FR 2839657 A1 20031121 FR 0205905 A 20020514 Dispersion colloïdale de nanoparticules de phosphate de calcium et d'au moins une protéine, ainsi que les nanoparticules redispersables et les particules calcinées correspondantes, procédé de préparation et utilisations. La présente invention a pour objet des dispersions colloïdales de nanoparticules de phosphate de calcium, et d'au moins une protéine. Elle concerne également les nanoparticules obtenues par lyophilisation de la dispersion précédente, ainsi que les particules obtenues par calcination des nanoparticules lyophilisées. Enfin l'invention a aussi pour objet le procédé de préparation et les utilisations de ces dispersions et de ces nanoparticules. Dans de nombreux produits, il est utile d'ajouter une source de composé de calcium pour enrichir ce produit en calcium en fonction des besoins des consommateurs. C'est le cas notamment dans le domaine alimentaire où l'on cherche à supplémenter en calcium les aliments, les boissons ou les préparations alimentaires. C'est également le cas dans le domaine pharmacologique où il est utile d'ajouter une source de composé de calcium dans des comprimés ou des solutions dans le but, par exemple, de prévenir l'ostéoporose ou pour traiter les maladies des os. Les techniques connues pour supplémenter un produit en calcium consistent à y ajouter des sels de calcium solubles, par exemple du gluconate de calcium. Il est également connu d'utiliser du phosphate de calcium comme source de calcium, notamment sous forme de dispersion. Cependant dans le cas de l'utilisation de phosphate de calcium, les dispersions obtenues ne sont pas stables. De plus il est difficile d'obtenir des poudres de phosphate de calcium précurseurs d'hydroxy-apatites à morphologie isotrope. En effet l'hydroxy-apatite développe classiquement une morphologie anisotrope. Cependant les techniques actuelles ne permettent pas d'obtenir des composés qui soient stables et dont la morphologie est contrôlée. Afin de répondre aux exigences des industriels, il est devenu nécessaire de trouver d'autres moyens pour apporter des composés stables dont la morphologie est contrôlée et de petite taille. Aussi le problème que se propose de résoudre l'invention est de fournir un composé, notamment sous forme de dispersion, stable, de taille nanométrique, et à morphologie contrôlée. Dans ce but l'invention propose selon un premier mode de réalisation des dispersions colloïdales de nanoparticules de phosphate de calcium et d'au moins une protéine, et dont la taille desdites nanoparticules est comprise entre 50 à 300 nm, et dont la morphologie desdites nanoparticules est sphérique. L'invention propose également selon un second mode de réalisation, des nanoparticules caractérisées en ce qu'elles sont obtenues par lyophilisation des dispersions colloïdales décrites ci-dessus. L'invention propose selon un troisième mode de réalisation des particules caractérisées en ce qu'elles sont obtenues par calcination des nanoparticules décrites ci-dessus. L'invention a également pour objet le procédé de préparation des dispersions colloïdales de nanoparticules de phosphate de calcium et d'au moins une protéine caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : (a) on forme un mélange comprenant l'agent complexant du calcium et une source de calcium, (b) on ajoute au milieu issu de l'étape (a), au moins une protéine, (c) on ajoute au milieu issu de l'étape (b), une source de phosphore, (d) on chauffe le milieu issu de l'étape (c) L'invention a également pour autre objet l'utilisation des dispersions colloïdales de nanoparticules de phosphate de calcium et d'au moins une protéine dans les industries alimentaires, cosmétiques, pharmacologiques. L'invention a également pour autre objet l'utilisation des nanoparticules ou des nanoparticules calcinées dans les industries alimentaires, cosmétiques, pharmacologiques. L'invention a pour avantage d'apporter une source de calcium qui peut être un précurseur d'hydroxy-apatite [ Ca10(PO4)6(OH)2 ] qui est la substance minérale qui se dépose sur la matrice osseuse au cours de l'édification du squelette. L'invention a pour autre avantage de fournir des dispersions colloïdales et / ou des nanoparticules de phosphate de calcium, qui