FR 2283700 A1 19760402 FR 7526927 A 19750902 La présente demande se rapporte à un appareil et à un procédé H 'icres de recueil du sang1 dans lesquels la séparation au @@@@précipité riche en Facteur ViI d'avec le reste du plasma se:nglin est facilitée d ":ne manière perrectionnee et dans lesquels la renderlnent en cryoprécipité riche en Facteur VIII est eilleur. Plus eus milliers d'unités de sang sont recueillies chaque année dans des appareils de recueil du sang à poches multiples, comprenant plusieurs poches scellées, compatibles avec le sang, reliées ensemble par des tubes compatibles avec le sang. Dans une opération typique, on introduit une aiguille de donneur dans la veine d'un patient. Cette aiguille est reliée par un tube convenable, tel qu'un tube en vinyle, à une première poche à sang contenant une petite quantité de stabilisant ordinaire des globules sanguins, tel que du ACD ou du CPD. On laisse le sang remplir la première poche à sang de l'appareil, on retire du Fatient l'aiguille du donneur, et on scelle le tube reliant aiguille à la poche. Après quoi on centrifuge l'appareil de recueil du sang afin d'obliger les globules sanguins à se déposer et se séparer du plasma. On exprime ensuite le plasma à travers un autre tube pour l'introduire dans une deuxième poche à sang, tandis que les cellules restent dans la première poche à sang. Facultativement, les plaquettes peuvent être récoltées à ce stade par une seconde centrifugation. On congèle ensuite le plasma de la deuxième poche à sang, soit par réfrigération soit par immersion dans un mélange de glace carbonique et d'éthanol ou dans un solvant similaire. Après cela, on laisse ordinairement se dégeler le plasma congelé, et on le centrifuge une fois encore afin d'amener la matière solide contenue dans le plasma liquefié, froid, à se déposer. Cette matière solide est appelée du cryoprécipité riche en Facteur VIII. Après la centrifugation d'usage, on exprime le plasma, qui est maintenant pauvre en cryoprécipité, à travers un tube pour l'introduire dans une troisième poche à sang en vue de son utilisation ultérieure, laissant derrière le cryoprécipité riche en Facteur VIII. Ce précipité riche en Facteur VIII est la source d'un agent thérapeutique important pour empêcher les symptômes d'un type courant d'hémophilie. Selon la présente invention, un appareil et un procédé d'utilisation dudit appareil sont fournis qui permettent le recueil de rendements accrus de cryoprécipité riche en Facteur VIII sans faire appel à une seconde phase de centrifugation et qui aboutissent à des économies appréciables en temps et en efforts en comparaison de la méthode actuelle d'obtention du cryoprécipité riche en Facteur VIII. L'appareil perfectionné de recueil du sang incorpore une série de poches scellées, compatibles avec le sang, reliées ensemble par des conduits compatibles avec le sang. Le moyen de recueil du sang, telle qu'une aiguille de saignée reliée à un tube en plastiquevinyle, communique avec l'intérieur de la première des poches. De ce fait,le sang est recueilli dans la première poche, puis est centrifugé afin de le débarrasser des globules sanguins. Le plasma est ensuite exprimé, à travers le conduit de raccordement approprié, de la première poche a la deuxième poche. Facultativement, les plaquettes peuvent être récoltées par une autre centrifugation au cours de laquelle les plaquettes restent dans la deuxième poche et le plasma est envoyé dans une poche supplémentaire. La poche contenant le plasma est scellée, typiquement par soudage à chaud ou par pincement du conduit, et congelée afin de former le cryoprécipité riche en Facteur VIII. Pour la phase finale de séparation, il est préférable de laisser le plasma congelé se dégeler lentement, en permettant au plasma liquéfié de passer par filtration à travers le moyen filtrant et de sortir de la poche pour entrer, à mesure qu'il fond, dans un autre récipient de conservation. L'opération de dégel peut typiquement être exécutée entre 20 et 200C (de préférence entre 2 et 50C) pour un rendement maximum en cryoprécipité. La poche congelée est suspendue et laissée fondre lentement et s'égoutter à travers