FR 3023618 A1 20160115 FR 1456606 A 20140709 La présente invention concerne une méthode pour identifier l'espèce de chêne d'un échantillon de bois de chêne. Les chênes sont des arbres à bois dur. Le bois de chêne a une masse volumique comprise entre 0,75 et 0,85 g/cm3. Cela présente l'avantage de fournir un matériau très résistant et dur pour différentes applications que sont par exemple l'ébénisterie, la menuiserie, la parqueterie ou encore la tonnellerie. En outre, le chêne est particulièrement apprécié pour sa résistance aux insectes et aux champignons grâce à sa forte teneur en tanins. Parmi les espèces de chêne, le chêne sessile (Quercus petraea), aussi 10 connu sous la dénomination de « chêne rouvre », et le chêne pédonculé (Quercus robur) sont les deux espèces majoritaires en surface rencontrées dans les forêts européennes. Les bois de chêne pédonculé et sessile ont été utilisés pour la construction navale jusqu'au 191ème siècle et représentaient les principales essences de 15 bois employées dans la construction des charpentes en Europe. Aujourd'hui, ces bois de chêne sont couramment utilisés dans la menuiserie, la parqueterie, la production de plaquage, ainsi que l'cenologie. Plus précisément, en ce qui concerne l'cenologie, il existe deux applications essentielles du bois de chêne. 20 Tout d'abord, les vins et les boissons spiritueuses (telles que cognac, whisky, eau-de-vie) sont vieillis dans des contenants en bois de chêne appelés, par exemple, selon leur forme et leur volume: barriques, fûts et tonneaux. Ces contenants sont majoritairement en bois de chêne sessile et pédonculé. En effet, le vieillissement est bénéfique à la qualité des vins et des boissons spiritueuses, grâce à l'extraction des 25 composés volatils et non-volatils du bois et aux transformations complexes qui ont lieu lors de l'élevage sous bois. Une autre application oenologique du bois de chêne consiste en l'introduction de morceaux de ce bois dans les vins et les boissons spiritueuses afin de les enrichir en des molécules chimiques présentes dans ledit bois et ainsi d'en 30 modifier les qualités organoleptiques. Ces produits sont généralement désignés dans ce domaine technique sous le nom « produits alternatifs » et sont utilisés sous la forme de copeaux, d'éclats, de poudres, ainsi que de morceaux plus volumineux tels que des bâtonnets. Les espèces de chêne sessile et pédonculé sont donc utilisées toutes les 35 deux pour la fabrication de contenants pour l'cenologie et également pour la production des produits alternatifs précités. En raison de leurs caractéristiques respectives, le chêne sessile est plus généralement réservé à l'élaboration des barriques pour le vin et le chêne pédonculé aux barriques pour les boissons spiritueuses. Bien que ces deux espèces de chêne sessile et pédonculé possèdent des 5 caractéristiques morphologiques distinctes, par exemple au niveau du tronc, des branches, de l'écorce ou encore de leur feuillage, il est difficile de les discriminer l'une de l'autre sans ambiguïté par un examen visuel. En outre, ces deux espèces de chêne sont souvent mélangées dans la plupart des forêts (par exemple des forêts françaises). C'est pourquoi, il n'est pas 10 possible de se fier à la forêt d'où provient le bois de chêne pour déterminer son espèce. En effet, des analyses génétiques ont montré qu'au sein de forêts réputées pour être peuplées de chênes sessiles, il existait également des chênes pédonculés en quantité significative. C'est pourquoi, la seule méthode d'identification sans ambiguïté de 15 l'espèce de chêne d'un échantillon de bois de chêne repose sur ces analyses génétiques. Elles exigent d'être réalisées sur du bois frais ou, idéalement, sur des feuilles, ce qui, d'un point de vue pratique, n'est pas toujours aisé à mettre en oeuvre. En outre, ces analyses génétiques ne fournissent pas un résultat immédiat, mais au contraire requièrent un certain temps. Enfin, ces analyses sont coûteuses. 20 Or, au vu des utilisations très différentes du fait de la diversité des boissons qui sont stockées dans les contenants en bois de chêne, il est essentiel pour le tonnelier de savoir précisément et aussi de garantir l'espèce de chêne qui est utilisée pour la fabrication de ses contenants. En effet, en matière de tonnellerie, les caractéristiques et la qualité de la 25 matière première (c'est-à-dire le bois de chêne) qui est utilisée pour le stockage des boissons alcoolisées conditionnent de manière significative la qualité du produit fini, à savoir la boisson alcoolisée. On comprend aisément qu'il est essentiel pour le tonnelier de connaître avec exactitude l'espèce du bois de chêne dont il dispose pour la fabrication de ses 30 contenants en bois. A ce jour, la seule méthode d'identification certaine d'une espèce de chêne consiste à mettre en oeuvre des analyses génétiques qui, comme cela a été rappelé ci-dessus, sont longues et fastidieuses. La présente invention se propose de surmonter les inconvénients 35 détaillés ci-dessus des analyses génétiques en proposant un nouveau procédé d'identification de l'espèce de chêne d'un échantillon de bois de chêne. Le procédé d'identification selon l'invention présente les avantages de pouvoir être facilement mis en oeuvre et d'obtenir le résultat très rapidement. De plus, le procédé selon l'invention garantit un résultat parfaitement fiable et ce, en particulier, à la différence d'un examen visuel d'un échantillon d'un 5 élément d'un chêne tel que ses feuilles ou son écorce par exemple. Plus précisément, le procédé d'identification de l'espèce de chêne d'un échantillon de bois de chêne se caractérise en ce qu'il comprend au moins les étapes suivantes : a) On dispose d'un échantillon de bois de chêne ; 10 b) On prépare l'échantillon de bois de chêne de manière appropriée pour une analyse de détermination de la concentration de dérivés de