FR 2529338 A1 19831230 FR 8310806 A 19830629 Procédé et montage pour mesurer le dichroisme circu laire La présente invention concerne un procédé et un montage pour mesurer le dichroisme circulaire (encore appelé en abrégé "DC" ou "CD") et pour-traiter les grandeurs CD d'un échantillon de mesure (par exemple de solutions de biopolymères) pour toutes les longueurs d'onde d'une zone spectrale choisie. L'appareil convient pour des applications dans le domaine de la recherche ainsi que dans l'industrie chimique et pharmaceutique, dans le domaine des examens de structure des biopolymères, des polymères et des corps naturels. On connais des appareils de mesure CD destinés a mesurer le dichroisme circulaire en fonction des longueurs d'onde pour des substances actives sur le plan optique (L. Velluz, M. Legrand et M. Crosjean, Optical Circular Dichroism, Verlag Chemie, GmbH, Weinheim, Bergstr. Academic Press Inc. New York et Londres 1965 ; Analytical Biochemistry 50, 1, 281, 1972). Dans ce cas, on fait tourner des prismes dans un dispositif monochromatique, pour régler successivement toutes les longueurs d'onde de la plage spectrale à mesurer. Un dispositif de modulation composé d'un polarisateur et d'un modulateur transforme la lumière à polarisation linéaire en une lumière à polarisation circulaire gauche et droite, la tension appliquée au modulateur étant déterminee par la longueur d'onde de la lumière pour laquelle on veut régler la condition dite t /4 pour obtenir un rayonnement à polarisation circulaire.L'absorption différente des composantes à polarisation circulaire gauche et droite correspondant à la longueur d'onde mesurée, est déterminée après passage de la lumière à travers l'échantillon de mesure à l'aide d'un multiplicateur d'électrons secondaires. Les inconvénients des appareils connus résident dans le fait que pour recevoir un spectre CD, il faut un temps de mesure relativement long, ce qui rend très difficile la mesure de la dépendance entre le tracé spectral du dichroisme circulaire et des autres paramètres tels que le pH, l'intensité ionique, la température ou la concentration, et rend de telles mesures pratiquement irréalisables. Pour une mesure dans la plage des longueurs d'onde comprise entre 200 nm et 400 nm, il faut plusieurs ninutes. I1 en résulte que pour une mesure de la dépendance du tracé spectral du dichroisme circulaire dans la plage spectrale envisagée, en fonction de la température dans la plage des températures comprise entre 200C et 1000C avec des incréments de température de 0,50 (grandeur minimale pour caractériser de façon fiable les passages entre les phases), il faut un temps de mesure de plus de 20 heures. La mesure du tracé des variations de conformation des biopolymères en fonction du temps n'est possible jusqu'à présent qu'avec une longueur d'onde (Biochem. Biophys. Res. Commun. 62, 717, 1975) car pour des examens cinématiques, on a de façon générale des variations de conformation déjà pendant la réception d'un spectre. A côté de l'indication limitée quant aux caractéristiques de la variation de conformation, on peut également avoir des erreurs résultant du déplacement de la longueur d'onde du maximum d'absorption. Un autre inconvénient des appareils de mesure CD, connus, est le grand nombre de pièces qui doivent être mobiles mécaniquement et avec une grande précision, par exemple le réglage automatique ou manuel de la fente pour régler une largeur de bande de spectre, constante, la rotation de prisme pour régler la longueur d'onde souhaitée. Les dispositifs de réglage mécaniques (par exemple les paliers) subissent une usure permanente. En outre du fait du réglage mécanique des composants optiques, on détériore le rapport signal-bruit. En outre, les mesures dans le vide et avec un rayonnement ultraviolet ne sont possibles qu'en mettant en oeuvre des moyens techniques importants (par exemple Review of Scientific Instruments 42,9, 1283, 1971 ; 48,12,1663, 1977). La présente invention a pour but de remédier aux inconvénients des appareils de mesure CD, connus, et de permettre la mesure plus rapide et plus précise de spectre CD à l'aide d'un appareil de mesure CD commandé par un calculateur. L'invention se propose de créer un appareil de mesure CD qui permet une mesure