FR 3056225 A1 20180323 FR 1658863 A 20160921 INRIA 195.FRD BIORÉACTEUR POUR LA SÉLECTION DE MICROALGUES La présente invention se rapporte à un bioréacteur capable d'induire un stress cellulaire sur des cellules de microalgues au moyen de variations de température. L'invention se rapporte également à un procédé de sélection de microalgues basée sur un stress cellulaire induit par des variations de température. Il existe des micro-organismes photosynthétiques procaryotes et eucaryotes, regroupés communément sous le terme de microalgues. Les micro-organismes photosynthétiques procaryotes sont représentés par les cyanobactéries (parfois appelées « algues bleu-vert »). Les micro-organismes photosynthétiques eucaryotes sont représentés par une multitude de classes parmi lesquelles on peut citer les chlorophycées, les diatomées, les chrysophycées, les coccolithophycées, les euglénophycées et les rhodopycées. D'une manière générale, la taille d'une cellule de microalgue est comprise entre 1 um et 100 um. On estime aujourd'hui qu'il existe plus d'un million d'espèces de microalgues dont quelques dizaines de milliers d'espèces sont référencées. Les microalgues sont ubiquistes et on les trouve aussi bien dans les eaux douces et que dans les eaux saumâtres et marines. La production de microalgues est un secteur qui prend de plus en plus d'ampleur. En effet, les microalgues synthétisent de nombreux produits de natures différentes parmi lesquels on peut citer les protéines, les antioxydants, les pigments, les acides gras polyinsaturés à longues chaînes DHA (acide docosahexaénoïque) et EPA (acide eicosapentaénoïque). Ainsi, les microalgues trouvent une application dans plusieurs domaines technologiques et notamment dans l'industrie cosmétique, l'industrie pharmaceutique, l'aquaculture, l'industrie des alicaments ou des compléments alimentaires. De plus, les microalgues sont utilisées dans la production de bioénergie. Les microalgues ont une capacité à capter l'énergie lumineuse pour fixer et métaboliser le carbone inorganique à partir du dioxyde de carbone (CO2) dans des molécules énergétiques. Le couplage des microalgues avec le CO2 et le fait que les microalgues sont souvent riches en sucres ou en huiles ont pour conséquence que les microalgues présentent un grand intérêt dans la production de biocarburants. Ce couplage est aussi à l'origine de capacités épuratoires que présentent les microalgues. 3056225 2 Les microalgues sont des espèces photosynthétiques. Les cellules de microalgues ont besoin de la lumière pour proliférer. Les microalgues peuvent être cultivées en utilisant de la lumière naturelle (lumière solaire) ou de la lumière artificielle. Il existe des systèmes de culture ouverts de type bassin de culture (aussi appelé bassin « raceway») et des systèmes de culture fermés 5 comme les bioréacteurs d'alimentation par batch, les bioréacteurs d'alimentation par fed- batch ou les bioréacteurs d'alimentation continu. D'une manière générale, tous les systèmes de culture présentent une cuve destinée à recevoir un milieu de culture qui comprend des nutriments. Les microalgues sont dispersées dans ce milieu de culture et reçoivent de la lumière à une température fixée ou à une température 10 variable selon les conditions climatiques naturelles. Dans l'idéal, la température est généralement choisie proche de la température de l'environnement naturel des microalgues. Ceci permet un bon taux de croissance des cellules. Mais ceci n'est parfois que difficilement réalisable ou coûteux. Dans les systèmes de cultures pour microalgues, la lumière joue un rôle important pour la 15 croissance. D'une manière simplifiée, plus les microalgues absorbent de la lumière, plus leur croissance est favorisée. Toutefois, dans les systèmes de l'état de la technique, la lumière est majoritairement absorbée par les cellules proches de la source lumineuse. Lorsque la densité de microalgues est élevée, une grande partie de la lumière ne parvient pas à pénétrer en profondeur de la cuve. En conséquence, les microalgues en profondeur des cuves se 20 retrouvent dans l'obscurité et ne peuvent pas proliférer correctement. Les systèmes de cultures présentent donc un problème de surexposition lumineuse des cellules proches de la source lumineuse et un problème de sous-exposition des cellules situées en profondeur du milieu de culture. Ce gradient de lumière au sein des systèmes de culture limite la production de microalgues. Ainsi, la source lumineuse et l'intensité lumineuse est un facteur limitant pour 25 les procédés de production. L'état de la technique propose une approche qui consiste à modifier génétiquement les microalgues. Il s'agit de réduire la taille ou le nombre des antennes collectrices (molécules de chlorophylle) et/ou de modifier les ratios entre les différents pigments (notamment chlorophylle a, chlorophylle b, chlorophylle c, caroténoïdes et autres pigments) des 30 microalgues pour les rendre plus transparentes. 3056225 3 Le document WO 2014/089533 divulgue des microalgues mutantes présentant des antennes collectrices réduites. Chaque cellule de microalgue capte une quantité moindre de lumière ce qui permet à la lumière de pénétrer en profondeur des cuves. Les cellules localisées dans les zones les plus éloignées de la source lumineuse sont donc moins ombragées. Toutefois, cette 5 approche requiert des méthodes complexes et coûteuses de génie génétique ou de mutation- sélection telles que la mutagenèse chimique ou le traitement par ultraviolet ou irradiation gamma. Par ailleurs, les systèmes de cultures ne comprennent qu'un seul type de mutant : il s'agit de monocultures de microalgues. Les monocultures sont moins robustes, notamment face à des conditions d'exploitation industrielle. 