FR 2112131 A1 19720616 FR 7039970 A 19701106 La présente invention à la réalisation de laquelle ont partici pé MM. BARDONESCHI Roland et MUFLIER Georges, a pour objet un nouveau procédé de préparation de glucosides dérivés de la thiocoichicine. L'invention a plus précisément pour objet un procédé de préparation des glucosides de formule générale I dans laquelle R1 représente un radical méthyle lorsque R2 représente un radical glucose-2-yle, ou bien R1 représente un radical glucose2-yle lorsque R2 représente un radical méthyle, c'est-à-dire de la 2-(glucose-2-yl) 2-déméthyl thiocolchicineet de la3-(glucose-2-yl) 3-déméthyl thiocolchicine (ou thiocolchicoside). On connaissait déjà des procédés de préparation du thio colchicoside (composé de formule I avec Rt = glucose-2-yle et R2 = méthyle) décrits notamment dans les Brevets français nO 1 099 138 et nO t 113 761. Mais ces procédés utilisent comme matière première le colchicoside qui est relativement peu abondant dans le colchique. Il a été trouvé maintenant un nouveau procédé de préparation du thiocoichicoside et de son homologue glucosylé en position 2 qui présente l'avantage d'utiliser comme matière première la trisdéméthyl N-désacétyl thiocoîchicine que l'on peut préparer facilement par des procédés connus au départ de la colchicine, cette dernière étant plus abondante dans le colchique que le colchicoside (environ 2/3 de colchicine pour 1/3 de colchicoside). La trisdéméthyl N-désacétyl thiocolchicine peut entre obtenue à partir de la N-désacétyl thiocolchicine comme il est décrit dans le Brevet spécial de médicament 3 375 M. La N-désacétyl thiocolikidne est préparée à partir de la thiocolchicine provenant elle-même de la colchicine. Ces procédés sont décrits en particulier dans le Brevet français nO 1 099 138. Le procédé objet de l'invention, illustré par le schéma annexé est essentiellement caractérisé en ce que l'on soumet la trisdéméthyl N-désacétyl thiocoîchicine, II, à l'action d'un agent acétylant, pour obtenir un mélange de composés acétylés, III, fait réagir sur ce mélange un agent 'basique, condense en milieu basique la trisdéméthyl thiocolchicine,IV, résultante avec l'acétobromoglucose, pour obtenir un mélange de 2-tétracétoglucose-2-yl trisdéméthyl thiocolchicine et de 3-tétracétoglucose-2-yl trisdéméthyl thiocolchicine, V, que l'on soumet à l'action du diazométhane, puis saponifie à l'aide d'un agent basique le mélange de 2-tétracétogluoss 2-yl 2-déméthyl thiocolehicine et de 3-tétracétoglucose-2-yl 3-démethyl thiocoîchicine résultant, VI, pour obtenir un mélange de 2-glucos > 2kyi2-déméthyl thiocoîchicine et de 5iglucoaF2-yl 3-déméthyl thiocoîchicine (ou thiocolchicoside), VII, que l'on sépare en ses constituants- par les moyens physiques habituels. L'agent acétylant à l'action duquel on soumet la trisdéméthyl N-désacétyl thiocolchicine est de préférence l'anhydride acétique et et l'on effectue cette acétylation de préférence en présence de pyridine. Le mélange obtenu contient principalement de la 1,2,3-triacétoxy trisdéméthyl thiocolchicine et de la 2,3-diacétoxy trisdéméthyl thiocoîchicine. L'agent basique à 1' action duquel on soumet le mélange de composés acétoxylés, est notamment la soude, la potasse, les bicarbonates alcalins, les carbonates alcalins, la triéthylamine. L'agent basique en présence duquel on fait réagir l'acétobromoglucose sur la trisdéméthyl thiocoîchicine est la soude, la potasse , un carbonate alcalin, la triéthylamine, la condensation étant effectuée en milieu aqueux, en présence d'un solvant organique tel que le dioxane ou l'acétone. On fait réagir le diazométhane sur le mélange de 2-tétrasite- glucose-2-yl trisdéméthyl thiocolchicine et de 3-tétracétoglucose-2yl tris déméthyl thiocolchicine au sein d'un solvant organique ou d'un mélange de solvants organiques tels que le chlorure de méthylène et le méthanol. L'agent basique qui sert à saponifier le mélange de 2-tétracétoglucose-2-yl 2-déméthyl thiocolchicine et de 3-tétracétoglucose-2-yl 