FR 2186247 A1 19740111 FR 7219466 A 19720531 L'invention se rapporte à une préparation médicamenteuse applicable dans toutes les indications de le levure thérapeutique dans la pathologie humaine et animale et dans ses conséquences médicales et vétérinaires. Les levures se présentent actuellement sous diérentes formes : eil suspension dans un liquide, ampoules buvabies, desséchées ou lyophilisées, cornprimés, granulés ou paillettes. Une suspension de levures dans leur milieu de culture d'origine est présentée en ampoules buvables. Elle est utilisée e:- thérapeutique habituelle dans les affections intestinales, furonculose et dermatoses, troubles dds d l'antibiothérapie. Cette présentation n'offre cependant qu'une trop faible concentration de levures (150 à 300 millions de germes par ampoule) les résultats obtenus tendant à montrer que les levures doivent être employées doses beaucoup plus élevées. Par ailleurs, l'expérience prouve que les levures disponibles perdent rapidement leur vitalité. La levure supporte mal l'épreuve de la congélation et de la dessiccation, la mortalité au cours de la lyophilisation est importante, de l'ordre de 90 . Elle peut titre notablement réduite par l'apport d'un protecteur. La proportion d'éléments vivants varie selon les conditions opératoires Je 50 à 90%. Les cellules vivantes sont reproductibles lorsqu'elles trouvent in situ, après réhydratation dans un milieu favorable à leur développement optimum, un apport de matériaux nutritionnels indispensables à leur retour à la vie active. Actuellement, aucune levure thérapeutique ne permet d'assurer la reproduction de ces cellules par des éléments nutritionnels incorporés ou liés à la cellule revivifiable.Les levures sous forme de granulés, comprimés ou paillettes qui n1 ont qu'une valeur diététique ne sont pratiquement pas employées en thérapeutique. L'objet principal de la présente invention est un procédé de préparation de levures lyophilisées capables d'assurer après réhydratation ia reproduction des cellules revivifiables ainsi que les préparations pharmace-utiques en résultant, caractérisés en ce que les levures sont intimement liées, avant lyophilisation selon toute méthode connue, à un facteur de croissance qui est un produit d'hydrolyse de la levure : un autolysat, un hydrolysat, un protéolysat ou un moat de bière. La levure préconisée est de préférence une sélection de saccharomycès cerevisiae, variété ultra haute, groupe des ascosporées à sporulation interne ne renfermant aucune race pathogène : souche W. k. Les propriétés pharmacologiques des préparations ainsi obtenues sont d'une part celles déjà bien cornues des levures thérapeutiques, d'outile part des propriétés propres à ces préparations rendant possible des traitements jusqu'alors inefficaces.Ainsi, au lieu d'obtenir des effets relativement très lents ou même dans certains cas pratiquement aucun effet comme par exemple dans le cas d'une forte présence de bactéries pathogènes: staphylocoques dorés, proteus, ou encore de levures pathogènes du genre candida proliférant cours le l'antibiothérapie, les préparations de levures objets de l'inven- tion exercent par leur prolifération une action antagoniste intense sur les bactéries et levures pathogènes entratnant des effets rapides aussi bien en cours de traitement anitbiothérapie qu'après traitement. On pense que les résultats spectaculaires obtenus sont dûs à une action synergique du facteur de croissance intimement lié avec une forte proportion de cellules revivifiables et en association avec les cellules non revivifiables. A titre d'exemple : au cours d'une épidémie de typhus chez le jeune chat, l'entérite aigüe consécutive à cette affection a été traitée suivant la prescription habituelle suivante 10 1 million d'U de pénicilline pendant 3 jours en injection sous cutanée. 20 FOSORYL une injection sous cutanée de 1 cc pendant 6 jours. 