FR 2501205 A1 19820910 FR 8104589 A 19810309 L'invention se rapporte à de nouveaux dérivés de l'acide dihydro orotique dont un des azotes est acylé par un dérivé de l'acide propionique. Elle a plus particulièrement pour objet, des dérivés de 1' acide dihydro orotique ou thio orotique dont un des atomes d'azote est acylé par une channe amidinopropionique. Elle a spécifiquement pour objet les acides N- acyl dihydro orotiques de formule générale I. dans laquelle R est de l'hydrogène ou un radical alcoyle inférieur R1 est de l'oxygène, ou du soufre R3 est de l'hydrogène, le groupe benzhydrile ou le groupe trityle et R4 est de l'hydrogène ou un radical alcoyle inférieur. L'invention se rapporte aussi aux diastdréo isomères et aux isomères optiques des composés de formule générale I. La molécule de l'acide dihydro orotique ou de l'acide dihydrothio orotique comporte deux atomes de carbone asymétrique donnant naissance à deux diastéréo isomères qui peuvent chacun titre dédoublé. En outre la chaine propionique comporte un atome de carbone chiral lorsque R est différent de l'hydrogène. Ce nouveau centre de symétrie peut étre dédoublé donnant naissance à deux isomères optiques L'invention se rapporte également aux sels des composés de formule générale I avec un acide minéral ou organique de préférence thérapeutiquement compatible. L'invention se rapporte également aux esters des acides de formule générale I répondant à la formule générale dans laquelle R, R1, R3 ët R4 sont définis comme précédemment, et R représente un radical alcoyle inférieur, hydroxy alcoyle ou polyhydroxy alcoyle inférieur, aralcoyle inférieur. Parmi les composés de formule générale I on citera plus particulièrement la N-( 2 - thio 4 - carboxy 6oXRexahyclropyrinid I.nyl 3) carbonylacetanidine la N-C 2,6 dioxo 4- carboxy hexahydropyridimidinyl 3) carbonylacetamidine la N-(2,6- dioxo 4- carboxy 5- methyl hexahydrop'rimidinyl - 3) carbonylacetamidine la N-(2,6-dioxo 4-carboxy 5- methyl hexahydropyrimidlnyl3)2-carbonyl 2-methyl acetamidine les composés selon l'invention sont des inhibiteurs de l'enzyme qui convertit le décapeptide inactif Angiotensinelen octapeptide actif 15angiotensineII. L'angiotensine II est lthormone circulante qui peut êre considérée comme responsable de l'hypertension essentielle lorsqutelle est en excès. Les tests pharmacologiques ci-après ont montré que les composés I dé l'invention sont utiles comme agents antihypertenseurs ayant un effet prolongé ou comme médicaments pour le traitement ou la prophylaxie des complications du diabète. Lorsqu'on utilise ces composés pour abaisser la pression sanguine, on peut les administrer en combinaison avec des diurétiques tels que l'hydrofluméthiazide, le furosémide et le bumétanide, l'indapamide ou la chlortalidone. Pour le traitement de l'hypertension, ces préparations peuvent contenir non seulement des excipients inertes mais encore d'autres agents ntihypertenseurs tels que la réserpine, 1'&alpha;-méthyldopa, la guanéthidine, la clonidine, lthydra- lazine, etc.,ou des bloqueurs ss des récepteurs adrénergiques tels que le propanolol, l'alprénolol, le pindolol, le bufetolol, le buprnolol, le bunitrolol, le practolol, l'oxprénolol, l'indénolol, le tjmolol, le bunolol, etc. En vue de l'administration en thérapeutique les composés de formule I ont présentes sous forme de compositions pharmaceutiques adaptés pour l'adrranis- tration par voie buccale, parentérale ou rectale. Les formes d'administration sont des comprimés, des capsules, des poudres, des suppositoires, des