FR 2267103 A1 19751107 FR 7412714 A 19740411 La presente invention concerne des compositions à base de tétracycline, destinées au traitement d'infections mi crobiernes. Blactivite antibacterienne des tétracyclines est bien connue, mais une amélioration de la stabilité pourrait eAtre avantageuse, notamment au contact de l'air, en particulier en solution dans l'eau. I1 serait très intéressant de pouvoir utiliser en médicine des compositions antimicrobiennes àq base de tétracycline dans divers véhicules pharmaceutiques usuels, de stabilité améliorée, notamment dans s cas des produits ouverts et partiellement utilise's, par exemple-des paquets multiples de pansements imprégnés destinés à prptéger des blessures. ttinvention concerne une composition antimicrobienne contenant une tétracycline à une concentration efficace du point de vue antibactérien, de la 8-hydroxyquinoléine ou l'un de ses dérivés chlorés et/ou alkylés, à une concentration apte à stabiliser la tétracycline, et un diluant et/ou véhicule acceptable du point de vue pharmaceutique. La têtracycline et le dérivé de quinoléine peuvent entre présents tels quels ou sous la forme d'un sel. On entend désigner par "tétracycline" un représentant de la classe des antiblotiques désignés par le terme générique de tétracyclines", à savoir la tétracycline proprement dite, l'oxytetracycline, la chlorotétracycline, la diméthylchlorotétracycline, la doxycycline, la méthecycline et leurs sels tels que les chlorhydrates. La concentration de tétracycline offrant une action antimicrobienne efficace dépend ds circonstances de l'application, mais se situe généralement entre 0,1 et 6 % et de préférence entre 1 et 3 % en poids par rapport au poids de la composition. On envisage notamment d'utiliser comme agents stabilisants, la 8-hydroxyquinoléine, la 5-chloro-8-hydroxyquinoléine, la 5,7-dichloro-8-hydroxyquinoléine, la 5,7-dichloro-8-hydroxyquinaldine, leurs sels tels que les chlorhydrates et les sels de Sodium, et leurs mélanges. La concentration requise pour stabiliser la tétracycline, en retardant ou en empêchant sa position, dépend là encore des sirconstances d'application, mais se situe fréquemment entre O, 1 et 8 %, et notamment entre 1 et 3 % en poids par rapport au poids de la composition. La 8-hydroxyquinoléine proprement dite est légèrement toxique, comparée à ses dérivés chlorés et elle ne doit être utilisée qu'à des concentrations se situant vers les limites inférieures de ces gammes. tes dérivés 5-chloro-7-iodo de la 8-hydroxyquinoléine peuvent aussi être intéressants à utiliser dans les cas ou l'iode libéré n'accélère pas la décomposition de la tétracycrine. De préférence, le rapport en poids de la tétracycline à la 8-hydroxyquinoléine ou à son dérivé chloré et/on allyle est compris entre 3:1 et 1:3. tes compositions de l'invention peuvent Btre appliquées localement à des blessures, des bromures, des'ulcèreS et des infections locales, ou bien elles peuvent etre administrées par voie orale pour combattre une infection interne. Dans le traitement de blessures superficielles, il est connu que les tétracyclines sont efficaces contre une large gamme de bactéries, mais qu'il existe une possibilité di ontamination de la blessure par des spores de moisissures ou des organismes résistant aux tétracyclines. Il est connu que les blessures formées par abrasion, par exemple dans les accidents de la route, sont très fortement contaminées et ont constitué un véritable problème en ce qui concerne le traitement aux antibiotiques. On vient de découvrir que l'incorporation de 5-chloro-8-hydroxyquinoléine et d'autres 8-hydroxyquinoléines apparentées dans des formulations topiques avec la tétracycline, donnent un produit dont, non seulement, la stabilité d'entreposage est améliorée, mais qui déploie en outre une activité synergique contre un large spectre de micro-organismes. Une composition que l'on recommande d'utiliser à ces fins contient 1 à 3 % en poids de tétracycline, 1 à 7 % en poids d'une 5-chloro-8-hydroxy-quinoléine et un diluant ou véhicule acceptable du point de vue pharmaceutique. Des compositions à usage interne renferment de pré fésence,comme agent stabilisant,la 5,7-dichloro-8-hydroxy- quinoléine. tes dérivés de 8-hydroxy-quinoléine et 8-hydroxyquinaldine sont amphotères et peuvent