FR 2325327 A1 19770422 FR 7628814 A 19760924 La présente invention concerne une nouvelle composition attirant les insectes. A ce jour, on a utilise les substances attirant les insectes associées ou non a des agents de lutte contre les insectes pour dénombrer et contrler les populations des insectes nuisibles, perturber l'accouplement, tuer avec des appâts insecticides, attirer les ennemis naturels des insectes, etc. On divise ces compositions de façon g8nérale en compositions de type alimentaire et compositions non alimentaires (telles que les compositions provoquant une attirance sexuelle). On sait que le premier type de compositions est très efficace vis- -vis des insectes parfaits, quels que soient leur sexe, le stade d'éclosion et l'age, bien que leur activité soit extrêmement faible par rapport aux compositions provoquant une attirance sexuelle.Par exemple, on utilise, ou on a étudié, pour attirer les mouches des fruits qui sont des insectes nuisibles des arbres fruitiers, des hydrolysats acides liquides de soja, de caséine, de lactalbumine, de graines de cotonnier, de levure, etc., mais ils n'ont qu'une faible activité vis-a-vis des insectes. Apres de nombreux travaux de recherche pour supprimer les insuffisances des attractifs alimentaires utilisés a ce jour, la demanderesse a découvert que des hydrolysats acides de cellules de bactéries, des hydrolysats acides de cellules d'actinomycètes et des hydrolysats acides de bouillons de culture de bactéries et d'actinomycètes constituent des attractifs plus efficaces des insectes cibles que les attractifs alimentaires connus et que des mélanges de ces hydrolysats acides et d'aliments connus pour ces insectes utilisés à ce jour renforcent la tendance å s'alimenter et la croissance de ces insectes ou de leurs formes larvaires. Les bactéries qu'on utilise dans l'invention sont par exemple des bactéries en bâtonnets ne formant pas de spores a gram positif, telles que Corynebacterium glutamicum, Brevibacterium flavum et Brevibacterium linens, des bactéries en bâtonnets formant des spores a gram positif, telles que Bacillus subtilis, Bacillus megaterium, des coccis a gram positif, tels que Micrococcus luteus et Staphylococcus aureus, des entérobactéries a gram négatif, telles que Escherichia coli, des bactéries non intestinales, telles que Pseudomonas aeruginosa, des bactéries coryneformes et nocardiaformes a gram positif, telles que Nocardia erythropolis et Nocardia asteroides, et des actinomycètes (Steptomycetes), tels que, Far exemple, Streptomyces griseus, Streptomyces aureus et Microtetraspora niveoalba. Les hydrolysats acides qu'on utilise dans l'invention scat constitués d'hydrolysats acides de cellules de bactéries, d'hydrolysats acides de cellules d'actinomycètes et d'hydrolysats acides de bouillons de culture de bactéries ou d'actinomycètes. On peut utiliser également ces cellules à l'état humide. Les bouillons de culture précités sont, par des solutions qu'on obtient en cultivant des bactéries ou Les antinomycètes selon des procédés habituels et les matières qu'on obtient en éliminant les produits essentiels de la solution (par exemple, les matières obtenues en éliminant la majeure partie ou une partie des aminoacides des bouillons de fermentation des aminoacides). En pratique, on utilise les bouillons de culture de ces micro-organismes. On peut préparer les hydrolysats acides utilisés dans l'invention selon des procédés habituels. Par exemple, on traite les ssatieees de départ avec un acide, tel que l'acide sulfurique ou l1acide chlorhydrique. en chauffant s'il est nécessaire. On utilise, pour préparer les compositions attirant les insectes de l'invention, à partir des hydrolysats ainsi obtenue, soit les hydrolysats eux-memes, soit les composants actifs sépares des hydrolysats, soit le produit obtenu en éliminant les impuretés, telles que l'humus et les substances minérales des hydrolysats. De façon plus pratique, ci triite les hydrolysats acides avec ou sans concentration, avec un alcali tel que l'hydroxyde de sodium, l'hydroxyde de potassium, la chaux sodée, 1' etc., et, s'il est nécessaire, on neutralise ensuite pour obtenir1 