Brevet FR3050212A1 (20171020)
REVENDICATIONS1.- Procédé de détection et/ou de caractérisation de cellules tumorales (90), comprenant: - la fourniture d'une pluralité de gouttes (6) contenues dans un fluide porteur (8), au moins une des gouttes (6) comprenant au moins un agrégat (10) de particules (12) définissant un objet allongé selon un axe principal (X), au moins certaines gouttes (6) contenant une cellule (90) susceptible de produire au moins un élément cible du sécrétome d'une cellule tumorale propre à se fixer sur l'agrégat ; - la mesure d'au moins un paramètre physique caractéristique de la fixation d'un élément cible (37) du sécrétome d'une cellule tumorale sur l'agrégat (10) ; et - la détection et/ou la caractérisation de cellules tumorales (90) à partir de la mesure dudit au moins un paramètre physique. 2.- Procédé selon la revendication 1, ledit procédé étant un procédé de détection et/ou de caractérisation de cellules tumorales uniques comprenant : - la fourniture d'une pluralité de gouttes (6) contenues dans un fluide porteur (8), au moins une des gouttes (6) comprenant au moins un agrégat (10) de particules (12) définissant un objet allongé selon un axe principal (X), au moins certaines gouttes (6) contenant une cellule unique (90) ; - l'incubation des gouttes (6) contenant une cellule unique (90) dans des conditions et pendant une durée suffisante pour que la cellule unique (90) soit susceptible de produire au moins un élément cible (37) du sécrétome d'une cellule tumorale, propre à se fixer sur l'agrégat (10) ; - la mesure d'au moins un paramètre physique, chaque paramètre physique étant caractéristique de la fixation d'un élément cible (37) distinct du sécrétome d'une cellule tumorale sur l'agrégat (10) ; et - la détection et/ou la caractérisation de cellules tumorales uniques (90) à partir de la mesure dudit au moins un paramètre physique.\n<CLM>\1\t- Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel la cellule (90) est issue d'un fluide biologique et est choisie dans le groupe constitué par une cellule tumorale circulante (CTC) et une cellule tumorale disséminée (DTC). 4.- Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'étape de mesure comporte la mesure dudit au moins un paramètre physique localement 3050212 46 en une pluralité de points situés dans la goutte (6), l'étape de mesure comportant de préférence la détermination de l'intégrale des valeurs mesurées au sein de la goutte (6). 5.- Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel 5 l'étape de mesure est effectuée dans une chambre microfluidique sans circulation des gouttes. 6.- Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant : - la fourniture d'un dispositif comprenant un ensemble de mise en circulation (22) 10 de la goutte et une pluralité de zones de classement (94, 96), et un moyen de direction (98) de la goutte ou d'une partie de la goutte sélectivement vers une zone de classement (94, 96), - la décision de classement de la goutte (6) ou d'une partie de la goutte, la décision consistant à choisir sélectivement une zone de classement parmi la pluralité des 15 zones de classement (94, 96), - le transport de la goutte (6), respectivement d'une partie de la goutte, vers la zone de classement de la goutte (6) choisie lors de l'étape de décision. 7.- Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel 20 au moins une goutte comprend au moins deux entités de signalisation (34) distinctes, chacune des deux entités de signalisation (34) étant apte à former un complexe avec un élément cible distinct (37) sur l'agrégat (10), le procédé comprenant la mesure d'un signal indiquant la concentration de chacune des entités de signalisation (34) relocalisée. 25 8.- Procédé selon la revendication 7, dans lequel au moins certaines gouttes (6) comprennent une cellule tumorale susceptible de sécréter, cliver ou relarguer un ou plusieurs éléments du sécrétome de cellule tumorale, chaque éléments du sécrétome de cellule tumorale étant un élément cible distinct (37), la mesure du signal indiquant la concentration de chacune des entités de signalisation (34) relocalisées permettant une 30 quantification du ou des éléments du sécrétome de cellule tumorale. 9.- Appareil de détection et/ou de caractérisation de cellules tumorales (90) comprenant : - un ensemble de fourniture d'une pluralité de gouttes (6) contenues dans un fluide 35 porteur (8), au moins une des gouttes (6) comprenant au moins un agrégat (10) de particules (12) définissant un objet allongé selon un axe principal (X), au moins certaines 3050212 47 gouttes (6) contenant une cellule (90) tumorale susceptible de produire un élément cible (37) propre à se fixer sur l'agrégat (10), caractérisé en ce que l'appareil comprend un ensemble de mesure d'un paramètre physique caractéristique de la fixation d'un élément cible (37) sur l'agrégat (10), 5 l'appareil comprenant éventuellement, en outre: - un ensemble mise en circulation de la goutte (22), - un ensemble de décision de classement de la goutte, - un ensemble de tri de la goutte selon la décision de classement. 10 10.- Goutte de détection et/ou de caractérisation de cellules tumorales (90), comprenant une pluralité de particules propre à former un agrégat (10) de particules (12) définissant un objet allongé selon un axe principal (X), et une cellule tumorale (90) et éventuellement au moins un élément cible (37) du sécrétome de la cellule tumorale (90) propre à se fixer sur l'agrégat (10). 15 11.- Procédé de préparation de gouttes (6) de détection et/ou de caractérisation de cellules tumorales comprenant : - la dispersion, dans une masse de fluide (86) destinée à former des gouttes (6), de particules (12) propres à former un agrégat (10) définissant un objet allongé selon un 20 axe principal (X), et d'une pluralité de cellules (90), au moins certaines cellules (90) étant des cellules tumorales susceptibles de produire un élément cible (37) du sécrétome d'une cellule tumorale, puis - la dispersion de la masse de fluide (86) sous forme de gouttes (32), de sorte que chaque goutte comprenne une pluralité de particules (12) et qu'au moins certaines 25 gouttes (6) comprennent, en outre, une cellule (90), et - éventuellement la formation dans chaque goutte (6) d'au moins un agrégat (10) de particules (12) définissant un objet allongé selon un axe principal (X), l'agrégat (10) de particules (12) étant formé dans chaque goutte (6) après la dispersion.