FR 2003239 A1 19691107 FR 6905786 A 19690304 La présente invention a pour objet une nouvelle pénicilline et plus particulièrement de nouvelles formes anhydres d'isoxazolyl- pénicilline, et leur procédé de fabrication0 Le terme "isoxazolyl pénicilline1 employé ici doit entre in- terprété comme désignant une pénicilline de formule générale : et ses sels non toxiques, formule dans laquelle R1 est un groupe phényle qui peut être substitué par un ou deux atomes d'halogène, et R2 est un groupe alcoyle intérieur. Les sels sont des sels. non toxiques comprenant les sels métalliques non toxiques comme les sels de sodium, de potassium, de calcium et d'aluminium, d'ammonium et d'ammonium substitué, par exemple les sels d'amines non toxiques comme les trialcoylamines comprenant la triéthylamine, la procaïne, la dibenzylamine, la N-benzyl-bêta-phénéthylamine, la 1-éphénamine, la N,N'-dibenzyléthylènediamine, la déhydroabiétylamine, la N,N'-bis-déhydroabiétyléthylènediamine et d'autres amines que l'on a employées pour former des sels avec la bezylpénicilline. Les isoxazolyl pénicillines sont obtenues habituellement sous ronge hydratée et particulièrement sous forme monohydratée. La présence d'eau de cristallisation dans les isoxazolyl pénicil Unes normalement obtenues, s'est révélée inopportune, non seule- ment parcs que ces pénicillines hydratées subissent la dégradatien et nne perte de stabilité et d'activité au bout d'un certain temps et voient leur solubilité dans l'eau et les solvants organiques diminuer, mais parce que la présence d'eau de cristallisation n'est ni nécessaire, ni désirable pour l'activité antibiotique, ce qui en fait constitue même un inconvénient. Tandis qu'il existe une quantité limitée de renseignements concernant les formes hydratée et déshydratée d'autres pénicilline nes comme l'ampicilline trihydratée et l'ampicilline anhydre, les connaissances actuelles à ce sujet n'ont pas rendu possible l'ob tention de formes anhydres d'isoxazolyl pénicillines. Quand le procédé employé par exemple pour convertir l'ampicilline trihydratée en ampicilline anhydre est appliqué aux isoxazolyl-pénicilli nos, on constate que ce même procédé ne peut être suivi et ne donne pas les résultats escomptés. Par conséquent, il était très surprenant et inattendu que les isoxazolyl-pénicillines pussent être converties de la forme monohydratée à la forme anhydre, de manière relativement simple et remarquablement efficace, pourvu que certaines conditions critiques soient observées, et ceci est particulièrement vrai pour les sels de sodium, de potassium et les autres sels cationiques de ces isoxazolyl-pénicillines, ces sels constituant les formes les plus employées en thérapeutique.Ainsi, les procédés de séchage connus et courants comme l'emploi d'un agent déahydratant, tel que l'anhydride phosphorique se révèle stérile car le produit obtenu n'est pas anhydre, ou bien, si les conditions de séchage sont si drastiques qu'elles abaissent la teneur en huidi- té jusqu'à ce que l'on puisse considérer le produit comme anhydre, il se produit ceci que la pénicilline subit une grave dégradation et une perte de pouvoir sérieuse. Il est donc nécessaire de trouver d'autres moyens pour obtenir les isoxazolyl-pénicillines anhydres désirées. Les recherches qui ont conduit à la présente invention ont permis de constater que les isoxazolyl-pénicillines peuvent Stre converties de la forme monohydratée à la forme anhydre, sans perte notable de pouvoir, tout en maintenant une stabilité au moins aus- si bonne, sinon améliorée, e t en évitant en même temps la dégradation de la molécule de pénicilline. L'invention est applicable particulièrement à des pénicilline nee nouvelles et intéressantes, connues sous le nom de dicloxa- cilline qui est la 3-(2',6'-dichlorophényl)-5-méthyl-4-isoxazolyl- pénicilline, de cloxacilline qui est la 5-(2'-chlorophényl)-5-m6- thyl-4-isoxazolyl-pénicilline et de flucloxacilline qui est la 3-(2',6'-fluorochlorophényl)-5-méthyl-4-isoxazolyl-pénicilline et leurs sels non toxiques pharmaceutiquement acceptables comme les sels de sodium et de potassium. La préparation des formes monohydratées des isoxazolyl-pé- nicillines est bien connue, et elles se sont révélées des agent thérapeutiques et antibactériens efficaces dans le traitement des maladies infectieuses chez l'homme, les mammifères et la volaille. Les formes monohydratées des isoxazolyl-pénicillines ci-dessus contiennent de 3 à 5% d'eau comme on peut le déterminer par la méthode de Karl Fischer. Cette quantité d'eau confirme