FR 2243696 A1 19750411 FR 7332985 A 19730913 La présente invention concerne des dérivés, nouveaux et utiles, de 6-amino-uracile. La demanderesse a réussi à préparer de nouveaux dérivés de 6-amino-uracile ayant la formule où Rl est un groupe alcoyle inférieur qui peut être substitué par un groupe hydroxy ou un groupe alcoxy inférieur, R2 est un atome d'halogène, un groupe nitro ou un groupe alcoyle inférieur et n est égal à 0, 1 ou 2. Des études ultérieures réalisées sur ces composés (I) ont montré, alors que l'on ne s'y attendait pas, qu'ils possèdent in vitro une forte activité inhibitrice à l'é- gard de la phosphodiestérase d'adénosine-3' > 5'-phosphate cyclique et présentent d'excellentes propriétés pharmacologiques : ils facilitent la diurèse, empêchent l'agglutination des thrombocytes et agissent comme bronchodilatateurs. Le principal objet de la présente invention est de fournir les nouveaux dérivés de 6-aminouracile de formule (I) qui possèdent d'excellentes propriétés pharmacologiques. L'invention vise également une composition pharmaceutique comprenant un ou plusieurs de ces composés. L'invention a aussi pour objetun procédé de préparation de ces dérivés de 6-amino-uracile (I) nouveaux et utiles. Dans la formule (I), le groupe alcoyle inférieur représenté par R1 peut avoir une chalne droite ou ramifiée, être saturé ou non, et peut comporter avantageusement jusqu'à 4 atomes de carbone comme par exemples groupes méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, allyle, n-butyle, isobutyle, tertio-butyle et 2-méthylallyle. Ces groupes alcoyle inférieurs peuvent être substitués par un groupe hydroxy et/ou un groupe alcoxy inférieur. Le groupe alcoxy inférieur peut comporter de préférence jusqu'à 4 atomes de carbonate, comme les groupes méthoxy, éthoxy, n-propoxy, allyloxy, n-butoxy. Comme exemples de groupes alcoyle inférieurs substitués, on peut citer les groupes p-hydroxyéthyle, y-hydroxypropyle, p-méthoxyéthyle, p-éthoxyéthyle, p-méthoxypropyle et des groupes similaires. L'halogène représenté par R2 peut être le chlore, le brome, l'iode ou le fluor. Le groupe alcoyle inférieur représenté par R2 peut avoir une channe droite ou ramifiée, être saturé ou non saturé et comporte avantageusement jusqu'à 4 atomes de carbone, comme les radicaux méthyle, méthyle, n-propyle, allyle, n-butyle, sec-butyle et 2-méthylallyle. R2 peut occuper dans la formule (i) n'importe laquelle des position o, m, ou ç du radical benzyle si n est égal à 1. Si n est égal à 2 deux substituants R2 qui peuvent être identiques ou différents peuvent occuper deux quelconques de ces positions. Les dérivés de 6-amino-uracile (I) peuvent être obtenus, par exemple, en faisant réagir un 6-amino-uracile de formule ou R1 est tel que défini précédemment, avec un composé de formule où R2 et n sont tels que définis ci-dessus et X est un halogène, la réaction ayant lieu en présence d'une base inorganique. Dans la formule (III), l'halogène représenté par X peut être le chlore, le brome, l'iode ou le fluor. Les 6-amino-uraciles de formule (II) sont bien connus et peuvent être aisément préparés par des procédés bien connus décrits par exemple dans " Journal of Organic Chemistry" 17 (1951) p.l879 et sea. Les composés de formule (III) sont également bien connus et peuvent être préparés par des procédés connus, décrits par exemple dans "Journal cf Organic Chemistry" 10 (1945) p. 228 et seq. Ces composés (III) peuvent, en général, être employés en une quantité