FR 2398076 A1 19790216 FR 7722075 A 19770719 La présente invention à la réalisation de laquelle ont participé Messieurs Alain JOUQUEY et Jean-Pierre RAYNAUD concerne des stéroides marqués au tritium. Plus particulièrement, elle a pour objet les stéroides de formule générale dans laquelle3H représente le tritium et R et R1, semblables ou différents, représentent de l'hydrogène, un radical alcoyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone ou un radical acyle ayant de 7 à 10 atomes de carbone. Lorsque R et/ou R1 représentent un radical alcoyle, ils peuvent être par exemple un radical méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle ou sec-butyle. Lorsque R et/ou R1 représentent un radical acyle ayant de I à 10 atomes de carbone, ils peuvent représenter un reste acide aromatique ou non. Il peuvent être par exemple le reste d'un acide tel que l'acide formique, acétique, propionique, butyrique, valérique, maléïque, fumarique, succinique, tartrique, benzoïque, citrique, oxalique, glyoxylique, caproïque, caprilique ou caprique. Parmi les produits de formule générale I on citera notamment le (11, 17&alpha;)-11 -méthoxy-3H3-19-norpregna-l,3,5-(10)-trièn-20 yne-3,17-diol. Ces produits permettent ltétude, le dosage et la localisation du récepteur spécifique estrogène présent dans les cellules des tissus ou organes cibles de l'action des estrogènes et dans les tumeurs maligne et bénigne chez 1 'humain. L'invention a également pour objet un procédé de préparation des produits répondant à la formule générale I ci-dessus. Ce procédé est caractérisé en ce que l'on fait agir le méthanol tritié (C3H3OH) sur la 11ss-hydroxy-estra-4,9-diène-3,17-dione, soumet la (11ss)-11-méthoxy-3H-estra-4,9-dièn-3,17-dione résultant à l'action d'un agent d'aromatisation, fait agir sur la (11ss)-3-hydroxy-11-méthoxy-3H3-estra-1,3,5 (10)-trièn-17-one résultant un agent d'éthynylation et obtient le (11ss-17&alpha;)-11-métho- xy-3H3-19-norpregna-1,3,5 (10)-trièn-20-yne-3,17-diol, dont on peut, le cas échéant, éthérifier ou estérifier la ou les fonctions hydroxyles libres. Dans les conditions préférentielles de mise en oeuvre le procédé de l'invention est caractérisé en ce que l'on fait agir le méthanol tritié en présence de Acide perchlorique, l'agent d'aromatisation est l'hydroxyde de palladium et on opère dans le méthanol, l'agent d'éthynylation est l'acétylène et on opère en présence de t-amylate de sodium dans le toluène. - On éthérifie la ou les fonctions hydroxyles libres au moyen d'un agent d'éthérification, tel qu'un halogénure d'alcoyle ou d'aryle, ou un dialcoyle sulfate - et on estérifie la ou les fonctions hydroxyles libres au moyen d'un dérivé fonctionnel dtacide, tel que le chlorure d'acide ou l'anhydride. L'invention a encore pour objet à titre du produit industriel nouveau et notamment à titre d'intermédiaire nécessaire à l'exé- cution du procédé de l'invention la (11ss) 3-hydroxy-11-méthoxy- 3H3-estra-1,3,5 (10)-trièn-17-one. L'invention a également pour objet l'application des produits de formule générale I et notamment du (11ss, 17&alpha;)-11-méthoxy-3H3- 19-norpregna-1,3,5 (10)-trièn-20-yne-3,17-diol en tant que moyen de dosage et de localisation du réceptéur spécifique estrogène présent dans les cellules des tissus ou organes cibles de l'action des estrogènes et, de plus, dans les tumeurs malignes ou bénignes chez. l'humain. L'invention a également pour objet le moyen de dosage et dé localisation du récepteur spécifique estrogène présent dans