FR 3052072 A1 20171208 FR 1655222 A 20160607 1 SOLUTION INJECTABLE A PH 7 COMPRENANT AU MOINS UNE INSULINE BASALE DONT LE PI EST COMPRIS ENTRE 5,8 ET 8,5 ET UN CO-POLYAMINOACIDE PORTEUR DE CHARGES CARBOXYLATES ET DE RADICAUX HYDROPHOBES [0001] L'invention concerne les thérapies par injection d'insuline(s) pour traiter le diabète. [0002] L'invention concerne des compositions stables physiquement sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins une insuline basale dont le point isoélectrique (pi) est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes. [0003] L'insulinothérapie, ou thérapie du diabète par injection d'insuline, a connu ces dernières années des progrès remarquables grâce notamment à la mise au point de nouvelles insulines offrant une meilleure correction de la glycémie des patients en comparaison de l'insuline humaine et qui permettent de mieux simuler l'activité physiologique du pancréas. [0004] Lorsqu'un diabète de type II est diagnostiqué chez un patient, un traitement graduel est mis en place. Le patient prend en premier lieu des antidiabétiques oraux (OAD) comme la Metformine. Lorsque les OAD seuls ne suffisent plus à réguler le niveau de glucose dans le sang, un changement dans le traitement doit être fait et, en fonction des spécificités des patients, différentes associations de traitements peuvent être mises en place. Le patient peut par exemple avoir un traitement à base d'une insuline basale de type insuline glargine ou insuline detemir en complément des OAD, puis ensuite en fonction de l'évolution de la pathologie un traitement à base d'insuline basale et d'insuline prandiale. [0005] Par ailleurs, aujourd'hui, pour assurer la transition des traitements par les OAD, lorsque ceux-ci ne sont plus en mesure de contrôler le niveau de glucose dans le sang, vers un traitement insuline basale/insuline prandiale, l'injection d'analogues de GLP-1 RA est préconisée. [0006] Les GLP-1 FIA pour agonistes du récepteur Glucagon-Like Peptide-1, sont des peptides insulinotropiques ou incrétines, et appartiennent à la famille des hormones gastro-intestinales (ou Gut Hormones) qui stimulent la sécrétion d'insuline lorsque la glycémie est trop élevée, par exemple après un repas. [0007] Les hormones gastro-intestinales (Gut hormones) sont aussi appelées hormones de satiété. Elles comprennent notamment le GLP-1 RA (Glucagon like peptide-1 receptor agonist) et le GIP (Glucose-dependent insulinotropic peptide), 3052072 2 l'oxyntomoduline (un dérivé du proglucagon), le peptide YY, l'amyline, la cholecystokinine, le polypeptide pancréatique (PP), la ghreline et l'entérostatine qui ont des structures peptidiques ou protéiques. Elles stimulent également la sécrétion d'insuline, en réponse au glucose et aux acides gras et sont donc à ce titre des candidats 5 potentiels pour le traitement du diabète. [0008] Parmi celles-ci, les GLP-1 RA sont celles qui ont apporté à ce jour les meilleurs résultats dans le développement de médicaments. Elles ont permis à des patients atteints de diabète de type II de perdre du poids tout en ayant un meilleur contrôle de leur glycémie. 10 [0009] Des analogues ou des dérivés de GLP-1 RA ont ainsi été développés notamment pour améliorer leur stabilité. [00010] D'autre part, pour couvrir ses besoins journaliers en insuline, un patient diabétique dispose, actuellement, de façon schématisée, de deux types d'insulines ayant 15 des actions complémentaires : les insulines prandiales (ou insulines dites à action rapide) et les insulines basales (ou insulines dites à action lente). [00011] Les insulines prandiales permettent une prise en charge rapide (métabolisation et/ou stockage) du glucose apporté lors des repas et collations. Le patient doit s'injecter une insuline prandiale avant chaque prise alimentaire, soit environ 20 2 à 3 injections par jour. Les insulines prandiales les plus utilisées sont : humaine recombinante, NovoLog® (insuline aspart de NOVO NORDISK), Humalog® (insuline lispro de ELI LILLY) et Apidra® (insuline glulisine de SANOFI). [00012] Les insulines basales assurent le maintien de l'homéostasie glycémique du patient, en dehors des périodes de prise alimentaire. Elles agissent essentiellement pour 25 bloquer la production endogène de glucose (glucose hépatique). La dose journalière d'insuline basale correspond généralement à 40-50 °h des besoins totaux journaliers en insuline. Selon l'insuline basale utilisée, cette dose est dispensée en 1 ou 2 injections, régulièrement réparties au cours de la journée. Les insulines basales les plus utilisées sont Levemir® (insuline detemir de NOVO NORDISK) et Lantus® (insuline glargine de 30 SANOFI). [00013] On notera pour être exhaustif que la NPH (insuline NPH pour Neutral Protamine Hagedorn ; Humuline NPH®, Insulatard®) est la plus ancienne insuline basale. Cette formulation est le résultat d'une précipitation de l'insuline humaine (anionique à pH neutre) par une protéine cationique, la protamine. Les microcristaux ainsi formés 35 sont dispersés dans une suspension aqueuse et se dissolvent lentement après injection sous-cutanée. Cette dissolution lente assure une libération prolongée de l'insuline. Cependant cette libération n'assure pas une concentration constante d'insuline au cours du temps. Le profil de libération est en forme de cloche et dure seulement entre 12 et 3052072 3 16 heures. Elle est donc injectée deux fois par jour. Cette insuline basale NPH est bien moins performante que les insulines basales modernes, Levemir® et Lantus®. La NPH est une insuline basale à action intermédiaire. [00014] Le principe de la NPH a évolué avec l'apparition des insulines analogues 5 rapides pour donner des produits appelés « Premix » offrant à la fois une action rapide et une action intermédiaire. NovoLog Mix® (NOVO NORDISK) et Humalog Mix® (ELI LILLY) sont des formulations comprenant une insuline analogue rapide, Novolog® et Hurnalog®, complexée partiellement par la protamine. Ces formulations contiennent ainsi des microcristaux d'insuline analogue dont l'action est dite intermédiaire et une 10 partie d'insuline restée soluble dont l'action est rapide. Ces formulations offrent bien l'avantage d'une insuline rapide mais elles ont aussi le défaut de la NPH, c.