que les composés sont sous forme monohydratée et qu'ils ne sont pas sous forme anhydre, puisque pour que le composé soit "anhydre", sa teneur en eau ne doit pas excéder 2% et qu'elle doit être de préférence considérablement inférieure à 2% et de l'ordre de 0,5-1,5% environ, quantité d'eau acceptable n'entraînant pas d'inconvénients graves. Selon la présente invention, on obtient des isoxazolyl-péni- cillines anhydres et leurs sels non toxiques. La nouvelle forme anhydre des isoxazolyl-pénicillines peut être obtenue de deux manières différentes. Un des procédés consiste à sécher le monohydrate par la chaleur sous vide, la température devant entre de l'ordre de 60-120 C, le vide devant entre de moins de 2 as de mercure. Ces conditions de séchage sont très importantes. En effets si la température est notablement inférieure à 60 C, l'hu- midité de la pénicilline séchée ne peut,pour des raisons pratiques, descendre au-deesous de 2% sans perte notable de l'activité, tandis que si la température excède 120 C, il se produit une dégradation ou une détérioration de la molécule de pénicilline. Si le vide est de plus de 2 an de mercure, le temps de séchage est prolongé exsgérénent avec pour effet concomitant une diminution de l'ac- tivité. Le vide peut, cependant, être aussi poussé que possible avec un équipement adéquant, si on le maintient au-dessous de 2 na de mercure.En appliquant ce procédé, les formes monohydratées des isoxazolyl-pénicillines peuvent être converties en forme anhydres sans perte appréciable de l'activité ou de la stabilité, sans autres effets nuisibles en un temps relativement court, de l'ordre de 3 à 5 heures conne l'indique plus clairement le tableau B. Pour démontrer la stabilité à l'état monohydraté solide, on sonnet des échantillons au séchage en faisant varier les conditions commR le montre le tableau A. On analyse la fonction bêta-lactame par iodométrie pour déterminer l'activité et on porte sur le tableau la perte en pourcentage. (Voir tableau page suivante). Le second procédé pour obtenir des isoxazolyl-pénicillines anhydres consiste à ajouter la forme monohydratée de l'isoxazolyl- pénicilline désirée à un mélange de solvants organiques tels que les méthanol, éthanol, iso isopropanol, n-propanol, butanol, sec-buta nol, méthyl-isobutyl-cétoce, acétate de sec-butyle, acétate de TABLEAU A Composé Temps Conditions Perte d'acti- (heures) vité, % Cloxacilline anhydre 24 90 C 0 Cloxacilline monohydratée 24 90 C 20,9 Flucloxacilline anhydre 24 900C o Flucloxacilline monohydratée | 24 | 90 C | 18,6 Flucloxacilline anhydre 80 800C O Flucloxacilline monohydratée | 80 | 80 C | 21,8 Dicloxacilline anhydre 80 80 C 19,5 Dichloxacilline monohydratée | 80 | 80 C | 25,1 butyle, acétate de n-propyle, acétate d'isopropyle, chlorure de méthylène et (ou) chloroforme à une température élevée, puis à filtrer et à sécher.On chauffe le mélange de solvant à une température comprise entre 600C et 1200C et à un pH de 6,0 à 9,0 et si l'on respecte ces conditions, on obtient aisément les formes anhydres avec un bon rendement et une pureté satisfaisante et avec une teneur en eau inférieure à 2%. Ces procédés sont illustrés par les exemples suivants parmi lesquels l'exemple IX illustre un essai infructueux à titre comparatif. Les détails de mise en oeuvre peuvent d'ailleurs être modiiiés, dans le domaine des équivalences techniques, sans s'écar- ter de l'invention0 EXEMPLE N 1 On chauffe à 950C, 500 ml de métbyl-isobutyl-cétone et 30 ml de n-propanol. A ce mélange, on ajoute en agitant, 40 g de dicloxacillinate de sodium monohydraté ayant une pureté dé 87,2% et un degré d'humidité de 3,6%. On poursuit l'agitation pendant 5 minutes, puis on filtre le mélange à chaud. On rince le gâteau de filtration avec de la méthyl-isobutyl-cétone chaude et on sèche le produit à 600C pendant 24 heures dans un four sous vide à une pression inférieur à 2 mm de mercure.On obtient 35 g de dicloxa- cilline de sodium anhydre ayant une pureté de 88,5% et une teneur en eau de 0,47%. EXEMPLE N 2 On chauffe à 67 C, 200 ml d'isopropanol et on y ajoute 13 ml de méthanol, A ce mélange, on ajoute 20 grammes de dicloxacilli- nate de sodium monohydraté ayant une pureté de 90,4% et une teneur en eau de 3,6%. On agite pendant 10 minutes sans autre précaution ou restriction que l'évaporation du méthanol, On filtre le produit résultant à chaud et on sèche dans un four à air pulsé pendant 16 heures à 600C. On obtient 17 grammes de dicloxacilli- nate de sodium anhydre ayant une pureté de 88% et une teneur en eau de 