les cellules des tissus ou organes cibles de l'action des estrogènes comportant un produit répondant à la formule formule générale I, et notamment le (11ss, 17&alpha;)-11-méthoxy3H3-19-norpregna-1,3,5 (10) trièn-20-yne-3, 17-diol. Le (11ss, 17&alpha;)-11-méthoxy-3H3-19-norpregna-1,3,5 (10)-trièn- 20-yne-3,17-diol, produit de formule générale I dans laquelle R et Rî représentent de l'hydrogène, présente notamment une activité spécifique de l'ordre de 75 Ci/m.mol. Ce produit,comme déjà indiqué, permet l'étude et le dosage du récepteur spécifique estrogène présent dans les cellules des tissus des organes cibles de l'action des estrogènes, comme l'utérus, le vagin, l'hypophyse, l'hypothalamus et les tumeurs, comme par exemple du sein, de la prostate, aussi bien chez l'animal que chez l'homme.En effet comme ce produit ne se fixe pas sur les protéines plasmatiques liant les hormones tels que la testostérone et llestradiol chez la femme c'est un marqueur de choix du récepteur tissulaire des estrogènes avec lequel il forme un complexe de forte affinité et de grande stabilité, d'autant qu'il n'a aucune interaction avec les récepteurs tissulaires des autres classes d'hormones stéro5:diennes (glucocorticoldes, minéralo corticostéroldes androgènes ou progestogenes). Ces produits peuvent être par exemple utilisés pour le dosage ci-dessus indiqué, selon la méthode décrite dans les publications suivantes : - J.P. RAYNAUD, T. OJASOO, J.C. DELARUE, H. MAGDELENAT, P. MARTIN and D. PHILIBERT, dans "Progesterone receptors in normal and neoplastic tissus (w.t. Mc GUIRE, J.P. RAYNAUD et E.E. BAULIEU, eds), Raven Press, New-York, (sous presse) - J.P. RAYNAUD, M.M. BOUTON, D. PHILIBERT and B. VANNIER, dans : "Hypothalamus and Endocrine Functions (F. LABRIE, J. MEITES and G. PELLETIER, eds), Plenum Press, N.Y., pp 171-189, 1976. L'exemple suivant illustre à titre non limitatif la mise en oeuvre de l'invention. Exemple Le (11ss, 17&alpha;)-11-méthoxy-3H3-19-norpregna-1,3,5(10)trièn-20-yne-3,17-diol Stade A : La (11ss)-méthoxy-3H3-estra-4 9-dièn-3,17-dione On refroidit par l'azote liquide la solution de 14,3 mg de 11ss- hydroxy-estra-4,9-dièn-3,17-dione dans 1 ml de chlorure de méthylène sans méthanol à 0,2 % d'acide perchlorique, introduit sous vide 1,4 mg de méthanol tritié (C3H30H) à 75 Cilmmol. Puis on supprime le vide et remplit l'enceinte d'azote, laisse le mélange réactionnel revenir à température ambiante, le maintient sous agitation pendant trois heures, le verse dans 10 ml d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium glacée, décante, sépare la phase organique, extrait la phase aqueuse au chlorure de méthylène, lave les phases organiques réunies à l'eau jusqu'à la neutralité des eaux de lavage, sèche sur le sulfate de magnésium, filtre et concentre à sec et obtient le produit cherché brut que l'on purifie par chromatographie sous pression sur gel de silice (solvants: benzène: 8 - acétate d'éthyle:2). On obtient 5,1 mg de produit cherché d'une activité spécifique de 75 Ci/m.mol, Rf. = 0,3. Stade B La (11ss)-3-hydroxy-11-méthox-3H3-estra-1,3,5 (10)- trien-17-one On dissout 5 mg du produit obtenu au stade précédent dans 2 ml de méthanol, puis ajoute sous azote 15 mg d'hydroxyde de palladium sur oxyde de magnesium, pDrte le mélange réactionnel au reflux, sous azote et sous agitation pendant quatre-vingt-dix minutes environ, le laisse refroidir, filtre, évapore le solvant sous vide, et chromatographie le résidu cristallin sur le gel de silice (solvants : benzène: 7-acétate d'éthyle 3) et obtient 4 mg de produit cherché d'une activité spécifique de 75 Ci/m.mol, Rf. = 0,48. Stade C : Le (11ss, 17&alpha;)-11-méthoxy-3H3-19-norpregna-1,3,5(10)- triène-20-yne-3,17-diol On introduit par barbotage, pendant deux heures environ, l'acétylène dans 10 mi d'une solution de ter-amylate de sodium à 2,4 mg de sodium pour 100 ml, puis ajoute une solution de 4 t de produit obtenu au stade précédent, dissout dans 1,5 ml de tétrahydrofurane anhydre, agite le mélange réactionnel pendant cinq heures environ à température ambiante sous barbotage d'acétylène. On glace ensuite le mélange réactionnel, ajoute goutte à goutte 2 mi dtacide acétique aqueux, agite pendant cinq minutes environ, évapore le solvant sous vide, ajoute 20 ml d'eau, extrait au benzène, lave la phase organique à l'eau jusqu'à la neutralité des eaux de lavage, sèche sur le sulfate de sodium, filtre et évapore à sec sous vide, purifie le résidu par chromatographie sous pression sur le gel de silice (solvants : benzène : 7 acétate d'éthyle : 3), et obtient 3 mg de produit cherché dune activité spécifique de 75 Ci/m.mol, Rf. = 0,3. REVENDICATIONS 1. Stéroïdes de formule générale I dans laquelle 3H représente le tritium, R et R1, semblables ou différents représentent de l'hydrogène, un radical alcoyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone ou un radical acyle ayant de 1 à 10 atomes de carbone. 2. Le (11ss, 17&alpha;)-(11-méthoxy-3H3-19-norpregna-1,3,5 (10)-trièn-20- yne-3,17-diol. 3. Procédé de préparation des produits tels que définis aux revendications 1 et 2, caractérisé en ce que l'on fait agir le méthanol tritié (C3H3OH) sur la 11ss-hydroxy-estra-4,9-dièn-3,17-dione, soumet la (11ss)-11-méthoxy-3H3-estra-4,9-dièn-3,17-dione résultant 3 à l'action d'un agent d'aromatisation, fait agir sur la(11ss)- 3hydroxy-11-méthoxy-3H3-estra-1,3,5(10)-trièn-17-one résultant un agent d'éthynylation et obtient le (11ss, 17&alpha;)-11-méthoxy-3H3-19- norpregna-1,3,5(10)-trièn-20-yne-3,17-diol, dont on peut, le cas échéant, éthérifier ou estérifier la ou les fonctions hydroxyles libres. 4. Procédé selon la revendication 3,caractérisé en ce que l'on fait agir le méthanol tritié en présence de l'acide perchlorique. 5. Procédé selon les revendications 3 et 4, caractérisé en ce que l'agent d'aromatisation est l'hydroxyde de palladium et on opère dans le méthanol. 6. Procédé selon les revendications 3, 4 et 5, caractérisé en ce que l'agent d'éthynylation est l'acétylène et on opère en présence de t-amylate de sodium dans le toluène. 7. A titre de produit intermédiaire nécessaire à 11 exécution du procédé selon les revendications 3 à 6 la (11ss)-3-hydroxy-11- méthoxy-3H3-estraw ,3,5(1 O)-trièn-1 7-one. 8. Application des produits répondant à la formule générale I telle que définie à la revendication 1 et notamment du (11ss, 17&alpha;)- 11-méthoxy-3H3-19-norpregna-1,3,5 (10)-trièn-20-yne-3,17-diol en tant que moyen de dosage et de localisation du récepteur spécifique estrogène présent dans les cellules des tissus ou organes cibles de l'action des estrogènes et, de plus, dans les tumeurs malignes ou bénignes chez l'humain. 9. Noyen de dosage et de localisation du récepteur spécifique estrogène présent dans les cellules des tissus ou organes cibles de l'action des estrogènes comportant un produit répondant à la formule générale telle que définie à la revendication 1 et notamment le (11ss, 17&alpha;)-11-méthoxy-3H3-19-norpregna-1,3,5(10)- trièn-20-yne-3,17-diol.