FR 2199470 A1 19740412 FR 7233008 A 19720918 La présente invention concerne un procédé de désinfection ou de stérilisation d'objets en phase liquide par des produits chimiques stérilisants, ou chimiostérilisants, améliorés. Le procédé objet de l'invention est basé sur des phénomènes sporicides synergiques observés quand on opère à des températures relativement modérées, associées ou non å une irradiation par ultrasons, avec des produits sporicides de formule spéciale. Ces derniers sont à base de mélanges actifs de glutaraldéhyde avec des agents tensioactifs tels que les éthoxylates non ioniques d'alcools linéaires isomères (C11 à C6) ou les sulfonates d'hydrocarbures alkylaromatiques, ou alkylarylsulfonates, anioniques. Par un choix approprié des températures, de la densité de l'énergie acoustique et des composés chimiques, le procédé objet de l'invention permet de réduire dans un rapport de l'ordre de 50 å 1 le temps nécessaire pour la désinfection ou la stérilisation slperficielles de substances sensibles å la chaleur La stérilisation superficielle à basse température en phase liquide a été limitée antérieurement à l'emploi de deux agents chimiostérilisants : les solutions de formaldéhyde'et les solutions de glutaraldéhyde alcalines.Ce choix limite contraste a la vérité avec le grand nombre de bactéricides chimiques disponibles (dérivés d'ammonium quaternaires, composés contenant du chlore, iodophores, composés amphotères, etc.) quand aucune action sporicide n'est demandée. Le formaldéhyde est un des chimiostérilisants les plus anciens employés pour la destruction des spores et bien qu'on l'ait employé en solution de 1 à 2 une période de temps relativement longue (jusqu'à 20 heures) est nécessaire pour détruire les spores du Bacillus subtilis var. niger. Un temps un peu plus court est nécessaire si l'on emploie du formaldéhyde a concentration plus élevée (voisine de 8%) dans l'alcool isopropylique. Cette solution, dénommée "Formaline" présente plusieurs inconvénients. Les vapeurs irritantes du formaldéhyde limitent ses possibilités d'utilisation et sa nocivité pour les tissus exige que les matériaux ou objets désinfectés sotent lavés à fond à l'eau stérile avant usage. Les solutions de glutaraldéhyde alcalinisées vendues dans le commerce sous la marque "Cidex" sont les seules employées actuellement sur une grande échelle pour des applications pratiques. Elles sont constituées par une solution aqueuse à 2% de glutaraldéhyde, tamponnée par des substances basiques appropriées (en général 0,3 de bicarbonate de sodium) à un pH compris entre 7,5 et 8,5. En milieu acide, à la température ambiante, les solutions de glutaraldéhyde sont stables pendant de longues périodes de temps quand elles sont conservées dans un récipient clos. Cependant, quand il est alcalinisé, le glutaraldéhyde se polymérise progressivement et perd son activité.Quand le pH dépasse 9, cette polymérisation progresse très rapidement Pour un pH entre 7,5 et 8,5, la polymérisation est plus lente, mais le fabricant lui-meme reconnut que l'activité sporicide dis parait au knout de 2 semaines(ARBROOK, Bulletin JR 8016, 1968). On indique que le temps nécessaire à la température ambiante pour éliminer complètement par stérilisation le Bacillus subtilis, meme avec une solution fraîche de glutaraldéhyde tamponnée à 2%, par le procédé dit "AOAC Pennycylir,der" est compris entre 3 et 10 h, suivant la proport.ion d'eau contenue dans les spores L'impossibilité de conserver la solution sporicide pendant une période prolongée, l'obligation de la tamponner chaque fois avant usage et la longue durée de contact nécessaire (plusieurs heures) pour réaliser la stérilisation ont conduit les inventeurs à mettre au point un procédé et de nouveaux produits sporicides, ce