Brevet FR3078777A1 (20190913)

REVENDICATIONS1. Procédé d' analyse d'un échantillon biologique contenant des cellules biologiques incluant des cellules sanguines, le procédé d'analyse comprenant les 5 étapes suivantes : - passage des cellules biologiques de l'échantillon biologique à analyser dans une cellule de mesure d'un cytomètre en flux, - mesure de N paramètres de cytométrie pour chaque cellule biologique de l'échantillon biologique à analyser, 10 - détermination, pour chaque cellule biologique de l'échantillon biologique à analyser, d'un point dans un espace à N dimensions dont des coordonnées sont définies en fonction des paramètres de cytométrie mesurés pour la cellule biologique correspondante, où N est un entier supérieur ou égal à 3, - regroupement automatique des points déterminés en différentes 15 grappes de cellules en fonction des paramètres de cytométrie mesurés, de manière à définir un fichier de grappes d'échantillon, - identification des populations de cellules définies par les différentes grappes de cellules du fichier de grappes d'échantillon, - comptage des points de chaque grappe de cellules du fichier de grappes 20 d'échantillon, - comparaison du fichier de grappes d'échantillon avec des fichiers de grappes de référence, chacun des fichiers de grappes de référence étant définis à partir de paramètres de cytométrie d'un échantillon biologique pathologique ou anormal respectif. 25\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon la revendication 1, lequel comprend en outre une étape d'émission d'un message d'alarme lorsque le fichier de grappes d'échantillon est au moins partiellement identique ou similaire à un fichier de grappes de référence. 30\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon la revendication 2, dans lequel le message d'alarme émis contient des indications relatives à une pathologie ou une anormalité associée au fichier de grappes de référence auquel le fichier de grappes d'échantillon est au moins partiellement identique ou similaire. 35 27\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, lequel comprend en outre une étape d'analyse du fichier de grappes d'échantillon de manière à détecter au moins une éventuelle anomalie dans le fichier de grappes d'échantillon.\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon la revendication 4, dans lequel l'étape de comparaison est réalisée uniquement lorsqu'au moins une anomalie est détectée lors de l'étape d'analyse.\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon la revendication 4 ou 5, dans lequel l'étape d'analyse comprend les étapes suivantes : - analyse, pour chaque grappe de cellules du fichier de grappes d'échantillon, d'au moins un paramètre morphologique de ladite grappe de cellule, - détection d'une anomalie si au moins un paramètre morphologique 15 d'au moins une grappe de cellules du fichier de grappes d'échantillon dépasse une valeur de seuil prédéterminée respective.\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon l'une quelconque des revendications 4 à 6, dans lequel l'étape d'analyse comprend les étapes suivantes : 20 - comparaison, pour chaque grappe de cellules du fichier de grappes d'échantillon, du nombre de points regroupés dans ladite grappe de cellules avec au moins une valeur de seuil prédéterminée respective, - détection d'une anomalie si le nombre de points regroupés dans au moins l'une des grappes de cellules est inférieur et/ou supérieur à l'au moins une 25 valeur de seuil prédéterminée respective.\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon l'une quelconque des revendications 4 à 7, dans lequel l'étape d'analyse comprend les étapes suivantes : - analyse de la distribution des points dans chaque grappe de cellules du 30 fichier de grappes d'échantillon, - détection d'une anomalie si la distribution des points dans au moins l'une des grappes de cellules n'est pas gaussienne.\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon l'une quelconque des revendications 4 à 8, 35 dans lequel l'étape d'analyse comprend les étapes suivantes : 28 - analyse du positionnement des grappes de cellules du fichier de grappes d'échantillon, - détection d'une anomalie si au moins deux grappes de cellules du fichier de grappes d'échantillon sont au moins partiellement confondues. 5\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon l'une quelconque des revendications 4 à 9, dans lequel l'étape d'analyse comprend les étapes suivantes : - analyse des grappes de cellules du fichier de grappes d'échantillon, - détection d'une anomalie si la présence ou l'absence d'au moins une 10 grappe de cellules prédéterminée est détectée.