FR 3066117 A1 20181116 FR 1754219 A 20170512 1 Nouveaux bactéricides et antifongiques La présente invention concerne la production de nouveaux bactéricides et fongicides. Il existe un nombre croissant de bactéries devenues résistantes aux antibiotiques connus, et la recherche de nouveaux antibiotiques piétine. Il existe d'autre part des formations bactériennes nommées biofilms, qui sont résistantes à tous les antibiotiques connus. Les produits cosmétiques et certains médicaments sont formés d'une émulsion pâteuse d'eau et d'huile. Cette émulsion risque d'être colonisée par des bactéries et des moisissures. On les protège en adjoignant des parabènes en tant que conservateur, à raison de 0,4% à 0,8%. Les parabènes ont des inconvénients qui conduisent à chercher à la remplacer. Par ailleurs, dans leur utilisation comme anti-acné, les médicaments actuels (Epiduo, Aczone, Finacea, Acanya, and Ziana) présentent de sérieux inconvénients : ils provoquent une sécheresse de la peau, des démangeaisons, des desquamations et un léger oedème, ce qui conduit souvent à l'abandon du traitement. De plus ils sont tératogènes sur les foetus des femmes enceintes qui utilisent l'un de ces anti-acnés actuels. L'un des buts de l'invention est donc fournir de nouveaux bactéricides. L'un des buts de l'invention est donc fournir de nouveaux antifongiques Un autre but de l'invention est de remplacer le parabène présent comme conservateur dans les compositions alimentaires, cosmétiques et/ou pharmaceutique. Un autre but de l'invention est d'utiliser un métal de transition pour remplacer le parabène présent comme conservateur dans les compositions alimentaires, cosmétiques et/ou pharmaceutique. Un autre but de l'invention est de fournir une composition dépourvue de parabène et comprenant des sulfures de métaux de transition utilisés comme conservateur. Un autre but de l'invention est d'utiliser un métal de transition dans le traitement de l'acné. La présente invention concerne l'utilisation comme bactéricide ou comme anti fongique d'un métal de transition. Par « utilisation comme bactéricide » il est entendu, au sens de la présente invention, une utilisation dans le but de tuer au moins une bactérie. Les bactéries concernées sont des bactéries Gram positif ou Gram négatif, en particulier, les bactéries concernées sont choisies 3066117 2 parmi Staphylococcus Aureus, Staphylococcus aureus résistant à la méticilline (MRSA), Staphylococcus aureus sensible à la méticilline (MSSA), Propionibacterium Acnes, Escherichia Coli Pseudomonas Aeruginas, Par « utilisation comme antifongique» il est entendu, au sens de la présente invention, une utilisation dans le but de tuer au moins une levure par exemple Candida Albicans Au sens de la présente invention, un bactéricide ou antifongiques s'entend d'une substance dont la Concentration Minimale Inhibitrice est inférieure ou égale à 0,1 g/L. Dans un premier objet, la présente invention concerne l'utilisation comme substitut de parabène d'un métal de transition. Il est entendu, au sens de l'invention, par « parabène », un parahydroxybenzoate d'alkyle, c'est-à-dire un ester, possédant des propriétés bactéricides et fongicides à large spectre. Les propriétés antibactériennes et antifongiques des parabènes font qu'ils sont généralement utilisés comme conservateur dans les cosmétiques, les médicaments et les aliments. Par « utilisation comme substitut de parabène » il est entendu, au sens de la présente invention, une utilisation pour remplacer les parabènes utilisés comme conservateur en raison de leurs propriétés antibactériennes et/ou antifongiques. Au sens de l'invention, il est entendu par « métal de transition » un noyau choisi parmi les groupes IVB, VB, VIB, VIIB, VIIIB, IB et IIB du tableau périodique de Mendeleïev ; préférentiellement un noyau choisi parmi la colonne IB. Au sens de la présente invention, il est entendu par « utilisation d'un métal de transition » l'utilisation d'au moins un métal de transition. La présente invention concerne donc également l'utilisation d'un mélange de métaux de transition, en particulier un mélange de deux ou trois métaux de transition comme substitut de parabène. Selon un mode de réalisation avantageux, l'invention concerne l'utilisation comme substitut de parabène, d'un métal de transition sous forme insoluble, notamment sous forme d'un métal de transition au degré d'oxydation 0 ou sous forme de sulfure ou d'un oxyde du métal de transition, ou sous forme soluble notamment des sels de sulfates, nitrates ou chlorures du métal de transition. Par « insoluble » est entendue, au sens de l'invention, une poudre qui ne se dissout pas dans l'eau, c'est-à-dire dont la concentration maximale en solution aqueuse est inférieure à 0,5 mg.L-1 à température ambiante, c'est-à-dire à une température d'environ 25 °C, et qui est mise en solution aqueuse par l'ajout d'un additif pour former des nanoparticules ou des complexes. 3066117 3 Dans le cas des nanoparticules, l'additif est un surfactant. Le surfactant peut être une bromure d' ammonium triméthylR dans lequel R représente un alkyl de 6 à 20 atomes de carbone et notamment de 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 ,16, 17, ou 18 atomes de carbone.. Des exemples de surfactants incluent le CTAB (bromure de cétyltriméthylammonium ; Br[N(CH3)3(C16H33)]), le OTAB (le bromure d'octyltriméthylammonium ; Br[N(CH3)3(C81-117)1), PEG-dithiol (Polyéthylène glycol comprenant des fonctions thiols terminales) et le PEG600 (Polyéthylène glycol dont la masse molaire moyenne est de 600 g/mol). De préférence, le surfactant utilisé pour stabiliser les nanoparticules est le CTAB. Dans le cas des complexes, l'additif est un agent de solubilisation choisi parmi l'ammoniaque, l'acide citrique, le bichromate de potassium ou un mélange de ceux-ci. Lorsque l'agent de solubilisation est un mélange d'ammoniaque et d'acide citrique, du citrate d'ammonium est formé ; l'agent de solubilisation ainsi formé est alors soit du citrate d'ammonium avec de l'acide citrique si l'acide citrique est présent en excès molaire par rapport à l'ammoniaque, soit du citrate d'ammonium avec de l'ammoniaque si l'ammoniaque est introduit en excès molaire par rapport à l'acide citrique. Sous la forme insoluble du substitut de parabène de l'invention sont donc regroupés les nanoparticules et les complexes de métaux de transition tels que définis ci-dessus. Un sel « soluble», au sens de l'Invention, est à l'inverse, une poudre qui se solubilise au contact de l'eau, sans ajout d'un additif, c'est-à-dire dont la concentration maximale en solution aqueuse est supérieure à 0,5 mgri. Sous la forme soluble du substitut de parabène de l'Invention est comprise les sels et oxydes de métaux de transition tels que définis ci-dessus. Selon un mode de réalisation, le diamètre des nanoparticules de l'Invention est de 1 à 10 nm, notamment de 1 à 5 nm, en particulier de 2 nm. Selon un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne l'utilisation comme substitut de parabène, d'un métal de transition sous forme insoluble, ledit métal de transition sous forme insoluble étant mis en solution aqueuse par la formation de nanoparticules ou par la formation d'un complexe. Au sens de la présente invention le terme « mis en solution aqueuse» correspond à la formation d'une solution ou d'une suspension aqueuse dont la concentration en métal de transition selon l'invention est supérieure à 0,5 mg.L-1. Au sens de la présente invention, il est entendu par « complexe» un cation métallique, formé à partir d'un métal de transition tel que défini précédemment, lié à plusieurs atomes, ions ou molécules appelés ligands. Des exemples de ligands incluent l'eau et les additifs définis ci-dessus. 