FR 3001967 A1 20140815 FR 1351146 A 20130211 Procédé de fabrication de pyrazoles, nouveaux pyrazoles et leurs applications La présente invention concerne un procédé de fabrication de 5 pyrazoles, de nouveaux pyrazoles impossibles à fabriquer à ce jour, et leurs applications. Il existe de nombreux procédés de formation de pyrazoles. Ceux-ci peuvent se résumer à 2 solutions principales tel que décrit dans la revue 10 récente d'Antonio Simon-Fuentes, Chem. Rev. 2011, 111, 6984-7034. Une première solution consiste à utiliser la cyclo-condensation de 1,3-diélectrophiles, tels que des béta-dicétones, avec des hydrazines. Cette solution est connue depuis de nombreuses années et est probablement la plus utilisée encore de nos jours pour la synthèse de pyrazoles. Cependant, cette 15 méthode présente un certain nombre de limitations. En particulier elle ne peut s'appliquer à tous les substrats, notamment les substrats hydrazines possédant des groupements nucléophiles tels que des amines ne peuvent être employés. De même les substrats diélectrophiles possédant d'autres centres électrophiles, tels que des aldéhydes, des cétones ou des accepteurs de Michael sont à 20 proscrire. De plus les conditions réactionnelles nécessitent la plupart du temps l'emploi d'acides et/ou des températures élevées. La deuxième solution consiste à préparer les pyrazoles par cycloaddition 1,3-dipolaire à partir d'alcynes et de dipôles tels que les diazoalcanes, les nitrilimines ou les sydnones. La réaction avec les diazo-alcanes et 25 les nitrilimines nécessite des conditions de bases fortes et l'emploi de solvants organiques ce qui est un inconvénient important lorsque des substrats fragiles et/ou uniquement soluble en milieu aqueux doivent être employés. De plus, ces réactions génèrent deux régioisomères qu'il est nécessaire de séparer. La réaction avec les sydnones est décrite dans la littérature selon 30 deux solutions. Une première solution consiste à préparer les pyrazoles par voie thermique. La cycloaddition sydnone/alcyne par voie thermique est connue depuis de nombreuses années et elle a été décrite notamment par Kirsi Harju, Johanna Vesterinen, and Jari Yli-Kauhaluoma, Org. Lett. 2009, 10, 2219-2221 et par Duncan L. Browne, Matthew D. Helm, Andrew Plant, and Joseph P. A. Harrity, Angew. Chem. Int. Ed. 2007, 46, 8656 -8658. Les températures nécessaires à la réaction sont classiquement supérieures à 120°C. Une autre solution, décrite par exemple par Chunrui Wu, Yuesi 5 Fang, Richard C. Larock and Feng Shi, Org. Lett. 2010, 10, 2234-2237 ou par Yuesi Fang, Chunrui Wu, Richard C. Larock and Feng Shi, J. Org. Chem. 2011, 76, 8840-8851, consiste à préparer les pyrazoles à partir d'alcynes très réactifs. La cycloaddition sydnone/alcyne peut alors s'opérer à température ambiante lorsque l'on utilise des composés aromatiques appelés arynes, 10 possédant une triple liaison extrêmement réactive. Les arynes ne sont pas stables et doivent être préparés in situ à partir de précurseurs appropriés. Chacune de ces solutions comprend des inconvénients non négligeables. Les inconvénients de la première solution sont liés aux conditions 15 drastiques de préparation. Les hautes températures, typiquement de l'ordre de 150°C, sont incompatibles avec de nombreux substrats fragiles. La réaction thermique ne tolère pas la présence de nombreuses fonctions réactionnelles. De plus, deux produits régioisomères sont formés, ce qui diminue les rendements de synthèse et impose des purifications fastidieuses. 20 La seconde solution utilise des alcynes très particuliers. Elle est donc par nature limitée en termes de diversité de substrats pouvant être utilisés. Seuls les pyrazoles appelés 2H-Indazoles peuvent être synthétisés par cette réaction. Il serait donc souhaitable de disposer d'un procédé qui autorise la 25 fabrication de toute une variété de pyrazoles, notamment comportant des groupements fragiles ou réactifs. Il serait aussi souhaitable que ce procédé soit le plus général possible et compatible avec des molécules complexes et des milieux biologiques. Par ailleurs, pour augmenter le rendement réactionnel, il serait 30 souhaitable que ce procédé soit régio- et chimio- sélectif. Après de longues recherches, les inventeurs ont mis au point un procédé de fabrication de pyrazoles, permettant notamment la préparation de nouveaux pyrazoles impossibles à fabriquer à ce jour. Ces pyrazoles répondent à la formule I, et n'ont pratiquement aucune limitation quant à la nature des substituants R et R" qui peut être d'une très grande variété, allant d'un simple alkyle jusqu'à des 5 protéines comme on le verra ci-après dans les exemples. C'est pourquoi la présente demande a pour objet un procédé de préparation d'un pyrazole de formule I R' IB 10 dans laquelle - R représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement thio ou -thioalkyle, un groupement hydroxy ou alkoxy, un groupement amino ou - aminoalkyle, un radical alkyl renfermant de 1 à 8 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec F, Cl, Br, I, CN, OH, NH2, NH- 15 Alkyle C1-C8, N-(Alkyle C1-C8)2, SH, un radical aryl contenant 6 à 10 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec un radical alkyle ou alkoxy contenant 1 à 8 atomes de carbone, un hétérocycle, un acide aminé, un polypeptide, une protéine, un acide nucléique, une molécule d'ADN, un polysaccharide, un polymère, une nanoparticule, un dendrimère. 20 - R' représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement thio ou -thioalkyle, un groupement hydroxy ou alkoxy, un groupement amino ou - aminoalkyle, un radical alkyl renfermant de 1 à 8 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec F, Cl, Br, I, CN, OH, NH2, NH-Alkyle C1-C8, N-(Alkyle C1-C8)2, SH, un radical aryl contenant 6 à 10 atomes de 25 carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec un radical alkyle ou alkoxy contenant 1 à 8 atomes de carbone, un hétérocycle, - R" représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement thio, un groupement hydroxy, un groupement amino, un groupement hydrocarboné ou un groupement hydrocarboné renfermant de 1 à 100 hétéroatomes, R" représentant particulièrement un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement thio ou -thioalkyle, un groupement hydroxy ou alkoxy, un groupement amino ou -aminoalkyle, un radical alkyl renfermant de 1 à 8 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec F, Cl, Br, I, CN, 5 OH, -0-hétérocycle substitué ou non substitué, NH2, -NH-Alkyle C1-C8, -N-(Alkyle C1-C8)2, -NH-R"' ou - Alkyl C1-C3-NH-R"' où