FR 3015881 A1 20150703 FR 1363737 A 20131231 PROCEDE DE QUANTIFICATION D'AU MOINS UN PARAMETRE REPRESENTATIF D'UNE BANDE HYPOECHOGENE SOUS-EPIDERMIQUE DOMAINE TECHNIQUE L'invention propose un procédé de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypoéchogène sous-épidermique caractéristique non seulement du tissu cutané mais également du tissu osseux. ETAT DE LA TECHNIQUE ANTERIEUR L'échographie est actuellement utilisée pour explorer le tissu cutané, en particulier le derme et l'hypoderme, l'épiderme étant très rarement exploré in-vivo par ultrasons car il nécessite des résolutions d'image de l'ordre de 10 à 15 pm et donc des fréquences ultrasonores au moins égales à 150 MHz. Le derme, d'une épaisseur variant de moins de 1 mm à quelques millimètres, peut être imagé à des fréquences comprises entre 20 et 100 MHz et l'hypoderme, d'une épaisseur variant de quelques millimètres à plusieurs centimètres, peut être imagé à des fréquences comprises entre 5 et 50 MHz. De nombreuses études portent sur la caractérisation du vieillissement cutané par échographie haute-fréquence. Certaines portent sur la mesure de l'épaisseur du derme par échographie et son évolution avec l'âge. Les résultats de ces études sont souvent contradictoires et fortement dépendants du site cutané. D'autres études, telle que par exemple celle publiée dans le document « In Vivo Cross-sectional Ultrasonic Imaging of Human skin ; B.Querleux, J-L Levêque, J. de Rigal; 1988; 177 :332-337, Dermatologica », sont consacrées à l'analyse de l'échogénicité du tissu cutané et mettent en évidence une bande hypo-échogène située sous l'épiderme et dont les caractéristiques sont couramment associées au phénomène de chrono-vieillissement et de photo-vieillissement. Cette bande hypo-échogène est également dénommée SENEB (pour Sub-Epidermal Non-Echogenic Band en anglais), ou parfois SLEB (pour Sub-Epidermal Low-Echogenic Band en anglais). 3015 881 2 Conventionnellement, les méthodes visant à caractériser la SENEB consistent à mesurer l'épaisseur de celle-ci directement sur l'image échographique au moyen des curseurs de l'échographe ou en post-traitement. Le document « Assessment of aging of the human skin by in vivo ultrasonic 5 imaging; Jean de Rigal, Catherine Escoffier, Bernard Querleux, Brigitte Faivre, Pierre Agache, Jean-Luc Lévêque; 1989, Journal of Investigative Dermatology, vol. 93,621-625. » décrit une telle méthode. En revanche, cette méthode de caractérisation de la SENEB est opérateur-dépendant de la mesure. En effet, la transition entre la limite inférieure 10 de la bande hypo-échogène et le derme « normalement » échogène affichée sur l'écran de l'echographe n'est pas soudaine mais progressive. En conséquence, l'aspect global et la zone de transition de la SENEB sont conditionnés par les réglages de l'echographe (notamment le gain et la compression de la dynamique du signal) mais aussi la fréquence centrale de la sonde échographique. Les 15 limites de cette méthode sont donc liées à son caractère matériel et opérateur- dépendant. Par ailleurs, comme une image échographique est composée de pixels de différentes intensités reflétant l'échogénicité du milieu, une méthode différente est apparue dans les années 1990 et consiste à dénombrer le nombre de pixels 20 de faible intensité au niveau du derme superficiel pour quantifier l'hypoéchogénicité de la SENEB. Les pixels de faible intensité sont déterminés en fixant arbitrairement une valeur seuil identique pour tous les sujets. Cette méthode de l'hypoéchogénicité est décrite dans le document suivant : Ultrasound Structure and digital image analysis of the subepidermal low 25 echogenic band in aged human skin : diurnal changes and interindividual variability; M.Gniadecka, R.Gniadecki, J.Serup, J. Sondergaard; 1994, Journal of Investigative Dermatology 102 362-365. Cependant, cette quantification « tout ou rien » pêche par son manque de sensibilité et donc de précision. Par ailleurs, cette mesure d'hypo-échogénicité 30 de la SENEB ne peut s'affranchir d'une mesure complémentaire de l'épaisseur de SENEB. Il est important de noter ici que ces méthodes sont d'autant moins pertinentes que la fréquence ultrasonore est élevée. En effet, l'échogénicité d'un tissu augmente avec la fréquence d'exploration, par conséquent, si la SENEB apparait comme hypo-échogène à 20 MHz, elle devient échogène à des fréquences de l'ordre de 40-50 MHz. Il en résulte que les méthodes décrites ci-dessus et qui font l'hypothèse d'une visualisation « tout ou rien » de la SENEB sont souvent invalidées à partir de ces fréquences. EXPOSE DE L'INVENTION L'invention a donc pour objectif de remédier aux inconvénients de l'état de la technique. Dans ce contexte, l'invention vise à proposer un procédé non opérateur-dépendant permettant de quantifier de manière objective et précise au moins un paramètre quantitatif représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique caractéristique du tissu cutané tout en étant pertinent pour des fréquences ultrasonores sans limitation haute. A cette fin, l'invention porte sur un procédé de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique mettant en oeuvre une sonde ultrasonore munie d'au moins un transducteur ultrasonore, ledit procédé comportant les étapes suivantes : - acquisition d'au moins une image ultrasonore du tissu cutané au moyen de ladite sonde positionnée sur l'épiderme, - pour chaque image ultrasonore acquise, recalage des lignes radiofréquences de ladite image ultrasonore acquise de sorte à supprimer l'effet de courbure du tissu cutané, - pour chaque image ultrasonore dont les lignes radiofréquences sont recalées, calcul des enveloppes des lignes radiofréquences recalées, - pour chaque image, obtention d'un profil d'échogénicité du tissu cutané imagé à partir desdites enveloppes, - quantification dudit au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique, ladite quantification étant réalisée via ledit profil d'échogénicité. Le procédé selon l'invention est un procédé ultrasonore haute-fréquence et propose de quantifier in-vivo la bande hypo-échogène sous-épidermique (ou SENEB) du tissu cutané de manière non-opérateur dépendant. Outre les caractéristiques qui viennent d'être évoquées dans le paragraphe précédent, le procédé selon l'invention peut présenter une ou plusieurs caractéristiques complémentaires parmi les suivantes, considérées