FR 2850385 A1 20040730 FR 0301008 A 20030129 MICROPARTICULES CHOG NES, SERVANT NOTAMMENT COMME AGENT DE CONTRASTE POUR L'EXPLORATION ULTRASONIQUE ET/OU COMME EMBOLES POUR LA D TECTION ULTRASONIQUE La présente invention concerne des microparticules et leurs procédés de fabrication. L'invention s'intéresse tout particulièrement, mais non exclusivement, à l'utilisation de ces microparticules en tant qu'agent de contraste pour l'exploration 10 ultrasonique. Le principe physique à la base d'un examen échographique ou Doppler est la rétrodiffusion des ultrasons par les tissus. La sonde d'examen engendre une 15 onde mécanique pulsée d'une énergie donnée (calculée en terme d'indice mécanique) à une fréquence classiquement comprise entre 5 à 13 MHz (mégahertz). Cette onde se propage ensuite en profondeur depuis la surface de la sonde jusque dans les tissus. chaque interface 20 ultrasonore rencontrée, les lois de la réflexion s'appliquent et il s'ensuit qu'une partie de l'énergie est renvoyée vers la sonde tandis que l'énergie restante continue son trajet en profondeur. On entend ici par " interface ultrasonore " toute rupture d'impédance 25 acoustique entre deux milieux. Cette impédance se définit comme le produit de la vitesse de propagation des ultrasons par la masse volumique du milieu considéré. Autrement dit, lorsque l'onde arrive à l'interface entre deux structures différentes, par exemple entre un muscle 30 et un os, une onde " rétrodiffusée > est renvoyée. L'énergie de cette onde dépend de la différence d'impédance entre ces deux milieux. Plus ce différentiel sera important, plus l'énergie renvoyée sera élevée. En terme de reconstruction d'image, cette énergie rétrodiffusée sera codée par un niveau de gris. Ainsi, deux informations sont disponibles à partir d'une image échographique: 1) la localisation en profondeur des structures tissulaires du fait de la pulsatilité de l'onde; 2) une appréciation de la densité tissulaire par le niveau de gris représenté. Il est possible de superposer une image couleur 10 à l'image en niveau de gris. Cette nouvelle représentation permet de localiser les structures non plus fixes mais mobiles comme les globules rouges en écoulement dans les vaisseaux. Le principe physique est le mode Doppler: lorsqu'une onde, émise à une fréquence F, rencontre un 15 diffuseur (globule rouge) en mouvement, ce dernier émet une onde de fréquence F AF en retour. Le différentiel en fréquence AF est proportionnel à la vitesse de déplacement de ce diffuseur. Une équation régit alors la relation entre cette vitesse de déplacement et la fréquence Doppler 20 AF. Intégré dans son calculateur, l'échographe remonte à l'information vitesse depuis la fréquence Doppler réellement mesurée. Cette vitesse est ensuite représentée sur l'image Doppler par une couleur dont l'intensité permet une appréciation de la vitesse à partir de 25 l'échelle couleur générale (échelle de rouge et bleu selon le sens de l'écoulement). Afin d'améliorer la sensibilité de détection de la vascularisation (macro circulatoire), rehausseur du 30 signal rétrodiffusé peut être injecté dans l'organisme avant la mesure échographique. L'art antérieur connaît déjà, par la demande de brevet WO 9219272, un agent de contraste pour exploration ultrasonique comprenant des particules poreuses d'un matériau inorganique qui contiennent un gaz ou un liquide piégé et, dont le diamètre moyen se situe entre 0,05 et 500 microns, ledit matériau inorganique étant constitué 5 d'une ou plusieurs substances sélectionnées dans le groupe formé de borates polymères ou monomères, d'oxydes d'aluminium polymères ou monomères, de carbonates polymères ou monomères, de silices polymères ou monomères et de phosphates polymères ou monomères, et sels 10 cationiques inorganiques ou organiques pharmaceutiquement acceptables desdites substances. Il est également proposé dans le brevet américain N'US 6203778 un procédé caractérisant une 15 propriété de l'espace extravasculaire d'un tissu utilisant le contraste particulaire opaque aux rayons X. Ce document décrit une nouvelle classe d'agents particulaires consistant en un noyau organique ou inorganique entouré d'un revêtement organique du type polyéthylène glycol, 20 acide glucuronique, acide sialique, ou des mélanges de ces polymères. Mais les produits et les procédés de l'art antérieur présentent un certain nombre d'inconvénients. En 25 effet, les particules sont souvent instables ou présentent une durée de vie limitée et les procédés de fabrication de ces particules constituent des cots très importants. Les inventeurs ont maintenant préparé des 30 microparticules qui peuvent être utilisées comme agent de contraste et qui ne présentent pas les inconvénients des produits de l'art antérieur. En effet, les microparticules de l'invention offrent l'avantage d'être particulièrement échogènes et apparaissent résistantes à un champ ultrasonore prolongé, c'est-à-dire qu'elles présentent des performances remarquables vis-à-vis du phénomène d'insonification. Ce but est atteint grâce à des microparticules d'une taille comprise entre 0,1 m (micromètre) et 2000 tm et constituées d'un réseau macromoléculaire de polymères et/ou de copolymères hydrophiles. La propriété d'échogénicité est non évidente pour l'homme du métier. 