quasi-simultanée ou simultanée des grandeurs CD d'un échantillon pour toutes les longueurs d'onde dans une plage spectrale étendue. A cet effet, l'invention concerne un procédé selon lequel de la lumière à polarisation linéaire est transformée dans un modulateur en de la lumière à polarisation circulaire ou elliptique gauche ou droite, et dans lebel l'échantillon actif sur le plan optique est alors traversé par cette lumière, cet appareil étant caractérisé en ce que la lumière sortant de l'échantillon actif sur le plan optique, est fournie à un récepteur d'image à canaux multiples, après une décomposition du spectre. Pour une mesure quasi-simultanée des grandeurs CD, on éclaire un modulateur à l'aide d'une source lumineuse et d'une installation d'éclairage correspondantes (de préférence des systèmes à miroirs, pour éviter des erreurs chromatiques) par l'intermédiaire de la fente d' entrée du système à l'aide d'un faisceau lumineux parallèle à polarisation linéaire et on applique une tension alternative, sinusoïde croissante par échelons en dents de scie. On réalise ainsi pour toutes les longueurs d'onde d'une plage spectrale déterminée, successivement au cours d'un cycle en dents de scie, la condition nécessaire ; /4 pour obtenir de la lumière à polarisation- circulaire. Le faisceau lumineux qui sort également parallèlement du modulateur est décomposé après passage à travers l'échantillon de mesure par un élément de dispersion (prisme ou réseau). A l'aide d'une lentille, on forme dans le plan du récepteur d'image d'un analyseur- optique à canaux multiples (analyseur multicanaux, optique encore appelé analyseur OMA) et qui est prévu à ia place d'un multiplicateur électronique secondaire comme récepteur de rayonnement. Chaque élément de réception (ou plusieurs éléments de réception) de l'analyseur OMA est associé à une longueur d'onde prédéterminée. L'alimentation en courant du modulateur et les éléments-récepteurs de l'analyseur OMA sont couplés pour que les mesures ne se fassent que par les éléments qui reçoivent la longueur d'onde pour laquelle est satisfaite la condition t /4 sur le modulateur. Le couplage et la synchronisation entre l'analyseur OMA et l'alimentation en courant de modulation se font à l'aide d'un système électronique avec un microcalculateur. Un signal de cadence fourni par un générateur de cadence (horloge) commande en même temps le microcalculateur et l'analyseur OMA alors qu'un multivibrateur monostable et une bascule flipflip bistable donnent un signal qui commande une entrée d'une porte alors que les deux entrées sont commandées par deux comparateurs. L'un des comparateurs détermine le début des éléments de réception à interroger si le résultat du compteur coincide avec l'indication donnée au préalable par le microcalculateur alors que l'autre ferme un commutateur analogique par la porte lorsque le nombre des éléments de réception interrogés, déterminé par le compteur coincide avec le nombre prédéterminé par le microcalculateur. On détermine ainsi la fin des éléments de réception à interroger. L'inverseur commande de façon analogue par le compteur commute ainsi le signal d'un état de polarisation du faisceau lumineux directement sur l'entrée d'un intégrateur pendant qu'il commute le signal de l'autre état de polarisation par un amplificateur-inverseur sur l'intégrateur.La différence de l'intensité des ondes lumineuses à polarisation circulaire droite et gauche est formée dans le condensateur d'intégration et cette différence est transformée en des signaux numériques avec le signal de base formé dans l'intégrateur pendant la pause de commutation sur la longueur d'onde suivante par le convertisseur analogique/numérique en aval ; ces signaux numériques sont pris par le microcalculateur qui les traite et donne des signaux de sortie. Le compteur assure la remise à l'état initial du flip-flop après que l'on ait atteint le nombre prévu de mesures et que le cycle de mesure pour cette demi-onde soit terminé. Un autre compteur détecte le nombre des demi-ondes de modulation et lorsqu'il atteint un nombre prédéterminé, il fournit un signal au microcalculateur, qui règle toutes les indications préalables pour la longueur d'onde suivante. On obtient une mesure simultanée du dichrolsme circulaire en