FR 3048361 A1 20170908 FR 1651717 A 20160301 1 COMPOSITIONS POUR LE TRAITEMENT DES CANDIDOSES DOMAINE DE L'INVENTION La présente invention concerne l'utilisation combinée de fortes teneurs en lactobacilles avec un composé soufré en des teneurs spécifiques pour le traitement, notamment en première intention, des candidoses et des candidoses récidivantes. La combinaison selon l'invention peut remplacer le traitement par un antifongique chimique. L'invention est par exemple adaptée pour le traitement notamment en première intention, des candidoses vaginales et des candidoses vaginales récidivantes. Chez une femme saine, la flore urogénitale comprend près de 50 espèces différentes de microorganismes. Parmi ces microorganismes, 95 % de la population est constituée de diverses souches de lactobacilles, aussi appelées « bacilles de Dôderlein ». Ces lactobacilles jouent un rôle de protection contre les pathogènes par divers mécanismes : production de peroxyde d'hydrogène, production d'acide lactique, production de bactériocines, inhibition de l'adhésion et de l'expansion des pathogènes. En particulier, ces lactobacilles maintiennent un pH acide par la production d'acide lactique à partir du glycogène présent dans le mucus vaginal. Ainsi, la croissance de nombreux pathogènes du microbiote vaginal tels que Gardnerella vaginalis, Prevotella bivia, Neisseria gonorrhoeae, Mycoplasme, et Mobiluncus est inhibée. Le microbiote vaginal normal est ainsi principalement composé de lactobacilles formant un biofilm protecteur à la surface de la muqueuse. Les lactobacilles les plus fréquemment identifiés dans le vagin sont notamment Lactobacillus crispatus, Lactobacillus jensenii, Lactobacillus vaginalis, Lactobacillus iners et Lactobacillus gasseri. La candidose vulvovaginale (CVV) est une infection mycosique liée à un excès de croissance de champignons à partir d'un microbiote normal. 85-95 % des CVV sont liées à Candida albicans. La candidose vulvovaginale touche 70-75 % des femmes en période d'activité génitale au moins une fois dans leur vie (1) ; environ 40-50 % d'entre elles présenteront un deuxième épisode. L'incidence de la candidose vulvovaginale récidivante (définie par la survenue d'au moins 4 épisodes par an, dont deux prouvés par l'examen mycologique) a été estimée à 5-8 %. Cette affection bénigne a un impact très négatif sur la qualité de vie des patientes et engendre des dépenses de santé importantes. Traiter une telle pathologie est difficile du fait de la pathogénèse multifactorielle de cette affection. 3048361 2 L'apparition d'une CVV et sa propension à récidiver sont un réel problème de santé publique et représente des coûts de santé importants. Les traitements actuels contre les CVV, basés sur l'utilisation d'antifongiques, sont souvent associés à des effets secondaires tels que le développement de vaginoses bactériennes et induisent de nombreuses récidives 5 (2). Les nouveaux développements thérapeutiques doivent s'orienter vers une prise en compte plus large de la pathologie en tenant compte de son environnement spécifique et des causes de son apparition. Ainsi, depuis quelques années, les caractéristiques du microbiote vaginal sont particulièrement étudiées. Ce microbiote est dominé par le genre Lactobacillus, 10 présent chez environ 70 % des femmes dont chaque espèce individuelle constitue 99 % des ribotypes observés chez une femme (3). Des produits probiotiques ont été développés et testés pour prévenir les récidives aux CVV (4, 5, 6) via le rétablissement de l'équilibre du microbiote vaginal. L'action de ces produits ne se situe pas directement contre le pathogène responsable de la pathologie mais sur la prévention d'une nouvelle dysbiose pouvant être 15 induite par le traitement antifongique lui-même ou par d'autres éléments extérieurs. L'administration de lactobacilles 'bénéfiques' par voie orale ou vaginale a été décrite pour promouvoir la santé vaginale. En particulier, les demandes de brevet WO 84/04675, WO 2000/035465, US 2002/0044926 et WO 2006/045475 décrivent l'administration par voie orale ou vaginale de bactéries lactiques pour promouvoir la santé vaginale et pour prévenir 20 les récidives de la candidose vulvovaginale. Les lactobacilles préférés sont les Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus crispatus et Lactobacillus vaginalis. Les brevets US 6,093,394, US 6,468,526 et US 7,807,440, ainsi que la demande de brevet US 2010/0151026, décrivent l'administration de souches spécifiques de Lactobacillus crispatus. 