FR 2839073 A1 20031031 FR 0205284 A 20020426 HPV-16 contenant des anticorps selon la revendication 22. 1 2839073 PROCEDE D'EXTRACTION D'INULINE A PARTIR DE CHICOREES La presente invention a pour objet la fabrication de poudre d'inuline purifiee a partir de racines de chicoree (Cichorium intibus). L'inuline, polymere de fructose de falble poids moleculaire, est le polymere de reserve de la chicoree; il constitue la totalite des sucres de la chicoree. Des procedes actuels de fabrication d'inuline bases sur ['extraction d'inuline a partir de racines de chicoree vent deja connus. De fa,con commune, les racines de chicorees vent d'abord epierrees et levees. Wiles vent ensuite decoupees en cossettes de 14-15 m/100g grace a un couperacines. Ces cossettes subissent une diffusion a contre-courant avec de l'eau chaude (temperature d'extraction: 65-70 C). Les jus de diffusion vent recuperes et les cossettes epuisees vent pressees. Les jus de presse vent recuperes et collectes avec les jus de diffusion. A ce stade, les jus d'inuline contiennent un taux important d'impuretes et dolvent done subir une epuration par voIe calco- carbonique. Dans certains procedes, les jus vent chaules et carbonates simultanement, dans d'autre, ils vent chaules directement a pH 13 puis carbonates jusque pH 11. Dans un troisieme cas, ils vent pre-chaules a pH 11 puis subissent un chaulage massif et une carbonatation synchrone. Dans tous les cas, ils vent alors decantes et filtres. Dans l'etat de ['art, vent mises en ceuvre des cossettes de grande taille presentant une surface d'echange reduite. La diffusion de l'inuline necessite done un temps de contact relativement long a temperature elevee afin de realiser une extraction convenable. Ces conditions de travail vent a l'origine de phenomenes indesirables tels que: - Oxydation des jus; Diffusion importante d'impuretes (proteines, sels) conjointement a l'inuline; - Developpements bacteriens et generation d'acides organiques. 2 2839073 Concernant la purification, la vole "chaulage-carbonatation simultanes" rend les jus de decantation difficiles a filtrer, induisant des pertes d'inuline. Le chaulage massif, quant a lui, presente un inconvenient majeur: un pH superieur a 11 entrane une degradation de l'inuline en fructose et glucose. Enfin, tous les procedes cites ci-dessus impliquent une utilisation importante: - De chaux, a l'origine de coOts eleves; - De dioxyde de carbone, a l'origine de rejets de CO2 dans ['atmosphere, avec un impact non negligeable sur l'environnement. L'objet de la presente invention est un procede permettant d'obtenir un jus d'inuline purifie ne necessitant qu'une quantite reduite de chaux et pas de CO2, tout en reduisant les pertes en inuline et en lui conservant sa structure native, et ce, principalement grace a la mise en ceuvre d'agents de separation au cours de l'etape de purification. Dans ce procede, des racines de chicorees vent fragmentees. Les fragments vent mis en contact avec de lteau (contenant eventuellement de l'inuline), dans des conditions permettant la diffusion de la majeure partie de l'inuline dans la fraction liquide. Cette fraction liquide est separee des fragments afin d'obtenir une fraction liquide separee. Celle-ci est alors chaulee jusquta un pH au moins egal a 9. On en separe alors les impuretes par addition d'agents de separation, puis decantation et enfin, filtration des jus de surverse obtenus. Ce procede est caracterise par le fait que la separation s'effectue grace a ['addition d'abord