10 Les problèmes liés au gradient de lumière au sein des systèmes de culture restent des facteurs limitants dans les procédés de production, et tout particulièrement dans les systèmes tendant à maximiser la production en biomasse. Le besoin d'améliorer le rendement des systèmes de cultures persiste. L'état de la technique propose par ailleurs des systèmes de culture dans lesquelles des 15 microalgues sont spécifiquement sélectionnées pour augmenter le rendement de production. Le document WO 2013/012329 divulgue un procédé de sélection de microalgues présentant une capacité de stockage accrue en composants utiles pour la production de biocarburants. Une culture de différentes souches de microalgues est soumise à un stress nutritionnel. Seules les souches capables de stocker une forte concentration en nutriments survivent le stress. Les 20 souches sont ensuite récoltées et cultivées dans les systèmes de cultures décrits plus hauts. Toutefois, le nombre de souches pouvant survivre un stress nutritionnel est limité. De plus, le besoin de cultiver les microalgues dans un environnement simulant les températures d'un environnement naturel de microalgues requiert une adaptation d'une souche à une autre. Ceci est accompagné par un programme de chauffage/refroidissement qui a pour conséquence des 25 coûts élevés et des pertes d'énergies importantes. La présente invention vient améliorer la situation. À cet effet, l'invention vient introduire un bioréacteur comportant une cuve apte à être pilotée durant un temps de travail, ladite cuve étant destinée à recevoir un milieu de culture comprenant une culture cellulaire de micro-organismes photosynthétiques, une source de 30 lumière agencée pour émettre une lumière incidente d'une intensité lumineuse d'entrée 3056225 4 choisie en direction de la cuve, une sonde de température pour mesurer la température dudit milieu de culture dans la cuve, et un régulateur de température apte à augmenter et à baisser la température dudit milieu de culture dans la cuve. Le bioréacteur de l'invention comprend en outre une commande du régulateur de température agencée pour régler la température du 5 milieu de culture à une valeur de consigne basse durant un premier temps, et pour régler la température du milieu de culture à une valeur de consigne haute durant un deuxième temps, la succession desdits premier et deuxième temps permettant d'induire un stress cellulaire chez certains au moins desdits micro-organismes photosynthétiques durant le temps de travail. Dans un mode de réalisation, le bioréacteur comprend en outre un capteur de lumière disposé 10 en regard de la source de lumière, le capteur étant capable de mesurer une intensité lumineuse en sortie et de transmettre des données relatives à cette intensité au contrôleur pour calculer la concentration de la culture cellulaire et de piloter la cuve à ladite concentration de culture cellulaire choisie dans le milieu de culture durant le temps de travail. Dans un autre mode de réalisation le bioréacteur comprend en outre un contrôleur agencé 15 pour piloter la cuve à une concentration de culture cellulaire choisie (x,), de préférence à une concentration sensiblement inférieure ou égale à 1,0 g/L, dans le milieu de culture durant le temps de travail. Le stress induit sur les cellules a pour conséquence une sélection et/ou adaptation de la culture cellulaire de micro-organismes photosynthétiques (microalgues). Seules les souches 20 capables de survivre au stress sont récoltées après le procédé de l'invention (c'est-à-dire de préférence après plusieurs cycles successifs de temps de travail). Les souches récoltées présentent des propriétés précieuses (notamment des capacités de stockage accrues en lipides ou la synthèse accrue en lipides d'intérêt pour l'industrie). Dans un mode de réalisation, la commande est agencée pour déterminer la valeur de consigne 25 basse et ladite valeur de consigne haute et lesdits premier et deuxième temps de sorte à maintenir une valeur moyenne de consigne VM durant le temps de travail. Dans ce mode de réalisation, la valeur moyenne de consigne VM est égale à la somme du produit de ladite valeur de consigne basse et dudit premier temps et du produit de ladite valeur de consigne haute et dudit deuxième temps, divisée par le temps de travail : 30 VM = temps de travail (valeur de consigne basse x premier temps) + (valeur de consigne haute x deuxième temps) 3056225 5 Ceci permet d'induire un stress contrôlé sur la culture cellulaire au cours du temps de travail. L'adaptation et/ou sélection des microalgues est réalisée en évitant des dégradations cellulaires ou des morts cellulaires excessifs. Les cellules d'algues s'acclimatent à la température moyenne de consigne. Le temps de travail 5 peut être réitéré plusieurs fois. Chaque temps de travail peut redéfinir une valeur moyenne de consigne VM. En conséquence, durant chaque temps de travail les cellules d'algues peuvent s'acclimater à une nouvelle température moyenne de consigne. Selon un mode de réalisation, la valeur moyenne de consigne VM est augmentée au fur et à mesure de temps de travail successifs. Selon un autre mode de réalisation, la valeur moyenne de consigne VM est diminuée 10 au fur et à mesure de temps de travail successifs. Ainsi, les cellules d'algues s'acclimatent à une température moyenne respectivement de plus en plus élevée et de plus en plus basse. La valeur moyenne de consigne peut-être sensiblement égale à la température de croissance optimale (Tops) de la culture cellulaire de micro-organismes photosynthétiques. L'adaptation et/ou la sélection des microalgues est donc réalisée autour de température de croissance 15 optimale. Ce mode de réalisation tient compte de la sensibilité des microalgues et de leur environnement naturel d'évolution. Ceci évite davantage des dégradations cellulaires ou des morts cellulaires excessifs. L'intensité lumineuse d'entrée choisie /,' de la lumière incidente est de préférence fixe durant le temps de travail. Ceci évite des stress excessifs induits de par des variations de lumière. 20 L'intensité lumineuse d'entrée peut être comprise entre 100 et 2000 umol quanta rT1-2 s-1. Plus la concentration de la culture cellulaire dans le milieu de culture est élevée, plus l'intensité lumineuse réglée élevée. Ceci permet une bonne diffusion de la lumière au sein de la cuve du bioréacteur. Avantageusement, l'intensité lumineuse d'entrée est égal à environ 250 umol quanta rT1-2 s-1. Ceci permet un bon pilotage à une concentration de culture cellulaire choisie x, 25 dans le milieu de culture sensiblement égale à 1,0 g/L. Dans ces conditions, la diffusion de lumière au sein de la cuve et les conditions nutritionnelles du milieu de culture sont aisément contrôlable. Ceci a pour conséquence un bon taux de croissance et donc un bon rendement général. Dans un mode de réalisation, le temps de travail est égal à 24 heures, et dans lequel le premier 30 temps est égal à 8 heures et le deuxième temps est égal à 16 heures. Ce schéma d'application pour les valeurs de consignes basse et haute, permet une bonne adaptation des cellules de 3056225 6 microalgues. De préférence, le temps de travail est réitéré une fois achevé. Ceci permet d'engager un nouveau cycle de sélection. Après