FR 2837099 A1 20030919 FR 0203059 A 20020312 d'une composition pour accelerer la cicatrisation et la regeneration tissulaire. La presente invention concerne une composition chimique thermosensible comportant un solvent organique hydrophobe, une substance cite organogelatrice, et une substance bioactive, ladite composition etant destinee a etre administree a un organisme vivant, pour la delivrance prolongee de substances bioactives. Ladite composition a la capacite de former un organogel de facon spontanee ou par refroidissement, une fois mise au contact d'un milieu aqueux, et notamment, un liquide physiologique. Ledit organogel forme sert de support a la liberation prolongee de substances bioactives par diffusion eVou par erosion eVou biodegradation progressive audit organogel dans l'organisme. La presente invention s'etend egalement aux utilisations qui peuvent etre faites de cette composition dans le domaine therapeutique et plus particulierement dans le domaine de la delivrance prolongee de substances bioactives. On entend par composition thermosensible, toute composition capable de passer de l'etat liquide a l'etat gel en fonction de la temperature et par organogel tout gel dont la phase liquide est composee par un solvent organique. Par ailleurs, on entend par substance bioactive, toute substance ayant la capacite d'agir sur un organisme vivant ou son fonctionnement de fa,con a prevenir, guerir, soulager ou ameliorer l'etat audit organisme. On entend par solvent ou liquide organique hydrophobe, un solvent ou un liquide dont les molecules ou les parties de molecules presentent une certaine repulsion vis-a-vis des molecules d'eau. On entend par solvent hydrophile, un solvent dont les molecules etablissent des interactions d'attraction avec les molecules d'eau. Les gels vent depuis longtemps utilises dans le domaine de l'industrie pour les proprietes que leur confere ieur structure physique particuliere. 2 2837099 En effet, ils correspondent a un etat intermediaire de la matiere car ils vent composes a la fois d'elements sous forme solide et d'elements sous forme liquide. Les elements solides formant une structure tridimensionnelle ou matrice, organisee en reseau de molecules interconnectees entre elles, ce reseau immobilisant les elements presents sous forme liquide. On peut crasser les gels en fonction du type de liaisons qui relient entre elles les molecules de la phase solide ou en fonction du type de solvent, organique ou aqueux qui compose la phase liquide. On appelle hydrogels, les gels dont la phase liquide est une phase aqueuse, pour les differencier des organogels dont la phase liquide est une phase organique. Les gels dont la matrice est constituee de molecules liees entre elles par des liaisons covalentes vent generalement dans un etat stable et irreversible une fois formes. A ['inverse, les gels dont la matrice solide est obtenue par des liaisons de faible energie (type liaisons hydrogene ou liaisons de Van der Waals notamment), vent generalement des gels reversibles c'est-a-dire pouvant passer de l'etat gel a l'etat liquide en fonction des conditions environnantes (pH, temperature, force ionique etc.). Dans le cas des gels thermosensibles, la temperature a laquelle est observe le changement d'etat est appelee temperature de transition. Dans le cas particulier des systemes presentant un comportement d'hysterese, la temperature de transition geliliquide est differente de la temperature de transition liquide/gel. Ainsi, les gels vent notamment utilises dans l'industrie pharmaceutique, pour leur capacite de retention vis-a-vs de molecules bioactives, notamment dans le cadre d'une administration de substances actives par vole transcutanee. Cette propriete de retention a par ailleurs ete exploitee pour une utilisation des gels comme vecteurs de delivrance prolongee de medicaments. Ainsi, le brevet US N 3,932,624 decrit 1'utilisation d'un hydrogel destine a la delivrance retard de saralasine. Dans ce brevet, le gel est realise 3 2837099 a base de gelatine, qui, diluee dans une solution de serum physiologique contenant la substance bioactive va s'en impregner pour former une structure gelifiee qui pourra etre implantee dans l'organisme par vole chirurgicale au niveau sous cutane. Le gel implante libere de fa,con progressive la substance active qu'il contient par erosion progressive audit gel. Cependant, ce type d'utilisation necessite d'implanter in situ par vole chi ru rgica le. u n gel prealablement form e. Cette operation reste done a la fois couteuse et contraignante pour le patient. Pour pallier cet inconvenient, des hydrogels implantables se formant in situ ont ete developpes. Ainsi, le brevet US N 5,863,551 decrit l'utilisation d'une composition a base d'acrylamide N-substitue, d'un agent de liaison et d'un sucre complexe pour la formation d'un hydrogel implantable. Ce gel poreux se forme in situ, par polymerisation spontanee du sucre complexe apres avoir ete injecte sous forme liquide dans la zone desiree. L'hydrogel ainsi forme in situ ou plus exactement in vivo contient au moins 80 % d'eau. II est utilise dans le but d'offrir aux cellules en developpement un environnement tridimensionnel stable. De tels hydrogels a formation in situ ont egalement ete utilises pour la delivrance retardee de medicaments. Ainsi, plus recemment la demande de brevet US N 20010007673 decrit l'utilisation d'un hydrogel se formant in vivo destine a la delivrance retard de molecules bioactives, notamment de proteines. Une composition a base d'alginate, d'un ion metallique polyvalent et de la substance active desiree, est injectee sous forme liquide et passe sous forme gel une fois implantee dans l'organisme. La gelfication s'opere la encore par retention des liquides physiologiques dans la matrice constituee par les molecules d'alginate. Cet hydrogel permet une diffusion retardee de la substance bioactive d ans les liq uides de l' organ isme. Par ailleurs, le brevet US n 5 575 815 decrit ['implantation intra cavitales, i.e. intra-arterielle ou