FR 2845993 A1 20040423 FR 0212886 A 20021016 z-Z JT SS\ 'z = z z o z o z LE! À % JC Z %- -- - 1 DESCRIPTION La présente invention concerne le domaine de la chimie organique de synthèse appliquée au domaine pharmaceutique et a pour objet de nouveaux composés pharmacologiquement actifs, les compositions pharmaceutiques les contenant ainsi que leurs utilisations pharmaceutiques. 5 Ces nouveaux composés sont susceptibles de sélectivement inhiber la PDE5 et sont donc susceptibles de présenter de ce fait des propriétés vasodilatatrices avec la particularité de ne pas présenter d'effet antiagrégant. La présente invention concerne plus précisément 10 l'identification, la purification et la caractérisation de deux sous-types d'enzymes qui hydrolysent spécifiquement le GMP cyclique (Phosphodiestérases des nucléotides cycliques de type 5, PDE5) dans le muscle lisse vasculaire et dans les plaquettes sanguines. Elle concerne également la mise en évidence de leur 15 localisation tissulaire spécifique, de leurs différences structurales et de leur sensibilités différentes à des substances pharmacologiques. Ces différences ont pour conséquence de pouvoir inhiber de façon spécifique l'hydrolyse de GMPc dans le muscle lisse de façon à obtenir un effet relaxant à des concentrations qui n'agissent pas sur la PDE5 des plaquettes. Jusqu'à cette 20 invention, les PDE5 du muscle lisse et des plaquettes étaient considérées comme identiques, caractérisées par la même sensibilité aux composés pharmacologiques, notamment au Viagra( de la société Pfizer récemment mis sur le marché. Les composés selon l'invention permettent notamment de 25 cibler spécifiquement du point de vue thérapeutique, soit l'hypertension artérielle et/ou l'hypertension pulmonaire, soit l'impuissance sexuelle sans potentialiser des traitements anti-agrégants couramment utilisés dans l'insuffisance cardiaque, ce en inhibant spécifiquement la PDE5 du muscle lisse. On sait que le GMP cyclique (GMPc) joue un rôle majeur dans le contrôle de la vasodilatation et de l'agrégation plaquettaire. Ce nucléotide cyclique est spécifiquement dégradé par une enzyme appelée lors de sa caractérisation GMPc-PDE (Lugnier et coll., 1986), puis PDE V et dans la nouvelle nomenclature, PDE5. -2 Le premier inhibiteur spécifique décrit pour cette enzyme, est le composé M&B 22948 (Lugnier et coll., 1986) appelé maintenant zaprinast. Il inhibe de la même façon les PDE5 issues de muscles lisses vasculaires et pulmonaires que celles issues des plaquettes sanguines. C'est ce composé 5 qui a servi de point de départ pour concevoir le principe actif connu sous la désignation de sildénafil, principe actif du VIAGRA qui agit de façon semblable sur les PDE5 issues des divers tissus. En effet, les seules études actuellement accessibles concernant la synthèse d'inhibiteur de PDE5 ont été menées sur la PDE5 de poumon de 10 boeuf qui ont permis de développer à partir de la structure chimique du zaprinast de nouvelles molécules mille fois plus puissantes (Ki = 4 nM) et très spécifiques comme le DMPPO (Glaxo) et ledit sildénafil (Pfizer) qui agissent également sur le corps caverneux, cette dernière molécule ayant été commercialisée par la société Pfizer pour le traitement de l'impuissance 1 5 sexuelle. Le problème posé à la présente invention est par conséquent de proposer de nouveaux composés pharmacologiques agissant comme inhibiteurs sélectifs de la PDE5 du muscle lisse notamment vasculaire, dont l'activité sur cette PDE5 soit au moins 10 fois plus puissante que celle sur 20 la PDE5 plaquettaire. A cet effet il a été procédé à la différenciation biochimique, physicochimique et structurale des PDE5 vasculaires et plaquettaires conduisant à l'élaboration de familles d'inhibiteurs nouvellement synthétisés, qui de manière inattendue et surprenante sont 50 fois plus 25 puissants sur la PDE5 vasculaire que sur la PDE5 plaquettaire, 60 fois plus puissants que le VIAGRA en présentant une constante d'inhibition (Ki) de 32pM. Elle a donc pour premier objet les six familles principales de composés dont les formules sont: -3 R2 R7 NNN N R7N N N N R7N RN X R6,R I N N N N 0/:{ R1 O R1 11O O R1 R7 NX N N N R7 N N N R /N \N N " N N N"N N N "N N N I f R1 Rs R4 IV R4 V R4 VI dans lesquelles: R5 - R8, R, R, R1, R R13 R9, R23, R24, R25 et R26 qui peuvent être identiques ou différents, représentent un proton, un groupe alkyle, un groupe alkyle substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène, un groupe acyle, un groupe acyle substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène, un groupe hydrocarboné comportant une ou plusieurs 10 liaisons éthyléniques, un groupe aralkyle, un groupe aryle, un groupe hydrocarboné qui peut être insaturé et/ou comporter un ou plusieurs hétéroatomes; - R,, R5, R6 et R7 qui peuvent être identiques ou différents, représentent un proton, OR8, NR9R10, X'SO2Rll, X2SO2(X3R12), SOnR13, SO2(NR14R15), X4P(Y1)(X R6)(X6R17), X7P(Y2)(X8R18)R9, P(Y3)(X9R2 )(X' R21), P(Y4)(XllR2)R3 et P(Y5)R24R25, n pouvant être égal à 0, 1 ou2; 12 14 15 16 17 18 2 21 2 -R R, R,R R R, R2,,R21 et R22 qui peuvent être identiques ou différents, représentent un proton, un groupe alkyle, un groupe alkyle substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène, un groupe hydrocarboné comportant une ou plusieurs liaisons éthyléniques, un groupe aralkyle, un groupe aryle, un groupe hydrocarboné qui peut être -4 insaturé et/ou comporter un ou plusieurs hétéroatomes, un groupe ammonium, un ion de formule M+I/v, dans laquelle M représente un métal et v est l'état de valence du métal M, ou un cation interne; - X1 à XI qui peuvent être identiques ou différents, représentent O, S ou NR24; - y, à Y5 qui peuvent être identiques ou différents, représentent O, S ou Se, et dans lesquelles - au moins deux groupements parmi R3, R4,, R R6 et R7 sont différents d'un proton; - si R1 et R2 sont des protons, R6 est différent de SO2R3, SO02(NR'4R15); - si 3 groupes parmi R3 R4, R5, R6 et R7 sont des protons, les 2 autres ne peuvent être OR8; - si R3 est un groupe méthoxy ou n-propyloxy et si R4, R5 et R7 sont des protons, le groupe R6 ne peut contenir le motif carbonyle-ct,3-insaturé, ne peut être NH2, une urée ou une thiourée. Plus particulièrement, les composés préférés selon l'invention présentent des structures o: - R, R2, 4, R5, et R7 sont des atomes d'hydrogène; - R3 est le groupe n-propyloxy; - R6 est le groupe NHC(O)CH2OCH2CH2OBn; o Bn est le groupe benzyle (-CH2C6H5) Par ailleurs, certaines des 6 structures précitées sont en équilibre lorsque Rl et/ou R2 sont des protons. La présente invention a encore pour objet l'utilisation d'au moins un composé selon l'invention en tant qu'inhibiteur spécifique de la PDE5 dans le muscle lisse. Elle a également pour objet l'utilisation pour l'obtention d'un médicament comprenant en tant que principe actif au moins un composé de formule générale I à VI selon l'invention pour le traitement préventif ou curatif d'une maladie nécessitant l'inhibition sélective de la PDE5 du muscle lisse. Enfin, la présente invention a encore pour objet un procédé de traitement ou de prévention comprenant l'administration à un mammifère d'une quantité efficace sur le plan thérapeutique d'au moins un composé de formule générale I à VI ou d'un dérivé pharmaceutiquement acceptable (sel, 10 ester...) dudit ou desdits composés selon la présente invention. L'invention sera mieux comprise, grâce à la description détaillée ci-après, qui se rapporte à un mode de réalisation préféré, donné à titre d'exemple non limitatif. Dans le cadre de la présente invention on a tout d'abord 15 procédé à la purification à homogénéité de la PDE5 de muscle lisse vasculaire d'aorte de boeuf et de la PDE5 de plaquettes humaines par chromatographie liquide échangeuse d'ions, par chromatographie d'affinité à l'aide d'un ligand spécifique et élution par un excès de GMIPc. Puis on a caractérisé les masses moléculaires par