FR 2225410 A1 19741108 FR 7312875 A 19730410 La présente invention vise un procédé de préparation de dérivés prostanoques du type PGA caractèrisé en ce qu'il permet d'obtenir sélectivement le composé PGA2 par extraction à partir de l'invertébré marin Plexaura homomalla. I1 est connu que les invertebrés marins Plexaura homomalla, espèce appartenant à l'ordre des Gorgonacea et connue sous le nom de fouet de mer, contiennent une proportion abondante de composés prostanoïques du type PGA2 sous forme libre (fonctions acide et alcool non estérifiés) et sous forme esters 1 et/ou 15 et de diester 1-15. Ces composés existent sous deux formes R et S ne différant entre elles que par l'orientation de la substitution sur l'atome de carbone en position 15 ; la forme S correspond à celle rencontrée chez les mammifères et est donc la plus intéressante, la- forme R étant épimérique. Chacune de ces formes stéréochimique est spécifique d'une forme biologique de Plexaura homomalla qui porte la même lettre de différenciation. La richesse en l'une ou l'autre des deux formes R et S de colonies de Plexaura dépend principalement du lieu de récolte la forme R prédomine nettement, par exemple, dans les mers qui bordent la Floride et les Iles Bahama septentrionales alors que la forme S se trouve principalement dans la mer des antilles. D'autre parts le composé non estérifié est généralement plus intéressant que les composés estérifiés ; par exemple, la PGA2, connue aussi sous le nom de médulline, est impliquée dans le controle du flux rénal et dans les facteurs étiologique de l'hypertension rénale ; elle permet, notamment, d'augmenter le débit sanguin rénal à des doses ne modifiant pas la tension artérielle de l'organisme; elle permet, en outre, d1atteindre, par transformation chimique, divers autres types de prostaglandines dont, par exemple, la PGE2 dont l'intérêt dans les domaines de la régulation des naissances, de l'obstétrique, de L'hypertension et des ulcères gastriques est maintenant bien connu. Pour ces raisons, il est donc avantageux de disposer d'un procédé qui permet d'obtenir uniquement le produit PGA2 non estérifié par traitement des colonies de Plexaura. I1 faut tenir compte, toutefois, que le traitement ne peut tre facilement effectué à proximité du lieu de pêche à cause de la dissémination des colonies et de l'importance du matériel à mettre en oeuvre ce traitement ne peut, à fortiori, être effectué sur les bateaux de pèche.Or, comme toutes matières organiques et, plus spécialement, celles issues de la mer, les fouets de mer sont facilement la proie des microorganismes dès qu'ils ne sont plus dans leur milieu vital et il a été constaté que les dégradations subies entrainaient une forte perte en prostaglandines ; il importe donc d'assurer une bonne conservation en attendant que les opérations d'extraction puissent être effectuées. Dans la demande de brevet français n 2106764 déposée le 10 septembre -1971 par la société UPJOHN, il est décrit un procéde de conservation à basse température suivi d'un procédé dthydrolyse. La mise en oeuvre de basses températures, inférieures à -200C, oblige les bateaux de pêche à posséder une installation frigorifique puissante et tous leurs lieux de stockage doivent être maintenus à cette basse température et ceci entraine des investissements très élevés. En outre, les matières congelées doivent subir un traitement d'hydrolyse avant de pouvoir passer à l'extraction, ce qui provoque un cobt de main d'oeuvre et une perte de temps supplémentaires. Il a été trouvé par la Demanderesse que ces inconvénients graves pouvaient Qtre complètement supprimes en remplaçant la congellation par l'addition d'un agent antiferment