FR 2985664 A1 20130719 FR 1200160 A 20120118 - 1 - La présente invention se rapporte au domaine de la prophylaxie des mortalités hivernales et du syndrome d'effondrement des colonies (de la dénomination Anglaise CCD pour Colony Collapse Disorder) constatés sur les colonies d'abeilles du genre Apis. Par «abeille», on entend toutes races et sous espèces d'hyménoptère du genre Apis ; ce terme n'est pas limité uniquement à la forme adulte de l'insecte, mais englobe toutes les étapes du développement de l' abeille, y compris l'oeuf, la larve, et la nymphe. L'invention a pour objectif de maintenir la santé de la ruche hébergeant les abeilles et le couvain, en préservant la fonction normale de celle-ci, c'est à dire à terme, le renouvellement de sa population et la production de miel. La santé de la ruche est préservée lorsque la population constituée d'une colonie (sous entendu communauté d'abeilles mellifères et de son couvain), mais aussi, à titre individuel lorsque les abeilles, et les larves sont exempts de germes pathogènes ou d'acariens pouvant les contaminer. Toute agression pouvant déséquilibrer l'intégrité du système immunitaire de ses occupants peut faire émerger une prolifération de pathogènes produisant des affections graves responsables de pertes au sein de la colonie. Ainsi, l'importance de cette perte d'individus peut être une mesure du niveau d'infection pathogène agressant à la ruche. Les pertes hivernales correspondent à une mort de la colonie ou à un constat de « non-valeur » (colonies bourdonneuses, orphelines, faibles ou malades). Un faible pourcentage de pertes a toujours existé mais, depuis une vingtaine d'années, un rapport de L'ONU mentionne que celui-ci aurait régulièrement augmenté, et aurait été responsable, sur cette période, de la disparition de 2/3 des abeilles. Ces pertes ont été également constatées dans de nombreux autres pays (60% aux USA pour l'année 2007 et jusqu'à 90% dans certains états de l'est et du sud, 40% au Québec, 50% au Japon en 2008, 85% au Moyen-orient). Les pertes maximales en France ont été lors de l'hiver 2009/ 2010 d'une moyenne nationale d'environ 27% (sources ITSAP). Ces mortalités ont une répartition aléatoire sur territoire aussi bien dans les régions de monoculture intensive, qu'en zone de poly cultures traditionnelles, avec ou sans élevage, en plaine ou en montagne. Dans certains cas, le taux de mortalité varie de 5 à 80% d'un rucher d'hivernage à l'autre. Ces taux pouvant aussi être constatés dans différents ruchers d'un même apiculteur utilisant une technique d'élevage unique. C'est lors de la visite des ruchers au printemps que la mortalité hivernale est constatée et peut s'exprimer de diverses façons par : - l'absence totale d'abeille avec présence ou non de réserves. -2- 35 - la présence d'abeilles mortes dans ou devant l'entrée de la ruche, avec présence ou non de réserves. - la présence de réserve, mais avec un faible nombre d'abeilles, et une absence de couvain qui signent une stérilité de la reine en place qui n'assure plus le renouvellement des individus et voue la colonie à une mort certaine. 40 A ce jour, les étiologies de ces affections, qui ne font pas l'unanimité, seraient plurifactorielles. Parmi les diverses hypothèses avancées on trouve : -La présence de certains parasites tel que Acarapis woodi mais principalement « varroa destructor » qui, en plus de son action spoliatrice, jouerait un rôle de vecteur dans la 45 transmission et la diffusion d'autres agents pathogènes. -Le développement de parasites unicellulaires : Nosema apis et Nosema ceranae. -Le développement d'agents pathogènes bactériens responsables de l'apparition de loques américaine (Paenibacillus larvae) et européenne (Melissococcus pluton). Par « agent pathogène bactérien», on entend toute bactérie qui perturbe la santé ou la fonction 50 biologique normale d'une abeille ou d'une population d'abeille. - le développement d'éléments mycosiques : ascosphaerose - les maladies virales (une vingtaine de virus sont identifiés dont le CPV de la maladie noire, APV de la