FR 2876911 A1 20060428 FR 0411201 A 20041021 2876911 1 La présente invention concerne des complexes de piroxicam, de cyclodextrine et d'arginine, de tels complexes présentant une solubilité considérablement accrue, et leur procédé d'obtention par la technologie des fluides denses sous pression, en particulier celle du CO2. Les nouvelles molécules pharmaceutiques, à forte valeur ajoutée, sont dans 40% des cas insolubles ou peu solubles dans l'eau, ce qui nuit à leur biodisponibilité. L'augmentation de la surface spécifique des poudres permet d'améliorer leur vitesse de dissolution. Or la biodisponibilité de principes actifs peut être considérablement augmentée si leur vitesse de dissolution est améliorée. La présente invention concerne un complexe comprenant du piroxicam, une cyclodextrine et de l'arginine caractérisé en ce que le taux de solubilisation du piroxicam contenue dans une solution à 4 g/1 dans l'eau, mesuré à 37 C après entre 5 et 120 minutes d'agitation est supérieure à 90%, avantageusement supérieure à 95%, de façon avantageuse égale à 99%. Par cyclodextrines , on entend au sens de la présente invention les cyclodextrines, les cyclodextrines modifiées et leurs mélanges. De façon avantageuse, il s'agit de la (3-cyclodextrine, de la méthyle-(3- 2876911 2 cyclodextrine, de la y-cyclodextrine ou de l'hydroxypropyl-(3cyclodextrine. Avantageusement, il s'agit de la j3-cyclodextrine. Dans le cadre de la présente invention, on entend par taux de solubilisation le pourcentage de piroxicam solubilisé après 5 à 120 minutes d'agitation à 37 C d'un mélange d'eau et de piroxicam. On utilisera usuellement pour mesurer ce taux un mélange à 4g/1 de piroxicam dans l'eau. Cette solubilisation peut être mesurée par un test de solubilisation tel qu'indiqué ci-dessous. TEST DE SOLUBILISATION DU PIROXICAM. 15 Protocole opératoire Le dosage du Piroxicam dans la solution de dissolution est réalisé par HPLC Appareillage utilisé Système HPLC WATERS: - Module de séparation 2695, Détecteur UV 2487. Conditions chromatographiques: Colonne: WATERS X-Terra MS C18 250x4,6 mm. Phase mobile: Voie A % Tampon pH=3.5 KH2PO4 6,81 g/1 ajusté au pH avec 30 H3PO4 dilué R, % acétonitrile. 2876911 3 Débit: 1 ml / min Longueur d'onde détecteur: 230 nm Sensibilité du détecteur: 2 AUFS Volume injecté : 20 l Température du four: 40 C Temps d'analyse: 12 minutes Préparation des solutions témoins: Solution témoin: SM: Introduire 50 Piroxicam témoin dans une fiole de 100 ml. Gamme: Ti: Dilution au 1/20ème de T3 dans 40 acétonitrile / 60 eau. Dilution au 1/10ème de T3 dans 40 acétonitrile / 60 T2: eau. 60 T3: Dilution au 1/100ème de SM dans 40 acétonitrile / eau. Dilution au 1/50ème de SM dans 40 acétonitrile / 60 T4: eau. Dilution au 1/20ème de SM dans 40 acétonitrile / 60 T5: eau. Conditions opératoires des cinétiques de dissolution à 4 g/L: Réalisation de l'essai: 30 Conditions opératoires: mg de Dissoudre avec 20 ml de diméthylformamide et compléter au volume avec du méthanol. 20 Dans un erlen-meyer de 100 ml, introduire une prise d'essai équivalente à 200 mg de Piroxicam. Ajouter 50 ml d'eau. Mettre sous agitation magnétique à 400 tours par minutes, dans un bain thermostaté à 37 C +/- 2 C. Effectuer un prélèvement de 2 ml sous agitation magnétique à 5, 30, 60, 120 minutes. Filtrer les prélèvements sur filtre polypropylène 0,45 m Gelman GHP Acrodisc. La solution doit être limpide. Diluer le prélèvement au 1/200eme dans la phase mobile. Méthodologie, expression des résultats: Injecter 20 l de chaque solution témoin. Effectuer une régression linéaire des surfaces des pics 15 de Piroxicam par rapport aux concentrations. Le coefficient de corrélation doit être supérieur à 0,995. Injecter 20 l des solutions à examiner. Mesurer l'aire du pic de Piroxicam dans chaque solution 20 à examiner. En déduire la concentration X en g/ml d'après la droite de régression des témoins. Calculer la concentration en g par ml de Piroxicam solubilisé en multipliant par l'inverse de la dilution 25 réalisée (i.e. : 200). Le taux de solubilisation du piroxicam est calculé en divisant la concentration de piroxicam solubilisé par la concentration de piroxicam totale de la solution de départ. 