FR 2318877 A1 19770218 FR 7523857 A 19750723 L'objet de l'invention concerne un procédé pour llob- tention de dérivés succinylés des-ecçdys nes I1 consiste à permettre le couplage de ces dérivés pour l'obtention d'anti corps capables de fixer l'ecdysone, afin de donner la possibilité d'étudier;l'endocrinologie des arthropodes , les modes d'action des insecticides et l'éle- vage des crustacés et équivalents en milieu semi naturel, et la radio immunologie. Dans les procédés connus de nombreux stéroïdes ont été isolés à partir des Invertébrés arthropodes et des plantes . La structure mère à laquelle ils sont apparentés est celle de ecdysone IOH g8/ o de 1à; dérive la t ec sone par oxydation de la position 20 ou H est substitué par OH. Ces sub stances bien caractérisées sont connues comme hormones intervenant lors des mues des arthropodes On connait quelques dérivés de ces substances,dérivés tritiés utilisables lors d'études métaboliques et dérivés oxime ( par transformation de la fonction cétone) en vue de réaliser des couplages . Le procédé suivant l'invention permet d'obtenir les substances dérivées des ecdysones par traitement à I'anhydride succinique en milieu pyridine, afin d'obtenir les dérivés spcinyles sur la position 2 et 3 soit 2 succinyl ecdysone Pour la plupart des usages il n'est pas nécessaire de séparer les isomères 2 et 3 succinyles . I1 suffit de les séparer des réactif par chromatographie sur dextrane- ammonium quaternaire . On obtient ainsi en quantité plus faible le dérivé di- succinyle Â;partir du dérivé monosuccinylé on procède à une activation de la fonction carboxylique par le chloroformate d' éthyle dans le dimethylformamide/ .L'anhydride mixte formé est couplé avec une amine prImaire ou secondaire , dans la dimethylformamide Avec l'albumine, ou une proteine quelconque , on obtient par la conjugaison sur les lysines , un complexe ecdysone protéïne utilisable pour une immunisation Avec la tyrosine ester méthylique, on obtient un com I 0E plexe tyrosine-ecdysone OH OH CO-(CH) CC)coo 2 OH CH3O-CO-cH O CH2 2 2 meth$l P ectsone tyrosine methyl ester OR soit 2 succinyl F ecdysone tyrosine methyl ester Le dérivé obtenu est purifié par chromatographie d' é change d' ions. Enfin par iodation du précédent à partir d'iodure et avec un oxydant , chioranine T ou eau oxygénée , on obtient des dérivés mono et diiodés sur la positions ortho de la fonction phénolique . Avec l'iode I25 on obtient un dérivé de ltecdyso- ne fortement radio actif et relativement stable. Les dérivés io dés sont purifiés par chromatographie sur gel de dextrane Les dérivés succinyles des ecdysones peuvent servir à coupler ces derniers à d'autres molecules . Le dérivé du couplage a 1' albumine sert à obtenir des anti corps capables de fixer ecdysone , par immunisation d'un lapin par exemple . On peut utiliser ces anti corps pour le dosage radio imsunologique de l'ecdysone en competition avec un analogue radio actif, tritié ou iodé. Ce dosage intéresse les biologistes qui étudient l'en docrinologie des insectes et des arthropodes en général.I1 intéresse aussi ceux qui étudient le mode d'action des insecticides , spécialement ceux qui interfèrent avec les systèmes hornonaires de l'insecte. Enfin il intéresse les biologistes qui préparent l'élevage des crustacés en milieu semi naturel. Le dérivé iodé est le partenaire indispensable du dosage radio immrunologigue, mais peut servir également pour d'autres travaux , recherche des récepteurs naturels des ecdyso nes , études métaboliques , etc... Le dérivé du couplage à la tyrosine n'est qu'un intermédiaire vers le dérivé iodé , mais c'est le pro.totype de toute une famille de composés associant la structure de 1 'ecdysone et une autre structure dotée de propriétés très différentes , par exemple pour réaliser des insecticides spécifiques REVENDICATIONS 1 ) Procédé pour 1 'obtention des dérivés succinyles des ecdysones par couplage pour 1 obtention d'anticorps capables de fixer l'ecdysone, se caractérisant par le traitement à l'anhidri de succihique en milieu pyridine,afin d'obtenir des dérivés succinyles ,et à partir du dérivé monosuccinylé par activation de la fonction carboxylique par le chloroformaté d'éthyle dans le dimethylfor'salide. 2 Procédé suivant la revendication 1 se caracterisant par le fait qu'a partir du dérivé monosuccinylé l'anhydride mixte formé est couplé avec une amine primaire ou secondaire dans la dimethylformamide afin d'obtenir avec l'albumine un complexe ecdysone-proteine et avec la tyrosine ester methylique un com- plexe tyrosine - ecdysone. 3 Procédé suivant la revendicetion I se carsetérisant par l'application des dérivés iodés et des anticorps obtenus contre les dérivés succintles pour un dosage radio immunologi- que