FR 3036960 A1 20161209 FR 1555198 A 20150608 1 PRINCIPE ACTIF COSMETIQUE ISSU DE GRAINES DE PARKIA BIGLOBOSA, COMPOSITIONS COSMETIQUES ET PROCEDE DE TRAITEMENT COSMETIQUE DE LA PEAU La présente invention concerne l'utilisation de graines de Parkia biglobosa en cosmétique. En particulier l'invention se rapporte à un principe actif cosmétique issu de graines de Parkia biglobosa, à un procédé d'obtention d'un tel principe actif, à des compositions cosmétiques incluant un tel principe actif et à son utilisation en application topique pour améliorer l'état de la peau. L'aspect général de la peau est déterminé en particulier par son hydratation. Au niveau de l'épiderme, l'eau n'est pas répartie de manière homogène : 70% d'eau dans l'épiderme viable contre 15 à 25% au niveau de la couche cornée, strate supérieure de l'épiderme qui est issue du processus de différenciation épidermique. Elle régule les pertes en eau grâce aux lipides qu'elle contient mais aussi grâce à une structure stratifiée et cohésive. L'hydratation est essentielle au maintien de la santé de la peau. Si la teneur en eau diminue, les activités enzymatiques nécessaires à une bonne desquamation sont altérées. Les cornéocytes s'accumulent à sa surface. Elle devient sèche, rugueuse et terne. L'objectif de l'invention est de proposer un nouvel actif cosmétique capable d'améliorer l'aspect global de la peau, en particulier présentant un effet hydratant et restructurant cutané. Pour y répondre, la présente invention propose d'utiliser des graines de Parkia biglobosa. Parkia biglobosa, plus connu sous le nom de Néré, est un arbre que l'on trouve de manière clairsemée dans les champs du Burkina Faso. Ce robuste spécimen s'adapte aux sols pauvres et atteint sa taille définitive (15 à 20 mètres) entre 30 et 50 ans. Sa cime étalée forme un parasol. Ses racines lui assure une capture optimale de l'eau. Il peut alors résister à des périodes de sècheresse allant de 4 à 7 mois. Cet arbre nourricier est considéré comme un véritable trésor pour certaines populations d'Afrique de l'ouest. Il est vénéré et fait l'objet de nombreux contes. On dit de lui que « tout de la racine à la cime, contribue à la survie de l'homme ». En effet, le Néré est doté 3036960 2 de nombreuses vertus notamment nutritionnelles et médicinales. On utilise également les cosses en tant qu'engrais ou bien pour enduire les murs des cases. Quelques publications ont été réalisées sur le Parkia biglobosa, mais les données de la littérature scientifique relatives à la composition chimique des graines de Néré sont 5 presque inexistantes. On peut tout de même citer la publication de Oboh G. et al (2004) « Nutritional evaluation of some Nigerian wild seeds », qui indique que les graines de Parkia biglobosa du Nigeria contiennent des grosses protéines (6.5-24.2%), des graisses (19.0-58.5%), des minéraux. La présence de saccharides a aussi été décrite dans la publication « Comparison of 10 physicochemical and functional properties of four and starch extract in different ». La publication de Kourouma K. synthétise les différentes utilisations ethniques du Parkia biglobosa. Tous les organes de l'arbre (racines aux feuilles) ont été largement reconnus comme étant utilisés pour la nourriture, les médicaments, médico-magiques, culturels et autres. Les graines fermentées et la pulpe farineuse jaune (riche en saccharose) sont 15 toutes les deux très appréciées comme aliment. Dans une grande partie de l'Afrique de l'Ouest, en particulier au Togo, au Nigeria, au Mali, au Bénin, les semences de Parkia biglobosa sont utilisées comme condiment alimentaire sous forme de sauce d'assaisonnement. Les usages médicinaux de l'espèce sont très diversifiés. Cette publication a identifié les différentes maladies traitées par Parkia biglobosa et les recettes 20 utilisées par les différents groupes ethniques, qui relèvent de la médecine ethnique à base de plantes. Les organes de Parkia biglobosa sont riches en divers composants tels que les flavonoïdes aglycones, des acides gras, des tanins, des composés réducteurs (glucose et fructose), des glucides et des anthocyanosides. Les produits issus de Parkia biglobosa sont également 25 riches en protéines et peuvent donc être utilisés comme suppléments de protéines dans les régimes à base principalement de céréales. Ainsi, le Parkia biglobosa a été identifié comme ayant un potentiel médicinal sur lequel pourraient être développés des phytomédicaments standardisés. Par contre, aucun usage dermatologique et cosmétique courant n'a été rapporté à ce jour pour des produits issus de Parkia biglobosa. Selon l'invention, les graines de Néré peuvent être utilisées pour améliorer l'état de la peau, en particulier pour hydrater et restructurer la peau. 3036960 3 L'invention vise donc en particulier un principe actif cosmétique issu de graines de Parkia biglobosa, notamment un principe actif contenant des sucres, ainsi qu'un procédé cosmétique de soin de la peau pour améliorer l'état de la peau, qui consiste à appliquer sur la peau ce principe actif obtenu à partir de graines de Parkia biglobosa. 5 L'invention a également pour objet un procédé d'obtention du principe actif et des compositions cosmétiques l'incluant. Avantageusement le principe actif selon l'invention est capable de renforcer la fonction barrière cutanée et d'augmenter l'hydratation, pour obtenir une peau hydratée et éclatante et des rides estompées. 10 D'autres caractéristiques et avantages ressortiront de la description en détails de l'invention qui va suivre. L'invention a donc pour objet un principe actif cosmétique issu de graines de Parkia biglobosa. Par « actif cosmétique » ou « principe actif cosmétique » au sens de l'invention, on entend 15 un ensemble de plusieurs molécules présentant un effet sur les cellules de la peau. Par actif cosmétique ou principe actif cosmétique « issu de » ou « obtenu à partir de » graines de Parkia biglobosa au sens de l'invention, on entend un ensemble de plusieurs molécules extraites de graines de Parkia biglobosa présentant un effet sur les cellules de la peau. Les molécules peuvent être présentes à l'état naturel dans les graines de Parkia 20 biglobosa ou bien être préférentiellement obtenues par transformation des molécules présentes à l'état naturel dans les graines de Parkia biglobosa par exemple par hydrolyse. Les graines de Parkia biglobosa proviennent d'une filière tracée et maîtrisée du Burkina Faso et la disponibilité des ressources est prise en compte afin de respecter les besoins de la population. 25 La récolte des fruits s'effectue une fois par an juste avant les premières pluies du mois d'avril. Elle s'étale sur 2 à 3 semaines et s'effectue selon un cahier des charges précis. Le fruit du Néré se présente sous forme de gousses qui sont agencées en grappes. A l'intérieur de chaque gousse se trouve une pulpe jaune qui enveloppe des graines marron clair. Les ramasseuses identifient les fruits murs grâce à la couleur des gousses : 30 lorsqu'elles sont brunes, les graines ont atteint leur maturité. Les gousses sont alors récoltées manuellement dans l'arbre puis séchées afin de faciliter leur écossage. Leur contenu est récupéré et la pulpe jaune séparée des graines par pilonnage puis tamisage. 