\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, dans lequel l'étape de mesure de paramètres de cytométrie comprend au moins une étape de mesure de paramètres de cytométrie représentatifs de la morphologie et/ou de la structure des cellules biologiques de l'échantillon biologique à analyser.\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon la revendication 11, dans lequel l'étape de mesure de paramètres de cytométrie comprend au moins une étape de mesure, pour chaque cellule biologique de l'échantillon biologique à analyser, d'au moins une propriété optique de ladite cellule biologique.\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon la revendication 12, dans lequel l'étape de mesure de paramètres de cytométrie comprend : - une étape de mesure de l'intensité d'un faisceau lumineux diffusé aux petits angles par chaque cellule biologique, et/ou - une étape de mesure de l'intensité d'un faisceau lumineux diffusé à 90° par chaque cellule biologique, et/ou - une étape de mesure de l'intensité d'un faisceau lumineux diffusé selon un chemin optique du faisceau lumineux incident par chaque cellule biologique. 30\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon la revendication 12 ou 13, dans lequel l'étape de mesure de paramètres de cytométrie comprend une étape de mesure de l'intensité d'au moins un faisceau de fluorescence émis par chaque cellule biologique, par exemple à 90°. 35 29\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon l'une quelconque des revendications 1 à 14, dans lequel l'étape de mesure de paramètres de cytométrie comporte les étapes suivantes : - émission d'un faisceau lumineux incident en direction des cellules 5 biologiques passant dans la chambre de mesure de telle sorte que le faisceau lumineux incident croise le trajet des cellules biologiques, - détection d'au moins un faisceau lumineux issu de chaque cellule biologique passant dans la chambre de mesure. 10\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon l'une quelconque des revendications 1 à 15, lequel comprend en outre les étapes suivantes : - passage des cellules biologiques d'un échantillon biologique de référence dans une cellule de mesure d'un cytomètre en flux, - mesure de N paramètres de cytométrie pour chaque cellule biologique 15 de l'échantillon biologique de référence, - détermination, pour chaque cellule biologique de l'échantillon biologique de référence, d'un point dans un espace à N dimensions dont des coordonnées sont définies en fonction des paramètres de cytométrie mesurés pour ladite cellule biologique de l'échantillon biologique de référence, où N est un entier 20 supérieur ou égal à 3, - regroupement automatique des points déterminés relatifs à l'échantillon biologique de référence en différentes grappes de cellules en fonction des paramètres de cytométrie mesurés pour chaque cellule biologique de l'échantillon biologique de référence, de manière à définir un fichier de grappes de référence, 25 - répéter lesdites étapes de passage, de mesure, de détermination et de regroupement pour une pluralité d'échantillons biologiques de référence de manière à définir une pluralité de fichiers de grappes de référence.\n<CLM>\1\tAppareil d'analyse comprenant : - un cytomètre en flux comprenant une cellule de mesure destinée au passage de cellules biologiques d'un échantillon biologique à analyser et des moyens de mesure configurés pour mesurer des paramètres de cytométrie des cellules biologiques de l'échantillon biologique à analyser, et - unité de traitement (32) configurée pour : - déterminer, pour chaque cellule biologique de l'échantillon biologique à analyser, un point dans un espace à N dimensions dont des coordonnées 30 sont définies en fonction des paramètres de cytométrie mesurés pour la cellule biologique correspondante de l'échantillon biologique à analyser, où N est un entier supérieur ou égal à 3, - regrouper des points en différentes grappes de cellules en 5 fonction des paramètres de cytométrie mesurés pour chaque cellule biologique de l'échantillon biologique à analyser, de manière à définir un fichier de grappes d'échantillon, - comparer le fichier de grappes d'échantillon avec des fichiers de grappes de référence, chacun des fichiers de grappes de référence étant définis à 10 partir de paramètres de cytométrie d'un échantillon biologique pathologique ou anormal respectif.