2876911 5 Les complexes piroxicam, cyclodextrine et l'arginine selon la présente invention sont susceptibles d'être obtenus par le procédé tel que décrit ci-après. Un procédé de préparation d'un complexe selon la présente invention comprend les étapes successives suivantes a) mise en contact du piroxicam avec une cyclodextrine et l'arginine, b) mise en oeuvre d'une étape de diffusion moléculaire par mise en contact, en mode statique, d'un fluide dense sous pression avec le mélange obtenue à l'étape (a) en présence d'un ou plusieurs agents de diffusion, c) récupération du complexe piroxicam-cyclodextrine- arginine ainsi formé. L'étape (b) de diffusion moléculaire en mode statique appelée étape de maturation, consiste essentiellement en une phase de diffusion moléculaire en milieu dense sous pression, et notamment supercritique, permettant d'inclure le piroxicam dans les cyclodextrines. L'objectif recherché au cours de cette phase de diffusion est de former des complexes d'inclusion entre le piroxicam, la cyclodextrine et l'arginine. Le complexe ainsi formé associe de manière non-covalente le piroxicam, la cyclodextrine et l'arginine. L' arginine qui sert d'agent d'interaction interagit selon deux hypothèses plausibles: interactions fortes avec le piroxicam inclus dans la cyclodextrine et/ou interactions fortes avec le complexe formé. 2876911 6 La présence de l'arginine permet d'améliorer principalement les propriétés de dissolution du complexe dans les liquides biologiques, et notamment l'eau et éventuellement d'augmenter le taux d'inclusion du piroxicam dans la cyclodextrine. L'amélioration des propriétés physico-chimiques, notamment en terme de dissolution du système formé peut avoir pour origine - Une interaction non covalente de l'arginine avec le 10 piroxicam, la cyclodextrine ou les deux (complexation, salification...). - Une variation locale du pH du milieu de dissolution - L'obtention d'un système présentant un eutectique - Une modification de l'interface entre le système et son milieu de dissolution (effet surfactant, changement granulométrie). Par fluide dense sous pression , on entend au sens de la présente invention tout fluide utilisé à une température ou une pression supérieure à leur valeur critique. Avantageusement il s'agit du CO2 pur ou en mélange avec un solvant organique classiquement utilisé par l'homme du métier. Par agent de diffusion , on entend au sens de la présente invention n'importe quel solvant favorisant une interaction du piroxicam et des cyclodextrines. Avantageusement, cet agent de diffusion est choisi dans le groupe constitué par les alcools, les cétones, les éthers, les esters et l'eau avec ou sans agent surfactant et leurs mélanges. De façon encore plus avantageuse, il s'agit de l'eau. 2876911 7 Par mode statique on entend au sens de la présente invention une réaction ou un procédé dans lequel tous les réactifs sont mis simultanément en présence et où on laisse la réaction se dérouler. Par exemple, dans l'étape (b) de la présente invention, on met dans un autoclave le piroxicam, l'eau, l'arginine et du CO2 supercritique et on laisse réagir pendant plusieurs heures. La masse de produit n'évolue pas durant la réaction. A l'inverse, en mode dynamique, les réactifs sont apportés au fur et à mesure de l'évolution de la réaction ou de la production. Souvent dans le cadre d'un mode dynamique, il y a circulation d'un fluide. La masse de produit évolue durant la production. De façon avantageuse, l'étape (b) de diffusion moléculaire du procédé selon la présente invention est réalisée sous agitation. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, lors de l'étape (a) le piroxicam, l'arginine et les cyclodextrines sont introduits sous forme solide ou liquide dans un récipient dans lequel est injecté le fluide dense sous pression et l'agent de diffusion dans des proportions judicieusement choisies. Les conditions de pression et de température ainsi que la durée du traitement sont définies, par toute méthode appropriée. La ratio molaire piroxicam/cyclodextrine/arginine pourra être choisi de manière à assurer la meilleure inclusion du piroxicam au sein des cyclodextrines. Ainsi avantageusement le ratio molaire piroxicam/cyclodextrine 2876911 8 est compris entre 1/1 et 1/10, avantageusement entre 1/1 et 1/5, de façon avantageuse 1/2,5. De même avantageusement le ratio molaire piroxicam/arginine est compris entre 1/1 et 1/3, avantageusement 1/1. L'agent de diffusion peut être ajouté en continu ou en discontinu dans une quantité comprise entre 1 et 50% en masse par rapport à la masse totale du mélange, avantageusement entre 20 et 25% en masse par rapport à la masse totale du mélange. Le temps nécessaire à la diffusion moléculaire de l'étape (b) est déterminé par toute méthode appropriée. Cette étape (b) peut être réitérée autant de fois que souhaitée pour obtenir une vitesse de dissolution satisfaisante. Avantageusement, l'étape (b) dure entre environ 2 et 16 heures, avantageusement 1 heure. Les conditions de pression et de température de l'étape (b) sont choisies de façon à favoriser la diffusion moléculaire. Avantageusement la pression du fluide supercritique est comprise entre 5 MPa et 40 MPa, avantageusement 15MPa et la température entre 0 et 120 C, avantageusement 100 C. Avantageusement l'étape (b) du procédé selon la présente invention est mise en oeuvre dans un réacteur fermé, en particulier un autoclave. Le procédé peut être mis en oeuvre en batch ou en continu. De façon avantageuse le procédé selon la présente invention est réalisé en batch. 