Brevet FR3074189A1 (20190531)

REVENDICATIONS1. Procédé in vitro de transduction par un vecteur viral contenant un gène permettant de corriger un défaut génétique de cellules hématopoïétiques choisies parmi les cellules CD34+ et les précurseurs de cellules T, comprenant une étape de culture des cellules hématopoïétiques en présence de prostaglandine E2 préalablement à l'exposition au vecteur viral destiné à la transduction des cellules hématopoïétiques, caractérisées en ce que les cellules hématopoïétiques présentent des marqueurs d'inflammation.\n<CLM>\1\tProcédé in vitro de préparation de cellules hématopoïétiques transduites en vue d'une greffe osseuse chez un patient présentant une maladie génétique des cellules sanguines à composante inflammatoire, comprenant a. une étape de culture des cellules en présence de prostaglandine E2, suivie b. d'une étape d'exposition à un vecteur viral contenant un gène permettant de corriger un défaut génétique de ces cellules, destiné à la transduction des cellules CD34+.\n<CLM>\1\tProcédé-selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que lesdites cellules hématopoïétiques ont été isolées ou obtenues par culture in vitro de cellules CD34+ d'un patient atteint de granulomatose septique chronique, du syndrome de VViskott-Aldrich ou de lymphohistiocytose. 4-. Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que la prostaglandine E2 est ajoutée au milieu de culture entre 4 et 1 heure avant exposition des cellules au vecteur viral.\n<CLM>\1\tProcédé selon rune des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que la prostaglandine E2 est maintenue dans le milieu de culture avec le vecteur viral.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce qu'il comprend également au moins une étape choisie parmi a. Le lavage des cellules après transduction, b. La congélation des cellules après transduction 24 c. le conditionnement des cellules transduites dans une poche pour injection à un patient.\n<CLM>\1\tUtilisation de la Prostaglandine E2 pour la préparation in vitro d'un greffon de 5 cellules souches hématopoïétiques transduites par un vecteur viral contenant un gène permettant de corriger un défaut génétique de ces cellules destiné à être congelé pour conservation et décongelé avant administration chez un patient présentant une maladie génétique des cellules sanguines à composante inflammatoire. 10\n<CLM>\1\tUtilisation_ de la Prostaglandine E2 pour la préparation in vitro d'un greffon de cellules souches hématopoïétiques transduites par un vecteur viral contenant un gène permettant de corriger un défaut génétique de ces cellules, mettant en oeuvre la culture de cellules souches hématopoïétiques en présence du vecteur 15 viral, ledit greffon présentant une survie à long terme améliorée du greffon chez le patient présentant une maladie génétique des cellules sanguines à composante inflammatoire.\n<CLM>\1\tGreffon de cellules hématopcilétiques transduites susceptibles d'être obtenues 20 par un procédé selon l'une des-revendications 1 à 6, dans lequel le nombre de copies du gène corrigeant un défaut génétique par cellule est supérieur ou égal à 1,5.\n<CLM>\1\tGreffon selon la revendication 9, pour son utilisation pour le traitement d'une 25 maladie génétique des cellules sanguines à composante inflammatoire.