Brevet FR3038609A1 (20170113)
REVENDICATIONS1. Procédé de fabrication d'un hydrogel comprenant les étapes de : - a) polymérisation sol-gel d'au moins une molécule de formule (I) : Y1 Xa SI Y2 n Formule (I) dans laquelle : - n est un nombre entier supérieur ou égal à 2 ; 10 - A est un polymère organique de structure, préférentiellement d'origine synthétique pouvant être par exemple choisi parmi les protéines, les peptides tels que des dérivés du collagène, en particulier les séquences comprenant des répétitions de tripeptides Pro-Hyp-Gly ou Pro-Pro-Gly ou Asp-Pro-Gly ou Pro-Lys-Gly, des séquences peptidiques d'autoassernblage 15 comme Arg-Ala-Asp-Ala (SEQ ID 4), des oligoprolines, des oligoalanines, les polysaccharides, tels que l'acide hyaluronique et ses dérivés, les oligonucléotides, des polymères de C1-C6-alkylènes-glycols, ou de polyvinylpyrrolidone; - Xa est une liaison chimique ou un groupement espaceur préférentiellement 20 représenté par un radical divalent dérivé d'une chaîne hydrocarbonée aliphatique saturée ou insaturée comportant de 1 à 10 atomes de carbone, dans laquelle sont éventuellement intercalés, un ou plusieurs chaînons structuraux choisis parmi le groupe arylène, ou les fragments -0-, -S-, C(=0)-, SO2 ou -N(Ri)-, ladite chaîne étant non substituée ou substituée par 25 un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, les groupements hydroxyle, C1-C4 alkyle, benzyle et/ou phénéthyle ; - R1 représente un atome d'hydrogène, un groupement hydrocarboné aliphatique comportant de 1 à 6 atomes de carbones, un benzyle ou un phénéthyle ; 30 - Y1, Y2, Y3, identiques ou différents, représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, d'halogène, un groupement -0R2, un aryle ou une chaîne hydrocarbonée aliphatique saturée ou insaturée 3038609 39 comportant de 1 à 6 atomes de carbone éventuellement substitués par un atome halogène, un groupement aryle ou hydroxyle ; - R2 représente un atome d'hydrogène, un groupement aryle ou une chaîne hydrocarbonée aliphatique saturée ou insaturée comportant de 1 à 6 atomes 5 de carbone ; - au moins deux groupement Xa tels que définis ci-dessus étant reliés à des points d'accroches différents sur A; b) mise en présence d'eau, optionnellement conjointement à l'étape a) ; et c) récupération de l'hydrogel.\n<CLM>\1\tProcédé de fabrication d'un hydrogel selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit procédé comprend l'ajout conjointement ou successivement à l'étape a) d'au moins un type de molécule de formule (II) : Xb Si Z2 Z3 Formule (II) dans laquelle : - m est un nombre entier supérieur ou égal à 1, préférentiellement égal à 1 ; - B est un principe actif, préférentiellement une biomolécule ou un fluorophore, pouvant être par exemple choisi parmi un peptide, un oligopeptide, une protéine, telle que le collagène, un acide désoxyribonucléique, un acide ribonucléique, un polysaccharide, tel qu'une pectine, un chitosane, un acide hyaluronique, un polysaccharide polyarabinose et polygalactose, et un glycolipide; - Xb est une liaison chimique ou un groupement espaceur préférentiellement représenté par un radical divalent dérivé d'une chaîne hydrocarbonée aliphatique saturée ou insaturée comportant de 1 à 10 atomes de carbone, dans laquelle sont éventuellement intercalés, un ou plusieurs chaînons structuraux choisis parmi le groupe arylène, ou les fragments -0-, -S-, - C(=0)-, SO2 ou -N(R3)-, ladite chaîne étant non substituée ou substituée par 3038609 40 un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, les groupements hydroxyle, C1-C4 alkyle, benzyle et/ou phénéthyle ; - R3 représente un atome d'hydrogène, un groupement hydrocarboné aliphatique comportant de 1 à 6 atomes de carbones, un benzyle ou un 5 phénéthyle ; - Z1, Z2, Z3, identiques ou différents, représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, d'halogène, un groupement -0R4, un aryle ou une chaîne hydrocarbonée aliphatique saturée ou insaturée comportant de 1 à 6 atomes de carbone éventuellement substitués par un 10 atome halogène, un groupement aryle ou hydroxyle ; - R4 représente un atome d'hydrogène, un groupement aryle ou une chaîne hydrocarbonée aliphatique saturée ou insaturée comportant de 1 à 6 atomes de carbone ; et - avec préférentiellement un seul des groupements Z1, Z2, ou Z3 comme atome 15 d'halogène ou groupement OR4.\n<CLM>\1\tProcédé de fabrication d'un hydrogel selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que le procédé de polymérisation sol-gel est effectuée à pH physiologique ou en ce que l'hydrogel est formé en présence d'une quantité suffisante d'eau pour que 20 la teneur en eau de l'hydrogel soit d'au moins 50% en poids vis-à-vis du poids total de l'hydrogel formé.\n<CLM>\1\tProcédé de fabrication d'un hydrogel selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 caractérisé en ce que ledit hydrogel est polymérisé sur ou dans au moins un 25 premier hydrogel en tant que support, résultant ainsi en un hydrogel multicouches.\n<CLM>\1\tHydrogel susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à\n<CLM>\1\t30\n<CLM>\1\tHydrogel selon la revendication 5 pour son utilisation à des fins thérapeutiques et/ou chirurgicales, préférentiellement caractérisé en ce que ledit hydrogel permet la délivrance et/ou le transport de molécules actives, ou pour son utilisation in vivo 3038609 41 en ingénierie tissulaire pouvant par exemple se faire par une polymérisation dudit hydrogel in situ dans un organisme vivant suite à la coulée ou l'injection des molécules de formule (I) et éventuellement (II) telles que définies dans la revendication 1 ou\n<CLM>\1\t5\n<CLM>\1\tUtilisation in vitro d'un hydrogel selon la revendication 5, en ingénierie tissulaire.\n<CLM>\1\tProcédé de purification d'un produit de formule (I) ou (II) tels que définis selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2 caractérisé en ce que ledit procédé 10 comprend les étapes suivantes: - a1) éventuelle solubilisation du produit de formule (I) ou (II) à purifier dans un solvant ; - b1) précipitation du produit de formule (I) ou (II) à purifier, éventuellement en solution selon l'étape al ), dans un liquide de suspension ; 15 - c1) filtration du solide obtenu à l'étape (b1) ; - d1) répétition au moins une fois des étapes a1) le cas échéant, b1) et c1) ; et - e1) récupération du produit de formule (I) ou (II) purifié.\n<CLM>\1\tProcédé de purification d'un produit de formule (II) tel que défini selon la 20 revendication 2 dans laquelle un seul des groupements Z1, Z2, Z3 est un atome d'halogène ou un groupement -0R3, caractérisé en ce que ledit procédé comprend les étapes suivantes: - a2) passage du produit de formule (II) à purifier sur une colonne de chromatographie en phase liquide, préférentiellement en phase inverse ; 25 - b2) évaporation du solvant d'élution de l'étape a2), éventuellement par lyophilisation ; - c2) récupération du produit de formule (II) purifié.\n<CLM>\1\tProduit de formule (I) ou (II) tel que défini selon la revendication 1 ou 2, 30 susceptible d'être obtenu par le procédé selon la revendication 8 ou 9 caractérisé en ce que ledit produit présente une pureté d'au moins 98% en masse vis-à-vis du poids total de produit obtenu, préférentiellement supérieure à 99% en masse.