FR 3048612 A1 20170915 FR 1652110 A 20160314 1 TULATHROMYCINE POTENTIALISEE L'invention a pour objet les composés de formule (I), utilisés à une dose où ils ne présentent plus de propriétés antimicrobiennes, pour leur utilisation en tant qu'agent destinés à la potentialisation de la tulathromycine avec laquelle ils sont co-administrés. En particulier, la combinaison « potentialisateur(s) + tulathromycine » a pour but de prévenir et/ou traiter les infections bactériennes et fongiques chez l'animal. L'invention a également pour objet un procédé pour potentialiser la tulathromycine dans lequel on co-administre avec la tulathromycine un composé (ou plusieurs) de formule (I). Dans ce procédé, on utilise le composé de formule (I) à une dose où il est inactif seul. OBJET DE L'INVENTION Background L'invention a pour objet d'apporter des solutions aux problématiques liées à la baisse ou la perte d'activité des antibiotiques durant leur période d'utilisation commerciale et médicale. Après l'arrivée des antimicrobiens dans les années 1940 il est rapidement apparu que les microbes (bactéries et champignons) avaient la capacité de s'adapter aux antimicrobiens utilisés. L'efficacité de ceux-ci diminue au fil du temps et de leur utilisation. 2 stratégies existent pour lutter contre la résistance, la découverte de nouvelles molécules antimicrobiennes d'une part, et d'autre part l'association avec des molécules destinées à bloquer sélectivement les mécanismes de résistance. Depuis une vingtaine d'années, il est observé une baisse du nombre de nouvelles molécules antimicrobiennes accédant au marché, ce qui a entrainé l'augmentation majeure de la prévalence mondiale de microbes résistants. Il s'ensuit alors une situation complexe pour les patients qui sont plus difficilement soignés de leurs infections microbiennes. La Demanderesse a déjà démontré, dans la demande PCT/EP2015/071093, que les composés de formule (I) étaient capables de potentialiser des antibiotiques. Dans cette demande, il a été démontré que les bons résultats in vitro étaient confirmés in vivo. La 30 demande PCT/EP2015/071093 ne cite pas la tulathromycine. La tulathromycine est un antibiotique de la famille des macrolides. Son nom chimique (nomenclature IUPAC) est le (2R,3 S,4R, 5R, 8R,10R, 11R,12 S,13 S,14R)-13 - [ [2,6- dide oxy-3 -C-methy1-3 -0-methy1-4-C- [(propyl amino)methyl] -a-L-rib o-hexopyrano- 3048612 2 syl]oxy]-2-ethy1-3 ,4,10-trihydroxy-3 ,5,8,10,12,14-hexamethy1-114 [3 ,4,6-trideoxy-3 - (dimethylamino)-(3-D-xylo-hexopyranosy1]-oxy]-1 -oxa-6-azacyclopentadecan-15 -one. Elle est commercialisée par Zoetis sous la marque Draxxin® pour le traitement du bétail et des cochons ou autres animaux domestiqués. 5 Chez les bovins, la tulathromycine est notamment indiquée pour le traitement, la metaphylaxie et la prévention des pathologies respiratoires bovines associées à Mannheima haemolytica, Pasteurella multocida, Histophilus somni et Mycoplasma bovis sensibles à la tulathromycine. Elle est également indiquée pour le traitement et la metaphylaxie de la kératoconjonctivie infectieuse bovine associée à Moraxella bovis sensible à la 10 tulathromycine. Chez les porcins, la tulathromycine est notamment indiquée pour le traitement, la metaphylaxie et la prévention des pathologies respiratoires porcines associées à Actinobacillus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida, Mycoplasma hyopneumoniae et Haemophilus parasuis sensibles à la tulathromycine. 15 Descriptif L'invention décrit l'utilisation de composés de formules (I) pour potentialiser la tulathromycine. De façon inattendue, ces composés ont démontré leur capacité de potentialisation de l'effet de la tulathromycine à des doses faibles (de 0,01 à 100 mg/1) très 20 éloignées de celles où ils peuvent, seuls, présenter des propriétés antimicrobiennes. En conséquence, la tulathromycine co-administrée avec les composés de formules (I) présente, du fait de la potentialisation, une activité supérieure à celle usuellement observée. Il est important de rappeler que toute molécule présente, dans l'absolu, des propriétés antimicrobiennes. Les propriétés antimicrobiennes d'une molécule doivent donc s'évaluer en 25 regard de la concentration minimale qui inhibe la bactérie. L'invention se base sur la découverte surprenante que des composés, qui présentent des propriétés antimicrobiennes à des doses très élevées (niveau incompatible avec un usage en médecine pour cet effet) et dont les concentrations minimale inhibitrice (CMI) sont supérieures à 5000 mg/L, avantageusement supérieures à 10 000 mg/L, présentent des effets de potentialisation à des doses faibles (0,01 à 100 mg/1). A ces doses, il devient