10 Avantageusement, lesdits polymères et copolymères hydrophiles comprennent des fonctions alcools, amines ou acides. Selon un premier mode d'exécution de l'invention, les microparticules présenteront une taille variant de 0,1 fm à 10 xm, de préférence entre 1 tm et 7 nm. Dans ce cas, ces microparticules seront utilisées en tant que produit de contraste échographique. 20 Selon un second mode d'exécution de l'invention, les microparticules présenteront une taille variant de 30 fm à 2000 tm. Dans ce cas, ces microparticules seront utilisées dans la visualisation de l'embolie par 25 échographie. Ces microparticules seront susceptibles de constituer: - un implant pour occlusion vasculaire, pour le comblement de cavités naturelles, pour le comblement de cavités artificielles ou pour le comblement de cavités 30 chirurgicales; - un biomatériau de reconstruction tissulaire. Les deux modes de réalisation des microparticules selon l'invention pourront être utilisés pour la préparation d'un agent de contraste pour l'exploration ultrasonique. Les microparticules présentant une taille variant de 30 pm à 2000 m pourront être utilisées en tant que particule d'embolisation destinée au traitement des cancers. Les polymères et les copolymères qui constituent le réseau macromoléculaire de la particule sont de préférence des dérivés fonctionnalisés et/ou hydrophiles comme par exemple des dérivés alcools, des amines ou des 15 acides. Ces polymères et copolymères sont choisis dans l'un au moins des groupes comprenant: - les polymères ou copolymères acrylates et 20 méthacrylates, et leurs dérivés, sels, esters, amides, anhydrides, nitriles, comme par exemple, le DEAE acrylamide, l'acrylamide, l'acide acrylique, l'acrylate de sodium, l'hydroxyethyl acrylate ou méthacrylate; - les polymères et copolymères vinyliques et 25 leurs dérivés, comme par exemple acétate de vinyle, la vinyle pyridine, les vinyles sulfonâtes ou phosphates, vinyle pyrrolidone; - les polymères et copolymères d'éthylène glycol et ses dérivés; - les polymères et copolymères de sulfonate de styrène ou phosphonate de styrène et leurs dérivés; - les polymères et copolymères des acides polycarboxyliques tels que les acides fumariques, maléiques, maliques, succiniques, citriques, leurs sels, esters, amides, anhydrides, nitriles; - les polymères et copolymères de polyéthylimine, et ses dérivés; - les polymères et copolymères de polyvinyle sulfonate et le polyvinyle phosphonate, et leurs dérivés; - les polymères et copolymères de polyalcool vinylique, et leurs dérivés; - les polymères et copolymères de polyvinyles 10 pyridines, leurs sels, et leurs dérivés; - les polymères et copolymères de polyvinyle pyrrolidone, et leurs dérivés. De préférence, les microparticules de l'invention présentent un diamètre variant entre 1 micromètre (Um) et 10 micromètres ( Selon un mode d'exécution préféré de 20 l'invention, les microparticules sont constituées de Nacryloyl-tris(hydroxyméthyl)méthylamine, également dénommé Trisacryl, et de méthylène-bisacrylamide (MBA). Les travaux de recherche réalisés dans le cadre 25 de l'invention ont permis de mettre en évidence les propriétés d'échogénicité particulièrement intéressantes des microparticules citées ci-dessus. L'invention a également pour objet une 30 composition pour l'exploration ultrasonique comprenant les microparticules selon l'invention et un milieu suspendant. Le milieu suspendant pourra consister en un mélange d'eau stérile et de glycérol ou de sérum physiologique. Par ailleurs, les microparticules sont présentes dans la composition pour une concentration comprise entre 0,25 gramme par litre (g.1-1) et 16 grammes par litre (g 11) L'invention a donc aussi pour objet, l'utilisation des microparticules citées ci-dessus pour la préparation d'une composition pour l'exploration ultrasonique dans laquelle lesdites microparticules constituent l'agent de contraste. 