FR 2112398 A1 19720616 FR 7139211 A 19711102 La présente invention révèle que le complexe d'urée a' substitution pyrimidine représenté par la formule peut être utilisé en quantités plus petites que celles enseignées antérieurement, en utilisant une composition d'alimentation pour volailles contenant aussi de la 1,3-bis-(p-chloro benzylidèneamino)-guanidine : aux doses spécifiées. La présente invention concerne une nouvelle composition d'alimentation pour volailles qui contient des quantités relativement petites de 1,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)- guanidine en mélange avec un complexe durée à substitution pyrimidine ayant la formule Le complexe ci-dessus est un composé chimique distinct qui est un complexe équimoléculaire du 4,4'-dinitrocarbanilide et de 2-hydroxy-4,6-diméthyl pyrimidine. Ce complexe est connu de l'homme de l'art comme étant très actif contre la maladie de la volaille, la coccidiose; voir, par exemple, le brevet E.U.A. n" 2.731.382. Le composé a le nom général de nicarbazine et sera ainsi désigné ci-après. La nicarbazine est, comme spécifié ci-dessus, extr8me- ment active contre la coccidiose. La coccidiose est une maladie commune et répandue de la volaille causée par des espèces de parasites protozoaires du genre Eimeria. Les plus importantes de ces espèces sont E. maxima, E. acervulina, E. tenella E. necatrix et E. brunetti. Chez les dindons, E. meleagridis et E. adenoeides sont aussi des organismes responsables de coccidiose. Quand elle n'est pas traitée, la maladie conduit à un gain médiocre de poids, à une efficacité réduite de l'alimentation et à une haute mortalité. Pour cette raison, la lutte contre la coccidiose est très importante-dans l'industrie avicole. Bien que E. tenella et E. necatrix soient responsables des formes les plus mortelles de la maladie, il est connu que des infections dues à d'autres espèces, et particulièrement aux espèces dites intestinales comme E. acervulina, E. brunetti et E. maxima, posent aussi un problème économique sérieux. Toutefois, la nicarbazine n'est pas un agent coccidiostatique complètement satisfaisant. Elle présente sa meilleure activité à des proportions dans l'alimentation qui limitent son utilisation au marché des poulets, c'est-à-dire des volailles qu'on élève jusqu'à l'âge de 2 à 4 mois avant de les tuer. La dose préférée d'utilisation de 0,0125 %, par rapport au poids de l'alimentation de la volaille, quand elle est administrée à ce niveau, c'est-à-dire à des pondeuses et à des troupeaux de remplacement, présente des effets secondaires indésirables comme de toxicité pour les embryons et de coloration des oeufs. Même pour des poulets, a marge de sécurité est très étroite avec cette proportion préférée d'utilisation et petites erreurs dans l'opération de mélange des aliments par l'industrie peuvent être sérieuses. il sera évident qu'un produit plus avantageux est celui qui peut être utilisé sans effets secondaires sur le troupeau entier. Des doses de nicarbazine dans l'alimentation de O,Q06 % ou moins (en % en poids des aliments) sont exemptes d'effets secondaires indésirables pour les poulets, mais ces doses ne fournissent pas une protection suffisante contre une coccidiose provoquée par des espèces mélangées sur le terrain. En conséquence, la prézente invention a pour but de fournir un aliment pour volaille qui contient de la nicarbazine dans des proportions non toxiques et coccidiostatiques, sans effets secondaires. bulle a aussi pour but de fournir une composition d'alimentation pour volaille contenant de la nicarbazine utilisable tant pour les poulets que pour les pondeuses, efficace contre la coccidiose et exempte de tous effets indésirables. Un autre but de l'invention est de fournir un aliment pour volaille contenant des proportions très faibles de nicarbazine et de 1sn-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)-guauidine, cette composition alimentaire présentant un haut degré d'efficacité contre la