en quantité suffisante pour empêcher toute dégradation des produits de peche et la Demanderesse a constaté, avec surprise, qu'après un stockage de quelques jours dans ces conditions, tous les composés estérifiés présents étaient transformés en PGA2 libre qu'il suffisait dtisoler par extraction. L'invention vise donc un procédé de production d'un composé prostanoïque connu sous le sigle PGA2 et défini par la formule chimique I procédé caractèrisé en c qu'il consiste à traiter, après récolte, l'invertébré marin Plexaura homomalla par une quantité d'agent antiferment suffisante pour assurer une bonne conservation, à extraire ensuite ledit composé, directement et sans aucun autre traitement, au moyen d'un solvant organique chimiquement inerte envers ledit composé et à séparer le composé de son solvant par élimination de ce dernier. Le solvant inerte est choisi parmi tous les bons solvants connus du compose PGA2 ; il est préférablement volatil de façon à permettre une séparation facile du composé extrait par évaporation du solvant. parmi les solvants intéressants, il peut autre cité 11 acétone, la méthyl-éthyl-cétone, l'acétate d'éthyle, l'acétate d'isopropyle, l'acétate de propyle, le chlorure de méthylène, le dichlorométhane, le trichloréthylène, le méthanol, l'éthanol, le méthoxyéthanol et l'éthoxyéthanol. L'agent antiferment est choisi parmi les composés antibactériens et/ou antifongiques connus. Ces composés sont choisis préférablement parmi les composés phénoliques, les composés salicyliques, les composés benzoïques, les ammoniums quaternaires, le formol et les donneurs de formol, les salicylanilides, les carbanilides, les composés sorbiques, les composés vanilliques, les alcanoyloxy-d diméthyl-2 , dioxannes1,3, les benzimidazoles, les composés trichlorométhane-sulféniques, l'hydroxy-l oxo-2 pyridine et ses dérivés métalliques, les composés de ltétain, les sulfamides, les hydroxy-8 quinoléines, les composés acétiques et propioniques, les composés sulfureux et les composés déhydroacétiques. Parmi les composés phénoliques convenables, on peut citer le phénol proprement dit, le chloro-4 phénol, le dichloro-2,+ phènol, le chloro-4 méthyl-3 phènol, le chloro--r diméthyl-3,5 phènol, le dichloro-2,4 diméthyl-3,5 phénol, les crésols, les xylénols, l'octylerésol, le benzyl-2 chloro-4 phènol, le phènyl-2 phénol, l'hexyl-4 résorcinol, le chloro-5 (dichloro-2,--r phènoxy) -2 phènol, le bis(chloro-4 hydroxy-2 phènyl)sulfure, le bis (hydroxy-2 dichloro-3,5 phènyl)sulfure et les bis(hydroxy-2 phènyl)méthane chlorés. parmi les composés salicyliques convenables, on peut citer l'acide salicylique proprement dit, ses sels métalliques, ses esters, les salicylamides, leurs dérivés halogénés, acide amino-4 salicylique et ses sels. Parmi les composés benzoïques convenables, on peut citer l'acide benzoïque proprement dit, ses dérivés chlorés, l'acide hydroxy- benzoïque et leurs sels métalliques et es-ters. parmi les ammoniums quaternaires convenables, on eut citer les chlorure et les bromures d'alcoyl (C-8 à C-18) diméthylbenzylammonium ou d'alcoyl (C-12 à C-18) triméthylammonium. Parmi les salicylanilides, on peut citer le salicylanilide proprement dit et ses dérivés chloro-4 ; dichloro-±',5 ; trichloro- 3,4',5; dichloro-2', 5 nitro-4'; tétrachloro-3,3',4',5'' pentachloro-3,3',4',5,5(; bromo-4; dibromo-3',4; dibromo-3,5; dibromo-3',5; dibromo-4',5; tribromo-3,4',5; tribromo-3',4',5 tétrabromo-2',4,4',6'; dibromo-3,5 trifluorométhyl-3'. Farmi les carbanilides, on peut citer le carbanilide proprement dit, les bis alcoxy-t, ' carbanilides et les dérivés halogénés comme le trichloro-3,4,4' carbanilide. et le dichloro1,4' trifluorométhyl-3 carbanilide. parmi