intraveineuse, d'une composition liquide aqueuse qui se transforme ou se viscosifie en hydrogel in vivo. L'utilisation de ce gel pour ['incorporation de substances actives est prevue, notamment 4 2837099 pour l'angioplastie. Les hydrogels utilises vent constitues de polymeres polyethers. Cependant, le principal inconvenient de ces hydrogels reside dans leur falbie efficacite a la delivrance sur de longues periodes de temps de substances bioactives hydrophiles. Cela est du notamment a leur importante proportion en eau qui leur confere une forte porosite, conduisant les substances bioactives hydrophiles presentes dans de tels gels a etre relativement vite eliminees dans la circulation. Ce phenomene de diffusion est particulierement important pour des molecules de petite taille tres hydrophiles telles que certains medicaments hydrophiles ou certains peptides hydrophiles par exemple. L'efficacite de la liberation prolongee de ces substances s'en trouve done reduite. L'objet de la presente invention est de fournir une nouvelle composition pharmaceutique ayant la capacite de former un organogel permettant la liberation sur de longues periodes de temps de substances actives. De plus, I'objet de la presente invention est egalement de fournir un tel support de liberation retardee a la fois biocompatible et biodegradable permettant en outre d'etre administre sous forme liquide, c'est-a-dire de fa,con aisee, rapide et peu couteuse. Les organogels ont deja ete utilises comme support permettant la liberation retardee de principe actif. Ainsi la demande de brevet n WO 97/15287 decrit une matrice polymere biodegradable injectee en sous cutane ou intramusculaire sous forme gel qui libere progressivement le principe actif qu'elle contient en passant a l'etat liquide dans l'organisme. Cette matrice constituee de deux copolymeres hydrophobes contient un liquide aqueux dans loquel est dissout le principe actif. Ce document divulque ['administration parenterale d'un organogel hydrophobe qui se liquefie une fois injecte dans l'organisme. La presente invention a au contraire pour objet un organogel hydrophobe genere in vivo apres avoir ete applique sous forme liquide. De tels gels ont deja ete decrits dans l'art anterieur. 2837099 La demande de brevet n WO 94/08623 divulgue un organogel hydrophobe contenant de la lecithine et un solvent de la lecithine hydrophobe utilise pour la liberation retardee de proteine. Le gel se forme in vivo, a partir d'une solution injectee en intramusculaire ou en sous cutane, par absorption d'eau a partir du milieu interstitial lors de 1'injection. Au contraire, I'organogel hydrophobe de la presente invention ne se forme pas par absorption de l'eau environnante. La presente invention concerne une composition liquide thermosensible a proprietes gelifiantes comprenant un liquide organique hydrophobe, une substance cite organogelatrice, et une substance bioactive. La substance organogelatrice est constituee de molecules capables de se lier entre elles par des liaisons de falble energie si bien que l'auto assemblage de ces molecules est avantageusement thermoreversible. La composition thermosensible sous forme liquide selon ['invention contientun iiquide organique hydrophobe, une substance organogelatrice dont les molecules ont la capacite de se lier entre elles par liaisons de faible energie, et une substance bioactive. Wile passe sous forme d'organogel lorsqu'elle entre en contact avec un liquide physiologique, lors de son administration a un corps animal, en particulier l'homme, en particulier lors de 1'injection dans 1'organisme, par exemple a 1'aide d'une seringue conventionnelle, par vole parenterale extra vasculaire, ou intramusculaire sous cutanee. On entend par vole parenterale extra vasculaire toute vole de penetration dans l'organisme autre que la vole digestive et la vole vasculaire (veines, arteres et vaisseaux sanguine). La composition de ['invention peut egalement etre administree par vole intra-oculaire, par vole intracavitale ou sur des protheses prealablement a leur application, par vole vaginale, sur une plate ouverte ou lors d'une intervention chirurgicale. De nombreux documents decrivent des compositions pour usage topique contenant des organogels a base de lecithines (voir par exemple US N 6 306 383). La lecithine est un melange de phospholipides de faible poids 6 2837099 moldculaire. Les Ibcithines vent amphoteres, elles vent solubles dans l'alcool et elles forment une emulsion avec l'eau. Les organogels de Ibcithine ont btb dbcrits comme vehicules utlies pour faciliter la penetration des molecules a faible poids moleculaire (Willimann, H., et autres, " Organogel Ibcithine comme matrice pour le transport transdermique des medicaments", J. Pharm. Sci., vol. 81, 1992). Les organogels de Ibcithine vent obtenus en ajoutant un peu d'eau a une solution de lecithine dans des solvents organ iques tel q ue le palm itate d'isop ropyle ou le cyclooctane. Da ns ces documents, I'eau est ajoutbe pour former le gel desire si bien que l'organogel est formb avant son application sur la peau. Au contraire, les organogels de la presente invention vent sous forme liquide quand on les administre a un organisme vivant et prennent la forme de gei une fois qu'ils entrent en contact avec un liquide physiologique. Par ailleurs, les Ibcithines ne constituent pas des substances organogGlatrices telles que dbfinies dans le cadre de la prbsente invention. On entend par liquide physiologique, tout liquide circulant dans un corps animal, tel que par exemple le liquide Iymphatique, le liquide lacrymal, le liquide cephalo-rachidien, le liquide amniotique, le liquide parentbral et le sang. L'organogel formb a partir de la composition selon ['invention possede des capacitbs de rdtention de moldcules bioactives et plus particulierement de molecules d'un poids inferieur a 100 000 dalton presentant un caractere hydrophile, permettant d'envisager une liberation desdites moldcules dans l'organisme sur des periodes superieures a 3 jours. Enfin, ledit organogel formb dans l'organisme a partir de la composition selon ['invention a la capacitb de s'bliminer lentement par erosion eVou biodegradation progressive, sans toxicite pour l'organisme ou il est implantb. Cette propridtb de gelification in situ conforme a ['invention est obtenue par l'utilisation d'un solvent organique hydrophobe, constituent la phase organique audit organogel et par une substance organogGlatrice (ou organogGlateur), constituent la matrice solide audit organogel. 