FR 2510758 A1 19830204 FR 8114816 A 19810730 I PROCEDE DE PRELEVEMENT ET D'ANALYSE PAR CHROMATOGRAPRIE SUR PLAQUE ET DISPOSITIFS PERMETTANT SA MISE EN OEUVRE. La présente invention concerne un procédé de prélève- ment et d'analyse par chromatographie sur plaque ou sur cou- che mince d'au moins un mélange de substances, consistant à déposer une quantité appropriée du mélange à analyser sur la plaque de chromatographie, à mettre en contact la plaque de chromatographie avec un solvant ou un mélange de solvants de façon à provoquer la migration du mélange sur la plaque et îo la séparation des constituants dudit mélange, et à révéler ladite plaque par des moyens, par exemple chimiques ou physi- co-chimiques, pour l'analyse qualitative etjou quantitative des constituants du mélange. La méthode visée ci-dessus est bien connue et large- ment utilisée en laboratoire, La chromatographie sur plaque ou sur couche mince fait généralement appel à une plaque de verre sur laquelle est déposée une mince couche de 100 à 300 microns d'épaisseur, d'une substance absorbante telle que de la silice par exemple Sur une telle plaque de chromatogra- phie, on dépose une goutte du mélange à examiner; on laisse ensuite sécher; puis la plaque de chromatographie est placée, par exemple verticalement, à l'intérieur d'une cuve, sa base plongeant dans un auget contenant un solvant ou un mélange de solvants, qui monte par capillarité le long de la plaque Les différents constituants du mélange à analyser vont migrer plus ou moins le long d'une droite verticale et engendrer des tâches qui seront ensuite révélées La position des té- ches permet de déterminer la nature de chacun des constituants. Le mélange à soumettre à analyse peut se trouver sur un substrat C'est, par exemple, le cas du sébum secrété par le revêtement cutané, pour lequel il est souhaitable en dermatologie, de connaître la nature et les proportions re- latives des lipides qui le composent Le prélèvement du mé- lange à analyser sur le substrat peut être effectué au moyen d'un solvant Il peut être aussi plus commodément réalisé au moyen d'un support-plan tel qu'un petit carré de verre, Mais; dans ce dernier cas, on est quand même obligé de faire appel à un solvant pour faire passer par dilution, la prise d'essai prélevée sur le support-plan à l'intérieur dudit solvant Le volume de solvant utilisé doit être impor- tant si l'on veut récupérer toute la prise d'essai, ce qui est indispensable lorsque l'on désire déterminer les pro- portions relatives des constituants du mélange On obtient ainsi une solution, dont la concentration en soluté est ex- trêmement faible, et il est, par conséquent, nécessaire de la concentrer avant de la déposer sur la plaque de chromato- graphie Toutes ces étapes de dilution et de concentration compliquent l'analyse chromatographique et-s'avèrent coû- teuses en temps et en personnel expérimenté. Un autre inconvénient de l'analyse par voie chromato- graphique sur couche mince réside dans l'exigutté des prises d'essai Soumises à analyse, qui sont généralement comprises entre 1 et 5 microlitres et peuvent aller à l'extrême limite jusqu'à 20 microlitres En effet, la séparation chromatogra- phique des constituants d'un mélange réussit d'autant mieux que la quantité de mélange est plus faible à analyser; mais cette exigutté des prises d'essai est une source de diffi- culté lorsqu'on veut pratiquer une analyse quantitative pré- cise des constituants du mélange. On a commercialisé récemment des plaques comportant comme zone de concentration, o sont déposées les prises d'essai, une couche de terre de diatomées Ces plaques per- mettent le dépôt d'une quantité de prise d'essai plus impor- tante pouvant aller jusqu'à environ 500 microlitres sans que cela nuise à la qualité de la séparation Mais,néanmoins, de telles plaques de chromatographie nécessitent, comme les plaques de chromatographie classiques, une étape de dilution par un solvant de la prise d'essai prélevée sur un support- plan suivie d'une étape de concentration de la solution ob- tenue. La présente invention a pour but de remédier à l'in- convénient précité et, à cet effet, elle se propose de décri- re un procédé de prélèvement et d'analyse par chromatographie sur couche mince, dans lequel les étapes susmentionnées de dilution et de concentration sont supprimées Selon la pré- sente invention, le prélèvement du mélange à analyser à par- Z 510 ? 