FR 3061633 A1 20180713 FR 1750180 A 20170109 1 La présente invention concerne un dispositif et un procédé de conservation et de transport d'au moins un tissu humain ou animal, en vue d'une greffe ou d'une expérience ex vivo. L'invention s'applique à la conservation d'un tel tissu dans un milieu de conservation spécifique jusqu'à la greffe ou l'expérience ex vivo, et en particulier à la conservation d'un prélèvement de cornée humaine ou animale, tel qu'un greffon de cornée, à titre non limitatif. Actuellement, la conservation d'un greffon de cornée se fait 10 principalement de deux façons : - conservation à froid (procédé le plus utilisé en Amérique du Nord, typiquement à +4° C) : les greffons cornéens sont conservés pendant une courte durée (10 jours maximum) dans un milieu de culture spécifique, et - conservation à chaud en organoculture (procédé utilisé par 15 la majorité des banques de cornées européennes, typiquement entre 31° C et 37° C) : le greffon cornéen est conservé pendant une longue durée (5 semaines environ) en étant d'abord immergé dans un milieu de prélèvement dès son prélèvement et jusqu'à sa réception par la banque de cornées, où il est immédiatement transféré dans un milieu de conservation de même nature 20 que le milieu de prélèvement mais dans lequel le greffon est conservé au maximum 30 jours. Deux jours avant la greffe, on place le greffon dans un milieu dit de « déturgescence » pour réduire rcedème dû à sa conservation et faciliter ainsi le geste chirurgical ultérieur. Quelle que soit la méthode de conservation, le greffon est 25 usuellement immergé dans son liquide nutritif à l'intérieur d'un flacon en verre ou en plastique, suite au prélèvement post mortem. Comme le nombre de cellules endothéliales vivantes par mm2 conditionne son utilisation lors d'une greffe, on contrôle la qualité endothéliale de la cornée par deux comptages de ces cellules respectivement réalisés à la réception de la cornée et lors de son 30 immersion en milieu de déturgescence. Ces comptages nécessitent différentes étapes de manipulation des cornées telles que des transferts dans des boîtes de pétri, une coloration par du bleu de trypan, des rinçages puis, 3061633 2 après le comptage des cellules vivantes au moyen d'un microscope, une remise en flacon de la cornée. Or, ces manipulations risquent d'engendrer une contamination externe de la cornée et un traumatisme de l'endothélium. Pour la conservation simultanée d'une multitude de cornées, il 5 est connu de les conditionner séparément dans de tels flacons contenant leurs milieux de conservation que l'on place dans un incubateur maintenu à la température de conservation. Pour procéder à un contrôle qualité des cornées ainsi conservées, l'opérateur est contraint de sortir les flacons un à un de l'incubateur pour réaliser séparément sur chaque cornée une observation 10 microscopique, un comptage des cellules vivantes et une vérification de la couleur du milieu, notamment. Il en résulte une perte considérable de temps et un coût élevé pour l'ensemble du contrôle qualité, avec en outre un risque non négligeable de détérioration des cornées dû à leur manipulation. Le document WO 2014/140434 Al présente un dispositif de 15 conservation d'un prélèvement cornéen comprenant essentiellement des moyens de réception et d'emprisonnement sous pression réglable du prélèvement cornéen avec injection et prélèvement d'un liquide de conservation pour analyses, des moyens d'applanation du dôme cornéen, et des moyens d'injection de substances dans le dispositif, avec un contrôle 20 visuel ou instrumental de la qualité du prélèvement cornéen sans ouverture du dispositif. Le but recherché dans ce document est de permettre le contact entre le liquide de conservation renouvelé et les deux faces de la cornée, en délimitant dans le dispositif deux chambres respectivement endothéliale et épithéliale, indépendamment des paramètres physicochim igues du liquide 25 dont aucun n'est régulé en continu, ce qui présente l'inconvénient d'une altération potentiellement critique du liquide de conservation à laquelle il est difficile de remédier une fois cette altération détectée lors du contrôle qualité. En effet, on effectue généralement le transport d'un flacon contenant un greffon de cornée à température ambiante sans aucun suivi des 30 conditions de conservation du greffon, ce qui augmente le risque de détérioration de sa qualité biologique puisque les conditions optimales de sa 3061633 3 conservation comprenant notamment la température et le pH du milieu de conservation ne sont pas respectées. Ainsi, un inconvénient majeur des dispositifs et procédés de l'art antérieur pour conserver des tissus tels que des cornées réside non 5 seulement dans les ouvertures et manipulations successives des flacons les contenant pour les contrôles qualité des tissus et dans leurs transferts requis dans d'autres milieux (cas du procédé de conservation à chaud précité), mais encore dans le respect en continu des conditions de conservation du milieu. Un but de la présente invention est de proposer un dispositif de conservation d'au moins un tissu humain ou animal, par exemple un prélèvement cornéen, en vue d'une greffe ou d'une expérience ex vivo, le dispositif comprenant au moins une chambre qui est adaptée pour recevoir et conserver ledit au moins un tissu dans un milieu de conservation liquide et qui comprend des moyens de renouvellement en continu dudit milieu dans ladite au moins une chambre, qui remédie aux inconvénients