30 HEMATOPAN B 12 1 ampoule per os pendant 6 jours. Sur un lot de quatre chats, il a été ajouté à la prescription, dès le début du traitement, une gélule dosée à 0 gr 20 contenant 0 gr 0Oj5 de levure revivifiable 0 gr 045 de facteur de croissance (autolysat de levure) 0 gr 0071 de levure non revivifiable C gr 15 d'un protecteur classique de lyophilisation per os, en deux prises journalières, matin et soir. On a constaté, par rapport aux témoins, une diminution plus rapide du flux diarrhéique, un amaigrissement moins prononcé et une reprise de l'état général abrégeant la convalescence de plusieurs jours. Les lésions de la muqueuse intestinale sont moins importantes et leur cicatrisation plus rapide. De même sur un lot de trois veaux présentant des syndromes-typiques de la diarrhée des veaux, on a prescrit comme à l'habitude 10 BELCOMYCINE : 1 injection intra veineuse de 2 millions de germes 20 DIARINE 1 sachet matin et soir pendant trois jours 30 Ferments lactiques : 1 cuillerée à soupe matin et soir. Régime sans làt, eau de riz préparation N base de carotte, 011 a ajouté N cette prescription la prise de- 3 gélules pendant 5 jours per os, matin midi et soir, pour assurer un réensemencement constant de la mêrne préparation de levures que celle prescrite précédemment pour les chats. Le pronostic de guérison des animaux ainsi traités n été favorablement modifié. On a en effet contaté une diminution du plus diarrhéique, une digestion possible des aliments lactés sans platre, ni mayonnaise, un amaigrissement nettement moins prononcé; la reprise de poids s'est amorcée dès le 4 jour et la période d'abattement a été réduite de plusieurs jours. Dès le retour à l'alimentation lactée, on a enregistré aucune rechute et le poids normal a été rapidement atteint. Les résultats assez spectaculaires de cette préparation a Sase de levures revivi-fiabies sont certainement dis 9 l'action synergique du facteur de croissance qui permet une implantation des levures dans les milieu intestinal assurant ainsi pleinement leur rôle antibactérien et antitoxique en présence du complexe enzyme vitamine B. Selon l'invention, la levure est ensemencée dans un milieu de culture conventionnel adéquat et, dés sa récolte elle est additionnée d'un des facteurs de croissance sus énoncés ou même d'un de leur mélange dans les proportions suivantes AUTOLYSAT 25 à 40 % Levure sèche 20 30 à 30 et d'un protecteur de lyophilisation .......... 30 à 55% calculé en produit sec pour ICO gr. On procède à l'homogénéisation de telle sorte que la cellule de levure soit d'abord enrobée par le facteur de croissance. On ajoute ensuite le protecteur destiné plus particulièrement à assurer la conservation des éléments vivants au cours de la lyophilisation et dans le temps. Ce protecteur se compose de protéines plus ou moins dégradées, d'hydrates de carbone, d'acide ascorbique, de glutamate ou de toute substance possèdant une valeur de conservation dans le temps. Ce protecteur s'ajoute dans les proportions.de 30 à 55 % de l'ensemble autolysat plus levure sèche. L'homogénéisation et la lyophilisation sont conduites suivant les méthodes classiques. Le produit obtenu est aussitôt transformé en poudre par broyage et mis en flacons hermétiquement clos. Ces dernières opérations ont lieu en atmosphère stérile et déshydratée. Le produit stocké dans les conditions requises peut ainsi conserver plusieurs années ses propriétés reproductibles. La numération des éléments vivants s'effectue selon les procédés usuels par dilutions successives et ensemencement sur botte de PETRI, le milieu utilisé étant un milieu standard pour levures. L'incubation se fait à 270 en deux jours. Le résultat obtenu est de l'ordre de 30 à 40 /%' de cellules vivantes du poids total de levures franches calculé en matière sèche. Par exemple, par rapport à 4 grammes, le mélange autolysat-levure-protecteur de lyophilisation représente 60 milliards de cellules totales dont un tiers environ est repro ductible ce qui correspond approximativement à 20 milliards de cellules vivantes. Les levures ainsi préparées peuvent être mises à la disposition de la prescription médicale sous telle forme de présentation pharmaceutiquement acceptable, sous réserve que la bonne conservation des zendes vivants soit assurée. Pour ce faire, la mise en gélules, sachets, ampoules, flacons, capsules, est toujours conduite en atmosphère stérile et déshydratée. En ce qui concerne les gélules, capsules, sachets ou toute autre présentation "permeable", la mise en flacons protecteurs s'impose. On peut parfaire l'opération soit eu faisant le vile, soit en ajoutant un gaz inerte, azote ou gaz carbonique. On peut introduire également Sans le flacon une pastille destinée à neutraliser l'humidité éventuelle. Le produit fini se compose donc essentiellement des constituants suivants 10 PARTIE DE CELLULES REVIVIFIABLES 20 FACTEUR DE CROISSANCE 30 PARTIE DE CELLULES NON REVIVIFIABLES. Ces constituants peuvent être associés dans des proportions allant pour chacun d'eux de la moitié au double des valeurs de la composition de base suivante donnée pour 4 grammes du produit Cellules revivifiables .......... 