FR 2205311 A1 19740531 FR 7339107 A 19731102 La présente invention, due à Umberto VALCAVI, concerne un nouveau procédé de production industrielle d'acide 7-(D-a-aminophénylacétamido)-3-désacétoxy-céphalosporanique pur de formule I: dans laquelle n peut être 0,1,2 ou 3. Le composé I est une céphalosporine semi-synthétique possédant un large spectre bactérien, facilement absorbable après une administration par voie orale et,-en raison des propriétés indiquées, ce composé est couramment utilisé en thérapeutique sur des êtres humains (Sassiver M.L., Lewis B.A., Advan. Appl. Microb.13, 163,1970; Chauvette R.B.,J.Org.Chem.36,1259,1971;Ryan C.W.,Simon R.I.,Van Heyningen E.M., J.Med.Chem.12,310,1969; Griffith R.S.,Black K.R.,Med.Clin.North America 54,1229,1970). En général, pour synthétiser le composé I, on fait appel à l'un des procédés suivants: (a) On condense l'ester trichloréthylique IIa avec l'anhydride mixte Ixia; on obtient ainsi le produit intermédiaire IVa qu'on hydrolyse en composé I avec du zinc et de l'acide formique (voir Chauvette R.B.,J.Org.Chem.36,1259,1971; et les brevets Allemagne Fédérale nOS 2.036.919 et 2.036.907). Ce procédé donne des rendements non satisfaisants en ce qui concerne la production du composé I (en raison d'une stabilité limitée de l'antibiotique en milieu acide) et, d'autre part, le composé I obtenu est contaminé par des sels de zinc. (b) On condense l'ester p-nitrobenzylique IIb avec l'anhydride mixte IIIb et on obtient le produit intermédiaire IVb qu'on hydrolyse avec du zinc et de l'acide acétique ou qu'on soumet à une hydrogénation catalytique, la première variante opératoire aboutissant à des rendements trop faibles alors que la seconde variante est un procédé qui n'est pas économiquement avantageux (voir brevet Allemagne Fédérale N0 2.012.955 et brevet Grande Bretagne 1.270.633). (c) On condense l'ester bromoéthylique IIc avec le chlorure IIIc pour obtenir ainsi le produit intermédiaire IVc qu'on convertit en composé I par réaction avec de l'iodure de sodium et ensuite avec du zinc et de l'acide acétique, mais ce procédé donne des faibles rendements (brevet Allemagne Fédérale N 233787). (d) On condense l'acide IId avec l'anhydride IIId pour obtenir le produit intermédiaire IVd qu'on hydrolyse avec des acides tels que l'acide trifluoroacétique (brevet Allemagne Fédérale N01.917.423);Ryan C.W.,J.Med.Chem.,12,310,1969). Ce procédé utilise la N-t-butyloxycarbonyl-D-phénylglycine qui est un produit dont la fabrication industrielle n'est ni facile ni économique. (e) On condense l'acide IId avec l'anhydride mixte IIIb mais on n'isole l'antibiotique I qu'avec des rendements faibles (brevet France NO 1.524.225)ou bien on utilise pour cette condensation des réactifs qui ne sont pas disponibles économiquement sur le plan industriel, par exemple le N,O-bistriméthylsilylacé- tamide (brevet Grande Bretagne NO 1.269.697. (f) On condense les esters IIa et IIe avec les chlorures IIIc en présence de certains oxirannes tels que l'oxyde d'éthylène (brevet Allemagne Fédérale NO 2.063.268) mais ces oxurannes sont très toxiques et explosifs et ne sont donc pas faciles à utiliser dans des procédés industriels. (g) Par condensation enzymatique entre l'acide IId et l'ester méthylique de D-phénylglycine (Takahashi T., J.Am.Chem. Soc. 94, 4035,1972). (h)Par hydrogénation catalytique de la céphaloglycine V (Brevet France NO 1.524.225)mais ce procédé n'est pas économiquement réalisable attendu que la céphaloglycine V est obtenue à la suite de nombreux stades chimiques en partant des céphalosporines produites par voie microbiologique. (i) Par isomérisation du composé VI (Ochiai M.,Tetrahedron lett.1972,2341) mais ce procédé n'est pas davantage