25 Ces lactobacilles peuvent être administrés sous forme lyophilisée ou en solution, et éventuellement en combinaison avec d'autres agents actifs. La demande de brevet W02014/009349 décrit l'utilisation de thiosulfate pour potentialiser l'effet anti-pathogène des lactobacilles. Dans cette demande, du thiosulfate est ajouté dans le milieu de culture du lactobacille, avant lyophilisation, à une concentration allant 30 de 1 g/L à 113 g/L. Cet ajout permet de potentialiser l'effet anti-pathogène des lactobacilles, suite à une étape de culture préalable. Dans tous les essais, les inocula sont préparés par le mode opératoire suivant : 3048361 3 Préparation des inocula : o Produit probiotique : on place 0,2 g du lyophilisat dans 20 ml de bouillon MRS à l'étuve à 37°C pendant 48 h ; o Souche pathogène : on place 0,2 ml dans 20 ml de bouillon Sabouraud à 25°C 5 pendant 48 h ; - Mise en contact des inocula : on place 5 ml de la souche pathogène avec 5 ml de la souche probiotique ; - Suivi : détermination numéraire du pathogène et du probiotique à TO, T4 h, T24 h et T28 h. La numération des souches de lactobacilles reste constante et celle du 10 pathogène diminue. Cette demande démontre que l'ajout de thiosulfate dans le milieu de culture (avant lyophilisation de la souche de lactobacille) à une concentration allant de 1 g/L à 113 g/L, permet de potentialiser l'effet anti-pathogène de ces lactobacilles, qui ont été préalablement préparés par une pré-culture pendant 48 h avant mise en contact avec le pathogène. Sans 15 cette étape de pré-culture, aucune inhibition n'est observable dans le temps suivi de co- culture. Cette demande démontre que l'ajout de thiosulfate permet d'envisager l'utilisation des lactobacilles potentialisés pour recoloniser le microbiote vaginal et empêcher la repousse des agents pathogènes et ainsi les récidives. Cette demande ne permet pas d'envisager une 20 utilisation des lactobacilles potentialisés, formulés dans une composition pharmaceutique, en traitement de première intention des CVV, au vu du besoin de pré-culture de la souche avant utilisation qui traduit une non-adaptation de la composition à agir immédiatement sur le pathogène (et ainsi à exercer une action curative comme l'exercerait un antifongique) mais au contraire une adaptation de la composition pour exercer un effet de barrière à une 25 recolonisation par le pathogène après un traitement antifongique. Dans cette demande, les lactobacilles sont utilisés en une concentration allant de 107 à 1010 UFC/g de composition. Malgré cette utilisation dans la prévention des récidives aux CVV, l'utilisation de 30 souches de lactobacilles en première intention en substitution des antifongiques est non admise, notamment au vu que la proportion des lactobacilles ne varie pas au cours du développement du pathogène et de la pathologie. 3048361 4 De manière surprenante, il a été constaté qu'une composition pharmaceutique comprenant une concentration spécifique en lactobacilles et en composé soufré pouvait être utilisée en traitement de première intention des candidoses et des candidoses récidivantes. L'invention décrit en particulier les candidoses vulvovaginales et les candidoses 5 vulvovaginales récidivantes. De plus, les traitements actuels chimiques (antibiotiques et antifongiques) ne respectent pas l'équilibre du microbiote et peuvent favoriser l'émergence d'effets secondaires tels que le développement de vaginoses bactériennes et de nombreuses récidives (2). Cette invention permettra par sa composition de prévenir les risques de récidives. L'invention développée 10 permet donc par l'utilisation d'une souche probiotique d'inhiber spécifiquement des pathogènes responsables de ces pathologies, tout en respectant le microbiote lactobacillaire caractéristique de la femme asymptomatique (2). L'utilisation d'un produit biologique naturel, à l'inverse de produits chimiques, ne génère pas de dysbiose imputable aux traitements actuels et favorise ainsi la prévention des récidives. 15 EXPOSE DE L'INVENTION L'invention porte sur l'utilisation d'une concentration spécifique en lactobacilles (concentration > 2.1010 UFC par prise), hors des utilisations usuelles de ces produits, 20 associée à un composé soufré. Cette invention nous permet de proposer un traitement en première intention des candidoses avec une posologie équivalente aux antifongiques actuels. DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION La présente invention a pour objet une composition pharmaceutique comprenant i) à 25 titre d'actif thérapeutique plus de 2.1010 UFC de lactobacilles et ii) un composé soufré en tant que produits de combinaison pour son utilisation en tant que traitement de première intention des candidoses et des candidoses récidivantes. L'invention décrit en particulier les candidoses vulvovaginales et les candidoses vulvovaginales récidivantes. 30 Définitions Le terme « candidose » désigne une infection fongique causée par des levures du genre Candida. Candida albicans, l'espèce la plus fréquente, fait partie de la flore habituelle de l'oro-pharynx, du tube digestif, et peut aussi être présent en faible quantité dans le 3048361 5 microbiote vaginal normal. La candidose vulvovaginale est très fréquente et peut être sujette à plusieurs récidives. Par « traitement de première intention des candidoses et des candidoses récidivantes », on entend un traitement thérapeutique, avantageusement curatif, présentant 5 des propriétés fongicides permettant de traiter ces candidoses, et ainsi concrètement une destruction des pathogènes à l'origine de l'infection. Dans le cas présent, le traitement présente également des propriétés fongistatiques, caractérisées par l'inhibition de la