Brevet FR3073750A1 (20190524)

REVENDICATIONS1. Nanoparticule lipidique marquée pour pouvoir être observée par microscopie électronique en transmission, la nanoparticule lipidique comprenant un coeur (10) lipidique entouré d'une coquille lipidique (20), la coquille lipidique (20) comprenant au moins une couche de surfactants lipidiques amphiphiles (21), et des surfactants hydrophiles fonctionnalisés (22) par un groupement S-H (50), la nanoparticule lipidique étant recouverte au moins localement par une couche métallique (60) liée aux groupements S-H (50) des surfactants hydrophiles fonctionnalisés (22) via une liaison de coordination métallique.\n<CLM>\1\tNanoparticule selon la revendication 1, caractérisée en ce que la couche métallique (60) est en or, en argent, en cuivre, en nickel, en cobalt, en iridium ou en un mélange de ceux-ci.\n<CLM>\1\tNanoparticule selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisée en ce que la couche métallique (60) forme une couche continue autour des nanoparticules lipidiques.\n<CLM>\1\tNanoparticule selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que le coeur lipidique des nanoparticules lipidiques comprend une ou plusieurs molécules d'intérêt (41), tel qu'un principe actif, un agent d'imagerie ou un médicament.\n<CLM>\1\tNanoparticule selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la coquille (20) comprend en outre des surfactants hydrophiles additionnels (23).\n<CLM>\1\tNanoparticule selon la revendication précédente, caractérisée en ce que des agents de ciblage (42) sont greffés sur les surfactants hydrophiles additionnels (23) et/ou sur les surfactants hydrophiles fonctionnalisés (22), les agents de ciblage (42) 21 étant, par exemple, des ligands biologiques de ciblage tels que des anticorps ou des peptides.\n<CLM>\1\tNanoparticule selon l'une des revendications 5 et 6, caractérisée 5 en ce que les surfactants hydrophiles additionnels (23) sont des polyéthylènes glycols et/ou en ce que les surfactants hydrophiles fonctionnalisés (22) sont des polyéthylènes glycols fonctionnalisés.\n<CLM>\1\tNanoparticule selon l'une quelconque des revendications 10 précédentes, caractérisée en ce que le coeur (10) de la nanoparticule est un mélange d'une cire et d'une huile végétale, telle que l'huile de soja, et en ce que la coquille lipidique (20) comprend une monocouche de phospholipides (21).\n<CLM>\1\tProcédé de caractérisation de nanoparticules lipidiques, 15 comprenant les étapes successive suivantes : - fourniture d'une solution aqueuse contenant des nanoparticules lipidiques marquées telles que définies dans l'une quelconque des revendications 1 à 8, - mise en place de la solution aqueuse dans une chambre d'observation d'un porte-objet de microscope électronique en transmission, et fermeture 20 de la chambre d'observation, - caractérisation des nanoparticules lipidiques marquées dans la solution aqueuse par microscopie électronique en transmission.\n<CLM>\1\tProcédé de marquage de nanoparticules lipidiques, pour obtenir 25 des nanoparticules lipidiques telles que définies dans l'une quelconque des revendications 1 à 8, comprenant les étapes successives suivantes : a) fourniture d'une solution aqueuse comprenant des nanoparticules lipidiques, les nanoparticules lipidiques comprenant un coeur (10) lipidique entouré d'une coquille lipidique (20), la coquille lipidique (20) comprenant au moins une couche de 22 surfactants lipidiques amphiphiles (21), et des surfactants hydrophiles fonctionnalisés (22) par un groupement S-R avec R un groupement de protection de la fonction thiol, b) ajout d'une molécule de déprotection à la solution aqueuse, de manière à déprotéger le groupement S-R pour obtenir des surfactants hydrophiles 5 fonctionnalisés (22) avec un groupement S-H (50), c) dissolution d'un sel métallique dans la solution de manière à recouvrir au moins localement les nanoparticules lipidiques avec une couche métallique (60) via une liaison de coordination métallique avec le groupement S-H (50) des surfactants hydrophiles fonctionnalisés (22). 10\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 10, caractérisé en ce que le sel métallique est ajouté en excès par rapport au groupement S-H des surfactants hydrophiles fonctionnalisés (22). 15\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications 10 et 11, caractérisé en ce que le sel métallique est un sel d'or, d'argent, de cuivre, de nickel, de cobalt, d'iridium ou un mélange de ces sels.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 10 à 12, 20 caractérisé en ce que la molécule de déprotection est du dithiothréitol.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 10 à 13, caractérisé en ce que la solution aqueuse fournie à l'étape a) est obtenue selon les étapes successive suivantes : 25 al) préparation d'une phase huileuse comprenant un ou plusieurs composés lipidiques pour former le coeur lipidique (10) des nanoparticules lipidiques, et les surfactants lipidiques amphiphiles (21), a2) préparation d'une phase aqueuse, 23 a3) dispersion de la phase huileuse dans la phase aqueuse, par exemple sous l'action d'un cisaillement, telle que par sonication, pour former des nanoparticules lipidiques, les surfactants hydrophiles fonctionnalisés (22) par un groupement S-R, 5 étant ajoutés lors de l'étape a2) ou a3).