FR 2460625 A1 19810130 FR 7918042 A 19790711 La présente invention concerne un procédé de lutte biologique contre les Lépidoptères déprédateurs de plantes, par l'intermédiaire d'un insecte parasite oophage. On sait que les Lépidoptères causent des dégâts aux plantes : le stade adulte de ces Lépidoptères apparaît généralement au printemps puis, après copulation, les femelles pondent des oeufs. De ces derniers éclosent des chenilles qui ont souvent un comportement endophyte causant des dégâts soit à l'intérieur des tiges des fleurs et des fruits, soit au coeur même des plantes comme la noctuelle du chou. En particulier, la pyrale du mals, Ostrinia nubilalis, est un papillon dont la chenille cause des dégâts dans les cultures de mais. La femelle pond des oeufs à la face inférieure des feuilles et la chenille issue de ces oeufs, après quelques morsures sur les feuilles, migre vers le panicule mâle au sommet de la plante et pénètre dans la tige qu'elle mine. Selon les régions et les conditions climatiques de l'année, il peut exister deux générations de pyrale. A l'automne, la chenille entre en diapause et passe l'hiver dans les déchets de cultures.Au printemps, elle se nymphose et donne des insectes adultes dont la sortie et la ponte coincident pour la plupart des individus avec l'époque, notamment en France,où le mais est au stade cornet, mais elles peuvent également s'étaler pour certaines pyrales sur une période allant de juin à la mi-août. Les pertes de récoltes sont essentiellement dues à la chenille qui mine les tiges, entraînant une mauvaise alimentation de l'épi et une verse gênante pour la récolte. On connaît à l'heure actuelle trois procédés de lutte contre les Lépidoptères, la première par insecticides chimiques, par exemple en formulation de microgranulés épandus au stade cornet pour la pyrale du mais, la deuxième par des preparations bactériennes à base de souches de Bacillus thuringiensis détruisant les jeunes chenilles. Le troisième procédé est d'ordre biologique, par l'intermédiaire d'insectes,par exemple les Trichogrammes. La présente invention vise un perfectionnement à ce dernier procédé de lutte biologique. A l'heure actuelle, en ce qui concerne ce procédé de lutte biologique, les Trichogrammes produits industriellement par développement sur divers hôtes de substitution, sont épandus à l'état nymphal au dernier stade d'évolution dans l'oeuf-hôte. Ces nymphes se métamorphosent alors en adultes qui se dispersent et pondent dans les oeufs des Lépidoptères. La larve de Trichogramme se développe dans l'oeuf des papil lons, une femelle Pouvant ainsi détruire plusieurs pontes successives les Trichogrammes sont généralement présentés sur de petites plaquettes de carton que l'on fixe sur le végétal et, parfois, sous forme d'oeufs parasités sans support.La durée de la ponte des papillons de la pyrale étant souvent supérieure à la longévité des Trichogrammes et surtout à la durée pendant laquelle le Trichogramme est capable de pondre, le procédé actuel consiste à effectuer pour chaque génération de papillons de pyrale deux à trois lâchers successifs à dix jours d'intervalle, comme c'est le cas par exemple pour la pyrale du maïs : voir notamment les communications AFANACEVA 1935 ; ZILBERG, 1972 ; VOEGELE, 1973 ; VOEGELE et Collaborateurs, 1975 ; TCHERKANOVA, 1976. I1 est cependant difficile de prédire le début de la période de ponte des papillons de Lépidoptères. Or, il est prouvé qu'un Trichogramme, par exemple, voit sa période de vie diminuée s'il ne lui est pas donné la possibilité de pondre, d'où une diminution plus rapide de la population du Trichogramme et une moindre efficacité en cas de traitement effectué trop tôt. Si, au contraire, le traitement est effectué trop tard, les premières pontes de papillons de Lépidoptères ne seront pas parasitées, d'où une moindre efficacité, d'autant plus que le nombre de plaquettes par hectare est diminué puisqu'il faut un certain temps au Trichogramme pour se répartir de façon homogène dans la culture.Dans les conditions de cultures françaises en p-articulier, il parait d'ailleurs difficile de demander aux cultivateurs d'effectuer trois épandages à dix jours d'intervalle, surtout compte tenu du temps nécessaire pour traiter un hectare selon ce mode de traitement. La présente invention vise donc à remédier aux divers inconvénients ci-dessus en