précités. A cet effet, un dispositif selon l'invention est tel que le dispositif comprend en outre des moyens de régulation d'au moins un paramètre physicochimique dudit milieu comprenant son pH, par circulation en continu d'un gaz tampon dans ladite au moins une chambre hors et au contact dudit milieu. Par « gaz tampon », on entend de manière usuelle dans la présente description un gaz qui est apte à tamponner le milieu de conservation en le transformant en une solution tampon, i.e. en une solution 25 qui présente un pH sensiblement constant. On notera que cette régulation en continu du pH du milieu de conservation qui caractérise un dispositif selon l'invention permet notamment de conserver le ou chaque tissu (e.g. un greffon cornéen) dans son milieu nutritif suivant des conditions optimales, pendant une durée pouvant atteindre 30 5 semaines dans le cas de ce greffon cornéen (i.e. jusqu'à sa greffe). On notera également que la mesure en continu du pH inhérente à cette régulation permet de détecter à tout instant une 3061633 4 contamination bactérienne du milieu dans lequel est immergé le ou chaque tissu. Selon une autre caractéristique de l'invention, ladite au moins une chambre peut comporter : 5 - un récipient comportant un fond prolongé par une paroi latérale périphérique s'étendant à partir dudit fond, ledit récipient présentant de préférence une face interne sensiblement hémisphérique, et - un couvercle au moins en partie transparent monté sur ladite paroi latérale, ledit couvercle étant de préférence conçu pour une ouverture 10 unique et pourvu de moyens signalant à un opérateur son ouverture antérieure, et lesdits moyens de régulation peuvent alors comprendre des orifices d'amenée et d'évacuation dudit gaz tampon tel que du dioxyde de carbone dans et de ladite au moins une chambre, lesdits orifices d'amenée et 15 d'évacuation étant formés dans une zone supérieure de ladite paroi latérale adjacente audit couvercle de sorte que ledit gaz tampon soit amené dans et évacué de ladite au moins une chambre au-dessus dudit milieu. On notera que ce récipient à face interne sensiblement hémisphérique permet de minimiser les défauts d'homogénéité des propriétés 20 du milieu et les altérations potentielles du ou de chaque tissu par des arêtes ou angles vifs. On notera également que la transparence du couvercle autorise des mesures optiques pour le comptage des cellules vivantes du ou de chaque tissu, via la transparence du milieu. On notera en outre que la ou chaque chambre d'un dispositif selon l'invention peut ainsi avantageusement n'être ouverte qu'une seule fois, et que lesdits moyens signalant son ouverture à un opérateur (e.g. un chirurgien, son assistant ou toute autre personne devant accéder au tissu en vue de la prochaine greffe ou expérience ex vivo) comprennent par exemple une patte sécable initialement solidaire à la fois du couvercle et de la paroi latérale du récipient. 3061633 5 Selon une autre caractéristique de l'invention, lesdits moyens de régulation peuvent comprendre en outre : - des raccords fluidiques pour ledit gaz tampon (par exemple de type « Luer ») communiquant respectivement avec lesdits orifices 5 d'amenée et d'évacuation et aptes à le faire circuler sous pression et en continu dans ladite au moins une chambre, via une unité de mise en circulation que comprend le dispositif et qui comprend par exemple des pompes, - au moins un capteur dudit au moins un paramètre 10 physicochimique communiquant avec l'intérieur de ladite au moins une chambre et comprenant un capteur de pH, - optionnellement un capteur microbiologique par exemple fonctionnalisé apte à détecter une bactérie donnée dans ledit milieu, et - optionnellement au moins une ouverture dans ladite paroi 15 latérale pour introduire dans ladite au moins une chambre un fluide thérapeutique (i.e. une sorte de médicament à effet prophylactique ou curatif) ou non pour préserver ledit au moins un tissu et/ou pour accélérer sa régénération tissulaire. On notera que l'unité de mise en circulation que comprend le 20 dispositif peut avantageusement comprendre des micro-pompes piézoélectriques, dont la pression peut par exemple varier de 0 à 600 mbar (i.e. 60 000 Pa) pour des débits par exemple de 0 à 7 mL/m in. Selon une autre caractéristique de l'invention, lesdits moyens de renouvellement dudit milieu peuvent comprendre des orifices d'introduction 25 et de prélèvement dudit milieu adaptés pour l'introduire dans et le prélever de ladite au moins une chambre, respectivement en provenance d'un premier réservoir du dispositif contenant ledit milieu non usé à introduire et vers un second réservoir du dispositif contenant ledit milieu usé une fois prélevé, lesdits orifices d'introduction et de prélèvement étant formés dans ledit 30 récipient et communiquant respectivement avec deux raccords fluidiques pour ledit milieu (par exemple également de type « Luer ») aptes à faire circuler 3061633 6 sous pression et en continu ledit milieu dans ladite au moins une chambre via ladite unité de mise en circulation. On notera qu'un dispositif selon l'invention permet ainsi un renouvellement automatique et en continu du milieu de conservation grâce à 5 ces deux raccords fluidiques étanches, à l'instar de la circulation en continu dudit gaz tampon dans la chambre permettant de tamponner ce mlilieu renouvelé via les deux raccords fluidiques pour ce gaz. Selon une autre caractéristique préférentielle de l'invention, le dispositif peut comprendre en outre une unité de régulation de la température 10 dudit milieu dans ladite au moins une chambre à au moins une valeur prédéterminée comprise entre -20° C et 50° C, ladite unité de régulation étant montée hors de ladite au moins une chambre contre ledit fond et comprenant de préférence un module Peltier pourvu de connecteurs et d'un capteur de température communiquant avec l'intérieur de ladite au moins une chambre. 