3036960 4 Chaque gousse renferme 5 à 25 graines. Un arbre donne naissance à environ 100 kilogrammes de graines. Les graines sont séchées pendant trois à quatre jours à l'ombre des manguiers afin d'éliminer l'humidité résiduelle puis triées manuellement afin d'éliminer les non-conformes. Enfin, elles sont mises en sac et stockées dans un local du 5 village en attente d'une expédition par bateau. Le principe actif selon l'invention obtenu à partir de graines de Parkia biglobosa est préférentiellement un actif contenant des sucres, encore plus préférentiellement au moins 22% en poids de matière sèche. En plus des composés saccharidiques, le principe actif contient préférentiellement 10 d'autres molécules comme des peptides et/ou des acides uroniques et/ou des polyphénols. Selon une variante particulièrement adaptée, le principe actif selon l'invention est un hydrolysat de graines de Parkia biglobosa, préférentiellement un hydrolysat enzymatique. 15 Selon un mode de réalisation adapté, le principe actif utile selon l'invention se présente sous forme liquide et présente au moins une des caractéristiques suivantes : - Un taux de matières sèches compris entre 15 et 70g/I, préférentiellement entre 30 et 45g/I, - Une teneur en sucres comprise entre 5 et 30g/I, préférentiellement entre 10 et 19g/I, 20 soit entre 22% et 63% en sucres en poids par rapport au poids de matières sèches, principalement sous forme d'oligosaccharides et de polysaccharides de degré de polymérisation inférieur à 6, - Une teneur en composés peptidiques comprise entre 3% et 10% en poids par rapport au poids de matières sèches, 25 - Une teneur en acides uroniques comprise entre 9% et 13% en poids par rapport au poids de matières sèches, - Une teneur en polyphénols inférieur à 5% en poids par rapport au poids de matières sèches. - Une teneur en cendres comprise entre 22% et 28% en poids par rapport au poids de 30 matières sèches. Le taux de matière sèche peut être mesuré par passage à l'étuve à 105°C d'un échantillon jusqu'à obtention d'un poids constant. 3036960 5 La teneur globale en sucres peut être déterminée par la méthode de DUBOIS (Dubois M. et al., Analytical chemistry, 28, 3, 350-356, 1956). La caractérisation de la masse molaire des carbohydrates présents dans le principe actif de la présente invention est réalisée par méthode HPLC. Le dosage des sucres simples est réalisé par chromatographie liquide 5 ionique. La teneur en composés peptidiques est déterminée par la méthode de LOWRY (Lowry et al., Protein measurement with the folin reagent, J. Biol. Chem., 193, 265, 1951). La teneur en polyphénols peut être déterminée par dosage colorimétrique, en présence de ferricyanure de potassium et de chlorure de fer. L'intensité de la coloration, 10 proportionnelle à la quantité de composés phénoliques est déterminée par comparaison avec une solution de calibration de l'acide gallique, utilisé comme standard. La teneur en acides uroniques peut être réalisée par dosage spectrocolorimétrique, en présence de tétraborate de sodium et de métahydroxydiphényl qui donne une coloration rose en présence d'acide galacturonique. 15 La teneur en cendres brutes peut être déterminée par la pesée des résidus issus de l'incinération des échantillons du principe actif à 550°C dans un four à moufle électrique. Le principe actif selon l'invention peut être obtenu par tout procédé adapté. Préférentiellement, il est obtenu par un procédé comprenant une étape d'hydrolyse, en particulier d'hydrolyse enzymatique. 20 Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, le principe actif est obtenu par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - Solubilisation de poudre de graines de Parkia Biglobosa dans l'eau entre 10 et 150g/I, - Hydrolyse enzymatique avec une enzyme, préférentiellement une enzyme 25 hydrolysant les saccha rides, - Séparation des phases soluble et insoluble par filtration, décantation ou centrifugation, - Récupération de la phase soluble contenant les sucres hydrolysés, - Inactivation enzymatique par traitement thermique, 30 - Filtration et filtration stérilisante. 3036960 6 Les paramètres des différentes étapes doivent être ajustés afin d'obtenir des principes actifs présentant les caractéristiques de l'invention. Certaines étapes peuvent être ajoutées afin d'obtenir un actif particulier, comme une étape de : - Clarification ayant pour but de retirer les composés rendus insolubles lors 5 du traitement thermique, cette clarification peut, par exemple, être réalisée par filtration sur tamis, - Purification ayant pour but d'éliminer certains composés non souhaités, comme des composés colorés ou odorants. Ces étapes prises individuellement sont usuelles dans le domaine des extractions d'actifs 10 à partir de plantes ou de levures et l'homme du métier est à même d'en ajuster les paramètres réactionnels sur la base de ses connaissances générales. Le principe actif selon l'invention est préférentiellement utilisé dans une composition, cette composition comprenant un milieu cosmétiquement acceptable. Il s'agit de compositions dans différentes formes galéniques, adaptées à l'administration par voie 15 topique cutanée. Ces compositions peuvent se présenter notamment sous forme d'émulsions huile-danseau, émulsions eau-dans-huile, émulsions multiples (Eau/Huile/Eau ou Huile/Eau/Huile) qui peuvent être éventuellement des microémulsions ou des nanoémulsions, ou sous forme de solutions, suspensions, hydrodispersions, gels aqueux ou poudres. Elles peuvent 20 être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel, d'une pâte ou d'une mousse, ou sous forme solide. Il peut s'agir de compositions comprenant au moins 0,5% de principe actif issu de de graines de Parkia Biglobosa selon la présente invention, préférentiellement entre 0,5 et 10%. 25 Ces compositions comprennent, outre l'actif, un milieu physiologiquement acceptable et de préférence cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui ne provoque pas de sensations d'inconfort inacceptables pour l'utilisateur telles que des rougeurs, tiraillements ou picotements. Les compositions selon l'invention peuvent contenir comme adjuvant au moins un 30 composé choisi parmi : - les huiles, qui peuvent être choisies notamment parmi les huiles de silicone, linéaires ou cycliques, volatiles ou non volatiles ; 3036960 7 - les cires, telles que l'ozokérite, la cire de polyéthylène, la cire d'abeille ou la cire de carnauba, - les élastomères de silicone, - les tensioactifs, de préférence émulsionnants, qu'ils soient non ioniques, anioniques, 5 cationiques ou amphotères, - les co-tensioactifs, tels que les alcools gras linéaires, - les épaississants et/ou gélifiants, - les humectants, tels que les polyols comme la glycérine, - les filtres organiques, 10 - les filtres inorganiques, - les colorants, les conservateurs, les charges, - les tenseurs, - les séquestrants, - les parfums, 15 - et leurs mélanges, sans que cette liste soit limitative. Des exemples de tels adjuvants sont cités notamment dans le Dictionnaire CTFA (International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook publié par le Personal Care Product Council). Bien entendu, l'homme du métier veillera à choisir les éventuels composés 20 complémentaires, actifs ou non-actifs, et leur quantité, de telle sorte que les propriétés avantageuses du mélange ne soient pas, ou sensiblement pas, altérées par l'adjonction envisagée. Ces compositions sont notamment destinées à être utilisées pour le soin de la peau humaine en particulier pour améliorer l'état de la peau. 25 L'invention vise ainsi également l'utilisation cosmétique d'un principe actif cosmétique obtenu à partir de graine de Parkia biglobosa pour améliorer l'état de la peau et en particulier un procédé cosmétique de soin de la peau qui consiste à appliquer sur la peau un principe actif obtenu à partir de graines de Parkia biglobosa, préférentiellement un principe actif comprenant des sucres obtenus à partir de graines de Parkia biglobosa, 30 notamment un principe actif tel que décrit dans la présente demande de brevet. 