d'un agent de coagulation puts, apres une duree de coagulation, d'un agent de floculation. Les quantites respectives des agents mises en osuvre vent telles que les jus de surverse filtres presentent une teneur en inuline, mesuree dans le present brevet par l'analyse des sucres totaux, d'au moins 85% sur matiere seche. Pour cela, la mise en contact des chicoree avec l'eau se realise sur des fragments de chicoree presentant une surface d'echange superieure a celle des cossettes. De plus, I'extraction se realise par pressage et non par simple diffusion, ce qui permet de reduire la temperature d'extraction et le temps de mise en contact, tout en conservant un rendement d'extraction dtinuline interessant. Le jus d'extraction obtenu est de meilleure qualite. Enfin, dans la mesure ou l'epuration consiste a effectuer un chaulage a pH modere suivi 3 2839073 d'une separation des impuretes a ['aide d'agents coagulants et floculants au lieu de l'etape de calco-carbonatation classique, les quantites de chaux vent reduites et l'on n'utilise pas de dioxyde de carbone. Plus precisement, le procede consiste: a) A epierrer et laver des racines de chicorees fraches (Cichorium intibus); b) A les fragmenter en fragments de petite taille: - Soit au moyen d'une rape, pouvant etre par exemple, de marque Bucher, type C6, fonctionnant avec un rotor a 3 marteaux tournant a 730trs/min, et presentant 26 rangees de couteaux sur le bord de la chambre de rapage; - Soit au moyen d'un coupe-racines suivi d'un broyeur a herbe, le coupe-racines pouvant etre, par exemple, de marque PUTSH, le broyeur a herbes pouvant etre, par exemple, de la marque Maguin, de type SB 120A RG, tournant a 1000 trs/min. Le but est d'obtenir des fragments dont au moins 50% presentent une granulometrie inferieure a 1,6 mm, et, avantageusement dont la granulometrie est la suivante: Granulometrie % > 3,15 10-20% > 2,24 9-12% > 1,6 10-16% > 1,25 6-10% > 0,8 7-10% > 0,5 5-7% Fond 31-38% La granulometrie est determinee par passage du broyat humide sur des tamis presentant differentes taille de maille, avec poussage a I'eau. La methode est la suivante: - Chaque tamis est pese sec (M1) puis dispose sur le tamiseur; - 1 OOg de broyat vent deposes sur le premier tamis (M2); 4 2839073 - Le tamis est mis en marche; - 51 d'eau vent verses sur le premier tamis; - Le tamisage est conduit pendant 10 minutes; - L'excddent d'eau est blimine et chaque tamis est pesg tM3); - La proportion de chaque fraction granulomGtrique est calculde ainsi: 1% de produit humide sur le tamis = (M3-M1 j/M2x1 ool et dont la composition est la suivante: Composg % sur MS Matiere seche 23 - 25 % Matiere seche insoluble 16 - 18% Azote total 0, 7 - 0,9 % Cendres 4,4 - 5,5 % Sucres libres 4 - 8 % Sucres totaux 68 - 73 % - Les teneurs en sucres (glucose, fructose) vent dbtermindes par HPLC a C sur colonne dchangeuse d'ions sous forme calcium (marque Biorad, refgrence Aminex HPX 87C, dimension 300 x 7.8 mm) gquipbe d'une pr colonne (marque Biorad, rgfgrence Aminex HPX 87C, dimension 30 x 4.6 mm); bluant eau ultrapure a un dgbit de 0.6 ml/mini dbtection par rgfractometrie. - Les sucres libres vent dosgs apres diffusion, les sucres totaux apres hydrolyse enzymatique. - Protocole de prdparation de l'bchantillon pour le dosage: * Sucres libres: - Diffuser, 30 minutes a 80 C,1 g de matiere seche de chicorde dans 150 g d'eau, - Diluer pour analyse pour se ramener a 1 g de MS /litre 2839073 Filtrer sur C18 et 0.22 m avant analyse HPLC. * Sucres totaux - Diffuser 30 