électrophorèse SDS-PAGE et 20 immunoempreinte à l'aide d'un anticorps anti-PDE5 de poumon de boeuf (Dr J. Corbin, Vanderbilt University, Nashville, USA), des PDE5 vasculaires et plaquettaires montrant que ces deux protéines ont des masses respectives de 90 kDa et 85 kDa. L'analyse MALDI-TOF des peptides trypsiques des PDE5 25 vasculaire et plaquettaire obtenus en comparaison avec les peptides contenus dans les banques de données indiquent que les protéines purifiées sont effectivement des PDE5 et que ces deux PDE5 diffèrent structurellement entre elles. Ces deux protéines purifiées de tissu vasculaire et de plaquettes 30 sanguines ont conduit à la détermination des composés selon l'invention, à savoir des inhibiteurs spécifiques de l'hydrolyse du GMIPc dans le muscle lisse ne pouvant agir aux mêmes concentrations sur les plaquettes. Ainsi il a été possible de déterminer de nouvelles molécules puissantes, dépourvues d'effets non désirés au niveau plaquettaire et limitant les effets indésirables 35 en travaillant sur ces deux protéines cibles à partir de l'inhibiteur archétype. De manière complètement surprenante et inattendue les inventeurs des composés conformes à la présente invention ont noté que ces -6 derniers présentaient l'avantage de dissocier l'effet inhibiteur de la PDE5 de muscle lisse par rapport à l'inhibition de la PDE5 de plaquette sur laquelle les nouveaux inhibiteurs n'agissent qu'à des concentrations 50 fois supérieures. Ceci a pour conséquence d'offrir la possibilité de soigner 5 l'hypertension artérielle ou pulmonaire, ainsi que l'impuissance sexuelle en évitant de potentialiser un traitement antiagrégant. Dans le cadre de la cristallisation bidimensionnelle de la PDE5, les inventeurs ont été amenés à greffer sur le composé NH2-zaprinast une chaîne d'ancrage qui a donné lieu à la synthèse d'inhibiteurs de PDE5 10 puissants et sélectifs de nomenclature suivante: 2-(2-benzyloxy-éthoxy)-N[3 -(7-oxo-6,7-dihydro- 1H[1,2,3]triazolo[4,5-d]pyrimidin-5-yl)-4-propoxyphényl] acétamide (composé 3) de formule: o I H HN N O 01N N. dont dérivent tous les composés revendiqués dont les formules générales ont été données plus haut. Exemple de synthèse et de caractérisation du composé 3 précité Un exemple de synthèse du composé 3 peut être résumé par le mode opératoire suivant: -7- H -N //N + o0 Exemple de synthèse du 2-(2-benzyloxy-éthoxy)-N-[3 -(7-oxo-6,7-dihydro1H[1,2,3]ltriazolo[4,5-dl pyrimidin-5-yl)-4-propoxy-phényl] acétamide 3. Un mélange d'acide 2-benzyloxy-éthoxy acétique 1 (50 mg, 0,24 mmol), d'aminozaprinast 2 (Knowles, Philip; Lunt, Edward; Marshall, Stuart Malcolm; Ford, Roger Edward. 8-Azapurin-6-ones. Ger. Offen. (1978), 45 pp. CODEN: GWXMBX DE 2747199 19780427 CAN 89:24359 10 AN 1978:424359; Knowles, Philip; Lunt, Edward,; Marshall, Stuart Malcolm; Ford, Roger Edward. Aza-8-purin-6-one derivatives. Patentschrift (Switz.) (1982), 9 pp. Division of Patentschrift (Switz.) Appl. No. 12,868. CODEN. SWXXAS CH 627755 A 19820129 CAN 97:23816 AN 1982:423816) (50mg, 0,17mmol), de N,N'-dicyclohexylcarbodiimide 15 (72 mg, 0,34 mmol) et de 4-diméthylaminopyridine (12 mg, 0,10 mmol) est agité pendant 5 heures à température ambiante dans 5 mL de THF anhydre. La solution est filtrée et le filtrat est réduit sous vide. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur silice (CH2Cl2/EtOH 10:0 à 9/1) pour conduire au composé 3 (47 mg, 57 %) sous forme d'un solide 20 légèrement jaune. Caractérisation du composé 3 Mp (point de fusion): 74-75 C 'H-RMN (CDCl3, 300MHz) ô 11,54 (s, 1H); 9,18 (s, 1H); 8,60 (d, J= 2,8 Hz, 1H); 7,78 (dd, J= 2,8 et 9,03 Hz, 1H); 7,38-7,25 (m, 5H); 6,92 -8 (d, J= 9,0 Hz, 1H); 4, 73 (s, 2H); 4,20 (s, 2H); 4,14 (t, J= 6,8 Hz, 2H); 3,88-3,85 (m, 2H); 3, 76-3,74 (m, 22H); 2,00 (m, 2H); 1,15 (t, J= 7,5 Hz, 3H). 13C-RMN (CDC13, 75 MHz) 8 168,95, 167,64; 155,27; 154,73; 154,41; 154,14; 137,48; 131,71; 128,57 (2C); 127,97 (2C); 126,28; 122,87; 118,21; 113,60; 73,42; 71,76; 71,36; 70,38; 68,95; 22,35; 10,55. SM - spectroscopie de masse - (IC, NH3) m/z 479 [M+H]+ (100 %). 