d'environ 2 à 10 moles pour 1 mole des 6-aminouraciles (II). La base inorganique est de préférence un hydroxyde alcalin par exemple l'hydroxyde de sodium, de potassium, de lithium, etc.,) ou un carbonate alcalin (carbonate de potassium, carbonate acide de sodium, etc.), et est utilisée avantageusement sous forme de solution laqueuse. On peut également utilter avantageusement un alcoolate alcalin obtenu en faisant réagir un métal alcalin monovalent, (sodium ou potassium) avec un alcool (alcool éthylique ou méthylique). On peut, dans ce cas, employer un excès d'alcool qui agira comme solvant. Cette base inorganique est, en général et de préférence, utilisée en excès : 2 à 10 équivalents molaires sur la base du 6-amino-uracile (II). Cette réaction se produit généralement rapidement lorsqu'on emploie un solvant. Le solvant peut être, avec avantage, un mélange d'eau et d'alcool (aicool méthylique, éthylique, etc.) ou du diméthylformamide. On opère, en général, à une température comprise entre 50 et 1200C et, de préférence, entre 70 et 90 C. La réaction produit le dérivé de 6-amino-uracile (I) qui comporte, en position 3 et 5 du 6-amino-uracile (II) deux radicaux benzyle substitués ou non,- provenant du composé (III) utilisé. Les dérivés de 6-amino-uracile (I) ainsi produits, peuvent entre aisément séparés du mélange réactionnel et purifiés par des méthodes bien connues : extraction, recristallisation, chromatographie, etc. Les nouveaux dérivés de 6-amino-uracile (I) montrent, in vitre, une forte action inhibitrice à l'égard de la phosphodiestérase de I'adénoslne-3'J5'-phosphate cyclique (se rapporter aux essais détaillés ci-dessous) et ont d'excellentes propriétés pharmaeologiques, fortes et prolongées, comme diurétiques, antiagglutinants des thrombocytes et comme bronchodilatateurs. ils sont, par conséquent > utiles non seulement comme médicaments mais aussi comme -réactifs d'essais biochimiques. Les dérivés de 6-amino-uracile (I) peuvent être administrés, soit seuls soit en combinaison avec un ou plusieurs excipients utilisés en pharmacie, sous forme de poudres, eomprimés, solutions ou émulsions par la bouche ou sous forme de liquides injectables. Des compositions pharmaceutiques eontenant un ou plusieurs de ces composés peuvent etre préparés suivant les méthodes utilisées dans la préparation de poudres, de capsules; de comprimés, de pilules, de liquides pour injections etc. Le choix de l'excipient peut être déterminé selon le mode d'administration du produit, la solubilité du composé (I) etc. La posologie de ces dérivés de 6-amino-uracile (I) dépend, entre autres, du mode d'administration et du but poursuivi. Pour le traitement chez un adulte humain d'un oedème, dtne thrombose ou d'un asthme bronchique etc., une dose quotidienne de 0,1 à 3 g est avantageuse. Les exemples qui suivent ont uniquement pour but d'illustrer des modes de réalisation préférés de la présente invention et n'en restreignent pas la portée. Dans les exemples, la relation entre parties en poids et parties en volume correspond à celle entre grammes et millilitres. EXEMPLE 1 Dans une solution de 1,55 partie en poids de 1-éthyl6-amino-uracile dans 20 parties en volume d'éthanol à 95% (volu- me/volume), on ajoute 6 parties en volume d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium à 15% (poids/volume) et 2,4 parties en poids de chlorure de benzyle. Le mélange est chauffé à reflux et agité durant 3 heures, puis il est concentré jusqu'à siccité sous pression