R"' représente un groupement sulfoné, SH, un radical aryl contenant 6 à 10 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec un radical alkyle ou alkoxy contenant 1 à 8 atomes de carbone, un hétérocycle, un acide aminé, un 10 polypeptide, une protéine, un acide nucléique, une molécule d'ADN, un polysaccharide, un polymère, une nanoparticule, un dendrimère, caractérisé en ce que l'on fait réagir une sydnone de formule II R" R C) 04 Il dans laquelle R et R' ont les significations déjà indiquées, avec un alcyne de 15 formule III R" III dans laquelle R" a la signification déjà indiquée, en présence d'un métal catalyseur, pour obtenir un composé pyrazole de formule I que l'on isole et salifie 20 si désiré. L'atome d'halogène peut-être un atome de brome ou d'iode, et de préférence un atome de chlore. Le radical alkyl est à chaîne linéaire ou chaîne ramifiée et peut renfermer de 1 à 8 atomes de carbone et de préférence de 1 à 5 atomes de 25 carbone. Les groupes alkyles appropriés comprennent un méthyle, un éthyle, un propyle, un isopropyle, un butyle, un sec-butyle et un tert-butyle. Il en est de même pour le radical alkyle du groupement alkylthio, alkoxy ou alkylamino. Le terme aryl désigne un radical carbocyclique aromatique contenant 6 à 10 atomes de carbone, sauf indication contraire. Les groupes 30 aryle appropriés comprennent un phényle, un naphtyle et un biphényle. Les groupes aryle substitués comprennent les groupes aryle décrits ci-dessus qui sont substitués une ou plusieurs fois, de préférence une fois avec un halogène, un alkyle, un hydroxy, un alcoxy, un nitro, un méthylènedioxy, un éthylènedioxy, un amino, un alkylamino, un dialkylamino, un hydroxyalkyle, un hydroxyalcoxy, un carboxy. L'hétérocycle peut-être un groupe hétérocyclique saturé, partiellement saturé et totalement insaturé comportant un, deux ou trois cycles et un nombre total de 5 à 10 atomes de cycle où au moins l'un des atomes de cycle est un atome N, O ou S. De préférence, le groupe hétérocyclique contient 1 à 3 hétéroatomes de cycle choisis parmi N, O et S. Les groupes hétérocycliques saturés et partiellement saturés appropriés comprennent, un tétrahydrofuranyle, un tétrahydrothiényle, un tétrahydropyranyle, un dihydropyranyle, un pyrrolidinyle, un pipéridinyle, un pipérazinyle, un morpholinyle, un oxoazolinyle, un isoxazolinyle, et analogues. Les groupes hétéroaryles appropriés comprennent un furyle, un thiényle, un pyrrolyle, un pyrazolyle, un imidazolyle, un pyridyle, un pyrimidinyle, un benzopyranyle, un indolyle, un quinoléinyle, un isoquinoléinyle, un naphtyridinyle, et analogues. D'autres exemples de groupes hétérocycliques appropriés sont un 2-quinoléinyle, un 1,3-benzodioxyle, un 2-thiényle, un 2-benzofuranyle, un 2- benzothiophényle, un 3-thiényle, 2,3-dihydro-5-benzofuranyle, un 4-indoyle, un 4-pyridyle, un 3-quinoléinyle, un 4-quinoléinyle, un 1,4-benzodioxan-6-yle, un 3- indoyle, un 2-pyrrolyle, un benzopyran-6-yle, un 5-indolyle, un 1,5-benzoxépin8-yle, un 3-pyridyle, un 6-coumarinyle, un 5-benzofuranyle, un 2-isoimidazol-4- yle, un 3-pyrazolyle, un 3-carbazolyle, un 2-thiazolyle, un 2-oxazolyle, un 1-imidazolyle et un 2-imidazolyle. L'hétérocycle peut-être substitué en un ou plusieurs sites substituables avec, par exemple, un halogène, un aryle, un alkyle en Cl -05, un hydroxy, un alcoxy en Cl -05, un cyano, un trifluorométhyle, un nitro, un oxo, un amino, un alkyl C1-05 amino ou un dialkyl C1-05 amino ou même un autre hétérocycle qui lui-même peut également être substitué. Les radicaux qui sont substitués une ou plusieurs fois contiennent de préférence 1 à 3 substituants, Un polypeptide peut être par exemple l'angiotensine II, la substance P, la neurokine A, la calcitonine, l'ocytocine. Une protéine peut être par exemple un anticorps, une enzyme, l'hémoglobine, la transferrine, la streptavidine. Un acide nucléique peut être par exemple une molécule constituée d'ADN ou d'ARN. Un polysaccharide peut être par exemple le chitosan, la cellulose, les alginates, le dextran. Un polymère peut être par exemple le polyéthylène glycol (PEG), le polystyrène, le polypropylène, le polyéthylène, le polyacrylamide. Une nanoparticule peut être choisie par exemple parmi les 10 quantum dots, les nanotubes de carbone, les nanoparticules métalliques (Au, Fe304, Cr2O3, A1203, BaFe12O19)- Un dendrimère peut être choisi par exemple parmi les dendrimères PAMAM et les Cyclotriphosphazene-PMMH. Lorsque R"' représente un groupement sulfoné, il s'agit de 15 préférence d'un des groupements sulfonés illustré par les exemples. Dans la présente demande et dans ce qui suit, l'expression « groupement hydrocarboné » désigne un groupement hydrocarboné linéaire, ramifié, cyclique ou polycyclique, ces cycles pouvant être fusionnés ou non, renfermant de 1 à 100 hétéroatomes, ces groupements pouvant être non 20 substitués ou substitués par un ou plusieurs atomes ou groupements comme ceux cités pour la définition des radicaux R' et R". Il et à noter que les sydnones de formule Il sont des dipôles existant sous plusieurs formes tautomères. Seule une des formes est représentée ci-dessus. 25 Dans des conditions préférentielles de mise en oeuvre du procédé ci-dessus décrit, R représente un radical aryl ou hétéroaryl éventuellement substitué, notamment un radical aryl éventuellement substitué, particulièrement un radical phényl éventuellement substitué, ces différents radicaux et substituant ayant notamment les significations indiquées ci-dessus. 30 Dans d'autres conditions préférentielles de mise en oeuvre du procédé ci-dessus décrit, R' représente un atome d'hydrogène. Dans encore d'autres conditions préférentielles de mise en oeuvre du procédé ci-dessus décrit, R" représente un radical hétéroaryl ou un radical aryl ou encore un radical alkyl renfermant de 1 à 8 atomes de carbone, de préférence l'un des deux derniers. Dans des conditions tout particulièrement préférées, R et R', R' et R", R et R", et R, R' et R" ont les valeurs préférées indiquées ci-dessus. Le métal catalyse la réaction ci-dessus. On peut citer comme métaux catalyseurs utilisables dans la présente invention l'argent, l'or, le mercure, le cadmium, le zirconium, le ruthénium, le fer, le cobalt, le platine, le palladium, le nickel, le rhodium, le tungstène et le cuivre. Dans les conditions préférentielles de mise en oeuvre du procédé ci-dessus décrit, le métal catalyseur est le cuivre. Des formes du cuivre utilisables dans le procédé sont par exemple et de préférence soit des sels de cuivre (I) tels que Cul, CuOTf, CuCI, CuOAc,... et de préférence