fournissant un procédé de traitement permettant de n'effectuer qu'une seule opération par génération du déprédateur. Conformément à l'invention, on effectue un épandage unique à la période correspondant au début de la ponte du Lépidoptère, au moyen d'un mélange dosé d'oeufs-hôtes ayant subi un conditionnement tel que les uns, d'une première vague, renferment l'oophage au dernier stade d'évolution et les autres, d'une seconde vague, renferment l'oophage au stade pré-nymphe moyennant quoi les imagos issus des oeufs de la première vague émergent au bout de 1 à 2 jours et ceux issus de la seconde vague émergent au bout de 15 à 20 jours. Suivant d'autres caractéristiques les proportions respectives des oeufs de la première vague et des oeufs de la seconde vague sont dosés de façon à couvrir au maximum l'étalement de la ponte du Lépidoptère les oeufs de la première vague contiennent l'insecte oophage au stade nymphe à mandibules noires sclérifiées, yeux rouge lie de vin et abdomen virant du blanc au jaune les oeufs de la seconde vague contiennent l'insecte oophage au stade pré nymphe-nymphe, avec début de différenciation de la zone céphalique du reste du corps, sous forme d'un léger étranglement à la partie postérieure de la tête ;; le moyen de mise en oeuvre du procédé tel que défini ci-dessus est constitué par un mélange dosé destiné à être épandu en vrac ou par des plaquettes sur lesquelles sont collés les oeufs de la première vague et de la seconde vague au moyen d'une solution aqueuse d'alcool polyvinylique ou de gomme arabique. D'autres caractéristiques et avantages de la présente invention ressortiront mieux de la description qui va suivre faite en regard du dessin annexé représentant un graphique illustrant sur plusieurs années les périodes moyennes d'étalement de la ponte de la pyrale du mais. En ce qui concerne plus particulièrement la lutte biologique contre la pyrale du mais qui sera décrite ci-après à titre d'exemple d'application du procédé selon l'invention, on peut faire rappel à un seul traitement au tout début de la période de ponte des papillons, à l'aide de Trichogrammes épandus à l'état de fin de stade nymphal. I1 est possible de tirer parti des différences de longévité des individus au sein d'une population en augmentant les doses de façon telle que 30 jours après le traitement, le nombre de Trichogrammes adultes encore vivants soit suffisant pour parasiter la majeure partie des oeufs encore déposés à cette époque.Ce mode de mise en oeuvre est très satis faisant en conditions chaudes car la pyrale présente une période de ponte courte et intense, et permet d'obtenir une efficacité équivalente à trois lâchers. En conditions plus fraîches cependant, cette efficacité risque d'être moins bonne sur les oeufs déposés entre 15 et 20 jours après traitement, car la population du Trichogramme risque d'avoir trop diminué. Au-delà de cette période, le relais est pris soit par des Trichogrammes fils développés sur les premiers oeufs de papillons parasités, d'où une remontée de l'ef- ficacité du traitement sur la fin de la période de ponte, soit par un deuxième traitement si la ponte du déprédateur est trop reportée dans le temps. En se référant au graphique annexé, on a porté en abscisses le temps en mois et en quantièmes sur une période s'étendant du 15 juin au 10 août et, en ordonnées, le pourcentage de ponte de la pyrale pour 100 plants. Les courbes I, II, III et IV représentent respectivement l'étalement -des pontes pour les années 1975, 1976, 1977 et 1978. Les courbes I et II correspondent à des années chaudes, tandis que les courbes III et IV correspondent à des années froides. Sur ces graphiques, on a également porté les points JO respectifs représentant le début de ponte de la pyrale ainsi que des flèches T10 et T20 respectives correspondant à la date d'intervention ou de traitement, d'une part 10 jours après le début de la ponte et diantre part, 20 jours après le début de ladite ponte. Un exemple d'application réussie du procédé de traitement décrit ci-dessus est donné, pour la pyrale du mais, en années chaudes par les courbes I et II, en années froides par la courbe III. Conformément à l'invention, il est préférable de mélanger des Trichogrammes à différents stades d'évolution afin d'obtenir au champ une évolution retardée d'une partie de la population, ce qui permet de remédier aux deux