paralysie aiguë). -Les pollutions de l'environnement par l'utilisation de pesticides phytosanitaires, en 55 particulier des insecticides et fongicides utilisés en pulvérisation ou dans les semences enrobées tels que: Régent(fipronil) de BASF, Gaucho(imidaclopride) et Protéus(insecticide néonicotinique) de BAYER, Cruiser OSR(thiamétozam,fuidioxonil,métalaxyl-M) de SYNGENTA. En plus d'une toxicité directe, ces produits se concentrent dans la ruche particulièrement au niveau des cires. L'hypothèse avancée est que les pesticides accumulés 60 dans le corps des abeilles seraient responsables d'une faiblesse des processus de détoxification de l'organisme. - Une stérilité précoce de la reine dont l'origine serait due à des infections chroniques des ovarioles et des oviductes. - Une dégradation des conditions environnementales (pollutions industrielles et 65 électromagnétique) avec détérioration progressive de la biodiversité des fleurs à pollen et mellifères est observée depuis ces dernières décennies. - De mauvaises pratiques d'élevage de l'apiculteur (prélèvement maximal du miel contenu dans les cadres du corps de la ruche, perte de la diversité génétique). -3- 70 Actuellement, prenant en compte ces diverses étiologies qui seraient responsables des mortalités hivernales et du CCD, pour lequel les causes de cette dernière affection sont encore plus incertaines, l'homme de métier cherche à appliquer les bonnes pratiques dictées par ses organisations professionnelles. Il utilise, là où il peut agir, les traitements prophylactiques dont il dispose, comprenant, entre autre, l'utilisation de biocides tels qu'antibiotiques, 75 insecticides et antifongique. Ceux-ci peuvent avoir des effets néfastes sur les fonctions biologiques de l'abeille. Par «fonction biologique», on entend toute activité physiologique ou comportementale d'un organisme vivant. Les fonctions biologiques comprennent : la locomotion, l'activité neuronale, la reproduction, la respiration, mais aussi, de façon spécifique pour l'abeille la 80 production de miel. L'utilisation de tels biocides aboutit souvent au développement de résistances des souches pathogènes et à une contamination du miel. Par «biocide», on entend une substance qui ralentit, inhibe ou réduit la croissance, la multiplication et la durée de vie d'un agent pathogène. 85 De plus, aujourd'hui, concernant l'apiculture Française, la pharmacopée (recueil à caractère officiel et réglementaire des matières premières autorisées dans un pays pour la fabrication des médicaments) est très restrictive. Dans l'état actuel des connaissances, il n'est pas connu de traitement spécifique concernant le CCD et on constate qu'une utilisation prophylactique de biocides destinée aux agents 90 pathogènes spécifiques des abeilles ne peut empêcher l'émergence de ce syndrome. Le but de cette invention est de palier à ces carences thérapeutiques en fournissant une réponse adaptée contre un déséquilibre du système immunitaire de l'abeille, lui-même, responsable de l'émergence d'affections intercurrentes entraînant de la mort de la colonie. Cette perturbation immunologique paraît être, in fine, liée à une dénaturation de leur 95 alimentation et tout particulièrement des réserves nutritionnelles stockées dans la ruche. En effet, ces réserves d'automne, d'une douzaine de Kg par ruche, constituées de miel (glucide) et de pain d'abeille (protides et lipides) sont nécessaires pour un bon hivernage. Ce sont les protéines du pain d'abeille qui participent à l'élaboration et au bon fonctionnement du système immunitaire. L'absorption de pollen (riche de 16 à 40% de protéine) participe, entre 100 autre, au bon développement des glandes hypo pharyngiennes (et mandibulaires) des jeunes abeilles qui sécréteront, par la suite la gelée royale. Celle-ci, contenant les protéines du pollen en forte concentration sera distribuée, par les abeilles nourricières, aux larves d'ouvrières pendant 3 jours ainsi qu'à la future reine, durant toute sa phase larvaire(6 jours), mais aussi durant toute sa vie. -4- 105 Ce pain d'abeille