ce que dans le procédé selon lequel à l'aide d'un modulateur, on génère de la lumière à polarisation circulaire ou elliptique, droite ou gauche, alternativement, à partir de lumière à polarisation linéaire dans une plage spectrale prédéterminée, et selon lequel l'échantillon actif sur le plan optique est traversé par la lumière ainsi polarisée, et après décompositior du spectre, la lumière est appliquée à un récepteur d'image à canaux multiples pour former les signaux électriques qui sont traités par une installation de mesure électro- nique utilisant un calculateur, il est prévu selon l'invention d'utiliser pour la mesure du dichroisme circulaire, également la lumière à polarisation elliptique gauche et droite générée dans le modulateur, du fait que les deux composantes sont formées avec la me me intensité, en ce qu'on règle la condition > /4 pour une longueur d'onde qui se trouve au voisinage ou à l'intérieur de la plage des longueurs d'onde choisies, en ce qu'on fait passer la lumière à polarisation elliptique ou circulaire gauche ou droite à travers l'échantillon, en ce qu'on mesure simultanément et dans toute la plage spectrale prédéterminée, l'intensité de la lumière arrivant sur le récepteur d'image à canaux multiples, après décomposition spectrale, puis on transforme les signaux en signaux numériques et on les met en mémoire, et en ce qu'on mesure la lumière à polarisation elliptique et circulaire gauche et droite, successivement suivant la cadence du modulateur et on effectue l'exploitation des signaux, et lors de l'exploitation de la grandeur de mesure associée à une longueur d'onde, grandeur qui se compose de la différence des intensités de la polarisation elliptique ou circulaire, droite et gauche rapportée à la somme de ces deux fractions, et on multiplie par un coefficient qui résulte de l'excentricité du rayonnement de mesure pour déterminer la grandeur vraie du dichroisme circulaire. Pour une mesure simultanée des grandeurs CD d'un échantillon de mesure, on utilise une installation de modulation donnant de la lumière à polarisation circulaire pour une longueur d'onde à l'intérieur ou au woisi- nage d'une plage spectrale prédéterminée, et pour toutes les autres longueurs d'onde de la plage spectrale, alternativement de la lumière à polarisation elliptique droite et gauche avec une excentricité différente pour les différentes longueurs d'onde.Dans la mesure du dichroisme avec de la lumière à polarisation elliptique, on obtient une grandeur de mesure M( ) : Dans cette formule : ell eîl intensité de Ire11 I Irell : intensité de la lumière à polarisation elliptique gauche et droite après passage à travers l'échantillon, 11c1r I rcir : intensité des composantes de polarisation circulaire gauche et droite du rayonnement à polarisation elliptique sortant du modu lateur, indice d'absorption de la matière à mesurer pour un rayonnement à polarisation circulaire gauche ou droite grandeur vraie du dichroisme circulaire. Le coefficient de correction se détermine à l'aide de l'excentricité du faisceau de mesure arrivant sur l'échantillon.Cette excentricité peut soit se calculer, soit se déterminer expérimentalement. Le procédé de mesure simultané du dichroisme circu laire est possible à l'aide d'une installation dans laquelle pour former un faisceau de rayons parallèles, on utilise une source lumineuse, un miroir concave, une fente ainsi qu'un second miroir concave prévu en aval de la fente. Ce montage comporte également un système de modulation qui se compose d'un polariseur et d'un modulateur. La cuvette de mesure qui contient le produit à analyser est place dans le faisceau lumineux sortant du système de modulation.Un système optique est prévu dans le chemin du faisceau optique derrière la cuvette de mesure ; ce système optique comporte un troisième miroir creux pour focaliser le faisceau de rayons sortant de la cuvette de mesure, suivant une fente et en outre un quatrième miroir concave transformant de façon parallèle le faisceau de rayons,un élément de dispersion ainsi qu'une installation de-focalisa-tion pour obtenir le spectre sur un récepteur d'image à canaux multiples placé en aval, pour mesurer l'intensité lumineuse en fonction de la longueur d'onde pour les composantes à polarisation circulaire