triterpènes de type oléanane qui sont présents dans ledit échantillon de bois de chêne ; c) On effectue au moins une analyse sur l'échantillon de bois de chêne 15 ainsi préparé à l'étape b) de manière : - à identifier : i. entre une à trois molécules appartenant à une l'ère catégorie de molécules, lesdites une à trois molécules étant parmi les trois plus abondantes molécules de 20 toutes les molécules de ladite 1:ère catégorie de molécules présentes dans ledit échantillon de bois de chêne, ladite 1:ère catégorie de molécules étant définie par l'ensemble des dérivés de triterpènes de type oléanane qui sont issus d'une génine de formule brute 25 C30H4806, ii. entre une à trois molécules appartenant à une 21ème catégorie de molécules, lesdites une à trois molécules étant parmi les trois plus abondantes molécules de toutes les molécules de ladite 2Iènle catégorie de 30 molécules présentes dans ledit échantillon de bois de chêne, ladite 21ème catégorie de molécules étant définie par l'ensemble des dérivés de triterpènes de type oléanane qui sont issus d'une génine de formule brute C30H4607, ainsi que des dérivés de triterpènes de type 35 oléanane qui sont issus d'une génine de formule brute C30H4608, puis - à déterminer la concentration : - de chacune desdites une à trois molécules de la catégorie de molécules qui ont été identifiées ; - de chacune desdites une à trois molécules de la 2ième catégorie de molécules qui ont été identifiées ; d) On détermine un ratio R, ledit ratio R correspondant au rapport de la concentration ou de la somme des concentrations d'au moins une desdites une à trois molécules de la 1iè' catégorie de molécules qui ont été identifiées sur la concentration ou la somme des concentrations d'au moins une desdites une à trois molécules de la 2ième catégorie de molécules qui ont été identifiées ; e) On identifie l'espèce de l'échantillon de bois de chêne en fonction de la valeur du ratio R déterminée à l'étape d) de la manière suivante : - si le ratio R est inférieur à 0,316, alors l'échantillon de bois de chêne appartient à l'espèce pédonculée, - si le ratio R est supérieur à 3,162, alors l'échantillon de bois de chêne appartient à l'espèce sessile. Dans le cadre de la présente invention, on rappelle que les triterpènes sont des hydrocarbures à trente atomes de carbone résultant de la condensation de 20 six molécules d'isoprène. Un des avantages du procédé d'identification de l'espèce de chêne selon l'invention réside dans le fait qu'on obtiendra pour la quasi-totalité des échantillons de bois de chêne qui seront analysés un résultat (à savoir la détermination s'il s'agit d'un échantillon de chêne sessile ou de chêne pédonculé) sans aucune ambiguïté. 25 De manière préférée, la 11è' catégorie de molécules est définie par l'ensemble des dérivés de triterpènes de type oléanane qui sont issus de l'arjungénine, de l'acide séricique, ainsi que des isomères de l'arjungénine et de l'acide séricique. De manière préférée, la 2ième catégorie de molécules est définie par 30 l'ensemble des dérivés de triterpènes de type oléanane qui sont issus de l'acide bartogénique, des isomères de l'acide bartogénique, de la trachelosperogenine D et des isomères de la trachelosperogenine D. Les formules de l'arjungénine, de l'acide séricique, de l'acide bartogénique et de la trachelosperogenine D sont détaillées ci-dessous. 35 La formule (A) ci-dessous correspond à l'arjungénine. (A) La formule (B) ci-dessous correspond à l'acide séricique. (B) OH La formule (C) ci-dessous correspond à l'acide bartogénique. 30 HO,,. 0 H04,,, HO HOOC OH (C) 35 La formule (D) ci-dessous correspond à la trachelosperogénine D. HO HO OH (D) Dans un mode de réalisation de l'invention, la fère catégorie de molécules est définie par l'ensemble des molécules : - de formule (I) telle que détaillée ci-dessous, 15 (I) 20 dans laquelle : o X1 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o X2 représente un groupe gallate ou un hydrogène, 25 o X3 représente un hydrogène ou un groupe glucose ou un groupe gallate ou un groupe glucose-gallate, o X4 représente un hydrogène ou un groupe gallate, de formule (II) telle que détaillée ci-dessous, 30 x8-0 x7-0 35 dans laquelle : o X5 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o X6 représente un groupe gallate ou un hydrogène, o X7 représente un hydrogène ou un groupe glucose ou un groupe gallate ou un groupe glucose-gallate, o X8 représente un hydrogène ou un groupe gallate. Dans un mode de réalisation de l'invention, la 2ièmecatégorie de molécules est définie par l'ensemble des molécules : - de formule (III) telle que détaillée ci-dessous, 15 Y4-0 Y3-0 0 i 20 Y2 dans laquelle : o Y1 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o Y2 représente un groupe glucose ou un hydrogène, 25 o Y3 représente un hydrogène ou un groupe gallate ou un groupe glucose ou un groupe glucose-gallate, o Y4 représente un hydrogène ou un groupe gallate, de formule (IV) telle que détaillée ci-dessous, 30 (IV) 35 0 i Y6 dans laquelle : o Y5 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o Y6 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o Y7 représente un hydrogène ou un groupe glucose ou un groupe gallate ou un groupe glucose-gallate, o Y8 représente un hydrogène ou un groupe gallate, de formule (V) telle que détaillée ci-dessous, (V) dans laquelle : o Y9 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o Y10 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o Y11 représente un hydrogène ou un groupe gallate, o Y12 représente un hydrogène ou un groupe glucose ou un groupe gallate ou un groupe glucose-gallate, o Y13 représente un hydrogène ou un groupe gallate, de formule (VI) telle que détaillée ci-dessous, (VI)35 dans laquelle : o Y14 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o Y15 représente un hydrogène ou un groupe gallate o Y16 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o Y17 représente un hydrogène ou un groupe glucose ou un groupe gallate ou un groupe glucose-gallate, o Y18 représente un hydrogène ou un groupe gallate. Dans un mode de réalisation de l'invention, la 1:ère catégorie de molécules est définie par l'ensemble des molécules suivantes : le quercotriterpénoside I (ci-après abrégé QTT I) de formule (VII), le quercotriterpénoside II (ci-après abrégé QTT II) de formule (VIII) et, le quercotriterpénoside III (ci-après abrégé QTT III) de formule (IX), et dont les formules sont détaillées ci-dessous. 