FR 2293438 A1 19760702 FR 7439490 A 19741203 La présente invention est relative à des tablettes contenant au moins une enzyme. De façon plus précise, la présente invention concerne (1) un procédé de fabrication de tablettes contenant au moins une enzyme, qui est caractérisé par le fait qu'on mélange l'enzyme avec du polyéthylene glycol et qu'on transforme le mélange résultant en tablettes sous pression et (2) les tablettes contenant au moins une enzyme ainsi obtenues, ces tablettes comprenant l'enzyme et également-du polyéthylène glycol. Jusqu'ici, il était bien connu que les enzymes en général sont des substances instables et que leur activité a tendance à diminuer sous l'effetde la température, du pH, d'ions métalliques, de lthu- midité, etc. De plus, au cours de la fabrication de tablettes contenant une enzyme et en particulier au cours du procédé de moulage par compression, les enzymes se trouvent désactivées o décomposées à un degré notable. Il apparat que la désactivation des enzymes est provoquée en grande partie par les conditions du moulage par compression, comme la pression, la chaleur engendrée et la friction, etc. ta demanderesse a cherché pendant longtemps comment on pourrait éviter de tels inconvénients. Or, elle a constate avec surprise qu'en mélangeant une ou plusieurs enzymes avec du polyéthylène glycol avant l'opération de compression, au cours du procédé de fabrication de tablettes contenant au moins une enzyme, on peut largement éviter la dësactivation, et que les tablettes contenant au moins une enzyme fabriquées de cette manière sont stables vis-à-vis de la chaleur, de la lumière1 de l'humidité et d'autres conditions environnantes en cours de stocIvage. La présente invention est basée sur ces constatations inattendues. Par conséquent, la présente invention a principalement pour objet un procédé de fabrication de tablettes contenant au moins une enzyme dans lesquelles la désactivation de ltenze est diminuée de façon remarquable, ainsi que l'obtention de tablettes contenant au moins une enzyme qui résistent au vieillissement. Les enzymes pouvant êre utilisées dans la présente invention sont généralement celles qui sont susceptibles d'tre inactivées par une pression au cours de formage des tablettes sous pression. Ainsi, par exemple, on utilise habituellement une protéase (par exemple la Serratiopeptidase, l'IIirodase, la Biodiastase, etc.), l'amylase, la pancréatine, la lipase, la cellulase, lthemicellulase, la pectinase, la naringinase, la saccharase ou d'autres enzymes de digestion, des hydrolases, etc. Bien enten du, on peut utiliser ces enzymes isolément ou en combinaison.La "Serratiopeptidase" mentionnée ci-dessus est une protéase qui est produite par les microorganismes Serratia s . et qui est décrite, par exemple, dans les brevets américains nos 3 691 014 et 3 792 160 ainsi que dans le brevet Japonais n 486002. Le polyéthylène glycol devant être mélangé avec l'enzyme, qui est représenté par la formule générale HOCH2(CH2OCH2)nCH2OH possède les caractéristiques d'un polymère. On utilise avantageusement du polyéthylEne glycol ayant un poids moléculaire compris entre environ 400 et 20 000, de préférence entre environ 1 000 et 10 000. La quantité de polyéthylène glycol par rapport à l'en zyme varie selon la nature de l'enzyme ou du polyêthylène glycol ou encore d'autres conditions de traitement mais elle est gFnéra- lement de 7 partie en poids ou davantage par partie en poids d'enzyme. Le polyéthylène glycol est mélangé avec l'enzyme par les procédés généralement utilisés en pharmacie, comme un mélange, un broyage, une homogénéisation, une agitation, un malaxage, un criblage, etc. Le polyéthylène glycol peut entre incorporé à l'enzyme à l'état solide ou liquide. Lorsque le polyéthylène est à l'état solide, il est de préférence sous forme de particules fines. Plus les particules sont fines, plus le résultat obtenu est satisfaisant. Des particules fines qui traversent un tamis à ouvertures de 250 # donnent un résultat sensiblement optimal. Dans ce cas, la-quantité de polyéthylène glycol par rapport à l'enzyme est habituellement de 1 partie en poids