est constitué de pollen qui va subir, pour être assimilable et être bien conservé, des modifications biochimiques. Avant leur sortie, le pollen, récolté par les butineuses est ensemencé à l'aide de bactéries qui ont été prélevées dans un lieu de conservation bien particulier de la ruche. De retour à la ruche, ce pollen ensemencé est mis à température, stocké puis tassé dans des alvéoles pour y 110 subir une fermentation lactique semblable à celle décrite pour la conservation de certains aliments ou des ensilages de végétaux (fermentation lactique anaérobie). L'absence ou l'inadaptation des micro-organismes nécessaires au processus de maturation du pollen pour l'obtention du pain d'abeille entraîne une altération de la qualité des protéines digestibles. Cette altération, génère alors un disfonctionnement du système immunitaire des abeilles (reine 115 comprise) qui provoque à son tour l'émergence d'affections responsables de morbidité et /ou de mortalité de la colonie. L'invention consiste à fournir à la colonie, à titre prophylactique, des micro-organismes qui assureront une bonne maturation et conservation des protéines des pollens (récoltés). Ces protéines alors de bonne qualité, composant la base de l'alimentation des larves et des adultes, 120 (et de la reine en particulier), permettront un bon développement, suivi d'un bon fonctionnement de leur système immunitaire garantissant alors une prévention efficace au développement des pathogènes. L'utilisation de cette invention réduirait de façon significative les traitements conventionnels administrés à titre curatifs ou prophylactiques responsables des effets 125 secondaires néfastes sur les abeilles (exemple : pertes du comportement hygiénique de l'abeille) et de l'accumulation de toxiques dans les diverses matrices dont les cires et les pollen. Ces objectifs sont atteints selon l'invention, en démontrant qu'une composition contenant des cellules d'au moins une souche de bactéries de la classe des Bacilli utilisée 130 seule ou comme additif alimentaire, permet de réduire de façon significative l'incidence des pertes hivernale et du CCD pour Apis mellifera Linnaeus. De préférence on utilise les cellules d'une souche de bactéries de la classe des bacilli pour la fabrication d'une composition qui comprend de 103 à 108 Unités Formant Colonies (UFC) de la dite bactérie de la classe des Bacilli par gramme de composition. 135 Par « Bacilli », on entend, selon l'invention, des bactéries décrites dans le manuel de Bergery, et appartenant à la classe III du phylum des Fimicutes (Taxonomie outline of the procaryotes, Bergey's Manuel of Systématic Bactériology, 2nd edition, july 2002. Plus spécifiquement, par « bacilli » on entend, selon l'invention, des bactéries du groupe bacillus-lactobacillus-streptococcus (Tax ID 91061, NCBI.) -5- 140 Sont préférées les bactéries des familles Bacillaceae, Lactobacillaceae, carnobacteriaceae, Enteroccaceae, Leuconostocaceae, et Streptococcacea. Préférentiellement , on peut utiliser les souches Bacillus subtilis ATCC 6051, Bacillus cereus ATCC 14579, Bacillus licheniformis ATCC14580, Lactobacillus rhamnosus ATCC 7469, Lactobacillus plantarum ATCC 14917, Lactobacillus casei ATCC 393, Lactobacillus 145 acidophilus ATCC 4356, Lactobacillus johnsonii ATCC 33200, Lactobacillus helvticus ATCC 15009, Lactobacillus bulgaricus ATCC 11842, Lactobacillus fructivorans ATCC 8288, Lactobacillus brevis ATCC 14869, Pediococcus acidilactici DSM 20284, Pediococcus pentosaceus ATCC 33316,Carnobacterium divergens ATCC 35677, Carnobacterium inhibens CCGU 31728, Enterococcus faecium ATCC 19434, Leuconostoc cremoris ATCC 19254, 150 Weissella hellenica ATCC 51523, Streptococcus thermophilus ATCC 19258, Lactococcus lactis ATCC 19435. Une composition probiotique prophylactique utilisée selon l'invention peut comprendre des cellules d'une seule souche de bactéries de la famille des Lactobacillaceae telles que définies ci-dessus, ou encore en association, plusieurs souches de ces bactéries. 