formes injectables, des solutions ophtalmicues, des pommades ophtalmiques, etc. Ces préparations peuvent également contenir des excipients courants. On ajuste les doses selon les indications thérapeutiques, la forme d1administration et le poids du sujet. En général les doses journalières sont conprises entre 100 et 5000 mg, de préférence entre 250 et 1000 ag en une seule dose ou plusieurs doses fractionnées. En pratique les formes d'administration renfer-ment de préférence entre 125 et 500 mg de principe actif par prise unitaire. L'invention a encore pour objet un procédé de préparation des composés de formule générale I caractérisé en ce qu'on fait réagir un acide dihydroorotique de formule générale II Dans laquelle R1 et R ont les significations fournies antérieurement, avec un halogénure de benzhydryle ou de trityle pour former le dérivé mono-substitué de formule III dans laquelle R et R1 sont définis conme précédemment, et R3 est un radical benzhydryle ou trityle que l'on estérifie par un alcanol ou un arylalcanol pour former un ester de formule générale Iv dans laquelle R2 est un radical alcoyle ou aralcoyle, et R, R1 et R3 sont définis comme précédemment on fait réagir celui-ci avec un halogénure d'un acide propionique -halogéné de formule générale V dans laquelle R4 est de l'hydrogène ou un alcoyle inférieur X est du chlore ou du brome, et Hal est un halogène autre que le fluor pour former le dérivé N-acyle de l'acide dihydro orotique de formule générale VI dans laquelle les substituants X,,R4,R1 , R3 et R ont les mêmes significations que précédemment condense celui-ci avec un cyanure de métal alcalin ou alcalinoterreux pour obtenir le propionitrile de formule générale VII dans laquelle les substituants R, R1, R,R et R4 sont définis comme précédemment que l'on convertit en amidine de formule générale I par action de l'ammoniaque en milieu alcanolique. Le procédé de l'invention comprend aussi l'étape supplémentaire qui consiste à débloquer le second atome d'azote par hydrolyse acide au moyen d'acide acétique ou d'acide chlorhydrique pour former un acide dihydro orotique N- acylé de formule I' dans laquelle R3 est de lthydrogène et les substituants R, t, R2 et R4 sont défi- nis comme précédemment. Le procédé de l'invention comprend encore l'étape d'hydrolyse des esters de formule I' en acides de formule I dans laquelle les substituants R, R1, et R4 ont les significations antérieures. Les composés de formule générale I ou I' peuvent, si désiré, etre dédoublés en en leurs diastereo isomères ou dédoublés en leurs isomères optiques par des agents de dédoublement chimiques ou physiques. Les composés de formule générale I ou I' peuvent aussi être salifiés par addition d'un acide minéral ou organique comme l'acide chlorhydrique , l'acide sulfurique, l'acide acétique, l'acide benzotsue, l'acide nicotinique, l'acide méthane sulfonique, l'acide isethionique, l'acide p.toluène sulfonicue ou l'acide glucose 1 - phosphorique. Les exemples suivants illustrent l'invention. Ils ne la limitent en aucune façon. Exemple I N * .6 - dioxo 4 - carboxy hexahydropyrimidinyl - 3) carbonyl acetaminidine. Stade A : dihydroorotate de methyle On dissout 15g8 d'acide dihydro orotique dans 250 ml de methanol. On ajoute 1g50 d'acide p.toluène sulfonique et on porte le mélange au reflux pendant 4 heures. On laisse ensuite refroidir, puis on neutralise le milieu par addition d'une solution saturée de bicarbonate de sodium. On décante la phase aqueuse. La phase organique est séchée sur sulfate de