FR 2037002 A1 19701231 FR 6913814 A 19690430 La présente invention a pour objet des sels de l'acide pamoîque et des biguanides N-substitués, de formule générale : dans laquelle représente un groupe choisi parmi les suivants : a savoir le pamoate de phenformine, le pamoate de metformine et le panoate de buformine. Ces sels présentent les propriétés pharmacologiques inhérentes aux biguanides N-substitués & savoir la phenformine, la metformine et la buformine, en particulier les propriétés antidiabétiques, tout en ayant un effet retard particulièrement remarquabLe que ne possbdent pas ces biguanides. Ces sels sont donc intéressants comme médicaments hypoglycémiants de longue durée Leur action retard permet de diminuer la posologie journalière et le nombre de prises Journa lières et de ce fait d'améliorer la tolérance digestive desdits produits. On peut préparer ces sels en faisant réagir un pamoate alcalin (disodique ou dipotassique) sur un halogénhydrate (en particulier le chlorhydrate) d'un biguanide N-substitu choisi dans le groupe comprenant la phenformine, la metformine et la buformine, en miliéu aqueux, de préférence à la température ambiante, à raison de 2 équivalents molaires d'halogénhydrate par équivalent molaire de pamoate, et en laissant cristalliser le précipité formé. Selon une variante, on opère en milieu hydroalcoolique et on concentre ensuite jusqu'à précipitation du pamoate désiré. On illustre l'invention par les exemples non limitatifs suivants. EXEMPLE 1 PREPARATION DU PAMOATE DE DIPHENFORMINE (PAMOATE DE DI-N-B PHENYLETHYLBIGUANIDE). A une solution aqueuse de 5 grammes (1 équivalent) do paloate disodique , on ajoute goutte & goutte et sous agitation une solution aqueuse de 5,6 grammes (2 équivalents) de chlorhydrate de phenforaine. Le précipité formé en début de réaction se sépare sous forme d'huile qui cristallise lentement & la température ambiante. Le pamoate de diphenformine obtenu avec un rendement quantitatif et une bonne pureté se présente en fins cristaux jaune pales; F n + 1520C (istancé); il est très peu soluble dans l'eau, l'éther et'le chloroforme, soluble dans l'éthanol et le méthanol. Analyse pour C43H46N10O6 (PM = 798,87) Calculé % : C = 64,64 H - 5,80 N n 17,53 Trouvé % : G n 64,33 H = 5,54 N = 17,11 Spectre infrarouge (voir graphiquesdes figures 1 et la ci-joints) = bandes à (cm-1) 3600, 3380, 3200, 1640, 1560, 1540, 1500, 905, 815,740. Spectre ultraviolet (voir graphique de la figure 2 ci-joint). EXEMPLE 2 On procède comme & l'exemple 1, sauf qugon part d'une solution hydroalcoolique de phenformine à laquelle on ajoute l'acide pamoîque en solution dans lwéthanol. On concentre ensuite jusqu'à précipitation du pamoate de phenformine. EXEMPLE 3 PREPARATION DU PAMOATE DE METFORMINE (PAMOATE DE DI-N,N DIMETHYLBIGUANIDE). A une solution aqueuse de 11,9 grammes de pamoate disodique (1 équivalent) on ajoute goutte à goutte et sous agita tion une solution aqueuse de 10 grammes de chlorhydrate de metformine (2 équivalent). Aprés 24 heures à température ambiante, la solution laisse déposer des cristaux jaune-vert , en forme d'oursins. On recristallise dans l'eau bouillante Le pamoate de metformine obtenu a un point de fusion de F q 258 C (instantané); il est soluble dans l'eau bouillante, l'acétone, et l'alcool, insoluble dans le chloroforme et l'éther. Analyse pour C31H38O6N10 (P.M. 646,183 Calculé % : C - 57,57 H = 5,92 N m 21,66 Trouvé % : C 56,89 H = 5,95 N = 21,28 Spectre infrarouge (voir graphiques des figures 3 rt 3a ci-joints). EXEMPLE 4 On procède comme à l'exemple 3, mais on part d'une solution hydroalcoolique de metformine à laquelle on ajoute l'acide pamolque en solution dans ltéthanol. On concentre jusqu'à précipitation du pamoate de metformine. On obtient de la même façon le pamoate de buformine. Les activités pharmacologiques des produits selon l'invention sont illustrées par les essais qui suivent. 