FR 2871803 A1 20051223 FR 0406707 A 20040621 PARTICULES POLYMERES STIMULABLES PRESENTANT DES FONCTIONS REACTIVES, LEUR PROCEDE D'OBTENTION, ET LEURS UTILISATIONS --------------------------------------------------------------------------------------------------------- La présente invention a pour objet des particules polymères, et plus particulièrement des nanoparticules polymères, stimulables présentant des fonctions réactives, notamment de type acide, amine, alcool, ou chlorure d'acide, en périphérie, ainsi que leur procédé de synthèse en une étape, et leurs utilisations. Des polymères stimulables présentant des fonctions réactives obtenues par encapsulation ou adsorption des principes actifs directement dans le matériau ou dans des billes elles mêmes adsorbées ou greffées sur le matériau, ont déjà été décrits. Toutefois, l'adsorption ne permet pas une libération contrôlée du principe actif. Quant à l'encapsulation, si elle peut permettre une libération contrôlée du principe actif, elle est en revanche incompatible avec une utilisation prolongée et/ou lorsque le matériau est soumis à de fortes contraintes (flux, frottement...). Des nanoparticules polymères réactives obtenues par greffage covalent de principes actifs sur la nanoparticule fonctionnalisée ont également déjà été décrites. Cependant, la synthèse de telles nanoparticules se fait en deux étapes (synthèse du latex puis réaction avec le principe actif) et donc sans contrôle direct du greffage (nombre de fonctions introduites aléatoire). Par ailleurs ces nanoparticules ne possèdent pas conjointement le principe actif et des sites d'ancrages permettant une libération en un endroit spécifique du principe actif. Ces matériaux sont le plus souvent destinés à la vectorisation ou aux tests immunologiques. La présente invention a pour but de fournir de nouvelles particules polymères, comportant une fonction réactive, le cas échéant engagée dans une liaison avec un principe actif, ou une molécule biologique telle qu'une protéine, ladite fonction réactive étant liée de façon covalente auxdits polymères, ces derniers étant obtenus en une seule étape. L'invention concerne des particules sphériques d'un diamètre compris entre 10 mn et 100 m, lesdites particules étant constituées par des chaînes polymère contenant environ 30 à 10000 unités monomères, identiques ou différentes, dérivées de la polymérisation d'alcènes monocycliques dont le nombre d'atomes de carbone constitutifs du cycle est d'environ 4 à 12, ou d'alcènes polycycliques dont le nombre total d'atomes de carbone constitutifs des cycles est d'environ 6 à 20, l'une au moins desdites unités monomères étant substituée par une chaîne R comprenant un polyoxyde d'éthylène de formule (A) le cas échéant lié de façon covalente auxdites unités monomères via un pont hydrolysable -(CH2-CH2-O) n -X (A) dans laquelle n représente un nombre entier d'environ 50 à 340, notamment de 70 à 200, et X représente une chaîne alkyle ou alkyloxy d'environ 1 à 10 atomes de carbone, comprenant une fonction réactive du type OH, halogène, NH2, C(0)Xl dans laquelle XI représente un atome d'hydrogène, d'halogène, un groupe OR' ou NHR' dans lequel R' représente un atome d'hydrogène ou une chaîne hydrocarbonée d'environ 1 à 10 atomes de carbone, substituée ou non, ou X représente un groupe comprenant une fonction photosensible telle que les polyènes, ladite fonction réactive étant le cas échéant engagée dans une liaison avec un principe actif, ou une molécule biologique telle qu'une protéine, ladite chaîne R étant liée de façon covalente audit monomère. L'invention a plus particulièrement pour objet des particules sphériques telles que définies ci-dessus, caractérisées en ce que les unités monomères sont dérivées de la polymérisation d'alcènes monocycliques, et sont de formule (Z1) suivante =[CH-RI-CH]= (Zl) dans laquelle RI représente une chaîne hydrocarbonée de 2 à 10 atomes de carbone, saturée ou non, lesdites unités monomères étant le cas échéant substituées par une chaîne R, ou directement par un groupe X, tels que définis ci-dessus. L'invention concerne plus particulièrement des particules sphériques telles que définies ci-dessus, caractérisées en ce que les alcènes monocycliques dont sont issues les unités monomères sont: - le cyclobutène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de 30 formule (Z1a) suivante: Zla - le cyclopentène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z lb) suivante: Zlb - le cyclopentadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Zlc) suivante Z1c - le cyclohexène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z l d) suivante Zld - le cyclohexadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z l e) suivante Zle - le cycloheptène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (ZIf) suivante Zlf 2871803 4 - le cyclooctène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Zlh) suivante Zlh - le cyclooctapolyène, notamment le cycloocta-1,5-diene conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Zli) suivante O Zli - le cyclononène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Zlj) suivante Zlj - le cyclononadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Zlk) suivante Zlk - le cyclodécène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z11) suivante Z11 - le cyclodéca-1,5-diène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Zlm) suivante Zlm le cyclododécène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Zin) suivante Zln - ou encore l'acétate du 2,3,4,5-tétrahydrooxepin-2-yl, le cyclopentadécène, le