qui constitue l'objet de l'invention. Comme on t'a indiqué ci-dessus, le glutaraldéhyde alcalinisé a été employé sur une grande échelle comme chimiostérilisant, étant donné que ses caractéristiques antimicrobiennes ont été décrites pour la première fois dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique nO 3 016 328 (1962) dans lequel on a indiqué également pour la première fois que les solutions aqueuses de glutaraldéhyde sont modérément acides et on a souligné que, dans ce cas, elles ne présentent aucune caractéristique sporicide. Ce n'est que lorsque ces solutions sont tamponnées par des substances basiques appropriées à un pH compris entre 7,5 et 8,5 qu'elles deviennent microbicides (voir American Journal of Hospital Pharmacy 20 ; 458-465 septembre 1963).Ce point a été souligne dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique n" 3 016 328 précité qui indique (page 1, colonne 2, ligne 34) que l'invention a pour origine la découverte du fait qu'un dialdéhyde saturé contenant 2 à 6 atomes de carbone a, en fait, une activité sporicide quand il est mélangé avec un alcanol inférieur et une substance basique. Plus récemment, G. Sierra a montré dans le brevet canadien nO 865 913 (1971) que les conclusions formulées dans le brevet des Etats Unis d'Amérique 3 016 328 précité ne sont valable que dans l'intervalle de températures (2o a 23 C indiqué dans ledit brevet des Etats-Unis d'Amérique. Le brevet canadien n0 865 913 précité indique que les solutions acides non tamponnées et on alcalinisées de glutaraldéhyde ont une forte activité sporicide quand on opère a des températures supérieures (en général voisines de 450C) à celles indiquées dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique précité. Cette observation a été contirmée par les expériences des inventeurs. De plus, on a observé -et cela est un des objectifs de la présente. invention qu avec un mélange approprié de glutaraldéhyde en solution acide et de certains agents tensioactifs non ioniques ou anioniques à des températures supérieures à 15 C, mais en particulier supérieures à 450C, on peut obtenir des activités sporicides supérieures a celles mentionnées dans le brevet canadien n0 865 913 précité. L'augmentation de l'activité bactéricide et sporicide par l'emploi combiné du glutaraldéhyde (en t, solution acide et alcaline) avec des agents tensioactifs a été décrite antérieurement dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique n 3 282 775. cependant, lademandbressese réfère uni quement à l'utilisation d'agents cationiques. Plusieurs exemples figurent dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique n0 3 282 775 précité. Ils-con- cernent tous des mélanges de produits chimiques contenant des solutions de glutaraldéhyde associées à des sels d'ammonium quaternaires ou à du chlorure de cétylpyridinium, qui ont des caractéristiques sporicides à la température ambiante pour un pH compris entre 4 et 9. La présente invention a pour objet : de montrer qu'une solution de glutaraldéhyde méîa,gée à des agents tensioactifs non ioniques ou anioniques tels que les éthoxylates d'alcools linéaires isomères ou les alkylarylsulfonates est beaucoup plus active que toute autre formule spori cide antérieurement connues basée sur le mélange du glutaraldéhyde avec des agents tensioactifs cationiques, que l'emploi de solutions de glutaral débyde mélangées à des agents tensioactifs non ioniques ou anioniques est efficace dans une gamme de pH étendue (1 à 9) ainsi qu'a toute température comprise entre 15 et 75C et qu'on peut réduire considérablement la durée de stérilisation en associant une irradiation simultanée, par des ondes acous tiques (sons ou ultrasons) à des produits sporicides a base d'un mélange de glutaraldéhyde et