sont utilisables dans le domaine dentaire afin d'éviter la déminéralisation, notamment dans les pâtes dentifrices ou les bains de bouche. L'invention a encore comme avantage de ne pas utiliser de caséines. Un autre avantage de l'invention est de fournir des dispersions colloïdales et / ou des nanoparticules qui puissent fournir de fortes concentrations en calcium aux produits auxquelles elles sont ajoutées. L'invention a encore pour avantage de proposer des particules calcinées, comme par exemple une hydroxy-apatite, à morphologie isotrope sphérique qui peut par exemple présenter un vif intérêt en chromatographie. D'autres avantages et caractéristiques de la présente invention apparaîtront clairement à la lecture de la description et des exemples donnés à titre purement illustratif et non limitatif, qui vont suivre. L'invention concerne tout d'abord une dispersion colloïdale de nanoparticules de phosphate de calcium et d'au moins une protéine, et dont la taille desdites nanoparticules est comprise entre 50 à 300 nm, et dont la morphologie desdites nanoparticules est sphérique. La dispersion colloïdale de nanoparticules selon l'invention comprend au moins une protéine. Avantageusement il s'agit d'au moins une protéine soluble, de préférence dans une phase aqueuse, notamment l'eau. Par au moins une protéine, on entend également selon l'invention au moins un polypeptide. Les protéines selon l'invention peuvent être sous forme dénaturée. De préférence, on utilisera des protéines d'origine naturelle, des protéines d'origine naturelle modifiées pour améliorer leur solubilité dans une phase aqueuse, des polypeptides naturelles et / ou modifiées, à l'exclusion des caséines. Ces protéines peuvent contenir des groupements à base de phosphore ou non. A titre de protéines on peut citer notamment au moins une protéine choisie dans le groupe constitué par les lysozymes, les protéines de soja, les protéines issues de la phase soluble du lait, les protéines issues des différents types de lactosérums. A titre d'exemple de protéines d'origone végétales, on peut citer les protéines provenant de pois, de féverole, de lupin, de haricot, de lentille, du blé, de l'orge, du seigle, du maïs, du riz, de l'avoine, et du millet, du soja, de l'arachide, du tournesol, du colza, du sénevé (notamment moutarde), de la noix de coco (coprah), de luzerne, d'orties, de pomme de terre, et de betterave. A titre de protéines d'originesanimales, on peut citer de façon non limitative les protéines laitières comme par exemple, les protéines de l'oeuf comme les ovalbumines, les protéines issues des os et / ou de la peau des b#ufs, porcs ou poisson, comme la gélatine. Comme protéines d'origine naturelle modifiée, on peut citer les protéines de soja, comme celles commercialisées par la société Protein Technologies International ou Dupont de Nemours. Les dispersions colloïdales de nanoparticules selon l'invention ne contiennent pas de caséines. Cela signifie qu'il n'y a pas de caséines ajoutées, ou ni de sels de caséines ajoutés, au cours de la préparation de ces dispersions colloïdales de nanoparticules selon l'invention. Par contre il peut y avoir des traces de caséines ou de leurs sels présentes dans les dispersions colloïdales de nanoparticules, dues à l'utilisation d'au moins une protéine issue de la phase soluble du lait, ou des différents types de lactosérums, ou de toutes autres fractions. Les dispersions colloïdales de nanoparticules selon l'invention peuvent également contenir au moins un agent complexant du calcium. Cet agent complexant du calcium peut posséder avantageusement au moins une fonction carboxylate, de préférence au moins trois fonctions carboxylates, et encore plus préférentiellement au moins quatre fonctions carboxylates. L'agent complexant possède avantageusement diverses fonctions acides caractérisées par des valeurs de pKa , co-logarithme des constantes d'acidités comprises entre 1,5 et 8, et des constantes de dissociation de complexes avec l'ion calcium , caractérisées par des valeurs de pKc , co-logarithme des constantes de complexation comprise entre 2 et 8 , de préférence comprise entre 2 et 6. L'agent complexant du calcium préféré selon l'invention est le sel de sodium de l'acide glutamique N, N diacétique