7 2837099 Les molecules constituent cette substance organogelatrice, vent du type notamment des derives esters d'acides gras d'acides amines qui ont la capacite de s'auto-assembler spontanement pour former une matrice immobilisant ledit solvent organique hydrophobe. Cet auto-assemblage moleculaire peut se realiser par des liaisons hydrogene s'etablissant entre Ies groupements de type alcool (-OH), acide (-COOH), amine (-NH ou NH2) portes par les molecules organogelatrices. Si necessaire, la gelification de la composition liquide est induite par refroidissement du site d'application de la composition ou par diffusion d'un solvent organique hydrophile ajoute a la composition de 1'invention. La demanderesse a selectionnb des solvents organiques hydrophiles capables de creer des liaisons faIbles (ex.: poets hydrogene) avec les molecules de substance organogelatrice, et capables de diffuser dans les milieux aqueux pour realiser la composition selon ['invention. Ainsi, le solvent organique hydrophile, introduit dans le melange formant la composition selon ['invention va entrer en competition avec les molecules de substance organogelatrice, en creant avec lesdites molecules des liaisons faibles (ex.: poets hydrogene) empechant les cites molecules de s'auto-assembler en un reseau dense et unit La composition selon I'invention restera done sous forme liquide tent que les molecules audit solvent organique hydrophile resteront liees aux molecules de l'organogelateur. L'utilisation selon la presente invention de la reversibilite des liaisons faibles va avantageusement permettre a la matrice organogelatrice de se re assembler des lors que ledit solvent organique hydrophile aura diffuse dans le milieu environnant. Ainsi, des son entree en contact avec une solution aqueuse et plus particulierement avec les liquides physiologiques tels que le liquide interstitial, la Iymphe ou le liquide intra peritoneal par exemple, ledit solvent organique hydrophile present dans la composition conforme a 1'invention va diffuser dans ledit liquide environnant du fait de son hydrophilic. 8 2837099 La diffusion audit solvent organique hydrophile va alors permettre ['autoassemblage des molecules de ladite substance organogelatrice. Cet autoassemblage, en creant un reseau structure, va permettre la retention audit liquide organique hydrophobe, faisant passer ladite composition de I'etat liquide a l'etat gel. La presente invention offre done un systeme simple de gelification in sifu spontanee, et d'administration aisee. Par ailleurs, la presente invention repose sur les proprietes d'hysterese observees par la demanderesse sur des organogels a base de substances organogelatrices conformes a 1'invention. On entend par hysterese le phenomene physique observe notamment pour les compositions gelifiables, representant l'ecart existent entre la temperature de transition gel/liquide et la temperature de transition liquide/gel. Ces proprietes permettent en effet de concevoir une composition conforme a ['invention qui soit liquide, done facilement injectable, a temperature ambiante (ou a une temperature avoisinant la temperature ambiante). De plus, ces proprietes permettent egalement de realiser un organogel selon ['invention qui, une fois forme in vivo, va rester sous forme gel a la temperature corporelle de l'organisme considere. En effet, un tel organogel, qu'il soit forme par diffusion ou simple refroidissement, possede une temperature de transition gel/liquide superieure a la temperature du site dtinjection ou d'application. De ce fait, il est parfaitement stab le dans ledit organ isme. Enfin, la presente invention a l'avantage de fournir un support de liberation prolongee de medicaments ou d'autres substances actives. En effet, I'organogel forme dans l'organisme et conforme a la presente invention comporte une veritable structure matricielle organisee qu a peu d'affinite pour le milieu aqueux environnant et permet done une liberation lente de la substance active par diffusion, erosion ou biodegradation progressive audit organogel. La presente invention fournit done un support simple, efficace et facile d'administration permettant une liberation prolongee dans l'organisme, d'une periode au moins egale a 1 jour, de substances telles que des substances g 2837099 bioactives et plus particulierement de molecules a caractere hydrophile d'un poids inferieur a 100 000 dalton. En outre, la composition selon la presente invention a l'avantage d'etre extremement peu coOteuse, tent sur le plan de la fabrication comme cela est decrit plus loin, que sur le plan du conditionnement et de ['administration. Les substances organogelatrices conformes a ['invention vent des substances dont les molecules ont la capacite de se lier entre elles par liaisons de faible energie, et notamment par liaisons hydrogene, permettant la formation d'une matrice thermosensible. Ces molecules vent notamment des molecules de faible poids moleculaire presentant des extremites acide ( COOH) ou alcool (-OH) ou encore amine (-NH2 ou -NH) par exemple. Par ailleurs ces substances vent preferentiellement biocompatibles et ne donnent pas lieu a des metabolites toxiques ou dangereux pour I'organisme lors de leur degradation par ce dernier. On utilisera preferentiellement des derives d'acides amines ou derives esters d'acides gras d'acides amines tels que l'alanine, presentant a la fois une bonne biocompatibilite et un pouvoir organogelateur satisfaisant et surtout conferant au systeme gelifie des proprietes d'hysterese. Ces proprietes se