FR 2244493 A1 19750418 FR 7329234 A 19730809 L'invention a pour objet des sels de dérivés de flavonoldes, des procédés de préparation de ces dérivés ainsi que des médicaments renfermant dans leur substance active au moins l'un des susdits sels. Les dérivés selon l'invention sont constitués par des sels de dérivés de flavonoldes avec des acides aminés et répondent à la formule générale suivante Ar[(OCHRCOOH).H2N(CH2)m CH(NH2) COOH)n (I) dans laquelle - Ar représente un reste ayant la structure d'une flavone ou d'une flavanoFe - R représente un atome dthydrogène, un~radical alcoyle ou un groupe aromatique tel que le radical phényle, - n est un nombre entier de 1 à 5, et - m est un nombre entier de 3 à 5 Dans la formule générale sus-indiquée le substituant Ar représente de préférence un reste ayant la structure de la quercétine, de la naringénine et de l'hespérétine, de formules respectives IIJ III et IV suivantes :: Quant à l'acide aminé représenté dans ladite formule générale, il est constitué par un acide aminé basique,de préférence la lysine de formule V ou ltornithine de formule VI: En ce qui concerne le procédé de préparation conforme à l'invention des susdits sels, il comprend les étapes successives suivantes 1 - réaction en milieu basique des aglycones de dérivés de fla vonofdes du genre flavone ou flavanone avec soit un acide o(-halo- géné, soit un ester a-halogéné, la réaction étant suivie dans ce cas d'une hydrolyse de l'ester obtenu, ce qui mène à des atlycones substitués par au moins un groupe oxyalcanoique 2 - réaction du dérivé oxyalcanolque ainsi obtenu avec un acide aminé basique. La mise en oeuvre de ce procédé conduit à'des sels de dérivés oxyalcanoiques de flavonofdes avec des acides aminés, stables et sous dans l'eau. Dans la première étape, on procède tout d'abord à la mise en solution dans un solvant polaire de l'aglycone et,après avoir soumis le mélange à une agitation en milieu basique, à température ambiante, on ajoute l'ester ou l'acide a-halgéné. On porte.alors le mélange réactionnel à une température de l'ordre de 40 à 9O C. On maintient le mélange à cette température pendant environ 3 à 12 heures. A la fin de cette opération on concentre le mélange réactionnel,puis,dans le cas où l'on a mis en oeuvre un ester -halogéné,on effectue une hydrolyse de l'ester formée milieu basique, pendant une heure. La solution d'acide oxyalcanoique ainsi obtenue est alors acidifiée; l'acide oxyalca nolque y ciPiteJest isolé et recristallisé. Pour la deuxième étape, on effectué la neutralisation de l'acide oxyalcanoique obtenu à l'aide d'un pH mètre. On opère à température ambiante et on ajoute à l'acide dissous dans un solvant organique, par exemple dans un mélange d'eau et d'alcool, l'acide aminé en solution aqueuse. Selon une variante du procédé de l'invention les susdits aglycones sont préparés au cours d'une étape préalable dans laquelle on soumet à une hydrolyse acide des dérivés de flavonoides du genre susindiqué, comportant au moins un groupe oside. On donne ci-après, à titre illustratif, des exemples numériques de préparation de sels selon l'invention. EXEMPLE 1 Préparation d'oxyacétate de lysine quercétine. On effectue tout d'abord la synthèse de l'acide oxyacétique quercétine à partir de la quercétine. a) acide oxyacétipue quercétine On prépare un mélange de 5 g de quercétine (0,016 mole) dans 80 ml d'acétone et on ajoute 4,5 g (0,032 mole) de carbonate de potassium. Après avoir soumis le mélange obtenu à une agitation durant deux heures > on ajoute 11,7 g (0,07 mole) de bromacétate d'éthyle. Après avoir chauffé à reflux. le mélange réactionnel durant 6 heures, on élimine l'acétone peton obtient la 3, 3t, 4', 7 tétracarbéthoxyméthyl-quercétine.On soumet ce composé à une hydrolyse en le traitant durant une heure avec une solution de carbonate de sodium à 10%, à une température de iQOOC, et on obtient par acidification une poudre insoluble dans l'eau, constituée par l'acide oxyacétique quercétine (P.F. 130 C, rendement 60%). b) oxyacétate