58 tir du substrat, sur lequel il se trouve, est effectué, de façon classique, au moyen d'un support-plan non adsorbant, tel qu'une lamelle ou pastille de verre dépoli, mais la prise d'essai prélevée par le support-plan, au lieu d'être diluée dans un fort volume de solvant comme dans la méthode classi- que, est directement appliquée, sans autre traitement ulté- rieur, sur la plaque de chromatographie en appliquant et en fixant le support-plan sur la plaque de chromatographie pendant la durée nécessaire pour que la prise d'essai ait entièrement migré hors du support-plan. La présente invention vise, en outre, un dispositif spécialement conçu pour maintenir appuyé contre la plaque dé chromatographie le support o est déposé le mélange à analy- ser ainsi qu'un organe spécialement conçu pour effectuer des prélèvements sur un substrat dans des conditions reproducti- bles, c'est-à-dire avec une pression d'application du sup- port sur le substrat, qui ne varie pratiquement pas d'un prélèvement à un autre. La présente invention a donc pour objet un procédé de prélèvement et d'analyse par chromatographie sur plaque ou sur couche mince du type cidessus défini, caractérisé par le fait que l'on dépose le mélange à analyser, qui a été prélevé sur un support-non adsorbant, sur une zone de bordure. de la plaque de chromatographie, en appuyant directement ledit support, par sa face o se trouve le mélange à analy- ser, contre ladite zone de bordure de la plaque de chromato- graphie, ledit support étant maintenu appuyé contre la plaque de chromatographie jusqu'à ce que le mélange à analy- ser ait sensiblement entièrement migré hors du support précité. Pour vérifier si le mélange à analyser a entière- ment migré hors de son support, on peut notamment appliquer le support sur une nouvelle plaque de chromatographie et observer si d'autres substances sont susceptibles de migrer hors dudit support. Le support utilisé est, de préférence, un corps ri- gide non adsorbant et notamment un support-plan de petite dimension tel qu'une lamelle ou une pastille Le support- plan est avantageusement en verre, celle des deux faces qui 10758 reçoit le mélange à analyser étant dépolie. Dans un mode préféré de mise en oeuvre, on effectue au moyen d'un support non adsorbant le prélèvement du mé- lange à analyser à partir du substrat solide, sur lequel il se trouve, dans des conditions reproductibles, et pour ce faire, le support précité est appliqué sur le substrat sous une pression et pendant une durée prédéterminées. D'une façon générale, tous les types de plaques de chromatographie sont utilisables dans le procédé selon l'in- vention On préfère cependant utiliser celles qui comportent une zone de concentration o sont déposés les mélanges à analyser et les étalons, cette zone de concentration consis- tant en une mince couche de terre de diatomées disposée côte à côte avec la mince couche de substance absorbante qui est, de préférence, constituée de silice. Selon une autre caractéristique avantageuse du pro- cédé selon l'invention, on maintient le support sur lequel a été appliqué le mélange à analyser contre la plaque de chromatographie par des moyens élastiques tels que par exem- ple un poussoir poussé par un ressort contre la plaque de chromatographie. De préférence, on applique sur la même plaque de chromatographie non seulement le support sur lequel a été prélevé le mélange à analyser mais encore d'autres supports o sont déposés des substances o des mélangesétalons, les mélanges-étalons étant choisis de façon à présenter des ca- ractéristiques voisines de celles du mélange à analyser. Une fois que le mélange à étudier'et les substances ou les mélanges étalons ont été appliqués sur la plaque de chromatographie au moyen de supports non adsorbants, l'ana- lyse chromatographique s'effectue de façon classique Le procédé selon l'invention s'applique aussi bien à une chroma- tographie de partage qu'à une chromatographie d'adsorption. De façon connue, les solvants migrateurs, purs ou en mélange, sont convenablement choisis, de façon par exemple à faire- varier la polarité ou le p H du milieu en fonction du mélange de substances à séparer. Le procédé selon l'invention est tout particulière- ment utilisable en dermatologie pour la détermination quali- tative et quantitative du sébum secrété par la peau Dans ce cas, le substrat sur lequel est effectué le prélèvement est constitué par de la peau lin-vivo" Mais il peut, bien enten- du, être utilisé dans d'autres applications sans pour autant sortir du cadre de