Brevet FR3041644A1 (20170331)
REVENDICATIONS1. Polypeptide comprenant la séquence d'acides aminés suivante : W-S-Xl-W-X2-X3-C-S-X4-C-G (SEQ ID NO\n<CLM>\1\tdans laquelle : Xl, X2 et X3 représentent indépendamment les uns des autres, S ou G, X4 représente R-S ou V-S ou V-T, et les deux cystéines forment un pont disulfure.\n<CLM>\1\tPolypeptide selon la revendication 1, comprenant la séquence d'acides aminés suivante : W-S-G-W-S-S-C-S-R-S-C-G (SEQ ID NO\n<CLM>\1\tdans laquelle les deux cystéines forment un pont disulfure.\n<CLM>\1\tPolypeptide selon la revendication 1 consistant en la séquence d'acides aminés suivante : X5-W-S-X1-W-X2-X3-C-S-X4-C-G-X6 (SEQ ID NO\n<CLM>\1\tdans laquelle Xl, X2 et X3 représente indépendamment les uns des autres S ou G, X4 représente R-S ou V-S ou V-T, les deux cystéines forment un pont disulfure, X5 représente un atome d'hydrogène ou P ou A-P ou L-A-P ou V-L-A-P, et X6 représente un atome d'hydrogène ou L ou L-G ou L-G-L ou L-G-L-I ou L-G-L-I-F.\n<CLM>\1\tPolypeptide selon la revendication 1, consistant en la séquence d'acides aminés suivante : W-S-G-W-S-S-C-S-R-S-C-G (SEQ ID NO\n<CLM>\1\tdans laquelle les deux cystéines forment un pont disulfure.\n<CLM>\1\tPolypeptide selon la revendication 1, consistant en la séquence d'acides aminés suivante : W-S-Xl-W-X2-X3-C-S-X4-C-G (SEQ ID NO\n<CLM>\1\t3041644 30 dans laquelle Xl, X2 et X3 représente indépendamment les uns des autres S ou G, X4 représente R-S ou V-S ou V-T, et 5 les deux cystéines forment un pont disulfure, ledit polypeptide étant pratiquement dépourvu des formes réduite ou dimérique ou oligomérique dudit polypeptide ainsi que des dérivés dudit polypeptide dans lesquels les groupements thiols sont sous forme de sulfoxide ou de sulfone. 10\n<CLM>\1\tPolypeptide selon la revendication 1, consistant en la séquence d'acides aminés suivante: W-S-Xl-W-X2-X3-C-S-X4-C-G (SEQ ID NO\n<CLM>\1\tdans laquelle 15 Xl, X2, X3 et X4 ont la signification indiquée à la revendication 5, et les deux cystéines forment un pont disulfure, ledit polypeptide présentant une pureté supérieure à 80%, de préférence 85%, plus préférentiellement 90%, plus préférentiellement encore égale ou supérieure à 95%. 20\n<CLM>\1\tPolypeptide selon la revendication 1 consistant en la séquence d'acides aminés suivante : W-S-G-W-S-S-C-S-R-S-C-G (SEQ ID NO\n<CLM>\1\tdans laquelle les deux cystéines forment un pont disulfure, 25 ledit polypeptide étant pratiquement dépourvu des formes réduite ou dimérique ou oligomérique dudit polypeptide ainsi que des dérivés dudit polypeptide dans lesquels les groupements thiols sont sous forme de sulfoxide ou de sulfone.\n<CLM>\1\tPolypeptide selon la revendication 1, consistant en la séquence d'acides aminés suivante : 30 W-S-G-W-S-S-C-S-R-S-C-G (SEQ ID NO\n<CLM>\1\tdans laquelle les deux cystéines forment un pont disulfure, ledit polypeptide présentant une pureté supérieure à 80%, de préférence 85%, plus 35 préférentiellement 90%, plus préférentiellement encore égale ou supérieure à 95%. 3041644 31\n<CLM>\1\tProcédé d'obtention du polypeptide de séquence d'acides aminés SEQ ID NO 1: 5 W-S-XI-W-X2-X3-C-S-X4-C-G (SEQ ID NO\n<CLM>\1\tdans laquelle X1, X2 et X3 représente indépendamment les uns des autres S ou G, X4 représente R-S ou V-S ou V-T, et 10 les deux cystéines forment un pont disulfure, comprenant une étape de formation d'un pont disulfure en présence d'albumine dans le polypeptide de séquence SEQ ID NO 57: W-S-XI-W-X2-X3-C-S-X4-C-G (SEQ ID NO 57), 15 Xl, X2, X3 et X4 ayant la signification indiquée à la revendication 1, ledit polypeptide de séquence SEQ ID NO 57 étant en solution, de préférence en solution aqueuse. 