plusieurs itérations, la sélection et/ou adaptation des cellules est marquante. Selon un mode de réalisation, le temps de travail est réitéré 7 à 360 fois. 5 Dans un mode de réalisation préférentiel, la commande est agencée pour recevoir des données relatives au taux de croissance de la culture cellulaire de micro-organismes photosynthétiques après un ou plusieurs temps de travail. Après réception, la commande fixe la valeur de consigne basse et ladite valeur de consigne haute après ladite réception des données relatives au taux de croissance de ladite culture cellulaire de micro-organismes 10 photosynthétiques. Les données relatives au taux de croissance de la culture cellulaire indiquent si elle se trouve en situation de croissance ou non. Lorsque la croissance stagne le schéma de variation de température n'est pas modifié pour permettre aux cellules de microalgues de s'adapter aux conditions climatiques. Lorsque la culture cellulaire croît, le schéma de variation de température est rendu plus strict : l'écart entre les valeurs de 15 consignes basse et haute est augmenté. Seules les cellules capables de s'adapter aux nouvelles conditions climatiques plus extrêmes survivent. Ceci permet d'augmenter les critères de sélection et/ou adaptation et ainsi de récolter des souches finales présentant des propriétés améliorées. Les souches finales présentent un grand intérêt en industrie. L'invention vise également un procédé de sélection de micro-organismes photosynthétiques, 20 comprenant les étapes suivantes : 1. Mettre à disposition un bioréacteur tel que décrit ci-avant ; 2. Emplir la cuve d'un milieu de culture ; 3. Inoculer le milieu de culture avec une culture cellulaire constituée de microorganismes photosynthétiques ; 25 4. Piloter la cuve durant un temps de travail, de préférence à une concentration de culture cellulaire x, choisie dans le milieu de culture, et régler l'intensité lumineuse d'entrée (/,,,) à une valeur choisie ; 5. Régler la température du milieu de culture à une valeur de consigne basse (VcB) durant un premier temps, et à régler la température du milieu de culture à une valeur de 30 consigne haute (VcH) durant un deuxième temps, la succession desdits premier et deuxième temps permettant d'induire un stress cellulaire chez certains au moins desdits micro-organismes photosynthétiques durant le temps de travail ; 3056225 7 6. Récolter les micro-organismes photosynthétiques. La valeur de consigne basse et la valeur de consigne haute et les premier et deuxième temps sont réglés de manière à maintenir une valeur moyenne (VM) de consigne durant le temps de 5 travail, la valeur moyenne étant égale à la somme du produit de ladite valeur de consigne basse et dudit premier temps et du produit de ladite valeur de consigne haute et dudit deuxième temps, divisée par le temps de travail : VM = (valeur de consigne basse x premier temps) + (valeur de consigne haute x deuxième temps) temps de travail La valeur moyenne de consigne peut être sensiblement égale à la température de croissance 10 optimale (Tops) de la culture cellulaire de micro-organismes photosynthétiques. Dans un autre mode de réalisation, la valeur moyenne est choisie pour répondre à un critère de température biologiquement acceptable spécifique à une souche de microalgue choisie. En d'autres termes, la valeur moyenne de consigne peut prendre toute température biologiquement acceptable pour la/les souche(s) de microalgues présent(s) dans la cuve. 15 Le temps de travail peut être égal à 24 heures. Le premier temps est alors de préférence égal à 8 heures et le deuxième temps est alors égal à 16 heures. D'une manière générale, pour un temps de travail donné (prédéfini), le deuxième temps dure deux fois plus longtemps (le double) que le premier temps. L'étape 5. de régulation de température est avantageusement réitérée 2 à 360 fois. Ceci 20 augmente le critère de sélection et/ou adaptation. Le procédé de l'invention peut en outre comprendre les étapes suivantes : 4a. Prélever une partie du milieu de culture comportant au moins une partie desdits micro-organismes photosynthétiques ; et 4b. Compenser ladite partie du milieu de culture comportant au moins une partie 25 desdits micro-organismes photosynthétiques prélevée par du milieu de culture frais. De préférence, l'étape 5. de régulation de température est réitérée plus de 2 fois de manière à provoquer une dégradation cellulaire d'au moins une partie desdits micro-organismes photosynthétiques et ainsi sélectionner les micro-organismes photosynthétiques présentant des propriétés précieuses. 3056225 8 La récolte à l'étape 6. est de préférence réalisée lorsque le milieu de culture comporte une culture cellulaire de micro-organismes photosynthétiques constituée à plus de 75%, préférentiellement à plus de 90%, encore plus préférentiellement sensiblement à 100% de micro-organismes photosynthétiques présentant de propriétés précieuses. Dans un mode de 5 réalisation le procédé de l'invention comporte en outre les étapes suivantes : 7. Inoculer un milieu de culture frais avec les micro-organismes photosynthétiques modifiés récoltés à l'étape 6. dans un bioréacteur ; et 8. Piloter le bioréacteur de l'étape 7. pour une production de biomasse constituée desdits micro-organismes photosynthétiques modifiés. 10 Ceci permet de cultiver les souches récoltées en fin de l'étape 6. pour une exploitation industrielle. Selon un mode de réalisation préférentiel, l'étape 5. de régulation de température est réitérée 2 à 360 fois. Dans ce mode de réalisation, à chaque itération la commande reçoit des données relatives au taux de croissance de la culture cellulaire de micro-organismes photosynthétiques 15 après un ou plusieurs temps de travail. La commande fixe alors la valeur de consigne basse et ladite valeur de consigne haute après cette réception des données relatives au taux de croissance de la manière suivante : - Lorsque le taux de croissance est inférieur ou égal à zéro : la valeur de consigne basse et la valeur de consigne haute restent inchangées pour le 20 prochain temps de travail (ou cycle). - Lorsque le taux de croissance est supérieur à zéro : la valeur de consigne basse est revue à la baisse pour le prochain temps de travail, et la valeur de consigne haute est revue à la hausse pour le prochain temps de travail. 25 Selon un mode de réalisation de l'invention, les cellules de micro-organismes photosynthétiques sont des cellules de l'espèce Tisochrisis lutea, de préférence la souche Tisochrisis lutea CCAP 927/17. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront à la lecture de la description détaillée ci-après et sur les dessins annexés sur lesquels : 3056225 9 la figure 1 montre un schéma de production de biomasse de microalgues dans un bioréacteur selon l'invention ; la figure 2 montre un organigramme général d'un procédé de sélection selon l'invention ; 5 la figure 3 montre une évolution de la température durant un temps de travail du procédé de l'invention ; la figure 4 montre une évolution de la température durant un autre temps de travail du procédé de l'invention ; la figure 5 montre un diagramme comparatif de niches thermales entre une souche de 10 microalgues de l'état de la technique et deux souches de microalgues sélectionnées et/ou modifiées selon l'invention ; la figure 6 montre un diagramme comparatif du taux de croissance entre une souche de microalgues de l'état de la technique et deux souches de microalgues sélectionnées et/ou modifiées selon l'invention ; 15 la figure 7 montre un diagramme comparatif de températures de croissances et de niches thermales entre une souche de microalgues de l'état de la technique et deux souches de microalgues sélectionnées et/ou modifiées selon l'invention ; et la figure 8 montre un diagramme compratif du taux total de lipides présents dans les souches obtenues selon l'invention et de souches de l'état de la technique. 20 Les dessins et la description ci-après contiennent, pour l'essentiel, des éléments de caractère certain. Ils font partie intégrante de la description, et pourront donc non seulement servir à mieux faire comprendre la présente invention, mais aussi contribuer à sa définition, le cas échéant. Pour une bonne production de microalgues (ou biomasse de microalgues) il convient de les 25 cultiver dans un milieu de culture riche en nutriments (azote, phosphore, souffre, oligo- éléments, vitamines) à des valeurs de température et de pH optimales pour les microalgues, et d'apporter suffisamment de lumière. La présence des nutriments est nécessaire pour permettre aux microalgues de convertir l'énergie lumineuse en métabolisant le CO2. Cette conversion a pour conséquence la production d'oxygène et l'augmentation en biomasse par la 30 prolifération des microalgues (multiplication par division cellulaire). Après un ou plusieurs temps de travail, une partie du milieu de culture comportant des microalgues est prélevé de la cuve, et du milieu de culture frais est versé dans la cuve. En effet, après un ou plusieurs temps 3056225 10 de travail les nutriments du milieu de culture sont épuisés et les microalgues peuvent sécréter/produire des composants toxiques. Il convient alors d'éliminer une partie du milieu de culture avec une partie des microalgues et de remplacer cette partie par du milieu de culture frais. Classiquement, le milieu de culture est renouvelé proportionnellement par 5 rapport au taux de croissance des cellules de microalgues (ici de préférence par un coefficient de proportionnalité égal à 1). Dans un mode de réalisation, le procédé de l'invention prévoit un taux de renouvellement moyen du milieu de culture d'environ 10% sur l'ensemble du/des temps de travail. Classiquement on utilise une source de lumière capable d'émettre une lumière à une longueur 10 d'onde qui est fortement absorbée par les microalgues, afin d'obtenir un taux de croissance élevé. Les publications Light requirements in microalgal photobioreactors: an overview of biophotonic aspects - Carvalho et al., Appl Microbiology and Biotechnology, 2011, vol. 89, no. 5: 1275-1288 , Light emitting diodes (LEDs) applied to microalgal production - Schulze et al., Trends in 15 Biotechnology, 2014, vol. 32, no. 8: 422-430 et Optimizing conditions for the continuous culture of Isochrysis affinis galbana relevant to commercial hatcheries - Marchetti, Bourgaran & Dean, Aquaculture, 2012, 326-329, 106-105 décrivent l'utilisation de la lumière dans les systèmes de culture des microalgues ou les conditions de température et de pH pour obtenir une bonne croissance cellulaire en fonction des microalgues. 20 La figure 1 montre un schéma de production de biomasse de microalgues dans un bioréacteur de l'invention fonctionnant en alimentation continue. Les bioréacteurs d'alimentation en continu ont l'avantage de présenter une entrée et une sortie de milieu de culture, associées à un contrôleur permettant de piloter la cuve en continue à une concentration choisie de microalgues dans le milieu de culture durant un temps de travail. 25 Le bioréacteur comprend une cuve 100 apte à recevoir un milieu de culture comportant des microalgues. Les microalgues sont dispersées dans le milieu de culture ou sous forme de biofilm. Les microalgues sont constituées de cellules C de micro-organismes photosynthétiques. Le bioréacteur comprend une entrée 102 et une sortie 104 respectivement associées à un dispositif de régulation de débit. Ainsi, l'entrée 102 et la sortie 104 sont 30 respectivement associées à une première vanne (ou pompe) 106 et une deuxième vanne (ou pompe) 108 pour ouvrir et fermer l'entrée 102 et la sortie 104. L'entrée 102 et la première 3056225 11 vanne 106 permettent de contrôler l'apport du milieu de culture frais dans la cuve 100. La sortie 104 et la deuxième vanne 108 permettent de contrôler l'évacuation du milieu de culture et, le cas échéant, de certaines au moins des cellules C. L'entrée et la sortie permettent de piloter en continu le bioréacteur pour une production P de biomasse de microalgues. 5 D'une manière générale, le contrôle de la production de biomasse dans un système de culture à alimentation en continu s'appuie sur la maîtrise de la croissance cellulaire de la culture de microalgues. La concentration x [g/L] de microalgues dans le milieu de culture évolue en fonction du taux de croissance spécifique y (x) [h-1]. Dans les systèmes continus la concentration évolue aussi en fonction du taux de dilution D [h-1] du milieu de culture. Le taux 10 de dilution D est défini par le débit d'entrée (L/h) divisé par le volume (L) du milieu de culture. La concentration x [g/L] de microalgues dans le milieu de culture évolue au cours du temps. Pour une souche de microalgues donnée cette évolution peut être exprimée par la formule F1 suivante : jc = ,ux -Dx [F1] 15 En conséquence, pour la production de biomasse dans la cuve 100 du bioréacteur (à volume constant): Si y (x) > D: les cellules se multiplient (par division cellulaire) plus vite qu'elles ne sont évacuées, leur nombre et donc leur concentration (biomasse) va augmenter. Si y (x) Vco). Ainsi, la valeur de consigne haute induit un stress thermal sur les microalgues. La deuxième phase C2I1 est maintenue pendant une durée prédéfinie t = t2. Les durées respectives des première et deuxième phases sont choisies de sorte que ti + t2 = 25 24 heures. La succession des première et deuxième phases peut être réitérée sept fois par exemple. Ainsi, l'opération CYCLE 2 peut durer entre 7 jours. La figure 3 montre l'évolution de la température durant l'opération CYCLE 2 en fonction du temps, sur une durée de 24 heures. 