par exemple, un pH de 4 a 9 pour préparer les compositions attirant les teectes de l'invention. Un exemple de préparation d'hydrolysat acide de l'invention est le suivant On mélange 1 kg de cellules sèches de Brevibacterium ATCC 14 067 avec 1,2 kg d'acide chlorhydrique (concentré a 22 %),et on agite le mélange en chauffant a 1150C pendant 10 h. On refroidit le mélange obtenu et on élimine l'humus par filtration. On concentre le filtrat avec une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium (concentré a 27 %) 9 pH 5;0. On obtient ainsi environ 2,8 kg d'hydrolysat acide. Le degré d'hydrolyse des hydrolysats acides de l'invention n'est pas limité. De préférence, le pourcentage d'hydrolyse des protéines est supérieur a 20 % et mieux a 50 %. On peut utiliser l'hydrolysat acide obtenu ci-dessus tel quel comme composition attirant les insectes de l'invention. On peut également l'utiliser comme composition attirant les insectes sous forme d'une solution, émulsion, poudre mouillable, poudre, granulés ou aérosol en le dissolvant cu le dispersant dans un support liquide inerte (par exemple un solvant) ou en le mélangeant ou l'adsorbant avec un support solide approprié (tel qu'une poudre diluante ou un support) en s'aidant d'émulsifiants, d'agents dispersants, d'agents de mise en suspension, d'agents d'épandage, d'agents de pénétration, d'agents mouillants ou d'agents de stabilisation slil est nécessaire. Des solvants appropriés a la préparation des compositions attirant les insectes de l'invention sont l'eau, les alcools (tels que l'alcool méthylique, l'alcool éthylique et lléthylèneglycol), des cétones (telles que l'acétone et la méthyléthylcétone), des éthers (tels que le dioxanne, le tétrahydrofuranne, le méthylcellosolve), des hydrocarbures aliphatiques (tels que l'essence, le kérosène, le pétrole lampant) des hydrocarbures aromatiques (tels que le benzène, le toluène, le xylène et le solvant naphta), des bases organiques (telles que la pyridine), des hydrocarbures halogénés (tels que le chloroforme, le tétrachlorure de carbone), des amides (tels que le diméthylformamide), des esters (tels que l'acétate d'éthyIe, l'acétate de butyle, des glycérides d'acides gras), des nitriles (tels que I'acéto- nitrile) et des composés soufrés (tels que le diméthylsulfoxyde). On utilise généralement ces composants séparément ou en mélanges de deux ou plus. Comme poudres diluantes ou supports, on utilise des poudres d'origine végétale (telles que la poudre de soja, la poudre de tabac, la farine de blé, la poudre de bois, etc.), des poudres minérales (telles que des argiles comme la kaolinite, la bentonite et une terre acide, des talcs tels que la phyllite, des silices telles que la terre de diatomées et le mica), llaluaine, le soufre en poudre et le charbon actif. On utilise également ces poudres séparément ou en mélanges de deux ou plus. Des agents émulsifiants, des agents d'épandage et des agents de pénétration utiles sont des savons, des esters sulfuriques d'alcools supérieurs, des alkylsulfonates, des alkylarylsulfonates, des sels d'ammonium quaternaire, des esters d'acides gras d'axyalkylamines, des oxydes de poly alkylene et les sorbitols. S'il est nécessaire, on peut ajouter de la caséine, de la gélatine, de l'asidon, de l'acide alginique, de la gélose, de la carboxyméthyl- cellulose de l'acool polyvinylique, de l'essence de térébenthine extraite du bois, du furanne dérivant du riz, du saccharose, du glucose, des mélasses, des aminoacides, etc. On peut également utiliser les compositions attirant les insectes de l'invention avec des insecticides (hydrocarbures chlorés, composés organiques phosphorés, carbamates, insecticides naturels), des produits synergistes, d'autres types d'attractifs, des parfums, des germicides, etc. Les compositions attirant les insectes précédemment décrites en détail provoquent une forte attraction des insectes et on peut les utiliser avec ou sans insecticides pour évaluer, suivre et empêcher les dégâts que provoquent les insectes a l'homme, aux animaux et aux végétaux. Les hydrolysats acides de l'invention sont sans danger pour l'homme et les animaux supérieurs. Ils