traduisent par un passage de l'etat liquide a l'etat gel a une temperature differente de celle observee lors du passage de la forme gel a la forme liquide de ladite composition. La demanderesse a le merite d'avoir remarque que l'ecart entre ces deux temperatures de transition est variable en fonction du type de solvent organique hydrophobe utilise, et de la quantite de substance organogelatrice utilisee. Ainsi, la demanderesse a realise des compositions conformes a ['invention dont les temperatures de transition et les ecarts entre ces temperatures vent ajustables par simple modification de ces deux parametres. Les resultats traduisant ces variations vent representes sur les figures 1 et 2. La figure 1 represente le diagramme des temperatures de transition Liquide-gel (lignes pleines) et Gel-liquide (lignes pointillees) du Nlauroyl L 2837099 Alanine Methyle ester (LAM) en presence de benzoate de benzyle (cercles) ou d'un melange benzoate de benzyle/ alcool benzylique a 5 % (triangles). La figure 2 represente le diagramme des temperatures de transition Liquide gel (lignes pleines) et Gel-liquide (lignes pointillees) du LAM en presence d'huile de soja (losanges) ou de Labrafac CC (carrel). Preferentiellement, I'ecart entre ces deux temperatures de transition est choisi pour que la temperature de transition liquide/gel soit inferieure a la temperature corporelle de l'organisme vivant considere dans le. cas ou I,organogel est administre sans solvent organique hydrophile et que la temperature de transition gel/liquide soit superieure a la susdite temperature. Ainsi, on utilisera preferentiellement des derives esters de l'alanine tels que le N-lauroyl L-alanine methyle ester ou le N-lauroyl L-alamine ethyle ester comme substance organogelatrice conforme a ['invention. La quantite de substance organogelatrice est fonction du type de solvent organique hydrophobe employe et de la temperature de transition qu'on souhaite choisir pour l'organogel conforme a ['invention. Cependant, la proportion de cette substance est avantageusement choisie entre 0,5 et 50 % en poids du poids total de ladite composition. La demanderesse a constate que l'utilisation comme substance organogelatrice du N-lauroyl L-alanine methyle ester permet a ladite composition de passer a l'etat gelifie par simple refroidissement sous le seuil de transition liquide/gel et de demeurer a l'etat gel a une temperature depassant la temperature de transition liquide/gel en particulier la temperature de l'organisme vivant En effet, la demanderesse a rema rq ue que led it orga nogel forme pa r refroidissement est stable dans l'intervalle de temperatures comprises entre la temperature de transition liquide/gel et la temperature de transition gel/liquide. L'ensemble de ces constatations a conduit la demanderesse a elaborer une composition thermosensible a proprietes gelifiantes ayant la capacite de passer sous forme gelifiee par simple refroidissement local et de conserver cet etat gelifie a la temperature corporelle. Dans ce cas particulier de ['invention, la quantite de solvent organique hydrophile peut etre 1 1 2837099 extremement reduite, voire nulle puisque la gelification s'opere par un refroidissement de ladite composition et non plus par diffusion audit solvent organique hydrophile. Ce mode de realisation est particulierement avantageux puisqu'il permet de s'affranchir de la presence du solvent organique hydrophile et done de simplifier encore le procede de preparation de la composition selon ['invention et egalement de diminuer son coOt de revient. Ainsi, selon un mode de realisation particulier, la composition thermosensible selon ['invention contient une proportion de N-lauroyl L alanine methyle ester suffisante pour permettre le passage de ladite composition de l'etat liquide a l'etat d'organogel par simple refroidissement de ladite composition au contact de son site d'injection dans l'organisme. Un tel refroidissement doit etre suffisant pour faire passer ladite composition, appliquee sous forme liquide, a sa forme gelifiee. Ce refroidissement qui peut etre opere par apposition externe d'un objet froid tel qu'un pain de grace ou une compresse froide ou tout autre moyen refroidissant autour du site d'injection, doit permettre un abaissement local, sous la temperature de transition liquidelgel de ladite composition. La composition selon ['invention est done preferentiellement sous forme liquide a la temperature du site d'application, possede une temperature de transition gel/liquide superieure a la temperature corporelle et une temperature de transition liquide/gel inferieure a la temperature de l'organisme considere ou de la zone d'implantation du gel. En effet, la temperature cutanee peut etre inferieure de quelques degree a la temperature generale de 1'organisme. Dans un mode de realisation prefere, la proportion en N-lauroyl L alanine methyle ester de ladite composition est suffisante pour que la temperature de transition liquide/gel soit inferieure a la temperature corporelle (37 C en general) et que la temperature de transition geliliquide, soit superieure a la temperature corporelle (37 C en general). 