20 25 (VIII) HO (IX) HO Dans un mode de réalisation de l'invention, la 2ième catégorie de molécules est définie uniquement par le dérivé 28-glucosylé de l'acide bartogénique (ci-après abrégé Glu-AB) de formule (X) telle que détaillée ci-dessous. OH (X) OFF Dans un mode de réalisation de l'invention, le ratio R correspond au rapport de la concentration ou de la somme des concentrations d'au moins une des 25 molécules choisies parmi le QTT I de formule (VII), le QTT II de formule (VIII) et le QTT III de formule (IX) sur la concentration du Glu-AB de formule (X). Dans un mode de réalisation de l'invention, le ratio R correspond au rapport de la somme des concentrations du QTT I de formule (VII), du QTT II de formule (VIII) et du QTT III de formule (IX) sur la concentration du Glu-AB de formule 30 (X). La préparation de l'échantillon de bois de chêne est maintenant plus amplement décrite. Le bois de chêne de l'échantillon à analyser pour l'identification de l'espèce de chêne peut avoir des origines très variées, notamment en fonction de 35 l'application auquel est destiné le procédé d'identification selon l'invention. En effet, il peut s'agir, par exemple, des deux applications oenologiques précitées qui sont : - l'identification de l'espèce de chêne de produits alternatifs ; - l'identification de l'espèce de chêne de contenants en bois dans lesquels sont vieillis les vins et les boissons spiritueuses. Ainsi, dans le cadre de la présente invention, le bois de chêne de l'échantillon peut provenir d'une seule pièce en bois telle qu'un merrain ou bien d'un ensemble de pièces homogènes en bois tel que, par exemple, un ensemble de douelles destinées à la fabrication d'un fût ou bien d'un lot de produits alternatifs. Bien entendu, les exemples détaillés ci-dessus qui décrivent l'origine du bois constituant l'échantillon ne sont pas limitatifs de la portée de l'invention. En effet, le procédé d'identification selon l'invention présente l'avantage de pouvoir être mis en oeuvre sur tout échantillon de bois de chêne, et ce quelle que soit sa nature et son origine (par exemple, un morceau de bois prélevé sur un chêne ou bien provenant d'un produit manufacturé en bois tel qu'un merrain, une douelle, ou autres produits équivalents). De manière préférée, à l'étape b) du procédé d'identification selon l'invention, on prépare l'échantillon de bois de chêne selon une extraction solide liquide. On peut débuter la préparation de l'échantillon de bois de chêne dont on dispose en le découpant en copeaux, puis en laissant macérer les copeaux ainsi 20 obtenus dans un liquide pendant une durée déterminée. De manière avantageuse, on réduit en poudre lesdits copeaux avant la macération. Dans un mode de réalisation de l'invention, on laisse sécher l'échantillon de bois de chêne, pendant quelques heures (par exemple au moins 6 heures) à température ambiante, par exemple à une température d'au moins 20°C. 25 La macération du bois de chêne peut être effectuée dans tout liquide approprié, par exemple de l'eau ou bien encore un solvant tel qu'une solution alcoolique. Il peut s'agir d'une solution d'éthanol, par exemple une solution d'éthanol à 12% v/v. La solution peut avoir un pH acide, par exemple d'environ 3,5. Un exemple de solution dans laquelle est macéré l'échantillon de bois de 30 chêne, par exemple sous forme de copeaux ou de poudre, consiste en une solution d'éthanol à 12% v/v contenant en outre de l'acide tartrique (par exemple à une concentration de 5g/L) avec un pH de 3,5. Le pH de cette solution est ajusté avec de la soude, par exemple à une concentration de 5 mol/L. La concentration en l'échantillon de bois de chêne dans cette solution peut être par exemple de 50 g/L. L'échantillon de bois de chêne est macéré dans un liquide pendant plusieurs heures, par exemple pendant une durée d'au moins 48 heures, et ce à température ambiante (à savoir environ 20°C). De préférence, la macération de l'échantillon de bois de chêne a lieu dans l'obscurité. Cela présente l'avantage de protéger certaines des molécules du bois de chêne qui sont sensibles à la lumière et éviter ainsi qu'elles ne se dégradent avant la réalisation de l'analyse destinée à déterminer leur concentration ; ce qui pourrait induire un résultat erroné de l'espèce de chêne de l'échantillon. L'exemple de réalisation de la macération de l'échantillon de bois de chêne qui a été décrit ci-dessus n'est pas limitatif de la présente invention. Il s'agit d'un mode de réalisation envisageable dans le cadre de la présente invention pour la préparation dudit échantillon en vue de son analyse au cours de l'étape c) du procédé d'identification qui, rappelons-le consiste à identifier et à doser (autrement dit à extraire et à quantifier) entre une à trois des molécules les plus abondantes parmi les molécules de la 1:ère catégorie de molécules et les molécules de la 2Ième catégorie qui ont été décrites ci-dessus. En effet, les inventeurs de la présente invention ont constaté que ce mode de réalisation de la macération de l'échantillon de bois de chêne était approprié pour la réalisation de l'analyse de l'étape c) du fait que ces conditions de macération sont assez similaires aux conditions de l'élevage du vin au cours duquel, rappelons-le, des composés volatils et non-volatils du bois sont