sodium, filtrée puis évaporée à sec. Le dihydro orotate de methyb brut est repris par 25 ml de chlorure de methylène; la solution est décolorée au charbon activé, filtrée et évaporée à sec. Le dihydro orotate de methyle est finalement purifié par distillation sous pression réduite. On obtient ainsi 13g67 de dihydro orotate de methyle que l'on utilise tel quel pour la poursuite de la synthèse. Stade B s N' trityl dihydro orotate de methyle On dissout llg15 de dihydro orotate de methyle dans 40 ml de chlorure de methylène, puis 2mol. 5 de triethylamine et enfin progressivement une solution de 18g5 de chlorure de trityle dans 60 ml de chlorure de methylène. On agite à température ambiante pendant 6 heures. On sépare par filtration le triphenyl carbinol qui a précipité puis lave le filtrat b l'eau jusqu'à neutralité des eaux de lavage. la solution methylénique est alors séchée sur sulfate de magnesium et évaporée à sec. Le résidu de N' - trityl dihydro orotate de methyle est repris par 50 ml d'acetate d'ethyle à chaud.Par refroidissement le dérivé tritylé se sépare. On laisse reposer la suspension pendant 12 heures en glacière puis sépare le précipité par filtration. On le lave à l'acétate d'ethyle froid puis le sèche à poids constant. Le N' - trityl dihydro orotate de methyle est recristalisé de l'acetonitrile par chaud et froid. Il se présente sous forme de cristaux incolores fondant à 237 - 2400. Stade C : N' - trityl N -(2 - chloropropionyl) dihydro orotate de methyle On dissout 16g30 d'acide 2- chloropropionique dans 45 ml dthexamethyl phosphorotriamide puis on ajoute par petites fractions 20g 5 de chlorure de thionyle fraichement redistillé. On maintient le mélange réactionnel à une température voisine de 50 pendant 2 heures. On g eliaacide chlorhydrique formé par distillation sous vide.La solution/est ajoutÉe progressivement à une solution de 62 g de N' - trityl dihydro orotate de methyle dans 125 ml d' hexaphosphorothiamide préalablement refroidi à 5 . On maintient sous agitation pendant 4 heures, puis décompose l'excès de réactif par addition d'une solution aqueuse de carbonate de sodium à 20%. On laisse en contact pendant une heure, puis épuise la phase aqueuse à l'ester isopropylique à trois reprises. Les solutions ethérées sont réunies, lavées à 17eau jusqu'a' neutralité, puis séchées et évaporées à sec. Le residu de N' - trityl N -( 2-chloropropionyl) dihydro orotate de methyle brut est purifié par dissolution dans le minimum d'acetate d'ethyle chaud. Par refroidissement on sépare le N' - trityl N -( 2 > chloropropionyl) dihydro orotate de methyle cristallisé que l'on filtre, essore et sèche sous vide. Ce composé fond à 251 - 2520. Stade D : N' trityl N -( L~cyanopropionyl) dihydro orotate de methyle. 25g de N'- trityl N - ( 2-chloropropsonyl) dihydro orotate de methyle sont dissoutsdans 120 ml de dimethyl sulfoxyde. Après complète dissolution, on ajoute avec précaution une solution de 4g de cyanure ce potassium dans 20 ml d'eau. On porte le mélange à 40 - 450 et on le maintient à cette température pendant 4 heures. On laisse le mélange réactionnel revenir à température ordinaire puis le dilue avec un volume égal d'eau. Le N - trityl N (2-cyano propionyl) dihydro orotate de methyle précipite progressivenent.On laisse reposer pendant 12 heures puis sépare le précipité qu'on lave à l'eau puis au bicarbonate de sodium puis encore à liteau. On le sèche ensuite sous vide.On obtient ainsi 17g65 de N' - trityl N -(2- cyano propionyl) dihydro orotate de methyle qu'on utilise tel quel