économique. La demanderesse a maintenant trouvé un procédé industriel nouveau pour la production de céphalexine pure (I) dans les conditions suivantes: a) On fait réagir le 7ADCA (IId) avec du triméthylchlorosilane, du diméthyldichlorosilane ou du pivalate de chlorométhyle dans le chlorure de méthylène ou le chloroforme en présence de triéthylamine et de diméthylaniline (ou de diéthylaniline, de quinoléine, d'isoquinoléine ou de pyridine).On doit exécuter une telle réaction à une température supérieure à 200C mais inférieure à 600C,; b) on fait réagir le dérivé silylique ou l'ester pivaloyloxy méthylique de 7ADCA (obtenu de la façon indiquée ci-dessus)avec le chlorhydrate de chlorure de D-phénylglycine en présence de diméthylaniline (ou de diéthylaniline , quinoléine,isoquinoléine, ou pyridin; c) on hydrolyse le dérivé silylique ou l'ester pivaloyloxyméthylique de céphalexine (obtenu de la façon indiquée ci-dessus) par addition d'eau à pH 1,0-1,5;; d) on récupère directement la céphalexine brute par addition d'ammoniac ou de triéthylamine à pH e) on purifie la céphalexine brute par mise en suspension dans l'eau à une température comprise entre 50 et 70 C. Dans ces conditions, on obtient la céphalexine I avec un bon rendement,à un degré élevé de puretéet par un procédé dont l'application industrielle est facile. Pour obtenir un bon rendement en céphalexine I pure, il est essentiel de remplir les conditions suivantes: a) assurer une estérification complète de 7ADCA avec du triméthylchlorosilane, du diméthyldichlorosilane ou du pivalate de chlorométhyle et, selon l'expérience de la demanderesse, il est obligatoire d'effectuer une telle condensation en présence de triéthylamine et de diméthylaniline Cou de diéthylaniline, quinoléine, isoquinoléine ou pyridine) à une température supérieure à 20"C et inférieure à 600C, de préférence une température de 400C;; b) assurer une acylation complète du dérivé silylique ou de l'ester pivaloyloxyméthylique de 7ADCA avec le chlorhydrate de chlorure de D-phénylglycine et, selon l'expérience de la demanderesse, il est nécessaire d'effectuer une telle condensation en présence de certaines bases aromatiques ou hétérocycliques telles que la diméthylaniline (ou diéthylaniline, quinoléine, isoquinoléine ou pyridine); c)effectuer une hydrolyse complète du dérivé silylique ou de l'ester pivaloyloxyméthylique de céphalexine I et,selon l'expérience de la demanderesse, on doit ajouter de l'eau et effectuer une telle hydrolyse à un pH de 1,0 à 1,5 et à une tem pérature de? 0 à 200C, de préférence, à OOC; ; d) récupérer la céphalexine pure par addition d'ammoniac ou de triéthylamine à un pH de 3,5-4,5, filtration du produit brut et ensuite mise en suspension du produit brut dans l'eau à une température comprise entre 50 et 700C, de préférence de 600C. On a constaté en fait que si la condensation entre l'acide 6-aminopénicillanique (VII) et l'anhydride mixte IIIb ou le chlorhydrate de chlorure de D-phénylglycine IIIc se produit avec de-s rendements très élevés et permet d'obtenir l'ampicilline pure VIII, au contraire, la condensation entre 7ADCA IId et l'anhydride mixte IIIb ou le chlorure IIIc donne des rendements faibles de céphalexine I qui n'est pas pure, peut être en raison du fait que,dans le composé IId, le groupe carboxylique à insaturation a,P, qui est très réactif, entre en réaction avec le groupe carboxylique de IIIb ou IIIc pour donner ainsi un nouvel anhydride mixte entre 7ADCA et la D-phénylglycine, de sorte qu'on trouve finalement un polymère de 7ADCA et de D-phénylglycine. On a constaté qu'on peut éviter cette réaction par une estérification complète du groupe carboxylique dans IId avec un groupe de protection; un