FR 2862879 A1 20050603 FR 0313958 A 20031127 La présente Invention est relative à des revêtements organiques bioactifs applicables sur des endoprothèses vasculaires (" stents " en anglais) afin d'améliorer leur performances en terme de réduction du taux de resténose. Elle est en particulier relative à des revêtements polymères renfermant une association de pentoxifylline et d'au moins un antioxydant, à leur procédé de préparation et à leurs utilisations. La lutte contre la resténose consécutive à la pose d'une endoprothèse vasculaire a franchi une étape d'innovation importante avec la mise au point, le développement, et récemment la commercialisation de stents dits " bioactifs ", c'est-à-dire revêtus d'une couche organique permettant une meilleure maîtrise des conséquences biologiques de la pose d'une endoprothèse dans un organisme vivant. Il semble aujourd'hui admis une préférence pour la mise en place, sur le stent, de revêtements contenant une molécule active qui est libérée de manière contrôlée. Sans entrer dans le détail des différents modes de réalisation de ces revêtements, il apparaît que de nombreux travaux s'orientent vers une incorporation de principes actifs dans des matrices polymères que l'on solidarise sur la surface du stent par un moyen ou un autre. Actuellement, de nombreux travaux visant le développement de stents à libération de substances cytostatiques utilisent l'endoprothèse comme un système de délivrance locale régulée, le plus souvent par les propriétés du polymère qui la recouvre. Actuellement 7 substances antiprolifératives ont été ou sont utilisées à l'occasion d'études cliniques de validation de sécurité et/ou d'efficacité : le sirolimus, un analogue du sirolimus codé ABT 578, le paclitaxel, l'actinomycine D, le tacrolimus et l'everolimus. Seuls le sirolimus et le paclitaxel ont actuellement bénéficié d'un large programme de validation clinique multiple ayant conduit à un processus de marquage CE. On peut notamment citer en exemple les produits aujourd'hui disponibles sur le marché des stents revêtus: - le stent Cypher commercialisé par la société Cordis dans lequel la molécule active est la rapamycine (sirolimus, Rapamune ), un immunosuppresseur utilisé jusque là comme traitement anti-rejet mais ayant aussi un puissant pouvoir antiprolifératif sur les cellules musculaires lisses vasculaires. La matrice polyrérique utilisée sur ce stent est un mélange de polyéthylènevinyl acétate (PEVA) et de polybutylméthacrylate (PBMA) - le stent NIRx commercialisé par la société Boston Scientific: ce stent bioactif est revêtu d'une matrice composée d'un copolymère tribloc qui libère de manière prolongée un puissant anticancéreux: le paclitaxel. D'autres approches pharmacologiques, non cytostatiques, ont également été évaluées. Globalement, les molécules bioactives concernées peuvent être regroupées dans les catégories suivantes: - les anti-néoplasiques tels que par exemple le paclitaxel (Taxol ), l'actinomycine D, la vincristine, le méthotrexate, l'angiopeptine, etc... - les anti-thrombotiques tels que par exemple l'hirudine, l'iloprost, et l'héparine, - les immunosuppresseurs tels que par exemple le sirolimus (Rapamycine ), le tacrolimus, le tranilast, la dexaméthasone, le méthylpredisolone, l'interféron gamma lb, le leflunomide et la ciclosporine, - les inhibiteurs de la migration et les modulateurs de la matrice extracellulaire tels que par exemple l'halofuginone, l'inhibiteur de la propylhydroxylase, l'inhibiteur de la protéinase C, les inhibiteurs des métalloprotéases et le batimastat, - les agents favorisant la ré-endothélialisation tels que les facteurs de croissance comme le "Vascular Endothelial Growth Factor" (VEGF), le 17-f3- oestradiol et les inhibiteurs de l'HydroxyMéthylGlutharyl (HMG) CoA réductase. La resténose consécutive à la pose d'un stent est un phénomène complexe dû principalement à l'hyperplasie intimale. L'épaississement de l'intima à la suite de la blessure vasculaire lors de l'implantation du stent est le résultat à la fois de la migration et de la prolifération des cellules musculaires lisses ainsi que de l'accumulation de protéines de la matrice extracellulaire (collagène, élastine, protéoglycanes). La stratégie principale actuelle adoptée pour lutter contre la resténose est de prévenir l'hyperplasie intimale en inhibant la prolifération des cellules musculaires lisses par des agents cytostatiques et antinéoplasiques ou leur migration par les anti-métalloprotéases. Cependant, la resténose étant un phénomène particulièrement complexe et multifactoriel, les réalisations de l'art antérieur présentent l'inconvénient de considérer principalement une cible particulière à l'origine d'une étape du processus, alors qu'il est préférable, de pouvoir viser différentes cibles moléculaires impliquées dans l'initiation et l'évolution de la resténose. La pentoxifylline est un vasodilatateur périphérique communément utilisé dans le traitement des artérites des membres inférieurs (en particulier la claudication intermittente), de l'insuffisance circulatoire cérébrale et des troubles vasomoteurs périphériques (Kim N.Y. et al., Gen. Phannacol., 2000, 35 (4), 205-211). En plus de ses propriétés pharmacologiques connues, la pentoxifylline possède de nombreux effets biologiques intéressants susceptibles de participer à la prévention de la resténose. En effet, la pentoxifylline inhibe in vitro la prolifération des cellules musculaires lisses vasculaires humaines (Chen Y. M. et al., J. Mol. Cell. Cardiol., 1999, 31, 773-783) ; c'est un puissant inhibiteur de la sécrétion des cytokines pro-inflammatoires telles que l'IL12, le TNF-alpha et l'interferongamma (Lazarczyk M. et al,. Oncology Reports, 2002, 9, 423-426). La pentoxifylline potentialise la production de monoxyde d'azote (NO) par les cellules musculaires lisses vasculaires et l'expression du gène de la NO-synthase inductible (Kim N.Y. et al., 2000, précité). Dans un modèle de cellules musculaires lisses de rat, il a été montré que cette molécule inhibe la synthèse du collagène de type 1 induite par le TGF-béta (Chen Y.M. et al., 1999, précité). La pentoxifylline possède également un effet protecteur vis-à-vis des cellules endothéliales (Sobottka-Ventura A. C. et B5hnke M.., Br. J. Ophtalmol., 2001, 85, 1110-1114). De plus, il a été montré que cette molécule protège le HDLalphatocophérol de l'oxydation par l'anion superoxyde libéré par les polynucléaires neutrophiles (Cogny A. et al., Eur. J. Biochem., 1999, 259, 32-39). Par ailleurs, l'alpha tocophérol (également dénommé vitamine E) est un puissant antioxydant et possède, de la même façon que la pentoxifylline, des propriétés biologiques intéressantes pouvant participer à prévenir l'apparition