15 Cette mesure de la température est avantageusement réalisée par un thermocouple ou autre capteur de température. S'agissant de l'exemple d'un prélèvement cornéen, on notera également que sa conservation à long terme (jusqu'à 5 semaines) peut avantageusement être réalisée dans une gamme de température allant de 0 à 20 37° C dans la ou chaque chambre. Selon un autre aspect de l'invention, le dispositif peut comporter en outre un boîtier unitaire transportable comprenant : - un premier logement recevant de manière amovible une 25 coque thermiquement isolante de préférence polymérique (e.g. en polytétrafluoroéthylène) dans laquelle est logée une dite chambre unitaire dont ledit récipient est de préférence métallique (e.g. en titane), - une unité de mise en circulation dudit au moins un milieu de conservation et dudit gaz tampon dans ladite chambre comprenant de 30 préférence des pompes (lesquelles peuvent être stérilisées en autoclave pour une réutilisation dans des conditions d'asepsie), 3061633 7 - un accumulateur d'énergie électrique pour le fonctionnement du dispositif comprenant de préférence une batterie (permettant par exemple une autonomie de 72 heures), un second logement recevant de manière amovible un 5 premier réservoir contenant ledit milieu non usé à introduire dans ladite chambre, - un troisième logement recevant de manière amovible un second réservoir contenant ledit milieu usé une fois prélevé de ladite chambre, - un microcontrôleur à carte mémoire qui est apte à 10 permettre la traçabilité de conditions de conservation dudit au moins un tissu en particulier pendant le transport du dispositif, comprenant des valeurs mesurées et à réguler dudit au moins un paramètre physicochimique, de la température dudit milieu et optionnellement de paramètres microbiologiques, ladite carte contenant des données relatives audit milieu et optionnellement 15 audit au moins un tissu et/ou à son donneur, - des moyens d'affichage desdites conditions de conservation, comprenant de préférence un écran tactile, et - des moyens de communication avec un opérateur comprenant par exemple une antenne de type GSM ou Wifi, Bluetooth ou 20 Zigbee, lesdits moyens de communication étant couplés audit microcontrôleur et aptes à permettre audit opérateur d'accéder auxdites conditions de conservation et de les modifier par exemple en modifiant le débit et/ou la pression dudit gaz tampon pour régler le pH dudit milieu. On notera qu'un opérateur (i.e. le chirurgien ou toute autre 25 personne) ferme dans un premier temps le récipient contenant le tissu prélevé baignant dans son milieu de conservation au moyen du couvercle, puis scelle la chambre de conservation unitaire obtenue avec un bouchon avant de l'insérer dans ladite coque pour réduire les déperditions thermiques. Puis on insère l'ensemble chambre-coque en le branchant au boîtier de transport 30 grâce à des connecteurs de type « jacks », la chambre étant alimentée continûment en milieu de conservation et en gaz tampon lors de son transport dans ce boîtier. 3061633 8 On notera également que ledit second réservoir contenant le milieu usé permet de réaliser des analyses microbiologiques et biochimiques nécessaires au contrôle qualité de la stérilité du tissu, même pendant son transport. 5 On notera en outre que ladite carte mémoire peut avantageusement contenir l'ensemble des paramètres physicochim igues relatifs au milieu de conservation contenu dans la chambre transportée, et que le système électronique incluant ce microcontrôleur et ces moyens de communication permet de consulter et de modifier à distance tout ou partie de 10 ces paramètres en agissant en temps réel par exemple sur le gaz tampon mis en circulation dans la chambre. Ainsi, le boîtier unitaire transportable que peut comprendre un dispositif selon l'invention pour son transport présente les avantages suivants : - le tissu à greffer (e.g. un greffon cornéen) peut être 15 transporté dans les meilleures conditions pour sa conservation entre le lieu de son prélèvement et la banque de tissus correspondants (e.g. de cornées) et entre cette banque et le lieu de la greffe, via le transport (pendant au maximum 72 heures environ dans le cas d'une cornée) de la chambre de conservation unitaire contenant ce tissu immergé dans son milieu de 20 conservation avec un maintien en température du milieu et donc du tissu durant ce transport à une température pouvant varier de -20° C à 50° C ; - ce boîtier affiche les paramètres pertinents, dont la température, le pH et la couleur du milieu de conservation par exemple sur l'écran tactile, lequel permet également de modifier les consignes relatives 25 aux conditions de transport (e.g. température de la chambre, débit et/ou pression du milieu de conservation y circulant, débit et/ou pression du gaz tampon y circulant) ; et - ce boîtier enregistre les données récoltées au cours du transport de la chambre sur une mémoire suffisante de la carte du 30 microcontrôleur pour stocker tous les paramètres précités relatifs à la chambre et pour les transmettre grâce auxdits moyens de communication à un opérateur. 