Brevet FR3067467A1 (20181214)

REVENDICATIONS1 Procédé pour caractériser la radiosensibilité d'un échantillon cellulaire d'un individu envers un rayonnement ionisant, ledit échantillon cellulaire ayant été obtenu à partir de cellules prélevées sur ledit individu, ledit procédé étant caractérisé en ce que - la radiosensibilité est déterminée à partir de la quantité de la protéine ATM phosphorylée pATM à l'état basal to, - ledit procédé ne comprend pas d'irradiation dudit échantillon cellulaire.\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 1, dans lequel on utilise pour la détermination de la quantité de la protéine pATM une méthode immuno-enzymatique.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2, dans lequel la quantité de la protéine ATM phosphorylée pATM est détectée par un test ELISA.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans lequel l'échantillon cellulaire est choisi parmi : un échantillon sanguin comprenant des lymphocytes ou des lymphoblastes et un échantillon issu d'une biopsie comprenant des fibroblastes.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, dans lequel (a) optionnellement, on isole des cellules nucléées cibles de l'échantillon cellulaire ; (b) on extrait les fractions totales ou les fractions cytoplasmiques et nucléaires ou les fractions nucléaires de l'échantillon cellulaire ; (c) on détermine sur les dites fractions dudit échantillon cellulaire, la quantité de la protéine ATM phosphorylée pATM à l'état basal t0; (d) on détermine la radiosensibilité de l'échantillon cellulaire en utilisant au moins le nombre moyen pATM o (nuc normalisé) ou le nombre moyen pATM o (cyto+nuc normalisé) ou le nombre moyen pATM (0 (total normalisé) ; et où - pATM (0 (nuc normalisé), exprimé en ppm, désigne la quantité moyenne de pATM présente dans le compartiment nucléaire à l'état basal to exprimée en ng divisée par la quantité totale de protéines cellulaires extraites dudit compartiment nucléaire exprimée en pg; 28 - pATM to (cyto+nuc normalisé), exprimé en ppm, désigne la quantité moyenne de pATM présente dans les compartiments cytoplasmiques et nucléaires à l'état basal to exprimée en ng divisée par la quantité totale de protéines cellulaires extraites desdits compartiments cytoplasmiques et nucléaires exprimée en pg; 5 - pATM to (total normalisé), exprimé en ppm, désigne la quantité totale moyenne de pATM extraite des cellules exprimée en ng divisée par la quantité totale de protéines extraites desdites cellules exprimée en pg.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, dans lequel les dites cellules nucléées cibles sont choisis parmi : des cellules mucosales, des cellules 10 épithéliales, des lymphoblastes, des lymphocytes et des fibroblastes, et encore plus préférentiellement parmi des lymphoblastes, des lymphocytes et des fibroblastes.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, dans lequel la radiosensibilité d'un échantillon cellulaire d'un individu envers un rayonnement 15 ionisant est déterminée sur des fibroblastes issus de biopsie dudit individu et dans lequel on considère que l'échantillon est radiorésistant si pATM to (nuc normalisé) k B, - on considère que l'échantillon est radiosensible si pATM to (nuc normalisé)\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, dans lequel la radiosensibilité d'un échantillon cellulaire d'un individu envers un rayonnement ionisant est déterminée sur des fibroblastes issus de biopsie dudit individu et dans lequel 30 - on considère que l'échantillon est radiorésistant si pATM to (cyto+nuc normalisé) k C, - on considère que l'échantillon est radiosensible si pATM to (cyto+nuc normalisé)\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, dans lequel la radiosensibilité d'un échantillon cellulaire d'un individu envers un rayonnement ionisant est déterminée sur des fibroblastes issus de biopsie dudit individu et dans lequel on considère que l'échantillon est radiorésistant si pATM to (total normalisé) k D, 10 - on considère que l'échantillon est radiosensible si pATM to (total normalisé)\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, dans lequel la radiosensibilité d'un échantillon cellulaire d'un individu envers un rayonnement ionisant est déterminée sur des lymphoblastes et/ou des lymphocytes issus de cellules sanguines dudit individu et dans lequel 35 - on considère que l'échantillon est radiorésistant si pATM to (total normalisé) k A, - on considère que l'échantillon est radiosensible si pATM to (total normalisé)\n<CLM>\1\tKit pour caractériser la radiosensibilité d'un échantillon cellulaire d'un individu envers un rayonnement ionisant, comprenant : a) des moyens d'extraction des fractions totales de l'échantillon cellulaire, b) des moyens de détermination sur les dites fractions dudit échantillon cellulaire de 10 la quantité de la protéine ATM phosphorylée pATM à l'état basal to.\n<CLM>\1\tUtilisation d'un kit selon la revendication 12 pour déterminer la radiosensibilité d'un échantillon cellulaire d'un individu envers un rayonnement ionisant.