FR 2070058 A1 19710910 FR 6933028 A 19690926 La présente invention est relative à des produits Uti lisables pour l'hygiène de la cavité buccale, ainsi qu'à leur préparation. De nouvelles compositions. pour l'hygiène de la bou- che, actives par voie enzymatique, seraient avantageuses, si elles présentaient, en particulier, une couleur et une stabili- té améliorées,ainsi qu'une meilleure absence d'odeur et de longues périodes de conservation, spécialement lorsqu'elles se trouveraient sous forme de compositions aqueuses .Ces compositions seraient particulièrement intéressantes si elles présentaient une combinaison d'activités enzymatiques sans dénaturation autogène d'un enzyme par un autre, ou meme d'un seul enzyme par lui-memet et si elles permettaient l'utilisation d'activités enzymatiques supplémentaires même si la gamme des pH de l'enzyme lui-mme, assurant l'activité optimum, se situait en dehors de la gamme des pH relativement neutres de la cavité buccale. L'invention prévoit en conséquence des compositions pour l'hygiène de la. bouche, comprenant ,à titre de 17un des composants actifs, au moins un produit de polymère-enzyme, dans le- cruel l'enzyme est lié par covalence 1 peut y avoir une série: activités enzymatiques sous la forme de plusieurs produits de polymère-enzyme. Des compositions de ce genre présentent l'avantage que le ou les composants actifs par voie enzymatique sont, de façon inhérente, beaucoup plus stables du fait de la nature de la molécule de polymère-enzyme et du fait en outre qu'un enzyme ne se digère pas lui-même ou ne digère pas un autre enzyme et ne détruit donc pas l'activité de la composition, puisque les divers fragments d'enzyme sont compris dans des ambiances différentes.Un perfectionnement plus grand encore est atteint lorsque plusieurs enzymes sont attacbês à la même molécule de polyme- re. De la sorte, on prévoit des compositions or l'hygiène de la bouefle, contenant un seul produit d'enzyme-polymère, ou bien une serie de produits d::enzyme-polymère, ou bien un produit de polymère à plusieurs enzymes, ou encore des combinaisons de produits de ce genre, tous ces produits étant actifs par voie enzymatique, nettement plus stables et d'une longue durée d'action, tout en étant moins susceptibles d'une détérioration à l'emmagasinage étant donné que les composants enzymatiques de ces compositions ne sont pas sujets à une destruction par eux-memesou par des com posants enzymatiques différents.A titre d'exemple, si un ou pls sieurs des enzymes présents dans une composition habituelle pour l'hygiène de la bouche doivent être une protéase, celle-ci attaquera d'autres molécules de protéase, des molécules de dextranase, d'amylase etc; une protéase alcaline attaquera des molécules de protéase neutre, lorsqu'il y en a; et enfin les molécules de protéase neutre peuvent même s'attaquer entre elles et se digérer. Une telle diminution autogène de activité enzymatique n'est pas caractéristique des compositions de la présente invention. De plus, comme certains enzymes ont une activité normale ou optimum en fonction du pH, qui se situe dans un intervalle ne convenant pas pour l'utilisation dans la cavité buccale, une dextranase ayant par exemple un pH optimum de 4-5, ils sont soit inactifs, soit actifs de façon marginale seulement lorsqu'on les utilise pour l'hygiène de la bouche, puisqu'évidemment les compositions employées ne seront pas (et ne peuvent pas litre pour rester acceptables du point de vue pharmacologique dans la bouche) rendues fortement acides ou basiques, simplement pour saccommoder de l'activité normale ou de la gamme des activités optima dSun composant actif par voie enzymatique.Lorsque l:en zyme est présent an étant lié par covalence dans une molécule de polymère anionique, l'activité optimum en fonction du pH est généralement sensiblement modifiée vers le haut, tandis que, lorsque l'enzyme est lié dans un polymère cationique, l'activité optimum de l'enzyme en fonction du pH est généralement sensiblement modifiée vers le bas , de sorte que, suivant l'invention, il est maintenant possible de prévoir des compositions pour l'hy- glène de la bouche, qui comportent des composants actifs par voie enzymatique0 qui sont actifs de façon normale ou de façon optima- le dans la gamme des pH relativement neutre de la cavité buccale1 ce qui entait jusqu à présent impossible du. fait que enzyme natif était soit inactif S soit actif seulement de façon marginale dans cette gamme de pH. A titre d'exemple, un produit de dextranase-EAM (copolymère d'éthylène et d'anhydride maléique), qui est 13un des produits de polymère-enzyme que l'on peut employer suivant l'invention, présente son activité optimum en fonction du pH ,à un niveau sensiblement supérieur à celui de l'activité de la dextranase elle-meme. En outre, on peut maintenant inclure d'innombrables combinaisons d'activités enzymatiques dans des compositions prévues pour l'hygiène de la bouche, sous la forme de matières solubles ou insolubles dans l'eau, chacune étant active par voie enzymatique et apte à dégrader , de façon indépendante, les composants qui s'attaquent aux surfaces de la cavité buccale en amenant une infection ou une prolifération de bactéries, en provoquant une carie des dents et d'autres maladies de la bouche. Les compositions pour l'hygiène de la bouche , suivant l'invéntion, sont formulées d'une manière courante, sauf qu'elles comportent un composant actif par voie enzymatique, à savoir le produit de polymère-enzyme choisit avantageusement un mélange de produits de polymère-enzyme de ce genre ou un ou des produits de polymère à plusieurs enzymes, ou encore des combinaisons quelconque des produits de ce genre. Ces produits peuvent étire employés sous la forme soluble dans l'eau ou Insoluble dans l'eau , comme on l'a mentionné, suivant la composition particulière et l'utilisation envisagée.L'application ou utilisation se fait par contact d'une quantité assurant une efficacité par voie enzymatique d'une telle composition ou de son composant actif par voie enzymatique, cette composition étant active dans l'intervalle des pH relatigement neutrEs de la cavité buccale, et étant utilisée seule ou conjointement avec un véhicule ,liant ou matière similaire, et ce dans la cavité buccale ou dans une partie choisie de cette dernière, le contact étant évidemment maintenu pendant une période de temps suffisante pour permettre à la matière de polymère-enzyme d'exercer son effet enzymatique désiré sur le substrat ainsi digéré. Le produit de polymère-enzyme peut donc être soluble ou insoluble dans ï:eau mais, en tout cas, le ou les enzymes sont liés par covalence à la molécule de polymère. Un tel produit d'enzyme-polymère peut, par exemple, autre avantageusement constitué par un produit de polymère-protéase neutre, ou bien par un tel produit avec un produit de polymère-dextranase, ou bien il peut s'agir d'un seul polymère comportant à la fois une protéase neutre et de la dextranase qui sont liées par covalence avec ce po polymère, des mélanges de divers types de produits de polymère-enzyme pouvant évidemment cotre envisagés. Le polymère employé est de préférence un polymère con tenant un groupe libre de carboxyle ou d'anhydride carboxylique, apte à réaliser une liaison par covalence avec l'enzyme, soit directement, soit par activation d'un groupe carboxyle. Le polymère peut Strie d'un poids moléculaire relativement bas et non réticulé lorsqu'on désire des produits solubles dans liteau, ou bien il peut avoir un poids moléculalre plus élevé et être lui-meme insoluble dans l'eau, lorsqu'on désire obtenir un produit de polymère-enzyme insoluble dans l'eau. I1 est bien évident que les divers types de produits envisagés auront leurs sphères particulières et préférées d'application dans le domaine de l'hygiène buccale.Cependant, dans tous les cas, ils seront relativement stables et d'un effet de longue durée. L'abréviation "EAM" désigne un polymère d'éthylène et d'anhydride maléique. Les polymères de ce type sont d'une grande valeur suivant la présente invention. On définira par la suite l'expression "polymère du type EAM". Les abréviations " EAM-enzy me ou "EAM/enzyme" désignent un copolymère d'éthylène et d'anhydride maléique, auquel un enzyme est lié par covalence. Le produit est le mtme que l'enzyme soit mis en réaction directement avec m groupe d'anhydride du copolymère d'éthylène-anhydride maléique ou avec un groupe carboxyle de ce copolymère, et que l'on utilise ou non un mécanisme intermédiaire d'activation pour les groupes carboxyles du polymère.Les groupes d'anhydride ne participant pas à la réaction par laquelle on prépare le produit en milieu aqueux sont présents dans ce produit sous forme de groupes de carboxyle ou de carboxylate. De tels groupes ne participant pas à la réac- tion peuvent cependant être convertis en groupes d'amide, d'imide, tester, etc., pouvant être présents dans des polymères du type EAM. L'expression "insoluble dans l'eau" signifie que le produit en cause ne se dissout pas dans l'eau ou en solution aqueuse, bien qui puisse avoir des caractéristiques telles qu' un degré élevé de gonflement dA à une solvation par liteau, meme au point d'exister sous la forme d'un gel. L'expression soluble dans l'eau" signifie évidemment que le produit est insoluble dans l'eau mais cette expression sera définie plus complètement par la suite. On peut préparer des dérivés dipolymere-enzyme en fa i- sant réagir l'enzyme ou le mélange d'enzymes cristallin ou brut avec le polymère en solution, ce qui a pour -résultat la formation d'un produit polymère dans lequel l'enzyme est lié par covalence. La réaction du polymère avec une série d'enzymes, comme elle se produit dans certaines des préparations, peut évidemment entre mise en oeuvre de façon graduelle, c'est-à-dire en prévoyant un enzyme à la fois, avec ou sans isolation intermédiaire, ou encore avec tous les enzymes en une seule fois. On préfère ce dernier procédé pour des raisons de temps, de commodité et d'économie. Lorsqu'il y a un anhydride ou carboxyle dans le poly mère, par exemple dans le cas d'un polymère du type EAM, la liaison par covalence de l'enzyme au polymère peut autre réalisée directement par réaction ou combinaison avec un groupe d'anhydride ou avec un groupe carboxyle en utilisant un agent activant. Le produit est le même dans les deux cas. La gamme des pH à prévoir pour la réaction dépend des enzymes utilisés et de leurs gammes de stabilités. Ce pII est habituellement environ 5 à 9,5, de préférence d'environ 6 à 8, mais un ajustement doit etre fait pour les cas particuliers. L'isolement et la purification sont généralement réalisées suivant les procédés biochimiques normaux et par le procédé général des exemples que l'on donnera par la suite. Comme on désire une liaison par covalence de l'enzyme au polymère, la réaction est ordinairement