15 Les agents de contraste selon l'invention et les compositions les contenant sont utiles pour l'exploration ultrasonique du corps humain ou animal et plus particulièrement dans le cadre de l'étude de la 20 vascularisation. Ainsi, l'invention s'intéresse également à un procédé d'investigation des vaisseaux sanguins et de certains organes ou parties d'un corps humain ou animal, 25 tels que le coeur, par échographie standard, consistant en les étapes suivantes: - administration au sujet/patient d'une dose de 0,25 à 16 grammes de microparticules par voie sanguine, - émission d'ondes ultrasonores au niveau de 30 la région investiguée, - réception des retours d'ondes ultrasonores provenant des microparticules énoncées précédemment, - réalisation d'opération de calcul grâce à un moyen de traitement, tels qu'un ordinateur, pour l'obtention d'au moins une image de la zone du corps humain ou animal investiguée. De la même manière, dans le cas des 5 microparticules présentant une taille variant entre 30 Ftm et 2000 ptm, l'invention concerne également un procédé d'investigation de l'embolisation de vaisseaux sanguins, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes: - administration par voie sanguine au 10 sujet/patient d'une dose de 0.1 à 20 ml des susdites microparticules, - émission d'ondes ultrasonores au niveau de la région investiguée, - réception des retours d'ondes ultrasonores 15 provenant des microparticules énoncées précédemment, - réalisation d'opération de calcul grâce à un moyen de traitement, tels qu'un ordinateur, pour l'obtention d'au moins une image de la zone du corps humain ou animal investigué. 20 L'invention se rapporte également à un procédé de fabrication des microparticules ci-dessus comprenant les étapes suivantes: - réalisation d'une émulsion inverse de 25 monomères identiques ou différents, ou polymères identiques ou différents dans une phase organique comportant ou non un tensioactif, - copolymérisation ou réticulation de la susdite émulsion agitée pour obtenir les microparticules 30 de polymères ou copolymères définies précédemment. L'étape de réticulation des chaînes de polymères consistera à réaliser grâce à un réactif lesdites microparticules, le ou lesdits polymère(s) étant choisi(s) parmi la liste suivante: - les polymères ou copolymères acrylates et méthacrylates, et leurs dérivés, sels, esters, amides, 5 anhydrides, nitriles, comme par exemple, le DEAE acrylamide, l'acrylamide, l'acide acrylique, l'acrylate de sodium, l'hydroxyethyl acrylate ou méthacrylate; - les polymères et copolymères vinyliques et leurs dérivés, comme par exemple acétate de vinyle, la 10 vinyle pyridine, les vinyles sulfonâtes ou phosphates, vinyle pyrrolidone; - les polymères et copolymères d'éthylène glycol et ses dérivés; - les polymères et copolymères de sulfonate de 15 styrène ou phosphonate de styrène et leurs dérivés; - les polymères et copolymères des acides polycarboxyliques tels que les acides fumariques, maléiques, maliques, succiniques, citriques, leurs sels, esters, amides, anhydrides, nitriles; - les polymères et copolymères de polyéthylène glycol ou le polyoxyéthylène, et leurs dérivés; - les polymères et copolymères de polyéthylimine, et ses dérivés; - les polymères et copolymères de polystyrène 25 sulfonate et le polystyrène phosphonate, et leurs dérivés; - les polymères et copolymères de polyvinyle sulfonate et le polyvinyle phosphonate, et leurs dérivés; les polymères et copolymères de polyalcool 30 vinylique, et leurs dérivés; - les polymères et copolymères de polyvinyles pyridines, leurs sels, et leurs dérivés; - les polymères et copolymères de polyvinyle pyrrolidone, et leurs dérivés. De la même manière, le réactif permettant la réticulation du ou des susdit(s) polymère(s) appartiendra à la liste suivante: - composés dialdéhydes, comme par exemple la 5 glutaraldéhyde pour réticuler des chaînes de PVA, et leurs dérivés..., - composés dérivés di-poly acides/amines/alcools permettant une réaction d'estérification avec une fonction complémentaire se 10 trouvant sur la chaîne du polymère, composés dérivés di-poly isocyanates utilisés par exemple dans la réticulation des chaînes de polyéthylène glycol. Selon une possibilité offerte par l'invention, le réactif permettant la réticulation du ou des susdit(s) polymère(s) pourra consister en un réactif (ou agent de couplage) permettant la réticulation en faisant réagir deux fonctions se trouvant sur deux chaînes de polymère 20 différentes, comme par exemple la réticulation entre deux chaînes peptidiques ou protéiniques, soit la réticulation de chaînes de sérum albumine humaine en utilisant de l'EDC (1-[3-(Dimnéthylamino)propyl]-3-éthylcarbodiimide hydrochloride). Le procédé de fabrication pourra également consister en une copolymérisation d'agents monomères et d'agents monomères réticulant. Dans ce cas, les monomères pourront consister en 30 un ou plusieurs monomère(s) choisi(s) parmi les familles de composés suivants: - monomères acrylates et méthacrylates, et leurs dérivés, sels, esters, amides, anhydrides, nitriles,...comme par exemple, le DEAE acrylamide, l'acrylamide, l'acide acrylique, l'acrylate de sodium, l'hydroxyethyl acrylate ou méthacrylate, - monomères vinyliques et leurs dérivés, comme par exemple acétate de vinyle, la vinyle pyridine, les vinyles sulfonâtes ou phosphates, vinyle pyrrolidone, - monomères d'éthylène glycol et leurs dérivés, - monomères de sulfonate de styrène ou phosphonate de styrène et leurs dérivés. 