10 Sauf indication contraire, les termes suivants utilisés dans la présente description et le présent jeu de revendications ont les significations suivantes: - " alkyle " désigne un radical hydrocarbure monovalent saturé linéaire 15 ayant de 1 à 12 atomes de carbone ou un radical hydrocarbure monovalent saturé ramifié ayant de 3 à 12 atomes de carbone, par exemple, méthyle, éthyle, propyle, 2-propyle, butyle, etc. - " acyle " désigne un radical monovalent R-CO- tel qu'il figure dans les acides, anhydrides, halogénures d'acides, amides et esters. - " aryle " désigne un radical hydrocarbure aromatique de type phényle éventuellement substitué, c'est-à-dire un groupe phényle qui est éventuellement substitué indépendamment avec un ou plusieurs groupe(s) hydrocarboné(s) qui peut (peuvent) être insaturé(s) et/ou comporter un ou plusieurs hétéroatome(s) ou substitué avec un ou 25 plusieurs hétéroatome(s). - " aralkyle " désigne un radical aryle défini ci-dessus substitué par un groupement alkylène, c'est-à-dire, par un radical hydrocarbure divalent saturé linéaire de 1 à 12 atomes de carbone ou un radical hydrocarbure divalent saturé ramifié de 3 à 12 atomes de carbone contenant au moins 30 une liaison double, tels que benzyle, phényléthyle, etc. - " halogène " désigne un radical monovalent choisi parmi le fluor, le chlore, le brome et l'iode. Selon une première caractéristique les composés selon la présente invention sont caractérisés en ce que dans les formules I à VI 35 susvisées Rl,, R2,, R R5, et R7 sont des atomes d'hydrogène, R3 est le groupe n-propyloxy, et R6 est le groupe NHC(O)CH2OCH2CH2OBn, Bn représentant le groupement benzyle (-CH2C6H5). -9 Selon une autre caractéristique et pour les raisons précédemment exposées, l'utilisation d'au moins un composé selon l'invention a lieu en tant qu'inhibiteur spécifique de la PDE5 dans le muscle lisse. En particulier, l'utilisation selon l'invention est caractérisée en ce que le muscle lisse est un muscle vasculaire et/ou un muscle pulmonaire. Selon un autre aspect, l'utilisation selon l'invention est caractérisée en ce que le ou les composés sont mis en oeuvre à des concentrations qui n'agissent pas sur la PDE5 des plaquettes. La présente invention a également pour objet l'utilisation pour l'obtention d'un médicament comprenant en tant que principe actif au moins un composé de formule générale I à VI selon l'invention pour le traitement préventif ou curatif d'une maladie nécessitant l'inhibition sélective de la PDE5 du muscle lisse. L'utilisation selon l'invention peut être caractérisée en ce que le médicament est destiné au traitement préventif ou curatif de l'hypertension artérielle, au traitement préventif ou curatif de l'hypertension pulmonaire et/ou au traitement préventif ou curatif de l'impuissance sexuelle masculine. La présente invention a encore pour objet une composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend à titre de principe actif au moins un composé de formule générale comprise parmi les formules I à VI précédemment définies. Grâce auxdits composés de la présente invention, il devient 25 également possible de proposer un procédé de traitement ou de prévention d'une maladie chez un mammifère, en particulier des maladies nécessitant une action spécifique sélective sur la PDE5 du muscle lisse. Ledit procédé de traitement ou de prévention comprend l'administration audit mammifère d'une quantité efficace sur le plan 30 thérapeutique d'au moins un composé de formule générale I à VI ou d'un dérivé pharmaceutiquement acceptable (sel, ester...) dudit composé selon la présente invention. Bien entendu, l'invention n'est pas limitée au mode de réalisation décrit. Des modifications restent possibles, notamment du point 35 de vue de la constitution des divers éléments ou par substitution d'équivalents techniques, sans sortir pour autant du domaine de protection de