l'invention. La présente invention a également pour objet un dis- positif conçu pour la mise en oeuvre du procédé ci-dessus défini pour maintenir appuyé contre la plaque de chromato- graphie le support o a été déposé le mélange à analyser et éventuellement d'autres supports o ont été déposés les substances ou les mélanges-étalons Ce dispositif est carac- térisé par le fait qu'il comporte, en premier lieu, au moins un logement ouvert à ses deux extrémités, o est placé le support du mélange à analyser, la paroi dudit logement étant en vis à vis d'une plaque de chromatographie, et en second lieu, des moyens qui sont, d'une part, disposés à l'extrémité du logement, qui est opposée à la plaque de chromatographie, et, d'autre part, assujettis de façon amovible à la paroi, o est ménagé le logement précité, pour appuyer élastiquement le support se trouvent à l'intérieur du logement contre la plaque de chromatographie. De préirenoe, notmmtent dans le cas o la plaque de c Inxnato- graphie est destinée à être placée verticalement à l'intérieur de la cuve de chromatographie, le logement, o est disposé le support du mélange à analyser, est constitué par un alésa- ge ménagé dans une plaque-support se terminant à ses deux extrémités par des équerres, o est positionnée et supportée la plaque de chromatographie. Les moyens, pour appuyer élastiquement le support du mélange à étudier à l'intérieur du logement de la plaque- support contre la plaque de chromatographie, consistent avan- tageusement en une contre-plaque assujettie par vissage à la plaquesupport, ladite contre-plaque étant traversée au droit du logement précité par un poussoir soumis à l'action d'au moins un ressort, ledit poussoir étant apte à prendre deux positions, une position o il fait saillie à l'intérieur du logement, et une position rétractée a il ne fait pas saillie à l'intérieur dudit logement. La plaque-support comporte avantageusement une plu- ralité de logements régulièrement écartés et s'étendant selon son axe longitudinal; dans ce cas, la contre-plaque comporte un nombre égal de poussoirs, chaque poussoir étant guidé à l'intérieur d'un manchon faisant saillie sur la face longitudinale de la contre-plaque, qui ne vient pas en appui sur la plaque-support De préférence, la plaque de chroma- tographie est suspendue à l'intérieur de la cuve au moyen d'un portoir amovible fixé par vissage sur la plaque-support et sa contre-plaque associée. La présente invention a enfin pour objet un organe non adsorban de prélèvement manuel permettant de saisir un support/desti né à recevoir le mélange à analyser, de l'appliquer sous une pression prédéterminée grâce au moins à un ressort taré sur un substrat et de libérer le support une fois que le pré- lèvement a été effectué, dans un logement du dispositif ci-dessus défini Un tel organe de prélèvement comprend, à l'intérieur d'un corps rigide, de forme cylindrique allon- gée, ouvert à ses deux extrémités, un fourreau déplaçable axialement à l'intérieur du corps rigide à l'encontre d'au moins un ressort taré enfilé autour dudit fourreau A l'in- térieur du fourreau est avantageusement monté un élément de préhension du support destiné à recevoir le mélange à étu- dier ou les substances ou mélanges-étalons, ledit élément étant déplaçable axialement à l'intérieur dudit fourreau à l'encontre d'un ressort de rappel enfilé autour dudit élément. L'élément de préhension comporte avantageusement une tige à l'une des extrémités de laquelle est assujetti un poussoir faisant saillie à l'extérieur du corps de l'organe; à son autre extrémité, la tige précitée est pourvue d'une pince constituée de lamelles élastiques séparées par des fentes axiales, lesdites lamelles étant rapprochées radialement vers l'intérieur, dans le fourreau o elles se trouvent, lorsque le poussoir n'est soumis à aucune action d'enfonce- ment. D'autres avantages et caractéristiques de l'inven- tion apparaîtront à la lecture de la description suivante faite à titre d'exemple non limitatif en se référant au dessin annexé. Sur ce dessin la figure 1 est une vue en élévation de l'organe de prélèvement selon l'invention, le support o est appliqué le mélange à analyser étant logé à l'intérieur de la pince dudit organe; la figure 2 est une coupe axiale de l'organe de prélèvement de la figure 1, au repos; la figure 3 est une vue en perspective montrant une plaque de chromatographie et un dispositif selon l'in- vention conçu pour maintenir en appui contre ladite plaque, le