10 L'agent réticulant pourra quant à lui consister en toute substance ayant au moins deux fonctions polymérisables sur la même molécule, comme par exemple du N,N' méthylène-bisacrylamide (MBA), éthylène glycol 15 diméthacrylate (EGDM) ou du divinyl benzène. D'autre part, les initiateurs de polymérisation, ou agent réticulant, peuvent être choisi parmi la liste ci-dessous: - 2, 2'- Azobis (2-amidinopropane)dihydrochloride, AIBN (2, 2'Azobisisobutyronitrile), 2, 2'- Azobis(2-méthyl-N-(2hydroxyéthyl) propionamide), persulfate de potassium, peroxyde ou système redox du type H202 et fer. 25 Selon une variante du procédé de fabrication des microparticules selon l'invention, le procédé de fabrication des microparticules pourra consister à modifier une chaîne de polymère existante, en y greffant 30 par exemple des fonctions polymérisables, puis en les faisant réagir de manière à obtenir une liaison C-C (carbone- carbone) de couplage entre les chaînes de polymère. titre d'exemple, il pourra être envisagé de greffer une fonction acrylate sur une chaine de PVA et de réticuler ces chaînes au moyen d'un système redox à base de fer ou de persulfate. D'autres avantages et caractéristiques de 5 l'invention apparaîtront dans les exemples ci-après concernant la préparation des microparticules de l'invention et leur utilisation comme agent de contraste dans des méthodes d'exploration ultrasonique. Il sera fait référence dans ces exemples aux dessins en annexe 10 dans lesquels: - la figure 1 est un diagramme illustrant l'échogénicité des microparticules selon l'invention, pour diverses concentrations, en fonction de la fréquence; - la figure 2 illustre la puissance des 15 spectres de rétrodiffusion des microparticules selon l'invention pour les différentes concentrations exprimées ci-dessus; - la figure 3 est un diagramme illustrant la variation de la puissance renvoyée par les microparticules 20 selon l'invention pour une puissance d'émission à 10 MHz en fonction du temps; la figure 4 illustre l'influence d'une insonification ultrasonore à 10 kHz de fréquence de répétition pour un même échantillon de microparticules en 25 fonction de deux durées de temps. Exemple 1: Fabrication des microparticules selon l'invention. Il existe plusieurs modes opératoires pour 30 réaliser les microparticules sphériques présentant la taille requise, soit une taille comprise entre 0,1 et 10 micromètres (Ulm). Ainsi, la taille des microparticules dépend de plusieurs paramètres dont les principaux sont la vitesse d'agitation, la concentration de tensioactif et le rapport de viscosité entre les deux milieux qui sont la phase monomère (phase aqueuse) et la phase continue (phase organique). Nous allons décrire dans la suite un exemple de fabrication de microparticules selon l'invention grâce à une polymérisation en miniémulsion qui se caractérise par des vitesses d'agitation très élevées, et une concentration de tensioactif supérieure à la 10 polymérisation en suspension pour former une pré-émulsion. La polymérisation s'effectue donc ensuite sur cette préémulsion. On introduit un litre d'huile de paraffine et 4 15 millilitres de Sorbitan trioleate dans un réacteur de deux litres. Cette solution est portée à la température de 45 WC (Celsius) sous très forte agitation et une solution aqueuse de 125 grammes (g) de trisacryl, 29 g de Methylene Bis-acrylamide et 2,51 g de 2,2'-Azobis(2-amidino-propane) 20 dihydrochloride (ou V-50) sont introduits. Après quinze minutes, cette émulsion est portée à la température de 80 OC pendant quatre heures. La dispersion résultante est lavée à l'hexane et séchée. Les microparticules sont ensuite re-dispersées dans une solution saline. 