3056225 15 L'opération CYCLE 2 est suivie par une opération MES de mesure du taux de croissance spécifique p des microalgues. Si p est inférieure ou égale à zéro l'opération CYCLE 2 est réitérée ; si p est supérieur à zéro une opération suivante CYCLE 3 est engagée. L'opération CYCLE 3 comporte une première phase C31 dans laquelle la température est réglée 5 à une deuxième valeur de consigne basse Van. La valeur de consigne basse Van est à choisie de sorte à répondre à des conditions de températures plus froides par rapport à la première valeur de consigne basse dans l'opération CYCLE 2 (VcB2 VCH1)- La valeur de consigne haute induit un stress thermal sur les microalgues. La deuxième phase C3I1 est 15 maintenue pendant une durée prédéfinie t = t4. Les durées respectives des première et deuxième phases sont choisies de sorte que t3 + t4 = 24 heures. La succession des première et deuxième phases peut être réitérée sept fois par exemple. Ainsi, l'opération CYCLE 3 peut durer entre 7 jours. La figure 4 montre l'évolution de la température durant l'opération CYCLE 3 en fonction du 20 temps, sur une durée de 24 heures. Le schéma des opérations successives (ici : CYCLE 2, puis MES, puis CYCLE 3) ci-dessus peut être réitéré un nombre prédéfini de fois, par exemple en fonction des espèces de microalgues. Ainsi, l'opération CYCLE 3 peut être suivie d'une nouvelle opération de mesure du taux de croissance spécifique p des microalgues. Si p est inférieure ou égale à zéro l'opération CYCLE 3 25 peut être réitérée ; si p est supérieur à zéro une opération suivante CYCLE 4 peut être engagée. L'opération CYCLE 4 comporte alors des valeurs de consignes basse et haute respectivement inférieure et supérieure par rapport aux valeurs consignes de l'opération CYCLE 3. Ceci induira des stress thermaux sur les cellules de microalgues. 3056225 16 EXEMPLE DE RÉALISATION Le bioréacteur du présent mode de réalisation comprend une cuve 100 avec un milieu de culture. Le milieu de culture comprend une dispersion d'une culture cellulaire de microorganismes photosynthétiques. 5 La culture cellulaire de micro-organismes photosynthétiques de départ choisie est la souche de microalgues Tisochrisis lutea CCAP 927/17. Dans la suite de la présente description, cette souche est appelée W2X. La souche W2X initiale présente une bonne productivité de triglycérides, cf. Bougaran et al. Enhancement of neutral lipid productivity in the microalga Isochrysis affinis Galbana (T-Iso) by 10 a mutation-selection procedure, Biotechnology and Bioengineering, 2012, 109(11), 2737-45 et Carrier et al. Comparative transcriptome of wild type and selected strains of the microalgae Tisochrysis lutea provides insights into the genetic basis, lipid metabolism and the life cycle, PLoS ONE, 2014, 9(1). La cuve présente une capacité volumique de 1,9 L. Ici, le milieu de culture est de type f/2, cf. 15 Culture of phytoplankton for feeding marine invertebrates, Culture of Marine Invertebrate Animais - Plenum, 1975. La cuve 100 comprend en outre des moyens de mélange du milieu de culture. Il s'agit ici d'un agitateur magnétique et d'une soufflerie (de type pompe à air) apte à générer des fines bulles au sein du milieu de culture. Le bioréacteur comprend une entrée 102 et une sortie 104. L'entrée 102 permet d'apporter du milieu de culture frais dans la cuve 100. 20 La sortie 104 permet d'évacuer du milieu de culture et des microalgues de la cuve 100. L'entrée 102 et la sortie 104 sont associées à un contrôleur. Le contrôleur permet de piloter la cuve 100 en continu pendant un temps de travail. Le temps de travail varie selon les souches de microalgues présentes dans le milieu de culture. Le temps de travail s'étend préférentiellement à minima sur 1 mois (sans limite supérieure de temps) ce qui correspond 25 généralement à au moins 20 générations de microalgues (c'est-à-dire 20 divisions cellulaire successives). Selon l'invention, le temps de travail est supérieur au temps nécessaire pour un cycle cellulaire de microalgues (division cellulaire). Dans le présent mode de réalisation, le temps de travail est de 260 jours. Avantageusement, la cuve du bioréacteur est nettoyée régulièrement (par exemple chaque mois). Le nettoyage peut être réalisé au moyen d'éthanol 30 70% suivi d'un lavage d'acide chlorhydrique (HCI) et rinçage à milieu de culture frais. Pendant 3056225 17 le nettoyage de la cuve, le milieu de culture comprenant la culture cellulaire est conservé dans des conditions stériles. Le bioréacteur comprend une source de lumière 200 qui émet une lumière incidente L d'une intensité lumineuse d'entrée /,' suffisamment élevée pour traverser la cuve 100 emplie du 5 milieu de culture comprenant la dispersion de microalgues. La source de lumière 200 est capable d'émettre une intensité lumineuse d'entrée 1m qui peut aller jusqu'à 5000 p.mol quanta m-2 s-1. Dans le présent mode de réalisation, la source de lumière est agencée pour émettre une intensité fixe de 250 p.mol quanta m-2 s-1. La source de lumière 200 émet une valeur constante d'intensité d'entrée /,' durant le temps de travail. Ici, la source de lumière 10 comprend des diodes électroluminescentes de la société Nichia Corporation de type NVSL219BT 2 700°K. Un contrôleur 600 pilote la cuve 100 en continu à un taux de dilution D. Pour cela, le contrôleur 600 comprend un ou plusieurs capteurs 300 de lumière tels que des cellules photoélectriques pour mesurer la densité optique de l'ensemble milieu de culture/microalgues au sein de la cuve 100. De cette manière le contrôleur 600 peut maintenir 15 la concentration de culture cellulaire x, dans le milieu de culture à une valeur choisie, par exemple environ 1,0 g/L, durant le temps de travail. Le contrôleur est agencé pour adapter le taux de dilution D en apportant et évacuant du milieu de culture. Une concentration d'environ 1,0 g/L permet une bonne diffusion de la lumière au sein de la cuve 100. Ici, le bioréacteur comporte un capteur 300 de lumière de de la société Skye Instruments de type SKL2620. 