croissance desdits pathogènes. Selon l'invention, les pathogènes appartiennent au genre Candida, et 10 préférentiellement aux espèces de Candida albicans, Candida glabrata, tout préférentiellement à l'espèce des Candida albicans. Candida albicans est l'espèce de levure la plus importante et la plus connue du genre Candida. Elle provoque des infections fongiques (candidose), par exemple au niveau des muqueuses gynécologiques. A titre de candidoses, on peut citer : 15 - Les candidoses cutanéomuqueuses, en particulier o les candidoses au niveau bucco-digestif : les candidoses buccales (muguet, glossite, stomatite, langue noire villeuse), les candidoses digestives (oesophagite, gastro-entérite, colite, anite), o les candidoses génitales : vulvite et vulvo-vaginite, balanite et méatite 20 o les candidoses cutanées : intertrigo des grands plis (plis inguinaux, pli interfessier, plis sous-mammaires et replis abdominaux, creux axillaires, dermite fessière des nourrissons), intertrigo des petits plis (espaces interdigitaux des mains) o les candidoses des ongles : onyxis, onycholyse 25 - Les candidoses oesophagiennes - Les candidoses systémiques Le terme « lactobacilles » désigne l'ensemble des bactéries du genre Lactobacillus, bactéries à gram positif, immobiles, de formes et dimensions variables, et aéro-anaérobies 30 facultatives. La plupart des lactobacilles convertissent le lactose et d'autres sucres simples en acide lactique. Dans l'exemple du traitement des CVV, les lactobacilles colonisent le vagin et constituent un élément important du microbiote vaginale. La présente invention peut ainsi 3048361 6 être relative aux lactobacilles constituant le microbiote vaginal, en particulier Lactobacillus casei, et Lactobacillus rhamnosus. Le terme « UFC » désigne l'unité de mesure généralement reconnue par l'homme du métier pour quantifier les bactéries capables de fonder une colonie et signifie précisément 5 « Unité Formant Colonie ». Il est exprimé par rapport au poids total de la composition pharmaceutique. Le terme « composition pharmaceutique » désigne le traitement thérapeutique administré au patient. Dans la généralité, la « composition pharmaceutique » correspondra à une dose du médicament. Toutefois, ne sortiraient pas du cadre de l'invention, des unités 10 distinctes prises au même moment et qui de manière cumulée contiendraient les produits de l'invention dans les teneurs revendiquées. Dans le cadre de la présente description, les teneurs sont données pour une composition correspondant à une dose, et pourront être adaptées dans les autres cas. Le terme « produits de combinaison » signifie que les lactobacilles et le composé 15 soufré particulièrement le thiosulfate sont formulés soit dans une même composition, soit dans deux compositions distinctes administrées au patient de manière concomitante, c'est-à-dire au même moment dans la journée. Tout intervalle de valeurs désigné par l'expression « entre a et b » représente le domaine de valeurs allant de plus de a à moins de b (c'est-à-dire bornes a et b exclues) 20 tandis que tout intervalle de valeurs désigné par l'expression « de a à b » signifie le domaine de valeurs allant de a à b (c'est-à-dire incluant les bornes strictes a et b). Sauf indication contraire, tous les pourcentages sont des pourcentages en poids. D'une manière surprenante, il a été découvert que lorsque ces lactobacilles sont utilisés 25 à une concentration supérieure de 2.1010 UFC, en présence d'un composé soufré dans une composition pharmaceutique, cette composition avait la capacité d'inhiber rapidement et spécifiquement des levures du genre Candida. Ainsi, contrairement à toute attente, à cette concentration, les lactobacilles, potentialisés par un composé soufré, peuvent être utilisés à titre d'actif thérapeutique ayant une action antifongique. Concrètement, il est possible de 30 proposer, en lieu et place d'un antifongique chimique, les compositions selon l'invention dans la prise en charge du traitement des candidoses, telles que les candidoses vulvovaginales et les candidoses vulvovaginales récidivantes. Le traitement peut même consister en la seule administration des compositions selon l'invention, sans administration, y compris préalable, 3048361 7 d'un antifongique chimique tel que le fluconazole ou le ketoconazole. Les antifongiques chimiques conduisent à un déséquilibre du microbiote par exemple. Les compositions selon l'invention peuvent donc remplacer les antifongiques habituellement administrés dans la prise en charge de ces conditions. L'invention a donc également pour objet une composition selon 5 l'invention pour son utilisation en substitution à un antifongique chimique dans le traitement des candidoses, telles que les candidoses vulvovaginales et les candidoses vulvovaginales récidivantes. La composition selon l'invention peut être utilisée pour inhiber en moins de 24 heures les pathogènes du genre Candida, en particulier Candida albicans ou Candida glabrata. 