FR 2878749 A1 20060609 FR 0412870 A 20041203 COMBINAISONS ANTITUMORALES CONTENANT UN AGENT INHIBITEUR DE VEGF ET DU 5FU OU UN DE SES DERIVES La présente invention concerne les combinaisons un inhibiteur de VEGF et un agent chimiotoxique de classe du 5 fluorouracile ou des 5 fluoropyrimidines utiles dans le traitement des maladies néoplastiques. Les inhibiteurs de VEGF qui sont des inhibiteurs du facteur de croissance vasculaire endothélial sont dans la majorité des cas des produits biologiques choisis parmi les récepteurs solubles, les antisens, les aptameères de RNA et les anticorps. Les dérivés des 5 fluoropyrimidines sont choisis parmi le 5 fluorouracile, la capecitabine ou la gemcitabine qui présentent des propriétés antitumorales et antileucémiques remarquables, ils sont particulièrement utiles dans le traitement des cancers de l'ovaire, du sein, du poumon ou du colon. La présente combinaison vise enparticulier le traitement du cancer du colon ou de l'estomac. La description et la préparation de l'inhibiteur du VEGF utilisé de préférence dans l'invention qui est une protéine chimère VEGF-Trap est décrite dans la demande de brevet W000/75319. Il y a plusieurs forme de réalisation de la protéine chimère. La forme de réalisation correspondant au VEGF-Trap est celle décrite à la figure 24 (séquence). Le VEGF Trap utilisé dans l'invention est une protéine de fusion comprenant la séquence signal du VEGFR1 fusionnée au domaine lg D2 du récepteur VEGFR1, elle même fusionnée au domaine lg D3 du récepteur VEGFR2 fusionnée à son tour au domaine Fc de IgGl encore appelée VEGFR1R2-FcACI ou le Fltl D2. F1k1 D3.FcAC 1. Généralement les doses utilisées, qui dépendent des facteurs propres au sujet à traiter, sont comprises entre 20 et 800 microgrammes par kilo quand l'administration est faite par voie sous cutanée et de 2 à 20 microgrammes par kilo quand l'administration est faite par voie intraveineuse ou éventuellement par voie intranasale à une dose inférieure de l'ordre de 0,01 picogramme à 1 mg par kilo. Le 5 fluorouracile est généralement utilisé par voie intraveineuse à une dose comprise entre 500 mg/m2 et 5000 mg/m2 par semaine en ce qui concerne les dérivés de 5 fluoropyrimidines tels que la capecitabine ils sont utillisés pour cette dernière généralement par voie orale à une dose comprise entre 500 et 3000 mg/m2 administrés généralement en deux doses journalières. La gemcitabine est utilisée généralement par voie intraveineuse à une dose comprise entre 500 et 2000 mg/m2 par semaine. Il a été décrit dans un article de H Hurwitz, L Fehrenbacher, W Novotny, T Cartwright, J Hainsworth, W Heim, J Berlin, A Baron, S Griffing, E Holmgren, N Ferrara, G Fyfe, B Rogers, R ross, F Kabbinavar paru dans The New England Journal of Medecine un essai clinique prouvant un meilleur taux de survie lors de l'utilisation de la combinaison de bevacizumab avec irinotecan, 5FU et leucoveurin par rapport à la même combinaison ne contenant pas le bevacizumab. Rien ne prouve dans cet essais clinique que l'amélioration du taux de sruvie provient de la combinaison de 5FU avec le bevacizumab, elle peut aussi bien provenir de la combinaison de l'irinotecan ou de la leucoverin avec le bevacizumab ou nepeut provenir que de la quatruple combinaison. Or comme il est connu que chacun des agents anticancéreux apporte à côté de son effet thérapeutique des effets secondaires toxiques il semble opportun de limiter au maximum leur présence surtout quand le même effet peut être obtenu en l'absence d'au moins l'un d'entre eux. Dans le cas présent il est connu que l'irinotecan entraîne des diarrhées importantes qui ont