FR 3064485 A1 20181005 FR 1752784 A 20170331 1 La présente invention concerne l'utilisation d'une composition d'immunoglobulines (1g) hyper-enrichie en immunoglobulines anti-virus respiratoire syncytial (RSV) dans le traitement prophylactique ou curatif d'une infection par le virus RSV chez un sujet, par administration de la composition sous une forme adaptée pour que les immunoglobulines anti-RSV se lient au RSV au niveau des voies respiratoires inférieures, de préférence au niveau des poumons. ARRIERE PLAN TECHNOLOGIQUE DE L'INVENTION Le virus respiratoire syncytial (RSV) est un agent infectieux répandu des voies respiratoires. Le RSV provoque généralement une infection bénigne, asymptomatique ou avec des symptômes faibles (rhume) chez les personnes immunocompétentes, mais qui peut être responsable de plusieurs épisodes infectieux par an sur un même individu, pouvant être à l'origine d'absentéisme scolaire ou au travail. De plus, ce virus est un facteur important d'infections dans les hôpitaux chez les patients immunodéprimés, en attente ou en sortie de greffe, chez les nourrissons ou jeunes enfants ou chez les personnes âgées. Le RSV est la plus importante cause de bronchiolites et de pneumonies chez les nourrissons et les jeunes enfants, et est largement responsable d'infections respiratoires dans les établissements pour personnes âgées. Actuellement, il n'existe pas de vaccin efficace disponible pour prévenir l'infection par le RSV. Bien que des médicaments anti-viraux soient proposés pour traiter les infections à RSV, leur efficacité est discutable, surtout chez les enfants. Il existe donc toujours un besoin en traitement préventif et curatif capable de neutraliser le virus respiratoire syncytial (RSV) et ainsi prévenir ou traiter une infection par le RSV. RESUME DE L'INVENTION L'invention vise à faire agir localement au niveau des poumons, et de manière ciblée, une composition d'immunoglobulines (1g) hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV. La présente invention concerne une composition d'immunoglobulines (1g) hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV, pour son utilisation dans le traitement prophylactique ou curatif d'une infection par le virus RSV chez un sujet, par administration de la composition sous une forme adaptée pour que les immunoglobulines anti-RSV se lient au RSV au niveau des voies respiratoires inférieures. De préférence, les voies respiratoires inférieures sont les poumons. 3064485 2 La composition selon l'invention est destinée à être administrée sous forme de particules ou de gouttelettes d'une taille comprise entre 0,025 !lm et 10 pin, de préférence entre 0,5 !lm et 5 !lm et préférentiellement entre 1 !lm et 3 !lm. 5 Selon un mode de réalisation particulier, la composition d'Ig hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV peut comprendre en outre un agent tensio-actif. Selon un mode de réalisation particulier, ladite composition peut comprendre en outre un agent modifiant la viscosité. 10 Selon un mode de réalisation particulier, ladite composition comprend une concentration d'immunoglobulines anti-RSV comprise entre 10 et 250 g/1, de préférence entre 10 et 100 g/l. Dans un mode de réalisation particulier, la composition utile selon l'invention est destinée à 15 être administrée par voie pulmonaire. Notamment, la composition selon l'invention peut être administrée par voie pulmonaire par inhalation d'un aérosol, de préférence au moyen d'un spray buccal ou par nébulisation au moyen d'un nébuliseur, en particulier un nébuliseur à tamis. Ladite composition peut être administrée par voie pulmonaire avec un volume d'administration compris entre 250 pl et 12 ml, de préférence entre 250 pl et 10 ml. 20 Dans un mode de réalisation particulier, la composition utile selon l'invention est destinée à être administrée par voie nasale. Notamment, la composition selon l'invention peut être administrée par voie nasale sous la forme d'un aérosol. Ladite composition peut être administrée par voie nasale avec un volume d'administration inférieur à 20 ml, de préférence 25 inférieur à 15 ml, plus préférentiellement compris entre 2 ml et 8 ml. Avantageusement, la composition est utilisée dans le traitement prophylactique ou curatif d'une infection par le virus RSV chez un sujet, le sujet pouvant appartenir à au moins un des groupes suivants : les enfants, les nourrissons, les personnes immunodéprimées notamment 30 les personnes traitées pour une greffe en particulier une greffe de poumon, les nourrissons prématurés et les enfants ou personnes âgées atteints d'une maladie pulmonaire en particulier une broncho-pneumopathie chronique obstructive (BPCO), cardiaque ou immunitaire. 3064485 3 LEGENDE DES FIGURES Figure 1. Analyse de la réplication virale par imagerie in vivo : administration préventive de la composition enrichie en Ig anti-RSV dans les poumons par voie 5 intranasale. Etude par imagerie in vivo de la réplication virale 5 jours après une infection au virus RSV chez des souris ayant reçu préventivement, par voie intranasale : un placebo ; une composition comprenant des 1g non spécifiques (contrôle négatif, « anticorps irrelevant ») ; une composition enrichie en 1g anti-RSV à une dose de lmg/kg (= LFB 1) ; une composition enrichie en 1g anti-RSV à une dose de 0,1mg/kg (= LFB 0,1). L'histogramme représente les 10 moyennes des résultats obtenus pour chaque condition expérimentale. Les résultats ont été obtenus à partir de 3 souris pour la condition placebo et de 4 souris pour chacune des autres conditions expérimentales. Figure 2. Quantification de la réplication virale (par quantification de l'activité 15 luciférase), 4 jours après infection au RSV. La réplication virale est analysée via une quantification de l'activité luciférase dans des lysats pulmonaires de souris ayant reçu préventivement, dans les poumons par voie intranasale : un placebo ; une composition comprenant des 1g non spécifiques (« anticorps irrelevant »); une composition enrichie en 1g anti-RSV à une dose de lmg/kg (= LFB 1) ; une composition enrichie en 1g anti-RSV à une 20 dose de 0,1mg/kg (= LFB 0,1). Figure 3. Quantification de la réplication virale (par RT-Q-PCR), 4 jours après infection au RSV. L'expression du gène de nucléocapside N du virus RSV est quantifiée par RT-qPCR à partir de lysats pulmonaires de souris ayant reçu préventivement, dans les poumons par voie 25 intranasale : un placebo ; une composition comprenant des 1g non spécifiques (« anticorps irrelevant »); une composition enrichie en 1g anti-RSV à une dose de lmg/kg (= LFB 1); une composition enrichie en 1g anti-RSV à une dose de 0,1mg/kg (= LFB 0,1). DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION 30 Traitement 11 est ici décrit une méthode de traitement prophylactique ou curatif d'une infection par le virus respiratoire syncytial (RSV) chez un sujet, ladite méthode comprenant l'administration 3064485 4 d'une composition d'immunoglobulines (Ig) hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV sous une forme adaptée pour que les immunoglobulines anti-RSV se lient au RSV au niveau des voies respiratoires inférieures, de préférence au niveau des poumons. 