de la resténose: - l'alpha tocophérol est en particulier un inhibiteur de la prolifération des cellules musculaires lisses vasculaires (Tasinato A. et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 1995, 92, 12190-12194) ; - c'est un anti-inflammatoire: il diminue l'adhérence des neutrophiles aux cellules endothéliales durant le processus inflammatoire en diminuant l'expression de certaines molécules d'adhésion à la surface de ces deux types de cellules (Yoshikawa T. et al., Biofactors, 1998, 7, 15-19) ; - c'est un anti-agrégant plaquettaire: il inhibe l'agrégation plaquettaire in vitro (Freedman J. E. et al., Circulation, 1996, 94, 2434- 2440,), diminue l'adhésion plaquettaire in vivo en réduisant la concentration plasmatique de la P-sélectine (Davi G. et al., Circulation, 1998, 97, 953-957). On connaît par ailleurs des travaux qui ont été réalisés dans le domaine de la lutte contre la fibrose, cicatrice anormale après agression tissulaire, et processus qui présente de nombreuses analogies avec celui de la resténose: inflammation, synthèse de cytokines, prolifération cellulaire, remodelage de la matrice extracellulaire et qui ont proposé d'associer la pentoxifylline avec un anti-inflammatoire, et notamment l'alpha-tocophérol, dans une formulation administrée par voie systémique (Demande de brevet FR-A-2 779 063). L'administration d'une composition renfermant l'association de la pentoxifylline et d'alpha-tocophérol dans des proportions données permet, lorsque la lésion est jeune et inflammatoire (phase de constitution), de prévenir la survenue d'une sclérose, et lorsque la lésion est ancienne et constituée (phase tardive), de réduire le bloc fibreux, voire, dans certains cas, de le faire disparaître. Parce qu'elle agit en synergie avec l'alpha tocophérol, la pentoxifylline est utilisée à des doses relativement faibles, par rapport aux prescriptions d'origines, ce qui permet d'en minimiser les effets secondaires. Cependant, on peut remarquer que ces deux molécules ont des pharmacocinétiques très différentes, dues notamment à leurs natures chimiques différentes. En effet, lorsque la pentoxifylline est absorbée par voie orale, elle atteint un taux sanguin maximal en trente minutes et son pic plasmatique est voisin de 1 g/ml après une prise orale de 200 mg; sa demi-vie est de 2 heures et l'élimination de plus de 90 % de la dose absorbée sous forme métabolisée (Banque de données sur les médicaments: BIAM) Lorsque l'alphatocophérol est administré par voie orale, il est résorbé par les graisses dans le tractus gastro-intestinal et 35 % de la dose administrée passe dans la circulation, le reste étant éliminé par les fèces. L'alphatocophérol se lie aux lipoprotéines plasmatiques des membranes cellulaires et montre un tropisme pour le tissu adipeux, l'hypophyse, les surrénales, l'utérus et le testicule (Banque de données sur les médicaments: BIAM) ; son temps de demi-vie varie de quelques jours à 3 mois selon les tissus. Il est donc probable que lors d'une absorption orale simultanée de pentoxifylline et d'alpha-tocophérol dans le traitement des fibroses, l'efficacité de ces deux molécules soit liée à leur mode d'action séquentiel et que les concentrations présentes in situ dépendent du tissu concerné. Ce type de composition n'a cependant jamais été préconisé dans le cadre de la resténose. Dans le cas particulier de la resténose et contrairement à ce qui est observé pour le traitement de la fibrose, les Inventeurs ont maintenant découvert de façon surprenante, qu'il est nécessaire que ces deux types de molécules soient présents localement au même moment car leurs activités biologiques sont complémentaires et qu'il n'est donc pas possible d'utiliser les compositions à base de pentoxifylline et d'alpha tocophérol proposées par l'art antérieur et destinées à l'administration par voie orale. Les Inventeurs se sont donné pour but de pourvoir à un revêtement organique bioactif applicable sur des endoprothèses vasculaires et permettant le relargage local et simultané de pentoxifylline et d'au moins un agent anti-oxydant afin d'améliorer leur performances en terme de réduction du taux de resténose. Ainsi la présente Invention a pour objet un revêtement organique à base de polymère caractérisé par le fait qu'il comprend au moins une couche de matrice de polymère(s) synthétique(s) présentant une épaisseur supérieure ou égale à 1 m, ladite matrice renfermant une association: - de pentoxifylline, en une quantité supérieure ou égale à 0,036 nmole/mm2 de surface de ladite matrice et - d'au moins un agent anti-oxydant, en une quantité supérieure ou égale à 0,042 nmole/mm2 de surface de ladite matrice. Ainsi que cela est démontré dans les exemples qui suivent, le revêtement conforme à l'Invention peut être utilisé pour recouvrir des endoprothèses vasculaires afin que la pentoxifylline et l'agent anti-oxydant soient relargués in situ simultanément et de manière prolongée une fois l'endoprothèse mise en place. Le revêtement conforme à l'Invention permet en particulier un relargage prolongé et simultané des deux molécules sur une période allant de 4 à 8 semaines environ. Selon une forme de réalisation préférée de l'Invention, la pentoxifylline est présente au sein de la matrice polymère en une quantité comprise entre 18 et 54 nmoles/mm2 environ de surface de ladite matrice (soit entre 5 et 15 g/mm2 environ), la valeur de 36 nmoles/mine (soit 10 g/mm2) étant tout particulièrement préférée. De même, l'agent anti-oxydant est de préférence présent au sein de la matrice polymère en une quantité comprise entre 32 et 53 nmoles/mm2 environ de surface de ladite matrice (soit entre 15 et 25 1.tg/mm2 environ dans le cas de l'alpha-tocophérol), la valeur de 42 nmoles/mm2 environ (soit 20 g/mm2 dans le cas de l'alpha-tocophérol) étant tout particulièrement préférée. L'épaisseur du revêtement conforme à l'Invention est de préférence supérieure ou égale à 5 m, et encore plus préférentiellement comprise entre 10}.gym et 100 gm inclusivement. Parmi le ou les agents anti-oxydants pouvant être incorporés dans la matrice polymère du revêtement conforme à la présente Invention, on peut tout particulièrement citer l'alpha-tocophérol et ses sels physiologiquement acceptables tels que l'acétate d'alpha-tocophérol, les enzymes anti-oxydantes telles que les superoxyde dismutases (SODs) et les glutathion peroxydases, l'acide ascorbique, le béta-carotène, les flavonoïdes, l'ubiquinone, le probucol, le glutathion et l'acide lipoïque et leurs mélanges; l'alpha-tocophérol et ses sels étant tout particulièrement préférés. Selon une forme de réalisation préférée, le ou les agents antioxydants représentent de 5 à 60 % en poids environ par rapport au poids total du