-à-d. une durée d'action limitée entre 12 et 16 heures et une insuline libérée en « cloche ». Cependant, ces produits permettent au patient de s'injecter en une seule fois une insuline basale à action intermédiaire avec une insuline prandiale à action rapide. Or 15 nombreux sont les patients soucieux de réduire leur nombre d'injections. [00015] Les insulines basales actuellement commercialisées peuvent être classées en fonction de la solution technique qui permet d'obtenir l'action prolongée et à ce jour deux approches sont utilisées. [00016] La première, celle de l'insuline detemir est la liaison à l'albumine in vivo. Il 20 s'agit d'un analogue, soluble à pH 7, qui comprend une chaine latérale d'acide gras (tetradecanoyl) fixée à la position B29 qui, in vivo, permet à cette insuline de s'associer à l'albumine. Son action prolongée est principalement due à cette affinité pour l'albumine après injection sous-cutanée. [00017] Cependant son profil pharmacocinétique ne permet pas de couvrir une 25 journée, ce qui fait qu'elle est le plus souvent utilisée en deux injections par jour. [00018] Une autre insuline soluble à pH 7, est l'insuline degludec commercialisée sous le nom de Tresibed. Elle comprend également une chaîne latérale d'acide gras fixée sur l'insuline (hexadecandioyl-y-L-Glu). [00019] La seconde, celle de l'insuline glargine, est la précipitation à pH 30 physiologique. L'insuline glargine est un analogue de l'insuline humaine obtenu par élongation de la partie C-terminale de la chaine B de l'insuline humaine par deux résidus arginine, et par substitution du résidu d'asparagine A21, par un résidu de glycine (US 5,656,722). L'addition de deux résidus d'arginine a été pensée pour ajuster le pI (point isoélectrique) d'insuline glargine au pH physiologique, et ainsi rendre cet analogue de 35 l'insuline humaine insoluble en milieu physiologique. [00020] Aussi, la substitution de l'A21 a été pensée afin de rendre l'insuline glargine stable à pH acide et pouvoir ainsi la formuler sous forme de solution injectable à pH acide. Lors de l'injection sous-cutanée, le passage de l'insuline glargine d'un pH acide 3052072 4 (pH 4-4,5) à un pH physiologique (pH neutre) provoque sa précipitation sous la peau. La redissolution lente des micro-particules d'insuline glargine assure une action lente et prolongée. [00021] L'effet hypoglycémiant de l'insuline glargine est quasi-constant sur une 5 durée de 24 heures ce qui permet à la plupart des patients de se limiter à une seule injection par jour. [00022] L'insuline glargine est considérée aujourd'hui comme l'insuline basale la plus utilisée. [00023] Cependant le pH nécessairement acide des formulations d'insulines 10 basales, dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5, de type insuline glargine, peut être un réel inconvénient, car ce pH acide de la formulation d'insuline glargine entraîne parfois chez les patients des douleurs à l'injection et surtout empêche toute formulation avec d'autres protéines et en particulier avec les insulines prandiales car ces dernières ne sont pas stables à pH acide. L'impossibilité de formuler une insuline 15 prandiale, à pH acide, tient au fait qu'une insuline prandiale subit, dans ces conditions, une réaction secondaire de déamidation en position A21, ce qui ne permet pas de répondre aux exigences de stabilité applicables aux médicaments injectables. [00024] A ce jour, dans les demandes WO 2013/021143 Al, WO 2013/104861 Al, 20 WO 2014/124994 Al et WO 2014/124993 Al il a été démontré qu'il était possible de solubiliser ces insulines basales, de type insuline glargine dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5, à pH neutre, tout en maintenant une différence de solubilité entre le milieu in-vitro (le contenant) et le milieu in-vivo (sous la peau), indépendamment du pH. 25 [00025] La demande WO 2013/104861 Al, en particulier, décrit des compositions sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins (a) une insuline basale dont le point isoélectrique pI est compris entre 5,8 et 8,5 et (b) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates substitué 30 par des radicaux hydrophobes. [00026] Ces compositions de l'art antérieur ont l'inconvénient majeur de ne pas être suffisamment stables pour répondre aux cahiers des charges applicables aux formulations pharmaceutiques. [00027] Dans les exemples de la partie expérimentale de la présente demande de 35 brevet i| est démontré que les compositions décrites en particulier dans WO 2013/104861 Al présentent une stabilité insatisfaisante dans le temps. 