3061633 9 Selon encore un autre aspect de l'invention, le dispositif peut être adapté pour la conservation et un contrôle qualité simultanés de plusieurs dits tissus et il comprend : - un plateau configuré pour recevoir suivant un agencement 5 circulaire ou linéaire une pluralité de dites chambres respectivement adaptées pour contenir lesdits tissus baignant dans des dits milieux de conservation identiques ou différents dont les températures et des dits paramètres physicochim igues sont régulés individuellement, - un réceptacle pour au moins un dit premier réservoir et un dit 10 second réservoir couplés à chacune desdites chambres, et - des moyens d'analyse qui comprennent par exemple un microscope pour le comptage de cellules vivantes dans lesdits tissus et qui sont montés en mouvement relatif par rapport audit plateau (ces moyens d'analyse pouvant comprendre tout autre appareil de métrologie). 15 Dès réception par la banque des tissus correspondants (e.g. la banque de cornées), chaque chambre de conservation unitaire contenant le tissu, tel qu'un greffon cornéen, est alimentée (i.e. branchée via la connectique équipant sa paroi de fond, pour faire communiquer la chambre avec les circuits de milieu de conservation et de gaz tampon et l'unité de 20 régulation de température nécessaires à la croissance des cellules) en un emplacement prévu à cet effet du plateau du dispositif, lequel forme ainsi un incubateur multi-tissus. Avantageusement, ledit plateau peut présenter une surface de réception des chambres qui est en forme de couronne circulaire présentant un 25 axe de symétrie et qui présente une succession de logements pour les chambres, ces logements étant répartis suivant ledit agencement circulaire et étant adaptés pour réaliser le branchement desdits raccords fluidiques pour ledit gaz tampon et pour ledit milieu, dudit capteur de pH et du capteur de température, et lesdits moyens d'analyse tels que ledit microscope peuvent 30 alors être montés en rotation sur un support mobile centré sur ledit axe de symétrie, monté en contrebas du plateau et par exemple pourvu de crans pour positionner les moyens d'analyse suivant des positions angulaires 3061633 10 déterminées par rapport auxdites chambres, lesquelles sont par exemple disposées suivant une dite succession de paires radiales de dits logements. Ce dispositif particulier selon l'invention permet notamment de résoudre le problème de la conservation simultanée de plusieurs greffons 5 cornéens et de leur contrôle qualité en assurant les fonctions suivantes : - conservation et contrôle qualité de plusieurs tissus en même temps grâce audit plateau qui peut contenir n chambres de conservation unitaires (n variant par exemple de 10 à 30) avec un maintien en température de ces chambres (de préférence entre -20° C et 50° C), un renouvellement 10 automatique et en continu du milieu de conservation dans ces chambres de façon individuelle (chaque chambre étant pourvue d'un circuit séparé pour la circulation du milieu de conservation, ce qui permet d'éviter tout risque de contamination des autres chambres) et une circulation en continu dudit gaz tampon dans les chambres également de façon individuelle, 15 - possibilité de stérilisation en autoclave desdits réservoirs contenant les milieux de conservation ainsi que des organes de l'unité de mise en circulation (comprenant de préférence lesdites pompes) pour une réutilisation en toute sécurité et sans risque de contamination du reste du dispositif, 20 - enregistrement en temps réel des paramètres de contrôle qualité des tissu conservés (e.g. température, pH, etc.) qui sont consultables sur un ordinateur, et - possibilité d'une future thérapie grâce à la présence d'un dit premier réservoir pour chaque chambre, en injectant une substance 25 appropriée dans ce premier réservoir. Un procédé de conservation selon l'invention d'au moins un tissu humain ou animal, par exemple un prélèvement cornéen, en vue d'une greffe ou d'une expérience ex vivo, le procédé comprenant la mise en place 30 dudit au moins un tissu dans un bain liquide d'un milieu de conservation à l'intérieur d'au moins une chambre dans laquelle ledit milieu est renouvelé en continu, est tel que le procédé comprend une circulation en continu d'un gaz 3061633 11 tampon, tel que du dioxyde de carbone, dans ladite au moins une chambre hors et au contact dudit milieu pour réguler : - au moins un paramètre physicochimique dudit milieu comprenant son pH, et 5 - de préférence la température dudit milieu à au moins une valeur prédéterminée comprise entre -20° C et 50° C. Avantageusement, on peut faire circuler ledit gaz tampon selon un débit et une pression partielle réglables, avec de préférence pour la conservation d'une dite cornée une fraction molaire de dioxyde de carbone à 10 titre de gaz tampon comprise entre 2 % et 10 % et par exemple entre 4 % et 6 %. D'autres caractéristiques, avantages et détails de la présente invention ressortiront à la lecture de la description suivante d'exemples de 15 réalisation de l'invention, donnés à titre illustratif et non limitatif, la description étant réalisée en référence aux dessins joints, parmi lesquels : la figure 1 est une vue latérale et en perspective d'une chambre de conservation unitaire incluse dans un dispositif selon l'invention, la figure 2 est une vue de dessus et en perspective de la 20 chambre de la figure 1, la figure 3 est une vue de dessous et en perspective de la chambre de la figure 1 montrant la connectique dont elle est pourvue, la figure 