extraits. Bien entendu, d'autres conditions d'extraction des molécules les plus abondantes de la 1:ère catégorie de molécules et de la 2Ième catégorie de molécules aussi performantes que celles décrites ci-dessus pourraient être mises en oeuvre et 25 sont parfaitement à la portée de l'homme du métier. Ainisi, dans le cadre de la présente invention, la macération de l'échantillon de bois peut être réalisée dans d'autres conditions de durée, de températures que celles décrites ci-dessus. Par exemple, la macération peut être effectuée à des températures plus élevées que la température ambiante (par exemple 30 entre environ 50°C et 80°C), et ce sur une durée moins élevée que celle précisée ci-dessus (par exemple quelques heures, à savoir entre 5 et 10 heures). A l'issue de la macération, on obtient un macérat de bois de chêne. Dans un mode de réalisation de l'invention, en vue de la réalisation de l'analyse de l'étape c) du procédé d'identification selon l'invention, on dilue le 35 macérat de bois de chêne, par exemple par une dilution 20 fois, avantageusement dans une eau ultra-pure, et ensuite on le filtre, par exemple sur un filtre en PTFE (à savoir l'acronyme de « polytétrafluoroéthylène ») de diamètre de maille 0,45 um. Il s'agit d'un mode de réalisation envisageable de la finalisation de la préparation de l'échantillon de bois de chêne. D'autres dilutions et d'autres moyens de filtration peuvent évidemment être envisagés dans le cadre de la présente invention. Ils sont tout à fait connus de l'homme du métier. Bien entendu, dans le cadre de la présente invention, il convient de noter que la dilution du macérat de bois de chêne est facultative. Autrement dit, l'étape b) de préparation de l'échantillon de bois de chêne peut être réalisée sans aucune étape de dilution. Par exemple, une dilution ne sera pas forcément nécessaire si la concentration initiale de l'extrait brut de bois de chêne de l'échantillon à analyser est inférieure à 100 mg/L après filtration. Ainsi, dans ce mode de réalisation de l'invention, l'étape b) de préparation pourrra consister en une macération de l'échantillon de bois de chêne (se présentant par exemple sous la forme de poudre) dans un mélange d'eau et d'éthanol, la concentration en éthanol pouvant être inférieure à celle mentionnée ci-dessus, et par exemple inférieure à 10% v/v. Bien entendu, la préparation de l'échantillon de bois de chêne est parfaitement à la portée de l'homme du métier qui saura exactement comment procéder pour préparer ledit échantillon en fonction des analyses qu'il effectuera pour déterminer les concentrations en les molécules des 1:ère et 2Ième catégories de molécules qui, rappelons-le, ont pour caractéristique commune d'être des dérivés de triterpènes de type oléanane. Ainsi, les modes de réalisation de la préparation de l'échantillon de bois de chêne décrits ci-dessus correspondent à des exemples de réalisation de l'étape b) 25 qui sont envisageables dans le cadre de la présente invention mais n'en limitent pas pour autant la portée du procédé d'identification selon l'invention. L'analyse de l'étape c) du procédé d'identification peut consister en au moins une analyse chimique permettant la détermination de la concentration des molécules chimiques qui sont des dérivés de triterpènes de type oléanane. 30 Par exemple, il peut s'agir d'au moins une analyse choisie parmi : les analyses LC-MS (à savoir une analyse de chromatographie liquide couplée à une analyse de spectrométrie de masse), les analyses GC-MS (à savoir une analyse de chromatographie gazeuse couplée à une analyse de spectrométrie de masse), 35 les analyses RMN (à savoir la résonance magnétique nucléaire). Bien entendu, la réalisation de ces analyses chimiques qui sont détaillées ci-dessus est parfaitement à la portée de l'homme du métier qui saura mettre en oeuvre le protocole d'analyse adéquat pour identifier puis déterminer la concentration des molécules les plus abondantes de la l'ère catégorie et de la 2Ième catégorie de molécules telles que détaillées ci-dessus. En d'autres termes, l'homme du métier sait déterminer la concentration de dérivés de triterpènes de type oléanane présents dans un échantillon, et notamment dans un échantillon de bois de chêne, et ce par exemple après avoir soumis ledit échantillon à une extraction solide liquide. En particulier, en ce qui concerne les analyses par chromatographie liquide et/ou gazeuse, l'homme du métier sait réaliser les courbes d'étalonnage appropriées, ainsi que le cas échéant le rapport des aires des chromatogrammes qui sont nécessaires pour la détermination des concentrations des molécules les plus abondantes de la 1:ère catégorie de molécules et de la 2Ième catégorie de molécules qu'il aura identifiées dans l'échantillon de bois de chêne à analyser. De manière préférée à l'étape e) du procédé d'identification, on calcule le logarithme décimal du ratio R et : si le logarithme décimal du ratio R ainsi calculé est supérieur à 0,5 alors l'échantillon de bois de chêne est de l'espèce de chêne sessile ; si le logarithme décimal du ratio R ainsi calculé est inférieur à -0,5 alors l'échantillon de bois de chêne est de l'espèce de chêne pédonculé. Le logarithme décimal est un moyen qui permet d'exprimer l'abondance relative des molécules identifiées de la 1:ère et 2Ième catégories de molécules. Le calcul du logarithme décimal présente l'avantage de fournir un résultat facile à lire puisque la nature de l'espèce de bois de chêne est liée au signe de la valeur ainsi obtenue : si le résultat est négatif, il s'agira d'un chêne pédonculé et si, au contraire, le résultat est positif, il s'agira d'un chêne sessile. Il convient de noter que le procédé d'identification de l'espèce de bois de chêne présente les avantages suivants : la préparation de l'échantillon de bois de chêne peut être réalisée sur du bois frais, mais