donc, dans quelques cas, former aes sels avec la tétracycline. Toutefois, on suppose que les deux ingrédients actifs agissent séparément et que toute formation de sel qui peut avoir lieu n'altère pas les propriétés antimicrobiennes de la composition. tes compositions peuvent être préparées sous la forme de pommades, crèmes, lotions,comprimés,poudres, et aussi formula- tions en aérosols renfermant les ingrédients actifs en solution ou en suspension. ta composition sous la forme d'une pommade contient habituellement une base non aqueuse telle que la vaseline. Ces compositions sous la forme de pommades peuvent être utilisées dans la production de pansements antiseptiques par imprégnation, avec la pommade, d'une gaze en coton blanchi, coton et rayonne ou rayonne seule. Pour le traitement d'Infections et de blessures orales, telles que des ulcères, la composition peut être sous la forme d'une pommade, d'une poudre ou d'une pastille pouvant renfermer des substances convenables modifiant le goat. Les compositions meuvent aussi renfermer des médi- caments arsti-inflammatoires qui agissent par application topique, par exemple l'hydrocortisone. Elles peuvent aussi renfermer des agents antioxydants tels que le métabisulfite de sodium L'invention est illustrée par les exemples suivants, donnés à titre non limitatif. Exemple 1 On prépare une pommade topique de composition suivante % en poids Chlorhydrate de tétracycline 5-chloro-8-hydroxyquinolé ine 1 Métabisulfite de sodium 0,2 Paraffine jaune molle, quantité suffi sante pour 100 Exemple 2 On prépare une pommade-topique de composition sui vante en poids Chlorhydrate de tétracycline 2 5-chloro-8-hydroxyquinolé ine 2 Cire paraffinique 5 Antioxydant, quantité suffisante Paraffine jaune molle, complément à 100 Exemple 3 On prépare et on utilise pour imprégner une gaze, une formulation de composition suivante en poids Chlorhydrate de tétracycline 5-chloro-8-hydro xyquinoléine Lanoline anhydre 0,5 Cire paraffinique 2 Antioxydant, quantité suffisante Paraffine jaune molle, complément à 100 Exemple 4 On prépare un gel topique de composition suivante en poids Chlorhydrate de tétracycline 5-chloro-8-hydroxyquinoléine 1 Antioxydant, quantité suffisante "Polyox WSR-205l' (Union Carbide) 2 Propylène-glycol 85 Eau complément à 100 Exemple 5 On prépare une poudre stérile pour saupoudrage, de composition suivante en poids Chlorhydrate de tétracycline 2 5-chloro-8-hydroxyquinoléine Anti-cxydant, quantité suffisante Poudre absorbable stérile pour saupoudrage, complément à 100 La 5,7-dichloro -8-hydroxyquinaldine peut etre utilisée à la place de la 5-chloro-8-hydroxyquinoléine. Exemple 6 Un produit destiné à etre appliqué par pulvérisation en aérosol,est préparé en chargeant dans un récipient à aérosol de 57 ml de capacité, un concentré contenant les ingrédients suivants Chlorhydrate de tétracycline 100 mg 5-chloro-8-hydroxyquinoléine 50 mg Dipropylène-glycol 20 ml puis en plaçant le récipient sous pression par l'addition d'un gaz propulseur consistant en un mélange de 5 ml de "Propellent 11-S" 10 ml de "Propellent 12" Exemple 7 On prépare une poudre sous la forme convenable pour l'application topique à un ulcère, contenant les ingrédients sui- vants en poids Tétracycline 1 5-chloro-8-hydroxyquinoléine Natrosol en particules microsco piques 4 Gomme arabique séchée par pulvé- risation 7 Lactose 90,5 Menthol 0,5 Parfum/antioxydant , quantité suffisante Exemple 8 On prépare des pastilles orales contenant chacune les ingrédients suivants en en poids Oxytétracycline 5 mg 5-chloro-8-hydroxyquinoléine 10 mg Parfum/antioxydant, quantité suffisante Excipient (sucre), complément à 1 Exemple 9 On prépare des comprimés contenant chacun les ingrédients suivants %en poids Tétracycline 20 mg 5-chloro-8-hydroxyquinoléine 40 mg Antioxydant, quantité suffisante Amidon 100 mg Lactose, complément à 1 g L'activité antimicrobienne et la stabilité de la pommade de l'exemple 1 (contenant 1 % de chlorhydrate de tétracycline et 1 % de 5-chloro-8-hydroxyquinoléine) ont été comparées avec celles d'une pommade similaire contenant 1 % de chlorhydrate de tétracycline. On a constaté le fait surprenant que la pommade (A) contenant 1 % de chlorhydrate de tétracycline et 1 % de 5-chloro8-hydroxyquinoléine était bien plus stable que la pommade (B) contenant 