le moyen filtrant et la sortie de la poche pour entrer dans un autre récipient. L'opération de dégel et d'égouttage prend approximativement de 18 à 24 heures à 50C dans une poche à sang Fenwal contenant une unité de plasma sanguin. Une fois l'égouttage achevé, la poche contenant le cryoprécipité riche en Facteur VIII peut être scellée et dissociée des autres poches solidaires. Une unité de cryoprécipité est ainsi obtenue (souvent avec un rendement accru en Facteur VIII). Egalement, une unité de plasma pauvre en cryoprécipité passe dans le récipient de conservation, qui est habituellement la troisième ou la quatrième poche de l'appareil. Le moyen filtrant utilisé dans la séparation du cryoprécipité d'avec le plasma doit impérativement présenter des caractéristiques bien déterminées. I1 doit laisser passer le plasma pauvre en cryoprécipité, tout en retenant le cryoprécipité riche en Facteur VIII. Du plasmapauvre en cryoprécipité peut passer par filtration à travers un filtre ordinaire à membrane ou du type à tamis,avec un pore de 2 microns. Toutefois, le cryoprécipité encrasse les filtres actuels à membrane ou à tamis. C'est pourquoi une partie de l'appareil à plusieurs poches de sang doit tenir compte du problème de l'encrassement et le résoudre. L'expression moyen filtrant" telle qu'utilisée ici signifie donc un filtre qui peut laisser passer par filtration le plasma pauvre en cryoprécipité tout en retenant le cryoprécipité riche en Facteur VIII et qui apporte une solution au problème de l'encrassement. A l'heure actuelle, le meilleur moyen filtrant, possédant ces propriétés de non encrassement, est un filtre d'épaisseur. *Un filtre d'épaisseur consiste en des matières fibreuses, granulaires ou frittées, comprimées, enroulees, chauffées, ou d'une autre manière agglomérées pour former un enchevêtrement sinueux de canaux d'ecoulement". (Millipore's High Volume Pharmaceutical and Biological Filtration,(1972) page 2). Du fait qu'un filtre d'épaisseur est un enchevêtrement irrégulier de matière à trois dimensions, il possède une grande surface interne sur laquelle du cryoprécipité peut être retenu. I1 ne s'encrassera donc pas aisément, à mesure que le plasma passe par filtration dans le filtre. Du fait aussi qu'un filtre d'épaisseur est un enchevêtrement de matière à trois dimensions, sa capacité de filtration ne peut pas se définir par rapport à la grosseur des particules qu'il laissera passer. La capacité de filtration d'un filtre d'épaisseur s'exprime plutôt expérimentalement pa rapport au pourcentage des particules d'une grosseur bien déterminée qui y passeront par filtration. I1 s'ensuit que des paramètres externes influeront sur la vitesse de filtration des filtres d'epaisseur. Le débit, la pression et 1 'adhésivité des particules sont trois de ces paramètres. Le moyen filtrant préférable à l'heure actuelle, utilisé dans l'appareil perfectionné de recueil du sang de la présente invention, est un filtre d'épaisseur en mousse polyuréthane à cellules ouvertes. La forme spécifique de réalisation décrite dans ce qui suit illustre un appareil typique pour mettre en oeuvre l'invention de la présente demande. Un appareil triple poche" est représenté, ayant une certaine similitude avec les triples poches Fenwal d'usage courant, mais d'autres structures tels que des appareils "simple poche", "double poche", et "quadruple poche" peuvent être utilisées si on le désire, modifiées selon la présente invention. Sur le dessin La Figure 1 est une vue en plan d'un appareil "triple poche" de recueil du sang, utilisant l'invention de la présente demande, avec une portion arrachée pour montrer un détail de construction ; et La Figure 2 est une vue en coupe transversale faite suivant la ligne 2-2 de la Figure 1. En examinant le dessin, un appareil de recueil du sang est représenté comprenant des poches à sang 10, 12, 14 scellées, compatibles avec le sang, reliées ensemble par des conduits 16, 18, compatibles avec le sang, qui dans le cas présent sont des tubes en plastique vinyle. Comme on l'a indiqué dans ce qui précède, un bon nombre de détails spécifiques globaux des constructions des poches 10, 12, 14 et de