ou davantage, et est de préférence comprise entre environ 2 et 20 parties en poids, par partie en poids d'enzyme . Une quantité supérieure à 20 parties est bien entendu ef ficabe, mais n'est pas utile au point de vue économique. Lorsque le polyéthylène glycol se trouve à l'état liquide, la quantité de ce composé par rapport i l'enzyme est habituellement de I partie en poids ou davantage, et est de préférence comprise entre environ 2 et 15 parties en poids, par partie en poids d'enzyme . Une quantité supérieure à 15 parties est bien entendu efficace, mais un tel excès est superflu au point de vue économique. Dans le cas présent, on utilise habituellement le polyéthylène glycol sous forme d'une solution dans un solvant approprié qui n'a pas d'effet fâcheux sur l'activité de l'enzyme.Un solvant approprié & cet effet est par exemple un alcool tel que le méthanol, l'éthanol, l'alcool propylique, l'alcool isopropylique, l'alcool butylique, etc., une cetone telle que l'acétone, etc., un amide tel que le diméthylforma- mide, etc., un hydrocarbare halogéné tel que le chlorure de mé- thylène, le trichloréthane, etc. Parai ces solvants, l'alcool isopropylique est préféré. Bien entendu, les solvants peuvent être utilisés isolément ou en combinaison. En plus du polyéthylène glycol, on peut incorporer un ou plusieurs autres ingrédirnts à à l'enzyme. Par exemple, on peut ajouter des excipients als que la cellulose microcristalline, le glycolate de calcium, le saccharose, le glucose, le sulfate de calcium, le phosphate de calcium, le chlorure de sodium, etc., des liants conne la dextrine, la gosse arabique, la gFla- tine, la méthylcellulose, la polyvinylpyrrolidone, l'hydroxypropyl-cellulose, l'hydroxypropylméthyl-cellulose, etc., des lubrifiants conne le stéarate de magnésium, le talc, le silicate d'aluminium synthétique, le laurylsulfate de sodium, l'acide borique, l'oxyde de magnésium, la paraffine, etc., des agents colorants, des agents aromatisants, des agents amélio- rant 1' odeur ou d'autres additifs qu- sont connns en eux-m%tes ou sont de type courant dans le domaine de la pharmacie. Les ingrédients peuvent être inoorporés en une seule fois ou progressivement. Â cet effet, on peut faire appel à un procédé connu quelconque tel qu'une granulation, un séchage, un mélange, un pétrissage, etc., selon les techniques connues dans le domaine de la préparation de médicaments sous des formes solides. Après que le mélange est terminé, on transforme le mélange résultant en tablettes contenant une enzyme, par exemple par un procédé de formage sous pression de type classique. L'expression "formage sous pression" désigne l'opération de compression du mélange résultant pour lui donner la forme soli- de désirée de tablettes. La pression utilisée au cours du forage sous pression varie selon la nature de l'ingrédient et de l'enzyme, la proportion des ingrédients, la quantité de mélange à transformer en tablettes, etc., et elle est habituellement comprise entre environ 400 et 5 000 kg/cm2, et de préférence entre environ 200 et environ 3 000 kg/cm2 Si on le désire, les tablettes peuvent être soumises à une opération dite d'enrobage dans une pellicule par des procédés bien connus. A titre d'agents d'enrobage, on peut citer l'acétophtalate de cellulose, la gomme-laque, la méthyl cellulose, l'éthyl cellulose, l'hydroxypropyl cellulose, la polyvinylpyrrolidone, etc.Les agents d'enrobage peuvent être de préférence utilisés sous forme d'une solution dans un solvant approprié tel que le méthanol, l'éthanol, l'acétone, le chlorure de méthylène, l'alcool isoopylique, l'eau, le trichloréthylène, etc. On donne ci-après des exemples concernant les modes de réalisation préférés de la présente invention. Du polyéthylène glycol dissous dans un solvant est aJouté à 1 'enzyme et on soumet le mélange à un criblage pour obtenir un mélange final. On incorpore un excipient et un liant à ce mélange. On pétrit le mélange résultant, on le sèche et on le transforme en granules. On mélange les granules avec un lubrifiant et on comprime le mélange résultant pour obtenir des tablettes. En outre, si on le désire, les tablettes