FR 2035791 A1 19701224 FR 6909618 A 19690331 La présente invention est relative à un nouveau médi@amen antibactérien utilisable nctamment pour le traitement ces infec- tion bactériennes de l'intestin et de l'appareil urinaire. Ce médicament est caractérisé on e qu'il contient, à tir de principe actif. une association d'une néomycine, ou @ 'un sel de celle-ci, et d'acide nalfdixique. D'autres caractéristiques -e l'invention apparaîtront au cours de la description qui va suivre. Par "néomycine", on entend ici désigner un membre quelconque de la famille des néomycines à activité abtibiotique. On peut l'utiliser sous forme de la base ou sous la forme d'un sel théra peutiquement administrable comme le sulfate, le e chlorhydrate, etc. Parmi ces sels, on préfère utiliser le sulfate dans le médicament de l'invention. La néomycine est un produit bien connu isolé de Streptomyces fradie et décrit pour la première fois par Waksman en 1949, qui est considéré comme l'antibiotique privilégié pour la thérapie des infections bactériennes à localisation intestinale. Elle produit son action maximale en milieu alcalin et--est principalement active contre les micro-organismes gram-négatifs. E le ait également contre certains organismes gram-positifs. Elle est administrée habituellement par voie orale en raison des phénomènes toxiques observés lors de l'administration par voie parentérale, au niveau des reins en particulier. Elle agit donc ainsi par un mécanisme d'action topique évitant les phénomènes d'intolérance hépatique, rénale, nerveuse, allergqe, etc. fréquents avec l'emploi d'autres antibiotiques r activité systémique. Le second constituant du principe actif est l'acide nalidixi- que, ou acide 1-éthyl-7-méthyl-4-oxo-1,8-naphtyridine-3-carboxyli que. I1 s'agit là d'un produit de synthèse ,récent dont la prépara- tion et les propriétés thérapeutiques sont notamment décrites cans le brevet français N I 427 608 et le B.S.M. N 1822 M. Il poss de un activité bactériostatique et bactéricide notable sur une @s- te gamme de germes gram-négatifs et @ram-positifs. Administré par voie orale, il est totalement absorbé dans la première partie de l'intestin grêle et éliminé essentiellement par les reins et 1? nile. La tolérance est parfaite et sa toxieité très faible. Dans l'association de l'invention, le rapport en poids entre la né@m@eine ou son sel et @@aeide nalidixiq@e neut @arier dans de larges limites @uivant le résultat thérapeutique cherché. Il est avantagessement compris entre l,l e 1/5 respectivement, un rapport er poids de néomycine (calculée en sulfate à l'acide nalidixique de 1/2 étant, préféré. L'association de l'invention bénéficie des propriétés propres chacun de ses constituants. Les essais pharmacologiques effec @ués ont cependant montré qu'elle ne présentait pas que la simple addition des propriétés de la néomycine et de l'acide nalidixique, mais bien des propriétés antibactériennes supérieures à cette addition, c'est-à-dire qu on est en présence d'une véritable synergie antibactérienne. Le médicament de l'invention eonstitue de ce fait une préparation d' emploi sur pour le traitement des infections gastro-intestinales, surtout ŭ'elles sont compliquées d'un état septique généralisé, et pour combattre les complications urinaires. On donnera ci-après, à titre-a' exemples, des résultats d'essais toxicologiques, pharmacologiques et cliniques montrant la faible toxicité, l'action synergique et l'efficacité clinique du médicament de l'invention. Dans Dols ces essais, on a utilisé une association de sulfate de néomycine acide nalidixique dans le rapport de 1/2 en poids. I. - Essais toxicologiques l) Toxicité aiguë La DL50 de l'association chez le rat est de 0,26 g/kg par voie intraveineuse et de 4,2 g/kg par voie orale. 2) Toxicité subaiguë - Les doses expérimentées, qui étaient égales ou double de celles utilisées en thérapie chez l'homme. n'ont provoqué chez le rat aucun signe d'intolérance après 4 semaines d'administration. 