12 2837099 D'une maniere encore plus preferentielle, la composition selon ['invention doit comporter une temperature de transition liquide/gel inferieure a 30 C et une temperature de transition gel/liquide superieure a + 35 C. Ainsi, la composition selon ['invention est preferentiellement une S composition dont l'intervalle entre la temperature de transition liquide/gel et la temperature de transition gel/liquide est avantageusement d'au moins 20 C, la temperature de transition liquide/gel etant preferentiellement comprise entre +5 C et + 36 C. Les solvents organiques hydrophobes utilisables pour la realisation de la composition selon la presente invention appartiennent au groupe des solvents organiques non miscibles a l'eau capables de creer une structure de type organogel, en presence d'une quantite suffisante de substance cite organogelatrice telle que decrite ci-dessus. Ces solvents vent preferentiellement biocompatibles, c'est-a-dire toleres par 1'organisme hose, ne declenchant pas ou peu de reaction immunitaire, de type inflammatoire ou allergique par exemple. Enfin, on notera qu'il est preferable d'utiliser des solvents organiques hydrophobes liquides a temperature ambiante ce qui simplifie le procede de fabrication et d'administration de la composition conforme a ['invention. On utilisera preferentiellement des solvents organiques pouvant etre degrades de maniere lente, c'est-a-dire, non rapidement metabolises par les enzymes presentes sur le site d'injection, et notamment par les lipases. Ainsi, les solvents organiques hydrophobes conformes a ['invention appartiennent au groupe comprenant les huiles vegetales, les huiles semi synthetiques et certains esters d'acides gras, notamment du glycerol (en particulier biglycerides et triglycerides) On peut ainsi envisager l'utilisation d'huiles vegetales biocompatibles telles que l'huile de soja, I'huile de mas, I'huile de coton, I'huile d'arachide, I'huile d'olive, I'huile de ricin, I'huile de sesame ou l'huile d'amande par exemple. De fa,con preferentielle, on utilisera comme solvent organique hydrophobe une huile vegetale telle que l'huile de soja presentant un 13 2337099 comportement de gelification adequat, une biodegradabilite lente et une excellente biocompatibiiite. Parmi les esters d'acides gras utilisables a titre de solvents organiques hydrophobes conformes a ['invention, on peut citer par exemple I'oleate d'ethyle ou le myristate d'isopropyle notamment. Plus preferentiellement, on utilisera des esters d'acides gras du glycerol, notamment les triglycerides. Encore plus preferentiellement, on utilisera les triglycerides a chane moyenne (inferieure a 18 atomes de carbone) tels que le Labrafac CC comportant deux acides gras de 8 et 10 atomes de carbone. Parmi les solvents synthetiques ou semi-synthetiques utilisables comme solvents organiques hydrophobes conformement a la presente invention, on peut citer notamment le squalene, le benzoate de benzyle, le chlorure de benzyle, et les melanges benzoate de benzyle/alcool benzylique. On peut aussi combiner huiles et solvents organiques hydrophobes synthetiques. On entend par solvent organique hydrophile selon ['invention, un solvent ayant une affinite importante pour les milieux aqueux, c'est-a-dire miscible a l'eau. Le type de solvent organique hydrophile susceptible d'etre utilise dans la presente invention, est avantageusement un solvent capable d'agir comme agent de destabilisation de l'organogel, c'est-a-dire susceptible de creer des liaisons falbles avec les molecules d'organogelateur. Un tel solvent est par ailleurs avantageusement biocompatible, c'est-a-dire tolere par l'organisme, de telle sorte que sa diffusion n'entrane pas ou peu de reaction immunitaire de type inflammatoire ou allergique. On utilisera done de maniere preferentielle pour la realisation de la presente invention, un solvent ayant fait ['objet d'une approbation pour usage parenteral. Ledit solvent organique hydrophile conforme a ['invention sera utilise avantageusement dans des proportions inferieures a 60 JO en poids de ladite composition, et plus preferentiellement inferieures a 20 %. 14 2837099 On peut citer parmi les solvents hydrophiles les solvents tels que les alcools comme l'ethanol7 le glycerol, le propylene glycol, le poly(ethylene) glycol de falble poids moleculaire, I'alcool benzylique oule chlorobutanol et leurs melanges. Par ailleurs d'autres solvents miscibles a l'eau peuvent etre envisages, tels que le dimethyle sulfoxide (DMSO), le N-methyl-pyrrolidone, le N-N-Dimethylacetamide, le furfural, le glycerol formal, I'isopropylidene glycerol, le lactate d'ethyle, I'acide acetique ou l'acide lactique et leurs melanges. Ces exemples ne vent pas limitatifs et on peut tout a fait concevoir de realiser ['invention a partir d'autres composes organiques hydrophiles qui auraient des proprietes destabilisatrices de gel, c'est-a-dire la capacite de creer des liaisons falbles avec la substance organogelatrice conforme a ['invention. Les substances bioactives susceptibles d'etre liberees dans I'organisme a partir de l'organogel conforme a la presente invention vent avantageusement des substances difficilement conditionnables pour une liberation de fa,con prolongee telles que les molecules de falble poids moleculaire a caractere hydrophile ou tres hydrophile. Avantageusement, ladite substance bioactive sera utilisee dans des proportions de 0,5 a 70 % en poids de la composition selon ['invention. Ainsi, la demanderesse a teste le relargage a partir d'un organogel preforme de molecules de dextran marquees avec une molecule fluorescente: le;FITC (FIuoro-lso Thio Cyanate). Le profil de liberation du dextran a ete suivi in vitro sur 20 jours par dosage de la fluorescence comme le montre la figure N 3. La fluorescence a ete mesuree par des prelevements reguliers d'une solution aqueuse de tampon phosphate salin. Ainsi, on peut concevoir la liberation sur des periodes superieures a 3 jours de proteines notamment d'interet therapeutique telles que ['interferon oc, 3 0 I' interferon, la somatostati ne, la ca lcitonine, I ' heparine, les interleukines ou l'erythropoetine, de peptides, d'acides amines ou de vitamines. 