3066117 4 Selon un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne l'utilisation comme substitut de parabène d'un métal de transition choisi dans la colonne IB de Mendeleïev, en particulier choisi parmi le cuivre, l'argent et l'or. Au sens de la présente invention, le métal de transition de la colonne IB de Mendeleïev est au degré d'oxydation 0, +I, +Il ou +III. En particulier, l'Invention concerne l'utilisation d'un métal de transition choisi parmi Cu(0), Cu(II), Ag(0), Ag(I), Au(0) ou Au(III). Selon un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne l'utilisation comme substitut de parabène d'un métal de transition choisi parmi le cuivre, l'argent et l'or, et étant sous forme de sulfure. Selon un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne l'utilisation comme substitut de parabène d'un métal de transition choisi parmi le cuivre, l'argent et l'or, étant sous forme de sulfure et sous forme d'un complexe. Les sulfures d'or, d'argent et de cuivre, insolubles sans additifs, sont solubles sous la forme de complexes. Pour le sulfure de cuivre SCu, dont la concentration maximale en solution aqueuse est de 0,33 mg/L, l'ajout d'ammoniaque comme additif permet d'atteindre une concentration aqueuse en Cu au moins égale à 0,2 g/L. Pour le sulfure d'argent SAg2, dont la concentration maximale en solution aqueuse est de soluble à 6,2.1015 mg/L, l'ajout d'acide citrique ou d'un mélange d'acide citrique et d'ammoniaque comme additif permet d'atteindre une concentration aqueuse en Ag au moins égale à 0,2 g/L. Pour le sulfure d'or S3Au2, la concentration aqueuse sans additif est indécelable. L'ajout soit de bichromate de potassium seul, soit d'un mélange équimolaire de bichromate de potassium et d'ammoniaque, permet d'atteindre une concentration aqueuse en Au au moins égale à 0,2 g/L. Selon un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne l'utilisation comme substitut de parabène d'un métal de transition choisi parmi le cuivre, l'argent et l'or, étant sous forme de sulfure et sous forme de nanoparticules. Au sens de la présente invention, lorsque le métal de transition est sous forme de nanoparticules de sulfure de cuivre, de nanoparticules de sulfure d'argent ou de nanoparticules de sulfure d'or, le métal de transition est, respectivement, au degré d'oxydation +II, +I et +III, c'est-à-dire Cu(II), Ag(I) et Au(III). 3066117 Au sens de la présente invention, il est entendu par « utilisation d'un métal de transition» l'utilisation d'au moins un métal de transition. La présente invention concerne donc également l'utilisation d'un mélange de métaux de transition, en particulier un mélange de deux ou trois métaux de transition comme substitut de parabène. Selon un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne l'utilisation, comme substitut de parabène, d'un métal de transition choisi parmi le cuivre, l'argent et l'or, étant au degré d'oxydation 0 et sous forme de nanoparticules. Au sens de la présente invention, il est entendu par « utilisation d'un métal de transition» l'utilisation d'au moins un métal de transition. La présente invention concerne donc également l'utilisation d'un mélange de métaux de transition, en particulier un mélange de deux ou trois métaux de transition comme substitut de parabène. Selon un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne l'utilisation comme substitut de parabène d'un métal de transition choisi parmi le cuivre, l'argent et l'or, étant sous forme de sel soluble. Au sens de la présente invention, il est entendu par « utilisation d'un métal de transition» l'utilisation d'au moins un métal de transition. La présente invention concerne donc également l'utilisation d'un mélange de métaux de transition, en particulier un mélange de deux ou trois métaux de transition comme substitut de parabène. Selon un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne l'utilisation d'un métal de transition dans une composition contenant de l'eau. Selon un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne l'utilisation d'un métal de transition dans une composition contenant de l'eau et un réducteur. Il est entendu par « réducteur» au sens de la présente invention, un composé capable de réduire le sel de métal de transition utilisé lors de la formation des nanoparticules du métal de transition selon l'invention et d'empêcher l'oxydation du métal de transition lors de son utilisation selon l'invention. Un exemple de réducteur au sens de l'Invention est le glycérol en milieu basique (pH = 14), de préférence du glycérol en présence de NaOH. La réduction est effectuée à pH 14, et, une fois les nanoparticules de métaux formées, la solution est neutralisée et ramenée à pH 7. Selon un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne l'utilisation d'un métal de transition dans une composition contenant de l'eau, ladite composition comprenant de l'ordre de 10-6gramme de substitut de parabène par gramme de composition. 3066117 6 Au sens de la présente invention, il est entendu par « de l'ordre de 10-6 gramme» une gamme de valeurs approximative, pouvant également autrement être formulée par une gamme s'échelonnant de 10-5 à 10-7 g. Cette gamme de concentrations représente 100 à 10 000 fois moins de produit que lors de l'utilisation des parabènes. (les parabènes sont utilisés à des concentration de 4 à 8 pour 1000 hors d'Europe, et 3 fois moins en Europe) Selon un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne l'utilisation d'un métal de transition dans une composition contenant de l'eau, dans laquelle la composition contenant de l'eau est une émulsion. Selon un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne l'utilisation d'un métal de transition dans une composition contenant de l'eau, dans laquelle la composition contenant de l'eau est une émulsion huile-dans-l'eau ou eau-dans-l'huile. Selon un mode de réalisation, le pourcentage d'eau par rapport à la quantité d'huile présent dans ces émulsions est de 65 à 99%, de préférence de 70 à 95%, en particulier de 70 à 80% d'eau. Selon un autre mode de réalisation avantageux, l'invention concerne l'utilisation comme substitut de parabène d'un métal de transition dans un produit alimentaire ou cosmétique ou pharmaceutique. L'invention concerne également une composition sous la forme d'une émulsion huile-dansl'eau ou eau-dans-l'huile, dépourvue de parabènes, comprenant du sulfure de cuivre, sulfure d'argent ou sulfure d'or ; en particulier, ladite composition comprenant du sulfure de cuivre. Selon un mode de réalisation avantageux, l'invention concerne une composition dans laquelle le sulfure de cuivre, sulfure d'argent ou sulfure d'or forme un complexe ou des nanoparticules. Selon un mode de réalisation avantageux, la composition de l'Invention comprend le sulfure de cuivre, sulfure d'argent ou sulfure d'or, sous la forme de complexes ou de nanoparticules tels que définis ci-dessus, ladite composition comprenant également de l'eau et un additif. Selon un mode de réalisation avantageux, la composition de l'Invention comprend le sulfure de cuivre, sulfure d'argent ou sulfure d'or, sous la forme d'un complexe tel que défini ci-dessus, ladite composition comprenant également de l'eau et un additif, ledit additif étant choisi parmi l'ammoniaque, l'acide citrique, le bichromate de potassium ou un mélange de ceux-ci. Selon un mode de réalisation avantageux, la