5 Le sujet peut être tout mammifère, de préférence un être humain, quel que soit son âge ou son sexe. Il peut s'agir notamment d'un sujet à risque vis à vis d'une infection par le virus RSV, par exemple les enfants, les nourrissons, ou une personne immunodéprimée, notamment chez les nourrissons prématurés et les enfants ou personnes âgées atteints d'une maladie pulmonaire, cardiaque ou immunitaire. De préférence, le sujet, s'il est infecté, est 10 asymptomatique, c'est-à-dire qu'il n'a pas encore développé de symptômes associés à l'infection. En particulier, le sujet appartient à au moins un des groupes suivants : les enfants, les nourrissons, les personnes immunodéprimées notamment les personnes traitées pour une 15 greffe en particulier une greffe de poumon, les nourrissons prématurés et les enfants ou personnes âgées atteints d'une maladie pulmonaire en particulier une broncho-pneumopathie chronique obstructive (BPCO), cardiaque ou immunitaire. Le terme « traitement prophylactique » se réfère à la prévention ou l'arrêt du développement 20 de l'infection, avant que celle-ci n'atteigne les voies respiratoires inférieures, et provoque une inflammation des poumons. Il prévient ainsi l'apparition des symptômes, à savoir congestion ou écoulement nasal, mais surtout inflammation pulmonaire, notamment chez les nourrissons prématurés et les enfants atteints d'une maladie pulmonaire, cardiaque ou immunitaire. Le terme « traitement curatif » se réfère à une disparition ou une diminution de l'infection liée 25 au RSV au niveau des voies respiratoires inférieures et/ou à une disparition ou une atténuation d'un ou des symptômes, à savoir congestion ou écoulement nasal, mais surtout inflammation pulmonaire, notamment chez les nourrissons prématurés et les enfants atteints d'une maladie pulmonaire, cardiaque ou immunitaire. 30 Composition d'Ig hyper-enrichie en Ig anti-RSV La composition d'immunoglobulines utile selon l'invention est une composition d'immunoglobulines hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV qui présente une action neutralisante vis-à-vis du RSV et présente une efficacité thérapeutique pour le patient. Plus 3064485 5 particulièrement, la composition est hyper-enrichie en immunoglobulines dirigées de manière spécifique contre le virus RSV. Le terme « spécifique » signifie que les immunoglobulines reconnaissent et se lient à un immunogène dudit virus, substantiellement sans réaction croisée avec un autre virus. Dans l'ensemble de la description, les termes «1g », « immunoglobulines 5 » et « anticorps » peuvent être interchangeables. La composition d'immunoglobulines comprend des anticorps qui se lient à un même immunogène viral (on parle alors de population monovalente d'anticorps), ou à plusieurs immunogènes différents du RSV (on pourra alors parler de population polyvalente d'anticorps). Essentiellement, il s'agit d'anticorps polyclonaux. 10 Ladite composition d'immunoglobulines contient essentiellement des immunoglobulines humaines polyvalentes qui peuvent être des immunoglobulines A (IgA), des immunoglobulines E (IgE), des immunoglobulines M (IgM) ou des immunoglobulines G (IgG). Avantageusement, la composition d'immunoglobulines contient essentiellement des IgG et/ou des IgM et/ou des IgA. 15 Dans un mode de réalisation particulier, la composition d'immunoglobulines comprend essentiellement des IgG, quelle que soit leur sous-classe (IgGl, IgG2, IgG3 et IgG4). De préférence, la composition est adaptée à une administration locale et contient de préférence essentiellement des IgG et/ou des IgA, les IgA permettant le recrutement de cellules telles que des cellules mucosales présentant des alfa récepteurs. 20 Par « composition d'Ig hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV » on entend une composition d'immunoglobulines comprenant au moins 10%, au moins 20%, au moins 30%, au moins 40%, au moins 50%, au moins 60%, au moins 65%, au moins 70%, au moins75%, au moins 80% ; au moins 85%, au moins 90%, au moins 95%, au moins 96%, au moins 97%, au moins 98%, au moins 99% en poids d'immunoglobulines neutralisantes vis-à-vis du RSV. 25 Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, le concentré d'immunoglobulines hyper-enrichi en immunoglobulines anti-RSV comprend au moins 10% en poids d'immunoglobulines polyvalentes capables de reconnaître et/ou de neutraliser le virus RSV ou l'une de ses parties. Dans un autre mode de réalisation particulier de l'invention, le concentré d'immunoglobulines hyper-enrichi en immunoglobulines anti-RSV comprend au 30 moins 30% en poids d'immunoglobulines polyvalentes capables de reconnaître et/ou de neutraliser le virus RSV ou l'une de ses parties. Dans encore un autre mode de réalisation particulier de l'invention, le concentré d'immunoglobulines hyper-enrichi en immunoglobulines anti-RSV comprend au moins 60% en poids d'immunoglobulines polyvalentes capables de reconnaître et/ou de neutraliser le virus RSV ou l'une de ses parties. 3064485 6 Les immunoglobulines dirigées spécifiquement contre le RSV peuvent se lier à l'une quelconque des protéines du virus, de préférence une protéine de surface, jouant un rôle dans les mécanismes d'infection, notamment au cours de la reconnaissance, de la liaison de la particule virale à sa cellule-hôte, de la fusion de la particule virale à sa cellule-hôte et de la 5 propagation du virus de cellules hôte à cellule hôte. On peut citer notamment la protéine SH, la protéine G ou la protéine F du RSV. La composition est généralement concentrée. En particulier, la composition peut comprendre une concentration d'immunoglobulines anti-RSV comprise entre 10 et 250 g/1, de préférence 10 entre 10 et 100 g/l. Méthodes de préparation de la composition d'Ig hyper-enrichie en Ig anti-RSV Plusieurs méthodes de préparation de la composition d'Ig hyper-enrichie en Ig anti-RSV sont possibles. Préférentiellement, on utilise une méthode de préparation d'immunoglobulines à 15 partir de pools de plasma, avantageusement de plasma humain. Une telle méthode implique des opérations de concentration des préparations plasmatiques, typiquement d'un facteur 100 à 1000. Selon un mode particulier de réalisation, des préparations d'immunoglobulines issues de plasma ou de fractions de plasma sanguin sont soumises à une chromatographie d'affinité 20 utilisant une protéine virale comme ligand d'affinité, pour obtenir une préparation d'immunoglobulines hyper-enrichies en immunoglobulines capables de reconnaître, et avantageusement de neutraliser, ledit RSV. Cette méthode met en oeuvre des supports de chromatographie d'affinité sur lesquels sont greffés une ou plusieurs protéines virales du RSV, ou des fragments antigéniques de ceux-ci. Parmi les protéines virales utiles comme 25 ligands, on peut citer par exemple les protéines de l'enveloppe : la protéine SH, la protéine G (glycoprotéine transmembranaire hautement glycosylée responsable de la liaison à la cellule hôte), la protéine