2876911 9 Avantageusement, l'étape (b) du procédé est mis en oeuvre dans un réacteur fermé éventuellement agité, alimenté par le fluide dense et le piroxicam et le cas échant, en continu. La mise en oeuvre de l'étape de diffusion moléculaire en milieu dense sous pression en présence d'un agent de diffusion permet une forte interaction des particules de piroxicam avec les cyclodextrines, ce qui favorise la dissolution en milieu aqueux. La présente invention concerne en outre une composition pharmaceutique comprenant un complexe selon la présente invention, et éventuellement un excipient pharmaceutiquement acceptable. La présente invention concerne également un complexe selon la présente invention ou une composition pharmaceutique selon la présente invention en tant que médicament, avantageusement ayant une action anti-inflammatoire et avantageusement destiné à traiter les des rhumatismes inflammatoires, la polyarthrite, l'arthrose, les tendinites ou les affections posttraumatiques de l'appareil locomoteur. L'exemple suivant, donné à titre indicatif a été réalisé avec le piroxicam, la béta cyclodextrine a été utilisée, l'eau comme agent de diffusion et l'arginine comme agent d'interaction. 2876911 10 Exemple 1: complexes Piroxicam, P-cyclodextrine, arginine 43 gramme de piroxicam, 384 gramme de (3-cyclodextrine et 25 gramme d'arginine sont introduits dans un réacteur, ainsi que 61 grammes d'agent de diffusion (eau). Le dioxyde de carbone est par la suite introduit dans le réacteur sous une pression de 15 MPa et sous une température de 100 C. L'ensemble est maintenu dans ces conditions opératoires pendant une durée d'une heure. Sur les complexes obtenus, sont mesurés la cinétique de dissolution et le taux de solubilisation comme indiqué ci-dessus dans le TEST DE SOLUBILISATION DU PIROXICAM . Les résultats sont rassemblés dans le Tableau 1 ci-après. Temps Concentration en Taux de (minutes) piroxicam ( g/m1) solubilisation (%) 3863 96,6 3854 96,4 3941 98,5 3962 99 É 2876911 REVENDICATIONS 1. Complexe comprenant du piroxicam, une cyclodextrine et l'arginine caractérisé en ce que le taux de solubilisation du piroxicam contenue dans une solution à 4 g/1 dans l'eau, mesuré à 37 C après entre 5 et 120 minutes d'agitation est supérieure à 90%, avantageusement supérieure à 95%, de façon avantageuse égale à 99%. 2. Complexe selon la revendication 1 caractérisé en ce que la cyclodextrine est une béta-cyclodextrine. 3. Procédé de préparation d'un complexe selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2 caractérisé en ce qu'il comprend les étapes successives suivantes: a) mise en contact du piroxicam avec une cyclodextrine et l'arginine, b) mise en oeuvre d'une étape de diffusion moléculaire par mise en contact, en mode statique, d'un fluide dense sous pression avec le mélange obtenue à l'étape (a) en présence d'un ou plusieurs agents de diffusion, c) récupération du complexe piroxicamcyclodextrinearginine ainsi formé. 4. Procédé selon la revendication 3 caractérisé en ce 30 que le fluide dense sous pression est le dioxyde de carbone. 2876911 12 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 3 ou 4 caractérisé en ce que l'agent de diffusion est choisi dans le groupe constitué par les alcools, les cétones, les éthers, les esters et l'eau avec ou sans agent surfactant et leurs mélanges, avantageusement de l'eau. 6. Procédé selon l'une quelconque des revendications 3 à caractérisé en ce que l'étape (b) de diffusion 10 moléculaire est réalisée avec agitation. 7. Procédé selon l'une quelconque des revendications 3 à 6 caractérisé en ce que l'agent de diffusion est ajouté en continu ou en discontinu dans une quantité comprise entre 1 et 50% en masse par rapport à la masse totale du mélange, de préférence entre 10 et 25% en masse par rapport à la masse totale du mélange. 8. Composition pharmaceutique comprenant un complexe selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2, et éventuellement un excipient pharmaceutiquement acceptable. 9. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2 ou composition pharmaceutique selon la revendication 8 en tant que médicament, avantageusement ayant une action anti-inflammatoire et avantageusement destiné à traiter les des rhumatismes inflammatoires, la polyarthrite, l'arthrose, les tendinites ou les affections posttraumatiques de l'appareil locomoteur.