composition de l'Invention comprend le sulfure de cuivre, sulfure d'argent ou sulfure d'or, sous la forme de nanoparticules telles que définies 3066117 7 ci-dessus, ladite composition comprenant également de l'eau et un additif, ledit additif étant du CTAB. L'invention concerne également une composition sous la forme d'une émulsion huile-dansl'eau ou eau-dans-l'huile, dépourvue de parabènes, comprenant du cuivre, de l'argent ou de l'or sous la forme de nanoparticules. Selon un mode de réalisation particulier, la composition de l'invention sous la forme d'une émulsion huile-dans-l'eau ou eau-dans-l'huile, dépourvue de parabènes, comprenant du cuivre, de l'argent ou de l'or sous la forme de nanoparticules, comprend également un additif tel que du CTAB et un réducteur tel que du glycérol en milieu basique, en particulier du glycérol en présence de NaOH à pH 14. La réduction est effectuée à pH 14, et, une fois les nanoparticules de métaux formées, la solution est neutraliée et ramenée à pH 7. La présente invention concerne également un métal de transition pour son utilisation comme bactéricide, ou comme antifongique Dans un second objet, la présente invention concerne un métal de transition pour son utilisation dans le traitement de l'acné. Au sens de la présente invention, il est entendu d'un « traitement de l'acné» une action bactéricide sur une bactérie responsable de l'acné. En particulier, le traitement de l'acné s'entend d'une action bactéricide sur Propionibacterium Acnes. La présente invention concerne également un procédé de préparation des nanoparticules de métal de transition et nanoparticules de sulfure de métal de transition. Le procédé de préparation des complexes solubles de sulfure de métal de transition de l'invention est décrit aux exemples 1 à 3. Ainsi, dans un troisième objet, la présente invention concerne un procédé (I) de préparation d'un bactéricide comprenant un métal de transition sous la forme de nanoparticules dudit métal de transition, ledit procédé comprenant une étape de réduction du métal de transition, en présence d'un additif, dans une solution aqueuse à pH 14 comprenant du glycérol. La réduction est effectuée à pH 14, et, une fois les nanoparticules de métaux formées, la solution est neutralisée et ramenée à pH 7 En particulier, dans le procédé (I) de l'invention, le métal de transition est choisi dans la colonne I B de Mendeleïev, notamment choisi parmi le cuivre (0), l'argent (0) et l'or (0). En particulier, dans le procédé (I) de l'Invention, le métal de transition est sous la forme d'un sel métallique avant l'étape de réduction. Le sel métallique est en particulier choisi parmi du cuivre (11), notamment du nitrate de cuivre Cu(NO3)2, de l'argent (I), notamment du nitrate d'argent Ag(NO3), et de l'or (III), notamment du chlorure d'or AuC13. 3066117 8 En particulier, dans le procédé (I) de l'Invention, la solution aqueuse à pH 14 comprend de l'eau, du glycérol et une base, notamment un hydroxyde, en particulier du NaOH. La réduction est effectuée à pH 14, et, une fois les nanoparticules de métaux formées, la solution est neutralisée et ramenée à pH 7 Dans le cadre de ce procédé (I), l'additif est un surfactant. Des exemples de surfactants incluent le CTAB (bromure de cétyltriméthylammonium ; Br[N(CH3)3(C16H33)]), le PEG-dithiol (Polyéthylène glycol comprenant des fonctions thiols terminales) et le PEG600 (Polyéthylène glycol dont la masse molaire moyenne est de 600 g/mol). De préférence, le surfactant utilisé pour stabiliser les nanoparticules est le CTAB. La concentration en glycérol est comprise de 0,8 à 2,2 M, en particulier de 1 à 2 M, notamment de 1 à 1,85 M dans l'eau après l'étape de réduction du métal de transition. Le procédé selon l'invention est effectué soit à 0 °C, soit à température ambiante, soit à une température de 60 à 100 °C, notamment de 80 à 100 °C. Selon un mode de réalisation particulier, le procédé (I) de l'invention comprend: - une étape de formation d'une solution A comprenant le métal de transition sous la forme d'un sel métallique, un additif et de l'eau ; - une étape de formation d'une solution aqueuse B à pH 14 comprenant du glycérol ; - une étape de réduction du métal de transition par l'addition de la solution A à la solution aqueuse B pour former une suspension de nanoparticules ; - une étape de neutralisation de la suspension de nanoparticules obtenue à l'étape précédente par l'addition d'un acide. En particulier, dans l'étape de neutralisation du procédé (I) de l'invention, l'acide est un acide inorganique, notamment du HCI. Au sens de l'invention, il est entendu par « neutralisation » le passage d'une solution basique, dont le pH est compris de 8 à 14, à une solution à pH 7. La concentration en sel métallique lors de la formation de la solution A est comprise de 0,001 à 0,5 M, en particulier de 0,01 à 0,04 M, notamment 0,013 M, 0,023 M ou 0,04 M. La concentration en additif lors de la formation de la solution A est comprise de 0,01 à 0,05 M, en particulier de 0,02 à 0,04 M, notamment 0,02 M ou 0,037 M. Selon un mode de réalisation particulier, le procédé (I) de l'invention comprend : - une étape de formation d'une solution A comprenant le métal de transition sous la forme d'un sel de cuivre (II), du CTAB et de l'eau ; 3066117 9 - une étape de formation d'une solution aqueuse B à pH 14 comprenant du glycérol ; - une étape de réduction du métal de transition par l'addition de la solution A à la solution aqueuse B pour former une suspension de nanoparticules de cuivre (0) ; - une étape de neutralisation de la suspension de nanoparticules de cuivre (0) obtenue à l'étape précédente par l'addition d'HCI. Selon un mode de réalisation particulier, le procédé (I) de l'invention comprend : - une étape de formation d'une solution A comprenant le métal de transition sous la forme d'un sel d'argent (I), du CTAB et de l'eau ; - une étape de formation d'une solution aqueuse B à pH 14 comprenant du glycérol ; - une étape de réduction du métal de transition par l'addition de la solution A à la solution aqueuse B pour former une suspension de nanoparticules d'argent (0) ; - une étape de neutralisation de la suspension de nanoparticules d'argent (0) obtenue à l'étape précédente par l'addition d'HCI. Selon un mode de réalisation particulier, le procédé (I) de l'invention comprend : - une étape de formation d'une solution A comprenant le métal de transition sous la forme d'un sel d'or (III), du CTAB et de l'eau ; - une étape de formation d'une solution aqueuse B à pH 14 comprenant du glycérol ; - une étape de réduction du métal de transition par l'addition de la solution A à la solution aqueuse B pour former une suspension de nanoparticules d'or (0) ; - une étape de neutralisation de la suspension de nanoparticules d'or (0) obtenue à l'étape précédente par l'addition d'HCI. Les conditions optimales pour la préparation de nanoparticules de métal de transition selon l'invention peuvent être déterminées par l'homme du métier, en particulier au vu des exemples 8 à 10 de la présente invention. Selon un mode de réalisation avantageux, l'invention concerne des nanoparticules obtenues par le procédé (I). Selon un quatrième objet, la présente invention concerne un procédé (II) de préparation d'un bactéricide comprenant un métal de transition, ledit métal de transition étant sous la forme d'une nanoparticule de sulfure dudit métal de transition, ledit procédé comprenant une étape de précipitation d'un sel soluble du métal de transition en présence de sulfure de sodium Na2S. 3066117 En