leurs conduits respectifs 16, 18 sont bien connus, et des poches similaires faites en plastique vinyle sont à l'heure actuelle disponibles dans le commerce. Une aiguille 20 de recueil du sang, garnie normalement d'un couvercle 22 de protection d'aiguille, est représentée comme étant reliée d'une manière ordinaire par un tube 24 en plastique vinyle à l'intérieur de la première poche 10. Le tube 16 en plastique vinyle et un tube souple de raccordement 17 assurent une communication entre la première poche 10 et la deuxième poche 12, tandis que le tube 18 en plastique vinyle et un tube de raccordement 19 similaire assurent une liaison entre la deuxième poche 12 et la troisième poche 14. Chacune des trois poches comporte une paire d'orifices de sortie 26, lesquels sont entourés de gaines ordinaires arrachables 28, représentées spécifiquement comme étant du modèle utilisé actuellement dans les poches à sang Fenwal. Selon la présente invention, un moyen filtrant est installé dans l'intérieur de la deuxième poche 12, en occupant une position dans laquelle il recouvre un tube 32 de l'orifice de sortie de la poche 12. Le tube 32 de l'orifice de sortie, qui est habituellement en plastique, communique lui-meme par l'intermédiaire du tube 18 avec l'intérieur de la poche 14. Le moyen filtrant 30 peut être un filtre d'épaisseur en mousse de polyuréthane à cellules ouvertes, vendu sous la marque de fabrique Scott Felt par la Scott Paper Company. Cette matière est une matière en feuille, épaisse, la qualité utilisée spécifiquement ici étant celle correspondant à une épaisseur de 9,5 mm environ. La matière, à l'état initial, comporte approximativement 40 pores par cm, mais elle est ensuite comprimée au huitième de son épaisseur, et durcie à chaud de sorte que la matière ne se redilate pas notablement après la suppression de la compression. En examinant également la Figure 2, une fente 34 est représentée comme étant découpee longitudinalement dans lemoyen filtrant 30. Un tube 32 d'orifice est installé à l'intérieur de la fente. Le tube 32 d'orifice et le moyen filtrant 30 sont placés, comme représenté en Figure 1, entre les deux feuilles plastiques 35, 37 qui constituent la poche de sang 12, et la périphérie 36 des feuilles 35, 37 est soudee à chaud l'une contre l'autre, avec entre elles la partie inférieure 38 du moyen filtrant 30, de telle façon que la périphérie 36, la partie inférieure 38 du moyen filtrant 30, et le tube 32 de l'orifice de sortie sont scellés ensemble pour former une masse scellée, d'une seule pièce. Les deux extrémités du tube32del'orifice de sortie font saillie de part et d'autre de la périphérie 36 soudée à chaud, pour une communication du liquide à travers cette dernière. Un tube 19 est raccordé au tube 32 delaorifice de sortie au moyen d'un manchon 40, lequel peut être fait en matière plastique ou analogue. Le manchon 40 enferme une membrane 42, qui empeche l'écoulement du liquide hors de la poche 12 à travers le tube 32 de 11 orifice , tant que la membrane n'a pas été rompue par une canule tubulaire pointue 44, laquelle est construite d'une manière similaire au dispositif de rupture de membrane du Brevet des Etats-Unis d'Amérique n03.110.308, et est retenue dans un alésage du tube de raccordement 19, étant donné que l'alésage du tube 18 est préférablement trop petit pour recevoir la canule. A titre de variante, le dispositif pour rompre la membrane 42 peut être semblable à celui du Brevet des Etats-Unis d'Amérique nO 3.685.795, ou encore n'importe quel autre dispositif classique de rupture d'une membrane peut être utilisé. Un manchon similaire 40, comportant une membrane 42, communique avec l'intérieur de la première poche de sang 10, tout en étant retenu avec la périphérie correspondante 36, soudée à chaud, de la poche 10 pour une communication étanche avec l'intérieur de la poche. Une autre canule creuse 44, retenue dans un tube de raccordement 17, est prévue pour la même fonction de rupture de la membrane 42. Les tubes obturés 46, sur les poches 12 et 14, sont les orifices utilisés au cours de la stérilisation des poches, pour permettre la mise à l'air libre des poches pendant et après