Brevet FR3071512A1 (20190329)

REVENDICATIONS1. Méthode in vitro d'identification d'un fibroblaste dermique comme étant un fibroblaste papillaire, un fibroblaste réticulaire ou un fibroblaste de la jonction dermo-hypodermique (FJDH), comprenant les étapes suivantes : a) fournir un échantillon biologique comprenant au moins un fibroblaste dermique, b) mesurer le niveau d'un produit d'expression d'au moins un gène choisi dans le groupe constitué des gènes UCP2 et FGF9 et éventuellement des gènes COL11A1 et ACAN, et éventuellement le niveau d'un produit d'expression du gène KLF9, et c) sur la base du ou des niveau(x) mesuré(s) à l'étape b), identifier le fibroblaste dermique comme étant un fibroblaste papillaire, un fibroblaste réticulaire ou un fibroblaste de la jonction dermo-hypodermique (FJDH).\n<CLM>\1\tMéthode selon la revendication 1, dans lequel le niveau d'un produit d'expression d'au moins un gène choisi dans le groupe constitué des gènes UCP2 et FGF9 est mesuré à l'étape b), et dans lequel le fibroblaste dermique est identifié comme étant un fibroblaste papillaire quand : (i) le niveau du produit d'expression du gène UCP2 est augmenté par rapport à un niveau contrôle, et/ou (ii) le niveau du produit d'expression du gène FGF9 est diminué par rapport à un niveau contrôle.\n<CLM>\1\tMéthode selon la revendication 1, dans lequel le niveau d'un produit d'expression d'au moins un gène choisi dans le groupe constitué des gènes UCP2, ACAN, FGF9 et COL11A1, et le niveau d'un produit d'expression du gène KLF9 sont mesurés à l'étape b), et dans lequel le fibroblaste dermique est identifié comme étant un fibroblaste réticulaire quand :\n<CLM>\1\t(i) le niveau du produit d'expression du gène UCP2 est diminué par rapport à un niveau contrôle, (ii) le niveau du produit d'expression du gène ACAN est augmenté par rapport à un niveau contrôle, (iii) le niveau du produit d'expression du gène FGF9 est augmenté par rapport à un niveau contrôle, et/ou 22 (iv) le niveau du produit d'expression du gène COL11A1 est augmenté par rapport à un niveau contrôle, et\n<CLM>\1\tle niveau du produit d'expression du gène KLF9 est diminué par rapport à un 5 niveau contrôle.\n<CLM>\1\tMéthode selon la revendication 1, dans lequel le niveau d'un produit d'expression d'au moins un gène choisi dans le groupe constitué des gènes UCP2, ACAN, FGF9 et COL11A1, et le niveau d'un produit d'expression du gène KLF9 sont mesurés à l'étape b), 10 et dans lequel le fibroblaste dermique est identifié comme étant un fibroblaste de la jonction dermo-hypodermique quand :\n<CLM>\1\t(i) le niveau du produit d'expression du gène UCP2 est diminué par_ rapport à un niveau contrôle, 15 (ii) le niveau du produit d'expression du gène ACAN est augmenté par rapport à un niveau contrôle, (iii) le niveau du produit d'expression du gène FGF9 est augmenté par rapport à un niveau contrôle, et/ou (iv) le niveau du produit d'expression du gène COL11A1 est augmenté par 20 rapport à un niveau contrôle, et\n<CLM>\1\tle niveau du produit d'expression du gène KLF9 est augmenté par rapport à un niveau contrôle. 25\n<CLM>\1\tProcédé de préparation d'un équivalent de derme in vitro comprenant une sous-population de fibroblastes de la jonction dermo-hypodermique (FJDH) ledit procédé comprenant une étape initiale d'identification de fibroblastes dermiques comme étant des fibroblastes FJDI-1, comprenant les étapes suivantes : 30 A) la fourniture d'une culture homogène de fibroblastes dermiques, B) le prélèvement d'une partie de la culture de fibroblastes dermiques fournie à l'étape A), C) l'identification de la partie de la culture de fibroblastes dermiques prélevée à l'étape B) comme étant une culture de fibroblastes FJDH en mettant en oeuvre la 35 méthode d'identification telle que définie selon les revendications 1 ou 4, et 23 D) l'utilisation de la partie de la culture de fibroblastes dermiques non prélevée à l'étape B) pour préparer un équivalent de derme.\n<CLM>\1\tKit pour identifier un fibroblaste dermique comme étant un fibroblaste papillaire, un 5 fibroblaste réticulaire ou un fibroblaste de la jonction dermo-hypodermique (FJDH), ledit kit comprenant : - au moins un moyen de mesure choisi dans le groupe constitué d'un moyen de mesure du niveau d'un produit d'expression du gène UCP2, un moyen de mesure du niveau d'un produit d'expression du gène FGF9, un moyen de mesure du niveau d'un 10 produit d'expression du gène COL11A1 et un moyen de mesure du niveau d'un produit d'expression du gène ACAN, et - au moins un moyen de mesure du niveau d'un produit d'expression du gène KLF9. 15\n<CLM>\1\tPuce à ADN pour identifier un fibroblaste dermique comme étant un fibroblaste papillaire, un fibroblaste réticulaire ou un fibroblaste de la jonction dermo-hypodermique (FJDH), ladite puce comprenant : - au moins une sonde choisie dans le groupe constitué d'une sonde détectant un 20 produit d'expression du gène UCP2, une sonde détectant un produit d'expression du gène FGF9, une sonde détectant un produit d'expression du gène COL11A1 et une sonde détectant un produit d'expression du gène ACAN, et - au moins une sonde détectant un produit d'expression du gène KLF9.