de formule (NaCOO)CH2CH2- CH(COONa)N(CH2COONa)2- L'agent complexant du calcium peut dans certains cas se trouver à l'intérieur et / ou en surface des nanoparticules constitutives de la dispersion colloïdale, mais également dans la phase continue de la dispersion, ou dans les deux à la fois. Les nanoparticules de la dispersion colloïdale selon l'invention sont généralement formées de cristallites élémentaires de diamètre compris entre 3 et 20 nm. Par cristallites élémentaires, on entend des cristallites constitutifs des nanoparticules. Ces cristallites élémentaires sont avantageusement de morphologie isotrope de taille comprise entre 3 et 20 nm, visibles par microscopie électronique à transmission. La structure du phosphate de calcium contenu dans les nanoparticules de la dispersion colloïdale selon l'invention est généralement amorphe par diffraction aux rayons X. Cette caractérisation par diffraction aux rayons X est effectuée sur les poudres obtenues par lyophilisation des dispersions colloïdales selon l'invention. Par spectroscopie RMN solide du P31, ces phosphates de calcium sont caractérisés par une raie majoritaire à un déplacement chimique compris entre 2,5 et 4 ppm, de préférence vers 3,4 ppm et une raie complémentaire dont le déplacement chimique est compris entre 5 et 7 ppm, de préférence vers 6,4 ppm. La raie vers 3,4 ppm est généralement attribuée à une hydroxy-apatite carbonatée. Selon un mode de réalisation préférentiel, les nanoparticules de la dispersion colloïdale selon l'invention ont majoritairement une morphologie sphérique. Elles ont avantageusement une taille nanométrique, avec un diamètre compris entre 50 et 300 nm. Par morphologie sphérique, on entend une morphologie caractérisée par un indice de forme défini par le rapport R = grand diamètre / petit diamètre. Dans le cas de l'invention ce rapport R, tend avantageusement vers 1 à 1,5 , de préférence de 1 à 1,25 et encore plus préférentiellement de 1 à 1,1. Avantageusement ces nanoparticules de la dispersion colloïdale selon l'invention sont individualisées avec un pourcentage de nanoparticules individualisées en nombre supérieur ou égal à 60%, de préférence supérieur ou égal à 80 %, et encore plus préférentiellement supérieur ou égal à 90%. La répartition en taille est généralement monodisperse. Par monodisperse on entend des nanoparticules qui sont homogènes en taille et caractérisées par un rapport r = (d90-d10) / 2 dso ) compris entre 0,05 et 0,5, de préférence entre 0,05 et 0,25 et avantageusement entre 0,05 et 0,125. On peut utiliser la technique de cryo MET pour déterminer la taille, la monodispersité et l'état d'agrégation des particules élémentaires. Elle permet d'observer par microscopie électronique à transmission (MET), des échantillons maintenus congelés dans leur milieu naturel qui est de l'eau. La congélation s'effectue sur des films minces d'environ 50 à 100 nm d'épaisseur dans l'éthane liquide. Par cryo MET, l'état de dispersion des particules est bien préservé et représentatif de celui présent dans le milieu réel. Les nanoparticules de la dispersion colloïdale selon l'invention présentent un rapport phosphate de calcium / protéines, exprimé en masse de phosphate de calcium / masse de protéines compris entre 0,5/1 et 6 /1. Les nanoparticules de la dispersion colloïdale selon l'invention présentent parfois une composition en phosphate de calcium et en protéines qui est homogène. C'est à dire que les nanoparticules sont par exemple constituées par un assemblage de cristallites élémentaires de phosphates de calcium et de protéines réalisées de manière homogène ou par un assemblage hétérogène de type c#ur-écorce, avec une plus forte concentration de cristallites de phosphates de calcium en périphérie des nanoparticules. Le degré d'homogénéité de l'assemblage peut être mis en évidence par cryo microscopie à transmission (méthode Dubochet). Un contraste plus fort est observé pour le phosphate de calcium en comparaison des parties de protéines. Les dispersions colloïdales de nanoparticules selon l'invention présentent avantageusement un pH compris entre 4 à 8, de préférence un pH compris entre 5 à 7,5. La charge de surface des nanoparticules de la dispersion colloïdale peut être positive ou négative