particulier, dans le procédé (II) de l'invention, le sel soluble du métal de transition est choisi parmi du cuivre (II), notamment du sulfate de cuivre Cu(SO4) ou du nitrate de cuivre Cu(NO3)2, de l'argent (I), notamment du nitrate d'argent Ag(NO3), et de l'or (III), notamment du chlorure d'or AuC13. Dans le cadre de ce procédé (II), l'additif est un surfactant. Des exemples de surfactants incluent le CTAB (bromure de cétyltriméthylammonium ; Br[N(CH3)3(C16H33)]), le OTAB (le bromure d'octyltriméthylammonium ; Br[N(CH3)3(C81-117)]), le PEG-dithiol (Polyéthylène glycol comprenant des fonctions thiols terminales) et le PEG-600 (Polyéthylène glycol dont la masse molaire moyenne est de 600 g/mol). De préférence, le surfactant utilisé pour stabiliser les nanoparticules est le CTAB. Selon un mode de réalisation particulier, le procédé (II) de l'invention comprend : - une étape de formation d'une solution A comprenant le métal de transition sous la forme d'un sel soluble du métal de transition, un additif et de l'eau ; - une étape de formation d'une solution B comprenant du Na25 et de l'eau ; - une étape de précipitation du sel soluble du métal de transition par l'addition de la solution A à la solution B pour former une suspension de nanoparticules de sulfure métallique ; En particulier, dans l'étape de neutralisation du procédé (II) de l'invention, l'acide est un acide inorganique, notamment du HCI. Au sens de l'invention, il est entendu par « neutralisation » le passage d'une solution basique, dont le pH est compris de 8 à 14, à une solution à pH 7. La concentration en sel métallique lors de la formation de la solution A est comprise de 0,001 à 0,5 M, en particulier de 0,01 à 0,03 M, notamment 0,013 M, 0,023 M ou 0,025 M. La concentration en additif lors de la formation de la solution A est comprise de 0,01 à 0,05 M, en particulier de 0,02 à 0,04 M, notamment 0,037 M. La concentration molaire de l'additif est 0,2 fois celle du sel métallique La concentration en Na25 est comprise de 0,001 à 0,02 M, en particulier de 0,003 à 0,02 M, notamment 0,003 M, 0,0065 M ou 0,0185 M dans l'eau après lors de l'étape de formation de la solution B. La concentration en Na25 est la concentration stoechiométrique pour la formation du sel insoluble. Si le sel est SO4Cu, Na25 et SO4Cu sont équimolaires. Selon un mode de réalisation particulier, le procédé (II) de l'invention comprend : - une étape de formation d'une solution A comprenant le métal de transition sous la forme d'un sel soluble de cuivre (II), du CTAB et de l'eau ; 3066117 11 - une étape de formation d'une solution B comprenant du Na2S et de l'eau ; - une étape de précipitation du sel soluble de cuivre (II) par l'addition de la solution A à la solution B pour former une suspension de nanoparticules de sulfure de cuivre (II) ; Selon un mode de réalisation particulier, le procédé (II) de l'invention comprend : - une étape de formation d'une solution A comprenant le métal de transition sous la forme d'un sel soluble d'argent (I), du CTAB et de l'eau ; - une étape de formation d'une solution B comprenant du Na2S et de l'eau ; - une étape de précipitation du sel soluble d'argent (I) par l'addition de la solution A à la solution B pour former une suspension de nanoparticules de sulfure d'argent (I) ; La concentration en Na2S est la concentration stoechiométrique pour la formation du sel insoluble. Si le sel est NO3Ag, la concentration molaire de Na2S est la moitié de celle de NO3Ag Selon un mode de réalisation particulier, le procédé (II) de l'invention comprend : - une étape de formation d'une solution A comprenant le métal de transition sous la forme d'un sel soluble d'or (III), du CTAB et de l'eau ; - une étape de formation d'une solution B comprenant du Na2S et de l'eau ; - une étape de précipitation du sel soluble d'or (III) par l'addition de la solution A à la solution B pour former une suspension de nanoparticules de sulfure d'or (III) ; La concentration en Na2S est la concentration stoechiométrique pour la formation du sel insoluble. Si le sel est CI3Au, la concentration molaire de Na25 est 1,5 fois celle de CI3Au Les conditions optimales pour la préparation de nanoparticules de sulfure métallique selon l'invention peuvent être déterminées par l'homme du métier, en particulier au vu des exemples de la présente invention. Selon un mode de réalisation avantageux, l'invention concerne des nanoparticules obtenues par le procédé (II). FIGURES: La Figure 1 représente une image HR-TEM des particules de SAg2 selon l'Exemple 4. La Figure 2 représente le spectre d'absorption UV-visible d'une suspension aqueuse de nanoparticules d'argent à une concentration de 0,2 wt% d'argent selon l'Exemple 8B. 3066117 12 La Figure 3 représente des images HR-TEM des particules d'argent de l'Exemple 8B. A, B, C et D correspondent à différentes échelles de taille. La Figure 4 représente le spectre d'absorption UV-visible de la solution de nanoparticules d'argent à une concentration de 0,14 g.L-1 (Exemple 80) comparée à la solution de l'Exemple 8B. La Figure 5 représente une image de microscopie HR-TEM réalisées sur la suspension à 0,14 g.L-1 de l'Exemple 80. A, B, C et D correspondent à différentes échelles de taille. La Figure 6 montre des images HR-TEM de la solution à 2 g.L-1 préparée dans l'exemple 80. A et B correspondent à différentes échelles de taille. La Figure 7 représente une image HR-TEM de la solution colloïdale de nanoparticules d'argent à 2 grl obtenue après distillation sous vide d'une partie de l'eau d'une suspension à 0.2 g.L-1, selon l'Exemple 8D. La Figure 8 montre un histogramme de la distribution de taille des nanoparticules d'argent dans une suspension concentré à 2 grl selon l'Exemple 8D. Le comptage de nanoparticules et la détermination de la taille de chacune d'elles sont réalisés sur un cliché de microscopie. La Figure 9 montre une image HR-TEM de nanoparticules d'argent obtenues selon procédé 8.B mais en présence de bromure d'octyltriméthylammonium (OTAB) selon l'Exemple 8E. La Figure 10 montre un histogramme de la distribution de taille des nanoparticules d'argent dans une suspension concentrée à 0.2 grl préparée en présence de bromure d'octyltriméthylammonium (OTAB) selon l'Exemple 8E. Le comptage de nanoparticules et la détermination de la taille de chacune d'elles sont réalisés sur un cliché de microscopie. La Figure 11 représente une image HR-TEM de la suspension de nanoparticules d'or selon l'Exemple 9. La Figure 12 montre une image HR-TEM de la solution colloïdale comprenant les nanoparticules de cuivre selon l'Exemple 10. La Figure 13 montre une image HR-TEM de la solution colloïdale comprenant les nanoparticules de cuivre selon l'Exemple 10. La Figure 14 représente une image HR-TEM de la solution colloïdale comprenant les nanoparticules de soufre selon l'Exemple 11. EXEMPLES 3066117 13 I ) Synthèse des complexes Exemple 1. Solution SCu Dissoudre 126 mg de SO4Cu dans 90 mL d'eau. Dissoudre 140 mg de Na2S dans 20 mL d'eau. Mélanger les 90 mL de la solution de SO4Cu avec 10 mL de la solution de Na2S. On obtient un précipité de 75 mg de SCu. Le séparer par filtration. Placer ce précipité dans 100 mL d'eau, dans un récipient avec agitateur. En agitant constamment, y faire tomber goutte à goutte, très lentement une solution concentrée de NH3 dans l'eau. La concentration maximale de SCu dans l'eau est de 0,33 mg.L-1. SCu devient plus soluble en solution aqueuse en présence d'ammoniaque. L'ajout d'ammoniaque au sulfure de cuivre permet d'atteindre une concentration aqueuse au moins égale à 0,2 