FR 2383967 A1 19781013 FR 7708171 A 19770318 La présente invention, à la réalisation de laquelle a partici pé Monsieur Jean Georges TEUTSCH, concerne de nouveaux dérivés 17&alpha;-acétyléniques de l'androst 4-ène, leur procédé de préparation et leur applicatipn comme médicament. L'invention a pour objet les composés de formule I dans laquelle R représente un radical alcoyle, aryle ou aralcoyle, renfermant de 1 à 12 atomes de carbone, et les traits pointilles dans le cycle A représentent une double liaison éventuelle en 1(2). L'invention s'étend donc aux composés de formule I, pour lesquels le cycle A ne porte pas d'insaturation éthylénique en 1(2), et à ceux pour lesquels le cycle A porte une insaturation éthylénique en 1(2). Lorsque R représente un radical alcoyle, il s'agit, de préféronce, du rad@@al méthyle, ethyle, propyle, isopropyle, butyle, isorutyle ou tert-butyle, n-pentyle, n-hexyle, 2-methyl-pentyle, 2,3diméthyl-butyle, n-heptyle, 2-methyl-hexyle, 2,2-diméthyl-pentyle, 3,3-diméthyl-pentyle, 3-éthyl-pentyle,n-octyle, 2,2-diméthyl hexyle, 3-méthyl 3-éthyl pentyle, nonyle, 2,4-diméthyl heptyle ou n-décyle. Lorsque R représente un radical aryle ou aralcoyle, il agit, c préférence, du radical phényle ou benzyle, éventuellement sub situé en ortho, méta, ou para par un ou plusieurs radicaux alcoyle renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, par un ou plusieurs radical alcoxy renfermant: de 1 à 4 atomes de carbone comme, par exemple, un radical méthoxy, par un ou plusieurs atomes d'halogène comme, par Exemple, un atome de chlore ou de fluor, par un radical trifluorométhyle ou Far une combinaison de ces divers substituants. Parmi les composés de l'invention, on peut citer tout parti culicrement, les composés de formule I dont les noms suivent - Le 3-oxo 11ss ,17p ss -dihydroxy pregn-4-ène 20-yne 21-carboxy- late de méthyle ; - Le 3-oxo 11ss, 17ss-dihydroxy pregn-4-ène 20-yne 21-carboxy ltLe de butyle - Le 3-oxo 11ss ,17ss -dihydroxy pregn-4-ène 20-yne ol-carboxy- late de benzyle, - Le 3-oxo 11je,17 p-dihydroxy pregna 1,4-diène 20-yne 21carboxylate de méthyle. Les composés de l'invention presentent d'intéressantes propriétés pharmacologiques : ils manifestent en-particulier une activité antiinflammatoire par voie locale remarquable, et sont pratiquement dénués d'activités antiinflammatoires par voie générale. Cette dissociation des proprietés antiinflammatoires par voie locale et par voie générale est très intéressante, car elle permet d'utiliser les composés de l'invention à des doses ot il n'y a pas à redouter les effets secondaires classiques du type cortisonique. Les produits de l'invention peuvent donc etre utilisés pour lutter contre les réactions inflammatoires locales comme par exemple les oedèmes, les dermatoses, les prurits, les diverses formes d'eczéma et les érythèmes solaires. L'invention a donc pour objet les composés de formule I à titre de médicament. L'invention s'étend aux compositions pharmaceutiques renfermant, comme principe actif, les médicaments définis ci-dessus. Ces compositions pharmaceutiques peuvent etre administrées par voie locale-en application topique sur la peau et les muqueuses. Ces compositions peuvent être solides ou liquides et se présenter sous les formes pharmaceutiques couramment utilisées en médecine humaine comme, les poudres, les pommades, les crèmes, les gels et les préparations en aérosols ; elles sont préparées selon les méthodes usuelles. Le principe actif peut y être incorporé à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, l'amidon, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants, ou émulsifiants et les conservateurs. La posologie utile varie notamment en fonction du sujet à traiter et de l'affection en cause. Elle peut être comprise,par exemple, entre 1 et 4 applications par jour d'une