envisageable d'utiliser les composés (I) chez l'animal. De façon encore aussi surprenante, il a été constaté que l'effet de potentialisation est meilleur à dose faible du composé (I), et que l'effet (pour les composés présentant des 3048612 3 propriétés antimicrobiennes à dose très élevées) augmente lorsque l'on s'éloigne de la dose à laquelle le composé (I) présente seul des propriétés antimicrobiennes. Par exemple, il a été constaté de façon inattendue que le cinéole, qui présente des propriétés antimicrobiennes à une concentration de l'ordre du g/L (CMI de 25 000mg/1 à 50 5 000 mg/1 soit 2,5 à 5%, selon les souches), présente des effets de potentialisation des antibiotiques à ces concentrations proches de la CMI (1 à 3 dilutions). Lorsque l'on diminue sa concentration en dessous de la CMI, le cinéole ne potentialise plus les antibiotiques (voire exemples 2 et 6 de la demande PCT/EP2015/071093). Puis, de manière très surprenante, on a constaté qu'en diminuant 10 encore significativement la concentration en cinéole, de 10 à 50 fois moins que la CMI, le cinéole présente à nouveau des effets de potentialisation sur un très grand nombre d'antibiotiques sur un très grand nombre de souches, cette fois à des doses compatibles avec l'usage médical ou vétérinaire. Un grand avantage est que les composés (I) utilisés à ces doses éloignées de leur seuil 15 d'efficacité, sont le plus souvent utilisables chez l'animal sans contraintes de toxicité du fait de l'absence de toxicité ou à des niveaux acceptables de toxicité. Cela ne serait pas le cas si l'on souhaitait les utiliser aux doses élevées où ils présentent des propriétés antimicrobiennes voire aux doses proche de leur CMI ou ils pourraient potentialiser les antimicrobiens. De façon tout aussi surprenante l'effet de potentialisation observé avec le composé selon 20 l'invention n'est pas spécifique d'un mécanisme de résistance particulier mais s'observe sur diverses souches, qu'elles aient, ou n'aient pas, développé un ou plusieurs mécanismes de résistance distincts. ART ANTERIEUR L'art antérieur décrit dans de nombreuses publications les propriétés 25 antimicrobiennes de certains composés (I). Ces publications n'anticipent pas l'effet de potentialisation des composés (I) à des doses éloignées de leur seuil d'efficacité. L'art antérieur est conséquent sur les composés (I) car ils appartiennent à des classes chimiques très étudiées dans de nombreux domaines. Les composés (I) dans le cadre de la présente invention présentent les caractéristiques suivantes qui permettent de les écarter de 30 l'art antérieur et qui permettent d'envisager leur usage comme potentialisateur d'antimicrobiens administrés à l'homme et à l'animal: 3048612 4 A/ Ils sont utilisés à des doses faibles (0,01 à 100 mg/1), doses éloignées de leur seuil de propriétés antimicrobienne, leur effet de potentialisation n'est pas spécifique de mécanismes d'action ou de résistance particuliers B/ ils ont été validés par des méthodes de screening adaptée à leurs caractéristiques 5 physico-chimiques C/ ils présentent, aux doses ou ils potentialisent, un ratio effet/toxicité qui permet un usage sécurisé chez l'homme ou l'animal D/ Ils constituent une (des) entité(s) chimique(s) isolée(s) dont les caractéristiques sont reproductibles de façon constante à l'infini car leur méthode d'obtention 10 (synthèse, hémi-synthèse, extraction) le permet. E/ Ils ne possèdent pas de toxicité particulière qui interdirait leur usage même à dose faible (génotoxicité, cardiotoxicité,...) A/ Concernant les niveaux d'activités mesurés dans l'art antérieur Dans l'art antérieur, la concentration utilisée pour observer une activité 15 antimicrobienne n'est pas compatible avec une utilisation future chez l'homme ou l'animal, en particulier lors d'une application systémique. Dans la majeure partie des publications scientifiques, l'usage médical est envisagé alors que les concentrations efficaces mesurées (de l'ordre de plusieurs mg/ml) sont incompatibles avec cet usage. Les effets antimicrobiens mesurés l'ont très souvent été pour des teneurs en huile essentielle, ou de son composé actif, 20 de l'ordre de plusieurs mg/ml. Or, une telle concentration n'est pas adaptée pour une utilisation future chez l'homme ou l'animal, en particulier par voie systémique. 