10 Selon l'invention, l'actif thérapeutique ayant une action antifongique est une association de lactobacilles et d'un composé soufré. Cette association pourra prendre la forme d'une seule composition (utilisation simultanée), de deux compositions administrées en même temps (utilisation combinée). 15 Le composé soufré peut être choisi dans une large liste de composés, tant que ceux-ci sont adaptés à une administration chez l'homme ou l'animal. A titre de composé soufré, on pourra notamment lister : - Les sulfates, thiosulfates et polythionates (tels que les tétrathionates), en particulier alcalins (sodium, potassium) ; 20 - Les acides aminés soufrés, en particulier la cystéine, la méthionine, l'homocystéine ; leurs dérivés oxydés (par exemple cystéine-S-sulfonate, méthionine sulfoxyde) ; les acides aminés soufrés reliés entre eux par un pont disulfure (par exemple la cystine) ; les acides aminés soufrés reliés par un pont disulfure à un thiosulfate, à un sulfate, à un thiol ; les dérivés de ces composés dans lesquels la fonction -NH- 25 de l'acide aminé est remplacé par une fonction -O- ou -N(CH3)- ; - Les acides aminés condensés (avantageusement jusqu'à 5 acides aminés, plus avantageusement jusqu'à 3 acides aminés) comprenant au moins un acide aminé soufré tel que défini précédemment (par exemple le glutathion) ; - Les vitamines comprenant dans leur structure chimique du soufre, telles que la 30 vitamine B1 ou la vitamine B8 ; - Et leurs mélanges. 3048361 8 Lorsque le composé soufré est du thiosulfate, la composition comprend 15 à 300 mg de thiosulfate. La quantité en composé soufré autre que le thiosulfate sera déterminée par l'homme du métier sur cette référence pour fournir une quantité équivalente de soufre. Selon un aspect de l'invention, le composé soufré est un thiosulfate, qui peut être choisi 5 parmi le thiosulfate de sodium ou le thiosulfate de potassium. Préférentiellement, le thiosulfate de sodium est utilisé. Le thiosulfate de sodium est constitué d'ions sodium et d'ions thiosulfate. La composition comprend avantageusement 15 à 300 mg de thiosulfate, plus avantageusement 30 à 300 mg, encore plus avantageusement 45 à 120 mg, encore plus 10 avantageusement 45 à 80 mg, et idéalement de 60 mg. A une teneur inférieure à 15 mg, la quantité de thiosulfate n'est pas suffisante pour potentialiser les lactobacilles. A une teneur supérieure à 300 mg, le thiosulfate commence à exercer une action d'inhibition délétère sur les lactobacilles endogènes ou exogènes. La composition pharmaceutique comprend plus de 2.1010 UFC de lactobacilles, 15 avantageusement plus de 5.1010 UFC de lactobacilles, encore avantageusement plus de 1.1011 UFC de lactobacilles. La quantité en lactobacilles varie avantageusement de 2.1010 à 1. 1012 UFC, plus avantageusement de 5.1010 à 1.1012 UFC, plus avantageusement de 1.1011 à 1.1012 UFC. A une teneur inférieure à 2.1010 UFC de lactobacilles, on n'observe pas d'effet 20 d'inhibition des pathogènes sans lyse en culture préalable de la souche ; ce qui ne permet pas d'envisager une action en traitement, en particulier en première intention. Ces teneurs correspondent à la généralité d'une composition correspondant à une dose, et pourront être adaptées dans les autres cas. La composition est avantageusement préparée à partir d'un lyophilisat comprenant les 25 lactobacilles et le composé soufré, avantageusement le thiosulfate. Dans une première variante, le composé soufré, avantageusement le thiosulfate, est introduit lors de la lyophilisation des lactobacilles. Avantageusement, la composition comprend de 250 à 2500 mg de lyophilisat, plus 30 avantageusement de 500 à 1500 mg de lyophilisat ; le lyophilisat comprenant les lactobacilles et le composé soufré, avantageusement le thiosulfate. 3048361 9 L'homme du métier, spécialiste de la lyophilisation, saura adapter la quantité de composé soufré ajoutée avant lyophilisation pour obtenir la quantité désirée dans la poudre finale obtenue après lyophilisation. 5 Dans une deuxième variante, les lactobacilles sont lyophilisés en absence de composé soufré, avantageusement de thiosulfate, lequel est introduit ultérieurement dans la composition pharmaceutique ou est co-administré avec la composition comprenant le lyophilisat de lactobacilles. Avantageusement, la composition pharmaceutique comprend 10 - de 250 à 2500 mg de lyophilisat, plus avantageusement de 500 à 1500 mg de lyophilisat ; le lyophilisat comprenant les lactobacilles ; - de 15 à 300 mg de thiosulfate, plus avantageusement de 30 à 300 mg, encore plus avantageusement 45 à 120 mg, encore plus avantageusement 45 à 80 mg, et idéalement de 60 mg de thiosulfate. 