155 Lorsque plusieurs souches de bactéries de la famille des Lactobacillaceae sont présentes en association dans une composition prophylactique, selon l'invention, elles sont combinées préférentiellement à 2, 3, 4, ou 5 souches distinctes, appartenant indifféremment aux genres Bacillus, Lactobacillus, Pediococcus, Carnobacterium, Enterococcus, Leuconostoc, Weissella, Streptococcu, Lactococcus. 160 Préférentiellement, pour la fabrication d'une composition prophylactique, selon l'invention, on utilise des cellules d'une souche de bactéries de la famille des lactobacillaceae choisie parmi lactobacillus rhamnosus CNCM MA 543/2B, ou lactobacillus plantarum CNCM M_A 18/5U ou bacillus subtilis R0179. De manière particulièrement préférée, on utilise une souche de pediococcus acidolactici, telle que la souche de pediococcus acidolactici déposée à la 165 collection Nationale de cultures de Microorganismes de l'Institut Pasteur, sous le numéro MA 18 5M. On peut également utiliser les souches Lactobacillus rhamnosus ATCC14893, Bacillus cereus NCIB 40112. La composition prophylactique, utilisée selon l'invention, est distribuée à la dose de 0,1g à 2g 170 par ruche (moitié dose pour une ruchette) et contient préférentiellement de 104 à 107 UFC (unités formant colonies) de ladite bactérie de la classe des bacilli, par gramme de la composition. L'invention a aussi pour projet un procédé d'administration de cellules de la ou des souche(s) de bactéries appartenant à la classe des bacilli aux abeilles de la ruche. Il a été -6- 175 préféré d'incorporer le probiotique, sous la forme d'additif alimentaire, à un apport glucidique de type sirop 1/1 (50/50), 2/1 (66/34), 3/1 (75/25) ou 9/1 (90) soit candi (sucre sous forme cristallisée). Une dilution appropriée de ces cellules dans de l'eau peut être réalisée, avant le mélange, pour favoriser une répartition plus homogène de cet additif dans les sirops de nourrissement. Le sirop additionné des bactéries de la classe des bacilli est versé dans un 180 nourrisseur couvre -cadres, cadre nourrisseur, ou nourrisseur d'entrée. L'homme du métier peut aussi utiliser l'un des sirops de nourissement proposés dans le commerce, celui-ci étant enrichi ou non en vitamines et /ou protéines tels que : « butiforce® », « sirop fortune HF 1575® », « abei-fondant® », « bee-pro® », « beecomplee», « royal-sirop », « fructoplus », « apistar® », « apiinvere » commercialisés par la société 185 ICKOWICZ S.A.S. « fondabee® », « invertbee® » commercialisés par la société SNT THOMAS S.A.S. L'invention a aussi pour projet un procédé d'administration de cellules de la ou des souche(s) de bactéries appartenant à la classe des bacilli aux abeilles de la ruche, par incorporation à d'autres substances formant alors un mélange. 190 L'invention a aussi pour projet un procédé d'administration de cellules, de la ou des souche(s) de bactéries appartenant à la classe des bacilli aux abeilles de la ruche, sous forme d'une dilution aqueuse en quantité adaptée, avec dépôt ou pulvérisation direct dans la ruche (par exemple au niveau des têtes des cadres de corps). L'invention a aussi pour projet un procédé d'administration de cellules de la ou des souche(s) 195 de bactéries appartenant à la classe des bacilli aux abeilles par incorporation, en quantité adaptée, à une substance sous forme solide, présenté en poudre (étui semi perméable) ou en bloc et par dépôt direct (de ceux-ci) dans la ruche (sur des têtes des cadres de corps), ou à l'extérieur de celle-ci (devant l'entrée sur la planche d'envol). Mais aussi sous un autre aspect, l'invention a aussi pour projet l'utilisation d'un dispositif 200 d'administration de cellules de la ou des souche(s) de bactéries appartenant à la classe des bacilli aux abeilles. Ce dispositif est choisi parmi un ensemble comprenant : bande (lanière), bande à libération contrôlée, bloc, réservoir, disque polymère, bloc polymère, système d'évaporation, fibre, tube, membrane, granulé, paquet, micro-capsule, étui semi perméable (type « sachet de thé »), microcapillarité. 