20 milliards Facteur de croissance .......... 1 g. Cellules non revivifiables ..... 40 milliards. Ces éléments de meme nature biologique mais à des états différents, associés en un mélange intime, constituent un complexe synergique et catalytique. Son homogénéité et la quantité administrée assurent ses propriétés pharmacologiques originales. Bien que lton connaissait déjà les propriétés antagonistes des levures vivantes en présence des bactéries pathogènes et que l'on connaissait aussi la résistance génétique de la levure à toute action antibiotique même à forte dose, on n'avait pu jusqu'à ce jour utiliser pratiquement ces propriétés, les cellules revivifiables étant absentes des préparations de levures actuelles. De plus, ltingestion de cellules revivifiables seules ne pouvait apporter aucune conséquence thérapeutique sérieuse dans les traitements des troubles intestinaux consécutifs à l'antibiothérapie, les cellules revivifiables ne trouvant plus en général les éléments nutritionnels indispensables à leur développement. M!me dans les cas favorables où l'intestin fournirait un milieu de bactéries propice à la présence du complexe enzyme vitamines B, le nombre des cellules revivifiables devrait etre très grand pour que leur action puisse se faire sentir même faiblement. Quant aux cellules non revivifiables de la levure thérapeutique, on connalt bien leurs propriétés surtout dans l'apport du complexe vitaminique B niais en définitive c'était là leur r81e essentiel, leurs propriétés thérapeutiques découlant essentiellement de cet apport. On constate enfin que l'action synergique entre cellules revivifiables et cellules non revivifiables ne se produit que par la présence du facteur e croissance. Dans ce cas, et quelle que soit la pauvreté du milieu intestinal en bactéries génératrices du complexe enzyme vitamines B, les cellules revivifiables exercent leurs propriétés antagonistes sur les bactéries pathogènes, staphylocoques dorés, proteus, ou sur les levures pathogènes ou genre candida proliférant au cours de l'antibiothérapie. Enfin, les cellules non revivifiables exercent un roule direct sur l'association cellules revivifiables - facteur de croissance, renforçant considérablement leur action mutuelle, le rôle des cellules non revivifiables n'étant plus seulement limité qu'à faciliter 11 absorption intestinale des vitamines B. Parmi les indications thérapeutiques, on peut citer notamment - la pathogénie due à l'antibiothérapie. - les affections intestinales aiguës et chroniques, colites. Syndrome entéro rénal. - les indications des vitamines du complexe B. - les furonculose-dermatoses. REVENDICATIONS 1') Procédé de préparations de levures lyophilisées dans lesquelles les levures sont associées à un facteur de croissance caractérisé en ce que le facteur de croissance est un produit d'hydrolyse de la levure et ou un autolysat, un hydrolysat, un proteolysat, un moût de bière, et en ce que ledit facteur de croissance est intimement lié à la levure avant lyophilisation. 2') Préparations médicamenteuses à base de levures thérapeutiques préparées conformément au procédé revendiqué en 1. 3-) Préparation telle que revendiquée en 2 dans laquelle la levure thérapeutique est une sélection de saccharomycès cerevisiae, variété ultra haute, groupe des ascosporées à sporulation interne. 4 ) Préparation telle que revendiquée dans l'une quelconque des revendications 2 ou 3 contenant par dose de O gr 20 - 0,5 à 2 milliards de saccharomycès cerevisiae revivifiables, - 1 à 4 milliards de saccharomycès cerevisiae non rcvivifiables, - 0,02 à 0,09 gr de facteur de croissance, - 0,09 à 0,3 gr de protecteur de lyophilisation. 5 ) Préparation telle que revendiquée en 4 sous forme de gélule dosée à 0,20 gr contenant : - 1 milliard de saccharomycês cerevisiae souche V. R. revivifiable, - 2 milliards de saccharomycès cerevisiae souche W. R. non revivifiables, - 0,045 gr d'autolysat de levure, - 0,150 gr de protecteur de lyophilisation.