F (glycoprotéine transmembranaire responsable de la fusion à la membrane hôte, de l'entrée du virus dans la cellule et de la formation des syncitia). La chromatographie utilise une matrice comprenant un support à base de particules de 30 polymère, et est de préférence sous forme d'un gel ou d'une résine. Ces particules de polymère sont de préférence de forme sphérique ou oblongue, il peut s'agir notamment de billes. Le polymère peut être naturel ou non-naturel, organique ou inorganique, réticulé ou non réticulé. Le polymère est de préférence un polymère organique, de préférence réticulé. Dans un mode de réalisation préféré, le polymère est de la cellulose, et les particules sont de 3064485 7 préférence des billes de cellulose poreuses. D'autres types de polymères possibles incluent agarose, dextran, polyacrylates, polystyrène, polyacrylamide, polyméthacrylamide, des copolymères de styrène et divinylbenzène, ou des mélanges de ces polymères. Les particules peuvent fournir un milieu de chromatographie que l'on peut utiliser pour remplir une colonne 5 par exemple. Sur le support est greffé une protéine virale du RSV, ou un fragment antigénique de celle-ci, soit directement, soit via un espaceur, qui lie de manière covalente le ligand aux particules du support chromatographique. Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, la protéine greffée sur le support est une protéine de surface du RSV, par exemple la protéine F du RSV 10 ou la protéine G du RSV, ou un fragment antigénique de celles-ci, soit directement, soit via un espaceur, qui lie de manière covalente le ligand aux particules du support chromatographique. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, le support greffé présente plusieurs protéines différentes et/ou plusieurs fragments antigéniques différents appartenant au RSV, 15 afin d'obtenir un concentré d'immunoglobulines présentant différentes cibles antigéniques. Une particule peut porter plusieurs espaceurs. La liaison entre le ligand et l'espaceur peut être, par exemple, une liaison amide. La matrice sous forme de gel est préparée par addition classique d'un tampon sur les particules de polymère portant les ligands, comme cela est connu de l'homme du métier, de 20 manière à obtenir une matrice sous forme de gel, adaptée pour une chromatographie d'affinité. La matrice telle que définie ici est utile dans une chromatographie d'affinité liant des immunoglobulines. La matrice est particulièrement utile dans une chromatographie d'affinité à lit mélangé. Une telle matrice comprend avantageusement plusieurs antigènes différents spécifiques du RSV et est donc capable de lier des immunoglobulines dirigées 25 contre plusieurs épitopes différents du RSV. Les immunoglobulines anti-RSV présentes dans le plasma ou la fraction plasmatique se fixent à la matrice, et le produit adsorbé est élué et récupéré, enrichi en immunoglobulines anti-RSV. De manière avantageuse, les conditions de mise en oeuvre de la chromatographie d'affinité sont adaptées par l'homme du métier pour garantir la réutilisation de la matrice tout en maintenant des conditions d'élution non 30 dégradantes pour le produit d'intérêt. Le plasma ou la fraction plasmatique de départ soumis au procédé d'enrichissement consiste en du plasma provenant de plasmas sanguins ou de pools de plasmas sanguins de sujets mammifères (humains ou non humains) ou en une fraction de ce plasma, soit toute partie ou sous-partie du plasma, ayant fait l'objet d'une ou plusieurs étapes de purification. Dans un 3064485 8 mode de réalisation particulier, le plasma ou la fraction plasmatique de départ soumis au procédé d'enrichissement consistent avantageusement en du plasma provenant de pools de plasmas sanguins de sujets humains normaux ou en une fraction de ce plasma, soit toute partie ou sous-partie du plasma, ayant fait l'objet d'une ou plusieurs étapes de purification. Les 5 fractions plasmatiques utilisables incluent ainsi le surnageant de plasma cryoprécipité, le cryoprécipité de plasma (remis en suspension), les fractions I à V obtenues par fractionnement éthanolique (selon la méthode de Cohn ou de Kistler & Nitschmann), le surnageant et le précipité obtenus après précipitation à l'acide caprylique et/ou caprylate, les éluats de chromatographies et les fractions non adsorbées des colonnes de chromatographie, et les 10 filtrats. De manière particulièrement avantageuse, le plasma ou la fraction plasmatique de départ soumis au procédé d'enrichissement proviennent de pools de plasmas sanguins de sujets humains normaux, sans sélection préalable des donneurs, en particulier, sans sélection des donneurs sur la base de leur éventuel taux plasmatique en immunoglobulines anti-RSV. Le 15 plasma ou la fraction plasmatique de départ soumis au procédé d'enrichissement comporte ainsi avantageusement un taux d'immunoglobulines anti-RSV similaire ou égal au taux d'immunoglobulines anti-RSV d'un plasma issu du pool d'au moins 1000 donneurs humains normaux aléatoirement choisis. Le plasma ou la fraction plasmatique de départ soumis au procédé d'enrichissement est avantageusement non enrichi en immunoglobulines anti-RSV 20 d'intérêt comparé au taux d'immunoglobulines anti-RSV d'un plasma issu du pool d'au moins 1000 donneurs choisis de manière aléatoire. Dans un mode de réalisation supplémentaire, le plasma ou la fraction plasmatique de départ soumis au procédé d'enrichissement consistent en du plasma provenant de plasmas sanguins ou de pools de plasmas sanguins de sujets mammifères non humains, mâles et/ou femelles, 25 avantageusement de chèvre, brebis, bouc, bison, buffle, chameau, lama, souris, rat, vache, taureau, cochon, truie, lapin(e), cheval, jument. Le mammifère non humain est avantageusement transgénique et a été préalablement exposé au virus RSV afin de produire dans son plasma des immunoglobulines humaines anti-RSV. Le plasma ou la fraction plasmatique de départ soumis au procédé d'enrichissement contient 30 des immunoglobulines humaines polyvalentes qui peuvent être des immunoglobulines A (IgA), des immunoglobulines E (IgE), des immunoglobulines M (IgM) ou des immunoglobulines G (IgG). Avantageusement, le plasma ou la fraction plasmatique de départ contient essentiellement des IgG quelle que soit leur sous-classe (IgGl, IgG2, IgG3 et IgG4) et/ou des IgA. 3064485 9 Le procédé peut typiquement être un procédé indépendant, dédié à la purification d'immunoglobulines anti-RSV, et est alors avantageusement effectué à partir de plasma ou d'une fraction plasmatique. Dans ce mode de réalisation, le procédé comprend avantageusement les étapes suivantes : 5 fourniture d'un échantillon de plasma ou d'une fraction plasmatique, passage de l'échantillon de plasma ou d'une fraction plasmatique sur une chromatographie d'immunoaffinité sur la matrice décrite ici, récupération de la fraction adsorbée sur la matrice correspondant à la composition d'immunoglobulines hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV. 10 De manière avantageuse, le procédé peut comprendre en outre, après l'étape de capture sur chromatographie d'affinité anti-RSV, une étape dédiée de déplétion de certaines immunoglobulines, en particulier les immunoglobulines E (IgE) et/ou immunoglobulines (IgM), qui peuvent être impliquées dans des mécanismes d'effets secondaires délétères chez les patients. 