15 Dans une troisième variante, les première et deuxième variantes sont combinées : une partie du composé soufré est introduit lors de la lyophilisation, l'autre partie lors de la formulation de la composition pharmaceutique. L'homme du métier sera adapter les proportions dans le respect des teneurs décrites précédemment dans les première et 20 deuxième variantes. Selon un aspect préféré de l'invention, les lactobacilles sont des Lactobacillus rhamnosus et/ou des Lactobacillus crispatus et/ou Lactobacillus casei et/ou Lactobacillus vaginalis. Avantageusement, les lactobacilles sont des Lactobacillus rhamnosus et/ou des 25 Lactobacillus crispatus et/ou Lactobacillus casei Les souches préférées sont la souche Lcr35® (7). De préférence, les lactobacilles sont sous forme lyophilisée. La souche peut être le seul élément lyophilisé de la composition, mais de préférence la souche est lyophilisée dans un milieu comprenant des constituants additionnels, qui seront ajoutés avant ou après l'étape de 30 lyophilisation. Dans une variante le composé soufré peut être ajouté avant lyophilisation. Dans une autre variante, le composé soufré est ajouté après lyophilisation lors de la préparation de la composition pharmaceutique. 3048361 10 Selon un autre aspect particulier de l'invention, la composition pharmaceutique comprend de plus une matrice de conservation et/ou des excipients bien connus de l'homme du métier, et optionnellement d'autres principes actifs ayant une action complémentaire. En particulier, cette composition peut comprendre les principes actifs suivants : des 5 hormones (estriol, progestérone...), des agents anti-inflammatoires. L'homme du métier saura déterminer quels sont les principes actifs qui peuvent être avantageusement couplés aux lactobacilles. Cette composition comprend également, selon un aspect spécifique de l'invention, plusieurs souches de lactobacilles. Ces compositions pharmaceutiques sont avantageusement formulées pour une 10 administration par voie vaginale, orale ou topique, plus avantageusement vaginale pour les candidoses vulvovaginales. En particulier la galénique utilisée sera sous forme de gélules, de comprimés, de crèmes, de suspensions liquides ou huileuses, ou tout autre dispositif médical approprié. Avantageusement, la galénique utilisée sera sous forme de gélules ou de comprimés. L'homme du métier sera adapter la forme appropriée à l'effet thérapeutique 15 escompté. La composition pharmaceutique selon l'invention est avantageusement à libération immédiate, en particulier un comprimé ou une gélule à libération immédiate. Les modes d'administration, les posologies et les formes galéniques optimales des composés et compositions selon l'invention peuvent être déterminés selon les critères 20 généralement pris en compte dans l'établissement d'un traitement pharmaceutique adapté à un patient, comme par exemple l'âge ou le poids corporel du patient, la gravité de son état général, la tolérance au traitement, les effets secondaires constatés. Ce patient pourra être l'Homme ou un animal, avantageusement l'Homme. 25 L'invention a également pour objet une composition pharmaceutique comprenant plus de 2.1010 UFC de lactobacilles et 15 à 300 mg de thiosulfate. L'invention a également pour objet une composition pharmaceutique comprenant plus de 2.1010 UFC de lactobacilles et un composé soufré. La quantité en composé soufré, autre que le thiosulfate, sera adaptée sur cette base, en 30 équivalent soufre. Les lactobacilles et le thiosulfate, réciproquement le composé soufré, sont avantageusement tels que décrits précédemment. 3048361 11 La composition pharmaceutique comprend avantageusement 30 à 300 mg, plus avantageusement 45 à 120 mg, encore plus avantageusement 45 à 80 mg, et idéalement 60 mg de thiosulfate. La composition pharmaceutique comprend avantageusement plus de 5.1010 UFC de 5 lactobacilles, encore avantageusement plus de 1.1011 UFC de lactobacilles. Dans la composition, la teneur en lactobacilles varie avantageusement entre 2.1010 à 1.1012 UFC, plus avantageusement de 5.1010 à 1.1012 UFC, plus avantageusement de 1.1011 à 1.1012 UFC. La composition pharmaceutique comprend avantageusement : 10 - de 250 à 2500 mg de lyophilisat, plus avantageusement de 500 à 1500 mg de lyophilisat ; le lyophilisat comprenant les lactobacilles et la composition comprend plus de 2.1010 UFC de lactobacilles ; - de 15 à 300 mg de thiosulfate, plus avantageusement de 30 à 300 mg, encore plus avantageusement 45 à 120 mg, encore plus avantageusement 45 à 80 mg, et 15 idéalement de 60 mg de thiosulfate La composition pharmaceutique est avantageusement à libération immédiate, en particulier un comprimé ou une gélule à libération immédiate. Dans un mode de réalisation particulier, le comprimé à libération immédiate selon 20 l'invention est combiné avec une formulation à libération prolongée comprenant elle aussi des lactobacilles. Ainsi, l'invention a également pour objet un comprimé multicouche comprenant : - au moins une couche à libération immédiate comprenant, par rapport au poids total de l'ensemble des couches à libération immédiate, plus de 2.1010 UFC de lactobacilles 25 et 15 à 300 mg de thiosulfate (ou une quantité équivalente d'un composé soufré) ; - au moins une couche à libération prolongée, comprenant, par rapport au poids total de l'ensemble des couches à libération prolongée, de 1.105 à 1.1010 UFC de lactobacilles. 30 La ou les couches à libération prolongée peuvent également contenir du thiosulfate, avantageusement en une teneur combinée de 60 mg par composition. 