20 Dans le présent exemple de réalisation le protocole de sélection de l'invention est conduit dans un bioréacteur de type alimentation continue. La turbidité est maintenue constante à environ 9 x 105 cellules/mL. Ceci est réalisé par une mesure en continue à 800 nm par le capteur 300 et un pilotage par ajustement de dilution par le contrôleur 600. Il est fait ici référence au mode de sélection « SFturb ». 25 Parallèlement, le protocole de sélection de l'invention est conduit dans un bioréacteur de type fed-batch. Une dilution au moyen de milieu de culture frais est réalisée tous les sept jours ; 5% à 10% du mélange milieu de culture/cellules de microalgues est conservé avant la dilution. La concentration cellulaire initiale après dilution est donc d'environ 5 x 105 cellules/L. Il est fait ici référence au mode de sélection « SFb ». 30 Le pH du milieu de culture comprenant les microalgues est maintenu à pH = 8,2 par ajout de dioxyde de carbone (CO2) durant le temps de travail. 3056225 18 Le bioréacteur comprend en outre un régulateur de température 500 apte à augmenter et à baisser la température dudit milieu de culture dans la cuve. Ici, le régulateur comporte un système de refroidissement/chauffage réalisé au moyen d'un double-manteau à eau agencée sur le pourtour de la cuve 100. Le bioréacteur comporte une sonde de température 400 pour 5 mesurer la température dudit milieu de culture dans la cuve. Le bioréacteur comporte en outre une commande 700 du régulateur de température 500 agencée pour régler, durant un premier temps, la température du milieu de culture à une valeur de consigne basse VcB, et durant un deuxième temps la température du milieu de culture à une valeur de consigne haute VcF1, la succession desdits premier et deuxième temps permettant d'induire un stress cellulaire 10 chez certains au moins desdits micro-organismes photosynthétiques durant le temps de travail. Ici, la commande 700 comporte un thermostat de la société Lauda Brinkmann de type Proline RP 845. Le réglage de la température en vue d'atteindre les températures de consigne haute et basse peut être réalisé selon différent manières par la commande. Ainsi, la baisse et/ou 15 l'augmentation de température peut notamment être réalisée de façon linéaire, exponentielle, ou par pallier. Selon l'invention la température moyenne TM du milieu de culture (et donc reçue par cellule de microalgue) est maintenue constante durant le temps de travail. Ceci est radicalement différent des approches de l'état de la technique qui visent à augmenter progressivement la 20 moyenne de température reçue par cellule. La commande 700 est agencée pour répondre à la condition de température moyenne durant le temps de travail suivante : TM = (VCB x premier temps) + (VCH x deuxième temps) temps de travail L'amplitude (ou l'écart) entre les valeurs de consignes basses et de consignes hautes est augmentée de cycle en cycle (ou de temps de travail à temps de travail). 25 Le présent protocole de sélection prévoit des cycles de variation de températures toutes les 24 heures. La température de croissance optimale -4,, (valeur de température Vco) pour la souche W2X (Tisochrisis lutea CCAP 927/17) est égale à 28°C. La température moyenne choisie sur 24 heures dans le présent exemple de réalisation est égale à 28°C 3056225 19 Chaque cycle (temps de travail) comporte un premier temps pour lequel la température du milieu de culture est réglée à une température Ti0 plus froide que la température croissance optimale. La commande règle la température à la valeur de consigne basse VcB. Dans le présent mode de réalisation le premier temps est de 8 heures. Chaque cycle (temps de travail) 5 comporte en outre un deuxième temps pour lequel la température du milieu de culture est réglée à une température Trugh plus chaude que la température croissance optimale. La commande règle la température à la valeur de consigne haute VcFi. Dans le présent mode de réalisation le deuxième temps est de 16 heures. La succession desdits premier et deuxième temps permet d'induire un stress cellulaire chez 10 certains au moins desdits cellules de la souche W2X. Dans le 1" cycle de sélection, la valeur de consigne basse Vice (Tiow) est égale à 26°C. Dans le 1" cycle de sélection, la valeur de consigne haute VcH(Trugh) est égale à 29°C. Ainsi, les microalgues sont exposées pendant 8 heures à 26°C, suivi de 16 heures à 29°C. La moyenne de température reçue par les microalgues en 24 heures est égale à 28°C (Tops). 15 Le 1er cycle de sélection est réitéré pendant 7 jours. Après 7 jours, le taux de croissance p est déterminé. Si p est inférieur ou égale à zéro, les conditions de températures du 1er cycle de sélection sont réitérés à l'identique ; Si p est supérieur à zéro, un 2ème cycle de sélection est engagé. Dans le 2e' cycle de sélection, la valeur de consigne basse Vice (Tiow) est égale à 24°C. Dans le 20 2e' cycle de sélection, la valeur de consigne haute VcH(Trugh) est égale à 30°C. Ainsi, les microalgues sont exposées pendant 8 heures à 24°C, suivi de 16 heures à 30°C. La moyenne de température reçue par les microalgues en 24 heures est égale à 28°C (Tops). Le 2e' cycle de sélection est réitéré pendant 7 jours. Après 7 jours, le taux de croissance p est déterminé. Si p est inférieur ou égal à zéro, les conditions de températures du 2e' cycle de 25 sélection sont réitérées ; Si p est supérieur à zéro, un 3e' cycle de sélection est engagé. Chaque cycle (ou temps de travail) subséquent baisse, d'une part, la valeur de consigne basse Vice (Tiow) de 0,5°C à 1°C, et augmente, d'autre part, la valeur de consigne haute VcF1 (Trugh) de 0,25°C à 0,5°C, tandis que les premier et deuxième temps restent identique (respectivement 8 heures et 16 heures). 3056225 20 Les conditions de températures sont de plus en plus extrêmes d'un temps de travail à un autre. Ainsi, la valeur de consigne basse Vice (Ti') peut par exemple atteindre 12°C et la valeur de consigne haute VcF1 (Trugh) peut par exemple atteindre 36°C. La sélection est de plus en plus stricte en augmentant le nombre de temps de travails successifs. 