Brevet FR3045606A1 (20170623)
REVENDICATIONS1 - Complexes cationiques formés d'un ion lanthanide Ln3÷ et d'un ligand de formule (I) : X -N Y dans laquelle : - X et Y, identiques ou différents, représentent, chacun indépendamment, -CH2-(CH2)'-, -C1-12-(CH2)n-A-CH2CH2- ou -CH2-CR31114-C -, X se lisant sur la formule générale (I) de la gauche vers la droite et Y se lisant sur la formule générale (I) de la droite vers la gauche, avec : o n qui est égal à 1, 2 ou 3 ; A qui représente -NR2-, -0(CH2)20- ou -0-, avec R2 qui est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle ou -CH2R5, R5 représentant un groupe phényle, pyridinyle ou picolinyle ; R3 qui représente un groupe méthyle ; et o R'4 qui représente -NHR4, R4 représentant -H, -CH3, -CH2R6 ; R6 représentant un groupe phényle ou pyridinyle R1 représente : R7 avec : R7 qui représente -000, -CONH2, -CONHR9, - R 00, ou un groupe choisi (I) Rg N parmi : 3045606 93 avec R9 qui représente un atome d'hydrogène, un groupe méthyle, éthyle ou phényle ; et o R8 qui représente un atome d'hydrogène, de fluor, chlore, brome ou iode, un groupe -OH ou -NH2 ; 5 étant entendu qu'au moins un des enchainements X et Y est différent de -CH2-(0-12)n-, et leurs sels avec un anion, leurs solvats et hydrates ; à l'exception des complexes cationiques formés d'un ion lanthanide Ln3 et d'un ligand répondant à l'une des formule I.1) à (I.5) suivantes, et de leurs sels avec un 1 0 anion, leurs solvats et hydrates 00C "00C C 3045606 94 00C 00C -°0C C00- (1.5). 2 - Complexes selon la revendication 1 formés avec un ligand répondant à l'une des formules suivantes : 3045606 95 R4 H3C R1 (IB) (IC) N (IF) avec R1, R2, n et R4 qui sont tels que définis à la revendication 1, ainsi que leurs sels avec un anion, leurs solvats et hydrates. 3 - Complexes selon la revendication 1 ou 2 sous la forme d'un sel avec un 5 anion choisi parmi : Cl-, Br, F, NO3-, triflate, PF6-, SbF6-, B(Ph)4-, BF4-, les sulfates, carbonates, phosphates et carboxy ates. 4 - Complexes selon l'une des revendications 1 à 3 formés avec un ligand répondant à la formule (IA) : (LA) 10 dans laquelle n=1 et R2=H, et R1 est tel que défini à la revendication 1, ainsi que leurs sels avec un anice, solvats et hydrates. 5 - Complexes selon l'une des revendications 1 à 4 caractérisé en ce que R1 eprésente avec : 3045606 96 - R7 qui représente -000 ou -PR900 avec R9 qui représente un groupe méthyle ou éthyle ; ou bien R7 qui représente un groupe: - R8 qui représente un atome d'hydrogène, de fluor, chlore, brome ou iode; ainsi que leurs sels avec un anion, leurs solvats et hydrates. 5 6- Complexes selon la revendication\n<CLM>\1\tchoisis parmi les complexes de + 10 ainsi que leurs sels avec un anion, en particulier leur sel chlorhydrate, leurs solvats et hyd rates. 7- Complexes selon l'une des revendications 1 à 6, avec un ion lanthanide n3+, Ln étant Sm, Eu, Gd, Tb, Dy, Ho, Er, Tm, Yb ou Lu, avec Eu, Tb, Yb et Lu qui sont préférés. 15 8- Utilisation d'un complexe tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 7, ou d'un complexe cationique formé d'un ion lanthanide et d'un ligand de formule (1.1) à (1.5) telle que définie à la revendication 1, ou d'un de leurs sels avec un anion, leurs solvats ou hydrates, en tant qu'aide à la cristallisation l'une macromolécule biologique. 3045606 97 9 - Utilisation selon la revendication 8 caractérisée en ce que le complexf est utilisé en tant qu'agent nucléant et/ou en tant qu'agent cristallisant lors de cristallisation d'une macromolécule biologique. 10 - Utilisation selon la revendication 8 ou 9 caractérisée en ce que, 5 dans le complexe, Ln =Eu ou Tb et le complexe est également utilisé en tant qu'agent luminescent pour la détection de cristaux. 11 - Utilisation d'un complexe tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 7, ou d'un complexe cationique formé d'un ion lanthanide Ln3+ et d'un ligand de formule (1.1) à (1.5) telle que définie à la revendication 1, ou d'un de 10 leurs sels avec un anion, leurs solvats ou hydrates, en tant qu'aide à l'obtention de données structurales d'une macromolécule biologique. 