menée à de basses températures et à des pH relativement neutres, dans de l'eau ou dans un tampon aqueux dilué , à titre de solvant. Lorsqulon pratique de cette manière, on obtient le dérivé de polymère-enzyme actif désiré, mais le degré d'activité imparti au produit polymère est parfois inférieur à celui désiré, peut-etre du fait d'une inactivation partielle de l'enzyme durant le procédé. On peut fréquemment avoir recours , de façon avantageuse, à l'utilisation d'un système solvant mixte, en utilisant un solvant dans lequel 13 enzyme est au moins partiellement soluble, et ce habituellement en une quantité allant jusqu'à environ 50:o en volumes. Le sulfoxyde de diméthyle convient spécialement bien comme solvant, en même temps que de 11 eau ou qu'une solution aqueuse de tampon dans un tel système solvant mixte.En utilisant ce dernier, on obtient ordinairement le produit de polymère-enzyme actif. en des rendements plus élevés et avec de plus hautes conversions, et l'introduction d'une somme élevée d'activité enzy matique dans la molécule de polymère est généralement moins dif facile En ce qui concerne le polymère participant à une telle réaction, il comporte de préférence des liaisons de carboxyle ou d'anhydride , en particulier lorsque l'enzyme contient un groupe amino, hydroxyle (notamment un groupe hydroxyle phénolique) ou sulfhydryle , non essentiel pour son activité enzymatique. Lorsque l'enzyme contient un groupe carboxyle non essentiel à son activité, le polymère peut contenir des groupes libres d'hydroxyle ou d'amine pour la réaction avec le groupe précédent. Le polymère est de préférence le EAM ou un polymère du type EAM, mais il peut aussi etre constitué par l'un quelconque des types précédemment décritwkomme se combinant ou réagissant avec un enzyme, et en tous cas ce polymère doit être apte à réaliser une liaison par covalence avec l'enzyme efue de donner un produit d'enzymepolymère, et ce directement ou indirectement en utilisant un agent activant.Etant donné que l'activité enzymatique de ltenzy- me de départ doit être conservée dans le produit final, il est évidemment d'abord nécessaire que la liaison de l'enzyme au polymère se fasse à l'intervention d'un groupe qui ne provoquera pas une inactivation d'un site actif dans la molécule d'enzyme. Parmi les divers groupes réactifs de molécules d'enzyme, on peut mentionner , outre les groupes amino et sulfhydryle:, les groupes hydroxyle (notamment le groupe hydroxyle phénolique), carboxyle et imidazolyle. De tels groupes sont présents sous une forme libre ou non liée dans les portions inactives des molécules d'enzyme, comme dans le cas d'un fragment lysine, cystéine, sérine, thréonine, histidine ou tyrosine d'une molécule d'enzyme, où le fragment particulier en question n'est pas considéré commeessentiel pour l'activité enzymatique. En conséquence, la fixation à la molécule de polymère se fait par la réaction de ce polymère avec de tels groupes pour éviter une inactivation de l'enzyme durant sa fixation à cette molécule de polymère. Généralement, la liaison est formée par le groupe d'amide, dzimide, d'ester, de thioester ou de disulfure, par exemple celui formé par le carboxyle ou anhydride du-polymère avec un groupe d'amine ou 'hydroxyle dans un fragment non essentiel de la chatne protéique de l'enzyme. Des amides sont formés de manière convenable par réaction de grou pes amino libres de l'enzyme avec des groupes d'anhydride carboxylique sur le polymère formant véhicule , dans de l'eau, des milieux tampons aqueux ou des solvants mixtes. Des amides, imides et Asters seront facilement formés par activation de groupes carboxyles du polymère ou de groupes carboxyles libres de l'enzyme, et réaction avec des groupes hydroxyle,d'amine ou de mercaptan existant sur l'autre réactif. Une telle activation peut être réalisée en utilisant divers carbodiimides, carbodiimidazoles, réactifs de Woodward ou de Sheehan, etc, pour former des intermédiaires très actifs capables de réagir avec d'autres groupes mentionnés précédemment sous des conditions modérées, ces dernières favorisant la conservation de l'activité enzymatique. Le polymère choisi pour une telle réaction peut, par conséquent, être- considéré comme apte à se combiner ou à réagir avec l'enzyme, soit de manière directe, soit indirectement par l'utilisation d'un agent activant, et comme étant en toutcas apte à réaliser une liaison par covalence avec l'enzyme. Les processus de fixation donnés s & t menés par des techniques pouvant comprendre n'importe quelle protection requise pour 1 t enzyme, ce qui peut supposer un blocage réversible du ou des sites actifs par voie enzymatique, comme par exemple dans le cas de la papaïne, ou on peut employer de la mercuripapalne ou de la papaine de zinc comme intermédiaire pour la réaction avec le polymère afin d'assurer des rendements plus élevés lors de la fixation, les atomes de protection étant enlevés après la réaction de fixation. La matière enzymatique de départ peut autre obtenue de n'importe quelle source appropriée, qu'elle soit végétale, animale ou microbienne. De nombreuses matières de ce genre sont disponibles sur le marché. Outre le produit de polymère-protéase que l'on préfère, on prévoit également un autre produit de polymère-enzyme actif d'une manière différente pour arriver 4 'activité enzymatique maximum. I1 peut y avoir avantageusement une autre protéase, une amylase ou diastase, de la dextranase, une lipase ou une carbohydrase dans le m & e produit de polymère-enzyme ou dans un autre produit de ce genre employé simultanément.Lorsqu' on utilise un produit de polymère et de protéase acide ou d'un autre enzyme à action acide, le polymère est de préférence d'une nature anionique pour élever l'activité en fonction du pH et la gamme des activités optima. Ceci s'applique par exemple aux produits de polymère-pepsine et de polymère-dextranase. Lorsqu'on utilise des produits de polymère-trypsine ou d'autres produits de polymère et de protéase alcaline, il sont de préférence attachés dans une molécule de polymère cationique pour abaisser la gamme efficace et optimum des activités du produit en fonction du pH.En tout cas, il y aura habituellement au moins une protéase neutre et de préférence une protéase neutre et une protéase alalcaline ou acide, ou de préférence ces trois dernières, ces protéases étant liées par covalence dans une ou plusieurs molécules de polymère-enzyme. Meme s'il y a une protéase alcaline dans une molécule de polymère anionique, ou si un autre enzyme est lié a un polymère qui ne modifie pas son activité normale ou son activité optimum en fonction du pH pour la situer dans la gamme des pH relativement neutres de la cavité buccale, leur présence, bien qu'elle ne soit pas d'une efficacité maximum, n'est pas préjudiciable pour les autres enzymes se trouvant dans la même molécule de polymère ou dans des molécules différentes de la composition, car une dégradation autogène ne se produit pas du fait des ambiances différentes dans lesquelles les fragments enzymes sont localisés. Le ou les enzymes incorporés dans le produit de polymère-enzyme à utiliser suivant la présente invention sont de préférence d'origine microbiologique. De ce fait, les buts de llin- vention peuvent autre atteints sans que l'on doivent . recourir à des enzymes réputés comme relativement indisponibles, et l'invention peut donc etre mise en oeuvre sans crainte d'une limitation d'exploitation due à un manque de matières de départ. Ceci constitue évidemment une considération importante du point de vue économique. De nombreux enzymes de ce genre peuvent Strie obtenus de façon commode à partir de micro-organismes qui englobent des bactéries, des levures, des champignons ,etc, en utilisant des procédés bien connus de fermentation, tel que ceux décrits d'une manière générale par Kirk-Othmer, Encylopedia of Chemical Technology 8, 173-204, un grand nombre d'enzymes produits par voie microbienne étant disponibles sur le marché. L'activité exacte du ou des enzymes employés comme matières de départ dépend du procédé exact de préparation et n'est par critique dans le cadre de la présente invention, pourvu seulement que le produit de polymère-enzyme actif par voie enzymatique ainsi produit présente l'activité enzymatique désirée. On dispose de diverses méthodes analytiques pour déterminer l'activité d'une matière active par voie enzymatique; par exemple, l'actif vité de la protéase d'enzymes protéolytiques peut être déterminée par les procédés bien connus de digestion de caséine. Suivant de tels essais, une protéase catalyse l'hydrolyse de la caséine pendant une certaine période de temps, pour une certaine température et un certain pH; la réaction est arrStée par l'addition d'acide trichloroacétique et la solution est filtrée.La couleur du filtrat est développée par le réactif phénolique de Folin et le taux de l'activité enzymatique est mesuré par voie spectrophotométrique en unités de tyrosine de caséine. Une telle méthode est plus complètement décrite dans Journal of General Physiology ",30 291 (1947) et dans "Methods of Enzymology"2, 33,Academic Press NY. (1955). L'activité de l'amylase est généralement déterminée par la méthode bien connue à l'acide dinitrosalicylique de Bernfeld D'autres procédés d'essai encore sont connus et largement divulgués. Une source particulièrement efficace d'enzymes mixtes que l'on peut utiliser comme matière de départ dans le cadre de la présente invention est constituée par une mutante d'un organisme Bacillus subtilis . Le procédé de production de cet organisme et des enzymes qui en dérivent est décrit dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique nO 3.031.380. Une culture de cet organisme Bacillus subtilis (souche AM) -a été déposée auprès du Departement de l'Agriculture des Etats-Unis d'Amérique, Agricultural Research Service, Northern Utilization Research and Development Division, 1815 Nord'n University Street, Peoria, Illinois 61604, cette souche étant désignée par NRRL B-3411. On a trouvé que la matière active par voie enzymatique produite par cet organisme consiste généralement en deux protéases,à savoir environ 65 à 75% de protéase neutre (activité à un pH de 7,0-7,5) et environ 25-35% de protéase alcaline (activité à un pH de 9-10). Cette matière comprend également une quantité importante d'amylase. I1 y a généralement environ 700.000 à environ 1.200.000 unités d'activité de la protéase neutre prépondérante par gr de solides isolés, et environ 250.000 à environ 400.000 unités d'activité de la protéase alcaline par gr, ce qui peut8.tre déterminé par la variante de Anson -de la méthode à la caséine de Kunitz. I1 y a généralement environ 300000 à 350.000 unités d'activité de l'amylase par gr, ce que l'on détermine par la méthode de Bernfeld. Comme on le signale dans le brevet cité ci-dessus, les proportions relatives de