FR 3032718 A1 20160819 FR 1551256 A 20150216 - 1 - « Procédé de culture microbienne mettant en oeuvre un sac à analyse comprenant de la poudre de bouillon de culture ». Introduction L'invention se rapporte à un sac à analyse d'échantillon biologique, à un sac muni d'un sachet, à des procédés de fabrications de ces sacs et sachets ainsi qu'à une utilisation de tels sacs à analyse dans un procédé de culture microbienne. Art antérieur L'invention appartient au domaine de la culture microbienne qui est une technique de laboratoire de développement contrôlé de micro-organismes, de croissance in vitro, en principe d'une seule souche bactérienne. Une telle culture facilite donc l'étude des souches bactériennes. Un milieu de culture est un support qui permet la culture de cellules, de bactéries, de levures ou de moisissures afin de permettre leur étude. En principe, les cellules trouvent dans ce milieu les composants indispensables pour leur multiplication en grand nombre, rapidement, mais aussi parfois des éléments qui permettent de privilégier un genre bactérien ou une famille. Ainsi, selon le but de la culture, il est possible de placer les microorganismes dans des conditions optimales de développement, ou tout à fait défavorables. Un milieu de culture se compose d'une base, par exemple de l'agar-agar, de l'eau, de minéraux, ainsi que d'un indicateur coloré de pH ou de réaction d'oxydo-réduction pour permettre de formuler des hypothèses sur le genre. Il existe aussi des bouillons de culture qui possèdent la même fonction, mais ces milieux ne contiennent pas d'agar-agar et sont donc totalement liquides. Plus précisément, l'invention s'intéresse aux bouillons de culture. On connaît des bouillons de culture conditionnés sous forme de bouteille ou de poche. Le transport de ces bouteilles ou de ces poches est une charge financière pour leur utilisateur. Les bouteilles comme les poches sont volumineuses, encombrantes et difficiles à stocker. De plus, elles présentent une durée de d'utilisation relativement courte. En outre, une bouteille ou une poche entamée doit être utilisée dans une période maximale de 48 heures sous peine de contamination. Un autre inconvénient 3032718 - 2 - de ces conditionnements est la difficulté de manutention qui génère des troubles musculo squelettiques. On connaît des bouillons de culture conditionnés sous forme de poudre. Le bouillon de culture est reconstitué par chauffage de cette poudre avec de 5 l'eau stérilisée et par agitation. Un inconvénient de ce type de conditionnement est que l'étape de reconstitution est chronophage. Elle implique des manipulations de confection, de distribution et de stérilisation. Un autre inconvénient de ce type de conditionnement est qu'il implique en outre parfois l'utilisation de produits thermosensibles tels que le Frazer 10 demi, ce qui nécessite à nouveau de s'assurer de la stérilité de cette opération d'ajout de produits. Nécessitant du temps et la réalisation d'un certain nombre d'étapes, une étape de reconstitution est mise en oeuvre pour une bouteille de grande capacité, c'est à dire un contenant présentant un volume important. Un autre inconvénient de ce conditionnement est 15 donc la difficulté de manutention de cette bouteille qui génère des troubles musculo squelettiques. Un but de l'invention est de proposer un conditionnement d'un bouillon de culture qui propose une solution à tout ou partie des inconvénients précités. 20 En particulier, un but de l'invention est de proposer un conditionnement d'un bouillon de culture qui ne nécessite pas de mise en oeuvre d'étape chronophage telle que visée ci-dessus. Un autre but de l'invention est de proposer un conditionnement d'un bouillon de culture nécessitant moins de manipulation. 