Brevet FR3045834A1 (20170623)
REVENDICATIONS1. Composition pour immunoessai, comprenant au moins (i) un amphipol et (ii) un copolymère amphotérique à base de monomères de (méth)acrylate, une partie de ces monomères comprenant un groupe phosphorylcholine.\n<CLM>\1\tComposition selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'amphipol est un polymère amphiphile comprenant un homopolymère ou copolymère d'anhydride maléique ou de polyacrylate, sur lesquels sont greffés au moins un groupe hydrophobe et un groupe hydrophile, et de masse moléculaire moyenne comprise entre 1 000 et 100 000 g/mol, de préférence entre 4 000 et 70 000 g/mol.\n<CLM>\1\tComposition selon la revendication 2, caractérisée en ce que l'amphipol est choisi parmi les poly(anhydride maléiques) sur lesquels sont greffés au moins une chaine alkyle hydrophobe et au moins un groupe hydrophile.\n<CLM>\1\tComposition selon la revendication 3, caractérisée en ce que ladite chaine alkyle hydrophobe est une chaine alkyle linéaire de formule (-CH2).- avec n est un entier supérieur ou égal à 4, de préférence supérieur ou égal à 6, de préférence supérieur ou égal à 8, et par exemple compris entre 4 et 16, de préférence entre 8 et\n<CLM>\1\t5. Composition selon l'une des revendications 2 à 4, caractérisée en ce que le groupe hydrophile est un groupe carboxylate ou un groupe chargé positivement, en particulier un ammonium alkyle, par exemple la 3-(diméthylamino)-1-propylamine. 25\n<CLM>\1\tComposition selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que l'amphipol est choisi parmi les poly(anhydride-alt-1-octadécène maléiques), poly(anhydride-alt-1-tétradécène maléiques), poly(anhydride-alt-l-décène maléiques), substitués par un groupe hydrophile, notamment substitués par un ammonium alkyle, par exemple la 3-(diméthylamino)-1-propylamine. 30 20\n<CLM>\1\tComposition selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que l'amphipol est choisi parmi 3045834 38 - le polymère amphiphile de formule suivante (Ia) suivante : respectifs préférence préférence préférence de masse moléculaire moyenne étant comprise entre 4 000 et 4 600 g/mol, de 10 préférence environ 4 300 g/mol, - le poly(anhydride-alt-1-tétradécène maléique) substitué de formule (IIa) suivante : 15 l (IIa) et de masse moléculaire moyenne comprise entre 10 000 et 14 000 g/mol, par exemple environ 12 000 g/mol, - le poly(anhydride-alt-1-décène maléique) substitué de formule (IIb) suivante : x, y, z correspondent aux pourcentages x étant compris entre 34 et 36 %, de y étant compris entre 24 et 26 %, de z étant compris entre 38 et 42 %, de 5 des motifs, environ 35%, environ 25%, environ 40%, 3045834 39 (IIb) et de masse moléculaire moyenne comprise entre 16 000 et 20 000 g/mol, par exemple environ 18 500 g/mol, et le poly(anhydride-alt-1-octadécène maléique) substitué de formule (IIc) 5 suivante : (IIc) et de masse moléculaire moyenne comprise entre 39 000 et 65 000 g/mol. 10\n<CLM>\1\tComposition selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que le copolymère amphotérique est un copolymère amphotérique à base d'un monomère de 2-methacryloyloxyéthyl phosphorylcholine (MPC) et d'un autre monomère de méthacrylate fonctionnalisé avec un groupe hydrophobe, un groupe anionique, un groupe cationique ou un groupe permettant la formation de liaisons hydrogène. 15\n<CLM>\1\tComposition selon l'une des revendications 1 à 8, caractérisée en ce que le copolymère amphotérique est un copolymère amphotérique à base de MPC et de méthacrylate fonctionnalisé avec un groupe hydrophobe choisi parmi 20 - les alkyles linéaires ou ramifiés en C4 à C30 ; - les alkyles linéaires ou ramifiés en C4 à C30 comprenant au moins un cycloalkyle ; 3045834 40 - les chaînes hydrocarbonées en C4 à C30 comprenant au moins une double liaison ; - les chaînes hydrocarbonées en C4 à C30 comprenant au moins une triple liaison ; et, - les chaînes hydrocarbonées en C4 à C30 comprenant au moins un cycle aromatique.