Brevet FR3068361A1 (20190104)

REVENDICATIONS1. Système fluidique (1) de production de vésicules extracellulaires (EV) à partir de cellules productrices (6), comprenant au moins un récipient (4), un milieu liquide (5) contenu par le récipient (4) et des cellules productrices (6), caractérisé en ce qu'il comprend également des microporteurs (3) en suspension dans le milieu liquide (5), la majorité des cellules productrices (6) étant adhérentes à la surface des microporteurs (3), et un agitateur (7) de milieu liquide (5), l'agitateur (7) et la forme et les dimensions du récipient (4) étant adaptés à la génération d'un écoulement turbulent du milieu liquide (5) dans le récipient (4).\n<CLM>\1\tSystème fluidique (1) selon la revendication 1, dans lequel l'agitateur (7) du milieu liquide (5) et les dimensions du récipient (4) sont 15 adaptés à commander un écoulement du milieu liquide (4), la longueur de Kolmogorov de l'écoulement étant inférieure ou égale à 75 pm.\n<CLM>\1\tSystème fluidique (1) selon la revendication 1 ou 2, comprenant une sortie (9) et une connectique (13) reliée à la sortie (9), la 20 connectique (13) étant susceptible de comprendre du milieu liquide (5) et des vésicules extracellulaires (EV).\n<CLM>\1\tSystème fluidique (1) selon l'une des revendications 1 à 3, dans lequel un agitateur (7) de milieu liquide est un agitateur rotatif dont 25 la ou les vitesses de rotation, la forme et la taille sont adaptées, avec la forme et les dimensions du récipient (4), à la génération d'un écoulement turbulent du milieu liquide (5) dans le récipient.\n<CLM>\1\tSystème fluidique (1) selon l'une des revendications 1 à 4 dans 30 lequel les microporteurs (3) sont des microbilles (14), le diamètre des microbilles (14) étant compris entre 100 pm et 300 pm. 35\n<CLM>\1\tSystème fluidique (1) selon l'une des revendications 1 à 5 comprenant un séparateur (15) de vésicules extracellulaires (EV), relié fluidiquement au récipient (4) de manière à être susceptible de réintroduire 5 dans le récipient (4) un milieu liquide (5) appauvri en vésicules extracellulaires (EV).\n<CLM>\1\tProcédé de production ex vivo de vésicules extracellulaires (EV) à partir de cellules productrices (6), comprenant : 10 - une commande d'un agitateur (7) entraînant un écoulement turbulent d'un milieu liquide (5) dans un récipient (4), le récipient comprenant une sortie (9), le milieu liquide (5) comprenant des cellules productrices (6) adhérentes sur la surface de microporteurs (3), les microporteurs (3) étant en suspension dans le milieu liquide (5), et - une collecte du milieu liquide (5) comprenant des vésicules extracellulaires (EV) en sortie (9) du récipient (4).\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 7 dans lequel on agite le milieu liquide (5) pendant plus de trente minutes.\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 7 ou 8, dans lequel on commande l'agitateur (7) pour entraîner un écoulement du milieu liquide (5), la longueur de Kolmogorov de l'écoulement étant inférieure ou égale à 75 pm, préférentiellement inférieure ou égale à 75 pm.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications 7 à 9 dans lequel un séparateur appauvrit une partie du milieu liquide (5) collecté en sortie du récipient (4) en vésicule extracellulaire (EV), et dans lequel on réintroduit la partie du milieu liquide (5) dans le récipient (4). 25 30 36\n<CLM>\1\tVésicules extracellulaires (EV) susceptibles d'être obtenues par le procédé selon l'une des revendications 7 à\n<CLM>\1\t5\n<CLM>\1\tComposition pharmaceutique comprenant des vésicules extracellulaires (EV) selon la revendication\n<CLM>\1\t13. Composition pharmaceutique selon la revendication 12, pour son utilisation en médecine régénérative. 10