Brevet FR3067814A1 (20181221)

REVENDICATIONS1. Procédé d'application, dans un support solide (1) en forme de tube, évasé ou non, présentant une ouverture circulaire ou ellipsoïdale à chaque extrémité, tel qu'un cône ou une pipette, d'au moins un partenaire P1 de liaison à un analyte à détecter ou à quantifier dans un échantillon de test, comprenant les étapes suivantes : (i) connecter le support solide à un dispositif d'aspiration-refoulement (2, 3), (ii) aspirer dans le support solide, par l'une de ses extrémités, une solution comprenant ledit au moins un partenaire P1 de liaison, dite solution de sensibilisation Si, contenue dans un récipient (4, 7, 8, 9), appelé récipient R1, (iii) poursuivre le contact entre la solution de sensibilisation Si et la surface interne du support solide pendant un temps compris entre ls et 11 min, (iv) refouler la solution de sensibilisation Si dans un récipient (4, 7, 8, 9), lequel est ou non ledit récipient R1, les étapes (ii) à (iv) formant un cycle qui est pouvant être répété au moins 1 fois, sur une durée totale d'au moins 1 min et d'au plus 2h30.\n<CLM>\1\tProcédé d'application selon la revendication 1, caractérisé en ce que le temps de contact de l'étape (iii) entre la solution de sensibilisation Si et la surface interne du support solide est compris entre 2s et lmin, de préférence entre 5s et 20 s, de préférence encore entre 6s et 15 s.\n<CLM>\1\tProcédé d'application selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que les étapes (ii) à (iv) sont répétées de 10 à 100 fois, de préférence de 30 à 80 fois.\n<CLM>\1\tProcédé d'application selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le total des cycles répétés est compris entre 10 et 20 min et est de préférence de 15 min.\n<CLM>\1\tProcédé d'application selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu'il comprend également les étapes suivantes, mises en oeuvre lorsque les cycles 42 d'aspiration (ii)/contact (iii)/refoulement (iv) sont terminés : (v) aspirer dans le support solide dans lequel sont appliqués lesdits au moins un partenaire de liaison Pl, une solution de lavage Li contenue dans un récipient appelé récipient RL1, 5 (vi) poursuivre le contact entre la solution de lavage Li et la surface interne du support solide pendant un temps compris entre 0 s et 11 min, (vii) refouler la solution de lavage Li dans un récipient, lequel est ou non ledit récipient RL1, les étapes (v) à (vii) formant un cycle pouvant être répété au moins 1 fois, sur une durée 10 totale d'au moins 1 min et d'au plus 2h30.\n<CLM>\1\tProcédé d'application selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que la solution de sensibilisation Si contient également au moins un partenaire P2 de liaison au partenaire Pl de liaison à l'analyte. 15\n<CLM>\1\tProcédé d'application, dans un support solide (1) en forme de tube, évasé ou non, présentant une ouverture circulaire ou ellipsoïdale à chaque extrémité, tel qu'un cône ou une pipette, d'au moins un partenaire P2 de liaison à un partenaire Pl de liaison à un analyte à détecter ou quantifier dans un échantillon de test, comprenant les étapes 20 suivantes : (a) connecter le support solide à un dispositif d'aspiration-refoulement (2, 3), (b) aspirer dans le support solide, par l'une de ses extrémités, une solution comprenant ledit au moins un partenaire P2 de liaison, dite solution de sensibilisation S2, contenue dans un récipient (4, 7, 8, 9), appelé récipient R2, 25 (c) poursuivre le contact entre la solution de sensibilisation S2 et la surface interne du support solide pendant un temps compris entre 0 s et 11 min, (d) refouler la solution de sensibilisation S2 dans un récipient (4, 7, 8, 9), lequel est ou non ledit récipient R2, les étapes (b) à (d) formant un cycle pouvant être répété au moins 1 fois, sur une durée 30 totale d'au moins 1 min et d'au plus 2h30. 43\n<CLM>\1\tProcédé d'application selon la revendication 7, caractérisé en ce qu'il comprend également les étapes suivantes, mises en oeuvre lorsque les cycles d'aspiration (b)/contact (c)/refoulement (d) sont terminés : (e) aspirer dans le support solide dans lequel sont appliqués lesdits au moins un 5 partenaire de liaison P2, une solution de lavage L2 contenue dans un récipient appelé récipient RL2, (f) poursuivre le contact entre la solution de lavage L2 et la surface interne du support solide pendant un temps compris entre 0 s et 11 min, (g) refouler la solution de lavage L2 dans un récipient, lequel est ou non ledit récipient 10 RL2, les étapes (e) à (g) formant un cycle pouvant être répété au moins 1 fois, sur une durée totale d'au moins 1 min et d'au plus 2h30.\n<CLM>\1\tProcédé d'application selon la revendication 7 ou 8, comprenant également 15 l'application, dans ledit support solide, après les cycles d'aspiration (b)/contact (c)/refoulement (d), dudit au moins un partenaire P1 de liaison.