3048361 12 La ou les couches à libération prolongée comprennent avantageusement un excipient approprié pour conférer audit comprimé des propriétés de muco-adhésion à la paroi vaginale et de libération prolongée. Des exemples d'excipients pouvant convenir sont décrits dans Advanced Drug Delivery 5 System Reviews, 57 (2005), 1692-1712. L'excipient peut être choisi parmi le chitosan et ses dérivés, les pectines, les polyéthylènes glycols, l'alginate de sodium, les acides polyacryliques, les dérivés cellulosiques tels que la carboxyméthylcellulose sodique, l'hydroxypropylméthylcellulose ou la cellulose microcristalline, les gommes, les Carbopol® et leurs combinaisons. De préférence, le comprimé selon la présente invention comprend un 10 dérivé cellulosique, en particulier de l'hydroxypropylméthylcellulose (HPMC). Dans le cadre de l'invention, on préfère utiliser de l'hydroxypropylméthylcellulose de haute viscosité. Ainsi, on utilise avantageusement de l'hydroxypropylméthylcellulose ayant une viscosité dynamique supérieure à 10 000 mPa.s, avantageusement comprise entre 11 000 mPa.s et 21 000 mPa.s, plus avantageusement d'environ 15 000 mPa.s. 15 La viscosité de cet excipient bien connue est mesurée selon la norme européenne ou américaine pour une solution aqueuse à 2 % (m/v) d'hydroxypropylméthylcellulose à 20°C. La couche à libération prolongée comprend généralement de 10 â 40 °/0 en poids par rapport au poids total de ladite couche d'un excipient conférant au comprimé ses propriétés de muco-adhésion à la paroi vaginale et de libération prolongée. De préférence, la couche 20 comprend de 10 à 30 % en poids par rapport au poids total de ladite couche dudit excipient, plus avantageusement de 10 à 25 % en poids, encore plus avantageusement de 10 à 20 % en poids, voire elle comprend 10 % en poids dudit excipient. Ledit excipient est avantageusement l'HPMC. 25 La ou les couches à libération immédiate comprennent avantageusement les composés décrits précédemment pour la composition pharmaceutique, aux teneurs indiquées précédemment. L'invention a également pour objet une composition pharmaceutique pour 30 administration par voie vaginale caractérisée en ce qu'elle est sous la forme d'un produit de combinaison comprenant i) une première composition pharmaceutique comprenant à titre d'actif thérapeutique plus 2.101° UFC de lactobacilles et ii) une deuxième composition 3048361 13 pharmaceutique comprenant de 15 mg à 300 mg de thiosulfate pour son utilisation séparée, simultanée ou décalée dans le temps L'invention a également pour objet une méthode de traitement des candidoses, avantageusement des candidoses vulvovaginales et des candidoses vulvovaginales 5 récidivantes, comprenant l'administration, avantageusement en première intention, à un patient en ayant besoin, d'une composition pharmaceutique, telle que décrite précédemment. Le traitement des candidoses, avantageusement des candidoses vulvovaginales et des candidoses vulvovaginales récidivantes, se fera de manière préférée par administration d'une dose jour. La prise pourra éventuellement être renouvelée, par exemple 2, 3, 4 ou 5 jours 10 après la prise de la première dose. Le traitement des candidoses, avantageusement des candidoses vulvovaginales, et de leur récidive pourra consister en : - L'administration en première intention de la composition selon l'invention, en une dose, éventuellement renouvelée, par exemple 2, 3, 4 ou 5 jours après la prise de la 15 première dose - L'administration en prévention d'une récidive d'une composition comprenant des lactobacilles potentialisés par du thiosulfate en une concentration de 107 à 1010 UFC/g. 20 DESCRIPTION DES FIGURES Figure 1. Impact d'une concentration standard (W02014/009349 vs invention) Perte de la viabilité de C. albicans (log10(UFC/m1) en fonction du temps de co-culture (heures) témoin C. albicans (1 g/L de thiosulfate) ; formulation A décrite dans WO 2014/009349 ; Lcr350 à une concentration de 1011 UFC + 1 g/L de thiosulfate ; Lcr35® à une concentration de 10" UFC + 2 g/L de thiosulfate Figure 2. Effet de l'association de L. rhamnosus Lcr35® à 1011 UFC + thiosulfate à diverses concentrations 30 Perte de la viabilité de C. albicans (1og10(UFC/ml) en fonction du temps de co-culture (heures) témoin C. albicans (1 g/L de thiosulfate) ; 25 3048361 14 Lcr35® à une concentration de 1011 UFC + 0 g/L de thiosulfate ; Lcr35® à une concentration de 1011 UFC + 1 g/L de thiosulfate ; Lcr35® à une concentration de 1011 UFC + 2 g/L de thiosulfate ; Lcr35® à une concentration de 1011 UFC + 5 g/L de thiosulfate ; 5 Lcr35® à une concentration de 1011 UFC + 7,5 g/L de thiosulfate ; 11111111111111 1111-11111VO Lcr35® à une concentration de 1011 UFC + 10 g/L de thiosulfate Figure 3. Effet de l'association de L. rhamnosus Lcr35® à diverses concentrations + thiosulfate à 2 g/L 10 Perte de la viabilité de C. albicans (log10(UFC/m1) en fonction du temps de co-culture (heures) témoin C. albicans (2 g/L de thiosulfate) ; 1:=1:1 Lcr35® à une concentration de 1.1011 UFC + 2 g/L de thiosulfate ; ÉMI Lcr35® à une concentration de 7,5.1010 UFC + 2 g/L de thiosulfate ; Lcr350 à une concentration de 5.1010 UFC + 2 g/L de thiosulfate ; 15 Lcr35® à une concentration de 2,5.1010 UFC + 2 g/L de thiosulfate