selon la nature des protéines. Ainsi, à pH voisin de pH 6, les nanoparticules de la dispersion colloïdale développent une charge de surface identique à la charge développée par la protéine au même pH. Les nanoparticules de la dispersion colloïdale développent ainsi des charges négatives lorsque les protéines sont des protéines de type protéines de la phase soluble du lait ou de type protéines de soja. Elles développent des charges positives lorsque la protéine utilisée est une protéine de type lysozyme. Ces charges de surface peuvent être déterminées par exemple par le tracé des courbes de potentiels électrophorétiques en fonction du pH . Les dispersions colloïdales de nanoparticules selon l'invention possèdent avantageusement une concentration en phosphate de calcium exprimé en concentration équivalente en calcium comprise entre 0,2 à 2 M en calcium. Les dispersions colloïdales selon l'invention peuvent être concentrées par postconcentration ou par ultrafiltration. Les dispersions colloïdales possèdent alors des concentrations exprimées en calcium supérieures à 1 M en calcium. Les dispersions colloïdales selon l'invention peuvent contenir des sels résiduels formés à partir des anions et cations associés contenus dans les solutions précurseurs de calcium et de phosphate de type, par exemple, NaCI, NH4CI, NaN03, NH4N03, KCI, KNO3. Elles peuvent également contenir des complexants, des protéines, des ions calciums et / ou des ions phosphates résiduels sous forme libre. Des composés initialement présents dans les solutions de protéines peuvent également être présents au sein de dispersions colloïdales comme par exemple le lactose. Ces concentrations résiduelles en composés précédemment définies peuvent être minimisées par purification des dispersions colloïdales par ultrafiltration. L'invention concerne selon un second objet les nanoparticules obtenues par lyophilisation des dispersions colloïdales précédemment décrites. Elles sont parfois dénommées nanoparticules lyophilisées, dans la suite du texte. Ces nanoparticules selon l'invention sont réalisées selon les techniques classiques de lyophilisation, de préférence après lavage par ultrafiltration de la dispersion colloïdale à lyophiliser. Ces nanoparticules selon l'invention sont redispersibles dans l'eau pour donner des dispersions colloïdales. En effet, à partir des nanoparticules selon l'invention, il est possible de réaliser des dispersions colloïdales ayant avantageusement les caractéristiques des dispersions précédemment décrites. La stabilité colloïdale des dispersions obtenues par simple redispersion dans l'eau de ces nanoparticules lyophilisées, est avantageusement supérieure à un jour, de préférence supérieure à une semaine, de préférence parfaitement stable au cours du temps à la condition de conserver la dispersion à l'abri des bactéries. Ces nanoparticules comprennent au moins une protéine ayant les mêmes caractéristiques que celles définies précédemment, dans le cas des dispersions. La structure du phosphate de calcium contenu dans les nanoparticules selon le second objet de l'invention est identique à celle décrite pour le premier objet de l'invention. Les nanoparticules lyophilisées peuvent également contenir des sels du type NaCI, NaN03, NH4N03, NH4CI, KN03, KCl. Les nanoparticules lyophilisées peuvent également contenir de l'eau. La quantité d'eau est alors comprise entre 0,1 et 10 %, de préférence comprise entre 1 et 8 %, pourcentage exprimé en poids. Selon un mode de réalisation préférentiel, les nanoparticules selon l'invention ont majoritairement une morphologie sphérique, une taille nanométrique, une répartition monodisperse, et présentent parfois une composition en phosphate de calcium et en protéines qui est homogène, comme déjà décrit plus haut en ce qui concerne les nanoparticules de la dispersion. Le rapport phosphate de calcium / protéines est le même que celui décrit pour les nanoparticules de la dispersion. Enfin l'invention concerne également les dispersions colloïdales caractérisée en ce qu'elles sont obtenues par remise en suspension des nanoparticules lyophilisées. L'invention concerne selon un troisième objet des particules qui sont obtenues par calcination des nanoparticules décrites ci-dessus et qui