revêtement et encore plus préférentiellement de 10 à 50 % en poids environ. La nature du ou des polymères synthétiques utilisables pour former la ou les couches de matrice du revêtement conforme à la présente Invention n'est pas critique. Ils peuvent être choisis parmi les polymères biodégradables ou non biodégradables et leurs mélanges. Selon l'Invention, on préfère cependant utiliser des polymères biocompatibles biodégradables ou non et connus pour être disponibles sous la qualification de "medical grade". Selon l'Invention, on entend par polymères "biodégradables", des polymères pouvant se désagréger en milieu biologique, notamment par hydrolyse, avec une cinétique telle qu'environ 20 % du polymère (en poids) est dégradé dans un temps de l'ordre de ou supérieur au temps nécessaire au relargage complet des substances actives telles que définies précédemment. Dans le présent exemple, le temps de relargage est typiquement de l'ordre de 4 à 8 semaines. Les polymères biodégradables sont de préférence choisis parmi les polyesters biodégradables tels que par exemple les polymères d'acide lactique (PLA) ou d'acide glycolique (PGA), les copolymères d'acide lactique et d'acide glycolique (PLGA), les polymères d' -caprolactone, d'alkyle cyanoacrylate, d'hydroxybutyrate, ou d'hydroxyvalérate, les polyanhydrides, les poly-orthoesters, les poly (imido carbonates) et les poly (a-acide malique) ; les poly(phosphazènes) ; les poly(éthers), les polysaccharides et leurs mélanges. Les polymères non biodégradables sont de préférence choisis parmi les polyesters non biodégradables tels que le polyéthylèneterephtalate, les polyacrylates et les polyméthacrylates; les poly(amides) ; le polychlorure de vinyle; les polyéthylène vinyle acétates; les polyuréthanes; les polysiloxanes; la polyvinylpyrrolidone (PVP) et leurs mélanges. Selon l'Invention, la ou les matrices polymères sont de préférence constituée(s) par un ou plusieurs polymères biodégradables biocompatibles choisis parmi les polyesters biodégradables et encore plus préférentiellement parmi les PLA, PGA, leurs copolymères (PLGA) et leurs mélanges. Lorsque le revêtement conforme à l'Invention est constitué de plusieurs couches de matrice polymères, identiques ou différentes en elles du point de vue de la nature des polymères, alors chacune des couches de matrice polymère peut renfermer la pentoxifylline et l'agent anti-oxydant dans des proportions respectives variant d'une couche à l'autre. Il est par exemple possible de prévoir un revêtement comportant au moins deux couches de matrice polymère et dans lequel la couche externe (supérieure) est enrichie en agent anti-oxydant, notamment en acétate d'alpha- tocophérol, de manière à ce que cette dernière molécule soit relarguée de façon préférentielle, en quantité facilement ajustable, de manière à profiter, aux temps courts, des propriétés anti-oxydantes et anti- inflammatoires de l'alpha-tocophérol dans la lutte contre les effets inflammatoires dus à la pose de l'endoprothèse vasculaire. Il est également possible d'envisager un revêtement comportant au moins deux couches de matrice polymère (une couche externe et une couche interne) et dans lequel la couche externe ne comprend ni pentoxifylline ni agent anti- oxydant, ces deux molécules étant par contre uniquement contenues dans la couche interne; la couche externe laissant par contre diffuser ces deux molécules cers l'extérieur du revêtement. La présente invention à donc également pour objet l'utilisation d'au moins un revêtement tel que défini ci-dessus pour recouvrir des endoprothèses vasculaires. Un autre objet de l'invention est un procédé de préparation d'une endoprothèse vasculaire caractérisé par le fait qu'il comprend au moins une étape au cours de laquelle la surface de ladite endoprothèse est recouverte d'au moins une couche de revêtement conforme à l'invention. La couche de revêtement conforme à l'Invention peut être appliquée à la surface de ladite endoprothèse de manière conventionnelle selon les méthodes classiquement utilisées à cet effet par l'homme de l'art. A titre d'exemple, le ou les polymères constituant la matrice, en solution dans un solvant sont mélangé à une solution de pentoxifylline et d'au moins un agent anti-oxydant, puis le mélange résultant est appliqué (par exemple par trempage ou pulvérisation) sur la surface à revêtir et enfin séché pour former un film. Selon une forme de réalisation avantageuse de l'Invention, ledit procédé comprend de préférence une étape préliminaire à l'étape d'application du revêtement conforme à l'invention au cours de laquelle la surface de l'endoprothèse est d'abord recouverte d'une première couche de primaires d'adhésion afin de faciliter la fixation ultérieure du revêtement conforme à l'Invention. De telles couches de primaires d'adhésion peuvent être fixées, en général de manière covalente, sur la surface de l'endoprothèse et offrir à l'extérieur une polarité et/ou des groupements fonctionnels présentant une affinité pour la matrice polymère à fixer. Parmi ces primaires d'adhésion, on peut par exemple citer les siloxanes (R-Si(OH)3), les chlorosilanes (R-SiC13), les sels de diazonium (R-(DN2+, X-, où X- est un sel tel que par exemple un tétrafluoroborate ou un tosylate), ainsi que les produits de réduction électrochimique des sels de diazonium et des monomères vinyliques (H2C=C(RI)R2, où RI = H, CH3, CN et R2 est un groupement acide carboxylique, un groupement ester ou un groupement amide). Des procédés conduisant à la formation d'une couche de primaires d'adhésion sont en particulier décrits dans la demande internationale WO 98/44172 et dans le brevet US 6,517,858, respectivement, et permettent en particulier d'aboutir à l'électro-greffage covalent d'une couche organique sur toute surface conductrice ou semi-conductrice de l'électricité. Les interfaces entre les couches polymères sont solides (primaires d'adhésion et matrice polymère) et résistent notamment à la délamination et au décrochage des revêtements par morceaux. En effet, si les interfaces entre la première couche primaire d'adhésion et l'endoprothèse d'une part, et entre la couche primaire d'adhésion et la matrice de polymère du revêtement conforme à l'Invention d'autre part, sont solides, alors ladite matrice de polymères biodégradables se dégradera "par sa surface externe", permettant ainsi une biodégradation progressive assurant la production de relargages contrôlés. On peut choisir la nature des groupements R des primaires d'adhésion mentionnés ci-dessus de manière à ce qu'ils présentent une bonne affinité chimique pour le polymère biocompatible à fixer, et/ou assurent une bonne maîtrise de l'énergie de surface (hydrophile / hydrophobe) de manière à