Brevet FR3043780A1 (20170519)
REVENDICATIONS1. Méthode pour diagnostiquer des anomalies de la coagulation sanguine, comprenant les étapes successives suivantes : a) placer un échantillon de sang total dans une cuve contenant deux paires d'électrodes connectées à un appareil générant un courant électrique ; b) incuber cet échantillon pendant 60 à 180 secondes en présence de calcium ; c) ajouter à cet échantillon du facteur tissulaire en une concentration adéquate pour déclencher la coagulation sanguine ; d) mesurer la variation d'impédance entre les électrodes en fonction du temps, pendant une période comprise entre 10 et 30 minutes à partir de l'étape (c) et générer une courbe des valeurs d'impédance en fonction du temps; e) comparer la valeur de l'aire sous la courbe générée à l'étape (d) avec une valeur d'aire sous la courbe de référence.\n<CLM>\1\tMéthode selon la revendication 1, caractérisée en ce que la mesure de la variation d'impédance est réalisée pendant une période d'environ 20 minutes.\n<CLM>\1\tMéthode selon l'une des revendications 1 à 2, caractérisée en ce que l'échantillon de sang total est citraté.\n<CLM>\1\tMéthode selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que le facteur tissulaire est ajouté à une concentration finale dans l'échantillon comprise entre 0.5 et 5 pM.\n<CLM>\1\tMéthode selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que le volume de l'échantillon de sang total est inférieur à 1 ml, de préférence inférieur à 500 pl.\n<CLM>\1\tMéthode selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisée en ce qu'à l'étape (b) une solution saline comprenant du calcium est ajoutée à l'échantillon, de préférence en effectuant une dilution volume / volume.\n<CLM>\1\tMéthode selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que la courbe de référence est une courbe moyenne obtenue en réalisant les étapes (a) à (d) sur des échantillons de sang issus d'individus ne présentant pas d'anomalie de la coagulation. 3043780 24\n<CLM>\1\tMéthode selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que la variation d'impédance est mesurée une fois par minute pour générer la courbe.\n<CLM>\1\tMéthode selon l'une des revendications 1 à 8, caractérisée en ce que les anomalies de la coagulation diagnostiquées sont des troubles de l'hémostase secondaire, en 5 particulier choisis parmi les coagulopathies constitutionnelles et les coagulopathies acquises.\n<CLM>\1\tMéthode pour déterminer l'efficacité d'un traitement d'une anomalie de la coagulation sanguine chez un individu, comprenant les étapes suivantes : i) déterminer la valeur de l'aire sous la courbe d'un échantillon de sang dudit 10 individu avant le début dudit traitement, en effectuant les étapes (a) (b) (c) et (d) de la méthode selon l'une des revendications 1 à 9, et ii) déterminer la valeur de l'aire sous la courbe d'un échantillon de sang dudit individu après le début dudit traitement, en effectuant les étapes (a) (b) (c) et (d) de la méthode selon l'une des revendications 1 à 9, 15 ledit traitement étant jugé comme efficace lorsque la valeur de l'aire sous la courbe déterminée à l'étape ii) est supérieure à la valeur de l'aire sous la courbe déterminée à l'étape i). 20