paracyclophane, le ferrocenophane. L'invention concerne également des particules sphériques telles que définies ci-dessus, caractérisées en ce que les unités monomères sont dérivées de la polymérisation d'alcènes polycycliques, et sont: - de formule (Z2) suivante =[CH-R2-CH]= (Z2) dans laquelle R2 représente: * un cycle de formule a Y( \Y2 dans laquelle: Y représente -CH2-, ou un hétéroatome, ou un groupe -CHR-, ou un 15 groupe -CHX-, R et X étant tels que définis ci-dessus, Y1 et Y2, indépendamment l'un de l'autre, représentent H, ou une chaîne R, ou un groupe X susmentionnés, ou forment en association avec les atomes de carbone qui les portent un cycle de 4 à 8 atomes de carbone, ce cycle étant le cas échéant substitué par une chaîne R, ou un groupe X susmentionnés, 20. a représente une simple ou double liaison, * ou un cycle de formule dans laquelle: Y' représente -CH2-, ou un hétéroatome, ou un groupe -CHR-, ou un groupe -CHX-, R et X étant tels que définis ci-dessus, Y'l et Y'2, indépendamment l'un de l'autre, représentent -CH2-, ou un groupe -C(0), ou un groupe -COR, ou un groupe - C-0X, R et X étant tels que définis 30 ci-dessus, - de formule (Z3) suivante dans laquelle R3 représente: * un cycle de formule / \I 1) 1 \ Y2) n2 dans laquelle: n1 et n2, indépendamment l'un de l'autre, représentent 0 ou 1, Y" représente -CH2-, ou un groupe -CHR-, ou un groupe -CHX-, R et X étant tels que définis ci-dessus, Y" l et Y"2, indépendamment l'un de l'autre, représentent une chaîne hydrocarbonée de 0 à 10 atomes de carbone, * ou un cycle de formule a dans laquelle Y" et Y"a, indépendamment l'un de l'autre, représentent -CH2-, ou un groupe -CHR-, ou un groupe -CHX-, R et X étant tels que définis ci-dessus. É ou un cycle de formule (Z3) "a dans laquelle Y" et Y"a, indépendamment l'un de l'autre, représentent - CH2-, ou un groupe -CHR-, ou un groupe -CHX-, R et X étant tels que définis ci-dessus. L'invention a plus particulièrement pour objet des particules sphériques telles que définies ci-dessus, caractérisées en ce que les alcènes polycycliques dont sont issues les unités monomères sont: - les monomères contenant un cycle cyclobutène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2a) suivante: (Z2a) - les monomères contenant un cycle cyclopentène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2b) suivante: O O O (Z2b) - le norbornène (bicyclo[2.2.1]hept-2-ène) conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2c) suivante: (Z2c) - le norbornadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2d) suivante: (Z2d) - le 7-oxanorbornène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2e) suivante: O (Z2e) - le 7-oxanorbornadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2f) suivante: O (Z2f) - le dimère du norbornadiène conduisant à un polymère comprenant des unités 20 monomères de formule (Z3a) suivante: (Z3 a) - le dicyclopentadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3b) suivante: (Z3b) le tetracyclododécadiene conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3c) suivante: (Z3c) - ou le bicyclo[5.1.0]oct-2-ène, le bicyclo[6.1.0]non-4-ène. L'invention concerne plus particulièrement des particules sphériques préférées telles que définies ci-dessus, caractérisées en ce que les alcènes mono ou polycycliques dont sont issues les unités monomères sont: - le norbornène (bicyclo[2.2.1]hept-2-ène) conduisant à un polymère comprenant des 5 unités monomères de formule (Z2c), - le tetracyclododécadiene conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3c), - le dicyclopentadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3b), - le dimère du norbornadiène conduisant à un polymère comprenant des unités. monomères de formule (Z3a), - le cycloocta-1,5-diene conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z1 i). Avantageusement, les particules sphériques telles que définies ci-dessus, sont 15 caractérisées en ce que au moins 0,5 % jusqu'à 100% des unités monomères sont substituées par une chaîne R telle que définie ci-dessus. L'invention a plus particulièrement pour objet des particules sphériques telles que définies ci-dessus, caractérisées en ce qu'elles comprennent: entre environ 0,5 % et 99,5 % d'unités monomères substituées par une chaîne R 20 telle que définie ci-dessus, ladite chaîne R étant identique pour ces monomères, - et entre environ 0,5 % et 99,5 % d'unités monomères substituées par une chaîne R telle que définie ci-dessus, ladite chaîne R de ces monomères étant différente de la chaîne R des monomères précédents, - et/ou entre environ 0,5 % et 99,5 % d'unités monomères substituées directement 25 par un groupe X tel que défini ci-dessus, ce groupe X de ces monomères étant identique ou différent du groupe X de la chaîne R des monomères précédents, - et/ou entre environ 0,5 % et 99,5 % d'unités monomères non substituées, le total des pourcentages des différents monomères susmentionnés faisant 100 %. L'invention concerne plus particulièrement des particules sphériques telles que définies ci-dessus, caractérisées en ce que la ou les chaînes R substituant les monomères sont représentées par la formule - CH2-O-(CH2-CH2-O) ,,-CH2-CH2-O-X dans laquelle n est tel que défini ci- dessus, et X représente H, -CH2-COOH, -CH2-COC1, -CH2-COY, Y représentant un principe actif, ou une molécule biologique telle qu'une protéine. L'invention concerne également des particules sphériques telles que définies ci- dessus caractérisées en ce que la ou les chaînes R comprennent un polyoxyde d'éthylène de formule (A) lié de façon covalente auxdites unités monomères