ou elliptique gauche et droite. Le récepteur d'image permet la mesure simultanée des intensités lumineuses dans la plage prédéterminée des longueurs d'onde. Les grandeurs de mesure sont transformées en grandeurs numériques et sont reçues dans un calculateur qui les traite suivant l'équation (A). Comme modulateur, on peut utiliser une plaque en un matériau approprié et de dimensions adéquates pour satisfaire à la condition t J4 pour une longueur d'onde voisine ou dans la plage des longueurs d'onde prédéterminée pour la mesure, par exemple une plaquette de quartz combinée à un polariseur. En modifiant la position relative du modulateur par rapport au polariseur, on obtient suivant la fréquence des changements de la lumière à polarisation elliptique ou circulaire alternée à gauche ou à droite à travers le système optique sur le récepteur d'image à plusieurs canaux. Comme modulateurs,on peut également utiliser des modulateurs électro-optiques ou élasto-optiques ; pour une plage de longueurs d'onde prédéterminée, on règle une tension d'excitation constante pour réaliser la condition rai/4 pour une longueur d'onde située au voisinage ou à l'intérieur de la plage des longueurs d'onde prédéterminée. Le procédé et l'installation selon l'invention permettent notamment la mesure des spectres CD et la variation de ces spectres en fonction d'éléments extérieurs tels que par exemple la variation du pH, celle du milieu ionique, la température ou la concentration, l'influence d'agent sur les spectres CD de biopolymères ainsi que la variation des spectres en fonction du temps (cinétique). Comme contrairement aux mesures antérieures du dichroisme circulaire en fonction des influences extérieures, la grandeur CD pour une longueur d'onde n'appa ratt plus comme grandeur de mesure mais que l'on utilise le dichroisme circulaire d'une plage spectrale plus étendue, il est possible d'effectuer une représentation d'un profil de réaction en trois dimensions (la dépendance du dichroisme circulaire suivant les longueurs d'onde comme fonction d'un des paramètres à changer). Cela augmente notablement la teneur en informations des mesures. Cela permet de déterminer simultanément par exemple les modifications de structure de différents types et pour différents segments des molécules, et qui se caractérisant par des changements du dichroisme circulaire pour différentes longueurs d'onde. Cela permet de prouver facilement les déplacements des bandes. Le montage selon l'invention ne comporte pas de pièces déplacées mécaniquement, ni de composants réglés mécaniquement. Tous les composants ou toutes les pièces sont montés de façon fixe et il n'y a aucun moyen d'entraînement ou de réglage mécanique, ce qui réduit considérablement les frais et coûts de fabrication par rapport aux appareils connus et augmente considérablement la fiabilité des appareils. Comme il n'y a aucune pièce mobile et les moyens de mise en oeuvre nécessaires, l'appareil présente une construction relativement compacte (faible encombrement des éléments), ce qui permet une extension de la plage des mesures dans le domaine du rayonnement ultraviolet, sous vide, sans nécessiter de moyens importants. La présente invention sera décrite plus en détail à l'aide d'un exemple de réalisation représenté dans les dessins annexés, dans lesquels - la figure 1 montre le cheminement optique d'un faisceau pour une mesure quasi-simultanée et une mesure simultanée. - la figure 2 montre la relation entre la tension et la fréquence dans un montage de mesures quasi-simultanees. - la figure 3 montre le schéma de principe de la partie électronique pour une mesure quasi-simultanée. Selon la figure 1, la source lumineuse 1 éclaire la fente 3 par l'intermédiaire du miroir concave 2. A l'aide d'un second miroir concave 4, on forme un faisceau parallèle, faisceau dans lequel sont placés le polariseur 5 et le modulateur 6 ainsi que la cuvette de mesure 7. Un troisième miroir concave 8 focalise le faisceau lumineux sur la fente d'entrée 9 d'un spectromètre qui se compose du miroir 10, du prisme 11 et de la lentille 12. Le spectre se forme dans le plan E-E. Le récepteur d'image d'un analyseur optique à canaux multiples (OMA) 13 se trouve dans ce plan pour mesurer l'intensité lumineuse. Le modulateur 6 est