également sur du bois de douelles après séchage et même après avoir été chauffé, et ce à la différence des analyses génétiques qui nécessitent des échantillons de chêne frais ; la préparation de l'échantillon de bois est simple et le temps d'analyse très court, et ce aussi à la différence des analyses génétiques. Ainsi, l'utilisation à l'échelle industrielle du procédé d'identification de l'espèce de chêne selon l'invention permet à un tonnelier de certifier que ses contenants en bois (par exemple fûts, cuves, barriques) ne sont réalisés qu'a partir de chêne sessile ou de chêne pédonculé selon qu'ils sont destinés, respectivement, à l'élevage des vins et des eaux-de-vie. L'adaptation du fût à son contenu est ainsi optimisée. Le procédé d'identification selon l'invention constitue une solution particulièrement appropriée pour le domaine technique de la tonnellerie, car il est simple à mettre en oeuvre tout en étant peu coûteux et fournit un résultat d'identification très rapide. Avec le procédé d'identification selon l'invention, cela permet de 15 s'affranchir des analyses génétiques lorsqu'on souhaite connaître sans ambiguïté l'espèce de chêne auquel appartient un échantillon de bois de chêne. De façon similaire, le procédé d'identification selon l'invention est parfaitement approprié pour identifier l'espèce de bois de chêne dans le cadre d'une autre application oenologique qui a été mentionnée ci-dessus, à savoir l'application 20 qui concerne les produits alternatifs (copeaux, poudres, bâtonnets) introduits dans les vins et les boissons spiritueuses en vue d'en modifier leurs qualités organoleptiques. Ainsi, le procédé d'identification selon l'invention permet une détermination aisée et sans ambiguïté de l'espèce de chêne dont sont constitués des produits alternatifs. 25 La présente invention n'est nullement limitée à l'analyse d'échantillons de bois de chêne provenant de ces deux applications oenologiques mentionnées ci-dessus. Ainsi, dans le cadre de la présente invention, il est parfaitement envisageable de mettre aussi en oeuvre le procédé d'identification de l'espèce de 30 chêne tel que décrit ci-dessus pour identifier l'espèce de chêne dans des échantillons médicaux et/ou pharmaceutiques. En effet, dans différentes applications médicales et/ou pharmaceutiques, il peut être nécessaire d'identifier l'espèce du bois de chêne que peuvent contenir certaines préparations médicales et/ou pharmaceutiques. Dans ce cas, l'homme du métier saura aussi parfaitement préparer l'échantillon de bois de 35 chêne provenant de ces préparations médicales et/ou pharmaceutiques pour ensuite, identifier et doser entre une à trois des molécules les plus abondantes des molécules de la 1:ère et de la 2Ième catégories de molécules telles que définies ci-dessus. DESCRIPTION DES FIGURES : La figure 1 est un diagramme de la concentration en QTT I de formule (VII) déterminée dans chacun des échantillons de bois de chêne A à V. La figure 2 est un diagramme de la concentration en QTT II de formule (VIII) déterminée dans chacun des échantillons de bois de chêne A à V. La figure 3 est un diagramme de la concentration en QTT III de formule (IX) pour 10 chacun des échantillons de bois de chêne A à V. La figure 4 est un diagramme de la concentration en Glu-AB de formule (X) pour chacun des échantillons de bois de chêne A à V. La figure 5 est un diagramme de la somme des concentrations en QTT I, QTT II et QTT 15 La figure 6 est un diagramme du logarithme décimal du ratio R de chacun des échantillons A à V. Un exemple de mise en oeuvre du procédé d'identification de l'espèce de chêne d'un échantillon de bois de chêne selon l'invention est détaillé en prenant 20 appui sur la partie expérimentale qui suit. PARTIE EXPERIMENTALE : Des échantillons de chêne ont été prélevés sur 22 arbres, dans 6 forêts françaises, en collectant à la fois : 25 des feuilles, pour la détermination de l'espèce de chêne par une analyse génétique, et du bois pour la détermination de l'espèce de chêne selon le procédé d'identification selon l'invention. On a ainsi obtenu 22 échantillons référencés A à V. 30 Chacun des 22 échantillons Aà Va été soumis à : une analyse génétique ; au procédé d'identification de l'espèce de chêne selon l'invention. Dans le cadre de cette partie expérimentale, les analyses génétiques ont servi à valider que le procédé d'identification selon l'invention de l'espèce de chêne 35 permettait d'identifier sans erreur l'espèce de chêne de ces différents 22 échantillons de bois de chêne. En effet, l'analyse génétique donne un résultat de l'espèce sans ambiguïté. Ainsi, des analyses génétiques ont été réalisées sur les échantillons A à V de bois de chêne. D'après les analyses génétiques : les échantillons A à H étaient des échantillons de l'espèce de chêne sessile, et les échantillons I à V étaient des échantillons de l'espèce de chêne pédonculé. Par ailleurs, le bois de chêne de chacun des 22 échantillons A à Va été préparé de la manière suivante : le bois de chêne collecté a été réduit en poudre ; ensuite, la poudre de bois de chêne a été ajoutée à une solution aqueuse contenant de l'éthanol (12% v/v) à une concentration de 50 g/L, ladite solution aqueuse contenait en outre de l'acide tartrique (à une concentration de 5g/L) et avait un pH de 3,5. Le pH de cette solution a été ajusté avec de la soude (à une concentration de 5mol/L) ; la solution ainsi obtenue a été laissée macérer pendant 48 heures dans l'obscurité ; ensuite, le macérat de bois de chêne ainsi obtenu a été dilué par 20 fois dans de l'eau ultra-pure puis filtré sur un filtre en PTFE de diamètre de maille 0,45 um. Pour chacun des 22 échantillons de bois de chêne préparés, on a 25 déterminé la concentration des molécules suivantes : les QTT I, QTT II et QTT III, à savoir des molécules appartenant à la 1:ère catégorie de molécules du procédé d'identification selon l'invention, et le Glu-AB, à savoir une molécule appartenant à la 21ème catégorie 30 de molécules du procédé d'identification selon l'invention. La détermination de ces concentrations a été réalisée par chromatographie liquide couplée à une spectrométrie de masse à transformée de Fourier (LC-FTMS). Après établissement de droites de calibration, les 4 molécules détaillées ci-dessus ont été dosées simultanément. 