support sur lequel est appliqué le mélange à analyser; la figure 4 est une vue partielle éclatée des dif- férents éléments constituant le dispositif de la figure 3; la figure 5 est une coupe partielle selon V-V de la figure 3; la figure 6 est une coupe selon VI-VI de la figure ; la figure 7 est une coupe selon VII-VII selon la figure 5. Sur la figure 3, on a désigné par 1 une plaque de chromatographie commercialisée sous la désignation de "Whatman LUPK" Elle est destinée à être suspendue vertica- lement à l'intérieur d'une cuve, sa base étant disposée de façon classique à l'intérieur d'un auget contenant un sol- vant ou un mélange de solvants Elle est constituée d'une plaque de verre revêtue d'une mince couche de silice d'en- viron 250 microns d'épaisseur qui s'étend sur une hauteur d'environ 10 cm A sa base, elle comporte, sur une hauteur d'environ 2 cm, une zone de concentration 2 constituée d'une mince couche de terre de diatomées Sur la zone de concentra- tion 2 sont habituellement déposées des gouttelettes du mé- lange à analyser et des étalons appropriés La couche de dia- tomées 2 permet, on le sait, le dépôt d'une plus grande quan- tité de mélange pouvant aller jusqu'à 500 microlitres en autorisant une bonne séparation alors que pour une plaque de chromatographie classique, la quantité des prises d'essai ne peut pas excéder 20 microlitres et est généralement com- prise entre l'et 5 microlitres. Dans cet exemple, l'échantillon à analyser et les étalons sont appliqués sur des supports-plans non adsorbants constitués par des pastilles de verre dépoli 3 (figures 1 et 3) d'environ 6 mm de diamètre. L'échantillon à analyser et les étalons sont dépo- sés sur la face dépolie des pastilles 3 et sont prélevés au moyen d'un organe qui sera décrit de façon détaillée ci- après en liaison avec les figures 1 et 2. Les pastilles de verre 3 sont, après prélèvement, dis- posées à l'intérieur de logements cylindriques 4 pratiqués dans une plaque-support 5 Dans cet exemple, il est prévu huit logements 4 tous identiques, traversant de part en part, la plaque-support 5 Les logements 4 sont régulièrement es- pacés et disposés selon l'axe longitudinal de la plaque-sup- port 5. La plaque-support 5 est réalisée en acier inoxydable. Elle est solidarisée avec quatre vis d'assemblage 6 à tête fraisée dont les tiges filetées font saillie sur la face antérieure de la plaquesupport 5, c'est-à-dire sur la face qui est opposée à la plaque de chromatographie 1 La plaque- support 5 est pourvue à ses extrémités, du côté de sa face postérieure, de deux équerres 7 tournées l'une vers l'autre. Les deux équerres 7 sont rivetées à la plaque-support 5 La plaque de chromatographie 1 est montée à jeu entre les deux équerres 7 et la plaquesupport 5; elle vient porter sur deux ergots de butée 8 supportés à leurs extrémités, d'une part, par la plaque-support 5 et, d'autre part, par l'aile parallèle de l'équerre correspondante 7. Deux petits tétons (non représentés) faisant saillie sur la face postérieure de la plaque-support 5, au droit des deux équerres 7, mais tiennent écartée la plaque de chroma- tographie 1 par rapport à la plaque-support 5; cet écarte- ment est approximativement de 1 mm et est inférieur à l'épais- seur d'une pastille de verre 3 Les logements 4 des pastil- les de verre 3 sont disposés sensiblement selon l'axe médian longitudinal de la zone de concentration 2 de la plaque de chromatographie 1. Une contre-plaque 10, également en acier inoxydable peut être serrée contre la face antérieure de la plaque-sup- port 5 au moyen de quatre écrous moletés 11 coopérant avec les vis d'assemblage 6 de la plaque-support 5 La largeur de la contre-plaque 10 est sensiblement égale à celle de la plaque-support 5 mais sa longueur est légèrement inférieure. Au droit de chaque logement 4 de la plaque-support 5, la contre-plaque 10 comporte un alésage o est serti un manchon cylindrique 12 La contreplaque 10 est donc solidaire de huit manchons 12 régulièrement espacés dont les axes sont per- pendiculaires au plan de la plaque; les manchons 12 ne font saillie que sur la face antérieure de la contre-plaque 10 de sorte que cette dernière peut être appliquée à plat contre la plaque-support 5 Deux encoches diamétralement opposées- 13 sont pratiquées sur le bord libre des manchons 12 qui est opposé à la contre-plaque 10. Un poussoir 14 doté d'une tête moletée 15 est monté à coulissement à l'intérieur des manchons 12 Sur l'extrémi- té du poussoir 14, qui