favoriser les meilleures interactions. Enfin, l'Invention a également pour objet une endoprothèse vasculaire caractérisée par le fait que sa surface est recouverte par au moins une couche du revêtement conforme à l'Invention et tel que décrit précédemment. Outre les dispositions qui précèdent, l'Invention comprend encore d'autres dispositions qui ressortiront de la description qui va suivre, qui se réfère à un exemple des exemples de préparation de revêtements conformes à l'Invention, à des études du relargage de la pentoxifylline et de l'acétate d'alpha-tocophérol à partir de revêtements conformes à l'invention, à une étude de relargage de la pentoxifylline et de l'acétate d'alpha-tocophérol à partir d'un stent revêtu de poly (acide lactique) fixé par une couche de primaire d'adhésion, à une étude de l'effet de l'association pentoxifylline/acétate d'alpha-tocophérol sur la migration in vitro des cellules musculaires lisses humaines, à une étude de l'effet de l'association pentoxifylline/acétate d'alpha-tocophérol sur la prolifération in vitro des cellules musculaires lisses vasculaires humaines ainsi qu'aux figures 1 à 5 annexées dans lesquelles: - la figure 1 représente les profils de relargage de la pentoxifylline (losanges) et de l'acétate d'alpha-tocophérol (carrés) à partir d'une matrice de poly(acide lactique), exprimés en!.tg/cm' de surface de revêtement en fonction du temps (jours) ; - la figure 2 représente les profils de relargage de la pentoxifylline (losanges) et de l'acétate d'alpha-tocophérol (carrés) à partir d'une matrice de poly(acide lactique) fixé sur un stent par l'intermédiaire d'une couche de primaire d'adhésion de poly butylméthacrylate, exprimés en g/stent de surface de revêtement en fonction du temps (jours) ; - la figure 3 représente l'inhibition (en %) de la migration de cellules musculaires lisses vasculaires humaines après incubation dans des milieux de culture renfermant différentes concentrations de pentoxifylline et/ou d'acétate d'alpha-tocophérol; - la figure 4 représente le nombre de cellules musculaires lisses 30 vasculaires humaines/cm2 après culture dans des milieux renfermant différentes concentrations de pentoxifylline et/ou d'acétate de tocophérol en fonction du temps en jours pour une première série de manipulations (Jl (barres noires), J2 (barres 25 blanches), J9 (barres grises), J15 (barres hachurées en diagonale), J21 (barres à damiers) et J27 (barres à pointillés)) ; - la figure 5 représente le nombre de cellules musculaires lisses vasculaires humaines/cm2 après culture dans des milieux renfermant différentes concentrations de pentoxifylline et/ou d'acétate de tocophérol en fonction du temps en jours pour une deuxième série de manipulations (Jl (barres noires), J2 (barres blanches), J9 (barres grises), J15 (barres hachurées en diagonale), J21 (barres à damiers) et J27 (barres à pointillés)). EXEMPLE 1: PREPARATION D'UNE MATRICE POLYMERE BIODEGRADABLE D'ACIDE POLYLACTIQUE CONTENANT DE LA PENTOXIFYLLINE ET DE L'ACETATE D'ALPHA TOCOPHEROL. Dans cet exemple, on réalise une matrice polymère permettant le relargage de la pentoxifylline et de l'acétate d'alpha-tocophérol. Les deux molécules sont contenues dans la même matrice de polymère, faite d'acide poly lactique, et l'on montre que ce mode de réalisation permet d'obtenir que ces molécules soient présentes de façon concomitante dans la matrice. On mélange une solution de poly(acide lactique) à 10 % (p/v) dans du chloroforme avec une solution de pentoxifylline et d'acétate d'alpha tocophérol dans le chloroforme, de manière à ce que chacun des rapports pentoxifylline/polymère et acétate d'alpha tocophérol/polymère soit au final de 30 %. Un film de cette matrice de relargage est déposé sur une lame d'inox 316L par trempage, aller-retour, de la lame dans la solution contenant la matrice dissoute. Le film est séché à température ambiante, puis on en analyse la composition par spectrométrie de masse à ionisation secondaire (TOF-SIMS: Time-Of-Flight-Secondary Ionization Mass Spectrometry). Les graphiques obtenus (non représentés) montrent les pics de masse caractéristiques de l'acétate d'alpha-tocophérol (T) et de la pentoxifylline (P), ce qui démontre que ces deux molécules sont présentes dans la matrice et que leur structure a été préservée. En combinant l'analyse TOF-SIMS et l'abrasion du film de polymère à l'aide d'un faisceau d'ions gallium focalisé sur la surface de l'échantillon à partir d'un canon auxiliaire présent sur l'appareil et synchronisé avec le faisceau d'ions primaires, on peut réaliser le suivi des intensités de pics caractéristiques de chacune des deux molécules en fonction du temps d'abrasion. Le tracé des intensités de ces pics en fonction du temps d'abrasion (non représenté) montre des plateaux, qui illustrent le fait que la concentration des molécules actives reste constante dans l'épaisseur du film, ce qui démontre une bonne répartition des deux molécules au sein de la matrice polymère pour effectuer le relargage continu de celles-ci de façon concomitante. EXEMPLE 2: MATRICE POLYMERE BIODEGRADABLE D'UN COPOLYMERE DE L'ACIDE LACTIQUE ET DE L'ACIDE GLYCOLIQUE CONTENANT DE LA PENTOXIFYLLINE ET DE L'ACETATE D'ALPHA TOCOPHEROL. Dans cet exemple, des matrices de polymère permettant le relargage de la pentoxifylline et de l'acétate d'alpha-tocophérol ont été réalisées dans les mêmes conditions que celles décrites ci-dessus à l'exemple 1, mais en partant d'un mélange d'une solution à 500 mg/ml de pentoxifylline dans le chloroforme et d'une solution d'acétate d'alpha-tocophérol à 500 mg/ml dans le même solvant d'une part, et de solutions dans le chloroforme de divers copolymères de l'acide lactique et de l'acide glycolique (PLGA 85/15, PLGA 75/25, PLGA 65/35 et PLGA 50/50). L'analyse TOF-SIMS des différentes matrices obtenues a permis, comme dans l'exemple 1 ci-dessus, de montrer que les deux molécules actives sont présentes, de façon homogène, dans le film de copolymère servant de matrice de relargage (résultats non représentés). EXEMPLE 3: MATRICE POLYMERE BIODEGRADABLE DE POLY ORTHO ESTER (POE) CONTENANT DE LA PENTOXIFYLLINE ET DE 25 L'ACETATE D'ALPHA TOCOPHEROL. Dans cet exemple, des matrices polymères permettant le relargage de la pentoxifylline et de l'acétate d'alpha-tocophérol ont été réalisées dans les mêmes conditions que celles décrites ci-dessus à l'exemple 1, mais en partant d'une solution contenant les deux molécules actives à raison chacune de 500 mg/ml dans le chloroforme, et d'une solution dans le chloroforme d'un poly orthoester, à savoir le poly ([ 10-3,9-diéthyl-9(nonyloxy)-2,4,8,10-tetraoxa-spiro[5,5]undec-3-yloxy]-)decan- 1 -ol. L'analyse TOF-SIMS (non représentée) permet, comme dans l'exemple 