Brevet FR3066920A1 (20181207)

REVENDICATIONS1. Procédé de fabrication d'un adjuvant liposomial comprenant une saponine en utilisant un dispositif 5 microfluidique, comprenant les étapes suivantes : (a) le mélange dans le dispositif d'une première solution comprenant un solvant, un lipide de phosphatidylcholine et un stérol, et d'une seconde solution comprenant de l'eau et la saponine ; et 10 (b) l'élimination du solvant.\n<CLM>\1\tProcédé de fabrication d'un adjuvant liposomial comprenant une saponine en utilisant un dispositif microfluidique, comprenant les étapes suivantes : (a) le mélange dans le dispositif d'une première 15 solution comprenant un solvant, un lipide de phosphatidylcholine et un stérol, et d'une seconde solution comprenant de l'eau ; (b) l'ajout de la saponine ; et (c) l'élimination du solvant. 20\n<CLM>\1\tProcédé de fabrication d'un adjuvant liposomial comprenant une saponine en utilisant un dispositif microfluidique, comprenant les étapes suivantes : (a) le mélange dans le dispositif d'une première solution comprenant un solvant, un lipide de 25 phosphatidylcholine et un stérol, et d'une seconde solution comprenant de l'eau ; (b) l'élimination du solvant ; et (c) l'ajout de la saponine.\n<CLM>\1\tProcédé de fabrication d'un concentré 30 liposomial à utiliser dans la préparation d'un adjuvant liposomial comprenant une saponine en utilisant un 3066920 135 dispositif microfluidique, comprenant l'étape de mélange dans le dispositif d'une première solution comprenant un solvant, un lipide de phosphatidylcholine et un stérol, et d'une seconde solution comprenant de l'eau et la saponine.\n<CLM>\1\tProcédé de fabrication d'un concentré liposomial à utiliser dans la préparation d'un adjuvant liposomial comprenant une saponine en utilisant un dispositif microfluidique, comprenant les étapes suivantes : (a) le mélange dans le dispositif d'une première solution comprenant un solvant, un lipide de phosphatidylcholine et un stérol, et d'une seconde solution comprenant de l'eau ; et (b) l'ajout de la saponine.\n<CLM>\1\tProcédé de fabrication d'un concentré liposomial à utiliser dans la préparation d'un adjuvant liposomial comprenant une saponine et un agoniste des TLR4 en utilisant un dispositif microfluidique, 20 comprenant les étapes suivantes : (a) le mélange dans le dispositif d'une première solution comprenant un solvant, un lipide de phosphatidylcholine et un stérol, et d'une seconde solution comprenant de l'eau ; 25 (b) l'ajout de la saponine ; et (c) l'ajout de l'agoniste des TLR4 ; dans lequel les étapes (b) et (c) peuvent être dans un ordre ou dans l'autre, ou peuvent être effectuées dans une seule étape. 30\n<CLM>\1\tProcédé de fabrication d'un adjuvant liposomial comprenant une saponine en utilisant un dispositif 3066920 136 microfluidique selon la revendication 1, comprenant les étapes suivantes : (a) le mélange dans le dispositif d'une première solution comprenant un solvant, de la DOPC et un 5 stérol, et d'une seconde solution comprenant de l'eau et la saponine ; et (b) l'élimination du solvant.\n<CLM>\1\tProcédé de fabrication d'un adjuvant liposomial comprenant une saponine en utilisant un dispositif 10 microfluidique selon la revendication 2, comprenant les étapes suivantes : (a) le mélange dans le dispositif d'une première solution comprenant un solvant, de la DOPC et un stérol, et d'une seconde solution comprenant de l'eau ; 15 (b) l'ajout de la saponine ; et (c) l'élimination du solvant.\n<CLM>\1\tProcédé de fabrication d'un adjuvant liposomial comprenant une saponine en utilisant un dispositif microfluidique selon la revendication 3, comprenant les 20 étapes suivantes : (a) le mélange dans le dispositif d'une première solution comprenant un solvant, de la DOPC et un stérol, et d'une seconde solution comprenant de l'eau ; (b) l'élimination du solvant ; et 25 (c) l'ajout de la saponine.