35 L'analyse de chacun des échantillons a duré environ 7,5 minutes. Plus précisément, les caractéristiques techniques de la chromatrographie liquide ont été les suivantes : Une plate-forme de chromatographie liquide à ultra haute performance (en anglais : Ultra high performance liquid chromatography) comprenant un passeur d'échantillons de type HTC PAL (appareillage de la société CTC Analytics AG) couplé à un système de pompage de type Accela. Une colonne de type C18 a été utilisée en tant que phase stationnaire, ladite colonne est commercialisée par la société Thermo Fisher Scientific sous le nom commercial Hypersil Gold et a les dimensions suivantes : 2,1 mm x 100 mm et 1,9 um pour la taille des particules. La phase mobile était un mélange d'eau et d'acétonitrile. Le débit était de 600 ulimin et le pourcentage volumique en acétonitrile de la phase mobile variait de la manière suivante : o Initialement : 20% v/v o 30 secondes après le début de l'analyse : 20% v/v ; o 4 minutes après le début de l'analyse : 50 v/v ; o 4,1 minutes après le début de l'analyse: 98% v/v ; o 6,1 minutes après le début de l'analyse : 98% v/v ; o 6,2 minutes après le début de l'analyse : 20% v/v ; o 7,5 minutes après le début de l'analyse : 20% v/v. Le volume d'injection était de 5 u.L. Chaque échantillon et chaque niveau de calibration ont été injectés trois fois. Le dispositif de chromatographie liquide à ultra haute performance décrit ci-dessus a été couplé à un spectromètre de masse de type Exactive, doté d'un analyseur Orbitrap et équipé d'une sonde d'ionisation par électronébullisation. Ces deux appareillages sont commercialisés par la société Thermo Fisher Scientific. Les données de spectrométrie de masse ont été acquises en 6 minutes en mode d'ionisation négative FTMS (à savoir l'acronyme anglophone de « Fourier Transform Mass Spectrometry » qui signifie spectromètre de masse à transformée de Fourier). Les autres paramètres de l'analyse de spectrométrie de masse sont détaillés dans le tableau 1 ci-dessous. Paramètre FTMS Valeur Débit du gaz de gaine 75 Débit du gaz auxiliaire 18 Température de la source d'ionisation 320°C Température du capillaire 350°C Tension d'ionisation -3 kV Tension du capillaire -95 V Tension de la lentille tubulaire (connue sous la dénomination anglophone : « tube lens ») -190 V Tension du récupérateur (connue sous la dénomination anglophone : « skim mer ») -46 V Energie de fragmentation par dissociation dans la source 20 eV Gamme de balayage 500 - 1200 Th Résolution 25 000 Valeur du contrôle automatique du gain 3.106 Tableau 1 détaillant les paramètres de l'analyse de spectrométrie de masse. Dans le tableau 1 ci-dessus, les gaz sont du diazote et les débits gazeux sont exprimés en unités arbitraires (c'est-à-dire les deux premières lignes du tableau 1). De plus, pour le mode de fragmentation, une énergie de 20eV a été appliquée dans la source afin de dissocier les éventuels adduits des molécules à quantifier avec des anions du milieu. La résolution est définie comme le rapport m/Am à mi-hauteur et elle est 10 exprimée ci-dessus pour un ion de rapport rn/z 200 Th. Une calibration externe du spectromètre utilisant une solution de calibration « Pierce® ESI Negative Ion Calibration » (Thermo Fisher Scientific) a été effectuée avant chaque série d'analyse. Les données ont été traitées à l'aide des applications Qualbrowser et Quanbrowser du logiciel Xcalibur version 2.1 (Thermo 15 Fisher Scientific). La détection des 4 molécules précitées a été réalisée en se basant sur leur masse théorique exacte, ainsi que sur leurs temps de rétention théoriques respectifs. Les aires des pics ont été déterminées par intégration automatique et les 5 concentrations des 4 molécules précitées ont été déterminées en tenant compte du facteur de dilution (20 fois) détaillé ci-dessus. Ainsi, les concentrations des 4 molécules précitées présentes dans les différents échantillons de bois de chêne A à V préparés de la manière telle que détaillée ci-dessus ont été calculées automatiquement. 10 Le tableau 2 ci-dessous indique le détail des concentrations en QTT I, QTT Il, QTT III pour les échantillons A à V, lesdites concentrations étant exprimées en mg/L et en ug/g (ug/g signifiant « microgramme/gramme »). mg/L ug/g mg/L ug/g mg/L ug/g mg/L ug/g QTT I QTT II QTT III QTT totaux A 12,5 249,8 6,0 120,4 17,9 357,8 36,4 728,0 20,2 403,5 5,1 102,7 30,8 615,0 56,1 1121,2 41,6 832,5 70,9 1418,0 70,4 1408,7 183,0 3659,2 23,9 477,9 4,1 82,8 11,8 235,3 39,8 796,0 13,3 265,4 2,2 43,1 6,6 132,5 22,1 441,0 29,0 580,9 6,8 135,2 24,2 484,2 60,0 1200,2 40,7 814,0 66,0 1320,0 70,3 1405,2 177,0 3539,2 2,8 56,0 1,9 37,5 3,7 74,0 8,4 167,5 0,2 3,1 0,2 4,0 0,2 4,7 0,6 11,7 J 0,1 2,1 0,1 2,1 0,2 3,3 0,4 7,4 K 0,1 1,6 0,5 10,2 0,1 2,9 0,7 14,7 L 0,1 1,3 0,1 1,8 0,1 1,9 0,3 5,0 M 0,1 2,2 0,9 18,8 0,2 4,9 1,3 25,9 N 0,1 1,9 0,1 1,4 0,1 2,0 0,3 5,3 0 0,2 3,2 0,3 5,9 0,1 2,1 0,6 11,2 P 0,2 4,8 0,1 2,6 0,2 4,3 0,6 11,7 Q 0,1 1,1 0,0 1,0 0,2 3,1 0,3 5,2 R 0,3 5,4 0,3 5,2 0,2 4,8 0,8 15,4 S 0,9 17,3 2,2 44,1 1,3 26,2 4,4 87,7 T 0,5 9,6 0,8 15,3 0,5 10,6 1,8 35,4 U 0,1 2,9 1,4 28,0 0,4 7,2 1,9 38,0 V 0,8 16,3 0,1 3,0 0,2 4,4 1,2 23,7 Tableau 2 détaillant pour les échantillons A à V les concentrations en me et en ug/g 15 de QTT I. QTT II et QTT III, ainsi que la somme des concentrations de QTT I. QTT II et QTT III Les diagrammes des figures 1 à 3 représentent respectivement les concentrations en QTT I, QTT II et QTT