de lysine quercétine On fait réagir, à une température de 20 C, 2 g {Q03 mole) d'acide oxyacétique quercétine avec 1,8 g de L-lysine (0, O 12 mole). Après neutralisation, on soumet le mélange à une dessication sous vide. On obtient le produit recherché sous forme d'une poudre jaune. Ce produit se décompose sans fondre. EXEMPLE 2 Préparation d'oxyacétate de lysine narinqénine On effectue tout d'abord la synthèse de l'acide oxyacétique naringénine à partir de la naringéninet elle-même obtenue à partir de naringine. a1) On chauffe à reflux, pendant 12 heures de la naringine du commerce avec une solution d'acide sulfurique à 2% et l'on obtient ainsi l'aglycone correspondant ou naringénine. a2.) On dissout 4,1 g de naringénine (0,015 mole) dans 40 ml d'acétone en présence de 3,3 g de carbonate de potassium (0,024 mole). Après une demi heure d'agitation, on ajoute lentement 5,3g de chloracétate d'éthyle (0,044 mole). On chauffe le mélange réactionnel à 600C pendant 7 heures. On élimine ensuite l'acétone et par addition d'eau, on obtient un dérivé cristallisé. Ce dérivé est soumis à une hydrolyse à l'aide de carbonate de sodium et à cet effet on chauffe le mélange à ébullition pendant une heure.0n obtient, après acidification, un précipité recristallisé dans un mélange alcool-eau : 1-5 (rendement 60%) b) on traite 3-g du susdit précipité (0,01 mole) à l'aide de 1,4 g de L-lysine (0,01 mole) à température ambiante. on obtient alors après dessication le 7-oxyacétate de lysine naringénine.La solubilité de ce dérivé dans l'eau est de 15 g/l. (fusion pâteuse à 170 C) EXEMPLE 3 Préparation d'oxypropionate de lysine narinqénine On opère comme dans l'exemple 2 mais en traitant dans ltétape a2 la naringénine par du chloropropionate d'éthyle. Après hydrolyse, recristallisation et neutralisatan par la L-lysine, on obtient un sel stable, soluble dans 1eau à raison de 80 g/l à un pH neutre. (fusion pateuse à 180 C). EXEMPLE 4 Préparation de phénylacétate de lysine narinqénine En opérant dans les mêmes conditions que celles de l'exemple 2 mais en traitant 8,1 g de naringénine (0,03 mole) par 6 g de chloro-phénylacétate d'éthyle (0,03 mole), on obtient après hydrolyse, recristallisation et neutralisation par 1,2 g de lysine, (ope9 mole), un sel stable soluble dans l'eau, à raison de 80 g/l à un pH neutre. Ce sel est constitué par le 7-oxyphénylacétate de lysine naringénine (fusion pateuse à 200 C). EXEMPLE 5 Préparation d'oxyphénylacétate de lysine hespérétine a1) On effectue, en opérant comme dans l'exemple 4, l'hydrolyse acide de l'hespéridine ce qui conduit à l'*espérétine. a2) Dans 80 ml de diméthylformamide, on dissout 6,4 g d'hespé rétine (0,02 mole) en présence de 2,8 g de carbonate de potassium (0,02 mole). Puis on ajoute lentement 5,9 g d'ct-chlorophé- nylacétate d'éthyle (0,04 mole). Après avoir chauffé le mélange réactionnel à 80"C pendant 10 heures, on concentre et on soumet à une hydrolyse basique à I'aide de carbonate de sodium. On obtient, après acidification un précipité qu'on lave à l'eau. c) On neutralise 2 g de ce précipité (g06 mole l'aide de 8,7 g de L-lysine 40,06 mole). On obtient le 7-oxyphénylacétate de lysine hespérétine. Ce dérivé est soluble dans l'eau à pH 7 (fusion pateuse à 200"C). EXEMPLE 6 : Préparation d'oxyacétate de lysine hespérétine On opère comme dans l'exemple 5, mais en traitant l'hespé- rétine par de ltoxyacétate d'éthyle. On obtient un dérivé soluble dans l'eau à raison de 80 g/l (fusion pâteuse à 210 Les dérivés selon l'invention présentent des propriétés thérapeutiques de grand intérêt, notamment une action vitaminique P ainsi qu'il ressort des expérimentations réalisées à laide de ces substances. Ces expérimentations comprennent des essais pharmacologiques, une étude toxicologique et des essais cliniques. Les essais-pharmacologiques ontété réalisés sur 1'animal et comportent la détermination de l'action des dérivés sur la résistance capillaire par le test de Menkin ou test au bleu trypan, la détermination de l'action des médicaments