\n<CLM>\1\tProcédé d'application selon la revendication 9, caractérisé en ce que l'application dudit au moins un partenaire P1 de liaison est mise en oeuvre selon un procédé 20 d'application tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à\n<CLM>\1\t11. Procédé d'application selon l'une quelconque des revendications 5 à 10, caractérisé en ce que le récipient R1, le récipient RL1, et le cas échéant le récipient R2 et/ou le récipient RL2 sont contenus dans la même barrette d'analyse (6), laquelle est constituée 25 de plusieurs récipients (4, 7, 8, 9, 10, 11).\n<CLM>\1\tProcédé d'application selon la revendication 11, caractérisé en ce que la barrette d'analyse comprend également d'autres récipients contenant d'autres composants nécessaires à la détection ou quantification dudit analyte. 30\n<CLM>\1\tProcédé de détection ou quantification in vitro d'un analyte dans un échantillon de 44 test susceptible de contenir le dit analyte, ledit procédé utilisant au moins un support solide (1) en forme de tube, évasé ou non, présentant une ouverture circulaire ou ellipsoïdale à chaque extrémité, tel qu'un cône ou une pipette, dans lequel est appliqué au moins un partenaire P1 de liaison à un analyte à détecter ou quantifier dans 5 l'échantillon de test selon un procédé d'application tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 6 et 9 à 12, lequel procédé de détection ou quantification comprend des étapes de mise en contact de l'échantillon de test avec le support solide et de révélation de la liaison, si l'analyte est présent, dudit analyte et dudit au moins un partenaire P1 de liaison. 10\n<CLM>\1\tProcédé de détection ou quantification selon la revendication 13, caractérisé en ce que le partenaire P1 de liaison est un partenaire d'immunoessai et en ce que la révélation de la liaison dudit analyte est mise en oeuvre par un test sandwich utilisant un autre partenaire de liaison à l'analyte, de nature différente ou non, lequel est marqué. 15\n<CLM>\1\tProcédé de détection ou quantification selon la revendication 13, caractérisé en ce que le partenaire P1 de liaison à l'analyte est un partenaire d'immunoessai et en ce que la révélation de la liaison ou non dudit analyte est mise en oeuvre par un test en compétition utilisant un composé marqué entrant en compétition avec l'analyte à 20 détecter ou quantifier.\n<CLM>\1\tProcédé de détection ou quantification selon l'une quelconque des revendications 13 à 15, caractérisé en ce que la révélation de l'analyte est mise en oeuvre en utilisant une enzyme et un substrat enzymatique catalysé par ladite enzyme, de préférence la 25 phosphatase alcaline et le 4-méthylombelliferyl phosphate.\n<CLM>\1\tProcédé de détection ou quantification selon l'une quelconque des revendications 13 à 16, caractérisé en ce que les étapes de mise en contact de l'échantillon de test avec le support solide et de révélation de la liaison, si l'analyte est présent, dudit analyte et 30 dudit au moins un partenaire P1 de liaison sont mises en oeuvre juste après le procédé d'application d'au moins un partenaire de liaison P1 dans ledit support solide tel que 45 défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 6 et 9 à\n<CLM>\1\t18. Procédé de détection ou quantification selon l'une quelconque des revendications 13 à 17, caractérisé en ce que les étapes de mise en contact de l'échantillon de test avec 5 le support solide sur lequel est appliqué ledit au moins partenaire P1 de liaison, et de révélation de la liaison dudit analyte et dudit au moins partenaire P1 de liaison, comprennent les étapes suivantes consistant à : (1) aspirer dans ledit support solide (1), par une de ses extrémités, ledit échantillon contenu dans un récipient (10), appelé récipient RE, laisser en contact et refouler ledit 10 échantillon dans un récipient (10, 4, 7, 8, 9), lequel est ou non ledit récipient RE, (2) aspirer dans ledit support solide, par la même extrémité, une solution comprenant un composé conjugué à un marqueur, tel qu'un autre partenaire de liaison à l'analyte ou un composé entrant en compétition avec l'analyte, appelée solution de conjugué SC, ladite solution de conjugué C étant contenue dans un récipient (4, 7, 8,\n<CLM>\1\tappelé 15 récipient RC, laisser en contact et refouler ladite solution de conjugué SC dans un récipient (4, 7, 8, 9), lequel est ou non ledit récipient RC, (3) si le marqueur utilise un substrat de révélation, aspirer dans ledit support solide, par la même extrémité, une solution comprenant un substrat de révélation avec lequel le marqueur va réagir, appelée solution de substrat SS, ladite solution de substrat SS étant 20 contenue dans un récipient (4, 7, 8, 9,\n<CLM>\1\tappelé récipient RS, laisser en contact et refouler ladite solution de substrat dans un récipient, lequel est ou non ledit récipient RS, et (4) mesurer le signal émis. 25\n<CLM>\1\tProcédé de détection ou quantification selon la revendication 18, caractérisé en ce que le récipient RE, le récipient RC et le récipient RS sont contenus dans la même barrette d'analyse (6).\n<CLM>\1\tProcédé de détection ou quantification selon l'une quelconque des revendications 30 13 à 19, caractérisé en ce que l'échantillon de test à analyser est un échantillon d'origine biologique, alimentaire ou environnemental.