FR 2334368 A1 19770708 FR 7636966 A 19761208 L'invention concerne un procédé permettant d'isoler des pepins de raisin une substance want une activité anti-inflammatoire supérieure à celle de l'huile de pépins de raisin commerciale. L'invention concerne aussi des compositions cosmétiques et pharmaceutiques contenant la substance anti-inflammatoire ainsi isolée ; en particulier, l'invention propose des compositions anti-inflammateires pour le traitement des cheveux, de la peau et de la cavité buccale. On comprend que les états de la peau qui conduisent à 1 t inflammation et souvent aussi à l'oedème des tissus superficiels se rencontrent fréquemment. Des. exemples de ces états de la peau sont la gingivite qui peut être causée par une infection, l'érythème cutané comme celui qui résulte d'une exposition prolongée au soleil, ainsi que lteezéma et d'autres formes de lésion cutanée qui peuvent résulter d'une irritation consécutive à un contact avec des agents chimiques. On peut atténuer certains de ces inconvénients grâce à un traitement par des compositions cosmétiques ou pharmaceutiques contenant des substances synthétiques qui ont un effet anti-inflammatoire, par exemple la cortisone, la phénylbutazone, les -salicylés, l'indométhacine et les dérivés de l'acide anthranilique, mais elles peuvent donner lieu à des effets sècondaires indésirables et en tout cas, on ne les utilise habituellement que sous une surveillance médicale stricte. Les pépins de raisin contiennent normalement environ 12 à 20 en poids d'huile. I1 a été démontré que cette huile, que l'on peut séparer en pressant les pépins ou plus habituellement par extraction à l'hexane selon un procédé industriel connu, présente une légère activité anti-inflammatoire. Toutefois, il apparait que cette activité est insuffisante pour permettre d'utiliser l'huile comme constituant actif d'un cosmétique anti-inflammatoire. On a découvert maintenant un procédé permettant d'isoler des pépins de raisin une substance ayant des propriétés anti-inflammatoires accrues et on a aussi mis au point avec succès des compositions cosmétiques et pharmaceutiques contenant cette substance anti-inflammatoire et pouvant servir dans le traitement des etats de la peau qui s'accompagnent d'une inflammation et/ou d'un oedème. Plus particulíèrement, on a démontré que la substance anti-inflammatoire peut être extraite des pépins de raisin au moyen d'un mélange spécial de solvants organiques. En conséquence, l'invention propose un procédé permettant d'isoler à partir des pépins de raisin une substance ayant une activité anti-inflammatoire, procédé caractérisé par le fait que l'on extrait les pépins de raisin par un mélange d'au moins deux solvants organiques polaires miscibles entre eux, de manière à obtenir une substance dont la valeur anti-inflammatoire, telle qu'elle est définie ci-après, est inférieure à 5. Il y a lieu d'expliquer que l'on peut démontrer et mesurer l'activité anti-inflammatoire d'une substance en déterminant son effet sur l'oedème engendré sur la patte du rat à la suite d'une injection sous-cutanée d'un agent phlogogène comme la carraghénine. On peut exécuter cet essai comme suit On administre par voie buccale une quantité connue de substance anti-inflammatoire à un groupe de rats et on administre à un deuxième groupe de rats un placebo tel que le glucose ou l'huile de vaseline. Une heure après l'ingestion, tous les rats reçoivent dans la patte droite de derrière une injection sous-cutanée de 0,15 ml d'une solution de carraghénine à 1% dans le sérum physiologique. Quatre heures plus tard, on me-sure par pléthysmographie l'accroissement de volume de la patte droite de derrière en comparaison de la gauche. Cette méthode pléthysmographique est décrite plus complètement par C.A. Winter, E.A. Risley et G.W. Nuss dans "prou. Exp. Biol. Met." 111, 544 (1962). On calcule l'accroissement moyen de volume (nv) pour les deux groupes de rats et le pourcentage d'inhibition de formation d'oedème ( inhibition) après l'administration de la substance anti-inflammatoire, d'après l'expression Yo inhibition = tv (témoin) - Av (traité) x 100 nv (témoin) D'après ces résultats, il est possible de déterminer la valeur anti-inflammatoire de la