est opposée à la tête moletée 15, est pratiqué un trou, axial fileté à l'inté rieur duquel est vis- sée une vis 16 h tète ronde La tête de la vis 16, qui fait saillie radialement par rapport au corps du poussoir 14, constitue l'une des deux butées pour un ressort hélicotdal 17 enfilé autour du poussoir 15 à l'intérieur du manchon 12. L'autre butée du ressort hélico:dal 17 est constitué par un épaulement 18 pratiqué sur la paroi intérieure du manchon 12. Le ressort 17 tend à déplacer le poussoir 15 en direction de la plaque de chromatographie 1, de façon que la atête ron- de de la vis 16 fasse saillie à l'intérieur des logements 4 de la plaque 5. Le poussoir 14 est solidaire d'un ergot d'arrat 19 grâce auquel il peut prendre deux positions: une position rétractée o l'ergot 19 est appuyé contre le rebord périphé- rique du manchon 12 etune position de sortie o l'ergot d'arrêt 19 vient en butée contre le fond de l'une des deux encoches diamétralement opposées 13, le passage de l'une à l'autre des deux positions étant réalise en faisant to U'ner le poussoir 14 à l'intérieur du manchon 12 d'au maximum un quart de tour. L'ensemble formé par la plaque-support 5, la contre- plaque 10 vissée sur la plaque-support 5 et la plaque de chromatographie 1 est suspendu à l'intérieur d'une cuve de chromatographie de type connu au moyen d'un portoir en U, 20 en acier inoxydable qui est assujetti par vissage au moyen de deux écrous moletés 1 l sur des vis d'assemblage 6 de la plaque-support 5. Sur les figures 1 et 2, on a représenté l'organe de prélèvement d'un mélange à analyser sur un substrat tel que de la peau "in-vivo" par exemple, au moyen d'une pastille de verre dépoli 3 Un tel organe a été désigné par 30 dans son ensemble Il a pour fonction: de saisir une pastille du verre dépoli 3 sur laquel- le on désire prélever une prise d'essai; d'appliquer la pastille de verre dépoli 3 sur le substrat sous une pression prédéterminée; et, une fois le prélèvement effectué, de libérer la pastille de verre dépoli 3 au droitd'un logement 4 de la plaque-support 5 pour l'introduire à l'intérieur. L'organe de prélèvement 30 est pourvu d'un corps ri- gide 31, en forme de cylindre allongé, ouvert à ses deux extrémités; le corps 31 comporte deux sections de diamètres intérieurs différents se raccordant par un épaulement 32. A l'extrémité libre de la section du plus grand diamètre, qui est tournée du côté du substrat, est vissé un embout 33. Un fourreau 34, également ouvert à ses deux extrémi- tés, est monté à coulissement à l'intérieur du corps 31 de l'organe de prélèvement Il est pourvu d'une collerette périphérique 35 poussée contre l'embout 33 au moyen d'un ressort spiral taré 36 enfilé à l'intérieur du corps 31 autour du fourreau 34 et s'appuyant contre l'épaulement inté- rieur 32 Une rondelle en téflon 44 est sertie à l'intérieur du fourreau 34, au voisinage de son extrémité opposée à l'em- bout 33. A l'intérieur du fourreau 34, est monté à coulisse- ment un élément de préhension 37: il comprend une tige 38 il à l'une des extrémités de laquelle est vissé un poussoir 39 qui émerge normalement à l'extrémité du corps 31 opposée à l'embout 33 Sur l'autre extrémité de la tige 38 est vissée une pince 40 comportant trois lamelles élastiques 4 l de sec- tion courbe, séparées par des fentes axiales. Le poussoir 39 sert de butée à un ressort de rappel 42 enfilé autour de la tige 38 et s'appuyant sur un épaule- ment 43 ménagé sur la paroi intérieure du fourreau 34. Le fonctionnement de l'organe de prélèvement 30 est comparable à celui d'un stylo-mine de type classique équipé d'un ressort taré supplémentaire: pour saisir une pastille de verre dépoli 3, l'opérateur, en tenant à pleine main le corps 31 de l'organe de prélèvement appuie, par exemple avec le pouce, sur le poussoir 39 Il provoque ainsi, à l'intérieur du fourreau 34, le déplacement de la tige 38 et de sa pince 40 attenante, ce mouvement étant effectué à l'encontre du ressort de rappel 42; la pince 40 peut alors faire saillie en dehors de l'embout 33 et ses trois lamelles 41 qui étaient contraintes radialement vers l'inté- rieur par le fourreau 34, peuvent s'écarter l'une de l'autre; l'opérateur place la pastille de verre dépoli 3 à l'intérieur * du passage circulaire défini par les trois lamelles 41 écar- tées de la pince émergeante 40 Dès que l'opérateur relâche son mouvement, la pince 40 est à nouveau enfoncée à l'inté- rieur du fourreau 34; les trois lamelles élastiques 41 sont