minutes a 80 C, 1 g de matiere seche de chicoree dans 150 g d'eau, - Ajuster le pH a 4.5 - Ajouter 1 ml d'enzyme N230 NOVO NORDISK - Agiter au bain-marie 60 C pendant 30 minutes - Laisser refroidir - Diluer pour analyse pour se ramener a 1 g de MS /litre - Filtrer sur C18 et 0.22 m avant analyse HPLC. Au cours de l'hydrolyse enzymatique de l'inuline, la rupture de la liaison osidique engendre une augmentation de la matiere seche. La teneur en sucres totaux est done calculee selon une formule prenant en compte cette variation de la matiere seche: lsucre totaux = sucres totaux mesures par HPLC x 0,951 La determination du taux d'azote total est realisee suivant la methode de Kjeldahl. Le principe de cette methode consiste a transformer l'azote organique en sulfate d'ammonium par action d'acide sulfurique concentre, a chaud, en presence d'un catalyseur. L'ammoniaque est ensuite libere de son sel au moyen de soude puis est entrane par distillation, et enfin recueilli dans une solution d'acide borique a pH 4,65. La titration s'effectue par de l'acide sulfurique dilue jusqu'a retour au pH initial. 1) Peser environ exactement m g de produit a analyser (par exemple m = 2 g de matiere seche de produit a analyser) 2) Incorporer ltechantillon dans un matras de 250 ml 3) Introduire deux pastilles de catalyseur de mineralisation Kjeltabs W 4) Ajouter 25 mL d'acide sulfurique concentre sous une hotte 5) Mineraliser progressivement a thermostat moyen jusqu'a apparition de fumee blanchatre (Mineralisateur Gerhardt, Kjeldatherm) 6 2839073 6) Monter alors a une temperature de 400 C, y rester 2 heures (disparition de la coloration verdatre) 7) Cheque serie doit comporter: - 1 etalon NH4CI seche 1 h30 a 1 1 0 C (100 mg) s (valeurtheorique en azote: 26,17%) -1 blanc i.e NT des reactifs et du materiel 8) Introduire de la lessive de soude dans le tube de mineralisation jusquta obtention d'une coloration noire ou bleue 9) Distiller pendant 5 mn (Distillateur - Titrateur Gerhardt, Vapodest 6) et recueillir le distillat dans 50 mL d'acide borique a 20 g/L ) Titration du distillat par pH-metrie par une solution d'acide sulfurique 0,1N 11) pH final de titration 4,65 (correspond au retour au pH initial de l'acide borique) Le taux d'azote total du produit est obtenu au moyen de la formule suivante: |((V1 -V2) x14x0,1 x100)/m Avec: V1 Volume H2SO4 titrant de l'echantillon V2 Volume H2SO4titrant du blanc m Masse en mg de la prise d'essai La determination du taux de cendres est realisee par incineration du produit a analyser en atmosphere oxydante a 550 C. 1) Placer des creusets en porcelaine pendant une heure dans un four (par exemple Carbolite CSF 1200) prechauffe a 700 C. 2) Peser (PO) les creusets apres refroidissement au dessicateur. 3) Refroidir le four a temperature ambiante. 4) Introduire environ exactement 3 a 4 g de produit (P1) dans les creusets. ) Chauffer avec precautions les creusets au moyen d'une plaque chauffante jusqu'a ce que les prises d'essais soient totalement carbonisees. 6) Placer les creusets dans le four. 7) Monter en temperature tres progressivement jusqu'a atteindre 550 C. 7 2839073 8) Laisser a 550 C pendant 12 heures ou jusqu'a obtention de cendres homogenes (blanches). 