via un pont hydrolysable. De telles particules sphériques sont particulièrement avantageuses dans la mesure où elles permettent une libération contrôlée de principes actifs stables ou pas in vivo. Suivant cette stratégie la libération du principe actif, emprisonné à l'intérieure de la particule donc isolé du milieu extérieure lié de manière covalente à celle-ci, se fait par une première étape de déstabilisation desdites particules par rupture des liaisons entre les unités monomères et les chaînes R via un stimuli extérieur (tel que pH, hyperthermie...), ce qui entraîne un relargage des chaînes R stabilisantes. Les chaînes résultantes, R ou Z1, fonctionnalisées ou non par le principe actif, subissent dans un deuxième temps des réactions d'hydrolyses et libèrent le principe actif. De préférence les ponts hydrolysables susmentionnés sont choisis parmi les enchaînements d'environ 1 à 10 motifs d'c-caprolactone, ou de fonctions OC(0)-, -C(0)OC(0)-, -C(0)-NH-... A ce titre, l'invention a plus particulièrement pour objet des particules sphériques telles que définies ci-dessus, caractérisées en ce que la ou les chaînes R comprenant un polyoxyde d'éthylène de formule (A) lié de façon covalente à un pont hydrolysable choisi parmi les enchaînements d'environ 1 à 10 motifs d's-caprolactone, sont représentées par la formule -CH2-(O-CO-(CH2)5)t-O-CO-(CH2)s-O-CO-(CH2)2-CO-0-(CH2-CH2-O) -(CH2)2-O-X dans laquelle t représente un nombre entier compris entre 1 et 10, et X représente H, -CH2-COOH, -CH2-COC1, ou -CH2-COY, Y représentant un principe actif, ou une molécule biologique telle qu'une protéine. L'invention concerne également des particules sphériques telles que définies ci- dessus, caractérisées en ce que le principe actif est choisi parmi les molécules utilisées en thérapeutique, cosmétique, parfumerie, ou pour les revêtements de surface, tels que les peintures et les antifoulings. L'invention a plus particulièrement pour objet des particules sphériques telles que définies ci-dessus, caractérisées en ce que le principe actif est un médicament utilisé en thérapeutique choisi notamment parmi ceux des classes thérapeutiques suivantes: les anti-inflammatoires, notamment l'indométacine, les anti-cancéreux, les antibiotiques, les anticoagulants, ou les antimitotiques. L'invention concerne plus particulièrement des particules sphériques telles que 5 définies ci-dessus, caractérisées en ce que la molécule biologique est choisie parmi les protéines susceptibles de se lier à une cible biologique intra ou extracellulaire, ou à des anticorps, ou à tout autre ligand spécifique. L'invention a plus particulièrement pour objet des particules sphériques telles que définies ci-dessus, caractérisées en ce que la molécule biologique est choisie parmi les protéines suivantes: l'avidine, l'albumine, les facteurs de croissance tel que le VEGF. L'invention concerne également des compositions pharmaceutiques comprenant des particules sphériques telles que définies ci-dessus, dans lesquelles le ou les différents groupes X contiennent un principe actif médicamenteux, le cas échéant en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable, notamment pour une utilisation sous forme parentérale. L'invention a également pour objet des compositions cosmétiques comprenant des particules sphériques telles que définies ci-dessus, dans lesquelles le ou les différents groupes X contiennent un principe actif utilisé en cosmétique, le cas échéant en association avec un véhicule approprié, notamment pour une application sous forme d'émulsions, crèmes. L'invention concerne également des compositions de revêtement de surfaces comprenant des particules sphériques telles que définies ci-dessus, dans lesquelles le ou les différents groupes X contiennent un principe actif utilisé pour les revêtements de surfaces, le cas échéant en association avec un véhicule approprié. L'invention a également pour objet un procédé de préparation de particules sphériques telles que définies ci-dessus, caractérisé en ce qu'il comprend une étape de polymérisation d'un alcène mono ou polycyclique tel que défini ci-dessus substitué par une chaîne R telle que définie ci-dessus, le cas échéant en présence: - d'un ou plusieurs alcènes mono ou polycycliques tels que définis ci- dessus, identiques ou différents du précédent, et substitués par une chaîne R telle que définie ci-dessus, ladite chaîne R étant différente de celle substituant l'alcène mono ou polycyclique susmentionné, - et/ou d'un ou plusieurs alcènes mono ou polycycliques tels que définis ci-dessus, identiques ou différents du précédent, et substitués par un groupe X tel que défini ci- dessus, ce groupe X étant identique ou différent du groupe X de la chaîne R des alcènes précédents, - et/ou d'un ou plusieurs alcènes mono ou polycycliques tels que définis ci-dessus, identiques ou différents des précédents, lesdits alcènes n'étant pas substitués, ladite polymérisation étant effectuée sous agitation en présence d'un complexe de métal de transition en tant qu'amorceur de la réaction choisi notamment parmi ceux des groupes IV ou VI ou VIII, tel que le ruthénium, l'osmium, le molybdène, le tungstène, l'iridium, le titane, en milieu polaire ou apolaire, notamment à l'aide des complexes à base de ruthénium suivants: RuC13i RuC12(PCy3)2CHPh. L'invention concerne également des alcènes mono ou polycycliques, caractérisés en ce qu'ils sont substitués par une chaîne R, ou un groupe X, tels que défmis ci-dessus. Des alcènes mono ou polycycliques tels que définis ci-dessus préférés sont choisis parmi ceux