4 est une vue latérale et en perspective d'une coque selon l'invention adaptée pour recevoir une chambre selon les figures 1 à 3, 25 la figure 5 est une vue de dessus et en perspective d'un dispositif selon l'invention formant boîtier transportable incorporant une chambre selon les figures 1 à 3 logée dans une coque selon la figure 4, la figure 6 est une vue frontale avant et en perspective du dispositif de la figure 5, 30 la figure 7 est une vue latérale et en perspective du dispositif de la figure 6, 3061633 12 la figure 8 est une vue similaire à la figure 7 mais avec arrachement des parois externes du boîtier pour visualiser une partie de ses composants internes, la figure 9 est une vue de dessus et en perspective montrant 5 un exemple de microcontrôleur tel que visible dans le boîtier de la figure 8, et la figure 10 est une vue de dessus et en perspective d'un dispositif selon un autre aspect de l'invention formant un incubateur multitissus adapté pour recevoir une multitude de chambres selon les figures 1 à 3. 10 La chambre de conservation unitaire 1 visible aux figures 1-3 qui constitue un élément principal d'un dispositif de conservation 1', 1" selon l'invention, est destinée à recevoir un tissu, tel qu'une cornée, immergé dans un bain d'un milieu de conservation liquide spécifique à ce tissu, et comprend : - un récipient 2 métallique (par exemple en titane) comportant 15 un fond 2a prolongé par une paroi latérale périphérique 2b s'étendant à partir du fond 2a, le récipient 2 présentant une face interne sensiblement hémisphérique 2c et la paroi latérale 2b présentant une face externe 2d globalement convexe (définie dans cet exemple par deux côtés convexes opposés en arcs de cylindre reliés entre eux par deux côtés plats via des 20 zones de liaison arrondies), et - un couvercle 3 au moins en partie translucide ou transparent (comprenant par exemple une fenêtre 3a de type vitre en verre ou en un autre matériau tel que du saphir) qui est verrouillé en vue d'une ouverture unique sur une partie supérieure de la face interne 2c de la paroi latérale 2b adaptée 25 pour ce verrouillage, via des moyens de retenue 3b aptes à signaler à un opérateur son ouverture antérieure (par exemple via la rupture d'une patte sécable, non représentée). Dans le récipient 2 sont formés (voir figure 2) : - dans la paroi latérale 2b et dans le fond 2a, respectivement 30 un orifice d'introduction 4a et un orifice de prélèvement 4b (i.e. de sortie) du milieu de conservation qui communiquent avec des raccords fluidiques 5a et 3061633 13 5b par exemple de type « Luer » montés de manière étanche contre la face externe du fond 2a et traversant ce dernier (voir figure 3), - dans une zone supérieure de la paroi latérale 2b située immédiatement en dessous des moyens de retenue 3b du couvercle 3, des 5 orifices d'amenée 6a et 6b et d'évacuation d'un gaz tampon tel que du CO2 dans et de la chambre 1 qui communiquent également avec des raccords fluidiques 7a et 7b par exemple de type « Luer » montés de manière étanche contre la face externe du fond 2a et traversant ce dernier (voir figure 3), - dans le fond 2a ou dans une zone inférieure de la paroi 10 latérale 2b, un capteur 8 de pH du milieu de conservation (de préférence un micro-capteur potentiométrique) qui communique avec un connecteur 9 monté contre et à travers le fond 2a, et - une unité de régulation de la température 10 du milieu dans la chambre 1 à une valeur prédéterminée entre -20° C et 50° C, qui est 15 montée contre la face externe du fond 2a et qui comprend un module Peltier 11 (voir figure 3) pourvu d'un premier connecteur 12 pour ce module 11 et d'un second connecteur 13 pour un capteur de température communiquant avec l'intérieur de la chambre 1. Le module Peltier 11 utilise de manière connue l'effet 20 thermoélectrique, phénomène physique de déplacement de chaleur en présence d'un courant électrique. Dans les dispositifs 1', 1" de l'invention illustrés aux figures 4-8 et 10, ce module 11 utilise un composant électronique qui permet d'obtenir une température maximale en lui appliquant une tension positive, et une température minimale par l'inversion de cette tension à ses 25 bornes. A titre d'exemple mis en oeuvre pour la conservation d'une cornée, on a testé un module Peltier 11 fabriqué par Adaptative sous la référence ET071-10-13-RS, de type 21,2 W - 3,9A - 8,8 V - 20 x 20 mm. Ce module 11 était équipé d'une boucle d'asservissement constituée d'un thermocouple et d'un microcontrôleur, pour assurer la régulation de la température du milieu de 30 conservation à une température de consigne comprise entre -20° C et 50° C dans le cadre de l'invention. 3061633 14 Les dispositifs 1' et 1" comprennent chacun en outre une unité de mise en circulation 14 (voir figures 5-7) du milieu de conservation et du gaz tampon via les raccords fluidiques 5a, 5b et 7a, 7b et orifices 4a, 4b et 6a, 6b, qui comprend de préférence des pompes. On a en particulier testé des 5 pompes piézo-électriques (pompes Mp6 Micropump de la société Bartels Mikrotechnik, à deux actionneurs piézoélectriques dans un même logement) pour le renouvellement du milieu de conservation, avec une pression appliquée au liquide ou au gaz qui varie de 0 à 600 mbar (0 à 60 000 Pa) pour des débits de 0 à 7 mL/min. (étant précisé que la pression peut atteindre 10 plusieurs bars lorsque les pompes sont mécaniques). Concernant le gaz tampon mis en circulation dans la chambre 1, on a en particulier testé du CO2 pour la conservation d'une cornée, en utilisant une fraction molaire de CO2 de 5 % dans l'atmosphère humide thermostatée de la chambre 1, soit avec la pression partielle de CO2 suivante 15 à la pression atmosphérique de 790 mm Hg (soit 1,013.105 Pa) : PCO2 = 0,05. 