5 Dans le présent exemple de réalisation, le temps de travail de 24 heures est réitéré 259 fois (total de 260 jours). En variante il est possible de modifier les premier et deuxième temps. Par exemple, dans un mode de réalisation le premier temps est fixé à 6 heures et le deuxième temps est fixé à 12 heures. Il est alors prévu un troisième temps durant lequel la température est maintenue égale 10 à la valeur optimale de croissance (Vco). Ainsi, la température moyenne reçue par les microalgues reste constante sur 24 heures. À titre d'exemple on peut citer un cycle de sélection, dans lequel : la température Ti0 à la valeur de consigne Vice basse égale à 26°C est maintenue pendant 6 heures ; 15 la température Trugh à la valeur de consigne haute VcF1 égale à 29°C est maintenue pendant 12 heures, et dans lequel la température Tops à la valeur de croissance optimale Vco égale à 28°C est maintenue durant un troisième temps égal à 6 heures. La moyenne de température reçue par cellule de microalgue en 24 heures est alors égale à 20 28°C (Tops). Dans cette variante, le postulat général dans lequel pour un temps de travail donné (prédéfini), le deuxième temps dure deux fois plus longtemps (le double) que le premier temps, est vérifié. Il s'y ajoute un troisième temps pour compléter ledit temps de travail donné. La figure 5 montre le taux de croissance par jour (j-1) par rapport à la température (°C) de la 25 souche initiale W2X et des souches W2X ayant été soumis au protocole de sélection de l'invention, à savoir respectivement W2XSTurb (pour la souche W2X sélectionnée dans le bioréacteur en continue) et W2XSFb (pour la souche W2X sélectionnée dans le bioréacteur en fed-batch). La figure 5 montre que la niche thermale des souches adaptées W2XSTurb et W2XSFb est accrue par rapport à la souche W2X initiale. Les températures extrêmes, à savoir 30 les températures minimales Tmin de croissance et les températures maximales Tmax de 3056225 21 croissance pour chaque souche ont été calculées selon le modèle proposé dans Validation of a simple model accounting for light and temperature effect on microalgal growth, Bernard & Rémond, Bioresource Technology, 2012,123,520-7. La figure 6 montre un diagramme comparatif entre la souche initiale W2X et les souches 5 modifiées par le procédé de l'invention W2XSFb et W2XSTurb. Les souches générées selon l'invention ont un taux de croissance accrue par rapport à la souche initiale W2X. La figure 7 montre un diagramme comparatif des souches W2X, W2XSFb et W2XSTurb entre les températures minimales Try',, de croissance, les températures maximales Tmax de croissance, la température optimale Tops de croissance et les niches thermales. 10 Les figures 5 et 6 montrent que les taux de croissance des souches adaptées W2XSTurb et W2XSFb sont plus élevées que le taux de croissance de la souche initiale W2X. La figure 7 montre que les niches thermales des souches adaptées W2XSTurb et W2XSFb sont plus larges que la niche thermale de la souche initiale W2X. Ainsi, les figures 5 à 7 démontrent que les microalgues modifiées au moyen du procédé de sélection de l'invention présentent un taux de 15 croissance élevé et une niche thermale élargie. Ceci est contraire aux résultats et modèles de l'état de la technique qui associent une niche thermale large à un taux de croissance faible. L'intérêt pour une exploitation industrielle des souches adaptées W2XSTurb et W2XSFb est accrue par rapport à la souche initiale W2X à niche thermale plus étroite. La figure 8 montre un diagramme compratif du taux total de lipides présents dans une souche 20 sauvage (wild-type) Tisochrisis lutea à savoir la souche CCAP 927/14 (cf. Bougaran et al. Enhancement of neutral lipid productivity in the microalga lsochrysis affinis Galbana (T-Iso) by a mutation-selection procedure, Biotechnology and Bioengineering, 2012, 109(11), 2737-45), dans la souche initiale W2X, dans la souche W2XSFb et dans la souche W2XSTurb. Les souches modifiées par le procédé de l'invention W2XSFb et W2XSTurb ont des taux de lipides (lig de 25 lipides par lig de carbone d'algue) accrues par rapport à la souche sauvage et à la souche W2X initiale. Les acides gras et leur taux respectif, contenus dans les échantillons de la souche initiale W2X, de la souche W2XSFb et de la souche W2XSTurb, ont été identifiés en chromatographie en phase gazeuse (CPG).. La composition des acides-gras et les quantités respectives de ces acides 30 ont été déterminées. Le tableau 1 montre les résultats. 3056225 22 Acide Gras W2XSTurb W2XSTurb W2XSFb W2X [ 1er Échantillon] [2ème Échantillon] Acides Gras Saturés : C14:0 24.70 24.24 21.73 22.1 C15:0 0.32 0.33 0.29 C16:0 14.21 14.12 14.57 16.9 C18:0 0.50 0.54 0.79 0.7 Total 40.47 39.93 38.071 39.9 Acides Gras Mono- insaturés : Monoène C14:1n-5 0.55 0.63 0.45 C16:1n-7 2.28 2.09 2.56 5.1 C18:1n-9 21.71 22.99 22.99 28.9 C18:1n-7 1.282 1.29 1.70 1.1 Total 27.60 29.23 29.87 37.9 Acides Gras Polyinsaturés : Diène C16:2n-6 0.13 0.12 0.15 0.1 C16:2n-4 0.31 0.31 0.41 0.2 C18:2n-6 4.41 4.97 3.45 3.8 C20:2n-6 0.064 0.081 0.13 0.1 Triène C18:3n-3 3.81 3.891 4.63 3.1 C20:3n-6 0.0531 0.049 0.079 0.1 3056225 23 C20:3n-3 0.0351 0.031 0.092 0.2 tétraène C18:4n-3 7.746 7.25 9.70 6.8 C20:4n-6 0.072 0.10 0.089 0.1 C20:4n-3 0.024 0.0031 0.020 0.3 Pentaène C18:5n-3 0.65 0.59 0.76 0.4 C20:5n-3 (EPA) 0.24 0.23 0.21 0.2 C22:5n-6 2.16 2.06 1.94 0.8 C22:5n-3 0.095 0.14 0.33 0.9 C22:6n-3 (DHA) 11.39 10.21 9.32 5 Total Poly 31.92 30.83 32.06 22.4 Tableau 1: Comparatif entre les compositions en acides-gras des souches adaptées W2XSFb et W2XSTurb et la composition en acide-gras initiale dans la souche W2X. Les résultats figurants dans le tableau 1 montrent que les souches de microalgues adaptées (notamment génétiquement modifiées) par le procédé de l'invention présentent des quantités 5 accrues en acides gras. Tout particulièrement une augmentation significative est observée pour le DHA qui présente un grand intérêt industriel. La modification de la souche W2X par le bioréacteur de l'invention résulte en des souches modifiées de W2X (ici W2XSFb et W2XSTurb) présentant une niche thermale augmentée de plusieurs degrés Celsius (ici jusqu'à 3°C). Les souches de W2X modifiées selon l'invention 10 présentent en outre un taux accru d'acides gras par rapport à la souche initiale W2X (notamment en DHA). Le taux de croissance des souches de W2X modifiées selon l'invention est accru par rapport à la souche W2X initiale. REVENDICATIONS1. Bioréacteur caractérisé en ce qu'il comporte une cuve (100) apte à être pilotée durant un temps de travail, ladite cuve (100) étant destinée à recevoir un milieu de culture comprenant une culture cellulaire de micro-organismes photosynthétiques, une source de lumière (200) agencée pour émettre une lumière incidente d'une intensité lumineuse d'entrée choisie (/,') en direction de la cuve, une sonde de température (400) pour mesurer la température dudit milieu de culture dans la cuve, et un régulateur de température (500) apte à augmenter et à baisser la température dudit milieu de culture dans la cuve, et en ce qu'il comprend en outre une commande (700) du régulateur de température agencée pour régler la température du milieu de culture à une valeur de consigne basse (VcB) durant un premier temps, et pour régler la température du milieu de culture à une valeur de consigne haute (Vc1i) durant un deuxième temps, la succession desdits premier et deuxième temps permettant d'induire un stress cellulaire chez certains au moins desdits micro-organismes photosynthétiques durant le temps de travail. 