g.L-1 en Cu. Exemple 2. Solution SAg2 Dissoudre 79 mg de NO3Ag dans 97 mL d'eau. Mélanger les 97 mL de la solution de NO3Ag avec 3 mL de la solution de Na2S. On obtient un précipité de 75 mg de SAg2. Le séparer par filtration. Placer ce précipité dans 100 mL d'eau, dans un récipient avec agitateur. En agitant constamment, y faire tomber goutte à goutte, très lentement une solution concentrée de citrate d'ammonium (NH4)5(C6H407)2H3. La concentration maximale de SAg2 dans l'eau est de 6,21.10-15 g1-1. SAg2 devient plus soluble en présence d'acide citrique, ou d'un mélange de citrate d'ammonium et d'acide citrique, ou d'un mélange de citrate d'ammonium et d'ammoniaque, le citrate d'ammonium étant formé par un mélange d'acide citrique et d'ammoniaque. L'ajout d'acide citrique, ou d'un mélange de citrate d'ammonium et d'acide citrique, ou d'un mélange de citrate d'ammonium et d'ammoniaque, au sulfure d'argent permet d'atteindre une concentration aqueuse au moins égale à 0,2 g.L-1 en Ag. Exemple 3. Solution S3Au2 Dissoudre 77 mg de CI3Au dans 95 mL d'eau. 3066117 14 Mélanger les 95 mL de la solution de CI3Au avec 5 ml de la solution de Na2S. On obtient un précipité de 62 mg de S3Au2. Le séparer par filtration. Placer ce précipité dans 100 mL d'eau, dans un récipient avec agitateur. En agitant constamment, y faire tomber goutte à goutte, très lentement une solution concentrée de bichromate de potassium.La concentration maximale d'Au2S3 dans l'eau est indécelable. La solubilité aqueuse de Au2S3 est augmentée en présence de bichromate de potassium, ou d'un mélange de bichromate de potassium et d'ammoniaque. L'ajout de bichromate de potassium, ou d'un mélange de bichromate de potassium et d'ammoniaque, au sulfure d'or permet d'atteindre une concentration aqueuse au moins égale à 0,2 gri en Au. Il) Synthèse des nanoparticules de sulfure métallique Exemple 4. SAg2 en nanoparticules Exemple 4A. SAg2 en nanoparticules Tous les réactifs sont utilisés tels que reçus, sans purification préalable. L'eau utilisée pour préparer la solution est de l'eau ultra-pure dégazée et stockée sous Argon. La réaction a lieu sous Argon, à température ambiante (20 °C). La solution d'argent est manipulée dans le noir (protection sous aluminium). - Pour la synthèse de 200 mL de solution colloïdale à 0,2 wt% (2 g1-1) de nanoparticules d'argent : Pour la préparation de la solution A, préparer 80 mL d'eau ultra-pure dans un ballon et dissoudre d'abord 1,35 g de bromure de cétyltriméthylammonium (CTAB ; 3,7.10-3 mol) dans l'eau puis 0,4 g d'Ag+ sous la forme d'AgNO3 (2,3.10-3 mol) et ajuster à 100 mL avec de l'eau ultra-pure. Stocker à froid, dans le noir. Pour la préparation de la solution B, préparer 50 mL d'eau ultra-pure dans un ballon, dissoudre 0,144 g de Na25 (1,85.10-3mo1) et ajuster à 100 mL avec de l'eau ultra-pure. A température ambiante, dans le noir, sous une atmosphère d'argon et sous agitation (600 rpm), ajouter goutte à goutte la solution A à la solution B. Laisser réagir pendant 4h. Les particules de SAg2 sont caractérisées par H R-TEM, Figure 1. Elles présentent une large distribution de taille avec une présence majoritaire de particules de taille supérieure à 20 nm. 3066117 Exemple 4B. SAg2 en nanoparticules, effet de la température Les nanoparticules de sulfure d'argent sont synthétisées selon l'exemple 4A, à 0 °C. Il y a une différence peu significative sur l'activité bactéricide entre les nanoparticules obtenues à température ambiante et celles obtenues à 0°C (cf tableau 1 lignes R et 0) Exemple 4C. SAg2 en nanoparticules, effet du surfactant Les nanoparticules de sulfure d'argent sont synthétisées selon l'exemple 4A, en utilisant du PEG-600 à la place du CTAB. Exemple 5. SCu en nanoparticules Exemple 5A. SCu en nanoparticules Tous les réactifs sont utilisés tels que reçus, sans purification préalable. L'eau utilisée pour préparer la solution est de l'eau ultra-pure dégazée et stockée sous Argon. La réaction a lieu sous Argon, à température ambiante (20 °C). - Pour la synthèse de 200 mL de solution colloïdale à 0,2 wt% (2 g1-1) de nanoparticules de cuivre : Pour la préparation de la solution A, préparer 80 mL d'eau ultra-pure dans un ballon et dissoudre d'abord 1,35 g de CTAB (3,7.10-3 mol) dans l'eau puis 0,4 g de Cu2+ sous la forme de CuSO4 (2,5.10e mol) et ajuster à 100 mL avec de l'eau ultra-pure. Stocker à froid, dans le noir. Pour la préparation de la solution B, préparer 50 mL d'eau ultra-pure dans un ballon, dissoudre 0,5 g de Na25 (0,64.10-3 mol) et ajuster à 100 mL avec de l'eau ultra-pure. A température ambiante, dans le noir, sous une atmosphère d'argon et sous agitation (600 rpm), ajouter goutte à goutte la solution A à la solution B. Laisser réagir pendant 4h. Exemple 5B. SCu en nanoparticules, effet de la température Les nanoparticules de sulfure de cuivre sont synthétisées selon l'exemple 5A, à 0 °C. 3066117 16 Il n'y a pas de différence sur l'activité bactéricide entre les nanoparticules obtenues à température ambiante et celles obtenues à 0°C (cf lignes Q et T du tableau 1) Exemple 5C. SCu en nanoparticules, effet du surfactant Les nanoparticules de sulfure de cuivre sont synthétisées selon l'exemple 5A, en utilisant du PEG-600 à la place du CTAB. Exemple 6. S3Au2 en nanoparticules Exemple 6A. S3Au2 en nanoparticules Tous les réactifs sont utilisés tels que reçus, sans purification préalable. L'eau utilisée pour préparer la solution est de l'eau ultra-pure dégazée et stockée sous Argon. La réaction a lieu sous Argon, à température ambiante (20 °C). La solution d'or est manipulée dans le noir (protection sous aluminium). - Pour la synthèse de 200 mL de solution colloïdale à 0,2 wt% (2 g1-1) de nanoparticules d'or : Pour la préparation de la solution A, préparer 80 mL d'eau ultra-pure dans un ballon et dissoudre d'abord 1,35 g de CTAB (3,7.10-3 mol) dans l'eau puis 04g de d'Au3+ sous la forme de AuCI3 (1,3.10-3 mol) et ajuster à 100 mL avec de l'eau ultra-pure. Stocker à froid, dans le noir. Pour la préparation de la solution B, préparer 50 mL d'eau ultra-pure dans un ballon, dissoudre 0,234 g de Na25 (0,3.10-3 mol) et ajuster à 100 mL avec de l'eau ultra-pure. A température ambiante, dans le noir, sous une atmosphère d'argon et sous agitation (600 rpm), ajouter goutte à goutte la solution A à la solution B. Laisser réagir pendant 4h. Exemple 6B. S3Au2 en nanoparticules, effet de la température Les nanoparticules de sulfure d'or sont synthétisées selon l'exemple 6A, à 0 °C. Les nanoparticules obtenues à température ambiante sont un peu plus efficaces que celles obtenues à 0°C (cf tableau 1 lignes P et S) 3066117 17 III) Synthèse des nanoparticules de métaux de transition Exemple 7. Comment synthétiser des suspensions de nanoparticules métalliques dans l'eau ? Les nanoparticules métalliques dans l'eau sont générées par la réaction d'un sel du métal et d'un réactif : - le réactif étant un oxydant pour obtenir des nanoparticules d'oxydes métalliques ; - le réactif étant un réducteur pour obtenir des nanoparticules métalliques. De plus, les sels métalliques doivent être stabilisés dans des « cages » afin d'empêcher l'agglomération des nanoparticules en particules plus larges et plus stables. Les cages sont généralement formées avec des surfactants possédant une partie hydrophile et une partie hydrophobe. Ces cages, en milieu aqueux, sont appelées micelles. Exemple 8. Nanoparticules d'argent, Ag Exemple 8.A Sélection des réactifs Le sel d'argent disponible (et le plus commun) est AgNO3. (Aldrich, 99%, M = 169.9 g.mo1-1, assay 63.4% Ag). Le surfactant utilisé est le CTAB (bromure de cétyltriméthylammonium). Le réducteur choisi est le glycérol. L'utilisation du glycérol implique l'utilisation d'une base pour exalter ses propriétés de réducteur. Le NaOH a été utilisé à cet effet, pour produire une solution basique de glycérol dans l'eau. Ces solutions ont pour but de réduire le sel métallique d'Ag+ par la conversion du glycérol en dihydroxyacétone (DHA). Exemple 8.B Synthèse de 200 mL de solution colloïdale à 0,2 wt% (2 g.L-1) de nanoparticules d'argent Tous les réactifs sont utilisés tels que reçus, sans purification préalable. L'eau utilisée pour préparer la solution est de l'eau ultra-pure dégazée et stockée sous Argon. La réaction a lieu sous Argon, à température ambiante (20 °C). La solution d'argent est manipulée dans le noir (protection sous aluminium). 