individuellement ou selon toutes les combinaisons techniquement possibles. Dans une mise en oeuvre non limitative, le profil d'échogénicité du derme imagé est obtenu par addition des enveloppes des lignes radiofréquences recalées. Dans une mise en oeuvre non limitative, le procédé selon l'invention comporte une sous-étape de détermination, via le profil d'échogénicité, d'une 10 zone représentative de la bande hypo-échogène. Dans une mise en oeuvre non limitative, la zone représentative de la bande hypo-échogène est formée par une concavité disposée entre deux pics que présente le profil d'échogénicité, ladite concavité étant située entre le premier pic représentatif de l'épiderme et le deuxième pic successif au dit 15 premier pic. Dans une mise en oeuvre non limitative, le au moins un paramètre quantifié est un paramètre absolu, le paramètre absolu étant: - la hauteur à mi-largeur de la concavité, et/ou - la largeur de ladite concavité, et/ou 20 - l'aire de la concavité. Dans une mise en oeuvre non limitative, le procédé selon l'invention comporte une sous-étape de détermination d'une zone représentative du derme formée par l'aire située sous la courbe du profil d'échogénicité prenant naissance au niveau d'une droite perpendiculaire à l'axe des abscisses du profil 25 d'échogénicité et passant par la valeur minimale de la concavité, l'aire située sous la courbe du profil d'échogénicité s'étendant jusqu'à un seuil d'échogénicité prédéterminé, le au moins un paramètre quantifié étant un paramètre relatif choisi parmi les paramètres suivants : - la hauteur à mi-largeur de la concavité par rapport à la hauteur à 30 mi-largeur de ladite zone représentative du derme, et/ou - la largeur de la concavité par rapport à la largeur de ladite zone représentative du derme, et/ou - l'aire de la concavité par rapport à l'aire de ladite zone représentative du derme. Dans une mise en oeuvre non limitative, lorsqu'au moins deux d'images ultrasonores du tissu cutané sont acquises, le procédé comporte une étape de calcul d'une moyenne de l'ensemble des profils d'échogénicité obtenus. Dans une mise en oeuvre non limitative, le procédé selon l'invention comporte une étape d'ajustement mathématique du profil d'échogénicité. Dans une mise en oeuvre non limitative, lorsqu'au moins deux images ultrasonores du tissu cutané sont acquises, ledit procédé comporte une étape de calcul d'une moyenne de l'ensemble des profils d'échogénicité ajustés. Dans une mise en oeuvre non limitative, le procédé selon l'invention comporte une étape de correction de la diffraction du transducteur ultrasonore sur les profils d'échogénicité. Dans une mise en oeuvre non limitative, seulement une fraction des lignes radiofréquences de l'image ultrasonore acquise est employée. Dans une mise en oeuvre non limitative, lorsque la sonde ultrasonore est une sonde 2D un gel solide est appliqué entre le transducteur ultrasonore de ladite sonde 2D et l'épiderme. Dans une mise en oeuvre non limitative, lorsque la sonde ultrasonore est une sonde 3D un liquide visqueux est appliqué entre le transducteur ultrasonore de ladite sonde 3D et l'épiderme. L'invention porte en outre sur une méthode de détermination d'un état cutané, ladite méthode mettant en oeuvre les étapes du procédé de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo- échogène sous-épidermique selon l'invention de façon à quantifier au moins un paramètre représentatif d'une bande hypoéchogène sous-épidermique, ladite méthode de détermination d'un état cutané comportant en outre une étape de comparaison dudit paramètre quantifié avec un paramètre de référence du tissu cutané. Dans une mise en oeuvre non limitative de la méthode de détermination d'un état cutané selon l'invention, l'état cutané déterminé correspond à un degré de vieillissement chronologique du tissu cutané, ou encore à un degré de photo-exposition du tissu cutané. Dans une mise en oeuvre non limitative de la méthode de détermination d'un état cutané selon l'invention, le paramètre de référence du tissu cutané est le même type de paramètre que le paramètre quantifié: - le paramètre quantifié se distinguant dudit paramètre de référence par un facteur d'étude, - le paramètre quantifié étant mesuré sur une zone différente de celle dudit paramètre de référence, et/ou - le paramètre de référence étant obtenu par une méthode de mesure alternative au procédé de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous- épidermique selon l'invention. L'invention porte également sur une méthode de sélection d'un agent actif (par exemple de type cosmétique) fonction d'un état cutané déterminé au moyen de la méthode de détermination d'un état cutané selon l'invention, ledit agent actif sélectionné visant à ralentir ou atténuer le vieillissement ou le photovieillisement au niveau sous-épidermique. L'invention concerne par ailleurs une méthode d'évaluation de l'efficacité d'un agent actif (par exemple de type cosmétique), ladite méthode d'évaluation comportant les étapes suivantes : - mise en oeuvre, à un instant t, du procédé de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique selon l'invention de façon à quantifier au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique, - utilisation d'un agent actif agissant sur la bande hypoéchogène sous- épidermique, - mise en oeuvre, à un instant t+1, du procédé de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique selon l'invention de façon à quantifier le au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique, - comparaison du au moins un paramètre quantifié à l'instant t avec le au moins un paramètre quantifié correspondant à l'instant t+1 de façon à déterminer l'efficacité de l'agent actif utilisé. L'invention porte de surcroît sur une méthode de détermination d'un état du tissu osseux, ladite méthode mettant en oeuvre les étapes du procédé de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypoéchogène sous-épidermique selon l'invention de façon à quantifier au moins un paramètre représentatif d'une bande hypoéchogène sous-épidermique, ladite méthode de détermination d'un état du tissu osseux comportant en outre une étape de détermination de l'état du tissu osseux en fonction de la valeur dudit paramètre quantifié. Dans une mise en oeuvre non limitative de la méthode de détermination d'un état du tissu osseux selon l'invention, l'étape de détermination