Cul, soit des sels de cuivre (II) tels que CuSO4, CuOTf2, CuOAc2, ... et de préférence CuSO4 réduits in situ en sels de Cu(I) par un agent réducteur tel que l'acide ascorbique, du bisulfite de sodium, du zinc ou du cuivre métallique, et de préférence de l'acide ascorbique. Les sels de cuivre peuvent soit être utilisés tels quels, soit sous forme complexés à des ligands tels les dérivés de phénanthrolines, de triazoles, 20 de pyridines, d'imidazoles, des phosphines et de préférence des ligands azotés et notamment des phénanthrolines. Les considérations qui précèdent sont valables pour les autres métaux catalyseurs précités. Notamment plus généralement, les sels des métaux ci-dessus sont de préférence réduits in situ en sels ayant un degré 25 d'oxydation inférieur. Les solvants utilisables pour la mise en oeuvre du présent procédé peuvent être des solvants organiques, de l'eau ou des mélanges organoaqueux. Il est à noter que de manière tout à fait remarquable, un liquide physiologique, éventuellement complexe comme le plasma, l'urine, les lysats 30 cellulaires, ou les milieux de culture cellulaire peuvent être utilisés comme milieu solvant dans la présente invention, sans perturber la réaction. Le présent procédé est peu sensible au pH du milieu rédactionnel. On préfère cependant opérer en milieu neutre, ou particulièrement en milieu alcalin. A cette fin, on peut utiliser par exemple une base organique comme la triéthylamine ou la triéthanolamine. Les procédés objet de la présente invention possèdent de très 5 intéressantes propriétés. Ils jouissent notamment de remarquables rendements réactionnels, généralement supérieurs à 95 %. Ils bénéficient d'une totale régiosélectivité, c'est-à-dire qu'un seul régioisomère est formé lors de la réaction. Pour préparer les pyrazoles de formule 1, on peut faire réagir des réactifs de départ comportant des groupements fonctionnels sans les altérer. 10 La réaction est applicable quelque soit la structure des réactifs définis ci-dessus mis en oeuvre. La réaction est effectuée dans des conditions réactionnelles douces, compatibles notamment avec des molécules fragiles ou des biomolécules telles que des protéines, des enzymes, les molécules d'ADN etc. 15 Ces propriétés sont illustrées ci-après dans la partie expérimentale. Elles justifient l'utilisation des procédés ci-dessus décrits, dans la préparation de composés originaux du pyrazole, jusqu'à présent inaccessibles. 20 C'est pourquoi la présente demande a aussi pour objet des composés du pyrazole de formule I ci-dessus décrits, dans laquelle R' et R" ont la signification et les valeurs préférées déjà indiquées et R représente un polypeptide comme par exemple l'angiotensine II, la substance P, la neurokine A, la calcitonine, l'ocytocine; une protéine comme par exemple un anticorps, 25 une enzyme, l'hémoglobine, la transferrine, la streptavidine; un acide nucléique comme par exemple une molécule constituée d'ADN ou d'ARN (Remarque : une séquence d'ADN ou d'ARN n'est pas un produit mais une suite ordonnée de molécules d'ADN ou d'ARN écrite par exemple sur du papier); un polysaccharide comme par exemple le chitosan, la cellulose, les alginates, le 30 dextran; un polymère comme par exemple le polyethylène glycol (PEG), le polystyrène, le polypropylène, le polyéthylène, le polyacrylamide, une nanoparticule comme par exemple des quantum dots, des nanotubes de carbones, des nanoparticules métalliques (Au, Fe304, Cr2O3, A1203, BaFei2019), un dendrimère comme par exemple les dendrimères PAMAM, les Cyclotriphosphazene-PMMH. R " représente dans ce cas de préférence un radical ayant une fonction de fluorophore comme par exemple les cyanines Cy3 et Cy5, les 5 dérivés Alexa Fluor, les dérivés de coumarine, de fluorescéine et de rhodamine tel que la tétraméthylrhodamine (TAMRA), un radiotraceur comme par exemple les complexes de DOTA-Gd, DOTA-Ga et DOTA-64Cu ou une molécule comportant un atome 18F ou 1251, un principe actif de thérapeutique humaine (médicament) comme par exemple le taxol, le taxotère, la navelbine, la 10 vinblastine, une molécule capable d'interagir avec une protéine ou de l'ADN comme par exemple la biotine, le tétraacétylfucose, les peptides RGD, les anth racycli nes. La présente demande a aussi pour objet des composés du pyrazole de formule I ci-dessus décrits, dans laquelle R et R' ont la signification et les 15 valeurs préférées déjà indiquées et R" représente un polypeptide comme par exemple l'angiotensine 11, la substance P, la neurokine A, la calcitonine, l'ocytocine; une protéine comme par exemple un anticorps, une enzyme, l'hémoglobine, la transferrine, la streptavidine; un acide nucléique comme par exemple une molécule constituée d'ADN ou d'ARN (Remarque : une séquence 20 d'ADN ou d'ARN n'est pas un produit mais une suite ordonnée de molécules d'ADN ou d'ARN écrite par exemple sur du papier); un polysaccharide comme par exemple le chitosan, la cellulose, les alginates, le dextran; un polymère comme par exemple le polyéthylène glycol (PEG), le polystyrène, le polypropylène, le polyéthylène, le polyacrylamide, une nanoparticule comme 25 par exemple des quantum dots, des nanotubes de carbones, des nanoparticules métalliques (Au, Fe304, Cr2O3, A1203, BaFei2019), un dendrimère comme par exemple les dendrimères PAMAM, les cyclotriphosphazene-PMMH. R représente dans ce cas de préférence un radical ayant une fonction de fluorophore comme par exemple les cyanines Cy3 et Cy5, les 30 dérivés Alexa Fluor, les dérivés de coumarine, de fluorescéine et de rhodamine tel que la tétraméthylrhodamine (TAMRA), un radiotraceur comme par exemple les complexes de DOTA-Gd, DOTA-Ga et DOTA-64Cu ou une molécule comportant un atome 18F ou 1251, un principe actif de thérapeutique humaine (médicament) comme par exemple le taxol, le taxotère, la navelbine, la vinblastine ; une molécule capable d'interagir avec une protéine ou de l'ADN comme par exemple la biotine, le tetraacetylfucose, les peptides RGD, les anth racycli nes. Les nouveaux composés du pyrazole de formule I ci-dessus décrits objet de la présente invention possèdent de très intéressantes propriétés. Ils sont doués notamment de remarquables propriétés telles que : 0 une grande sensibilité de détection dans le cas des pyrazoles ayant un groupement R ou R" = fluorophore ou radiotraceur, ii) la capacité à lier efficacement une biomolécule d'intérêt dans le cas des pyrazoles ayant un groupement R ou R" = principe actif ou une molécule capable d'interagir avec une protéine ou de l'ADN. Ces propriétés sont illustrées ci-après dans