3036960 8 Selon un mode de réalisation préféré, le principe actif cosmétique est formulé au sein d'une composition cosmétique, préférentiellement une composition cosmétique telle que décrite dans la présente demande de brevet. Le principe actif cosmétique selon l'invention, peut être utilisé pour améliorer l'aspect de 5 la peau, en particulier pour renforcer la fonction barrière et l'hydratation cutanée. L'épiderme est la partie de la peau la plus exposée aux agressions environnementales. Il est formé grâce à la superposition de plusieurs couches cellulaires dont la couche cornée, strate la plus superficielle, qui établit une barrière protectrice vis-à-vis des agressions chimiques ou mécaniques. 10 La couche cornée correspond à des cornéocytes emballés dans une matrice lipidique, souvent comparée à un assemblage de « briques et de mortier ». Les principaux composés de la couche cornée sont les cornéocytes accompagnés de leur enveloppe cornée et les lipides intercellulaires. Les cornéocytes sont inclus dans une enveloppe cornée qui est constituée de diverses protéines réticulées : loricrine, filaggrine 15 et involucrine. Les cornéocytes sont liés entre eux par des cornéodesmosomes et consécutivement une barrière mécanique résistante est formée. Ces cornéodesmosomes peuvent ensuite être dégradés par des enzymes (SCCE ou SCTE) au cours du processus de desquamation. La stagnation à long terme de cellules mortes à la surface de la peau est évitée et l'éclat du teint est conservé. 20 Cette barrière mécanique est complétée par des jonctions serrées (Claudine-1) qui au niveau de la couche granuleuse assurent la cohésion cellulaire. Elle résulte de la différenciation kératinocytaire en activant la synthèse de la filaggrine : un processus qui permet la formation du stratum corneum et son renouvellement. De l'intégrité de cette barrière dépend sa capacité à défendre l'organisme. 25 Avantageusement, un principe actif selon l'invention, lorsqu'il est appliqué sur la peau, notamment sur une peau dont la barrière cutanée est altérée, est capable : - d'augmenter l'épaisseur de la barrière cutanée, - d'activer la différenciation kératinocytaire (notamment en augmentant la filaggrine), 30 - de stimuler la cohésion de la barrière cutanée (notamment en augmentant claudine-1), - de diminuer la perte insensible en eau. 3036960 9 Le principe actif selon l'invention peut ainsi être utilisé pour renforcer la fonction barrière de la peau, notamment en stimulant la cohésion de la fonction barrière cutanée, en favorisant le renouvellement des cellules cutanées et/ou en réduisant les pertes insensibles en eau. L'invention vise donc l'utilisation d'un principe actif issu de graines de 5 Parkia biglobosa pour ces applications, et plus spécifiquement un procédé cosmétique de soin de la peau pour ces applications. Au-delà de sa fonction protectrice vis-à-vis de l'environnement, l'épiderme est également impliqué dans la régulation des échanges d'ions mais surtout d'eau. D'une part, cette fonction est assurée par les lipides du stratum corneum qui agissent 10 comme une barrière qui empêche la perte d'eau trans-épidermique. La filaggrine synthétisée au cours de la différenciation épidermique va être clivée afin de donner naissance aux NMF (natural moisturizing factor), un mélange d'acides aminés et dérivés capable de piéger et de retenir l'eau. Ils permettent le maintien de l'hydratation de la couche cornée en dépit de l'effet asséchant de l'environnement. Le niveau d'hydratation 15 est ainsi directement lié au processus de différenciation épidermique et à l'état de la fonction barrière. D'autre part, d'autres molécules vont réguler les échanges d'eau afin de maintenir un niveau d'hydratation optimal : les aquaporines et l'acide hyaluronique. Les aquaporines sont des canaux présents au niveau de la membrane des cellules 20 épidermiques qui assurent le transport de l'eau et des solutés tels que le glycérol et l'urée. Treize types d'aquaporines ont été recensées chez l'homme dont les aquaporines 3 qui sont exprimées au niveau de la membrane basale de l'épiderme. L'absence des aquaporines 3 entraînent un défaut d'hydratation et d'élasticité de la peau. L'acide hyaluronique est un glycosaminoglycane dont la principale propriété est de retenir 25 l'eau. Il contribue ainsi à l'hydratation de la peau. Avantageusement, un principe actif selon l'invention, lorsqu'il est appliqué sur la peau, est capable : - d'activer la synthèse des aquaporines 3 - d'activer la synthèse de l'acide hyaluronique. 30 II augmente ainsi l'hydratation de la peau Le principe actif selon l'invention peut ainsi être utilisé pour améliorer l'hydratation de la peau, notamment en augmentant la synthèse des canaux d'irrigation. 3036960 10 L'invention vise donc l'utilisation d'un principe actif issu de graines de Parkia biglobosa pour ces applications, et plus spécifiquement un procédé cosmétique de soin de la peau pour ces applications. Le principe selon l'invention peut donc être utilisé pour améliorer l'aspect général de la 5 peau. Il présente en particulier un effet restructurant et un effet hydratant. Appliqué sur la peau, il ravive l'éclat, affine le grain de peau et lisse le microrelief. Il agit notamment : - en renforçant la fonction barrière : o en stimulant la cohésion o en favorisant le renouvellement cellulaire (prolifération, différenciation, 10 desquamation) o en réduisant les pertes insensibles en eau - en favorisant l'hydratation : o en garantissant le réservoir hydrique de la peau o en augmentant la synthèse des canaux d'irrigation. 