1 mg/m1 correspond à 1 g/1 ou lg/kg ou encore 0,1%. Si la CMI était de 1 mg/ml, il faudrait, en fonction des paramètres de pharmacocinétique, administrer au moins 1 g/kg/j de poids vif. Par exemple, la dose effective pour une vache devrait être au moins 500 g/j et au moins 60 25 g/j pour l'homme (ceci correspond à la dose minimale car on suppose ici que le produit est totalement absorbé et distribué dans l'organisme). Ces doses bien trop importantes ne sont pas envisageables pour une utilisation sécurisée en thérapeutique. Par exemple on peut citer deux publications qui citent l'effet antibactérien des terpénoïdes et leur éventuel capacité de potentialisation des antimicrobiens : 30 - Biointerfacae Vol 2, Issue 1, 2012, 271-276: Marinas et al : Rosmarinus officinalis essential oil as antibiotic potentiator against Staphylococcus aureus. Si cette publication semble proche de l'invention il est important de noter la dose envisagée (p274) d'eucalyptol qui, à 25 1.1L/mL (soit 25 ml /L soit 25 g/1) se situe très 3048612 5 loin de la dose administrable à l'homme ou l'animal. Le test de synergie envisagée est réalisé avec la solution de stockage (50% de cinéole) soit 50 g/L, supérieure à la CMI du cinéole dans la publication, dosage incompatible pour une utilisation en médecine. 5 - Journal of Antimicrobial Chemotherapy (2009) 64, 1219-1225 : Hendry et al : Antimicrobial efficacy of eucalyptus oil and 1,8-cineole alone and in combination with chlorhexidine digluconate against microorganisms grown in planktonic and biofilm cultures. Là encore il est envisagé la synergie avec un produit qui présente des propriétés 10 antimicrobiennes. La concentration de cinéole envisagée est de 4 g/L, dose très proche de la CMI du cinéole dans la publication (8-64 g/L) mais trop importante pour être envisageable dans une administration humaine ou animale. Clairement l'invention se différencie de ces deux publications car dans celles-ci les doses envisagées sont très élevées tandis que la concentration envisagée se situe à proximité de la 15 CMI. B/ Concernant l'inadaptation des méthodes décrites dans l'art antérieur Les auteurs ayant travaillé selon des approches différentes (produits actifs seuls, produits naturels,...) sur les familles chimiques comprenant les composés (I) ont en général utilisé les méthodes standard de mesure d'effet antibactérien sans les adapter à la nature 20 hydrophobe et volatile des terpénoïdes et phénylpropanoïdes. Par exemple, WO 99/66796 (Wisconsin Alumni Research Foudation) décrit une méthode pour sensibiliser des cellules microbiennes vis-à-vis de composés antibactériens comprenant une étape de mise en contact avec un composé antibactérien et un sesquiterpenoïde, pour améliorer l'effet du composé antibactérien. 25 Dans cette demande, les CMI ont été déterminées avec la méthode de diffusion sur gélose, inadaptée à la nature volatile et hydrophobe des composés (I) et des familles apparentés. Cette méthode consiste à déposer des disques de papier imprégnés de quantités connues de composés à tester sur une gélose ensemencée avec la bactérie à étudier. Il s'établit sur la gélose un gradient de concentration du composé autour de chaque disque ; 30 après 18 heures on mesure le diamètre du halo d'inhibition. Cette méthode n'est toutefois pas fiable pour les composés hydrophobes qui, en raison de tensions de surface et d'angles de contacts très différents sur les surfaces hydrophiles, interfèrent avec la formation du gradient de concentration dans la gélose. Dans certaines zones, la concentration en composés à tester 3048612 6 est bien supérieure à la concentration théorique. Ainsi, les tests ne peuvent pas être quantitatifs, lorsqu'ils peuvent être qualitatifs. En outre, on note une dilution du composé hydrophobe à tester dans l'éthanol, sans toutefois corriger le résultat alors que l'éthanol est un composé antibactérien et volatil. 5 A noter que cette demande enseigne qu'aucun effet n'est obtenu avec des terpènes autres que les sesquiterpènes. C/ Concernant la toxicité des composés de l'art antérieur A propos des composés et compositions naturelles, il y a une confusion entre l'origine naturelle et l'absence de toxicité. Les huiles essentielles (et leurs dérivés) sont habituellement 10 décrites comme étant peu toxiques, ce qui est souvent vrai dans des applications alimentaires ou en parfumerie mais erroné dans le cadre d'une administration thérapeutique. A propos des composés chimiques isolés, la confusion existe aussi et repose sur l'origine naturelle (extraction) des composés. Par exemple W02006/120567 (Advanced Scientific developments) décrit des 15 compositions pharmaceutiques comprenant au moins une substance thérapeutique active et décrite comme non toxique, choisie parmi carveol, thymol, eugenol, borneol, carvacrol, alpha-ionone, beta-ionone, et leurs isomères, dérivés et mélanges, et comprenant, à titre de deuxième substance thérapeutique active un antibiotique. Le carveol, thymol, eugenol, borneol, carvacrol, alpha-ionone, ou beta-ionone, utilisés seuls, présentent une activité 20 