la partie expérimentale. Elles justifient l'utilisation des nouveaux composés du pyrazole ci-dessus décrits, 15 dans de nombreuses applications comme la détection de protéines. C'est pourquoi la présente demande a aussi pour objet l'utilisation des nouveaux composés du pyrazole ci-dessus décrits en tant que : i) traceurs biologiques pour l'imagerie médicale ou le diagnostic (triazoles comportant un 20 atome de 18F et un anticorps par exemple), ii) polymères fonctionnels pour la capture et la détection de biomolécules d'intérêt, iii) molécules permettant la détection et l'analyse d'ADN, d'ARN et des protéines suite à l'incorporation de groupements fluorescents via le procédé de l'invention, iv) nano-objets à activité thérapeutique (dans le cas de dendrimères ou de nanoparticules poly- 25 fonctionnalisées, via le procédé de l'invention, par un principe actif), y) composés radiopharmaceutiques (triazoles comportant un anticorps spécifique de cellules tumorales et un radioélément par exemple) Les conditions préférentielles de mise en oeuvre des composés du pyrazole ci-dessus décrites s'appliquent également aux autres objets de 30 l'invention visés ci-dessus, notamment à leurs applications ainsi qu'à leur procédé de fabrication. Les exemples qui suivent illustrent la présente demande. Exemples 1 à 6 Des composés du pyrazole de formule 1 dans laquelle R représente un radical phényle, R' représente un atome d'hydrogène et R" représente un radical benzyl ont été préparés conformément à la réaction ci-5 dessous, 2a 002 selon les procédures de l'invention exposées ci-dessous : Procédure A On a ajouté 200 pl d'une solution aqueuse fraîchement préparée de sulfate de 10 cuivre pentahydraté (5 mg, 0,02 mmol), (0,2 eq.) dans du trihydrate d'acide bathophénanthrolinedisulfonique disodique (11,8 mg, 0,02 mmol) et de la triéthanolamine (15 mg, 0,1 mmol), à une solution de sydnone (0,1 mmol), d'alkyne (0,1 mmol), d'ascorbate de sodium (39,6 mg, 0,2 mmol) et de triéthanolamine (15 mg, 0,1 mmol) dans 1,8 mL d'eau. Le mélange résultant a 15 été porté sous agitation à 60°C pendant 16h, puis refroidi avec 2 mL d'une solution 0,05 M de HEDTA et extrait à l'aide de 3x5mL de chlorure de méthylène. Les phases organiques combinées ont été séchées sur sulfate de sodium anhydre et concentrées pour obtenir le produit attendu, objet d'une purification supplémentaire par chromatographie flash. 20 Procédure B On a versé une solution de sydnone (0,5 mmol), d'alkyne (0,5 mmol), de triéthylamine (0,5 mmol) et de 1,10-phénanthroline (0,1 mmol) dans 10 mL de diméthylformamide anhydre dans un flacon contenant de l'iodure de cuivre (0,1 25 mmol) sous Argon. Le mélange résultant a été porté sous agitation à 60° C. le sous argon pendant 16h puis concentré. On a dissous le résidu dans 10 mL de chlorure de méthylène et lavé avec 10 mL d'une solution 0,05 M de HEDTA. La phase organique a été séchée sur sulfate de sodium anhydre et concentrée pour donner le produit attendu, objet d'une purification supplémentaire par 30 chromatographie flash. Procédure C On a ajouté du sulfate de cuivre pentahydraté (5 mg, 0,02 mmol), (0,2 eq.) à une solution de sydnone (0,1 mmol), d'alkyne (0,1 mmol), d'ascorbate de sodium (39,6 mg, 0,2 mmol), de triéthylamine (0,1 mmol) et de 1,105 phénanthroline (0,02 mmol) dans 2 mL d'un mélange tert-butanol/eau (1:1). Le mélange résultant a été agité pendant 16h à 60° C. puis refroidi avec 2 mL d'une solution 0,05 M de HEDTA et extrait à l'aide de 3x5mL de chlorure de méthylène. Les phases organiques combinées ont été séchées sur sulfate de sodium anhydre et concentrées pour obtenir le produit attendu, objet d'une 10 purification supplémentaire par chromatographie flash. Procédure C' On a ajouté 200 pl d'une solution aqueuse fraîchement préparée de sulfate de cuivre pentahydraté (5 mg, 0,02 mmol), (0,2 eq.) dans du trihydrate d'acide 15 bathophenanthrolinedisulfonique disodique (11,8 mg, 0,02 mmol) et de la triéthanolamine (15 mg, 0,1 mmol), à une solution de sydnone (0,1 mmol), d'alkyne (0,1 mmol), d'ascorbate de sodium (39,6 mg, 0,2 mmol) dans 1,8 mL d'un mélange tert-butanol/eau (55:45). Le mélange résultant a été agité pendant 16h à 60° C. puis refroidi avec 2 mL d'une solution 0,05 M de HEDTA 20 et extrait à l'aide de 3x5mL de chlorure de méthylène. Les phases organiques combinées ont été séchées sur sulfate de sodium anhydre et concentrées pour obtenir le produit attendu, objet d'une purification supplémentaire par chromatographie flash. 25 Procédure D On a opéré comme dans la procédure C, mais en effectuant la réaction à température ambiante. 30 Procédure E On a opéré comme dans la procédure B, mais sans triéthylamine. Les résultats obtenus sont reportés dans le tableau 1 ci-dessous. Tableau 1 Rendement % Rapport 3a/3a' Procédure A 99 100/0 Procédure B 92 100/0 Procédure C 99 100/0 Procédure C' 99 100/0 Procédure D 67 100/0 Procédure E 62 100/0 Ainsi, on a un excellent rendement, et en plus la régiosélectivité de la réaction est totale en faveur du composé 3a, ceci dans des milieux très variés, aqueux, organique, ou mixte. Exemple comparatif 1 A titre de comparaison, on a également mis en oeuvre les mêmes réactifs, pour procéder à leur réaction par voie thermique selon l'art antérieur, dans les conditions suivantes : Solvant = DMF - Reflux (153°C) - durée de la réaction=16h. On a obtenu un rendement de seulement 15 %, et un mélange 15 d'isomères 3a et 3a' dans un rapport 3a/3a' = 25/75. Exemples 7 et 8 : 4-phénéthy1-1-phény1-1H-pyrazole N On a préparé le produit du titre de l'exemple 7 à partir de 320 phénylsydnone et de 4-phényl-1-butyne en utilisant la procédure C, avec purification par chromatographie flash (acétate d'éthyle (EtOAc)/cyclohexane = 20/80). Le produit a été obtenu sous forme d'une huile jaune avec un rendement de 96 %. En procédant dans les conditions de la procédure B, le produit a été obtenu avec un rendement de 90 %. 1H NMR (400 MHz, CDCI3, Ô ppm): 7,67 (s, 1 H), 7,65 (s, 2 H), 7,56 (s, 1 H), 7,46 (t, J = 8,0 Hz, 2 H), 7,20 - 7,37 (m, 6 H), 2,93 - 3,00 (m, 2 H), 2,86 - 2,93 5 (m, 2 H). 13C NMR (100 MHz, CDCI3, Ô ppm): 141,6, 141,0, 140,3, 129,5, 128,6, 128,5, 126,2, 125,0, 123,1, 118,9, 37,2, 26,3. Exemple 9 : Benzoate de (1-phény1-1H-pyrazol-4-yl)méthyle o 10 'le On a préparé le produit du titre de l'exemple 9 à partir de 3phénylsydnone et de benzoate de prop-2-yn-1-yl en utilisant la procédure C, avec purification par chromatographie flash (EtOAc/cyclohexane = 20/80). Le produit a été obtenu sous forme d'une huile jaune avec un rendement de 93 %. 