tel groupe de protection doit être introduit facilement et économiquement et doit être facile à éliminer entièrement à la fin de la réaction. On a maintenant établi que la condensation entre de tels esters de 7ADCA (Ild) et le chlorhydrate de chlorure de D-phénylglycine se produit avec d'excellents rendements si l'on opère en présence d'une base aromatique ou hétérocyclique telle que la diméthylaniline, la diéthylaniline, la quinoléine, l'isoquinoléine ou la pyridine. En opérant dans les conditions indiquées, on peut obtenir la céphalexine I avec des rendements excellents à. l'échelle industrielle et aussi d'une excellente pureté (la céphalexine I contient moins de 1% de D-phénylglycine et moins de 1% de 7ADCA IId; Les exemples suivants dans lesquels toutes les proportions sont en poids servent à illustrer l'invention sans aucunement en limiter la portée: EXEMPLE 1. - On traite 300 g de 7ADCA (IId) dans 6 litres de chlorure de méthylène à 20"C avec 400 ml de triéthylamine et 200 ml de diéthylaniline. Sous atmosphère d'azote à 20"C, on ajoute 370 ml de diméthyldichlorosilane et on soumet le mélange au reflux avec agitation pendant 45 minutes.On refroidit la suspension à une température de -15 C en 20 minutes et, à cette température,on ajoute 289 g de chlorhydrate de chlorure de D-phénylglycine. On conserve la suspension à -10 C pendant 30 minutes et ensuite à 20 C pendant 3 heures, on filtre et on ajoute 1 litre d'eau à 0 C. Aprs agitation pendant 10 minutes à OOC, on ajoute de la triéthylamine jusqu'à l'établissement d'un pH de 4,0 à cette même température de OOC. On dilue la suspension avec 5 litres d'acétone, on sépare par filtration la céphalexine brute et on lave avec 2,5 litres d'un mélange de CH2C12, H20, acétone, dans un rapport de 4:1:4 en volume, à 0 C. On sèche le produit avec agitation pendant 10 minutes à 60 C. Après refroidissement à 0 C, on filtre le produit, on lave avec de l'eau distillée à 0 C, on sèche à 40 C et on obtient 450-g de monohydrate de céphalexine I. -Humidité (K.Fischer) =4,50% -~~~~~ 262 u =ElXcm 210 [&alpha;]D20 C 0,1% dans l'eau = +140 -Titrage pour l'acide (avec méthy latede sodium) =99% de l'étalon ou norme FDA sous forme de céphalexine anhy dre sur produit anhydre. -Titrage d'amine(avec acide perchlorique) =98% de norme FDA sous forme de céphalexine anhydre sur produit anhydre. -Titrage iodométrique (selon FDA, CFR) 148 W 6 = 101% de norme FDA sous forme de céphalexine anhydre sur produit anhydre. -Biotitrage (Sarcina lutea selon = 98% de norme FDA sous forme de FDA,CFR 148 W 6) céphalexine anhydre sur produit anhydre. -5pectre I.R. = Comme la norme FDA. -Chromatographie en couche mince C (gel de silice) ( (Eluant:isopropanol-eau-HCOOH Un spot seulement avec Rf 0,8 80:20:4 en volume) ( à titre d'étalon 7ADCA et (développement: ninhydrine 1% dans éthanol et ensuite ( D-phénylglycine moins de 1%. 10 minutes à 110 C) ( EXEMPLE 2. On procède comme dans l'exemple 1, en conservant-les mêmes conditions opératoires et en partant de 300 g de 7ADCA (IId)mais en utilisant 376 ml de triméthylchlorosilane au lieu de 370 ml de diméthyldichlorosilane. On obtient 400 g de monohydrate de céphalexine (I) dont les propriétés chimiques, physiques et biologiques sont les mêmes que celles du produit de l'exemple 1. EXEMPLE 3. On procède comme dans l'exemple 1, en conservant les mêmes conditions opératoires et en partant de 300 g de 7ADCA (IId)mais en utilisant 200 ml de quinoléine au lieu de 200 ml de diéthylaniline. On obtient 270 g de monohydrate de céphalexine (I) dont les propriétés chimiques, physiques et biologiques sont les mêmes que celles du produit de l'exemple 1. EXEMPLE 4. On agite 30 g de 7ADCA (IId) dans 605 ml de CH2Cl2 et