2. Bioréacteur selon la revendication 1, dans lequel la commande (700) est agencée pour déterminer ladite valeur de consigne basse et ladite valeur de consigne haute et lesdits premier et deuxième temps de sorte à maintenir une valeur moyenne (VM) de consigne durant le temps de travail, la valeur moyenne étant égale à la somme du produit de ladite valeur de consigne basse et dudit premier temps et du produit de ladite valeur de consigne haute et dudit deuxième temps, divisée par le temps de travail. 3. Bioréacteur selon la revendication 2, dans lequel ladite valeur moyenne de consigne est sensiblement égale à la température de croissance optimale (Topt) de la culture cellulaire de micro-organismes photosynthétiques. 4. Bioréacteur selon l'une des revendications précédentes, dans lequel ladite intensité lumineuse d'entrée choisie (/,,,,) de la lumière incidente est fixe durant le temps de travail. 5. Bioréacteur selon l'une des revendications précédentes, dans lequel ladite intensité lumineuse d'entrée choisie (/,,,) de la lumière incidente est comprise entre 100 et 2000 gmol quanta ni-2s1, de préférence égal à environ 250 gmol quanta m-2 s-1. 6. Bioréacteur selon l'une des revendications précédentes, comprenant en outre un contrôleur (600) agencé pour piloter la cuve à une concentration de culture cellulaire choisie (x,), de 3056225 25 préférence à une concentration sensiblement inférieure ou égale à 1,0 g/L, dans le milieu de culture durant ledit temps de travail. 7. Bioréacteur selon l'une des revendications précédentes, comprenant en outre un capteur de lumière (300) disposé en regard de la source de lumière (200), le capteur étant capable de 5 mesurer une intensité lumineuse en sortie (Lw) et de transmettre des données relatives à cette intensité (/0',) au contrôleur pour calculer la concentration de la culture cellulaire et de piloter la cuve à ladite concentration de culture cellulaire choisie (x,) dans le milieu de culture durant le temps de travail. 8. Bioréacteur selon l'une des revendications précédentes, apte à réitérer le temps de travail 10 une fois achevé. 9. Bioréacteur selon la revendication 8, dans lequel la commande est en outre agencée pour recevoir des données relatives au taux de croissance de ladite culture cellulaire de microorganismes photosynthétiques après un ou plusieurs temps de travail, et dans lequel la commande fixe la valeur de consigne basse et ladite valeur de consigne haute après ladite 15 réception des données relatives au taux de croissance de ladite culture cellulaire de micro- organismes photosynthétiques. 10. Procédé de sélection de micro-organismes photosynthétiques, comprenant les étapes suivantes : 1. Mettre à disposition un bioréacteur selon la revendication 1; 20 2. Emplir la cuve d'un milieu de culture ; 3. Inoculer le milieu de culture avec une culture cellulaire constituée de microorganismes photosynthétiques ; 4. Piloter la cuve durant un temps de travail et régler l'intensité lumineuse d'entrée (I,') à une valeur choisie 25 5. Régler la température du milieu de culture à une valeur de consigne basse (VcB) durant un premier temps, et régler la température du milieu de culture à une valeur de consigne haute (VcH) durant un deuxième temps, la succession desdits premier et deuxième temps permettant d'induire un stress cellulaire chez certains au moins desdits micro-organismes photosynthétiques durant le temps de travail ; 30 6. Récolter les micro-organismes photosynthétiques. 3056225 26 11. Procédé selon la revendication 10, dans lequel ladite valeur de consigne basse et ladite valeur de consigne haute et lesdits premier et deuxième temps sont réglés de manière à maintenir une valeur moyenne (VM) de consigne durant le temps de travail, la valeur moyenne étant égale à la somme du produit de ladite valeur de consigne basse et dudit premier temps 5 et du produit de ladite valeur de consigne haute et dudit deuxième temps, divisée par le temps de travail. 12. Procédé selon l'une des revendications 10 et 11, dans lequel ladite valeur moyenne de consigne est sensiblement égale à la température de croissance optimale (Tom) de la culture cellulaire de micro-organismes photosynthétiques. 10 13. Procédé selon l'une des revendications 10 à 12, comprenant en outre les étapes suivantes : 4a. Prélever une partie du milieu de culture comportant au moins une partie desdits micro-organismes photosynthétiques ; et 4b. Compenser ladite partie du milieu de culture comportant au moins une partie desdits micro-organismes photosynthétiques prélevée par du milieu de culture frais. 15 14. Procédé selon l'une des revendications 10 à 13, dans lequel l'étape 5. de régulation de température est réitérée plus de 2 fois de manière à provoquer une dégradation cellulaire d'au moins une partie desdits micro-organismes photosynthétiques et ainsi sélectionner les microorganismes photosynthétiques présentant des propriétés précieuses. 15. Procédé selon l'une des revendications 10 à 14, dans lequel la récolte à l'étape 6. est 20 réalisée lorsque le milieu de culture comporte une culture cellulaire de micro-organismes photosynthétiques constituée à plus de 75%, préférentiellement à plus de 90%, encore plus préférentiellement sensiblement à 100% de micro-organismes photosynthétiques présentant des propriétés précieuses. 16. Procédé selon la revendication 15, comprenant en outre les étapes suivantes : 25 7. Inoculer un milieu de culture frais avec les micro-organismes photosynthétiques présentant des propriétés précieuses dans un bioréacteur ; et 8. Piloter le bioréacteur de l'étape 7. pour une production de biomasse constituée desdits micro-organismes photosynthétiques présentant des propriétés précieuses.