inconvénients mentionnés ci-dessus. Ce mélange est à épandre au début de la période de ponte des Lépidoptères, et comprend donc des Trichùgrammes prêts à émerger et des Trichogrammes au stade pré-nymphe.Il y a lieu de noter dans ce cas la meilleure adaptation à la biologie de la pyrale, illustrée par exemple par la distribution des pontes de la pyrale du mais des quatre dernières années (voir courbes I, II, III et IV) qui montre en effet qu'il existe des années chaudes avec dépôt très pr-écoce et regroupement des ooplaques (courbe I) et des années froides avec dépôt tardif et très étalé des oeufs (courbe IV). I1 est ainsi nécessaire de disposer à l'instant J qui est celui du dépôt des premières ooplaques et qui se situe selon les années du 20 juin au 10 juillet, d'une population de Trichogrammes prêts à émerger, donc à intervenir (première vague) et susceptible de pouvoir faire face éventuellement à une ponte groupée de la pyrale, c'est-à-dire d'être disponible à dose forte. La première vague --présente un effet étalé de l'ordre de 10 jours environ en conditions normales et davantage en conditions froides. Les oeufs-hôtes déposés après ces 10 jours doivent être parasités par de nouveaux Trichogrammes (deuxième vague) qui présenteront également une activité de l'ordre de 10 jours. Au-delà de cette période de 20 jours apparaissent les Trichogrammes de la nouvelle génération, dans le cas par exemple de la pyrale du mais, renforcés éventuellement par les derniers émergés de la seconde vague qui exploiteront les derniers oeufs-hôtes pondus. Les proportions du mélange sont bien entendu à adapter à la courbe de ponte de l'hôte. Dans le cas de la pyrale du mals, elles peuvent varier par exemple de 1/3 à 2/3 de première vague et de 2/3 à 1/3 de seconde vaqueavec des possibilités d'aménagement pour une dose globale par hectare minimale de 150 000 individus, cette dose pouvant éventuellement atteindre et même dépasser 300 000 individus. Pour chaque vague plusieurs conditionnements sont possibles et peuvent par exemple correspondre aux caractéristiques suivantes PREMIERE VAGUE Cette première vague a pour but de pouvoir disposer durant un intervalle de 20 jours correspondant aux fluctuations du début de la ponte du prédateur selon les années, de Trichogrammes prêts à éclore. Conditionnement 1 Sous l'action de divers facteurs abiotiques, les Trichogrammes peuvent êt-re stockés de 3 mois à 1 an à l'état de prénymphe en diapause. I1 est ensuite possible d'obtenir à nouveau leur développement jusqu'à l'âge adulte avec plus de 90 diémer- gence.Le Demandeur a déjà décrit un tel procédé de conditionne ment dans sa demande de brevet français NO 79 17774 déposée le 9 juillet 1979 et consistant notamment pour la souche N 16 décrite dans cette demande et utilisable contre la pyrale du mais, à instaurer un état de diapause en soumettant des oeufs-hôtes fraîchement parasités à des températures de développement inférieures ou égales à 150C, par exemple 14,50C ou 120C, ou à une thermopériode de 5 à 120C pendant plus de 40 jours avec photopériode de 8 heures de lumière et 16 heures d'obscurité, puis un stockage à 30C, l'humidité relative durant ce conditionnement étant de 80 Ó. De tels oeufs, placés après stockage à une température de ré activation de 16 à 170C, par exemple le 13 juin pour la pyrale du maïs, pourront être accélérés s'il y a lieu, à des températures plus élevées en cas de jours J particulièrement précoces. Retirés de la température de réactivation et placés à une température plus élevée au champ, ils émergent en 1 ou 2 jours. Conditionnement 2 Les Trichogrammes en provenance d'un élevage continu à 200C ou bien de diapausants et bénéficiant dans ce cas d'un effet dit F1 (décrit dans la demande de brevet français précitée) qui se traduit par un potentiel biotique considérablement accru, sont élevés pendant une semaine à 25 C à compter par exemple du 13 juin sur la pyrale-du mais et sont ensuite placés dans ce cas le 20 juin à 15-160C. Dans de telles conditions de froid, les Trichogrammes peuvent se conserver plusieurs jours et sont prêts, à partir du 24 juin dans cet exemple, à émerger de manière très groupée dans les 24 heures qui suivent leur sortie du froid. Conditionnement 3 I1 consiste à f-aire parasiter par exemple le 8 juin pour la pyrale du mais, par des Trichogrammes provenant de diapause ou bien