pommade renfermant 0,5 9s à 5 % de principe actif. L'invention a également pour objet un procédé de préparation des composés de formule I, caractérisé en ce que l'on soumet un composé de formule IIA: dans laquelle K représente une fonction cétone bloquée sous forme de cétal ou d'oxime, ou un composé de formule IIB dans laquelle Y représente un radical alcoyle renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, à I'action d'un agent d'éthynylation pour obtenir le composé de formule IIIA dans laquelle K conserve sa signification précédente, ou le composé de formule IIIB dans laquelle Y conserve sa signification précédente, soumet le composé de formule IIIA ou le composé de formule IIIB à l'action d'un composé de formule RlMgHal ou d'un composé de formule R2Li, R1 et R2 représentant un radical alcoyle renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, pour obtenir le composé de formule IV: dans laquelle K conserve sa signification précédente et W représente un groupement MgHaI ou un atome de lithium, ou le composé de formule IVB :: dans laquelle Y et W conservent leur signification précédente, puis soumet le composé de formule IVA ou le composé de formule IVB à l'action de l'anhydride carbonique, puis à celle d'un agent d'hydrolyse, pour obtenir l'acide 3-oxo 11r,1713 -dihydroxy pregn-4-ène 20-yne 21-carboxylique, que l'on soumet à l'action d'un agent d'estérification, pour obtenir le composé de formule IA dans laquelle R représente un radical alcoyle, aryle ou aralcoyle, renfermant de 1 à 12 atomes de carbone, puis, si désiré, soumet le composé de formule 1A à l'action d'un agent de déshydrogénation, pour obtenir le composé de formule IB correspondant Lorsque K représente un groupement cétal, il s'agit, de préf é- rence, d'un groupement alkyl cétal cyclique, ayant de 2 à 4 atomes de carbone, et notamment de l'éthylène cétal ou du propylène cétal, ou bien d'un dialkyl cétal, par exemple, du diméthyl ou du diéthyl cétal. Lorsque K représente un groupement cétone bloqué sous forme d'oxime, il s'agit, de préférence, d'un groupement NOH ou NOalc, alc représentant un radical alcoyle renfermant de 1 à 4 atomes de carbone. L'éthynylation des composés de formule 11A ou 11B est réalisée de préférence par action d'un acétylure alcalin, par l'acetyle- ne en présence d'un alcoolate tertiaire ou d'un amidure, ou par un halogénure d'éthynyl magnésium. Hal représente, de préférence, un atome de brome. R1 et R2 représentent, de préférence, un radical méthyle, éthyle, n-propyle ou isopropyle. L'estérification de l'acide 3-oxo 11 ,17B-dihydroxy pregn-4éne 20-yne 21-carboxylique est réalisée selon les procédés classiques, et de préférence au moyen du diazométhane, ou d'un alcool en milieu acide, par exemple en présence d'une résine forme acide, ou de l'acide paratoluène sulfonique. La déshydrogénation des composés de formule IA est réalisée, de préférence, par voie biochimique, et notamment par l'utilisation de la bactérie "Arthrobacter Simplex UC 1047".On peut également effectuer la déshydrogénation par voie chimique, et notamment au moyen du chloranile ou d'autres dérivés de la p-benzoquinone comme la 2,3-dichloro 5,6-dicyano parabenzoquinone. L'acide 3-oxo 11 ss ,17ss -dihydroxy pregn-4-ène 20-yne 21-carboxylique est un produit nouveau, et est en lui même, un des objets de la présente invention. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois la limiter. Préparation : 3-éthoxy 11ss-hydroxy androsta 3,5-diène 17-one. On chauffe à 500C, 43 g de îî -hydroxy androst 4-ène 3,17dione, préparé selon le brevet des Etats-Unis d'Amérique 3072684, 215 cm3 d'éthanol et 43 cm3 d'une solution 0,26M d'orthoformiate d'éthyle. On ajoute ensuite 5,2 cm3 d'une solution renfermant 0,48 g d'acide paratoluène sulfonique dans 50 cm3 d'éthanol. On maintient la solution obtenue 5 minutes à 500C et ajoute 8,6 cm de triéthylamine, puis la refroidit à 200C. On ajoute ensuite 258 cm3 d'eau. On refroidit le mélange réactionnel pendant une heure à @ ,+ 50C, et obtient ainsi 40,1 g du produit recherché que l'on utilise tel quel dans le stade suivant. Exemple 1 : 3-oxo 11ss,17ss-dihydroxy pregn-4-ène 20-yne 21carboxylate de méthyle. Stade A : 3-éthoxy 11ss,17ss-dihydroxy 17&alpha; éthynyl androsta 3,5-diene. On introduit 2,17 g de 3-éthoxy 11 P -hydroxy androsta 3,5-diène 17-one dans 21,7 cm3 d'éthylènediamine. On ajoute à la solution obtenue, 4,34 g d'acétylure de lithium complexé à l'éthylènediamine. On maintient la solution réactionnelle pendant 2 heures à 550,600C, puis la refroidit à 0 ,+ 50C. On ajouté alors 150 cm3 d'une solution aqueuse saturée de chlorure d'ammonium. On extrait à l'éther, lave à l'eau, et sèche le produit obtenu.On obtient 2,6 g d'une résine que l'on chromatographie sur silice en éluant avec un mélange éther sulfurique-essence B (Eb : 60 C-80 C) (1-1) On obtient ainsi 1,960 g du produit recherché fondant à 1630C (identique au produit décrit dans le brevet américain 2793217). Stade B : Acide 3-oxo 11ss,17ss-dihydroxy pregn 4-ène 20-yne 21-carboxylique. On introduit à 00,+50C,50 cm3 d'une solution de bromure d'éthyle magnésium 0,55M dans le tétrahydrofuran dans une solution contenant 1,96 g du produit préparé au stade A dans 10 cm3 de tétrahydrofuran. On maintient la solution à la température ambiante pendant 30 minutes, puis la porte au reflux pendant 30 minutes. On refroidit la solution, et fait barboter du gaz carbonique pendant 1 heure 30 minutes à la température ambiante, puis pendant 1 heure 30 minutes au reflux du tétrahydrofuran. On refroidit et ajoute 100 cm3 d'une solution aqueuse saturée de chlorure d'ammonium. On dilue avec 200 cm d'eau et lave avec de l'éther. On acidi- fie la phase aqueuse avec une solution d'acide chlorhydrique 2N, puis extrait au chloroforme. On obtient ainsi le produit recherché que l'on utilise tel quel dans le stade suivant. Stade C : 3-oxo lla ,1713-dihydroxy pregn 4-ène 20-yne 21carboxylate de méthyle. On introduit le produit préparé au stade B dans une solution renfermant 30 cm3 de chloroforme et 30 cm3 de méthanol. On ajoute une solution à 2 % de diazométhane dans le chlorure de méthy lène, jusqu'à la fin du dégagement gazeux. On concentre ensuite sous pression réduite, et obtient 2,4 g d'un produit que l'on purifie par chromatographie sur silice en éluant avec un mélange acétate d'éthyle essence B (Eb : 60 C-80 C) (1-1). On obtient ainsi 1,628 g du produit recherché fondant à 159 C. (&alpha;)D20 = + 12,5 # 2 (c = 0,5 %,éthanol). Exemple 2 : 3-oxo 11ss,17ss-dihydroxy pregn 4-ène 20-yne 21carboxylate de n-butyle. On porte au reflux pendant 5 heures 30 minutes, 3 g de l'acide 3-oxo 11ss,17ss-dihydroxy pregn 4-ène 20-yne 21-carboxylique, et 90 cm3 de butanol normal contenant 3 g de résine Rédex CF. On filtre la résine, la rince avec du chloroforme et concentre le filtrat à sec sous vide. On obtient 3,4 g d'une résine amorphe que l'on chromatographie sur silice (éluant : acétate d'éthyle-essence B (Eb : 600C-800C) 7-3. On isole ainsi 1,6 g de résine amorphe jaune de rf = 0,35 que l'on purifie à nouveau par chromatographie. On obtient ainsi le produit recherché. Spectre IR (CHCl3) C = O 1708-1665cm-1 C = C 1620cm 1 OH 3600cm-1 C#C 2230cm-1 @ + 24@5 # 1 (@ @ @ @ % @@@@D@@ + 24,5 t 1 (c = 0,9 %, chloroforme). Exemple 3 : 3-oxo 11ss,17ss -dihydroxy pregn 4-ène 20-yne 21carboxylate de benzyle. On dissout 62 mg d'acide 3-oxo 11ss ss 11/,17 -dihydroxy pregn 4-ène 20-yne 21-carboxylique dans 2 cm3 de benzène. On ajoute alors 0,1 cm3 d'alcool benzylique, et 32 mg d'acide paratoluène sulfonique solvaté avec une molécule d'eau. On maintient la solution réactionnelle à la température ambiante pendant une nuit. On chauffe