les composés sorbiques, on peut citer l'acide sorbique proprement dit, ses sels métalliques et ses esters alcoyliques. parmi les composés vanilliques, on peut citer acide vanillique proprement dit, ses sels métalliques et ses esters alcoyliques. parmi les benzimidazoles, on peut citer le (thiazoyl-4)-2 benzimidazole, le (furyl-2)-2 benzimidazole, le phènyl-2 benzimi- dazole, et les alcoxycarbonylamino-2 benzimidazoles. Parmi les composés trichlorométhane-sulféniques, on peut citer les N-trichlorométhane-sulfényl phtalimide et tétrahydrophtalimide. Parmi les composés de l'étain, on peut citer l'oxyde de tributylétain, l'acétate de triéthylétain, l'acétate de tripropylétain, l'acétate de tributylétain, l'acétate de trihexylétain, l'acétate de triphènylétain. Farmi les donneurs de formol, on peut citer la méthyl-1 hydroxyméthyl-3 thiourée, le (chloro-3 allyl)-l triaza-3,5,7 azonia-1 adamentane, l'hexaméthyléne-tétramine et le trioxyméthylène. Parmi les sulfamides, on peut citer la sulfadiazine, la sulfaméthazine, la sulfaquinoxaline, la sulfapyridine, la sulaguanidine, la sulfamidine, la sulfamérazine, la sulfapyrazine, le sulfisoxazole et le phtalylsulfathiazole. armi les hydroxy-8 quinoléines, on peut citer l'hydroxy-8 quinoléine ou oxine proprement dite, la chloro-5 oxire, la dichloro-5,7 oxine, la bromo-5 oxine, et la dibromo-5,7 oxine. Parmi les composés acétiques et propioniques, on peut citer les acides acétique et propionique proprement dits, leurs dérivés chlorés et les sels métalliques correspondants. parmi les composés sulfureux3 on peut citer l'anhydride sulfureux et les sulfites et bisulfites métalliques ami les composés déhydroacétiques, on peut citer l'acide déhydroacétique proprement dit et ses sels métalliques. Les agents antiferments peuvent être ajoutés directement au produit de puche à la dose convenant pour assurer ler conservation mais il est sénéralement préférable de les placer en solution ou en suspension dans un m lieu inerte pour faciliter leur dispersion dans le produit de pêche. Le milieu inerte peut être un solide pulvérulent comme le talc, le kaolin, l'argile séchée et le chlorure de sodium ou un liquide. Le milieu liquide peut être constitué par l'eau ou un solvant organique approprié. Un liquide convenable peut etre constitue par une solution aqueuse de chlorure de sodium et/ou de nitrate de potassium. I1 est généralement intéressant d'ajouter une petite quantité d'un acide fort destiné à favoriser l'hydrolyse, en particulier lorsque le stockage doit être de courte durée. Cet acide fort peut Qtre choisi, par exemple, parmi les acides chlorhydrique, bromhydrique, perchlorique, sulfurique et phosphorique et utilisé dans des proportions n'excédant pas 25 kg d'acide par tonne de produit de perche. Il est toujours bon de faire en sorte que le milieu liquide contenant I'agent antiferment recouvre la partie supérieure du contenu de chaque emballage. Les exemples ci-après sont donnés pour permettre une meilleure compréhension de ce qui précède et sans qu'il en résulte de limitation. Préparation de PGA2 forme S Des colonies de Plexaura homomalla de forme S sont récoltées dans la mer des antilles entre les les des Saintes et la Guadeloupe et sont aussitôt passés au hachoir mécanique en mélange avec une dilution de 100 grammes de chlorure de benzyldodécyl- diméthylammonium dans 10 kg de kaolin pour une tonne de produit récolté. Le mélange résultant est stocké dans des barils pendant une semaine. Au bout de ce laps de temps, ledit mélange est transformé dans un malaxeur et est additionné d'acétate d'éthyle à raison de 1000 litres par tonne ; après une heure de malaxage, on soumet le tout à une centrifugation