réduite -et le résidu est secoué énergiquement avec un mélange de 50 parties en volume de chloroforme et 50 parties en volume d'eau. La couche aqueuse est ensuite extraite avec 50 parties en volume de chloroforme. Les couches de chloroforme sont réunies et concentrées jusqu'à siccité sous pression réduite. Le résidu est dissous dans 5 parties en volume de chloroforme et on fait passer la solution sur une colonne garnie avec 50 parties en poids de gel de silice. La colonne est éluée avec 500 parties en volume de chloroforme et les fractions contenant le composé recherché sont réunies et évaporées jusqu'à siccité sous pression réduite. Le procédé donne 1,04 partie en poids de l-éthyl-3,5-bisbenzy1-6- amino-uracile sous forme d'une poudre blanche. Le spectre d'absorption dans l'ultraviolet d'une solution du produit dans l'éthanol montre un maximum à 285 m/u. Analyse élémentaire : Calculé pour C20H21N302 C 71,62 H 6,31% N 12,53k trouvé C 71,69% H 6,43% N 12,35% EXEMPLE 2 A une solution de 3,4 parties en poids de l-(p-hy- droxyéthyl)-6-amino-uracile dans 40 parties en volume d'éthanol à 95% (volume/volume), on ajoute 10 parties en volume d'une solution aqueuse à 16% (poids/volume) d'hydroxyde de sodium et 8,64 parties en poids de bromure de p-nitrobenzyle. Le mélange est chauffé à reflux et agité durant 15 minutes, puis il est concentré jusqu'à siccité sous pression réduite. Le résidu est ensuite bien secoué avec un mélange de 50 parties en volume de chloroforme et 50 parties en volume d'eau.Le résidu insoluble est soigneusement lavé à l'eau bouillie puis recristallisé, à deux reprises avec chaque fois 300 parties en volume d'acétone. On obtient 1,2 partie en poids de 1-(ss-hydroxyéthyl)-3,5-bis- i-nitrobenzyl)-6-amino-uracile sous forme d'aiguilles jaune pâle fondant à 225-227 C. Le spectre d'absorption dans l'ultraviolet dSune solution du produit dans l'éthanol montre un maximum à 275 m/u. Analyse élémentaire : Calculé pour C20H19N507 C 54,40% H 4,33% N 15,84% Trouvé C 54,34% H 4,30% N 16,52% EXEMPLE 3 Dans 100 parties en volume d'éthanol à 95% (volume/ volume), on dissout 5,49 parties en poids de 1-éthyl-6-amino- uracile, puis on ajoute 15 parties en volume d'une solution aqueuse à 15% (poids/volume) d'hydroxyde de sodium et 6,48 parties en poids de bromure de p-nitrobenzyle. Le mélange est chauffé à reflux et agité durant 15 minutes, puis traité comme indiqué dans l'exemple 1. Le procédé donne 1,37 partie en poids de l-éthyl- 3,5-bis(p-nitrobenzyl)-6-amino-uracile sous forme de granules jaunes fondant à 215-217 C. Le spectre d'absorption dans l'ultraviolet d'une solution dans le chloroforme montre un maximum d'absorption à 273,5 m/u. Analyse élémentaire Calculé pour C20H19N5O6 C 56,47% H 4,o% N 16,46% Trouvé C 56,62% H 4,71% N 16,31% EXEMPLE 4 Dans 80 parties en volume d'éthanol à 95% (volume/ volume), on dissout 7 parties en poids de l-éthyl-6-amino-uracile puis on ajoute 12 parties en volume d'une solution aqueuse à 15% (poids/volume) d'hydroxyde de sodium et 3,64 parties en poids de chlorure de p-chlorobenzyle. Le mélange agité est chauffé à reflux durant une heure, puis traité comme indiqué dans l'exemple 1. On obtient un sirop de 1-éthyl-3,5-bis(p-chlorobenzyl)-6-amino-uraci- le.On le recristallise dans 5 parties en volume d'éther éthylique à la suite de quoi on obtient 1,1 partie en poids de granules blancs fondant à 157 C Le spectre d'absorption dans l'ultraviolet d'une solution dans l'éthanol indique deux maxima à 