\n<CLM>\1\tProcédé de fabrication d'un concentré liposomial à utiliser dans la préparation d'un adjuvant liposomial comprenant une saponine en utilisant un dispositif microfluidique selon la revendication 4, 30 comprenant l'étape de mélange dans le dispositif d'une première solution comprenant un solvant, de la DOPC et 3066920 137 un stérol, et d'une seconde solution comprenant de l'eau et la saponine.\n<CLM>\1\tProcédé de fabrication d'un concentré liposomial à utiliser dans la préparation d'un adjuvant 5 liposomial comprenant une saponine en utilisant un dispositif microfluidique selon la revendication 5, comprenant les étapes suivantes : (a) le mélange dans le dispositif d'une première solution comprenant un solvant, de la DOPC et un 10 stérol, et d'une seconde solution comprenant de l'eau ; et (b) l'ajout de la saponine.\n<CLM>\1\tProcédé de fabrication d'un concentré liposomial à utiliser dans la préparation d'un adjuvant 15 liposomial comprenant une saponine et un agoniste des TLR4 en utilisant un dispositif microfluidique selon la revendication 6, comprenant les étapes suivantes : (a) le mélange dans le dispositif d'une première solution comprenant un solvant, de la DOPC et un 20 stérol, et d'une seconde solution comprenant de l'eau ; (b) l'ajout de la saponine ; et (c) l'ajout de l'agoniste des TLR4 ; dans lequel les étapes (b) et (c) peuvent être dans un ordre ou dans l'autre, ou peuvent être 25 effectuées dans une seule étape.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 ou 7 à 11, dans lequel la première solution comprend en outre un agoniste des TLR4.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des 30 revendications 1 à 3 ou 7 à 9, dans lequel un agoniste des TLR4 est ajouté avant l'élimination du solvant. 3066920 138\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 ou 7 à 9, dans lequel un agoniste des TLR4 est ajouté après l'élimination du solvant.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des 5 revendications 1 à 15, dans lequel le dispositif microfluidique comporte une entrée pour la première solution vers la chambre de mélange.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 16, dans lequel le dispositif 10 microfluidique comporte deux entrées pour la seconde solution vers la chambre de mélange.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 17, dans lequel le dispositif microfluidique a des entrées telles que chaque entrée a 15 une largeur de 0,2 mm et couvre la pleine longueur de l'autre côté de la chambre de mélange dispositif microfluidique.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 18, dans lequel dispositif microfluidique a une chambre de mélange ayant la section transversale de la chambre de mélange est de 0,6 à 1,2 mm2, comme autour de 0,8 mm2.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 19, dans lequel dispositif microfluidique a une chambre de mélange sensiblement rectangulaire en coupe transversale.\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 20, dans lequel la coupe transversale de la chambre de mélange a un côté long de 1,6 à 2,4 mm. 3066920 139\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 20 ou 21, dans lequel la coupe transversale de la chambre de mélange a un côté court de 0,2 à 0,6 mm.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des 5 revendications 1 à 22, dans lequel dispositif microfluidique a une chambre de mélange ayant une longueur de 2 à 3 cm.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 23, dans lequel le dispositif 10 microfluidique comporte une sortie à partir de la chambre de mélange pour la récupération du matériau mélangé.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications 1 à 24, dans lequel dispositif microfluidique a une chambre de 15 mélange telle que le débit total dans la chambre de mélange est de 17,5 à 25 ml/min/mm2 de coupe transversale de la chambre de mélange.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 25, dans lequel le rapport des 20 débits pour les première et seconde solutions dans le dispositif microfluidique se situe dans la plage de 1/2 à 1/6.