3-déméthyl thiocolchicine est notamment la soude ou la potasse. Pour isoler, à partir de leur mélange, la 2-glucose-2-yl 2-déméthyl thiocolchicine et la 3-glucose-2-yl 3-déméthyl thiocolchicine, on emploie de préférence la chromatographie ou la cristallisation dans un solvant ou un mélange de solvant convenables. Les deux premières étapes du procédé de l'invention sont partir culièrement caractéristiques. La présence d'un hydroxyle libre en position 3 étant nécessain pour permettre la glucosation en cette position et 11 obtention ultérieure du thiocolchicoside, et la déméthylation sélective de la thiocolchicine étant possible en position 1 et en position 2, mais non en position 3, on utilise au départ du procédé un composé com plètement déméthylé en 1, 2 et 3, à savoir la trisdéméthyl Ndésacétyl thiocolchicine, obtenue par action de l'acide bromhydrique en milieu acétique sur la N-désacétyl thiocolchicine (voir Brevet spécial de médicament 3 375 M), la thiocolchicine ou le chlorhydrate de N-désacétyl thiocolchicine. Le produit obtenu n'étant plus acétylé sur l'azote, on passe par un stade de réacétylation qui bloque plus ou moins complètement les fonctions hydroxyles, en même temps que lafonction aminée. La saponification sélective par un agent basique permet alors d'obtenir la trisdéméthyl thiocolchicine dont la glucosation autorise ultérieurement l'accès aux glucosides désirés. I1 est à noter, par ailleurs que I'hydroxyle en position 2 étant nettement plus réactif que l'hydroxyle en position 3, la glucosation conduit à un mélange qui, d'après l'analyse chromatographique contient environ 80 pair cent de 2-glucose-2-yl 2-déméthyl thiocolchicine et 20 pour cent de 3- lucose-2-yl 3-déméthyl thiocolchicine. L'invention a également pour objet, en tant que composé nouveau, la 2-glucose-2-yl 2-déméthyl thiocolchicine de formule développée Ce composé est doué d'une intéressante activité antimitotique. L'invention s'étend à l'application de ce composé comme médicament. Son activité antimitotique trouve son emploi dans le traitement des leucémies myéloides, néoplasies cutanées et tumeurs oesopha giennes ou du tube digestif et des carcinomes en général. I1 peut être utilisé par voir buccale ou transcutanée. I1 peut se présenter sous forme de solutionrtr injectableq de sus pens-ions injectabl conditionnées en ampoule en flacons à prises multiples, de poudre stérile mise en solution au moment de l'emploi dans un solvant approprié, de comprimés, de comprimés enrobés, de pommades et de crèmes Les formes pharmaceutiques telles que t comprimés, solutions ou suspensions injectables, poudres stériles, pommades et crèmes, sont préparées selon les procédés usuels. La N-désacétyl thiocoîchicine n'est pas la seule source de trisdéméthyl N-désacetyl thiocoîchicine. La thiocolchicine est décrite dans le Brevet français nO 1 099 138. Le chlorhydrate de N-désacétyL thiocolchicine est décrit par MM. VELLUZ Léon et MULLER Georges Bull. Soc. chim. France (1954) 1 072. Un exemple de préparation de trisdéméthyl N-désacétyl thiocolchicine à partir de chlorhydrate de N-désacétyl thiocoîchicine est donné plus loin à titre indicatif, dans la partie expérimentale. Les exemples suivants illustrent l'invention sans lui conférer toutefois aucun caractère limitatif. Préparation : trisdéméthyl N-désacétyl thiocolchicine On mélange 40 g de chlorhydrate de N-désacétyl thiocolchicine, 120 cm3 d'acide acétique et 80 cm3 de solution aqueuse d'acide bromhydrique à 600 Bé, porte au reflux, maintient le reflux pendant une heure, introduit 40 cm3 de solution aqueuse d'acide bromhydrique à 600 Bé, maintient au reflux pendant une heure, refroidit à 1000, ajoute de la glace, puis sans dépasser 3000 on introduit 400 cm3 de solution aqueuse d'ammoniaque à 220 Bé, isole par essorage le précl- pité formé, le lave à l'eau, à méthanol, à 11 éther, le sèche et obtient 27,1 g de trisdéméthyl N-disacétyl thiocolchicine brute, utilisée telle quelle pour le stade suivant. De manière analogue au