antibactérienne et nombre d'entre eux posent cependant également des problèmes de toxicité, ignorés dans cette demande. Par exemple, le carvacrol présente les données de toxicité suivantes: la DL 50 (souris, intraveineuse) est de 80 mg/kg tandis que la dose létale la plus faible en voie orale est de 100 mg/kg, chez deux espèces mammifères (chat et rat). Ces données sont à mettre en regard de 25 la dose de 0,3 mg/m1 (soit 300 mg/kg), envisagés dans le document. D/ Concernant la variabilité chimique des composés décrits dans l'art antérieur L'utilisation d'huile essentielle est problématique, à l'échelle industrielle, en termes de qualité et de reproductibilité étant donné que la composition d'une huile essentielle varie d'un lot à l'autre. 30 Par exemple DE 196 31 037 (Boehringer) décrit l'utilisation de l'huile essentielle d'arbre à thé pour potentialiser l'effet d'antibiotiques sur les souches Staphylococcus aureus. Le composant principal l'huile essentielle d'arbre à thé est le terpinen-l-ol. 3048612 7 Cette variabilité a notamment trois conséquences qui limitent industrialisation en vue d'une application chez l'homme ou l'animal: il est difficile d'assurer la constance de l'effet thérapeutique Il est difficile d'assurer la faible toxicité des produits 5 le coût relatif à l'approvisionnement et au management de la qualité et de la reproductibilité des matières est important. Le tableau suivant récapitule l'enseignement de ces arts antérieurs : A/ Produits B/ Métlude de CI Toxicité D/ Problènr de Doseerivisagée tifs à dose envisagée suce-ling à la dose valiabfliËchimique incompatible avec la lubie damique des envisagée COMPOSéS Maiinasetal Oui Oui Oui Non 15 g/L soit 15 000 mg/1 Henchy etal Oui Non Oui Non 4 g/L soit 4 000 mg/1 WO 2009/043987 Ammatedinologies Oui Oui Oui Oui 0,1 à 0,4 % soit : 1 à 4 000 mg/L WO 2006/120567 Aclvanoed Oui Oui, (pas &gent Oui Non 0,3 mg/mi soit 3 000 mg/1 disposant) DE 19631037 &changer Oui Non (tstchElelait) Oui Oui 1 à 2 mg /m1 soit 1000 à 2000 mg /1 WO 99/66796 Oui Oui Oui Non 1 mM soit 222 mg/L (pour le sesquiterpenoides) WiszonsinAhimni Piésente hwention Non Non Non Non 0,01 à 100 mg/L Tableau 1 Le travail portant sur des composés (I) à des doses faibles éloignées de celles 10 auxquelles ils présentent une activité antimicrobienne est nouveau et l'art antérieur n'a pas, à notre connaissance, envisagé cet usage. DEFINITIONS Par « micro-organisme », on entend tout organisme vivant, invisible à l'oeil nu en raison de ses faibles dimensions. 15 Par « organisme », on entend toute entité biologique (être vivant) animale ou végétale capable de naître, de se développer et normalement de se reproduire. Dans ce brevet la définition de microbe reprend la définition de micro-organisme, limitée au champ médical auquel l'invention se réfère. Ainsi les « microbes » sont les microorganismes 3048612 8 vivants potentiellement pathogènes (bactéries, champignons, levure et mycobactéries). Le terme exclue donc les pathogènes inertes comme les virus et les prions. Par « antimicrobien » on entend tout composé destiné à être administré à l'homme ou l'animal capable de tuer ou d'inhiber la croissance de microbes. Les sels 5 pharmaceutiquement acceptables de ces antimicrobiens sont également inclus dans cette définition. Cela inclut, par exemple, les sels de sodium, de potassium, de calcium, etc. et les sels aminés de procaine, dibenzylamine, éthylendiamine, éthanolamine, méthylglucamine taurine, etc., de même que les sels d'addition acide tels que les hydrochlorures et les acides aminés basiques. Le terme regroupe ainsi les antibiotiques (leurs associations avec les 10 inhibiteurs de mécanismes de résistance), les antifongiques destinés à un usage systémique ou local. Par « propriétés antimicrobiennes » on entend les propriétés d'une quelconque substance capable de détruire ou d'inhiber la croissance des microbes. Les produits qui présentent des propriétés antimicrobiennes comprennent notamment les antimicrobiens et les 15 biocides. Par opposition au terme « antimicrobien » qui regroupe les antibactériens, antifongiques destinés à être administrés, le terme « biocide » regroupe les produits ayant des propriétés antimicrobiennes destinés à être appliqués à des systèmes inertes (virus et prions). 20 Par « propriétés antibactériennes » et « propriétés antifongiques » on entend non seulement les propriétés bactéricides et fongicides caractérisées par la destruction des bactéries et champignons (et levures, mycobactéries), mais également les propriétés bactériostatiques et fongistatiques, caractérisées par l'inhibition de la croissance desdites bactéries et champignons (et levures, mycobactéries). Les produits qui présentent des 25 propriétés antibactériennes ou antifongiques comprennent notamment les antimicrobiens. Par « bactérie résistante » aux antibiotiques on entend, au sens de la présente invention, une bactérie résistante à au moins un, notamment au moins deux, en particulier au moins trois, voire au moins quatre, antibiotique(s) ou famille(s) d'antibiotique, classiquement utilisé(s). 