9) Peser (P2) les creusets apres refroidissement au dessicateur. Le pourcentage de cendres du produit est obtenu par la formule: I((P2 PO) / P1) x 100| Et dont les degree de polymerisation l'inuline (DP) presentent la repartition suivante: DP DP2 DP3 DP4 DP5 DP6 DP7 DP8 DP9 DP10 DP11 DP12 DP13 DP14 DP15 DP16 DP17 % 17 20,5 9,5 7,5 7,5 7,5 7 6 4,5 4 3,5 3 3,5 2 2 1 Le degre de polymerisation exprime le nombre de residue osidiques (fructose et glucose dans le cas de l'inuline) dont est constitue un polymere. La determination du degre de polymerisation de l'inuline est realisee par HPLC selon le protocole decrit dans la reference: >,1984, 303, 417-421. Colonne: Nucleosil silice greffee NH2, Fournisseur: Macherey-Nagel, dimension 250 x 4.6 mm Temperature colonne: 35 C Eluant: Acetonitrile/eau/polyethylene glycol 10000/1,4 diaminobutane: /50/0.2/0.02 Debit: 1 ml/min (pression maximum 8 2839073 - Dans une cuve de 1 m3 agitee a environ X trs/min; - A une temperature comprise entre 55 C et 70 C et, de preference entre 60 C et 65 C; - En presence d'un agent anti-oxydant, tel que le bisulfite de sodium, a raison de 0,2 a 0,6% de bisulfite de sodium sur matiere seche, et de preference 0,3% de bisulfite de sodium sur matiere seche; - Pendant une duree comprise entre 15 a 30 minutes et, de preference entre 20 et 25 mini - De telle sorte que l'eau represente entre 80 et 90%, et, de preference 85% en poids du broyat dilue; de fa,con a obtenir une fraction liquide contenant de l'inuline et certaines impuretes. L'avantage de travailler a cette temperature est de limiter les phenomenes d'oxydation et la mise en solution d'impuretes; celui de travailler rapidement est de limiter les developpements bacteriens et ['apparition d'acides organiques. d) A separer la fraction solide de la fraction liquide dans le but de recuperer cette derriere et de la purifier. La separation peut s'effectuer par differentes technologies: - Par pressage sur un filtre- presse de la marque Choquenet, equipe avec des plateaux de 800x800 mm, et presentant une surface filtrante de 1m2 par plateau; le pressage peut s'effectuer en un etage ou, preferentiellement en deux etages avec un recyclage des boues de filtre-presse; - Et, de preference, par pressage sur une presse bi-vis type P35 de la marque Stord, equipee avec des vis de la marque Babbini, et dont la grille presente les caracteristiques de porosite suivantes: Longueur de la tailledes pores de la grille grille Jusqu'a 46 cm 2 mm De46a62cm 1,5mm De 62 a 157 cm 1 mm 9 2839073 Le pressage peut steffectuer en un etage; on obtient alors une fraction solide 1 et une fraction liquide 1. Avantageusement, on effectue un deuxieme etage de pressage: s pour cela, la fraction solide 1 (issue du premier etage) est mise en contact avec de lteau, de telle sorte que l'eau represente en masse, 90% du melange eaufraction solide, pendant 15 a 30 minutes et, de preference entre 20 et 25 minutes. Le melange est alors presse; la fraction liquide 2 obtenue est alors utilisee pour la mise en contact des fragments initiaux, en substitution totale de l'eau, de telle sorte que l'eau represente en poids dans le broyat dilue entre 80 et 90%, et, de preference 85%. La fraction liquide 1 separee ainsi obtenue presente les caracteristiques suivantes: A q Matiere seche 11-14% Azote total 0,5-1% Sucres totaux 8184% e) A faire subir a cette fraction liquide 1 separee un chaulage: Soit un chaulage massif, en ajoutant en une fois une quantite de fait de chaux (a 180g/l de CaO) pour atteindre un pH au minimum de 9, de preference 9, ce qui represente globalement une quantite de CaO inferieure a 2g/l de CaO/litre de fraction liquide separee; - Soit, et preferentiellement, un chaulage progressif, en lui ajoutant une premiere quantite de fait de chaux (a 180g/l de CaO) pour