coccidiose. Un autre but encore est de fournir un procédé perfectionné pour lutter contre la coccidiose des vdailles par l'administration simultanée de petites quantités de nicarbazine et de 1,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)-guanidine. Un autre but est de fournir des prémélanges et/ou suppléments alimentaires pour volailles contenant de la nicarbazine et de la 1, 3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino) -guanidine en quantités qui agissent contre la coccidiose quand elles sont administrées aux volailles avec les aliments. Le composé 1,5-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)-guanidine est déåà connu (voir, par exemple, le brevet belge n0 735.375). Le composé est préparé commodément sous la forme d'un sel so- luble, par exemple sous la forme du nitrate, du méthylsulfate, du bromhydrate, du chlorhydrate ou d'autres sels similaires. Sa forme préférée est celle du sel chlorhydrate, le chlorhydrate de 1,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)-guanidine. On prépare ce composé par l'addition d'une solution aqueuse concentrée de chlorhydrate de 1 ,3-diaminoguanidine, contenant quelques gouttes d'acide chlorhydrique libre, à une solution chaude de p-chlorobenzaldéhyde (k,2 équivalents) dans un solvant organique approprié, comme l'éthanol ou le méthanol. le mélange est maintenu à la température ambiante pendant plusieurs heures et le précipité résultant est recueilli, lavé et recristallisé à partir -d'éthanol par exemple. Le sel cristallin blanc, le chlorhydrate de 1,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)-guanídine, a un point de fusion de 289-290 C avec décomposition. La forme préférée de ce composé est la 1,3-bis-(p chl orobenzylidèneamino ) -guanidine ou un sel d'addition d'acide non toxique. Toutefois, il existe d'autres guanidines équivalentes qui peuvent eAtre utilisées avantageusement aussi. Par exemple, les composés suivants sont utiles en combinaison avec la nicarbazine dans la mise en oeuvre de la présente invention où R1 et R5 représentent chacun un halogène ou un groupe trifluorométhyle ou cyano, R2 et R6 représentent chacun de l'hydrogène ou un halogène, R3, R4, R7 et R8 représentent chacun de l'hydrogène ou un groupe alcoyle inférieur ayant de 1 à 4 atomes de carbone et R9 représente de l'hydrogène en un groupe alcanoyle inférieur ayant de 1 à 4 atomes de carbone; le terme halogène devant être compris comme englobant la série entière chlore, brome, fluor ou iode. Le composé 1 ,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino) -guani- dine est connu comme ayant une activité coccidiostatique. le brevet belge nO 735.375 révèle un domaine d'activité de 0,0015 à 0,025 %, par rapport au poids de l'aliment pour volaille servant de véhicule. il est connu, toutefois, que malgré son activité supérieure contre la coccidiose, l'utilisation de ce composé à des doses de plus de 0,007 % ou d'environ 0,007 % pose des problèmes de toxicité. Par exemple, la qualite du produit viande de volaille est défavorablement influencée, de sorte qu'un gott anormal est détectable durant la consommation de la viande.De plus, à des doses inférieures à 0,0007 %, l'effica- cité de la lutte contre une infection de coccidiose par des espèces mélangées est peu satisfaisante, comme on le voit par des taux accrus de mortalité chez les volatiles traités et aussi par un gain réduit de poids par rapport à des volatiles témoins non infectés. On a maintenant trouve qu'une composition contenant de faibles proportions à la fois de nicarbazine et de 1,3-bis-(pchlorobenzylidèneamino)-guanidine est très efficace contre une infection de coccidiose par des espèces mélangées. De plus , les quantités de chacun des composés sont telles qu'on n'observe pas du tout de toxicité ou d'effets secondaires, tandis qu'on observe une efficacité à peu près complète contre une infection par des espèces mélangées. Ceci était inattendu, car il n'était pas évident que deux agents