25 Pour fabriquer des microparticules présentant une taille comprise 30 micromètres (gym) et 2000 Ftms pour leur utilisation dans la visualisation de l'embolie vasculaire par échographie, nous présentons ci-après deux 30 modes opératoires; l'un pour réaliser des microparticules à base de trisacryl avec gélatine porcine et l'autre pour réaliser des microparticules à base de sodium acrylate. Pour les microparticules à base de trisacryl avec gélatine porcine, on utilise un bécher de 10 litres. on verse 4 litres d'huile de paraffine, 4 ml de Sorbitan trioleate et on chauffe au bain marie entre 54 C et 60 C (Celsius). Dans un bécher de 1 litre, on pèse 87 g de chlorure de sodium et 40.8 g d'acétate de sodium. On les met en solution dans 300 ml d'eau déminéralisée. On ajoute ensuite 400 ml de Glycérine et les différents monomères le 10 Trisacryl (90 grammes), le DEAE Acrylamide (35 grammes) et du Méthylène Bis Acrylamide (10 grammes). D'autre part, la gélatine est mise en suspension dans 120 ml d'eau ultra pure et chauffée à 60 C. Lorsque les monomères sont dissous, on ajoute la 15 solution de gélatine et 1,4 g de persulfate d'ammonium, préalablement dissout dans 20 ml d'eau ultra pure. La phase monomère est ensuite coulée dans la phase huileuse à 60 C sous agitation. On verse ensuite 4 ml de N, N, N', N' tétraéthylméthanediamine (TEMED) dans l'émulsion. Les microparticules sont ensuite récupérées par décantation et lavées soigneusement. Ces microparticules sont alors traitées avec de la glutaraldéhyde et lavées plusieurs fois à 60 et 90 C. Puis on les tamise et stérilise à la vapeur en 25 milieu tamponné. Pour les microparticules à base de sodium acrylate, on utilise également un bécher de 10 litres. L'opérateur verse 4 litres d'huile de paraffine, 4 ml de 30 Sorbitan trioleate et on chauffe au bain marie à une température comprise entre 54 C et 60 C. Dans un bécher de 1 litre, on pèse 87 g de chlorure de sodium et 40.8 g d'acétate de sodium. On les met en solution dans 300 ml d'eau déminéralisée. On ajoute ensuite 400 ml de Glycérine. On ajoute du sodium acrylate (104 g) et du Méthylène Bis Acrylamide (27.5 g). Lorsque les monomères sont dissous, on ajoute la solution de gélatine et 1,4 g de persulfate d'ammonium, 5 préalablement dissout dans 20 ml d'eau ultra pure. La phase monomère est ensuite coulée dans la phase huileuse à 60 0C sous agitation. On verse ensuite 4 ml de TEMED dans l'émulsion. Les microparticules sont ensuite récupérées par 10 décantation et lavées soigneusement. Puis on les tamise et stérilise à la vapeur en milieu tamponné. Exemple 2: Utilisation ou mise en òuvre des microparticules Lorsqu'un patient nécessite un examen échographique-Doppler classique, la procédure est la suivante: - la sonde est placée en contact avec la peau 20 du patient à l'endroit o doit être effectué l'examen. Un gel échographique est préalablement étalé sur la surface de la sonde afin d'assurer une bonne transmission du faisceau ultrasonore entre la sonde et les tissus, la profondeur de mesure ainsi que le gain 25 bidimensionnel de l'échographe sont respectivement réglés suivant la profondeur o se situe l'organe d'intérêt et le contraste de l'image obtenue, - lorsque l'organe d'intérêt est repéré sur l'image, l'examinateur procède à la mesure des dimensions 30 de l'organe sur image arrêtée. Généralement un cliché photographique est imprimé et l'image est stockée numériquement, - si une visualisation des vaisseaux est nécessaire, le mode Doppler est activé. Apparaît alors un secteur sur l'image qui est correctement positionné par l'opérateur afin de le superposer au niveau du vaisseau d'intérêt, - la vitesse maximale mesurable est réglée par l'opérateur de sorte à ne pas générer des erreurs de mesure ( titre d'exemple, l'échographie permet une analyse descriptive de la morphologie et de la structure de la thyrode. Elle permet d'apprécier: * les dimensions de chaque lobe (hauteur, épaisseur et largeur) ; * ses contours; * d'éventuels nodules et d'étudier leurs caractéristiques (échostructure, échogénicité) ; * les aires ganglionnaires: taille, aspect et 25 situation d'éventuelles adénopathies; * les éventuelles compressions et déformations des organes de voisinage; et éventuellement, elle permet * d'étudier la vascularisation thyrodienne * de guider la cytoponction d'un nodule thyrodien non ou mal palpable. Pour ce type d'investigation, une sonde de haute fréquence (7,5 MHz ou plus) est indispensable pour obtenir une haute résolution spatiale (barrette linéaire de préférence). L'appareil doit avoir régulièrement une mise à jour technique et un contrôle de qualité. une sonde linéaire de grande taille, ou une sonde sectorielle 5 permettant l'étude des goitres plongeants et la mesure de la hauteur des lobes d'un goitre. On administre au patient par voie sanguine les microparticules préférentiellement directement là o 10 l'échographie doit être réalisée. La dose administrée est variable en fonction du patient. Pour un petit animal tel qu'une souris, on administrera par exemple 0,2 millilitre d'une émulsion présentant une concentration de 0,08 grammes de microparticules selon l'invention dans 40 15 millilitres de milieu suspendant, soit une concentration de 2 grammes de microparticules par litre de milieu suspendant. Le milieu suspendant sera par exemple constitué d'eau stérile et de glycérol ou de sérum physiologique, ne contenant bien entendu aucun élément 20 rétrodiffusant. 