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 26, dans lequel le débit de la 25 première solution dans la chambre de mélange du dispositif microfluidique est de 3 à 6,5 ml/min/mm2 de coupe transversale de la chambre de mélange.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 27, dans lequel le débit de la 30 seconde solution dans la chambre de mélange du 3066920 140 dispositif microfluidique est de 14 à 20 ml/min/mm2 de coupe transversale de la chambre de mélange.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 28, dans lequel la température de la 5 première solution est fournie à une température de 15 à 25°C.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 29, dans lequel la température de la seconde solution est fournie à une température de 15 à 10 25°C.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications 1 à 30, dans lequel la température de la chambre de mélange du dispositif microfluidique est de 15 à 25°C.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des 15 revendications 1 à 31, dans lequel le nombre de Reynolds maximal au sein de la chambre de mélange du dispositif microfluidique est de 1500 ou inférieur.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 32, dans lequel le dispositif 20 microfluidique comprend une pluralité de chambres de mélange.\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 33, dans lequel le dispositif comprend 4 à 32 chambres de mélange.\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 33 ou 34, dans 25 lequel toutes les chambres de mélange dans la pluralité des chambres de mélange sont alimentées par les mêmes pompes et le matériau mélangé issu de toutes les chambres de mélange est recueilli avant un autre traitement et/ou stockage.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 33 à 35, dans lequel la pluralité des 3066920 141 chambres de mélange est capable de produire le matériau mélangé à un taux de 50 à 2000 ml/min.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 33 à 36, dans lequel la pluralité des 5 chambres de mélange est capable de produire le matériau mélangé à un taux d'au moins 1 g de lipide de phosphatidylcholine par minute.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 33 à 37, dans lequel la pluralité des 10 chambres de mélange est capable de produire le matériau mélangé à un taux d'au moins 1 g de DOPC par minute.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 38, dans lequel le solvant comprend 70 à 90 % v/v d'éthanol. 15\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 39, dans lequel le solvant comprend 10 à 30 96 v/v d'isopropanol.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 40, dans lequel la première solution 20 comprend 100 à 170 mg/m1 de lipide de phosphatidylcholine.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 41, dans lequel la première solution comprend 100 à 170 mg/ml de DOPC. 25\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 42, dans lequel la première solution comprend 20 à 50 mg/ml de stérol.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 43, dans lequel le stérol est le 30 cholestérol. 3066920 142\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 44, dans lequel le poids sec de la première solution est de 120 à 250 mg/ml.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des 5 revendications 1 à 45, dans lequel la seconde solution comprend au moins 90 % p/p d'eau.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 46, dans lequel la saponine est le QS-21. 10\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 47, dans lequel la seconde solution comprend 1 à 4 mg/m1 de saponine.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 6, 12 à 48, dans lequel l'agoniste TLR4 15 est le 3D-MPL.\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 6, 12 à 49, dans lequel la première solution comprend 4 à 10 mg/m1 de l'agoniste des TLR4.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des 20 revendications 1 à 50, dans lequel la taille moyenne des liposomes est de 95 à 120 nm.