d'agents tensioactifs non ioniques ou anioniques. pour faciliter la compréhension de l'invention, on passera brievement e, revue les divers phénomènes physiques ou chimiques qui jouent un rôle dans l'action sporicide renforcée observée avec le procédé de la présente invention Un certain nombre de bactéries disposent d'un mécanisme très efficace pour assurer leur survie Elles comportent une forme élémentaire différenciée grâce à laquelle, dans certaines conditions, la forme végé- tative relativement sensitle de ces organismes peut donner naissance à une forme "dormante" résistante, dénommée "spore" Les spores des bactéries sont beaucoup plus résistantes aux actions destructrices de la chialeur, des rayonnements et des pruduits chimiques que les cellules végétatives corses ponderates. La résistance des spores diffère suivant la nature des microbes et des variations sont courantes pour une espèce déterminée. Parmi les spores qui ont été employées pour étudier les procédés de la présente invention3 on peut citer les suivantes: Bacillus subtilis, Bacillus stearothermopilus, Bacillus pumilus, Clostridium sporogaues et Clostridium tetani). Une spore de bactérie a en général un diamètre de l'ordre du micron et est constituée essentiellement par une petite cellule, souvent dénommée "protoplaste", du noyau ou de la spore, entourée d'un certain nombre de couches spécialisées. Les principales de ces couches sont le cortex épais et les revetements constitués par plusieurs couches et autour des spores de certaines espètes, une couche additionnelle loche dénommée "exosporium". A un moment donné on admettait (C.S. Phillips Bact. Rev. 1962) que des agents aîkyîants tels que l'oxyde d'éthylène, la ss-propiolactone, le formaldéhyde, le glutaraldéhydeainsi que d'autres aldéhydes attaquaient les groupes sulfhydriles sH, hydroxyles -OH, amino NH2 et carboxy présents dans les protéines des cellules des spores. Plus récemment T. J. Munton et A.D. Russelt(J. Appl. Bact., 1970) ont affirmé que les emplacements de la molécule de glutaraldéhyde pour lesquels des réactions chimiques sont possibles peuvent etre constitués par des groupes NH2 y compris dans le cas de réactions de réticulation entre ces groupes (D. Hopwood, Histochemie, 1968).Cependant, d'après ces auteurs, le mécanisme suggéré n'exclut pas des emplacements de réaction comportant d'autres groupes chimiques. T,J. Munton et A.D. Russel (J. Appl. Bact. 1970) ont également montré que l'adsorption du glutaraldéhyde acide et du glutaraldéhyde alcalin (tampon: bicarbonate de sodium) sont semblables et que ces deux phénomènes sont du type décrit par Langmuir. Ceci a été démontré avec le Bacillus E. Coli et le Bacillus megatorium.En d'autres termes, à mesure que le nombre d'emplacements occupés des cellules de bactéries ou de spores augmente, les molécules de glutaraldéhvde se heurtent à des difficultés croissantes pour se fixer elles memes à la celluie ou à la spore En ce qui concerne les procédés de la présente invention) on admet que les éthoxylates d'alcools linéaires rt'n ioniques abaissent la tension superficielle et augmentent la mouillabilité à l'intersurface spore/liquide de manière à accélérer la vitesse d'absorption des molécules de glutaraldéhyde. Ceci pourrait etre aussi-le résultat de la fixation à l'intersurface spores liquide d'une quantité plus importante de molécules de glutaraldéhyde. L'importance de ce phénomène augmente suivant une loi logarithmique avec la température dans l'intervalle 15 C-75 C. On a observé, bien qu'avec une amplitude moindre, la meme augmentation de la vitesse d'absorption à l'intersurface spore/liquide avec des alkylarylsulfonates anioniques mélangés à des éthers d'alcools et de polyoxyéthylène non ioniques. Lorsqu'on traite des vitesse