3) Résultat et études in vitro relatives aux propriétés échogènes des microparticules selon l'invention Comme cela est visible sur la figure 1, sept 25 dilutions de microparticules ont été étudiées, soit 1/512, 1/256, 1/128, 1/64, 1/32, 1/16 et 1/8; ces dilutions étant calculées par rapport à une concentration initiale fixée à 5 grammes de microparticules selon l'invention dans 40 millilitres de milieu suspendant. 30 Le graphe de la figure 1 représente les différentes courbes pour chacune des susdites concentrations en fonction de la fréquence. Ainsi, comme on peut le remarquer sur cette figure, chaque courbe présente un pic de rehaussement présentant un maximum sensiblement pour la valeur de la fréquence d'émission égale à 10 MHz. Le graphe de la figure 2 représente plus clairement ce pic de rehaussement à 10 MHz pour chacune des concentrations. Les résultats, présentés ci-dessus, montrent que l'échogénicité des microparticules selon l'invention augmente avec le nombre de ces particules 10 présentes dans la suspension. Une augmentation non négligeable de 5 décibels (dB) est d'ailleurs obtenue pour la plus faible concentration étudiée (1/512 soit 0.Olg/mL). De plus, nous obtenons un rehaussement du signal de l'ordre de 15 dB pour la concentration de 1/64 15 (soit 0.08g/4OmL). Il a ensuite été testé les propriétés des microparticules vis-à-vis du phénomène d'insonification. Pour ce faire, il a été utilisé la concentration maximale 20 étudiée à savoir 1/8ème. Durant ce protocole, les microparticules présentes dans la suspension ont été insonifiées avec une onde de 10 MHz avec une fréquence de répétition de 1 kHz. 25 Les mesures de rétrodiffusion ont été relevées à différents intervalles de temps. Les résultats de ces mesures sont présentés sur la figure 3. Il a été observé que la rétrodiffusion 30 ultrasonore ne varie pas de manière significative dans le temps lorsque les microparticules de l'invention sont soumises à un champ ultrasonore et ce de manière prolongée. En conséquence, il apparaît que les microparticules n'ont pas été altérées ou détruites sous l'effet d'une insonification d'énergie donnée et prolongée. Compte tenu des résultats précédents, il a été 5 décidé de poursuivre l'étude pour une énergie ultrasonore émise plus élevée. L'amplitude de l'onde émise ayant été réglée sur l'émetteur à son niveau maximal, nous avons augmenté la fréquence de répétition de l'onde à 10 kHz. De cette sorte, la puissance ultrasonore transmise aux 10 particules est globalement plus importante pour un intervalle de temps équivalent. Comme cela est visible sur la figure 4, il apparaît que le niveau maximal disponible de puissance 15 émise n'est pas suffisant pour détruire, même partiellement, les microparticules. En effet, la puissance recueillie 90 minutes après le début du protocole est identique à celle relevée seulement 1,45 minute après le début de l'insonification. Enfin, il a été choisi de tester l'influence du taux de cisaillement sur la résistance des microparticules. Ainsi, dans ce test, l'onde n'a étéémise qu'au moment d'effectuer la mesure; deux mesures ayant 25 été relevées, à 1,45 minute et 90 minutes après le déclenchement de la circulation de la suspension. Comme pour l'influence d'une insonification ultrasonore prolongée, nous n'observons aucune variation 30 significative de la rétrodiffusion ultrasonore des microparticules lorsque celles-ci sont soumises à un champ de cisaillement constant et durable. Ainsi, il peut être conclu que les microparticules sont non seulement résistantes à l'onde ultrasonore employée mais également à un champ mécanique de cisaillement. Des tests de stabilité ont été réalisés in vitro 5 sur les microparticules de l'invention. Ces microparticules ont été soumises à un champ de cisaillement et à un champ ultrasonore tous deux appliqués de façon prolongée, l'échogénicité des microparticules est demeurée constante pendant toute la durée de l'expérience 10 c'est-à-dire deux heures. A l'inverse, le Levovist est beaucoup moins stable: le pic de rehaussement se produit quasi instantanément après l'injection du produit pour ensuite diminuer progressivement jusqu'à complète disparition lOmn après l'injection. Ce dernier point est 15 un facteur limitant lors d'un examen échographique. Ces tests et études ont permis de mettre en évidence le caractère échogène des microparticules selon l'invention. Par ailleurs, ces microparticules 20 apparaissent résistantes à la fois à un champ ultrasonore et à un champ de cisaillement appliqués de manière prolongée. REVENDICATIONS 1. Microparticules d'une taille comprise entre 0,1 jm (micromètre) et 2000 tm et constituées d'un réseau 5 macromoléculaire de polymères et/ou de copolymères hydrophiles. 