la protéase à l'amylase varieront suivant les conditions exactes de croissance du micro-organisme, mais on a trouvé que la protéase neutre, la protéase alcaline et l'amylase seront produites au moins en certaines quantités, et ce pratiquement quels que soient les changements apportés au milieu de culture et à d'autres conditions de croissance du micro-organisme.Le rapport de l'activité de la.protéase alcaline à l'activité de la protéase neutre dans les matières de départ et dans les produits de polymère-enzyme n'est de préférence pas supérieur à environ 0,25 1,2/1 Une autre source d'enzymes mixtes que l'on peut utiliser comme matière de départ suivant la présente invention est constituée par la souche de B. subtilis NRRL 644, la souche B.subtilis NRRL 941 et la souche B. subtilis IAM 1523 (Japanese Culture Collection). On dispose encore d'autres micro-organismes de B. subtilis , qui produisent de la protéase, un mélange de protéases, ou de la protéase et de l'amylase, au moins à un degré limité si pas à un degré optimum.La protéase neutre dite Streptomyces grises présente une large gamme d'activités en fonction du pH et peut constituer un enzyme de départ à incorporer dans les produits-de l'invention. On peut également utiliser avantageusement le produit de protéase à prédominance acide provenant d'Aspergilus oryzae , spécialement lorsqu'il est lié dans un polymère anionique. Des exemples d'enzymes convenant pour une incorporation dans les produits de polymère-enzyme des compositions pour la cavité buccale de l'invention sont Protéases neutres de B.subtilis , telles quelle protéase neutre B. subtilis AM (Monsanto) Protéase neutre de B,subtilis var. amylosacchariticus Protéase neutre bactérienne thermophile cristalline (thermolysine ou thermoase cristalline-Daiwa Kasei) Protéase neutre de B. subtilis (Miles Lab.) Formes brutes ou diluées de ces enzymes, par exemple-un mélange à base de l'enzyme B. subtilis AM (Monsanto) Protéinase bactérienne Novo, ou Thermoase Mélanges de l'un quelconque des types précédents d'enzymes avec une diastase, une carbohydrase, une amylase ou d'autres protéases, par exemple les protéases alcalines de B. subtilis , de telles protéases alcalines étant particulièrement efficaces lorsqu'elles sont attachées à un polymère cationique Protéase acide d'Aspergillus oryzae , provenant par exemple de A. oryzae ATCC 14.605 Protéase de Streptomyces griseus Streptomyase (protéase de Streptomyces rectus) Autres protéases connues sous les marques Prolysin, Pronase, Morcin, Molsin, Prosin, ou des Rhozymes, par exemple A4, Pîl (TM-Rohm & Haas) Asclepaine Ficine Lipase Bromélaine Papaine, pepsine, ou dextranase - spécialement lors d'une fixation à un polymère anionique Enzyme C provenant de protéase de Myxobacter AL-1, qui est un enzyme bactériolytique (R.L. Jackson et R.S. Golfe, J. Biol. Chem 243, 879 (1968); lysozyme ou autres enzymes lytiques Des combinaisons quelconques des enzymes précédentes. Le polymère auquel le ou les enzymes sont attachés contient des liaisons de carboxyle ou d'anhydride, en particulier lorsque les enzymes contiennent un groupe amino, hydroxyle ou sulfhydryle, non essentiel pour leur activité enzymatique. Lorsqu un enzyme contient un groupe carboxyle non essentiel à son activité, le polymère peut contenir des groupes d'hydroxyle ou d'amine pour la réaction avec cet enzyme. Le polymère peut 8tre le EAM ou un polymère du type EAM , ou encore l'un quelconque des polymères décrits comme pouvant se combiner ou réagir avec un enzy e, mais en tout cas ce polymère doit être apte à se combiner ou à réagir avec l'ensyme pour réaliser une liaison covalente et assurer l'obtention du produit de polymère-enzyme désiré. Comme on désire une liaison par covalence, il doit etre entendu que le polymère formant véhicule est prévu de maniè re à contenir au moins un site réactif pour chaque molécule de polymère avec laquelle l'enzyme peut réagir, soit directement, soit indirectement, pour produire une liaison covalente. Suivant la présente invention, ce ou ces sites réactifs sont de preféren ce formés par des groupes de carboxyle ou d'anhydride carboxyli que. Le réactif polymère est de préférence un polymère (a) comprenant des channes d'unités d'acide carboxylique oid'anhydri- de d'acide carboxylique, ou (b) comprenant des unités de groupes d'acide carboxylique ou d'anhydride d'acide carboxylique, séparés par des chatnes carbonées d'au moins 1 à 4 atomes de carbone au plus, ces chatnes carbonées faisant partie d'une unité comportant un maximum de 18 atomes de carbone, ces channes polymères étant formées par polymérisation d'acides ou anhydrides polymérisables et par copolymérisation d'un acide ou anhydride polymérisable avec un autre monomère copolymérisable, l'acide ou anhydride de départ et le monomère copolymérisable supplémentaire étant de pré férence non saturés.Une telle polymérisation ou copolymérisa tion consiste de préférence en une polymérisation ou copolyméri sation du type à addition, englobant une telle insaturation. Parmi les polymères convenant-pour la mise en oeuvre de la présente invention, on préfère les polyélectrolytes polymères comportant des unités de la formule dans laquelle R RA et R B sont constitués par de l'hydrogène, un halogène (de préférence le chlore), un alkyle de 1 à 4 atomes de carbone (de préférence le méthyle), le radical cyano, le phényle ou des combinaisons de ces radicaux, pourvu-que l'un des RA et au au plus soit du pilényle;Z est un rédical bivalent (de pré- férence un alkylène, un pkiénylalkylène, un alkoxy inférieur alkylène ou un acyloxyalkylène aliphatique inférieur) de 1 à 18 atomes de carbone inclusivement, comprenant de préférence une chatne carbonée bivalente comportant de 1 à 4 atomes de carbone inclusivement, cette chatne carbonée faisant partie d'une unité compor- tant 1 à 18 atomes de carbone inclusivement; q est égal à zéro ou un;X et Y sont choisis parmi les radicaux : hydroxy, -O-métal alcalin, OR, -0HNH3, -OH-R3N, -OH-R2NH, -0H-RNH2, -NRR', -(Q) -W-(NR'R') , et -(Q) -W- (-OH) , où x a une valeur de 1 à 4 p p et p est égal à zéro ou un, R désigne un alkyle, un phénylaîkyle ou un phényle, dans chaque cas de 1 à 18 atomes de carbone, R' représente H ou R, Q est de l'oxygène ou -NR'-, et W est un radical bivalent, de préférence un alkylène inférieur, un phényle, un phénylalkyle, un phénylalkylphényle ou un alkylphénylalkyle comportant jusqu t à 20 atomes de carbone, X et Y considérés conjointement peuvent autre un atome d'oxygène, ou au moins l'un des X et Y est . de l'hydroxyle. De nombreux parmi ces polymères-sont disponibles sur le marché e-t d'autres sont de simples dérivés de pro-duits disponibles que l'on peut aisément préparer avant ou simultanément à la réaction de fixation d'enzyme, ou que l'on peut produire par une petite modification du polymère de base après la fixation De tels polymères contenant les unités du type EAM décrites ci-dessus sont désignés ci-après par "polymères du type EAM". Comme les molécules d'enzyme ont un poids moléculaire extrêmement élevé, meme si les unités polymères citées comme étant utilisables pour la fixation de l'enzyme ne se présentent qu'une seule fois dans une chatne polymère, par exemple une seule fois sur plusieurs centaines d'unités, la réaction de l'enzyme avec cette unité donnera un produit de polymère-enzyme ayant une activigé enzymatique importante et dans lequel le fragment enzyme forme une proportion importants du poids moléculaire du produit de polymère-enzyme'il y a plus d'une de ces unités, on peut obtenir des fixations multiples avec une activité enzymatique accrue du produit. Comme on le signalera par la suite, les unités de la formule donnée sont de préférence répétitives, n étant au moins égal à 8.Lorsque les unités sont répétitives, les symboles dans les diverses unités ne désignent pas nécessairement la mtme chose dans toutes les unités répétitives. De plus, lorsque ces unités sont répétitives, certains des groupes-X et Y peuvent avoir des significations autres que hydroxy ou oxygène. A titre d'exemple, certains d'entre eux , mais pas tous, peuvent.tre présents sous la forme de groupes imides, c'est-à~dire des groupes dans lesquels X et Y considérés ensemble représentent -NR ou -N-W-(NR'R')x, où R, W et R' ont les valeurs données précédemment. Uype préféré de matière polymère est le polymère d'un acide polycarboxylique oléfiniquement non satùré ou d'un dérivé de celui-ci avec lui-même ou en des proportions approxima vivement quimolaires.avec au moins un autre monomère copolymérisable avec lui.Le dérivé d'acide polycarboxylique peut être du type non vicinal, en étant notamment l'acide acrylique, l'anhydride acrylique, l'acide méthacrylique, l'acide crotonique ou leurs dérivés respectifs, notamment leurs esters, amides et sels partiels, ou bien du type vicinal, notamment les acides maléique1 itaconique, citraconique, a,a-diméthylmaléique, a-butylmaléique, a-phénylmaléique, fumarique, aconitique, a-chloromaléique, J- bromomaléique, a-cyanomaléique, etc, y compris leurs esters, amides et sels partiels. On utilise avantageusement les anhydrides de l'un quelconque des acides précédents. Des comonomères convenant pour l'utilisation avec les monomères fonctionnels précédents sont les a-oléfines, comme l'éthylène, le propylène, l'isobutylène, les 1- ou 2-butènes, le l-hexène, le l-octène, le l-décène, le l-dodécène, le l-octadécène, et d'autres monomères vinyliques, comme le styrène, le a-méthylstyrène, le vinyltoluène, l'acétate de vinyle, la vinylamine1 le chlorure de vinyle, le formiate de vinyle, le propionate de vinyle, les esters vinylalkyliques, par exemple l'ester méthylvinylique, les acrylates d'alkyle, les méthacrylates d'alkyle , les acrylamides et les alkylacrylamides, ou encore des mélanges de ces monomères.La réactivité de certains groupes fonctionnels des copolymères, résultant de certains de ces monomères, permet la formation d'autres groupes fonctionnels intéressants dans le copolymère formé, notamment des groupes hydroxy, lactone, amine et lactame. On peut copolymériser l'une quelconque de ces dérivés diacides polybasiques avec l'une quelconque des autres monomères décrits précédemment, ainsi qu'avec l'un des.