l'opération de stérilisation. A l'issue de cette dernière, les tubes sont obturés, comme représenté. Des numéros de série identiques peuvent être placés sur les tubes en vinyle 16, 18, et 24 de la-manière décrite dans le Brevet des Etats-Unis d'Amérique n 2.986.619 de Bellamy, pour l'identification des poches respectives après qu'elles ont été dissociées les unes des autres et pour l'analyse de petits échantillons du contenu des poches. Des suspentes 40, au bas des poches 10 et 14, permettent de retourner les poches sur un dispositif pour perfusion pour l'administration normale à un malade du contenu respectif des poche Cela étant, on peut utiliser l'appareil "triple poche" de recueil du sang de la Figure 1 en obtenant une unité de sang frais, par prise de sang normale avec l'aiguille 20 et recueil d'une unité de sang dans la poche 10. Ce recueil étant terminé, on peut ensuite sceller le tube donneur 24 par pincement, ou par soudage à chaud dans une soudeuse HEMATRON, vendue par la Fenwal Division of Travenol Laboratories, Inc. La poche 10 contient une petite quantité de stabilisant ordinaire des globules sanguins, telle qu'une solution stabilisante ACD ou CPD. A l'issue du recueil sang, et du scellement du tube 24, on centrifuge la poche à sang afin d'obliger les globules sanguins de l'échantillon à se déposer au fond de la poche 10.Après cela, on fait avancer la canule 44 de la poche 10 en manipulant le tube souple de raccordement 17 de façon à pousser la canule 44 à travers la membrane. On peut ensuite exprimer avec soin le plasma à travers le tube 16 pour l'envoyer dans la deuxième poche 12, en laissant derrière dans la poche 10 les cellules tassées. On sectionne ensuite normalement le tube 16 après pincement ou soudage à chaud, et on peu retirer de l'appareil la poche 10, ses cellules tassées étant stabilisées et conservées par la suite d'une manière classique jusqu'à ce que leur utilisation se révele nécessaire. On place ensuite les autres poches de l'appareil dans un environnement de-congélation, par exemple un bain d'éthanol-glace carbonique ou une réfrigération mécanique, afin de congeler à l'état solide le plasma contenu dans la poche 12. Après que le plasma s'est solidifié, on réchauffe avec les doigts de la main ou analogue la canule 44 associée à la poche 12, ainsi qu'une portion appropriée du tube souple de raccordement 19, afin de pouvoir faire avancer la canule pour rompre sa membrane associée 42. Cette rupture ouvre une communication entre la poche 12 et le tube 18. On suspend ensuite la poche 12 (si on le désire, au moyen des trous 54) dans un réfrigérateur à une température au-dessus du point de congélation du plasma. La température préférable est de l'ordre de 50C. On place la poche 14 dans une position verticale, au-dessous de la poche 10, de façon à ce qu'elle reçoive goutte à goutte du plasma pauvre en cryoprécipité, à mesure que le plasma fond. Le plasma fondant dans la poche 12 passe par filtration à travers le moyen filtrant 30 et le tube 32 de l'orifice de sortie et par conséquent à travers les tubes 19 et 18 pour entrer dans la poche 14. Après que le plasma s'est complètement dégelé et qu'il a été filtré avant d'entrer dans la poche 14, on peut sceller le tube 18 en procédant comme décrit précédemment et ensuite le sectionner afin de pouvoir retirer la poche 14 et le plasma pauvre en cryoprécipité, en vue de conserver ce dernier jusqu'au moment nécessaire pour son administration. Une quantité abondante de cryoprécipité riche en Facteur VIII reste sur le moyen filtrant 30 à l'intérieur de la poche 12. Cette matière peut ensuite être congelée pour sa conservation, si on le désire. Lorsqu'il est nécessaire d'utiliser le cryoprécipité, on peut le dissoudre en ajoutant 10 cm3 environ de sérum physiologique stérile, normalement à la température ambiante, à l'intérieur de la poche 12. Cette opération peut être effectuée en ouvrant l'une des gaines de fermeture 28, à feuille arrachable, de la poche 12 et en introduisant dans l'orifice de sortie 26,apparent, un dispositif pour injection de médication du type vendu couramment par le Fenwal Division of Travenol Laboratories