substance; qui est par définition la quantité-minimale de l'échantillon contenant la substance anti-inflammatoire, exprimée en g/kg de rat qui, administré par voie buccale, cause une diminution statistiquement significa- tive de l'oedème. La matière première du procédé selon l'invention est formée depépins de raisin (Vitis vinifera) ou du tourteau nui reste-après élimination de 'huile. La matière première préférentielle est formée de pépins des raisin qui sont de préférence à l'état broyé, pulvérisé ou divisé autrement. L'étape du procédé selon l'invention consiste à extraire la matière première par un mélange d'au moins deux solvants organiques polaires miscibles entre eux. Les solvants polaires appropriés à cet effet comprennent le chloroforme, le méthanol, l'acétone, 'méthanol, le dioxanne et le chlorure de méthylène, mais on comprend qu'il est possible d'utiliser d'autres solvants Tiques polaires remplissant la condition de miscibilité mu zle. Un mélange de solvants particulièrement approprié est formé de chloroforme et de méthanol, de préférence sous forme mélange azéotropique. La composition de ces mélanges azéotropiques, ainsi que d'autres similaires aui conviennent particulièrement, est indiquée au tableau ci-après. .Chloroforme Méthanol : Acétone : Point d'ébulli Point d'ébul- . tion du mélange, lition : . 610C : 64"C : 56 C : "C 87 13 - 53,5 80 - 20 64,7 parties en poids 12- 88 55,7 47 23 30 57,5 Quel que soit le mélange de solvants polaires que l'on utilise, on soumet à une distillation, à une évaporation ou à un autre processus de concentration l'extrait ainsi obtenu, contenant la substance anti-inflammatoire, afin d'éliminer le solvant et d'obtenir ainsi un résidu huileux qui contient la substance anti-inflammatoire. I1 est préférable d'éliminer le solvant à une température ne dépassant pas 500C environ, afin d'obtenir un rendement optimal. On peut avantageusement, par exemple, élimi ner le solvant par distillation sous vide. Le résidu huileux ainsi obtenu a normalement une valeur anti-inflammatoire inférieure à 5 et, plus habituellement, cette valeur sera inférieure à 2. En conséquence, il est possible d'utiliser ce résidu huileux sans autre purification dans la fabrication de compositions cosmétiques ou pharmaceutiques. Toutefois, si l'on veut une plus grande activité (donc une moindre valeur numérique), on peut avoir recours à une nouvelle purification, par exemple par le procédé décrit ci-après. I1 est entendu qu'il existe d'autres procédés de purification et que l'invention n'est pas limitée à ceux que l'on va décrire. Selon le procédé préférentiel de purification de la substance anti-inflammatoire contenue dans le résidu huileux ayant une valeur anti-inflammat'oire inférieure à 5, on dissout le résidu huileux dans un solvant polaire ayant un point de fusion inférieur à -600C. De préférence, on peut alors faciliter la purification de la substance anti-inflammatoire en refroidissant la so lutin à une température qui ne dépasse pas -600C, de préférence entre -70 et -80 C ; alors, les triglycérides qui peuvent être présents cristallisent et la substance anti-inflammatoire reste -en solution. Un solvant polaire préférentiel ayant un point de fusion inférieur à -600C est l'acétone ; on conduit de préférence la dissolution dans ce solvant à 500C. On peut réaliser une nouvelle purification de la solution de la substance anti-inflammatoire dans le solvant polaire, par exemple en extrayant par une solution de soude, puis en acidifiant pour convertir la substance anti-inflammatoire à la forme acide. On peut obtenir une substance anti-inflammatoire ayant une pureté qui doit être d'au moins 90% en séparant la subs tance des impuretés sur une colonne de silice avec élution par étapes, d'abord au moyen d'un mélange 80:20 d'hexane et d'éther, puis au moyen d'un mélange 50:50 d'hexane et d'éther et finalement au moyen de méthanol. Pour obtenir une pureté d'au moins 99%, il est possible de cristalliser la substance anti-inflammatoire dans un solvant non polaire comme l'hexane. Pour mieux illustrer, uniquement à titre d'exemple, 'isolemert et la purification d'une substance anti-inflammatoire provenant des pépins de raisin, on donne ci-après une description