Figure 4. Effet de l'association de Lactobacillus spp. à 1011 UFC + thiosulfate à 2 g/L sur Candida albicans. Perte de la viabilité de C. albicans (1og10(UFC/m1) en fonction du temps de cc-culture (heures) 20 témoin C. albicans (2 g/L de thiosulfate) ; Lcr35® à une concentration de 1.1011 UFC + 2 g/L de thiosulfate ; aE3 L. casei à une concentration de 1.1011 UFC + 2 g/L de thiosulfate ; L. crispatus à une concentration de 1.1011 UFC + 2 g/L de thiosulfate 25 Figure 5. Effet de l'association de L. rhamnosus Lcr35® à 1011 UFC + thiosulfate à 2 g/L sur Candida spp. 5A : Perte de la viabilité de C. albicans (log1o(UFC/m1) en fonction du temps de co-culture (heures) 3048361 15 témoin C. albicans (2 g/L de thiosulfate) ; Lcr35® à une concentration de 1.1011 UFC + 2 g/L de thiosulfate 5B : Perte de la viabilité de C. albicans clinique (loglo(UFC/ml) en fonction du temps de coculture (heures) 5 témoin C. albicans clinique (2 g/L de thiosulfate) ; Lcr35® à une concentration de 1.1011 UFC + 2 g/L de thiosulfate 5C : Perte de la viabilité de C. glabrata (log1o(UFC/m1) en fonction du temps de co-culture (heures) témoin C. glabrata (2 g/L de thiosulfate) ; 10 Lcr35® à une concentration de 1.1011 UFC + 2 g/L de thiosulfate Figure 6. Effet de l'association de L. rhamnosus Lcr35® à 1011 UFC + de molécules soufrées à 2 g/L sur Candida albicans. Perte de la viabilité de C. albicans (logio(UFC/ml) en fonction du temps de co-culture (heures) 15 témoin C. albicans (2 g/L de thiosulfate) ; Lcr35® à une concentration de 1.1011 UFC + 2 g/L de thiosulfate ; El] Lcr35® à une concentration de 1.1011 UFC + 2 g/L de cystéine ; EXEMPLES 20 Exemple "I effet de l'association de L. rhamnosus Lcr35® + thiosulfate sur des pathogènes de différentes espèces de Candida Matériel et Méthode : Après une pré-culture dans un bouillon Sabouraud, le pathogène est placé à une numération 25 d'environ 1.108 UFC/ml dans 30 ml de SVF (milieu permettant de simuler le milieu vaginal - pH 4,2) et est mis en contact direct avec les lactobacilles sous forme lyophilisée suite à une étape de fermentation et de lyophilisation + thiosulfate ou cystéine (sans pré-culture afin de s'approcher des conditions d'utilisation in vivo). La numération du pathogène est suivi à TO, T12 h, T16 h, T20 h, T24 h par numération sur gélose, et, en plus, à T36h pour la figure 3. 3048361 16 Les résultats sont exprimés en diminution logarithmique entre la numération initiale (TO) et le temps de suivi. L'activité antifongique est établie comme spécifique à partir d'une diminution de 3 log. Un témoin de viabilité du pathogène est réalisé en parallèle dans les mêmes conditions sans présence de composés de l'invention. On désigne par « formulation A de l'invention W02014/009349» une formulation de la souche L. rhamnosus Lcr35® telle que préparée par le procédé décrit dans l'exemple 4 de la demande W02014/009349, c'est-à-dire en en présence de 1139/1 de thiosulfate de sodium lors de la lyophilisation. Dans les exemples qui suivent, la formulation A comprend 1.109 UFC de L. rhamnosus Lcr35®. 10 Quatre concentrations en lactobacilles ont été testées : 2,5.1010 UFC, 5.1010 UFC, 7,5.1010 UFC et > 1.1011 UFC soit par ml : 8. 109 UFC/ml, 1,6. 109 UFC/rnl, 2,5. 109 UFC/ml et 3,3. 109 UFC/ml. Ainsi que la concentration que l'on retrouve dans la formulation A de l'invention W02014/009349 de 109 UFC soit 3,3. 107 UFC/ml 15 Différentes concentrations en thiosulfate de sodium dans le milieu de culture de l'essai ont été testées : 0, 1, 2, 5, 7,5, 10, et 25 g/L Plusieurs pathogènes issus de prélèvements cliniques ont été testés : Candida albicans, Candida glabrata. Plusieurs espèces de lactobacilles ont été testées : L. crispatus, L. case!. 20 Les résultats sont reportés sur les figures 1 à 6: Conclusions Figure 1 : Que cela soit avec 1 g/L ou 2 g/L de thiosulfate l'invention permet d'avoir une inhibition supérieure à 3 log dès 20 h de co-culture alors que le produit issu de la précédente 25 invention (formulation A décrite dans WO 2014/009349) n'induit aucun effet antifongique sur le pathogène Candida albicans ATCC10231. Figure 2. Dès 1 g/L de thiosulfate (gamme testée de 1 à 10 g/L), l'invention permet d'avoir une inhibition supérieure à 3 log à partir de 20 h de co-culture. A la concentration optimale de 2 g/L, ce niveau d'effet antifongique est atteint dès 16 h de co-culture entre l'invention et le 30 pathogène Candida albicans ATCC10231. Figure 3 : Une activité antifongique de 3 log est obtenue en 24 h à partir d'une concentration en Lcr35® de 5.1010 UFC (soit 1,6.109 UFC/ml). Pour une concentration de 2,5.1010 UFC (soit 3048361 17 8.108 UFC/ml), cette activité antifongique est obtenue après 36 h de co-culture entre l'invention et le pathogène Candida albicans ATCC10231. Figure 4 : L'activité antifongique de l'invention est démontrée dès 20 h pour différentes espèces de lactobacilles pour le pathogène Candida albicans ATCC10231 en co-culture. 