25 Un autre but de l'invention est de proposer un conditionnement d'un bouillon de culture présentant une conformation plus réduite. Un autre but de l'invention est de proposer un conditionnement d'un bouillon de culture présentant une plus grande durée de d'utilisation. Un autre but de l'invention est de proposer un conditionnement réduisant 30 les frais de transport. Un autre but de l'invention est de proposer un conditionnement permettant de limiter les risques de trouble musculo squelettiques. Exposé de l'invention Selon un premier aspect de l'invention, il est proposé un sac à analyse destiné à recevoir un échantillon biologique et à être mis en oeuvre dans 3032718 - 3 - une culture microbienne. Selon l'invention, le sac à analyse comprend une poudre de bouillon de culture. Cette poudre de bouillon de culture est apte à reconstituer un bouillon de culture lorsqu'elle est mélangée avec un liquide, par exemple de l'eau 5 stérile. La solution ainsi obtenue est homogénéisée par un système d'homogénéisation, par exemple un malaxeur de laboratoire ou un agitateur. Ainsi, le sac à analyse suivant l'invention résout les problèmes précités. Le sac à analyse suivant l'invention est de préférence prévu pour être 10 utilisé par un malaxeur de laboratoire dans le but de réaliser des extractions bactérienne de l'échantillon biologique. Selon une première particularité, le sac à analyse comprend un sachet et la poudre de bouillon de culture est délimitée par au moins un sachet, le sachet présentant une interface poreuse. L'interface poreuse permet le 15 passage de l'eau sans laisser passer la poudre. Le sachet peut par exemple être constitué d'un matériau non-tissé. Le sachet peut par exemple présenter une épaisseur de 150 pm. Le sachet peut par exemple présenter une porosité comprenant des ouvertures d'environ 10 pm. 20 Le sachet peut par exemple présenter une masse surfacique de 10 g/m2. Dans un mode de réalisation particulier, le sachet présente une combinaison d'au moins deux parmi les quatre caractéristiques précitées de matériau, d'épaisseur, de porosité et de masse surfacique. Le sachet peut présenter une combinaison de trois ou quatre 25 caractéristiques précitées de matériau, d'épaisseur, de porosité et de masse surfacique. Selon une deuxième particularité, le sac à analyse comprend deux compartiments présentant une paroi commune poreuse, le premier compartiment étant adapté pour recevoir la poudre de bouillon de culture et 30 le deuxième compartiment étant adapté pour recevoir l'échantillon biologique. La poudre de bouillon de culture peut être contenue dans un berlingot dont l'enveloppe est constituée d'un film hydrosoluble. Alternativement, l'enveloppe du berlingot peut être constituée d'un film présentant une zone 35 de rupture prédéterminée. 3032718 - 4 - Avantageusement, le sac à analyse contenant la poudre de bouillon de culture selon l'invention est stérilisé. De préférence, le sac à analyse selon l'invention est ensaché sous gaine plastique et stérilisée. 5 Selon un deuxième aspect de l'invention, il est proposé un sachet adapté pour être inséré dans un sac à analyse selon l'invention. Selon l'invention, le sachet comprend une poudre de bouillon de culture. De préférence, le sachet selon l'invention est constitué d'un pliage d'un matériau poreux et de soudures de ce matériau poreux de manière que la 10 poudre de bouillon de culture est prisonnière du sachet. Selon un troisième aspect de l'invention, il est proposé un procédé de fabrication d'un sachet selon l'invention, à partir d'une feuille d'un matériau poreux. Selon l'invention, le procédé de fabrication du sachet comprend les étapes de : 15 - dépose d'une poudre de bouillon de culture sur une zone de la feuille ; - pliage en deux de la feuille et soudure de trois côtés de la feuille pliée de manière que la poudre de bouillon de culture soit prisonnière du sachet ainsi fabriqué. Selon un quatrième aspect de