205 Dans d'autres réalisations, l'invention prévoit des instructions qui incluent au moins l'un des éléments suivants: description (mention du type de) du probiotique ; posologie et administration pour la prévention des mortalités hivernales et (ou) du « CCD » ; précautions; péremption ; avertissements; description des études de recherche et / ou références. - 7 - Les instructions peuvent être imprimées directement sur le contenant, sur une étiquette 210 apposée sur le contenant, sur une feuille séparée, brochure, carte. Un dossier technique peut être fourni avec ou dans le contenant. Selon un autre aspect, l'homme du métier ajoutera à la dose voulue, à l'une de ces compositions commerciales, toutes autres substances dans la mesure où le mélange final ne forme pas un milieu hostile ou létal pour lesdites cellules de Bacilli. 215 Selon cet autre aspect, l'homme du métier ajoutera à l'aliment une dose contenant les dites cellules de Bacilli à une valeur de UFC connue, en quantité adaptée de manière à obtenir, pour cette administration, une composition de mélange final conforme au nombre de cellules nécessaires pour chaque ruche. En ce qui concerne les effets secondaires observés sur les abeilles suite à 220 l'administration de ce probiotique, Il n'a été constaté aucune mortalité ni de baisse d'activité aussi bien, pour les abeilles adultes, les oeufs, les larves ou les nymphes dans cas suivants : -suite à l'apport d'au moins une souche de bactéries de la classe des bacilli. - suite à l'apport de la dite bactérie de la classe des Bacilli qui contient de 104 à 107 unités formant les colonies (UFC) par gramme de composition à des doses comprises entre de 0,1g à 225 2 g par ruche. - suite à plusieurs administrations répétées jusqu'aux doses maximales par ruche à une fréquence de une à quelques semaines d'intervalle. Par ailleurs,il n'a pas été constaté d'action phagoinhibitrice à l'égard d'administration d'au moins une souche de bactéries de la classe des Bacilli aux divers dosages compris entre 0,1g 230 à 2g par ruche, mélangé à 2Kg sirop de sucre de composition 3/1 dans un nourrisseur couvre-cadres. Les délais de consommation de la totalité de ces mélanges par rapport à un même sirop de sucre sans additif sont identiques après les nourrissements des colonies. Dans d'autres versions, la technique permet des étapes ultérieures : -administration à la ruche un mélange test contenant l'additif afin de tester les fonctions 235 biologiques de l'abeille. -identification un mélange test contenant l'additif afin ne pas perturber pas les fonctions biologiques de l'abeille. -identification d'un mélange test contenant l'aditif afin de perturber les fonctions biologiques de l'abeille. 240 -identification d'un mélange test contenant l'aditif à dose létale pour l'abeille. Dans une version, selon l'invention, on met en oeuvre un procédé d'administration prophylactique de la mortalité hivernale des abeilles et du CCD caractérisé en ce qui concerne - 8 - une étape au cours de laquelle un apport de probiotique, tel qu'il est défini ci-dessus, est 245 distribué, en des quantités appropriées à chacune des ruches et à des périodes déterminées : De préférence, pour la prévention de la mortalité hivernale, l'invention consistera en ce que l'administration soit prescrite deux fois à trois ou quatre semaines d'intervalle en période d'automne de façon à ce que les abeilles destinées à passer l'hiver aient été nourries, à leur stade larvaire, par des nourricières ayant pu se nourrir elle-même, soit avec du pollen frais, 250 soit avec du pain d'abeille ayant maturé par adjonction des dites cellules, mais aussi, et surtout, que ces même abeilles d'hiver, dès leur naissance, puissent avoir à disposition, si les conditions climatiques sont défavorables, du pain d'abeilles adjuvés par les dites cellules. Dans le cas d'utilisation prophylactique du CCD, et après avoir éliminé les pathologies évidentes, l'invention consistera en ce qu'une administration soit prescrite chaque 3 mois. 255 Cependant, la décision d'intervention reviendra à l'homme de métier en fonction des constations des risques potentiels estimés