5 Figure 5 : L'activité antifongique de l'invention est démontrée dès 16 h pour différentes espèces du pathogène : Candida albicans ATCC10231 et deux souches cliniques : Candida albicans et Candida glabrata. Figure 6: L'activité antifongique de l'invention est démontrée dès 16 h pour différentes sources de molécules soufrées (thiosulfate, cystéine) contre le pathogène Candida albicans 10 ATCC10231 en co-culture. REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES : 1. Sobel JD. Recurrent vulvovaginal candidiasis. A prospective study of the efficacy of 15 maintenance ketoconazole therapy. N Engl J Med 1986; 315: 1455-58. 2. Fischer G. Chronic vulvovaginal candidiasis: what we know and what we have yet to learn. Australas J Dermatol, 2012 Nov;53(4):247-54. doi: 10.1111/j.1440-0960.2011.00860.x. Epub 2012 Sep 24 3. Petrova et al. Lactobacillus species as biomarkers and agents that can promote 20 various aspects of vaginal health Frontiers in Physiology. 2015. 4. Kern et al. Prenventive treatment of vulvovaginal candidosis with vaginal probiotic (Gynophilus® - Lcr Regenerans0) results of the observational study candiflore. La lettes du Gynécologue n°370 - mars 2012 5. Yue et al. The dynamic changes of vaginal microecosystem in patients with recurrent 25 vulvovaginal candidiasis; a retrospective study of 800 patients. Arch Gynecol Obstet DOl 10.1007/s00404-015-3774-2 6. Murina et al. Can Lactobacillus fermentum LF10 and Lactobacillus acidophilus LA02 in a slow-release vaginal product be useful for prevention of recurrent vulvovaginal candidiasis ? A clinical study. J Clin Gastroenterol. Volume 48, sup. 1; November/December 30 2014 7. Sophie Coudeyras et al. Taxonomie and strain-specific identification of the probiotic strain Lactobacillus rhamnosus 35 within the Lactobacillus casei group, Appl. Environ. Microbiol. doi:10.1128/AEM.02286-07, 2008. REVENDICATIONS1. Composition pharmaceutique comprenant i) à titre d'actif thérapeutique plus 2.1010 UFC de lactobacilles et ii) un composé soufré en tant que produits de combinaison pour son utilisation en tant que traitement de première intention des candidoses et des candidoses récidivantes. 2. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, pour son utilisation pour inhiber en moins de 24 heures les pathogènes du genre Candida, en particulier Candida albicans ou Candida glabrata. 3. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le composé soufré est choisi parmi : a. Les acides aminés soufrés ; leurs dérivés oxydés ; les acides aminés soufrés reliés entre eux par un pont disulfure ; les acides aminés soufrés reliés par un pont disulfure à un thiosulfate, à un sulfate, à un thiol ; les dérivés de ces composés dans lesquels la fonction -NH- de l'acide aminé est remplacé par une fonction -O- ou -N(CH3)- ; b. Les sulfates, thiosulfates et polythionates ; c. Les acides aminés condensés comprenant au moins un acide aminé soufré tel que défini précédemment ; d. Les vitamines comprenant dans leur structure chimique du soufre ; e. Et leurs mélanges. 4. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant à titre de composé soufré de 15 mg à 300 mg de thiosulfate. 5. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications précédentes, pour son utilisation en substitution à un antifongique chimique. 6. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins 5.1010 UFC de lactobacilles, 3048361 19 avantageusement au moins 1.1011 UFC, plus avantageusement de 1.1011 à 1.1012 UFC de lactobacilles. 7. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications 3 à 6, caractérisée en ce qu'elle comprend 30 à 300 mg de thiosulfate, avantageusement 45 à 120 mg, plus avantageusement 45 à 80 mg. 8. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que les lactobacilles sont des Lactobacillus rhamnosus et/ou des 10 Lactobacillus crispatus et/ou des Lactobacillus casai. 9. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que les candidoses sont des candidoses vulvovaginales. 15 10. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle est sous une forme pour administration par voie vaginale, avantageusement sous la forme d'un comprimé ou d'une gélule à libération immédiate. 11. Composition selon l'une quelconque des revendications 3 à 10 caractérisée en ce qu'elle 20 est sous la forme d'un comprimé multicouche comprenant : - au moins une couche à libération immédiate comprenant, par rapport au poids total de l'ensemble des couches à libération immédiate, plus de 2.1010 UFC de lactobacilles et 15 à 300 mg de thiosulfate ; et - au moins une couche à libération prolongée, comprenant, par rapport au poids total 25 de l'ensemble des couches à libération prolongée, de 1.105 à 1.101° UFC de lactobacilles. 12. Comprimé multicouches selon la revendication 11, caractérisé en ce que la couche à libération prolongée comprend de 10 à 30 % en poids par rapport au poids total de ladite 30 couche d'HPMC. 13. Composition pharmaceutique pour administration par voie vaginale caractérisée en ce qu'elle est sous la forme d'un produit de combinaison comprenant i) une première 3048361 20 composition pharmaceutique comprenant à titre d'actif thérapeutique plus 2.10" UFC de lactobacilles et ii) une deuxième composition pharmaceutique comprenant de 15 mg à 300 mg de thiosulfate.