sont enrobées à l'aide d'une solution d'enrobage donnant une pellicule pour obtenir le produit final, à savoir des tablettes. Exemple 1 On transforme en tablettes de la Serratiopeptidase, c'està-dire la protéase préparée selon l'exemple 1 du brevet Japonais nO 486 002, cette transformation étant exécutée d'après les formules 1, 2, 3 et 4 données plus loin. On fabrique le produit de formule I de la manière suivante. On dissout du polyéthylène glycol 6000 (Carbowax 6000) dans de l'alcool isopropylique. On met une protéase en suspension dans la solution. On ajoute la suspension à un mélqnge de lactose et d'amidon de mais. On pétrit le mélange résultant, on le sèche et on le transforme en granules. Ensuite, on transforme les granules en tablettes en utilisant des poinçons (1,12 cm de diamètre) et une pression de 2 500 kg/cm2, ce qui donne des tablettes pesant 500 mg chacune. On prépare le produit de formule 2 de la manière suivante. On mélange uniformément du polyéthylène glycol 6000 avec la protéase. On moule le mélange résultant sous forure de tablettes de la même manière que lans le cas de la formule 1. On obtient le produit de formule 3 de la manière suivante. On mélange uniformément le polyéthylène glycol 6000 avec la protéase. On aJoute ensuite du lactose et de l'amidon de mais au mélange. On malaxe parfaitement le mélange résultant et on moule le mélange final sous forme de tablettes, de la même ma- nière que dans le cas de la formule 1. Â titre de comparaison, on prépare des tablettes le contenant pas de polyéthylène glycol 6000, selon la formule 4. Dans ce cas, on aJoute la protéase à de l'isopropanol. On incorpore le mélange dans un mélange de lactose et d'amidon de mais. On pétrit le mélange final, on le sèche et on le transforme en granules. Ensuite, on transforme les granules en tablettes de la même manière que dans le cas de la formule 1. Immédiatement après la transformation en tablettes, on détermine le taux de désactivation de l'enzyme au cours de la fabrication des tablettes. Les résultats sont donnés dans le tableau 1 ci-après. Formule 1 Ingrédients ffi (P/P) Lactose 64 Amidon de mais 17 Serratiopeptidase 3 Polyéthylène glycol 6000 16 (Alcool isopropylique 30) Formule 2 Ingrédients % (P/P) Serratiopeptidase 3 Polyéthylène glycol 6000 97 Formule 3 Ingrédients ,% (P/P) Lactose 60 Amidon de mais 17 Serratiopeptidase 3 Polyéthylène glycol 6000 20 Formule 4 Ingrédients % (P/P) Lactose 80 Amidon de mais 17 Serratiopeptidase 3 (Alcool isopropylique 30) Tableau 1 Taux de désactivation de l'enzyme Type de tablettes Taux de désactivation (X) Formule I 3,8 Formule 2 O Formule 3 7,8 Formule 4 Exemple 2 Selon la formule 5, on obtient des tablettes contenant diverses quantités d'enzyme de la manière suivante.On dissout du polyéthylène glycol 6000 dans de l'alcool isopropylique. On met en suspension de la Serratiopeptidase dans cette solution. On ajoute la suspension à un mélange de lactose, d'amidon de mais et d' amidon(. On pétrit le mélange résultant, on le sèche et on le transforme en granules. Ensuite, on transforme les granules en tablettes en utilisant des poinçons (1,12 ci de diamètre) sous une pression de 500 kg/cm2, 1 000 kg/cm2 ou 2 500 kg/cm2 les tablettes pasant @@@@@@ 500 @@ kg/cm , les tablettes pesant chacune 500 mg. On détermine le taux de désactivation de l'enzyme dans ces tablettes. Formule 5 Ingrédients % (P/P) Lactose 82-I Amidon de mais 12 Amidon &alpha; 3 Serratiopeptidase 3 Polyéthylène glycol o000 X (Alcool isopropylique 30) Tableau 2 Taux de désactivation de l'enzyme (%) Pression Quantité X o 2 1 cm2 de polyéthylèal K l ~ ~ ~ O 18,3 22,1 rc,o 3 10,8 13,7 17,2 4,8 8,1 12,2 11,8 9 - - 6,2 15 2 O 1,3 2,2 suivre Tableau 2 (suite) ersion Quantité kg/ci2 de polSeU1JL500 1 .2 5X) lOne gp u. \ l 21 1 ~ 1 0,6 30 | - | 0,1 Exemple 3 On obtient des tablettes à partir dè diverses enzymes selon la formule 6 et la formule 7, de la même manière que dans 1 exemple 1. On détermine le tazut de désactivation des enzymes respectives dans le cas de la formule 6 et dans le cas de la formule 7. Formule 6 Ingrédiente % (P/P) Lactose 60 Amidon de mais 16 Polyéthylène