consiste à estimer : - la densité minérale osseuse en fonction de la hauteur de la concavité (ou la hauteur relative), - l'épaisseur de la corticale en fonction de la largeur de la concavité (ou la largeur relative), et/ou - le dosage du marqueur de résorption CTX en fonction de la largeur de la concavité (ou la largeur relative). L'invention porte aussi sur une méthode de sélection d'un agent actif fonction d'un état du tissu osseux déterminé au moyen de la méthode de détermination d'un état du tissu osseux selon l'invention, ledit agent actif sélectionné visant à ralentir ou atténuer le vieillissement du tissu osseux. L'invention porte également sur une méthode d'évaluation de l'efficacité d'un agent actif visant à ralentir ou atténuer le vieillissement du tissu osseux, la méthode d'évaluation comportant les étapes suivantes : - mise en oeuvre, à un instant t, du procédé de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique selon l'invention de façon à quantifier au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique, - utilisation d'un agent actif agissant sur le tissu osseux, - mise en oeuvre, à un instant t+1, du procédé de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique selon l'invention de façon à quantifier le au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique, - comparaison du au moins un paramètre quantifié à l'instant t avec le au moins un paramètre quantifié correspondant à l'instant t+1 de façon à déterminer l'efficacité de l'agent actif agissant sur le tissu osseux utilisé. BREVE DESCRIPTION DES FIGURES Les figures ne sont présentées qu'à titre indicatif et nullement limitatif de l'invention. Les figures montrent : - à la figure 1, un exemple de mise en oeuvre des étapes d'un procédé de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo- échogène sous-épidermique selon l'invention ; - à la figure 2, de manière schématique une sonde mise en oeuvre pour réaliser différentes étapes du procédé selon l'invention, - à la figure 3, une image ultrasonore du tissu cutané, - à la figure 4, une ligne radiofréquence isolée provenant de l'image ultrasonore représentée sur la figure 3, - à la figure 5, une image ultrasonore correspondant à l'image ultrasonore représentée sur la figure 3 dont l'effet de courbure a été supprimé, - à la figure 6, un exemple de profil d'échogénicité représentatif de l'échogénicité de l'image ultrasonore illustrée sur la figure 5, - à la figure 7, différents paramètres d'un profil d'échogénicité, - à la figure 8A, un paramètre relatif quantifié correspondant à l'épaisseur de la SENEB/épaisseur du derme, - à la figure 8B, un paramètre relatif quantifié correspondant à la variation d'échogénicité de la SENEB/Ia variation d'échogénicité du derme, - à la figure 8C, un paramètre relatif quantifié correspondant à la surface de la SENEB/Ia surface du derme, - à la figure 9, une mise en oeuvre non limitative d'une méthode de détermination d'un état cutané selon l'invention, - à la figure 10, une mise en oeuvre non limitative d'une méthode de sélection d'un agent actif fonction d'un état cutané selon l'invention, - à la figure 11, une mise en oeuvre non limitative d'une méthode d'évaluation de l'efficacité d'un agent actif selon l'invention, - à la figure 12, une mise en oeuvre non limitative d'une méthode de détermination d'un état du tissu osseux selon l'invention, - à la figure 13, une mise en oeuvre non limitative d'une méthode de sélection d'un agent actif fonction d'un état du tissu osseux selon l'invention, - à la figure 14, une mise en oeuvre non limitative d'une méthode d'évaluation de l'efficacité d'un agent actif sur le tissu osseux selon l'invention. DESCRIPTION DETAILLEE D'AU MOINS UN MODE DE REALISATION DE L'INVENTION La figure 1 représente un synoptique des étapes d'un procédé 100 de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypoéchogène sous-épidermique conforme à une mise en oeuvre non limitative de l'invention. Le procédé 100 met en oeuvre un dispositif, formé par exemple par un échographe, muni d'une sonde ultrasonore 1 (représentée sur la figure 2), cette sonde 1 étant munie d'un unique transducteur ultrasonore ou d'une pluralité de transducteurs ultrasonores 2. Cette sonde 1 peut être de type 2D ou 3D. Pour la mise en oeuvre des étapes du procédé 100, le nez de la sonde 1 est positionné au contact du tissu cutané 3 (ou peau). Le tissu cutané 3 présente une couche superficielle dénommée épiderme 4, une couche située sous la couche superficielle 4 dénommée derme 5 et une couche profonde située sous le derme 5, cette couche étant dénommée hypoderme 6. Le couplage acoustique entre l'épiderme 4 et la sonde 1 et plus particulièrement les surfaces d'émission et de réception 7 des transducteurs ultrasonores 2 peut être réalisé de différente manière. A titre d'exemple non limitatif, dans le cas d'une sonde 2D un gel 8 solide est appliqué entre les surfaces d'émission et de réception 7 des transducteurs ultrasonores 2 de la sonde 2D et l'épiderme 4. Une sonde 2D à 50 MHz présentant une largeur de balayage de 15 mm et une fréquence image (ou « frame rate » en anglais) de 10 Hz peut être utilisée. Selon ce type de sonde, chaque image 2D (B-scan) obtenue est composée de 299 lignes radiofréquences d'une profondeur d'exploration de 3.2 mm. A titre d'exemple non limitatif, dans le cas d'une sonde 3D un liquide visqueux est appliqué entre les surfaces d'émission et de réception 7 du transducteur ultrasonore 2 de la sonde 3D et l'épiderme 4. L'utilisation d'un liquide légèrement visqueux permet de s'affranchir des bulles d'air présentes dans un gel de couplage standard et nuisibles à la réalisation d'une image échographique haute-fréquence. En effet, la présence de bulles d'air génère des zones d'ombres acoustiques sur l'image échographique. Un exemple de couplant acoustique formé par un liquide légèrement visqueux pouvant être utilisé est l'antiseptique cutané Diaseptyl® en solution aqueuse (Laboratoires Ducray). Une sonde 3D à 50 MHz présentant une surface de balayage de 15x15 mm2 et une fréquence image de 10 Hz peut être utilisée. Selon ce type de sonde, une acquisition 3D (C-scan) est composée de 300 images 2D (B-scan), chaque image 2D (B-scan) étant composée de 299 lignes radio-fréquences. A titre d'exemple non limitatif, chacune des sondes 2D ou 3D possède une résolution axiale de l'ordre de 70 pm et une résolution