-autres monomères formant un copolymère avec des dérivés d'acides dibasiques. Les dérivés d'acides polybasiques peuvent entre des copolymères avec une série de comonomères , auquel cas la quantité totale des comonomères sera de préférence approximativement équimolaire par rapport à celle des dérivés d'acides polybasiques. Bien que l'on puisse préparer ces copolymères par polymérisation directe des divers monomères, ils sont fréquemment préparés plus facilement par une modification d'après-réaction d'un copolymère existant. On peut convertir des copolymères d'anhydrides et d'un autre monomère en copolymères contenant des groupes carboxyles par réaction avec de l'eau, et en sels d'ammonium, de métaux alcalins et alcalino-terreux, et d'alkylamines, par réaction avec des composés de métaux alcalins, des composés de métaux alcalinoterreux, des amines, ou de l'ammoniac, avant, durant ou après la fixation de l'enzyme.D'autres dérivés convenables des polymères précédents sont les esters partiels alkyliques ou autres et les amides, alkylamides, dialkylamides, phénylalkylamides et phénylamides partiels, préparés par réaction de groupes carboxyles existant sur la chatne polymère avec les amines choisies ou les alcools alkyliques ou phénylaîkyliques voulus, ainsi que des aminoesters, des aminoamides, des hydroxyamides et des hydroxy esters1 dans lesquels les groupes fonctionnels sont séparés par un alkylène inférieur, un phényle, un phénylalkyle, un phénylalkylphényle ou un alkylpilénylaîkyle, que l'on peut préparer de la meme manière dans chaque cas en tenant compte de la conservation nécessaire des sites de fixation d 'enzyme comme on lta signalé précédemment. il peut y avoir d'autres groupes aryliques au lieu des groupes de phényle. Des dérivés particulièrement intéressants sont ceux dans lequels les groupes de carboxyle chargés négativement sont partiellement remplacés par des groupes d'amide ou de sel aminé. Ceux-ci sont formés par réaction de ces carboxyles avec des poly ami nes, par exemple de la diméthylaminopropylamine,ou des dialkylaminoalcools, comme le diméthylaminoéthanolt les premieresformant une liaison d'amide avec le polymère , tandis que les derniers forment un liaison d'ester . Un choix convenable des dérivés précédents permet une influence sur plusieurs paramètres de comportement des produits de polymère-enzyme utilisés dans la présente invention. On connatt des exemples de polymères d'acide ou anhydride dibasique et d'oléfine, en particulier des polymères d'acide ou anhydride maléique- et d'oléfine , notamment du type EAM précédemment cité. Généralement, ces polymères auront un degré de polymérisation-de 8 à 10,000, de préférence d'environ 100 à 5.000, et un poids moléculaire d'environ 1000 à 1.000.000, de préférence d'environ 10.000 à 500.000. De nombreux parmi ces polymères sont disponibles sur le marché. Des copolymères particu- lièrement intéressants sont ceux qui dérivent de l'éthylène. et de ltanhydride maléique en des proportions pratiquement équimolaires. Ces produits sont disponibles sur le marché. Les copolymère d'anhydride maléique ainsi obtenus comportent des liaisons d'anhydride répétitives dans la molécule, qui sont aisément hydrolysées par l'eau pour donner la formeâcide du copolymère, la vitesse d'hydrolyse étant proportionnelle à la tem pérature. Du fait que les réactions de fixation sont réalisées en suspensions ou solutions aqueuses, ou en utilisant des mélanges d'eau-solvant,.le produit de la liaison par covalence de l'enzyme au EAM comporte des groupes de carboxyle ou carboxylate attachés à ses chatnes, au voisinage de l'enzyme attaché, au lieu de groupes d'anhydride , du fait de l'hydrolyse des groupes d'anhydride qui ne réagissent pas avec l'enzyme durant la réaction.Ceci est vrai également des groupes d'anhydride ne réagissant pas , qui sont présents dans d'autres polymères, par exemple des polymères du type EAM2 ces groupes s'hydrolysant en groupes de carboxyle ou de carboxylate durant la réaction. L'expression "insoluble dans l'eau", comme on l'a déjà signalé, signifie que le produit en causene se dissout pas dans l'eau ou dans des solutions aqueuses r même s'il peut avoir des caractéristiques telles qu'un degré élevé de gonflement dA à une solvatation par l'eau, meme au point d'exister sous la forme de gel. On peut séparer des produits l'insolubles dans l'eau" par des procédés supposant une filtration, une centrifugation ou une sédimentation. De-telles caractéristiques sont imparties par ré ticulation. On peut assurer une insolubilité supplémentaire par conversion du produit de polymère-enzyme en un sel insoluble, tel que le sel de calcium, par exemple par réaction du polymère ou du produit de polymère-enzyme avec de l'eau de chaux. L'expression "soluble dans l'eau " signifie que le produit en cause se dissout dans l'eau ou dans des solutions aqueuses. Comme d'habitude, cependant, ceci ne signifie pas que le produit se dissout totalement à toutes les concentrations ou à tous les pH. Cependant, ces produits sont caractérisés en ce qu'ils sont solubles pour toute une série de concentrations et de pH, et ils sont généralement solubles à des pH de 7 ou plus. Dans leur forme soluble, les produits de polymèreenzyme-sont caractérisés par la meme activité enzymatique générale que l'enzyme natif de départ, mais ils présentent tous les avantages inhérents à la possibilité de leur utilisation sous forme de solution ou de suspension, ainsi qu'une stabilité accrue et une activité prolongée. De plus, du fait de leur forme polymère, meme s'ils sont solubles, les produits de polymère-enzyme de l'invention sont séparables de l'enzyme natif ou des substrats, ainsi que des impuretés et des matières colorantes d'une nature indésirahle, par des procédés normaux de séparation, par exemple une centrifugation, une électrophorèse ou une chromatographie. Les produits de polymère-enzyme insolubles dans l1eau sont produits par réaction de l'enzyme avec un polymère insoluble dans l'eau ou en amenant le produit de réaction de l'enzyme et du polymère à devenir insoluble par réaction avec un agent de réticulation polyfonctionnel, tel qutune polyamine ou un polyol (notamment un glycol), lorsque ceci est nécessaire. Le produit d'enzyme-polymère est fréquemment au moins partiellement insoluble en soi à cause de l'interréaction entre le fragment enzyme et les chatnes polymères additionnelles. Si le polymère est pré-réticulé de manière à présenter une structure à trois dimensions ou comporte , dans certain cas, une longueur de channe linéaire suffisamment importante, le polymère de départ est déjà insoluble dans l'eau.D'autres méthodes de réticulation existent et sont bien connues d'ailleurs en pratique. Lorsqu'on a en vue des produits nettement insolubles, il est souvent avantageux d'utiliser des copolymères qui comportent déjà une certaine réticulation. On contact de tels copolymères réticulés et on peut les obtenir en menant la polymérisation, par exemple la copolymérisation d'anhydride maléique et d'une oléfine hydrocarburée, en présence d'un agent de réticulation, par exemple un composé contenant deux doubles -liaisons oléfiniques, comme le divinylbenzène ou le crotonate de vinyle, le poly1,2-butadiène ou les alpha, oméga-dioléfines. La quantité de l'agent de réticulation variera avec le degré d'insolubilité que l'on désire, mais elle sera généralement de l'ordre de 0,1 à 10% en poids du mélange total de monomères. A titre d'exemple de procédé de préparation d'un réseau de polymère à trois dimensions, on peut utiliser un composé difonctionnel pour la réticulation d'un copolymère préformé d'acide dibasique et d'une mono-oléfine C2-C18. Ceci peut entre réalisé par réaction entre le copolymère et une polyaminé, par exemple 0,1 à 10 moles% d'éthylène diamine. De la sorte on peut con trtler la somme de réticulation du polymère global. il doit être enténdu que.ltéthylènediamine constitue un exemple seulement de réactif de réticulation, car de nombreux-autres composés ,tels que le groupe des alkylènes et d'autres -polyamines similaires, peuvent être utilisés à cet effet.D'autre part, on peut produire avantageusement des produits insolubles d'enzyme-polymère par un procédé quelque peu différent. Procédé général de préparation de produits solubles Pour obtenir des rendements élevés de produits d'enzyme-polymère solubles dans l'eau, il est désirable d'éviter une réticulation qui causerait une insolubilisation. Pour préparer des dérivés solubles d'enzyme-polymère, la réaction est par conséquent réalisée de préférence sous des conditions excluant pratiquement une réticulation La réticulation indésirable peut entre réduite en réalisant la réaction de fixation dans une dilution élevée de telle sorte qu'il y ait moins de réactions entre plusieurs molécules de polymère et une seule molécule d'enzyme. A titre de variante, des rapports élevés enzymes'polymère favorisent la réaction de plusieurs molécules d'enzyme avec une seule molécule de polymère. Ceci a par conséquent pour résultat un système enzyme/polymère aggloméré, qui conserve les propriétés solubles désirées des molécules individuelles d'enzyme, Une voie supplémentaire suivant laquelle la formation de produits solubles est favorisée consiste à mener la réaction à une concentration ionique élevée pour diminuer l'agglomération de la protéine native. Bien que des procédés tels que ceux décrits ci-dessus soient souvent avantageux, il n'est pas toujours nécessaire d'utiliser des solutions diluées ou des rapports enzyme/po- lymère élevés pour arriver à la formation de dérivés solubles dlenzyme/polymère. Des polymères préférés sont choisis dans le groupe comprenant: (a) un copolymèred'éthylène/anhydride maléique un copolymère de styrène/anhydride maléique un copolymère d'éther vinylméthylique/anhydride maléique un copolymère d'acétate de vinyle/anhydride maléique un cyclo-copolymère d'éther divinylique/anhydride maléique l'anhydride polymaléique et l'anhydride polyacrylique, et leurs dérivés cationiques, et des enzymes préférés consistent en au moins un enzyme choisi dans le groupe comprenant (b) une protéase neutre, une protéase acide, une protéase alcali ne, une amylase, une dextranase, une lipase, un lysozyme ou une protéase de Myxobacter AL-1, ou autre enzyme lytique en core, une protéase alcaline en particulier lorsqu'elle est attachée à un polyélectrolyte cationique ou basique, et tous les enzymes étant de préférence d'origine microbiologique, ainsi que les combinaisons de ces produits. Des combinaisons de ce genre de deux produits d'enzyme-polymère ou plus donnent des résultats supérieurs à ceux obtenus lorsqu'on utilise un seul produit d'enzyme-polymère et, en conséquence, ces combinaison représentent une forme de réalisation préférée du procédé de l'invention. L'utilisation de combinaisons d'une série d'enzymes sous la forme d'une seule molécule de polymère à plusieurs enzymes est également envisagée suivant la présente invention et constitue une autre forme de réalisation préférée de/celle-ci, étant donné qu'une multiplicité d'activités enzymatiques peuvent ainsi être imparties à la composition pour l'hygiène de la bouche et à son ingrédient actif par voie enzymatique sous la forme d'un produit stable qui n'est pas sujet à une autolyse comme le sont des combinaisons ou de simples mélanges d'enzymes.A titre d'exemple, on a trouvé qu'un produit de polymère-enzyme contenant une protéase neutre et/ou un amylase et/ou une lipase et/ou une dex transe et/ou un enzyme lytique , comme le lysozyme, ou la protéase Mvxobacter AL-1 convient spécialement bien pour l'utilisation suivant la présente invention et forme de ce fait une application préférée de celle-ci. I1 peut certainement y avoir des enzymes autres que ceux énumérés ci-dessus dans la molécule du produit de polymère-enzyme que: l'on emploie , par exemple une protéase alcaline, pour arriver à une activité efficace , ces enzymes étant de préférence lies à un polyélectrolyte cationique ou basique, chacun des enzymes assurant sa fonction propre. Le procédé général employé consiste à permettre à des solutions froides d'enzymes dans des tampons appropriés de réagir pendant la nuit à 4 C avec des suspensions de polymère homogénéisées froides, par exemple de EAM. On utilise de préférence le EAM21 qui a un poids moléculaire d'environ 20900-30.000. On peut également utiliser des polymères ayant d'autres poids moléculaires. A titre d'exemple, on peut aussi employer le EAM-ll qui a un poids moléculaire d'environ 2.000-3.000 et le EAM-31 qui a un poids moléculaire d'environ 60.000.La séparation des produits d'addition solubles et insolubles, après la réaction, est réalisée par centrifugation à froid (centrifugeuse de Sorval SS-3 (TM), environ 10.000 tours par minute, durée de centrifugation de 10 minutes) Les produits d'addition solubles sont dialysés de manière complète par rapport à de l'eau à froid et ensuite lyophilisés. On lave les produits insolubles (et on les centrifuge), habituellement 10 fois avec un tampon froid et 5 fois avec de l'eau distillée froide, puis on les lyophilise. Préparations 1-11 Produits polymèra de EAM-protéase neutre, protéase alcaline et amylase On prépare les réactifs utilisés dans la production d'un produit.d'addition d'un mélange d'enzymes Bacillus subtilis / EAM-21 en tenant compte des exigences suivantes 10 On prépare du EAM-21 anhydre en partant de EAMH-21 (EAM hydrolysé) par chauffage sous vide à une température de 1050C pendant la nuit Le poids moléculaire-du EAM-21 est d'environ 2030.000. 2" Le tampon de véronal utilisé est 0,05M avec un pH de 7,8. 30 La solution d'acétatede sodium que l'on utilise est 1M Cette solution est ajoutée à raison de deux fois le volume pour amener la solution d'enzyme à la concentration requise en ion calcium. Ou bien, on utilise une solution d'une concentration 2M. On emploie différents échantillons d'un mélange d'enzymes de Bacillus subtilis AM , contenant chacun de la protéase neutre, de la protéase alcaline et de l'amylase La matière était des trois types suivants : 1. Mélange d'enzymes de B. subtilis souche AM, ayant une activité de protéase de 1,9 xlO micron/gr (pH 7) et étant partielle ment insoluble. 2. Mélange d'enzymes de B. subtilis souche AM, ayant une activité de protéase de 1,0 x 106 micron/gr (pH 7), et étant partiellement insoluble. 3. Mélange d'exzymes de B. subtilis souche Am, ayant une activité de protéase de 1,43 x 106 micron/gr (pH 7) et étant totalement soluble. A. Fixation Le procédé général est décrit ci-après. On met en suspension le mélange d'enzymes de B. subtilis brut dans de l'eau distillée froide et on agite par voie magnétique pendant une heure à 40C. On centrifuge ensuite le mélange résultant à 8.000 tours par minute pendant 10 minutes pour séparer les solides en suspension et inactifs (cette phase est omise pour le système enzymatiqueltotaBtent soluble n SG-2144). On sépare la matiere surnageante et on l'amène à 0,065M en ion calcium par l'addition de Ca(OAc)2 1M et on agite alors la solution pendant 30 minutes à froid (40C). On centrifuge ensuite le mélange à 8.000 tours par minute pendant 10 minutes pour séparer les solides précipités et inactifs. A la matière surnageante clarifiée, on ajoute, avec agitation, un tampon de-véronal 0,05M froid, pH de 7,8. Pendant que l'on prépare les solutions précédentes, on dissout une quantité appropriée de EAM (enzymes de B. subtilis/ EAM : 21,8/1 en poids/poids) dans du sulfoxyde de diméthyle. Cette solution est ajoutée goutte à goutte à la solution enzymatique froide agitée précédente et on agite ensuite mélange pendant la nuit à t C On centrifuge ensuite le mélange à 8.000 tours par minute pendant 10 minutes et on récolte le produit solide. On la ve clui-ci en utilisant deux fois son volume d'eau distillée froide, avec agitation et centrifugation. On lave 15 fois les produits d'addition de cette manière ,le produit final étant ensuite isolé par lyophilisation.Les rendements et les activités enzymatiques des préparations de produits d'addition sont donnés dans le tableau I suivant. On prépare leqproduits insolubla d'une manière avantageuse en réalisant la réaction en présence d'un agent de réticulation, tel quelle l'hexaméthylènediamine, par exemple à une concentration de 1 à 2% par rapport à la quantité du polymère employé. Prép. Mélange Activité Quantité Rapport mélange Activité de Produit Activité Poids n enzym. initiale de B. enzym. B. subtilis/ protéase récu - d' conservée, récupéré, B. subtilis, de subtilis, EAM pérée, /gr addition, % % n protéase, Mélange rec., gr 106 /gr enzym., gr 1 R.G.A. 6,0 3 8/1 3,045.000 0,780 50,7 26,0 2 SG-2046 1,9 20 8/1 1.400.000 5,493 73,7 27,5 3 SG-2046 1,9 20 8/1 1.050.000 5,260 55,2 26,3 4 SG-2046 1,9 20 8/1 1.515.000 4,962 79,7 24,8 5 SG-2046 1,9 150 8/1 1.400.000 52,70 73,7 35,1 6 SG-2046 1,9 55 8/1 670.000 11,10 35,2 20,0 7 SG-2046 1,9 55 8/1 288.000 12,90 43,0 23,4 8 SG-2046 1,9 750 mgr 8/1 1.312.500 0,163 68,9 21,7 9 SG-2089 1,0 55 8/1 375.000 119,2 37,5 30,9 10 SG-1244 1,4 4 x 55 # 8/1 1.250.000 70,0 87,3 31,8 11 SG-2144 1,4 9 x 55 ## 8/1 650.000 400 45,4 46,0 # Combinaison de quatre traitements de 55 gr ## Combinaison de neuf traitements de 55 gr. Déterminations Les détérminations relatives à l'amylase sont réalisées en utilisant le procédé de Bernfeld bien connu en employant un temps de chauffage de 5 minutes pour le développement de la coloration. Les déterminations concernant la protéase au pH de 7 sont réalisées par le procédé d' Anson connu; les déterminations au pH 10 diffèrent par le fait que la solution de caséine est neutralisée au pH 10 avec de l'acide phosphorique dilué. Etudes de stabilité Les études de stabilité sur les composants du mélange enzymatique de B. subtilis AM (amylase, protéase au pH 7,0 et au pH de 10,0) et sur leurs dérivés insolubles de EAM ont été réalisées respectivement à 250, 370 et 500C sur des périodes allant jusqu'à 22 jours. L'effet de l'addition de calcium est plus perceptible sur la stabilité du dérivé EAM-enzyme, peut-être du fait de la séparation de calcium endogène durant la préparation L'activité de l'amylase est assez stable et est accrue au pH de 8-10 dans le dérivé de EAM-enzyme, On observe un effet similaire avec l'activité totale de protéase (au pH de 7,0) et de la protéase alcaline(pE de 10,0) lors d 'études à long terme au pH de 7-10 à 25 et 370. Dans ltétude de stabilité à plus haute température (jusqu'à 800) avec un chauffage de 30 minutes seulement, la stabilité accrue de l'activité d'amylase du dérivé de EAM-enzyme aux pH supérieurs est biendémontrée. La protéase ne montre pas une stabilité thermique fortement accrue correspondante, bien que la stabilité de la protéase neutre dans le produit d'addition de EAM soit elle-meme environ deux fois celle de l'enzyme natif, et que la stabilité de la protase alcaline dans le produit d'addition de EAM soitdzenviron quatre fois allie de l'enzyme natif après 30 minutes à 800C Propriétés et caractérisation Une preuve positive que les trois types d'enzymes sont présents dans la molécule polymère est obtenue de la manière suivante (1) Le produit de EAM à plusieurs enzymes a une activité spécifique amylase presque aussi élevée que celle des deux mélanges enzymatiques non fixés utilisés comme témoins, ce qui est montré par le tableau Il (2) Le produit de EAM à plusieurs enzymes a une activité de portéase au pH 7 et au pH 10, qui est à peu près dans le même rapport que dans le cas des mélanges enzymatiques non fixés utilisés comme témoins. L'activité spécifique du produit de EAM à plusieurs enzymes aux deux pH sous lesquels il est vérifié est de plus presque identique aux valeurs d'activité trouvées pour les deux mélanges enzymatiques témoins, ce qui est également montré par le tableau II TABLEAU II Amylase, Protéase Protéase /gr neutre alcaline (pH 7,0), (pH 10,0), /gr /gr Produit insoluble de EAM à plusieurs enzymes 405.000 1.090.000 680.000 Enzyme A 666.000 1.720.000 990.000 Enzyme B 340.000 960.000 550.000 Des études de stabilité montrent une stabilité élevée imprévisible pour les produits de polymère-enzyme, ce qui est montré par les tableaux III à VIII suivants. TABLEAU III Effet de la fixation au EAM sur la stabilité d'amylase de B. subtilis Période de chauffage de 30 min.,pH de 10,0 Température 25 OC 50 600 700 800 Produit Insoluble de EAM à plusieurs enzymes (100) 104 100 70 16 Enzyme témoin (100) 99 85 43 2 TABLEAU IV Effet de la fixation au EAM sur la stabilitéde la protéase neutre de B.subtilis Période de chauffage de 30 min., pH de 8,0 Essai de la protéase au pH de 10,0 Température 250C 500 600 700 800 Produit insoluble de EAM à plusieurs enzymes (100'- 92 63 .19 Enzyme témoin (100) 79 54 12 6 TABLEAU V Stabilité de la protéase alcaline et de sondérivé avec le EAM au pH de 10,0 Période de chauffage de 30 min.; essai au pH de 10,0 Température 250C 500 600 700 800 Produit insoluble de EAM à plusieurs enzymes (100) 70 52 35 13 Enzyme témoin (100) 68 49 8 3 TABLEAU VI Effet de la fixation au EAM sur la stabilité de la protéase neutre de B.subtilis Température de 250C; pH de 9,0; essai au pH de 7,0 dans du CaAc2 0,1% Temps- (heures) 0 22 46 70 166 238 Produit insoluble de EAM à plusieurs enzymes (100) 67 28 28 27 23 Enzyme témoin (100) 28 15 20 14 2 TABLEAU VII Effet de la fixation au EAM sur la stabilité de la protéase alca line de B. subtilis Temp, de 250C; pH de 7,0 dans du CaAc2 0,1% ;essai au pH 10,0 Temps (heures) 0 22 46 94 166 Produit insoluble de EAM à plusieurs enzymes (100) 90 ss 100 90 92 Enzyme témoin (100) 83 71 17 4 TABLEAU VIfI Effet de la fixation au EAM sur la stabilité de la protéase alca line de B. subtilis Temp. de 500C; pH de 10,0 dans du CaAc2 0,1%;essai au pH 10,0 Temps (heures) @ 0 22 46 94 166 190 214 Produit insoluble de EAM à plusieurs enzymes (100) 62 2i 23 19 12 12 Enzyme témoin (100) 22 9 3 2 6 1 Préparation 12 Produits soluble;. et insoluble de EAM etde protéase neutre de Bacillus subtilis -dextranase On dissout de la protéase neutre de B.subtilis (100 mgr) et de la dextranase (100 mgr) dans 75 ml d'un tampon de phosphate O,lM froid, pH de 7,5, qui est également O,OlM en acétate de calcium. A cette solution, on ajoute un mélange homogénéisé de EAM (250 mgr) dans 100 ml de tampon phosphate 0,1M froid,pH de 7,5. On agite pendant la nuit à froid (40C) le mélange combiné et on sépare le solide de la solution