détaillee du procédé que l'on peut utiliser lorsqu'on utilise comme matiere première les pépins de raisin non extraits et non traités par ailleurs. I1 est entendu que l'invention n'est pas seulement limitée à ce schéma particulier. - Procédé d'extraction de substance anti-inflammatoire On commence par sécher et broyer des pépins de raisin en poudre fine puis on les extrait à 53,50 C, pendant 8 heures par un mélang & azéotropique de chloroforme et de méthanol comprenant 87 parties en poids de chloroforme et 13- parties en poids de méthanol. On soumet l'extrait ainsi obtenu à la distillation sous vide pour éliminer le mélange de solvants et il reste un rési- du huileux. On détermine la valeur anti-inflammatoire de cet extrait par l'essai sur la patte du rat, décrit plus haut. On trouve que la valeur anti-inflammatoire de ce rési- du huileux (appelé Huile ne 2) est de 1,25. On purifie alors davantage la substance anti-inflamma toire présente dans le résidu huileux (Huile no 2 en la dissolvant dans l'acétone à 500C puis en la refroidissant à -700C pendant 4 heures. On élimine la matière solide par filtration et on soumet le filtrat à la distillation sous vide pour éliminer le solvant ; il reste un deuxième résidu huileux0 On trouve que la valeur anti-inflammatoire- de ce résidu huileux (appelé Fraction A) est de 0,50. On purifie alors à nouveau la substance anti-inflammatoire présente dans ce résidu huileux en l'extrayant par la soude iN dans l'alcool aqueux, puis on acidifie 11 extrait par l'acide chlorhydrique IN pour convertir la substance anti-inflammatoire à la forme acide. On conduit alors une nouvelle purification en séparant la substance anti-inflammatoire des impuretés sur une colonne de silice, par la technique d'élution par étapes décrite plus haut. Finalement, en cristallisant la fraction A dans l'hexane, on obtient une substance anti-inflammatoire sous la forme d'un solide cristallin blanc fondant entre 306 et 3080C et dont la pureté estimée est d'au moins 99 %. On trouve que la valeur anti-inflammatoire de la subs tance anti-inflammatoire purifiée est inférieure à 0,05. L'invention est illustrée davantage à propos du dessin qui est un organigramme indiquant sous forme schématique les étapes préférentielles de procédé que l'on peut utiliser pour isoler et purifier la -substance anti-inflammatoire tirée des pépins de raisin. La substance anti-inflammatoire pure ou un extrait de pépins de raisin ayant une valeur anti-inflammatoire inférieure à 5 peuvent être incorporés à des compositions cosmétiques et pharmaceutiques à usage externe ou interne. En conséquence, l'invention a aussi pour objet une composition cosmétique ou pharmaceutique comprenant au moins 0,1% en poids de la substance anti-inflammatoire préparée selon le procédé décrit ci-dessus, ainsi qu'un véhicule acceptable cosmétiquement ou pharmaceutiquement, autre que l'eau. Ces compositions comprennent au moins 0,1 en poids de la substance anti-inflammatoire ou de l'extrait qui la contient; de préférence, les compositions comprennent là 50 %, idéalement 2 à 20 % en poids de la substance anti-inflammatoire. Des exemples de compositions cosmétiques selon l'invention sont des crèmes pour la peau comme celles qui servent à soulager les coups de soleil et d'autres crèmes destinées à être appliquées principalement sur les mains et le visage. D'autres exemples sont la crème à raser, les dentiiices, les bains de bouche, les lotions contre la transpiration, les désodorisants et les produits de traitement des cheveux. On comprend que la nature de la composition cosmétique ou pharmaceutique influence le choix du ou des véhicules appropriés. Les véhicules appropriés peuvent être classés comme indiqué ci-après. Ilsaut expliquer que les véhicules sont des substances qui peuvent jouer le rôle de diluants, agents de dispersion ou excipients de la substance anti-inflammatoire et qui assurent donc que l'on puisse l'appliquer et la distribuer uniformément sur la peau à une concentration appropriée ; dans certains cas, le véhicule peut faciliter sa pénétration dans l'épiderme à travers la couche cornée, augmentant ainsil'efficacité de la substance anti-inflammatoire appliquée. I1 n'est pas exclu d'utili ser