760 (mmHg) = 38 mmHg (soit environ 5 065 Pa). Comme expliqué ci-dessus, la circulation continue de ce gaz tampon dans la chambre 1 au-dessus et au contact du milieu de conservation contenu dans celle-ci (i.e. en évitant une circulation du gaz directement au 20 sein du liquide de conservation) permet de réguler en continu le pH du milieu, pour conserver le tissu dans son milieu nutritif selon des conditions optimales jusqu'à la greffe (pendant une durée pouvant par exemple atteindre 5 semaines dans le cas d'une cornée). De plus, la mesure en continu du pH du milieu de conservation dans lequel est immergé le tissu permet de détecter à 25 tout instant une contamination bactérienne de ce milieu. Les essais réalisés par la Demanderesse ont ainsi établi qu'une fraction molaire de CO2 égale à 5 % permet de maintenir un pH optimal sensiblement constant, pour un milieu de conservation de dénomination CorneaMax® de la société EUROBIO contenant un greffon de 30 cornée et dont la température était régulée à 31° C par le module Peltier 11 précité ET-071-10-13-RS (cette régulation à 31° C est particulièrement adaptée à la pratique des banques de cornées européennes, étant précisé 3061633 15 qu'il est possible de réguler la température du milieu à une température beaucoup plus basse de seulement 4° C par exemple, suivant en cela la pratique en Amérique du Nord). La figure 4 montre la structure d'une coque 15 thermiquement 5 isolante (e.g. en Téflon()) comprenant un container 16 sensiblement cubique pourvu d'un couvercle de coque 17 (illustré vide et en position ouverte) qui est articulé par des charnières 18 et qui présente une fenêtre 19 translucide ou transparente, à l'instar du couvercle 3 de la chambre 1 que la coque 15 est adaptée pour recevoir après fermeture et scellage du couvercle 3 de la 10 chambre 1. La paroi de fond 16a du container 16 est traversée par la connectique 20 de la chambre 1 (comme visible à la figure 3, cette connectique 20 comprend notamment les raccords 5a, 5b, 7a, 7b et les connecteurs 9, 12-13, en plus d'une batterie et d'une carte-mémoire, non visibles), de sorte à permettre l'alimentation de la connectique 20 pour la mise 15 en oeuvre de la conservation du tissu et l'enregistrement des conditions de conservation lors du transport de la chambre 1 au moyen de la coque 15. Selon un autre aspect de l'invention, la coque 15 contenant la chambre remplie du tissu baignant dans son milieu de conservation est elle-20 même connectée à un boîtier unitaire transportable 21 que peut comprendre un dispositif 1' selon l'invention. Comme illustré aux figures 5 à 8, le boîtier 21 comprend notamment : - un logement 22 recevant la coque 15 dans laquelle est 25 logée et connectée une chambre unitaire 1 pour la mise en circulation du milieu de conservation et du gaz tampon et pour la régulation de la température du milieu, - l'unité de mise en circulation 14 du milieu de conservation et du gaz tampon dans la chambre 1, 30 - une batterie électrique (identifiée par sa trappe d'accès 23) pour le fonctionnement du dispositif 1' (permettant par exemple une autonomie de 72 heures), 3061633 16 - un logement 24a recevant un premier réservoir tubulaire 24b contenant le milieu de conservation « frais » (i.e. non usé) à introduire dans la chambre 1, - un logement 25a recevant un second réservoir 5 tubulaire 25b contenant le milieu de conservation usé prélevé de la chambre 1, - un microcontrôleur 26 à carte mémoire 26a (voir figures 8 et 9) pour la traçabilité de conditions de conservation du tissu en particulier pendant le transport du dispositif 1', comprenant des valeurs mesurées et à réguler du pH, de la température du milieu et optionnellement de paramètres 10 microbiologiques (la carte 26a contenant des données relatives au milieu et optionnellement au tissu et/ou à son donneur), - un écran 27 par exemple tactile pour l'affichage des conditions de conservation, et - une antenne 28 par exemple de type GSM ou Wifi, 15 Bluetooth ou Zigbee pour la communication à un opérateur via le microcontrôleur 26 des conditions de conservation et pour que cet opérateur puisse les modifier par exemple en modifiant le débit et/ou la pression du gaz tampon pour régler le pH du milieu (une augmentation du débit de gaz tampon pouvant permettre par « rinçage » de retrouver le pH de consigne), en cas de 20 message d'alerte sur ce pH émis par le dispositif 1'. La carte mémoire 26a du microcontrôleur 26 détaillée à la figure 9 est par exemple de type mémoire SSD (pour «Solid State Drive », i.e. disque à mémoire flash), et elle peut être couplée à un module 26b de type GSM et Wifi. 25 Comme expliqué ci-dessus, un opérateur tel qu'un chirurgien qui ouvre la chambre de conservation unitaire 1 sait, grâce à la présence intacte desdits moyens aptes à signaler l'ouverture du couvercle (tels qu'une patte sécable) et grâce à la carte-mémoire 26a du microcontrôleur 26 recensant les conditions de conservation du tissu, qu'il peut procéder le cas 30 échéant à la greffe ou à l'expérience ex vivo prévue à partir du tissu ainsi conservé. 