1- TOXICITE AIGUE PAMOATE DE PHENFORMINE La toxicité asiguré a été effectuée chez la souris d'un poids moyen de 29 g T 2. Les animaux ont reçu, per os, le pamoate de phenformine en suspension dans l'eau distillée à raison de 0,5 ml/20 g de poids corporel. Les résultats obtenus 48 heures après ingestion sont donnés dans le tableau I suivant : T A B L E A U I Doses Nombre d'ani- Nombre de a b ab mg/kg maux par dose morts par dose 500 10 0 200 0,5 100 700 10 1 300 2,5 750 I 000 10 4 500 5 2 500 I 500 10 6 500 8 4000 2 000 10 10 # ab - 7 350 DL 50 = DL 100- #ab 10 DL 50 - 2000 - 735 " 1265 mg/kg per os Les animaux survivants présentent un aspect normal. La DL 50 de la phenformine est de 450 mg/kg per os, par comparaison. 2 - RECHERCHE DE L'ACTION HYPOGLYCEMIANTE DU PAMOATE DE PHENFORMINE PRINCIPE DE L'EXPERIENCE L'administration per os d'une solution de glucose à 50 pour cent détermine chez le rat à jeun depuis environ 48 heures, une augmentation de l'alloxanémie. Selon "Loubatières et Bouyard' le duodéno-jéjunum est particulièrement impliqué dans la formation de cet alloxane libéré à la faveur de l'absorption glucose. Le phénomène se traduit par une vague d'hyperalloxa- némie considérable, double d'une hyperglycémie. PROTOCOLE DE L'EXPERIENCE 27 rats mêles d'un poids moyen de 250 g à jeun depuis 48 heures reçoivent per os les uns (animaux témoins) un dispersif en l'occurrence la carboxyméthylcellulose (CMC), les autres (animaux traités), le pamoate de phenformine en suspension dans de la CMC & raison de 250 mg/kg. 40 minutes avant les prélèvements de sang tous les rats reçoivent per os la solution de glucose à 50 pour cent à raison de 2 g/kg. Les prélèvements sont effectués au plexus ophtalmi que .4, 8, 12, 16 et 24 heures après l'administration du produit, à chaque heure il y a 4 ou 5 rats témoins et 4 ou 5 rats traités. te sang est recueilli sur fluorure de sodium puis analysé RESULTATS La glycémie est exprimée dans le tableau II suivant en grammes par litre; les chiffres représentent la moyenne de 4 ou 5 rats par lot suivant le cas. T A B L E A U II - TAUX DE GLYCEMIE Temps en heures Témoins Animaux traités après l'adminis tration 4 1,534 + 0,037 1,474 + 0,023 8 1,437 t 0,089 1,205 t 0,035 12 1,572 t 0,089 1,300 t 0,046 16 1,420 + 0,021 1,220 t 0s060 24 1,420 # 0,021 1,306 # 0,025 Les écarts types sont calculés par la formule On a également groupé dans un calcul A part tous les témoins des différentes heures et calculé la moyenne générale et l'écart type, ce qui donne: 1,520 # 0,041. Cette moyenne générale des témoins est représentée sur le graphique de la figure 4 ai-joint par la ligne AB dont l'écart type se trouve aux extrémités. Le graphique de la figure 4a donne les valeurs pour 16. h et 24 h. On observe ainsi une action remarquable du pamoate de phenformine sur l'hyperglycémie expérimentale provoquée par la méthode ci-dessus, cette action ayant une durée minimum significative d'au moins 24 heures. 3 - RECHERCHE DZ L'ACTION HIPOGLYCEMIANTB DU PAMOATE DE MSTFORMINS PRINCIPE DE L'EXPERIENCE Le même que celui indiqué ci-dessus pour le pamoate de phenformine. PROTOCOLE DEL'EXPERIENCE 22 rats mâles d'un Poids moyen de 250 g a jeun depuis 48 haures reçoivent per os les uns (animaux témoins), un dispersif en l'accurrence la carboxyméthylcellulose (CMC), les autres (animaux traités), le pamoate de metformine en suspension dans la CMC à raison de 500 mg/kg (en tenant compte de la poso-logie journalière utilisée chez l'homme de la metformine, plus élevée que celle des deux autres biguanides). 40 minutes avant les prélèvements de sang tous les rats reçoivent per os la solution de glucose à 50 pour cent à raison de 2 g/kg. Les prélèvements sont effectués au plexus ophtalmique aux heures 4 - 8 - 12 - 16 et 24 après l'administration du produit; à chaque heure il y a 4 rats témoins et 4 ou 5 rats traités. Le sang est recueilli sur fluorure de sodium puis analysé. RESULTATS la glycémie est exprimée dans le tableau III suivant en grammes par litre, les chiffres représentent la moyenne de 4 ou 5 rats par lot suivant le cas. T A B L s A U III TAUX DE GLYCEMIE Temps en heures Témoins Animaux traités après l'administration 4 1,520 1,460 #0,040 #0,025 8 1,480 1,205 #0,089 #0,030 12 1,510 1,200 #0,070 #0,027 16 + 1,464 0,060 #0,040 24 1,510 1,380 #0,050 #0,060 Les écarts typessont calculés par la formule : on a également groupé dans un calcul à part tous les témoins des différentes heures et calculé la moyenne générale et l'écart type. Cette moyenne générale des témoins est représentée sur le graphique de la figure 5 ci Joint par la ligne AB dont l'écart type se trouve aux extrémités. On observe donc une action remarquable du pamoate de metformine sur l'hyperglycémie expérimentale provoquée par la méthode ci-dessus citée, cette action ayant une durée minimum significative d'au moins 24 heures. 