FR 2296431 A1 19760730 FR 7443438 A 19741231 La présente invention, réalisée au Centre de Recherche Pierre Fabre, concerne un procédé pour la stérilisation micro biologique d'un milieu fluide, des moyens pour la mise en oeuvre de ce procédé et des applications dudit procédé. I1 est connu, dans le domaine de la pharmacie et de la cosmétologie, qu'un grand nombre de préparations, en particulier les préparations pour applications topiques, constituent des milieux de croissance ou de conservation pour les microorganismes, qu'ils soient bactéries, levures ou champignons. Or, malgré les soins apportés à la fabrication de ces préparations, l'introduction de germes au niveau des matières premières, pendant la fabrication ou en cours de conditionnement, ne peut être évitée. ta présence de ces germes entraRne souvent, outre une altération de la présen tation de la préparation (changement de couleur, changement de consistance), une altération de l'excipient et des principes actifs et, chose beaucoup plus grave, la présence de ces microorganismes peut conduire à des réactions dtintolérance pouvant être très gravesau niveau des téguments. Pour pallier ces inconvénients, la solution actuelle consiste à incorporer, dans les préparations cosmétiques ou pharmaceutiques, une ou plusieurs substances appelées "agents de conservation" ou "conservateurs" ayant la propriété d'empêcher la prolifération et d'assurer la destruction des germes présents dans lesdites préparations. On utilise habituellement, à titre de conservateurs, des substances solides telles que les esters de l'acide parahydroxybenzoSque, l'acide sorbique, l'acide déhydro-acétique, des dérivés du mercure, des dérivés cationiques, etc. On utilise également des conservateurs liquides tels que le formol, l'alcool phényléthylique, l'alcool phénoy-éthylique, etc. Or, il faut bien comprendre que ces conservateurs ne peuvent être choisis au hasard car ils doivent présenter une compatibilité totale avec les principes actifs et les excipients de la préparation. L'étude de cette compatibilité doit donc faire 11 objet de tests pharmacologiques et chimiques dans le temps, de ce fait il s'agit d'études nécessairement-longues et parfois couteuses. En outre, il est nécessaire de vérifier que ces conservateurs n induisent pas, au niveau des téguments, de réactions indésirables, réactions d'allergies par exemple. Mais il est bien connu que les réactions d'allergies sont fonction de l'utilisateur et il n'est souvent pas possible de les mettre surement en évidence au stade du laboratoire. On constate, ainsi, de plus en plus, que les conservateurs induisent des allergies quand ils ne présentent pas directement une action irritante au niveau de l'épiderme avec, dans certains cas, apparition de rougeurs, démangeaisons, érythèmes, etc. Ainsi, de façon paradoxale, l'utilisation de conservateurs conduit à des résultats voisins de ceux observés lors d'utilisation de préparations dans lesquelles prolifèrent des germes. Or, la Demanderesse a découvert qu'il était possible de pallier les différents inconvénients cités précédemment dans des conditions économiques très satisfaisantes. Pour cela, la présente invention propose un procédé pour la stérilisation microbiologique d'un milieu fluide contaminable, notamment d'une préparation cosmétique ou pharmaceutique, exempte de conservateur solide ou liquide, caractérisé en ce que l'on place ledit milieu dans une enceinte close et en ce qu'on introduit sous pression, dans ladite enceinte, un agent germicide gazeux à température et pression ordinaires. Par"procédé de stérilisation microbiologique" on entend désigner, dans la présente description, un procédé qui empêche la croissance et assure la destruction des germes, qu'ils soient des bactéries, des levures ou des champignons. Par "milieu fluide contaminable" on entend désigner, dans la présente description, un milieu non solide qui, dans les conditions normales de stockage, permet la multiplication ou au moins la conservation en vie d'un grand nombre de germes, bactéries, levures ou champignons. Un agent germicide gazeux à température et pression ordinaires est un composé ou un mélange de