2337099 Ces exemples ne vent en aucun cas limitatifs et d'autres types de molecules, en particulier d'autres proteines peuvent tout a fait etre envisagees pour une telle liberation prolongee a partir d'un organogel conforme a ['invention. On peut envisager le relargage dans l'organisme a partir de I'organogel selon ['invention, de molecules telles que certaines hormones et notamment certaines hormones peptidiques telles que ['hormone de croissance humaine ou ['hormone thyreotrope. Ainsi, on peut prevoir d'utiliser la presente invention pour la liberation prolongee dans 1'organisme d'acides nucleiques, d'oligonucleotides ou de derives d'acides nucleiques notamment. De meme, on peut tout a fait concevoir de realiser la presente invention dans le but de solubiliser puis de liberer de fa,con prolongee des substances bioactives hydrophobes, c'est-a-dire presentant une forte affinite pour l'organogel et une falble affinite pour le milieu aqueux environnant. La presente invention est done utilisable pour un grand nombre de substances a interet therapeutique ou medical pour lesquelles on souhaite une liberation prolongee dans l'organisme. A titre d'exemple, la composition selon la presente invention peut etre preparee de la maniere suivante. Cas d'un systeme de gelification par diffusion On procede tout d'abord a la dissolution spontanee ou par chauffage eVou agitation de l'organogelateur dans le solvent organique hydrophile. Puis on incorpore la substance active et le (les) solvent(s) organique(s) hydrophobe(s) a ce melange, deux cas peuvent alors se presenter: a) Soit la substance active est soluble dans la phase organique ainsi formee: Dans ce cas, on solubilise la substance active dans la phase organique formee. La solubilisation stopere spontanement ou par chauffage, avec ou sans agitation. 16 2837099 On peut egalement prevoir dans ce cas la dissolution de ladite substance active directement dans le solvent organique hydrophobe. b) Soit la substance active est peu ou pas soluble dans la phase organique: Dans ce cas, on procede tout d'abord au "mouillage" de la substance active en la dispersant dans la phase organique formee par le solvent organique hydrophile et la substance organogelatrice. Apres agitation, il se forme alors une suspension de substance active dans le melange. Cette suspension pourra alors etre ajoutee aux autres constituents de la composition selon la presente invention. II est aussi possible de dissoudre la substance active dans une quantite juste suffisante d'eau. Cette solution aqueuse de substance active va etre ajoutee a la phase organique formee par le solvent organique hydrophile et la substance organogelatrice. On procede ensuite a ['emulsion de cette phase aqueuse dans la phase organique par agitation vive. Plus vive est ['agitation, plus petite est la taille des particules aqueuses formees dans la suspension organique et plus stable est ['emulsion. Cette emulsion va ensuite pouvoir etre utilisee pour la preparation d'une composition conforme a ['invention. 11 est a noter, toutefois, que cette technique utilisant une emulsion, a I'avantage de conserver les molecules complexes de substance active dans un micro environnement aqueux, ce qui limite beaucoup les perturbations dont elles peuvent faire ['objet lorsqu'elles vent soumises au changement d'environnement. On ajoute ensuite au melange precedemment obtenw le solvent organique hydrophobe, eventuellement sous agitation eVou chauffage modere jusqu'a obtenir un melange homogene. Ce melange homogene selon ['invention peut alors etre injecte dans un organisme vivant par vole parenterale extra vasculaire a ['aide d'une seringue conventionnelle pour injections sous cutanees. Apres un temps de latence qui depend de la formulation choisie, on assiste a la formation d'un 17 2337099 durcissement sur le site d'injection, preuve de la formation;n v/vo de l'organogel selon ['invention. S'il n'est pas extrait de maniere chirurgicale, ledit organogel va, suivant sa taille et la nature des composants qui le constituent, etre biodbgrade eVou s'eroder progressivement a plus ou moins longue echeance dans l'organisme. Cette biodegradation progressive va entrainer le relargage de la substance active eventuellement contenue dans l'organogel selon ['invention. On choisira preferentiellement de realiser de tels organogels dont la biodegradation sera comprise sur des periodes superieures a 3 jours. Cas d'un svsteme de nelification par refroidissement Dans ce cas, on melange tout d'abord la substance organogelatrice dotee de proprietes d'hysterese avec le solvent organique hydrophobe. Puis on procdde a ['incorporation de la substance active dans ce melange. Si la substance active est organosoluble, elle sera dissoute dans le melange directement ou par faible agitation. Dans le cas ou la substance active est peu ou pas organosoluble, on procede comme precedemment a la dispersion de cette derriere dans la phase organique ou a la realisation diune emulsion stable de substance active prealablement dissoute dans l'eau, dans la phase organique formee. La composition ainsi formee est stable et preferentiellement liquide a la temperature ambiante. Wile est injectee par exemple par vole parenterale extravascu la ire. Immediatement apres ['injection, un objet froid (ou tout autre systeme de refroidissement) est maintenu au contact du site d'injection pendant une duree suffisante pour permettre la gelification in situ de la composition selon la presente invention. Lorsque la gelification est accomplie, le systeme de refroidissement est retire. Le site d'injection regagne alors la temperature corporelle, I'organogel selon ['invention restart stable a ladite temperature. 18 2837099 La composition thermosensible a proprietes gelifiantes conforme a ['invention peut etre utilisee par exemple a la delivrance retard de substances bioactives sur de longues periodes, c'est-a-dire sur des periodes d'au moins un jour, generalement superieures a 3 jours. Cette composition peut done servir de support a la delivrance retard de tout type de substances, notamment de substances a interet therapeutique ou medical. On peut ainsi prevoir l'utilisation de la composition thermosensible conforme a ['invention pour la delivrance retard de medicaments necessitant d'etre maintenu a un taux sanguin constant. Cette invention se revere done particulierement interessante pour les medicaments administres ordinairement par plusieurs prises quotidiennes destinees a maintenir un taux therapeutique efficace dans l'organisme. On peut ainsi envisager l'utilisation de ['invention pour des substances therapeutiques telles que la morphine ou les medicaments agissant comme regulateurs du systeme cardio-vascuiaire ou du systeme nerveux. De meme, on peut concevoir