275 m/u et 221 m/u. Analyse élémentaire Calculé pour C20H19N3C1202 : C 59,41% H 4,74% N 10,39% Trouvé C 59,31% H 4,79% N 10,37% Calculé C1 17,54% Trouvé Cl 17,46% EXEMPLE 5 Dans 20 parties en volume d'éthanol à 95% (volume/ volume), on dissout 1,55 partie en poids de l-éthyl-6-amino-uracile, puis on ajoute 4 parties en volume d'une solution aqueuse à 15% (poids/volume) d'hydroxyde de sodium et 2,81 parties en poids de chlorure de p-méthylbenzyle. Le mélange est chauffé à refux et agité durant une heure, puis traité comme indiqué dans l'exemple 1. On obtient une poudre jaune de l-éthyl-3,5-bis(p méthylbenzyl )-6-amino-uracile. Le spectre dans l'ultraviolet d'une solution dans 1'éthanol montre un maximum d'absorption à 279,5 m/u. Analyse élémentaire Calculé pour C22H25N302 : C 72,70% H 6,93% N 11,56% Trouvé C 71,91% H 6,96 N 11,28 EXEMPLE 6 La réaction entre les 6-amino-uraciles de formule (II) et les composés de formule (III) en présence d'une base inorganique en utilisant les mêmes procédés que dans les exemples précédents produit les composés indiqués dans le tableau 1. Tous sont nouveaux et utiles et sontcouverts par la formule (I). TABLEAU 1 Analyse élémentaire Spectre d'absorption dans Composé formule calculé trouvé l'ultraviolet et point de brute (%) (%) fusion C 52,75 C 52,49 Solvant : Ethanol 1-isobutyl-3,5-bis(2,4-di C22h21N3O2Cl4 H 4,22 H 4,40 chlorobenzyl)-6-amino-uracile #max. = 283 m N 8,38 N 8,21 Cl 28,32 Cl 27,96 Point de fusion : 181-183 C C 69,10 C 69,23 Solvant : Ethanol 1-(ss-méthoxyéthyl)-3,5 C21H23N3O3 H 6,34 H 6,12 # max. = 285 m bisbenzyl-6-amino-uracile H 11,48 N 11,11 C 73,65 C 73,62 1-allyl-3,5-bis-(p-méthyl- Solvant : Ethanol C21H25N3O3 H 6,72 H 6,54 benzyl)-6-amino-uracile #max. = 280 m N 11,18 N 10,95 C 73,25 C 73,04 1-méthyl-3,5-bis-(2,4-di- Solvant : Ethanol C23H27N3O2 H 7,22 H 7,11 méthylbenzyl)-6-amino-ura- #max. = 282 m cile N 11,12 N 10,85 EXEMPLE 7 Quelques exemples de formulations pratiques dans lesquelles les composés de la présente invention sont utilisés pour traiter un oedème, l'asthme bronchique, une thrombose etc., sont donnés ci-dessous A. (Comprimé) (1) l-éthyl-3,5-bisbenzyl-6-amino-uracile 20 mg (2) lactose 35 mg (3) amidon de mais 150 mg (4) cellulose microcristalline 30 mg (5) stéarate de magnésium 5 mg 240 mg par comprimé (1), (2), (3), les 2/3 de la quantité de (4) et la moitié de la quantité de (5) sont soigneusement mélarEés, puis le mélange est granulé.Le tiers restant de (4) ainsi que la moitié restante de (5) sont ajoutés aux granules et le tout- est moulé en comprimés qui peuvent, en outre, être enrobés avec un agent de revAetement convenable, le sucre par exemple. B. (Capsule) (1) l-éthyl-3,5-bis(p-chlorobenzyl)-6-amino- 20 mg uracile (2) lactose 102 mg (3) cellulose microcristalline 70 mg (4) stéarate de magnésium 8 mg 200 mg par capsule (1), (2), (3) et la moitié de (4) sont soigneusement mélangés et le mélange est granulé. la moitié restante de (4) est ajoutée aux granules et le tout est introduit dans une capsule de gélatine. ESSAI L'activité inhibitrice de dérivés représentatifs de 6-amino-uracile (I) de la présente invention à l'égard de la phosphodiéstérase d'adénosine-3',5'-phosphate cyclique est déterminée par le procédé suivant Un mélange de 900 ml de sang de boeuf frais et de 100 ml d'une solution aqueuse à ,8% (poids/volume) de citrate de sodium est centrifugé à 2000 tr/mn (rayon du rotor : 9 cm), durant 10 minutes jusqu'à séparation d'une couche supérieure. La