Brevet FR3043779A1 (20170519)
REVENDICATIONS1. Système de détection électrochimique de molécules d'intérêt, caractérisé en ce que ledit système comprend : - un matériau conducteur, - au moins un nanomatériau portant des fonctions positives, lié covalemment audit matériau conducteur, - au moins une molécule redox, et - au moins une sonde oligonucléotidique simple brin ciblant une molécule d'intérêt, ladite molécule redox étant liée covalemment à la fois audit nanomatériau et à la sonde oligonucléotidique, le nombre de fonctions positives dudit nanomatériau étant supérieur au nombre de sondes oligonucléotidiques.\n<CLM>\1\tSystème de détection électrochimique selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit nanomatériau portant des fonctions positives est choisi parmi le groupe comprenant : - un dendrimère, préférentiellement un dendrimère de type de poly(amidoamine) notamment de deuxième, quatrième ou sixième génération, - des particules métalliques comme des nanoparticules d'or, - des nanoparticules magnétiques, telles que l'oxyde de fer, - des nanomatériaux hybrides à base de chitosan, et - des polymères conducteurs éventuellement modifiés par des fonctions positives.\n<CLM>\1\tSystème de détection électrochimique selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que ledit matériau conducteur est formé de carbone, en particulier des nanotubes de carbone, de carbone vitreux, de graphite, de graphène ou d'un métal.\n<CLM>\1\tSystème de détection électrochimique selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que ledit matériau conducteur 3043779 29 est absent dudit système lorsque ledit nanomatériau porteur de fonctions positives est conducteur.\n<CLM>\1\tSystème de détection électrochimique selon l'une quelconque des 5 revendications 1 à 4, caractérisé en ce que ladite molécule redox est choisie dans le groupe comprenant le ferrocène, la quinone, le bleu de méthylène, les métalloporphyrines, le viologène.\n<CLM>\1\tSystème de détection électrochimique selon l'une quelconque des 10 revendications 1 à 5, caractérisé en ce que les sondes oligonucléotidiques ciblent au moins une molécule d'intérêt choisie indépendamment parmi un ADN, un ARN, une protéine ou une toxine.\n<CLM>\1\tSystème de détection électrochimique selon l'une quelconque des 15 revendications 1 à 6, caractérisé en ce que ledit système comprend : - au moins deux types de molécules redox dont les potentiels d'oxydoréduction sont distincts, et - au moins deux types de sondes oligonucléotidiques en simple brin chacun ciblant une molécule d'intérêt différente, 20 le même type de sondes oligonucléotidiques étant lié au même type de molécules redox.\n<CLM>\1\tSupport modifié pour la préparation du système de détection selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, comprenant : 25 un matériau conducteur, un nanomatériau portant des fonctions positives, et au moins une molécule redox, ledit nanomatériau étant situé entre ledit matériau conducteur et ladite molécule redox et étant lié covalemment à ces deux derniers. 30\n<CLM>\1\tKit de préparation d'un système de détection électrochimique selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, comprenant: (i) un support modifié tel que défini selon la revendication 8, et (ii) au moins un oligonucléotide ciblant une molécule d'intérêt. 3043779 30\n<CLM>\1\tMéthode de préparation d'un système de détection électrochimique selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, comprenant : (i) la mise en contact d'un support modifié tel que défini selon la 5 revendication 8 avec au moins un oligonucléotide fonctionnalisé ciblant une molécule d'intérêt ; (ii) la formation des liaisons covalentes entre le susdit support modifié et ledit oligonucléotide fonctionnalisé. io\n<CLM>\1\tMéthode électrochimique de détection d'au moins un type de molécule d'intérêt dans un échantillon, caractérisée en ce qu'elle comprend les étapes suivantes : (i) la mise en contact d'un système de détection tel que défini selon l'une quelconque des revendications 1 à 7 avec un 15 échantillon susceptible de contenir ladite molécule d'intérêt ; (ii) la mesure électrochimique du signal redox spécifique à ladite molécule d'intérêt.\n<CLM>\1\tMéthode électrochimique de détection selon la revendication 11, 20 caractérisée en ce qu'elle comprend, en plus des étapes (i) et (ii) et après l'étape (ii), le dosage quantitatif de ladite molécule d'intérêt en se rapportant à une courbe de calibration.\n<CLM>\1\tMéthode électrochimique de détection multiple d'au moins deux types 25 de molécules d'intérêt dans un échantillon, caractérisée en ce qu'elle comprend les étapes suivantes : (i) la mise en contact d'un système de détection tel que défini selon la revendication 7 avec un échantillon susceptible de contenir lesdites molécules d'intérêt ; 30 (ii) la mesure des signaux redox spécifiques auxdites molécules d'intérêt.\n<CLM>\1\tUtilisation d'un système de détection électrochimique tel que défini selon l'une quelconque des revendications 1 à 7 ou d'un kit de 3043779 31 préparation dudit système selon la revendication 9 pour diagnostiquer in vitro ou in vivo une maladie, pour identifier la résistance à un médicament et pour suivre la présence d'un médicament dans les fluides biologiques. 5\n<CLM>\1\tUtilisation d'un système de détection électrochimique tel que défini selon l'une quelconque des revendications 1 à 7 ou d'un kit de préparation dudit système selon la revendication 9 pour détecter la présence d'un pathogène ou une toxine dans un échantillon 10 agroalimentaire, pharmaceutique ou un effluent.