atteindre un pH compris entre 7 et 8, de preference 7,5, puis une deuxieme quantite de fait de chaux pour arriver a un pH compris entre 8 et 9, de preference 8,5 et enfin, en ajoutant une derriere quantite de fait de chaux pour arriver a un pH au minimum de 9, de preference de 9, ce qui represente globalement une quantite de CaO inferieure a 2g/l de CaO par litre de fraction liquide separee; 2839073 A agiter cette solution pendant une duree de 10 a 20 min. de preference de 15 mini a une temperature comprise entre 75 et 85 C de preference de 80 C. On obtient alors une fraction liquide chaulee prbsentant les caracteristiques suivantes: Matiere seche 12-14% Sucres totaux (% sur MS) 85-89% trouble 30-40 Le trouble est detecte a 420nm, sur une solution non filtree. La methode est la suivante: a. Ia solution a analyser est diluee avec de lteau distillee de fa,con a obtenir une densite optique comprise entre 0,2 et 0,8; b. L'absorbance est alors lue a 420nm sur la solution filtree et non filtree. L'absorbance est calculee ainsi: bs = DO non filtre- DO filtre| Le trouble est calcule ainsi, en tenant compte des tables de conversion: - Conversion inuline: brix corrige = (1,2xBrix lu - 0,8) - Conversion fructose: brix corrige = (1,017xBrix lu-0,0719) rouble (U.l) = (100 000xabs)i(1ongueur de la cuve x brig |corrigej| f) A separer les impuretes de la fraction liquide chaulee gr3ce a l'utilisation d'agents de separation facilitant la decantation et la filtration. Ce procede permet d'eviter l'utilisation de dioxyde de carbone. g) Pour cela, a cette fraction liquide chaulee, on ajoute tout d'abord un agent de coagulation organique de type polyamine de teas poids moleculaire (5.104 Daltons) et de viscosite moyenne (200-450 cps a C), par exemple ['agent Sucazur 4583, de la societe Degremont Erpac, de la fa, con suivante: - L'agent de coagulation est d'abord dilue dans de l'eau de facon a ce que ['agent represente 1% du volume de la solution d'agent coagulant; - La solution d'agent coagulant est ajoutee a la fraction liquide chaulee, de maniere a ce que ['agent de coagulation represente entre 1 et 20 ppm, et, de preference, 5 ppm sur la fraction liquide chaulee; - La fraction liquide chaulee ainsi coagulee est melangee pendant au moins 5 minutes; h) On ajoute alors a cette fraction liquide coagulee, un agent de floculation de type copolymere d'acrylamide de haut poids moleculaire (107 Daltons), presentant une viscosite elevee en solution a 5g/l a 25 C (800cps), et de preference ['agent floculant Prosedim AS 23 Suc de la marque Degremont Erpac, de la fa,con suivante: - L'agent de floculation est d'abord dilue dans de l'eau de fa,con a ce que ['agent de floculation represente 1% du volume de la solution d'agent de floculation; - La solution d'agent de floculation est ajoutee a la fraction liquide coagulee, de maniere a ce que ['agent de floculation represente entre 1 et 20 ppm, et, de preference, 5 ppm sur la fraction liquide coagulee; - la fraction liquide coagulee-floculee ainsi obtenue est alors agitee pendant au moins 5 minutes; i) A decanter cette fraction liquide coagulee-floculee pendant au moins 1 h, a une temperature comprise entre 75 et 85 C et de preference 80 C, de fa,con a obtenir des boues et un jus de surverse presentant les caracteristiques suivantes: Matiere seche 11-13% Sucres totaux (% sur MS) 84-86% Trouble 30-36 k) A recuperer le jus de suerse; 12 2839073 I) A passer les boues de decantation sur filtre epaississeur de fa,con a en recuperer les jus; m) A