15 Le procédé comprend avantageusement en outre une étape consistant à soumettre la composition d'immunoglobulines hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV à au moins une étape d'inactivation et/ou d'élimination virale. Dans encore un autre mode de réalisation particulier, le procédé d'obtention des immunoglobulines anti-RSV est couplé à un procédé d'immunoglobulines G polyvalentes 20 afin d'obtenir, à partir d'un même pool de plasma de départ, à la fois un concentré d'immunoglobulines G polyvalentes et un concentré d'immunoglobulines hyper-enrichies en anti-RSV. Le procédé comprend alors typiquement une étape préalable d'obtention de la fraction plasmatique, par fractionnement éthanolique et/ou fractionnement caprylique et/ou séparation 25 chromatographique. Dans ce mode de réalisation, le procédé comprend avantageusement les étapes suivantes : fourniture d'un échantillon d'une fraction plasmatique prépurifiée obtenue par fractionnement éthanolique et/ou fractionnement caprylique et/ou séparation chromatographique passage de la fraction plasmatique prépurifiée sur une chromatographie d'immunoaffinité sur 30 la matrice décrite ici, récupération de la fraction adsorbée sur la matrice correspondant à la composition d'immunoglobulines hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV. Par « séparation chromatographique », on entend toute étape de chromatographie, qu'il s'agisse de chromatographie échangeuse d'ions (échangeuse d'anions et/ou échangeuse de 3064485 10 cations), mixed mode, affinité (utilisant des ligands de type chimiques, anticorps, fragments d'anticorps, aptamères). Par séparation chromatographique, on entend aussi bien une seule et unique colonne de chromatographie, ou un ensemble de colonnes de chromatographie, utilisant ou non le même type de support, en série (mode multicolonnes par exemple) ou en 5 parallèle. Plus précisément, la fraction plasmatique peut être obtenue par un fractionnement éthanolique développé à l'origine par Cohn et al (Cohn et al, 1946. J. Am. Chem. Soc. 68, 459 ; Oncley et al, 1949, J. Am. Chem. Soc. 71, 541), ou bien par une séparation chromatographique, telle que décrite par exemple dans EP 0 703 922 et WO 99/64462, ou encore par un fractionnement 10 caprylique tel que décrit par Steinbuch et al 1969, Arch Biochem Biophys. 134(2):279-84). On préfère tout particulièrement les procédés mis au point par la Demanderesse dans les demandes de brevet WO 94/29334 et WO 02/092632, et tout particulièrement celui décrit dans WO 02/092632. Dans ce cas, on soumet un plasma sanguin, ou une fraction de plasma sanguin enrichie en Ig, à un fractionnement caprylique (prépurification par précipitation de 15 contaminants non immunoglobulines), et une chromatographie unique sur un support de résine échangeuse d'anions effectuée à pH alcalin. Un traitement d'inactivation virale peut être réalisé, de préférence effectué par solvant-détergent, comme décrit par Horowitz dans le brevet US 4 764 369, éventuellement complété par une étape d'élimination virale par nanofiltration sur filtre de taille de pores 75N, 35N, 20N et/ou 15N. 20 La fraction d'Ig ainsi récoltée est déjà concentrée, mais peut ensuite subir des étapes de concentration supplémentaire par ultrafiltration, et de filtration stérilisante. Ce concentré est ensuite soumis à une étape chromatographique d'immunoaffinité sur la matrice telle que décrite plus haut. De manière avantageuse, le procédé peut comprendre en outre, de préférence après l'étape de 25 capture sur chromatographie d'affinité anti-virus, une étape dédiée de déplétion de certaines immunoglobulines, en particulier les immunoglobulines A (IgA), et/ou immunoglobulines E (IgE) et/ou immunoglobulines M (IgM), qui peuvent être impliquées dans des mécanismes d'effets secondaires délétères chez les patients. Les immunoglobulines à dépléter sont avantageusement sélectionnées en particulier selon la voie d'administration choisie pour le 30 concentré d'immunoglobulines hyper-enrichi en immunoglobulines anti-virus et/ou selon le contenu de l'échantillon de plasma ou de la fraction plasmatique de départ. Le procédé peut en outre comprendre les étapes ultérieures consistant à additionner un ou plusieurs stabilisants pharmaceutiquement acceptables; et éventuellement congeler ou lyophiliser le concentré ainsi obtenu. 3064485 11 Formulation Avantageusement, une composition d'immunoglobulines telle que décrite plus haut est sous la 5 forme d'une composition pharmaceutique comprenant les immunoglobulines anti-RSV, en association avec au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable. Par excipient pharmaceutiquement acceptable, on entend des excipients qui ne sont pas nocifs ou toxiques vis-à-vis du tractus respiratoire et plus particulièrement de l'épithélium trachéo-bronchique. La formulation de la composition pharmaceutique utile selon l'invention est adaptée pour que 10 les immunoglobulines anti-RSV se lient au RSV au niveau des voies respiratoires inférieures, de préférence au niveau des poumons. Ainsi, la composition pharmaceutique peut être préparée selon les méthodes habituelles, en utilisant des excipients appropriés, de préférence adaptés à une administration permettant d'atteindre les voies respiratoires inférieures. 15 En particulier, des additifs peuvent être mis en oeuvre dans la formulation, tels que des agents stabilisants comme l'albumine, et/ou les antioxydants (tels que l'acide ascorbique, cystéine, alpha tocophérol, méthionine), et/ou 20 les sucres et glycols (tels que glucose, maltose, mannitol, sorbitol, glycérine, lactitol, stachyose, mannose, sorbose, xylose, ribose, ribitol, myoinisitose, myoinisitol, galactose, galactitol, glycérol, cyclitols (tels que l'inositol), et le PEG), et/ou des agents complexants (tels que l'édétate de sodium), et/ou des conservateurs et/ou bactériostatiques (tels que l'éthanol anhydre, le chlorure de 25 benzalkonium, l'alcool benzylique, le chlorobutanol, les parabènes, l'alcool phényléthylique, l'acide benzoïque, l'EDTA, le 2-pyrrolidone, et leurs dérivés), et/ou des agents modifiant la viscosité (tels que le chlorure de calcium, le chlorure de magnésium, le chlorure de sodium, le biphosphate de sodium, la caféine, la théophylline, la tyramine, la procaïne, la lidocaïne, l'imidazole, l'aspartame, la 30 saccharine, et l'acésulfame de potassium), et/ou des agents influençant l'osmolarité (tels que le mannitol, l'arginine ou la glycine), et/ou des tensio-actifs tels que les surfactants non-ioniques, comme les polysorbates (polysorbate 80 ou polysorbate 20), les poloxamères (tels que le poloxamère 188, le 3064485 12 PF68), le TritonTm, le sodium dodecyl sulfate (SDS), le sodium octyl glycoside, la lauryl-sulfobétaïne, la myristyl-sulfobétaïne, la linoleyl-sulfobétaïne, la