2. Microparticules selon la revendication 1, caractérisées en ce que lesdits polymères et copolymères 10 hydrophiles comprennent des fonctions alcools, amines ou acides. 3. Microparticules selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisées en ce que les 15 polymères et les copolymères sont choisis parmi l'un au moins des groupes comprenant: - les polymères ou copolymères acrylates et méthacrylates, et leurs dérivés, sels, esters, amides, anhydrides, nitriles, comme par exemple, le DEAE 20 acrylamide, l'acrylamide, l'acide acrylique, l'acrylate de sodium, l'hydroxyethyl acrylate ou méthacrylate; - les polymères et copolymères vinyliques et leurs dérivés, comme par exemple acétate de vinyle, la vinyle pyridine, les vinyles sulfonâtes ou phosphates, 25 vinyle pyrrolidone; - les polymères et copolymères d'éthylène glycol et ses dérivés; - les polymères et copolymères de sulfonate de styrène ou phosphonate de styrène et leurs dérivés; - les polymères et copolymères des acides polycarboxyliques tels que les acides fumariques, maléiques, maliques, succiniques, citriques, leurs sels, esters, amides, anhydrides, nitriles; - les polymères et copolymères de polyéthylimine, et ses dérivés; - les polymères et copolymères de polyvinyle sulfonate et le polyvinyle phosphonate, et leurs dérivés; 5 les polymères et copolymères de polyalcool vinylique, et leurs dérivés; les polymères et copolymères de polyvinyles pyridines, leurs sels, et leurs dérivés; - les polymères et copolymères de polyvinyle 10 pyrrolidone, et leurs dérivés. 4. Microparticules selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisées en ce qu'elles sont constituées de N-acryloyltris(hydroxyméthyl)méthylamine, 15 également dénommé Trisacryl, et de méthylène-bisacrylamide (MBA). 5. Microparticules selon l'une des revendications 1 à 4 caractérisées en ce qu'elles 20 présentent un diamètre variant entre 1 micromètre (Im) et micromètres (htm), de préférence compris entre 1 pm et 7 m. 6. Microparticules selon l'une des revendications 1 à 4 caractérisées en ce qu'elles présentent un diamètre compris entre 30 micromètres (tm) et 2000 micromètres (tm). 7. Agent de contraste pour l'exploration 30 ultrasonique, caractérisé en ce qu'il est constitué de microparticules selon l'une quelconque des revendications 1 à 6. 8. Composition pour l'exploration ultrasonique comprenant les microparticules selon l'une des revendications 1 à 6 et un milieu suspendant. 9. Composition selon la revendication 8, caractérisé en ce que le milieu suspendant consiste en un mélange d'eau stérile et de glycérol ou de sérum physiologique. 10. Composition selon la revendication 9, caractérisé en ce que les microparticules sont présentes dans ladite composition à une concentration comprise entre 0,25 gramme par litre (g.l1-) et 16 grammes par litre (g.l1). 11. Utilisation de microparticules selon l'une quelconque des revendications 1 à 6 pour la préparation d'un agent de contraste pour l'exploration ultrasonique. 12. Utilisation de microparticules selon la revendication 6 pour la préparation d'une composition d'embolisation destinée au traitement des cancers. 13. Procédé de fabrication des microparticules 25 selon les revendications 1 à 6, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes: réalisation d'une émulsion inverse de monomères identiques ou différents, ou polymères identiques ou différents dans une phase organique 30 comportant un tensioactif, - copolymérisation ou réticulation de la susdite émulsion agitée pour obtenir les microparticules de polymères ou copolymères selon l'une des revendications 1 à 6. 