III des échantillons A à V. Le diagramme de la figure 5 représente la somme des concentrations de QTT I, QTT II et QTT III des échantillons A à V. Le tableau 3 ci-dessous indique le détail des concentrations en Glu-AB pour les échantillons A à V, lesdites concentrations étant exprimées en mg/L et en ug/g. mg/L ug/g Glu-AB Chêne 0,9 17,6 sessile 0,4 8,2 2,1 42,6 0,3 6,8 0,2 4,1 0,4 8,5 4,9 97,9 0,3 6,5 8,0 160,2 Chêne J 5,4 108,2 pédoncule' K 68,7 1373,5 L 20,5 410,6 M 45,5 910,5 N 1,8 36,0 0 86,7 1733,3 P 18,9 377,1 Q 32,1 641,4 R 34,1 682,8 S 83,8 1676,2 T 23,0 460,2 U 97,6 1952,0 V 20,2 403,1 Tableau 3 détaillant pour les échantillons A à V les concentrations en mg/L et en ug/g de de GLU-AB Le diagramme de la figure 4 représente la concentration en Glu-AB des échantillons A à V. Le tableau 4 ci-dessous détaille pour les échantillons A à V le ratio R et le logarithme décimal du ratio R, ledit ratio R correspondant à la somme des 15 concentrations de QTT I, QTT II, QTT III sur la concentration en Glu-AB. R LOG(R) 41,40 1,62 137,16 2,14 85,94 1,93 116,36 2,07 Chêne 108,68 2,04 sessile 141,61 2,15 36,16 1,56 25,76 1,41 Chêne I 0,07 -1,14 pédonculé J 0,07 -1,16 K 0,01 -1,97 L 0,01 -1,91 M 0,03 -1,55 N 0,15 -0,84 0 0,01 -2,19 P 0,03 -1,51 Q 0,01 -2,10 R 0,02 -1,65 S 0,05 -1,28 T 0,08 -1,11 U 0,02 -1,71 V 0,06 -1,23 Tableau 4 détaillant pour les échantillons A à V le ratio R et logarithme décimal du ratio R Le diagramme de la figure 6 représente le logarithme décimal du ratio R des échantillons A à V. Au vu des valeurs détaillées dans le tableau 4 ci-dessus, on relève que tous les échantillons de chêne sessile (à savoir les échantillons A à H) ont une valeur de ratio R supérieure à 3,162 et tous les échantillons de chêne pédonculé (à savoir les échantillons I à V) ont une valeur de ratio R inférieure à 0,316. En ce qui concerne, le logarithme décimal du ratio R : le logarithme 10 décimal du ratio R de tous les échantillons de chêne sessile est supérieur à 0,5 et le logarithme décimal du ratio R de tous les échantillons de chêne pédonculé est inférieur à -0,5. Le diagramme de la figure 6 exprime clairement ce résultat de différenciation sans ambiguïté d'un échantillon de bois de chêne de l'espèce de chêne 15 sessile de celui de l'espèce de chêne pédonculé. Par ailleurs, au regard des tableaux 2 et 3 et des figures 1 à 5, les échantillons G et S témoignent de tout l'intérêt du procédé d'identification de l'espèce de chêne d'un échantillon d'un bois de chêne selon l'invention, et notamment de la néccessité absolue de la prise en considération de deux catégories de molécules différentes et qui ont été décrites ci-dessus. En effet, l'échantillon G (s'avérant être de l'espèce sessile) a une concentration quasi aussi élevée en Glu-AB que l'échantillon J qui est de l'espèce pédonculé. De même, l'échantillon S (s'avérant être de l'espèce pédonculé) a une concentration non négligeable en QTT I, QTT II et QTT III qui, de prime abord, aurait pu inciter à conclure qu'il appartenait à l'espèce sessile. En effet, les bois de chêne sessile ont une concentration non négligeable en ces molécules de la 1:ère catégorie de molécules. Ainsi, ces échantillons témoignent que le procédé d'identification selon l'invention, grâce une sélection appropriée de deux catégories de molécules de dérivés de triterpènes de type oléanane, à savoir la 1:ère catégorie de molécules et la 2Ième catégorie de molécules qui ont été détaillées ci-dessus, permet une identification sans ambiguïté de l'espèce de chêne d'un bois de chêne. Et autrement dit, ces échantillons témoignent que si l'on considère 20 uniquement la présence dans l'échantillon de bois d'une molécule appartenant soit à la 1:ère catégorie de molécules soit à la 2Ième catégories de molécules, on peut conclure de manière erronée sur l'espèce de chêne de l'échantillon analysé. REVENDICATIONS1. Procédé d'identification de l'espèce de chêne d'un échantillon de bois de chêne, caractérisé en ce qu'il comprend au moins les étapes suivantes : a) On dispose d'un échantillon de bois de chêne ; b) On prépare l'échantillon de bois de chêne de manière appropriée pour une analyse de détermination de la concentration de dérivés de triterpènes de type oléanane qui sont présents dans ledit échantillon de bois de chêne ; c) On effectue au moins une analyse sur l'échantillon de bois de chêne ainsi préparé à l'étape b) de manière : - à identifier : i. entre une à trois molécules appartenant à une 1ière catégorie de molécules, lesdites une à trois molécules étant parmi les trois plus abondantes molécules de toutes les molécules de ladite 1ière catégorie de molécules présentes dans ledit échantillon de bois de chêne, ladite 11ère catégorie de molécules étant définie par l'ensemble des dérivés de triterpènes de type oléanane qui sont issus d'une génine de formule brute C30H4806, ii. entre une à trois molécules appartenant à une 2ième catégorie de molécules, lesdites une à trois molécules étant parmi les trois plus abondantes molécules de toutes les molécules de ladite 2iènle catégorie de molécules présentes dans ledit échantillon de bois de chêne, ladite 2iènle catégorie de molécules étant définie par l'ensemble des dérivés de triterpènes de type oléanane qui sont issus d'une génine de formule brute C30H4607, ainsi que des dérivés de triterpènes de type oléanane qui sont issus d'une génine de formule brute C30H4608, puis - à déterminer la concentration : - de chacune desdites une à trois molécules de la catégorie de molécules qui ont été identifiées ;de chacune desdites une à trois molécules de la 2ième catégorie de molécules qui ont été identifiées ; d) On détermine un ratio R, ledit ratio R correspondant au rapport de la concentration ou de la somme des concentrations d'au moins une desdites une à trois molécules de la 1iè' catégorie de molécules qui ont été identifiées sur la concentration ou la somme des concentrations d'au moins une desdites une à trois molécules de la 2ième catégorie de molécules qui ont été identifiées ; e) On identifie l'espèce de l'échantillon de bois de chêne en fonction de la valeur du ratio R déterminée à l'étape d) de la manière suivante : Si le ratio R est inférieur à 0,316, alors l'échantillon de bois de chêne appartient à l'espèce pédonculée, Si le ratio R est supérieur à 3,162, alors l'échantillon de bois de chêne appartient à l'espèce sessile. 