stearylsulfobétaïne, la lauryl-sarcosine, la myristyl-sarcosine, la linoleyl-sarcosine, la stearylsarcosine, la linoleyl-bétaïne, la myristyl-bétaïne, la cetyl-bétaïne, la 5 lauroamidopropyl-bétaïne, la cocamidopropyl-bétaïne, la linoleamidopropyl-bétaïne, la myristamidopropyl-bétaïne, palmidopropyl-bétaïne, l'isostearamidopropyl-bétaïne (tels que le lauroamidopropyl), le myristarnidopropyl-, palmidopropyl-, ou isostearamidopropyl- dimethylamine, le sodium methyl cocoyl-, ou disodium methyl ofeyl-taurate, les composés phosphatés quaternaires (tels que les séries MonaquatTM de 10 Mona Industries, Inc., Paterson, N. J.), le polyethyl glycol, le polypropyl glycol, et/ou des acides aminés ou leurs dérivés (tels que l'isoleucine, le chlorhydrate d'arginine et le chlorhydrate de lysine), et/ou des inhibiteurs d'enzymes et/ou des agents qui influencent le pH (tels que le tampon de citrate ou phosphate) et/ou 15 des agents qui influencent la tonicité de la formulation (tel que le chlorure de sodium ou le glutamate d' arginine, les complexes métallo-protéiques, les polymères biodégradables (notamment les polyesters), les ions capables de former des sels (tels que le sodium), les sucres d'alcool polyhydriques, les acides aminés (tels que l'alanine, la glycine, la glutamine, l'asparagine, l'histidine, l'arginine, la lysine, 20 l'ornithine, la leucine, la 2-phenylalanine, l'acide glutamique et la thréonine), les sucres organiques ou les sucres d'alcool (tels que le lactitol, le stachyose, le mannose, le sorbose, le xylose, le ribose, le ribitol, le myoinisitose, le myoinisitol, le galactose, le galactitol, le glycérol, les cyclitols dont l'inositol, le polyéthylène glycol), les agents réducteurs soufrés (tels que l'urée, la glutathione, l'acide thioctique, le thioglycolate 25 de sodium, le thioglycerol, l'a-monothioglycerol et le sodium thiosulfate) et/ou des cryoprotectants (tels que le sucrose ou le tréhalose) En particulier, la composition selon l'invention peut comprendre un agent tensio-actif. On entend par « tensio-actif » une molécule amphiphile présentant deux parties de polarité 30 différente, l'une lipophile et apolaire, l'autre hydrophile et polaire. Un tensio-actif peut être de type ionique (cationique ou anionique), zwitterionique ou non-ionique. L'agent tensio-actif peut avantageusement être choisi parmi les surfactants non-ioniques, comme les polysorbates (polysorbate 80 ou polysorbate 20), les poloxamères (par exemple le poloxamère 188, le PF68), le TritonTm, le sodium dodecyl sulfate (SDS), le sodium octyl glycoside, la lauryl- 3064485 13 sulfobétaïne, la myristyl-sulfobétaïne, la linoleyl-sulfobétaïne, la stearyl-sulfobétaïne, la lauryl-sarcosine, la myristyl-sarcosine, la linoleyl-sarcosine, la stearyl-sarcosine, la linoleylbétaïne, la myristyl- bétaïne, la cetyl-bétaïne, la lauroamidopropyl-bétaïne, la cocamidopropyl-bétaïne, la linoleamidopropyl-bétaïne, la myristamidopropyl-bétaïne, la 5 palmidopropyl-bétaïne, la isostearamidopropyl-bétaïne (tels que le lauroamidopropyl), la myristarnidopropyl-, palmidopropyl-, ou isostearamidopropyl- dimethylamine, le sodium methyl cocoyl-, ou disodium methyl ofeyl-taurate, les composés phosphatés quaternaires (tels que les séries MonaquatTM de Mona Industries, Inc., Paterson, N. J.), le polyéthyl glycol, le polypropyl glycol. 10 Selon un mode de réalisation particulier, la composition selon l'invention peut comprendre un agent modifiant la viscosité, la viscosité étant l'ensemble des phénomènes de résistance à l'écoulement se produisant dans la masse d'une matière. Par exemple, plus la viscosité diminue, plus le fluide s'écoule facilement. En particulier, l'agent modifiant la viscosité peut 15 être un fluidifiant. L'agent modifiant la viscosité peut être avantageusement choisi parmi le chlorure de calcium, le chlorure de magnésium, le chlorure de sodium, le biphosphate de sodium, la caféine, la théophylline, la tyramine, la procaïne, la lidocaïne, l'imidazole, l'aspartame, la saccharine, et l'acésulfame de potassium. 20 Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, la composition comprend des agents qui influencent le pH (tels que tampon de citrate ou phosphate). Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, la composition comprend des agents qui influencent la tonicité de la formulation (tel que le chlorure de sodium ou le glutamate 25 d' arginine, les complexes métallo-protéiques, les polymères biodégradables (notamment les polyesters), les ions capables de former des sels (tels que le sodium), les sucres d'alcool polyhydriques, les acides aminés (tels que l'alanine, la glycine, la glutamine, l'asparagine, l'histidine, l'arginine, la lysine, l'ornithine, la leucine, la 2-phenylalanine, l'acide glutamique et la thréonine), les sucres organiques ou les sucres d'alcool (tels que le lactitol, le stachyose, 30 le mannose, le sorbose, le xylose, le ribose, le ribitol, le myoinisitose, le myoinisitol, le galactose, le galactitol, le glycerol, les cyclitols dont l'inositol, le polyethylene glycol), les agents réducteurs soufrés (tels que l'urée, la glutathione, l'acide thioctique, le thioglycolate de sodium, le thioglycerol, l'a-monothioglycerol et le sodium thiosulfate). 3064485 14 Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, la composition comprend des cryoprotectant (tels que le sucrose ou le tréhalose). Dans un mode de réalisation particulier, ladite composition est sous forme d'une poudre pour 5 inhalation qui contient en outre des adjuvants physiologiquement acceptables appropriés, par exemple choisis parmi les monosaccharides, les disaccharides, les oligo- et polysaccharides, les polyalcools, les sels ou des mélanges de ces adjuvants. Dans un mode de réalisation particulier, ladite composition est dispersée dans un gaz 10 propulseur sélectionné parmi des hydrocarbures, comme le n-propane, le n-butane ou l'isobutane ou des halogénohydrocarbures, comme des dérives fluorés du méthane, de l'éthane, du propane, du butane, du cyclopropane ou du cyclobutane. Par exemple, le gaz propulseur peut être du trichlorofluorométhane, du dichlorodifluorométhane, du chlorodifluorométhane ou du dichlorotétrafluoroéthane. Ces gaz propulseurs peuvent 15 également jouer le rôle de solvant car ils sont liquéfiés avant d'être pulvérisés avec ladite composition. Administration 20 Ladite composition d'immunoglobulines (1g) hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV telle que décrite précédemment est destinée à être administrée sous une forme adaptée pour que les immunoglobulines anti-RSV se lient au RSV au niveau des voies respiratoires inférieures, de préférence au niveau des poumons, en particulier au niveau de l'épithélium pulmonaire. 