l'invention, il est proposé un procédé de 20 fabrication d'un sac à analyse selon l'invention, ce procédé comprenant : - une étape d'insertion dans le sac à analyse d'une poudre de bouillon de culture, - une étape d'ensachement du sac à analyse ainsi obtenu sous gaine plastique, 25 - une étape de stérilisation de l'ensachement obtenu. L'étape de stérilisation peut être mise en oeuvre par un procédé de radiostérilisation. Ce procédé met en oeuvre un rayonnement pour détruire à froid tous les types de micro-organismes, bactéries, moisissures, etc. On traite ainsi des emballages pharmaceutiques ou alimentaires, des enzymes 30 industrielles, des cosmétiques, etc. Avantageusement et lorsque le sac à analyse comporte un compartiment adapté pour recevoir la poudre de bouillon de culture, le procédé comprend en outre une étape de fermeture du compartiment par une paroi poreuse, cette étape étant mise en oeuvre postérieurement à l'étape d'insertion de la 35 poudre de bouillon de culture. 3032718 - 5 - Lorsque le sac à analyse comporte un compartiment adapté pour recevoir la poudre de bouillon de culture, l'insertion de la poudre de bouillon de culture peut être réalisée dans le compartiment. Cette insertion peut être mise en oeuvre préalablement à une étape de fermeture du compartiment 5 par une paroi poreuse. Avantageusement, l'étape d'insertion de la poudre de bouillon de culture est réalisée par insertion d'au moins un sachet selon l'invention dans le sac à analyse. Selon un cinquième aspect de l'invention, il est proposé un procédé de 10 culture microbienne mettant en oeuvre un sac à analyse selon l'invention. De préférence, le procédé de culture microbienne selon l'invention comprend une étape d'ajout d'eau stérilisée dans le sac à analyse postérieure à l'insertion de poudre de bouillon de culture dans le sac à analyse, avant ou après l'insertion d'un échantillon biologique dans le sac à 15 analyse. Description des figures D'autres particularités et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture de la description détaillée de mises en oeuvre et de modes de réalisation nullement limitatifs, au regard de figures annexées sur 20 lesquelles : - la FIGURE 1 est une vue schématique d'un sac à analyse 10 selon un premier mode de réalisation de l'invention ; - la FIGURE 2 est une vue schématique d'un sac à analyse 20 selon un deuxième mode de réalisation de l'invention. 25 Description de l'invention Ces modes de réalisation n'étant nullement limitatifs, on pourra notamment réaliser des variantes de l'invention ne comprenant qu'une sélection de caractéristiques décrites par la suite, telles que décrites ou généralisées, isolées des autres caractéristiques décrites, si cette sélection 30 de caractéristiques est suffisante pour conférer un avantage technique ou pour différencier l'invention par rapport à l'état de la technique. La FIGURE 1 illustre un premier mode de réalisation d'un sac à analyse 10 selon l'invention. Le sac à analyse 10 présente un contenant 11 sous la forme d'un sac adapté pour la culture microbienne d'un échantillon 35 biologique. Le contenant 11 comprend, par exemple, du film polymère, ainsi 3032718 -6 que toute combinaison adaptée de matériau afin que le contenant 11 possède des propriétés physiques suffisantes en termes de tenue d'étanchéité du contenant 11. Le contenant 11 est pourvu d'une ouverture 12. 