3052072 5 [00028] Il existe donc un besoin de trouver une solution qui permet de solubiliser une insuline basale dont le point isoélectrique (pI) est compris entre 5,8 et 8,5 tout en conservant son profil basal après injection mais qui permettent également de satisfaire à des conditions de stabilité physique standard pour les produits pharmaceutiques à 5 base d'insuline. [00029] De manière surprenante, la demanderesse a trouvé que les co- polyaminoacides porteurs de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes selon l'invention permettent d'obtenir des compositions sous forme de solutions qui non seulement répondent aux exigences décrites dans WO 2013/104861 Al mais qui de plus 10 sont en mesure de conférer une stabilité physique améliorée auxdites compositions sans avoir à augmenter la quantité d'excipients utilisée. [000]0] Ces performances a priori jamais atteintes sont de plus conservées lorsque l'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 est associée dans la composition avec une insuline prandiale et/ou une hormone gastro-intestinale. 15 [000]1] Ainsi, de façon surprenante, l'affinité des co-polyaminoacides selon l'invention pour l'insuline glargine a été augmentée en ce qu'elle permet d'obtenir une solubilisation et une stabilisation des solutions d'insuline glargine à un ratio [Hy]/[insuline basale] inférieur à celui de l'art antérieur ; ces résultats sont de plus obtenus sans altérer, voire en améliorant, la propension de l'insuline glargine à 20 précipiter comme cela est démontré dans la partie expérimentale. [00032] Cette amélioration de l'affinité permet en outre dans le cadre de traitements chroniques de limiter le niveau d'exposition auxdits excipients. [00033] L'invention concerne ainsi des compositions stables physiquement sous 25 forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins : a) une insuline basale dont le point isoélectrique (pI) est compris entre 5,8 et 8,5 et b) un co-polyanninoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un 30 radical hydrophobe de formule I. [00034] Dans un mode de réalisation, l'invention concerne une composition sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins : 35 a) une insuline basale dont le point isoélectrique pI est compris entre 5,8 et 8,5 ; b) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy, ledit co-polyaminoacide étant constitué d'unités 3052072 6 glutamiques ou aspartiques et lesdits radicaux hydrophobes Hy étant de formule I suivante : P Formule I 5 dans laquelle GpR est un radical de formules II ou II' : 0 H H U H 10 - GpA est un radical de formules III ou III' p, HN-* * II Al 0 H hIN-*IIIou * A N * III'; - GpC est un radical de formule IV : 15 Hy comprend plus de 30 atomes de carbone, - les * indiquent les sites de rattachement des différents groupes liés par des fonctions amides ; a est un entier égal à 0 ou à 1 ; - b est un entier égal à 0 ou à 1 ; 20 p est un entier égal à 1 ou à 2 et o si p est égal à 1 alors a est égal à O ou à 1 et GpA est un radical de formule III' et, o si p est égal à 2 alors a est égal à 1, et GpA est un radical de formule III ; 25 c est un entier égal à 0 ou à 1, et si c est égal à 0 alors d est égal à 1 ou à 2; d est un entier égal à 0, à 1 ou à 2 ; r est un entier égal à 0 ou à 1, et IV; 3052072 7 o si r est égal à O alors le radical hydrophobe de formule I est lié au copolyaminoacide via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminale du copolyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une 5 fonction amine en position N terminale du précurseur du co-polyaminoacide et une fonction acide portée par le précurseur du radical hydrophobe , et osi r est égal à 1 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide : - via une liaison covalente entre un atome d'azote du radical 10 hydrophobe et un carbonyl du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine du précurseur du radical hydrophobe et une fonction acide portée par le précurseur du co-polyaminoacide ou - via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe 15 et un atome d'azote en position N-terminale du co- polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction acide du précurseur du radical hydrophobe et une fonction amine en position N-terminale portée par le précurseur du co-polyaminoacide ; 20 R est un radical choisi dans le groupe constitué par : - un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant si GpR est un radical de formule II de 2 à 12 atomes de carbone ou si GpR est un radical de formule II' de 1 à 11 atomes de carbone ; o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant si GpR est un 25 radical de formule II de 2 à 11 atomes de carbone ou si GpR est un radical de formule II' de 1 à 11 atomes de carbone, ledit radical alkyle portant une ou plusieurs fonctions -CONH2, et o un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ; 30 A est un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 6 atomes de carbone; B est un radical alkyle linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant un noyau aromatique, comprenant de 1 à 9 atomes de carbone ; Cx est un radical alkyl monovalent linéaire ou ramifié, dans lequel x indique le 35 nombre d'atomes de carbone et : o si p est égal à 1, x est compris entre 11 à 25 (11 x 25) ; o si p est égal à 2, x est compris entre 9 et 15 (9 x 15), 3052072 8 le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques étant compris entre entre 0 ). [000768] Les résultats de stabilité accélérée (obtenus avec différentes compositions sont présentés dans les tableaux 7 et 8 ci-après. Composition Co-polyaminoacide Stabilité à 25°C en dynamique (en jours) CA3 AB18 11 >30 19 11 17 7 >15 7 7 CA3b CA3c CA3d CA3e CA3f CA3h CA3i CA3j CA3k BB5 BB11 BB14 BB15 CEB1 CEB2 CEB3 CEB4 5 Tableau 7: résultats des stabilités des compositions co-polyaminoacide/insuline glargine (200 U/mL) à 25°C en dynamique (sous agitation à 250 rpm). (*Apparition d'un précipité quand le pH de la solution d'insuline glargine est ajusté à pH 7). 