1, de montrer que les deux molécules actives sont présentes, de façon homogène, dans le film de polymère servant de matrice de relargage. EXEMPLE 4: MATRICE POLYMERE BIODEGRADABLE D'ACIDE 5 POLYLACTIQUE CONTENANT DE LA PENTOXIFYLLINE ET DE L'ACETATE D'ALPHA TOCOPHEROL. Dans cet exemple, on réalise une matrice polymère permettant le relargage de la pentoxifylline et de l'acétate d'alpha-tocophérol composée de deuxcouches de matrice polymère successives, dans lesquelles les proportions respectives des deux molécules sont différentes. On illustre en particulier le cas où la couche supérieure est enrichie en acétate d'alpha-tocophérol. Dans chaque couche, les deux molécules sont contenues dans la même matrice de polymère, faite d'acide poly lactique. Pour ce faire, on réalise d'une part une solution de poly(acide 15 lactique) à 10 % (p/v) dans du chloroforme et d'autre part deux solutions de pentoxifylline et d'acétate d'alpha tocophérol dans le chloroforme: une première solution dans laquelle le rapport pondéral acétate d'alpha tocophérol / pentoxifylline est égal à 4 et - une deuxième solution dans laquelle le rapport pondéral acétate 20 d'alpha tocophérol / pentoxifylline est égal à 1. Chacune de ces deux solutions est mélangée avec la solution de polymère à 10 % dans le chloroforme de manière à obtenir une solution A (rapport = 4) et une solution B (rapport = 1). Une première couche de matrice polymère est déposée sur une lame d'inox 316L par trempage, aller-retour, de la lame dans la solution B. Le film obtenu est séché à température ambiante, puis on dépose sur la première couche de matrice polymère une seconde couche de matrice par trempage, aller-retour, de la lame dans la solution A. L'analyse de la composition du revêtement complet a été effectuée par TOF-SIMS. L'étude des profils (non représentés) de concentration en profondeur de chacune des deux molécules montre que le revêtement obtenu est enrichi en surface en acétate d'alpha-tocophérol. EXEMPLE 5: ETUDE DU RELARGAGE DE LA PENTOXIFYLLINE ET DE L'ACETATE D'ALPHA TOCOPHEROL A PARTIR D'UN REVETEMENT DE POLY (ACIDE LACTIQUE) FIXE PAR UNE COUCHE DE PRIMAIRE D'ADHESION A BASE DE POLY (BUTYL-METHACRYLATE) Dans cet exemple, on illustre la fixation, sur une surface d'inox 316L, d'un revêtement constitué d'une matrice de polymère biodégradable contenant de la pentoxifylline et d'acétate d'alpha-tocophérol. Cette fixation est réalisée grâce à une sous-couche électro-greffée de poly méthacrylate de butyle (PBMA), qui sert de primaire d'adhésion pour la matrice polymère biodégradable. Les deux molécules sont contenues dans la même matrice de polymère, et l'on montre que ce mode de réalisation permet d'obtenir que ces molécules soient relarguées de façon concomitante. 1-) Electrogreffage de la sous-couche de PBMA: On trempe une lame d'acier inoxydable 316L de 10 cm de longueur sur 1 cm de large dans une solution de diméthylformamide (DMF) renfermant 3,125 mol/1 de méthacrylate de butyle (BUMA), 10-2 mol/1 de tétrafluoroborate de 4-nitrophényl diazonium et 2,5.10-2 mol/1 de nitrate de sodium. Cette lame sert d'électrode de travail dans un montage à trois électrodes. Les deux autres électrodes du dispositif sont une électrode de platine de grande dimension, qui sert de contre- électrode, ainsi qu'un fil d'argent, utilisé comme électrode de référence. On soumet cette lame à une série de 50 balayages de potentiel en conditions voltamétriques, entre 0,1 et 3,0 V/(Ag+/Ag), à une vitesse de 100 mV/s. La lame est ensuite rincée à la DMF, puis à l'acétone, et enfin séchée sous courant d'azote. On obtient un film de PBMA d'environ 300 nm d'épaisseur. 2)-Synthèse et dépôt de la matrice polymère On mélange, comme décrit cidessus à l'exemple 1, une solution de poly(acide lactique) à 10 % (p/v) dans du chloroforme avec une solution de pentoxifylline et d'acétate d'alpha tocophérol réalisée dans le même solvant de manière à ce que chacun des rapports pentoxifylline/polymère et acétate d'alpha tocophérol/polymère soit au final de 30 % en poids. Le dépôt du polymère de relargage chargé en molécules est réalisé par trempage des lames d'inox 316L préalablement revêtues de PBMA électrogreffé selon l'étape 1 précédente. Après séchage, les lames sont mises à tremper dans du tampon phosphate 0, 1 M de pH 7,4 et soumises à une agitation douce (50 tours/min) sur un plateau rotatif à 37 C (ces conditions mimant celles du milieu physiologique, dans lequel on veut évaluer le relargage des molécules actives). Des dosages de la pentoxifylline et de l'acétate d'alpha-tocophérol libérés dans les bains de relargage sont effectués à intervalles réguliers, par la mesure des spectres d'absorption des bains de relargage au contact des lames. Les deux molécules actives présentent en effet une absorption optique caractéristique dans le domaine UV, à 270 nm et 285 nm, pour la pentoxifylline et l'acétate d'alpha-tocophérol en tampon phosphate à pH = 7,4, respectivement. La mesure des mêmes absorptions optiques sur des solutions ne contenant respectivement que de la pentoxifylline ou de l'alpha-tocophérol en concentrations croissantes permet préalablement d'établir des droites d'étalonnage pour chacune des deux molécules. Ces droites d'étalonnage permettent, de mesurer les concentrations de pentoxifylline et d'acétate d'alpha-tocophérol, respectivement, libérées dans les bains de relargage. Ces bains de relargage sont changés à chaque dosage, et leur volume est connu. Le produit de la concentration mesurée par le volume du bain de relargage est égal à la quantité relarguée depuis le dosage précédent. La somme des quantités relarguées depuis le démarrage du relargage (t = 0) est égale à la quantité relarguée cumulée. Un exemple de profils de relargage, présentant l'allure de la quantité relarguée cumulée en fonction du temps, est représenté sur la figure 1 annexée sur laquelle les quantités cumulées de pentoxifylline (losanges) et d'acétate d'alpha-tocophérol (carrés) relarguées sont exprimées en g/cm2 de surface de revêtement en fonction du temps (en jours). Ces résultats montrent que si les deux molécules sont bien relarguées de façon concomitante, on observe cependant que le rapport de leurs concentrations dans l'éluat varie en fonction du temps. On observe en particulier que le rapport de la concentration en pentoxifylline sur celle de l'acétate d'alpha-tocophérol (CPTx / Ça-TOGO) est proche de 1, voire inférieur à 1, aux temps courts, jusqu'à un temps d'environ 48 heures. Ce résultat est intéressant, car il montre qu'aux temps courts, c'est la molécule présentant des propriétés anti-oxydantes qui est relarguée en plus grande quantité : ceci présente un effet a priori favorable pour lutter plus efficacement