l'eau qui peut jouer le rôle de véhicule ; l'eau peut certainement être présente dans beaucoup des compositions selon l'invention, mais il est prévu qu'elles doivent contenir au moins un véhicule autre quel'eau, Les véhicules qui peuvent servir dans les compositions selon l'invention peuvent comprendre des absorbants pulvérulenti liants et excipients, des liquides tels que des émollients, propulseurs, solvants, humidifiants et épaississants.Voici des exemples de chacun de ces types de véhicule Absorbants pulvérulents silicate de magnésium-base d'absorption de lanoline, poudre de silice amorphe. Liants et excipients pulvérulents : cellulose microcristalline, néopentanoate dtisostéaryle, polyacrylamide, lactate de lauryle, silice précipitée, talc, craie. Emollients alcool stéarylique, monoricinoléate de glycéryle, monostéarate de glycéryle, suif sulfaté, propylèneglycol, huile de vison, alcool cétylique, stéarate de stéaryle, isostéarate d'isopropyle, brassylate de diméthyle, acide stéarique, palmitate d'iso- butyle, stéarate d-'isocétyle, alcool oléylique, låurate d'isopropyle, laurate d'hexyle, oléate de décyle, adipate de diiso propyler octadodécanol (2), alcool isocétylique, éthoxymyristate de myristyle, palmitate de cétyle, diméthylpolysiloxane, sébaçate de dibutyle(n), sébaçate de diisopropyle, sébaçate de bis- (2-éthylhexyle) ,palmitate de 2-éthylhexyle, isononanoate dtisononyle, isononanoate dt isodécyle, isononanoate d'isotridécyle, stéarate de 2-éthylhexyle, adipate de bis-(2-éthylhexyle), succinate de bis-(2-éthylhexyle), myristate d'isopropyle, palmitated'isopropyle, stéarate d'isopropyle, stéarate de butyle, monostéarate de glycéryle, polyéthylèneglycol , -propylène- glycol, triéthylèneglycol, lanoline, huile de ricin, alcools de lanoline acétylés, lanoline acétylée, pétrolatum, ester d'isopropyle d'acides gras de lanoline, huiles minérales, myristate de butyle, acide isostéarique, acide palmitique, linoléate d'isopropyle, lactate de cétyle, lactate de lauryle, lactate de myristyle, aminogluconate d'hydroxyalcoyle quaternisé, oléate de décyle, oléate d'isodécyle, néopentanoate d'isostéaryle, myris tate de myristyle, ethoxymyristate d'oléyle, stéarate de diglycol, stéarate de 2-éthoxyéthyle, stéarate myristyle, lanolate d'isopropyle. Propulsifs trichlorofluorométhane, dichlorodifluorométhane, dichlorotétrafluoréthane, monochlorodifluorométhane, trichlorotrifluoréthane, propane, butane, isobutane (utilisés isolément ou en mélange). Solvants alcool éthylique, 2-éthylhexanol, carbonate d'éthylène, carbonate de propylène, huile de ricin, polymère linéaire éthoxylé de méthanol, 2-éthoxyéthanol, éthers monobutylique et monoéthylique du diéthylèneglycol, butanol propoxylé, alcool oléylique propoxylé, stéarate de butyle, myristate de butyle. Humidifiants glycérol, sorbitol, 2-pyrrolidone-5-carboxylate de sodium, collagene soluble, phtalate de dibutyle, gélatine, polyglycérogène, glucose éthoxylé (10 à 20 moles), glucose propoxylé (10 à 20 moles). Epaississants gommes, amidon, silice collordale, polyacrylate de sodium, smectites de tétraalcoylammonium et/ou de trialcoyl-arylammonium, silicate de magnésium et d'aluminium modifié chimiquement, montmorillonite modifiée organiquement, silicate d'aluminium hydraté, silice fumée, polymères carboxyvinyliques, sodiumcarboxyméthylcellulose, amide du stéarate d'hydroxyéthyle, stéarate de 2-éthoxyéthyle. Le véhicule utilisé peut constituer tout le reste du produit ou une moindre proportion, à condition que le véhicule soit capable, le cas échéant en mélange avec d'autres véhicule les, de jouer son rôle ici défini. Les exemples suivants illustrent les compositions de produits cosmétiques contenant une substance anti-inflammatoire selon l'invention, extraite des pépins de raisin. En se référant à l'organigramme, on pourra identifier les diverses huiles et fractions contenant la substance anti-inflammatoire et mentionnées dans ces exemples. Exemple 1 Lotion astringente antiseptique % en poids sulfate de potassium et d'aluminium 1,0 glycérol 5,0 chlorure de benzalkonium 0,5 alcool 5,0 Fraction A 0,3 eau pour faire00 Exemple 2 Masque à tous usages : % en poids kaolin 35,0 bentonite 5,0 alcool cétylique 2,0 laurylsulfate de