ensuite au reflux du solvant. Au bout de 3 heures, on concentre à sec sous pression réduite, et obtient 200 mg d'un produit que l'on chromatographie sur silice (éluant : benzène-acétate d'éthyle 8-2). On obtient ainsi 30 mg du produit recherché rf = 0,35. Spectre IR chloroforme. OH 3601cm-1 -C#C- 2230cm-1 C = O 3-oxo 1664cm 1 ester 1708cm 1 C = C 1619cm 1 Aromatique : 1497 cm 1 20 o (@)D @ @ @@ - 2 (c-0,4@ %, chloro@orme). Exemple 4 : 11ss,17ss-dihydroxy 3-oxo pregna 1,4-diène 20-yne 21-carboxylate de méthyle. On dissout 4 g de 3-oxo 11 ,174 -dihydroxy pregn 4-ène 20-yne 21-carboxylate de méthyle dans 240 cm3 de méthanol. On verse cette solution dans 2 litres d'une solution renfermant 3,95 litres d'eau, 27,6 g de phosphate acide de potassium et 11,2 cm3 de soude. On ajoute alors 20 g d'hyflosupercel et 20 g de poudre "Arthrobacter Simplex" UC 1047. On agite à 350 - 20C avec barbotage d'air pendant 40 heures. On filtre et extrait au chlorure de méthylène. On lave les phases chlorométhyléniques, sèche et concentre à sec. On obtient 4,39 g d'une résine que lton traite à nouveau par l'enzyme pendant 24 heures et obtient 4,45 g d'une résine que l'on chromatographie sur silice (éluant : chloroforme, méthanol (95-5)l. On sépare ainsi 2,091 g de produit que l'on purifie par cristallisation dans l'éther isopropylique. On obtient ainsi 1,567 g du produit recherché fondant à 2230C. Exemple 5 : Etude pharmacologique du 3-oxo 11ss,17ss-dihydroxy pregn 4-ène 20-yne 21-carboxylate de méthyle (produit A). Le produit a été étudié comparativement à l'hydrocortisone. Le produit A et l'hydrocortisone ont été utilisés dans un dispersif aqueux contenant de 0,25 % de carboxyméthyl cellulose et 0,20 % de polysorbate 80. 1/ - Etude de l'activité antiinflammatoire par voie orale. Elle a été recherchée selon le test classique du granulome. Dans la technique utilisée, modification de la méthode de R. MEIER et Coll. (Experientia, 1950, 6, 469X, des ratsWistar conventionnels femelles, pesant de 100 à 110 g, reçoivent une implantation de deux pellets de coton de 10 mg chacun sous la peau du thorax ; le traitement oral, qui commence aussitôt après cette implantation, dure deux jours, à raison de deux administrations par jour ; seize heures apres la dernière ingestion, soit le troisième jour, les animaux sont sacrifiés. Les pellets, entourés du tissu de granulome formé, sont pesés à l'état frais, puis après séjour de dix-huit heures à 600C : le poids du granulome est obtenu par déduction du poids initial du coton. La pesée des thymus, prélevés en même temps que les granulomes, permet d'apprécier l'activité thymolytique des produits. L'étude des produits a été effectuée comparativement à celle de l'hydrocortisone. Les résultats exprimés en DA50 (c'est-à-dire en dose provoquant une inhibition du granulome de 50 % et en dose provoquant une involution du thymus de 50 %) sont les suivants Granulome Thymus Produit A 50 mg/kg inactif 50 mg/kg Hydrocortisone | 15 mg/kg 10 mg/kg Conclusion : Le produit A est beaucoup mo-ins actif que l'hydro- cortisone sur l'inhibition du granulome et l'involution du thymus. 2/ - Etude de l'activité dermique du produit A comparée à celle de l'hydrocortisone. L'activité dermique du produit a été étudiée au moyen du test de l'oedème au croton. Test de l'oedème au croton La technique employée est inspirée de celle de TONELLI et Al. (endocrinology 1965 77, p.625) : un oedème est provoqué chez la souris par application huile de croton sur une oreille, - chez les souris du premier lot, on applique la solution d'huile de croton sur l'oreille droite. - chez les souris du deuxième lot, on applique sur l'oreille droite la solution d'huile de croton additionnée de produit A ou d'hydrocortisone. - on n'applique aucun produit sur les oreilles gauches des souris. Au bout de six heures, on coupe