12 - Utilisation selon la revendication 11 caractérisée en ce que le complexe est utilisé en tant qu'agent phasant lors de la détermination structurale par diffraction des rayons X. 15 13 - Utilisation selon la revendication 11 ou 12 caractérisée el que, dans le complexe, Ln =Eu ou Tb et le complexe est également utilisé en qu'aide au positionnement du cristal dans un faisceau de rayons X. 14 - Utilisation selon l'une des revendications 8 à 13 caractérisée en ce que la macromolécule biologique est choisie parmi les peptides, les protéines et les acides nucléiques, notamment les ADN ou ARN. 15 - Cristal dérivé d'une macromolécule biologique comprenant un complexe selon l'une des revendications 1 à 7 ou un complexe cationique formé d'un ion lanthanide Ln et d'un ligand de formule (I.1) à (1.5) telle que définie à la revendication 1, ou un de ses sels avec un anion, solvat ou hydrate. 16 - Cristal dérivé selon la revendication 15 caractérisé en ce que la macromolécule biologique est choisie parmi les peptides, les protéines et les acides nucléiques, notamment les ADN ou ARN. 17 - Procédé de cristallisation d'une macromolécule biologique, préférence choisie parmi les peptides, les protéines et les acides nuc notamment les ADN ou ARN, comprenant les étapes suivantes - disposer d'une. solution comprenant ladite macromolécule biologique c.. u . complexe tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 7, ou un complexe 3045606 98 cationique formé d'un ion lanthanide Ln3+ et d'un ligand de formule I.1) à (1.5) telle que définie à la revendication 1, ou un de ses sels avec un anion, solvat ou hydrate, - obtenir des cristaux de la macromolécule biologique à partir de ladite solution. 5 18 - Procédé de cristallisation selon la revendication 17 caractérisé ce que la solution comprend, en outre, un agent précipitant choisi parmi les sels que les sels d'ammonium, les sulfates, acétates, phosphates, citrates, formiates, tartrates tels que le tartrate de sodium ou de potassium, le tartrate double de sodium et de potassium, les chlorures, iodures et fluorures, par exemple NaCI ; les 10 polymères tels que les polyéthylèneglycols et la Jeffamine T; l'éthanol, le dioxane, le méthylpentanediol, le glycérol, l'isopropanol, 2-méthyl-2,4-pentanediol. 19 - Procédé de cristallisation selon la revendication 17 ou 18, caractérisé en ce que dans la solution, le complexe est présent à une concentration de 1 à 100 mM, préférentiellement à une concentration de 1 à 25 mM, et de manière 15 encore plus préférée à une concentration de 10 mM ± 10%. 20 - Procédé de cristallisation selon la revendication 17, 18 ou 19, caractérisé en ce que l'obtention de cristaux est réalisée par cristallisation par diffusion de vapeur, par dialyse, er batch ou encore dans un procédé de cristallisation en phase cubique de lipides. 20 21 - Procédé d'analyse ou de détermination de la structure d'une macromolécule biologique comprenant les étapes suivantes a) disposer d'un cristal dérivé de la macromolécule biologique tel que défini à la revendication 15 ou 16, b) analyser la structure cristalline de la macromolécule biologique à partir 25 dudit cristal dérivé. 22 - Procédé d'analyse ou de détermination selon la revendicatiu 21 caractérisé en ce que le cristal dérivé est obtenu selon un procédé de cristallisuion selon l'une quelconque des revendications 17 à\n<CLM>\1\t23 - Procédé d'analyse ou de détermination selon la revendication 21 30 ou 22 caractérisé en ce que le cristal dérivé est obtenu par trempage d'un cristal de .3 macromolécule biologique dans une solution d'un complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 7 ou d'un complexe cationique formé d'un ion lanthanide Ln 3045606 99 et d'un ligand de formule (1.1) à (1.5) telle que définie à la revendicà , ou d'un de leurs sels avec un anion, leurs solvats ou hydrates. 24 - Procédé d'analyse ou de détermination selon la revendication 21 ou 22 caractérisé en ce que le cristal dérivé est obtenu par trempage d'un cristal 5 dérivé de la macromolécule biologiq- r",htenu selon un procédé de cristallisation selon l'une quelconque des revendicail 1.7 à 20, dans une solution d'un complexe selon l'une des revendications 1 à 7 ou J'un complexe cationique formé d'un ion lanthanide Ln et d'un ligand de formule (1.1) à (1.5) telle que définie à la revendication 1, ou d'un de leurs sels avec un anion, leurs solvats ou hydrates. 25 - Procédé d'analyse ou de détermination selon l'une quelconque des revendications 21 à 24 caractérisé en ce que l'analyse de la structure cristalline de l'étape b) correspond à la détermination de la structure de la macromolécule biologique réalisée par diffraction des Rayons X (RX) ou à l'obtention de données structurales par la méthode SAXS ou MASC. 15