elles-mêmes ont été obtenues par lyophilisation des dispersions colloïdales précédemment décrites. La calcination est effectuée de préférence soit sous air, ou soit sous atmosphère inerte, puis air et de préférence avec un gradient de température supérieur ou égal à 400 C / min. De préférence, il convient de réaliser une calcination dite flash , c'est à dire avec introduction dans un four préalablement chauffé à la température de calcination et maintenu à cette température de calcination pendant un temps variant de 2 min à 1 heure. La calcination peut avoir lieu à des températures comprises avantageusement entre 200 C et 1000 C, et de préférence comprise entre 300 C et 800 C. De préférence, concernant l'obtention de poudres calcinées à morphologie isotrope, on utilise des poudres redispersables caractérisées par un rapport massique "Phosphate de calcium : protéines" élevé, c'est à dire un rapport massique variant de 2 :1 à 6:1. Il est préférable de calciner des nanoparticules lyophilisées ayant un rapport phosphate de calcium / protéines, supérieur ou égale à 3. Les particules calcinées selon l'invention ont avantageusement une morphologie isotrope, éventuellement agglomérées et sont de préférence de taille nanométrique. Ces particules calcinées présentent après calcination une structure de type apatitique, encore appelée hydroxy-apatite, de préférence de formule du type Ca10(PO4)6(OH)2, ou Ca2P207, ou CaHP04, ou Ca3(P04)2, ou encore phosphate de calcium amorphe, seul ou en mélange. Les particules calcinées selon l'invention peuvent contenir éventuellement la présence de sels du type NaCl, NaN03, NH4NO3, NH4CI. Les particules calcinées selon l'invention peuvent éventuellement et dans des cas très rares, contenir la présence de traces de protéines ou de polypeptides ou d'agent complexant ou leurs résidus, provenant de la pyrolyse des protéines ou des polypeptides ou de l'agent complexant. Les particules calcinées selon l'invention sont généralement anhydres. Les particules calcinées selon l'invention présentent avantageusement une isotropie, avec un rapport R, (avec R = grand diamètre (L) / petit diamètre (1) ) tendant avantageusement vers 1 à 1,5 , de préférence de 1 à 1,3. L'invention concerne selon un quatrième objet un procédé de préparation des dispersions colloïdales selon l'invention qui comprend les étapes suivantes : (a) on forme un mélange comprenant l'agent complexant du calcium et une source de calcium, (b) on ajoute au milieu issu de l'étape (a), au moins une protéine, (c) on ajoute au milieu issu de l'étape (b), une source de phosphore, (d) on chauffe le milieu issu de l'étape (c) La source de calcium utilisée à l'étape (a) est avantageusement un sel de calcium, ou un hydroxyde de calcium ou un carbonate de calcium. On peut citer notamment le dichlorure de calcium, le nitrate de calcium, de la chaux hydratée, du carbonate de calcium. La concentration en calcium est avantageusement d'au plus 1 M, de préférence au plus 0,5 M dans le mélange formé à l'étape (a). L'étape (a) du procédé de préparation selon l'invention est caractérisé en ce que le pH du milieu issu de l'étape (a) est avantageusement ajusté de manière à obtenir un pH compris entre 5 et 7. L'ajustement de pH est classiquement réalisé par l'addition d'HCI ou HN03. L'étape (a) du procédé est réalisée avec un rapport molaire Ra, pour lequel Ra = agent complexant du calcium / calcium, avantageusement compris entre 0,1 et 3. A l'étape b), la solution de protéines utilisée est généralement obtenue par simple dispersion de la protéine dans de l'eau déminéralisée. La source de phosphore utilisée à l'étape (c) est avantageusement un sel de phosphate de métal alcalin ou d'ammonium. On peut citer notamment le dihydrogénophosphate de sodium (NaH2P04) ou le monohydrogénophosphate de sodium (Na2HP04), ou le dihydrogénophosphate d'ammonium (NH4(H2P04), ou le monohydrogénophosphate d'ammonium (NH4)2(HP04). Au cours du procédé de préparation selon l'invention et avant l'addition de la source de phosphore selon l'étape (c), on ajuste avantageusement le pH du milieu à une valeur comprise entre 4,5 et 8. L'étape (c) du procédé est réalisée avec un rapport massique Rb, pour lequel Rb = phosphate de calcium / protéine (s), compris avantageusement