10 Tableau 8 : résultats des stabilités des compositions co-polyaminoacide/insuline glargine (200 U/mL)/insuline lispro (66 U/mL) à 25°C en dynamique (sous agitation à 250 rpm) et contre-exemples. (*Apparition d'un précipité quand le pH de la solution est ajusté à pH 7). Co-polyaminoacide Stabilité à 25°C en dynamique [en jours AB6 AB21 13 AB17 14 AB18 BB] BBS BB7 8 BB10 8 BB11 15 >41 29 15 17 14 8 5 4 BB15 BB16 CEB2 CEB3 Composition CB3 CB3a CB3c CB3r CB3i CB3f CB3g CB3j CB3m CB3n CB3o CB3p CB3s CB3t 3052072 114 Exemple E2 : Stabilité accélérée à 30°C en statique [000769] 5 vials de 3 mL remplis avec 1 mL de composition sont placés verticalement dans une étuve maintenue à 30°C. Les vials sont inspectés visuellement de manière quotidienne afin de détecter l'apparition de particules visibles ou d'une turbidité. Cette 5 inspection est réalisée selon les recommandations de la Pharmacoppée Européenne (EP 2.9.20) : les vials sont soumis à un éclairage d'au moins 2000 Lux et sont observés face à un fond blanc et un fond noir. Le nombre de semaines de stabilité correspond à la durée à partir de laquelle au moins la moitié des vials présentent des particules visibles ou sont turbides. 10 [000770] Ces résultats sont en accord avec la pharmacopée US (USP ). [000771] Les résultats de stabilité accélérée (obtenus avec différentes compositions sont présentés dans les tableaux 8a et 8b ci-après. BB7 Stabilité à 30°C en statique (en semaine * CB5f BB14 Tableau 8a : résultats des stabilités des compositions co-polyaminoacide/insuline glargine (225 15 U/mL)/insuline lispro (75 Ul/mL) à 30°C en statique. (*Apparition d'un précipité quand le pH de la solution est ajusté à pH 7). Composition Co-polyaminoacide >12 CB3o BB15 Tableau 8b : résultats des stabilités des compositions co-polyaminoacide/insuline glargine (200 U/mL)/insuline lispro (66 Ul/mL) à 30°C en statique. (*Apparition d'un précipité quand le pH de la 20 solution est ajusté à pH 7). >9 CB3 CB3j >9 Stabilité à 30°C en statique en semaine) Composition CB5 Co-polyaminoacide CA3 * Composition Co-polyaminoacide Jaune après 2.5 semaines Tableau 8c: résultats des stabilités des compositions co-polyaminoacide/insuline glargine (200 U/mL) à 30°C en statique. (*Apparition d'un précipité quand le pH de la solution est ajusté à pH 7). BB15 CEB4 CA3f CA3k Stabilité à 30°C en statique (en semaine) >7 3052072 V. Exemples de compositions selon l'invention Exemple H1 : Préparation de compositions de co-polyaminoacides et d'insuline glargine à 200 U/mL et à pH 7,1 5 [000772] De manière analogue à l'exemple CA3 des compositions d'insuline glargine à 150 U/mL et de co-polyaminoacides sont préparées. Elles sont présentées dans le tableau 9a suivant : Tableau 9a : Compositions de co-polyaminoacides et d'insuline glargine à 200 U/mL et 10 à pH 7,1. Exemple H2 : Préparation de compositions de co-polyaminoacides et d'insuline glargine à 150 U/mL et à pH 7,1 [000773] De manière analogue à l'exemple H1, des compositions d'insuline glargine 15 à 150 U/rriL et de co-polyaminoacides sont préparées. Elles sont présentées dans le tableau 9b suivant : CA3 CA3c 200 CA3d 200 BB11 6 200 CA3g Composition Insuline glargine Co-polyaminoacide Concentration en co- (U/mL) | polyaminoacide CA3e CA3f 10 200 200 BB14 BB15 6 AB18 BB5 CA3b 200 200 BB16 3052072 116 Composition Insuline Co-polyaminoacide Concentration en co- glargine polyaminoacide (mg/mL) (U/mL) H2b 150 AB18 4,S H2c H3d 150 BB5 6,75 150 BB11 4/5 H2e 150 BB14 7,5 H2f 150 BB15 4.S H2q 150 |B816 4,5 Tableau 9b : Compositions co-polyaminoacide /insuline glargine (150 U/mL Exemple H3 : Préparation de compositions de co-polyaminoacide et d'insuline glargine 5 à 300 U/mL et à pH 7,1 [000774] De manière analogue à l'exemple Hl, des compositions d'insuline glargine à 300 U/mL et de co-polyaminoacides sont préparées. Elles sont présentées dans le tableau 10. AB18 BB5 BB11 BB14 BB15 BB16 Composition H3b H3c H3d 1-13e H3f H3 Insuline glargine 300 300 '00 300 300 Concentration polyaminoacide (mg/mL) 9 13,5 9 Co-polyaminoacide en CO- 10 Tableau 10 : Compositions co-polyaminoacide insuline glargine (300 U/mL) Exemple H4 : Préparation de compositions de co-polyaminoacide, d'insuline glargine à 200 U/mL et d'insuline lispro à 66 U/mL à pH 7,1 [000775] Des exemples des compositions d'insuline glargine à 200 U/mL, d'insuline 15 lispro à 66 U/mL et de co-polyaminoacides sont décrits dans l'exemple CB3 et présentées dans le tableau 4a. 3052072 117 Exemple H5 : Préparation de compositions de co-polyaminoacide, d'insuline glargine à 150 U/mL, d'insuline lispro à 50U/mL à pH 7,1 [000776] De manière analogue à l'exemple H4, des compositions d'insuline glargine à 150 U/nnL, d'insuline lispro à 50 U/mL et de co-polyaminoacide sont préparées. Elles 5 sont présentées dans le tableau 11 : Composition Insuline Insuline Co-polyaminoacide Concentration en co- glargine lispro polyaminoacide (mg/mL) (U/mL) (U/mL) H5a 150 50 AB6 5,25 H5c 150 50 AB21 4,5 H5f 150 50 BB3 5,25 H5g 150 50 BB5 6,75 H5i 150 50 A818 4,5 H5j 150 50 50 BB7 5,25 8810 4,5 H5m 150 H5n 150 50 BB11 4,5 H5o 150 50 BB15 4,5 50 H5p 150 BB16 4,5 H5r 150 50 AB17 4,5 Tableau 11 : Compositions co-polyaminoacide U/mL). insuline glargine (150 U/mL) / insuline lispro (50 15 Composition Insuline Insuline Co-polyaminoacide Concentration en co- glargine lispro polyaminoacide (mg/mL) (U/mL) (U/mL) H6a 300 100 AB6 10,5 300 100 AB21 H6c 9 H65f 300 100 BB3 10,5 H6g 300 100 BB5 13,5 H6i 300 100 AB18 9 H6j 300 100 BB7 10,5 H6m 300 100 8B10 9 H6n 300 100 BB11 9 300 H6o 100 BB15 9 H6p 300 100 BB16 9 116r 300 100 AB17 9 H6s 300 100 CEB2 9 H6t 300 100 CEB3 10,5 Tableau 12 : Compositions co-polyaminoacide/insuline glargine (300 U/mL) / insuline lispro (100 U/mL). Exemple H6 : Préparation de compositions de co-polyaminoacide et d'insuline glargine 10 à 300 U/mL, d'insuline lispro à 100 U/mL et à pH 7,1 [000777] De manière analogue à l'exemple H4, des compositions d'insuline glargine à 300 U/mL, d'insuline lispro à 100 U/mL et de co-polyaminoacide sont préparées. Elles sont pr ésentée', dans le tableau 12. 