30 Par « bactérie multi-résistante » on entend, au sens de la présente invention une bactérie résistante à plusieurs antibiotiques, en particulier pour lesquels la souche devrait être sensible, ou a priori sensible, tout particulièrement une bactérie qui présente au moins deux résistances non naturelles. 3048612 9 On distingue les « résistances naturelles » des « résistances acquises ». Certains antibiotiques n'ont jamais été efficaces, à des doses non toxiques, contre certaines souches ou espèces bactériennes. Il s'agit d'une résistance naturelle. Lorsque des antibiotiques normalement efficaces ne s'avèrent pas ou peu efficaces vis-à-vis d'une bactérie, cette 5 bactérie a développé une résistance acquise. Une « infection microbienne » au sens de la présente invention désigne une infection provoquée par une ou plusieurs souches microbiennes et inclut les phases allant de la colonisation de l'hôte aux phases pathologiques. L'expression « infection microbienne » englobe donc tout effet néfaste, signe clinique, symptôme ou toute maladie apparaissant chez 10 l'homme ou l'animal suite à la colonisation par le microbe. Par "terpenoïde" on entend selon l'invention tout composé comprenant un squelette proche d'un terpène. Un « terpène » désigne un dérivé de l'isoprène qui est obtenu par voie biologique par la condensation d'unités en C5, conduisant par exemple aux monoterpènes, sesquiterpenes. Par « proche » on entend que le squelette est similaire à un terpène ou 15 différent en ce qu'au moins un substituant alkyle, normalement présent, peut être absent ou porté par un autre atome. Le squelette peut en outre être substitué par des radicaux variés tels que des radicaux aliphatiques, saturés ou insaturés, linéaires ou cycliques (alkyles, alcényles, alkylènes), oxy, des aldéhydes, des esters, des alcools, des éthers et leurs équivalents soufrés ou azotés. Le terpénoïde peut avantageusement être d'origine naturelle. 20 Par "phenylpropanoide" on entend selon l'invention tout composé comprenant un squelette proche d'un phénylpropane. Un « phenylpropane » désigne un dérivé obtenu par synthèse biologique à partir du phénylpropane et conduisant à des dérivés en C6 (aromatique)-C3 (aliphatique) ou en C6 (aromatique)-C1 (aliphatique) et aux lactones correspondantes. Par « proche » on entend que le squelette est similaire à un phénylpropane, 25 en particulier on retrouve le motif phényle, ou différent en ce qu'au moins un substituant alkyle, normalement présent, peut être absent ou porté par un autre atome. Le squelette peut en outre être substitué par des radicaux variés tels que des radicaux aliphatiques, saturés ou insaturés, linéaires ou cycliques (alkyles, alcényles, alkylènes), oxy, des aldéhydes, des esters, des alcools, des éthers et leurs équivalents soufrés ou azotés. Le phénylpropanoïde 30 peut avantageusement être d'origine naturelle. Le terme « prophylaxie » ou « prévenir une infection » tel qu'utilisé dans la présente demande désigne tout degré de retardement dans le moment d'apparition de signes cliniques ou de symptômes de l'infection, ainsi que tout degré d'inhibition de la sévérité des signes 3048612 10 cliniques ou symptômes de l'infection, y compris mais sans limitation à, la prévention totale de ladite infection. Ceci nécessite que l'antimicrobien et le composé selon l'invention soient co-administrés à l'homme ou l'animal susceptible d'être colonisé par une souche microbienne à titre préventif, par exemple suite à un acte de chirurgie, d'implantation d'un 5 dispositif médical, un acte médical intrusif. Cette administration prophylactique peut avoir lieu avant, pendant ou après l'acte susceptible de provoquer une infection (en particulier une infection nosocomiale) dans le but d'empêcher, améliorer, et/ou réduire la sévérité de n'importe quelle infection subséquente. Le terme « traitement » au sens de la présente demande implique que l'antimicrobien 10 et le composé selon l'invention soient co-administrées à un sujet (humain ou animal) au moment de la colonisation ou après la contamination ou la suspicion de contamination par une souche microbienne susceptible de provoquer une infection telle qu'une infection nosocomiale. Le terme « traitement » ou « traiter une infection » inclut donc : - tout effet curatif (inhibition