coccidiostatiques ayant des modes d'activité différents pourraient être utilisés chacun à raison de quantités n'entraSnant pas d'effets secondaires nuisibles, mais maStrisant la coccidiose dans une infection à large spectre. Le point essentiel de la présente invention est qu'on a éliminé les effets secondaires de deux agents anticoccidiens différents tandis qu'on maîtrise l'infection en utilisant des quantités individuelles de chaque médicament qui isolément ne sont pas actives d'une manière sûre contre la coccidiose. Quand on parle de quantités qui "ne sont pas actives d'une manière sûre", on veut dire qu'à certains points (bas) des intervalles spécifiés pour les deux composés, un essai peut indiquer qu'il existe un niveau de symptômes coccidiens observés correspondant à une mat- trise de l'infection, tandis qu'un autre essai identique indique une maîtrise moindr*te l'infection.Par ailleurs, à certains points (élevés) dans les intervalles spécifiés, l'infection coccidienne est maîtrisée, mais les effets secondaires toxiques militeraient contre l'utilisation de ces quantités. On comprendra qu'il existe des preuves que certaines des combinaisons revendiquées atteignent un niveau de "synergie" ou d'une interaction inattendue et extraordinaire entre/ltes deux composes. Toutefois, d'autres des combinaisons revendiquées n'atteignent pas ce niveau, mais présentent cependant des résultats additifs exceptionnels et inattendus. Bien que la présente invention soit décrite en parlant de nicarbazine, ce dernier composé fait partie d'une classe de composés très voisins qui présentent tous une activité anticoccidienne et qui sont décrits par exemple dans les brevets S.U.A. n" 2 8 3 162, 2 762 743, 2 762 742, 2 731 385, 2 731 384, 2 731 383, 2 731 382, 2850530, 2 881 157 et 3 008 873. N'importe lesquels de ces composés peuvent autre utilisés efficacement en petites quantités en étant combinés avec les guanidines substituées décrites ici. L'une des compositions nouvelles de la présente invention est une composition alimentaire solide ingestible pour volaille contenant de 0,001 à 0,006 % environ de nicarbazine en combinaison avec 0,0002 à 0,0015 % environ de 1,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)-guanidine ou d'un sel d'addition d'acide non toxique de ce composé. On comprendra que les quantités relativement petites de 1,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)-guanidine, c'est-à-dire inférieures à 0,0004 % et descendant åusqu'à 0,0002 *, sont utilisées de préférence avec les quantités relativement grandes de nicarbazine, c'est-à-dire de 0,005 à 0,006 %. De préférence, la nouvelle composition de la présente invention est une composition alimentaire pour volaille contenant de 0,001 à 0,003 % de nicarbazine et de 0,0004 à 0,0015 * de 1, 3-bis-(p-cnlorobenzylidèneamino) -guanidine. Les pourcentages sont basés sur le poids de l'aliment pour volaille. D'une façon particulièrement préférable, la nouvelle composition est un aliment pour volaille contenant de 0,001 à 0,003 % environ de nicarbazine et de 0,0004 à 0,0008 % environ de 1,3-bis-(p chlorobenzylidèneamino) -guanidine. La composition préférée optimale contient 0,003 * environ de nicarbazine et 0,0004 * environ de 1,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)-guanidine.Dans ces proportions, contre une infection par cinq espèces mélangées, aucun des composés isolément n'est actif contre la coccidiose. Toutefois, la combinaison est très active contre la coccidiose. Les aliments solides finis contenant le mélange de la présente invention dispersé ou distribué en leur sein sont n'importe lesquels de ceux habituellement utilisés dans l'industrie avicole et qui sont suffisants pour la nutrition, conte nant normalement une source de graisse, de protéine, d'hydrate de carbone, des substances minérales, des vitamines et autres facteurs nutritifs. Les aliments peuvent contenir aussi des agents favorisant la croissance, des antibiotiques ou