Brevet FR3068368A1 (20190104)

REVENDICATIONSAMENDEES\n<CLM>\1\tUtilisation d'au moins un polypeptide choisi parmi les potyketide synthases de type III de bactéries actinomycètes comme phloroglucinol synthase, à l'exclusion de la polyketide synthase de type III de Pseudomonas fluorescens PHLD.Pf, caractérisée en ce que ledit polypeptide comprend au moins une séquence d'acides aminés ayant au moins 80% d'identité avec la séquence SEQ ID NO:\n<CLM>\1\t2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que lesdites bactéries actinomycètes sont choisies dans le groupe constitué par Tsukamurella sp., Nocardia sp., et Mycobacterium sp. Gordonia sp.\n<CLM>\1\tUtilisation selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que ledit polypeptide comprend 15 au moins une séquence d'acides aminés ayant au moins 85% d'identité, avec la séquence SEQ ID NO:\n<CLM>\1\t4. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que ledit polypeptide comprend au moins une séquence d'acides aminés de SEQ ID NO:\n<CLM>\1\t20\n<CLM>\1\tMolécule d'acides nucléiques isolée comprenant un promoteur contrôlant l'expression d'au moins une séquence d'acides nucléiques codant un polypeptide tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à\n<CLM>\1\t25\n<CLM>\1\tMolécule d'acides nucléiques isolée selon ta revendication 5, caractérisée en ce que te promoteur est un promoteur exogène.\n<CLM>\1\tMolécule d'acides nucléiques isolée comprenant un terminateur de transcription d'au moins une séquence d'acides nucléiques codant un polypeptide tel que défini dans l'une quelconque 30 des revendications 1 à\n<CLM>\1\t8. Molécule d'acides nucléiques isolée selon la revendication 7, caractérisée en ce que te terminateur est un terminateur exogène. 35\n<CLM>\1\tMolécule d'acides nucléiques isolée selon ta revendication 5 ou 6, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un terminateur de transcription de ladite séquence d'acides nucléiques. 31\n<CLM>\1\tVecteur comprenant au moins une molécule d'acides nucléiques selon l'une quelconque des revendications 5 à\n<CLM>\1\t5\n<CLM>\1\tCellule hôte comprenant au moins une molécule d'acides nucléiques selon l'une quelconque des revendications 5 à 9, ou au moins un vecteur selon la revendication\n<CLM>\1\t12. Cellule hôte selon la revendication 11, caractérisée en ce que ladite cellule hôte est un microorganisme sélectionné parmi les bactéries, levures, champignons, algues, et 10 cyanobactéries.\n<CLM>\1\tCellule hôte selon la revendication 11 ou 12, dans laquelle au moins une copie de ladite molécule d'acides nucléiques est intégrée dans te génome de ladite cellule hôte.\n<CLM>\1\tMéthode pour produire du phloroglucinol, Eomprenant les étapes consistant en : (i) la mise en contact d'une cellule hôte exprimant le polypeptide à activité de phloroglucinol synthase tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 4, avez un substrat -approprié ; -- (ii) ta culture in vitro de ta cellule hôte de l'étape (i) dans des conditions permettant ta croissance de ladite cellule hôte et/ou l'expression de la molécule d'acides nucléiques contenue dans ladite cellule hôte, de manière à produire du phloroglucinol; (iii) optionnetlement la récupération du milieu de culture comprenant le phloroglucinol, obtenu après l'étape (ii) ; et (iv) optionnellement, la purification du phloroglucinol à partir du milieu de culture de l'étape (iii).\n<CLM>\1\tMéthode pour produire du phloroglucinol, comprenant au moins les étapes consistant en : (i) la mise en contact d'au moins un polypeptide tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 4 avec un substrat approprié ; (ii) l'incubation du mélange issu de l'étape (i) dans des conditions adaptées pour produire du phloroglucinol; (iii) optionneltement la récupération du milieu réactionnel comprenant le phloroglucinol, obtenu après l'étape (ii) ; et (iv) optionnellement, ta purification du phloroglucinol à partir du milieu réactionnel de L'étape (iii).