1 % de chlorhydrate de tétracycline seule. Ainsi, l'examen visuel d'échantillons conservés à l'abri de la lumière pendant trois mois et six mois à la température ambiante, à 370C et à 450C n'a fait apparaltre qu'un léger changement de couleur dans le cas de la pommade (A), tandis que la pommade (B) a pris une teinte très foncée. Couleur Température ambiante 370C 450c ini- tiale 3 mois 6 mois 3 mois 6 mois 3 mois 6 mois A Jaune Jaune Jaune Jaune Jaune Jaune Jaune clair clair gris gris blanc B Jaune Jaune Jaune Jaune Jaune Jaune Jaune clair orangé orangé brun rouge brun rouge De mime, pendant ltentreposage, on ne note pas de dégagement de gaz pour la première pommade après conservation à la température ambiante, à 770C ou à 450C pendant trois ou six mois, tandis que dans le cas de la seconde pommade, après entreposage à la température ambiante pendant trois ou six mois, on note une légère odeur, et dans le cas d'échantillons conservés pendant trois ou six mois à 37 ou 450C, l'odeur est accentuée. les éc-hantillons de pommades (A) et (B) conservés à températures élevées pendant six mois ont été examines par chroma- tographie en couche mince sur plaques de cellulose. Des échantillons d'un gramme des pommades ont été lavés à l'éther de pétrole (point d'ébullition 40-60 C) pour éliminer ainsi la 5-chloro-8-hydroxy-quinoléine et la base gélifiée en laissant comme résidu la tétracycline et tous ses produits de décomposition.Le résidu a été repris dans du méthanol (2 nil), du chloroforme (2 ml) et de l'eau (10 gouttes) et fractionné sur des plaques cellulosiques de chromatographie préparative en couche mince,en effectuant ltélution avec un mélange d'acétate d'éthyle, d'isopropanol et d.'eau à 70:40:20. le produit principal de décomposition de l'échantillon de pommade (B) conservé à 37 et à 450C a été extrait des plaques et on a constaté qu'il équivalait à 5 % et respectivement 8 % de la tétracycline. Dans ces deux échantillons de pommade (B), on a trouvé qu'une faible propor- tion d'un second produit de décomposition. Dans le cas de la pommade (A), les signes éventuels de décomposition ont été négligeables. es propriétés microbiologiques de la pommade (A) ont été comparées avec celles de la pommade (B) et d'une pommade (C) (contenant I % de 5-chloro-8-hydroxyquinoléine) vis-à-vis de toute une gamme d'organismes sous leur forme pathogène. On a effectué deux essais pour apprécier les propriétés bactériostatiques des formulations. Essai d'inhibition par zones On prépare des plaques en utilisant 20 mi de gélose nutritive contenant 0,4 mi de culture. On en prépare pour chaque culture soumise à l'essai On ménage un puits-au centre de chaque plaque, que l'on remplit ensuite du gel soumis à l'essai. On fait incuber les plaques à 370C pendant 8 heures. On mesure les zones claires d'inhibition qui se sont développées. Essai de concentration inhibitrice minimale On ajoute 5 g de gel à 95 ml de bouillon nutritif et on fait incuber le mélange pendant environ 16 heures à 370C. On procèae airsi pour améliorer la dispersion du gel dans le bouillon nutritif et pour permettre donc à l'antibiotique de se dissipper dans le milieu liquide A la température ambiante, le gel n'est nullement miscible au bouillon. Le loerdemain, on effectue des dilutions au double du volute de la première dilution à 1:20, jusqutà une dilution finale de 1:10240, c'est-à- dire un total de 10 dilutions. On fait incuber chaque dilution avec une goutte de dilution à 1 pour 10 d'une culture en bouillon, âgée de 24 heures, de l'organisme soumis à l'essai, et on fait incuber les tubes à 370C pendant 72 heures. La concentration inhibitrice minimale du gel est la dilution maximale s'opposant au développement de l'organisme. D'après les résultats de concentration inhibitrice minimale et les résultats de l'inhibition par zones indiqués sur le tableau suivant,on note un certain synergisme entre les deux agents contre certains organismes, par exemple Staphylococcus albus, E. coli, certaines espèces du genre Proteus et Elebsiella aerogenes. TABLEAU Résultats : Sensibilité à l'anti- Résultats de l'effet d'inhibition biotique sur @ale Culture biotique sur gels Zone Résultat de l'inhi- Résultats de con- bition centration inhibi- Dilution minimale trice minimale s'opposant au dévelop Diamètre de