Brevet FR3078074A1 (20190823)

REVENDICATIONS1. Réseau tridimensionnel infusible de fibres de polymère réticulé, caractérisé en ce que : - le diamètre desdites fibres est compris entre 0,1 et 1,5 gn, de préférence entre 0,3 et 1 gn, et plus préférentiellement entre 0,6 et 0,8 gn, - la taille des interstices entre lesdites fibres est comprise entre 0,1 et 50 gn2, de préférence entre 0,5 et 10 gn2, et plus préférentiellement entre 1 et 2 gn2, et - la rigidité dudit réseau est caractérisée par un module d'élasticité compris entre 0,01 et 10 000 kPa, de préférence entre 0,1 et 10 000 kPa, de préférence entre 0,1 et 1 000 kPa, plus préférentiellement entre 0,1 et 300 kPa.\n<CLM>\1\tRéseau tridimensionnel selon la revendication 1, caractérisé en ce que : - ledit polymère est obtenu par la réticulation thermique de polyacrylonitrile (PAN), - la rigidité du réseau est caractérisée par un module d'élasticité compris entre 0,01 et 10 000 kPa, de préférence entre 0,1 et 10 000 kPa, de préférence entre 0,1 et 1 000 kPa, plus préférentiellement entre 0,1 et 300 kPa, et - optionnellement la surface des fibres est recouverte par au moins une protéine de la matrice extracellulaire, de préférence choisie parmi : la laminine, la fibronectine, la vitronectine, l'acide hyaluronique et le collagène.\n<CLM>\1\tRéseau tridimensionnel selon la revendication 2, caractérisé en ce que : - ledit polymère est obtenu par la réticulation thermique de PAN, - ledit polymère réticulé comprend des nanocharges, de préférence des nanotubes de carbone, à une concentration comprise entre 0,00001 et 5 %, de préférence entre 0,00001 et 1 'Vo, de préférence entre 0,0001 et 0,1 'Vo, de préférence entre 0,0002 et 0,08 'Vo, de préférence entre 0,00075 et 0,05 'Vo, ledit pourcentage étant exprimé en pourcentage massique de la solution du polymère avant réticulation, 34 - la rigidité du réseau est caractérisée par un module d'élasticité compris entre 0,1 et 1 000 kPa, de préférence entre 0,1 et 300 kPa, et - la surface des fibres est recouverte de laminine. 5\n<CLM>\1\tProcédé de préparation d'un réseau tridimensionnel de fibres de polymère réticulé selon la revendication 3, ledit procédé comprenant les étapes successives suivantes : a) une étape de synthèse dudit réseau par électrofilage d'une solution de PAN dont la concentration est comprise entre 8 et 12 'Vo, de préférence de 10 'Vo, 10 exprimé en pourcentage massique de ladite solution de PAN, pour obtenir un réseau tridimensionnel de fibres, et b) une étape de traitement thermique sous atmosphère oxydante et à une température comprise entre 40 °C et 400 °C, de préférence entre 200 °C et 300 °C, du réseau tridimensionnel de fibres obtenu lors de l'étape a), 15 ladite étape de synthèse par électrofilage étant caractérisée en ce que : - la solution de PAN est projetée par une aiguille dont l'amplitude de déplacement est comprise entre 30 et 50 mm, de préférence 40 mm, et dont la vitesse de déplacement est comprise entre 2 et 10 mm/seconde, de préférence 5 mm/seconde, 20 - la distance entre la source de polymère et l'électrode collectrice est comprise entre 1 et 50 cm, de préférence entre 10 et 30 cm et plus préférentiellement 15 cm, et le champ électrique appliqué dans le champ de projection est compris entre 16 et 24 kV, de préférence 20 kV, et - le débit de la solution de polymère lors de l'alimentation de la seringue est 25 compris entre 0,5 et 8,6 mL/h.\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que la solution de PAN est projetée sur une électrode collectrice rotative, de préférence un tambour, de diamètre compris entre 12 et 18 cm, de préférence de 15 cm, la vitesse de 30 rotation de ladite électrode étant comprise entre 1 et 100 000 g, de préférence entre 1 et 1 000 g et plus préférentiellement de 335 g.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 4 ou 5, caractérisé en ce que ladite solution de polymère comprend des nanotubes de carbone à une concentration comprise entre 0,00001 et 5 'Vo, de préférence entre 0,00001 et 35 1 'Vo, de préférence entre 0,0001 et 0,1 'Vo, de préférence entre 0,0002 et 0,08 'Vo, de préférence entre 0,00075 et 0,05 'Vo, exprimé en pourcentage massique de ladite solution de polymère avant réticulation. 5\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 4 à 6, caractérisé en ce que ladite étape de traitement thermique est suivie par une étape de traitement de la surface desdites fibres, comprenant la mise en présence dudit réseau avec une solution d'au moins une protéine de la matrice extracellulaire, ladite protéine étant de préférence choisie parmi : la laminine, la fibronectine, la 10 vitronectine, l'acide hyaluronique et le collagène, ladite mise en présence étant optionnellement précédée par un traitement préalable de la surface des fibres dudit réseau.\n<CLM>\1\tDispositif pour le support de cellules, comprenant au moins un réseau selon 15 l'une quelconque des revendications 1 à 3 ou un réseau susceptible d'être obtenu par un procédé selon l'une quelconque des revendications 4 à\n<CLM>\1\t9. Utilisation d'un réseau tridimensionnel selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, d'un réseau tridimensionnel obtenu par un procédé selon 20 l'une quelconque des revendications 4 à 7 ou d'un dispositif selon la revendication 8, en tant que support de cellules.\n<CLM>\1\tUtilisation selon la revendication 9, caractérisée en ce qu'elle comprend les étapes successives suivantes : 25 - la mise en contact de cellules avec un réseau tridimensionnel selon l'une des revendications 1 à 3, un réseau tridimensionnel obtenu par un procédé selon l'une quelconque des revendications 4 à 7 ou un dispositif selon la revendication 8, et - l'observation et optionnellement la détermination d'au moins un paramètre 30 caractérisant lesdites cellules et/ou l'analyse biochimique desdites cellules.