donc rapprochées radialement vers l'intérieur et viennent, par suite, serrer la pastille de verre dépoli 3 - Pour appliquer sur le substrat, la pastille de verre dépoli 3 maintenue par la pince 40 de l'organe de prélève- ment, l'opérateur, en tenant ledit organe par son corps 31, le pousse contre le substrat de façon à déplacer axialement, à l'encontre du ressort taré 36, le corps 31 par rapport au fourreau 34 et à amener ainsi l'embout 41 sensiblement au con- tact du substrat Le tarage du ressort 36 est choisi de façon à appliquer sur le substrat une pression sensiblement cons- tante, que le ressort 36 soit peu ou fortement comprimé. Pendant une période de temps constante, prédéterminée, l'opé- rateur maintient la pastille de verre dépoli 3 appliquée contre le substrat. Après prélèvement, la mise en appui de la pastille de verre dépoli 3 sur une plaque de chromatographie 1, au moyen des dispositifs 3 à 7 est effectuée comme suit: la contre-plaque 10 n'étant pas assemblée à la plaque-support 5, on introduit entre les deux équerres 7 de cette dernière la plaque de chromatographie 1, puis cet ensemble est sensible- ment couché à plat, par exemple sur une paillasse, la plaque- support 5 étant superposée à la plaque de chromatographie 1. L'organe de prélèvement 30 est amené au droit de l'un des logements 4 de la plaque-support 5 et l'opérateur, en agis- sant sur le poussoir 39, libère la pastille de verre dépoli 3 et la fait tomber à l'intérieur du logement choisi 4 contre la plaque de chromatographie 1 En répétant l'opération choisie ci-dessus, l'opérateur peut garnir chacun des loge- ments 4 avec des pastilles de verre dépoli 3 sur lesquelles ont été déposés soit d'autres échantillons à étudier, soit des étalons convenablement choisis. Cette opération étant achevée, on applique sur la plaque-support 5, la contre-plaque 10 dont tous les poussoirs 14 sont en position rétractée puis le portoir 20 en enfilant ces deux éléments autour des vis d'assemblage 6 de la plaque-support 5 et on assemble le tout au moyen des boulons moletés 11; enfin, on tourne les poussoirs 14 pour les faire passer dans leur position de sortie. Le dispositif des figures 3 à 7 et l'organe de prélè- vement 30 des figures l et 2 sont particulièrement utilisa- bles en dermatologie pour l'analyse du sébum Dans ce cas, une pastille de verre dépoli 3 est appliquée sur la peau (front ou scalp) au moyen de l'organe de prélèvement 30 pen- dant un temps d'environ 15 secondes; ce temps est choisi de façon à prélever une prise d'essai qui ne soit ni trop faible ni trop importante Sans aucun traitement ultérieur, la pastille de verre dépoli 3 est positionnée contre la zone de concentration 2 de la plaque de chromatographie 1, comme ci-dessus décrit, au moyen du dispositif des figures 3 à 7. On prend soin de disposer de part et d'autre de la prise d'essai, des mélanges étalons qui ont été également déposés L 5510758 sur des pastilles de verre dépoli 3 Ces mélanges étalons sont convenablement choisis de façon à présenter des caracté- ristiques voisines du mélange de lipides à étudier L'ensem- ble représenté sur la figure 3 est alors suspendu à l'inté- rieur d'une cuve de chromatographie de type classique, la base de la zone de concentration 2 étant plongée dans un sol- vant, le niveau de solvant étant, bien entendu, en dessous des pastilles de verre dépoli 3. L'élution est opérée de façon classique: le solvant de migration passe sur la terre de diatomées puis sur la silice de la plaque 1 Lorsque la pastille de verre dépoli 3, maintenue par le dispositif décrit ci-dessus, se trouve en contact avec la silice, le solvant élue le mélange de lipides se trouvant sur ledit verre dépoli: le solvant de migration se comporte aussi comme un solvant d'élution La séparation des différents lipides du mélange est effectuée par les trois bains successifs suivants: hexane, hexane-éther, ( 90/10); hexane-éther-acide acétique ( 70/30/1) Il y a lieu de noter que l'élution de la plaque de chromatographie 1 est achevée dès le deuxième bain A la fin de celui-ci, on peut séparer la plaque de chromatographie 1 de la plaque-support 5 et de sa contre-plaque attenante 10 La plaque de chromatographie 1 est séchée puis immergée dans une solution d'acide sulfurique à 3 La plaque de chromatographie est ensuite laissée à l'étude pendant un temps d'environ 30 minutes à une tempéra- ture d'environ 1700 C. Au moins cinq taches distinctes apparaissent alors, très séparées Elles correspondent