pour la suite de la synthèse. Stade E : N' - trityl N -(2 formamidino propionyl) dihydro orotate de methyle. On dissout 13g85 de N'- trityl N-(2 cyano propionyl) dihydro orotate de methyle dans 100 ml dXethanol et on fait passer un courant d'acide chlohydrique sec pendant 3 heures tout en chauffant à lsebullition.Au bout de ce temps on laisse refroidir le mélange au voisinage de zéro pari rsion dans un bain d'eau glacée puis on ajoute goutte à goutte 30 ml d'une solution ethanolique à 10% d'ammoniaque. On laisse en contact pendant 2 heures puis sépare le précipité par filtration. On le lave à l'eau, l'essore et le sèche, on obtient ainsi 8g70 de formamidine. Stade F : N -( 2 formamidino propionyl) dihydro orotate de methyle. On met la totalité des 8g70 de formamidine obtenue au stade précédent,en suspension dans 60 ml d'eau puis on ajoute 5 ml d'acide acétique cristallisé. On maintient l'agitation pendant 30 mn. On sépare ensuite le précipité de triphényl carbinol. Le filtrat est ensuite neutralisé par addition de bicarbonate de sodium. La formamidine précipite. On la lave à l'eau jusqu'à neutralité des eaux de lavage, l'essore et la sèche. On recueille ainsi 3g71 de formamidine que l'on purifie par recristallisation du méthanol. La formamidine ainsi obtenue fond à 195-1960 Stade G s N-(2,6 - dioxo 4- carboxy hexahydro pyrimidinyl -3) 2-carbonyl 2méthyl acétamidine. On met en suspension 3g de formamidine obtenue au stade précédent dans 25ml d'eau et on ajoute sous forte agitation 20 ml de potasse éthanolique N. On maintient sous agitation à température ordinaire pendant 6 heures puis neutralise le milieu par addition d'acide acétique. L'acétamidine qui précipite est séparée par filtration, lavée à plusieurs reprises à l'eau puis essorée et séchée sous vide. Pour l'analyse, elle est recristallisée de l'acétonitrile. On obtient ainsi 2g25 d'acétamidine fondant à 210 - 2120 (avec décomposition). Par neutralisation à l'aide d'une base approprie on obtient respectivement la sel de sodium, de potassium, de lithium, de calcium, de magnésium, de strontium, d'aluminium, ou de fer. Par neutralisation par l'acide chlorhydrique ou l'acide méthane sulfonique, on obtient le chlorhydrate ou le méthane. En neutralisant avec une amine on obtient des sels avec des bases organiques, par exemple le sel de dicyclohexylamine, les sels de benzothine, de N-méthyl D-glucamine, et d'hydrabamine, des sels avec des amino-acides comme l'arginine la lysine, la glycine, la valine, l'ornithine ou la citrulline. Exemple II En opérant comme à l'exemple I au départ de l'acide thio orotique, puis con densation du N-trityl thio orotate de méthyle avec l'acide d -bromo acétique puis condensation du dérivé bromoacétylé avec le cyanure de potassium, on obtient finalement la N -(2-thio 4- carboxy 6-oxo hexahydro pyrimidinyl -3 ) carbonyl acétamidine .F = 237-2380C ExemDle III En opérant comme à l'exemple I au départ du N-trityl orotate de méthyle et de l'acide ot-bromo acétique puis condensation du N-trityl N'-?