3052072 118 Exemple H7 : Préparation de compositions de co-polyanninoacide et de dulaglutide à 1 mg/mL à pH 7,1 [000778] De manière analogue à l'exemple DB3, des compositions d'insuline glargine à 200 U/mL, de dulaglutide à 1 mg/mi et de co-polyaminoacide sont préparées. Elles 5 sont présentées dans le tableau 12a. Composition Co- Insuline Dulaglutide Co-polyaminoacide polyaminoaci glargine (mg/mL) (mg/mL) de (U/mL) DB1 50 0,25 DB2 50 0,25 DB3a AB6 200 1 DB3b AB17 200 1 6 DB3c BB7 200 1 7 DB3d BB5 200 1 9 200 1 6 9 DB3e BB10 DB3f BB14 BB15 200 1 200 1 6 Tableau 12a : Compositions de co-polyaminoacide et de dulaglutide à 1 mg/mL à pH 7,1 Exemple H8 : Préparation de compositions de co-polyaminoacide, d'insuline glargine à 150 U/mL, et de dulaglutide à 0,75 mg/mi à pH 7,1 10 [000779] De manière analogue à l'exemple H7, des compositions d'insuline glargine à 150 U/mL, de dulaglutide à 0,75 mg/mi et de co-polyaminoacide sont préparées. Elles sont présentées dans le tableau 13. Composi Co- Insuline Dulaglutide Co-polyaminoacide (mg/mL) tion polyaminoacid glargine (mg/mL) (U/mL) H8a AB6 150 0 75 5 25 H8b AB17 | 150 0,75 4,5 H8c BB7 150 D'75 5.25 H8d BB5 150 O.75 6,75 H8e 8810 150 0.75 4,5 H8f BB14 150 0,75 6,75 H8o BB15 | 150 0,75 4,5 Tableau 13 Compositions co-polyaminoacide /insuline glargine (150 U/mL) / dulaglutide (0,75 mg/mi). 3052072 119 Exemple H9 : Préparation de compositions de co-polyaminoacide, d'insuline glargine à 300 U/mL, et de dulaglutide à 1,5 mg/mL à pH 7,1 [000780] De manière analogue à l'exemple H7, des compositions d'insuline glargine à 300 U/mL, de dulaglutide à 1,5 mg/m1 et de co-polyaminoacide sont préparées. Elles 5 sont présentées dans le tableau 14. Composi Co- Insuline Dulaglutide mg/ml) Co-polyaminoacide tion polyaminoac glargine (mg/mL) ide (11/mL) H8a AB6 300 1.5 10,5 H8b AB17 300 1,5 9 H8c 887 300 1,5 10,5 H8d BB5 300 1,5 13.5 H8e BB10 300 1,5 9 H8f 8814 300 1,5 13,5 1,5 g H8g BB15 300 Tableau 14: Compositions co-polyaminoacide /insuline glargine (300 U/mL) dulaglutide (1,5mg/m1). 10 Partie F : Etudes de pharmacocinétique et pharmacodynamie chez le chien Exemple F1 : Etude de pharmacocinétique et pharmacodynamie chez le chien de la composition co-polyaminoacide BB7 (7 mg/mL) / insuline glargine (200 U/mL) / insuline lispro (66 11/mL) 15 [000781] Des études chez le chien ont été conduites dans l'objectif d'évaluer la pharmacocinétique et la pharmacodynamie d'une composition de solution d'insuline. [000782] Les profils pharmacocinétiques et les effets hypoglycémiants de cette composition ont été comparés par rapport à ceux d'injections simultanées, mais séparées, d'insuline glargine (Lantue) (pH 4) (exemple C4) et d'une insuline prandiale 20 lispro (Humalogn (exemple C1) dans les proportions 75% d'insuline glargine (Lantus®) / 25% d'insuline lispro (Humalog®). [000783] Dix animaux qui ont été mis à jeun depuis 18 heures environ ont été injectés dans le cou au-dessus de la région interscapulaire à la dose de 0,8 U/kg à l'aide d'un stylo Junior Star. Dans l'heure précédant la ou les injections d'insuline, 2 25 prélèvements sanguins sont réalisés afin de déterminer le niveau basal de glucose et d'insuline. Des prélèvements sanguins sont ensuite réalisés pendant les 20h suivant la 3052072 ou les injections. La glycémie est déterminée au moyen d'un glucomètre. Les niveaux d'insuline sont déterminés par un test ELISA. [000784] Les courbes pharmacocinétiques moyennes de l'insuline exprimées en déviation du niveau basal sont présentées dans la Figure 1. 5 [000785] Les courbes de pharmacodynamie moyenne du glucose exprimée en pourcents du niveau basal sont représentées dans la Figure 2. [000786] Les résultats de pharmacocinétique obtenus avec les administrations 10 simultanées d'insuline lispro (Humalog®) et d'insuline glargine (Lantusn en comparaison avec la composition décrite dans l'exemple CB3j sont présentés sur la figure 1. Les profils sont biphasiques. La première phase correspond à un pic d'insuline qui apparait très rapidement après l'injection, dans les 30 minutes suivant l'injection. Le pic s'étend jusqu'à environ 3h après l'administration. La seconde phase est observée, 15 elle débute environ 3h après l'administration et se termine à la fin du profil et correspond à une absorption prolongée d'insuline conduisant à un profil plat. Cette seconde phase est la partie basale du profil d'insuline quand la première phase correspond à sa partie prandiale. Ces deux phases sont caractéristiques d'une injection simultanée d'insuline prandiale et d'insuline basale et sont bien reproduites avec la 20 composition de l'invention présentée dans l'exemple CB3j. [000787] Les résultats de pharmacodynamie