4 - RECHERCHE DE L'ACTION HYPOGLYCEMIANTE DU CHLORHYDRATE DE METFORMINE A titre de comparaison, on a également recherché l'action hypoglycémiante du chlorhydrate de metformine. PROTOCOLE EXPERIMENTAL 20 rats mâles d'un poids moyen de 250 g & jeun depuis 48 heures reçoivent per os les uns (témoins) de l'eau distillée, les autres (traités) le chlorhydrate de metformine en solution dans l'eau distillée à raison de 250 mg/kg). 40 minutes avant le prélèvement de sang tous les rats regoivent per os la solution de glucose à 50% & raison de 2 g/kg. Les prélèvements sont effectués au plexus ophtalmique aux heures 4, 8, 12 et 16 après l'administration du produit, 8 chaque heure il y a 4 rats traités, un seul lot de 4 témoins est utilisé dans cette expérience0 RESULTATS Glycémie en g/litre (moyenne de 4 rats) Témoins...................................1,410#0,029 Chlorhydrate de metformine 4h 1,215 - n n ah 1,148 f 0,085 n n 12 h 1,260 + 0,022 n n 16 h 1,420 + 0,030 (voir graphique de la figure 6) Le chlorhydrate de metformine agit plus rapidement que le pamoate: en effet on observe déjà une action à 4 heures, l'action maximum étant à B heures; toutefois Q 16 heures, toute action hypoglycémiante est déjà épuisée, la glycémie est revenue & son taux initiale Le pamoate a une durée d'action beaucoup plus longue et son action est plus régulière. 5 - RECHERCHE DE L'ACTION HYPOGLYCEMIANTE DU CHLORHYDRATE DE PHENFORMINE PROTOCOLE EXPERIMENTAL 12 rats mâles dtun poids moyen de 250 g à jeun depuis 48 heures reçoivent per os les uns (témoins) de l'eau distillée les autres (traités) le chlorhydrate de phenformine en solution dans l'eau distillée à raison de 125 mg/kg. 40 minutes avant le prélèvement de sang tous les rats reçoivent per os la solution de glucose à 50 % à raison de 2 g/kg. Les prélèvements sont effectués au plexus ophtalmique aux heures 4, 8 et 12 après l'administration du produit, à chaque heure il y a 4 rats traités, un seul lot de 4 tdmoins est utilisé dans cette expérience. RESULTATS Glycémie en-g/litre (moyenne de 4 rats) Témoins 1,420 t 0 021 Chlorhydrate de phenformine 4h 1,205 # 0,082 " " 8h 1,147 # 0,080 " " 12h 1,265 t 0,029 " " 16h 1,410 # 0,031 (voir graphique de la figure 7) Le chlorhydrate de phenformine agit plus rapidement que le pamoate; en effet, on observe déjà une action à 4 heures, l'action maximum étant à 8 heures, mais elle s'épuise complètement à la 16e heure. Le pamoate a une durée d'action beaucoup plus longue et son action est plus régulière. R E V E N D I C A T I O N S 1. Sel de l'acide pamoïque et dtun biguanide N-substitué, de formule générale dans laquelle représente un groupe choisi parmi les suivants : Pamoate de phenformine. 3. Pamoate de metformine. 4. Pamoate de buSormine. 50 Procédé' de préparation d'un sel de l'acide pamoïque et d'un biguanide N-substitué, tel que défini en 1, caractérisé en ce que l'on fait réagir un pamoate alcalin sur un halogénhydrate d'un biguanide N-substitué choisi dans le groupe comprenant la phenformine, la metformine et la buformine, en milieu aqueux, de préférence & la température ambiante, à raison de 2 équivalents molaires d'halogénhydrate par équivalent molaire de pamoate, et on laisse cristalliser le précipité formé. 6. Procédé selon 5, caractérisé en ce que lton opère en milieu hydroalcoolique, et on concentre ensuite jusqu'à précipitation du pamoate désiré. 7. A titre de médicament nouveau et plus particulièrement en tant que médicament hypoglycémiant à effet retard, les sels de l'acide pamoique et de biguanides N-substitués, tels que définis en 1.