FR 2104911 A1 19720428 FR 7032059 A 19700903 La présente invention concerne un nouveau médicament utile dans la prévention et le traitement des troubles circulatoires, administrable par voie orale, rectale, parentérale et percutanée. Ce nouveau médicament met en oeuvre des hétérosides pouvant être soit extraits du rhizome du Ruscus aculeatus L.(Liliacées), soit préparés par hydrolyse ménagée de la chaste hétérosidique des saponines de cette même plante. Ces hétérosides particuliers sont appelés, dans la suite, orosapogéninesn pour mieux les différencier des saponines dont elles dérivent et des ruscogénines qui sont le terme ultime de leur hydrolyse poussée. La présente invention concerne également les "prosa- pogénines" impures ( à > 50 % de pureté) d'un prix de revient industriel plus intéressant et qui, à doses égales d'hétéroside pur, ont les mêmes propriétés thérapeutiques. le produit pur se présente sous forme d'une poudre blanche, cristallisée en bâtonnets. Caractères de solubilités - Produit soluble à la température ordinaire dans l'alcool éthylique, méthylique, N-propylique, le dioxanne, le diméthyl formamide, le diméthyl sulfoxyde et le butanol saturé d'eau. - Produit assez peu soluble dans l'eau. - Produit insoluble dans l'éther isopropylique, l'éther éthy lique, l'éther de pétrole, le chloroforme, le trichloréthy lène, le benzène, le tétrachlorure de carbone, l'hexane et le toluène. Point de fusion : déterminé au banc Kofler, le point de fusion est de 192-1950C. Pouvoir rotatoire spécifique (solution à 0,5 ffi dans ltéthanol) 20 g ~7D = -75 0 environ0 Chromatographie sur couche mince (plaques de Silice H) Solvants Rf CH Cl3, CH3OH, H20 (65/25/4) 0,85 Alcool éthylique à 95 0,78 Butanol saturé d'eau 0,62 Spectre UV : (en solution dans l'éthanol) légère absorption entre 220 et 300 nm (E Icm = 0,2 environ) (en solution dans H2S04) max max = 390 nm (E 1cm = 290) 1 % 1cm 327 nm (E 1% = 290) et 271 nm (E 1cm - 2 - 40) Spectre IR : On note les bandes d'absorption aux fré quences suivantes () en cl~1) 780; 810 ; 840 ; 880 ; (900); 920 960 ; 980 ; 1050 ; 1140 ; 1230 ; 1385 1455 ; 1650 ; 2820 ; 2950 ; 3410. Identification des sucres après hydrolyse acide (H Cl/3 heures) - Arabinose - Rhamnose. Il est bien entendu que les caractéristiques qui viennent d'être décrites sont celles du produit étalon et que l'invention concerne également le produit brut pouvant contenir comme impuretés des reliquats de saponines, des sucres libres différents de l'arabinose et du rhamnose et des produits issus d'une hydrolyse trop poussée : hétéroside à chatne mono-osidique et traces de génines (ruscogénine et néo-ruscogénine), impuretés atoxiques et sans action sur le plan thérapeutique mais dont la séparation est très coûteuse parce que nécessitant de multiples chromatographies ou autres procédés équivalents. La DX 50 des "prosapogénines" par voie intra-péritonéale chez la souris est de 500 mg + 54/kg. Administrées par voie orale à la dose de 1.000 mg/kg chez la souris également, les "prosapogénines" ne déterminent aucun trouble dans les 72 heures qui suivent leur administration0 Après administration per os prolongée (oxicité sub-chronique) pendant 1 mois, il n'a pas été possible lors de l'autopsie (rats Wistar) de relever des anomalies macroscopiques et histologiques au niveau des viscères. La moyenne des courbes pondérales des animaux traités a été presque superposable à celle des animaux témoins. Action anti-inflammatoire On provoque un oedème à la carragénine dans la patte du rat ; les animaux traités à la dose de 25,50 et 100 mg/kg per os (produit administré en suspension gommeuse) voient leur oedème régresser 2 heures 30 après l'administration : les pourcentages de diminution ont été trouvés proportionnels aux doses et en tout cas valables sur le plan statistique0 Action in vitro et action de tyPe héParinique : Appliquant la technique de la veine isolée de Moscarella C. (Thèse Université Toulouse, Pharm., 1954) il a été constaté qu'à de très faibles concentrations (10 4 - 10 5 g/ml) le pro- duit avait des propriétés veino-constrictices proportionnelles et reproductibles. Ce phénomène a pû être objectivé de la même façon sur le train postérieur isolé de rat et sur l'oreille isolée de lapin.C'est d'ailleurs en appliquant cette dernière technique que la demanderesse a pû prévoir les légères mais nettes propriétés fibrinolytiques du type héparinique qui ont ensuite été objectivées par des méthodes classiques : temps de saignement, temps de lyse de caillot, thrombo-élastogrammes, temps de Quick (augmenté de 20 % chez le lapin 2 heures après administration intra-duodénale à la dose de 50 mg/kg). Les essais pratiqués en clinique avec le plus souvent