-bromo acétyl orotate de méthyle formé avec le cyanure de potassium, on obtient finalement la N- (2,6- dioxo 4-carboxy hexahydropyrimidinyl -3) carbonyl acétamidine.F=20l-2 Exemple IV En opérant comme à l'exemple I au départ de l'acide 5-méthyl dihydro uracile 6carboxylique on obtient respectivement - le 5- méthyl dihydro uracile 6-carboxylate d'éthyle, - le N-trityl 5séthyl dihydro uracile 6- carboxylate d'éthyle, - le N-trityl N'-&alpha;;-bromoacétyl 5-méthyl dihydro uracile 6- carboxylate d'éthyle, - le N- trityl N'-o(-cyanoacétyl 5- méthyl dihydro uracyle 6- carboxylate d'éthyle, - le N-trityl N'- (ok-formamidino acétyl) 5- méthyl dihydro uracile 6- carboxy late d'éthyle, - le Nl- (&alpha;-amidino acétyl) s - méthyl dihydro uracile 6-carboxylate d'éthyle - la N- (2,6- dioxo 4-carboxy 5- méthyl hexahydro pyrimidinyl- 3) carbonyl acéta midine.F = 189-190 Exemple V En opérant comme à l'exemple I au départ de l'acide 5 - méthyl dihydro uracile 6- carboxylique, on obtient le N- trityl 5- méthyl dihydro uracile 6- carboxylate d'éthyle que l'on condense avec le chlorure d'O8chloropropionyie pour former le: N- trityl N'- chloropropionyl 5- méthyl dihydro uracile 6- carboxylate d'éthyle N- trityl N'- N'-dccyano propionyl 5- méthyl dihydro uracile 6- carboxylate d'éthyle N- trityl N'-(&alpha; formamido propionyl) 5- méthyl dihydro uracile 6- carboxylate d'éthyle N'- (otformamidino propionyl) 5- méthyl dihydrouracile 6- carboxylate d'éthyle N- ( 2,6 dioxo 5- méthyl 4- carboxy hexa hydropyrimidinyl-3) 2- carbonyl 2 méthyl acetamidine F = 197-1980 Exemple VI Exemples de compositions composé de l'exemple I 230 g lactose 150 g cellulose cristalline 50 g carboxyméthylcellulose calcique 7g stéarate de magnésium 3 g Total pour 1000 comprimés à 410 g composé de l'exemple II 150 g lactose 120 g cellulose cristalline 50 g carboxyméthylcellulose calcique 7 g stéarate de magnésium 13 g Total pour 1000 comprimés à 340 g ExemDle YII Etude pharmacologique des composés selon l'invention a/ test de toxitd La toxicité aiguë des composés de formule générale I correspond à une DL50 de 2g50/1 La DL50 a été déterminée graphiquement de la manière suivante On place des souris de souche Reckland de 4 semaines pesant 19 à 21 g dans une pièce d'élevage à température et à humidité constantes (23 t t 40C, 55 - 5%) et on leur fournit à volonté un aliment en boulettes et de l'eau pendant une semaine. On choisit pour l'expérience des souris dont la croissance est normale. l Méthode d'administration ). On met le composé à étudier en suspension dans une solution à 0,5% de gomne adragante et on l'administre par voie orale à la dose de 0,5 ml pour 20 g de poids corporel. b/ Etude de l'action antihfpertensive On a récemment mis en évidence que les composés inhibant l'enzyme de transformation de l'angiotensine I peuvent avoir une activité curative vis-b-vis de l'hypertension rénale et de l'hypertension essentielle. On a donc évalué les composés de l'in- vention comme agents antihypertenseurs selon la méthode suivante On utilise des rats Wistar mules pesant 200 à 300 g. Sous anesthésie à l'éther, on place une canule en polyéthylène dans l'artère carotide et dans la veine jugulaire. On raccorde la canule de l'artère carotide à un transducteur électrique tandis que l'on raccorde la canule de la veine jugulaire à un appareil de perfusion continue. Lorsque les effets de l'anesthésie ont totalement cessé, on perfuse de l'angioten sine I par voie intraveineuse à la dose de 300W/kg au noyen de l'appareil de perfusion continue et on enregistre la réponse hypertensive avec un polygraphe. On administre les composés de l'invention en suspension dans une solution aqueuse à 0,5 % de gomneadragante, par voie orale à la dose de 0,3 ml/llOO g de poids corporel et on mesure la réponse d'hypertension à la perfusion intraveineuse d'angiotensine au cours du temps. On exprime l'activité inhibitrice des composés vis-vis de l'enzyme de conversion de l'angiotensine I par le pourcentage d'inhibition de la réponse d'hypertension à l'angiotensine I. Le tableau