parfois imposé l'arrêt du traitement. D'autre part cet article ne prouve aucun effet synergique au sens de Corbett c'est à dire un effet non obtenable par chacun des élements de la combinaison utilisé seul à sa dose maximale tolérée. Il a maintenant été trouvé, et c'est ce qui fait l'objet de la présente invention, que l'efficacité des inhibiteurs de VEGF peut être considérablement améliorée lorsqu'ils sont administrés en association avec au moins une substance thérapeutiquement utile dans les traitements anticancéreux ayant un mécanisme d'action différent de celui des inhiteurs du VEGF. Par ailleurs, l'activité des produits dépendant des doses utilisées, il est possible d'utiliser des doses plus élevées et d'augmenter l'activité en diminuant les phénomènes de toxicité ou en retardant leur apparition en associant aux inhibiteurs de VEGF1, ou à leurs analogues d'autres substances thérapeutiquement actives des facteurs de croissance de type hématopoïétique tels que le G-CSF ou le GM- CSF ou certaines interleukines. Plus particulièrement, l'invention concerne les associations de VEGF Trap avec le 5 flurouracile ou ses dérivés tels que la capécitabine ou la gemcitabine. L'efficacité améliorée d'une combinaison selon l'invention peut être mise en évidence par la détermination du synergisme thérapeutique. Une combinaison manifeste un synergisme thérapeutique s'il est thérapeutiquement supérieur à l'un ou l'autre des constituants utilisé à sa dose optimale [T.H. CORBETT et coll., Cancer Treatment Reports, 66, 1187 (1982)]. Pour mettre en évidence l'efficacité d'une combinaison, il peut être nécessaire de comparer la dose maximale tolérée de la combinaison à la dose maximale tolérée de chacun des constituants isolés dans l'étude considérée. Cette efficacité peut être quantifiée, par exemple par le log10 des cellules tuées qui est déterminé selon la formule suivante: log10 des cellules tuées = T-C (jours)/3.32. Td dans laquelle T - C représente le délai de croissance des cellules qui est le temps moyen, en jours, pour que les tumeurs du groupe traité (T) et les tumeurs du groupe témoin (C) aient atteint une valeur prédéterminée (1 g par exemple) et Td représente le temps, en jours, nécessaire au doublement du volume de la tumeur chez les animaux témoins.[T.H. CORBETT et coll., Cancer, 40, 2660. 2680 (1977) ; F.M. SCHABEL et coll., Cancer Drug Development, Part B, Methods in Cancer Research, 17 3-51, New-York, Academic Press Inc. (1979)] Un produit est considéré comme actif si log10 des cellules tuées est supérieur ou égal à 0,7. Un produit est considéré comme très actif si log10 des cellules tuées est supérieur à 2,8. La combinaison, utilisée à sa dose maximale tolérée propre, dans laquelle chacun des constituants sera présent à une dose généralement inférieure ou égale à sa dose maximale tolérée, manifestera une synergie thérapeutique lorsque le log10 des cellules tuées sera supérieur à la valeur du log10 des cellules tuées du meilleur constituant lorsqu'il est administré seul. L'efficacité des combinaisons sur les tumeurs solides peut être déterminée expérimentalement de la manière suivante: Les animaux soumis à l'expérience, généralement des souris, sont greffés bilatéralement par voie sous-cutanée avec 30 à 60 mg d'un fragment de tumeur mammaire MC 13/C au jour 0. Les animaux portant les tumeurs sont mélangés avant d'être soumis aux divers traitements et contrôles. Dans le cas de traitement de tumeurs avancées, on laisse les tumeurs se développer jusqu'à la taille désirée, les animaux ayant des tumeurs insuffisamment développées étant éliminés. Les animaux sélectionnés sont répartis