entre 0,3 et 6. L'étape (c) du procédé est réalisée avec un rapport molaire Rc, pour lequel Rc = moles de calcium / mole de phosphore, compris avantageusement entre 1 et 4. Les diverses additions de réactifs sont réalisées à vitesse contrôlée ou de préférence de manière instantanée et à température ambiante. Au cours de l'étape (d) du procédé, on chauffe le milieu issu de l'étape (c) a une température avantageusement comprise entre 20 C et 90 C. Cette étape est réalisée selon les méthodes classiques de traitement thermique. De préférence, on introduit le milieu issu de l'étape (c) dans une étuve préalablement chauffée à la température du traitement thermique. La durée du traitement thermique est généralement comprise entre 2 heures et 24 heures de préférence entre 6 heures et 20 heures. La dispersion colloïdale peut alors être purifiée par lavage par de l'eau déminéralisée par ultrafiltration. Le lavage par ultrafiltration permet d'éliminer les sels et les complexants libres résiduels. Les dispersions colloïdales peuvent également être concentrées par ultrafiltration. Il est également possible d'ajouter un agent anti bacterien à la dispersion colloïdale obtenue. L'invention concerne selon un cinquième objet l'utilisation des dispersions colloïdales selon l'invention ou des dispersions colloïdales obtenues par le procédé de préparation selon l'invention dans les industries alimentaires, cosmétiques, pharmacologiques. L'invention concerne également l'utilisation des nanoparticules lyophilisées selon l'invention et des nanoparticules calcinées selon l'invention dans les industries alimentaires, cosmétiques, pharmacologiques. Elle concerne également l'utilisation des dispersions colloïdales ou des nanoparticules lyophilisées ou des particules calcinées pour le conditionnement et / ou le stockage de protéines, de polypeptides ou de toutes autres molécules. Elle concerne aussi l'utilisation des nanoparticules calcinées comme support pour la chromatographie. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois en limiter la portée. EXEMPLES 1 / Préparation de dispersions colloïdales 1-1/ Exemple 1-1 : Dispersion colloïdale de phosphate de calcium, d'agent complexant et de protéines de soja Etape (a) :Une solution A contenant des ions Ca2+ est obtenue en dissolvant 2,75 g de CaC12,2H20 (PM = 147,02 g, soit 18,7 millimoles de Ca) dans de l'eau déminéralisée et addition de 26,5 cm3 de complexant GBS 5 de formule développée NaCOO(CH2CH2)CH- (COONa) N (CH2COONa)2 à 1,4 M, soit 37,4 millimoles de GBS 5. Le mélange possède un pH de 13. On ajuste à pH 6 par HCI 1 M. Le volume final est de 35 cm3. Etape (b) : Une solution B contenant des protéines de soja ( commercialisée par Protein Technologies International, DuPont) Qualité FP 940 est obtenue en additionnant 1,87 g de protéines à de l'eau déminéralisée. On complète à 25 cm3 par de l'eau déminéralisée. On verse de manière instantanée la solution B dans la solution A fraîchement préparée. Etape (c) : Une solution C contenant des ions phosphate de sodium est obtenue par addition de 0,88 g de Na2HP04 ( PM = 141,96 g, soit 6,23 millimoles de P) dans 25 cm3. On ajuste à pH 6 par HCI 1 M. On additionne au mélange précédent, la solution C de manière instantanée. On réajuste l'ensemble réactionnel à pH 6. L'ensemble est laissé sous agitation 5 min. Etape (d) : On porte l'ensemble réactionnel dans une étuve préalablement chauffée à 50 C. La dispersion présente un aspect colloïdal après 16 heures à 50 C. 1-2/ Exemple 1-2: Dispersion colloïdale de phosphate de calcium, d'agent complexant et de protéines de lysozyme Etape (a) :Une solution A contenant des ions Ca2+ est obtenue en dissolvant 2,75 g de CaC12,2H20 (PM = 147,02 g, soit 18,7 millimoles de Ca) dans de l'eau déminéralisée et addition de 26,5 cm3 de complexant GBS 5 de formule développée NaCOO(CH2CH2)- CH- (COONa) N (CH2COONa)2 à 1,4 M, soit 37,4 millimoles de GBS 5. Le mélange possède un pH de 13. On ajuste à pH 6 par HCI 1 M. Le volume final est de 35 cm3. Etape (b) : Une solution B contenant du lysozyme est obtenue en additionnant 1,87 g de lysozyme à de l'eau déminéralisée. On complète à 25 cm3 par de l'eau déminéralisée. On verse de manière instantanée la solution B dans la solution A fraîchement