de la croissance ou destruction du microbe) obtenu 15 grâce à la co-administration antimicrobien + composé selon l'invention ainsi que l'amélioration des signes cliniques ou des symptômes observés de même que l'amélioration de l'état du sujet. - le ralentissement, l'interruption, ainsi que l'arrêt de la progression de l'infection. La co-administration antimicrobien-composé selon l'invention peut en effet également 20 permettre de ralentir la progression d'un microbe et/ou empêcher complètement ou partiellement une infection microbienne de s'étendre aux tissus environnants et au- delà. - l'inhibition, l'atténuation ou la prévention des conséquences néfastes de l'infection telles que les dommages cellulaire ou physiologiques provoqués par les toxines 25 produites par certains microbes au niveau des tissus infectés ou avoisinants. Le terme « metaphylaxie » tel qu'utilisé dans la présente demande désigne tout traitement préventif et systématique d'animaux présumés sains mais soumis à un risque certain. Le terme « co-administrés » signifie que la tulathromycine et le composé selon 30 l'invention (ou le mélange de composés selon l'invention) sont administrés sous forme combinée ou juxtaposée au sujet. La combinaison inclut toute association médicamenteuse, toute composition pharmaceutique, tout kit pharmaceutique, et tout médicament comprenant (i) au moins la tulathromycine et (ii) au moins un composé selon l'invention. Les composés 3048612 11 (i) et (ii) peuvent être présents sous la forme d'un mélange ou sous la forme de formulations ou compositions distinctes dans ladite combinaison. La combinaison peut également comprendre plusieurs composés selon l'invention, en particulier 2 ou 3 ou plus composés selon l'invention. La combinaison pourrait également comprendre un ou plusieurs autres 5 antibiotiques. Ces constituants forment une unité fonctionnelle du fait d'une indication commune, qui est la mise en oeuvre d'un traitement antimicrobien. Cette thérapie combinée est plus spécifiquement destinée à la prophylaxie et/ou au traitement d'infections et de maladies d'origine microbienne, en particulier des infections nosocomiales. La co-administration peut être simultanée ou étalée dans le temps. 10 Le terme « simultané » signifie que la tulathromycine et le composé selon l'invention (ou le mélange de composés selon l'invention) sont administrés en même temps, au même moment, à un sujet. Ces composés peuvent être administrés sous la forme d'un mélange ou, simultanément mais séparément, sous la forme de compositions distinctes. L'expression « administration séquentielle » signifie que la tulathromycine et le 15 composé selon l'invention (ou le mélange de composés selon l'invention) sont administrés non pas simultanément mais séparément dans le temps, l'un après l'autre. L'expression « potentialiser » la tulathromycine signifie que l'utilisation d'un composé selon l'invention permet d'obtenir un effet prophylactique, metaphylaxique ou thérapeutique supérieur à l'effet prophylactique, metaphylaxique ou thérapeutique obtenu en 20 utilisant tulathromycine seule. Ceci peut s'exprimer de différentes manières, alternatives ou cumulatives : augmentation de l'effet de la tulathromycine, diminution de la dose de tulathromycine à effet constant de tulathromycine, réduction de la CMI. En outre, la potentialisation permet de réduire, voire annihiler, l'apparition de résistance. L'expression augmenter l'effet de la tulathromycine signifie : l'élargissement du 25 spectre microbien de l'activité de la tulathromycine, l'augmentation de la vitesse d'action de la tulathromycine, l'amélioration du succès clinique (cure rate) ou de la vitesse de l'obtention du succès clinique (time to cure) de la tulathromycine, à dose constante de tulathromycine. L'expression « diminuer la quantité de tulathromycine utilisée » signifie que 30 l'utilisation de composé selon l'invention permet d'utiliser une quantité de tulathromycine inférieure à la quantité de tulathromycine normalement nécessaire pour obtenir un effet thérapeutique, metaphylaxique ou prophylactique donné lorsque la tulathromycine est administré seule. La diminution de la quantité de tulathromycine utilisée peut être plus ou 3048612 12 moins importante ; elle est de préférence d'au moins 10%, et plus préférablement d'au moins 20 %, encore plus préférablement d'au moins 40%, voire 50% ou plus par rapport à la quantité normalement nécessaire pour obtenir un effet thérapeutique ou prophylactique donné. 