FR 2340302 A1 19770902 FR 7604091 A 19760205 L'objet de l'invention concerne un procédé pour obtenir des dérivés acylés des amines primaires et secondaires ainsi que des alcools. I1 concerne la préparation des dérivés organiques et plus particulièrement biochimiques pour faciliter les analyses dans les industries chimiques, pharmaceutiques partant d'agents normalisés et stabilisés. Actuellement, le procèdé le plus courant pour acyler une molécule -consiste a' traiter cette molécule en solution en milieu organique par l'anhydride cristallisé ou quelquefois liquide en présence d'une base tertiaire. Ce procèdé ne convient pas à la plupart des molécules biologiques qui sont le plus souvent insolubles dans les solvants organiques et seulement solubles dans l'eau. Les amines sont généralement assez réactives pour que l'on puisse les acyler dans liteau à ph neutre ou alcalin,l'hydrolyse de l'anhydride étant, sensiblement plus lente. , I1 en-est de même pour certains alcools, tels ceux dont la réactivité'est augmente par la présence dfun groupement élec- tron attracteur proche. Reste enfin la difficulté qui réside dans le fait que les anhydrides sont peu ou pas solubles dans Liteau et de ce fait ne peuvent pas se prêter facilement- fià';-ce type de réaction. L'objet de l'invention supprime ces inconvénients découlant des solubilités incompatibles des anhydrides et des molécules à acyler en opèrant sur l'anhydride une transformation physico-chimique qui accroit considérablement sa réactivité dans toute espèce de solvant. A titre d'exemple d'exécution d'un mode d'application de l'invention il est cité la conversion des nucléotides 3',5'monophosphate cycliques en dérivés 2'0 succinylés,réaction utilisée lors de leur dosage radioimmunologique. Le procédé s'applique aux anhydrides solides à température ordinaire. I1 consiste à dissoudre l'anhydride dans un solvant à point de fusion relativement élèvé tel que le dioxanne, puis à congeler la solution obtenue et à lyophiliser. Ce procèdé n'est applicable que dans le cas ou le solvant est suffisamment volatil et la lyophilisation doit être soigneusement contrôlée pour éviter la sublimation de l'anhydride. L'anhydride prend alors la forme d'un réseau tridimentionnel à larges mailles d'un réactivité trêsaipérieure à celle qu' il a sous forme cristallisée. Elle permet alors l'acylation dans l'eau en présence d'une base telle que K OH ou Na OR avec un excellent rendement. C'est ainsi que pour obtenir l'adénosine 3',5' monophosphate cyclique 2'-0 succinylée à partir de IOmg d'adénosine 3', 5' monophosphate cyclique il faut I00 mg d'anhydride succinique en milieu organique en présence d'unRamine tertiaire. La réaction dure plus de dix haures et le rendement est de 50%. 45 mg d'anhydride succinique lyophilisé dans l'eau. La réaction est instantanée et le rendement de I00%, une base organique coûteuse n'est plus nécessaire ; la soude ou la potasse suffisent Le procédé de lyophilisation permet la préparation de petites fractions aliquotes d'anhydrides de poids précis. Il suffit de distribuer des volumes précis de la solution d'anhydride dans le dioxanne, de congeler ltensemble des fractions et de les lyophiliser. Les résultats sont beaucoup plus précis dans la gamme du mg, que les distributeurs de poudre actuellement employés dans l'industrie pharmaceutique par exemple. La distribution des fractions peut s'effectuer dans un portoir à alvéoles qui après lyophilisation est recouvert par un film plastique. On peut également faire une distribution en tubes plastiques. I1 est également possible de distribuer dans les mêmes tubes outre l'anhydride, la base nécessaire au dosage : K OH ou Na OR. I1 faut alors procèder en deux temps IO/ Distribuer la fraction alcaline dans l'eau ou l'alcool et la laisser sécher 20/ Distribuer l'anhydride dans son solvant et lyophiliser. Outre la préparation des dérivés acylés à échelle industrielle et semi-industrielle, les anhydrides lyophilisés peuvent servir en chimie analytiquepOaR des conversions de micro qnantités, inférieures souvent a' IO-I2 mole de nucléides cycliques par exemple en vue de leur dosage radioimmunologique, il est alors nécessaire d'avoir a) une forme très réactive de l'anhydride pour que la réaction soit coiXète, sans avoir à la contrôler ce qui serait pratiquement impossible. b) une distribution en fractions aliquotes stockables à la température ambiante qui permettent l'acylation extemporannée de séries dtéchantillons en solution agueuse. Un meme opéra teur peut acyler quatre vingt échantillons en moins de dix minutes. REVENDICATIONS IO/ Procèdé pour l'obtention des dérivés acylés des amines primaires et secondaires ainsi que des alocools destiné à la préparation des dérivés organiques et biochimiques pour faciliter entre autre les analyses dans les industries chimiques, phar maceutiques partant d'agents normalisés stabilisés se caractéri sânt par la préparation d'anhydrides diacides carboxyliques obtenus par lyophilisation de leur solution dans le solvant organique approprié et plus particulièrement les anhydrides cycliques comme l'anhydride succinique et les solvants lyophilisables tels que dioxanne et tétrahydrofurane. 20/ Procèdé suivant la revendication I se caractérisant par le fait que ces produits les dits anhydrides sont conditionnés en tubes ou portoirs en micro fractions destinées à des opérations répétitives. 30/ Procèdé suivant la revendication I se caractérisant par les combinaisons anhydride lyophilisé, base organique ou minérale, obtenus par lyophilisations successives ou lyophilisation d'une solution mixte préparée extemporanement ou séchage de la solution basique (soude ou potasse) suivie de la lyophilisation/