15 L'utilisation du principe actif sur la peau comme principe actif permet ainsi : - l'hydratation de la peau en stimulant la synthèse des médiateurs clés de l'hydratation : les aquaporines 3 et l'acide hyaluronique - le renforcement de la fonction barrière, en réduisant les pertes insensibles en eau : o en stimulant la cohésion cellulaire : en augmentant la synthèse de 20 claudine-1 o en favorisant le renouvellement cellulaire : - la prolifération cellulaire, par augmentation de l'épaisseur de l'épiderme - la différenciation épidermique , en activant la synthèse de filaggrine 25 - la desquamation, en augmentant la synthèse des SCTE et SCCE - l'aspect global de la peau en ravivant l'éclat de la peau et en lissant le microrelief Afin d'illustrer ces effets cosmétiques sur la peau, les exemples suivants avec leurs résultats d'essais sont présentés. I. EXEMPLES 30 1.1 Exemple 1 : Principe actif selon l'invention Un exemple de procédé d'obtention d'un principe actif selon l'invention, comprend la mise en oeuvre des étapes suivantes : 3036960 11 - Solubilisation de poudre de graines de Parkia biglobosa dans l'eau à raison de 20g/I, - Hydrolyse enzymatique à l'aide d'une carbohydrase, - Séparation des phases soluble et insoluble par décantation, 5 - Inactivation des activités enzymatiques par traitement thermique, - Filtration, - Purification par élimination des polyphénols et des composés odorants, - Précipitation d'une partie des minéraux, - Filtration, 10 - Filtration stérilisante. Le principe actif obtenu est un liquide limpide de jaune clair présentant une matière sèche de 39 g/I, un pH de 5.1 et une teneur en sucres (méthode de Dubois) de 16.9g/I, soit 43% de la matières sèches et une teneur en protéines (méthode de Lowry) de 2.1 g/I. Le principe actif contient 12% de monosaccharides (DP1, soit une masse molaire inférieure 15 ou égale à 180Da) et 88% d'oligosaccharides ou de polysaccharides inférieure à DP65, soit 11700Da. Le principe actif est constitué majoritairement de monosaccharides et d'oligosaccharides de degré de polymérisation compris entre 1 et 6. La proportion des sucres simples du principe actif selon l'invention est 27% de glucose, 20 23% de saccharose, 19% d'acide galacturonique, 16% de fructose, 11% de saccharose et 4% d'arabinose. 1.2. Exemple 2 : Utilisation d'un principe actif selon l'invention dans une crème hydratante A. Eau qsp 100% Conservateur 0,7% Glycérine 3,3% Propylène Glycol 3,2% B. Diamant N (Aiglon SA) 10% Cire de Lanol CTO (Seppic) 1,3% Lanette N (Personal Care BASF) 1% DUB GMS AE (Stéarinerie Dubois) 3% DC 200 (Dow Corning)) 5% 3036960 12 butyrosperum parkii (shea (Sictia) 2,1% butter) Alcool Céthylique 4% Alcool Stéarylique 3% C. Principe actif de l'exemple 1 3% Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. Cette émulsion blanche, ferme brillante et légèrement odorante, présente un pH de 6,3. Elle présente une préhension souple et une application douce et glissante avec un fini doux et mate qui unifie l'aspect de la peau. 5 Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - Mélanger A et chauffer au bain-marie à 50°C en veillant à bien disperser les différents constituants, - Mélanger B, - Chauffer A et B séparément sous agitation au bain marie à 80°C, 10 - Emulsionner A et B sous rotor sator à 2000 tr/min, - A 40°C, ajouter C, - Laisser homogénéiser à 1500 tr/min jusqu'à complet refroidissement. 1.3. Exemple 3 : Utilisation d'un principe actif selon l'invention dans un lait de soin A. Eau qsp 100% Conservateur 0,7% Propylène Glycol 2% B. Montane 481 (Seppic) 4,5% Simulsol 58 (Seppic) 3% Montanov 202 (Seppic) 3% Montanov 68 (Seppic) 1% Isopropyl Myristate 2% Isopropyl Palmitate 3% DUB SYNERSOL (Stéarinerie Dubois) 2,2% Octocare SM2030 (Innospec Limited) 3,6% 3036960 13 C. principe actif de l'exemple 1 3% Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. Cette émulsion blanche, souple, brillante, avec une légère odeur citronnée présente un pH de 4,7. Elle présente une préhension aisée, un étalement glissant, une pénétration rapide et un 5 fini sec et brillant. Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - Mélanger A et chauffer au bain-marie à 50°C sous agitation magnétique, - Mélanger B, - Chauffer A et B séparément sous agitation au bain marie à 80°C, sous agitation 10 magnétique, - Emulsionner A et B sous rotor sator à 2500 tr/min, - A 30°C, ajouter C, sous rotor sator à 1500 tr/min, - Laisser sous agitation jusqu'à complète homogénéisation. 1.4 Exemple 4 : Utilisation d'un principe actif selon l'invention dans un gel silicone A. Eau qsp 100% Conservateur 0,7% Glycérine 4,8% Carbopol Ultrez 10 (Novéon) 0,7% B. DUB MCT 5545 (Stéarinerie Dubois) 6% DUB 1632 (Stéarinerie Dubois) 2% DUB G12G18A (Stéarinerie Dubois) 5,1% DUB Zenoat (Stéarinerie Dubois) 2,3% KF-96-50CS (DKSH) 1% Montanov L (Seppic) 4% C. Principe actif exemple 1 3% 15 Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. 3036960 14 Ce gel émulsionné blanc, avec une texture souple et sans odeur, présente un pH de 5. Il présente une préhension aisée, avec une application glissante, un effet hydratant, une pénétration assez rapide, avec un fini mat, unifié et aspect hydraté. Il peut être obtenu par la mise en oeuvre des étapes suivantes : 5 - Mélanger A et chauffer au bain-marie à 50°C sous agitation magnétique, - Mélanger B, - Chauffer A et B séparément sous agitation au bain marie à 80°C, sous agitation magnétique, - Emulsionner A et B sous rotor sator à 1500 tr/min, 10 - A 30°C, ajouter C, sous rotor sator à 1500 tr/min, - Laisser sous agitation jusqu'à complet refroidissement. Il. EVALUATION DE L'EFFICACITE COSMETIQUE D'UN PRINCIPE ACTIF SELON L'INVENTION Il. A. Tests in vitro A.1 - Effet sur le profil d'expression génique de cultures de kératinocytes humains 15 Le but de cette étude est d'évaluer le potentiel d'activité d'un principe actif selon l'invention sur l'expression des gènes clés de la fonction barrière. Cette étude a été réalisée sur kératinocytes humains normaux traités avec le principe actif de l'exemple 1. Le profil d'expression génique a été établi grâce au support « hBA15-NHEK » contenant 20 164 gènes en duplicate, sélectionnés pour leur importance dans la physiologie des kératinocytes (croissance, différenciation, métabolisme, communication,...). Le protocole de l'étude est le suivant. A JO, les kératinocytes humains sont ensemencés et incubés à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2. 25 A J3, les cellules sont traitées avec le principe actif de l'exemple 1 à 0,5% (V/V). Les cellules sont ensuite incubées pendant 6 et 24 heures à 37°C. A la fin de chaque temps d'incubation, les tapis cellulaires sont récupérés et les ARN extraits. L'analyse de l'expression des gènes a été réalisée en utilisant des DNA arrays, dédiés à la recherche et adaptés au screening. L'analyse a été réalisée selon une technologie 30 miniaturisée, basée sur l'utilisation d'ARN messager et d'une révélation par chimiluminescence. Les images obtenues à l'aide du LAS4000 (Fujifilm) ont été analysées avec le logiciel TotalLab TL100 (Perkin Elmer). 3036960 15 Les résultats sont présentés dans le tableau 1 ci-après. Traitement Traitement T6 heures T24 heures Renouvellement cellulaire : -Ki67 +52 Différenciation : -CK14 +24 +35 -cystatin A -calgranulin B +34 Cohésion : -claudin-1 +115 -catenin betal +42 Desquamation : -SCCE +30 -SCTE +25 +45 +17 -corneodesmosin Tableau 1 : Effet d'un principe actif selon l'invention à 0,5% sur l'expression génique de kératinocytes humains à 6 heures et 24 heures de culture. On constate que testé à 0,5% sur kératinocytes humains normaux, le principe actif selon 5 l'invention : * stimule la fonction barrière en : - augmentant la différenciation kératinocytaire, - stimulant les enzymes impliquées dans la desquamation. * favorise la cohésion kératinocytaire et stimule le renouvellement cellulaire. 