Inc. A l'aide d'une seringue et d'une aiguille à injection, on ajoute ensuite le sérum dans la poche à travers le dispositif pour injection de médication. Après quoi, on manipule et on lave avec le sérum dans la poche le moyen filtrant 30, jusqu'à ce que tout le cryoprécipité soit dissous dans le sérum. Cela étant, on retourne la poche de façon à ce que les orifices de sortie 26 soient orientes vers le bas, et on retire de la poche au moyen de l'aiguille de la seringue le sérum physiologique, avec le cryoprécipité dissous. On notera que le moyen filtrant 30 est avantageusement placé du c6té de la poche opposé à celui où se trouve l'orifice de sortie 26 utilisé dans cette opération, de sorte qu'il est alors possible de retourner la poche avec l'orifice de sortie orienté vers le bas, le moyen filtrant 30 étant quant à lui hors de contact avec le liquide et au-dessus de ce dernier. Par la suite, on peut exprimer à la main le moyen filtrant afin d'en extraire essentiellement la totalité de la solution de cryoprécipité. REVENDICATIONS 1. Appareil perfectionné de recueil du sang qui comprend des récipients compatibles avec le sang, incluant un récipient scellé, compatible avec le sang, pour recevoir du plasma sanguin, caractérisé en ce qu'il comprend un moyen filtrant à l'intérieur dudit récipient du plasma, ledit moyen filtrant étant placé de manière à recouvrir une sortie dudit récipient contenant du plasma, grace à quoi du plasma sanguin dans ledit récipient recevant du plasma peut être congelé, et ensuite dégelé pour former du cryoprécipité riche en Facteur VIII dans ledit récipient contenant du plasma, et du plasma pauvre en cryoprécipité peut être prélevé dudit récipient à travers ledit moyen filtrant et ladite sortie, tandis que ledit cryoprécipité est retenu dans ledit second récipient par ledit moyen filtrant. 2. Appareil de recueil du sang selon la revendication 1, dans lequel ledit moyen filtrant est un filtre d'épaisseur. 3. Appareil de recueil du sang selon la revendication 2, dans lequel ledit filtre d'épaisseur est un filtre en mousse à cellules ouvertes. 4. Appareil de recueil du sang selon la revendication 3, dans lequel ledit filtre en mousse à cellules ouvertes est en polyuréthane. 5. Appareil perfectionné de recueil du sang à poches multiples, qui comprend une série de poches scellées, compatibles avec le sang, ainsi que des conduits compatibles avec le sang, et un moyen de recueil du sang communiquant avec l'intérieur d'une première desdites poches, caractérisé en ce qu'il comprend Un moyen filtrant placé à l'intérieur d'une deuxième desdites poches pour recouvrir une sortie de ladite deuxième poche, grâce à quoi du plasma sanguin, exprimé depuis ladite première poche dans ladite deuxième poche, peut être congelé pour former du cryoprécipité riche en Facteur VIII dans ladite deuxième poche, et au cours du dégel, du plasma pauvre en cryoprécipité peut être prélevé de ladite deuxième poche à travers ledit moyen filtrant et ladite sortie, tandis que ledit cryoprécipité est retenu dans ladite deuxième poche par ledit moyen filtrant. 6: Appareil de recueil du sang selon la revendication 5, dans lequel ledit moyen filtrant est un filtre d'épaisseur. 7. Appareil de recueil du sang selon la revendication 6, dans lequel ledit filtre d'épaisseur est un filtre en mousse à cellules ouvertes. 8. Appareil de recueil du sang selon la revendication 7, dans lequel ledit filtre en mousse à cellules ouvertes est en polyuréthane. 9. Appareil de recueil du sang de la revendication 5, dans lequel ladite sortie de la deuxième poche permet le passage de liquide dans une troisième poche, pour recevoir de manière aseptique du plasma pauvre en cryoprécipité. 10. Procédé amélioré de recueil du sang qui consiste à introduire du plasma sanguin contenant du Facteur VIII dans un récipient scellé compatible avec le sang ; à congeler ledit plasma sanguin à l'intérieur dudit récipient scellé afin de provoquer la précipitation de cryoprécipité riche en Facteur VIII et à dégeler ledit plasma sanguin, caractérisé en ce qu'il consiste à faire passer, à travers un moyen filtrant, le plasma sanguin décongelé, danses conditions susceptibles d'empêcher la redissolution effective dudit cryoprécipité, ledit moyen filtrant étant placé à 11 intérieur dudit récipient de façon à en obstruer une sortie, grâce à quoi du plasma pauvre en cryoprécipité est prélevé depuis ledit récipient, et ledit cryoprécipité est retenu sur le moyen filtrant à l'intérieur dudit récipient. 