les oreilles et on les pèse. La différence de poids entre l'oreille droite et l'oreille gauche donne le degré d'inflammation. Les résultats sont exprimés en CA50 ou concentration active qui diminue de moitié l'oedème provoqué par l'huile de croton chez les témoins. CA50 en mg/cm3 Produit A 1 Hydrocortisone 2,5 Conclusion : L'activité dermique du produit A est très supérieure à celle de l'hydrocortisone. Exemple 6 : Exemple de compositions pharmaceutiques. On a préparé une pommade pour application topique, répondant à la formule suivante Produit A........................ 3 g Excipient q.s.p. ................ 100 g détail de l'excipient : lanoline et vaseline. - R E V E N D I C A T I O N S 1. - Les composés de formule I : dans laquelle R représente un radical alcoyle, aryle ou alcoyle, renfermant de 1 à 12 atomes de carbone, et les traits pointillés dans le cycle A représentent une double liaison éventuelle en 1(2). 2. - Les composés de formule I, tels que définis à la revendication 1, pour lesquels le cycle A ne porte pas d'insaturation éthylénique en 1(2). 3. - Les composés de formule I, tels que définis à la revendication 1, pour lesquels le cycle A porte une insaturation éthylénique en 1(2). 4. - Les composés de formule I, tels que définis à la revendication 1, dont les noms suivent : - Le 3-oxo 11ss,17ss-dihydroxy pregn 4-êne 20-yne 21-carboxylate de méthyle, - Le 3-oxo 11ss,17ss-dihydroxy pregn 4-ène 20-yne 21-carboxylate de butyle, - Le 3-oxo 11 ,1713 -dihydroxy pregn 4-ène 20-yne 21-carboxylate de benzoyle, - Le 3-oxo 11ss ,1713-dihydroxy pregna 1,4-diène 20-yne 21-carboxylate de méthyle. 5. - A titre de médicament, les composés définis à l'une quelconque des revendications 1 à 3. 6. - A titre de médicament, les composés définis à la revendication 4. 7. - Les compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif, au moins un médicament défini à la revendication 5. 8. - Les compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif, au moins un médicament défini à la revendication 6. 9. - Procédé de préparation des composés définis à l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que l'on soumet un composé de formule IIA dans laquelle K représente une fonction cétone bloquée sous forme de cétal ou d'oxime, ou un compose de formule IIB : dans laquelle Y représente un radical alcoyle renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, à l'action d'un agent d'éthynylation pour obtenir le composé de formule IIIA : dans laquelle K conserve sa signification précédente, ou le composé de formule IIIB :: dans laquelle Y conserve sa signification précédente, soumet le composé de formule IIIA ou le composé de formule IIIB à l'action d'un composé de formule R1MgHal ou d'un composé de formule R2Li, R1 et R2 représentant un radical alcoyle renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, pour obtenir le composé de formule IVA dans laquelle K conserve sa signification précédente et W représente un groupement MgHal ou un atome de lithium, ou le composé de formule IVB :: dans laquelle Y et W conservent leur signification précédente, puis soumet le composé de formule IVA ou le composé de formule IVB à l'action de l'anhydride carbonique, puis à celle d'un agent d'hydrolyse, pour obtenir l'acide 3-oxo 11ss ,171ss -dihydroxy pregn 4-ène 20-yne 21-carboxylique, que l'on soumet à l'action d'un agent d'estérification, pour obtenir le composé de formule 1A dans laquelle R représente un radical alcoyle, aryle ou aralcoyle, renfermant de 1 à 12 atomes de carbone, puis, si désiré, soumet le composé de formule IA à l'action d'un agent de déshydrogénation pour obtenir le composé de formule 1B correspondant 10. - A titre de produit intermédiaire nécessaire à la préparation des composés de formule I, l'acide 3-oxo 11ss,17ss-dihydroxy pregn 4-ène 20-yne 21-carboxylique.