d'élevage continu, des oeufs d'Ephestia kuhniella de 72 heures, à les laisser évoluer pendant 4 à 5 jours à 2ûOC puis pendant 7 jours à une température légèrement inférieure à 150C avant de les-stocker à 3 C où ils peuvent être conservés de 0 jour à 1 mois avec émergence à leur sortie du froid en moins d'une semaine à une température supérieure à 22 C (décrit également dans la demande de brevet français précitée). Dans ces trois conditionnements, les Trichogrammes au départ du lieu de production sont au stade nymphe à mandibules noires sclérifiées, yeux rouge lie de vin et abdomen virant du blanc au jaune. SECONDE VAGUE : I1 s'agit cette fois de disposer, toujours durant l'intervalle de 20 jours, de Trichogrammes qui émergeront de 10 à 15 jours après leur distribution sur le terrain, c'est-àdire en coincidence avec la disparition des Trichogrammes de la première vague. Ici également, plusieurs conditionnements sont possibles selon les exemples suivants Conditionnement 4 I1 correspond au conditionnement 1 ci-dessus sans réactivation préalable. Au jour J, les oeufs sont prélevés directement à la température de 3 C. Ils évolueront en adultes en 10 à 15 jours en conditions de températures élevées et de 16 à 26 jours environ en cas d'années froides. Conditionnement 5 Les oeufs d'Ephestia kuhniella sont parasités à partir par exemple, pour la pyrale du mais, du 20 juin et mis à développer à la température seuil de 15 à 16 C. I1 peut être fait appel dans ce cas à des Trichogrammes diapausants ou provenant d'un élevage continu. Conditionnement 6 I1 consiste à placer à 150C pendant 7 jours des oeufs d'Ephestia kuhniella parasités en 24 heures puis à stocker ces oeufs à 30C de O jour à 1 mois. Retirés du froid, ils émergent en 10 à 20 jours suivant les conditions météorologiques de l'année. Dans ces trois derniers conditionnements, il est avantageux d'atteindre le stade prénymphe-nymphe caractérisé par le début de différenciation de la zone céphalique du reste du corps sous forme dlun léger étranglement à la partie postérieure de la tête. I1 y a lieu de noter que les Trichogrammes ayant subi une diapause présentent, par rapport à ceux d'élevage continu et contrairement à ces derniers, l'avantage d'avoir des descen dants sur le terrain qui n'entrent pas en diapause en cas d'années particulièrement fraîches. Le mélange peut être distribué mécaniquement ou manuellement avec ou sans support. Dans le cas du mélange sans support, il peut être distribué en particulier au moyen de tous appareils d'épandage de poudres ou granulés connus en soi. Dans le cas de l'épandage avec support, le moyen d'application est constitué par des plaquettes sur lesquelles sont collés les oeufs de la première vague et de la deuxième vague, dans-les proportions requises, au moyen d'une solution aqueuse d'alcool polyvinylique ou de gomme arabique. Le tableau I ci-dessous résume à titre d'exemple le devenir de pontes d'Ephestia kuhniella parasitées par le Trichogramme et stockées à 30C, après leur sortie du froid. Les données indiquées dans ce tableau correspondent aux oeufs de la seconde vague sous le conditionnement 4 mentionné ci-dessus, les essais ayant été réalisés sur trois parcelles correspondant à trois régions différentes. TABLEAU I N Date sortie Date mise Date sortie Date sortie Durée Taux paras. Taux émerg. Parcelle Essai 3 C en place 1er imago derniers d'avolution sur la somme sur la somme (bri météc) imagos A B des plaquettes des placuettes 1 5.06 8.06 22.06* 26.06* 19 22 80 à 90 93 % 2 8.06 11.06 24.06* 29.06* 19 22 80 à 90 88 % 1 3 12.06 13.06 7.07 8.07 26 27 80 à 90 94 % 4 15.06 19.06 8.07 9.07 21 25 80 à 90 88 % 5 19.06 21.06 10.07 12.07 22 25 80 à 90 80 % (25 %) (100 %) 1 5.06 8.06 22.06* 26.06* 19 22 80 à 90 85,5 % 2 8.06 11.06 28.06* 11.07# 21 22 80 à 90 87 % 2 3 2.06 13.06 8.07 11.07 29 30 80 à 90 98 % (100 %) 4 15.06 19.06 8.07 9.07 23 25 80 à 90 84 % 5 19.06 21.06 9.07 10.07 20 23 80 à 90 90 % 1 5.06 14.06 23.06* 27.06* 20 23 80 à 90 79 % 2 8.06 14.06 29.06* 30.06# 23 80 à 90 80 % 3 3 12.06 14.06 10.07 12.07 30 31 80 à 90 83 % 4 15.06 19.06 11.07 12.07 26 28 80 à 90 37 % 5 19.06 21.06 12.07 14.07 24 26 80 à 90 90 % (20 %) * Donrées théoriques # Données observées A : Evolotion en jours au champ B : Evolution en jours de la sortie 3 C à la fin d'émergence Le tableau II ci-dessous donne, également à titre d'exemple, les