3) Toxicité chronique Des essais portant sur 28 semaines n'ont mis en évidence chez lé rat aucune altération des constantes biologiques. Aucun effet tératogène @'a été observé. II. - Essais pharmacol@@iques - L'activité antihactérienne et la synergie de l'association ont été mises en évidence par des essais comparatifs in vitro effectués sur 10 souches de Staphylococcus aureus, une souche de Streptococcus faecalis, I) souches de Shigella, 16 souches de Escherichia coli, 6 souches de Salmonella typhi, 5 souches de Salmonella paratrphi A 4 souches de @@@@onella para@@@hi B. 2 souches de Proteus @ulgaris 3 @@@ches de Proteus @irabilis, 2 souches de Proteus rettgeri et une souche de Pseudomonas aeruginosa Le milieu de culture était le bouillon nutritif "Nutrient Broth B.B.L. (Baltimore Biological Laboratory)". @'activité anti-bactérienne "in-vitro" de la néomgeine, de l'acide nalidixique et de leur association dans le rapport 1/2 a été déterminée par l'étude de la concentration inhibante (MIC). On a dissous directement la néomycine et l'acide nalidixique dans le milieu de culture, avec préparation de diverses dilutions de ces deux composés séparément et de leur association. On a ensuite procédé à la répartition de volumes de 5 ml dans des éprouvettes L'ensemencement des bactéries a été pratiqué avec 0,05 ml de bouillon de culture de 24 heures. La lecture des résultats a été exécutée après une incubation à 37 C pendant I8 heures pour toutes les éprouvettes d'essai. On a déterminé ainsi la concentration minimale de la néomycine, de l'acide nalidixique et de leur association (exprimée en capable d'inhiber le développement des bactéries inoculées, c'està-dire la MIC. RESULTATS Les résultats obtens, et qui ont trait à la MIC de la néomy- cine, de l'acide nalidiique et de leur association dans le rapport 1:2, sur 63 souches de bactéries essayées ont été étudiés. L'interaction entre l'antibiotique et l'agent chimiothérapeutique a etc mise en évidence en comparant la valeur de l'action antibactérienne de l'association obtenue expérimentalement, par détermination de la concentration inhibante minimale (MIC déterminée. avec la valeur atteinte (MIC atteinte) calculée en se basant sur In simple effet additif des composés qui constituent l'association. La MIC "atteinte" a été calculée par application de la or- mule nise au point nar CIMMINO et ses Collaborateurs (Cimmino Filadoro F et Reuzini G : Antibiotica 2, I9, I964) Cn x Can C = 0,67 Cn + 0,33 Can dans laquelle Cn = MIC de la néomyeine Can = MIC de l'acide nalidixique C = MIC "@tteinte" de l'association n@@n, @@ide nalidixique dans le rapport l@ on peut donc apprécier l'interaution de in récm@@@ine a@e @@@@ @@e @alidixique en @@@@ lant le rapport en@@e @@@ a@e e@@a MIC "atteinte" et @elle de la MIC "@éterminée" e@ erimen @@@@@@en e@ @@nsidérant q@e @e@ @@@@ena@tion est s@ne@@ @ @@@@@@@@g @@@@@@@@ @ort est @@@@r@e @@@@@@@nité. Il résulte mettement de l'examen des @és ais obten Les m@@ennes des rapports entre la valeur @e @ MIC "atteinte" et celle de la MIC "déterminée" pour chaque espèce bactérienne examinée sont supérieures à l'unité. @n particulier, on trouve pour les 10 souches de Staph@locce- @@us aureus: 2,061; pour la souche de Streptococets faecalis 1,47; pour les I3 souches de Shigella: 1,306; pour les 16 souches de Escherichia coli: 1,217; pour les 6 souches de Salmonella typhi: 1,272; pour les 5 souches de Salmonella paratyphi A: 1,262; pour les 4 souches de Salmonella paratyphi B: 1,047; pour les 2 souches de Proteus vulgaris: 2,545; pour les 3 souches de Proteus mirabilis: 1,393; pour les 2 souches de Proteus rettgeri: 1,310 et pour la souche de Pseudomonas aeruginosa: 1,49. Ceci montre que l'association néomycine-acide nalidixique essayée (rapport 1/2) non seulement ne donne lieu à aucun effet antagoniste , mais de plus nrésente une activité bactérienne supérieure à celle calculée par addition simple de celles de ses constituants. Ce résultat expérimental est d'un grand intérêt du fait que récemment, lattention a été attirée sur l'importante caractéristique de l'acide nalidixique consistant en ce que ce corps s'élimine sélectivement, non seulement par voie rénale mais également par voie biliaire, de sorte qu'il s'établit une circulation entéro-hépatique du médicament. De cette façon, les deux substances de l'association, outre le fait qu'elles agissent séparément sur les divers systèmes de l'organisme, peuvent interagir également au ni--eau intestinal et le fait d'avoir constaté la présence de phénomènes synergétiques entre elles sur de nombreuses espèces bactériennes a une grande importance du point de vue thérapeutique. Pour l'administration en thérapeutique, le médicament de l'invention petit être présenté sous forme de doses unitaires pour l'ad~ ministration orale, telles que des capsules ou gélules,ou encore sous forme de sirop (suspension) à prendre par la bouche. nans ces formes pharmaceutiques, le principe actif est associé aux véhicules ou excipients appropriés bien connus des spécialis- tes. A titre d'exemples, on donnera ci-dessous deux formes pharmaceutiques du médicament qui ont été utilisées dans les essais cliniques résumés ci-après: Capsules Sulfate de néomycine (correspondant à 0,0684 g o I00 m? de néomycine base) Acide nalidixique . . . . * . . . . . . . . . . 