11. Procédé selon la revendication 10, dans lequel ledit plasma sanguin congelé est laissé se dégeler lentement à une température au-dessous de 200C, tandis que le plasma est admis à passer à travers ledit filtrant rapidement à mesure qu'il fond et à s'échapper par ladite sortie du récipient. 12. Procédé selon la revendication 10,dans lequel ledit plasma sanguin est laissé se dégeler à 2-50C. 13. Procédé selon l'une des revendications 10, 11 et 12, dans lequel ledit moyen filtrant est un filtre d'épaisseur. 14. Procédé selon la revendication 13, dans lequel ledit filtre d'épaisseur est un filtre en mousse à cellules ouvertes. -15. Procédé selon la revendication 14; dans lequel ledit filtre en mousse à cellules ouvertes est en polyuréthane. 16. Procédé selon la revendication 10, dans lequel ledit plasma pauvre en précipité est transféré à un autre récipient scellé compatible avec le sang par l'intermédiaire d'un conduit compatible avec le sang. 17. Procédé selon la revendication 16, dans lequel du sérum physiologique est ajouté par la suite au deuxième récipient, afin de redissoudre le cryoprécipité, et ledit sérum contenant du cryoprécipité est extrait par la suite dudit deuxième récipient. 18. Procédé selon la revendication 17, dans lequel, après que le cryoprécipité a été redissous, tout précipité retenu dans le filtre est enlevé du filtre. 19. Procédé selon la revendication 19, dans lequel l'enlèvement du cryoprécipité du filtre est effectué par lavage du filtre avec une solution saline. 20. Procédé selon la revendication 19, dans lequel l'enlèvement du cryoprécipité du filtre est effectué par expression du filtre. 21. Appareil permettant de transformer du plasma sanguin en cryoprécipité riche en Facteur VIII et en plasma pauvre en cryoprécipité, caractérisé en ce qu'il comprend un récipient scellé de congélation de plasma, comportant un moyen permettant d'y introduire du plasma sanguin un récipient scellé recevant du plasma pauvre en cryoprécipité; un moyen déterminant un trajet d'écoulement entre lesdits récipients ; et un moyen filtrant accouplé à ces derniers de manière active afin de filtrer le plasma transféré par l'intermédiaire dudit trajet d'écoulement entre les deux récipients, grâce à quoi du plasma sanguin peut être introduit dans ledit récipient de congélation du plasma et y être congelé, et ensuite dégelé pour former du cryoprécipité riche en Facteur VIII, et du plasma pauvre en cryoprécipité peut être transféré à travers ledit moyen filtrant audit récipient recevant du plasma pauvre en cryoprécipité. 22. Procédé de transformation de plasma sanguin contenant du Facteur VIII en cryoprécipité riche en Facteur VIII et en plasma pauvre en cryoprécipité en utilisant un filtre, caractérisé en ce qu'il consiste (a) à congeler le plasma sanguin contenant du Facteur VIII (b) à dégeler le plasma sanguin congelé d'une manière telle que du cryoprécipité est effectivement empeché de repasser en solution (c) à filter sur le filtre et à séparer une portion notable du plasma liquéfié obtenu dans l'opération (b) afin de disposer de volumes distincts de plasma pauvre en cryoprécipité et de plasma riche en Facteur VIII. 23. Procédé selon la revendication 22, dans lequel, après qu'une séparation effective s'est produite, une petite quantité de plasma séparé pauvre en cryoprécipité est introduite a nouveau dans le cryoprécipité séparé riche en Facteur VIII afin de former un plasma de cryoprécipité riche en Facteur VIII facile a manipuler et à conserver. 24. Procédé selon la revendication 22, dans lequel, après qu'une séparation effective s'est produite, une petite quantité de solution saline est introduite dans le cryoprécipité séparé riche en Facteur VIII afin de former une solution de cryoprecipité riche en Facteur VIII facile à manipuler et à conserver.