selon 1'inven- tion vis-à-vis de l'adrénaline par le test dit de protection à l'égard de l'adrénaline et l'étude de l'action antidiffusante des susdits médicaments par le test d'activité antihyaluronidasique. On rapporte ci-après les résultats obtenus dans les essais effectués avec ltoxyacétate de lysine naringénine. a) test de Menkin on administre à des lapins 50 mg/kg de la substance à étudier et l'on constate que le temps d'apparition du bleu trypan est double de celui obtenu avec les témoins. b) test de protection à l'égard de l'adrénaline on réalise l'essai sur un organe isolé. On note un effet positif pour des concentrations en substance selon l'invention de 5 y/ml en présence de sérum albumine. c) test d'activité antihyaluronidasique : l'administration d'une solution de substance à 10 y/ml dans une membrane traitée par la hyaluronidase conduit à un retour à la normale du débit. Les résultats de ces tests montrent que les médicaments selon l'invention sont doués d'une avantageuse action hypotensive, antidiffusante et d'une action sur la résistance capillaire. L'intérêt de ces composés est encore accru du fait de leur faible toxicité. En déterminant la DL50 de ces composés chez le rat et la souris, par administration par voie orale, on n'observe aucun décès même pour des doses supérieures à 3 g/kg. L'ensemble de ces résultats d'essais montre les propriétés avantageuses des susdits dérivés. Ces derniers peuvent être utilisés dans le traitement d'affections vasculaires tout particulièrement dans les indications suivantes : syndromes hémorragiques, troubles circulatoires, athérosclérose. Les médicaments selon l'invention peuvent être administrés à l'homme par voie orale sous les formes utilisables habituellement pour les médicaments à action vitaminique P, et notamment se présenter sous forme de comprimés. La dose posologique unitaire est de 0,100 g à 0,500 g, de préférence 0,250 g. La dose thérapeutique quotidienne est de 0,200 g à 2 g de préférence 0,500g Dans les formulations pharmaceutiques, les dérivés selon l'invention constituant le principe actif des médicaments peuvent être associés aux adjuvants et supports usuels. Ci-après, on donne à titre illustratif des exemples de composition pharmaceutique. Comprimé : Composition A - oxyacétate de lysine naringénine 0,250 g - excipient q.s.p. un comprimé enrobé Composition B - oxypropionate de lysine naringénine 0,200 g - excipient q.s.p. un comprimé enrobé On donne ci-dessous deux exemples d'application thérapeutique des médicaments selon l'invention. Dans ces essais cliniques on a utilisé respectivement ltoxyacétate de lysine naringénine ou A, et l'oxypropionate de lysine naringénine ou B. a) traitement à l'aide de A de troubles circulatoires caractérisés par l'engourdissement des membres supérieurs et par des -douleurs vespérales des membres inférieurs Mme X ,,.,., 53 ans souffre d'engourdissement permanent de ses mains et de ses avant-bras, allant jusqu'à lui rendre difficile l'accomplissement de taches journalières et tout particulièrement la conduite de sa voiture. Elle se plaint en outre de douleurs violentes dans les jambes apparaissant dans la soirée et se pour suivant pendant la nuit sans qu'elle puisse trouver le repos. Dans le cadre du traitement on administre à la patiente deux comprimés deux fois par jour de A dosés chacun à 250 mg. Dès le troisième jour l'engourdissement des membres s'at- ténue pour disparaître au bout de 8 jours, en même temps qu'une amélioration extrêmement nette concernant les douleurs des membres inférieurs est obtenue. b) traitement à l'aide de B, d'oedèmes vespéraux des membres inférieurs, accompagnés de douleurs articulaires Mme Y ,,,,,, 51 ans présente le soir un oedème considérable des membres inférieurs partant du tiers inférieur de la jambe et intéressant les chevilles et les pieds. En outre, Mme Y se plaint de douleurs articulaires au niveau des genoux qui présentent euxmêmes une certaine augmentation-de volume. Le traitement consiste à administrer deux