FR 2101030 A1 19720331 FR 7029469 A 19700811 La présente invention concerne une nouvelle substance biologique complexe agissant comme facteur de croissance pour les lactobacilles, et notamment le Lactobacillus bifidus, ainsi que le procédé pour la préparation de cette substance complexe et son application comme adjuvant diététique dans les aliments pour nourrissons. On sait que la flore intestinale des nourrissons alimentés au lait maternel est caracterisée par la présence prédominante d' un micro-organisme désigné et connu sous le nom de Lactobacillus bifidus, présence à laquelle peuvent store attribués la plupart des avantages résultant de l'alimentation au lait maternel d'un bébé, par rapport à l'alimentation au lait de vache ou à d'autres préparations du commerce, C'est pourquoi, depuis un certain nombre d'années, on s'est préoccupé des moyens d'identification et d'isolement du principe actif biologique déterminant la croissance du Lactobacillus fifidus dans le trajet intestinal des bébés, ce principe étant, de toute évidence absent, ou tout au moins, présent en quantité insuffisante, dans le cas où les bébés sont alimentés au lait de vache ou à d'autres préparations alimentaires du commercez On a ainsi pu constater que des bébés alimentés au moyen Q compositions contenant de la mucine gastrique de porc, présentaient une augmentation de la concentration de leur feces en Lactobacillus bifidus, avec simultanément une diminution des micro-organismes gram-négatifs (Voir à ce sujet le brevet US 2,697,663) A la suite de cette découverte , les savants se sont préoc- cupés de la constitution de la mucine, et des moyens de préparer synthétiquement des complexes destinés à jouer le mEme r6le en tant qu'adjuvants à des aliments pour bébés C'est ainsi qu'une quinzaine d'années après le brevet US précité, on a proposé (Voir brevet français 1.518.553) un produit diététique destiné a étre incorporé à une farine pour nourrissons, et comportant comme constituants identifiés la D-glucousamine, la N-acétyî-D-glucosamine, la galactose-N-acétyl-D-glucosamine, l'é- thyl-N-acétyT-D-glucosamine et les aligo-saccharides et polysaccharides de N-acétyl-D-glucosamine "du lait humain". A ce jour, et dans l'état des connaissances de la Demande- resse, a-ucune autre proposition n'a été faite dans le même domaine Or, les recherches et les travaux expérimentaux de la Deman- deresse l'ont conduit à constater que certains constituarits de la mucine naturelle, qui sont mal connus e-t pratiquement impossibles à isoler et à dentifier, jouent un ralle efficace comme facteurs de croissance du Lactobacillus bifidus, de sorte qu'il convient de s'assurer de la présence de ces gaeterus après traversée du tube digestif du nourrisson0 Malheureusement, il est appern Q1e la mucine naturelle n'est pas digérée en totalité, en l'absence d'enzymes capables de le faire dans le tube digestif A l'inverse l'hydrolyse de la mucine naturelle détruit l'acétylglucosamine. L'invention vise donc une substance biologique complexe, assurant dans le trajet intestinal, la présence, dans les proportions nécessaires et suffisantes, de tous les constituants de la mucine naturelle jouant dans la croissance du Lactobacillus bifidus, le mEme rôle favorable que les constituants du lait maternel0 Cette substance est celle résultant de l'hydrolyse d'une mucine naturelle purifiée, à laquelle uli ajoute environ 15 % en poids d'acétylglucosamine. On a constaté que l'addition à du lait de vache ou à des aliments dérivés du lait d'une telle substance, permet une alimentation en tous points comparable à celle obtenue avec le lait humain.La flore intestinale est alors rétablie et les selles dememrent normales; de sorted que a santé du nourrisson ne souffre en aucune façon du @angement d'alimentation. Les résultats les meilleurs sont obtenus en ajoutant de 100 à I50 grammes du complexe biologique à 100 kg de lait en poudre Cette proportion est donnée à titre indicatif, la présente invention concernant l'utilisation générale du complexe a pouvoir bifidogène, non seulement en mélange avec le lait: mais également avec tous les aliments lactés. la mucine servant à préparer l'hydrolysat est une mucine gastrique de porc purifiée. La mucine (1,200 kg) est mise en suspension dans 20 litres d'ezu déminéralisée. Après addition de 2 litres d'acide chlorhydrique concentré pur, le mélange est porté à une température comprise entre 90 et 950 C, pendant I heure sous agitation lente. Après refroidissement, la solution acide est filtrée, puis passée sur une colonne de résine faiblement basique, par exemple Amberlite IR - 4 -B, pour éliminer l'acide chlorhydrique et ramener le pH de la solution vers 4,5 - 5,5. La solution est concentrée sous vide à 600 C jusqu'à un volume de IO litres environ. L'acétylglucosamine (0,250 kg) est alors dissoute dans la solution, qui peut entre filtrée stérilement et lyophilisée. La composition finale du complexe à pouvoir bifidogène correspond approximativement à la formule suivante Hydrolysat de mucine - 85 g Acétylglucosamine 0 . 15 g g La composition de l'hydrolysat de mucine peut varier selon les fabrications ; mais elle doit contenir au miniumum 30 % dlhexo- satines, exprimées en chlorhydrate de glucosamine, et au-maximum. IO % d'N total, déduction faite de I'N-des hexosamines. On peut également réaliser des "complexes" de ce genre en y ajoutant des vitamines telles que celles du groupe-B et/ou des oligo-éléments tels que le lactate ferreux (anti-anémique). A titre d'illustration de l'intérêt de la composition selon l'invention, on donne ci-après les résultats d'études expérimentales chimiques Dans le cadre de la mise au point d'un lait biochimiquement adapté à l'alimentation des nourrissons et correspondant à des modifications des fractions protéique, lipidique et minérale,oenfor- mes aux aptitudes nutritionnelles des nourrissons, l'ajonction d' un hydrolysat de mucine spécialement étudiée assure au produitt une digestibilité améliorée et une acidification des selles avec modification de la flore microbienne et prédominence des micrcorganismes GRAM positifs (Bifidus et Cocci) A titre d'exemple alors que les selles des nourrissons éle- vés au lait de vache. sont à un pH variant de 6,5 à 7,5- avec présence constante de STERCOBILINE, celles des nourrissons alimentés avec un lait maternisé additionné du complexe conforme à l'invention, sont à un pH variant de 5 à 6,5 avec une absence constante de STERCOBILINE, REVENDICATIONS I- Nouvelle substance biologique agissant comme facteur de croissance du Lactobacillus Bifidus, caractérisée en ce qu'elle résulte de l'hydrolyse de la mucine gastrique de porc, avec addition de I5 % en poids de N-acétylrD-glucosamineO 2- Aliment diététique pour nourrissons sevrés du lait maternel, caractérisé en ce qu'il consiste en lait en poudre maternisé additionné de la substance selon I, à raison de I00 - I50 g de ladite substance pour 100 kg de lait en poudre,