surnageante par centrifugation. Après dialyse et lyophilisation, le produit insoluble de protéase neutre de B.subtilis et de dextranase-EAM présente 43% de l'activite initiale de protéase et 27% de l'activité initiale de dextranase. La solution surnageante est dialysée et lyophilisée pour donner un produit soluble solide de protéase neutre de B.subtiliset de dextranase-EAM , qui présente 64% de l'activité initiale de protéase et 62% de l'activité initiale de dextranase. L'emploi de 1% dthexaméthylènediamine augmente la quantité du produit réticulé insoluble. Préparation 13 Produits soluble et insoluble de EAM-dextranase On obtient la dextranase sous forme d'un produit précipité par l'addition d'un solvant organique à une liqueur de fermentation de Penicillium funiculosum (souche NRRL 1132). On dissout 100 mgr de dextranase dans 50 ml de tampon phosphate 0,lM froid, pH de 7,5, qui est 0,OlM en acétate de calcium. A cette solution, on ajoute un mélange homogénéisé de 100 mgr de EAM dans un tampon phosphate 0,lM froid (50 ml). On agite le mélange combiné pendant la nuit à froid (4"C) et on sépare le solide de la solution surnageante par centrifugation. Après dialyse et lyophilisation, le produit insoluble de dextranase-EAM présente 35% de l'activité initiale de dextranase. La solution surnageante est dialysée et lyophilisée pour donner un produit solide soluble de dextanase-EAM ,qui présente 68% de l'activité initiale de dextranase. Préparations 14-56 Autres produits de polymère-enzyme On prépare les produits supplémentaires suivants de polymère-enzyme en utilisant le procédé de la Préparation 1. Les pourcentages, lorsqu'ils sont donnés, sont ceux de l'activité enzymatique présente dans le produit de polymre-enzyme, compara tivement à activité de l'enzyme natif de départ. 14 - Protéase acide,neutre et alcaline-EAM (protéase acide de A.oryzae) Soluble : 47%, 45%, 52% Insoluble : 35%, 34%, 48% -15 - Protéase acide et neutre-EAM (protéase acide de A. orvzae) Soluble : 32%, 48% Insoluble : 30%, 42% 16 - Protéase neutre de B.subtilis/papaine et pepsine-EAM Soluble : 42%, 57%, 45% Insoluble : 32%, 48%, 38% 17 - Protéase acide/papaine/pepsine (protéase acide de A.oryzae) EAM Soluble : 52% (y compris pepsine), 25% Insoluble : 54% (y compris pepsine), 28% 18 - Protéase neutre/lipase-copolymère de styrène/anhydride maléique Insoluble : environ 20% dans chaque cas 19 - Protéase neutre/protéase alcaline-copolymère d'éther vinylméthylique/anhydride maléique Insoluble : environ -50% dans chaque cas 20 - Protéase neutre/protéase alcaline/amylase-copolymère d'acétate de vinyle/anhydride maléique Insoluble : environ 60% dans chaque cas 21 - Protéase neutre/lipase-cyclo-copolymère d'éther divinylique/ anhydride maléique Insoluble : environ 50% dans chaque cas 22 - Protéase neutre/protéase alcaline-poiymère d'anhydride maléfique Insoluble : environ 70% dans chaque cas 23 - Protéase neutre/protéase alcaline/lipase-polymère d'anhy dride polyacrylique Insoluble : environ 50% dans chaque cas 24 - Protéasssneutre et alcaline de B.subtilis et amylase-EAM Soluble : 42%, 57%, 69% Insoluble 0 32%, 48%. 62% 25 - Protéase neutre/dextranase-anhydride polyacrylique Soluble : 62%, 52% Insoluble : 40%, 28% 26 - Protéases neutre et alcaline de B.subtilis-EAM Soluble : 47%, 59% Insoluble : 38%, 52% 27 - Protéas neutre et alcaline de B.subtilis et lipase-EAM Soluble : 43%, 56%, 17% Insoluble : 35%, 47%, 72% 28 - EAM-trypsine 29 - Chymotrypsine-EAM 30 - Lipase-EAM 31 - Lysozyme-EAM 32 - Protéases neutre et alcaline de B.subtilis/protéase acide/ dextranase-EAM 33 - Protéases neutre et alcaline de B.subtilis/amylase et dextranase-EAM 34 - Protéase neutre (B. subtilis var.amylosacchariticus)-EAM 35 - Asparaginase-EAM 36 - EAM-papalne 37 - Protéase neutre-copolymère de styrène et d'anhydride maléique 38 - Protéase neutre/amylase-copolymère dtéther vinylméthylique/ anhydride maléique 39 - Ficin-copolymère d'acétate de vinyle/anhydride maléique 40 - Dextranase/protéase neutre-cyclo-copolymère d'éther divinylique/anhydride maléique 41 - Chymotrypsine-polymère d'anhydride maléique 42 - Trypsine-polymère d'anhydride polymaléique 43 - Protéases alcaline et neutre-polymère d'anhydride polymaléique 44 - Protéase acide (A.oryzae)-polymère d'anhydride polyacrylique 45 - Protéase acide (A.oryzae)-EAM 46 - Protéase Myxobacter AL-1-EAM 47 - Protéase alcaline-diméthylaminopropylamide de EAM 48 - Protéases neutre et alcaline de B.subtilis/amylase- diméthylaminoéthylimide de EAM 49 - Bromélaîne-EAM 50 - Protéase alcaline-diméthylaminopropanol ester de EAM 51 - Protéases neutre et alcaline de B. subtilisjamylase et pro téase de Myxobacter AL-1-EAM 52 - Pepsine-EAM 53 - Papaïne de zinc 54 - Protéase neutre de B. subtilis AM-EAM 55 - Protéase neutre de B,subtilis AM/dextranaseGEAM 56 - Lysozyme/protéase neutre/protéase alcaline-diëthylamino- propylimide de EAM EXEMPLE 1 Compositions pour lavage de bouche contenant des produits de polymère-enzyme On prépare des compositions typiques pour lavage de bouche en utilisant les spécifications générales suivantes en poids Eau 30-99 Alcool 0-70 Glycérol 0-25 Agent tensio-actif 0-0,1 Agent antimicrobien,par exemple chlorure de cétylpyrldinium 0,01-0,1 Agent aromatisant 0,1-0,2 Agent colorant Produit de polymère-enzyme 0,1-2 Lorsqu'on utilise un ou plusieurs , de préférence plusieurs produits de polymère-enzyme suivant les Préparations 1-55, à titre d'ingrédients actifs par voie enzymatique dans la formulation précédente, les compositions sont stables meme après de longues périodes de stockage, elles ont une action de longue durée et elles sont extrêmement efficaces pour enlever les taches des dents r de même que pour retarder la formation de concrétions molles et dures, si on les utilise sur une période prolongée de temps. Les compositions sont d'un aspect très acceptableht en outre très efficaces lorsqu'elles englobent des produits de polymère-enzyme solubles dans lteau, mais elles sont d'une plus longue durée lorsqu'elles englobent des produits insolubles. Des compositions particulièrement efficaces sont celles qui englobent les produits de polymère-enzyme solubles et/ ou insolubles des Préparations précédentes, référence étant faite ci-après aux numéros des Préparations A. 1 F. 1+13+31 K. 51 P. 12+44 B. 1+13 G. 32 L. 55 Q. 18+13 C. 12 H. 33 M. 48 R. 25 D. 2+30 ~ I. 46 N. 3+44 S. 4+31 E 24 J 45 O. 3+44+13 T. 40 Les produits de polymère à plusieurs enzymes semblent autre les plus efficaces comme le sont ceux qui englobent un produit de polymère-protéase neutre ou de polymère-protéase neutre plus un produit de polymère-dextranase, et en particulier un produit de polymère-protéase neutre/dextranase.Les compositions contenant un produit de polymère-protéase de Myxobacter AL-1 sont également particulièrement efficaces. EXEMPLE 2 Compositions pour pate dentifrice1 contenant un produit de polymère-enzyme en poids 1. Agent abrasif ou de polissage 49-60 2. Excipient 20-30 3. Agent modificateur (agent épaississant) 0,5-3,0 4. Détergent 0,5-5,0 5. Eau 10-20 6. Produit de polymère-enzyme 0,4-4,0 7. Agent adoucissant ou aromatisant Types particuliers 1. Le CaCO3 , le phosphate dicalcique, le CaP, le CaS04 sont des exemples 2. Des exemples sont la glycérine, le propylène glycol, le sor bitol 3. Des exemples sont la gomme adragante, la gomme de Karaya, la gomme de carragileen , la gomme de guar, la carboxyméthylcellu lose, le carbopol 4.Des exemples sont les sels de métaux alcalins et de métaux alcalino-terreux d'acides gras, ou des mono-ou diglycérides d'acides gras, ou encore des détergents synthétiques. Lorsqu'on utilise un ou plusieurs des produits de po lymère-enzyme des Préparation 1 à 55 comme ingrédients actifs par voie enzymatique dans la formulation précédente, les compositions sont stables meme après de longues périodes de stockage, elles ont une action de longue durée, et elles sont extrêmement efficaces pour enlever les taches des dents,de meme que pour retarder la formation de concrétions molles et dures si on les utilise sur une période prolongée de temps. Les compositions sont très efficaces lorsqu'elles englobent des produits de poiymèreenzyme solubles dans l'eau et elles sont d'une plus longue durée lorsqu'elles comprennent des produits insolubles. Des compositions particulièrement efficaces sont celles qui englobent les produits solubles et/ou- insolubles de polymère-enzyme des Préparations précédentes, référence étant faite ci-après aux numéros des Préparations: A. 1 F. 1+13+31 K. 51 P. 12+44 B. 1+13 G. 32 L. 55 Q. 18+13 C. 12 H. ~ 33 M. - 48 R. 25 D 2+30 I. - 46 N. 3+44 S. 4+31 E.. 24 J. - 45 0 3+44+13 T. 40 Les produits de polymère à plusieurs enzymes semblent à nouveau être les plus efficaces, par exemple ceux qui englobent un polymère-protéase neutre ou polymère-protéase neutre plus un polymère-dextranase, et en particulier un produit de polymèreprotéase neutre/dextranase.Les compositions contenant de la protéase de Myxobacter AL-1 -polymère sont également particulièrement efficaces EXEMPLE 3 Compositions de gomme à macher , contenant un produit de polymèreenzyme On prépare des compositions de gomme- à macher de la façon suivante en poids Base de gomme (élastomères naturels et synthétiques ainsi que charges) 20-35 Glucose lO-2Ô Sucrose 50-70 Produit de polymère-enzyme 0,4-2 Agent d'aromatisation Lorsqu'on utilise un ou plusieurs des produits de polymère-enzyme des Préparations 1 à 55 à titre d'ingrédients actifs par voie enzymatique dans la formulation précédenté, les compositions sont stables même après des périodes prolongées de temps sous la forme emballée, elles ont une action de longue durée lors de l'utilisation et elles sont extrêmement efficaces pour supprimer les taches des dents, ainsi que pour retarder la formation de concrétions molles et dures si on les utilise sur une période prolongée de temps. Les compositions sont très efficaces lorsqu'elles comprennent des produits de polymère-enzyme solubles dans l'eau mais elles sont d'une action plus longue lorsqu'elles englobent des produits insolubles. Des compositions particulièrement efficaces sont celles qui comprennent les produits solubles et/ou insolubles de polymère-enzyme des Préparations précédentes,référence étant faite ci-après aux numéros des Préparations A. 1 F. 1+13+31 K. 51 P. 12+44 B. 1+13 G. 32 L. 55 Q. 18+13 C. 12 H. 33 M. 48 R. 25 D. 2+30 I. 46 N. 3+44 S. 4+31 E. 24 J 45 O. 3+44+13 T. 40 Les produits de polymère à plusieurs enzymes appa raissentune fois de plus comme étant les plus efficaces, notamment ceux contenant un polymère-protéase neutre ou un polymèreprotéase neutre plus un polymère-dextranase, et en particulier un produit de polymère-protéase neutre/dextranase. Les compositions contenant un polymère et une protéase Myxobacter AL-1 sont également particulièrement efficaces. EXEMPLE 4 Autres compositions de p te dentifrice, contenant un produit de polymère-enzyme On prépare d'autres compositions de patte dentifrice contenant un produit de polymère-enzyme, de la manière suivante : Parties en poids Diphosphate calcique 70 Bentonite 5 Gomme adragante 0,1 Eau 10 Glycérine 20 Essence de menthe 0,5 Menthol 0,02 Saccharine sodium 0,05 Méthyl Paraben (agent de conservJation) 0,05 Produit de polymère-enzyme 0Z1l Lorsqu'on utilise un ou plusieurs des produits de polymère-enzyme des Préparations 1 à 55 à titre d'ingrédients actifs par voie enzymatique dans la formulation précédente, les compositions sontstables/même après de longues périodes de stockage, -elles sont d'une action de longue durée et elles sont extrêment efficaces pour supprimer les tache des dents ,ainsi que pour retarder les concrétions molles et dures si on les utilise sur une période prolongée de temps. Les compositions sont très efficaces lorsqu'elles englobent des produits de polymère-enzyme solubles dans l'eau mais elles sont d'une plus longue durée lorsqu'elles comportent des produits insolubles. Les compositions particulièrement efficaces sont celles qui comprennent les produits de polymère-enzyme solubles et/ou insolubles des Préparations précédentes, référence étant faite ci-après aux numéros des Préparations : A. 1 F. 1+13+31 K, 51 P, 12+44 B. 1+13 G. 32 L.