des formes orales en traitement général et avec des crèmes ou gels pour des traitements locaux (sous forme de suppositoires ou crème pour les manifestations hémorroSdaires) ont donné dans l'ensemble de très bons résultats dans les syndromes variqueux et pré-variqueux (70 % de cas favorables). le syndrome de la jambe lourde" si fréquent, a souvent régressé lorsque ce traitement aux "prosapogénines" (traitement de 1 mois)a été appliqué. Les résultats ont encore été meilleurs lorsque des formes composées ont été administrées, formes faisant intervenir simultanément les 11prosapogénines", le couple vitamine C - Facteurs P, et un salidiurétique. Il en va de même en ce qui concerne le syndrome pré-menstruel.les produits employés n'ont jamais donné lieu à des intolérances. L'exemple suivant illustre, à titre non limitatif, le procédé de préparation des prosapogénines par hydrolyse enzymatique des saponines Exemple 10 grammes de saponines en solution dans un tampon citraté (pH 5,2) sont portés à la température de 300C0 La solution est brassée avec un complexe enzymatique ('aka-diastase par exemple) ayant une activité p-glucosidasique ou avec une p glucosidase pure (Calbiochem). La quantité d'enzyme à mettre en oeuvre est fonction de son activité enzymatique qui varie avec les différents lots utilisés. L'hydrolyse est suivie en chromatographiant régulièrement la solution traitée (voir ci-après systèmes solvant/support employées).L'hydrolyse est stoppée lorsque le spot correspondant aux "prosapogénines" (révéld à la cinnamaldéhyde) n'augmente plus (3 heures environ)0 Lorsque les saponines initiales sont suffisamment pures, on observe en cours d'hydrolyse une précipitation des prosapogénines. L'hydrolysat est alors évaporé à sec et le résidu est épuisé par le méthanol à froid. L'hydrolyse peut être opérée en milieu acide (H Cl à 4 dans durméthanol à 80 % - durée de l'hydrolyse : 5 heures t = 800C), mais, il est préférable d'effectuer une hydrolyse enzymatique, plus rapide et plus spécifique. L'isolement et la purification des "prosapogénines" sont pratiqués par chromatographie sur colonne d'alumine (Woelm). Le produit brut obtenu après hydrolyse fermentaire est mis en solution dans le minimum de butanol saturé d'eau et l'élution est pratiquée avec le même solvant, La fraction de l'éluat contenant les'prosapogénines" est évaporée à sec : on obtint 5 g environ de "prosapogénines" (Rdt 50 %) qui peuvent être recristallisées à plusieurs reprises dans l'éthanol jusqu'au degré de pureté désiré. A titre d'exemples non limitatifs sont énumérées les formules suivantes Gélules Prosapogénines (exprimées en produit pur) ... 20 mg Hespéridine méthyl chalcone 0 50 mg Vitamine C enrobée .......................... 200 mg Comprimé 8 Prosapogénines 0 20 mg Excipient q.s.p. .0 i comprimé Comprimés Prosapogénines ....................... 20 mg Hespéridine méthyl chalcone ............ 0 50 mg Vitamine C enrobée 0 100 mg Oxyéthyl-théophylline ................. 50 mg Excipient q.s.p. ...................... 0 1 comprimé pellicule Gouttes Prosapogénines 0. 1 g Bamethan ............................... 1 g Perméthol .............................. 0 0,4 g Vitamine C 0 00 1 g Excipient hydro alcoolique q.s.p B o o o 100 ml Gel Prosapogénines 000 0,5 g Salicylate de diéthylamine 0.0 1 i g Excipient q.s.p. ...................... 100 g La présente invention concerne, comme l'ont montré les exemples précédents les formes simples à base de "prosapogénines" et les formes dans lesquelles les prosapogénines" peuvent être associées à des médicaments tels que vasodilatateurs, salidiurétiques, vitamines, analgésiques et anesthésiques. Revendications 1, A titre de médicament nouveau, le produit de l'hydrolyse ménagée des saponines de Ruscus aculeatus L, (Liliacées). 2. A titre de médicament nouveau, une composition contenant comme principe actif des hétérosides de Ruscus aculeatus L. (Liliacées) dénommés "prosapogénines"et fabriqués par hydrolyse ménagée des saponines de cette plante, suivie d'une purification. 3. A titre de médicaments nouveaux, les "prosapogénines" qui, à l'état pur, présentent les caractéristiques de solu bilités, de pouvoir rotatoire spécifique, de chromatographie sur couche mince, de spectre U.V. et I.R. et de point de fusion définies dans la description. 40 les présentations pharmaceutiques administrables par voie orale, rectale, parentérale et percutanée contenant comme principe actif au moins un médicament selon l'une des reven dications 1 à 30 5. Les présentations pharmaceutiques selon la revendication 4, contenant en outre des principes actifs choisis parmi les vitamines, les vasodilatateurs, les salidiurétiques, les analgésiques et les anesthésiques.