5 «CMI » signifie « concentration minimale inhibitrice », qui est la plus faible concentration de substance à laquelle on n'observe plus de croissance microbienne après 18 à 24h de contact dans des conditions favorables à la croissance microbienne Les tests de mesure de concentration minimale inhibitrice sont réalisés en milieu solide gélose selon les normes internationales en vigueur (normes CLSI M7-A9 Jan 12) : 10 dispersion des composés à tester dans une gélose Mueller Hinton. Une adaptation relative à l'hydrophobicité des composés et compositions est cependant nécessaire pour les disperser dans le milieu : dilution des composés dans un solvant. Les composés et compositions incorporés dans la gélose peuvent être au préalable dilués dans un ou plusieurs solvant (Tween® 80 dilué dans l'eau, tween® 80 dilué dans le propylène, DMSO dilué dans l'eau). 15 Le milieu peut être ajusté en cations. Les souches sont déposées sur la surface de la gélose avec un appareil de steers. Dans les exemples, différentes méthodes de dissolution des produits sont testées en parallèle pour contourner les problématiques de coefficient de répartition eau/solvant des molécules (antimicrobien et potentialisateur) tandis que les bactéries poussent dans la seule phase aqueuse. La contrainte technique n'interviendra pas 20 dans les tests in vivo. Les mêmes méthodes de dilutions peuvent être mise en oeuvre en milieu liquide (microplaques et tubes). La même méthodologie est mise en oeuvre avec les champignons. Les CMI 50 et CMI 90 représentent respectivement les concentrations qui inhibent 50% et 90% en nombre des souches d'un même genre. 25 Par « atome d'halogène », on entend, au sens de la présente invention, les atomes de fluor, de chlore, de brome et d'iode. Par « hétéroatome », on entend, au sens de la présente invention, N, O ou S, avantageusement O. 30 Par groupement « (Ci-C6)alkyle », on entend, au sens de la présente invention, une chaîne hydrocarbonée monovalente saturée, linéaire ou ramifiée, comportant 1 à 6, de préférence 1 à 4, atomes de carbone. A titre d'exemple, on peut citer les groupes méthyle, 3048612 13 éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, sec-butyle, tert-butyle, pentyle ou encore hexyle. Par groupement « (C2-C6)alcényle », on entend, au sens de la présente invention, une chaîne hydrocarbonée monovalente, linéaire ou ramifiée, comportant au moins une double 5 liaison et comportant 2 à 6 atomes de carbone. A titre d'exemple, on peut citer les groupes éthényle ou allyle. Par « (Ci-C6)halogénoalkyle », on entend, au sens de la présente invention, un groupe (Ci-C6)alkyle, tel que défini ci-dessus, pour lequel un ou plusieurs atomes d'hydrogène ont été remplacés par un atome d'halogène tel que défini ci-dessus. Il peut s'agir en particulier 10 d'un groupe CF3. Par groupement « (Ci-C6)alcoxy », on entend, au sens de la présente invention, un groupe (Ci-C6)alkyle tel que défini ci-dessus, lié au reste de la molécule par l'intermédiaire d'un atome d'oxygène. A titre d'exemple, on peut citer les groupes méthoxy, éthoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy ou encore tert-butoxy. 15 Par groupement « (C2-C6)alcénoxy », on entend, au sens de la présente invention, un groupe (C2-C6)alcényle, tel que défini ci-dessus, lié au reste de la molécule par l'intermédiaire d'un atome d'oxygène. A titre d'exemple, on peut citer le groupe - OCH2CH=CH2. Par groupement « (Ci-C6)alkylène » ou « (Ci-C6)alcanediyle », on entend, au sens de 20 la présente invention, une chaîne hydrocarbonée divalente, linéaire ou ramifiée, comprenant 1 à 6 atomes de carbone, comme par exemple, un groupement methylène, éthylène, propylène, butylène, pentylène ou encore hexylène. Par groupement « (C2-C6)alcénylène » ou « (C2-C6)alcènediyle », on entend, au sens de la présente invention, une chaîne hydrocarbonée divalente, linéaire ou ramifiée, 25 comprenant 2 à 6 atomes de carbone et au moins une double liaison, comme par exemple, un groupement vinylène (éthénylène) ou propénylène. DESCRIPTION DE L'INVENTION L'invention a pour objet la tulathromycine potentialisée par un composé de formule I pour son utilisation dans le traitement, la métaphylaxie et la prévention d'une infection 30 microbienne. Elle a ainsi pour objet une association de la tulathromycine et d'un composé répondant à la formule I suivante : 3048612 14 R1, R2, R3 (I) dans laquelle R1, R2, R3 représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre, H, OH un groupe (C i-C6)alkyle, (C2-C6)alcényle, (C1-C6)halogénoalkyle, (C -C6)alcoxy, (C2- C6)alcénoxy, (C -C6)halogénoalcoxy, -0-00-(C1-C6)alkyle ; 5 A représente un hétéroatome ou un groupe R-(Het)-R' ou -(Het)-R où R, R', représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre, un groupe (Ci-C4)alcanediyle éventuellement substitué par des radicaux alkyles en C1-C4 et Het représente un hétéroatome, A représente avantageusement un groupe -(Het)-R en un ratio massique, composé de formule (I) : tulathromycine, variant de 8 :1 à 1 :10. 