aux constituants suivants (classés par ordre de Rf croissant) cholestérol acides gras libres triglycérides cires monoesters squalène D'autres taches, fonction du type de peau, peuvent apparaître: les diglycérides (avant le cholestérol) les cires diesters (entre les triglycérides et les cires monoesters). L'analyse quantitative de chacun des constituants séparés est effectuée par détermination de l'intensité de la couleur de la tâche (photo-densitométrie); grâce à la présen- ce des mélanges étalons déposés de part et d'autre de la pri- se d'essai, le photo-densitométre donne, après étalonnage, une réponse linéaire Il est donc possible de connaître les quantités exactes de chaque constituant présent dans chaque prise d'essai La précision est de l'ordre de 0,5 %. Cette méthode s'avère particulièrement sensible puis- qu'elle permet de détecter des quantités de constituant aussi faibles que 0,2 /mg (par exemple, cholestérol: 0,2 /'g, cires: 1 /'g; squalène: 0,5 /g). La plus grande sensibilité analytique que l'on ob- tient avec la méthode ci-dessus décrite, en comparaison de la méthode classique, résulte pour l'essentiel du fait que les prises d'essai de la méthode classique ne pouvaient pas dépasser 20 microlitres alors que dans la présente méthode, elles peuvent aller jusqu'à 500 microlitres ce qui, bien évi- demment, améliore l'analyse quantitative. Un autre intérêt majeur de la présente méthode est qu'elle est particulièrement simple et rapide puisque les phases de dissolution des prises d'essai puis de concentra- tion de la solution obtenue avant son application sur la pla- que de chromatographie sont supprimées Dans la présente invention, on passe directement du substrat sur lequel se trouve le mélange à étudier en utilisant un véhicule solide non adsorbant quelconque pour transporter le prélèvement du substrat à la plaque de chromatographie, sans aucun traite- ment intermédiaire, le véhicule étant fixé sur la plaque pendant la chromatographie. Du fait de la suppression des opérations délicates de dilution de la prise d'essai et de concentration de la solution obtenue, la méthode selon l'invention peut être mise en oeuvre par des personnes même non expertes dans les techniques de laboratoire et être utilisée sans difficul- té pour des contrôles de routine. Il est bien entendu que le mode de réalisation ci- dessus décrit n'est aucunement limitatif et pourra donner lieu à toutes modifications désirables, sans sortir pour cela du cadre de l'invention. REVENDICATIONS 1 Procédé de prélèvement et d'analyse par chromato- graphie sur plaque ou sur couche mince d'au moins un mélange de substances, ledit mélange étant prélevé au moyen d'un sup- port solide non adsorbant, ce procédé consistant à déposer une quantité appropriée du mélange à analyser sur une zone de bordure d'une plaque de chromatographie, à mettre en con- tact ladite bordure de la plaque de chromatographie avec un solvant ou un mélange de solvants de façon à provoquer la migration du mélange sur la plaque de chromatographie et la séparation des constituants dudit mélange, et à révéler ladi- te plaque pour l'analyse qualitative et/ou quantitative des constituants du mélange, caractérisé par le fait que l'on dépose le mélange à analyser, qui a été prélevé sur le support non adsorbant, sur la plaque de chromatographie, en appuyant directement ledit support, par sa face o se trouve le mélan- ge à analyser, contre une zone de bordure de ladite plaque de chromatographie, ledit support étant maintenu appuyé contre la plaque de chromatographie jusqu'à ce que le mélange à analyser ait sensiblement entièrement migré hors du support précité. 2 Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que le support non adsorbant utilisé est un sup- port-plan sensiblement rigide, de petite dimension. 3 Procédé selon la revendication 2, caractérisé par le fait que-le support-plan est un verre dépoli. 4 Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, dans lequel on effectue le prélèvement du mélange à analyser à partir d'un substrat solide sur lequel il se trouve,caracté- risé par le fait que l'on applique le support solide non adsorbant sur le substrat sous une pression et pendant une durée prédéterminées. Procédé selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé par le fait que la plaque de chromatographie uti- lisée comporte sur une zone de bordure, une zone de concen- tration, o sont déposés les mélanges à analyser, et éven- tuellement des produits-étalons, cette zone de concentration consistant en une mince couche de terre de diatomées dispo- posée côte à cote avec la mince couche de silice absorbante portée par la plaque de chromatographie. 