mentionnés ci-dessus. L'invention a plus particulièrement pour objet des alcènes mono ou polycycliques 15 tels que définis ci-dessus, caractérisés par les formules suivantes: O OH n dans laquelle n représente un nombre entier compris entre environ 50 et 340, o ci o n dans laquelle n représente un nombre entier compris entre environ 50 et 340, cl dans laquelle n représente un nombre entier compris entre environ 50 et 340, ci /OH dans laquelle n représente un nombre entier compris entre environ 50 et 340, ci O (CH2)5 O t z)5 OH dans laquelle t représente un nombre entier compris entre 1 et 10, O 0 O CH3 dans laquelle t représente un nombre entier compris entre 1 et 10, et n représente un nombre entier compris entre environ 50 et 340. L'invention a également pour objet l'utilisation d'alcènes mono ou polycycliques tels que définis ci-dessus, pour la mise en oeuvre d'un procédé de préparation de particules sphériques définies ci-dessus, notamment selon le procédé décrit ci-dessus. L'invention sera davantage illustrée à l'aide de la description détaillée qui suit de l'obtention de particules sphériques de l'invention, et de leurs caractéristiques physicochimiques. A) synthèse des macromonomères de formules A et B ci-après Les macromonomères (A et B) sont des oligomères de poly(oxyde d'éthylène) de 7000 g/mol de masse molaire (Mn). Ils sont issus d'une polymérisation anionique vivante' ce qui permet de contrôler la longueur et la fonctionnalité des chaînes. Ils sont fonctionnalisés à l'une de leur extrémité par une unité norbornényle, entité choisie pour sa réactivité élevée en polymérisation par métathèse et, à l'autre extrémité par une fonction réactive de type alcool, acide, amine...(A), ou par le principe actif (indométacine) (B) via un pont clivable (anhydride d'acide, ester, amide, .)...DTD: 1. a-norbornenyl-a-carboxylic acid-poly(ethylene oxide) ; formule A Formule chimique: o o O \/ OH O n avec n compris entre 50 et 340 en fonction des besoins de l'application envisagée. Référence: NB-POE-COOH. Schéma de synthèse: CH2OH (C6H5)2CHK THF, 25 C /^ \v/oH1) THF, NaH 2) H+ O MeOH CH2O'K+ m 0 AO A Procédure de synthèse: Le 5-norbornène-2-méthanol (0,5 mL) en solution dans le tétrahydrofurane (THF) (200mL) est tout d'abord déprotonné par l'ajout d'un équivalent molaire de diphénylméthyl potassium. L'espèce résultante va ensuite amorcer la polymérisation de l'oxyde d'éthylène (28 mL) de manière vivante (48h) jusqu'à la destruction des centres actifs par l'ajout de méthanol (lmL). La fonction alcool du poly(oxyde d'éthylène) obtenu (A0) va alors être transformée en fonction acide par déprotonnation de A0 (10g) avec NaH (0,17 g) en solution dans le THF (15mL), suivi de l'ajout d'acide bromoacétique (0,42g). Après lavage du produit à l'acide chlorhydrique (18 mL, 1M) puis précipitation dans l'éther, le macromonomère A est obtenu sous une forme pure. 2. a-norbornenyl-co-indométacine poly(ethylene oxide) ; formule B Formule chimique: cl o. n avec n compris entre 70 et 200 en fonction des besoins de l'application envisagée. Référence NB-POE-CO(0)-IND. Schéma de synthèse: 0 0 ci) Ici >-THF, D o,\ o A 0 n A2 ci Et3N A2 o cl indométacine t3 Procédure de synthèse: La fonction acide du NB-POE-COOH (A) est transformée en chlorure d'acide (A2) par réaction de A (5,2g) sur le chlorure d'oxalyl (0,08 mL) dans le THF (25mL) en présence d'une quantité catalytique de diméthylformamide pendant 24h. L'indométacine (0,6g) ainsi que la triéthylamine (0,24mL) sont alors additionnés à la solution de A2 et laisser sous agitation pendant 15h. Après précipitation dans l'éther, le macromonomère B est obtenu. 3. Dérivé indométacine du norbornène Le monomère utilisé dans les réactions précédentes est le norbornène (NBH), ou le norbornène fonctionnalisé (NBD) par le principe actif. Celui-ci est alors introduit via un pont hydrolysable de type ester, anhydride, amide La synthèse du norbornène fonctionnalisé par l'indométacine est décrite ci-après. Formule chimique: cl Référence: NBD. Schéma de synthèse: et et 0 0 iindodométacine CH2Cl2 + 1 --- OH CH2Cl2 ci Synthèse du monomère NBD Lors d'une réaction type, le chlorure d'oxalyle (0,87mL) est additionné à l'indométacine (1,1g) en solution dans le dichlorométhane (20mL). Après 2 heures de réaction et élimination du chlorure d'oxalyle non réagi, le composé 1 obtenu est ensuite ajouté à une solution de 5-norbornène-2-méthanol (0,36 mL) dans du dichlorométhane (20mL) en présence de triéthylamine (0, 84mL) et laissé sous agitation pendant 15h à 45 C. Après purification par extraction, le monomère NBD est obtenu (p>95%). B. Synthèse des particules 15 Les particules de l'invention sont obtenues par copolymérisation en milieu dispersé (émulsion, mini- et microémulsion, dispersion, suspension) de monomères vinyliques (cyclo-oléfines) avec des macromonomères a,a -fonctionnalisés par une entité polymérisable et une fonction réactive ou un principe actif (médicaments, molécules organiques...). La polymérisation est amorcée par des métaux de transition et peut se faire en milieu aqueux ou organique (dichlorométhane/éthanol). Les macromonomères jouent le rôle de stabilisant et d'agent de fonctionnalisation. En tant que stabilisants ils permettent, lors de la formation du polymère dans le milieu réactionnel, de le disperser sous forme de nanoparticules sphériques. Purement stérique la stabilisation est insensible à toute variation de pH du milieu. Par ailleurs, la fonctionnalisation du latex par l'intermédiaire de macromonomère améliore la disponibilité des fonctions réactives à la surface du