melanger les jus de surverse et jus des boues, puis a leur faire subir une filtration sur un filtre a plaques cellulosiques de porosite 10 m, par exemple des plaques de la marque Seitz, de type T1000, eventuellement et avantageusement suivie d'une seconde filtration sur des plaques de porosite 0,22,um afin d'assurer la sterilite; de fa,con a obtenir un jus de surverse filtre presentant les caracteristiques suivantes: Matiere seche 1 1-13% Sucres totaux (% sur MS) 84-87% Trouble 0-6 n) A acidifier ce jus de surverse filtre: - Soit par electrodialyse; - Soit, et de preference, sur une resine d'echange d'ion cationique fortement acide, de type polystyrenique, et, de preference l'Amberlite 200C Na; Et, pour obtenir l'inuline sous forme de poudre: o) A concentrer ce jus de surverse acidifie jusqu'a 25-35% de matiere seche et de preference 30%, sur un evaporateur a floss tombant; p) A atomiser ce jus acidifie afin d'obtenir une poudre d'inuline presentant les caracteristiques suivantes: Matiere seche 95-99% Azote total( % sur MS) 25% Cendres (% sur MS) 1-4% Fructose libre / sucre totaux 8-9% Sucres totaux (% sur MS) 89-91% Calcium (% sur MS) 0-0,05% Acides organiques (% sur MS) 1-3% Et dont les degree de polymerisation l'inuline presentent la repartition suivante: 13 2839073 % de chaque oligomere DP2 DP3 DP4 DP5 DP6 DP7 DP8 DP9 dans les fragments 17 2O,5 9,5 7,5 7,5 7,5 7 6 I) DP10 DP11 DP12 DP13 DP14 DP15 DP16 DP17 4,5 4 3,5 3 3,5 2 2 1 4 3 3 2 2 2 1 0 On obtient ainsi de l'inuline non degradee, puisque que la repartition des degree de polymerisation de ses oligomeres est tres proche de celle des oligomeres de l'inuline retrouvee dans les fragments broyes. Exemple 1 L'exemple suivant illustre le procede d'extraction de l'inuline utilisant le chanage coupe-racines/broyeur a herbe et la technique de pressage sur presse. 1219 Kg de chicorees fraches vent levees de maniere a obtenir 1000Kg de chicorees epierrees a 24% de matiere seche et 69,8% de sucres totaux. Wiles vent alors fragmentees par passage dans un coupe-racines PUTSH suivi d'un broyeur a herbes MAGUIN equipe d'une grille presentant des orifices de x25 mm. Le broyat obLenu presente les caracteristiques suivantes: Granulometrie % > 3,15 18,3 > 2,24 10,3 > 1,6 10,0 > 1,25 8,5 > 0,8 8,2 > 0,5 6,7 Fond 38,0 Le broyat est alors dilue avec la fraction liquide 2 issue de l'aval du procede. On lui ajoute 5 Kg d'une solution de bisulfite de sodium a15% et 655Kg de 14 2839073 fraction liquide 2 issue de l'aval du procede. Le melange est chauffe a 60 C par injection directe de vapeur qui represente un apport en eau de 120Kg. On obtient alors 1780Kg de broyat dilue chauffe a 15% de matiere seche. ll est alors presse sur une presse bi-vis de la marque STORD equipee de deux vis de la marque BABBINI. On obtient alors 249Kg d'une fraction solide 1 a ,1% de matiere seche et 1531Kg d'une fraction liquide 1 a 12,6% de matiere seche. La fraction solide 1 est diluee a nouveau avec 570Kg d'eau. Ce melange est de nouveau presse de la meme maniere que precedemment. On obtient alors 163,4 Kg d'une fraction solide 2 et 655Kg d'une fraction liquide 2 a 4,1% de matiere seche. Cette derriere est recuperee et utilisee en amont du procede pour diluer le broyat initial. La fraction liquide 1 presente les caracteristiques suivantes: Matiere seche 12,6% Azote total (% sur MS) 0,7% Sucres totaux (% sur MS) 83,5% Trouble 60 La fraction liquide 1 est alors chaulee de fa,con massive: pour cela, 8Kg de fait de chaux a 18% de matiere seche lui