d'absorption, on doit signaler que l'augmentation de mouillabilité observée avec des molécules sporicides pourrait etre de non seulement a une augmentation de l'intersurface extérieure des spores. mais aussi à une pénétration plus rapide dans les intersurfaces intérieures des spores, par exemple à travers les couches du cortex, le cortex ou la membrane du plasma. Si l'on emploie un des mélanges sporicides de la présente invention en le combinant avec une irradiation par des ultra-sons, on observe des vitesses de destruction extremement élevées. Cela pourrait en fait etre expliqué comme suit : comme connu, le principal composant d'une couche du cortex d'une spore est un polymère appelé muréine (ou peptidoglucane). La muréine est présente, en quantités moindres, dans les mem uranes de toutes les bactéries. Elle est constituée par une grande molécule réticulée, semblable à un filet, possédant plusieurs caractéristiques sortant de l'ordinaire. Ce polymère est acide et il peut exister, dans les pores, sous forme d'une couche fortement contractée par des molécules chargées positivement.Une theorie récente destinée à rendre compte de l'extraordinaire résistance à la chaleur des spores admet qu'une pression de contraction appliquée par cette structure peut comprimer suffisamment le noyau central pour le maintenir si sec qu'il résiste à la chaleur. L'irradiation par les ultrasons est une des techniques les plus efficaces (K. Y. Sergeeva, Sov lhys Acoust., mars 1966) pour secouer les réseaux des polymères et réaliser une dépolymérisation rapide. On dit que cette technique est très efficace dans une bande de fréquences étendue, aussi bien aux basses fréquences (G. Schmid et al., Kolloid L, 1951) qu'aux fréquences élevées (M.A.K. Mostafa, J. F'olym, Sci. 1958) Il est par conséquent compréhensible qu'une dépolymérisation de ia muréine ou une destruction partielle du réseau réticulé serré permettraient aux groupes aldéhydes de pénétrer et de se combiner plus rapidement avec les emplacements actifs des spores. Des agents tensioactifs non ioniques et anioniques doivent en fait accélérer la pénétration à travers le réseau relâché du polymère.Des ultrasons de grande intensité pourraient également jouer un rôle important par l'intermédiaire d'autres mécanismes secondaires, mais importants. Les revêtements extérieurs riches en protéines des spores contiennent une protéine avec une forte proportion de bisulfures dont certanines propriétes sont voisines de celle de la kératine. Etant donné que les protéines semblables à la kératine sont en général résistantes, inertes vis-à-vis des réactifs chimiques et résistantes aux enzymes, elles custi- tuent une barrière protectrice parfaite pour les spores. Cependant, des ultrasons de grande intensité pourraient dégrader mécaniquement la kératine J. H. Bradbury, Nature, 1960) et favoriser ainsi une pénétration plus rapide des molécules actives de glutaraldéhyde. Deux autres caractéristiques des spores sont leur teneur élevée en calcium (souvent 2% du poids des spores sèches), et en acide dipicolinique (DPA) qui peut représenter plus de 10% du poids des spores sèches. Une turbulence acoustique peut provoquer des échanges d'ions (raréfaction des ions Ca),tandis que la molécule hétérocyclique de DPA pourrait également être brisée (1. E. Elpiner et A.V. Sokolskaya, Sov. Phys. Acoust. mars 1963). En résumé, les ultrasons peuvent accélérer la diffusion physique des molécules ou des radicaux actifs en direction des emplacements de réaction à l'intérieur des spores et/ou détruire des liaisons chimiques de constituants importants des spores (y compris des modifications de leurs emplacements) Ils pourraient, en particulier, associés au glutaraldéhyde alcalin, dépolymériser une partie du glutaraldéhyde en solution. Ceci pourrait avoir une importance particuliere si l'on se souvient que le glutaraldéhyde alcalinisé perd progressivement son activité quand la polymérisation progresse (A. A. Stonehill et al, Am. Journ. Hosp. Pharm. 