\n<CLM>\1\t11. 10\n<CLM>\1\t15\n<CLM>\1\t20\n<CLM>\1\t15.\n<CLM>\1\tComposition selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisée en ce que le copolymère amphotérique est le BiolipidureTM 206 commercialisé par la société NOF CORPORATION. Solution aqueuse comprenant la composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 10 et au moins un réactif d'immunoessai. Solution aqueuse selon la revendication 11, dans laquelle le réactif d'immunoessai est choisi parmi un partenaire de liaison destiné à détecter ou quantifier un analyte dans un échantillon biologique susceptible de le contenir, ledit partenaire pouvant être marqué ou non, un contrôle positif, un standard et un ajusteur d'un immunoessai. Solution aqueuse selon la revendication 11 ou 12, caractérisée en ce qu'elle ne comprend pas d'agent stabilisant et/ou d'agent bloquant d'origine humaine ou animale, par exemple choisi parmi les sérums animaux, le lait écrémé, les caséines hydrolysées ou non, l'albumine bovine ou humaine, et les gélatines. Trousse d'immunoessai comprenant au moins une solution aqueuse selon l'une des revendications 11 à 13, et au moins un partenaire de liaison à un analyte à détecter ou quantifier par immunoessai et, le cas échéant, les composés nécessaires à la mise en évidence d'une interaction spécifique entre le ou les partenaires de liaison et l' analyte. Utilisation d'une composition telle que définie dans l'une des revendications 1 à 10 ou d'une solution aqueuse telle que définie dans l'une des revendications 11 à 13, dans un procédé par immunoessai, comme agent stabilisant et/ou bloquant. Utilisation selon la revendication 15, pour réduire l'interaction non-spécifique entre (i) au moins un partenaire de liaison destiné à détecter ou quantifier un analyte dans 3045834 41 un échantillon biologique susceptible de le contenir, par exemple un partenaire de liaison marqué, et, (ii) une phase solide.\n<CLM>\1\tUtilisation selon la revendication 15 ou 16, pour réduire l'interaction non-spécifique 5 entre (i) un contrôle positif de l'immunoessai, un standard de l'immunoessai et/ou un ajusteur de l'immunoessai, et, (ii) une phase solide.\n<CLM>\1\tProcédé par immunoessai de détermination de la présence ou de quantification d'un analyte cible, dans un échantillon biologique susceptible de le contenir, comprenant 10 la mise en contact dudit échantillon avec au moins deux partenaires de liaison audit analyte, P1 et P2, séquentiellement ou simultanément, l'un des deux partenaires P2 étant marqué pour révéler la présence dudit analyte, s'il est présent, l'autre partenaire P1 étant de préférence immobilisé sur une phase solide, et ledit partenaire P2 marqué étant contenu dans au moins une composition telle que définie dans l'une des 15 revendications 1 à 10 ou au moins une solution aqueuse telle que définie dans l'une des revendications 11 à 13, pour former le cas échéant un complexe P1/analyte/P2, la révélation de la présence dudit complexe formé permettant de conclure à la présence ou à la quantité d'analyte dans l'échantillon. 20\n<CLM>\1\tProcédé par immunoessai de détermination de la présence ou de quantification d'un analyte cible, dans un échantillon biologique susceptible de le contenir, comprenant la mise en contact dudit échantillon avec au moins un partenaire P1 de liaison audit analyte et un réactif R1 de compétition à l'analyte, ledit partenaire de liaison P1 étant de préférence immobilisé sur une phase solide, ledit réactif R1 étant marqué pour 25 révéler indirectement la présence dudit analyte, et ledit réactif R1 étant contenu dans au moins une composition telle que définie dans l'une des revendications 1 à 10 ou au moins une solution aqueuse telle que définie dans l'une des revendications 11 à 13, pour former un complexe P 1/R1, la révélation de la présence dudit complexe formé permettant de conclure indirectement à l'absence ou à la quantité d'analyte 30 dans l'échantillon.