FR 2454808 A1 19801121 FR 7910652 A 19790426 La présente invention à la réalisation de laquelle ont participé Messieurs Robert FOURNEX, Fernando BARZAGHI et Julien WARNANT, concerne l'application a titre de médicaments d'oximes dérivées du E-homo éburnane, ces oximes étant sous la forme d'un mélange d'isomères syn et anti ou sous la forme d'un isomère unique. La demande concerne également les produits sous la forme syn ou anti ainsi qu'un procédé de préparation de l'oxime anti d partir de l'oxime syn. Dans sa demande de premier certificat d'addition dépo sée en France le 10 Septembre 1970 sous le n0 70-32889 et délivrée sous le NO 2 104 959, la demanderesse a décrit une nouvelle synthèse de la (+)vincamine. Parmi les produits intermédiaires nécessaires a la préparation de la vincamine selon la méthode décrite dans cette demande, la demanderesse a décrit le 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20)E-homo éburnane de formule sous la forme d'un mélange syn et anti. Ce meSne produit peut être également dénommé 15 oxime de 3a, 16a-D-homo éburnaméni- ne 14,15-dione (mélange syn et anti). La demanderesse a maintenant effectué la séparation de ce mélange en ses deux constituants, ctest-a-dire, l'isomere syn de formule et l'isomère anti de formule La séparation du mélange syn et anti en ses deux constituants peut, par exemple, être effectuée par chromatographie; un tel exemple figure dans la partie expérimentale. La salification de ces produits peut être effectuée selon les méthodes usuelles. La société demanderesse-vient de découvrir que le mélange des isomères syn et anti tel que décrit dans le brevet NO 2 104 959, chacun des isomeres syn ou anti et les sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques de ces produits possèdent d'intéressantes propriétés pharmacologiques; ce sont notamment des oxygénateurs et vasorégulateurs cérébraux de grande valeur; ils entrassent en particulier une augmentation du flux cérébral au niveau de la microcirculation cérébrale. Ces propriétés justifient leur application en thérapeutique, et l'invention a pour objet, a titre de médicaments, les produits de formule sous la forme d'un mélange d'isomères syn et anti ou sous la forme de l'un de ces isomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques de ces produits, phar maceutiquement acceptables. L'invention a plus particulièrement pour objet, à titre de médicament, le 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20) E-homo éburnane sous la forme anti et les sels d'addition de ce produit avec les acides minéraux ou organiques, phazmaceutique- ment acceptables. Les sels d'addition pharmacoligiquement acceptables avec les acides minéraux ou organiques peuvent entre, par exemple, les sels formés avec les acides chlorhydrique, bromhydrique, iodhydrique, nitrique, sulfurique, phosphorique, acétique, formique, benzoïque, maléique, fumarique, succinique, tartrique, citrique, glyoxylique, aspartique, ascorbique, les acides alcoylmonosulfoniques tels que l'acide méthanesulfonique, l'acide éthanesulfonique, l'acide propanesulfonique, les acides alcoyldisulfoniques tels que l'acide méthanedisulfonique, l'acide a,-éthanedisulfonique, les acides arylmonosultoniques tel que l'acide benzènesulfonique et les acides aryldisulfoniques. L'invention a notamment pour objet, à titre de médicament, le chlorhydrate du 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20) E-homo éburnane isomère anti. L'ensemble des produits tels que définis ci-dessus constituent des médicaments très utiles en thérapeutique humaine, dans le traitement des vasculopathies cérébrales et de tous les syndromes provoqués par une altération de la circulation cérébrale; ils permettent de prévenir ou de diminuer les effets de l'artériosclérose cerébrale, des troubles circulatoires cérébraux, des hémorragies méningées ou cérébrales. Ils peuvent être utilisés en particulier dans le traitement des insuffisances cérébrales, des accidents cérébro-vasculaires et des traumatismes