15 1H NMR (400 MHz, CDCI3, Ô ppm): 8,05 (m, 3 H), 7,82 (s, 1 H), 7,68 (d, J= 7,7 Hz, 2 H), 7,56 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,49 - 7,38 (m, 4 H), 7,30 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 5,34 (s, 2 H). 13C NMR (100 MHz, CDCI3, Ô ppm): 166,7, 141,7, 140,1, 133,2, 130,2, 129,8, 129,6, 128,5, 127,7, 126,9, 119,4, 118,6, 57,8. 20 Exemple 10 : 2-(1-phény1-1H-pyrazol-4-yl)propan-2-ol On a préparé le produit du titre de l'exemple 10 à partir de 3phénylsydnone et de 2-méthyl-3-butyn-2-ol en utilisant la procédure C, avec 25 purification par chromatographie flash (EtOAc/cyclohexane = 10/90). Le produit a été obtenu sous forme d'un solide blanc avec un rendement de 83 %. 1H NMR (400 MHz, Méthanol-d4, Ô ppm): 8,12 (s, 1 H), 7,75 - 7,65 (m, 3 H), 7,47 (t, J = 8,1 Hz, 2 H), 7,31 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 1,59 (s, 6 H). 13C NMR (100 MHz, Methanol-d4, Ô ppm): 141,6, 139,7, 135,0, 130,7, 127,8, 30 125,7, 120,4, 68,7, 31,9. Exemple 11 : 1,4-dipheny1-1H-pyrazole N On a préparé le produit du titre de l'exemple 11 à partir de 35 phénylsydnone et de phénylacétylène en utilisant la procédure C, avec purification par chromatographie flash (EtOAc/cyclohexane = 20/80). Le produit a été obtenu sous forme d'un solide blanc avec un rendement de 80 %. 1H NMR (400 MHz, CDCI3, Ô ppm): 8,19 (s, 1 H), 8,04 (s, 1 H), 7,77 (d, J= 8,1 Hz, 2 H), 7,59 (d, J = 7,7 Hz, 2 H), 7,51 (t, J = 7,8 Hz, 2 H), 7,44 (t, J = 7,7 Hz, 2 10 H), 7,37 - 7,27 (m, 2 H). 13C NMR (100 MHz, CDCI3, Ô ppm): 140,2, 138,9, 132,2, 129,6, 129,1, 127,0, 126,7, 125,8, 125,0, 123,5, 119.2. Exemple 12 : 4-hepty1-1-pheny1-1H-pyrazole 15 On a préparé le produit du titre de l'exemple 12 à partir de 3phénylsydnone et de 1-nonyne en utilisant la procédure C', avec purification par chromatographie flash (EtOAc/cyclohexane = 20/80). Le produit a été obtenu sous forme d'une huile jaune avec un rendement de 61 %. 20 1H NMR (400 MHz, CDCI3, Ô ppm): 7,70 (s, 1 H), 7,66 (d, J= 7,7 Hz, 2 H), 7,55 (s, 1 H), 7,43 (t, J = 7,9 Hz, 2 H), 7,25 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 2,52 (t, J = 7,7 Hz, 2 H), 1,61 (quin, J = 7,4 Hz, 2 H), 1,38 - 1,28 (m, 8 H), 0,89 (t, J = 6,8 Hz, 3 H). 13C NMR (100 MHz, CDCI3, Ô ppm): 141,1, 140,4, 129,5, 126,1, 124,8, 124,2, 118,9, 32,0, 30,9, 29,4, 29,3, 24,3, 22,8, 14,2. 25 Exemple 13 : acide 4-(4-phénéthy1-1H-pyrazol-1-y1)benzoïque On a préparé le produit du titre de l'exemple 13 à partir de 3-(4carboxyphényl)sydnone et de 4-phény1-1-butyne en utilisant la procédure C'. Le produit a été obtenu sous forme d'un solide blanc avec un rendement de 99 %. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, Ô ppm): 12,98 (br. s., 1 H), 8,40 (s, 1 H), 8,04 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 7,90 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 7,63 (s, 1 H), 7,32 - 7,21 (m, 4 H), 7,17 (t, J = 6,8 Hz, 1 H), 2,90 (t, J = 7,7 Hz, 2 H), 2,79 (t, J = 7,7 Hz, 2 H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6, Ô ppm): 166,7, 142,8, 141,8, 141,4, 130,9, 128,3, 128,3, 127,7, 126,0, 125,9, 123,6, 117,4, 36,0, 25,6. Exemples 14, 15, 16 : acide 4-(4-(2-hydroxypropan-2-y1)-1H- pyrazol-1-y1) benzoïque On a préparé le produit du titre de l'exemple 14 à partir de 3-(415 carboxyphényl)sydnone et de 2-méthyl-3-butyn-2-ol en utilisant la procédure A, en opérant à 37° C. Le produit a été obtenu sous forme d'un solide blanc avec un rendement de 93 %. En procédant dans les conditions de la procédure A mais en utilisant comme solvant du plasma sanguin humain, le produit a été obtenu 20 avec un rendement de 88 %. En procédant dans les conditions de la procédure C, le produit a été obtenu avec un rendement de 91 %. 1H NMR (400 MHz, Methanol-d4, Ô ppm): 8,27 (s, 1 H), 8,14 (d, J= 8,8 Hz, 2 H), 7,87 (d, J = 8,8 Hz, 2 H), 7,77 (s, 1 H), 1,61 (s, 6 H) 25 13C NMR (100 MHz, Methanol-d4, Ô ppm): 169,2, 144,8, 140,7, 135,7, 132,5, 125,6, 119,4, 68,7, 31,9 Exemple 17 : triacétate de (2R,3R,4S,5R,6R)-2-(acétoxyméthyl)-6- ((1-phény1-1H-pyrazol-4-yl)méthoxy)tétrahydro-2H-pyran-3,4,5-triy1 y o o e.)o O o . y0 o On a préparé le produit du titre de l'exemple 17 à partir de 3- (phényl)sydnone et de 2-propynyl-tétra-0-acéty1-13-D-glucopyranoside en utilisant la procédure C. Le produit a été obtenu sous forme d'un solide blanc avec un rendement de 96 %. 1H NMR (400 MHz, CDCI3, Ô ppm): 7,89 (s, 1 H), 7,68 - 7,62 (m, 3 H), 7,44 (t, J = 7,9 Hz, 2 H), 7,28 (t, J = 7,2 Hz, 1 H), 5,19 (t, J = 9,5 Hz, 1 H), 5,10 (t, J = 9,5 Hz, 1 H), 5,03 (t, J = 9,1 Hz, 1 H), 4,83 (d, J = 12,4 Hz, 1 H), 4,66 - 4,59 (m, 2 H), 4,27 (dd, J = 4,8, 12,2 Hz, 1 H), 4,18 (dd, J = 2,3, 12,2 Hz, 1 H), 3,76 - 3,66 (m, 1 H), 2,09 (s, 3 H), 2,01 (s, 3 H), 1,99 (s, 3 H), 1,98 (s, 3 H). 13C NMR (100 MHz, CDCI3, Ô ppm): 170,8, 170,3, 169,5, 169,4, 140,9, 140,0, 129,5, 126,8, 126,6, 119,2, 119,0, 99,2, 72,9, 71,9, 71,3, 69,2, 68,5, 62,1, 62,0, 20,8, 20,7, 20,6. Exemple 18 : 4-(4-méthoxyphény1)-1-phény1-1H-pyrazole I o On a préparé le produit du titre de l'exemple 18 à partir de 3(phényl)sydnone et de 1-éthyny1-4-méthoxybenzene en utilisant la procédure C', avec purification par chromatographie flash (EtOAc/cyclohexane = 20/80). Le produit a été obtenu sous forme d'un solide blanc avec un rendement de 64 %. 1H NMR (400 MHz, CDCI3, Ô ppm): 8,09 (s, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 7,73 (d, J= 8,2 Hz, 2 H), 7,48 (t, J = 8,2 Hz, 4 H), 7,30 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 6,95 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 3,85 (s, 3 H). 13C NMR (100 MHz, CDCI3, Ô ppm): 158,8, 140,2, 138,7, 129,6, 127,1, 126,7, 124,8, 124,8, 123,0, 119,2, 114,6, 55,5. Exemple 19 : 2-(1-pheny1-1H-pyrazol-4-yl)pyridine /\ ---N On a préparé le produit du titre de l'exemple 19 à partir de 3- (phényl)sydnone et de 2-éthynylpyridine en utilisant la procédure C'. Le produit a été obtenu sous forme d'un solide blanc avec un rendement de 95 %. 1H NMR (400 MHz, CDCI3, Ô ppm): 8,62 (d, J= 4,8 Hz, 1 H), 8,55 (s, 1 H), 8,20 (s, 1 H), 7,78 (d, J = 7,9 Hz, 2 H), 7,72 (dt, J = 1,6, 7,7 Hz, 1 H), 7,57 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,50 (t, J = 8,0 Hz, 2 H), 7,33 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 7,20 - 7,12 (m, 1 H). 13C NMR (100 MHz, CDCI3, Ô ppm): 151,5, 149,7, 140,0, 139,3, 136,9, 129,6, 126,9, 125,4, 125,2, 121,6, 119,9, 119,3. Exemple 20 : 1-phény1-4-(thiophèn-3-y1)-1H-pyrazole s On a préparé le produit du titre de l'exemple 20 à partir de 3(phényl)sydnone et de 2-éthynylthiophène en utilisant la procédure C'. Le produit a été obtenu sous forme d'un solide blanc avec un rendement de 99 %. 