commandé par la tension d'alimentation 43 déterminée par le microcalculateur 28 et qui génère une tension alternée de forme sinusoidale d'amplitude croissante par échelons (figure 2).L'amplitude des différents échelons est prédéterminée de façon à satisfaire la condition X /4 pour une longueur d'onde déterminée pendant une durée prédéterminée. Du fait de la croissance par échelons de la tension alternative, on satisfait successivement à la condition X /4 pour chaque longueur d'onde de la plage spectrale prédéterminée. Lorsqu'on arrive à l'extrémité de la plage spectrale prédéterminée, l'appareil commute en retour sur le premier échelon et le parcours des échelons recommence de nouveau. Les éléments-récepteurs de l'analyseur OMA sur lequel tombe la lumière de la longueur d'onde pour laquelle la condition X /4 est satisfaite à ce moment, sont commandés à la même cadence, également par le microcalculateur. L'information relative à l'intensité lumineuse incidente est exploitée par une installation de mesure électronique (figure 3) et est appliquée au microcalculateur 28. Celuici forme le rapport entre le signal d'intensité continue et le signal d'intensité alternative et fournit le résultat qui correspond au dichroisme circulaire de l'échantillon ; ce résultat est fourni à un appareil périphérique tel que par exemple un appareil d'affichage. Par la modulation de la lumière, on obtient pour une demi-onde de la tension alternative appliquée au modulateur, une lumière à polarisation circulaire gauche alors que pour la demi-onde de polarisation opposée, on obtient de la lumière à polarisation circulaire droite. L'intensité lumineuse des deux états de polarisation est différente si l'échantillon de mesure est actif sur le plan optique. Pour mesurer la différence de ces signaux, le signal généré à partir d'un état de polarisation est appliqué directement à l'intégrateur 23 alors que le signal généré par l'état de polarisation opposé est inversé par l'amplificateur 21 et est également appliqué à l'intégrateur On obtient ainsi la différence de ces deux signaux dans le condensateur d'intégration 25. L'opération de mesure commence lorsque la porte 35 ouvre le commutateur analogique 19. Cette porte possède trois entrées qui doivent être à l'état "H" (état logique haut ou tension haute) afin que la sortie soit à l'état "H". Le premier signal d'entrée de la porte est dérivé d'une demi-onde de la tension de modulation à partir du redresseur 42, du limiteur de tension 41, de la bascule monostable temporisée 40 et de la bascule bistable flip-flop 36. On détermine ainsi l'instant du début de la mesure. Le second signal d'entrée de la porte provient du comparateur 31 qui compare l'information fournie par le microcalculateur, relative aux éléments de réception à interroger et le résultat de mesure fourni par le compteur 44.Lorsque le résultat du comptage coïncide avec l'infç > r- mation numérique du microcalculateur 28, le comparateur 31 émet un signal "H" et la mesure commence. Le troisième signal d'entrée H pour la porte 35 est fourni par le comparateur 30 lorsque le résultat donnée par le compteur 46 est plus petit que la grandeur prédéterminée dans le comparateur 30 par le microcalculateur 28. Lorsque le résultat du comptage coincide avec l'indication prédéterminée donnée par le microcalculateur 28, la sortie du comparateur 30 est mise à l'état L (tension basse ou état logique bas) ; la porte bascule également sur l'état L et le commutateur analogique se ferme. De cette façon, l'inver- seur analogique 20 ne reçoit que les signaux de ceux des éléments-image sur lesquels arrive la lumière dont la longueur d'onde satisfait à la condition iL/4. Dans le domaine des ultraviolets, il y a du fait de la dispersion non linéaire du prisme, un plus grand nombre d'éléments de réception que dans le domaine visible du spectre. Le nombre plus grand d'éléments-récepteurs dans le domaine des courtes longueurs d'onde des ultraviolets, y est par tiellement composé par la plus faible intensité de la source lumineuse. Simultanement, le nombre des élémentsrécepteurs par plage de longueurs d'onde détermine la largeur de l'intervalle spectral. Le microcalculateur est programmé de façon que les informations de commande fournies tiennent compte de