craniens. La présente demande a encore pour objet : les compositions pharmaceutiques contenant, à titre de principe actif, l'un au moins des médicaments tels que définis ci-dessus. Ces compositions sont réalisées de façon à pouvoir être administrées par la voie digestive ou parentérale. Elles peuvent etre solides ou liquides et se présenter sous les formes pharmaceutiques couramment utilisées en médecine humaine comme, par exemple, les comprimés, simples ou dragéifiés, les gélules, les granulés, les suppositoires, les préparations injectables; elles sont préparées selon les méthodes usuelles. Le ou les principes actifs peuvent y etre incorporés à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques tels que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraff iniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émulsifiants, les conservateurs. La posologie usuelle, variable selon le produit utilisé, le sujet traitéet l'affection en cause, peut être par exemple de 10 à 200 mg par jour chez l'adulte, par voie orale. L'invention a également pour objet le 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20) E-homo eburnane, sous la forme syn et ses sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques et le 14-oxo 15-hydroxyimino 3a a (20) E-homo éburnane sous la forme anti et ses sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques. Les sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques peuvent être choisis dans la liste donnée ci-dessus. Le sel préféré est le chlorhydrate. L'invention a enfin pour objet un procédé de préparation du 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20) E-homo éburnane sous la forme anti, caractérisé en ce que le 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20) E-homo éburnane sous la forme syn est chauffé dans un milieu choisi parmi l'acide formique, l'éthérate de trifluorure de bore et le complexe trifluorure de boreacide acétique et plus particulièrement un procédé caractérisé en ce que l'on opère dans l'acide formique à une température de l'ordre de 1000C. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois la limiter. EXEMPLE 1 : 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20) E-homo ébur- nane isomère syn et 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20) Ehomo éburnane isomère anti On ajoute 250 cm3 de chlorure de méthylène à 25 g de chlorhydrate de 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20) E-homo éburnane sous forme de mélange syn et anti. On obtient une suspension à laquelle on ajoute en une fois 100 cm3 d'ammoniaque pur. On agite 5 minutes et obtient une dissolution On décante la phase aqueuse que l'on réextrait avec 50 cm3 de chlorure de méthylène. On rassemble les phases organiques, sèche sur sulfate de magnésium, filtre et distille à sec.On obtient 26,1 g de produit que l'on chromatographie sur une colonne de 1,4 kg de silicagel avec un éluant constitué de chlo rure de méthylène-acétone (100-20). On recueille ainsi 13,6 g de 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16 (20) E-homo éburnane isomère syn de Rf élevé. Fusion = 1760C [&alpha;]D = 7D = + 1110 (c = 1% dans la pyridine) et 3,7 g de 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20)E-homo éburnane isomère anti. Fusion = 201 C [&alpha;]D = + 620 (c = 1% dans la pyridine) EXEMPLE 2 : Chlorhydrate de 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20) E-homo éburnane isomère syn. On place 16,8 g de 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20) E-homo éburnane isomère syn dans 60 cm3 de chlorure de methy- lène sec. On ajoute en une fois 7,8 cm3 d'une solution 5,2N d'acide chlorhydrique sec dans l'éthanol. Un précipité se développe rapidement. On agite pendant 1 h30 à température ambiante puis essore et empate par l'acétate d'éthyle. On sèche sous vide à 1000C pendant 24 heuresen présence de potasse et recueille 13,3 g de cristaux blancs F = 230-2400C t a-7D = + 870 (1% dans la pyridine) Microanalyse : C20H24ClN3O2 = 