1H NMR (400 MHz, CDCI3, Ô ppm): 8,11 (s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,75 (d, J= 8,0 Hz, 2 H), 7,49 (t, J = 8,0 Hz, 2 H), 7,42 - 7,38 (m, 1 H), 7,38 - 7,27 (m, 3 H) 13C NMR (100 MHz, CDCI3, Ô ppm): 140,1, 139,2, 132,9, 129,6, 126,6, 126,4, 126,2, 123,4, 120,4, 119,1, 115,1. Exemple 21: acide 4-(4-((5-(dimethylamino)naphthalene-1- 5 sulfonamido)methyl)-1H-pyrazol-1-y1)benzoic acid N OH On a préparé le produit du titre de l'exemple 21 à partir de 3-(4- carboxyphenyl)sydnone et de 5-(dimethylamino)-N-(prop-2-yn-1- 10 yl)naphthalene-1-sulfonamide en utilisant la procédure C', en opérant à 37° C. et avec purification par chromatographie flash (EtOAc/cyclohexane/AcOH = 49/49/2). Le produit a été obtenu sous forme d'un solide jaune avec un rendement de 59 %. 1H NMR (400 MHz, Methanol-d4, Ô ppm): 8,40 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 8,28 (d, J = 15 8,6 Hz, 1 H), 8,20 (d, J = 7,4 Hz, 1 H), 8,03 (d, J = 8,8 Hz, 2 H), 7,59 - 7,42 (m, 5 H), 7,20 (s, 1 H), 7,17 (d, J= 7,5 Hz, 1 H), 4,10 (s, 2 H), 2,73 (s, 6 H). 13C NMR (100 MHz, Methanol-d4, Ô ppm): 169,2, 153,3, 144,1, 142,3, 137,5, 132,3, 131,4, 131,1, 131,1, 130,7, 129,9, 129,2, 127,7, 124,3, 121,9, 120,5, 119,2, 116,4, 45,8, 38,0. Exemple 22: 2-(6-(diethylamino)-3-(diethyliminio)-3H-xanthen-9- y1)-5-(N-((1-pheny1-1H-pyrazol-4-yl)methyl)sulfamoyl)benzenesulfonate N ` , 0 Il D HN-S 0 + 20 On a préparé le produit du titre de l'exemple 22 à partir de 3- (phényl)sydnone et de 2-(6-(diethylamino)-3-(diethyliminio)-3H-xanthen-9-yI)-5- (N-(prop-2-yn-1-yl)sulfamoyl) benzenesulfonate en utilisant la procédure C' et isolation par filtration à partir du milieu réactionnel. Le produit a été obtenu sous forme d'un solide violet avec un rendement de 92 %. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, Ô ppm): 8,47 (d, J= 1,6 Hz, 1 H), 8,38 (br. s., 1 H), 8,32 (s, 1 H), 7,91 (dd, J = 1,6, 8,0 Hz, 1 H), 7,76 (d, J = 7,9 Hz, 2 H), 7,51 (s, 1 H), 7,45 (t, J = 7,9 Hz, 2 H), 7,39 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,28 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 6,98 - 6,86 (m, 6 H), 4,12 (d, J = 2,8 Hz, 2 H), 3,69 - 3,56 (m, 8 H), 1,20 (t, J = 7,0 Hz, 12 H). MS (ESI) m/z: 714,3 [M+H]+. Exemple 23 : tris((1-pheny1-1H-pyrazol-4-yl)méthyl)amine V /i N-N On a ajouté du sulfate de cuivre pentahydraté (0.15 mmol) à une solution de 3-phénylsydnone (0.9 mmol), tripropargylamine (0.1 mmol), ascorbate de sodium (1.5 mmol), triéthylamine (0.9 mmol) et 1,1020 phénanthroline (0.15 mmol) dans 18 mL d'un mélange tert-butanol/eau (1:1). On a agité le mélange résultant dans un flacon fermé à 60° C. pendant 16 H. on a ensuite ajouté au mélange la seconde portion d'ascorbate de sodium (1.5 mmol), de 1,10-phenanthroline (0.15 mmol) et du sulfate de cuivre pentahydraté (0.15 mmol) et le nouveau mélange a été agité à 60° C. 25 pendant encore 24 H. Après refroidissement à température ambiante, le mélange a été dilué avec 20 mL d'une solution 0,05 M de HEDTA et a été extrait avec 3x30mL de chlorure de méthylène. Les phases organiques combinées ont été séchées sur sulfate de sodium anhydre et concentrées pour obtenir 127.3 mg du produit attendu sous forme d'un solide blanc, 0.26 mmol, rendement 85%, objet d'une purification supplémentaire par chromatographie flash (CH2Cl2/EtOAc = 80/20 à 0/100). 'H NMR (400 MHz, CDCI3, Ô ppm): 7,91 (s, 3 H), 7,73 (s, 3 H), 7,71 (d, J= 8,0 Hz, 6 H), 7,47 (t, J = 7,9 Hz, 6 H), 7,30 (t, J = 8,2 Hz, 3 H), 3,67 (s, 6 H). 13C NMR (100 MHz, CDCI3, Ô ppm): 141,7, 140,2, 129,6, 126,5, 126,4, 120,3, 119,0, 47.1. Exemple 24 : marquage d'un peptide avec un fluorophore : acide 2-(2-(2-(4-(4-((5-(dimethylamino)naphthalene-1-sulfonamido)methyl)-1H- pyrazol-1-y1)benzamido)acetamido)-3-(1H-indol-3-y1)propanamido)acetique \N -0 /-----01 - S ii NH 8 A une solution de 3-(4-((2-((1-((carboxyméthyl)amino)-3-(1H-indo1- 3-y1)-1-oxopropan-2-yl)amino)-2-oxoéthyl) carbamoyl)phény1)-1,2,3-oxadiazol-3- ium-5-olate (6 mg, 12 !mol), N-dansyl-N-propargylamine (4,5 mg, 16 !mol), sodium ascorbate (7 mg, 36 !mol) et de triéthanolamine (1,8 mg, 12 !mol) dans 1 mL d'eau on a ajouté 200 !IL d'une solution aqueuse fraîchement préparée de sulfate de cuivre pentahydraté (0,9 mg, 3,6 !mol), trihydrate du sel disodique de l'acide bathophénanthrolinedisulfonique (2.1 mg, 3.6 !mol) et de triéthanolamine (1.8 mg, 12 !mol). On a agité le mélange résultant à 37°C pendant 16h. Une analyse chromatographie liquide/spectrométrie de masse du mélange résultant a montré une conversion complète du produit de départ. Le mélange a été concentré et purifié par chromatographie liquide haute performance sur une colonne C18 XBridge 19 x 150 mm, 5 pm pour donner le produit attendu marqué par le dansyl. 1H NMR (400 MHz, Methanol-d4, Ô ppm): 8,43 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 8,30 (d, J = 30 8,6 Hz, 1 H), 8,22 (d, J = 6,6 Hz, 1 H), 7,86 (d, J = 8,8 Hz, 2 H), 7,63 - 7,55 (m, 3 H), 7,54 - 7,46 (m, 3 H), 7,31 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,22 (s, 1 H), 7,20 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,16 (s, 1 H), 7,07 (t, J = 7,1 Hz, 1 H), 7,00 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 4,80 (dd, J = 5,4, 7,8 Hz, 1 H), 4,12 (s, 2 H), 4,06 (d, J = 16,5 Hz, 1 H), 4,01 3,83 (m, 3 H), 3,44 - 3,38 (m, 1 H), 3,25 - 3,12 (m, 1 H), 2,76 (s, 6 H) MS (ESI) m/z: 751,4 [M+H]+. Exemple 25 : Marquage d'une protéine avec un fluorophore n On opère comme ci-dessus mais en utilisant comme sydnone de départ la sydnone couplée à la sérum albumine bovine préparée ci-après. On a opéré à température ambiante pendant 16h dans les conditions suivantes : sydnone couplée à la sérum albumine bovine : 1 mg/mL - 0,18 !mol, 1eq. N-dansyl-N-propargylamine : 1,8 !mol, 10 eq. CuSO4 : 1,8 !mol, 10 eq. Bathophénanthroline : 1,8 !mol, 10 eq. Ascorbate de sodium : 18 !mol, 100 eq. Après révélation des protéines avec du bleu de Coomassie et mesure de la fluorescence du dansyl Àex=320nm, Àem=320nm, on a trouvé qu'un nombre moyen de restes dansyl de 1,6 a été greffé sur la sérum albumine bovine. Ainsi, le procédé de l'invention peut être mis en oeuvre sur des 25 sydnones de départ portant des molécules biologiques. Exemple 26 : (R)-(1-pheny1-1H-pyrazol-4-yl)methyl 2-(4-((5-chloro- 3-fluoropyridin-2-yl)oxy)phenoxy)propanoate o CIF NO On a préparé le produit du titre de l'exemple 26 à partir de 3- (phenyl)sydnone et de Clodinafop-propargyl en utilisant la procédure C' et avec purification par chromatographie flash (EtOAc/cyclohexane = 30/70). Le produit a été obtenu sous forme d'un solide blanc avec un rendement de 62 %. 