sont efficaces, par exemple,vis-a-vis des insectes tels que les Culicidae, les Muscidae, les Cecidomyiidae, les Trypetidae, les Drosophilidae, les Calliphoridae, les Sarcophagidae, les Agromyzidae, les Tabanidae, etc.. de l'ordre des diptères, les Blattidae, les Blattellidse, etc. de l'ordre des orthoptères, les Myrmeleonidae de l'ordre des neuroptères, les Noctuidae (par exemple Adristyrannus amurensis Staudinger, Oraesia excavata Butler, Oraesia.emarginata Fabricius, Heliothis assulta Guenee, Prodenia litura Fabricius, etc.) de tordre des lipidopteres, les Yponomeutidae (par exemple Plutilla maculipennis Curtis), les Carposinidae (par exemple Carposina niponensia Walsingham), les Lymantriidae, etc. Les hydrolysats acides de cellules de bactéries ou d'actinomycètes qu'on utilise dans l'invention sont supérieurs aux hydrolysats acides des autres cellules telles que, par exemple, les cellules des Eumycètes (champignon vrai) tels que les levures. I1 existe une raison expliquant que les composants des cellules des bactéries ou des actinomycètes qu'on utilise dans les compositions de l'invention diffèrent remarquablement des composants des autres cellules. Par exemple, dans le cas d'une levure, la paroi cellulaire est constituée de polysaccharides, tandis que la paroi cellulaire des bactéries et des actinomycètes est constituée de peptide-glucanes. Les bactéries et les actinomycètes produisent divers types d'aminoacides, de peptides, etc. extracellulaires. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention seront mieux compris à la lecture de la description qui va suivre de plusieurs exemples de réalisation et en se référant -aux dessins annexés dans lesquels - la figure 1 représente un olfactomètre pieges où (a) est un moteur, (b) est un couvercle en toile métalliquea (c) est une boite en matière plastique, (d) est un bac eau, (e) est une soucoupe contenant du sucre et (f) sont des pieds - la figure 2 représente un piege de Mcphail où (g) est un échantillon ; et - la figure 3 représente la rotation des pièces où (h) est un piège de Mcphail, (i) est une suspension et (j) est un moteur. EXEMPLE 1 On fixe des pieges sphériques pour attirer les insectes (pièges de Mcphail) la partie centrale supérieure d'une cage grillagée de grande taille (200 cm x 200 cm x 200 cm). On fait tourner les pieges horizontalement pour empêcher qu'il s'établisse une supériorité due à la position. On place dans chaque piège une solution d'échantillons a 1 Z (renfermant un insecticide). On laisse séjourner le système pendant un nombre d'heures -déterminé et on compte le nombre d'insectes tués. On prépare l'échantillon en hydrolysant des cellules sèches de micro-organismes et une liqueur de graine de soja dégraissée, avec de l'acide chlorhydrique, puis en neutralisant le mélange obtenu avec une solution d'hydroxyde de sodium (pH = 5). De plus > on ajuste le pourcentage d'hydrolyse des protéines de l'échantillon å 65 Z. Echantillon nO Matière de départ Brevibacterium flavum ATCC 14067 2 Bacillus megaterium IFO 3003 3 Staphylococcus aureus ATCC 12600 4 Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145 5 Streptomyces lavendulae ATCC 11924 6 Saccharomyces cerevisiae (levure) ATCC 15248 7 Gâteau de graines de soja dégraissées On détermine le pourcentage d'hydrolyse des protéines par formol-titration et par la méthode de Kjedahl qui sont bien connues pour obtenir l'azote aminé et l'azote total, ce qui permet de déterminer le pourcentage d'hydrolyse des protéines a partir de la formule suivante azote aminé - azote ammoniacal Pourcentage d'hydrolyse des protéines = x 100 azote total - azote ammoniacal Les insectes utilisés sont Musca domestica Linne, Tetradacus tsuneonis Miyake, Hylemyria platura Meigen et Agromyza oryzae Munakata. On utilise 300 insectes parfaits femelles éclos depuis 4 jours. La solution d'échantillons renferme un insecticide (Sumithion, dénomination commerciale de Sumitomokagaku Co., Inc.). Le tableau I ci-après indique le nombre d'insectes tués après un temps déterminé. Les valeurs augmentent avec le pouvoir attractif. Le tableau I montre nettement que tous les échantillons préparés 