sur son cheptel .Par exemples, l'apparition d'une période climatique défavorable (pluie sur plusieurs jours), peut interrompre une miellée et être préjudiciable au bon équilibre d'une colonie. Ainsi, les conditions de l'émergence de pathogènes deviennent maximales car les abeilles sont dans des conditions de promiscuité 260 importantes (ruche surpeuplée), avec de surcroit, des dépenses énergétiques accrues, dues aux activités de nourrissement d'un couvain conséquent, à la préparation du miel à partir du nectar ou du miellat récemment rentré, à la fabrication de la cire des alvéoles, et du travail de nettoyage. EXEMPLES : 265 L'invention, décrite ci-dessus, concernant l'apport en probiotique, aux colonies d'abeilles a été mise en évidence par des expérimentations effectuées en grandeur nature. Deux d'entre elles sont décrites dans les exemples suivants, sans pour autant être limitées à celles-ci. l' exemple sur un ensemble de 11 ruches mises en hivernage : Un apiculteur possède, respectivement sur 2 sites, 9 et 2 ruches numérotées de 1 à 11. 270 En automne, celles-ci ont toutes reçu, à deux reprises un sirop de nourrissement versé dans des nourrisseurs couvre-cadre en prévision de l'hivernage. Les complémentations ont été réalisées avec du BACTOCELL® commercialisé sous la marque Lallemand correspondant aux bactéries de la classe des Bacilli qui comprend de 104 à 107 unités formant les colonies (UFC), la bactérie choisie est la souche de pediococcus 275 acidolactici déposée à la Collection Nationale de cultures de Microorganismes de l'Institut Pasteur, sous le numéro MA 18 5M. - Le 21 octobre : - 9 - 4 des ruches à numéros impairs (1-3-5-et7) du premier site ont été complémentées chacune de 1,8g de Bactocell malaxé dans 2kg d'un sirop de sucre 3/1 (75/25). 280 Les 4 autres ruches à numéros pairs du premier site (2-4-6-8) ont reçu 2kg du même sirop de nourrissement, mais sans complémentation de Bactocell ®,. La dernière ruche N°9 du premier site n'a reçu qu'une demi dose (de 0,9g) de Bactocell ®. Quant aux 2 ruches de l'autre rucher (N° 10 et N°11), elles ont reçu 2kg du même sirop, et pour l'une d'elle (ruche N°11) un complément de 1,8g de Bactocell 285 -Le 3 novembre: Un contrôle de la consommation du sirop indique que tous les nourrisseurs ont été intégralement vidés par les abeilles sans distinction entre ceux contenant les sirops complémentés et non. Il a été pratiqué un nouveau nourrissement dans les mêmes conditions de quantité et de dosage : (cf voir protocole ci-dessus). 290 1 1 jours plus tard, un nouveau contrôle de la consommation de sirop indique que tous les nourrisseurs, ont encore été intégralement vidés, toujours sans distinction entre ceux contenant les sirops complémentés et non. Pour l'hivernage, les nourrisseurs ont été retirés sur l'ensemble des ruches. A la visite de printemps, en fin février, il a été constaté que: 295 -La seule ruche non complémentée du premier rucher est morte ; ce qui correspond à un taux de mortalité de 9% sur l'ensemble des ruches, alors que la moyenne nationale constatée sur cette même période a été de 28%. -La quasi-totalité des ruches ayant reçu le complément de BACTOCELL® présente une population d'abeilles plus importante avec un développement plus précoce du couvain par 300 rapport aux autres ruches de ces mêmes ruchers. -A partir de l'ensemble des ruches qui avaient été complémentées, un dédoublement a pu être réalisé à par la méthode de division, (avec un bon taux de réussite).En revanche, ce dédoublement n'a été possible que sur un nombre limité à partir des autres ruches. -Enfin, au printemps suivant, alors que les soins apportées aux ruches ont été identiques 305 pour chacune d'entre elles, la production des ruches complémentées a été égale ou supérieure (parfois doublée) par rapport aux autres ruches. La production de la totalité des 2 ruchers, sur un nombre comparable de colonies situées sur les mêmes emplacements a été presque doublée l'année qui a suivi la complémentation hivernale. 