1H NMR (400 MHz, Methanol-d4, Ô ppm): 8.15 (s, 1 H), 7.79 (d, J= 2.2 Hz, 1 H), 10 7.75 (dd, J = 2.2, 9.5 Hz, 1 H), 7.70 (s, 1 H), 7.66 (d, J = 7.9 Hz, 2 H), 7.44 (t, J = 7.9 Hz, 2 H), 7.30 (t, J = 7.3 Hz, 1 H), 6.99 (d, J = 9.0 Hz, 2 H), 6.86 (d, J = 9.0 Hz, 2 H), 5.19 (s, 2 H), 4.85 (q, J = 6.8 Hz, 1 H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3 H). 15 MS (ESI) m/z: 468.0 [M(35CI)+H]+, 469.8 [M(37CI)+H]+ Exemple 27 : 1-((2R,4S,5R)-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl) tetrahydrofuran-2-y1)-5-(1-pheny1-1H-pyrazol-4-yl)pyrimidine-2,4(1H,3H) -dione 20 On a préparé le produit du titre de l'exemple 27 à partir de 3- (phényl)sydnone et de 5-Ethynyl-2'-déoxyuridine en utilisant la procédure C' et isolation par filtration à partir du milieu réactionnel. Le produit a été obtenu sous 25 forme d'un solide blanc avec un rendement de 84 %. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, Ô ppm): 8.68 (s, 1 H), 8.48 (s, 1 H), 8.05 (s, 1 H), 7.81 (d, J = 7.9 Hz, 2 H), 7.50 (t, J = 7.9 Hz, 2 H), 7.32 (t, J = 7.9 Hz, 1 H), 6.23 13C NMR (100 MHz, CDCI3, Ô ppm): 173.8, 156.4, 152.7, 148.6, 148.5, 142.7, 141.3, 141.2, 130.7, 129.6, 128.1, 126.5, 126.3, 123.4, 120.5, 119.8, 117.2, 74.3, 59.0, 18.9. (t, J = 6.4 Hz, 1 H), 4.33 (br. s, 1 H), 3.84 (d, J = 3.0 Hz, 1 H), 3.73 (dd, J = 3.0, 11.9 Hz, 1 H), 3.66 (dd, J = 3.0, 11.9 Hz, 1 H), 2.32 - 2.13 (m, 2 H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6, Ô ppm): 162.1, 150.0, 139.9, 138.9, 135.8, 130.0, 126.7, 124.9, 118.7, 116.6, 106.2, 87.8, 85.0, 70.2, 61.1, 31.0. MS (ESI) m/z: 371.0 [M+H]+, 741.3 [2M+H]+. Les sydnones de départ de formule II peuvent être préparées comme suit : Stade A : préparation d'acides aminés N-nitrosylés On ajoute goutte-à-goutte en 40 minutes une solution de 6,90g de NaNO2 dans 100 ml d'eau, à une suspension vigoureusement agitée d'aminoacide N-arylé (0,1 mol) dans 10% d'acide chlorhydrique aqueux (100 15 mL). Le mélange résultant a été agité à température ambiante sous azote pendant 14H. Le produit attendu a été récupéré par filtration, laver avec un peu de méthanol et a été séché pour produire le composé N-nitrosylé attendu. On a ainsi préparé l'acide 4-((carboxyméthyl)(nitroso)amino) benzoïque sous forme d'un solide blanc avec un rendement de 72 %. 20 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, Ô ppm): 8,08 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 7,76 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 4,81 (s, 2 H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6, Ô ppm): 167,0, 166,6, 144,5, 130,7, 129,3, 119,0, 46,2. On a également préparé l'acide 2-(nitroso(phényl)amino)acétique 25 sous forme d'un solide blanc avec un rendement de 89 %. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, Ô ppm): 7,62 (d, J= 7,9 Hz, 2 H), 7,54 (t, J= 7,9 Hz, 2 H), 7,43 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 4,76 (s, 2 H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6, Ô ppm): 167,2, 141,3, 129,5, 127,6, 119,9, 46,9. 30 Stade B : préparation de sydnones de formule II On a mélangé pendant 3H à 100° un mélange de 0,1 mol d'acide aminé N-nitrosylé et 100 mL d'anhydride acétique. La solution obtenue a été concentrée sur évaporateur rotatif. On a trituré le résidu avec 100 ml d'eau. Puis le précipité a été récupéré par filtration et recristallisé dans le méthanol pour obtenir le produit pur attendu. On a ainsi préparé le 3-(4-carboxyphény1)-1,2,3-oxadiazol-3-ium5-olate sous forme d'un solide blanc avec un rendement de 52 %. 1H NMR (400 MHz, DMF-d7, Ô ppm): 8,32 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 8,19 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 7,88 (s, 1 H) 13C NMR (100 MHz, DMF-d7, Ô ppm): 169,7, 167,1, 138,9, 135,7, 132,3, 123,1, 96,1. On a également préparé le 3-phény1-1,2,3-oxadiazol-3-ium-5-olate 10 sous forme d'un solide blanc avec un rendement de 55 %. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, Ô ppm): 7,94 (dd, J= 1,5, 8,1 Hz, 2 H), 7,78 (s, 1 H), 7,77 - 7,67 (m, 3 H) 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6, Ô ppm): 168,5, 132,4, 130,2, 126,6, 121,6, 94,9. 15 Préparation d'une sydnone de formule 11 portant un tripeptide : le 3-(4-((2-((1-((carboxyméthyl)amino)-3-(1H-indo1-3-y1)-1-oxopropan-2-yl) amino)- 2-oxoéthyl) carbamoyl)phény1)-1,2,3-oxadiazol-3-ium-5-olate. NH 0 0 Hu N'-N Hu N '-OH H 0 o 20 On a ajouté du N,N'-Dicyclohexylcarbodiimide (13 mg, 0,063 mmol) à une solution de 3-(4-carboxyphényl)sydnone (13 mg, 0,063 mmol) et de N-Hydroxysuccinimide (8,7 mg, 0,076 mmol) dans du diméthylformamide anhydre (1 mL) à 0°C. La solution résultante a été agitée à température ambiante pendant 24 H puis a été filtrée. Ensuite, on a ajouté au filtrat le 25 tripeptide H-Gly-Trp-Gly-OH (20 mg, 0.063 mmol) et la solution a été agitée à température ambiante pendant encore 16 H. le mélange a alors été concentré et le résidu a été purifié par chromatographie liquide haute performance semipréparative sur colonne Phenomenex Synergi Fusion-RP 21.2 x 150 mm, 5 ilm, pour produire 13 mg du produit attendu sous forme d'un solide blanc avec un 30 rendement de 41 %. 1H NMR (400 MHz, Methanol-d4, Ô ppm): 8,05 (d, J = 8,8 Hz, 2 H), 7,98 (d, J = 8,8 Hz, 2 H), 7,58 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,48 (s, 1 H), 7,28 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,14 (s, 1 H), 7,04 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 6,97 (t, J = 7,2 Hz, 1 H), 4,79 (dd, J = 5,5, 7,7 Hz, 1 H), 4,07 (d, J = 16,5 Hz, 1 H), 3,97 (d, J = 16,5 Hz, 1 H), 3,94 - 3,82 (m, 2 H), 3,36 (dd, J = 5,2, 14,7 Hz, 1 H), 3,17 (dd, J = 8,1, 14,8 Hz, 1 H). MS (ESI) m/z: 507,1 [M+H]+. Préparation d'une sydnone de formule II portant une protéine : la sérum albumine bovine (BSA) On a opéré comme ci-dessus, mais en utilisant la sérum albumine bovine au lieu du tripeptide pour obtenir le produit attendu, dans lequel la sérum albumine bovine porte 12 sydnones. REVENDICATIONS1. Un procédé de préparation d'un pyrazole de formule I R' R dans laquelle - R représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement thio ou -thioalkyle, un groupement hydroxy ou alkoxy, un groupement amino ou - aminoalkyle, un radical alkyl renfermant de 1 à 8 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec F, Cl, Br, I, CN, OH, NH2, NH- Alkyle C1-C8, N-(Alkyle C1-C8)2, SH, un radical aryl contenant 6 à 10 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec un radical alkyle ou alkoxy contenant 1 à 8 atomes