pour séparer la plase liquide de la pulpe solide; on recommence six fois le traitement avec 1000 litres d'acétate d'éthyle suivi d'une centrifugation. Les fractions liquides sont réunies et séchées sur sulfate de sodium anhydre puis filtrées sur silice; en évaporant l'acétate d'éthyle, on obtient un résidu pesant environ 1@,3 kg et contenant un peu plus de 14,5 kg de PGA2 (de formule I) et un peu moins de 0,6 kg de PGE2 (de formule II). On peut éliminer ce dernier composé en procédant à une séparation chromatographique sur colonne de silice, avec un éluant à base d'hexane et d'acétate d'éthyle, mais lorsque le produit obtenu est destiné à être transformé en PGE2, cette élinination n'est évidemment pas nécessaire. Exemple 2 Le tableau ci-dessous indique les quantités convenables à utiliser de divers autres agents antiferments seuls ou en mélange (en kg par tonne de produit de pêche). A B C D E F G H I J Acide propionique 5 - - - - - - - - 2 Acide sorbique - 2 - - - - - - 1 Hydroxy-1 oxo-2 pyridine/Zinc - - 0,5 - - - - - - tribromo-3,4',5 salicylanilide - - - 0,1 - - - - - Eis(dichloro-3,5 hydroxy-2 phènyl) sulfure - - - - 0,1 - - - - trioxyméthylène - - - - - 1 - - - chloro-4 méthyl-3 phènol - - - - - - 0,@ - - - phènyl-2 phénol - - - - - - - 0,3 - Chlorure de sodium - - 15 - - - - - 20 20 nitrate de potassium - - - - - - - 5 5 argile séchée - - - 10 10 9 - - - eau 95 120 - - - - 120 - 100 acide chlorhydrique 22 Bé 10 - - - - - - - - acide sulfurique 66 Bé - 5 - - - - - - - acide phosphorique 80% - - - - - - - - - 10 acide perchlorique - - - - - - - - - Exemple 3 réparation de PGA2 forme R En opérant comme il est dit dans les exemples 1 et 2 mais en utilisant des colonies de -plexaura homomalla de forme R récoltées, par exemple, au large de Biscayne Key (bride) on obtient, par tonne récoltée, environ 1-- kg d'un produit contenant près de 13 ko de PGA2 sous sa forme épimérique. Les exemples de préparation ci-après sont donnés pour montrer l'intérêt du composé PGA2 et la facilité avec laquelle on peut obtenir divers dérivés de celui-ci dont, notamment le composé PGE2 Préparation I : éther triméthylsilyl-15 de PGA2 Dans 60 millilitres de tétrahydrofuranne, on introduit 3,3's grammes (0,01 mole) de PGA2 ; on refroidit vers 00C en agitant à l'abri de l'humidité et on ajoute peu à peu une solution de 1,1 gramme (0,01 mole) de triméthylchlorosilane dans 20 millilitres d'hexaméthyldisilazane ; on laisse la température remonter à celle de l'ambiante et continue à agiter pendant trois heures. Le solvant est élimine par distillation sous pression réduite dans un évaporateur rotatif. Préparation II: époxyde-10,11 de l'éther triméthylsilyl-15 de PGA2 Le produit résultant de la préparation précédente est dissout dans 100 millilitres d'isopropanol et le tout est refroidi entre -30 et -40 C ; on ajoute alors 6 millilitres d'eau oxygénée à 30 % nuis, goutte à goutte, 10 millilitres d'une solution aqueuse 2 % d'hydroxyde de lithium. On maintient vers -30 C pendait huit heures puis on neutralise en ajoutant 25 millilitres d'acide chlorhydrique e solution aqueuse normale. L'isopropanol est évaporé sous pression réduite et le résidu est repris par 100 millilitres d'acétate d'éthyle ; on sèche sur sulfate de sodium, filtre et évapore le solvant sous pression réduite. Préparation III: PGE2 On dissout le produit résultant de la préparation précédente dans 100 millilitres d'un mélange oxyde d'éthyle/méthanol ( : î) on ajoute 2C millilitres d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium et on refroidit le tout vers 10 C ; on agite énergiquement et ajoute, peu à peu, 5 grammes de poudre d'aluminium amalgamé ; on agite encore pendant deux heures ; on