Brevet FR3038723A1 (20170113)
REVENDICATIONS1. Procédé d'estimation d'une quantité d'un analyte (30) dans un échantillon liquide (10), le procédé comportant les étapes suivantes : a) mélange dudit échantillon (10) avec un premier réactif (22) apte à former un indicateur coloré (24) en présence dudit analyte, dans l'échantillon, b) suite à ce mélange, illumination dudit échantillon (10) à l'aide d'une source de lumière (11), apte à émettre un rayonnement lumineux (12) vers l'échantillon, c) acquisition, à l'aide d'un photodétecteur matriciel (16), d'une image (I, l') d'un rayonnement lumineux (14, 14') transmis ou réfléchi par l'échantillon, d) estimation d'une quantité dudit analyte (30) en fonction de ladite image, le procédé étant caractérisé en ce que l'étape d) comporte les sous-étapes suivantes : i) sélection d'une zone de mesure (ZM), dans ladite image, ladite zone de mesure comprenant une pluralité de pixels, ii) détermination, à l'intérieur de la zone de mesure (ZM), d'une région d'intérêt (ROI) et d'au moins une région d'exclusion (REX), iii) estimation de ladite quantité d'analyte (30) à partir d'une grandeur (k) représentative de l'intensité des pixels dans ladite zone d'intérêt, sans prise en compte de l'intensité des pixels de chaque région d'exclusion.\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 1, dans lequel la sous-étape ii) comprend la détermination d'au moins une région d'exclusion (REX) ladite région d'intérêt (ROI) correspondant à une partie de ladite zone de mesure (ZM) ne comportant pas chaque région d'exclusion ainsi déterminée.\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 1 ou la revendication 2, dans lequel l'échantillon comporte des particules (20), le procédé comportant le mélange de l'échantillon avec un deuxième réactif (26), dit réactif de lyse, apte à lyser lesdites particules.\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 3, dans lequel chaque zone d'exclusion correspond à la trace (28) d'une bulle d'air (27), ladite bulle d'air étant formée suite à la lyse desdites particules.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications 3 ou 4, comportant également, lors de l'étape d), - la détermination d'un indicateur de lyse (Ind(t,)) à partir de l'image acquise lors de l'étape c), 3038723 23 - l'estimation de la quantité d'analyte étant réalisée lorsque cet indicateur de lyse satisfait à un critère de lyse prédéterminé.\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 5, dans lequel lorsque l'indicateur de lyse ne satisfait pas audit critère de lyse, l'étape c) est réitérée, de telle sorte qu'une pluralité d'indicateurs de lyse (Ind(t,)) 5 sont déterminés, à partir d'images (Ind(t,), (Ind(t,4)) acquises à différents instants (t,, t,_1),\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 6, dans lequel chaque indicateur de lyse est déterminé en formant une image de comparaison (Ai), représentant une comparaison entre deux images (Ind(t,), (Ind(t,4)) acquises à différents instants (t,,\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant une étape 10 d'introduction de l'échantillon dans une chambre fluidique (13), les étapes c) et d) étant effectuées à partir d'un instant (T) prédéterminé après ladite introduction.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant l'acquisition d'une pluralité d'images (I, V) successives du rayonnement lumineux transmis ou réfléchi par l'échantillon, la quantité d'analyte étant déterminée, lors de l'étape d), en fonction de 15 l'évolution de l'intensité de chaque image en fonction du temps.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel, lors de l'étape d), ladite grandeur (k) représentative de l'intensité des pixels dans ladite région d'intérêt (ROI) comporte l'intégrale ou la moyenne des pixels dans ladite région d'intérêt.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel la région 20 d'exclusion (REX) est déterminée par seuillage de ladite image (I, I'), ou par segmentation de ladite image (1,1').\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 3 à 11, dans lequel lesdites particules (20) sont des globules rouges.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'analyte est le 25 glucose.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel le photodétecteur (16) est situé à une distance (d) de l'échantillon inférieure à 1 cm. 3038723 24\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel il n'y a aucune optique de grossissement entre l'échantillon (10) et le photodétecteur (16).\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'échantillon (10) est disposé entre ladite source de lumière (11) et ledit photodétecteur (16), de telle sorte 5 que le photodétecteur détecte un rayonnement (14) transmis par l'échantillon (10), l'image acquise par le photodétecteur étant alors une image (I) dite de transmission.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 15, dans lequel l'échantillon est disposé face à la source de lumière (11) et au photodétecteur (16), de telle sorte que le photodétecteur détecte un rayonnement (14') réfléchi ou rétrodiffusé par l'échantillon (10), 10 l'image acquise par le photodétecteur étant alors une image (I') dite de réflexion.\n<CLM>\1\tDispositif pour estimer la quantité d'un analyte (30), dans un échantillon liquide (10), le dispositif comprenant : une source de lumière (11) apte à émettre un rayonnement lumineux (12), en direction dudit échantillon (10), 15 un support, pour maintenir l'échantillon (10) entre ladite source de lumière (11) et un photodétecteur matriciel (16), le photodétecteur matriciel (16), étant agencé pour acquérir une image (1,1') du rayonnement transmis ou réfléchi (22, 22') par l'échantillon, lorsque ce dernier est exposé audit rayonnement lumineux (12), 20 un processeur, apte à estimer une quantité d'analyte dans l'échantillon (10), le dit processeur étant apte à mettre en oeuvre l'étape d) du procédé objet des revendications 1 à\n<CLM>\1\t19. Dispositif selon la revendication 18, dans lequel le photodétecteur (16) est situé à une distance (d) de l'échantillon inférieure à 1 cm, et/ou dans lequel il n'y a aucune optique de 25 grossissement entre l'échantillon (10) et le photodétecteur (16).