3061633 17 Le dispositif 1" selon un autre aspect de l'invention illustré à la figure 10 forme un incubateur multi-tissus permettant une conservation et un contrôle qualité simultanés d'une multitude de tissus. Ce dispositif 1" est à cet effet configuré pour contenir une multitude de chambres unitaires de 5 conservation 1 (seulement deux chambres 1 sont représentées) contenant respectivement les tissus baignant dans leurs milieux de conservation dont les températures et le pH notamment sont régulés individuellement. Dans cet exemple, les chambres 1 sont montées sur un plateau circulaire 29 équipé de moyens d'analyse qui comprennent par exemple un microscope miniaturisé 10 (non illustré) pour le comptage des cellules vivantes dans les tissus et qui sont montés en contrebas du plateau 29 sur un support 30 centré sur l'axe de symétrie X du plateau 29 et mobile en rotation par rapport au plateau 29, via des crans 31 pour positionner ces moyens d'analyse suivant des positions angulaires déterminées par rapport aux chambres 1. 15 Le plateau 29 présente une surface de réception 29a des chambres 1 en forme de couronne circulaire et présentant une succession de logements 30a et 30b pour les chambres 1 répartis par paires radiales (par rapport à l'axe X) suivant un agencement circulaire. Comme visible à la figure 10, chaque logement 30a, 30b est adapté pour permettre le 20 branchement de la connectique 20 des chambres 1 à travers le plateau 29 via des prises 32 formées dans ces logements 30a et 30b, de sorte à assurer et maintenir les conditions de conservation requises pour les tissus dès leur réception de la banque correspondante (notamment via les circuits de milieu de conservation et de gaz tampon et l'unité de régulation de température 10). 25 Est en outre visible à l'exemple de la figure 10 un réceptacle 33 qui définit deux paires d'emplacements 34 pour quatre réservoirs 24b et 25b et qui est par exemple solidaire en rotation du support 30. Chaque paire d'emplacements 34 sont respectivement destinés à recevoir un premier et un second réservoirs tubulaires 24b (milieu non usé) et 25b 30 (milieu usé) pour l'une des deux chambres 1 de chaque paire de chambres 1 radiales. REVENDICATIONS1) Dispositif de conservation (1', 1") d'au moins un tissu humain ou animal, par exemple un prélèvement cornéen, en vue d'une greffe 5 ou d'une expérience ex vivo, le dispositif comprenant au moins une chambre (1) qui est adaptée pour recevoir et conserver ledit au moins un tissu dans un milieu de conservation liquide et qui comprend des moyens de renouvellement en continu (4a et 4b, 5a et 5b) dudit milieu dans ladite au moins une chambre, caractérisé en ce que le dispositif comprend en outre des 10 moyens de régulation (6a et 6b, 7a et 7b) d'au moins un paramètre physicochimique dudit milieu comprenant son pH, par circulation en continu d'un gaz tampon dans ladite au moins une chambre hors et au contact dudit milieu. 15 2) Dispositif (1', 1") selon la revendication 1, dans lequel ladite au moins une chambre (1) comporte : - un récipient (2) comportant un fond (2a) prolongé par une paroi latérale périphérique (2b) s'étendant à partir dudit fond, ledit récipient présentant de préférence une face interne (2c) sensiblement hémisphérique, 20 et - un couvercle (3) au moins en partie translucide ou transparent monté sur ladite paroi latérale, ledit couvercle étant de préférence conçu pour une ouverture unique et pourvu de moyens (3b) signalant à un opérateur son ouverture antérieure, 25 et dans lequel lesdits moyens de régulation (6a et 6b, 7a et 7b) comprennent des orifices d'amenée et d'évacuation (6a et 6b) dudit gaz tampon tel que du dioxyde de carbone dans et de ladite au moins une chambre, lesdits orifices d'amenée et d'évacuation étant formés dans une zone supérieure de ladite paroi latérale adjacente audit couvercle de sorte 30 que ledit gaz tampon soit amené dans et évacué de ladite au moins une chambre au-dessus dudit milieu. 3061633 19 3) Dispositif (1', 1") selon la revendication 2, dans lequel lesdits moyens de régulation (6a et 6b, 7a et 7b) comprennent en outre : - des raccords fluidiques (7a et 7b) pour ledit gaz tampon communiquant respectivement avec lesdits orifices d'amenée et d'évacuation (6a et 6b) et aptes à le faire circuler sous pression et en continu dans ladite au moins une chambre (1), via une unité de mise en circulation (14) que comprend le dispositif et qui comprend par exemple des pompes, - au moins un capteur dudit au moins un paramètre physicochimique communiquant avec l'intérieur de ladite au moins une 10 chambre et comprenant un capteur de pH (8), - optionnellement un capteur microbiologique par exemple fonctionnalisé apte à détecter une bactérie donnée dans ledit milieu, et - optionnellement au moins une ouverture dans ladite paroi latérale pour introduire dans ladite au moins une chambre un fluide 15 thérapeutique ou non pour préserver ledit au moins un tissu, et/ou pour accélérer sa régénération tissulaire. 4) Dispositif (1', 1") selon la revendication 3, dans lequel lesdits moyens de renouvellement (4a et 4b, 5a et 5b) dudit milieu 20 comprennent des orifices d'introduction et de prélèvement (4a et 4b) dudit milieu adaptés pour l'introduire dans et le prélever de ladite au moins une chambre (1), respectivement en provenance d'un premier réservoir (24b) du dispositif contenant ledit milieu non usé à introduire et vers un second réservoir (25b) du dispositif contenant ledit milieu usé une fois prélevé, lesdits 25 orifices d'introduction et de prélèvement étant formés dans ledit récipient (2) et communiquant respectivement avec deux raccords fluidiques (5a et 5b) pour ledit milieu aptes à faire circuler sous pression et en continu ledit milieu dans ladite au moins une chambre via ladite unité de mise en circulation (14). 