sodium O,1 glycérine 10,0 "Nipagin MW Huile nO 2 parfum q.s. eau pour faire 100,0 Exemple 3 Crème de démaquillage % en poids acide stéarique 10,0 huile minérale 3,5 vaseline 2,0 alcool céto/stéarylique 1,5 myristate dtisopropyle 3,0 monolaurate de sorbitan 2,0 glycérol 6,5 sel de sodium du sulfate d'éther laurylique 5,0 monolaurate de polyoxyéthylène-sorbitan 2,0 triéthanolamine 1,5 Huile N03 1,5 eau 61,5 Exemple 4 Shampooing 46 en poids stéarate de magnésium 4,0 alcool polyvinylique à 10 56 6,0 monolaurate de glycéryle 2,0 lanoline 1,0 laurylsulfate de triéthanolamine 35,0 alcool cétylique 2,0 Huile n 2 920 eau 48,0 Exemple 5 P te dentifrice 56 en poids Huilé n 2 1,00 hydroxyde d'aluminium A1(OH)3 microcristallin 41,-50 alumine A1203 2,00 glycérol 28,0O eau 24,50 sodiumsulfo-acétate de lauryle 1,00 arme 0,70 gomme adragante 0,50 p-hydroxybenzoate de méthyle 0,10 saccharine soluble 0,05 acide phosphorique H3P04 à 10056, pour donner un pH de 6,5 à 7,5 q.s. Exemple 6 Bain de bouche 56 en poids Fraction B 0,100 chlorure de cétylpyridinium 0,100 solution de sorbitol à 70 % 20,000 essence de cannelle 0,050 essence de menthe poivrée 0,100 acide citrique 0,100 "FD & C Red n 2" 0,001 "Tween 60" 0,300 alcool éthylique 10,000 eau 69,249 Ce bain de bouche-doit être dilué avec 3 à 4 parties d'eau lorsqu'on veut l'utiliser. Exemple 7 Crème pour les mains 56 en poids myristate dtisopropyle 3,00 monostéarate-de polyéthylèneglycol (1000) 5,00 acide stéarique 19,00 méthylparaben monostéarate de polyéthylèneglycol (300) 5,00 sorbitol 3,00 Huile n 3 7,00 eau 63,85 parfum et colorant q.s. Exemple 8 Rouge à lèvres 56 en poids cire de carnauba 10,0 cire d'abeille 15,0 lanoline . 5,0 alcool cétylique 5,0 huile de ricin 64,8 Fraction A 0,2 Exemple 9 Fard pour les yeux % en poids stéarate de triéthanolamine 45,0 cire d'abeilles Jaunes 5,0 monostéarate de glycéryle 5,0 cire de carnauba jaune 15,0 lanoline anhydre USP 9,0 noire de carbone 20,0 Huile no 2 ?0 Exemple 10 Lotion contre la transpiration 56 en poids hydroxychlorure d'aluminium 20,0 propylèneglycol 5,0 alcool 10,0 germiclde 0,2 Fraction C 0,5 parfum q.s eau pour faire 100 REVENDICATIONS 1. Procédé permettant d'isoler à partir des pépins de raisin une substance ayant une activité anti-inflammatoire, procédé caractérisé par le fait que l'on extrait les pépins de raisin par un mélange d'au moins deux solvants organiques polaires miscibles entre eux, de manière à obtenir une substance dont la valeur anti-inflammatoire, telle que définie de la ligne 12 page 2 à la ligne 1 page 3 de la description, est inférieure à 5. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que la matière première est le tourteau restant après extraction des pépins de raisin par un solvant non polaire. 3. Procédé selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé par le fait que le solvant polaire est le chloroforme, le méthanol, l'acétone, l'éthanol, le dioxanne, le chlorure de méthylène ou un mélange de ceux-ci. 4. Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé par le fait que le mélange de solvants polaires est formé de chloroforme et de méthanol, de préférence sous forme de mélange azéotropique. =. Procédé selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé par le fait que le mélange de solvants polaires comprend au chloroforme, du méthanol et de l'acétone, de préférence sous forme de mélange azéotropique. 6. Procédé selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé par le fait que l'on purifie en outre la substance ayant une activité anti-inflammatoire par les étapes suivantes (a) dissoudre la substance dans un solvant polaire ayant un poin de fusion inférieur à -60 C, (b) refroidir la solution à une température ne dépassant pas -600C, (c) séparer la solution ainsi obtenue de la matière insoluble, et (d) séparer le solvant polaire pour obtenir une substance dont la valeur anti-inflammatoire, telle qu'elle est définie ici, est inférieure à 1,0. 7. Gomposition cosmétique ou pharmaceutique caractérisée par le fait qu'elle comprend au moins 0,1 56 en poids de la substance anti-inflammatoire préparée selon l'une des revendications 1 à 6, ainsi qu'un véhicule acceptable cosmétiquement ou pharmaceutiquement, autre que l'eau.