vent ajoutes en une foist A cette fraction liquide chaulee vent alors ajoutes 0,77Kg d'une solution de coagulant SUCAZUR 4583 a 1 % de matiere seche. La solution coagulee est alors agitee a X trs/min pendant 5 minutes. A cette fraction liquide coagulee vent alors ajoutes 7,7Kg de solution de floculant AS 23 a 0,1% de matiere seche. La fraction liquide coagulee est alors agitee a X trs/min pendant 5 minutes. La fraction liquide coagulee- floculee est alors envoyee dans un decanteur statique de temps de sejour 1 h. Apres ce temps de sejour, on recupere 1377Kg de jus de surverse a 12, 2% de matiere seche et 170Kg de boues a 16 % de matiere seche. Ces boues vent epaissies sur filtre epaississeur de maniere a en recuperer les just On obtient alors 34Kg de boues epaissies et 136Kg de jus a 12,2% de matiere seche. Ce jus est ajoute au jus de surverse : le melange est alors filtre sur plaques cellulosiques de 10pm de la marque SEITZ. On obtient alors 1506Kg de jus de surverse filtre a 12,1% de matiere seche. II presente les caracteristiques suivantes: Matiere seche 12,1 % 2839073 Sucres totaux (% sur MS) 86,5% Trouble 2 Celui-ci est alors acidifie par passage sur une resine cationique forte Amberlite 200C Na, a raison de 8BV/h. Le jus est alors pre-concentre jusqu'a une matiere seche de 30% puis atomise. L'on obtient alors 176 Kg de poudre d'inuline presentant la composition suivante: Compose % sur MS . _ Matiere seche 97% Azote total 0,6% Cendres 2,5% Fructose libres/sucres totaux 8,1% Sucres totaux 90,6% Calcium 0,03% Acides organiques 2,1% Et dont les degree de polymerisation l'inuline presentent la repartition suivante DP DP2 DP3 DP4 DP5 DP6 DP7 DP8 DP9 DP10 % 20 10 7 7 7 6 6 5 4 DP11 DP12 DP13 DP14 DP15 DP16 DP17 3 3 2 2 2 1 0 Le graphique ci-dessous montre bien que l'inuline a garde sa structure native puisque les degree de polymerisation suivent la meme repartition dans la poudre finale que dans le broyat initial. 16 2839073 2s,0% lli - 2.7 o,o % À Broyat o,oYO i: i 2 in:e OO.=;! - o o% i s 1 Q Q Og <>Q Exemple 2 Cet exemple suit le meme procede que celui presente precedemment, a ceci pres que la fragmentation des racines de chicoree s'effectue au moyen au moyen d'une rape de marque Bucher, type C6, fonctionnant avec un rotor a 3 marteaux tournant a 730trs/min, et presentant 26 rangees de couteaux sur le bord de la chambre de rapage. Ainsi, les fragments obtenus presentent le profil granulometrique suivant: Granulometrie % > 3,15 14,1 > 2,24 10,4 > 1,6 15,6 >1,25 9,3 >0,8 8,1 >0,5 5,4 Fond 37 Le broyat suit ensuite les memes etapes que dans l'exemple 1. 17 2839073 Exemple 3 L'exemple suivant est le meme procede que celui presente dans ltexemple 1, a ceci pres que, la separation des fractions liquide et solide s'effectue au moyen d'un filtre-presse. Ainsi, 500Kg de chicorees fraches a 24% de matiere seche vent broyees a ['aide d'un coupe-racines et d'un broyeur a herbe. Les fragments obtenus vent mis en contact avec 210Kg d'eau et 55Kg de fraction liquide issue d'aval du procede plus 3Kg d'une solution de bisulfite de sodium a 15%. Le melange est chauffe a 60 C par de la vapeur directe correspondent a 70Kg d'eau. Les 837Kg de broyat dilue a 14,6% de matiere seche vent alors presses sur filtre- presse de marque CHOQUENET. Pour cela, le broyat subit tout d'abord une phase de filtration: il est envoye sous pression contre la toile filtrante. ll subit alors une etape de compaction ou de l'air est injecte entre les plateaux. Apres cette etape de filtration- compaction, on