contre l'inflammation, prépondérante aux temps courts après mise en place du stent. Après ce délai, ce rapport tend vers une valeur constante, approximativement égale à deux, qui est précisément le rapport de concentrations (CPTX / Ca-TOCO) dans le mélange initial ayant servi à concevoir la matrice de polymère. Le relargage s'enrichit donc progressivement en pentoxifylline, dont on peut montrer qu'elle possède des propriétés anti-prolifératives et anti- migratoires intéressantes dans la lutte contre la resténose. EXEMPLE 6: ETUDE DU RELARGAGE DE LA PENTOXIFYLLINE ET DE L'ACETATE D'ALPHA TOCOPHEROL A PARTIR D'UN REVETEMENT DE POLY (ACIDE LACTIQUE) FIXE PAR UNE COUCHE DE PRIMAIRE D'ADHESION CONSTITUEE PAR UN FILM DE TETRAFLUOROBORATE DE 4-DODECANE DIAZONIUM. Dans cet exemple, on illustre la fixation, sur une surface d'inox 316L, d'un revêtement constitué d'une matrice de polymère biodégradable contenant de la pentoxifylline et de l'acétate d'alpha-tocophérol. Cette fixation est réalisée grâce à une sous-couche électro-greffée obtenue par électro-réduction de tétrafluoroborate de 4-docécane diazonium (DC 12), qui sert de primaire d'adhésion pour la matrice polymère biodégradable. Les deux molécules actives sont contenues dans la même matrice de polymère, et l'on montre que ce mode de réalisation permet d'obtenir que ces molécules soient relarguées de façon concomitante. 1-) Electrogreffage de la sous-couche de DC12: On trempe une lame d'acier inoxydable 316L de 10 cm de longueur sur 1 cm de large dans une solution d'acétonitrile renfermant 2.10-3 mol/1 de tétrafluoroborate de 4-dodécane diazonium et 5.10-2 mol/1 de perchlorate de tétraéthylammonium. Cette lame sert d'électrode de travail dans un montage à trois électrodes. Les deux autres électrodes du dispositif sont une électrode de carbone de grande dimension, qui sert de contre-électrode, ainsi qu'un fil d'argent, utilisé comme électrode de référence. On soumet cette lame à une série de 10 balayages de potentiel en conditions voltammétriques, entre 0,33 et 1,8 V/(Ag+/Ag), à une vitesse de 20 mV/s. La lame est ensuite rincée à l'acétonitrile, puis à l'acétone, et enfin séchée sous courant d'azote. On obtient un film de DC12, présentant les bandes infrarouges caractéristiques. 2)-Synthèse et dépôt de la matrice polymère On réalise la matrice de polymère, ainsi que son dépôt, dans les mêmes conditions que celles décrites dans l'exemple 5 ci-dessus, étape 2). Après séchage, les lames sont mises à tremper dans les mêmes conditions que dans l'exemple 5, et le suivi du relargage est effectué de la même manière. On observe, comme dans l'exemple 5, un relargage concomitant des deux molécules actives, avec aux temps courts un relargage préférentiel de l'alpha-tocophérol. EXEMPLE 7: ETUDE DU RELARGAGE DE LA PENTOXIFYLLINE ET DE L'ACETATE D'ALPHA TOCOPHEROL A PARTIR D'UN REVETEMENT A BASE DE POLY (ACIDE LACTIQUE)CO(ACIDE GLYCOLIQUE) FIXE PAR UNE COUCHE DE PRIMAIRE D'ADHESION A BASE DE POLY HYDROXYETHYL-METHACRYLATE (POLY(HEMA)). 1) Electrogreffage de la sous-couche de poly(HEMA) On trempe une lame d'acier inoxydable 316L de 10 cm de longueur sur 1 cm de large dans une solution constituée d'un mélange (5/95: v/v) de DMF et d'eau distillée renfermant 3,5 mol/1 de méthacrylate d'hydroxyéthyle (HEMA), 10"2 mol/1 de tétrafluoroborate de 4-nitrophényl diazonium et 2,5.10-2 mol/1 de nitrate de sodium. Cette lame sert d'électrode de travail dans un montage à deux électrodes. L'autre électrode est une électrode de platine de grande dimension. On soumet cette lame à l00 balayages de potentiel, entre 0,3 et 1,2 Volts, à une vitesse de 100 mV/s. La lame est ensuite rincée à la DMF, puis à l'acétone, et enfin séchée sous courant d'azote. On obtient un film de poly(HEMA) d'environ 1 micron d'épaisseur. 2) Synthèse et dépôt de la matrice polymère On mélange une solution de poly(acide lactique)co(glycolique) (75/25) à 10 % (p/v) dans du chloroforme avec une solution de pentoxifylline et d'acétate d'alpha tocophérol réalisée dans le même solvant de manière à ce que chacun des rapports pentoxifylline/polymère et acétate d'alpha-tocophérol/polymère soit au final de 20 % en poids. Le dépôt du polymère de relargage chargé en molécules est réalisé 5 par trempage des lames d'inox 316L préalablement revêtues de poly (HEMA) selon le protocole de l'étape 1 du présent exemple. Après séchage, les lames sont mises à tremper dans du tampon phosphate 0, 1 M, pH 7,4 et soumises à une agitation douce à 37 C (ces conditions mimant celles du milieu physiologique, dans lequel on veut évaluer le relargage des molécules actives). Des dosages de la pentoxifylline et de l'acétate d'alpha-tocophérol libérés dans les bains de relargage sont effectués intervalles réguliers. On observe, comme dans l'exemple 5, que les deux molécules sont relarguées de façon concomitante. Les mêmes allures de cinétiques de relargages (non représentées) que celles obtenues ci-dessus à l'exemple 5 (figure 1) ont été obtenues. EXEMPLE 8: ETUDE DU RELARGAGE DE LA PENTOXIFYLLINE ET DE L'ACETATE D'ALPHA TOCOPHEROL A PARTIR D'UN STENT REVETU DE POLY (ACIDE LACTIQUE) FIXE PAR UN PRIMAIRE D'ADHESION A BASE DE PBMA 1) Electrogreffage de la sous-couche de PBMA On recouvre un stent en inox 316L d'une couche de PBMA électrogreffée, en utilisant le stent comme électrode de travail dans le même montage et avec le même protocole que dans l'étape 1 de l'exemple 5 exposé précédemment. 2) Synthèse et dépôt de la matrice polymère On mélange une solution de poly(acide lactique) à 2 % (p/v) dans du chloroforme avec une solution de pentoxifylline et d'acétate d'alpha tocophérol réalisée dans le même solvant de manière à ce que chacun des rapports pentoxifylline/polymère et acétate d'alpha-tocophérol/polymère soit au final de 50 en poids. Le dépôt du polymère de relargage chargé en molécules est réalisé par pulvérisation (spray) sur les stents préalablement revêtus de la souscouche de PBMA électro-greffé selon le protocole de l'étape 1. La buse d'atomisation utilisée est une buse à mélange interne c'est-àdire que le mélange entre l'air sous pression et le liquide à pulvériser a lieu à l'intérieur de la buse. Le diamètre de l'orifice est de 0,040 inches soit 1,6 mm. La buse est entièrement constituée d'acier inox et alimentée grâce à une micro-pompe. La pulvérisation est discontinue car assurée par une micropompe dont la chambre se remplit et se vide alternativement. Le contrôle est effectué par un module qui permet d'ajuster à 0,1 pi près le volume de solution atomisée par pulvérisation ainsi que le débit de la solution à 0,1 l par seconde près. Le stent, en rotation devant le jet de la buse de façon à ce que toute sa surface extérieure voit le jet, est