3066117 18 Pour la préparation de la solution A, préparer 80 mL d'eau ultra-pure dans un ballon et dissoudre d'abord 1,35 g de CTAB (3,7.10-3 mol) dans l'eau puis 04g d'ion Ag + sous la forme d'AgNO3 (2,3.10-3 mol) et ajuster à 100 mL avec de l'eau ultra-pure. Stocker à froid, dans le noir. Pour la préparation de la solution B, préparer 50 mL d'eau ultra-pure dans un ballon, dissoudre 34 g de glycérol (0,37 mol) puis 8 g de NaOH (0,2 mol) et ajuster à 100 mL avec de l'eau ultra-pure. A température ambiante, dans le noir, sous une atmosphère d'argon et sous agitation (600 rpm), ajouter goutte à goutte la solution A à la solution B. Laisser réagir pendant 4h. A la fin de la réaction, ajuster le pH à 7 par addition d'HCI commercial concentré (24 M). Le volume correspondant à ajouter est compris de 0,8 à 0,9 mL. La solution résultante est analysée par spectroscopie UV-visible puis la morphologie et la taille des particules obtenues sont analysées par microscopie électronique à transmission haute résolution (HR-TEM). La longueur d'onde d'absorption en UV-visible est spécifique de la taille et de la quantité des nanoparticules en suspension. L'analyse par spectroscopie UV-visible de la suspension colloïdale de nanoparticules d'argent à une concentration de 0,2 wt% est représentée sur la figure 2. La solution ne présente aucun dépôt, tout l'argent introduit initialement est sous forme colloïdale. La distribution est mono-modale avec une longueur d'onde centrée à 410 nm, indiquant une taille de nanoparticules inférieure à 40 nm. La taille des nanoparticules est ensuite confirmée par microscopie HR-TEM. Les images obtenues par HR-TEM sont présentées sur la figure 3, à différentes échelles. Les nanoparticules sont homogènes en taille, avec un diamètre moyen de 15 nm. Exemple 8.0 Effet de la concentration en réactifs sur la formation des nanoparticules Dans le but d'augmenter la concentration en nanoparticules et atteindre une concentration de 2 g.L-1 (soit 0,2 wt%) en argent, la quantité de réactifs a été augmentée. Cependant toute la quantité de CTAB n'est pas soluble dans ces conditions et la majeure partie précipite. La stabilisation des nanoparticules d'argent n'est plus assurée. Le spectre d'absorption UV-visible résultant d'une suspension qui a été diluée environ 50 fois afin d'éviter une saturation du spectre UV est présenté sur la figure 4. Il peut être déduit de la 3066117 19 comparaison de ce spectre avec le spectre obtenu à l'exemple 8.B que la solution a une concentration en argent de 0,14 g.L-1. Une analyse par microscopie HR-TEM a été réalisée sur cette suspension diluée à 0,14 g.L1.La distribution est bimodale avec des nanoparticules possédant un diamètre d'environ 30 nm et des nanoparticules plus petites, d'un diamètre inférieur à 5 nm. Ce comportement est directement lié à un défaut de stabilisateur. La solution obtenue selon le procédé 8.B mais avec une concentration de 2 g.L-1 en argent, est de couleur dorée. Les images HR-TEM de cette solution 2 g.L-1 (solution concentrée préparée en 8.0 sont rapportées en Figure 6. Les particules obtenues ne sont pas homogènes. La figure 6A illustre la présence de nanoparticules avec un diamètre moyen de 30 nm, ces nanoparticules étant de formes diverses (bâtonnets, sphères). De petites nanoparticules sphériques, dont le diamètre moyen est compris de 5 à 10 nm, sont également présentent dans la solution, comme illustré sur la figure 6B. Exemple 8.0 Effet de la concentration en argent sur la taille des nanoparticules d'argent. La concentration en argent est obtenue par distillation sous vide de l'eau (p = 15 mbar à 20 °C) de la solution colloïdale initiale préparée selon l'exemple 8.B. Une solution de nanoparticules d'argent de concentration 0,2 g.L-1 et de taille inférieure à 15 nm (exemple 8.B) est concentrée par distillation sous vide de l'eau pour conduire à une concentration en argent de 2 g.L-1.La solution résultante est trouble et dorée. Les images obtenues par HR-TEM de cette nouvelle suspension sont présentées sur la figure 7. Les nanoparticules généralement sphériques présentent une large distribution en taille (5 à 20 nm), Figures 7 et 8. Il est cependant à noter que le CTAB précipite lors de l'élimination de l'eau. Exemple 8.E Effet de la nature du surfactant sur la formation des nanoparticules 3066117 Une solution de nanoparticule est réalisée selon l'exemple 8.B en utilisant du bromure d'octyltriméthylammonium (OTAB) à la place du bromure de cétyltriméthylammonium (CTAB). La solution obtenue est verte. Un déplacement hypsochrome de la longueur d'onde du maximum d'absorption de cette solution est en effet observé lors de l'analyse par spectroscopie d'absorption UV-visible. Le Plasmon généré en surface est donc plus énergétique que lorsque les nanoparticules sont formées en présence de CTAB. La figure 9 représente une image obtenue par microscopie HR-TEM de la solution verte. La taille des nanoparticules est très petite, d'un diamètre inférieur à 5 nm. Un diamètre moyen de 3,7 nm est déterminé par une analyse de la distribution en taille des particules de la solution (figure 10). Le comptage de nanoparticules et la détermination de la taille de chacune d'elles sont réalisés sur un cliché de microscopie. 100 nanoparticules sont nécessaires afin que la distribution en taille déterminée soit représentative de l'ensemble de la population de la solution colloïdale de départ. Puis la distribution est ajustée par une loi log-normale. Exemple 8F. Effet de la nature du surfactant sur la formation des nanoparticules Une solution de nanoparticule est réalisée selon l'exemple 8.B en utilisant du PEG-dithiol à la place du bromure de cétyltriméthylammonium (CTAB). Exemple 9. Nanoparticules d'or, Au Tous les réactifs sont utilisés tels que reçus, sans purification préalable. L'eau utilisée pour préparer la solution est de l'eau ultra-pure dégazée et stockée sous Argon. La réaction a lieu sous Argon, à température ambiante (20 °C). 