latérale de l'ordre 15 de 120 pm. Le procédé 100 selon l'invention met en oeuvre une étape d'acquisition 101, d'au moins une image ultrasonore 9 du tissu cutané 3 au moyen de la sonde 1 positionnée sur l'épiderme 4. Un exemple d'image ultrasonore acquise 9 est illustré sur la figure 3. Sur l'exemple d'image ultrasonore 9, 20 l'épiderme est formé par la ligne courbe 4 la plus échogène située en haut de l'image 9 et est confondu avec la membrane (non représentée) de la sonde 1 du fait de l'emploi du liquide visqueux comme couplant acoustique. En effet, dans cette exemple la couche de couplant n'est que de quelques dizaines de ilm. En dessous, une zone sombre hypo-échogène correspond à la SENEB 10, puis le 25 derme 5 est associé à la zone échogène la plus épaisse d'environ 1 mm. Comme illustré sur la figure 4, on en déduit de cette image ultrasonore 9, une pluralité de lignes radiofréquences, une seule est représentée et correspond à une ligne radiofréquence 11 située approximativement au centre de l'image 9 et est matérialisée, à titre illustratif, par la ligne verticale 12. 30 Il convient par ailleurs de noter que l'image ultrasonore 9 est acquise en prenant en compte la focale du transducteur ultrasonore 2 de manière à optimiser la résolution. Ainsi, la profondeur à laquelle se trouve le derme 5 correspond approximativement à la distance focale du transducteur ultrasonore 2, cette focale étant matérialisée à titre illustratif, par la ligne horizontale 13. Au moment de l'acquisition 101, on peut également optimiser la numérisation du signal analogique : l'échographe permet de régler le gain de manière à ce que l'amplitude maximale des signaux radio-fréquences du derme 5 corresponde aux 3/4 de la pleine échelle de numérisation. Pour chaque image ultrasonore acquise 9, le procédé 100 selon l'invention met en oeuvre, via des moyens de recalage (formés par exemple par un microprocesseur), une étape de recalage 102 des lignes radiofréquences 11 de l'image ultrasonore 9 acquise de sorte à supprimer l'effet de courbure du tissu cutané 3. Cette étape 102 de recalage consiste à supprimer la courbure du tissu cutané 3 sur l'image en réalignant les lignes radiofréquences les unes par rapport aux autres. Pour cela on effectue une détection automatique de l'épiderme 4 sur l'image échographique 9 puis les lignes radiofréquences sont recalées par rapport à la ligne radiofréquence pour laquelle le début de l'épiderme est le plus proche de l'origine (cette ligne radiofréquence pour laquelle le début de l'épiderme est le plus proche de l'origine est située approximativement au centre de l'image 9 dans l'exemple illustré sur la figure 3 et est matérialisée par la ligne verticale 12). Par comparaison à l'image ultrasonore acquise 9, dès lors que l'effet de courbure est supprimé on obtient une image ultrasonore 14 conforme à celle illustrée sur la figure 5. Pour chaque image ultrasonore, le procédé 100 selon l'invention met en oeuvre, via des moyens de calcul d'enveloppe (formés par exemple par un 25 microprocesseur), une étape 103 de calcul des enveloppes des lignes radiofréquences recalées. Pour réaliser cette étape 103 de calcul des enveloppes des lignes radiofréquences recalées, on extrait les lignes radiofréquences de l'image ultrasonore 14 puis on redresse le signal radio-fréquence, i.e. on prend sa 30 valeur absolue, et ensuite on applique un filtre passe-bas afin de ne conserver que la composante basse fréquence du signal. Pour chaque image acquise 9, le procédé 100 selon l'invention met en oeuvre, via des moyens d'obtention (formés par exemple par un 3015 881 12 microprocesseur), une étape 104 d'obtention d'un profil d'échogénicité 15 du tissu cutané imagé à partir des enveloppes. Dans une mise en oeuvre non limitative, le profil d'échogénicité 15 du tissu cutané imagé 3 est obtenu par addition des enveloppes des lignes 5 radiofréquences recalées. Plus particulièrement, les enveloppes des lignes radiofréquences sont sommées afin d'obtenir un signal moyen représentatif de l'image échographique 14 dont les lignes radiofréquences sont recalées. Pour éviter les effets liés à l'appui de la sonde sur le tissu cutané que l'on peut distinguer sur les bords de l'image 14, seulement une fraction des lignes 10 radiofréquences de l'image ultrasonore acquise est employée. Cette fraction est par exemple formée par les lignes radiofréquences comprises entre la 50ème et 250è". La moyenne des enveloppes des lignes radiofréquences recalées déduite illustrée sur la figure 6 correspond au profil d'échogénicité 15 du tissu cutané imagé. 15 Le procédé 100 selon l'invention peut met en oeuvre, via des moyens de correction (formés par exemple par un microprocesseur), une étape de correction 105 de la diffraction du transducteur ultrasonore 2. Ainsi la variation de sensibilité du transducteur en fonction de la profondeur est rendue constante. Cette correction est directement appliquée sur le profil d'échogénicité. 20 La diffraction peut être mesurée comme décrit ci-après. Les variations de sensibilité de la sonde en fonction de la profondeur dues à l'effet de diffraction sont mesurées en mode émission/réception sur une cible plane pour des profondeurs comprises entre la distancefocale/2 à la distancefocale*2 et des incréments d'une demi longueur d'onde. Les amplitudes crête à crête (c-à-c) de l'écho de réflexion sont mesurées pour chaque profondeur et normalisées par rapport à la distance focale (amplitude c-à-c maximale). Ainsi, la correction vaut 1 à la distance focale et vaut (amplitude c-à-c à la focale)/(amplitude c-à-c à la profondeur i) pour la profondeur i. La courbe de correction obtenue est ensuite multipliée au profil d'échogénicité. Dans une première mise en oeuvre non limitative, lorsqu'au moins deux images ultrasonores 9 du tissu cutané 3 sont acquises, le procédé 100 met en oeuvre, via des premiers moyens de calcul d'une moyenne (formés par exemple par un microprocesseur), une étape 106 de calcul d'une moyenne de l'ensemble des profils d'échogénicité obtenus. Dans une deuxième mise en oeuvre non limitative, le procédé 100 met en oeuvre, via des moyens d'ajustement (formés par exemple par un microprocesseur), une étape d'ajustement mathématique 107 du profil d'échogénicité. Cet ajustement peut par exemple être réalisé en appliquant un fit polynomial (ou régression polynomiale) au profil d'échogénicité 15 