latex et préserve leur réactivité. L'amorceur de la polymérisation est un complexe à base de ruthénium stable en milieu polaire: RuC13, RuC12(PCy3)2CHPh et leurs homologues. Le latex synthétisé dans ces conditions sera constitué de chaînes de polyalcénamère porteuses de greffons poly(oxyde d'éthylène) qui serviront à stabiliser les particules. Les particules obtenues sont stables en milieu aqueux ou /et organique. Leur taille est comprise entre quelques nanomètres et quelques micrométres en fonction du procédé de polymérisation (dispersion, suspension, mini-émulsion...) utilisé. Les nanoparticules sont sphériques et de très bonne isométrie. Schéma de synthèse: + z PEO X (A) PEO 0 (B) (NBR) Amorceur eau ou CH,CI, EtOH nanoparticule R = H, D X=COOH, OH, COOCI, NH, Procédure de synthèse: D=principe actif (Indométacine...) Les macromonomères A et B sont copolymérisés en présence de monomère (NBH et/ou NBD). Dans une réaction type, 0,8g de monomère et 1g de macromonomère (0,2g de A et 0,8g de B) préalablement dissous dans 14ml d'un mélange dichlorométhane/éthanol (35%/65%) sont ajoutés sous azote et sous vive agitation à 10m1 de dichlorométhane/éthanol (50%50%) contenant 20mg d'amorceur. La durée de la polymérisation est de une heure. Le milieu totalement homogène au départ devient de plus en plus turbide au fur et à mesure que la polymérisation a lieu. Le suivi des polymérisations, par chromatographie gazeuse, a révélé des conversions des monomères totales en moins de une minute. L'incorporation des macromonomères A et B dans le latex est totale. C. VARIANTE POUR LE TRANSPORT DE PRINCIPE ACTIF SENSIBLE. Le latex est réalisé comme précédemment par copolymérisation entre une cyclooléfine (le norbornène) porteuse d'un principe actif (Indométacine) ou pas et le stabilisant polymère (NB-PCL-POE-OMe). Ce dernier fonctionnalisé ou pas par une fonction réactive de type acide, chlorure d'acide, alcool, amine (même fonction que précédemment) possède un pont hydrolysable, notamment des motifs d'c-caprolactone (PCL) entre la fonction polymérisable et la chaîne de polyoxyde d'éthylène selon le schéma ci-après. PCL-POE-OMe -- Médicament Suivant cette stratégie la libération du principe actif, emprisonné à l'intérieur de la particule et lié de manière covalente à celle-ci (Figure 13), nécessite une première étape de déstabilisation du latex. Celle-ci peut être réalisée via un stimuli extérieure (pH, hyperthermie...) par relargage des chaînes stabilisantes. Les chaînes linéaires de polyalcénamères résultantes fonctionnalisées par le principe actif subissent dans un deuxième temps des réactions d'hydrolyses et libèrent 30 le principe actif (Figure 14). 1) Procédure pour la synthèse copolymère poly(caprolactone-3-éthylène glycol)-a-norbornène-c)-méthyléther NB-PCL-POE-OMe h 1 (Cy,P) ,C1,Ru=C11Ph @7 c PCL-POE-OMe Médicament 2871803 22 Préparation du poly(caprolactone) a-norbornènyle (NB-Pcapro) A une solution de 2- hydroxyméthyl-5-norbornène (1,3.10-2 mole) dans le toluène (100 mL) refroidie à -80 C est ajouté le triéthylaluminium (1,3.10-2 mole) goutte à goutte. Après un retour progressif à température ambiante, la réaction est poursuivie pendant 2,5 heures. La caprolactone (3,9 mole) est ensuite additionnée au milieu réactionnel sous agitation vigoureuse. Après 18 heures de réaction, 50 mL d'acide chlorhydrique (0,1 N) sont ajoutés. Après un lavage à neutralité, le poly(ecaprolactone)-a-norbornènyle est précipité à froid dans l'heptane puis filtré sur fritté n 4. Les traces d'heptane seront éliminés par un chauffage (40 C) sous vide pendant 10 heures. Le polymère obtenu est ensuite lyophilisé 3 fois avec du dioxane en tant que solvant. Préparation du poly(éthylène glycol)-a-acide carboxylique-co-méthyléther Solubiliser 3,89.10-3 mole d'anhydride succinique et 4.10-3 mole de triéthylamine dans 45 mL d'acétone anhydre. Ajouter sous agitation et goutte à goutte une solution de poly(éthylène glycol) monométhyléther (6. 104 mole) dans 15 mL de CH2C12 anhydre. Après 16 heures de réaction, additionner 1 mL de méthanol. Après concentration à l'évaporateur rotatif, précipiter le polymère dans l'éther éthylique. Recommencer 2 autres fois les étapes de dissolution/précipitation. Placer le polymère sous vide dynamique pendant 10 heures pour éliminer toutes traces de solvant. Préparation du copolymère poly(caprolactone-b-éthylène glycol)-a-norbornèneco-méthyléther (NB-Pcapro-PEG-OMe) Solubiliser 4.10-4 mole de poly(éthylène glycol)-a-acide carboxylique-co- méthyléther dans 40 mL de CH2C12 anhydre. Ajouter à cette solution refroidie à 5 C le chlorure d'oxalyle (8.104 mole). Après 15 heures de réaction, enlever l'excès de chlorure d'oxalyle non réagi ainsi que le CH2C12 sous pression réduite. Le résidu jaune obtenu est ensuite redissous dans 40 mL de dichlorométhane. Après avoir additionné la triéthylamine (4,3.104 mole), ajouter goutte à goutte et sous agitation le poly(caprolactone) a-norbornènyle. Après concentration à l'évaporateur rotatif, précipiter le polymère dans l'éther éthylique. Recommencer 2 autres fois les étapes de dissolution/précipitation. Placer le polymère sous pression réduite pendant 10 heures pour éliminer toutes traces de solvant. 