1963). Bien que l'action sporicide synergique résultant de la combinaison d'une chaleur modérée, d'une solution de glutaraldéhyde et d'ultrasons de grande intensité ait été décrite déjà dans la demande de brevet canadien n0 98 416 déposée par G. Sierra en 1971, la présente invention démontre que l'addition d'agents tensioactifs non ioniques ou anioniques à une solution de glutaraldéhyde conduit dans tous les cas à une augmentation appréciable de la vitesse de destruction des bacteries, virus ou spores. On donne ci-après,après avoir décrit le procédé de stérilisation selon l'invention et les produits sporicides associés à ce dernier, plusieurs exemples destinés à faciliter la compréhension de l'invention. Exemples prépare un nouveau produit aqueux bactéricide, virucide et sporicide selon l'invention en ajoutant 9 de l'eau 2% de glutaraldéhyde (qualité Union Carbide) et 02% d'un agent tensioactif non ionique préparé à partir d'un mélange d'éthoxylates d'alcools isomeres à chaîne linéaire. La partie hydrophoble de cet agent tensioactif est un mélange d'alcools en C11 a C16 a channes linéaires. La partie hydrophile est constituée par une chaîne de groupes polyoxyéthylène (au nombre de 9 å 13) fixée de manière désordonnée à ladite chaîne aliphatique linéaire des alcools en C11 à C16 par une liaison éther, comme l'indique la formule ci-après L'agent tensioactif non ionique incorporé dans la préparation objet de l'invention a les caractéristiques ci-après: poids moléculaire 728, point de trouble (solution aqueuse à 1%) 90 C, point de goutte 170C, solubilité à 100X dans l'eau à 25 C, densité à 200C par rapport à l'eau à 200C 1,023, masse spécifique 1,0175 g/l à 300C, viscosité 48 centistokes à 40 C, poids d'éclair 238 C (d'après le document ASTM Méthode D 92). Le mélange d'un agent tensioactif anionique avec des éthers d'alcools et polyoxyéthyîènes non ioniques incorporé dans la seconde formulation objet de l'invention a les caractéristiques ci-après : masse spécifique 1,02 kg/l, liquide clair soluble dans l'eau chaude ou l'eau froide, pH compris entre 6 et 8, point de solidification -10 C. Le concentré de glutaraldéhyde qualité Union Carbide qui a été employé pour préparer la solution à 2% employée pour les présentes expériences a les caractéristiques ci-après . masse spécifique 1,058 à 1,065 kg/l à 20 C, concentration en glutaraldéhyde 24,5 à 25,5% en poids, pH 2,7 à 3,7 à 25 C, acidité maximale, calculée en acide acétique5 0,2 en poids, teneur en fer inférieure à 3 ppm1 teneur en métaux lourds inférieure à 2 ppm, couleur 125 (maximum cohalt-pldtine). Les spores ayant fait objet d'essais avec ces solutions sont des cultures séches sous vide de Clostridium Sporogenes (ATCC 7955); Bacillus globigii, Bacillus pumilus, Bacillus stearothermophilus et Bacillus subtilis. parmi tous ces micro-organismes, le dernier est celui qui présente la résistance la plus grande audit produit sporicide et pour plus de clarté on se limitera à la présentation de résultats concernant ce microorganisme. Les essais ont été effectués dans des cuves en acier ir txv- dable pour ultrasons spécialement conçues (ensemble Wave Energy série CTC 160) de capacité voisine de 7,5 1. On a employé pour chaque essai environ 3,75 1 de suspension de spores, L'énergie acoustique injectée dans la phase liquide variait de 10 à 30 W/1 de spores en suspension. La fréquence d'irradiation était pour ces essais de 10 kHz ou 27 kHz (+ 1 kHz). (Les densités d'énergie ont été ramenées à un litre pour faciliter les comparaison). Aux fréquences