l'invention. - 10 REVENDICATIONS 1. Composés de formules générales I à VI O O R1o R7,N NxR7 N\N\ R7 NX N $N \' N \\N N N N 'NN N N N N R4 IV R4 V R4 Vl O il O R I5 I dans lesquellós: R7 R7 N N N R7 N N I N N NN N R1 R R,2 R R9, R5 Rl, R]3 R19 R23 R24, R25 et R26 qui peuvent être 10 identiques ou différents, représentent un proton, un groupe alkyle, un groupe alkyle substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène, un groupe acyle, un groupe acyle substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène, un groupe hydrocarboné comportant une ou plusieurs liaisons éthyléniques, un groupe aralkyle, un groupe aryle, un groupe 15 hydrocarboné qui peut être insaturé et/ou comporter un ou plusieurs hétéroatomes; - R3, R4, R5, R6 et R7 qui peuvent être identiques ou différents, représentent un proton, OR8, NR9R1, X SO2R i, X2SO2(X3Ri2), SOnR3, 20 S02(NR14R1l5), X4P(Ye)(XaRl6)(X6Re7), X7p(y2)(XuRs)R9,s P(Y3)(X9R2 )(xl R21) p(y4) (xllR22)R23 et P(ys)R24R25, n pouvant être égal à 0, 1 ou 2; - 11 -R12, R, 4 Ri, R1,6, R17, R18 R20, R21 et R22 qui peuvent être identiques ou différents, représentent un proton, un groupe alkyle, un groupe alkyle substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène, un groupe hydrocarboné comportant une ou plusieurs liaisons éthyléniques, un 5 groupe aralkyle, un groupe aryle, un groupe hydrocarboné qui peut être insaturé et/ou comporter un ou plusieurs hétéroatomes, un groupe ammonium, un ion de formule M+i/v, dans laquelle M représente un métal et v est l'état de valence du métal M, ou un cation interne; - XI à X1l qui peuvent être identiques ou différents, représentent O, S ou NR24; - Y' à YS qui peuvent être identiques ou différents, représentent O, S ou Se, et dans lesquelles: - au moins deux groupements parmi R3, R4, R5, R6 et R7 sont différents d'un proton; - si R' et R2 sont des protons, R6 est différent de SO02R3, 802(NRl4R15) - si 3 groupes parmi R3 R4, R5, R6 et R7 sont des protons, les 2 autres ne peuvent être OR8; - si R3 est un groupe méthoxy ou n-propyloxy et si R4, R5 et R7 sont des protons, le groupe R6 ne peut contenir le motif carbonyle-ca,3-insaturé, ne peut être NH2, une urée ou une thiourée. 2. Composés selon la revendication 1, o: - Rl, R2, R4, R5, et R7 sont des atomes d'hydrogène, -R3 est le groupe n-propyloxy, et -R6 est le groupe NHC(O)CH2OCH2CH2OBn Bn représentant un groupement benzyle (-CH2C6Hs). 3. Utilisation d'au moins un composé selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2 en tant qu'inhibiteur spécifique de la PDE5 dans le muscle lisse. - 12 4. Utilisation selon la revendication 3, caractérisée en ce que le muscle lisse est un muscle vasculaire. 5. Utilisation selon la revendication 3, caractérisée en ce que le muscle lisse est un muscle pulmonaire. 6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 3 à 5, caractérisée en ce que le ou les composés sont mis en oeuvre à des concentrations qui n'agissent pas sur la PDE5 des plaquettes. 7. Utilisation pour l'obtention d'un médicament comprenant en tant que principe actif au moins un composé de formule 10 générale I à VI selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2 pour le traitement préventif ou curatif d'une maladie nécessitant l'inhibition sélective de la PDE5 du muscle lisse. 8. Utilisation selon la revendication 7, caractérisée en ce que le médicament est destiné au traitement préventif ou curatif de 15 l'hypertension artérielle. 9. Utilisation selon la revendication 7, caractérisée en ce que le médicament est destiné au traitement préventif ou curatif de l'hypertension pulmonaire. 10. Utilisation selon la revendication 7, caractérisée en ce 20 que le médicament est destiné au traitement préventif ou curatif de l'impuissance sexuelle masculine. 11. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend à titre de principe actif au moins un composé de formule générale comprise parmi les formules I à VI selon l'une quelconque des 25 revendications 1 ou 2.