Brevet FR3038985A1 (20170120)
REVENDICATIONS1. Utilisation d'une composition comprenant - un anticorps donneur couplé à une première molécule luminescente, et - au moins un anticorps accepteur couplé à une deuxième molécule luminescente, lesdits anticorps donneur et accepteur reconnaissant chacun spécifiquement un épitope (déterminé et) différent de ladite protéine CCND1, lesdites première et deuxième molécules luminescentes étant telles que la longueur d'onde d'émission de la première molécule luminescente correspond à la longueur d'onde d'excitation de la deuxième molécule luminescente, pour la mise en oeuvre d'une méthode de détection quantitative in vitro de la protéine codée par le gène Ccndl dans un échantillon (comprenant des protéines).\n<CLM>\1\tMéthode de quantification in vitro de la protéine Cycline D1, notamment représentée par la séquence SEQ ID NO : 1, dans un échantillon comprenant des protéines, ladite méthode comprenant les étapes suivantes : - une étape de mise en contact dudit échantillon avec o un anticorps donneur couplé à une première molécule luminescente, et o au moins un anticorps accepteur couplé à une deuxième molécule luminescente, lesdits anticorps donneur et accepteur reconnaissant chacun spécifiquement un épitope (déterminé et) différent de ladite protéine CCN D1, lesdites première et deuxième molécules luminescentes étant telles que la longueur d'onde d'émission de la première molécule luminescente correspond à la longueur d'onde d'excitation de la deuxième molécule luminescente, et - une étape de détection et de quantification de ladite protéine Cycline Dl.\n<CLM>\1\tMéthode selon la revendication 2, dans laquelle l'étape de détection et de quantification consiste en - une première sous étape d'exposition de l'échantillon à une source 3038985 - 26 - 5\n<CLM>\1\t105.\n<CLM>\1\t15\n<CLM>\1\t20\n<CLM>\1\t25 30 35 lumineuse excitatrice de longueur d'onde correspondant à la longueur d'onde d'absorption de la molécule fluorescente couplée audit anticorps donneur pendant une durée déterminée, et - une seconde étape de détection de la luminescence émise après l'extinction de la source lumineuse excitatrice. Méthode selon la revendication 2 ou 3, dans laquelle les anticorps donneur et accepteur sont choisis parmi les anticorps suivants : ab1, ab3, SP4 et SC450. Méthode selon l'une quelconque des revendications 2 à 4, dans laquelle la première molécule luminescente est un cryptate de terre rare ou de lanthanide, notamment le cryptate d'europium ou le cryptate de terbium. Méthode selon l'une quelconque des revendications 2 à 5, dans laquelle la deuxième molécule luminescente est d2, DY647, le Cy5, l'Alexa647, la fluorescéine et les protéines fluorescentes GFP. Méthode selon l'une quelconque des revendications 2 à 7, dans laquelle l'échantillon est mis en contact avec - l'anticorps donneur SC450, et - l'un au moins des anticorps accepteurs suivants : ab1, ab3 et SP4. Composition comprenant : - un anticorps donneur couplé à une première molécule luminescente, et - au moins un anticorps accepteur couplé à une deuxième molécule luminescente, lesdits anticorps donneur et accepteur reconnaissant chacun spécifiquement un épitope (déterminé et) différent de ladite protéine Cycline D1, lesdites première et deuxième molécules luminescentes étant telles que la longueur d'onde d'émission de la première molécule luminescente correspond à la longueur d'onde d'excitation de la deuxième molécule luminescente, pour son utilisation dans le cadre du pronostic de résistance à une chimiothérapie d'une tumeur cancéreuse, ou dans le cadre du pronostic de développement de maladies neurodégénératives, les cardiopathies et la fertilité humaine. 3038985 -27-\n<CLM>\1\tComposition selon la revendication 8, dans laquelle les anticorps donneur et accepteur sont choisis parmi les anticorps suivants : ab1, ab3, SP4 et SC450.\n<CLM>\1\tComposition selon la revendication 8 ou 9, dans laquelle l'échantillon est mis en contact avec - l'anticorps donneur SC450, et - l'un au moins des anticorps accepteur suivants : ab1, ab3 et SP4. 5 10