5 L'ouverture 12 permet l'introduction d'un échantillon biologique à l'intérieur du contenant 11. Le sac à analyse 10 comprend une poudre de bouillon de culture 14 représentée par la partie hachurée sur la FIGURE 1. Plus précisément, le contenant 11 présente un compartiment 15 délimité 10 par une paroi de fond du contenant 11 du côté opposé à l'ouverture 12 et une paroi poreuse 16 représentée par des carrés sur la FIGURE 1. La paroi poreuse 16 sépare le contenant en deux compartiments 15 et 17. Ainsi, le sac à analyse 10 comprend deux compartiments 15, 17 présentant une paroi commune poreuse 16, le premier compartiment 15 15 étant adapté pour recevoir la poudre de bouillon de culture 14 et le deuxième compartiment 17 étant adapté pour recevoir l'échantillon biologique. Ainsi, un sac à analyse 10 peut être fabriqué à partir d'un sac à analyse classique en mettant en oeuvre : 20 - une étape d'insertion dans le sac à analyse d'une poudre de bouillon de culture 14 ; - une étape d'ensachement du sac à analyse ainsi obtenu sous gaine plastique ; - une étape de stérilisation de l'ensachement obtenu. 25 Le procédé de fabrication du sac à analyse 10 comprend en outre une étape de fermeture du compartiment 15 par la paroi poreuse 16, cette étape étant mise en oeuvre postérieurement à l'étape d'insertion de la poudre de bouillon de culture. Il est particulièrement astucieux d'utiliser un tel sac à analyse 10 dans 30 une culture microbienne. En effet et selon l'invention, une culture microbienne utilisant un tel sac à analyse comprend une étape d'ajout d'eau stérile postérieure à l'insertion de poudre de bouillon de culture 14 dans le sac à analyse 10. Ainsi, en fonction du poids de l'échantillon à analyser, il est possible de 35 choisir le sac à analyse contenant une masse adéquate de bouillon de 3032718 - 7 - culture et d'y ajouter le volume d'eau stérilisée nécessaire. Ainsi, plus le poids de l'échantillon à analyser est grand, plus il est choisi un bouillon de culture important en masse. Par exemple, pour 25 grammes d'échantillon biologique à analyser, on 5 peut utiliser un bouillon de culture comprenant 5,7 grammes d'eau peptonnée tamponnée en poudre ou 2,1 grammes de tryptone sel en poudre ou 13 grammes de Frazer demi supplémenté en poudre. Un tel bouillon de culture est reconstitué par ajout de 225 millilitres d'eau stérilisée. 10 Par exemple, pour 10 grammes d'échantillon biologique à analyser, on peut utiliser un bouillon de culture comprenant 2,3 grammes d'eau peptonnée tamponnée en poudre ou 0,9 grammes de tryptone sel en poudre ou 5,2 grammes de Frazer demi supplémenté en poudre. Un tel bouillon de culture est reconstitué par ajout de 90 millilitres d'eau stérilisée. 15 Il est ainsi possible d'utiliser selon le poids de l'échantillon à analyser, différentes masses de différentes poudres de bouillon de culture alors que le volume d'eau stérilisée à rajouter reste le même. Lorsqu'il a été introduit à l'intérieur du contenant 11, le milieu de culture est utilisé pour la culture microbienne de l'échantillon biologique à l'intérieur 20 du contenant 11. La FIGURE 2 illustre un deuxième mode de réalisation d'un sac à analyse 20 selon l'invention. Le sac à analyse 20 présente un contenant 21 sous la forme d'un sac adapté pour la culture microbienne d'un échantillon biologique. Le contenant 21 comprend, du film polymère, ainsi que toute 25 combinaison adaptée de matériau afin que le contenant 21 possède des propriétés physiques suffisantes en termes de tenue d'étanchéité du contenant 21. Le contenant 21 est pourvu d'une ouverture 22. L'ouverture 22 permet l'introduction d'un échantillon biologique à l'intérieur du contenant 21. 30 Le sac à analyse 20 comprend une poudre de bouillon de culture 24a, 24b représentée par des parties hachurées sur la FIGURE 2. Plus précisément, la poudre de bouillon de culture 24a, 24b est délimitée par deux sachets 25a, 25b. Les sachets 25a, 25b présentent une interface poreuse 26a, 26b représentée par des carrés sur la FIGURE 2. 