d'autres coccidiostatiques, comme l'amprolium ou l'éthopabate. L'aliment contenant la proportion désirée d'agent coccidiostatique, c'est à-dire la concentration désirée en pourcentage en poids, est fourni ad libitum à la volaille. Ainsi qu'il sera compris de l'homme de l'art, la dose de médicament administrée est exprimée habituellement sous la forme d'une concentration dans la nourriture des volatiles plutôt que par rapport au poids des volatiles. Selon un autre aspect de l'invention, qui est préféré, on envisage de nouvelles compositions anticoccidiennes qui comprennent le mélange de la présente invention intimement dispersé ou mélangé dans un véhicule ou diluant inerte mangeable. Ce véhicule est habituellement un élément de subsistance des volailles, cest-à-dire qui est ou peut être un ingrédient de l'alimentation de l'animal et qui a un certain degré de valeur nutritive pour l'animal. Ces compositions solides sont ce qu'on appelle les suppléments alimentaires ou prémélanges alimentaires qui contiennent des quantités relativement grandes d'agent coccidiostatique et qui sont prévus pour addition à la nourriture de la volaille soit directement soit après une tape intermédiaire de dilution ou de mélange.Des exemples de véhicules ou diluants nutritifs utilisables pour ces compositions sont des ingrédients d'alimentation des animaux comme les grains séchés de distillerie, la farine de mais, la farine de citron, les résidus de fermentation, les coquilles d'huitres broyées, les sous-produits de meunerie, les matières solubles de mélasse, la farine d'épis de mals, des substances végétales comestibles, la farine de soåa écossé grillée, un aliment au soåa moulu, du mycélium antibiotique, du gruau de soja, de la pierre calcaire broyée, etc. Les agents coccidiostatiques sont dispersés ou mélangés intimement dans tout ce véhicule solide par des techniques comme le broyage, le brassage, le malaxage ou le mélange par basculement Zn choisissant des diluants appropriés et en modifiant le rapport du véhicule à l'ingrédient actif, on peut préparer des compositions d'une c-oncentration désirée quelconque. Des compositions contenant de 2 à 10 % environ en poids de nicarbazine et de 0,02 à 3 c/o environ en poids des dérivés de guanidine sont particulièrement utilisables pour addition à des matières alimentaires pour la volaille. De préférence, la composition peut contenir de 2 à 6 % environ en poids de nicarbazine et de 1,5 à 1,7 > environ en poids du dérivé de guanidine. Les composés actifs sont habituellement dispersés ou mélangés uniformément dans le diluant, mais dans certains cas ils peuvent etre adsorbés sur le support Comme il est commode pour le fabricant d'aliments d'utiliser environ 0,45 kg de supplément alimentaire pour chaque tonne d'aliment fini, la concentration préférée dans le supplément est fonction de la proportion d'ingrédient actif désirée dans l'aliment fini.Bien que les quantités relatives des deux ingrédients actifs puissent être exprimées sous la forme de rapports, on préfère, pour plus de simplicité, les exprimer en pourcentages en poids. On peut évidemment calculer facilement des rapports en utilisant les valeurs numériques données. Des exemples de tels suppléments alimentaires pour la volaille sont les suivants À. Nicarbazine 3 kg 1 ,3-bis-(p-chlorobenzylidène amino)-guanidine . HCl 2 kg ous-produits de meunerie 95,0 kg B. Nicarbazine 2 kg 1 , 3-bis-(p-chlorobenzylidène- amino)-guanidine , HCl 1,5 kg Sous-produits de meunerie 46,5 kg Grains séchés de distillerie 50,0 kg C. Nicarbazine 1,3-bis-(p-chlorobenzylidène- amino)-guanidine . HCl 3 kg Farine de germe de mais 37,0 kg Grains de distillation de mais 50,0 kg Ces suppléments -sont préparés par malaxage ou mélange mécanique des ingrédients pour assurer une distribution uniforme du composé actif. Les suppléments alimentaires du type illustré sont habituellement dilués encore avec des ingrédients alimentaires comme de la farine de mais ou de la farine