résultats de traitements effectués également sur trois régions et comportant un mélange dosé de 2/3 d'oeufs de la première vague (conditionnement 2) et de 1/3 d'oeufs de la seconde vague (conditionnement 5). Les résultats donnés dans ce tableau montrent une efficacité réelle du mélange sur le parasitisme des pontes de pyrale et une efficacité théorique sur les chenilles comparable à celle d'un insecticide chimique (surtout si l'on tient compte de la dispersion réelle des Trichogrammes en dehors des parcelles contrôlées). TABLEAU II Parcelle % Pontes de la pyrale Chenilles de pyrale Eficacité du mais parssitées du maïs parsaitées théorique T1 T10 T11 T12 T13 T1 T10 T11 T12 T13 T1 T10 T11 T12 T13 1 18 23 61 77 71 52 19 37 31 30 6 49 41 46 36 Facteur significatif b b a a a c a bc ab ab b a a a a 2 7 11 45 80 66 75 19 60 27 36 2 76 37 69 59 Facteur eignificatif d c b a a c a c ab b c a b b ab 3 11 29 88 92 30 97 31 34 34 41 5 71 57 70 55 Facteur significatif b a a a a b a a a a b a a a a T1 : Témoin T10 : Insecticide chimique "Dursben" T11 : 150 000 Trichogrammes à J T12 : 100 000 Trichogremmes à J, 50 000 à + 10 T13 : Mélange 100 000 adultes + 50 000 prénymphes REVENDICATIONS 1. Procédé de lutte biologique contre les Lépidoptères déprédateurs de plantes par l'intermédiaire d'un insecte parasite oophage, dans lequel on effectue au moins un épandage annuel au champ d'oeufs-hôtes du parasite oophage sur les plants à protéger, caractérisé par le fait que l'on effectue un épandage unique à la période correspondant au début de la ponte du Lépidoptère, d'un mélange dosé d'oeufs-hôtes ayant subi un conditionnement-tel que les u-ns, d'une première vague, renferment 1'oophage au dernier stade d'évolution et les autres, d'une seconde vague, renferment l'oophage au stade pré-nymphe, moyennant quoi les imagos issus des oeufs de la première vague émergent au bout de 1 à 2 jours et ceux issus de la seconde vague émergent au bout de 15 à 20 jours. 2. Procédé selon la revendication 1, plus particulièrement applicable à la lutte contre la pyrale du mais, caractérisé par le fait que le conditionnement des oeufs de la première vague comprend l'induction de la diapause d'oeufshôtes parasités, un stockage de 1 à 12 mois à 30C,suivi d'une réactivation longue à 16-170C,ou courte à 250C, ou un élevage direct à 200C, ou l'utilisation de la génération fille de diapausants. 3. Procédé selon la revendication l, plus particulièrement applicable à la lutte contre la pyrale du mais, caractérisé par le fait que le conditionnement des oeufs de la première vague comprend l'induction de la diapause d'oeufshôtes parasités, un stockage court limité à 30 jours à 3 C, avec réactivation à une température supérieure à 220 C. 4. Procédé selon la revendication 1, plus particulièrement applicable à la lutte contre la pyrale du mals, caractérisé par le fait que le conditionnement des oeufs de la seconde vague comprend l'induction d'une diapause d'oeufs-hôtes parasités, sans réactivation, ou l'utilisation d'oeufs provenant d'un élevage direct à 15-160C. 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé par le fait que le mélange dosé comprend des proportions respectives d'oeufs de la première vague et d'oeufs de la seconde vague en des quantité elles-mêmes fonction de l'étalement de la période de ponte du Lépidoptère. 6. Procédé selon la revendication 5, caractérisé par le fait que le mélange dosé renferme des proportions de 1/3 à 2/3 d'oeufs de la première vague etde 2/3 à 1/3 d'oeufs la seconde vague. 7. Mélange dosé pour la mise en oeuvre du procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé par le fait que les oeufs de la première vague contiennent l'insecte oophage au stade nymphe à mandibules noires sclérifiées, yeux rouge lie de vin et abdomen virant du blanc au jaune. 8. Mélange dosé selon la revendication 7, caractérisé par le fait que les oeufs de la seconde vague contiennent 1' insecte oophage au stade prénymphe-nymphe, avec début de différenciation de la zone céphalique du reste du corps, sous forme d'un léger étranglement à la partie postérieure de la tête. 9. Mélange dosé selon la revendication 7, caractérisé par le fait qu'il est constitué par des plaquettes sur lesquelles sont collés les oeufs de la première vague et de la seconde vague au moyen d'une solution aqueuse d'alcool polyvinylique ou de gomme arabique.