à une température de 15 à 200C, on traite avec 39,3 ml de triéthylamine et 19,4 ml de diméthylaniline. En atmosphère d'azote à une température de 12 à 15 C, on ajoute en 10 minutes 37,6 ml de triméthylchlorosilane. On soumet le mélange au reflux pendant 45 minutes à 400C en atmosphère d'azote. On refroidit la suspension à -15 C et on ajoute 28,9 g de chlorhydrate de chlorure de Dphénylglycine et ensuite 60 ml de CH2C12. On agite la sus pension en atmosphère d'azote pendant 30 minutes à -10 C, puis pendant 30 minutes à + 10 C et pendant 3 heures à +20 C.On filtre la suspension sur 3 g de celite, on lave à trois reprises dans 100 ml de CH2Cl2, on traite le filtrat limpide à 0 C avec 125ml d'eau également à 0 C. On agite le mélange pendant 10 minutes à OOC, on ajoute à une température de +10 C une quantité de triéthylamine suffisante pour porter le pH à 3,5-4,0; puis on ajoute 560 ml d'acétone, on agite le mélange pendant 1 heure à 0 C et on filtre le produit, on le lave trois fois dans 80 ml d'un mélange de CH2Cl2,H20 et acétone (4:1:4 en volume) à 0 C et on sèche à 4000. On met le produit (75g) en suspension dans 200 ml d'eau distillée, on agite la suspension pendant 30 minutes à 200C en corrigeant le pH à l'aide de NH40H pour le maintènir à 3,5, puis on chauffe à 600C pendant 10 minutes, on refroidit à 5 C en 30 minutes et on filtre le monohydrate de céphalexine (I), on le lave six fois dans 10 ml d'eau distillée à 50C et on sèche le produit sous vide à 4000. On obtient ainsi 30g de monohydrate de céphalexine pure (I). - Humidité (K. Fischer) = 4,8% eau 1% max 264-266 m = E1cm 212 telle quelle -[&alpha;]D20 C 0,1% dans l'eau = +142 " " -Spectre I.R. Comme la norme FDA. -Titrage pour l'acide (avec méthylate de sodium) =101% de norme FDA sous forme de céphalexine anhydre sur produit anhydre. -Titrage d'amine(avec HClO4) = 97% de norme FDA sous forme de céphalexine snhydre sur produit anhydre. -Titrage iodométrique(selon FDA, = 99% de norme FDA sous forme CFR 148 W 6) de céphalexine anhydre sur produit anhydre. Biotitrage (Sarcina Lutea selon = 97% de norme FDA sous forme FDA, CFR 148 W 6) de céphalexine anhydre sur produit anhydre. Chromatographie en couche mince =comme la norme 7ADCA et D-phénylglycine moins de 1%. EXEMPLE 5. On procède comme dans l'exemple 4 en conservant les mêmes conditions opératoires et en utilisant 605 ml de CHCl3 au lieu de 605 ml de CH2Cl2 et on obtient 25 g de céphalexine monohydratée (I) dont les propriétés chimiques, physiques et biologiques sont les mêmes que celles du produit de l'exemple 4. EXEMPLE 6.- On met en suspension 150 g de 7ADCA (IId) dans 3 litres de CH2Cl2 et on traite à une température de 12 C et avec agitation avec 197 ml de triéthylamine et 97 ml de diméthylaniline. A une température de 12 à 15 C, on ajoute en 10 minutes 188 ml de triméthylchlorosilane. On traite le mélange par reflux pendant 45 minutes en atmosphère d'azote (+410C) et ensuite on refroidit à -15 0C. En 20 minutes et à cette température de -150C, on ajoute 166,5g de chlorhydrate de chlorure de D-phénylglycine. Après agitation en atmosphère d'azote pendant 30 minutes à -100C, pendant 30 minutes à +10 C et pendant 3 heures à 20 C, on filtre la suspension sur 150g de celite et on lave dans 3 x 530 ml de CH2cl2. On refroidit le filtrat limpide à 0 C et on traite avec 625 ml d'eau distillée à 0 C; après 10 minutes d'agitation à OOC, la phase de chlorure de méthylène est séparée et on la lave avec 330 ml d'eau distillée. On traite les phases aqueuses combinées (1640 ml)avec de la triéthylamine jusqu'à l'établissement d'un pH de 3,8 (166 ml de triéthylamine), on évapore à 20 C pendant 1 heure pour faire disparaitre les traces de solvant, on chauffe