0,9%. EXEMPLE N 3 L'effet de la température sur la formation d'une nouvelle forme de dicloxacilline (anhydre) est mis en évidence par le ta bleau B. Les données sont établies en employant un vide de moins de 1 mm de mercure. TABLEAU B Température Temps (heures) Humidité, % Initiale finale 85 C | 24 | 3,6 | 1,7 900C 17 3,6 1,5 102 C | 3 | 3,6 | 1,5 1170C 3 | 3,6 0,4 EXEMPLE N 4 On place dans un four sous vide à une pression inférieure à 2 ma de mercure, 25 grammes de cloxacillinate de sodium monohy draté. On a établi au préalable la température à 120 C. Après 3,5 heures, on isole le produit. La teneur en eau est réduite de 4,3% à 1,65% sans diminution de l'activité. EXEMPLE N 5 On place dans un four à une pression inférieure à 2 mm de mercure, 25 grammes de flucloxacillinate de sodium monohydraté. La température est de 120 C. Après cinq heures, la teneur en eau est réduite de 4,2% à 1,2% sans diminution de l'activité. Le poids final atteint 23,8 grammes. EXEMPLE N 6 On place dans un mélange, préchauffé à 850 C, de 500 ml de méthyl-isobutyl-cétone et 30 ml de n-propanol, 25 grammes de di cloxacillinate de potassium monohydraté ayant une activité de 87% et ure teneur en eau de 3,3%. Après 10 minutes d'agitation rapide, on filtre le mélange chaud et on lave le résidu avec 100 ml de méthyl-isobutyl-cétone à 85 C. On sèche le produit à 600C pendant seize heures. On obtient 17,7 grammes de dicloxacillinate de potassium anhydre n'ayant subi aucune perte d'activité et d'une teneur en eau de 1,7%. EXEMPLE N 7 On fait dissoudre 75 grammes d'acide 6-amino-pénicillanique dans 400 ml d'eau et 345 ml de soude N. On ajoute cette solution à une solution de 101 grammes de chlorure de 3-(2',6'-dichlorophényl) 5-méthyl-4-isoxazole-carbonyle dans la méthyl-isobutyl-cétone. Après agitation, oll sépare la phase aqueuse et on empâte la méthyl-isobutyl-cétone avec du sulfate de magnésium anhydre pour réduire la teneur en eau à une valeur compri8e entre 1,2 et 1,7%, puis on ajoute une solution à 33% de 2-éthyl-hexanoate de sodium dans la méthyl-isobutyl-cétone à la méthyl-isobutyl-cétone séchée ci-dessus, jusqu'd ce qu'on atteigne un pH de 7,5. On laisse le produit cris talliser et on le filtre ensuite.On ajoute 206 grammes de ce teau de filtration humide à 1000 ml de méthyl-isobutyl-cétono fraî- che, chauffée à 95 C. On ajoute 40 ml de n-propanol et on agite le mélange pendant six minutes. On filtre ensuite à chaud, et on lave avec 150 ml de méthyl-isobutyl-cétone préchauffée à 85 C. On sèche ensuite à 600C pendant 24 heures dans un four à air pulsé. On obtient 113 grammes de forme anhydre de dicloxacillinate de sodium ayant une activité de 91% et une teneur en eau de 1,08%. EXEMPLE N 8 On effectue le même essai que dans l'exemple N 7, mais on remplaçant le 2-éthyl-hexpnoate de sodium, comme agent cristallisant, par du méthoxyde de sodium dissous dans du chlorure de méthylène et de l'isopropanol. La cristallisation prend 16 heures au lieu de 1 heure. L'analyse du produit final indique 84,5% et une teneur en eau de 1,8%. EXEMPLE N 9 On chauffe à 550a, 200 ml d'isopropanol anhydre et on y ajoute 20 ml de méthanol, puis 20 grammes de dicloxacillinate de sodium monohydraté. On agite le mélange à 55-58 C pendant 22 minutes avant de filtrer. On sèche dans un four sous us vide à 600C pendant 18 heures. La teneur en eau initiale était de 3,6%. La La teneur en eau finale est supérieure à 2%. Ceci tend à démontrer que les températures au-dessus de 600a facilitent la conversion à l'état anhydre, alors que les températures au-dessous de 60 C la rendent difficile, sinon impossible. Les modalités de mise en oeuvre peuvent être modifiés, sans s'écarter de l'invention, dans le domaine des équivalences. R E V E N D I C A T I O N S 1.- Isoxazolyl-pénicillines anhydres et leurs sels non toxiques. 2.- Cloxacilline anhydre et son sel de sodium ou de potassium. 3.- Dicloxacilline anhydre et son sel de sodium ou de potassium. 4.- Flucloxacilline anhydre et son sel de sodium ou de potassium. 5.- Procédé pour l'obtention d'isoxazolyl-pénicillines anhydres et de leurs sels non toxiques, ce procédé consistant à soumettre la forme hydratée de la pénicilline ou de son sel non toxique à une température comprise entre 600 et 120 C et à un vide de moins de 2 mm de mercure jusqu'à ce que la teneur en eau n'excède pas 2% ou à ajouter la forme hydratée à un mélange de solvants organiques anhydres ayant un pH de 6 à 9 et à chauffer à une température comprise entre 600 et 120 C, à filtrer et à éliminer le mélange de solvants.