départ de la thiocolchicine on obtient par action de l'acide bromhydrique en milieu acétique la trisdéméthyl N-désacétyl thiocoîchicine. Exemple : 2-alucose-2-yl 2-déméthyl thiocoîchicine et 3-glueose-2-yl 3-déméthyl thiocoîchicine Stade A : acétylation de la trisdéméthyl N~désacétzl thiocolchicine On mélange 13,5 g de trisdéméthyl N-désacétyl thiocoîchicine brute, 108 cm3 de pyridine, 54 cm3 d'anhydride acétique, laisse à 200C pendant une heure, ajoute de l'eau, agite, extrait la phase aqueuse par du chlorure de méthylène, lave les extraits chloro méthyléniques à l'eau, les sèche, les concentre à sec par distillation sous pression réduite, et obtient 30 g d'un mélange de dérivés acétylés constitué principalement par de la 1,2,3-triacétoxy trisdéméthyl thiocolchicine et de la 2,3-diaoétoxy trisdéméthyl thio-. colchieine, que l'on utilise tel quel pour le stade suivant. Stade B : trisdéméthyl thiocolchicine On mélange sous atmosphère d'azote 30 g du mélange de dérivés acétylés obtenu au stade A, 120 cm3 de solution aqueuse 2N de soude, laiase sous agitation pendant une heure, refroidit, ajoute 50 cm3 de solution aqueuse 6N d'acide chlorhydrique, triture la gomme formée pour la concrétiser, isole par essorage le précipité formé, le lave à l'eau, le chauffe à 700 C, pour éliminer l'eau qu'il contient, dissout la gomme résultante dans le minimum de méthanol, introduit 40 cm3 de mélange (chloroforme : 85 - méthanol : 12 - acide acétique : 2 - eau : 1), concentre par distillation sous vide à 20 cms ajoute 30 cm3 de mélange (chloroforme : 85 - méthanol : 12 - acide acétique : 2 - eau : 1), isole par essorage le précipité formé, le lave, avec le mélange chloroforme-méthanol-acide acétique-eau, puis au chloroforme et enfin à l'éther; on le sèche et obtient il g de trisdéméthyl thiocolchicine, F. = 2280C. Un échantillon de ce produit est purifié par cristallisation dans un mélange de méthanol et d'eau, F. = 230oC. Analyse : C19If1905NS = 373,41 Calculé : 0% 61;12 P% 5,13 N% 3,75 S%O 8,58 Trouvé : 61,0 5,1 3,6 2-tétracétoglucose-2-yl trisdéméthyl 8,6 Stade C :: colchicine et de 3-tétracétoglucose-2-yl trisd thiocolchicine On mélange sous atmosphère d'azote, 3,73 g de trisdéméthyl thio colchicine obtenueau stade B, 4,52 g d'acétobromoglucose, 75 cm3 de dioxane pur, introduit 11 cm3 de solution aqueuse normale de soude, agite pendant seize heures à 200 C, verse le mélange réactionnel dans l'eau, l'extrait au chlorure de méthylène à 20 pour cent de méthanol, lave les extraits organiques par une solution aqueuse de bicarbonate de sodium à 5 pour cent, les sèche, les concentre à sec par dises; lation sous pression réduite et obtient 5,1 g de mélange de 2tétracétoglucose-2-yl trisdéméthyl thiocoîchicine et de 3-tétracétoglucose-2-yl trisdéméthyl thiocolchicine brut utilisé tel quel pour le stade suivant. Stade D : mélange de 2-tétracétoglucose-2-yl 2-déméthyl thiocolchicine et de 3-tétracétolucose-2-yl 3-déméthyl thiocolchicine On dissout à +5 C les 5,1 g de mélange obtenu au stade C, dans 50 cm3 de méthanol, ajoute lentement 150 cm3 de solution chlorométhylénique à 2 pour cent de diazométhane, laisse une heure à +5 C, concentre à 50 cm3 par distillation sous pression réduite et utilise de suite pour le stade suivant la solution obtenue contenant un mélange de 2-tétracétoglucose-2-yl 2-déméthyl thiocolchicine et de 3-tétracétoglucose-2-yl 3-déméthyl thiocolchicine. Stade E : 2-glucose-2-yl 2-diméthyl thiocolchicine et 3-glucose-2yl 3-déméthyl thiocolchicine Dans la solution méthanolique obtenue au stade D, on introduit, sous atmosphère d'azote, 10 cm3 de solution aqueuse 2N de soude, laisse une heure à 200C, verse le mélange réactionnel dans une solution aqueuse de chlorure de sodium, extrait la phase aqueuse au chloroforme à 40 pour cent d'éthanol, lave les extraits organiques par une solution aqueuse normale de soude saturée de chlorure de sodium, concentre les -extraits organique s à sec par distillation sous pression réduite, obtient 1,4 g de