de soåa avant d'être incorporés dans la nourriture des animaux. Dans cette étape intermédiaire de traitement, la proportion d'agent coccidiostatique est réduite, facilitant ainsi une distribution uniforme des substances dans l'aliment fini qui est un aliment suffisamment nutritif contenant normalement une source de graisse, de protéine, d'hydrate de carbone, des substances minérales, des vitamines et d'autres facteurs nutritifs. il sera évident aussi pour l'homme de l'art que des compositions spéciales de suppléments alimentaires et d'aliments finis pour animaux contenant des vitamines, des antibiotiques, des agents favorisant la croissance et d'autres substances nutritives et anticoccidiennes peuvent comprendre les nouveaux composés anticoccidiens de la présente invention. Les exemples non limitatifs suivants montreront bien comment la présente invention peut être mise en oeuvre. Exemple L'activité coccidiostatique de la combinaison de la présente invention est déterminée de la manière suivante On conduit deux essais différents, comme indiqué dans les Tableaux I et II. Des groupes de dix poussins âgés de 2 semaines sont nourris avec une bouillie contenant des quantités échelonnées des composés comme indiqué. Le composé est dispersé uniformément dans la nourriture. Âpres que les poussins ont été ainsi nourris pendant 24 heures, on inocule à chacun 50.000 oocystes sporulés de chacune des cinq espèces suivantes (250.000 au total) : B. tenella, S. acervulina, E. maxima, b. necatrix et E. brunetti. D'autres groupes de dix poussins sont nourris avec une bouillie similaire qui ne contient pas d'agent coccidiostatique.Ils sont aussi infectés de la même manière après 24 heures et servent de témoins positifs ou infectés. Comme témoins infectés, on utilise 2 à 4 groupes de dix poussins chacun. Autres groupes encore de dix poussins sont nourris chacun avecKa bouillie exempte d'agent coccidiostatique et ne sont pas infectés de coccidiose. Ils servent de témoins normaux. les régimes sont administrés aux poussins pendant huit jours après la date d'infection. Au bout de ce temps, on sacrifie tous les volatiles. On autopsie les volatiles, et on compte les oocystes par examen microscopique des homogénats caecal, intestinal et duodénal. On observe grossièrement les lésions dans le caecum, le duodénum et l'intestin. Les résultats en utilisant les quantités indiquées de composé coccidiostatique, exprimés en valeurs moyennes, sont donnés dans le Tableau ci-dessous. On indique aussi l'indice anticoccidien, qui est déterminé en combinant les divers critères utilisés pour évaluation de l'efficacité de la médication pour donner un critère unique d'efficacité. L'indice anticoccidien indique l'activité anticoccidienne relative globale de la médication. L'indice anticoccidien est la somme de (1) le pourcentage de volatiles survivants plus (2) le pourcentage de gain relatif de poids moins (3) l'indice de lésions et moins (4) l'indice d'oocystes. Chaque constituant de l'indice anticoccidien pour un groupe de poussins est calculé comme suit : (1) le pourcentage de survivants (0-100 A) donne le nombre correspondant de points (0-100). (2) Le pourcentage de gain relatif de poids, calculé en comparant le gain moyen de poids du groupe au gain moyen de poids (en pourcentage) du groupe non infecté et non traité fournit le nombre correspondant de points (0-100, ou plus ou moins). (3) L'appréciation numérique des lésions de coccidiose observées en moyenne (0-4,0) est multipliée par 10 pour devenir l'indice de lésions attribué correspondant (0-40). Le nombre observé d'oocystes par volatile (0,1 à 40) est adopté comme indice d'oocystes (01cl ou plus). Les lésions coccidiennes sont évaluées selon le système suivant : O = normal, 1 = détectable, 2 = modéré, 3 = marqué et 4 = maximal. Pour obtenir des estima- tions de la production d'oocystes, le tissu est homogénéisé dans un mélangeur. Des portions appropriées sont diluées, placées dans un hémacytomètre