la dispersion du prisme. Après plusieurs interrogations du récepteur d'image à canaux multiples de l'analyseur OMA 13, le compteur 47 qui est réglé sur le nombre souhaité de mesures, remet à l'état initial la bascule bistable flip-flop 36 et ferme le commutateur analogique. Cela termine la mesure pour cette demi-onde de modulation qui correspond à un état de polarisation circulaire déterminé. L'opération de mesure suivante est, comme déjà indiqué, pour une demi-onde de modulation suivante, déclenchée à un instant prédéterminé dépendant des conditions décrites. Les signaux fournis par la bascule bistable flip-flop 36 sont comptés par le compteur binaire 38.Les sorties 20 et 21 ouvrent en alternance les deux canaux de l'inverseur analogique 20, de sorte que les signaux qui proviennent de la composante à polarisation circulaire gauche du faisceau lumineux arrivent dans l'un des canaux et que les signaux qui proviennent de la composante à polarisation circulaire droite du faisceau lumineux arrivent dans l'autre canal. De cette façon, il est possible de former la différences deux signaux dans l'intégrateur 23. Le compteur 33 compte le nombre des demi-ondes de la tension de modulation et indique au microcalculateur qu'un nombre prédéterminé est atteint. Le microcalculateur 28 fournit alors toutes les informations pour régler la condition pour le segment de longueur d'onde suivant à mesurer.Dans la pause de mesure qui commence peu avant la commutation sur l'étage suivant de la tension de modulation et qui se termine peu après la commutation, le microcalculateur déclenche la détection et la conversion analogiques/numériques des in formations de l'intégrateur. A partir de l'information numérique qui est alors présente pour la partie variable et la partie constante, le microcalculateur forme le rapport et le met dans une mémoire. En parallèle à cette opération, il est possible de représenter les données de mesure sur un écran-image. Dans l'exemple décrit, lorsqu'on utilise un récepteur d'image à canaux multiples comportant 512 élémentsrécepteurs, la fréquence de la cadence fournie par le générateur de cadence (horloge) 45 est avantageusement égale à 17,28 MHz et le cycle d'interrogation d'une durée de 30/us. Lorsqu'on choisit comme fréquence de la tension de modulation la fréquence de 1 kHz et que la longueur d'échelon de la tension de commande (Ust) est égale à 5 ms, on a pour un échelon, cinq demi-ondes de lumière à polarisation circulaire gauche et cinq demi-ondes de lumière à polarisation circulaire droite. Pendant le maximum de chaque demi-onde, le récepteur d'image à canaux multiples (comme représenté à la figure 2) peut être interrogé cinq ou six fois. De cette façon, l'intégrateur 23 intégre vingt-cinq à trente signaux de mesure pour chaque état de polarisation.Un cycle de mesure, la ré- ception d'un spectre CD dans une plage spectrale de par exemple 200 nm, durant ainsi dans cet exemple une seconde, si Ust est également subdivisé en 200 échelons. La plage spectrale détectée, se choisit librement dans certaines limites suivant les dimensions du récepteur d'image (12,5 mm - 25 mm) et la dispersion du spectromètre. Suivant les propriétés optiques de l'échantillon à mesurer, cette plage est avantageusement de 200 nm à 400 nm ou de 200 nm à 800 nm. Cela permet de mesurer les variations d'un spectre CD en fonction du temps et de réaliser une représentation tridimensionnelle du déroulement cinétique dans la plage d'une seconde (dépendance des grandeurs CD en fonction de la longueur d'onde et du temps).Cela signifie que l'on peut déterminer simultanément toutes les variations de position et d'intensité de toutes les grandeurs CD dans une plage spectrale intéressante. Dans le cas de mesures effectuées par exemple sur des protéines, on peut ainsi détecter à la fois des variations de conformation et les effets alternés des chaines latérales. Dans le cas de la mesure simultanée des grandeurs CD, le modulateur 6 qui est par exemple un modulateur électro-optique, est commandé par une tension d'excitation constante, et l'amplitude de la tension d'excitation est réglée sur une longueur d'onde voisine ou comprise dans la plage des longueurs d'onde choisies pour la con dition X /4 et cette grandeur est maintenue constante