obtenus avec les administrations simultanées d'insuline lispro (Humalog®) et d'insuline glargine (Lantusn en comparaison avec la composition décrite dans l'exemple CB3j sont présentés sur la 25 figure 2. L'activité hypoglycémiante de la composition décrite dans l'exemple CB3j est biphasique. La première phase rapide est définie par une décroissance marquée de la glycémie durant environ 60 minutes caractéristique de l'effet rapide de l'insuline lispro. Cette première phase est également visible sur la double injection Lantus® / Humalog®, indiquant que la composition selon l'invention ne modifie pas le caractère rapide 30 d'Humalog®. Après environ 60 minutes, la glycémie remonte jusqu'à 3 heures avant une seconde phase plus lente, caractérisée par une activité hypoglycémiante moins marquée et prolongée jusqu'à 18-20 heures post-injection. Cette seconde phase basale est caractéristique de l'effet basal de l'insuline glargine, également visible sur la double injection, indiquant qu'il est bien conservé avec la composition selon l'invention décrite 35 dans l'exemple CB3j. 3052072 121 Exemple F2 : Etude de pharmacocinétique et pharmacodynamie chez le chien de la composition co-polyaminoacide BB15 (6 mg/mL) / insuline glargine (200 U/mL) / insuline lispro (66 U/mL) [000788] Les profils pharmacocinétiques et les effets hypoglycémiants de cette 5 composition ont été comparés par rapport à ceux d'injections simultanées, mais séparées, d'insuline glargine (Lantus®) (pH 4) (exemple C4) et d'une insuline prandiale lispro (Humalog®) (exemple C1) dans les proportions 75% d'insuline glargine (Lantus®)/ 25% d'insuline lispro (Hunnalog8). [000789] Dix animaux qui ont été mis à jeun depuis 18 heures environ ont été 10 injectés dans le cou au-dessus de la région interscapulaire à la dose de 0,8 U/kg à l'aide d'un stylo Junior Star. Dans l'heure précédant la ou les injections d'insuline, 2 prélèvements sanguins sont réalisés afin de déterminer le niveau basal de glucose et d'insuline. Des prélèvements sanguins sont ensuite réalisés pendant les 20h suivant la ou les injections. La glycémie est déterminée au moyen d'un glucomètre. Les niveaux 15 d'insuline sont déterminés par un test ELISA. [000790] Les courbes pharmacocinétiques moyennes de l'insuline exprimées en déviation du niveau basal sont présentées dans la Figure 3. [000791] Les courbes de pharmacodynamie moyenne du glucose exprimée en pourcents du niveau basal sont représentées dans la Figure 4. 20 [000792] Les résultats de pharmacocinétique obtenus avec les administrations simultanées d'insuline lispro (Humalogo) et d'insuline glargine (Lantuso) en comparaison avec la composition décrite dans l'exemple CB3o sont présentés sur la figure 3. Les profils sont biphasiques. La première phase correspond à un pic d'insuline 25 qui apparait très rapidement après l'injection, dans les 30 minutes suivant l'injection. Le pic s'étend jusqu'à environ 3h après l'administration. La seconde phase est observée, elle débute environ 3h après l'administration se termine à la fin du profil et correspond à une absorption prolongée d'insuline conduisant à un profil plat. Cette seconde phase est la partie basale du profil d'insuline quand la première phase correspond à sa partie 30 prandiale. Ces deux phases sont caractéristiques d'une injection simultanée d'insuline prandiale et d'insuline basale et sont bien reproduites avec la composition de l'invention présentée dans l'exemple CB3o. [000793] Les résultats de pharmacodynamie obtenus avec les administrations 35 simultanées d'insuline lispro (Humalog®) et d'insuline glargine (Lantusn en comparaison avec la composition décrite dans l'exemple CB3o sont présentés sur la figure 4. L'activité hypoglycémiante de la composition décrite dans l'exemple CB3o est biphasique. La première phase rapide est définie par une décroissance marquée de la 3052072 122 glycémie durant environ 60 minutes caractéristique de l'effet rapide de l'insuline lispro. Cette première phase est également visible sur la double injection insuline glargine (Lantus®) / insuline lispro (Humalogn, indiquant que la composition selon l'invention ne modifie pas le caractère rapide de l'insuline lispro (Humalogn. Après environ 60 5 minutes, la glycémie remonte jusqu'à 3 heures avant une seconde phase plus lente, caractérisée par une activité hypoglycémiante moins marquée et prolongée jusqu'à 18- 20 heures post-injection. Cette seconde phase basale est caractéristique de l'effet basal de l'insuline glargine, également visible sur la double injection, indiquant qu'il est bien conservé avec la composition selon l'invention décrite dans l'exemple CB3o. 10 REVENDICATIONS1. Composition sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6, 0 et 8,0, comprenant au moins : a) une insuline basale dont le point isoélectrique pI est compris entre 5,8 et 8,5 ; b) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy, ledit co-polyaminoacide étant constitué d'unités glutamiques ou aspartiques et lesdits radicaux hydrophobes Hy étant de formule I suivante : dans laquelle *--(GpR GpA) (GpC) a p Formule I GpR est un radical de formules II ou II' : 0 H HH *-N-R-N-* ou *-1-R N *Iii; - GpA est un radical de formules III ou III' : 0 HN--* O HN-* in ou *-11--A N *III'; Hy comprend plus de 30 atomes de carbone, les * indiquent les sites de rattachement des différents groupes liés par des fonctions amides ; - a est un entier égal à 0 ou à 1 ; - b est un entier égal à 0 ou à 1; - GpC est un radical de formule IV : 0 H IV; 3052072 124 