la suspens ion à 600C et on agite à cette température pendant 10 minutes. Après 16 heures à 0 C, on filtre le produit solide, on lave avec 450 ml d'eau distillée et on sèche à 45 C sous vide. On obtient 233 g d'une forme nouvelle de céphalexine; il est vraisemblable que ce produit est la céphalexine dihydratée dont il a déjà été question. eau 1% 249-254 mp =E 1cm 222 -Humidité (K.Fischer) =10,3% -pH 5 dans l'eau =5,2 -[&alpha;]D20 C 0,1% dans l'eau =118 -Titrage pour l'acide (avec méthylate = 90% de norme FDA de sodium) sous forme de céphalexi ne anhydre sur produitanhydre -Titrage d'amine (avec HCl04) =105% de norme FDA sous forme de céphalexi ne anhydre sur produit anhydre. -Titrage iodométrique(selon FDA, =93,2% de norme FDA 0FR 148 W 6) sous forme de céphalexi ne anhydre sur produit anhydre. -Spectre I.R. =non identique (voir figure 1)à la norme FDA (voir figure 2). -Chromatographie en couche mince =1 seul spot avec le même Rfque la norme FDA de céphalexine monohydratée. On sèche un échantillon pendant 2 jours à 500C jusqu'à un poids constant: -Humidité ( E.Fischer) =10,36% -#maxeau 249-254 m =E1cm1% 221 20 -[&alpha;]D C C 0,1% dans l'eau = 117 -Titraqe pour l'acide (avec méthy late de sodium) =91% de norme FDA sous forme de céphalexine anhydre sur produit anhydre. -Titrage d'amine (avec HClO4) = 103% de norme FDA sous forme de céphalexine anhydre sur pro duit anhydre. -Titrage iodométrique (selon FDA, CFR 148 W 6) = 92% de norme FDA sous forme de céphalexine anhydre sur produit anhydre. (a) On met en suspension 100 g de céphalexine dihydratée du type décrit dans 400 ml d'eau distillée, on agite la suspension pendant 30 minutes à 20 C à pH 3,9, on chauffe à 600C et on agite pendant 10 minutes à cette température. Après refroidissement à 0 C, filtre, on lave avec de l'eau distillée et on sèche à 500C. On obtient 66,6 g de céphalexine monohydratée (I). -Humidité (K.Fischer) ,6,01% max 262 nu lcm 227 sur produit anhydre -[&alpha;]D20 C 0,1% dans l'eau = + 157 sur produit anhydre -Spectre i.R. comme FDA norme de céphalexine monohydratée. -Titrage pour l'acide (avec =91,3% de norme FDA sous forme de méthylate de sodium) céphalexine anhydre sur produit anhydre. -Titrage d'amine(avec HClO4) =105% de norme FDA sous forme de céphalexine anhydre sur produit anhydre. -Titrage iodométrique (selon FDA,=100,6% de norme FDA sous forme CFR 148 W 6) de céphalexine anhydre sur pro duit anhydre. Biotitrage (Sarcina lutea selon = 91,45% de norme FDA sous forme FDA,CFR 148 W 6) de céphalexine anhydre sur pro duit anhydre. -Chromatographie en couche mince = comme la norme. (b) Oh met en suspension 100 g de céphalexine dihydratée du type décrit dans 700 ml d'eau distillée et 1400 ml d'acétonitrile à + 10 C et on dissout avec la triéthylamine jusqu'à pH 9. On filtre la solution sur de la celite, on lave avec 85 ml d'un mélange (2:1) d'acétonitrile et d'eau et on ajoute du HCl à 15% à une température de 10 C jusqu'à pH 6,5. On filtre le produit solide, on sèche et on met en suspension dans 140 ml d'eau distillée à 65 C pendant 20 minutes. On filtre le produit solide, on lave avec de l'eau, on sèche sous vide à 50 C et on obtient 60g de céphalexine monohydratée I. -Humidité ( K. Fischer) = 6,84% eau 1% Mmax 262 m = E1cm 235 sur produit anhydre 20 C 0,1% dans l'eau = + 167 sur produit anhydre -Spectre I.R. =comme FDA norme de céphaixine monohydratée. -Titrage pour l'acide (avec méthy late de sodium) =102,5% de norme FDA sous forme de céphalexine anhydre sur pro duit anhydre. -Titrage d'amine (avec HC104) =92,5% de norme FDA sous forme de céphalexine anhydre sur pro duit anhydre. -Titrage iodométrique (selon FDA, =95,3% de norme FDA sous forme CFR 148 W 6) de céphalexine