Brevet FR3048286A1 (20170901)
REVENDICATIONS1. Méthode de criblage in vitro d'au moins un peptide immunogène d'intérêt capable de reconnaitre au moins un anticorps issu du sérum d'individus atteints de tuberculose active, ledit au moins un peptide immunogène étant un peptide hydrophile issu d'une protéine hydrophobe, ladite protéine hydrophobe étant une protéine de paroi, ou sécrétées de bactéries du genre Mycobacterium, ladite protéine hydrophobe présentant une activité lipolytique, ladite méthode comprenant les étapes suivantes: - la mise en contact d'au moins un peptide hydrophile issu d'au moins une protéine hydrophobe avec successivement au moins deux pools indépendants de sérums issus de patients atteints de tuberculose active confirmée, pour permettre la formation de complexes immuns entre lesdits anticorps et lesdits peptides à cribler, et - au moins un échantillon contrôle issu d'un individu n'étant pas atteint de tuberculose, - la détection de la formation de complexes immuns à l'étape précédente, - une première sélection des peptides d'intérêt pour lesquels la valeur d'un ratio R est supérieure ou égale à 1,5 pour au moins un des pools indépendants de sérums issus de patients atteints de tuberculose active confirmée, le ratio R étant la valeur normalisée (de mesure de la formation de complexe immun sur la valeur de mesure normalisée obtenue à partir de l'échantillon issu d'un individu sain.\n<CLM>\1\tMéthode de criblage selon la revendication 1, comprenant en outre les étapes suivantes : - la mise en contact des peptides sélectionnés à la première étape de sélection avec chacun des sérum individuels composants lesdits pools indépendants de sérums issus de patients atteints de tuberculose active confirmée, pour permettre la- formation de complexes immuns entre lesdits anticorps et lesdits peptides à cribler, - la détection de la formation de complexes immuns à l'étape précédente, et - une seconde sélection des peptides d'intérêt pour lesquels la valeur du ratio R est supérieure ou égale à 1,5 pour avec chacun des sérums individuels 3048286 29 composants lesdits pools indépendants de sérums issus de patients atteints de tuberculose active confirmée.\n<CLM>\1\tMéthode selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle lors de la première sélection, seuls sont sélectionnés les peptides pour lesquels la valeur d'un ratio R est supérieure ou égale à 1,5 pour au moins deux des pools indépendants de sérums issus de patients atteints de tuberculose active confirmée.\n<CLM>\1\tMéthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans laquelle les 10 peptides hydrophiles ont une taille de 15 à 25 acides aminés.\n<CLM>\1\tPeptide hydrophile, comprenant de 15 à 25 acides aminés, issu d'une protéine hydrophobe, ladite protéine hydrophobe étant une protéine de paroi ou sécrétée de bactéries du genre Mycobacterium, ladite protéine hydrophobe présentant une activité lipolytique, ledit peptide étant représenté par l'une quelconque des séquences suivantes : SEQ ID NO : 1 à SEQ ID NO\n<CLM>\1\tMéthode de diagnostic in vitro chez un individu susceptible d'être atteint de la tuberculose active, ladite méthode comprenant : - une étape de mise en contact d'un échantillon sanguin dudit individu avec au moins un peptide hydrophile tel que défini dans la revendication 5, et - une étape de détection d'un complexe immun entre au moins un anticorps dudit échantillon sanguin et lesdits peptides. Kit de diagnostic de la tuberculose active, comprenant : - au moins un peptide hydrophile tel que défini dans la revendication 6, et - des moyens d'identification de complexes immuns entre au moins un anticorps issus d'un échantillon sanguin d'un individu et ledit au moins un peptide. Kit de diagnostic selon la revendication 7, comprenant moyens d'identification de complexes immuns entre au moins un anticorps issus d'un échantillon sanguin d'un individu sont disposés sur un support de type chromatographique. 15\n<CLM>\1\t20 25\n<CLM>\1\t30\n<CLM>\1\t35