afin d'éliminer la composante haute-fréquence. Puis, dans cette deuxième mise en oeuvre non limitative, lorsqu'au moins 10 deux images ultrasonores 9 du tissu cutané 3 sont acquises, le procédé 100 met en oeuvre, via des deuxièmes moyens de calcul d'une moyenne (formés par exemple par un microprocesseur), une étape 108, de calcul d'une moyenne de l'ensemble des profils d'échogénicité ajustés. Le procédé 100 met en outre en oeuvre, via des moyens de quantification 15 (formés par exemple par un microprocesseur), une étape 109 de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique, la quantification étant réalisée via le profil d'echogénicité. Pour ce faire, le procédé 100 selon l'invention met en oeuvre, via des moyens de détermination (formés par exemple par un microprocesseur), une 20 sous-étape de détermination 110, via le profil d'échogénicité, d'une zone représentative de la bande hypo-échogène. Comme illustré sur la figure 7 la zone représentative de la bande hypoéchogène Zbh est formée par une concavité disposée entre deux pics P1 et P2 que présente le profil d'échogénicité Pe, la concavité Zbh étant située entre le premier pic P1 25 représentatif de l'épiderme et le deuxième pic P2 successif au premier pic P1. A partir de cette zone hypoéchogène Zbh on peut quantifier un paramètre absolu, le paramètre absolu étant : - l'épaisseur de la SENEB à mi-hauteur, ce paramètre correspondant à la hauteur h à mi-largeur 1/2 de la concavité 30 Zbh, et/ou - la variation d'échogénicité, ce paramètre correspondant à la largeur Ide la concavité Zbh, et/ou - la surface de la SENEB, ce paramètre correspondant à l'aire de la concavité Zbh. Afin de pouvoir quantifier des paramètres relatifs pertinents, le procédé peut en outre mettre en oeuvre, via des deuxièmes moyens de détermination (formés par exemple par un microprocesseur), une sous-étape 111 de détermination d'une zone représentative du derme Zd formée par l'aire située sous la courbe du profil d'échogénicité Pe. Cette zone représentative du derme Zd prend naissance au niveau d'une droite D perpendiculaire à l'axe des abscisses du profil d'échogénicité Pe et passe par la valeur minimale de la concavité Zbh, l'aire située sous la courbe du profil d'échogénicité Pe s'étendant jusqu'à un seuil d'échogénicité prédéterminé déterminé par le niveau d'échogénicité au sein du gel acoustique entre la sonde et l'épiderme. A partir de cette zone représentative du derme Zd on peut quantifier des paramètres relatifs, les paramètres quantifiés relatifs peuvent être : - l'épaisseur de la SENEB/épaisseur du derme, dans ce cas on calcule la hauteur h à mi-largeur 1/2 de la concavité Zbh par rapport à la hauteur H à mi-largeur L/2 de ladite zone représentative du derme Zd, et/ou - la variation d'échogénicité de la SENEB/la variation d'échogénicité du derme, dans ce cas on calcule la largeur I de la concavité Zbh par rapport à la largeur L de la zone représentative du derme Zd, et/ou - la surface de la SENEB/la surface du derme, dans ce cas on calcule l'aire de la concavité Zbh par rapport à l'aire de la zone représentative du derme Zd. A titre illustratif, les figures 8A, 8B et 8C illustrent des paramètres de SENEB mesurés pour deux groupes de personnes, un premier groupe formé de femmes caucasiennes de moins de 30 ans, et un second groupe de femmes caucasiennes de plus de 60 ans. Pour chacun des groupes, les paramètres ont été mesurés une première fois sur l'avant-bras au niveau de la face interne (autrement dit, sur une zone photo-protégée), puis une seconde fois sur l'avant-bras au niveau de la face externe (autrement dit, sur une zone photo-exposée). Les traits en pointillés sont représentatifs des mesures effectuées sur la face externe, tandis que les traits continus sont représentatifs des mesures effectuées sur la face interne de l'avant-bras. Plus particulièrement, sur la figure 8A le paramètre relatif quantifié est celui correspondant à l'épaisseur de la SENEB/épaisseur du derme. La figure 8A illustre donc l'épaisseur de la SENEB/épaisseur du derme en fonction de l'âge. Sur la figure 8B, le paramètre relatif quantifié est celui correspondant à la variation d'échogénicité de la SENEB/la variation d'échogénicité du derme. La figure 8B illustre donc la variation d'échogénicité de la SENEB/la variation d'échogénicité du derme en fonction de l'âge. Sur la figure 8C, le paramètre relatif quantifié est celui correspondant à la surface de la SENEB/la surface du derme. La figure 8C illustre donc la surface de la SENEB/la surface du derme en fonction de l'âge. Il est aisé de constater que les trois paramètres mesurés caractérisant l'intensité de la SENEB augmentent avec l'âge, et ce tant sur la face externe que sur la face interne de l'avant-bras. En outre, ces paramètres sont plus importants sur la zone photo exposée des moins de 30 ans. En d'autres termes, le photo vieillissement et vieillissement intrinsèque entraînent tous les deux une augmentation de chacun de ces trois paramètres, l'influence de l'âge étant prépondérante. En résumé, le procédé 100 selon l'invention est un procédé ultrasonore haute-fréquence et propose de quantifier in-vivo la SENEB 10 du tissu cutané 3 de manière non-opérateur dépendant. Ce procédé consiste à extraire les paramètres de profondeur, de variation d'échogénicité et de surface de SENEB à partir d'un profil d'échogénicité Pe du tissu cutané. Ce profil d'échogénicité est obtenu en moyennant les enveloppes des lignes radiofréquences qui composent l'image échographique après avoir effectué leur réalignement spatial. Les lignes radio-fréquences de l'image sont sélectionnées de manière à s'affranchir des « effets de bord » de la sonde qui comprime localement le tissu cutané. Cette mesure peut être réalisée à partir d'une seule image en deux dimensions (2D) de la peau, mais la pertinence des paramètres est améliorée en considérant n images 2D qui peuvent avoir été réalisées avec une sonde 3D. Typiquement, sur une surface cutanée de 16*16 mm2, 10 images échographiques, d'une largeur de 16 mm et uniformément réparties sur la surface, permettent d'extraire 10 profils d'échogénicité qui conduiront à calculer la valeur moyenne des paramètres de la SENEB. En outre, l'invention porte sur une méthode de détermination d'un état 5 cutané 200. Les étapes de mise en oeuvre d'une telle méthode 200 sont illustrées à la figure 9. Cette méthode 200 met en oeuvre 201 les étapes du procédé 100 de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypoéchogène sous-épidermique 10 selon l'une quelconque des réalisations 10 précédemment décrites de façon à quantifier au moins un paramètre représentatif d'une bande hypoéchogène sous-épidermique. De façon non limitative, ce paramètre quantifié peut être formé par un paramètre relatif représentatif de l'épaisseur de la SENEB/épaisseur du derme. Cette méthode de détermination d'un état cutané 200 comporte en outre 15 une étape de comparaison 202 du paramètre quantifié (dans l'exemple, l'épaisseur de la SENEB/épaisseur du derme) avec un paramètre de référence du tissu cutané. Ainsi, selon les différences entre ces deux paramètres, à savoir le paramètre mesuré et le paramètre de référence, il est possible d'en déduire l'altération du tissu cutané dont on vient de quantifier le paramètre. 