composés susceptible de détruire et d'empêcher la prolifération des germes, qu'il s'vagisse de bactéries, de levures ou de champignons, le ou lesdits composés étant totalement gazeux à une pression de 11 ordre de 1 atm. et à une température de l'ordre de 200C. L'agent germicide sera, de préférence, un composé unique, entièrement gazeux à la pression de mise en oeuvre du procédé et à la température ordinaire, c'est-à-dire qu'il sera choisi parmi les gaz difficilement liquéfiables. Dans le mode de mise en oeuvre préféré du procédé selon la présente invention, l'agent germicide utilisé est le protoxyde d'azote de formule : N20. Le procédé selon l'invention utilise, de préférence, une pression de l'agent germicide supérieure à 2 bars et de façon encore préférée une pression voisine de 7 bars. Pour la mise en oeuvre du procédé, l'enceinte close sera, deérence, nrécpient de de type bombe aérosol, c'est-à-dire une enceinte métallique, aluminium par exemple, munie d'un dispositif d'obturation fonctionnant par pression. L'invention concerne également, à titre d'agent germicide, le protoxyde d'azote sous une pression supérieure à 2 bars. L'invention concerne, enfin, un dispositif du type bombe aérosol pressurisée, destiné à la distribution d'un milieu fluide contaminable, caractérisé en ce que le gaz propulseur est constitué, au moins en partie, par un agent germicide gazeux à température et pression ordinaires, en particulier un agent germicide gazeux à la température ordinaire et à la pression régnant dans ltenceinte, et notamment un tel dispositif dans lequel l'agent germicide est du protoxyde d'azote. Les avantages de l'invention sont nombreux, tout d'abord sur le plan économique, il n'est plus nécessaire d'utiliser des conservateurs liquides ou solides dont certains peuvent entre onéreux, ensuite, lors de l'utilisation du milieu à la température et à la pression ordinaires, l'agent germicide étant gazeux, il disparaît presqu'instantanément et ne peut donc produire d'effet néfaste sur les téguments. On supprime ainsi, de façon élégante, la quasi-totalité des inconvénients des conservateurs de la technique antérieure, en outre, la compatibilité des gaz avec les préparations est, en générale, totale. L'un des avantages annexes de l'invention est que, dans le conditionnement des bombes du type aérosol pressurisé, l'agent germicide peut servir de gaz propulseur. Ainsi, le protoxyde d'azote qui est un gaz liquéfiable à - 900C sous la pression atmosphérique constitue un agent germicide de choix dans les bombes aérosols. Le protoxyde d'azote est, en effet, un gaz propulseur déjà utilisé pour la distribution par aérosol pressurisé de préparations liquides non contaminables, soit parce qu eleis contiennent des conservateurs, soit parce que le produit actif est lui-m8me un germicide (cas des antibiotiques), soit parce que les produits ne permettent pas la prolifération des germes (certains produits d'entretien par exemple). L'utilisation du protoxyde d'azote présente, en outre, l'avantage que celui-ci est neutre vis à vis de la majorité des constituants des préparations cosmétiques ou pharmaceutiques. Enfin, il présente une certaine solubilité dans les solutions aqueuses, ce qui assure un bon contact entre l'agent germicide et le milieu à protéger. Des essais réalisés pour mettre en oeuvre le procédé selon la présente invention vont être décrits, ci-après, sans qu'ils puissent être considérés comme limitant la présente invention. EXEMPLE 1 On conditionne en aérosol pressurisé une émulsion fluide comprenant - 7 do d'un émulgateur type stéarate de polyéthylène 7,6 - 7,6 6 % corps gras d'origine animale ou végétale, - 0,4 % d'huile essentielle - 85 % d'eau, le pH de cette émulsion étant de 6,5, qui est réputée difficile à protéger du point de vue microbiologique sans conservateur. Cette émulsion est ensemencée avec les germes suivants - Bactéries aérobies . Staphylococcus 6538 P Escherichia coli . Pseudomonas aeruginosa - Bactéries anaérobies Welchia perfringens Actinobacterium meyeri - Levure . Saccharomyces cerevisiae - Champignon Aspergillus niger. On introduit ensuite, dans l'aérosol, du protoxyde d'azote sous une