6 Procédé selon l'une des revendications 1 à 5, ca- ractérisé par le fait que l'on maintient le support non ad- sorbant, sur lequel a été déposé le mélange à analyser, contre la plaque de chromatographie par des moyens élastiques. 7 Procédé selon l'une des revendications 1 à 6, ca- ractérisé par le fait que le mélange à analyser est du sébum prélevé sur de la peau "in-vivo". 8 Dispositif conçu pour la mise en oeuvre du procé- dé selon l'une des revendications 1 à 7, ce dispositif per- mettant de maintenir appuyé contre la plaque de chromatogra- phie, le support non adsorbant o a été déposé le mélange à analyser et, éventuellement, d'autres supports oh ont été déposés les substances ou les mélanges-étalons, caractérisé par le fait qu'il comporte en premier lieu, au moins un loge- ment ( 4) ouvert à ses deux extrémités, oh est placé le sup- port ( 3) du mélange à analyser, la paroi du logement ( 4) étant en vis à vis d'une plaque de chromatographie ( 1) et en second lieu, des moyens qui sont, d'une part, disposés à l'extrémité du logement ( 4), qui est opposée à la plaque de chromatographie ( 1) et, d'autre part, assujettis de façon amovible à la paroi o est ménagé le logement ( 4) pr 4 cité pour appuyer élastiquement le support ( 3) se trouvant à l'intérieur du logement ( 4) contre la plaque de chromatogra- phie ( 1). 9 Dispositif selon la revendication 8, caractérisé par le fait que le logement ( 4) o est disposé le support ( 3) du mélange à analyser est constitué par un aléaage ména- gé dans une plaque-support ( 5) se terminant a ses deux extr- mités par des équerres ( 7), o est positionnée et supportée la plaque de chromatographie ( 1). Dispositif selon l'une des revendicationaz 8 ou 9, caractérisé par le fait que les moyens pour appuyer élastiques ment le support ( 3) du mélange à étudier à l'intérieur du logement ( 4) de la plaque-support ( 5) contre la plaque de chromatographie ( 1 consiste' t en une contre-plaque ( 10) assujettie par vizsage à la plaque-support 11 Dispositif selon la revendication 10, caractéri- sé par le fait que la contre-plaque ( 10) est traversée au droit du logement ( 4) par un poussoir ( 15) soumis à l'action d'au moins un ressort ( 18), ledit poussoir ( 15) étant apte à prendre deux positions, une position o il fait saillie à l'intérieur du logement ( 4)-, et une position rétractée o il ne fait pas saillie à l'intérieur dudit logement ( 4). 12 Dispositif selon l'une des revendications 10 ou 11, caractérisé par le fait que la contre-plaque ( 10) compor- te plusieurs poussoirs ( 15) en nombre égal au nombre de loge- ments ( 4) de la plaque-support ( 5), chaque poussoir ( 15) étant guidé à l'intérieur d'un manchon ( 12) faisant saillie sur la face longitudinale de la contre-plaque ( 10), qui ne vient pas en appui sur la plaque-support ( 5). 13 Organe de prélèvement manuel pour la mise en oeu- vre du procédé selon l'une des revendications 1 à 8, ledit organe permettant de saisir un support non adsorbant destiné à recevoir le mélange à analyser, de l'appliquer sur un subs- trat et de libérer ledit support une fois que le prélève- ment a été effectué, caractérisé par le fait qu'il comprend à l'intérieur d'un corps rigide ( 31) de forme cylindrique allongée, ouvert à ses deux extrémités, un fourreau-( 34) dé- plaçable axialement à l'intérieur dudit corps rigide ( 31) à l'encontre d'au moins un ressort taré ( 36) enfilé autour dudit fourreau. 14 Organe de prélèvement selon la revendication 13, caractérisé par le fait qu'à l'intérieur du fourreau ( 34), est monté un élément de préhension ( 37) du support destiné à recevoir le mélange à étudier, ledit élément étant déplaça- ble axialement à l'intérieur dudit fourreau-( 34) à l'encontre d'un ressort de rappel ( 42). Organe de prélèvement selon la revendication 14, caractérisé par le fait que l'élément de préhension ( 37) comporte une tige à l'une des extrémités de laquelle est assujetti un poussoir ( 39), ladite tige comportant, à son autre extrémité, une pince ( 40) constituée de lamelles élas- tiques ( 41) séparées par des fentes axiales, lesdites lamel- les étant rapprochées radialement vers l'intérieur dans le fourreau ( 34) o elles se trouvent> lorsque le poussoir ( 39) n'est soumis à aucune action d'enfoncement dans le corps ( 31).