pendant toute la durée de la mesure. Pour toutes les autres longueurs d'onde, on obtient ainsi de la lumière à polarisation elliptique droite et gauche. On éclaire l'échantillon avec cette lumière à polarisation elliptique ou circulaire droite et gauche. Après avoir traversé le spectromètre, le faisceau forme le spectre dans le plan E-E. Cette lumière est appliquée à un récepteur d'image à canaux multiples placé dans ce plan et faisant partie d'un analyseur optique à canaux multiples. A l'aide de l'analyseur optique à canaux multiples, on mesure l'intensité lumineuse en fonction de la longueur d'onde dans toute la plage spectrale prédéterminée, simultanément et pour les composantes à polarisation circulaire et elliptique gauche et droite, successivement. Lors de l'exploitation, la grandeur de mesure associée à une longueur d'onde et qui est formée de la différence des intensités à polarisation circulaire ou elliptique gauche ou droite rapportée à la somme de ces deux fractions, est multipliée par un coefficient qui résulte de l'excentricité du faisceau de mesure pour déterminer la grandeur vraie du dichroisme circulaire. Cette correction peut être effectuée par le calculateur relié à l'appareil de mesure. REVENDICATIONS 10) Procédé de mesure du dichroisme circulaire, procédé selon lequel de la lumière à polarisation linéaire est transformée en de la lumière à polarisation circulaire ou elliptique gauche et droite dans un modulateur, et selon lequel l'échantillon actif sur le plan optique est traversé par ce faisceau lumineux, procédé caractérisé en ce que la lumière sortant de l'échantillon actif sur ie plan optique est appliquée à un récepteur d'image à canaux multiples après décomposition du spectre. 20) Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que les éléments de réception du récepteur d'image par exemple d'un analyseur optique à canaux multiples (analyseur OMA) sont associés à des longueurs d'onde prédéterminées par l'intermédiaire d'un système de dispersion (11) (prisme ou réseau) et le modulateur (6) est commandé par une alimentation (43) suivant une tension alternative, croissant par échelons en dents de scie, et l'alimentation du modulateur (43) ainsi que les éléments de réception et l'analyseur (OMA 13) sont couplés pour que les mesures ne puissent se faire que sur les éléments qui reçoivent la longueur d'onde pour laquelle le modulateur satisfait à la condition X /4, en ce que la cuvette de mesure (7) du polariseur (4) et du modulateur (6) est prévue dans le faisceau parallèle en avant du système de dispersion (11) et l'association des différentes longueurs d'onde et des différents éléments de réception de l'analyseur OMA (13) est réalisée par l'image d'une fente (9) sur les éléments de l'analyseur OMA (13) avec interposition du système de dispersion (11) et par le couplage et la synchronisation entre l'analyseur OMA (13) et l'alimentation (43) du modulateur, par un système électronique comportant un microcalculateur (28), en ce qu'un signal de cadence fourni par le générateur de cadence (45) commande simultanément le microcalculateur (28) et l'analyseur OMA (13) et le redresseur (42), un limiteur de tension (41), une bascule monostable (40) et une bascule bistable flip-flop (36) forment un signal qui commande une entrée de la porte (35) alors que les deux autres entrées sont commandées par les comparateurs (30 et 31), le comparateur (31) comparant le résultat fourni par le compteur (44) et l'indication prédéterminée fournie par le microcalculateur (28), et déterminant le début des éléments de réception à interroger, alors que le comparateur (30) compare le nombre d'éléments de réception à interroger, nombre déterminé par le compteur (46) et le nombre prédéterminé par le microcalculateur (28) et en cas de coincidence, il ferme le commutateur analogique (19) par l'intermédiaire de la porte (35) et détermine ainsi la fin des éléments de réception à interroger, l'inverseur analogique (20) commandé par le compteur (38), commutant le signal de l'état de polarisation de la lumière directement sur l'entrée de l'intégrateur (?3) alors que le signal de l'autre état de polarisation du faisceau lumineux est transmis par l'amplificateur-inverseur (21) à l'intégrateur (23), le condensateur