25 La composition selon l'invention est administrée sous forme de particules ou de gouttelettes ayant une taille et une morphologie adaptées pour cibler les voies respiratoires inférieures, de préférence les poumons, et plus particulièrement l'épithélium pulmonaire. En particulier, la taille (également appelée diamètre aérodynamique médian en masse) des particules (solides) 30 ou gouttelettes (liquides) est adaptée pour permettre le passage de celles-ci à travers les voies respiratoires jusqu'aux alvéoles pulmonaires. Notamment, la taille des particules ou gouttelettes est comprise entre 0,025 microns (25 nm) et 10 !dm, de préférence entre 0,5 !dm et 5 !dm et plus préférentiellement entre 1 !dm et 3 !dm. 3064485 15 La taille des particules peut être mesurée par toute technique connue de l'homme du métier, notamment les techniques de diffraction laser. La taille des gouttelettes peut être mesurée par toute technique connue de l'homme du métier, notamment les techniques utilisant la diffraction laser et les techniques basées sur l'effet doppler. En particulier, l'homme du métier 5 pourra effectuer ses mesures à l'aide d'un appareil mettant en oeuvre la diffraction laser et notamment les modèles d'appareils Visisize D30, Visisize P15, Visisize N60 et Visisize S200 (Oxford Lasers Inc). Dans un mode de réalisation particulier, ladite composition est destinée à être administrée par 10 voie pulmonaire. On entend par administration par « voie pulmonaire » toute libération et/ou application de la composition dans les voies respiratoires inférieures, et de préférence dans les poumons, plus préférentiellement au niveau de l'épithélium pulmonaire, ces surfaces constituant un territoire majeur de l'infection par le virus du RSV et présentent donc un intérêt dans la prophylaxie et dans le traitement curatif d'une infection au RSV. 15 Par « voies respiratoires inférieures » ou « voies aériennes inférieures », on entend tout conduit ou cavité intra thoracique tel que la trachée, les bronches et les poumons (constitués des bronchioles et alvéoles). En particulier, l'administration permet à la composition d'atteindre et/ou pénétrer l'épithélium pulmonaire, caractérisé par une surface de 90000 cm2 20 développée au sein des alvéoles pulmonaires. De manière préférée, l'administration permet de traiter de manière préventive et/ou curative une infection pulmonaire causée par le virus RSV. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, ladite composition est destinée à une inhalation. 25 Ladite composition d'immunoglobulines (Ig) hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV peut ainsi être administrée par voie pulmonaire sous forme de poudre, de solution, de suspension ou d'aérosol. De préférence, ladite composition est administrée sous forme d'aérosol comprenant des particules solides ou des gouttelettes liquides ayant une taille et une 30 morphologie adaptées pour cibler les voies respiratoires inférieures, et de préférence les poumons. Un aérosol est défini ici comme la dispersion de particules solides ou de gouttelettes liquides très fines dans un gaz. En particulier, l'aérosol comprend une phase gazeuse continue et, dispersée dans celle-ci, une phase discontinue de particules ou de gouttelettes. 3064485 16 Ladite composition d'immunoglobulines (1g) hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV peut être administrée par voie pulmonaire à l'aide d'un distributeur, de préférence à l'aide d'un dispositif inhalateur tel que : un inhalateur à poudre, un inhalateur doseur pressurisé, un 5 nébuliseur ou tout autre dispositif connu dans la littérature pharmaceutique qui permet d'inhaler une composition. Dans le cas de l'inhalateur à poudre, la composition se présente sous la forme d'une poudre sèche micronisée, qui est inhalée par le sujet à l'aide d'une profonde inspiration. 10 Dans le cas d'un inhalateur doseur pressurisé, ladite composition peut être sous la forme d'une poudre micronisée en suspension dans un gaz ou bien sous la forme d'une solution dispersée dans un gaz. Plus particulièrement, l'aérosol doseur permet d' aérosoliser ladite composition en suspension ou en solution au moyen d'un gaz propulseur (tel qu'un 15 hydrofluoroalcane). L'aérosol doseur se présente avantageusement sous la forme d'un spray buccal. Ainsi, selon un mode de réalisation particulier, ladite composition est administrée par inhalation d'un aérosol, de préférence au moyen d'un spray buccal. 20 Un nébuliseur est défini ici comme un dispositif capable d'aérosoliser un matériau liquide dans une phase liquide dispersée. Plus particulièrement, le nébuliseur permet de transformer ladite composition liquide en « brume » à l'aide d'un gaz pressurisé ou d'un compresseur à air. Le nébuliseur permet l'administration de ladite composition au moyen d'un masque ou 25 d'un embout disposé sur la bouche et/ou le nez du sujet. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, les compositions pharmaceutiques selon l'invention sont administrées à l'aide d'un nébuliseur choisi au sein du groupe suivant : un nébuliseur à jet, un nébuliseur à ultrason et un nébuliseur à tamis. 30 Ainsi, selon un mode de réalisation particulier, ladite composition est administrée par nébulisation, en particulier au moyen d'un nébuliseur à tamis. 3064485 17 Dans le cas d'une administration réalisée à l'aide d'un nébuliseur la durée de nébulisation est adaptée en fonction du sujet. De préférence, la durée de nébulisation sera au maximum de 20 minutes pour un sujet adulte et d'au maximum 10 minutes pour un enfant. 5 De préférence le dispositif d'administration permet l'administration de ladite composition sous forme d'aérosol. De préférence, le dispositif d'administration est un nébuliseur ou un inhalateur doseur pressurisé permettant la pulvérisation de ladite composition sous forme d'aérosol. 10 La composition pharmaceutique selon l'invention peut se présenter sous forme de doses unitaires (le dispositif ne permet qu'une seule administration) ou de multidoses (le dispositif permet plusieurs administrations). Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, les compositions pharmaceutiques se 15 présentent avantageusement sous forme de doses unitaires. La composition pharmaceutique selon l'invention peut être administrée par voie pulmonaire avec un volume d'administration compris entre 250 pl et 12 ml, de préférence entre 250 pl et 10 ml. 20 Par « volume d'administration » on entend le volume de ladite composition administrée, par dose ou prise. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, ladite dose ou prise possède un volume 25 d'administration adapté pour que les immunoglobulines anti-RSV se lient au RSV au niveau des voies respiratoires inférieures, de préférence au niveau des poumons. De manière préférée, le volume d'administration est suffisant pour permettre la diffusion de ladite composition dans les voies respiratoires inférieures, de préférence dans les poumons. 