20 A titre d'exemple non limitatif, l'état cutané déterminé correspond par exemple à un degré de vieillissement chronologique du tissu cutané, ou encore à un degré de photo-exposition du tissu cutané. Dans une mise en oeuvre non limitative de cette étape 201 de comparaison du paramètre quantifié avec un paramètre de référence du tissu 25 cutané, le paramètre de référence du tissu cutané est le même type de paramètre que le paramètre quantifié (dans l'exemple, l'épaisseur de la SENEB/épaisseur du derme), et le paramètre quantifié se distingue dudit paramètre de référence par un facteur d'étude. Ce facteur d'étude peut être formé par l'appartenance à un groupe différent. A titre d'exemple, si le paramètre 30 mesuré est mesuré sur un sujet de moins de 30 ans, alors il peut être comparé à au même paramètre de référence mais obtenu sur un sujet sain de plus de 60 ans, et inversement. Le facteur d'étude peut également être formé par le traitement ou non du sujet sur lequel est mesuré le paramètre. Alternativement, le paramètre mesuré peut être comparé à un paramètre de référence représentatif obtenu sur un sujet sain ou non de moins de 30 ans ou de plus de 60 ans. Il est entendu que les différents âges sont uniquement utilisés comme exemple et ne sont par conséquent aucunement limitatifs. Dans une mise en oeuvre différente non limitative de cette étape 201 de comparaison du paramètre quantifié avec un paramètre de référence du tissu cutané, le paramètre de référence du tissu cutané est le même type de paramètre que le paramètre quantifié (dans l'exemple, l'épaisseur de la SENEB/épaisseur du derme), et le paramètre quantifié se distingue dudit paramètre de référence par le fait que le paramètre quantifié est mesuré sur une zone différente de celle du paramètre de référence. Par exemple, si le paramètre mesuré est mesuré sur la face externe de l'avant-bras, il peut être comparé au même paramètre mais cette fois ci mesuré sur la face interne de l'avant-bras, le paramètre mesuré sur la face interne de l'avant-bras formant, dans cet exemple, le paramètre de référence. Cette comparaison permet de déterminer l'état cutané correspondant au photo-vieillissement en comparant une zone photo-exposée (la face externe) à une zone non photo-exposée (la face interne). Dans une autre mise en oeuvre non limitative de cette étape 201 de comparaison du paramètre quantifié avec un paramètre de référence du tissu cutané, le paramètre de référence du tissu cutané est le même type de paramètre que le paramètre quantifié (dans l'exemple, l'épaisseur de la SENEB/épaisseur du derme), et le paramètre quantifié se distingue dudit paramètre de référence par le fait que le paramètre de référence est obtenu par une méthode de mesure alternative, autrement-dit une méthode de mesure différente. Cette méthode de mesure alternative peut consister en la mesure d'élasticité (cutométrie) ou des observations d'un expert (dermatologue). Il est entendu que ces types de comparaisons ne sont pas limitatifs et peuvent être en outre combinés. L'invention porte également sur une méthode de sélection d'un agent actif (par exemple de type cosmétique) 300 fonction d'un état cutané déterminé au moyen de la méthode de détermination 200 d'un état cutané selon l'une quelconque des mises en oeuvre précitées (Cf. figure 10). L'agent actif sélectionné vise à ralentir ou atténuer le vieillissement ou le photo-vieillisement au niveau sous-epidermique. Cet agent actif peut être sélectionné en fonction d'un état cutané déterminé au moyen de la méthode de détermination 200. La figure 11 illustre en outre une méthode d'évaluation de l'efficacité d'un agent actif 400 selon l'invention. La méthode dévaluation 400 comporte les étapes suivantes : - mise en oeuvre 401 , à un instant t, du procédé 100 de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous- épidermique 10 selon l'invention de façon à quantifier au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous- épidermique 10, - utilisation 402 d'un agent actif agissant sur la bande hypoéchogène sous-épidermique 10, - mise en oeuvre 402, à un instant t+1, du procédé 100 de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous- épidermique 10 selon l'invention de façon à quantifier, après utilisation d'un agent actif appliqué sur le tissu cutané, le au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique 10,- - comparaison du au moins un paramètre quantifié à l'instant t avec le au moins un paramètre quantifié correspondant à l'instant t+1 de façon à déterminer l'efficacité de l'agent actif utilisé. En d'autres termes, cette méthode 400 consiste à mettre en oeuvre au moins deux fois le procédé 100 de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique 10, une première fois avant l'application sur le tissu cutané d'un agent actif agissant sur la bande hypoéchogène sous-épidermique 10, puis une seconde fois après l'application sur le tissu cutané de l'agent actif de façon à déterminer une quelconque modification du paramètre mesuré, laquelle modification reflète l'efficacité ou non de l'agent actif utilisé. L'invention porte également sur une méthode de détermination d'un état du tissu osseux 500 illustrée sur la figure 12. La méthode 500 met en oeuvre 501 les étapes du procédé 100 de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique 10 de façon à quantifier au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique. La méthode 500 de détermination d'un état du tissu osseux comporte en outre