- 55 Q. 18+13 C. 12 H, 33 M. 48 R. 25 D, 2+30 I. 46 N. 3+44 S. 4+31 E, 24 J. 45 O. 3+44+13 T. 40 Les produits de polymère à plusieurs enzymes semblent à nouveau autre les plus efficaces, par exemple ceux comportant un polymère-protéase neutre ou un polymère-protéase neutre plus un polymère-dextranase, et spécialement un produit de polymère-protéase neutre/dextranase. Les compositions contenant un polymèreprotéase de Myxobacter AL-1 sont également spécialement efficaces. EXEMPLE 5 Compositions de gomme à mâcher, contenant un produit de polymèreenzyme D'autres compositions de gomme à mâcher , contenant un produit de polymère-enzyme, sont préparées de la façon suivant te : % en poids Base de gomme 28,3 Sucre se 56,2 Glucose 14,0 Agent d'aromatisation 0,7 Produit de polymère-enzyme 0,8 Lorsqu'on utilise un ou plusieurs des produits de polymère-enzyme des Préparations 1 à 55 comme ingrédients actifs par voie enzymatique dans la formulation précédente, les compositions sont stables meme après de longues périodes de temps d'emmagasinage, elles sont d'une action de longue durée lors de l'utilisation et elles sont extrtmement efficaces pour supprimer les taches des dents, ainsi que pour retarder les concrétions molles et dures Si on les utilise sur une période prolongée de temps. Les compositions sont très efficaces lorsqu'elles comportent des produits de polymère-enzyme solubles dans l'eau, mais elles sont d'une plus longue durée lorsqu'elles comportent des produits insolubles. Des compositions particulièrement efficaces sont celles qui englobent des produits de polymère-enzyme solubles et/ ou insolubles des Préparations précédentes, référence étant faite ci-après aux numéros des Préparations A. 1 F. 1+13+31 K. 51 P. 12+44 B. 1+13 G. 32 L. 55 Q. 18+13 C. 12 H. 33 M. 48 R. 25 D 2+30 I. 46 N. 3+44 S. 4+31 E. 24 J 45 0. 3+44+13 T. 40 Les produits de polymère à plusieurs enzymes apparaissent une fois de plus comme étant les plus efficaces, par exemple ceux comportant un polymère-protéase neutre ou un polymèreprotéase neutre plus un polymère-dextranase, et spécialement un produit de polymère-protéase neutre/dextranase. Les compositions contenant un polymère-protéase de Myxobacter AL-1 sont également spécialement efficaces. Bien que, dans les exemples précédents; on ait envisagé des compositions pour l'hygiène de la boubhe-sous une forme aqueuse, c'est-à-dire contenant une certaine quantité d'eau, on peut également préparer ces compositions sous une forme non aqueuse mais comportant à titre de composant fluide, un fluide acceptable du point de vue pharmacologique, comme la glycérine, l'éthylè- ne glycol, l'éthylène cellosolve, les Carbitols (TM), tels que l'éther monoéthylique de diéthylène glycol , ou leurs esters, par exemple l'acétate, ou un Carbowax (TM), par exemple un polyéthylène glycol de poids moléculaire inférieur, ou encore des matières similaires. Evidemment, toute matière utilisée doit tre suffisamment non toxique pour être acceptable du point de vue pharmacologique pour la cavité buccale. Des compositions de ce genre comprendront alors le produit de polymère-enzyme actif par voie enzymatique, en mime temps qu'un véhicule qui est solide, semi-solide ou élastomère (naturel ou synthétique), ou qui est formé par un fluide. Celui-ci, comme on l'a déjà mentionné, peut etre de liteau ou en comprendre, ou bien il peut réagir d'un fluide non aqueux. On emploie fréquemment des compositions non aqueuses comme composition pour le rinçage de la bouche oupour gargariser, qui doivent être diluées avec de l'eau immédiatement avant l'utili,sation. Ces compositions peuvent, par conséquent, centre d'une nature aqueuse ou non aqueuse. Si le véhicule employé est un véhicule fluide, la composition comprendra également un agent antimicrobien, soit bactériostatique, soit bactéricide, pour empêcher une détérioration bactériologique ultérieure de la cavité buccale après le traitement avec le produit de polymère-enzyme de l'invention ou les compositions en contenant, ou encore un agent de suspens ion, par exemple un agent émulsionnant ou dispersant, en particulier lorsque le produit de polymère-enzyme employé est insoluble par nature, bien que, lorsque le véhicule est un fluide, même lorsque le produit de polymèreenzyme est d'une nature soluble, on utilise ordinairement aussi de manière avantageuse un agent dispersant, émulsionnant ou autre agent de mise en suspension. Des agents antimicrobiens utilisés peuvent tre de touttype courant.En fait, une concentration considérable d'alcool dans la composition servira d'agent antimicrobien efficace Des agents antimicrobiens et des agents émulsionnants dispersants ou autres agents de suspension peuvent évidemment entre aussi incorporés dans des formes non fluides de la compositione notamment des véhicules non fluides, mais l'incorRo= ration d'agents de suspension , par exemple des agents dispersants ou émulsionnants, dans des formes solides, semi-solides ou élastomères de la composition, n'est habituellement pas essentielle, du fait de la présence d'autres composants de ces types de composition, comme c'est le cas avec une composition fluide, en particulier une composition aqueuse, et l'emploi de véhicules fluides sans utiliser simultanément un agent antimicrobien et/ou un agent de suspension notamment un agent émulsionnant ou dispersant, laisserait beaucoup à désirer du point de vue de l'efficacité globale des compositions fluides. On obtient les mimes effets et/ou des résultats pratiquement similaires en englobant d'autres produits de polymèreenzyme ou des produits supplémentaires de ce genre dans les compositions prévue pour l'hygiène de la bouche suivant l'invention. De plus, les compositions peuvent prendre la forme de liquides de rinçage ou de gargarisme, en se présentant de préférence sous une forme concentrée qui est destinée à une dilution importante avant l'utilisation, ces compositions pouvant entre prendre la forme de bonbons, en particulier de bonbons à mâcher, de pastilles, de tablettes, de poudres dentifrices, de pulvérisations d'un type contenu dans une bouteille déformable ou d'un type à aérosol, de ciments dentaires, en combinaison si on le désire avec un anesthésique local, etc. Les compositions pour l'hygiène de la cavité buccale suivant l'invention peuvent, par exemple, prendre la forme d'un pansement dentaire fortement imprégné ou enrobé, l'imprégnation ou l'enrobage comprenant un produit de-polymère-enzyme, soluble ou insoluble; de gazes imprégnées ou enrobées du produit de polymère-enzyme; de tissus enrobés ou imprégnés de ce produit; de tampons également imprégnés ou enrobés; de cure-dents ou de bâtonnets de bois, de matière pistique ou de métal, enrobés ou imprégnés d'un produit de polymère-enzyme utilisé seul ou en combinaison avec un liant; de brosses à dents comportant des soies enrobées ou imprégnées du produit de polymère-enzyme; de bandages pour la cavité buccale, capables d'adhérer à l'intérieur de celle-ci..,par exemple à la gencive , au palais , ou encoré à une dent, ces bandages étant imprégnés, enrobés ou contenant d'une autre manière un produit de polymère-enzyme soluble ou insoluble; d'abaisselangues ou d'objets similaires imprégnés ou enrobés d'une forme soluble ou insoluble du produit de polymère-enzyme, que l'on utilise seul ou sous la forme d'une composition; de coton imprégné ou enrobé de ce produit de polymère-enzyme; de crèmes, de pommades ou d'onguents contenant une forme soluble ou insoluble d'un tel produit de polymère-enzyme; et d'autres formes pour l'utilisation dans le traitement de la cavitkbuccale , formes qui sont évidemment trop nombreuses à mentionner et dans lesquelles le produit de polymère-enzyme sera englobé sous une forme soluble ou insoluble, seul ou en combinaison avec un liant,véhicule ou matière similaire d'un type approprie. Lorsque la composition pour l'hygiène de la cavité buccale est sous la forme d'une gomme à matcher ou d'une matière similaire, l'emploi d'une forme soluble ou insoluble dans liteau particulière est à nouveau une question de choix. Pour assurer un effet maximum d'abrasion et de masse, on préfère les formes insolubles, tandis que, pour des caractéristiques plus normalement propres à la gomme à macher et pour assurer un contact maximum du composant actif par voie enzymatique avec le substrat, on préfère des formes solubles dans l'eau.Dans leur forme insoluble, les produits de polymère-enzyme et les gommes en contenant ont une plus longue période d'activité enzymatique, meme après la période de mastication initiale, peut-8tre du fait d'une plus grande aff i- nité du produit insoluble de polymère-enzyme pour la surface des dents, ou durait d'un certain type d'enrobage formé de la sorte sur la surface des dents. Ceci est vrai également pour les pastilles, tablettes, dragées, bonbons ou formes similaires, sous lesquelles on peut présenter les compositions de la présente invention. Le domaine de l'application des compositions et des ingrédients actifs par voie enzymatique de l'invention n'est pas limité aux titre humains, car le problème de l'hygiène de la cavité buccale existe également chez les animaux, en particulier chez les animaux domestiques, comme les chiens. et les chats, les animaux de jardins zoologiques, etc.Pour une application dans ce domaine, les produits de polymère-enzyme actifs par voie enzymatique suivant l'invention sont habituellemenfncorporés à un véhicule approprié , qui est de préférence masticle, ces produits pouvant prendre la mtme forme que dans le cas de