373,887 Calculé : C% : 64,25 H%: 6,47 C1% : 9,43 Nt :11,24 Trouvé : 63,9 6,6 9,5 10,9 Dichroïsme circulaire dans l'éthanol Max. 217 nm Ag = + 15,7 285 nm A = - 5,36 245 nm ## = - 1,5 320 nm As = + 1,46 262 nm ## = + 3,74 EXEMPLE 3 :Chlorhydrate de 14-oxo 15-hydroxyimino 3az 16a (20) E-homo éburnane isomère anti. On place 6 g de 14-oxo 15-hydroxylmino 3&alpha;, 16&alpha; (20) Ehomo éburnane isomère anti dans 25 cm3 de chlorure de méthy- lène sec. On ajoute en une fois 3,75 cm3 d'une solution 5,2N d'acide chlorhydrique sec dans l'éthanol. Un précipité se développe. On agite 30 minutes puis introduit lentement 200 cm3 d'éther éthylique sec. On agite 2 heures à température ambiante puis essore, empâte à l'éther éthylique sec et seche sous vide à 500C avec de la potasse. On recueille 6,1 g de cristaux blancs, F = 2400C environ. /a 7 = + 45,8 (c = 1% dans la pyridine). Microanalyse : C20 H24 Cl N302 = 373,887 Calculé : CE : 64,25 H% : 6,47 C18 : 9,48 N% : 11,24 Trouvé : 63,9 6,3 - 9,3 11 Dichrolsme circulaire dans l'éthanol Max 219 nm = + 8,4 260 nm A = +12,6 295 nm A = - 6,4 EXEMPLE 4 : Chlorhydrate de 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16&alpha; (20) E-homo-éburnane isomère anti. On chauffe à 100 C pendant 2 heures sous atmosphère d'azote une solution de 0,5 g de chlorhydrate de 14-oxo 15hydroxyimino 3a, 16a (20) E-homo éburnane isomère anti dans 1 cm3 d'acide formique pur. On verse le mélange rapidement refroidi dans 150 cm3 d'une solution aqueuse saturée de carbonate acide de sodium puis extrait au chlorure de méthylène, lave à l'eau et sèche sur sulfate de sodium. Après évaporation du solvant on recueille 0,5 g de résine incolore. On forme le chlorhydrate du produit obtenu par dissolution dans 2,5 cm3 de chlorure de méthylène puis on ajoute 0,3 cm3 d'une solution 5,2N d'acide chlorhydrique dans l'éthanol. Après précipitation de cristaux blancs on dilue par 50 cm3 d'éther éthylique anhydre puis essore et sèche sous vide. On obtient 0,48 g de cristaux d'un produit identique à celui obtenu à l'exemple 3. EXEMPLE 5 : Formes pharmaceutiques. a) ComprimEs : On a préparé des comprimés répondant à la formule suivante - 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20) 4-homo éburnane isomère anti .................................. 30 mg - Excipient q.s.pour un comprimé (détail de l'exci pient: lactose, amidon de blé, amidon traité, amidon de riz, stéarate de magnésium, talc). b) Gélules On a préparé des gélules répondant à la formule suivante: - 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20) E-homo éburnane isomère anti ........................................ 30 mg - Excipient q. s.pour une gélule terminée à 350 mg (détail de l'excipient : talc, stéarate de magnésium, aérosil). - ETUDE PHARMACOLOGIQUE 1) Ischémie cérébrale obtenue par l'augmentation de la pression intracranienne du liquide cérébro-spinal chez le rat. Méthode On a utilisé des rats mâles anesthésiés trachéotomisés, immobilisés et aérés artificiellement. On a implanté et fixé avec du ciment dentaire deux électrodes d'argent chloruré dans la région du "cortex visuel" et du cervelet pour enregistrer 1' électroencéphalogramme. On a provoqué une ischémie complète avec une technique similaire à celle décrite par KRAMER et TUYMAN dans BRAINS RESEARCH 6 686 (1967), qui consiste à diffuser dans "la cisterna magna" un liquide cérébro-spinal artificiel à la pression de 200 mm Hg. Pour éviter une augmentation trop élevée de la tension artérielle, on a pratiqué 45 secondes avant le début de la compression des ventricules cérébraux et pendant toute la durée de cette compression, une perfusion de camsylate de trimethaphan selon la technique de LJUNGGREN et SCHUTZ - BRAINS RESEARCH 73 277 (1974). La durée de chaque ischémie a été de 30 secondes et on a pratiqué sur chaque animal trois ischémies successives à 15 mn d'intervalle. Le produit, dissout dans du sérum physiologique, a été injecté 3 mn avant la seconde ischémie. On a évalué la "résistance cérébrale" (temps