filtre et évapore le solvant sous pression réduite. Le résidu est repris par 100 millilitres d'acétate d'éthyle ; on lave avec 100 millilitres d'acide chlorhydrique normal saturé ae chlorure de sodium puis avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium ; on sèche sur sulfate de sodium anhydre, filtre puis évapore le solvant sous pression réduite. On obtient environ 2,3 grammes de produit contenant un peu plus de 90 % de PGE2, le reste étant l'épimère-11 de celui-ci ; on peut séparer l1épiière par cristallisations fractionnées, dans des mélanges acétate d'éthyle et-hexane ou cyclohexane, ou par chromatographie sur colonne de silice, l'éluant étant un mélange acétate d'éthyle/ hexane. REVENDICATIONS 1- Procédé de production d'un composé prostanoïque connu sous le sigle PGA2 et défini par la formule chimique I procédé caractèrisé en ce qu'il consiste à traiter, après récolte, l'invertébré Marin Plexaura homomalla par une quantité d'agent antiferment suffisante pour assurer une bonne conserration à extraire ensuite ledit composé, directement et sans aucun autre traitement, au moyen d'un solvant organique chimique- ment inerte envers ledit composé et à séparer le composé extrait de son solvant par élimination de ce dernier. 2 - Procédé conforme à la revendication 1 caractèrisé en ce que l'agent antiferment est choisi parmi les composés antibactériens et/pu antifongiques connus. 3 - Procédé conforme à la revendication 2 caractèrisé en ce que l'agent antiferment est choisi parmi les composés phénoliques, les composés salicyliques, les composés benzoiques, les ammoniums quaternaires, le formol et les donneurs de formol, les salicylanilides, les carbanilides, les composés sorbiques, les composés vanilliques, les alcanoyloxy-6 diméthyl-2,4 dioxannes-1,3, les benzirlidazoles, les composés trichlorométhane-sulféniques, l'hydroxy-1 oxo-2 pyridine et ses dérivés métalliques, les composés de l'étain, les sulfamides, les hydroxy-8 quinoléines, les composés acétiques et propioniques, les composes sulfureux et les composés déhydroacétiques. r - Procédé conforme à l'une quelconque des revendications 1 à 3 caractérisé en ce que l'agent antîferment est mélangé à une substance solide pulvérulente inerte au collent de l'emploi 5 - recédé conforme a le revendication 4 caractèrisé en ce que la substance solide pulvérulente inerte contient du chlorure de sodium et/ou du nitrate de potassium. 6 - Procédé conforme à l'une quelconque des revendications 1 à 3 caractèrisé en ce que l'agent antiferment est mis en solution ou en suspension dans un milleu liquide au moment de l'emploi. 7 - Procédé conforme à la revendication 5 caractèrisé en ce que le milieu liquide est constitué par de l'eau pouvant contenir on solution du chlorure de sodium et/ou du nitrate de potassium. 8 - Procédé conforme à l'une quelconque des revendications 1 à caractèrisé en ce que l'antiferment est additionné d'un acide minéral fort. 9 - Procédé conforme à la revendication 2 caractèrisé en ce que l'acide minéral fort est choisi parmi les acides chlorhydrique, romhydrique, perchlorique, sulfurique et phosphorique. 10 - procédé conforme à l'une quelconque des revendications 3 et caractèrisé en ce que l'acide fort est, au maximum, de 25 -s d'acide ear tonne d'invertébré marin. II - procédé conforme à l'une quelconque des revendications 1 à 10 caractèrisé en ce que le solvant inerte est choisi parmi l'acétone, la méthyl-éthyl-cétone, l'acétate d'éthyle, l'acétate d'isopropyle, l'acétate de propyle, le chlorure de méthylène, le dichlorométhne, le trichloréthylène, le méthoxyéthanol et l'éthoxyéthanol. 12 - roduit industriel préparé selon l'une quelconque des revendications 1 à 11.