maintenu verticalement à une distance de 6 à 12 cm de la buse. On ajuste la pression d'air afin d'obtenir une pression de 4 psi soit environ 200 mbars. pulvérisations successives avec 15 secondes d'intervalle entre chaque pulvérisation, sont nécessaires pour obtenir une épaisseur d'acide polylactique homogène de 10 microns sur l'ensemble de la surface du stent. Après séchage, les stents sont mis à tremper dans 1 ml en tampon phosphate 0,1 M, pH 7,4 et soumises à une agitation douce à 37 C. Des dosages par chromatographie liquide haute performance (HPLC), de la pentoxifylline et de l'acétate d'alpha-tocophérol libérés dans les bains de relargage sont effectués à intervalles réguliers selon la méthode décrite ci-dessus à l'exemple 5. Un exemple de profil de relargage est illustré par la Figure 2 annexée sur laquelle les quantités cumulées de chacune des deux molécules relarguées (pentoxifylline: losanges; acétate d'alpha-tocophérol: carrés) exprimées en p.g/stent est fonction du temps en jours. Ces résultats montrent que l'on observe des profils favorisant le relargage initial de l'acétate d'alpha-tocophérol aux temps courts, avant de favoriser le relargage de pentoxifylline aux temps plus longs. EXEMPLE 9: ETUDE DE L'EFFET DE L'ASSOCIATION PENTOXIFYLLINE/ACETATE D'ALPHA TOCOPHEROL SUR LA MIGRATION IN VITRO DES CELLULES MUSCULAIRES LISSES VASCULAIRES HUMAINES. Le but de cet exemple était d'évaluer, par un test standard, l'effet de l'association de la pentoxifylline/acétate d'alpha-tocophérol sur la migration des cellules musculaires lisses vasculaires humaines (CMLVH). 1) Mode opératoire a) Pré-incubation des cellules Des CMLVH (cellules d'aorte humaine AoSMC, n ATCC-2571) (6èt passage) sont ensemencées à raison de 5 000 cellules/cm2 dans des boites de Pétri de 35 mm de diamètre dans du milieu de culture complet ("Dulbecco's Modified Essential Medium" : DMEM contenant 5 % de sérum de veau foetal (SFV) et des antibiotiques (Pénicilline: 10000 g/ml, U-Streptomycine 10 000 g/ml et Amphotéricine 25 g/ml) à 0,5%) additionné par les différentes concentrations de pentoxifylline (PTX), d'acétate d'alpha-tocophérol (TOC) , ou de l'association des deux (association). Les concentrations testées ont été les suivantes: PTX: 250; 500 et 750 g/ml; TOC: 500; 1000 et 2000 g/ml; association PTX/TOC: 500/500; 500/1000 et 200/2000 g/ml. Un témoin négatif ne contenant ni pentoxifylline ni acétate d'alpha- tocophérol est mené en parallèle. b) Migration cellulaire Les cellules pré-incubées sont trypsinées, rincées dans le milieu de culture, puis suspendues dans un milieu de migration constitué de DMEM supplémenté à 2 % (p/v) par de l'albumine bovine (BAS) (fraction V), puis: - 30 l de "recombinant human Platelet Derivated Growth Factorhétérodimère AB (rhPDGF-AB) à 20 ng/ml de Milieu de migration sont déposés sur un fond de puit d'une plaque multipuits (24 puits de 15,5 mm de diamètre) et des inserts de 1 cm de diamètre et de porosité 8 m sont ajoutés dans chaque puits, - 50 l de la suspension cellulaire contenant 10 000 cellules sont déposés à l'intérieur de chaque insert, les plaques sont fermées et laissées à incuber à 37 C en atmosphère humide pendant 4 heures. A la fin de l'incubation, les inserts sont prélevés: la face supérieure de la membrane de l'insert est grattée afin d'éliminer les cellules adhérentes; - la membrane et les cellules adhérentes à la face inférieure sont fixées dans 500 l de méthanol, les cellules sont colorées au Giemsa et dénombrées au 5 microscope sur 10 champs consécutifs (X200). En parallèle, on réalise: - un témoin négatif: dans l'insert, les cellules sont incubées en présence de 30 l de Milieu de migration dans le puit de culture, - un témoin positif: dans l'insert, les cellules sont incubées en 10 présence de 301.11 de Milieu de Migration supplémenté par le rhPDGF-AB à 20 ng/ml. Les résultats de la migration sont exprimés en pourcentage d'inhibition I (%) selon la formule (1) suivante: I (%) _ [1- (Nombre de cellules prétraitées ayant migré /Nombre de cellules non pré-traitées ayant migré] X 100 (1) 2) Résultats Les résultats obtenus sont représentés sur la figure 3 annexée. Sur cette figure l'inhibition de la migration (en %) a été exprimée pour chacune des concentration de pentoxifylline et/ou d'acétate d'alpha-tocophérol testée. Ces résultats montrent que a pentoxifylline et l'acétate d'alphatocophérol inhibent la migration des cellules musculaires lisses de manière dose-dépendante avec des IC50 (concentration inhibant 50 % de la migration cellulaire) respectives de l'ordre de 700 g/ml et 1500 g/ml. Ils montrent également que l'association des 2 molécules conserve leur effet inhibiteur et permet, pour un même résultat, de diminuer les doses: pour inhiber 50 % de la migration cellulaire il suffit d'associer 500 g/ml de pentoxifylline et 1000 g/ml d'acétate d'alpha-tocophérol, ce qui permet d'utiliser des doses très inférieures aux doses cytotoxiques (respectivement 1000 g/ml et 2000 g/ml pour la pentoxifylline et l'acétate d'alpha-tocophérol). EXEMPLE 10: ETUDE DE L'EFFET DE L'ASSOCIATION PENTOXIFYLLINE/ACETATE D'ALPHA TOCOPHEROL SUR LA PROLIFERATION IN VITRO DES CELLULES MUSCULAIRES LISSES VASCULAIRES HUMAINES. Le but de cet exemple était d'évaluer par un test standard l'effet de l'association de la pentoxifylline/acétate d'alpha-tocophérol sur la prolifération des CMLVH. 1) Mode opératoire: Des CMLVH identiques à celles utilisées ci-dessus à l'exemple 9 (6ème passage) sont ensemencées à raison de 5 000 cellules/cm2 dans des plaques de 24 puits (15,5 mm de diamètre) avec du milieu de culture complet (DMEM supplémenté de SVF à 5 % (v/v) et d'antibiotiques à 0.5% (v/v) tel que décrit ci-dessus à l'exemple 9) et mises à incuber en atmosphère humide contenant 5 % de CO2. Au bout de 24 heures de culture, le bon état des cellules est vérifié au microscope. Le milieu de culture est prélevé et remplacé par le milieu de culture contenant différentes combinaisons de l'association pentoxifylline/acétate d'alpha-tocophérol (première série de manipulations: PTX 100 g/ml/TOC 1000 g/ml; PTX 500 g/ml/TOC 1000 g/ml; PTX 1000 g/ml/TOC 1000 et deuxième série de manipulations: PTX 500 g/ml/TOC 500 g/ml; PTX 500 g/ml/TOC 1000 g/ml; PTX 500.ig/ml/TOC 2000 g/ml). Des témoins négatifs sans PTX ni TOC ainsi que des témoins positifs ont été réalisés en parallèle: - Témoin négatif: milieu de culture contenant 0,5 % (v/v) d'éthanol absolu; - Témoin positif: rh PDGF-AB (Sigma, P3326) Les milieux de culture sont ensuite changés tous les trois jours dans les différentes séries (traitement en continu). Aux temps d'incubation 1, 3, 9, 15, 21 et 27 jours, les cellules (n = 4) sont comptées en cellule de Malassez, après trypsinisation en présence de bleu Trypan. 