élevées (20 W/1 et 5 kW à 850 kHz) la solution de spores était contenue dans un bécher en verre de 7,5 1 environ qui était placé dans un récipient rempli d'eau équipé à sa partie inférieure d'un convertisseur submersible (titante-zirconate de cobalt et plomb vernissé).Pendant toutes ces expériences, la température était réglée par thermostat à - 1 C près. Comme on l'a indiqué ci-dessus, on a utilisé des spores de Bacillus subtilis (ATCC 6051) pour toutes les expériences décrites. Les spores pures ont été préparées par la technique de G. Sierra et A. Bowman. Les spores ont été pasteurisées (à. 800C pendant 15 mn) puis conservées à 40C sous forme de suspensions concentrées dans de l'eau désionisée et utilisées au bout de moins d'une semaine. La normalisation des suspensions de spores a été mise en oeuvre de la manière décrite par G. Sierra (Can. Journ. Microbiology, 13 : 489-501, 1967), On utilisait pour chaque expérience, des solutions, fraîchement préparées. dans de l'eau désionisée, de glutaraldéhyde et de glutaraldéhyde additionnée d'un agent tensioactif. Une solution de réserve concentrée de tampons ou de bicarbonate de sodium était ajoutée séparément aux suspens ions de spores pasteurisées. Les valeurs de pH indiquées ci-après sont celles du mélange complet après toutes les additions et étaient déterminées à l'aide d'un pH mètre Beckman et type "Aeromatic II" dont le calibrage était vérifié avant chaque détermination L'agitation était continue et le pH était lu seulement après stabilisation du potentiel d'électrode. Pour récupérer efficacement les spores survivantes (en particulier aux plus faibles dilutions) l'effet de l'entraînement du glutaraldéhyde par les plaques de comptage contenant des spores intactes était neutralisé par neutralisation du glutaraldéhyde par du bisulfite de sodium avant dépôt sur les plaques. Après le traitement choisi, des échantillons de 0,5 ml étaient prélevés pour déterminer le nombre de spores survivantes. Chaque échantillon était dilué instantanément dans 4,5 ml d'une solution contenant 1% de hisulfite de sodium plus 0,1% de pept ne, qu'on laissait reposer pendant 10 mn, après quoi .- in réalisait une autre série de dilutions dans une solution de 0,5 de bisultite de sodium et 0,1X de peptone. On procédait 9 des comptages de colonies de spores à partir de volumes égaux à 0,1 ml de solution appropriée sur de la gélose nutritive-amidon à 0,1% des plaques identiques ont été incubées pendant 3 jours à 300C. On a observé que le traitement au bisulfite n'accentue pas la mise hors d'action des spores provoquée par le glutaraldéhyde et ne provoque pas de mise hors d'action directe décelable des spores intactes. Il peut etre intéressant, dans certains cas, d'employer comme diluant, non seulement de l'eau désionisée filtrée mais un alcanol inférieur tel que le méthanol, l'éthanol, l'isopropanol et analogue. On peut également employer un mélange des deux et on indique sur le tableau IV ciaprès les résultats d'essais effectués avec un produit contenant 60% d'alcool isopropylique, 37,8% d'eau, 2% de glutaraldéhyde et 0,2% d'un agent tensioactif non ionique Les tableaux I à V ci-après représentent quelques résultats typiques d'expériences réalisées par la demanderesse,effectuées avec des suspensions de Bacillus subtilis (ATCC 6051) dans des conditions (concentration du glutaraldéhyde, nature des agents tensioactifs, température et pli variables. Les résultats figurant sur ces tableaux mettent nettement en évidence les effets synergiques obtenus avec deux types de produits sporicides à base d'agents tensioactifs non ioniques et anioniques dissous en mame temps que du glutaraldéhyde. Ils indiquent également que la présente invention peut etre mise en oeuvre avec les paramètres ci-après