et comptées. Un indice anticoccidien est considéré comme "favorable" à une valeur de 180 ou plus, "modéré" à 160-179 et "médiocre" quand il est au-dessous de 160. TABLEAU I Nombre d'oocystes Indice % dans Nombre % de % de Lésions la noue de morta- gain x 10-6 dans les d'actiriture pous- lité de Caecum Intes- Duodé- volatiles survi- vité sins poids tin num vants Petits Moyens Gros Nicarbazine 0,0015 10 20 52 4,0 0,0 0,0 34,6 5,0 0,6 71 1,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)guanidine 0,0008 10 0 85 4,0 2,0 0,0 21,6 4,5 2,9 121 Témoins infectés --- 50 20 73 3,2 1,0 1,6 33,2 7,0 0,9 80 Témoins normaux --- 20 0 122 0,0 0,0 0,0 200 Nicarbazine + 1,3-bis- 0,0015 10 0 129 0,6 0,0 1,4 2,0 1,6 2,2 192 (p-chlorobenzylidèneamino)-guanidine 0,0008 Nicarbazine 0,003 10 30 74 3,6 0,0 1,6 33,7 6,7 0,9 74 Nicarbazine + 0,003 10 0 134 0,0 0,0 0,0 0,1 0,1 2,9 207 1,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)guanidine 0,0008 TABLEAU II % dans Nombre % de % de Lésions Nombre d'oocystes Indice la nour- de morta- gain x 10-6 dans les d'actiriture pous- lité de @aecum Intes- Duodé- volatiles survi- vité sins poids tin num vants Petits Moyens Gros Nicarbazine 0,003 20 30 77 4,0 0,0 0,2 24,9 8,8 1,7 50 1,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)guanidine 0,0004 20 10 103 1,4 0,0 0,5 6,4 3,9 1,8 136 Témoins infectés --- 100 40 51 4,0 0,3 0,7 16,0 6,2 0,8 37 Témoins normaux 000 20 0 139 0,0 0,0 0,0 10,1 10,1 10,1 200 Nicarbazine + 0,003 1,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)-guanidine 0,0004 20 0 134 0,0 0,3 0,1 1,1 0,5 0,8 191 Les résultats ci-dessus montrent qu'on peut obtenir des agent s chimiothérapeutiques anticoccidiens efficaces à partir d'une combinaison de nicarbazine et de 1,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)-guanidine. - REVENDICÂTIONS 1-Une composition comprenant un véhicule alimentaire solide pour volailles susceptible d'ingestion par voie orale, caractérisée en ce qu'elle contient de 0,001 à 0,006 * de nicarbazine, par rapport au poids de l'aliment, en combinaison avec 0,0004 à 0,0015 * de 1,3-bis-(p-chlorobenzylidèneaeino)- guanidine ou d'un sel d'addition d'acide non toxique de ce composé. 2 - Une composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que la quantité de 1,3-bis-(p-chlorobenzylidène amino)-guaniiine est comprise entre 0,0004 et 0,0008 io par rapport à l'aliment. 3 - Une composition alimentaire pour volailles selon la revendication 1, caractérisée en ce que la quantité de nicarbazine est comprise entre 0,001 et 0,003 % environ du poids de l'aliment. 4 - Un procédé de lutte contre l'infection de coccidiose par des espèces mélangées chez la volaille, caractérisé en ce qu'on administre oralement à la volaille une composition alimentaire pour la volaille contenant de 0,001 à 0,006 % de nicarbazine en combinaison avec 0,0004 à 0,0015 % de 1,3-bis (p-chlorobenzylidèneamino)-guanidine ou d'un sel d'addition d'acide non toxique de ce composé. 5 - Un procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que la quantité de 1,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)guanidine ou d'un sel d'addition d'acide non toxique de ce composé est comprise entre 0,0004 et 0,0008 * du poids de l'aliment. 6 - Un procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que la quantité de nicarbazine est comprise entre 0,001 et 0,003 Yo du poids de l'aliment. 7 - Un supplément alimentaire solide ingestible pour volaille caractérisé en ce qu'il contient de 2 à 10 % environ en poids de nicarbazine et de 0,02 à 3 * environ en poids de 1,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino)-guanidine ou d'un sel d'addition d'acide non toxique de ce composé. 8 - Un supplément alimentaire solide ingestible pour volaille, caractérisé en ce qu'il contient de 2 a 6 * environ en poids de nicarbazine et de 1,5 à 1,7 % environ en poids de 1 ,3-bis-(p-chlorobenzylidèneamino) -guanidine ou d'un sel d'addition d'aeide non toxique de ce composé.