pression de l'ordre de 7 bars qui correspond à la pression des aérosols commerciaux. On ensemence des milieux de culture appropriés après 7 et 14 jours avec des prélèvements de l'émulsion expérimentée. On constate que toutes les contaminations ont disparu après 7 jours sauf les spores d'Aspergillus niger. EXEMPLE 2 On conditionne en aérosol pressurisé une lotion aqueuse parfumée comprenant - 0,5 ffi d'huile essentielle, - 2 * d'un émulgateur, - 97,5 % d'eau, (pH : 7,5) qui est réputée difficile à protéger du point de vue microbiologique sans conservateur, Cette lotion est ensemencée comme à l'exemple 1 puis on introduit dans l'aérosol du protoxyde d'azote sous une pression de l'ordre de 7 bars. On vérifie l'efficacité du produit comme dans l'exemple 1 et l'on constate qu'ici encore toutes les contaminations microbiologiques ont disparu après 7 jours sauf les spores d'Aspergillus niger. La résistance de certains microorganismes sous forme de spores ne doit pas être considérée comme un inconvénient du fait qu'il s'agit là d'une forme très résistante et que de nombreux fongicides, même très puissants, ne peuvent en venir à bout. D'ailleurs, il est bien entendu que les spectres d'activité des agents germicides selon la présente invention sont nécessairement limités et que l'on doit entendre que ces agents permettent la destruction et empêchent la prolifération des microorganismes ordinairement rencontrés dans les préparations pharmaceutiques et cosmétologiques. Il est bien évident que certaines contaminations par des germes particuliers demanderont l'emploi d'agents germicides hautement spécialisés. On peut, dans ce cas, envisager l'utilisation d'un agent germicide selon l'invention comprenant plusieurs composés. Enfin, le protoxyde d'azote peut être, bien entendu, utilisé dans d'autres dispositifs pour la stérilisation de milieux contaminables. Nais, il est évident que le procédé et les dispositifs selon la présente invention sont plus particulièrement utiles pour la stérilisation de produits destinés à entrer en contact avec la peau ou destinés à être consommés. REVENDIC.t.TIONS 1) Procédé pour la stérilisation microbiologique d'un milieu fluide contaminable, notamment d'une préparation cosmétique ou pharmaceutique exempte de conservateur solide ou liquide, caractérisé en ce que l'on place ledit milieu dans une enceinte close et que l'on introduit sous pression dans ladite enceinte un agent germicide gazeux à température et pression ordinaires. 2) Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'agent germicide est gazeux à la pression de l'enceinte et à température ordinaire. 3) Procédé selon l'une des revendications 1 et 2 pour la stérilisation microbiologique d'un milieu fluide contaminable, notamment d'une préparation cosmétique ou pharmaceutique exempte de conservateur solide ou liquide, caractérisé en ce que l'on place ledit milieu dans une enceinte close dans laquelle on introduit, comme agent germicide gazeux, du protoxyde d'azote sous pression. 4) Procédé selon l'une des revendications 1 à3, caractérisé en ce que la pression de l'agent germicide est supérieure à 2 bars. 5) Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que la pression de l'agent germicide est voisine de 7 bars. 6) Procédé selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que l'enceinte close est une bombe aérosol. 7) A titre d'agent germicide pour la mise en oeuvre du procédé selon l'une des revendications 1 à 6, le protoxyde d'azote sous une pression supérieure à 2 bars. 8) Bombe aérosol pressurisée, destinée à la distribution d'un milieu fluide contaminable exempt de conservateur, condition née par la mise en oeuvre du procé-dé selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que le gaz propulseur est constitué au moins en partie par un agent germicide gazeux à température et pression ordinaires. 9) Bombe aérosol pressurisée selon la revendication 8, caractérisée en ce que l'agent germicide est gazeux à la pression régnant dans l'enceinte et à température ordinaire. 10) Bombe aérosol selon la revendication 9, caractérisée en ce que. l'agent germicide. est constitué au moins en partie par du protoxyde d'azote.