2871803 23 La synthèse du poly(e-caprolactone)a-norbornényle est effectuée selon le schéma suivant: OH + AIEt3 Toluène, 25 C, 2.5 h OAIEtz o Toluène, 25 C, 10 h (2) La synthèse du poly(c-caprolactone-b-éthylène glycol)-a-norbornène-cométhyléther est effectuée selon le schéma suivant: of H3C' \ n Acétone / CH2Cl2 l'OH n (1) OH o CI cl et H3C' (1) (2) n o CH2Cl2 (2) + (CH2)5 O H CH2Cl2 TEA O O)Ç(CHz)i) 01Î(CH2)5 CH x-1 0 n 3 2) Libération du principe actif Une fois la particule synthétisée, nous avons vérifié par spectrométrie UV-Visible la possibilité de libérer le médicament par simple abaissement du pH. Les résultats obtenus ont permis de confirmer une libération progressive et contrôlée de l'indométacine. Par ailleurs, l'application d'un pH égal à 3 a révélé que plus de 85% de celui-ci pouvait être relargué en 48h Légendes des figures - Figure 1: Spectre RMN 1H du macromonomère de formule A. - Figure 2: Spectre RMN 13C du macromonomère de formule A. - Figure 3:Chromatographie d'exclusion stérique du macromonomère de formule A dans le THF. - Figure 4: Spectre RMN 1H du macromonomère de formule B. Figure 5:Chromatographie d'exclusion stérique du macromonomère de formule B dans le THF. - Figure 6: Spectre RMN 1H du composé NBD. - Figure 7: Spectre RMN 13C du composé NBD. - Figure 8: Etude de la conversion en NB et en NB-POE-CO(0)-IND pendant la réaction de polymérisation. Evolution de la conversion en norbornène (É, NB) et du macromonomère (0, NB-POE-CO(0)-IND) en fonction du temps. - Figure 9: Cliché de Microscopie électronique à Balayage de particules sphériques obtenues par copolymérisation des macromonomères A et B en présence des 20 monomères NBH et/ou NBD. - Figure 10: Cliché de Microscopie électronique à Transmission de particules sphériques obtenues par copolymérisation des macromonomères A et B en présence des monomères NBH et/ou NBD. - Figure 11: Taille et distribution en taille des particules sphériques obtenues par 25 copolymérisation des macromonomères A et B en présence des monomères NBH et/ou NBD, par diffusion dynamique de la lumière. - Figure 12:Chromatographie d'exclusion stérique des particules sphériques obtenues par copolymérisation des macromonomères A et B en présence des monomères NBH et/ou NBD dans le THF. - Figure 13: Représentation d'une particule sphérique selon l'invention dans laquelle le principe actif est emprisonné à l'intérieur de la particule et lié de manière covalente à celle-ci. - Figure 14: Illustration de la déstabilisation d'une particule sphérique selon l'invention (ou latex) et relargage du médicament. REVENDICATIONS 1. Particules sphériques d'un diamètre compris entre 10nm et 1001.tm, lesdites particules étant constituées par des chaînes polymère contenant environ 30 à 10000 unités monomères, identiques ou différentes, dérivées de la polymérisation d'alcènes monocycliques dont le nombre d'atomes de carbone constitutifs du cycle est d'environ 4 à 12, ou d'alcènes polycycliques dont le nombre total d'atomes de carbone constitutifs des cycles est d'environ 6 à 20, l'une au moins desdites unités monomères étant substituée par une chaîne R comprenant un polyoxyde d'éthylène de formule (A) le cas échéant lié de façon covalente auxdites unités monomères via un pont hydrolysable -(CH2-CH2-O) n-X (A) dans laquelle n représente un nombre entier d'environ 50 à 340, notamment de 70 à 200, et X représente une chaîne alkyle ou alkyloxy d'environ 1 à 10 atomes de carbone, comprenant une fonction réactive du type OH, halogène, NH2, C(0)Xl dans laquelle XI représente un atome d'hydrogène, d'halogène, un groupe OR' ou NHR' dans lequel R' représente un atome d'hydrogène ou une chaîne hydrocarbonée d'environ 1 à 10 atomes de carbone, substituée ou non, ou X représente un groupe comprenant une fonction photosensible telle que les polyènes, ladite fonction réactive étant le cas échéant engagée dans une liaison avec un principe actif, ou une molécule biologique telle qu'une protéine, ladite chaîne R étant liée de façon covalente auxdites unités monomères. 2. Particules sphériques selon la revendication 1, caractérisées en ce que les unités monomères sont dérivées de la polymérisation d'alcènes monocycliques, et sont de formule (Z1) suivante =[CH-RI-CH]= (Z1) dans laquelle RI représente une chaîne hydrocarbonée de 2 à 10 atomes de carbone, saturée ou non, lesdites unités monomères étant le cas échéant substituées par une chaîne R, ou directement par un groupe X, tels que définis dans la revendication 1. 3. Particules sphériques selon la revendication 1 ou 2, caractérisées en ce que les alcènes monocycliques dont sont issues les unités monomères sont: - le cyclobutène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de 5 formule (Z 1 a) suivante: Zla - le cyclopentène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de 10 formule (Z lb) suivante: Zlb - le cyclopentadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de 15 formule (Z 1 c) suivante Z1c - le cyclohexène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de 20 formule (Z l d) suivante Z1d - le cyclohexadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z le) suivante Zle - le cycloheptène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Zlf) suivante Zlf - le cyclooctène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Zlh) suivante Zlh - le cyclooctapolyène, notamment le cycloocta-1,5-diene conduisant à un polymère 20 comprenant des unités monomères de formule (Zli) suivante O Zli 2871803 28 - le cyclononène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Zlj) suivante Zlj - le cyclononadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z1k) suivante Zlk - le cyclodécène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z11) suivante Z11 - le cyclodéca-1,5-diène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères 20 de formule (Z lm) suivante Zlm - le cyclododécène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de 5 formule (Zln) suivante Zln ou encore l'acétate du 2,3,4,5tétrahydrooxepin-2-yl, le cyclopentadécène, le 10 paracyclophane, le ferrocenophane. 