2) Résultats Les résultats obtenus sont reportés sur les figures 4 (première série de manipulations) et 5 (deuxième série de manipulations) annexées. Sur ces figures, le nombre de cellules/cm2 est exprimé en en fonction de chacune des doses de PTX et/ou de TOC testées et ce à J1 (barres noires), J2 (barres blanches), J9 (barres grises), J15 (barres hachurées en diagonale), J21 (barres à damiers) et J27 (barres à pointillés). Ces résultats montrent que l'association pentoxifylline/acétate d'alpha tocophérol possède un effet inhibiteur sur la croissance in vitro des cellules musculaires lisses humaines. Cet effet est principalement dû à l'activité de la pentoxifylline Des taux d'inhibition de la croissance compris entre 80 et 100 % sont obtenus au bout de 15 jours de traitement, quelles que soient les concentrations utilisées. L'ensemble de ces résultats montre que le revêtement conforme à l'invention peut être utilisé pour recouvrir des endoprothèse vasculaires dans le but de pourvoir à des prothèses bioactives empêchant ou diminuant les phénomènes de resténose. REVENDICATIONS 1. Revêtement organique à base de polymère caractérisé par le fait qu'il comprend au moins une couche de matrice de polymère(s) synthétique(s) 5 présentant une épaisseur supérieure ou égale à 1 m, ladite matrice renfermant une association: - de pentoxifylline, en une quantité supérieure ou égale à 0,036 nmole/mm2 de surface de ladite matrice et d'au moins un agent anti-oxydant, en une quantité supérieure ou 10 égale à 0,042 nmole/mm2 de surface de ladite matrice. 2. Revêtement selon la revendication 1, caractérisé par le fait que la pentoxifylline est présente au sein de la matrice polymère en une quantité comprise entre 18 et 54 nmoles/mm2 de surface de ladite matrice. 3. Revêtement selon la revendication 1 ou 2, caractérisé par le fait 15 que l'agent anti-oxydant est présent au sein de la matrice polymère en une quantité comprise entre 32 et 53 nmoles/mm2 de surface de ladite matrice. 4. Revêtement selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait qu'il présente une épaisseur supérieure ou égale à 5 m. 5. Revêtement selon la revendication 5, caractérisé par le fait qu'il présente une épaisseur comprise entre 10!lm et 100 m inclusivement. 6. Revêtement selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait que le ou les agents anti-oxydants sont choisis parmi l'alpha-tocophérol et ses sels physiologiquement acceptables, les enzymes anti- oxydantes, l'acide ascorbique, le béta-carotène, les flavonoïdes, l'ubiquinone, le probucol, le glutathion, l'acide lipoïque et leurs mélanges. 7. Revêtement selon la revendication 6, caractérisé par le fait que le ou les agents antioxydants sont choisis parmi l'alpha-tocophérol et ses sels physiologiquement acceptables. 8. Revêtement selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait que le ou les agents antioxydants représentent de 5 à 60 % en poids par rapport au poids total du revêtement. 9. Revêtement selon la revendication 8, caractérisé par le fait que le ou les agents antioxydants représentent de 10 à 50 % en poids par rapport au poids total du revêtement. 10. Revêtement selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait que le ou les polymères synthétiques sont choisis parmi les polymères biodégradables ou non biodégradables et leurs mélanges. 11. Revêtement selon la revendication 10, caractérisé par le fait que les polymères biodégradables sont choisis parmi les polyesters biodégradables, les poly(phosphazènes), les poly(éthers), les polysaccharides et leurs mélanges. 12. Revêtement selon la revendication 11, caractérisé par le fait que les polyesters biodégradables sont choisis parmi les polymères d'acide lactique (PLA) ou d'acide glycolique (PGA), les copolymères d'acide lactique et d'acide glycolique (PLGA), les polymères d's-caprolactone, d'alkyle cyanoacrylate, d'hydroxybutyrate, ou d'hydroxyvalérate, les polyanhydrides, les poly-orthoesters, les poly (imido carbonates) et les poly ((3-acide malique). 13. Revêtement selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, caractérisé par le fait que les polymères non biodégradables sont choisis parmi les polyesters non biodégradables, les poly(amides), le polychlorure de vinyle, les polyéthylène vinyle acétates, les polyuréthanes, les polysiloxanes, la polyvinylpyrrolidone et leurs mélanges. 14. Revêtement selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait qu'il comprend plusieurs couches de matrice polymères, identiques ou différentes entre elles du point de vue de la nature des polymères. 15. Revêtement selon la revendication 14, caractérisé par le fait qu'il comporte au moins deux couches de matrice polymère et dans lequel la couche externe (supérieure) est enrichie en agent anti-oxydant. 16. Revêtement selon la revendication 14, caractérisé par le fait qu'il comporte au moins deux couches de matrice polymère, à savoir une couche externe et une couche interne, dans lequel la couche externe ne comprend ni pentoxifylline ni agent anti-oxydant, ces deux molécules étant par contre uniquement contenues dans la couche interne. 17. Utilisation d'au moins un revêtement tel que défini à l'une quelconque des revendications précédentes pour recouvrir des endoprothèses vasculaires. 18. Procédé de préparation d'une endoprothèse vasculaire caractérisé par le fait qu'il comprend au moins une étape au cours de laquelle la surface de ladite endoprothèse est recouverte d'au moins une couche de revêtement tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 16. 19. Procédé selon la revendication 18, caractérisé par le fait qu'il comprend une étape préliminaire à l'étape d'application du revêtement au cours de laquelle la surface de l'endoprothèse est d'abord recouverte d'une première couche de primaires d'adhésion. 20. Procédé selon la revendication 19, caractérisé par le fait que les primaires d'adhésion sont choisis parmi les siloxanes, les chlorosilanes, les sels de diazonium, ainsi que les produits de réduction électrochimique des sels de diazonium et des monomères vinyliques. 21. Procédé selon la revendication 19 ou 20, caractérisé par le fait que la couche de primaire d'adhésion est appliquée par électro-greffage. 22. Endoprothèse vasculaire caractérisée par le fait que sa surface est recouverte par au moins une couche de revêtement tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 16. 23. Endoprothèse vasculaire caractérisée par le fait que sa surface est recouverte par au moins une couche de revêtement tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 16 et qu'elle est susceptible d'être obtenue par le procédé tel que défini à l'une quelconque des revendications 18 à 21.