3032718 - 8 - Les sachets 25a, 25b sont constitués d'un pliage d'un matériau poreux et de soudures de ce matériau poreux de manière que la poudre de bouillon de culture 24a, 24b est respectivement prisonnière des sachets 25a, 25b. Ainsi, les parois poreuses 26a, 26b séparent le contenu des deux sachets 5 25a, 25b, c'est à dire la poudre de bouillon de culture 24a, 24b du reste 27 du contenant 21 adapté pour recevoir l'échantillon biologique. Un sachet 25a, respectivement 25b, peut être fabriqué à partir d'une feuille d'un matériau poreux, cette fabrication comprenant les étapes de : - dépose de la poudre de bouillon de culture 24a, respectivement 24b, sur 10 une zone de ladite feuille ; - pliage en deux de la feuille et soudure de trois côtés de la feuille pliée de manière que la poudre de bouillon de culture 24a, respectivement 24b, soit prisonnière du sachet ainsi fabriqué. Il existe plusieurs techniques de soudures connues de l'homme du 15 métier, en particulier celles dites de thermo-soudure ou de soudure à ultra- sons. Ainsi, un sac à analyse 20 peut être fabriqué à partir d'un sac à analyse classique en mettant en oeuvre : - une étape d'insertion dans le sac à analyse 20 d'une poudre de bouillon 20 de culture 24a, 24b , cette insertion étant réalisée par une insertion d'au moins un sachet 25a ou 25b qui vient d'être décrit dans le sac à analyse 20 ; - une étape d'ensachement du sac à analyse obtenu sous gaine plastique ; 25 - une étape de stérilisation de l'ensachement obtenu. Il est particulièrement astucieux d'utiliser un tel sac à analyse 20 dans une culture microbienne. En effet et selon l'invention, une culture microbienne utilisant un tel sac à analyse comprend une étape d'ajout d'eau stérile postérieure à l'insertion 30 de sachets 25a, 25b, comprenant chacun une poudre de bouillon de culture 24a, 24b dans le sac à analyse 20. Ainsi, en fonction du poids de l'échantillon biologique à analyser, il est possible de choisir le sac à analyse contenant la masse de bouillon de culture adéquate et d'ajouter le volume d'eau stérilisée nécessaire. 3032718 -9 Par exemple, pour 25 grammes d'échantillon biologique à analyser, on peut utiliser : - un sachet de bouillon de culture comprenant 5,7 grammes d'eau peptonnée tamponnée en poudre, ou 5 - un sachet de bouillon de culture comprenant 2,1 grammes de tryptone sel en poudre, ou - un sachet de bouillon de culture 13 grammes de Frazer demi supplémenté en poudre. Le contenu d'un des trois sachets, une fois dilué par ajout de 225 10 millilitres d'eau stérilisée, constitue le bouillon de culture pour l'analyse de l'échantillon biologique. Par exemple, pour 10 grammes d'échantillon biologique à analyser, on peut utiliser : - un sachet de bouillon de culture comprenant 2,3 grammes d'eau 15 peptonnée tamponnée en poudre, ou - un sachet de bouillon de culture comprenant 0,9 grammes de tryptone sel en poudre, ou - un sachet de bouillon de culture 5,2 grammes de Frazer demi supplémenté en poudre. 20 Le contenu d'un des trois sachets, une fois dilué par ajout de 90 millilitres d'eau stérilisée, constitue le bouillon de culture pour l'analyse de l'échantillon biologique. Il est ainsi possible d'utiliser selon le poids de l'échantillon et selon le type d'analyse à effectuer, différentes masses de différentes poudres de 25 bouillon de culture alors que le volume d'eau stérilisée à rajouter reste le même. Lorsqu'il a été introduit à l'intérieur du contenant 21, le milieu de culture est utilisé pour la culture microbienne de l'échantillon biologique à l'intérieur du contenant 21. 