4. Particules sphériques selon la revendication 1, caractérisées en ce que les unités monomères sont dérivées de la polymérisation d'alcènes polycycliques, et sont: - de formule (Z2) suivante =[CH-R2-CH]= (Z2) dans laquelle R2 représente: * un cycle de formule dans laquelle: Y représente -CH2-, ou un hétéroatome, ou un groupe -CHR-, ou un groupe -CHX-, R et X étant tels que définis dans la revendication 1, Y1 et Y2, indépendamment l'un de l'autre, représentent H, ou une chaîne R, ou un groupe X susmentionnés, ou forment en association avec les atomes de carbone qui les portent un cycle de 4 à 8 atomes de carbone, ce cycle étant le cas échéant substitué par une chaîne R, ou un groupe X susmentionnés, a représente une simple ou double liaison, * ou un cycle de formule dans laquelle: Y' représente -CH2-, ou un hétéroatome, ou un groupe -CHR-, ou un 15 groupe -CHX-, R et X étant tels que définis ci-dessus, Y'1 et Y'2, indépendamment l'un de l'autre, représentent -CH2-, ou un groupe -C(0), ou un groupe -COR, ou un groupe - C-0X, R et X étant tels que définis ci-dessus, - de formule (Z3) suivante [C\ :81 H HJ (Z3) dans laquelle R3 représente: * un cycle de formule // l (Y"1)n1 dans laquelle: nl et n2, indépendamment l'un de l'autre, représentent 0 ou 1, Y" représente -CH2-, ou un groupe -CHR-, ou un groupe -CHX-, R et X étant tels que définis cidessus, Y"l et Y"2, indépendamment l'un de l'autre, représentent une chaîne hydrocarbonée de 0 à 10 atomes de carbone, * ou un cycle de formule a dans laquelle Y" et Y"a, indépendamment l'un de l'autre, représentent -CH2-, ou un groupe -CHR-, ou un groupe -CHX-, R et X étant tels que définis ci-dessus. É ou un cycle de formule "a dans laquelle Y" et Y"a, indépendamment l'un de l'autre, représentent -CH2-, ou un groupe -CHR-, ou un groupe -CHX-, R et X étant tels que définis ci- dessus. 5. Particules sphériques selon la revendication 1 ou 4, caractérisées en ce que les 15 alcènes polycycliques dont sont issues les unités monomères sont, : - les monomères contenant un cycle cyclobutène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2a) suivante: O O O (Z2a) - les monomères contenant un cycle cyclopentène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2b) suivante: (Z2b) - le norbornène (bicyclo[2.2.1]hept-2-ène) conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2c) suivante: (Z2c) - le norbornadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2d) suivante: (Z2d) - le 7-oxanorbornène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2e) suivante: O (Z2e) 2871803 33 - le 7-oxanorbornadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2f) suivante: O (Z2f) - le dimère du norbornadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3a) suivante: (Z3a) - le dicyclopentadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3b) suivante: (Z3b) 2871803 34 le tetracyclododécadiene conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3c) suivante: (Z3c) - ou le bicyclo[5.1.0]oct-2-ène, le bicyclo[6.1.0]non-4-ène. 6. Particules sphériques selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisées en ce que les alcènes mono ou polycycliques dont sont issues les unités monomères sont: - le norbornène (bicyclo[2.2.1]hept-2-ène) conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2c), - le tetracyclododécadiene conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3c), - le dicyclopentadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3b), - le dimère du norbornadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3a), - le cycloocta-1,5-diene conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Zli). 7. Particules sphériques selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisées en ce que au moins 0,5 % jusqu'à 100% des unités monomères sont substituées par une chaîne R telle que définie dans la revendication 1. 8. Particules sphériques selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisées en ce qu'elles comprennent: - entre environ 0,5 % jusqu'à 100 % d'unités monomères substituées par une chaîne R telle que définie dans la revendication 1, ladite chaîne R étant identique pour ces monomères, - et entre environ 0,5 % et 99,5 % d'unités monomères substituées par une chaîne R telle que définie dans la revendication 1, ladite chaîne R de ces monomères étant différente de la chaîne R des monomères précédents, - et/ou entre environ 0,5 % et 99,5 % d'unités monomères substituées directement par un groupe X tel que défini dans la revendication 1, ce groupe X de ces monomères étant identique ou différent du groupe X de la chaîne R des monomères précédents, - et/ou entre environ 1 % et 99,5 % d'unités monomères non substituées, le total des pourcentages des différents monomères susmentionnés faisant 100 %. 9. Particules sphériques selon l'une des revendications 1 à 8, caractérisées en ce que la ou les chaînes R substituant les unités monomères sont représentées par la formule -CH2-O-(CH2-CH2-O) nCH2-CH2-O-X dans laquelle n est tel que défini dans la revendication 1, et X représente H, 15 -CH2-COOH, -CH2-COCI, ou -CH2- COY, Y représentant un principe actif, ou une molécule biologique telle qu'une protéine. 10. Particules sphériques selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisées en ce que la ou les chaînes R comprennent un polyoxyde d'éthylène de formule (A) lié de façon covalente à une particule via un pont hydrolysable choisi parmi les enchaînements d'environ 1 à 10 motifs d's-caprolactone, ou de fonctions OC(0)-, -C(0)OC(0)-, - C(0)-NH-... 