recupere 782Kg de fraction liquide separee a 12,4% de matiere seche. Le broyat subit une troisieme etape de rin,cage: 75Kg d'eau vent envoyes sous pression a travers les gateaux. A cette etape, 75,7Kg de fraction solide et 55Kg de fraction liquide separee vent recuperes. Cette fraction liquide est recuperee et utilisee pour la dilution initiale du broyat. La fraction liquide separee 1 presente les caracteristiques suivantes: Matiere seche 12,0% Azote total (% sur MS) 0,7% Sucres totaux 82% La fraction liquide separee est alors chaulee puis separee selon l'exemple 1. 18 2839073 REVENDICATIONS 1. Procede de preparation d'une solution d'inuline a partir de chicoree, dans lequel on fragmente les racines de chicoree en fragments, on met les fragments en contact avec de lteau contenant eventuellement de l'inuline, dans des conditions dans lesquelles la plus grande partie de l'inuline contenue dans les fragments passe dans la fraction liquide, on separe la fraction liquide des fragments pour obtenir une fraction liquide separee, on chaule la fraction liquide separee jusqu'a obtention d'une fraction liquide chaulee d'un pH final au moins egal a 9, on separe les impuretes de la fraction liquide par addition d'agents de separation et par decantation puis filtration, pour obtenir comme jus de surverse filtre, la solution d'inuline, et caracterise en ce que lton effectue la separation des impuretes de la fraction liquide chaulee par addition, d'abord d'un agent de coagulation puts, apres une duree de coagulation, d'un agent de floculation, les quantites des deux agents etant telles que le jus de surverse filtre presente une teneur en inuline, mesuree dans le present brevet par l'analyse des sucres totaux, d'au moins 85% sur matiere seche. 2. Procede suivant la revendication 1, caracterise en ce que ['agent de coagulation est une polyamine cationique de teas poids moleculaire, ajoute a une dose comprise entre 1 et 20 ppm dans le jus et de preference de 5 ppm. 3. Procede selon l'une quelconque des revendications precedentes, caracterise en ce que ['agent de floculation est un copolymere d'acrylamide de haut poids moleculaire, ajoute a une dose comprise entre 1 et ppm (en ppm sur le volume de solution chaulee). 4. Procede selon l'une quelconque des revendications precedentes, caracterise en ce que la fraction liquide chaulee est agitee pendant au moins 5 minutes apres ajout de ['agent coagulant. 5. Procede selon l'une quelconque des revendications precedentes, caracterise en ce que la fraction liquide coagulee est agitee pendant au moins 5 minutes apres ajout de ['agent floculant. 6. Procede selon l'une quelconque des revendications precedentes, caracterise en ce que le jus de surverse filtre presente une purete en sucre au moins superieure a 85% (exprimee en sucres sur matiere seche). 7. Procede selon l'une quelconque des revendications precedentes, caracterise en ce que le pH final de la fraction liquide chaulee est au minimum de 9, et de preference de 9. 8. Procede selon l'une quelconque des revendications precedentes, caracterise en ce qutau moins 50 % des fragments presentent une granulometrie inferieure a 1,6 mm. 9. Procede selon l'une quelconque des revendications precedentes, caracterise en ce que l'on acidifie le jus de surverse filtre en le passant sur une resine d'echange d'ions, puis qu'on le concentre jusqu'a 30 Bx et enfin qu'on l'atomise de facon a obtenir une poudre d'inuline contenant au moins 89% d'inuline exprimee en sucres totaux sur matiere