montre les variations des pourcentages d'inhibition au cours du temps obtenus avec les composés de l'in vention. ( Résultats). Le tableau montre les résultats des tests pharmacologiques lorsqu'on utilise les composés (I) de l'invention et leurs sels, conne agents inhibant l'enzyme de conver sion de l'angiotensine I Effet suppresseur des composés de formule T sur la réponse hypertensive à l'angiotensine I. Composé N Dose (mg/kg) Inhibition (X) 25 65 (min) I 0,2 45 55 2 0,4 30 35 3 1,0 15 55 4 0,1 45 55 5 0,3 50 60 REVENDICATIONS 1/ Les acides N -acyl dihydro orotiques de formule générale I dans laquelle R est de l'hydrogène ou un radical alcoyle inférieur R1 est de l'Oxygène ou du soufre R est de l'hydrogène, le groupe benshydryle ou le groupe trity] et R est de l'hydrogène ou un radical alcoyle inférieur 2/ Les diastereo isomères et les isomères optiques des composés de formule générale I selon la revendicationlo. 3/ Les sels des composés selon l'une des revendications 10 ou 20 avec un acide minéral ou organique 4/ Les esters des composés de formule générale I selon l'une des revendicatior 10 à 30 répondant à la formule générale I' dans laquelle R,R1, R3 et R4 sont définis comme précédemment et R2 représente un radical alcoyle inférieur,aralcoyle inféra hydroxy alcoyle ou poly hydroxy alcoyle inférieur. 5/ La N-(2- thio 4-carboxy 6- oxo hexahydropyrimidinyl - 3) carbonyl acetamidi selon la revendication 10. 6/ La N-(2,6-dioxo 4-carboxy hexahydropyrimidinyl-3) carbonyl acetamidine selon la revendication 10. 7/ La N-(2,6-dioxo 4- carboxy 5-méthyl hexahydropyrimidinyl-3) carbonyl aceta midine selon la revendication 10. sj La N-(2,6- dioxo 4- carboxy 5- méthyl hexahydropyrimidinyl 3) 2-carbonyl 2-méthyl acetamidine selon la revendication 10. 9/ Les compositions pharmaceutiques renfermant à titre de principe actif au moins un composé selon l'une des revendications 10 à 80 éventuellement en association avec un autre principe actif d'action synergistique ou complémentaire mélangé avec un excipient ou un véhicule inerte non toxique pharmaceuticuement acceptable. 10/ Un procédé d'obtention des composés selon la revendication 10 caractérisé en ce que l'on fait réagir un acide dihydro orotique de formule générale II dans laquelle R et R1 sont définis comme cidessus avec un halogènure de benzhydryle ou de trityle pour former le dérivé monosubstitué de formule générale III dans laquelle R et R1 sont définis comme précédemment et R3 représente le groupe benzhydryle ou trityle que l'on esterifie par un alcanol ou un arylalcanol pour former un ester de formule générale IV dans laquelle R2 est un radical alcoyle ou aralcoyle inférieur et R, R1, et R3 sont définis comme précédemment fait réagir celui-ci avec un halogènure d'acide propionicue 0t - halogéné de formule générale V dans laquelle R4 est de l'hydrogène ou un radical alcoyle inférieur X est du chlore ou du brome et Hal est un halogène autre que le fluor pour former un dérivé N - acylé de l'acide dihydro orotique de formule générale VI dans laquelle les substituants X, R4, R, RX, R.t R3 ont les mêmes significations que précédennent condense ce dernier avec un cyanure de métal alcalin ou alcalino-terreux le propionitrile de formule générale VII dans laquelle les substituants R, R1, R2, R3 et R4 sont définis conne précédemment que l'on convertit en amidine de formule générale I par action de l'ammoniaque en milieu alcanolique, que lton peut si,désii, hydrolyser par détritylation ou débenzhydrylation ou saponifier par action d'une base alcaline.