l'utilisation de la composition selon ['invention dans le but de pallier certaines carences de l'organisme, notamment en vitamines ou en hormones. Ainsi, la presente invention peut servir de support a la delivrance prolongee d'hormones necessitant une prise quotidienne, et encore aujourd'hui administrees par injection, mode d'administration douloureux et contraignant. Un tel support de liberation par organogel, de part son administration aisee, son innocuite et son faIble cout permettrait de s'affranchir de ces contraintes pour le patient. Cette composition peut egalement etre utilisee pour la fabrication d'un med icament destine a etre injecte da ns l'organ isme pa r vole pa rentera le extravasculaire et notamment par vole sous cutanee, intradermique, intraperitoneale ou intram uscu laire, par vole intra-ocu la ire ou intravascu la ire, par vole vaginale, sur une plate ouverte ou lors d'une intervention chirurgicale. 3 0 Wile peut par ail leurs permettre ia fabrication d ' u n med icament destine a etre utilise comme vecteur de liberation prolongee de substance(s) bioactive(s) dans l'organisme. lg 2337099 Exemple 1: Formation d'un organogel in vivo a partir d'une composition conforme a ['invention. s Dans cet exemple, on cherche a verifier que la composition conforme a ['invention est bien capable de gelifier in vivo. Les essais vent realises sur le rat. On utilise comme solvent organique hydrophobe conforme a ['invention, I'huile de soja et ['ethanol comme solvent organique hydrophile selon ['invention. La substance organogelatrice choisie est le LAM (N-lauroyl L-alanine methyle ester) Les proportions utilisees vent recapitulees dans le tableau suivant: Produit Fonction Proportions LAM Organogelateur 17.2 % Huile de soja Solvant organique 68.8 % hydrophobe Ethanol Solvant organique 14 % hydrophile On procede tout d'abord a la dissolution de l'organogelateur dans ['ethanol. Puis on rajoute a ce melange l'huile de soja. Le melange ainsi obtenu est agite et chauffe jusqu'a homogeneisation complete. Ce melange reste stable et liquide a temperature ambiante. On procede ensuite a ['injection sous cutanee de la composition ainsi obtenue. L'injection est pratiquee au niveau dorsal, a ['aide d'une seringue conventionnelle pour ['injection en sous cutane. Apres 2 heures ['animal est sacrifie et un gel semi-solide est extrait du site d'injection, demontrant la formation in vivo de l'organogel. 2337099 Exemple 2: Formation d'un organogel in vivo a partir d'une composition conforme a ['invention. On utilise comme solvent organique hydrophobe conforme a I'invention, I'huile de soja et ['ethanol comme solvent organique hydrophile selon ['invention. La substance organogelatrice choisie est le LAM (N-iauroyl, L-alanine methyle ester) Les proportions utilisees vent recapitulees dans le tableau suivant: Produit Fonction Proportions LAM Organogelateur 24.6 % Huile de soja Solvant organique 57.4 % hydrophobe Ethanol Solvant organique 18 % hydrophile Le procede diinjection est identique a celui de l'exemple 1, de meme que ['apparition d'un organogel 2h30 post-injection. Exemple 3: Fabrication d'une composition selon ['invention contenant du FlTC-Dextran Cette composition permet de mesurer in vitro le relargage progressif d'une substance active contenue dans un organogel preforme. On utilise comme principe actif le FlTC-dextran qu va permettre de mesurer par dosage de la fluorescence associee, la quantite de dextran liberee par l'organogel conforme a i'invention (Cf. Figure n 3) La figure 3 represente le suivi sur 20 jours du profil de liberation du FlTC- dextran (Poids moleculaire = 9500) a partir d'un gel constitue d'huile de soja et de 30 % de LAM dans le PBS a 37 C. Chaque point represente la valeur moyenne ±sd (n=3). La surface du gel expose etait de 0.64 mm2. 21 2337099 Produit Fonction Proportions FlTC-Dextran Substance active 1.3 % LAM Organogelateur 30 % Huile de soja Solvant organique 68.7 % hydrophobe On procede tout d'abord a la dissolution a chaud du LAM dans l'huile de soja. Puis on disperse a chaud le FlTC-dextran dans la phase organique formee apres l'avoir prealablement broye au mortier, jusqu'a l'obtention d'une composition liquide homogene. Ce melange liquide est ensuite introduit gelifie par refroidissement dans un tube a essai. On ajoute sur le gel une solution aqueuse saline de tampon phosphate salin. On preleve ensuite sur une periode de 20 jours, des echantillons du liquide environnant l'organogel conforme a ['invention. On peut alors closer la fluorescence emise par ces echantillons et ainsi constater la liberation prolongee du FlTC-Dextran dans le milieu environnant. Dans l'hypothese ou un tel gel serait administre in vivo et conformement a la presente invention, un solvent organique du type ethanol devrait etre rajoute de fa,con a inhiber le processus de gelification avant ['injection. Les resultats de ce dosage vent recapitules sur la figure N 3. Exemple 4: Mise en evidence in vivo des proprietes hysteretiques d'un organogel conforme a ['invention. Exemple de gelification sans solvent hydrophile. La solution organogelifiante est preparee a partir des constituents suivants: Produit Fonction Proportions LAM Organogelateur 40 % Benzyl benzoate 1 5 % Solvantorganique 60 % alcool benzylique hydrophobe 22 2837099 * Les proprietes hysteretiques de cet organogel ont prealablement ete determinees pour que la temperature de transition liquide/gel soit inferieure a 30 C et que la temperature de transition gel/liquide soit superieure a 37 C. S La solution organogelifiante est tout d'abord amenee a l'etat liquide par chauffage, puis un volume de 180,uL de cette solution revenue a temperature ambiante est injecte en sous cutane chez le rat. Une fois [' injection terminee, une com presse a 4 C est apposee su r le site d' injection pendant 3 minutes, afin d'y abaisser la temperature et de provoquer la gelification. L'animal est sacrifie 2h30 apres ['injection et une observation visuelle de la forme de ['implant est effectuee. Puis ['implant est extrait du site d'injection et pese. Dans cette experimentation, I'implant avait une forme discodale d'environ 1 cm de diametre et un poids de 130 mg. 23 2337099 REVENDICATIONS 1. Composition thermosensible sous forme liquide contenant - un liquide organique hydrophobe, - une substance organogelatrice dont les molecules ont la capacite de se lier entre elles par liaisons de faible energie, et - une substance bioactive, qui passe sous forme d'organogel lorsqu'elle entre en contact avec un liquide physiologique, lors de son administration a un corps animal, en particulier I'homme. 