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 51, dans lequel la polydispersion des liposomes est de 0,3 ou inférieure. 25\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 52, dans lequel la polydispersion des liposomes est de 0,2 ou inférieure.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 53, dans lequel le solvant est 30 éliminé par diafiltration, ultrafiltration et/ou dialyse, en particulier par diafiltration. 3066920 143\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 54, dans lequel l'élimination du solvant aboutit à une teneur en eau d'au moins 98 % p/p d'eau. 5\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 55, comprenant l'étape supplémentaire de dilution, jusqu'à une concentration finale souhaitée.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des 10 revendications 1 à 56, comprenant l'étape supplémentaire d'ajustement du pH entre 5 à\n<CLM>\1\t58. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 57, comprenant l'étape supplémentaire d'ajustement de l'osmolalité à 250 à 15 750 mOsm/kg.\n<CLM>\1\tProcédé de préparation d'une composition immunogène adjuvée comprenant un immunogène ou un antigène, ou un polynucléotide codant pour l'immunogène ou l'antigène, ledit procédé comprenant les étapes de : 20 (i) fabrication d'un adjuvant liposomial selon le procédé de l'une quelconque des revendications 1 à 58 ; (ii) mélange de l'adjuvant liposomial avec un immunogène ou un antigène, ou un polynucléotide codant pour l'immunogène ou l'antigène. 25\n<CLM>\1\tProcédé de fabrication d'une composition immunogène adjuvée, ledit procédé comprenant l'étape de combinaison d'un immunogène ou d'un antigène, ou d'un polynucléotide codant pour l'immunogène ou l'antigène, avec un adjuvant liposomial fabriqué selon le procédé 30 de l'une quelconque des revendications 1 à\n<CLM>\1\t3066920 144\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 60, comprenant l'étape supplémentaire de stérilisation par filtration.\n<CLM>\1\tAdjuvant liposomial comprenant une saponine, 5 un agoniste des TLR4, de la DOPC et un stérol, produit selon le procédé de l'une quelconque des revendications 1 à\n<CLM>\1\t63. Composition immunogène adjuvée produite selon le procédé de la revendication 60 ou\n<CLM>\1\t10\n<CLM>\1\tSolution comprenant un solvant et 100 à 170 mg/ml de lipide, dans laquelle le solvant comprend 70 à 90 % v/v d'éthanol, comme 75 à 85 96 v/v d'éthanol, et 10 à 30 % v/v d'alcool isopropylique comme 15 à 25 % v/v d'isopropanol. 15\n<CLM>\1\tSolution selon la revendication 64, dans laquelle le lipide est une phosphatidylcholine.\n<CLM>\1\tSolution selon la revendication 64, dans laquelle le lipide est la DOPC.\n<CLM>\1\tSolution selon l'une quelconque des 20 revendications 64 à 66, comprenant en outre 20 à 50 mg/mi de stérol.\n<CLM>\1\tSolution selon l'une ou l'autre de la revendication 64 ou 67, dans laquelle le stérol est le cholestérol. 25\n<CLM>\1\tSolution selon l'une quelconque des revendications 64 à 68, comprenant un agoniste des TLR4.\n<CLM>\1\tSolution selon la revendication 69, dans laquelle l'agoniste des TLR4 est présent à une 30 concentration de 4 à 12 mg/ml. 3066920 145\n<CLM>\1\tSolution selon l'une quelconque des revendications 64 à 70 qui est constituée essentiellement d'un solvant et de 100 à 160 mg/ml de DOPC et de 30 à 40 mg/ml de cholestérol, de 4 à 5 10 mg/m1 d'agoniste des TLR4, et dans laquelle le solvant comprend 70 à 90 % v/v d'éthanol et 10 à 30 % v/v d'alcool isopropylique.\n<CLM>\1\tSolution selon l'une quelconque des revendications 64 à 71 dans laquelle l'agoniste des 10 TLR4 est un lipopolysaccharide, comme le 3D-MPL.\n<CLM>\1\tProcédé de préparation d'une solution comprenant un solvant, un lipide, du cholestérol et un agoniste des TLR4, ledit procédé comprenant les étapes de : 15 (i) la préparation d'une suspension de l'agoniste des TLR4 dans au moins une partie du solvant ; (ii) la combinaison de l'agoniste des TLR4 en suspension avec le lipide de phosphatidylcholine et le cholestérol ; 20 (iii) l'ajout de solvant ; (iv) le mélange.