couche inférieure est centrifugée à nouveau à 3000 tr/mn durant 8 minutes pour séparer une nouvelle couche supérieure. Les deux couches supérieures sont réunies et centrifugées à 4000 tr/mn pendant 10 minutes afin de précipiter les plaquettes. Les plaquet- tes bovines ainsi obtenues sont lavées deux fois, chaque fois avec 50 ml d'une solution saline et mises en suspension dans 25 ml d'une solution tampon de tris-HCl 0,025 M de pH 7,5. La suspension est soumise, à deux reprises, aux opérations successives de congélation rapide dans un bain de neige carbonique dans l'acétone et liquéfaction à 370C. La suspension ainsi traitée est utilisée comme préparation de phosphodiestérase d'adénosine-3',5'-phosphate cyclique de plaquettes bovines. On mélange 0,1 ml de cette préparation avec 0,1 ml d'une solution aqueuse 0,02 M d'adénosine-3',5'-phosphate cyclique, 0,1 ml d'une solution 0,1 à 10 nM dtun composé d'essai dans le diméthylsulfoxyde, 0,2 ml d'une solution tampon de tris-HCl 0,5 Mde pH 7,5 > 0,1 ml d'une solution aqueuse de MgS04 0,02 M 0,1 ml de venin de serpent (concentration 1 mgpar ml) et avec de l'eau en une quantité telle que le volume total soit 1 ml. Le mélange est incube durant 15 minutes à 37 C, après quoi on ajoute au mélange 0,5 ml d'une solution aqueuse d'acide sulfurique lON. La quantité de phosphate inorganique f-ormé dans le mélange réactionnel est déterminée suivant la méthode décrite P. 8 et seq. de "Methods in Biochemical Analysis" vol. 3, publié par Interscience Publishers, Inc. New York et Londres, en 1956. la constante d'inhibition (Ki) est calculée pour chacun-des composés d'essai respectifs. Les constantes dtinhibition des divers composés sont comparées, avec celle de la théophylline qui est l'un des produits le plus souvent employé comme inhibiteur delta phosphodiestérase d'adénosine-3',5'-phosphate cyclique, constante déterminée dans les mêmes conditions que ci-dessus. Les résultats obtenus sont rassemblés dans le tableau 2 ci-dessous. TABLEAU 2 Action in@@@itrice sur la pnospno Composé diestérase d'adénosine-3',5'-phos phate cyclique de plaquettes bovines 1-éthyl-3,5-bisbenzyl-6- 175 fois celle de la théophylline amino-uracile l-éthyl-3,5-bis(p-ohloro- 108 fois celle, de la théophylline benzyl)-6-amino-uracile 1-éthyl-3,5-bis(p-méthyl- 400 fois celle de la théophylline benzyl)-6-amino-uracile REVENDICATIONS 1. Dérivé de 6-amino-uracile ayant la formule ci-dessous où R1 est un groupe alcoyle inférieur qui peut être substitué par un groupe hydroxy ou par un groupe alcoxy inférieur, R2 est un atome d'halogène, un groupe nitro ou un groupe alcoyle inférieur, et n est égal à 0, 1 ou 2. 2. Dérivé de 6-amino-uracile selon la revendication 1, caractérisé par le fait que R est un groupe alcoyle inférieur ayant jusqu'à 4 atomes de carbone, qui peut être substitué par un groupe hydroxy ou par un groupe alcoxy inférieur ayant Jusqu'à 4 atomes de carbone. 3. Dérivé de 6-amino-uracile selon la revendication 2, caractérisé par le fait que R1 est un groupe éthyle. 4. Dérivé de 6-amino-uracile selon la revendication 1, caractérisé par le fait que n est égal à 0. 5. Dérivé de 6-amino-uracile selon la revendication 1, caractérisé par le fait que R2 est un atome d'halogène et n est égal à 1 ou 2. 6. Dérivé de 6-amino-uracile selon la revendication 5, caractérisé par le fait que l'halogène est le chlore. 7. Dérivé de 6-amino-uracile selon la revendication 1, caractérisé par le fait que R2 est un groupe alcoyle inférieur ayant jusqu'à 4 atomes de carbone et n est égal à 1 ou 2. 