la pement de l'organisme zone en mm Tétracycline CHC A B C A B C Bacille coliforme 1:: 5'8 S S 8* 3 5 Bacille coliforme 608 S S 5 5 5 Bacille coliforne 578 S s 6 0 6 160 C20 320 E. coli 566 S S 7* 5 5 E. coli 559 S S 16 4 9 80 E. coli 604 S S 8 6 7 80 E. coli 026 R s 4 0 3 20* E. coli 9395 S S 10* 3 3 80* 20 Proteus 371 ss 9 6 0 6 160* Proteus 20522 SS S 5 0 5 Proteus 20029 SS S 6* 0 4 Proteus 20523 SS S 6 0 6 Proteus 20531 SS S 2 0 2 Pr. mirabilis 5887 SS S 3 0 2 Pr. mirabilis 25942 SS S 7 0 7 Pr. rettgeri 7475 S S 7 * 5 3 80* Pr. vulgaris 4635 S S 9 * 2 4 40* Pr. mirabilis 25702 S S 0 0 0 Ps. multivorans BS S S 0 0 0 Ps. multivorans ME S S 11 7 16 40* Ps. aeruginosa 5267 S R 0 0 0 Ps. aeruginosa 1999 S R 0 0 0 Kleb. aerogenes 8172 S S 14 7 13 640* 160 Kleb. aerogenes 22352 S S 8 5 8 40* Serratia marcescens S S 2 * 0 0 Strep. faecalis 20190 R 2 5* O 3 20 Strep. fascalis 559 R R 0 0 2 20 Staph. albus 474 R S 6 0 5 Staph. albus 476 R S 6 0 6 80* Staph. albus 475 R S 6 0 5 80* Staph. albus 479 R S 6 0 4 40 Staph. aureus 20477 R S 4 * o 2 40 Staph. aureus 590 R S 5 o 4 160* Staph. pyogenes R S 7 0 6 40 Staph. aureus 7447 S S 9* 5 7 1280 Candida albicans R S 19 0 20 40 R = résistant S = sensible SS = légèrement sensible * fait présumer un effet synergique entre le chlorhydrate de tétracycline et la 5-monochloro-8-hydroxyquinoléine. Exemple 10 On divise en trois parties une solution à 1 % en poids de chlorhydrate de tétracycline dans l'eau. On ajoute à la première partie 1 % en poids de 5-chloro-8-hydroxyquinoléine. On ajoute à la deuxième partie 1 fo en poids de 5,7-dicliloro- 8-hydroxyquinoléine. On n'ajoute rien à la troisième partie. Les trois compositions aqueuses sont ensuite maintenues à 370C, à l'air libre. La décomposition de la tétracycline dans la troisième partie est très rapide et une couleur brune se développe en une semaine. les deux autres parties montrent une bonne stabilité, après conservation pendant une semaine. Il est évident que la décomposition de la tétracycline en solution aqueuse est notablement ralentie en présence de dérivés chlorés de 8-hydroxyquinoléine. Dans les exemples On suppose que le produit "Polyox W S R - 205" est un polyoxyéthylène-glycol. Le produit 1,Natrosol" désigne une hydroxyéthylcellulose. REVENDICATIONS Composition antimicrobienne présentée sous une forme permettant une application topique, comprenant comme seuls agents antimicrobiens, d'une part de 0,1 à 5 % en poids d'une tétracycline par rapport au poids de la composition, d'autre part de 0,1 à 8 % en poids, par rapport au poids de la composition, de la 8-hydroxy-quinoléine ou d'un dérivé chloré ou alkylé de 8-hydroxy-quinoléine ou de ces deux dérivés pour stabiliser la tétracycline, et un diluant ou véhicule inerte acceptable du point de vue pharmaceutique. 2. Composition antimicrobienne selon la revendication se présentant sous forme d'une pommade dont la base n'est pas aqueuse. 3. Composition antimicrobienne selon l'une quelconque des revendications 1 et 2 comprenant en outre au moins un médi- cament anti-inflammatoire. 4. Composition antimicrobienne selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 dans laquelle la concentration de la tétracycline est comprise entre 1 et 3 ffi en poids par rapport au poids de la composition. 5. Composition antimicrobienne selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 dans laquelle l'agent de stabilisation est le 8-hydroxy-quinoléine, la 5-chloro-8-hydroxy-quinoléine, la 5,7-dichloro-8-hydroxy-quinoléine ou un mélange de ces composés. 6. Composition antimicrobienne selon l'une quec'onque des revendications 1 à 5 dans laquelle la concentration de la 8-hydroxy-quinoléine ou de son dérivé chloré ou alkylé ou de leur mélange est comprise entre 1 et 3 se en poids par rapport au poids de la composition. 7. Composition antimicrobienne selon l'une quelconque des revendications 1 à 6 dans laquelle le rapport de la tétracycline à la 8-hydroxy-quinoléine ou à son dérivé chloré ou alkylé ou à leur mélange est compris entre 1:3 et 3:1 en poids. 8. Composition antimicrobienne présentée 'sous une forme propre à l'application topique comprenant entre 1 et 3 ffi en poids de tétracycline, entre 1 et 3 % de 5-chloro-8-hydroxyquinoléine et un diluant ou véhicule-acceptable du point de vue pharmaceutique.