30 Dans un mode de réalisation particulier, ladite composition est destinée à être administrée par voie nasale pour atteindre les voies respiratoires inférieures. On entend par administration par « voie nasale » toute administration, libération et/ou application de la composition dans les voies respiratoires supérieures via la cavité nasale d'un sujet. Par « voies respiratoires supérieures » ou « voies aériennes supérieures », on entend tout conduit ou cavité extra 3064485 18 thoracique en contact avec l'air tel que le nez, la bouche, les fosses nasales, le pharynx ou le larynx. En particulier, l'administration par voie nasale peut permettre à la composition d'atteindre et/ou pénétrer dans les voies respiratoires inférieures. De préférence, l'administration par voie nasale permet à la composition d'atteindre et/ou pénétrer dans les 5 poumons. Avantageusement, l'administration de la composition par voie nasale est adaptée pour que les immunoglobulines anti-RSV se lient au RSV au niveau des voies respiratoires inférieures, de préférence au niveau des poumons. De manière préférée, l'administration par voie nasale permet de traiter de manière préventive et/ou curative une infection pulmonaire causée par le virus RSV. 10 Dans un mode de réalisation particulier, la composition est administrée par voie nasale, sous forme d'un aérosol. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, la composition d'immunoglobulines 15 (Ig) hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV est administrée par voie nasale avec un volume d'administration inférieur à 20 ml, de préférence inférieur à 15 ml, plus préférentiellement compris entre 2 ml et 8 ml. La posologie peut être ajustée de manière appropriée pour atteindre les niveaux souhaités 20 d'immunoglobulines au niveau des poumons. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, ladite composition d'Ig hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV est administrée une fois par jour. Dans un autre mode de réalisation particulier de l'invention, ladite composition d'Ig hyper-enrichie en 25 immunoglobulines anti-RSV est administrée une fois par semaine. 3064485 19 Les exemples suivants illustrent l'invention sans en limiter la portée. EXEMPLES 5 EXEMPLE 1: Préparation d'une composition enrichie en 12 anti-RSV, à partir de fractions plasmatiques Dans cet exemple, l'échantillon utilisé est une fraction plasmatique issue du procédé de purification d'immunoglobulines tel que décrit dans la demande de brevet W002092632. Le procédé de purification comprend les étapes suivantes : 10 Récupération d'une fraction I+II+III, obtenue à partir de plasma sanguin traité à l'éthanol Précipitation à l'acide caprylique Traitement solvant-détergent (Triton/TnBP) Chromatographie échangeuse d'anions (TMAE) à pH basique L'éluat de la chromatographie échangeuse d'anions à pH basique est ensuite soumis à une 15 chromatographie d'immunoaffinité, comme décrit ci-dessous. 1. Chromatographie d'affinité anti-RSV (protéine F) On utilise comme ligand d'affinité la protéine RSV-F 11049-VO8B (Sino Biological Inc), protéine synthétique issue d'une séquence ADN du hRSV (RSS-2) de la Met 1 à la Thr 529, contenant 518 acides aminés après clivage du propeptide et dont la ma masse moléculaire 20 prédite est de 58kDa. En analyse SDS-PAGE et conditions de réduction, les masses moléculaires apparentes sont 45-55 kDa et 18 kDa. Le ligand RSV-F 11049-VO8B utilisé pour le greffage est en conformation post-fusion. 2mL de gel NHS-activated sepharoseTM 4 Fast Flow sont mis en place dans une colonne de chromatographie de diamètre 1.1cm et les tampons utilisés sont ceux recommandés par le 25 fournisseur du gel. Après lavage (1mM HCL à 4°C) et équilibrage en tampon de couplage, 1,98 mg de protéine F à greffer sont ajoutées au gel et l'ensemble est mis en agitation. Le blocage des groupements réactifs sur le gel est réalisé en ajoutant 6 mL de tampon 0.5M ethanolamine, 0.5M NaC1, pH 8.3 (6mL), et le gel est mis en agitation pendant 12h. Le gel couplé est lavé avec une alternance de 3 volumes de tampons basique puis acide : 0.1M Tris- 30 HC1 pH 8.4 et 0.1M acétate, 0.5M NaC1 pH 4, ce cycle étant répété trois fois. Le gel est ensuite stocké en tampon 10mM citrate, 0.5M NaC1, 0.1g/L azide de sodium pH 6.6 Le couplage a été évalué à 98%, correspondant à une densité de ligand de 0,89mg/mL de gel greffé. 3064485 20 L'échantillon est équilibré dans le tampon d'injection en y ajoutant une solution concentrée de tampon de NaC1 et de citrate trisodique qsp 0,05M NaC1 et 0,01M Citrate trisodique. Le produit est ensuite passé sur la colonne durant 3.3min (temps de contact). Après lavage, l'élution est réalisée en tampon 0,1M glycine, 30% propylène glycol à pH 2,57. L'éluat est 5 immédiatement neutralisé par du tampon 1M Tris-HC1 pH 9 pour en remonter le pH à environ 6. Le gel est alors passé en régénération afin de décrocher les Ig non éluées avec un tampon 6M guanidine pH 6. La fraction récupérée est aussi neutralisée par l'ajout de 1M Tris-HC1 pH9 pour en remonter le pH à 6. 2. Chromatographie d'affinité anti-RSV (protéine G) 10 Alternativement, ou en complément, on utilise comme ligand d'affinité la protéine RSV-G souche A (ref 11070-V08H2, SB), protéine synthétique issue d'une séquence ADN du hRSV (souche rsb1734) de la Asn 66 à l'Arg 297, contenant 242 acides aminés après clivage du propeptide et dont la masse moléculaire prédite est de 26,3kDa. En analyse SDS-PAGE et conditions réductrice, la masse moléculaire apparente est comprise du fait d'une importante 15 glycosylation entre 60 kDa et 90 kDa. souche B (ref 13029-V08H, SB), protéine synthétique issue d'une séquence ADN du hRSV (souche 036633-1) de l'His 67 à l'Ala 299, contenant 244 acides aminés après clivage du propeptide et dont la masse moléculaire prédite est de 27kDa. En analyse SDS-PAGE et conditions réductrice, la masse moléculaire apparente est comprise du fait d'une importante 20 glycosylation entre 80 kDa et 90 kDa. Le couplage est réalisé selon le même protocole que celui utilisé à la section 1. Trois colonnes sont réalisées : gel G-A, correspondant à une densité de Protéine G souche A de 1 mg/mL de gel greffé, gel G-B, correspondant à une densité de Protéine G souche B de 1 mg/mL de gel greffé, 25 gel G-AB, correspondant à un mélange 50% gel G-A et 50% gel G-B. Le design de l'expérience a en outre permis de constater que les IgG anti-RSV purifiés sur le variant A de la protéine G interagissaient également avec le variant B de la protéine G et inversement (anti-varB sur variantA) laissant penser qu'il existe une réactivité croisée entre les anticorps polyclonaux anti-RSV pour les deux variants de la protéine G. 30 Une forte proportion des immunoglobulines anti-RSV se fixe au support de chromatographie par affinité à la protéine hRSV-G, quelle que soit la souche, ce qui représente dans cet essai au moins 6,71..tg d'immunoglobulines anti-RSV par mL de gel. La fraction non adsorbée et la fraction de lavage sont appauvries en immunoglobulines anti-RSV. La fraction 3064485 21 d'immunoglobulines éluées du support à pH acide et en présence de Propylène glycol montre un enrichissement minimum de 109 fois en immunoglobulines anti-RSV. L'essai montre que la chromatographie d'affinité utilisant un ligand protéine G de souches A ou B greffées via une chimie NHS permet la purification d'immunoglobulines anti-RSV avec 5 un rendement d'au moins 26,2% dans les conditions testées, correspondant à un facteur d'enrichissement minimum de 109 fois. La composition obtenue après chromatographie d'affinité sur ligand protéine G en comprend donc au moins 30% en poids d'immunoglobulines dirigées spécifiquement contre au moins un épitope de la protéine G. 10 EXEMPLE 2: Etude de l'efficacité d'un traitement préventif par administration au niveau des voies respiratoires inférieures de la composition enrichie en Ig anti-RSV La composition enrichie en Ig anti-RSV telle que préparée dans l'exemple 1 ci-dessus a été testée en tant que traitement prophylactique envers le virus RSV. La composition a été 15 administrée au site d'intérêt (le poumon) via la voie nasale. Matériel et méthodes L'étude est conduite sur 5 jours (JO à J5), avec des souris femelles BALB/c âgées de 6 semaines et rendues sensibles au virus RSV. el' étape : administration du traitement prophylactique. 