p est un entier égal à 1 ou à 2 et o si p est égal à 1 alors a est égal à 0 ou à 1 et GpA est un radical de formule III' et, o si p est égal à 2 alors a est égal à 1, et GpA est un radical de formule 5 III; - c est un entier égal à 0 ou à 1, et si c est égal à 0 alors d est égal à 1 ou à 2; - d est un entier égal à 0, à 1 ou à 2; - r est un entier égal à 0 ou à 1, et 10 o si r est égal à 0 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminale du copolyaminoacide, formant ainsi une fonction amide, et o si r est égal à 1 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- 15 polyaminoacide : ^ via une liaison covalente entre un atome d'azote du radical hydrophobe et un carbonyl du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide ou via une liaison covalente entre un carbonyl du radical 20 hydrophobe et un atome d'azote en position N terminal du co- polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide; R est un radical choisi dans le groupe constitué par : o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant si GpR est un radical de formule II de 2 à 12 atomes de carbone ou si GpR est un radical 25 de formule II' de 1 à 11 atomes de carbone ; o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant si GpR est un radical de formule II de 2 à 11 atomes de carbone ou si GpR est un radical de formule II' de 1 à 11 atomes de carbone, ledit radical alkyle portant une ou plusieurs fonctions -CONH2, et o un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ; - A est un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 6 atomes de carbone ; - B est un radical alkyle linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant un noyau aromatique, comprenant de 1 à 9 atomes de carbone ; Cx est un radical alkyl monovalent linéaire ou ramifié, dans lequel x indique le nombre d'atomes de carbone et : o si p est égal à 1, x est compris entre 11 à 25 (11 x 5. 25), 3052072 125 o si p est égal à 2, x est compris entre 9 et 15 (9 x 5 15), le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques étant compris entre entre 0 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que lesdits radicaux hydrophobes sont choisis parmi les radicaux hydrophobes de formule I dans laquelle p = 1, représentée par la formule V suivante : 15 GpA)--GpC a formule V *---(GpR GpR, GpA, GpC, r et a ont les définitions données précédemment. 20 Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que lesdits radicaux hydrophobes sont choisis parmi les radicaux hydrophobes de formule I dans laquelle a = 1 et p = 2, représentée par la formule VI suivante : 25 *-(-GpR GpA GpC) 2 Formule VI dans laquelle GpR, GpA, GpC, r et a ont les définitions données précédemment. 30 4. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule VII suivante : 3052072 126 formule VII dans laquelle, - D représente, indépendamment, soit un groupe -CH2- (unité aspartique) 5 soit un groupe -CH2-CH2- (unité glutamique), - Hy est un radical hydrophobe choisi parmi les radicaux hydrophobes de formules I, V ou VI, dans lesquelles r = 1 et GpR est un radical de Formule II, - R1 est un radical hydrophobe choisi parmi les radicaux hydrophobes de 10 formules I, V ou VI dans lesquelles r = 0 ou r = 1 et GpR est un radical de Formule II', ou un radical choisi dans le groupe constitué par un H, un groupe acyle linéaire en C2 à C10, un groupe acyle ramifié en C3 à C10, un benzyle, une unité « acide aminé » terminale et un pyroglutamate, 15 - R2 est un radical hydrophobe choisi parmi les radicaux hydrophobes de formules I, V ou VI dans lesquelles r = 1 et GpR est un radical de Formule II, ou un radical -NR'R", R' et R" identiques ou différents étant choisis dans le groupe constitué par H, les alkyles linéaires ou ramifiés ou cycliques en C2 à C10, le benzyle et lesdits R' et R" alkyles pouvant 20 former ensemble un ou des cycles carbonés saturés, insaturés et/ou aromatiques et/ou pouvant comporter des hétéroatomes, choisis dans le groupe constitué par O, N et S, - X représente une entité cationique choisie dans le groupe comprenant les cations alcalins ; 25 - n + m représente le degré de polymérisation DP du co-polyaminoacide, c'est-à-dire le nombre moyen d'unités monomériques par chaîne de copolyaminoacide et 5 n + m 5 250 ; 3052072 127 5. Composition selon la revendication précédente, caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi 5 parmi les co-polyaminoacides de formules VII, dans laquelle R1 = R'1 et R2 = R'2, de formule VIIa suivante : Hy Formule VIIa dans laquelle, m, n, X, D et Hy ont les définitions données précédemment, 10 R'1 est un radical choisi dans le groupe constitué par un H, un groupe acyle linéaire en C2 à C10, un groupe acyle ramifié en C3 à C10, un benzyle, une unité « acide aminé » terminale et un pyroglutamate, R'2 est un radical -NR'R", R' et R" identiques ou différents étant choisis dans le groupe constitué par H, les alkyles linéaires ou ramifiés ou cycliques en C2 à 15 C10, le benzyle et lesdits R' et R" alkyles pouvant former ensemble un ou des cycles carbonés saturés, insaturés et/ou aromatiques et/ou pouvant comporter des hétéroatomes, choisis dans le groupe constitué par O, N et S. 6. Composition selon la revendication 4, caractérisée en ce que le co- 20 polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule VII dans laquelle n = 0 de formule VIIb suivante : 3052072 128 N H 0 Formule VIIb dans laquelle m, X, D, R1 et R2 ont les définitions données précédemment et au moins R1 ou R2 est un radical hydrophobe de formule I, V ou VI. 5 7. Composition selon la revendication 6 caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule VII dans laquelle n = 0 de formule VIIb et R1 ou R2 est un radical hydrophobe de formule I, V ou VI. 10 8. Composition selon la revendication 6, caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules VIIb dans laquelle R2 est un radical hydrophobe de formule I, V ou VI dans lesquelles r = 1 et GpR est de Formule II. 15 9. Composition selon l'une quelconque des revendications 4 à 8, caractérisé en ce que R1 est un radical choisi dans le groupe constitué par un groupe acyle linéaire en C2 à C10, un groupe acyle ramifié en C3 à C10, un benzyle, une unité « acide aminé » terminale et un pyroglutamate. 