200 mL de solution colloïdale à 0,2 wt% (2 g1-1) en nanoparticules d'or sont synthétisés en suivant les étapes suivantes : Pour la préparation de la solution A, préparer 80 mL d'eau ultra-pure dans un ballon et dissoudre d'abord 0,73 g de CTAB (2,0.10-3 mol) dans l'eau puis 0,4 g d'Au3+ sous la forme d'AuCI3(1,3.10-3 mol) et ajuster à 100 mL avec de l'eau ultra-pure. Stocker à froid. Pour la préparation de la solution B, préparer 50 mL d'eau ultra-pure dans un ballon, dissoudre 0,2 mol de glycérol (18,4 g) puis 0,2 mol de NaOH (8 g) et ajuster à 100 mL avec de l'eau ultra-pure. 3066117 21 A température ambiante, sous une atmosphère d'argon et sous agitation (600 rpm), ajouter goutte à goutte la solution A à la solution B. Laisser réagir pendant 4h. A la fin de la réaction, ajuster le pH à 7 par addition d'HCI commercial concentré (24 M). Le volume correspondant à ajouter est compris de 0,8 à 0,9 mL La figure 11 représente une image HR-TEM des nanoparticules d'or obtenues. Leurs tailles varient entre 10 et 30 nm. Exemple 10. Nanoparticules de cuivre, Cu Exemple 10A. Synthèse des nanoparticules de cuivre, Cu Les nanoparticules de cuivre sont synthétisées selon le protocole décrit à l'Exemple 8 B: Tous les réactifs sont utilisés tels que reçus, sans purification préalable. L'eau utilisée pour préparer la solution est de l'eau ultra-pure dégazée et stockée sous Argon. La réaction a lieu sous Argon, à température ambiante (20 °C). Pour la préparation de la solution A, préparer 80 mL d'eau ultra-pure dans un ballon et dissoudre d'abord 1,35 g de CTAB (3,7.10-3 mol) dans l'eau puis 0,4 g de Cu2+ sous la forme d'Cu(NO3)2 (Masse molaire : 187,56 g/mol : 0,75gCu(NO3)2 = 4.10-3 mol) et ajuster à 100 mL avec de l'eau ultra-pure. Stocker à froid, dans le noir. Pour la préparation de la solution B, préparer 50 mL d'eau ultra-pure dans un ballon, dissoudre 0,37 mol de glycérol (34 g) puis 8 g de NaOH (0,2 mol) et ajuster à 100 mL avec de l'eau ultra-pure. A température ambiante, dans le noir, sous une atmosphère d'argon et sous agitation (600 rpm), ajouter goutte à goutte la solution A à la solution B. Laisser réagir pendant 4h. A la fin de la réaction, ajuster le pH à 7 par addition d'HCI commercial concentré (24 M). Le volume correspondant à ajouter est compris de 0,8 à 0,9 mL. La figure 12 représente une image H R-TEM des nanoparticules de cuivre comprises dans la suspension colloïdale ainsi obtenue. Des amas de petites particules sont observés démontrant que le surfactant ne permet pas une stabilisation complète des nanoparticules de cuivre. Quelques nanoparticules isolées sont également présentent comme illustré sur la figure 13. Ces nanoparticules sont homogènes et de petite taille, avec un diamètre d'environ 2 nm. 3066117 22 Exemple 10B. Effet de la nature du surfactant sur la formation des nanoparticules de cuivre Une solution de nanoparticule est réalisée selon l'exemple 10A en utilisant du PEG-600 à la place du bromure de cétyltriméthylammonium (CTAB). Exemple 11. Tentative de préparation de nanoparticules de soufre Selon la procédure 8.B à partir de Na2S et du PEG-600 comme surfactant : une solution colloïdale à 0,2 g.L-1 en soufre a été obtenue. Des objets homogènes en taille et de diamètre d'environ 5 nm mais difficiles à observer par microscopie HR-TEM en raison d'un faible contraste (figure 14), ont pu être observés. Ces objets du fait de leur taille ont été appelés nanoparticules de soufre. IV) Résultats bio Exemple 12. Test CMI sur les bactéries MRSA et MSSA : Matériels et Méthodes Les bactéries MRSA (Meticilline Résistant Staphylococus Aureus ; ATCC 43300) et MSSA (Meticilline Sensible Staphylococus Aureus ; ATCC 29213) ont été incubées sur TSA 24 h à 37 °C. La standardisation des bactéries a été effectuée en réalisant un 0.5mc farland avec des colonies fraiches, représentant 1,5.107 CFU.mL-1 puis la suspension bactérienne a été diluée au 1/100ème dans du milieu Mueller Hinton (MH) (sigma. 90922-500G) afin d'obtenir une concentration bactérienne finale (spf) correspondant à 1,5.105 CFU.mL-1. Chaque essai sur particule a été réalisé sur une ligne d'une plaque 96 puits à fond rond (ref.353077) en duplicate. 50 pL de milieu MH ont été déposés dans les puits. 50 pL de la particule pure ont été déposés dans la première colonne (colonne 1) de la plaque puis des dilutions successives de raison 2 ont été réalisées en prenant 50 pl de chaque colonne redéposés dans la colonne suivante jusqu'à la dernière colonne (colonne 12). Les 50 pl de la dernière colonne ont été jeté. Puis 50 pL de la suspension bactérienne (spf) a été déposée dans chaque puit représentant une concentration finale bactérienne par puit de 0,75.105 CFU.mL-1. La concentration finale de la particule dans le premier puit (colonne 1) représentant une dilution finale au 1/4 par rapport à sa concentration initiale. Deux contrôles négatifs ont été réalisés avec du MH pure, et avec 50 pL de MH et 50 pL de particule pure pour vérifier qu'il n'y avait pas de contamination. Un contrôle positif a été réalisé avec 50 pL de MH et 50 pL de la suspension bactérienne (spf). La plaque a été incubée pendant 24 h à 37 °C dans une chambre humide. 3066117 23 Cette méthode étant la méthode de référence pour déterminer la CMI d'une particule, un contrôle de la CMI pour l'oxacilline a été réalisé sur ces mêmes souches MSSA et MRSA. Exemple 13. Test CMI sur les bactéries MRSA et MSSA : Résultats La première cupule sans pousse de bactérie est déterminée comme étant la Concentration Minimale Inhibitrice (CMI) de la particule. Numéro Particule/ quantité CMI MSSA (g/L) CMI MRSA (g/L) Contrôle Oxacilline 2,5.10-4 0,256 A Ag (selon Exemple 8B) 7,81.10-4 7,81.10-4 B Ag (selon Exemple 8F) 0,05 0,05 D S 0 (selon Exemple 11) 0,05 0,05 F Cu 0.2g/L (selon exemple 10A) 4,88.10-5 9,71.10-5 H Au (selon Exemple 9) 4,88.10-5 3,9.10-4 K Cu (selon Exemple 10B) 0,025 0,05 L Ag2S PEG-600 (selon Exemple 4C) 0,0125 Non determiné N CuS PEG-600 (selon Exemple 5C) 0,0125 Non déterminé 0 Ag2S (selon Exemple 4A) 1,95.10-4 3,9.10-4 P Au2S3 (selon Exemple 6A) 2,44.10-5 4,88.10-5 Q CuS (selon Exemple 5A) 9,71.10-5 9,71.10-5 R Ag2S (selon Exemple 4B) 1,95.10-4 1,95.10-4 S Au2S3 (selon Exemple 6B) 4,88.10-5 9,71.10-5 T CuS (selon Exemple 5B) 9,71.10-5 9,71.10-5 3066117 24 U CuS+NH3 (selon Exemple 1) 0,023-0,046 0,046 V CuSO4 0,078 0,078-0,157 A+D 1/8 D + 7/8 A 7,81.10-4 7,81.10-4 H+D 1/8 D + 7/8 H 9,71.10-5 9,71.10-5 F+D 1/8 D + 7/8 F 4,88.10-5 1,95.10-4 D+A+H 1/8 D + 3,5/8 A + 3,5/8 H 9,71.10-5 1,95.10-4 D+A+F 1/8 D +3,5/8 A +3,5/8 F 9,71.10-5 9,71.10-5 D+H+F 1/8 D+ 3,5/8 H + 3,5/8 F 4,88.10-5 9,71.10-5 D+A+H+F 1/8 D + 2/8 A + 2/8 H + 3/8 F 4,88.10-5 9,71.10-5 D+K 1/8 D + 7/8 K 0,025 0,05 0+P 1/2 0 + 1/2 P 9,71.10-5 9,71.10-5 P+Q y2 p + y2 Q 4,88.10-5 9,71.10-5 0+Q 1/40+1/4Q 7,81.10-4 1,95.10-4 Tableau 1. Test de Concentration Minimale Inhibitrice (CMI) des solutions aqueuses obtenues par l'utilisation de la présente invention sur les bactéries MRSA et MSSA. Les nanoparticules d'Ag(0) (selon l'exemple 8), de Cu(0) (selon l'exemple 10) et d'Au(0) (selon l'exemple 9) sont notées respectivement Ag, Cu et Au, et les nanoparticules de sulfure d'argent (selon l'exemple 4), de sulfure de cuivre (selon l'exemple 5) et de sulfure d'or (selon l'exemple 6) sont notées respectivement Ag2S, CuS et Au2S3. CuSO4 se rapporte à une solution de sel de cuivre soluble au sens de l'Invention, c'est-à-dire à une solution de sulfate de cuivre dans l'eau. S représente une solution aqueuse de nanoparticules de soufre préparée selon l'exemple 11. CuS+NH3 se réfère au complexe soluble de sulfure de cuivre de l'exemple 1.Ce complexe soluble n'a pas d'activité car c'est la suspension et non la solution de nanoparticules qui présente des propriétés bactéricides. Le contrôle représente bien la CMI attendue pour ces souches. Les CMI des différentes particules montrent un effet bactéricide pour la plupart sur les souches MSSA et MRSA à des concentrations différentes. 