2. Procédé d'identification selon la revendication 1, caractérisé en ce que la 1iè' catégorie de molécules est définie par l'ensemble des dérivés de triterpènes de type oléanane qui sont issus de l'arjungénine, de l'acide séricique, ainsi que des isomères de l'arjungénine et de l'acide séricique. 3. Procédé d'identification selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que la 2ième catégorie de molécules est définie par l'ensemble des dérivés de triterpènes de type oléanane qui sont issus de l'acide bartogénique, des isomères de l'acide bartogénique, de la trachelosperogenine D et des isomères de la trachelosperogenine D. 35 4. Procédé d'identification selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que la 1:ère catégorie de molécules est définie par l'ensemble des molécules : - de formule (I), (I) X4-0 X3-0 0, dans laquelle : X2 o X1 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o X2 représente un groupe gallate ou un hydrogène, o X3 représente un hydrogène ou un groupe glucose ou un groupe gallate ou un groupe glucose-gallate, o X4 représente un hydrogène ou un groupe gallate, de formule (II), X8 - 0 X7 -0 P dans laquelle : X6 o X5 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o X6 représente un groupe gallate ou un hydrogène, o X7 représente un hydrogène ou un groupe glucose ou un groupe gallate ou un groupe glucose-gallate, o X8 représente un hydrogène ou un groupe gallate. 5. Procédé d'identification selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que la 2ième catégorie de molécules est définie par l'ensemble des molécules :- de formule (III), 27 Y4-0 Y3-0 0 i dans laquelle : Y2 o Y1 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o Y2 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o Y3 représente un hydrogène ou un groupe gallate ou un groupe glucose ou un groupe glucose-gallate, o Y4 représente un hydrogène ou un groupe gallate, de formule (IV), (IV) 0 i dans laquelle : Y6 o Y5 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o Y6 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o Y7 représente un hydrogène ou un groupe glucose ou un groupe gallate ou un groupe glucose-gallate, o Y8 représente un hydrogène ou un groupe gallate,35- de formule (V), 28 (V) dans laquelle : o Y9 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o Y10 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o Y11 représente un hydrogène ou un groupe gallate, o Y12 représente un hydrogène ou un groupe glucose ou un groupe gallate ou un groupe glucose-gallate, o Y13 représente un hydrogène ou un groupe gallate, de formule (VI), 20 25 (VI) 30 dans laquelle : o Y14 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o Y15 représente un hydrogène ou un groupe gallate o Y16 représente un groupe glucose ou un hydrogène, o Y17 représente un hydrogène ou un groupe glucose ou un 35 groupe gallate ou un groupe glucose-gallate, o Y18 représente un hydrogène ou un groupe gallate. 6. Procédé d'identification selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que la 1:ère catégorie de molécules est définie par l'ensemble des molécules suivantes : - le quercotriterpénoside I de formule (VII) 10 15 20 25 30 35 HO OH OH - le quercotriterpénoside II de formule (VIII), (VIII) OH - le quercotriterpénoside III de formule (IX), HO HO 7. Procédé d'identification selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en que la 2ième catégorie de molécules est définie uniquement par le dérivé 28-glucosylé de l'acide bartogénique de formule (X) : OH 8. Procédé d'identification selon la revendication 7, caractérisé en ce que le ratio R correspond au rapport de la concentration ou de la somme des concentrations d'au moins une des molécules choisies parmi le quercotriterpénoside I de formule (VII), le quercotriterpénoside II de formule (VIII) et le quercotriterpénoside III de formule (IX) sur la concentration du dérivé 28-glucosylé de l'acide bartogénique de formule (X). 9. Procédé d'identification selon la revendication 8, caractérisé en ce que le ratio R correspond au rapport de la somme des concentrations du quercotriterpénoside I de formule (VII), du quercotriterpénoside II de formule (VIII) et du quercotriterpénoside III de formule (IX) sur la concentration du dérivé 28-glucosylé de l'acide bartogénique de formule (X). 10. Procédé d'identification selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisé en ce qu'a l'étape b), on prépare l'échantillon de bois de chêne selon une extraction solide liquide.35 11. Procédé d'identification selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, caractérisé en ce qu'a l'étape c), l'analyse consiste en au moins une analyse choisie parmi : les analyses de chromatographie liquide couplée à une analyse de spectrométrie de masse, les analyses de chromatographie gazeuse couplée à une analyse de spectrométrie de masse, les analyses de résonance magnétique nucléaire. 12. Procédé d'identification selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé en qu'a l'étape e) du procédé d'identification, on calcule le logarithme décimal du ratio R et : si le logarithme décimal du ratio R ainsi calculé est supérieur à 0,5 alors l'échantillon de bois de chêne est de l'espèce sessile ; si le logarithme décimal du ratio R ainsi calculé est inférieur à -0,5 alors l'échantillon de bois de chêne est de l'espèce pédonculée.