mélange de 2-glucose-2-yl 2-déméthyl thiocolchicine et de 3-glucose-2-yl 3-déméthyl thiocolchicine. Ce mélange est chromatographié sur gel de silice en éluant avec un mélange de chloroforme : 85 - méthanol : 12 - acide acétique : 2 eau 1. Dans les fractions de tête on sépare le 2-glucoside qui,après cristallisation dans l'acétone, fournit 370 mg de 2-glucose-2-yl 2-déméthyl thiocoîchicine F. = vers 2000C, /a/D = -372 C (c = 0,48 pour cent, eau). Analyse : C27H33O10NS = 563,60 Calculé s 0% 57,54 H% 5,90 N% 2,48 5% 5,69 Trouvé : 57,7 6,2 2,5 5,7 D2ns les fractions de queue on isole la 3-glucose-2-yl 3déméthyl thiocolchicine, bu thiocolchicoside), F. = 215 C, j, 20 = -550 (c = 0,5 pour cent, eau) identique au composé décrit dans D le Brevet français n 1 113 761. REVEND I C ÂT IONS 1. Procédé de préparation de la 2-glucose-2-yl 2-déme'thyl thiocolchicine et de la 3-glucose-2-yl 3-déméthyl thiocolchicine (ou thiocolchicoside) essentiellement caractérisé en ce que l'on soumet la trisdéméthyl N-désacétyl thiocolchicine, -II, à 11 action d'un agent acétylant, pour obtenir un mélange de composés acétylés,III, fait réagir sur ce mélange un agent basique, condense en milieu basique la trisdéméthyl thiocolchicine, IV, résultante avec l'acétobromoglucose pour obtenir un mélange de 2-tétracétoglucose-2-yl trisdéméthyl thiocolehicine et de 3-tétracétoglucose-2-yl trisdéméthyl thiocolchicine, V, que l'on soumet à l'action du diazométhane, puis saponifie à l'aide d'un agent basique le mélange de 2-tétracétoglucose-2-yl 2-déméthyl thiocolchicine et de 3-tétracétoglucose-2-yl 3-déméthyl thiocolchicine résultant, VI, pour obtenir un mélange de 2-glucose-2-yl 2-déméthyl thiocolchicine et de 3-glucose-2-yl 3déméthyl thiocolchicine (ou thiocolchicoside) que l'on sépare en ses constituants par les moyens physiques habituels. 2. Procédé de préparation de la trisdéméthyl thiocoîchicine essentiellement caractérisé en ce que l'on soumet la trisdémethyl N- désacétyl thiocolchicine à l'action d'un agent acétylant pour obtenir un mélange de composés acétylés, puis fait réagir sur ce mélange un agent alcalin. la revendication 3. Procédé selon 1 en ce que l'on soumet la trisdéméthyl N-désacétyl thiocolchicine à l'action de l'anhydride acétique en présence de pyridine, pour obtenir un mélange de composés acétylés, fait réagir la soude sur ce mélange, condense en présence de soude, en milieu dioxanique, la trisddméthyl thiocolchicine résultante, avec l'acétobromoglucose, pour obtenir un mélange de 2-tétracéto glucose-2-yl trisdéméthyl thiocolchicine et de 3-tétraCiD- glucose-2-yl trisdéméthyl thiocolchicine, que l'on soumet à l'action du diazométhane, au sein d'un mélange de méthanol et de chlorure de méthylène, puis saponifie par la soude, en milieu méthanolique, le mélange de 2-tétracétoglucose-2-yl 2-déméthyl thiocolchicine et de 3-tétracétoglucose-2-yl 3-déméthyl thiocolchicine résultant pour obtenir un mélange de 2-glucose-2-yl 2-déméthyl thiocolchicine et de 3-glucose-2-yl 3-déméthyl thiocolchicine (ou thiocolchicoside) dont on sépare les constituants par chromatographie. 4. La 2-glucose-2-yl 2-déméthyl thiocolchicine de formule développée: la revendicationl 5. À titre de médicament le composé selon/4. notamment coae antimitotique. 6. Les compositions pharmaceutiques contenant comme principe actif le composé selon la revendication 4. 7.-Les mélanges ou composés suivants : - les mélanges obtenus en soumettant la trisdéméthyl N-désacétyl thiocolchiciné à l'action d'un 2gent acétylant, et constitués principalement de 1,2,3-tria4toxy trisdéméthyl thiocolchicine et de 2,3-diacétoxy trisdéméthyl thiocolchicine, - la trisdéméthyl thiocolchicine, - le mélange de 2-tétracétoglucose-2-yl trisdéméthyl thiocolchicine et de 3-tétracétoglucose-2-yl tridéméthyl thiocoîchicine obtenu selon - le procédé de l'invention, - le mélange de 2-tétracétoglucose-2-yl 2-déméthyl thiocolchicine et de 3-tétracétoglucose-2-yl 3-déméthyl thiocolchicine obtenu selon le procédé de l'invention.