glycol 6000 22 Enzyme 2 (Alcool isopropylique 30) Formule 7 Ingrédients % (P/P) Lactose 82 Amidon de mais 16 Enzyme 2 Enzyme 2 (Alcool isopropylique 30) Tableau 3 Taux de désactivation de l'enzyme (%) Type de l'enzyme Formule 6 Formule 7 Pancréatine 2,1 16,5 Hirodase (Enzyme de digestion 8,8 23,9 résistant aux acides) Biodiastase 5,7 35,8 Anylase 3,3 21,2 Lipase 5,8 20,8 Exemple 4 On mélange 20 parties en poids de lactose avec 1 partie en poids d 'hydroxypropyl-cellulose. Par ailleurs, on dissout 6 parties en poids de polyéthylène glycol 6000 dans 6 parties en volume d'alcool isopropylique. On azote à la solution 1 partie en poids de Serratiopep- tidase et on incorpore le mélange ci-dessus de lactose et d'hydroxypropyl-cellulose. On pétrit le mélange résultant, on le sèche et on le transforme en granules. On ajoute du stéarate de magnésium aux granules, puis on mélange parfaitement. On transforme le mélange résultant en tablettes sous une pression de 2 500 kg/cm2 pour obtenir des tablettes simples. On enrobe les tablettes d'une pellicule en utilisant 2 parties en volume d'une solution d'enrobage comprenant ?partie en poids d'acétophtalate de cellulose, 0,1 partie en poids de bioxyde de titane et 14 parties en poids d'acétone, ce qui donne finalement des tablettes pesant 500 mg chacune. R E V E N D I C A T I O N S 1.-Procédé de fabrication de tablettes contenant au moins une enzyme, caractérisé par le fait qu'il consiste a mélanger l'enzyme avec du polyéthylène glycol et a transformer le mélange résultant en tablettes, sous pression. 2.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que la quantité de polyéthylène glycol est égale ou supérieure à 7 partie en poids par partie en poids d'enzvme. 3.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que l'enzyme est la Serratiopeptidase, c'est-à-dire une protéase qui est obtenue à l'aide-de microorganismes du te Serratia 2. 4.- Procédé -selon la revendication 1, caractérisé par le fait 2 que la pression est comprise entre 400 et 5 000kg/cm 5.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que le poids moléculaire du polyéthylène glycol est compris entre 400 et 20 000. 6.- Procédé de fabrication de tablettes contenant au moins une enzyme, caractérisé par le fait qu'il consiste à ajouter au moins une enzyme à une solution contenant du polyéthylène glycol, ù tamiser le mélange et a y incorporer un mélange d'un excisaient et d'un liant, a pétrir le mélange résultant, à sécher le produit pétri et à transformer le produit séché en granules, a mélanger les granules avec un lubrifiant, à transformer le mélange en tablettes, sous pression et, si on le désire, à enrober les tablettes d'lune pellicule. 7.- Procédé selon la revendication 6, caractérisé par le fait que l'enzyme est la Serratiopeptîdase, le solvant est l'alcool isopropylique, l'excipient est la lactose, le liant est lthydroxypro- pyl-cellulose et le lubrifiant est le stéarate de magnésium, la pression utilisée étant comprise entre {t00 et 5 000 kg/cm2. 8.- Tablettes contenant au oins une enzyme obtenues par un procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 7. 9.- Tablettes contenant au moins une enzyme, caractérisées par le fait qu'elles comprennént au moins une enzyme e-t du polyéthylène glycol. 10.- Tablettes contenant au moins une enzyme selon la revendication 8, caractérisées par le fait que l'enzyme est la Serrataopeptidase. 11.- Tablettes contenant au moins une enzyme selon l'une quel conque des revendications 8 à 10, caractérisées par le fait qu'elles comprennent de la Serrationpeptidase, du polyéthylène glycol, de la lactose, de l'hydroxypropyl-cellulose et du stéarate de magnésium. 12.- Table-ttes contenant au moins une enzyme selon l'une quelconque des revendications 9 à il , caractérisées par le fait que la quantité de e polyéthylène glycol par rapport 11 enzyme est égale à 1 partie en poids, ou davantage, par partie en poids d'enzyme. 13.- Tablettes contenant au moins une eiizyme selon l'une quelconque des revendications 9 à 12, caractérisées par le fait que le polyéthylène glycol a un poids moléculaire compris entre 400 et 20 000.