2ene exemple sur des ruches en mauvais état : 310 En début d'été, dans un rucher de 3 ruches, alors que les conditions climatiques ont été satisfaisantes, un apiculteur constate, une diminution d'activité et une perte importante de population sans qu'il puisse y associer une pathologie particulière. Deux ruches sur trois vont - 10 - alors être nourries avec un apport de la bactérie de la souche de pediococcus acidolactici déposée à la collection Nationale de cultures de Microorganismes de l'Institut Pasteur, sous le 315 numéro MA 18 5M. A la fin de l'été, la production des 2 ruches complémentées en BACTOCELL® a été acceptable, alors que la ruche non complémentée est morte. Les conclusions de ces expérimentations, concernant un apport de BACTOCELL® (bactéries de la classe des Bacilli), mettent en évidence plusieurs effets bénéfiques. Ceux-ci se traduisent principalement par une baisse significative du taux de la mortalité hivernale, un 320 rétablissement d'une colonie en mauvais état, et une meilleure productivité des ruches complémentées par un développement plus important du couvain et une augmentation du miel produit. En outre, selon l'invention l'apport de probiotique, grâce à la facilité de mise en oeuvre de la composition prophylactique, avec un coût réduit, se caractérise par une diminution 325 notoire des pertes. En conséquence, et en raison des répercussions économiques favorables, l'utilisation de ce probiotique dans le domaine apicole, proposée par l'invention, est susceptible d'application(s) commerciale(s) sous des formes de présentations adaptées à ce contexte. 330 335 340 345 REVENDICATIONS1- Utilisation de probiotique constitué de cellules vivantes d'au moins une souche de bactéries de la classe Bacilli pour la fabrication d'une préparation destinée à la prévention des mortalités hivernales et du CCD des abeilles apis mellifera linnaeus. 2- Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite composition comprend 103 à 108 unités formant colonies (cfu) de ladite bactérie de la classe des Bacilli, par gramme de composition. 3- Utilisation selon la revendication 2, caractérisée en ce que ladite composition comprend 104 à 107 unités formant colonies (cfu) de ladite bactérie de la classe des Bacilli, par gramme de composition. 4- Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que la ou les souche(s) de bactérie(s) de la classe de Bacilli est (sont) choisie(s) parmi les bactéries des familles lactobacillaceae, camobacteriaceae, entercoccaceae, leuconostocaceae et streptococcacea. 5- Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3 caractérisée en ce que la ou les souche(s ) de bactérie(s) de la classe de Bacilli est (sont) choisie(s) parmi les souches Bacillus subtilis, bacillus cereus, Bacillus licheniformis, Bacillus megaterium, Bacillus polymixa, Bacillus Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus helvticus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus fructivorans, Lactobacillus brevis, Pediococcus acidilactici, Pediococcus pentosaceus, Carnobacterium divergeas, Carnobacterium inhibens, Enterococcus faecium, Leuconostoc cremoris, Weissella hellenica,Streptococcus thermophilus, Lactococcus lactis . 6- Utilisation selon l'une des revendications là 5, caractérisée en ce que l'abeille est choisie parmi l'insecte de l'ordre des hyménoptères appartenant à l'espèce Apis mellifera linnaeus. 7- Utilisation selon l'une des revendications là 6, caractérisée en ce que ledit probiotique, est intégré ou non à un mélange formant une présentation constitué ou non d'un aliment de nourrissement pour abeilles. 8- Utilisation selon l'une des revendications là 7, caractérisée en ce que ledit probiotique, est associé à un ou plusieurs médicament(s). 9- Utilisation selon l'une des revendications là 8 caractérisée en ce que la quantité dudit 35 probiotique est apportée à la colonie correspond une dose de 0,1 à 2g par ruche. 10- Utilisation selon l'une des revendications là 9 caractérisée en ce que les doses apportées à la colonie sont administrées à des fréquences variables comprises entre 2 semaines et 3 mois d'intervalle. 40