une étape de détermination 502 de l'état du tissu osseux en fonction de la valeur du paramètre quantifié. Pour ce faire, il est préalablement établi des niveaux de correspondance entre les paramètres du tissu osseux et les paramètres de la bande hypoéchogène. Afin d'établir ces niveaux de correspondance, les paramètres du tissu osseux peuvent être obtenu via différents examens, par exemple via : - l'ostéodensitométrie, l'ostéodensitométrie étant un examen de référence pour le dépistage de l'ostéoporose, ou encore - un microscanner osseux, le microscanner osseux (HR-pQCT) étant une technique d'imagerie à haute valeur ajoutée qui complète les résultats obtenus par ostéodensitométrie et fournit entre autres des informations structurelles sur la microarchitecture du tissu osseux. - une analyse des marqueurs sanguins du métabolisme osseux. Une analyse des corrélations entre les paramètres de la SENEB précédemment décrits et des paramètres osseux, comme par exemple la Densité Minérale Osseuse (DMO), le contenu minéral osseux, ou encore la composition corporelle (poids et masse grasse), montre entre autre une corrélation significative entre la hauteur de la SENEB et la densité minérale osseuse au niveau de la hanche, entre la largeur de la SENEB et l'épaisseur de la corticale au niveau du radius et entre le dosage de CTX et la surface et la largeur de la SENEB. Par ailleurs, il convient de noter que les Ctx (C-telopeptide of collagen I) sont libérés lors de la dégradation du collagène mature et se retrouvent alors dans la circulation sanguine. Ces Ctx font partie des bio marqueurs les plus spécifiques de l'activité ostéoclastique pour des dosages plasmatiques. Ainsi, dans une mise en oeuvre non limitative, l'étape de détermination 502 consiste à: 3015 881 20 - lorsque le paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène quantifié est la hauteur h de la concavité Zbh, estimer la densité minérale osseuse en fonction de la hauteur h de la concavité Zbh, - lorsque le paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène 5 quantifié est la largeur I de la concavité Zbh, estimer l'épaisseur de la corticale en fonction de la largeur I de la concavité Zbh, et/ou - lorsque le paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène quantifié est la largeur I de la concavité Zbh, estimer le dosage du marqueur de résorption CTX en fonction de la largeur I de la concavité 10 Zbh. L'invention porte également sur une méthode de sélection d'un agent actif 600 fonction d'un état du tissu osseux déterminé au moyen de la méthode de détermination 500 d'un état du tissu osseux, l'agent actif sélectionné visant à ralentir ou atténuer le vieillissement du tissu osseux (Cf. figure 13). Cet agent 15 actif peut être sélectionné par un praticien en fonction de l'état du tissu osseux déterminé. La figure 14 illustre en outre une méthode d'évaluation 700 de l'efficacité d'un agent actif sélectionné visant à ralentir ou atténuer le vieillissement du tissu osseux selon l'invention. 20 La méthode d'évaluation 700 comporte les étapes suivantes : - mise en oeuvre 701, à un instant t, du procédé 100 de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique 10 de façon à quantifier au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique 10, 25 - utilisation 702 d'un agent actif agissant sur le tissu osseux, - mise en oeuvre 703, à un instant t+1, du procédé 100 de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique 10 de façon à quantifier le au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique 10, 30 - comparaison 704 du au moins un paramètre quantifié à l'instant t avec le au moins un paramètre quantifié correspondant à l'instant t+1 de façon à déterminer l'efficacité de l'agent actif utilisé visant à ralentir ou atténuer le vieillissement du tissu osseux. En d'autres termes, cette méthode 700 consiste à mettre en oeuvre au moins deux fois le procédé 100 de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique 10, une première fois avant l'utilisation d'un agent actif visant à ralentir ou atténuer le vieillissement du tissu osseux, puis une seconde fois après l'utilisation de l'agent actif de façon à déterminer une quelconque modification du paramètre mesuré, laquelle modification reflète l'efficacité de l'agent actif utilisé.10 REVENDICATIONS1. Procédé (100) de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique (10) mettant en oeuvre une sonde ultrasonore (1) munie d'au moins un transducteur ultrasonore (2), ledit procédé (100) comportant les étapes suivantes : acquisition (101) d'au moins une image ultrasonore (9) du tissu cutané (3) au moyen de ladite sonde (1) positionnée sur l'épiderme (4), pour chaque image ultrasonore (9) acquise, recalage (102) des lignes radiofréquences (11) de ladite image ultrasonore (9) acquise de sorte à supprimer l'effet de courbure du tissu cutané (3), - pour chaque image ultrasonore dont les lignes radiofréquences sont recalées (14), calcul (103) des enveloppes des lignes radiofréquences recalées, pour chaque image (14), obtention (104) d'un profil d'échogénicité (Pe) du tissu cutané imagé à partir desdites enveloppes, quantification (109) dudit au moins un paramètre représentatif d'une bande hypoéchogène sous-épidermique, ladite quantification (109) étant réalisée via ledit profil d'échogénicité (Pe). 2. Procédé (100) selon la revendication 1 précédente, selon lequel le profil d'échogénicité (Pe) du derme imagé est obtenu par addition des enveloppes des lignes radiofréquences recalées. 3. Procédé (100) selon l'une quelconque des revendications précédentes comportant une sous-étape de détermination (110), via ledit profil d'échogénicité (Pe), d'une zone représentative de la bande hypoéchogène (Zbh). 23 3015881 4. Procédé (100) selon la revendication 3 précédente, selon lequel ladite zone représentative de la bande hypoéchogène (Zbh) est formée par une concavité disposée entre deux pics (P1, P2) que présente le profil d'échogénicité (Pe), ladite concavité (Zbh) étant située entre le premier 5 pic (P1) représentatif de l'épiderme et le deuxième pic (P2) successif au dit premier pic (P1). 5. Procédé (100) selon la revendication 4 précédente, selon lequel le au moins un paramètre quantifié est un paramètre absolu, ledit paramètre 10 absolu étant: - la hauteur (h) à mi-largeur (1/2) de la concavité (Zbh), et/ou - la largeur (I) de ladite concavité (Zbh), et/ou - l'aire de la concavité (Zbh). 