20 Un prélèvement sanguin initial est effectué au début de l'étude sur toutes les souris testées. Le traitement prophylactique est administré à J-1 dans les poumons par voie intranasale selon les conditions suivantes : Administration dans les Placebo (tampon utilisé pour la formulation) poumons par voie intranasale Anticorps non spécifique (à 10mg/kg) Composition enrichie en Ig anti-RSV (à lmg/kg) Composition enrichie en Ig anti-RSV (à 0.1mg/kg) Le placebo et la composition comprenant des anticorps non spécifiques servent de contrôles 25 négatifs. L'étude a été réalisée sur 2 groupes de 16 souris (4 souris/condition/groupe). 2ème étape : Infection par le virus RSV. L'infection au virus RSV a été effectuée au jour JO, par injection intranasale d'une solution comprenant le virus RSV associé à la luciférase. La luciférase permet ainsi de détecter le 30 virus, par réaction de bioluminescence. 3064485 22 3ème étape : Analyse de la réplication virale chez la souris Au jour J4: Un groupe de souris a été sacrifié pour prélever les poumons/narines/liquide broncho-alvéolaire afin de conduire un test de bioluminescence (basé sur la détection de la 5 luciférase, complexée au virus RSV) ainsi qu'une quantification de l'ARN viral par RT-Q- PCR. Au jour J5 : La réplication virale est analysée (chez le deuxième groupe de souris) par un système d'imagerie in vivo. 10 Résultats Analyse de la réplication virale par imagerie in vivo : 5 jours après l'infection au virus RSV, on observe chez les souris contrôle (ayant reçu un placebo ou des 1g non spécifiques), une réplication virale importante au niveau des poumons. 15 A l'inverse, la réplication virale est considérablement réduite, voire supprimée (signal luminescent éteint) au niveau des poumons des souris ayant reçu, préventivement, par administration au niveau du poumon via la voie nasale, la composition enrichie en 1g antiRSV. Cet effet est observé chez les souris testées (figure 1), quelle que soit la dose (lmg/kg ou 0.1mg/kg). Ces résultats suggèrent une protection des poumons vis-à-vis du virus RSV 20 chez les souris ayant reçu préventivement la composition enrichie en 1g anti-RSV par administration au niveau du poumon via la voie nasale. Ces résultats confirment par ailleurs que l'administration de la composition enrichie en 1g anti-RSV, a permis une diffusion directement dans les voies pulmonaires, expliquant cet effet protecteur. 25 Analyse de la réplication virale par analyse de l'activité luciférase (test de bioluminescence): L'activité luciférase (enzyme couplée au virus RSV) est révélée par réaction de bioluminescence et quantifiée (figure 2), permettant ainsi de quantifier indirectement la réplication virale du RSV dans des lysats pulmonaires des souris, 4 jours après infection. La figure 2 démontre que la réplication virale est supprimée dans les poumons grâce à une 30 administration préventive intrapulmonaire via la voie nasale d'une composition enrichie en 1g anti-RSV, à une dose de lmg/kg. La réplication virale est également réduite suite à une administration préventive intrapulmonaire via la voie nasale d'une composition enrichie en 1g anti-RSV, à une dose de 0,1mg/kg. 3064485 23 Analyse de la réplication virale par quantification de l'ARN viral (RT-qPCR) : L'ARN viral a été quantifié par RT-qPCR (quantification de l'expression du gène de nucléocapside N), 4 jours après l'infection au virus RSV. Les résultats de quantification de l'ARN viral (figure 3) sont parfaitement cohérents avec les résultats de la quantification de 5 l'activité luciférase. Ces résultats soutiennent qu'une administration préventive intrapulmonaire via la voie nasale d'une composition enrichie en 1g anti-RSV est efficace vis-à-vis de la réplication du RSV dans les poumons. 10 REVENDICATIONS1.- Composition d'immunoglobulines (Tg) hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV, pour son utilisation dans le traitement prophylactique ou curatif d'une infection par le virus RSV chez un sujet, ladite composition étant adaptée à une administration sous forme de particules ou de gouttelettes d'une taille comprise entre 0,025 um et 10 um et étant adaptée pour que les immunoglobulines anti-RSV se lient au RSV au niveau des voies respiratoires inférieures. 2. Composition d'Ig hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV pour son utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que les voies respiratoires inférieures consistent en les poumons, et de préférence l'épithélium pulmonaire. 3. Composition d'Ig hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV pour son utilisation selon la revendication 1 ou 2, ladite composition étant adaptée à une administration sous forme de particules ou de gouttelettes d'une taille comprise entre 0,5 um et 5 gm et préférentiellement entre 1 gin et 3 um. 4. Composition d'Ig hyper-emichie en immunoglobulines anti-RSV pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, ladite composition comprenant en outre un agent tensio-actif et/ou un agent modifiant la viscosité. 5. Composition d'Ig hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, ladite composition comprenant une concentration d'immunoglobulines anti-RSV comprise entre 10 et 250 g/1, de préférence entre 10 et 100 g/l. 6. Composition d'Ig hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, l'administration étant une administration par voie pulmonaire, de préférence par inhalation d'un aérosol, de préférence au moyen d'un spray buccal ou par nébulisation au moyen d'un nébuliseur, et de préférence un nébuliseur à tamis. 3064485 7. Composition d'Ig hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications I à 5, caractérisée en ce que l'administration est une administration par voie nasale, de préférence sous la forme d'un aérosol. 8. Composition d'Ig hyper-enrichie en immunoglobulines anti-RSV pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, le sujet appartenant à au moins un des groupes suivants : les enfants, les nourrissons, les personnes immunodéprimées notamment les personnes Imitées pour une greffe en particulier une greffe de poumon, les nourrissons prématurés et les enfants ou personnes âgées atteints d'une maladie pulmonaire, en particulier une broncho-pneumopathie chronique obstructive (BPC0), cardiaque ou immunitaire.