d'intégration (25) formant la différence de l'intensité de la composante de lumière à polarisation circulaire gauche et de la composante à polarisation circulaire droite, et le signal de base formé dans l'intégrateur (37) pendant la pause de commutation sur la longueur d'onde suivante par le convertisseur analogique/numérique aval (32, 34) en des signaux numériques qui sont reçus par le microcalculateur qui les traite et les fournit comme signaux de sortie, le compteur (47) remettant à l'état initial le flip-flop (36) après avoir atteint le nombre réglé de mesures et termine le cycle de mesure pour cette demi-onde, et le compteur (33) détermine le nombre de demi-ondes de modulation et lorsqu'il atteint un nombre prédéterminé, il fournit un signal au microcalculateur (28) qui règle toutes les conditions préalables pour la longueur d'onde suivante. 30) Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que pour la mesure simultanée du dichroisme circu laire, on utilise également la lumière à polarisation elliptique gauche et droite formée par le modulateur (6), en ce que les deux composantes sont obtenues à la meme intensité, et on règle la condition t /4 pour une longueur d'onde qui se trouve au voisinage ou à l'intérieur de la plages des longueurs d'onde choisies, en ce que la lumière à polarisation circulaire ou elliptique gauche et droite passe dans l'échantillon, en ce qu'on mesure l'intensité de la lumière arrivant sur le récepteur d'image à canaux multiples, après décomposition du spectre, et cela dans toute la plage spectrale prédéterminée, puis on transforme les signaux en signaux numériques et on les met en mémoire, et en ce qu'on mesure la lumière à polarisation circulaire ou elliptique gauche et droite, successivement en cadence avec le modulateur et on fournit les signaux pour leur exploitation, l'exploitation de la grandeur de mesure associée à une longueur d'onde et qui résulte de la diffé rence des intensités de lumière à polarisation circulaire ou elliptique gauche et droite, rapportée à la somme de ces deux composantes, est multipliée par un coefficient qui découle de l'excentricité du faisceau de msure, pour déterminer la grandeur vraie du dichroisme circulaire. 40) Montage pour mesurer le dichroisme circulaire en utilisant un dispositif optique comportant un modula teur, montage caractérisé en ce que pour former un fais ceau de rayons lumineux parallèles, il comporte une source lumineuse (1), un miroir concave (2), une fente (3) ainsi qu'un second miroir concave (4) en aval de la fente, l'en semble étant suivi par un système de modulation qui se compose d'un polariseur (5) et d'un modulateur (6), et en ce que le système de modulation est relié à un cuvette de mesure (7) contenant le produit à examiner, en ce que derrière la cuvette de mesure, dans le faisceau optique, il est prévu un système optique qui se compose d'un troisième miroir concave (8) pour focaliser le faisceau de rayons lumineux sortant de la cuvette de mesure, sur une fente (9) ainsi que d'un quatrième miroir concave (10) transformant de façon parallèle le faisceau de rayons lumineux, un élément de dispersion (11) ainsi qu'un dispositif de focalisation (12) pour former le spectre sur un récepteur d'image à canaux multiples prévu en aval pour mesurer l'intensité lumineuse en fonction de la longueur d'onde pour les composantes à polarisation circulaire ou elliptique gauche et droite et le récepteur d'image est relié à un calculateur pour emmagasiner et traiter les grandeurs de mesure suivant l'équation (A) : : 50) Montage selon la revendication 4, caractérisé en ce que le modulateur est constitué par une plaque en un matériau approprié, et ayant des dimensions appropriées pour satisfaire à la condition a /4 pour une longueur d'onde proche ou comprise dans la plage des longueurs d'onde prédéterminée pour la mesure, par exemple une plaquette de quartz combinée à un polariseur. 60) Montage selon la revendication 4, caractérisé en ce que les modulateurs sont des modulateurs électrooptiques ou élasto-optiques et pour une plage de longueurs d'onde prédéterminée, on règle une tension d'excitation constante pour satisfaire à la condition t /4 pour une longueur d'onde proche ou à l'intérieur de la plage des longueurs d'onde prédéterminée.