en secondes qui s'écoule entre le début de l'ischémie et l'aplatissement du tracé) et la "récupération" (temps qui s'écoule entre la fin de l'ischémie et la réapparition de l'activité électroencéphalographique). DOSE AVANT TRAITEMENT APRES TRAITEMENT mg/kg 1 ère Ischémie 2ème Ischémie 3ème Ischémie PRODUIT Temps Temps Temps Temps Temps Temps MINISTRE I.V. Résist. Récup. Résist Récup. Résist Récup. (Sec) (Sec) (Sec) (Sec) (Sec) (Sec) Produit 16 31,4 17,8 21,7 17,7 26,5 des ex.3 5 t0,5 +2,3 +0,5 +1,8 0,6 12,3 et 4 Il ressort de ces résultats que le produit des exemples 3 et 4, administré par voie intraveineuse à la dose de 5mg/kg, augmente le temps de résistance à lrischémie et diminue le temps de récupération de l'activité électrique corticale après une ischémie totale. Le produit des exemples 3 et 4 facilite la reprise de la circulation sanguine post-ischémique des tissus cérébraux. 2) Action sur l'aorte isolée de lapin L'action de relaxation des produits étudiés est déterminée par le pourcentage de l'action antagoniste vis à vis des contractions provoquées par le chlorure de potassium sur l'aorte isolée de lapin selon le test décrit par FURCHGOTT et BHADRAKOM, J. Pharm. Exp. Thérap. 1953 - 108 p.125-143. METHODE L'aorte thoracique d'un lapin est prélevée le plus près possible du coeur, juste après la mort et placée dans une solution de Krebs. Le morceau d'aorte est alors découpé suivant une spirale longitudinale de façon à obtenir un frAgment de 3-4 mm de large et 3-4 cm de longueur. Un fil est attaché à chaque extrémité de la préparation et celle-ci est fixée dans le bain à organe contenant la solution de Krebs oxygénée et maintenue à 370 C. L'aorte est soumise à une tension de 2 g; les contractions sont enregistrées au moyen d'un capteur relié à un polygraphe. Le produit est étudié sur l'aorte dans du liquide de Krebs riche en chlorure de potassium qui provoque une certaine contraction de l'aorte; on peut ainsi noter une décontraction avec les produits relaxants. On mesure la contraction due au chlorure de potassium puis le pourcentage éventuel de relaxation provoqué par les deux concentrations du produit à étudier sur deux aortes dif ferventes. RESULTATS On obtient les résultats suivants exprimés en pourcentage d'inhibition de la contraction par le chlorure de potas sium ONCENTRATION 300.l06M 30. 106M 300.10 6M 30. 10 6M PRODUIT Produit de l'exem plue 2 Produit des exem- 70 74 ples 3 et 4 Vincamine 62 L 0 REVENDICATIONS 1.- A titre de médicaments, les produits de formule sous forme de l'un des isomères syn ou anti, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques de ces produits, pharmaceutiquement acceptables, 2.- A titre de médicament, le 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16 (20) E-homo éburnane sous la forme anti et les sels d'addition de ce produit avec les acides minéraux ou organiques, pharmaceutiquement acceptables. 3.- A titre de médicament, le chlorhydrate du 14-oxo 15hydroxyimino 3a, 16a (20) E-homo éburnane isomère anti. 4.- Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle contient, a titre de principe actif, l'un des médicaments tels que définis aux revendications 1 à 3. 5.- Le 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20) E-homo éburnane, sous la forme syn et ses sels d'addition avec les acides mi minéraux ou organiques. 6.- Le 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20) E-homo éburnane, sous la fonne anti et ses sels d'addition avec les acides mineuraux ou organiques. 7.- Procédé de préparation du 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16a (20) E-homo éburnane, sous la forme anti, caractérisé en ce que le 14-oxo 15-hydroxyimino 3a, 16e (20)E-homo éburnane sous la forme svn est chauffé dans un milieu choisi parmi l'acide formique, l'éthérate de trifluorure de bore et le complexe trifluorure de bore-acide acétique. 8.- Procede selon la revendication 7, caractérisé en ce que l'on opère dans l'acide formique a une température de l'ordre de 1000C.