de carbone, un hétérocycle, un acide aminé, un polypeptide, une protéine, un acide nucléique, une molécule d'ADN, un polysaccharide, un polymère, une nanoparticule, un dendrimère. - R' représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement thio ou -thioalkyle, un groupement hydroxy ou alkoxy, un groupement amino ou - aminoalkyle, un radical alkyl renfermant de 1 à 8 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec F, Cl, Br, I, CN, OH, NH2, NH-Alkyle C1-C8, N-(Alkyle C1-C8)2, SH, un radical aryl contenant 6 à 10 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec un radical alkyle ou alkoxy contenant 1 à 8 atomes de carbone, un hétérocycle, - R" représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement thio, un groupement hydroxy, un groupement amino, un groupement hydrocarboné ou un groupement hydrocarboné renfermant de 1 à 100 hétéroatomes, R" représentant particulièrement un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement thio ou -thioalkyle, un groupement hydroxy ou alkoxy, un groupement amino ou -aminoalkyle, un radical alkyl renfermant de 1 à 8 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec F, Cl, Br, I, CN, OH, -0-hétérocycle substitué ou non substitué, NH2, -NH-Alkyle C1-C8, -N- (Alkyle C1-C8)2, -NH-R"' ou - Alkyl C1-C3-NH-R"' où R"' représente un groupement sulfoné, SH, un radical aryl contenant 6 à 10 atomes de carbone quiest non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec un radical alkyle ou alkoxy contenant 1 à 8 atomes de carbone, un hétérocycle, un acide aminé, un polypeptide, une protéine, un acide nucléique, une molécule d'ADN, un polysaccharide, un polymère, une nanoparticule, un dendrimère, 5 caractérisé en ce que l'on fait réagir une sydnone de formule II R" R C) 0 Il dans laquelle R et R' ont les significations déjà indiquées, avec un alcyne de formule III R" III 10 dans laquelle R" a la signification déjà indiquée, en présence d'un métal catalyseur, pour obtenir un composé pyrazole de formule I que l'on isole et salifie si désiré. 2. Un procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que R 15 représente un radical aryl ou hétéroaryl, non substitué ou substitué. 3. Un procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que R' représente un atome d'hydrogène. 4. Un procédé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que R" représente un radical hétéroaryl ou un radical aryl ou un radical alkyl 20 renfermant de 1 à 8 atomes de carbone. 5. Un procédé selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que le métal catalyseur est choisi dans le groupe constitué par l'argent, l'or, le mercure, le cadmium, le zirconium, le ruthénium, le fer, le cobalt, le platine, le palladium, le nickel, le rhodium, le tungstène et le cuivre. 25 6. Un composé du pyrazole de formule I R' R I dans laquelle - R' représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement thio ou -thioalkyle, un groupement hydroxy ou alkoxy, un groupement amino ou -aminoalkyle, un radical alkyl renfermant de 1 à 8 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec F, Cl, Br, I, CN, OH, NH2, NH-Alkyle C1-C8, N-(Alkyle C1-C8)2, SH, un radical aryl contenant 6 à 10 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec un radical alkyle ou alkoxy contenant 1 à 8 atomes de carbone, un hétérocycle, - R" représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement thio, un groupement hydroxy, un groupement amino, un groupement hydrocarboné ou un groupement hydrocarboné renfermant de 1 à 100 hétéroatomes, R" représentant particulièrement un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement thio ou -thioalkyle, un groupement hydroxy ou alkoxy, un groupement amino ou -aminoalkyle, un radical alkyl renfermant de 1 à 8 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec F, Cl, Br, I, CN, OH, -0-hétérocycle substitué ou non substitué, NH2, -NH-Alkyle C1-C8, -N-(Alkyle C1-C8)2, -NH-R"' ou - Alkyl C1-C3-NH-R"' où R"' représente un groupement sulfoné, SH, un radical aryl contenant 6 à 10 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec un radical alkyle ou alkoxy contenant 1 à 8 atomes de carbone, un hétérocycle, un acide aminé, un polypeptide, une protéine, un acide nucléique, une molécule d'ADN, un polysaccharide, un polymère, une nanoparticule, un dendrimère, et - R représente un polypeptide, une protéine, un acide nucléique, de l'ADN, un polysaccharide, un polymère, une nanoparticule, un dendrimère. 7. Un composé du pyrazole selon la revendication 6 caractérisé en ce que R" a la fonction d'un fluorophore, d'un radiotraceur, d'un principe actif de thérapeutique humaine (médicament), d'une molécule capable d'interagir avec 25 une protéine ou de l'ADN. 8. Un composé du pyrazole de formule I R' dans laquelle - R représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement thio 30 ou -thioalkyle, un groupement hydroxy ou alkoxy, un groupement amino ou aminoalkyle, un radical alkyl renfermant de 1 à 8 atomes de carbone qui est nonsubstitué ou substitué une ou plusieurs fois avec F, Cl, Br, I, CN, OH, NH2, NH-Alkyle C1-C8, N-(Alkyle C1-C8)2, SH, un radical aryl contenant 6 à 10 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec un radical alkyle ou alkoxy contenant 1 à 8 atomes de carbone, un hétérocycle, un acide aminé, un polypeptide, une protéine, un acide nucléique, une molécule d'ADN, un polysaccharide, un polymère, une nanoparticule, un dendrimère. - R' représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement thio ou -thioalkyle, un groupement hydroxy ou alkoxy, un groupement amino ou - aminoalkyle, un radical alkyl renfermant de 1 à 8 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec F, Cl, Br, I, CN, OH, NH2, NH-Alkyle C1-C8, N-(Alkyle C1-C8)2, SH, un radical aryl contenant 6 à 10 atomes de carbone qui est non substitué ou substitué une ou plusieurs fois avec un radical alkyle ou alkoxy contenant 1 à 8 atomes de carbone, un hétérocycle, et - R" représente un polypeptide, une protéine, un acide nucléique, une molécule 15 d'ADN, un polysaccharide, un polymère, une nanoparticule, un dendrimère. 9. Un composé du pyrazole selon la revendication 8 caractérisé en ce que R a la fonction d'un fluorophore, d'un radiotraceur, d'un principe actif de thérapeutique humaine (médicament), d'une molécule capable d'interagir avec une protéine ou de l'ADN. 20 10. Utilisation d'un nouveaux composés du pyrazole tels que définis à l'une des revendications 6 à 9 ou préparé par le procédé tel que défini à l'une des revendications 1 à 5, dans la détection de protéines.