\n<CLM>\1\tProcédé de préparation d'une solution comprenant un solvant, un lipide, du cholestérol et un agoniste des TLR4, ledit procédé comprenant les étapes 25 de : (i) la préparation d'une suspension de l'agoniste des TLR4 dans au moins une partie du solvant ; (ii) la combinaison de l'agoniste des TLR4 en suspension avec le lipide de phosphatidylcholine et le 30 cholestérol ; (iii) l'ajout de solvant ; 3066920 146 (iv) le mélange ; (v) l'ajout de solvant supplémentaire.\n<CLM>\1\tProcédé de préparation d'une solution comprenant un solvant, un lipide, du cholestérol et un 5 agoniste des TLR4, ledit procédé comprenant les étapes de : (i) la préparation d'une suspension de l'agoniste des TLR4 dans au moins une partie du solvant ; (ii) la combinaison de l'agoniste des TLR4 en 10 suspension avec la DOPC et le cholestérol ; (iii) l'ajout de solvant ; (iv) le mélange.\n<CLM>\1\tProcédé de préparation d'une solution comprenant un solvant, un lipide, du cholestérol et un 15 agoniste des TLR4, ledit procédé comprenant les étapes de : (i) la préparation d'une suspension de l'agoniste des TLR4 dans au moins une partie du solvant ; (ii) la combinaison de l'agoniste des TLR4 en 20 suspension avec la DOPC et le cholestérol ; (iii) l'ajout de solvant ; (iv) le mélange ; (v) l'ajout de solvant supplémentaire.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications 73 à 25 76, dans lequel le mélange est à une température de 30 à 50°C.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 73 à 77, dans lequel l'au moins une partie du solvant est au moins 35 % du solvant. 30\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 73 à 78, dans lequel l'au moins une 3066920 147 partie du solvant est 90 % du solvant ou moins comme 80 % ou moins, spécialement 70 % ou moins et en particulier 60 % ou moins.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des 5 revendications 73 à 79, dans lequel le solvant ajouté est le solvant restant.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 73 à 80, dans lequel la solution comprend 100 à 160 mg/ml de lipide et 30 à 40 mg/ml de 10 cholestérol, dans lequel le solvant comprend 70 à 90 % v/v d'éthanol et 10 à 30 % v/v d'alcool isopropylique, dans lequel le lipide est de façon appropriée la DOPC.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 73 à 81, dans lequel l'agoniste des TLR4 15 est le 3D-MPL.\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 82, dans lequel la solution comprend 4 à 10 mg/ml de 3D-MPL.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 73 à 83, dans lequel le solvant 20 supplémentaire est 0 à 30 % du solvant.\n<CLM>\1\tSolution contenant des liposomes pouvant être obtenue par mélange de la première solution et de la seconde solution selon les procédés de l'une quelconque des revendications 1 à 53 avant l'élimination du 25 solvant.\n<CLM>\1\tProcédé, adjuvant, composition ou solution selon l'une quelconque des revendications 1 à 85, dans lequel/laquelle le lipide de phosphatidylcholine contient des chaînes acyle non ramifiées saturées 30 comportant 12 à 20 atomes de carbone comme des chaînes acyle comportant 14 à 1B atomes de carbone. 3066920 148\n<CLM>\1\tProcédé, adjuvant, composition ou solution selon l'une quelconque des revendications 1 à 85, dans lequel/laquelle le lipide de phosphatidylcholine contient des chaînes acyle non ramifiées comportant 12 5 à 20 atomes de carbone et une double liaison, comme des chaînes acyle comportant 14 à 18 atomes de carbone et une double liaison.\n<CLM>\1\tProcédé, adjuvant, composition ou solution selon l'une quelconque des revendications 1 à 85, dans 10 lequel/laquelle le lipide de phosphatidylcholine est choisi parmi la dilauroyl-phosphatidylcholine (DLPC), la dimyristoyl-phosphatidylcholine (DMPC), la dipalmitoyl-phosphatidylcholine (DPPC), la distéaroylphosphatidylcholine (DSPC) et la diarachidoyl- 15 phosphatidylcholine (DAPC), la dipalmitoléoylphosphatidylcholine et la dioléoyl-phosphatidylcholine (DOPC) ; et leurs mélanges.