200 mg Exeipient @ Lévilite = Silice colloïdale) q.s.p. 350 mg Les doses moyennes administrables sont de 1 à 2 capsules toutes les six heures. Sirop (suspension) Sulfate de néomycine . . . . . . . . . . . . . . 1 g Acide nalidixique . . . . . . . . . . . . . . . 2 g Kaolin pur colloïdal . . . . . . . . . . . . . . 20 g Gomme adragante . . . . . . . , . . . . . . . . 1,2 g Acide citrique . . . . . . . . . . . . . . . . . 0,1 g Parahydroxybenzoate de méthyle . . . . . . . . . 0,2 g Eau aromatisée . . . . . . . . . . . . . .q.s.p. 100 ml Cette préparation est surtout destinée aux enfants et les doses moyennes sont de 1 cuiller à café (5 ml) toutes les 4 à 6 heures pour les enfants de moins de deux ans et le double (10 ml) pour les enfants de plus de deux ans. III. - Essais cliniques Ces essais ont porté sur 154 cas divisés en A) cas d'entérocolite aiguë fébrile (Syndrome A) B) cas d' entéropathie accompagnée de sensibilité ou infection des voies urinaires (Syndrome B) Les résultats ont été classés en: "optimal", "bon" et "suf @ sart". On a obtenu, sur l'ensemble des cas A et B, 43,1 % de resultats optimaux, 7,3 % de résultats bons et 9,6 % de résultats suffisants. Vis-à-vis du syndrome A, les pourcentages ont été les suivants : 50 % de résultats optimaux, 43,1 de résultats bons et 2,9 % de résultats suffisants. On a pu effectuer d'une maniÉre extrêmement contrôlée des essais e comparaison avec '-e malades souffrant du même syndrome bien défini et soignés à la néomycine seule. On a obtenu 100 v de résultats optimaux avec le médicament de l'invention et seulement 40 % de résultats optimaux, 55 % ce résultats bons et 26,7 % de résultats suffisants avec la néomycine. En ce qui concerne le syndrome B. on a obtenu, avec l'association de l'invention, )2,4 % de résultats optimaux, 54 % de ré sultats bons et I3,6 . de résultats suffisants Dans des essais comparatifs avec des malades souffrant d'un syndrome de type B traités à l'Ampicilline, on a obtenu les résultats suivants: Avec le médicament de l'invention 70 % de résultats optimaux 10 % de résultats bons 20 % de résultats suffisants Avec l'Ampicilline: 30 % d- résultats optimaux 50 % f,e résultats bons 20 % de résultats suffisa-ats. En résumé, on a obtenu: a) 90,4 " de résultats classés timaux et bons par rapport à l'ensemble des cas traités par l'ass@ciation de l'invention; b) 93,1 % de résultats classés c@timaux et bons sur l'ensemble des cas du syndrome A; c) 86,4 % de résultats classés optimaux et bons sur ltensemble des cas du syndrome B. Il ressort de ce qui précède que l'association de néomycine et d'acide nalidixique de l'invention, pour laquelle a été démontrée une synergie antibactérienne, est efficace en thérapeutique dans tous les cas où, en plus d'une infection intestinale, on observe une atteinte systémique ou urinaire. Elle sera donc utilisée avartageusement Mans la plupart des infections intestinales et dans les intoxications alimentaires. REVENDICATIONS l - Un médicament antibactérien utilisable notamment pour le traitement des infections bactériennes de l'intestin et de l'appareil urinaire, à base d'une association d'un antibiotique et d'acide nalidixique, caractérisé en ce que, dans le principe actif, l'antibiotique est une néomycine ou un sel de celle-ci. 2 - Un médicament suivant la revendication 1, caractérisé en ce que le sel de néomycine est le sulfate de néomycine. 3 - Un médicament suivant la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que le rapport en poids de la néomycine à l'acide nalidixique dans le principe actif est compris entre l/l et 1/5. 4 - Un médicament suivant la revendication 3, caractérisé en ce que le rapport en poids du sulfate de néomycine à l'acide nalidixique est de 1/2. 5 - Un médicament suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le principe actif est associé à un véhicule pharmaceutiquement acceptable. 6 - Un médicament suivant la revendication 5, caractérisé en ce qu'il est présenté sous une forme administrable par voie orale. 7 - Un médicament suivant la revendication 6, caractérisé en ce qu il est présenté sous forme de capsules ou de suspension buvable.