30 Bien sûr, l'invention n'est pas limitée aux exemples qui viennent d'être décrits et de nombreux aménagements peuvent être apportés à ces exemples sans sortir du cadre de l'invention. De plus, les différentes caractéristiques, formes, variantes et modes de réalisation de l'invention 35 peuvent être associés les uns avec les autres selon diverses combinaisons 3032718 - 10 - dans la mesure où ils ne sont pas incompatibles ou exclusifs les uns des autres. Nomenclature 10 premier mode de réalisation d'un sac à analyse 5 11 contenant du sac à analyse 10 12 ouverture du sac à analyse 10 14 poudre de bouillon de culture 15 compartiment de milieu de culture 16 paroi poreuse 10 17 compartiment de l'échantillon biologique 20 second mode de réalisation d'un sac à analyse 21 contenant du sac à analyse 20 22 ouverture du sac à analyse 20 24a, 24b poudre de bouillon de culture 15 25a, 25b sachets de milieu de culture 26a, 26b interface poreuse des sachets 25a, 25b 27 reste du contenant 21 REVENDICATIONS1. Sac à analyse (10 ; 20) destiné à recevoir un échantillon biologique et à être mis en oeuvre dans une culture microbienne, caractérisé en ce qu'il comprend une poudre de bouillon de culture (14 ; 24a, 24b). 2. Sac à analyse (20) selon la revendication 1, caractérisé en ce que la poudre de bouillon de culture (24a, 24b) est délimitée par au moins un sachet (25a, 25b), ledit sachet (25a, 25b) présentant une interface poreuse (26a, 26b). 3. Sac à analyse (10) selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comprend deux compartiments (15, 17) présentant une paroi commune poreuse (16), ledit premier compartiment (15) étant adapté pour recevoir la poudre de bouillon de culture (14) et ledit deuxième compartiment (17) étant adapté pour recevoir l'échantillon biologique. 4. Sac à analyse (10 ; 20) selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le sac à analyse est stérile. 5. Sachet (25a, 25b) adapté pour être inséré dans un sac à analyse (20) selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, ledit sachet (25a, 25b) étant caractérisé en ce qu'il comprend une poudre de bouillon de culture (24a, 24b). 6. Sachet (25a, 25b) selon la revendication 5, caractérisé en ce qu'il est constitué d'un pliage d'un matériau poreux et de soudures dudit matériau poreux de manière que la poudre de bouillon de culture (24a, 24b) est prisonnière dudit sachet (25a, 25b). 7. Procédé de fabrication d'un sachet (25a, 25b) selon la revendication 5 ou 6 à partir d'une feuille d'un matériau poreux, le procédé comprenant les étapes de : 3032718 - dépose d'une poudre de bouillon de culture (24a, 24b) sur une zone de ladite feuille ; - pliage en deux de ladite feuille et soudure de trois côtés de ladite feuille pliée de manière que ladite poudre de bouillon de culture (24a, 24b) soit prisonnière du sachet (25a, 25b) ainsi fabriqué. 8. Procédé de fabrication d'un sac à analyse (10 ; 20) selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu'il comprend : - une étape d'insertion dans ledit sac à analyse (10 ; 20) d'une dose de poudre de bouillon de culture (14 ; 24a, 24b) ; - une étape d'ensachement dudit sac à analyse (10, 20) ainsi obtenu sous gaine plastique ; - une étape de stérilisation dudit ensachement ainsi obtenu, de préférence par radiostérilisation. 9. Procédé de fabrication d'un sac à analyse (10) selon la revendication 8, caractérisé en ce que le sac à analyse (10) comporte un compartiment (15) adapté pour recevoir la poudre de bouillon de culture (14), ledit procédé comprenant en outre une étape de fermeture dudit compartiment (15) par une paroi poreuse (16), ladite étape étant mise en oeuvre postérieurement à l'étape d'insertion de ladite poudre de bouillon de culture (14). 10. Procédé de fabrication d'un sac à analyse (20) selon la revendication 8, caractérisé en ce que l'étape d'insertion de la poudre de bouillon culture (24a, 24b) est réalisée par insertion d'au moins un sachet (25a, 25b) selon l'une des revendications 5 ou 6. 11. Procédé de culture microbienne, caractérisé en ce que ledit procédé met en oeuvre un sac à analyse (10 ; 20) selon l'une quelconque des revendications 1 à 4. 12. Procédé de culture microbienne selon la revendication 11, caractérisé en ce qu'il comprend une étape d'ajout d'eau stérilisée 3032718 dans le sac à analyse postérieure à l'insertion de poudre de bouillon de culture (14 ; 24a, 24b) dans ledit sac à analyse.