au hasard pour subir les traitements et les contrôles. Des animaux non porteurs de tumeurs peuvent être également soumis aux mêmes traitements que les animaux porteurs afin de pouvoir dissocier l'effet toxique de l'effet propre sur la tumeur. La chimiothérapie commence généralement de 3 à 22 jours après le greffage selon le type de tumeur et les animaux sont observés tous les jours. Les différents groupes d'animaux sont pesés trois ou quatre fois par semaine jusqu'à ce que la perte maximale de poids soit atteinte puis les groupes sont pesés au moins une fois par semaine jusqu'à la fin de l'essai. Les tumeurs sont mesurées deux ou trois fois par semaine jusqu'à ce que la tumeur atteigne environ 2 g ou jusqu'à la mort de l'animal si celle-ci survient avant que la tumeur atteigne 2 g. Les animaux sont autopsiés lors du sacrifice. L'activité antitumorale est déterminée en fonction des différents paramètres enregistrés. Pour l'étude des combinaisons sur des leucémies, les animaux sont greffés avec un nombre déterminé de cellules et l'activité antitumorale est déterminée par l'augmentation du temps de survie des souris traitées par rapport aux témoins. Un produit est considéré comme actif si le temps d'augmentation de survie est supérieur à 27 % et il est considéré comme très actif s'il est supérieur à 75 % dans le cas de la leucémie P388. A titre d'exemples, sont donnés, dans les tableaux suivants les résultats obtenus avec des combinaisons du VEGF Trap et du fluorouracile utilisées à leur dose optimale. La présente invention concerne également les compositions pharmaceutiques contenant les combinaisons selon l'invention. Les produits qui constituent la combinaison peuvent être administrés simultanément, séparément ou d'une manière étalée dans le temps de façon à obtenir le maximum d'efficacité de la combinaison chaque administration pouvant avoir une durée variable allant d'une administration totale rapide à une perfusion continue. Il en résulte que, au sens de la présente invention, les combinaisons ne sont pas uniquement limitées à celles qui sont obtenues par association physique des constituants, mais aussi à celles qui permettent une administration séparée qui peut être simultanée ou étalée dans le temps. Les compositions selon l'invention sont de préférence les compositions administrables par voie parentérale. Cependant, ces compositions peuvent être administrées par voie orale et/ou par voie orale. Les compositions pour administration parentérale sont généralement des solutions ou des suspensions stériles phanmaceutiquement acceptables qui peuvent éventuellement être préparées extemporanément au moment de l'emploi. Pour la préparation de solutions ou de suspensions non aqueuses peuvent être utilisées des huiles végétales naturelles telles que l'huile d'olive, l'huile de sésame ou l'huile de paraffine ou les esters organiques injectables tels que l'oléate d'éthyle. Les solutions stériles aqueuses peuvent être constituées d'une solution du produit dans l'eau. Les solutions aqueuses conviennent pour l'administration intraveineuse dans la mesure où le pH est convenablement ajusté et où l'isotonicité est réalisée, par exemple par une quantité suffisante de chlorure de sodium ou de glucose. La stérilisation peut être réalisée par chauffage ou par tout autre moyen qui n'altère pas la composition. Les combinaisons peuvent aussi se présenter sous forme de liposomes ou sous forme d'association avec des supports tels que les cyclodextrines ou les polyéthylèneglycols. Dans les combinaisons selon l'invention dont l'application des constituants peut être simultanée, séparée ou étalée