2. Composition selon la revendication 1, caracterisee en ce que la formation de l'organogel se fait par refroidissement du site d'application de ladite composition. 3. Composition selon la revendication 1 ou 2, caracterisee en ce qu'elle contient en outre un solvent organique hydrophile capable de creer des liaisons falbles avec la substance organogelatrice, et que la formation de l'organogel se fait par diffusion audit solvent organique hydrophile vers le milieu aqueux. 4. Composition selon la revend ication 1 ou 2, caracterisee en ce q ue led it organogel possede une temperature de transition de l'etat liquide a l'etat gel inferieure a la temperature du site d'application dans le cas ou l'organogel est administre sans solvent organique hydrophile et une temperature de transition de l'etat gel a l'etat liquide superieure a la temperature corporelle. 5. Com position selon la revend ication 4, ca racterisee en ce q ue led it organogel possede une temperature de transition de l'btat liquide a l'etat gel inferieure a 30 C et une temperature de transition de l'etat gel a l'etat liquide superieure a + 35 C. 24 2337099 6. Composition selon l'une des revendications 3 a 5 caracterisee en ce que la proportion du solvent organique hydrophile est inferieure a 60 %, et preferentiellement inferieure a 20 % en poids de ladite composition. 7. Composition selon l'une des revendications 3 a 6 caracterisee en ce que Iedit solvent organique hydrophile appartient au groupe comprenant ltethanol, le glycerol, I'alcool benzylique, le propylene glycol, le Nmethylpyrrolidone et le dimethylsulfoxide (DMSO), le poly(ethylene) glycol de faible poids moleculaire, le chlorobutanol, le furfural, le N-Ndimethyacetamide, le glycerol formal, I'isopropylidene glycerol, le lactate d'ethyle, I'acide acetique et l'acide lactique. 8. Composition selon la revendication 7, caracterisee en ce q ue led it solve nt organique hydrophile est ['ethanol. 9. Composition selon l'une des revendications precedentes, caracterisee en ce que ledit liquide organique hydrophobe appartient au groupe comprenant les huiles vegetales, les triglycerides, les huiles semi-synthetiques, et les solvents organiques non miscibles a lteau. 10. Composition selon la revendication 9, caracterisee en ce que ladite substance organique hydrophobe est l'huile de soja, le squalene, le benzoate de benzyle, un triglyceride, ou un melange de benzoate de benzyle et d'alcool benzylique. 11. Composition selon l'une des revendications precedentes, caracterisee en ce que ladite substance biologiquement active appartient au groupe comprenant les proteines, les peptides, les acides amines, les vitamines, les acides nucleiques et les oligonucleotides. 12. Composition selon la revendication 11, caracterisee en ce que ladite substance biologiquement active est choisie parmi la morphine, I'interferon a, 2837099 I'interferon 0, la somatostatine, I'heparine, les interleukines, I'erythropoetine, la ca lcitonine, I' hormone de croissance h umaine, I'hormone thyreotrope. 13. Composition selon l'une des revendications precedentes, caracterisee en ce que la substance organogelatrice represente entre 0,5 et 50 % en poids du poids total de ladite composition. 14. Composition selon l'une des revendications precedentes, caracterisee en ce que la substance organogelatrice est une molecule de falble poids moleculaire presentant des extremites acide, alcool ou amine, notamment un derive d'acides amines. 15. Composition selon la revendications 14, caracterisee en ce que la substance organogelatrice appartient au groupe des derives esters de I'alanine. i6. Composition selon la revendication 15, caracterisee en ce que ladite substance organogelatrice est le N-lauroyl L-alanine methyle ester ou N lauroyl L-alanine ethyle ester. 17. Organogel obtenu a partir de la composition selon l'une des revendications 1 a 16, caracterise en ce qu'il reste sous forme gelifiee stable entre la temperature d'application et la temperature de transition gel/liquide de ladite composition. 18. Utilisation d'une composition selon l'une des revendications 1 a 17 pour la fabrication d'un medicament destine a etre injecte dans l'organisme par vole parenterale extravasculaire et notamment par vole sous cutanee, intradermique, intraperitoneale ou intramusculaire, ou destine a etre administre par vole intra-oculaire ou par vole vaginale, sur une plate ouverte ou lors d'une intervention chirurgicale. 26 2837099 19. Utilisation d'une composition selon l'une des revendications 1 a 18 pour la fabrication diun medicament destine a etre utilise comme vecteur de liberation prolongee de substance(s) bioactive(s) dans l'organisme. 20. Procede de preparation d'une composition selon la revendication 1, caracterise en ce que la substance bioactive, eventuellement en solution aqueuse, est ajoutee au melange constitue de la substance organogelatrice et du solvent organique hydrophobe. 21. Procede de preparation d'une composition selon la revendication 3 qui consiste a - dissoudre la substance organogelatrice dans le solvent organique hydrophile, puis a - incorporer la substance bioactive et le solvent organique hydrobobe. 22. Procede selon la revendication 21, caracterise en ce que lorsque la substance bioactive est peu soluble ou pas soluble dans la phase organique, une solution aqueuse de ladite substance est dispersee sous agitation dans la phase organique constituee de la substance organogelatrice et du solvent