Brevet FR3048514A1 (20170908)
REVENDICATIONS1. Microscope (12) optique non-linéaire, comprenant - - une source (28) de faisceau laser excitateur d'un échantillon (16) à tester, du type de Bessel, - un détecteur (36) des signaux cohérents émis en transmission par l'échantillon (16) à tester, en réponse à l'excitation par le faisceau laser excitateur, et - un filtre (38) disposé entre l'échantillon à tester (16) et le détecteur (36), pour empêcher le détecteur (36) de détecter les signaux émis en transmission par l'échantillon (16) à tester, s'étendant au voisinage de l'axe optique (Z) du microscope (12).\n<CLM>\1\tMicroscope selon la revendication 1, dans lequel la source de faisceau laser excitateur comprend : - un émetteur (30) de faisceau laser pulsé, du type de Gauss, - un modulateur spatial de lumière (32) pour moduler le profil spatial du faisceau laser pulsé, et - un premier objectif (34) pour guider le faisceau modulé vers l'échantillon (16), le premier objectif (34) ayant de préférence une ouverture numérique supérieure à 0,5.\n<CLM>\1\tMicroscope selon la revendication 2, dans lequel le modulateur spatial de lumière (32) comprend, de préférence consiste en un élément, choisi parmi : - un axicon, - un élément diffractif, - un modulateur à cristaux liquides, - une lentille liquide modulable, et - une lame de phase, de préférence combiné avec une optique de focalisation, notamment une lentille.\n<CLM>\1\tMicroscope selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel le filtre (38) est adapté à bloquer les faisceaux émis par l'échantillon (16) à tester correspondant à une ouverture numérique inférieure ou égale au tiers, de préférence aux deux-tiers, de l'ouverture numérique du faisceau excitateur.\n<CLM>\1\tMicroscope selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel le filtre (38) est conformé pour bloquer les signaux cohérents émis par l'échantillon (16) correspondant à une 3048514 13 ouverture numérique inférieure à 0,1, de préférence inférieure à 0,2, et/ou supérieure à 0,8, de préférence supérieure à 0,9.\n<CLM>\1\tMicroscope selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant encore un 5 condenseur (42) ou un deuxième objectif, disposé entre l'échantillon à tester et le détecteur de signaux.\n<CLM>\1\tMicroscope selon la revendication précédente, comprenant une source de lumière blanche (40), le condenseur (42) ou le deuxième objectif étant adapté à guider la lumière blanche vers 10 l'échantillon (16) à tester, et une caméra (44) pour produire une image à partir de la lumière provenant de l'échantillon (16) à tester, illuminé par la lumière blanche.\n<CLM>\1\tMicroscope selon la revendications 2 en combinaison avec la revendication 6 ou 7, dans lequel le premier objectif (34), d'une part, et le condenseur (42) ou le deuxième objectif, d'autre part, 15 sont disposés de part et d'autre de l'échantillon (16) à tester.\n<CLM>\1\tMicroscope selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel la source (28) de faisceau laser excitateur ou l'émetteur (30) de faisceau laser pulsé, le cas échéant, a un taux de répétition supérieur à 10 MHz et/ou une puissance supérieure à 100 mW. 20\n<CLM>\1\tMicroscope selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel le faisceau laser excitateur ou pulsé, le cas échéant, est un train d'impulsions femtoseconde.\n<CLM>\1\tMicroscope selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant en outre des 25 moyens de balayage du faisceau laser excitateur sur l'échantillon à tester, notamment en ligne ou point par point.\n<CLM>\1\tMicroscope selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant un support de lame adapté à recevoir l'échantillon à tester. 30\n<CLM>\1\tScanner de lames (10) comprenant un microscope (12) optique non-linéaire selon l'une quelconque des revendications précédentes, une platine (14), de préférence motorisée, sur laquelle l'échantillon (16) peut être posé, et un enregistreur (20) des images détectées par le détecteur (36) des signaux cohérents. 3048514 14\n<CLM>\1\tProcédé de microscopie optique non-linéaire, mis en oeuvre notamment dans un microscope selon l'une quelconque des revendications 1 à 12 ou un scanner de lames selon la revendication 13, comprenant les étapes (104) consistant à : 5 - exciter avec un faisceau laser excitateur du type de Bessel, un échantillon à tester, - filtrer les signaux cohérents émis en transmission par l'échantillon, au voisinage de l'axe optique du microscope optique, et - détecter les signaux émis par l'échantillon ainsi filtrés. 10\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 14, dans lequel les signaux cohérents sont du type génération de second harmonique, génération de troisième harmonique, diffusion Raman anti-Stokes cohérents, diffusion Raman stimulée, mélanges à quatre ondes et somme de fréquences.\n<CLM>\1\tProcédé de scan de lames d'échantillons histologiques, comprenant les étapes consistant à : 15 - balayer (106) l'échantillon (16) pour observer différents points ou lignes de l'échantillon (16) en mettant en oeuvre un procédé de microscopie non linéaire selon la revendication 14 ou 15 ; et - remplacer (110,\n<CLM>\1\tl'échantillon à tester.