dans le temps, il est particulièrement avantageux que la quantité de dérivé du VEGF Trap représente de 2 à 80% en poids de la combinaison cette teneur pouvant varier en fonction de la nature de la substance associée, de l'efficacité recherchée et de la nature du cancer à traiter. Les combinaisons selon l'invention sont particulièrement utiles dans le traitement des cancers du colon et/ou de l'estomac. En particulier, elles peuvent présenter l'avantage de pouvoir mettre en oeuvre les constituants à des doses nettement plus faibles que celles auxquelles ils sont utlilisés seuls. L'exemple suivant illustre une comlbinaison selon l'invention. EXEMPLE On prépare selon la technique habituelle, pour l'administration sous cutanée, des ampoules de 1 cm3 contenant 25 mg de VEGF Trap qui sont diluées dans un tampon phosphate. On prépare selon la technique habütuelle, pour l'administration intraveineuse 02ml par souris à partir d'une solution commerciale de 5 cm3 contenant 250 mg de 5 FU à diluer avec du glucose 5 %. Ces solutions sont administrées simultanément, après dilution convenable, par perfusion. Le traitement peut être répété plusieurs fois par jour ou par semaine jusqu'à une rémission partielle ou totale ou une guérison. Dosage en mg/kg/jour Mort due % perte T/C T-C lck au poids au (total dose in mg/kg) sc VEGF- iv 5-FU traitement nadir % jours trap (jour 4, 11, (jour 4, 7, 18) 11, 14, 18, 21) (240) - 0/5 2.3 4 12.7 1.4 (150) - 0/5 1.1 8 13.9 1.5 (60) - 0/5 1.1 9 12.1 1.3 2.5 (15) - 0/5 0.9 32 5.2 0.6 (435) 1/5 8.7 Toxic - - - 90 (270) 0/5 4.8 0 12.5 1.3 - 55.8 (167.4) 0/5 1.1 12 7.8 0.8 - 34.6 (103.8) 0/5 + 2.3 34 4.6 0.5 (240) 90 (270) 0/5 8.0 0 25.2 2.7 (150) 90 (270) 0/5 9.6 0 24.8 2.7 (60) 90 (270) 0/5 7.4 0 23.1 2.5 (60) 55.8 (167.4) 0/5 4.4 0 16.5 1.8 (60) 34.6 (103.8) 0/5 5.4 1 20.0 2.2 2.5 (15) 90 (270) 0/5 7.0 0 20.4 2.2 2.5 (15) 55.8 (167.4) 0/5 2.0 0 18.0 1.9 2.5 (15) 34.6 (103.8) 0/5 2.0 6 11.7 1.3 BCM-1428 (05/28/04 07.30.2004): temps de doublement de la tumeur = 2.8 jours. Temps moyen pour 750 mg sur controles = 22.2 j. Durée de traitement = 18 j pour VEGF-trap et combination, et 15 days pour 5-FU. Abbreviations utilisées: T/C = inhibition de la croissance de la tumeur au jour 24, (T-C) ecart de croissance de la tumeur, lck = log cell tuéesl. REVENDICATIONS 1 - Combinaisons contenant un inhibiteur de VEGF avec au moins du fluorouracile ou un dérivé de 5 fluoropyrimidine thérapeutiquement utile dans le traitement des maladies néoplastiques. 2 - Combinaisons contenant un inhibiteur de VEGF avec le fluorouracile ou la capecitabine ou la gemcitabine. 3 - Combinaisons selon la revendication 2 contenant un inhibiteur de VEGF avec le fluorouracile. 4 - Combinaisons selon la revendication 3 contenant un inhibieur de VEGF 10 Trap avec le fluorouracile - Combinaisons selon l'une des revendications 1 à 4 caractérisées en ce qu'elles contiennent en outre des facteurs de croissance de type hématopoïétiques. 6 - Combinaisons selon l'une des revendications 1 à 5 caractérisées en ce qu'elles contiennent de 2 à 80 % en poids de VEGF Trap. 7 - Produits contenant un inhibiteur de VEGF et au moins une substance thérapeutiquement utile telle que définie dans l'une des revendications 1 à 5 dans le traitement des maladies néoplastiques comme préparation combinée pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie anticancéreuse. 8 Combinaisons contenant un inhibiteur de VEGF avec au moins du flurorouracile ou un dérivé de 5 fluoropyrimidine à l'exclusion de tout autre dérivé chimiotoxique présentant un effet thérapeutiquement synergique dans le traitement des maladies néoplastiques.