14. Procédé de fabrication de microparticules selon la revendication 13, caractérisé en ce que l'étape de polymérisation est réalisée grâce à un réactif, le ou 5 lesdits polymère(s) étant choisi(s) parmi la liste suivante: - les polymères ou copolymères acrylates et méthacrylates, et leurs dérivés, sels, esters, amides, anhydrides, nitriles, comme par exemple, le DEAE 10 acrylamide, l'acrylamide, l'acide acrylique, l'acrylate de sodium, l'hydroxyethyl acrylate ou méthacrylate; - les polymères et copolymères vinyliques et leurs dérivés, comme par exemple acétate de vinyle, la vinyle pyridine, les vinyles sulfonâtes ou phosphates, 15 vinyle pyrrolidone; - les polymères et copolymères d'éthylène glycol et ses dérivés; - les polymères et copolymères de sulfonate de styrène ou phosphonate de styrène et leurs dérivés; - les polymères et copolymères des acides polycarboxyliques tels que les acides fumariques, maléiques, maliques, succiniques, citriques, leurs sels, esters, amides, anhydrides, nitriles; - les polymères et copolymères de polyéthylène 25 glycol ou le polyoxyéthylène, et leurs dérivés; - les polymères et copolymères de polyéthylimine, et ses dérivés; - les polymères et copolymères de polystyrène sulfonate et le polystyrène phosphonate, et leurs 30 dérivés; - les polymères et copolymères de polyvinyle sulfonate et le polyvinyle phosphonate, et leurs dérivés; - les polymères et copolymères de polyalcool vinylique, et leurs dérivés; - les polymères et copolymères de polyvinyles pyridines, leurs sels, et leurs dérivés; - les polymères et copolymères de polyvinyle pyrrolidone, et leurs dérivés. 15. Procédé de fabrication de microparticules selon la revendication 14, caractérisé en ce que le réactif, permettant la polymérisation du susdit ou des susdit polymère, appartient à la liste de composés 10 suivants: composés dialdéhydes, comme par exemple la glutaraldéhyde pour réticuler par exemple du PVA, et leurs dérivés..., - composés dérivés di-poly acides/amines/alcools permettant une réaction d'estérification avec une fonction complémentaire se trouvant sur la chaîne du polymère, - composés dérivés di-poly isocyanates utiliser par exemple dans la réticulation des chaînes de 20 polyéthylène glycol. 16. Procédé de fabrication de microparticules selon la revendication 15, caractérisé en ce que le susdit réactif consiste en un réactif permettant la réticulation 25 en faisant réagir deux fonctions se trouvant sur deux chaînes de polymère différentes, comme par exemple la réticulation entre deux chaînes peptidiques ou protéiniques, soit la réticulation de chaînes de sérum albumine humaine en utilisant de l'EDC (1-[330 (Diméthylamino) propyl]-3-éthylcarbodiimide hydrochloride). 17. Procédé de fabrication des microparticules selon les revendications 1 à 6, caractérisé en ce qu'il consiste en une copolymérisation d'agent monomères et d'agents réticulant. 18. Procédé de fabrication des microparticules 5 selon la revendication 17, caractérisé en ce que les monomères consistent en un ou plusieurs monomère(s) choisi(s) parmi les familles de composés suivants: - monomères acrylates et méthacrylates, et leurs dérivés, sels, esters, amides, anhydrides, 10 nitriles,...comme par exemple, le DEAE acrylamide, l'acrylamide, l'acide acrylique, l'acrylate de sodium, l'hydroxyéthyl acrylate ou méthacrylate, - monomères vinyliques et leurs dérivés, comme par exemple acétate de vinyle, la vinyle pyridine, les 15 vinyles sulfonâtes ou phosphates, vinyle pyrrolidone, - monomères d'éthylène glycol et leurs dérivés, - monomères de sulfonate de styrène ou phosphonate de styrène et leurs dérivés. 20 19. Procédé de fabrication des microparticules selon la revendication 17, caractérisé en ce que l'agent réticulant consiste en toute substance ayant au moins deux fonctions polymérisables sur la même molécule, comme par 25 exemple du N,N' méthylène-bisacrylamide (MBA), éthylène glycol diméthacrylate (EGDM) ou du divinyl benzène. 20. Procédé de fabrication des microparticules selon la revendication 17, caractérisé en ce que l'agent 30 réticulant, ou initiateur de polymérisation, consiste en un agent choisi parmi la liste suivante: - 2, 2'- Azobis (2-amidinopropane)dihydrochloride, AIBN (2, 2'Azobisisobutyronitrile), 2, 2'- Azobis(2-méthyl-N-(2hydroxyéthyl)propionamide), persulfate de potassium, peroxyde ou système redox du type H202 et fer. 21. Procédé de fabrication des microparticules 5 selon les revendications 1 à 5, caractérisé en ce qu'il consiste à modifier une chaîne de polymère existante, en y greffant par exemple des fonctions polymérisables, puis en les faisant réagir de manière à obtenir une liaison C-C (carbone- carbone) de couplage entre les chaînes de 10 polymère. - 2, 2'- Azobis (2-amidinopropane)dihydrochloride, AIBN (2, 2'Azobisisobutyronitrile), 2, 2'- Azobis(2-méthyl-N-(2hydroxyéthyl) propionamide), persulfate de potassium, peroxyde ou système redox du type H202 et fer. 23. Procédé de fabrication des microparticules selon les revendications 1 à 5, caractérisé en ce qu'il consiste à modifier une chaîne de polymère existante, en y 10 greffant par exemple des fonctions polymérisables, puis en les faisant réagir de manière à obtenir une liaison C-C (carbonecarbone) de couplage entre les chaînes de polymère.