20 10. Composition selon la revendication précédente, caractérisé en ce que R1 est un radical choisi dans le groupe constitué par un groupe acyle linéaire en C2 à C10 ou un groupe acyle ramifié en C3 à C10. 11. Composition selon l'une quelconque des revendications 4 à 10, caractérisée en 25 ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules VII, VIIa ou VIIb dans lesquels le co-polyaminoacide est choisi parmi les co-polyaminoacides dans lesquels le groupe D est un groupe -CH2- (unité aspartique). 3052072 129 12. Composition selon l'une quelconque des revendications 4 à 10, caractérisée en ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules VII, VIIa ou VIIb dans lesquels le co-polyaminoacide est choisi parmi les co-polyaminoacides dans 5 lesquels le groupe D est un groupe -CH2-CH2- (unité glutamique). 13. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 est l'insuline glargine 10 14. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend entre 40 et 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5. 15 15. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 60 mg/mL. 16. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, 20 caractérisée en ce que la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 40 mg/mL. 17. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes , caractérisée en ce que la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges 25 carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 20 mg/mL. 18. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes , caractérisée en ce que la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 10 mg/mL. 30 19. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre une insuline prandiale. 20. Composition selon la revendication précédente, caractérisée en ce que l'insuline 35 prandiale est de l'insuline humaine. 3052072 130 21. Composition selon l'une quelconque des revendications 19 et 20, caractérisée en ce que au total elle comprend entre 40 et 500 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5. 22. Composition selon l'une quelconque des revendications 19 à 21, caractérisée en ce que les proportions entre l'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et l'insuline prandiale sont en pourcentage de 25/75, 30/70, 40/60, 50/50, 60/40, 70/30, 80/20 ou 90/10. 23. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre une hormone gastrointestinale. 24. Composition selon la revendication précédente, caractérisée en ce que 15 l'hormone gastrointestinale est choisie dans le groupe constitué par l'exenatide, le liraglutide, le lixisenatide, l'albiglutide et le dulaglutide, leurs analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. 25. Composition selon l'une quelconque des revendications 23 à 24, caractérisée en 20 ce que l'hormone gastrointestlnale est le dulaglutide ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. 26. Composition selon l'une quelconque des revendications 23 à 24, caractérisée en ce que l'hormone gastrointestinale est l'exenatide ses analogues ou dérivés et leurs 25 sels pharmaceutiquement acceptables. 27. Composition selon l'une quelconque des revendications 23 à 24, caractérisée en ce que l'hormone gastrointestinale est le liraglutide ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. 30 28. Composition selon l'une quelconque des revendications 23 à 24, caractérisée en ce que l'hormone gastrointestinale est le lixisenatide ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. 5 10 3052072 131 29. Composition selon l'une quelconque des revendications 23 à 28, caractérisée en ce que la concentration en hormone gastrointestinale est comprise dans un intervalle de 0,01 à 10 mg/mL. 5 30. Composition selon l'une quelconque des revendications 24 ou 26, caractérisée en ce qu'elle comprend entre 40 U/mL et 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et de 0,05 à 0,5 mg/mL d'exenatide. 31. Composition selon l'une quelconque des revendications 24 ou 27 caractérisée 10 en ce qu'elle comprend entre 40 U/mL et 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et de 1 à 10 mg/mL de liraglutide. 32. Composition selon l'une quelconque des revendications 24 ou 28, caractérisée en ce qu'elle comprend entre 40 U/mL et 500 U/mL d'insuline basale dont le point 15 isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide. 33. Formulation unidose à pH compris entre 7 et 7,8 comprenant une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 18 et une insuline prandiale. 20 34. Formulation unidose à pH compris entre 7 et 7,8 comprenant une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 18 et une hormone gastrointestinale. 35. Formulation unidose à pH compris entre 7 et 7,8 comprenant une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 18, une insuline prandiale et une 25 hormone gastrointestinale.