Brevet FR3077883A1 (20190816)

REVENDICATIONS1. Procédé d'analyse d'un échantillon de biocarburant comprenant des esters méthyliques d'acides gras (EMAG) en vue de déterminer la teneur totale en polluants dérivés du glycérol (TG), caractérisé en ce que ; - on effectue l'extraction en phase solide du glycérol et de ses dérivés à partir de l'échantillon dans une colonne (A) contenant une phase stationnaire d'aminopropylsilane (APS), on élue ensuite, d'une part, la phase (F1) des esters méthyliques d'acides gras et, d'autre part, la phase (F2) contenant le glycérol libre et les esters dérivés du glycérol puis, - on sépare la phase (F2) contenant le glycérol libre et ses dérivés et on la mélange avec un kit enzymatique de façon à obtenir un composé coloré (CC) et, - on analyse ledit composé coloré en vue de mesurer la concentration de glycérol total (TG). Procédé d'analyse selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on analyse ledit composé coloré (CC) par spectroscopie à 505 nm. Procédé d'analyse selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'on élue, d'une part, la phase (F1) des esters méthyliques d'acides gras avec le solvant hexane et, d'autre part, la phase (F2) contenant le glycérol et ses dérivés avec un solvant à base de chloroforme et de méthanol. Procédé d'analyse selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'après sa séparation, on sèche la phase (F2) contenant le glycérol et ses dérivés par un flux d'azote (N2) qui avant d'être analysée par spectroscopie est diluée avec l'éthanol. Procédé d'analyse selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que le kit enzymatique comprend des composants choisis dans le groupe constitué de lipase, de de l'adénosine triphosphate (ATP), du glycérol kinase (GIC), du glycérol phosphate oxydase (GPO), d'un accepteur d'oxygène et du 4- aminoantipirine (4- AAP). Procédé d'analyse selon la revendication précédente, caractérisé en ce que le kit enzymatique est apte et destiné à obtenir ; - une première réaction (1) entre les esters dérivés du glycérol (MAG, DAG et TAG) qui, en présence de lipase, produit du glycérol et des acides gras, 10\n<CLM>\1\t3. 20\n<CLM>\1\t25\n<CLM>\1\t30\n<CLM>\1\t- une seconde réaction (2) entre le glycérol total et l'adénosine triphosphate (ATP) qui, en présence de glycérol kinase (GK), produit du glycérol-3-phosphate (G3P) et de l'adénosine di-phosphate (ADP), - une troisième réaction (3) dans laquelle le glycérol-3-phosphate en présence de 5 glycerol-3-phosphate oxydase et d'oxygène, produit du di-hydroxy-acétone phosphate (DAP) et du peroxyde d'hydrogène (H202) puis, - une quatrième réaction (4), en présence de peroxydase, d'un accepteur d'oxygène (OA) et de 4-aminoantipirine (4AAP), pour produire de l'eau et le dit composé coloré (CC). 10\n<CLM>\1\tProcédé d'analyse selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que les dérivés du glycérol sont les mono-acylglycérols (MAG), les diacylglycérols (DAG), les tri-acylglycérols (TAG) et le glycérol libre (FG).\n<CLM>\1\tUtilisation du procédé d'analyse selon l'une des revendications précédentes, pour l'analyse des polluants d'un biodiesel issu d'une trans-estérification à taux de conversion élevé.