10 A.2 - Effet sur la protection de la barrière cutanée L'objectif de cette étude est d'évaluer l'effet d'un principe actif selon l'invention sur sa capacité à protéger ou à accroître la résistance d'un épiderme à une agression. L'étude a été réalisée sur des épidermes reconstruits, produits par la société SILAB, nommés SILABSKIN® RE et sur des épidermes reconstruits ayant une fonction barrière 15 altérée nommés SILABSKIN® RE à FB altérée. Les SILABSKIN®RE sont prétraités ou non avec le principe actif de l'exemple 1 puis agressés avec une solution de Sodium Lauryl Sulfate (SLS). Le Sodium Lauryl Sulfate entraine une altération de la fonctionnalité et de l'intégrité de la fonction barrière (FB) épidermique. L'effet du principe actif selon l'invention a été évalué sur : 20 - la protection des SILABSKIN®RE par coloration HE, 3036960 16 - l'intégrité de la fonction barrière à l'aide d'une sonde fluorescente le lucifer yellow, - la cohésion cellule-cellule par marquage immunohistologique de la claudine-1, - la différenciation épidermique par marquage immunohistologique de la filaggrine. Le protocole opératoire de l'étude est décrit en suivant. 5 A J0, Les kératinocytes sont ensemencés sur l'insert puis incubés à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2. Le milieu de culture est changé tous les 2 jours en présence ou non du principe actif de l'exemple 1 à 0,10% et 0,25% (V/V). A J16, les SILABSKIN®RE sont traités avec une solution SLS à 0,2% pendant 45 minutes. 10 A J17, les SILABSKIN®RE sont récupérés pour réaliser les études suivantes : - Coloration Hématoxyline Eosine (HE) Les SILABSKIN®RE sont récupérés, fixés, déshydratés et inclus en paraffine. Des coupes (4 um) sont ensuite réalisées à l'aide d'un microtome (RM2125RT, Leica). La capacité de protection est calculée selon la formule suivante : 15 SILABSKIN'RE à FB altérée traité - SILABSKINSE à FB altérée témoin Capacité de protection SILABSKIN'RE témoin - SILABSKIN'RE à FB altérée témoin Les résultats sont présentés dans le tableau 3 ci-dessous : Epaisseur des couches Capacité de protection vivantes (%) (I-tm) SILABSKIN®RE Témoin 70.13 SILABSKIN®RE à fonction barrière altérée Témoin 18.83 Exemple 1 0,10% 37.21 36 Exemple 1 0,25% 41.92 45 Tableau 4 Effet d'un principe actif selon l'invention sur la morphologie des SILABSKIN®RE à 20 fonction barrière altérée. - Test du lucifer yellow * 100 µL de lucifer yellow sont déposés sur les SILABSKIN®RE. * Incubation à 37°C pendant 2 heures. X100 3036960 17 * Rincage avec du tampon PBS. * Fixation avec une solution de PFA. * Des coupes (4 um) sont ensuite réalisées à l'aide d'un microtome (RM2125RT, Leica). 5 La visualisation est réalisée sur microscope IX 70 (Olympus) couplé à un système d'analyse d'images (logiciel NIS-Elements, Nikon). La mesure de l'épaisseur des SILABSKIN®RE et de la pénétration du lucifer yellow a été ensuite réalisée. Les résultats sont présentés dans le tableau 4. Mesure de pénétration du lucifer yellow Efficacité / témoin (lm) SILABSKIN®RE à fonction barrière altérée (%) SILABSKIN RE Témoin 5.62 SILABSKIN RE à fonction barrière altérée Témoin 64.01 Exemple 1 0,10% 38.26 -40 Exemple 1 0,25% 33.13 -48 10 Tableau 4 Effet d'un principe actif selon l'invention sur l'intégrité de la fonction barrière des SlLABSKWRE à fonction barrière altérée. - Etude immunohistologique de claudine-1 et de filaggrine * Déparaffinage en xylène 15 * Démasquage des sites antigéniques * Saturation * Anticorps primaire * Anticorps secondaire La visualisation est réalisée sur microscope IX 70 (Olympus) couplé à un système d'analyse 20 d'images (logiciel NIS-Elements, Nikon). Les synthèses de claudine-1 et filaggrine sont proportionnelles à l'intensité de la fluorescence verte présente sur les coupes de SILABSKIN®RE. Les noyaux des cellules apparaissent colorés en bleu. 3036960 18 Une analyse quantitative des images a été réalisée à l'aide du logiciel Matlab® version R2012b (Mathworks). Les résultats sont présentés dans les tableaux 5 et 6. La capacité de synthèse est calculée selon la formule suivante : 5 Pour Claudine-1 : Capacité à maintenir la synthèse de claudine-1 - SILABSKINSE à FB altérée traité - SILABSKINSE à FB altérée témoin X100 SILABSKIN'RE témoin - SILABSKIN'RE à FB altérée témoin Pour filaggrine : 10 Capacité à maintenir la SILABSKIN'RE à FB altérée traité - SILABSKINSE à FB altérée témoin synthèse de filaggrine _ SILABSKIN'RE témoin - SILABSKIN'RE à FB altérée témoin Intensité de fluorescence Capacité à maintenir la de claudine-1 / surface synthèse de claudine-1 totale ER (UA) (%) SILABSKIWRE Témoin 11.53 SILABSKIN®RE à FB altérée Témoin 7.23 Exemple 1 à 0,10% 10.22 70 Exemple 1 à 0,25% 10.95 87 15 Tableau 5 : Effet du principe actif selon l'invention sur la synthèse de claudine-1 sur SlLABSKWRE à fonction barrière altérée. X100 3036960 19 Intensité de fluorescence Capacité à maintenir de la filaggrine / surface la synthèse de filaggrine totale ER (UA) (%) SILABSKIN® RE Témoin 19.97 SILABSKIN®RE à FB altérée Témoin 9.57 Exemple 1 à 0,10% 15.53 57 Exemple 1 à 0,25% 16.75 69 Tableau 6 Effet du principe actif selon l'invention sur la synthèse de filaqqrine sur SlLABSKWRE à fonction barrière altérée. La fonctionnalité et l'intégrité de la fonction barrière sont significativement altérées lorsque les SILABSKIN®RE sont agressés avec du SLS. Testé à 0,25% sur SILABSKIN®RE à fonction barrière altérée, le principe actif selon l'invention permet d'accroître significativement : 5 - la synthèse de claudine-1 de 87%, - la synthèse de filaggrine de 69%. A.3 - Effet sur la synthèse des médiateurs de l'hydratation L'objectif est d'évaluer la capacité du principe actif selon l'invention à favoriser la synthèse de deux médiateurs de l'hydratation : 10 - les aquaporines 3, protéines membranaires essentielles au transport de l'eau, - l'acide hyaluronique, glycosaminoglycane, réservoir hydrique de la peau. L'effet du principe actif de l'exemple 1 sur la synthèse des aquaporines 3 et d'acide hyaluronique a été mesuré respectivement par marquage immunohistologique et dosage ELISA. 15 Le protocole opératoire de l'étude est décrit en suivant. Les kératinocytes humains sont cultivés dans un milieu de culture spécifique. A JO, les kératinocytes sont ensemencés sur l'insert puis incubés à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2. Le milieu de culture est changé tous les 2 jours en présence ou non de principe actif de l'exemple 2 à 0,10% et 0,25% (V/V). 3036960 20 A J13 les SILABSKIN®RE sont fixés, déshydratés et inclus en paraffine. Des coupes (4 um) sont réalisées à l'aide d'un microtome (RM2125RT, Leica). Les sous-nageants tissulaires sont récupérés et congelés à -80°C avant dosage. Le dosage d'acide hyaluronique est réalisé par ELISA (ELISA Hyaluronan R&D systems). 5 - Etude immunohistologique des aquaporines 3 - Déparaffinage en xylène - Démasquage des sites antigéniques - Saturation - Anticorps primaire 10 - Anticorps secondaire La visualisation est réalisée sur microscope IX 70 (Olympus) couplé à un système d'analyse d'images (logiciel NIS-Elements, Nikon). Les noyaux des cellules apparaissent colorés en bleu. La synthèse des aquaporines 3 est proportionnelle à l'intensité de la fluorescence rouge. 