3066117 Il est à noter que le soufre sous forme de nanoparticules ou le sulfate de cuivre en solution, n'appartenant pas à l'invention, ne présentent qu'une faible inhibition des bactéries MRSA et MSSA comparativement aux complexes solubles et nanoparticules de l'invention. De plus, les complexes solubles et nanoparticules de l'invention sont tous de meilleurs inhibiteurs de MRSA que l'oxacilline. L'oxacilline, utilisée ici comme référence, est un exemple de substance active utilisée en cas d'infection par des Staphylocoques. Parmi les composés de l'invention, les nanoparticules de cuivre, les nanoparticules de sulfure d'or et les nanoparticules de sulfure de cuivre présentent les meilleurs taux d'inhibition, à la fois des bactéries MSSA et des bactéries MRSA. Exemple 14. Test CMI sur les bactéries Gram positif/négatif et sur les levures La nanoparticule concernée est le sulfure de cuivre surfacté avec de CTAB, synthétisée selon l'exemple 5, la source de cuivre étant du nitrate de cuivre, Cu(NO3)2, et non du sulfate de cuivre. Les tests sont réalisés selon la méthode décrite à l'Exemple 12 Les activités sont mesurées par les CMI (Concentration Minimale Inhibitrice), l'index généralement utilisé, exprimé ici en mg par litre. Un mg par litre représente une ppm : Bactéries Gram positif Staphylococcus Aureus 0,15 Propionibacterium Acnes 0,07 Bactérie Gram négatif Pseudomonas Aeruginosa 1,2 Levure Candida Albicans 0,32 Ces nanoparticules sont actives en particulier sur la bactérie qui produit l'acné : la concentration minimale inhibitrice contre le propionibacterium acnes est 0,07 mg par litre. Les nanoparticules de sulfure de cuivre sont non seulement actives, mais sont de plus très bien tolérées, et cela d'autant plus que la concentration dans une crème anti-acné est faible : de l'ordre du ppm. Exemple 15 Il est à noter que dans tous les exemples ci-dessus faisant intervenir le CTAB, celui-ci peut être réduit à une concentration molaire égale à 0,2 fois celle du métal. 3066117 26 On a préparé également deux suspensions de nanoparticules de sulfure de cuivre avec un rapport CTAB/Cu respectivement de 1 et de 0.2 en suivant le protocole de l'exemple 5 et en utilisant les matières de départ ci-dessous CuSO4.5H20 Masse mol : 249,69 g Na2S.9H20 Masse mol : 240,18 g CTAB Masse mol : 364,45 g Solution à 2 g.L-1 de Cu (Masse mol : 63,55 g) soit 0.2 g pour 100 mL ce qui correspond à 3.15 mmol de Cu504.5H20 Deux suspensions de CuS dans 100 mL d'eau ont été préparées à température ambiante. Suspension 1 rapport CTAB/Cu = 1 dans 100 mL 3.15 mmol de Cu504.5H20 Soit m = 0.786 g 3.15 mmol de Na25.9H20 Soit m = 0.757 g 3.15 mmol de CTAB Soit m = 1.148 g Ces suspensions sont stables après 48 h à température ambiante Suspension 2 rapport CTAB/Cu = 0.2 3.15 mmol de Cu504.5H20 Soit m = 0.786 g 3.15 mmol de Na25.9H20 Soit m = 0.757 g 0.64 mmol de CTAB Soit m = 0.230 g Ces suspensions sont stables après 48h à température ambiante Exemple 16 3066117 27 Les tests sur CuS à 0,2 de CTAB (suspension 2 de l'exemple 15) ont été faits par Groupe Ideatest, . La bactérie testée est le propionibacterium Acnes, responsable de l'acné. Les résultats sont les suivants La concentration létale est de 1 mg.L-1 (une partie pour million) Il existe deux autres mesures, déterminées également par Groupe ldeatest. La mesure courante en Europe est la concentration 4 log (qui divise la population bactérienne par 10 000) en cinq minutes. Ceci est atteint pour le propionibacterium acnes avec 1 mg.L-1. La norme AFNOR EN 1276, à usage médical, bien plus rigide, est 5 log en cinq minutes (Elle divise la population bactérienne par 100 000) .Ceci est atteint pour le propionibacterium acnes avec 2 mg. L-1 Un contrôle de tolérance a été également fait par le Groupe Ideatest.. L'Europe interdisant maintenant les essais sur les animaux et sur les hommes en ce domaine, les laboratoires ont développé une méthode nouvelle. Elle consiste à cultiver des cellules de peau humaine, à les assembler en couches pour former une « peau reconstruite » et à tester sur cette peau reconstruite. Ces essais ont été faits avec une concentration de 20 mgri pour avoir une marge de sécurité très large. Contrairement à tous les anti-acnés actuellement sur le marché, la nanoparticule de l'invention ne produit aucune irritation. D'autres tests ont été faits avec CuS à 10 de CTAB, (exemple 5) en concentration inhibitrice : ils ont donné les résultats suivants, en mgri. 1 mgri correspond à une ppm, partie pour million : Bactéries Gram positif Staphylococus Aureus 0,15 Propionibacterium Acnes 0,07 Bactérie Gram négatif Escherichia Coli Pseudomonas Aeruginosa 1,2 Levures Candida Albicans 0,32 3066117 28 Ces résultats couvrent l'ensemble des familles de germes, gram positifs, gram négatifs et champignons notamment levures. Ils sont excellents. Exemple 17. Composition Crème anti-acné, 80% d'eau 20% d'huile, contenant 2 ppm de SCu préparé avec du CTAB comme surfactant, le rapport de concentration molaire du CTAB/Cu était 0,2, prépartion faite à température ambiante. REVENDICATIONS1. Métal de transition pour son utilisation comme substitut de parabène. 2. Métal de transition pour son utilisation selon la revendication 1, dans laquelle ledit métal de transition est un métal de transition sous forme insoluble, notamment sous forme d'un métal de transition au degré d'oxydation 0 ou sous forme de sulfure ou d'un oxyde du métal de transition, ou sous forme soluble notamment des sels de sulfates, nitrates ou chlorures du métal de transition. 3. Métal de transition pour son utilisation selon l'une des revendications 1 ou 2, dans laquelle le métal de transition est sous forme insoluble, ledit métal de transition sous forme insoluble étant mis en solution aqueuse par la formation de nanoparticules ou par la formation d'un complexe. 4. Métal de transition pour son utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, dans laquelle ledit métal de transition est choisi dans la colonne IB de Mendeleïev, en particulier choisi parmi le cuivre, l'argent et l'or. 5. Métal de transition pour son utilisation selon l'une des revendications 1 à 4, dans laquelle ledit métal de transition est choisi parmi le cuivre, l'argent et l'or, et étant sous forme de sulfure, notamment sous forme d'un complexe ou sous forme de nanoparticules. 6. Métal de transition pour son utilisation selon l'une des revendications 1 à 4, dans laquelle ledit métal de transition choisi est parmi le cuivre, l'argent et l'or, étant au degré d'oxydation 0 et sous forme de nanoparticules. 7. Métal de transition pour son utilisation selon l'une des revendications 1 à 4, dans laquelle ledit métal de transition est choisi parmi le cuivre, l'argent et l'or, étant sous forme de sel soluble. 8. Métal de transition pour son utilisation selon l'une des revendications 1 à 7, dans laquelle ledit métal de transition est dans une composition contenant de l'eau, notamment comprenant de l'ordre de 10-6 grammede substitut de parabène par gramme de composition. 9. Métal de transition pour son utilisation selon la revendication 8 dans laquelle la composition contenant de l'eau est une émulsion. 10. Métal de transition pour son utilisation selon l'une des revendications 8 ou 9 dans laquelle la composition contenant de l'eau est une émulsion huile-dans-l'eau ou eau-dans- l'huile, dépourvue de parabène et notamment comprenant du cuivre, de l'argent ou de l'or sous la forme de nanoparticules, ou comprenant du sulfure de cuivre, du sulfure d'argent ou du sulfure d'or. Demande de brevet initial en France n°17/54219 déposée le 12 mai 2017 3066117 30 Confidentiel 11. Métal de transition pour son utilisation selon l'une des revendications 1 à 10, dans laquelle ledit métal de transition est utilisé dans un produit alimentaire ou cosmétique ou pharmaceutique. Demande de brevet initial en France n° 17/54219 déposée le 12 mai 2017