Brevet FR3052170A1 (20171208)
REVENDICATIONS1. Microorganisme fongique modifié génétiquement pour la production de frambinone, ledit microorganisme présentant les caractéristiques suivantes : - la capacité à produire de la frambinone à partir de tyrosine ; et - une capacité faible ou une incapacité à dégrader la tyrosine en tyrosol, en p- hydroxyphényl acétaldéhyde et/ou en p-hydroxyphényl acétate.\n<CLM>\1\tMicroorganisme selon la revendication 1 caractérisé en ce que le microorganisme est choisi parmi les ascomycètes ou les basidiomycètes, avantageusement du genre des Saccharomycetales, encore plus avantageusement de la famille des Debaryomycetaceae, des Dipodascaceae ou des Saccharomycetaceae, de manière préférée du genre Yarrowia, Debaryomyces, Arxula, Scheffersomyces, Geotrichum, Pichia ou Saccharomyces, préférentiellement de l'espèce Yarrowia lipolytica Debaryomyces hansenii ou Saccharomyces cerevisiae. Microorganisme selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que le microorganisme comprend au moins une séquence hétérologue codant l'enzyme 4- coumarate:CoA ligase (4CL) ou benzalacétone synthase (BAS), avantageusement les enzymes 4CL et BAS. Microorganisme selon la revendication 3 caractérisé en ce qu'il comprend en outre au moins une séquence hétérologue ou surnuméraire codant l'enzyme tyrosine ammonia lyase (TAL) ou benzalacétone réductase (BAR), avantageusement les enzymes TAL et BAR. Microorganisme selon la revendication 3 ou 4 caractérisé en ce qu'il comprend en outre au moins une séquence hétérologue ou surnuméraire codant l'enzyme phénylalanine ammonia lyase (PAL) ou cinnamate 4-hydroxylase (C4H), avantageusement les enzymes PAL et C4H. Microorganisme selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce qu'il présente une activité hydroxyphényl pyruvate décarboxylase (HPPDC) inférieure ou égale à 2 x 10-6 kat par g de protéine, avantageusement inférieure ou égale à 5 x 10-7 35 kat par g de protéine.3.\n<CLM>\1\t5.\n<CLM>\1\t3052170 38\n<CLM>\1\tMicroorganisme selon la revendication 6 caractérisé en ce qu'il comprend au moins une mutation ou une délétion dans au moins un des gènes codant les enzymes suivantes : désaminase Aro8, désaminase Aro9, décarboxylase Aro10, décarboxylase Pdc5, décarboxylase Pdc6, alcool déshydrogénase (ADH), avantageusement Aro10, 5 Pdc5 et/ou Pdc6.\n<CLM>\1\tUtilisation d'un microorganisme fongique selon l'un des revendications 1 à 7 pour la production de frambinone, avantageusement par fermentation aérobie. 10\n<CLM>\1\tProcédé de production de frambinone comprenant la culture d'un microorganisme fongique selon l'un des revendications 1 à 7 dans un milieu comprenant de la tyrosine.\n<CLM>\1\tProcédé de production de frambinone comprenant la culture d'un microorganisme 15 fongique présentant une capacité à produire de la frambinone à partir de tyrosine dans un milieu comprenant de la tyrosine et un répresseur de la voie de dégradation de la tyrosine en tyrosol, en p-hydroxyphényl acétaldéhyde et/ou en p-hydroxyphényl acétate. 20\n<CLM>\1\tProcédé de production de frambinone selon la revendication 10 caractérisé en ce que le répresseur est le glutamate.\n<CLM>\1\tProcédé de production de frambinone selon la revendication 10 ou 11 caractérisé en ce que le microorganisme présente les caractéristiques déclinées aux revendications 2 25 à\n<CLM>\1\t13. Procédé de production de frambinone selon l'une des revendications 10 à 12 caractérisé en ce que le microorganisme est la souche industrielle Saccharomyces cerevisiae RK4 déposée auprès de la CNCM (Collection Nationale de Cultures de 30 Microorganismes, Institut Pasteur, 25 rue du Docteur Roux, 75724 Paris Cedex\n<CLM>\1\ten date du 1' Juin 2016, sous le numéro I-5101.