15 Une analyse quantitative des images a été réalisée à l'aide du logiciel Matlab® (Mathworks). Les résultats sont présentés dans le tableau 7. Moyenne d'intensité du Variation / Témoin marquage des aquaporines 3 (%) (x 104 UA) Témoin 788 EXEMPLE 2 0,10% 911* +16 EXEMPLE 2 0,25% 997* +27 Tableau 7 : Effet de l'effet du principe actif selon l'invention sur la synthèse des aquaporines 3 dans des SlLABSKW RE. 3036960 21 - Effet sur la synthèse d'acide hyaluronique Les résultats sont présentés dans le tableau 8. Taux acide hyaluronique Variation / Témoin (ng/mL) (%) Témoin 141 EXEMPLE 2 0,10% 174* +23 EXEMPLE 2 0,25% 229* +62 Tableau 8 : Effet du principe actif selon l'invention sur la sécrétion d'acide hyaluronique dans des SlLABSKWRE. 5 On constate que testé à 0,25% sur SILABSKIN®RE, le principe actif selon l'invention permet d'augmenter : - la synthèse des aquaporines 3 de 27% - la sécrétion d'acide hyaluronique de 62%. Le principe actif selon l'invention stimule ainsi les marqueurs clés de l'hydratation 10 cutanée. Il. B. Tests in vivo Pour la réalisation des tests in vivo, le principe actif selon l'invention a été formulé selon la composition suivante : Isononyl isononoate (Lanol 99, Seppic) 5,0 % Principe actif de l'exemple 1 3,0 % Behenyl alcohol / arachidyl glucoside / arachidyl alcohol (Montanov 202, Seppic) 3,0 % Cetearyl alcohol / cetearyl glucoside (Montanov 68, Seppic) 2,0 % Conservateurs 0,7 % Polyacrylamide / C13-14 isoparaffin / Laureth-7 (Sepigel 305, Seppic) 0,3 % Eau qsp 100% Les tests in vivo sont réalisés selon le protocole suivant : 15 Le protocole opératoire est le suivant : - Entre J-14 et JO, 3036960 22 - Applications biquotidiennes sur l'ensemble du visage d'une crème placebo - A JO, - les volontaires viennent au laboratoire sans avoir appliqué de produit sur le visage le matin (ni crème, ni maquillage). 5 - détermination de deux zones symétriques au niveau du visage. - réalisation des mesures du taux d'hydratation de la peau - Entre JO et Ji-1, - Applications biquotidiennes des produits, - A Ji, 10 - Les volontaires viennent au laboratoire sans avoir appliqué de produit sur le visage - Détermination de deux zones symétriques au niveau du visage. - Réalisation des mesures du taux d'hydratation de la peau. B.1 - Effet hydratant 15 L'objectif de cette étude a été d'évaluer, in vivo, l'effet du principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion sur l'hydratation de la peau en comparaison à un placebo. Cette étude a été menée sur 20 volontaires sains, de sexe féminin, âgées de 45 à 63 ans (âge moyen 53 ± 8 ans) présentant un teint terne et une peau à tendance sèche au niveau du visage. Les produits ont été appliqués en hémi-visage, selon une randomisation 20 prédéfinie, pendant 28 jours matin et soir en légers massages jusqu'à pénétration. Les mesures d'hydratation de la peau ont été réalisées à l'aide d'un Cornéomètre® Derma Unit SSC3 (Courage & Khazaka) au niveau des joues, avant et après 28 jours d'applications biquotidiennes. Cet appareil est muni d'une sonde qui mesure de façon quantitative et directe, la 25 capacitance électrique de la peau, c'est-à-dire la capacité de l'eau intercellulaire du stratum corneum à conduire les électrons. Cette mesure est reliée directement à l'état d'hydratation de la peau. Un résumé des résultats correspondant à l'effet du principe actif selon l'invention comparé au placebo sur le taux d'hydratation au niveau des joues est présenté dans le 30 tableau 9. 3036960 23 Variation / Placebo (%) Principe actif selon +17,3% l'invention Tableau 9: Effet d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion sur l'hydratation de la peau en comparaison au placebo après 28 jours d'applications biquotidiennes. On constate que dans les conditions de cette étude, après 28 jours d'applications biquotidiennes et en comparaison à un placebo, le principe actif selon l'invention formulé 5 à 3% en émulsion augmente significativement l'hydratation de la peau de 17,3%. Ainsi le principe actif selon l'invention participe à l'amélioration de l'hydratation cutanée. B.2 - Effet sur la fonction barrière de la peau L'objectif de cette étude a été d'évaluer, in vivo, sur volontaires, l'effet d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en gel-émulsionné sur la perte insensible en eau (PIE) en 10 comparaison à un placebo. Cet effet du principe actif de l'exemple 1 à 3% sur la PIE a été observé après 7 et 14 jours d'applications biquotidiennes et comparé au placebo après une perturbation artificielle chronique de la fonction barrière à l'aide d'un détergent, le Lauryl Sulfate de Sodium (SLS) à 10%. 15 Les mesures de perte en eau de la peau ont été réalisées avec un Tewamètre® TM 300 (Courage & Khazaka) au niveau de la face antéro-latérale externe du bras. Cette étude a été menée sur 21 volontaires sains, de sexe féminin, d'âge compris entre 42 et 65 ans (moyen 54 ± 7 ans). Cet appareil est muni d'une sonde qui mesure le gradient de vapeur d'eau se mettant en 20 place entre la surface cutanée et l'air ambiant, ce qui donne une information sur la qualité de la fonction barrière du stratum corneum. Un résumé des résultats correspondant à l'effet d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en gel-émulsionné comparé au placebo sur la PIE mesurée à l'aide d'un Tewamètre® au niveau de la face antéro-latérale externe du bras est présenté dans le 25 tableau 11. 3036960 24 Variation / Placebo (%) J7 -8,9% J14 -15,2% 5 Tableau 11 : Effet d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en gel-émulsionné sur la PIE après agression répétée au SLS, en comparaison au placebo après 7 et 14 jours d'applications 10 biquotidiennes. On constate que dans les conditions de cette étude, dès 7 jours d'applications biquotidiennes, le principe actif selon l'invention formulé à 3% en gel-émulsionné diminue significativement la perte insensible en eau après agression répétée au SLS de 15 8,9% en comparaison au placebo. Cet effet se poursuit après 14 jours d'application, où une diminution des pertes en eau a été observée. B.3 - Effet sur la capacité de récupération de la barrière cutanée L'objectif de l'étude a été d'évaluer, in vivo, l'effet du principe actif selon l'invention de 20 l'exemple 1 formulé à 3% en gel-émulsionné sur la capacité de récupération de la fonction barrière de la peau après une agression unique par stripping et après un prétraitement de 21 jours d'applications biquotidiennes du placebo et du principe actif. Les mesures ont été réalisées à l'aide d'un Tewamètre® TM300. Cette étude a été réalisée sur la face interne des avant-bras de 20 volontaires sains, de 25 sexe féminin, d'âge compris entre 43 et 67 ans (âge moyen 56 ± 8 ans). Les mesures de pertes insensibles en eau (PIE) ont été réalisées avant (PIE basale) et immédiatement après agression, ainsi que 24h, 72h, 96h, 7 jours, 10 jours et 14 jours après agression par strippings. La barrière cutanée a été agressée artificiellement par application successive d'adhésif 30 (D-squame® ref. DS100, Monaderm). L'agression a été standardisée à 15 g/h/m2, en effet une PIE supérieure à 12 g/h/m2 au niveau du corps est le reflet d'une perturbation de la barrière cutanée correspondant à une PIE de personnes à peau xérotique (Berry N et al., int .1 CosmetSci, 21, 241-252, 1999). Un résumé des résultats correspondant à l'étude de la PIE mesurée à l'aide d'un Tewamètre® au niveau de la face interne des avant-bras est présenté dans le tableau 12. 