20\n<CLM>\1\tProcédé d'obtention du polypeptide de séquence d'acides aminés SEQ ID NO 2: W-S-G-W-S-S-C-S-R-S-C-G (SEQ ID NO\n<CLM>\1\tdans laquelle 25 les deux cystéines forment un pont disulfure, comprenant une étape de formation d'un pont disulfure en présence d'albumine dans le polypeptide de séquence SEQ ID NO 58: W-S-G-W-S-S-C-S-R-S-C-G (SEQ ID NO\n<CLM>\1\t30\n<CLM>\1\tProcédé d'obtention du polypeptide de séquence SEQ ID NO 1 selon la revendication 9, ou du polypeptide de séquence SEQ ID NO 2 selon la revendication 10, caractérisé en ce que l'albumine et le polypeptide de séquence SEQ ID NO 57 ou l'albumine et le polypeptide de 3041644 32 séquence SEQ ID NO 58 sont présents dans un ratio albumine:polypeptide de 1:1 à 1:100, de préférence de 1:1 à 1:10 et plus préférentiellement 1:1.\n<CLM>\1\tProcédé d'obtention du polypeptide de séquence SEQ ID NO 1 selon l'une des 5 revendications 9 ou 11, ou du polypeptide de séquence SEQ ID NO 2 selon l'une des revendications 10 ou 11, caractérisé en ce que l'étape de formation d'un pont disulfure en présence d'albumine dans le polypeptide de séquence SEQ ID NO 57 ou dans le polypeptide de séquence SEQ ID NO 58 est réalisée à l'air ambiant. 10\n<CLM>\1\tProcédé d'obtention du polypeptide de séquence SEQ ID NO 1 selon l'une des revendications 9, 11 ou 12, ou du polypeptide de séquence SEQ ID NO 2 selon l'une des revendications 10, 11 ou 12, caractérisé en ce que l'étape de formation d'un pont disulfure en présence d'albumine dans le polypeptide de séquence SEQ ID NO 57 ou dans le polypeptide de séquence SEQ ID NO 58 est réalisée sans détacher le polypeptide de séquence SEQ ID NO 15 57 ou le polypeptide de séquence SEQ ID NO 58 de la résine utilisée pour la synthèse peptidique de ces polypeptides et en ce que le polypeptide de séquence SEQ ID NO 1 ou le polypeptide de séquence SEQ ID NO 2 est ensuite obtenu en séparant le polypeptide de la résine après l'étape de formation du pont disulfure. 20\n<CLM>\1\tPolypeptide de séquence SEQ ID NO 1 tel qu'obtenu par le procédé selon l'une des revendications 9, 11, 12 ou\n<CLM>\1\t15. Polypeptide de séquence SEQ ID NO 2 tel qu'obtenu par le procédé selon l'une des revendications 10 à\n<CLM>\1\t25\n<CLM>\1\tComposition pharmaceutique comprenant comme principe actif un polypeptide tel que décrit à l'une des revendications 1 à 8 et éventuellement un ou plusieurs excipients pharmaceutiquement acceptables. 30\n<CLM>\1\tPolypeptide selon l'une des revendications 1 à 8, pour son utilisation dans le traitement des pathologies neurodégénératives ou des traumatismes dans lesquels la régénération du système nerveux est nécessaire. 3041644 33\n<CLM>\1\tPolypeptide selon l'une des revendications 1 à 8, pour son utilisation dans le traitement de pathologies de type accidentel, traumatique ou dégénératif, notamment la maladie d'Alzheimer, la sclérose en plaque, la maladie de Parkinson, la section de la moelle épinière ou de nerfs périphériques, les traumatismes crâniens ou les lésions des nerfs optiques, 5 olfactifs, auditifs ou de tout nerf crânien ou périphérique.