11. Particules sphériques selon l'une des revendications 1 à 10, caractérisées en ce que la ou les chaînes R comprenant un polyoxyde d'éthylène de formule (A) lié de façon covalente à un pont hydrolysable choisi parmi les enchaînements d'environ 1 à 10 motifs d's-caprolactone, sont représentées par la formule -CH2-(O-CO-(CH2)5)t-O-CO-(CH2)5-O-CO(CH2)2-CO-O-(CH2-CH2-O)n-(CH2)2-O-X dans laquelle t représente un nombre entier compris entre 1 et 10, et X représente H, -CH2-COOH, -CH2-COC1, ou -CH2-COY, Y représentant un principe actif, ou une molécule biologique telle qu'une protéine. 12. Particules sphériques selon l'une des revendications 1 à 11, caractérisées en ce que le principe actif est choisi parmi les molécules utilisées en thérapeutique, cosmétique, parfumerie, ou pour les revêtements de surface, tels que les peintures et les antifoulings. 13. Particules sphériques selon l'une des revendications 1 à 12, caractérisées en ce que le principe actif est un médicament utilisé en thérapeutique choisi notamment parmi ceux des classes thérapeutiques suivantes: les anti-inflammatoires, notamment l'indométacine, les anticancéreux, les antibiotiques, les anti-coagulants, ou les antimitotiques. 14. Particules sphériques selon l'une des revendications 1 à 12, caractérisées en ce que la molécule biologique est choisie parmi les protéines susceptibles de se lier à une cible biologique intra ou extracellulaire, ou à des anticorps, ou à tout autre ligand spécifique. 15. Particules sphériques selon la revendication 14, caractérisées en ce que la molécule biologique est choisie parmi les protéines suivantes: l'avidine, l'albumine, les facteurs de croissance tel que le VEGF. 16. Compositions pharmaceutiques comprenant des particules sphériques selon l'une des revendications 1 à 15, lorsque le ou les différents groupes X contiennent un principe actif médicamenteux, le cas échéant en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable, notamment pour une utilisation sous forme parentérale. 17. Compositions cosmétiques comprenant des particules sphériques selon l'une des revendications 1 à 15, lorsque le ou les différents groupes X contiennent un principe actif utilisé en cosmétique, le cas échéant en association avec un véhicule approprié, notamment pour une application sous forme d'émulsions, crèmes. 18. Compositions de revêtement de surfaces comprenant des particules sphériques selon l'une des revendications 1 à 15, lorsque le ou les différents groupes X contiennent un principe actif utilisé pour les revêtements de surfaces, le cas échéant en association avec un véhicule approprié. 19. Procédé de préparation de particules sphériques définies dans l'une des revendications 1 à 15, caractérisé en ce qu'il comprend une étape de polymérisation d'un alcène mono ou polycyclique tel que défini dans l'une des revendications 1 à 5 substitué par une chaîne R telle que définie dans les revendications 1 et 9 à 11, cette étape de polymérisation étant éventuellement effectuée en présence: - d'un ou plusieurs alcènes mono ou polycycliques tels que définis dans l'une des revendications 1 à 5, identiques ou différents du précédent, et substitués par une chaîne R telle que définie dans la revendication 1 et 9 à 11, ladite chaîne R étant différente de celle substituant l'alcène mono ou polycyclique susmentionné, - et/ou d'un ou plusieurs alcènes mono ou polycycliques tels que définis dans l'une des revendications 1 à 5, identiques ou différents du précédent, et substitués par un groupe X tel que défini dans la revendication 1, ce groupe X étant identique ou différent du groupe X de la chaîne R des alcènes précédents, - et/ou d'un ou plusieurs alcènes mono ou polycycliques tels que définis dans l'une des revendications 1 à 5, identiques ou différents des précédents, lesdits alcènes n'étant pas substitués, ladite polymérisation étant effectuée sous agitation en présence d'un complexe de métal de transition en tant qu'amorceur de la réaction choisi notamment parmi ceux des groupes IV ou VI ou VIII, tel que le ruthénium, l'osmium, le molybdène, le tungstène, l'iridium, le titane, en milieu polaire ou apolaire, notamment à l'aide des complexes à base de ruthénium suivants: RuC13, RuC12(PCy3)2CHPh. 20. Alcènes mono ou polycycliques, caractérisés en ce qu'ils sont substitués par une chaîne R, ou un groupe X, tels que définis dans la revendication 1. 21. Alcènes mono ou polycycliques selon la revendication 20, caractérisés en ce qu'ils sont choisis parmi ceux mentionnés dans la revendication 3 ou 5. 22. Alcènes mono ou polycycliques selon la revendication 20 ou 21, caractérisés 30 par les formules suivantes: O n O dans laquelle n représente un nombre entier compris entre environ 50 et 340, o dans laquelle n représente un nombre entier compris entre environ 50 et 340, o r o n et ci dans laquelle n représente un nombre entier compris entre environ 50 et 340, ci OH o. dans laquelle n représente un nombre entier compris entre environ 50 et 340, O /O (CH2)5 O --t (\HI OH dans laquelle t représente un nombre entier compris entre 1 et 10, O dans laquelle t représente un nombre entier compris entre 1 et 10, et n représente un nombre entier compris entre environ 50 et 340. 23. Utilisation d'alcènes mono ou polycycliques selon l'une des revendications 20 à 22, pour la mise en oeuvre d'un procédé de préparation de particules sphériques définies dans l'une des revendications 1 à 15, notamment selon le procédé de la revendication 19. (\2)5 O 0\ \/\ O O CH3 O O