3036960 25 T24H T72H T96H J7 J10 J14 Zone agressée non traitée 24% 58% 73% 83% 91% 98% Zone agressée traitée 26% 59% 72% 82% 90% 98% placebo Zone agressée traitée 41% 70% 80% 88% 96% 103% Principe actif selon l'invention 3% p-valeur 0,0429 0,0111 0,0542 0,0392 0,1690 0,1857 Tableau 12 : Effet du principe actif selon l'invention formulé à 3% en gel-émulsionné sur la capacité de récupération de la perte insensible en eau après une agression unique par stripping et en comparaison au placebo et à une zone non traitée. 5 On constate que dans les conditions de cette étude, après un prétraitement de 21 jours en applications biquotidiennes et en comparaison au placebo, le principe actif selon l'invention formulé à 3% en gel-émulsionné permet à la peau une récupération de la fonction barrière plus rapide suite à une agression unique par stripping. En effet, après une agression unique, la récupération de la fonction barrière est 10 supérieure à 80% avec le principe actif selon l'invention en seulement 4 jours (96h), contrairement à la zone traitée par le placebo qui a nécessité 7 jours avant d'observer une récupération comparable. La récupération sur la zone traitée avec le principe actif selon l'invention est significativement supérieure à celle sur la zone placebo dès 24H après l'agression. 15 Le principe actif selon l'invention formulé à 3% améliore la capacité de récupération de la fonction barrière de la peau. B.4 - Effet lissant L'objectif de cette étude a été d'évaluer, in vivo, l'effet anti-rides d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion en comparaison à un placebo avant et après 28 jours 20 d'applications biquotidiennes. Cette étude a été menée sur 20 volontaires sains, de sexe féminin, âgées de 45 à 63 ans (âge moyen 53 ± 8 ans) présentant un teint terne et une peau à tendance sèche au niveau du visage. Les produits ont été appliqués en hémi-visage. 3036960 26 Les acquisitions 3D au niveau des pattes d'oie ont été réalisées à l'aide d'un appareil de projection de franges dédié à la mesure 3D du relief cutané (Eotech). Ce système (DermaTOP 1303) comprend un capteur de mesure associant un projecteur de franges lumineuses et une caméra CCD haute résolution reliée à un logiciel d'acquisition Optocat 5 (Eotech). Le microrelief de la peau est étudié par deux paramètres de rugosité en 3D ^ Sa : moyenne arithmétique de rugosité de surface. ^ Sq : moyenne quadratique de rugosité de surface. Une diminution de ces différents paramètres est caractéristique d'un lissage du relief de 10 la surface étudiée et d'une diminution des rides. Un résumé des résultats correspondant à l'effet du principe actif selon l'invention comparé au placebo sur le microrelief cutané de la patte d'oie mesuré par projection de franges est présenté dans le tableau 13. Variation / Placebo (%) Paramètre Sa -6,1% Paramètre Sq -5,7% 15 Tableau 13 : Effet d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion sur le microrelief cutané de la patte d'oie en comparaison au placebo après 28 jours d'applications biquotidiennes. Dans les conditions de cette étude, après 28 jours d'applications biquotidiennes et en comparaison au placebo, le principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion lisse 20 le microrelief cutané au niveau des pattes d'oie. En effet le principe actif selon l'invention diminue significativement les paramètres de rugosité 3D : - Sa : -6,1% (p = 0,0081), - Sq : -5,7% (p = 0,0287). B.5 - Effet sur le relief cutané des pattes d'oie 25 L'objectif de l'étude est d'évaluer in vivo l'effet lissant d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion en comparaison à un placebo par scorage visuel sur photographies numériques. Les photographies standardisées du visage ont été réalisées dans des conditions d'éclairage reproductibles en utilisant un système VISIA-CR (Canfield). A partir de ces photographies, une évaluation du niveau des rides de la patte d'oie de 3036960 27 chaque volontaire a été réalisée par un panel d'évaluateurs experts selon une échelle de score préalablement définie. Cet effet a été étudié après 28 jours de traitement biquotidien. De plus, l'effet rémanent du principe actif a aussi été évalué jusqu'à 14 jours après l'arrêt. 5 L'étude de l'effet du principe actif de l'exemple 1 après 28 jours d'application a été réalisée sur 20 volontaires sains, de sexe féminin, d'âge compris entre 46 et 64 ans, leur âge moyen étant de 56 ± 6 ans. Parmi ces 20 volontaires, 12 ont poursuivi l'étude afin d'étudier l'effet rémanent du principe actif selon l'invention. L'évaluation des rides de la patte d'oie a été réalisée selon les recommandations 10 suivantes : - évaluation de la profondeur de la ride la plus profonde - ne pas tenir compte du nombre de rides - ne pas tenir compte de la longueur des rides - ne pas tenir compte des cicatrices éventuelles 15 Un résumé des résultats correspondant à l'effet anti-rides du principe actif selon l'invention comparé au placebo sur le stade de rides des pattes d'oie évalué par scorage visuel par experts sur photographies numériques après 28 jours d'applications biquotidiennes, est présenté dans le tableau 14. Variation / Placebo (%) Principe actif selon -13,6% l'invention 3% Tableau 14 : Effet d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion sur le 20 stade de rides des pattes d'oie évalué par scorage visuel sur photographies numériques en comparaison à un placebo. De plus, un résumé des résultats correspondant à l'effet rémanent du principe actif selon l'invention comparé au placebo sur le stade de rides des pattes d'oie évalué par scorage 25 visuel par experts sur photographies numériques 14 jours après l'arrêt du traitement, est présenté dans le tableau 15. 3036960 28 Score moyen (UA) JO J28 14 jours après arrêt du traitement Placebo 4,4 4,3 4,3 Principe actif selon l'invention 3% 4,3 3,7 3,7 Tableau 15 : Effet rémanent d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion sur le stade de rides des pattes d'oie évalué par scoraqe visuel sur photographies numériques en comparaison à un placebo. 5 Dans les conditions de cette étude, après 28 jours d'applications biquotidiennes, le principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion réduit significativement de 13,6% le stade de rides moyen au niveau des pattes d'oie après une évaluation visuelle réalisée en aveugle sur photographies. L'étude de l'effet rémanent a permis de montrer un maintien de l'efficacité du principe 10 actif selon l'invention après 14 jours d'arrêt du traitement. En effet, le stade de rides du côté traité par le principe actif selon l'invention est resté inférieur au stade de rides du côté ayant reçu le traitement placebo avec un écart de 12,1% après 14 jours d'arrêt d'application des formules. B.6 - Effet sur l'éclat du teint 15 L'objectif de cette étude a été d'évaluer, in vivo, l'effet d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion sur l'éclat du teint du visage en comparaison à un placebo. Cette étude a été menée sur 20 volontaires sains, de sexe féminin, âgées de 45 à 63 ans (âge moyen 53 ± 8 ans) présentant un teint terne et une peau à tendance sèche au niveau du visage. 