préparée. Etape (c) : Une solution C contenant des ions phosphate de sodium est obtenue par addition de 0,88 g de Na2HP04 ( PM = 141,96 g, soit 6,23 millimoles de P) dans 25 cm3. On ajuste à pH 6 par HCI 1 M. on additionne au mélange précédent la solution C, de manière instantanée On réajuste l'ensemble réactionnel à pH 6 L'ensemble est laissé sous agitation 5 min. Etape (d) : On porte l'ensemble réactionnel dans une étuve préalablement chauffée à 50 C. La dispersion présente un aspect colloïdal après 16 heures à 50 C. 1-3/ Exemple 1-3 : Dispersion colloïdale de phosphate de calcium, d'agent complexant et de protéines laitières Etape (a) : Une solution A contenant des ions Ca2+ est obtenue en dissolvant 2,75 g de CaC12,2H20 (PM = 147,02 g , soit 18,7 millimoles de Ca) dans de l'eau déminéralisée et addition de 26,5 cm3 de complexant GBS 5 de formule développée NaCOO(CH2CH2)CH- (COONa) N (CH2COONa)2 à 1,4 M, soit 37,4 millimoles de GBS 5. Le mélange possède un pH de 13. On ajuste à pH 6 par HCI 1 M. Le volume final est de 35 cm3. Etape (b) : Une solution B contenant des protéines laitières issues du lactosérum est obtenue en additionnant 1,87 g de protéines laitières à de l'eau déminéralisée. On complète à 25 cm3 par de l'eau déminéralisée. On verse de manière instantanée la solution B dans la solution A fraîchement préparée. Etape (c) : Une solution C contenant des ions phosphate de sodium est obtenue par addition de 0,88 g de Na2HP04 ( PM = 141,96 g, soit 6,23 millimoles de P) dans 25 cm3. On ajuste à pH 6 par HCI 1 M. On additionne au mélange précédent la solution C, de manière instantanée. On réajuste l'ensemble réactionnel à pH 6. L'ensemble est laissé sous agitation 5 min. Etape (d) : On porte l'ensemble réactionnel dans une étuve préalablement portée à 50 C. La dispersion présente un aspect colloïdal après 16 heures à 50 C 2/ Préparation de nanoparticules lyophilisée 2-1 / Exempte 2-1 : (HAP: Protéine soja ) = (1:1) en poids, pH 6 La dispersion colloïdale obtenue à l'exemple 1-1 est lyophilisée. Par RMN solide du 31P, on observe un pic correspondant à un déplacement chimique de 3,4 ppm. La poudre lyophilisée est redispersable dans l'eau déminéralise. Par électronique à transmission on observe par cryo-microscopie (méthode Dubochet), des objets parfaitement individualisés, à répartition granulométrique monodisperse possédant une morphologie sphérique de taille d'environ 150 nm. Les courbes de potentiels électrophorétiques ont montré un point isoélectrique pH 4 et une charge négative au pH des dispersions d'environ-19 mV 2-2/ Exemple 2-2 : (HAP: Protéine lyzozyme) = (1:1) en poids, pH 6 La dispersion colloïdale obtenue à l'exemple 1-2 est lyophilisée. Par RMN solide du 31P, on observe un pic correspondant à un déplacement chimique de 3,4 ppm. La poudre lyophilisée est redispersable dans l'eau déminéralisée. Par électronique à transmission on observe par cryo-microscopie (méthode Dubochet), des objets parfaitement individualisés, à répartition granulométrique monodisperse possédant une morphologie sphérique de taille d'environ 150 nm. Les courbes de potentiels électrophorétiques ont montré un point iso-électrique à pH 9 et une charge positive au pH des dispersions d'environ + 5 mV. 2-3/ Exemple 2-3 : (HAP: Protéine WPC ) = (1:1) en poids, pH 6 La dispersion colloïdale obtenue à l'exemple 1-3 est lyophilisée. Par RMN solide du 31P, on observe un pic correspondant à un déplacement chimique de 3,4 ppm. La poudre lyophilisée est redispersable dans l'eau déminéralisée. Par électronique à transmission on observe par cryo-microscopie (méthode Dubochet), des objets parfaitement individualisés, à répartition granulométrique monodisperse possédant une morphologie sphérique de taille d'environ 150 nm. Les courbes de potentiels électrophorétiques ont montré un point isoélectrique à pH 4 et une charge négative au pH des dispersions d'environ - 18 mV. 3 / Préparation de particules calcinées 3-1/ Exemple 3-1: Essai à (HAP: Protéine WPC)= (3:1) en poids, pH 6 La dispersion colloïdale est préparée comme à l'exemple 1-3 mais en utilisant 0,62 g de protéines laitières. Cette dispersion est lyophilisée. Puis on réalise une calcination flash à 900 C La poudre obtenue de particules calcinées est constituée de phosphate de calcium et présente une morphologie isotrope en MET dont le rapport R est de 1,4. Par RX, on observe une structure avec un mélange d'hydroxy-apatite, de Ca3(P04)2 et de Ca2P207. REVENDICATIONS 1 Dispersion colloïdale de nanoparticules de phosphate de calcium et d'au moins une protéine, et dont la taille desdites nanoparticules est comprise entre 50 à 300 nm, et dont la morphologie desdites nanoparticules est sphérique. 