Concentration en glutaraldéhyde . environ 0,1% à 5%. Mélange d'agents tensioactifs non ioniques ou anioniques avec des agents non ioniques environ 0,1% à 1%. Fréquence du champ acoustique environ 10 kliz à 850 kHz Densité d'énergie du champ acoustique . environ 1 W/1 à 5 kW/l Diluant : eau ou alcanol inférieur Température : supérieure à 150C Valeur du ph : entre 2 et 10, Bien entendu, diverses modifications peuvent être apportées par l'homme de l'art aux dispositifs ou procédé qui viennent d'être décrits uniquement à titre d'exemples non limitatifs, sans sortir du cadre de l'invention. TABLEAU I Effets des variations de concentration du glutaraldéhyde. Nombre de spores au départ 107/ml. Température 55 C. Champ d'ondes acoustiques : fréquence 27kHz, densité d'énergie 20 W l, ph = 5. Concentration en% Temps minimal en minutes pour une du glutaraldéhyde destruction à 100% 0,1 20 avec les ultrasons 2 15 avec les ultrasons 5 15 avec les ultrasons 0,1 40 sans les ultrasons 2 30 sans les ultrasons 5 30 sans les ultrasons 2 10 avec les ultranson et un agent tensioactif non ionique (0,2%) 2 20 sans les ultrasons mais avec un agent tensioactif non ionique (0,2%) TABLEAU II Effets des variations de divers agents tensioactifs synergiques. Nombre de spores au départ : 107/ml. Température : 55 C. Champ acoustique : fréquence 27kHz, densité d'énergie 20 W/l. Concentration du glutaraldéhyde : 2% = pH =5 Nature de l'agent tensioactif. Concentration en Temps minimal en minutes agent tensioactif, % pour une destruction à 100% Non ionique * 0,02 11 Non ionique 0,2 10 Non ionique 1 10 Anionique ** 0,02 12 Anionique 0,2 11 Anionique 1 11 Cationique *** 0,2 15 Pas d'agent tensioactif 15 (glutaraldéhyde seul) * Ethoxylates d'alcools linéaires isomères. ** Alkylarylsulfonate mélangé avec des éthers d'alcool et de polyoxyéthylène. *** Chlorure de cétylpyridinium. TABLEAU III Activité à diverses températures. Nombre de spores au départ : 107/ml Champ acoustique : fréquence 27 kHz, densité d'énergie 20 W/l Concentration en glutaraldéhyde : 2% Concentration en agent tensioactif non ionique : 0,2% - pH = 5 Température Temps minimal en minutes pour une destruction à 100% 15 C 120 25 C 100 45 C 60 55 C 10 65 C 5 TABLEAU IV Activité pour diverses valeurs du pH. Nombre de spores du départ : 107/ml Champ acoustique : fréquence 27 kHz, densité d'énergie 20 W/l Concentration du glutaraldéhyde : 2% Concentration en agent tensioactif non ionique : 0,2%. Température : 55 C. Diluant pH Temps minimal en minutes pour une destruction de 100% Eau désionisée 2,5 11 Eau désionisée 5 10 Eau désionisée 6 10 Eau désionisée 8 (avec tampon) 10 Eau désionisée 10 (avec tampon) 12 Eau (38%) et alcool 6,5 10 isopropylique (60%) TABLEAU V Activité pour diverses fréquences et densités d'énergie acoustique. Nombre de spores au départ : 107/ml Concentration en glutaraldéhyde 2% Concentration en agent tensioactif non ionique ou anioique : 0,2% Température : 55 C. pH = 6 Nature de l'agent Fréquence des Densité d'énergie Temps minimal en minutes tensioactif ultrasons kHz acoustique, en W/l pour une destruction à 100% Non ionique 27 20 10 Non ionique 27 30 6 Non ionique 27 1 18 Non ionique 10 20 10 Non ionique 10 30 6 Non ionique 850 20 12 Non ionique 850 5000 4 Anionique 27 20 12 REVENDICATIONS 1. Procédé de désinfection ou de stérilisation en phase liquide d'un objet contaminé à une température supérieure à 150C, caractérisé en ce qu'il comprend les opérations ci-après : mise en contact dudit objet avec une solution aqueuse sporicide contenant environ 0,1 % à 5 % de glutaraldéhyde et au moins un membre du groupe ci-après : agents tensio- actifs non anioniques, tels que les éthoxylates d'alcools linéaires isomères et les alkrlaryisulfonates anioniques dans une proportion comprise entre environ 0,01 % et 1 % tout en soumettant en mème temps ladite solution à l'action de champs acoustiques, à savoir de sons ou d'ultrasons, de fréquence comprise entre environ 10 kHz et 850 kHz, avec une densité d'énergie acoustique comprise entre environ 1 W et 5.000 W/1, à l'intérieur de la phase liquide irradiée. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ladite solution active contient environ 0,01 % à 1 % d'un éthoxylate non ionique d'alcool linéaire isomère avec une portion hydrophobe alcoolique constituée par un mélange d'alcool en C11 à C16 à chaîne l-inéaire-et une partie hydrophile qui est constituée par une chaîne aliphatique, à laquelle sont fixés au hasard 9 à 13 groupes oxyéthylène par une liaison éther, et en ce que ledit glutaraldéhyde est un dialdéhyde à 5 atomes de carbone à l'état non polymérisé ou partiellement polymérisé. 3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ladite solution active contient environ 0,01 % à 1% d'uni mélange d'un alkylarylsulfonate anionique avec des éthers non ioniques d'alcool et de polyoxyéthylène. 4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que Ie le pH de la solution aqueuse active est compris entre 1 et 7. 5. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ladite solution active aqueuse est tamponnée par addition d'un sel alcalin, et en ce que son pH est compris entre 7 et 9. 6. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la durée du contact entre l'objet à désinfecter ou stériliser et la solution active est comprise entre 1 et 120 mn si l'on opère entre 15 et 750C. 7. Procédé de désinfection ou de stérilisation-d'instruments médicaux, dentaires ou chirurgicaux, etc., en phase liquide à une température supérieure à 150C, caractérisé en ce qu'il comprend les opérations ci-après mise en contact dudit objet avec un produit sporicide contenant environ 0,1 % à 5 % d'un dialdéhyde à 5 atomes de carbone à l'état non polymérisé ou partiellement polymérisé et au moins un agent tensioactif choisi dans le groupe constitué par les éthoxylates non ioniques et tensioactifs d'alcools linéaires isomères et les alkylarylsulfonates anioniques, la centration pondérale desdits agents tensioactifs étant comprise entre environ 0,01 % et 1 %. 8. Produit aqueux bactéricide, virucide ou sporicide, caractérisé en ce qu'ii contient environ 0,1 à 5 % de glutaraldéhyde à l'état non polymérisé ou partiellement polymérisé et environ 0,01 % à 1 % d'un éthoxylate tensioactif non ionique d'alcools linéaires isomères, dont la chaîne contient entre 10 et 16 atomes de carbone. 9. Produit aqueux bactéricide, virucide ou sporicide, caractérisé en ce qu'il comprend environ 0,1 8 à 5 % de glutaraldéhyde à l'état non polymérisé ou partiellement polymérisé et environ 0,01 % à 1 % d'un mélange d'agents tensioactifs non cationiques constitué par un mélange d'un alkylarylsulfonate anionique avec des éthers non ioniques d'alcools et de polyoxyéthylène. 10. Produit selon l'une des revendications 8 et 9, caractérisé en ce qu'il contient une proportion d'un alcanol inférieur suffisante pour que la concentration finale de ce dernier soit comprise entre environ 60 et 75 %. 11. Procédé de désinfection ou de stérilisation d'un objet contaminé à une température voisine de 15pu, caractérisé en ce qu'il comprend les opérations ci-après ; mise en contact dudit objet avec une solution aqueuse sporicide contenant du glutaraldéhyde et un agent tensioactif choisi dans le groupe constitué par les agents tensioactifs non ioniques et les agents tensioactifs anioniques. 12. Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce que ladite solution est soumise, quand elle est en contact avec 1'objet,à l'action d'un champ acoustique constitué par des sons ou des ultrasons.