comprimés de B deux fois par jour dosés chacun à 200 mg. Après quatre jours de traitement, on obtient une nette amélioration concernant les douleurs articulaires. Après une semaine on enregistre une régression considérable des phénomènes oedémateux. La malade ne présente aucun phénomène d'intolérance, elle signale toutefois quelques bourdonnements d'oreille. Le traitement est poursuivi sans inconvénient pendant un mois. L'état de l'intéressée étant satisfaisant,on arrête l'administration du médicament, en recommandant à la malade de faire des cures périodiques. Comme il va de soi, et comme il résulte d'ailleurs déjà de ce qui précède, l'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes d'application et de réalisation qui ont été plus spécialement envisagés; elle en embrasse au contraire toutes les variantes. REVENDICATIONS 1. Sels de dérivés de flavonoides avec des acides aminés caractérisés par Te fait qu'ils répondent à la formule générale Ar0(OCHRCOOH). H2N (CH2)m CH (NH2) COOHJ n (I) dans laquelle - Ar représente un reste ayant la structure d'une flavone ou d'une flavanone > - R représente un atome d'hydrogène, un radical alcoyle ou un groupe aromatique tel que le radical phényle, - n est un nombre entier de 1 à 5, et - m est un nombre entier de 3 à 5. 2. Sels selon la revendication 1 caractérisés par le fait que dans la formule générale T Ar représente le reste de la quercétine, de l'hespérétine ou de la naringénine. 3. Sels selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2 caractérisés par le fait que dans la formule générale I le groupe correspondant à l'acide aminé est constitué par la lysine ou l'or lithine. 4. Médicament, notamment à action vitaminique P, caractérisé par le fait qu'il renferme dans sa substance active au moins un sel de dérivés de flavonoides avec des acides aminés selon l'une quelconque des revendications 1 à 3. 5. Médicament selon la revendication 4,caractérisé par le fait qu'il se présente sous forme de comprimés dans lesquels les sels de dérivés de flavonoides avec des acides aminés sont associés à des excipients pharmaceutiques usuels appropriés. 6. Médicament selon l'une quelconque des revendications 4 ou 5 > caractérisé par le fait qu'il contient de O,lOOg à 0,500g de substance active par dose posologique unitaire et de 0,200à 2 g par dose thérapeutique quotidienne. 7. Procédé de préparation des sels de dérivés de flavonoides avec des acides aminés selon la revendication 1,caractérisé parle fait qu'il comprend les étapes successives suivantes 1- réaction en milieupbasique des aglycones de dérivés de flavo noises du genre flavone ou flavanone avec soit un acide -halogéné, soit un ester s-halogéné, la réaction étant suivie dans ce cas d'une hydrolyse de l'ester obtenu, ce qui mène à des aglycones substitués par au moins un groupe oxyalcanolque; 2- réaction du dérivé oxyalcanoIque ainsi obtenu avec un acide aminé basique. 8. Procédé selon la revendication 7 caractérisé par le fait que, dans la première étape, on met tout d'abord en solution l'aglycone, qu après agitation en milieu basique et à température ambiante on ajoute l'ester ou l'acide d -halogéné, qu'on porte alors le mélange réactionnel à une température de l'ordre de 40 à 90 C qu'on maintient pendant environ 3 à 12 heures, puis qu'on concentre le mélange réactionnel et, dans le cas où l'on a mis en oeuvre un ester d-halogéné, qu'on effectue une hydrolyse de l'ester formé en milieu basique, pendant environ une heure. 9. Procédé selon l'une quelconque des revendications 7 ou 8 caractérisé par le fait que dans la deuxième étape on ajoute à température ambiante l'acide aminé basique, en solution aqueuse, à l'acide oxyalcanoTque > dissous dans un solvant organique,jusqu'à neutralisation au pH mètre. IO. Procédé selon l'une quelconque des revendications 7 à 9 caractérisé par l'étape préalable de synthèse des aglycones selon laquelle on soumet des dérivés de flavonordes du genre flavone ou flavanone, comportant au moins un groupe oside, à une hydrolyse acide.