2 Dispersion colloïdale selon la revendication 1 caractérisées en ce qu'elle comprend au moins un agent complexant du calcium. 3 Dispersion colloïdale selon l'une des revendications précédentes caractérisées en ce qu'elle comprend au moins un agent complexant du calcium possédant au moins une fonction carboxylate. 4 Dispersion colloïdale selon l'une des revendications précédentes caractérisées en ce qu'elle comprend au moins un agent complexant du calcium possédant au moins trois fonctions carboxylates. 5 Dispersion colloïdale selon l'une des revendications précédentes caractérisées en ce qu'elle comprend au moins un agent complexant du calcium possédant au moins quatre fonctions carboxylates. 6 Dispersion colloïdale selon l'une des revendications précédentes caractérisées en ce qu'elles comprennent au moins une protéine soluble. 7 Dispersion colloïdale selon la revendication 6 caractérisées en ce qu'elles comprennent au moins une protéine choisie dans le groupe constitué par les lysozymes, les protéines de soja, les protéines issues de la phase soluble du lait, les protéines issues des différents types de lactosérums. 8 Dispersion colloïdale selon l'une des revendications précédentes caractérisées en ce que les nanoparticules sont formées de cristallites élémentaires de diamètre compris entre 3 et 20 nm. 9 Nanoparticules caractérisées en ce qu'elles sont obtenues par lyophilisation des dispersions colloïdales selon les revendications 1 à 8. 10 Nanoparticules selon la revendication 9 caractérisées en ce qu'elles sont redispersibles dans l'eau pour donner les dispersions colloïdales selon les revendications 1 à 8. 11 Dispersion colloïdale caractérisée en ce qu'elles sont obtenues par remise en suspension des nanoparticules selon les revendications 9 à 10. 12 Particules calcinées caractérisées en ce qu'elles sont obtenues par calcination des nanoparticules selon la revendication 9 ou 10. 13 Particules calcinées selon la revendication 12 caractérisées en ce qu'elles présentent une isotropie comprise entre 1 et 1,5, mesurée par le rapport R = L / I. 14 Procédé de préparation du produit selon les revendications 1 à 8 caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : (a) on forme un mélange comprenant l'agent complexant du calcium et une source de calcium, (b) on ajoute au milieu issu de l'étape (a), au moins une protéine, (c) on ajoute au milieu issu de l'étape (b), une source de phosphore, (d) on chauffe le milieu issu de l'étape (c) 15 Procédé selon la revendication 14 caractérisé en ce que le pH du milieu issu de l'étape (a) est ajusté de manière à obtenir un pH compris entre 5 et 7. 16 Procédé selon l'une des revendications 14 à 15 caractérisé en ce qu'avant l'addition de la source de phosphore selon l'étape (c), on ajuste le pH du milieu à une valeur comprise entre 4,5 et 8. 17 Procédé selon l'une des revendications 14 à 16 caractérisé en ce que l'étape (a) est réalisée avec un rapport molaire Ra = agent complexant du calcium / calcium compris entre 0,1et 3. 18 Procédé selon l'une des revendications 14 à 17 caractérisé en ce que l'étape (c) est réalisée avec un rapport molaire Rb = phosphate de calcium / protéine (s) compris entre 0,3 et 6. 19 Procédé selon l'une des revendications 14 à 18 caractérisé en ce que l'étape (c) est réalisée avec un rapport massique Rc = moles de calcium / mole de phosphore, compris entre 1 et 4. 20 Utilisation des dispersions colloïdales obtenues selon l'une des revendications 1 à 8 ou des dispersions colloïdales obtenues par le procédé selon l'une des revendications 14 à 19 dans les industries alimentaires, cosmétiques, pharmacologiques. 21 Utilisation des nanoparticules selon les revendications 9 ou 10, ou des particules selon les revendications 12 ou 13 dans les industries alimentaires, cosmétiques, pharmacologiques.