10 Le ratio massique composé de formule (I) : tulathromycine varie plus avantageusement de 4 :1 à 1 :10, plus avantageusement de 1 :1 à 1 :10, encore plus avantageusement de 1 :1 à 1 :5. Cela signifie que la dose administrée en composé de formule (I) est du même ordre 15 de grandeur, que celui de la tulathromycine. Le ratio massique correspond au ratio des doses en mg/kg du composé et de la tulathromycine à administrer à l'homme ou l'animal. D'une manière surprenante, il a été constaté que l'effet de potentialisation diminue lorsque la dose en composé selon l'invention (ou mélange de composés selon l'invention) 20 augmente. Cet effet de potentialisation peut réapparaître à la CMI du composé seul, mais cela n'est pas l'objet de l'invention. Dans le cadre de la présente invention, in vitro, la concentration en composé inactif, à laquelle on observe un effet de potentialisation, est très éloignée du seuil des propriétés antimicrobiennes (CMI), lorsque des propriétés antimicrobiennes sont observées. Par très 25 éloignée, on entend que la concentration in vitro est au moins 10 fois, avantageusement au moins 20 fois, plus avantageusement au moins 50 fois, encore plus avantageusement au moins 100 fois inférieure à la CMI. En particulier, sur une souche A, pathogène qui induit notamment l'infection microbienne considérée, la concentration en composé (I) répond avantageusement à 30 l'équation suivante : [C] 1010 UFC/ml) sont étalés sur une boîte de Mueller Hinton contenant une concentration 10 d'huile égale à 0,5 / 1 / 2 / 4 fois la CMI de la tulathromycine. Après 48h d'incubation on observe la présence ou non de colonies susceptibles d'être des mutants résistants. On a constaté que l'utilisation de cinéole permettait également de diminuer l'apparition de bactéries résistantes. Les résultats sont reportés dans les tableaux suivants : CMI 4 2 1 0,5 tulathromycine envahie envahie envahie envahie Tulathromycine + lmg/L cinéole envahie envahie envahie envahie Tulathromycine + 5mg/L cinéole 0 0 envahie envahie 15 Tableau 4 - Souche 8147 / Staphylococcus - solvant éthanol Alors que la tulathromycine seule sur le S. aureus entraine l'apparition d'innombrable mutants, l'ajout de cinéole (5mg/L) à la tulathromycine n'entraine plus l'apparition des mutants. CMI 4 2 1 0,5 tulathromycine 0 envahie envahie envahie Tulathromycine + lmg/L cinéole 0 2 colonies envahie envahie Tulathromycine + 5mg/L cinéole 0 1 colonie envahie envahie Tableau 5 - Souche 8146 / Staphylococcus - solvant éthanol 20 Là encore le cinéole, entraine la diminution d'apparition de mutants. REVENDICATIONS1. Association de tulathromycine et d'un composé de formule I pour son utilisation dans le traitement, la métaphylaxie ou la prévention d'une infection microbienne, le composé répond 5 à la formule I suivante le\444 R1, R2, R (I) dans laquelle R1, R2, R3 représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre, H, OH un groupe (C1-C6)alkyle, (C2-C6)alcényle, (C1-C6)halogénoalkyle, (Ci-C6)alcoxy, (C2- 10 C6)alcénoxy, (C1-C6)halogénoalcoxy, -0-00-(C1-C6)alkyle ; A représente un hétéroatome ou un groupe --(Het)-R' ou R-(Het)-R' où R, R', représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre, un groupe (Ci-C4)alcanediyle éventuellement substitué par des radicaux alkyles en C1-C4 et Het représente un hétéroatome ; 15 en un ratio massique, composé de formule (I) : tulathromycine, variant de 8 :1 à 1 :10, et en ce que l'infection microbienne est induite notamment par un pathogène de souche A et que sur cette souche A, la concentration en composé (I) répond à l'équation suivante : [C] 2. Association pour son utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que dans la 25 formule (I) R2 et R3 représentent chacun H, R1 représente un groupe (Ci-C6)alkyle, et A représente l'hétéroatome O un groupe R-O-R' ou -0-R' où R, R', représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre, un groupe (Ci-C2)alcanediyle éventuellement substitué par des radicaux alkyles en C1-C4. 3048612 26 3. Association pour son utilisation selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que le composé de formule (I) est le cinéole. 4. Association pour son utilisation selon l'une des revendications précédentes dans laquelle le ratio massique composé de formule (I) : tulathromycine varie de 4 :1 à 1 :10, avantageusement de 1 :1 à 1 :10, plus avantageusement de 1 :1 à 1 :5. 5. Association pour son utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le composé de formule (I) est adapté pour une administration par voie systémique.10