15 6. Procédé (100) selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 précédentes comportant une sous-étape de détermination (111) d'une zone représentative du derme (Zd) formée par l'aire située sous la courbe du profil d'échogénicité (Pe) prenant naissance au niveau d'une droite (D) perpendiculaire à l'axe des abscisses dudit profil d'échogénicité et 20 passant par la valeur minimale de la concavité (Zbh), ladite aire située sous la courbe du profil d'échogénicité (Pe) s'étendant jusqu'à un seuil d'échogénicité prédéterminé, ledit au moins un paramètre quantifié étant un paramètre relatif choisi parmi les paramètres suivants : la hauteur (h) à mi-largeur (1/2) de la concavité (Zbh) par rapport 25 à la hauteur (H) à mi-largeur (L/2) de ladite zone représentative du derme (Zd), et/ou la largeur (I) de la concavité (Zbh) par rapport à la largeur (L) de ladite zone représentative du derme (Zd), et/ou l'aire de la concavité (Zbh) par rapport à l'aire de ladite zone 30 représentative du derme (Zd). 7. Procédé (100) selon l'une quelconque des revendications précédentes, selon lequel lorsqu'au moins deux d'images ultrasonores (9) du tissu 24 3015881 cutané (3) sont acquises, ledit procédé (100) comporte une étape de calcul d'une moyenne (106) de l'ensemble des profils d'échogénicité (Pe) obtenus. 5 8. Procédé (100) selon l'une quelconque des revendications 1 à 6 précédentes comportant une étape d'ajustement mathématique (107) du profil d'échogénicité (Pe). 9. Procédé (100) selon la revendication 8 précédente, selon lequel lorsqu'au 10 moins deux images ultrasonores (9) du tissu cutané (3) sont acquises, ledit procédé (100) comporte une étape de calcul d'une moyenne (108) de l'ensemble des profils d'échogénicité (Pe) ajustés. 10. Procédé (100) selon l'une quelconque des revendications précédentes 15 comportant une étape de correction (105) de la diffraction du transducteur ultrasonore (2). 11. Procédé (100) selon l'une quelconque des revendications précédentes, selon lequel seulement une fraction des lignes radiofréquences de l'image 20 ultrasonore acquise est employée. 12. Procédé (100) selon l'une quelconque des revendications précédentes, selon lequel lorsque la sonde ultrasonore (1) est une sonde 2D un gel solide (8) est appliqué entre le transducteur ultrasonore (2) de ladite 25 sonde 2D et l'épiderme (4). 13. Procédé (100) selon l'une quelconque des revendications 1 à 12 précédentes, selon lequel lorsque la sonde ultrasonore (1) est une sonde 3D un liquide visqueux est appliqué entre le transducteur 30 ultrasonore (2) de ladite sonde 3D et l'épiderme (4). 14. Méthode de détermination d'un état cutané (200), ladite méthode (200) étant caractérisée en ce qu'elle met en oeuvre (201) les étapes du 3 0 1 5 8 8 1 25 procédé (100) de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique (10) selon l'une quelconque des revendications 1 à 13 de façon à quantifier au moins un paramètre représentatif d'une bande hypoéchogène sous-épidermique, 5 ladite méthode de détermination d'un état cutané (200) comportant en outre une étape de comparaison (202) dudit paramètre quantifié avec un paramètre de référence du tissu cutané. 15. Méthode de détermination d'un état cutané (200) selon la 10 revendication 14 caractérisée en ce que l'état cutané déterminé correspond à un degré de vieillissement chronologique du tissu cutané. 16. Méthode de détermination d'un état cutané (200) selon la revendication 14 caractérisée en ce que l'état cutané déterminé 15 correspond à un degré de photo-exposition du tissu cutané. 17. Méthode de détermination d'un état cutané (200) selon l'une quelconque des revendications 14 à 16, caractérisée en ce que le paramètre de référence du tissu cutané est le même type de paramètre que le 20 paramètre quantifié: - le paramètre quantifié se distinguant dudit paramètre de référence par un facteur d'étude, - le paramètre quantifié étant mesuré sur une zone différente de celle dudit paramètre de référence, et/ou 25 - le paramètre de référence étant obtenu par une méthode de mesure alternative au procédé (100) de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique (10) selon l'une quelconque des revendications 1 à 13. 30 26 3 0 1 5 8 8 1 18. Méthode d'évaluation de l'efficacité d'un agent actif (400) de type cosmétique, ladite méthode d'évaluation (400) comportant les étapes suivantes : mise en oeuvre (401), à un instant t, du procédé (100) de quantification 5 d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous- épidermique (10) selon l'une quelconque des revendications 1 à 13 de façon à quantifier au moins un paramètre représentatif d'une bande hypoéchogène sous-épidermique (10), utilisation d'un agent actif (402) agissant sur la bande hypoéchogène 10 sous-épidermique (10), mise en oeuvre (403), à un instant t+1, du procédé (100) de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique (10) selon l'une quelconque des revendications 1 à 13 de façon à quantifier le au moins un paramètre représentatif d'une bande 15 hypo-échogène sous-épidermique (10),- comparaison (404) du au moins un paramètre quantifié à l'instant t avec le au moins un paramètre quantifié correspondant à l'instant t+1 de façon à déterminer l'efficacité de l'agent actif de type cosmétique utilisé. 20 19. Méthode de détermination d'un état du tissu osseux (500), ladite méthode (500) étant caractérisée en ce qu'elle met en oeuvre (501) les étapes du procédé (100) de quantification d'au moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous-épidermique (10) selon l'une quelconque des revendications 1 à 13 de façon à quantifier au 25 moins un paramètre représentatif d'une bande hypo-échogène sous- épidermique, ladite méthode de détermination d'un état du tissu osseux (500) comportant en outre une étape de détermination (502) de l'état du tissu osseux en fonction de la valeur dudit paramètre quantifié. 30 20. Méthode de détermination d'un état du tissu osseux (500) selon la revendication 19, caractérisée en ce que l'étape de détermination (502) consiste à estimer : 27 3015881 - la densité minérale osseuse en fonction de la hauteur (h) à mi-largeur (1/2) de la concavité (Zbh), l'épaisseur de la corticale en fonction de la largeur (I) de la concavité (Zbh), et/ou le dosage du marqueur de résorption CTX en fonction de la largeur (I) de la concavité (Zbh).