8. Dérivé de 6-amino-uracile selon la revendication 7, caractérisé par le fait que le groupe alcoyle inférieur est un groupe méthyle. 9. Dérivé de 6-amino-uracile selon la revendication 2 1, caractérisé par le fait que R est un groupe nitro et n est égal à 1. 10. Dérivé de 6-amino-uracile selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'il est le l-éthyl-3,5-bisbenzy1-6- amino-uracile. 11. Dérivé de 6-amino--uracile selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'il est le l-éthyl-3,5-bis-(p-chloro benzyl ) -6ramino-uracile 12. Dérivé de 6-amino-uracile selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'il est le l-éthyl-3,5-bis(p-méthyl- benzyl)-6-amino-uracile. 13. Dérivé de 6-amino-uracile selon. la revendication 1, caractérisé par le fait qu'il est le l-(B-hydroxyéthyl)-3,5- bis(p-nitrobenzyl)-6-amino-uracile. @ 14. Dérivé de 6-amino-uracile selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'il est le 1-isobutyl-3,5-bis(2,4- dichlorobenzyl)-6-amino-uracile. 15. Procédé de préparation de dérives de 6-aminouracile ayant la formule où R1 est un groupe alcoyle inférieur qui peut être substitué par un groupe hydroxy ou par un groupe alcoxy inférieur, R2 est un atome d'halogène, un. groupe nitro ou un groupe alcoyle inférieur et n est égal à O, 1 otz 2, procédé caractérisé par le fait qu'il consiste à faire réagirun 6-amino-uracile de formule où R1 est tel que défini précédemment, avec un composé de formule où R2 et n sont tels que définis précédemment et X est un atome d'halogène, en présence d'une base inorganique. 16. Procédé selon la revendication 15, caractérisé par le fait- que la base inorganique est un hydroxyde alcalin ou un carbonate alcalin. 17. Procédé selon la revendication 15, caractérisé par le fait que l'halogène est du chlore ou du brome. 18. Composition pharmaceutique, caractérisée par le fait qu'elle comprend comme ingrédient actif au moins un des dérivés de 6-amino-uracile ayant la formule ou R1 est un groupe alcoyle inférieur qui peut être substitué par un groupe hydroxy ou par un groupe alcoxy inférieur, -R2 est un atome d'halogène, un groupe nitro ou un groupe alcoyle inférieur et n est égal à 0, 1 ou 2, auquel est ajouté un des excipients utilisés en pharmacie. 19. Composition pharmaceutique selon la revendication 18, caractérisée par le fait que R1 est un groupe alcoyle inférieur ayant jusqu'à 4 atomes de carbonate, qui peut être substitué par un groupe hydroxy ou par un groupe alcoxy inférieur ayant jusqu'à 4 atomes de carbone. 20. Composition pharmaceutique selon la revendication 19, caractérisée par le fait que R1 est un groupe éthyle. 21. Composition pharmaceutique selon la revendication 18, caractérisée par le fait que n est égal à 0. 22. Préparation pharmaceutique selon la revendication 18, caractérisée par le fait que R2 est un atome d'halogène et n est égal à 1 ou 2. 23. Préparation pharmaceutique selon la revendication 22 > caractérisée par le fait que l'halogène est du chlore. 24. Préparation pharmaceutique selon la revendication 18, caractérisée par le fait que R2 est un groupe alcoyle inférieur ayant jusqu'à 4 atomes de carbone et n est égal à 1 ou 2. 25. Préparation pharmaceutique selon la revendication 24, caractérisée par le fait que le groupe alcoyle est un groupe méthyle. 26. Préparation pharmaceutique selon la revendication 18, caractérisée par le fait que R2 est un groupe nitro et n est égal à 1.