30 5) Dispositif (1', 1") selon une des revendications 2 à 4, dans lequel le dispositif comprend en outre une unité de régulation de la température (10) dudit milieu dans ladite au moins une chambre (1) à au 3061633 20 moins une valeur prédéterminée comprise entre -20° C et 50° C, ladite unité de régulation étant montée hors de ladite au moins une chambre contre ledit fond (2a) et comprenant de préférence un module Peltier (11) pourvu de connecteurs (12 et 13) et d'un capteur de température communiquant avec 5 l'intérieur de ladite au moins une chambre. 6) Dispositif (1') selon une des revendications 2 à 5, dans lequel le dispositif comporte en outre un boîtier unitaire (21) transportable comprenant : - un premier logement (22) recevant de manière amovible une coque (15) thermiquement isolante de préférence polymérique dans laquelle est logée une dite chambre (1) dont ledit récipient (2) est de préférence métallique, - une unité de mise en circulation (14) dudit au moins un 15 milieu de conservation et dudit gaz tampon dans ladite chambre comprenant de préférence des pompes, - un accumulateur d'énergie électrique (23) pour le fonctionnement du dispositif comprenant de préférence une batterie, - un second logement (24a) recevant de manière amovible 20 un premier réservoir (24b) contenant ledit milieu non usé à introduire dans ladite chambre, - un troisième logement (25a) recevant de manière amovible un second réservoir (25b) contenant ledit milieu usé une fois prélevé de ladite chambre, 25 - un microcontrôleur (26) à carte mémoire (26a) qui est apte à permettre la traçabilité de conditions de conservation dudit au moins un tissu en particulier pendant le transport du dispositif, comprenant des valeurs mesurées et à réguler dudit au moins un paramètre physicochimique, de la température dudit milieu et optionnellement de paramètres microbiologiques, 30 ladite carte contenant des données relatives audit milieu et optionnellement audit au moins un tissu et/ou à son donneur, 3061633 21 - des moyens d'affichage (27) desdites conditions de conservation, comprenant de préférence un écran tactile, et - des moyens de communication (28) avec un opérateur comprenant par exemple une antenne, lesdits moyens de communication 5 étant couplés audit microcontrôleur et aptes à permettre audit opérateur d'accéder auxdites conditions de conservation et de les modifier par exemple en modifiant le débit et/ou la pression dudit gaz tampon pour régler le pH dudit milieu. 10 7) Dispositif (1") selon les revendications 4 et 5, dans lequel le dispositif est adapté pour la conservation et un contrôle qualité simultanés de plusieurs dits tissus, le dispositif comprenant : - un plateau (29) configuré pour recevoir suivant un agencement circulaire ou linéaire une pluralité de dites chambres (1) respectivement adaptées pour contenir lesdits tissus baignant dans des dits milieux de conservation identiques ou différents dont les températures et des dits paramètres physicochim igues sont régulés individuellement, - un réceptacle (33) pour au moins un dit premier réservoir (24b) et un dit second réservoir (25b) couplés à chacune desdites chambres, 20 et - des moyens d'analyse qui comprennent par exemple un microscope pour le comptage de cellules vivantes dans lesdits tissus et qui sont montés en mouvement relatif par rapport audit plateau. 25 8) Dispositif (1") selon la revendication 7, dans lequel ledit plateau (29) présente une surface de réception (29a) desdites chambres (1) qui est en forme de couronne circulaire présentant un axe de symétrie (X) et qui présente une succession de logements (30a et 30b) pour lesdites chambres, lesdits logements étant répartis suivant ledit agencement circulaire 30 et étant adaptés pour réaliser le branchement desdits raccords fluidiques pour ledit gaz tampon (7a et 7b) et pour ledit milieu (5a et 5b), dudit capteur de pH (8) et dudit capteur de température, 3061633 22 et dans lequel lesdits moyens d'analyse sont montés en rotation sur un support mobile (30) centré sur ledit axe de symétrie, monté en contrebas dudit plateau et par exemple pourvu de crans (31) pour positionner lesdits moyens d'analyse suivant des positions angulaires déterminées par 5 rapport auxdites chambres, lesquelles sont par exemple disposées suivant une dite succession de paires radiales de dits logements. 9) Procédé de conservation d'au moins un tissu humain ou animal, par exemple un prélèvement cornéen, en vue d'une greffe ou d'une 10 expérience ex vivo, le procédé comprenant la mise en place dudit au moins un tissu dans un bain liquide d'un milieu de conservation à l'intérieur d'au moins une chambre (1) dans laquelle ledit milieu est renouvelé en continu, caractérisé en ce que le procédé comprend une circulation en continu d'un gaz tampon, tel que du dioxyde de carbone, dans ladite au moins une 15 chambre hors et au contact dudit milieu pour réguler : - au moins un paramètre physicochimique dudit milieu comprenant son pH, et - de préférence la température dudit milieu à au moins une valeur prédéterminée comprise entre -20° C et 50° C. 20 10) Procédé selon la revendication 9, dans lequel on fait circuler ledit gaz tampon selon un débit et une pression partielle réglables, avec de préférence pour la conservation d'une dite cornée une fraction molaire de dioxyde de carbone à titre de gaz tampon comprise entre 2 % et 25 10 % et par exemple entre 4 % et 6 %.