20 L'évaluation de l'éclat du teint du visage a été réalisée en aveugle, par deux experts entraînés, avant et après 28 jours d'applications biquotidiennes du placebo ou du principe actif selon l'invention. L'évaluation se fait à partir d'échelles de scores (de 1 à 10) et les paramètres suivants ont été retenus : 3036960 29 - Le rayonnement de la peau est caractéristique d'un teint éclatant. Plus l'intensité des accroches de lumière sur les zones saillantes du visage est importante plus la peau est lumineuse. - Le grain de peau, en effet l'irrégularité de la surface cutanée est 5 corrélée à l'aspect terne de la peau. - La couleur rose claire permet de caractériser un teint éclatant. Plus le teint est rosé plus il est perçu comme frais. - La couleur olive, ce paramètre est représentatif de l'effet bonne mine, si la couleur olive diminue l'effet bonne mine est plus important. 10 - L'état de fatigue des yeux, en effet le teint paraît plus éclatant lorsque la peau est reposée. L'évaluation de l'aspect des yeux permet d'apprécier la fatigue générale de la peau. - L'appréciation générale de l'effet bonne mine rend compte de l'homogénéité de couleur et de sa répartition spatiale sur l'ensemble du 15 visage. L'évaluation de ces différents paramètres se fait sur les zones suivantes : - Pommettes - Front - Menton 20 - Yeux Un résumé des résultats correspondant à l'effet du principe actif selon l'invention comparé au placebo sur l'évaluation de l'éclat du teint par deux experts est présenté dans le tableau 16. Variation / Placebo (%) Rayonnement +10,6% Grain de peau +10,5% Couleur rose +14,4% Couleur olive -10,8% Etat de fatigue des yeux -5,0% Effet bonne mine +12,0% Tableau 16 : Effet d'un principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion sur l'éclat du teint 25 en comparaison au placebo après 28 jours d'applications biquotidiennes. 3036960 30 Dans les conditions de cette étude, après 28 jours d'applications biquotidiennes et en comparaison au placebo, le principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion : - améliore significativement le rayonnement de la peau de 10,6% - joue sur le microrelief de la peau en affinant le grain de la peau de 10,5% 5 - augmente significativement la couleur rose, caractéristique d'un teint frais de 14,4% et apporte un effet bonne mine (+12,0%), Enfin, le principe actif selon l'invention diminue significativement la couleur olive de 10,8% et l'état de fatigue des yeux de 5,0%. REVENDICATIONS1. Principe actif cosmétique, caractérisé en ce qu'il est issu de graines de Parkia biglobosa. 2. Principe actif selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il contient des sucres. 3. Principe actif selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il contient au moins 22% en poids de sucres par rapport au poids total de matières sèches. 4. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il contient également des peptides et/ou des acides uroniques et/ou des polyphénols. 5. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un hydrolysat de graines de Parkia biglobosa. 6. Procédé d'obtention d'un principe actif selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il comprend la mise en oeuvre des étapes suivantes - Solubilisation de poudre de graines de Parkia Biglobosa dans l'eau, - Hydrolyse enzymatique, Séparation des phases soluble et insoluble, Récupération de la phase soluble contenant les sucres, - Inactivation enzymatique par traitement thermique, - Filtration et filtration stérilisante. 7. Procédé d'obtention d'un principe actif de la revendication 6, dans laquelle l'hydrolyse enzymatique est une hydrolyse des saccharides. 8. Procédé d'obtention d'un principe actif de la revendication 6 ou 7, auquel est ajoutée une étape de clarification et/ou une étape de purification des sucres. 9. Composition cosmétique, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins 0,5% en poids de matière sèche d'un principe actif cosmétique issu de graine de Parkia big/obosa. 10. Composition cosmétique selon la précédente revendication, caractérisée en ce que le principe actif issu de graines de Parkia biglobosa est un principe actif selon l'une des revendications 1 à 5. 3036960 32 11. Composition cosmétique selon l'une des revendications 9 ou 10, caractérisée en ce qu'elle se présente sous forme d'émulsions huile-dans-eau, émulsions eau-danshuile, émulsions multiples (Eau/Huile/Eau ou Huile/Eau/Huile) qui peuvent être éventuellement des microémulsions ou des nanoémulsions, ou sous forme de solutions, suspensions, hydrodispersions, gels aqueux ou poudres 12. Procédé cosmétique de soin de la peau pour améliorer l'état de la peau, caractérisé en ce qu'il consiste à appliquer sur la peau un principe actif selon l'une des revendications 1 à 5. 13. Procédé cosmétique de soin de la peau selon la revendication 12 pour 10 améliorer l'hydratation de la peau. 14. Procédé cosmétique de soin de la peau selon l'une des revendications 12 ou 13, pour améliorer l'hydratation de la peau en augmentant la synthèse des aquaporines 3. 15. Procédé cosmétique de soin de la peau selon l'une des revendications 12 à 15 14, pour améliorer l'hydratation de la peau en augmentant la synthèse de l'acide hyaluronique. 16. Procédé cosmétique de soin de la peau selon l'une des revendications 12 à 15, pour renforcer la fonction barrière de la peau. 17. Procédé cosmétique de soin de la peau selon l'une des revendications 12 à 20 16, pour renforcer la fonction barrière de la peau en stimulant la prolifération cellulaire. 18. Procédé cosmétique de soin de la peau selon l'une des revendications 12 à 17, pour renforcer la fonction barrière de la peau en stimulant la cohésion de la fonction barrière cutanée. 19. Procédé cosmétique de soin de la peau selon l'une des revendications 12 à 25 18, pour renforcer la fonction barrière de la peau en stimulant la cohésion de la fonction barrière cutanée par synthèse de la filaggrine. 20. Procédé cosmétique de soin de la peau selon l'une des revendications 12 à 19, pour renforcer la fonction barrière de la peau en stimulant la desquamation. 21. Procédé cosmétique de soin de la peau selon l'une des revendications 12 à 30 20, pour renforcer la fonction barrière de la peau en stimulant les enzymes de la desquamation SCCE et SCTE. 3036960 33 22. Procédé cosmétique de soin la peau selon l'une des revendications 12 à 21, pour améliorer l'état de la peau en affinant le grain de peau et en lissant le microrelief cutané. 23. Procédé cosmétique de soin de la peau selon l'une des revendications 12 à 5 22, caractérisé en ce que le principe actif est appliqué formulé au sein d'une composition cosmétique selon l'une des revendications 9 à 11.