Brevet FR3049957A1 (20171013)
REVENDICATIONS1. Procédé de production d'enzymes cellulolytiques ou hémicellulolytiques comprenant : une phase a) de croissance d'un microorganisme cellulolytique en réacteur fermé, en présence d'au moins un substrat carboné de croissance à une concentration comprise entre 10 et 90 g/L, à une température de 25- 30°C et un pH de 4-5,5, - une phase b) de production des enzymes dans laquelle au moins un substrat carboné inducteur est introduit à une température de 25-27°C et un pH de 4-5, procédé dans lequel - ledit substrat inducteur est un marc prétraité issu d'un procédé de prétraitement de matériau lignocellulosique, ledit marc n'ayant pas subi d'hydrolyse enzymatique et étant introduit en mode fed-batch ou continu, - ledit marc montre un rendement en hydrolyse enzymatique d'au moins 80% après 96h, ladite hydrolyse étant conduite à 50°C et pH 4.8 sur ledit marc à 15% pds de matière sèche (MS) avec 10 mg d'enzymes CELLIC® CTEC2 par gramme de MS, ledit rendement étant le rapport de la masse de sucres simples libérés par l'hydrolyse enzymatique divisé par la masse théorique maximale qui serait obtenue si toute la cellulose, les hémicelluloses et les oligomères issus du prétraitement étaient hydrolysés, - ledit marc prétraité mis en suspension à température ambiante, à 10% pds de MS, présente une viscosité apparente inférieure à 1 Pa.s pour un taux de cisaillement de 10 s-1, de préférence inférieure à 0.15 Pa.s. - ledit marc est introduit à un débit compris entre 0.3 et 0.8 gramme de MS par litre de milieu et par heure en mode continu ; en mode fed-batch la quantité de marc ajoutée toutes les f heures, f étant compris entre 0,5h et 48h, est comprise entre 0.3f et 0.8f gramme de matière sèche par litre de milieu.\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 1 dans lequel la viscosité apparente du milieu de l'étape b) reste inférieure à 10 Pa.s pour un taux de cisaillement de 10 s-1, de préférence inférieure à 1 Pa.s. 3049957 17\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une revendication 1 ou 2 dans lequel le marc a été lavé avant d'être introduit.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une revendication 1 ou 2 dans lequel le marc n'a pas été lavé avant d'être introduit. 5\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications précédentes dans lequel ledit microorganisme cellulolytique est un champignon de l'espèce Trichoderma reesei.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications précédentes dans lequel le prétraitement est une explosion à la vapeur en condition acide.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications précédentes opérant en phase b) en l'absence 10 de sucre ajouté.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications précédentes dans lequel ledit marc prétraité est le seul substrat inducteur.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications précédentes dans lequel ledit marc prétraité est formé d'un liquide et d'un solide, le solide contient 20-70% de matière sèche 15 dont 20-50% de lignine.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications précédentes dans lequel ledit marc prétraité est formé d'un liquide et d'un solide , le solide dudit marc prétraité contient en outre 30-60% pds de cellulose et 1-10% pds de composés minéraux et d'hémicellulose, et le liquide contient 30-80% pds de sucres. 20\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications précédentes dans lequel dans la phase où le marc est ajouté, la concentration p02 d'oxygène dissous à saturation en oxygène dans le milieu à pression atmosphérique est maintenue supérieure à 30%.\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications précédentes dans lequel ledit marc prétraité est une partie du marc prétraité issu d'une étape de prétraitement de biomasse 25 lignocellulosique, l'autre partie du marc prétraité étant introduit dans une étape d'hydrolyse enzymatique réalisée en présence des enzymes obtenues par ledit procédé de production d'enzymes, l'hydrolysat obtenu étant envoyé dans une étape de fermentation éthanolique, l'effluent obtenu étant distillé pour séparer l'éthanol. 3049957 18\n<CLM>\1\tProcédé selon la revendication 12 dans lequel ladite partie du marc prétraité est utilisée directement dans la phase b).\n<CLM>\1\tProcédé selon l'une des revendications 12 ou 13 dans lequel une partie ou la totalité du liquide contenu dans ladite partie du marc prétraité est séparée, et le marc obtenu est 5 introduit dans la phase b).