9 partir des hydrolysats acides de l'invention ont un grand pouvoir attractif pour des mouches, telles que Musca domestica Lionne, Tetradacus Tsuneonis Miyake, Hylemyria Platura Meigen et Agromyza oryzae Munakata. EXEMPLE 2 On cultive de façon classique Brevibacterium flavum ATCC 14067. On hydrolyse le bouillon de culture obtenu qui renferme les cellules des micro-organismes avec de l'acide chlorhydrique jusqu'à un pourcentage d'hydrolyse des protéines de 75,0 %, puis on neutralise avec une solution d'hydroxyde de sodium (pH - 5,0). On pulvérise sur un champ de riz un mélange constitué dtune partie de l'hydrolysat acide de bouillon de culture précité, une partie d'insecticide (mélange 1/1 de DDVP et d'émulsifiant) et 98 parties d'eau. On constate que non seulement le mélange est.très efficace vis-a-vis des insectes cibles, tels que la cicadelle verte du riz, le petit fulgore brun, l'hylésine piniperde, la mouche des tiges de riz et la pyrale du riz, mais qu'il réduit également la fréquence des pulvérisations nécessaires et accroît la récolte de riz. On hydrolyse la liqueur mère obtenue en éliminant l'acide glutamique du bouillon de culture précité et on neutralise conne précédemment décrit. La matière obtenue (produit de l'invention) présente la même efficacité que ci-dessus. EXEMPLE 3 On cultive Streptomyces lavendulae ATCC 11924 selon un procédé connu. On hydrolyse le bouillon de culture obtenu renfermant les cellules des micro-organismes, avec de l'acide chlorhydrique, jusqu'a un pourcentage d'hydrolyse de protéines -de 65,5 %, puis on neutralise avec une solution d'hydroxyde de sodium (pH = 5,0). On pulvérise sur un verger de pêchers un mélange de 10 parties de l'hydrolysat acide de bouillon de culture précités 5 parties d'insecticide (mélange 1/1 de Malathion et d'émulsifiant), 1 partie de sucre brut, 4 parties d'acide alginique et 80 parties d'eau. Le mélange tue de façon très efficace les insectes cibles3 tels que le ver des pêches et le puceron vert du pêcher et réduit beaucoup plus les dommages provoqués par les insectes que dans le cas où on pulvérise uniquement l'insecticide. EXEMPLE 4 On accroche des pièges de Mcphail illustré par la figure 2 sous le couvercle d'un olfactomètre à piège illustré par la figure 1. L'olfactomètre est une boîte de plastique (100 cm x 100 cm x 100 cm) dont le couvercle est constitué d'une toile métallique. On fixe un moteur au centre du couvercle de l'olfactomètre pour faire tourner les suspensions auxquelles les pièges sont fixés, comme le montre la figure 3. Au centre du fond de l'olfactomètre on place une soucoupe contenant quelques morceaux de sucre et un bac contenant de l'eau comme appâts pour les insectes cibles. Les insectes cibles sont constitués de mouches du melon (100 mules et 100 femelles) et de mouches orientales des fruits (100 moles et 100 femelles) écloses depuis 3 jours. Chacun des pièges renferme 20 ml de chacun des échantillons A å F suivants et on le fait tourner a la vitesse constante de 1/15 tr/mn. On compte le nombre des insectes tués dans chaque olfactomètre en l7 heures (de 5 heures 22 heures). Echantillons Constituants A insecticide seul (émulsion de Malathion) dilué au 1/1000 B hydrolysat acide de protéines végétales du commerce, "PIB-7" (produit de Staley Co., Ltd., U.S.A. ; pourcentage d'hydrolyse des protéines : 39,4Z) 10 parties insecticite (émulsion de Malathion) dilué au 1/100 1 partie .C Wdrolysat acide de levure du commerce ('Amber BYF, Series 100", produit de Amber Co., Ltd., U.S.A.) 10 parties insecticite (émulsion de Malathion) dilué au 1/100 1 partie Echantillons Constituants D hydrolysat acide de cellules de Corynebacterium gkamicum ATCC 21 065 (pourcentage d'hydrolyse des protéines : 72) ; pH = 6,5 10 parties insecticide (émulsion de Malathion) dilué au 1/100 1 partie E hydrolysat acide de cellules de Micrococcus Luteus ATCC 4698 (pourcentage d'hydrolyse des protéines : 70% ; pH = 7,0) 10 parties insecticide (émulsion de Malathion) dilué au 1/100 1 partie F hydrolysat acide de cellules de Streptomyces griseus ATCC 23 345 (pourcentage d'hydrolyse des protéines : 75% ; pH = 6,8) 10 parties insecticide (émulsion de Malathion) dilué au 1/100 1 partie Les résultats de cet essai figurent dans le tableau II ci-après. On détermine l'indice attractif de la façon suivante (nombre d'insectes attirés par un des échantillons) Indice attractif = moyenne de nombre d'insectes attirés par le "PI d'insectes attirés par le "PIB-7") L'activité croit avec l'indice. Comme le montre le tableau II ci-après, l'activité des hydrolysats acides de l'invention est supérieure à celle des produits témoins. EXEMPLE 5 On effectue un essai sur le terrain à Ishiki, ville d'Itoman, Préfecture d'Okinawa (partie méridionale de l'île d'Okinawa) au Japon. On suspend des pièges tels que ceux illustrés par la figure 2 aux branches des arbres et on pulvérise, avec un pulvérisateur manuel, 100 ml des échantillons G b K sur la surface des feuilles des arbres la verticale des pièges. Le lendemain on compte le nombre de mouches du melon et de mouches orientales des fruits tuées. Les échantillons utilisés sont les suivants : Echantillons Constituants G insecticide (émulsion de Malathion dilué au 1/1000 H hydrolysat acide de protéines végétales du commerce, "PIB-7" (produit de Staley Co. Ltd., U.S.A. ; pourcentage d'hydrolyse des protéines 39,4%) 10 parties insecticide (émulsion de Malathion) dilué au 1/100 1 partie I hydrolysat acide de levure du commerce ("Amber BYF Series 100", (produit de Amber Co.Ltd., U.S.A. 10 parties insecticide (émulsion de Malathion) dilué au 1/100 1 partie J hydrolysat acide de cellules de Brevibacte rium flavum ATCC 14067 (pourcentage d'hydrolyse des protéines : 70 % ; azote total : 3,0 g/dl ; pH = 6,7) 10 parties insecticide (émulsion de Malathion) dilué au 1/100 1 partie K hydrolysat acide de cellules de Streptomyces lavendulae ATCC 11 924 (pourcentage d'hydrolyse des protéines : 75% ; azote total : 3,0 gldl pH = 6,7) 10 parties insecticide (émulsion de Malathion) dilué au 1/100 1 partie Les résultats de cet essai sur le terrain sont résumés dans le tableau III ci-après qui montre que les hydrolysats acides de l'invention sont très actifs. Bien entendu diverses modifications peuvent être apportées par l'homme de l'art aux dispositifs ou procédés qui viennent d'être décrits uniquement à titre d'exemples non limitatifs sans sortir du cadre de l'invention. TABLEAU I Nombre d'insectes tués Echantillon n Musca domestica Tetradacus tsuneonis Hylemia platura Agromyza oryzae Linne Miyaeke Meigen Munakata 1 205 179 183 192 Présente 2 108 137 93 58 invention 3 117 104 108 29 4 123 111 143 42 5 106 125 121 134 6 18 19 10 7 Témoin 7 20 10 13 10 TABLEAU II Indice attractif Mouche du melon (Dacus cucurbitae) Mouche orientale des fruits (Dacus dorsalis) Echantillon # # # + # # # # + # A 0 0,5 0,5 0,2 0,3 0,3 Témoin B 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 C 1,2 1,4 1,3 1,5 0,8 1,0 D 5,5 3,3 4,5 9,6 10,5 10,2 Produit de E 4,0 2,5 3,3 6,3 7,4 7,0 l'invention F 3,7 4,2 3,9 5,6 4,4 4,8 TABLEAU III Nombre d'insectes tués Echantillon Mouche du melon (Dacus cucurbitae) Mouche orientale des fruits (Dacus dorsalis) # # # + # # # # + # G 0 0 0 0 0 0 Témoin H 1,0 # 1,0 2,0 # 1,0 3,0 # 2,0 0,5 # 0,5 1,0 # 1,0 1,5 # 1,5 I 1,5 # 1,5 1,0 # 1,0 2,5 # 2,5 1,0 # 1,0 1,0 # 1,0 2,0 # 0 Produit de J 4,0 # 1,0 5,5 # 0,5 9,5 # 0,5 5,0 # 1,0 3,0 # 1,0 8,0 # 2,0 l'invention K 2,0 # 0 3,0 # 1,0 5,0 # 1,0 3,0 # 1,0 4,5 # 0,5 7,5 # 0,5 R E V E N D I C A TI O N S 1. Composition attirant les insectes, caractérisée en ce qu'elle est constituée d'un produit choisi parmi (1) les hydrolysats acides de cellules de bactéries, (2) les hydrolysats acides dfactinomycetes, (3) les hydrolysats acides de bouillons de culture de bactéries, et (4) les hydrolysats acides de bouillons de culture d'actinomycètes, avec un support approprié. 2. Composition pour attirer les insectes selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'on obtient le produit en hydrolysant par l'acide chlorhydrique des cellules de bactéries, des cellules d'actinomycètes, un bouillon de culture de bactéries ou un bouillon de culture dractinomycètes, en neutralisant les hydrolysats obtenus et en ce que le support est un liquide approprié ou un solide approprié.