compositions pour les êtres humains mais pouvant aussi prendre d'autres formes qui sont plus- adaptées pour que les animaux les acceptent, à titre d'exemple, des biscuits, des farines et d'autres présentations alimentaires, sous diverses formes et avec divers agents d'aromatisation prévus pour que les compositions soient acceptées par les animaux et attirent ceux-ci . Bien que les compositions soient de préférence ,comme d'habitude, préparées et/ou vendues sous forme de compositions sèches, ces compositions peuvent également prendre la forme d'aliments en botte ou empaquetés,de préférence à nouveau mais non nécessairement d'une nature masticable, avec divers degrés de teneurs d'eau ou de vapeur d'eau, bien qu'un long séjour sous des conditions telles qu'une température élevée favorisant l'activité enzymatique puisse nuire à la stabilité dans des cas de ce genre, de sorte qu'on recommande un stockage à froid. A titre d'autres formes d'application, les compositions peuvent prendre la forme de capsules, de boulettes, de microcapsules, de produits de coacervation avec des lipides, des coaloSdes, etc, pour la distribution dans des aliments de divers types au moment de leur emploi, tout en pouvant aussi être répartis à l'avance dans de tels aliments.Lorsqu'elles sont sous de telles formes, les compositions de l'invention peuvent évidemment être emballées indépendamment de l'aliment avec lequel elles doivent finalement autre combinées, et elles peuvent donc être distribuées séparément ou en combinaison avec cet aliment dans lequel elles doivent être dispersées ou dissoutes, avec des avantages évidents de stabilité découlant d'un tel processus d'emballage. Comme les produits de polymère-enzyme présentent généralement moins de 100% de l'activité de l'enzyme natif, il est fréquemment avantageux d'employer des quantités un peu supérieures du produit de polymère-enzyme que la quantité que l'on prévoirait si on utilisait l'enzyme natif, mais, comme cela sera évident, l'absence- > de détérioration ou de dégradation durant la production, le stockage et l'utilisation augmente sensiblement l'activité en zymatique-efficace disponible dans la composition au moment de l'utilisation, lorsqu'on utilise des composants de polymère-enzyme, de sorte que des quantités à peu près équivalentes peuvent être utilisées de façon sure.Les produits de polymère-enzyme devraient généralement autre utilisés à un taux d'environ 0,1 à 4%, habituellement à un taux d'environ 0,2 à 2%, en poids dans des dentifrices et produits similaires, spécialement lorsque enzyme a une activité de protéase (essai de digestion de caséine au pli de 7,0) d'environ 1,0-2,0 x 106 A/gr ou environ . Dans des liquides pour lavage de la bouche et dans des compositions alimentaires, les produits de l'invention devraient ordinairement autre employés en quantités correspondantes sur une base de poids, pour permet tre un "dosage"- journalier dans la cavité buccale d'environ 2.000-20.000 unités.Lorsqu'on les utilise sous des formes ou compositions en dosages fluides, les produits de polymère-enzyme seront de préférence sous la forme soluble dans l'eau pour faciliter un contact maximum avec le substrat, tandis que, sous des formes solides ou de pattes, la détermination de l'emploi d'un produit de polymère-enzyme soluble ou non dans l'eau est une question de chcix, suivant que l'on considère comme plus avantageuses des propriétés maxima d | d'abrasion ou de masse par rapport à un contact maximum du composant actif par voie enzymatique avec le substrat, en tenant compte de l'action enzymatique un peu plus longue de la forme insoluble de ces produits de polymère-enzyme. L'application où' utilisation des compositions de 1' in- vention se fait évidemment d'une manière courante, en amenant une quantité efficace du produit de polymère-enzyme en contact avec la cavité buccale ou avec la zone particulière de cette dernière, les nouveaux aspects de l'utilisation ou de l'application rési- dant dans le fait que le produit de polymère-enzyme actif par voie enzymatique à la gamme des pH de la cavité buccale est employé dans l'application- ou utilisation particulière envisagée, que ce soit pour brosser les dents, gargariser, laver la bouche, etc Evidemment, de telles compositions ,quelle que soit l'utili sation envisagée dans le cadre de l'hygiène de la bouche, peuvent contenir les produits de polymère-enzyme actifs par voie en zymatique, solubles ou insolubles dans l'eau, à titre de seuis ingrédients actifs, employés réellement seuls ou en combinaison avec un liant ou un véhicule acceptable du point de vue physiologique, ou bien on peut les utiliser comme composants de compositions qui englobent d'autres ingrédients actifs ou inactifs chimiquement ou physiquement pour les besoins de l'hygiène de la bou che, par exemple les agents tensio-actifs, les germicides, les abrasifs, etc, déjà mentionnés. Quelle que soit la forme exacte utilisée, on å trouvé que, de façon surprenante, les produits de polymère-enzyme constituant l'ingrédient actif par voie enzymatique des compositions de l'invention ont une attraction ou affinité relativement forte pour les surfaces dentaires, en particulier lorsqu'une protéase neutre est liée par covalence; de sorte que, quelle que soit le type exact de composition, de forme ou de mode d'administration que lton envisage, une proportion importante du produit de polymère-enzyme actif par voie enzymatique se situera d'elle-mEme sur les surfaces dentaires od l'action enzymatique très favorable doit s'effectuer de manière efficace sur une période prolongée de temps. Ceci est particulièrement vrai lorsqu'on utilise la forme insoluble du produit de polymère-enzyme. Dans l'un ou'autre cas, l'action enzymatique des compositions de l'invention se poursuit même après la fin du traitement particulier ou de la période de traitement, ce qui constitue un aspect très important car il n'est pas toujours possible de se rincer la bouche, de se brosser les dents ou de gargariser après chaque repas. En fait, meme après une simple période d'essai de traitement, l'activité enzymatique avec ses effets avantageux de prévention des concrétions molles et dures, ainsi que d'enlèvement et de prévention des taches,se poursuit de manière ininterrompue sur une période de temps importante. REVENDICATIONS 1. Une composition pour l'hygiène de la bouche, comprenant une quantité efficace par voie enzymatique d'au moins un produit de polymère-enzyme actif par voie enzymatique, dans lequel l'enzyme est lié par covalence et qui est actif par voie enzymatique dans la gamme des pH relativement neutres de la cavité buc cale, ainsi qu'un véhicule qui est acceptable pharmacologiquement pour la cavité buccale, ce véhicule étant choisi dans le groupe comprenant les véhicules solides, semi-solides et élastomères, ainsi que parmi les véhicules fluides englobant aussi un agent de suspension et/ou un agent antimicrobien 2.Une composition suivant la revendication 1, dans laquelle le produit de polymère-enzyme est soluble ou non dans l'eau, cette composition se présentant sous la forme d'un dentifrice, d'une gomme à matcher, d'un liquide detinçage pour la bouche, ou d'un gargarisme. 3. Une composition suivant l'une ou l'autre des revendications précédentes, dans laquelle le fragment enzyme du produit de polymère-enzyme est constitué par une protéase neutre, une protéase alcaline, une protéase acide, une amylase, une lipa se, une dextranase ou un enzyme lytique. 4. Une composition suivant l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant au moins un produit de polymère et de plusieurs enzymes. 5 Une composition suivant la revendication 4, dans laquelle les divers enzymes du produit de polymère à plusieurs enzymes sont constitués par une protéase neutre, ou bien une protéase neutre et une amylase, ou bien une protéase neutre et une dextranase, ou bien une protéase neutre et une lipase, ou bien une protéase neutre et une protéase alcaline, ou bien une protéase neutre, une amylase et une protéase acaline. 6. Une composition suivant la revendication 5, comprenant une protéase alcaline et une protéase neutre, le rapport de l'activité de la protéase alcaline à l'activité de la protéase neutre n'étant pas supérieur à environ 0,25-1,2/1. 7. Une composition suivant l'une quelconque des re yendications précédentes, comprenant à la fois un produit de polymère-enzyme et un produit de polymère- a plusieurs enzymes . 8. Une composition suivant l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle le polymère comprend des chatnes d'unités d'acide carboxylique ou d'anhydride d'acide car Jboxylique, ou des unités de groupes d'acide carboxylique ou d'anhydride d'acide carboxylique, séparés par des chatnes carbonées de 1 à 4 atomes de carbone, ces chaises faisant partie d'une unité qui contient un maximum dé 18 atomes de carbone, le polymère de la composition étant de préférence du type EMA. 9. Une composition suivant l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle lepolymère est constitué par un copolymère d'éthylène et d'anhydride maléique1 un copolymère de styrène et d'anhydride maléique, un copolymère d'éther vinylméthylique et d'anhydride maléique, un copolymère d'acétate de vinyle et d'anhydride maléique, un cyclo-copolymère d'éther divinylique et d'anhydride maléique, un anhydride polymaléique, un anhydride polyacrylique, et leurs dérivés cationiques. 10. Une composition suivant l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle tous les produits de po lymère---à un enzyme ou à plusieurs enzymes contiennent comme frag ment.-- enzyme ,des enzymes d'une origine microbiologique. 11. Un procédé de préparation d'une composition pour l'hygiène de la bouche, active par voie enzymatique, comprenant la combinaison d'une quantité efficace par voie enzymatique d'au moins un produit de polymère à un ou plusieurs enzymes, dans le quelle-cules enzymes sont liés par covalence, et qui sont actifs par voie enzymatique dans la gamme des pH relativement neutres de la cavité buccale, et d'un véhicule qui est physiologiquement acceptable pour cette cavité buccale, ce véhicule étant choisi parmi les véhicules solides, semi-solides et élastomères, ainsi que parmi les véhicules fluides, en englobant aussi, dans le cas de ces derniers, un agent de suspension et/ou un agent antimicrobien. 12. Procédé pour le traitement par voie enzymatique de la cavité buccale pour des raisons d'hygiene, qui consiste à mettre en contact avec cette cavité buccale une quantité efficace d'un produit de polymère-enzyme suivant l'une quelconque des revendications 1 à 10, ce produit ayant une activité enzymatique dans la gammes des pH relativement neutres de la cavité buc cale, et le maintien de ce contact pendant une période de temps suffisante pour permettre au produit d'exercer son activité enzymatique dans la cavité buccale.