anhydre sur pro duit anhydre. Biotitrage (Sarcina lutea,selon =99,2% de normeFDA sous forme FDA, CFR 148 W 6) de céphalexine anhydre sur pro duit anhydre. -Chromatographie en couche mince =comme la norme. EXEMPLE 7. On traite 108 g de 7ADCA (IId) dans 2000 ml de CH2C12 avec 98ml de triéthylamine et 70 ml de diméthylaniline et, à une température de 20 C, avec 148 ml de pivalate de chlorométhyle. On traite le mélange sous reflux jusqu'à ce que le composé 7ADCA (IId) soit complètement estérifié (détermination par chromatographie en couche mince comme ci-dessus: gel de silice et comme éluant un mélange 80:20:40 en volume d'isopropanol, d'eau et de HCOOH). On refroidit la suspension à -15 0C et ensuite en 20 minutes et à la température de -150C, on ajoute 96 g de chlorhydrate de chlorure de D-phénylglycine. On agite la suspension à -10 C pendant 30 minutes puis à +100C pendant 30 minutes et à +20 C pendant 3 heures. Après refroidissement à 0 C, on ajoute 330 ml d'eau distillée, on agite le mélange à pH 1,0-1,5 à 0 C jusqu'à l'hydrolyse complète du groupe pivaloyloxyméthylique (en utilisant la chromatographie en couche mince comme expliqué plus haut). On ajoute de la triéthylamine jusqu'à pH 3,5 à 0 C, on dilue la suspension avec 1,7 litres d'acétone, on filtre la céphalexine brute et on lave avec 800 ml d'un mélange de CH2Cl2, de H20 et d'acétone (4:1:4 en volume) à 0 C. On sèche le produit à 400C et on met en suspension la céphalexine brute ainsi obtenue dans 700 ml d'eau distillée à 60 C pendant 10 minutes. Après refroidissement à G C, on filtre le produit, on lave avec de l'eau distillée et on sèche à 40 C. On obtient 50 g de céphalexine monohydratée (I): -Humidité (K.Fischer) = 6,2% eau -#max 262 m =E1cm1% 220 sur produit anhydre -[&alpha;]20 C @ 1% dans l'eau @ @ 142 @@@ @@@duit @@@@@@@ -[&alpha;]D @ 0,1% dans l'eau = + 142 sur produit anhydre -Titrage pour l'acide (avec méthylate (de sodium) = 91% de norme FDA sous forme de céphalexine anhydre sur produit anhydre. -Titrage d'amine (avec HClO4) =107% de norme FDA sous forme de céphalexine anhydre sur produit anhydre. -Titrage iodométrique (selon FDA, CFR 148 W 6) = 91% de norme FDA sous forme de céphalexine anhydre sur produit anhydre. Comme il va de soi et comme il résulte d'ailleurs déjàde ce qui précède,l'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes d'application et de réalisation qui ont été plus spécialement envisagés;elle en embrasse, au contraire, toutes les variantes. -REVENDICATION Procédé pour la production industrielle de céphalexine pure de formule ci-après: dans laquelle n est égal à 0,1,2 ou 3, caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir le composé 7ADCA (IId) avec un réactif choisi parmi le triméthylchlorosilane, le diméthyldiClflorosilane et le pivalate de chlorométhyle dans un solvant choisi parmi le chlorure de méthylène et le chloroforme en présence de triméthylamine et d'une seconde base choisie parmi la diméthylaniline, la diéthylaniline, la quinoléine, l'isoquinoléine et la pyridine,à une température supérieure à 20"C mais inférieure à 600C; ; à faire réagir le dérivé silylique ou l'ester pivaloyloxyméthylique de 7ADCA ainsi obtenu avec le chlorhydrate de chlorure de D-phénylglycine en présence d'une base choisie parmi la diméthylaniline, la diéthylaniline, la quinoléine, l'isoquinoléine et la pyridine; à hydrolyser le dérivé silylique ou l'ester pivaloxyméthylique de la céphalexine ainsi obtenu par addition d'eau à pH 1,0-1,5; à récupérer directement la céphalexine brute par addition d'ammoniac ou de triéthylamine à pH 3,5-4,5; et à purifier la céphalexine brute ainsi obtenue par mise en suspension dans l'eau à une température comprise entre 50 et 70 C.