FR 2786778 A1 20000609 FR 9815386 A 19981204 EXTRAIT PLACENTAIRE DE FRUIT PROCEDE DE PREPARATION ET COMPOSITION LE CONTENANT. Domaine technique L'invention concerne un extrait de placenta de fruit, notamment de melon (cucumis melo), le procédé pour sa préparation, les compositions cosmétiques, diététiques ou pharmaceutiques contenant l'extrait. Techniques antérieures Les fruits contiennent des substances et composés intéressants en vue d'applications autres que pour l'alimentation de l'homme comme en formulation cosmétique, en diététique en pharmacie humaine et animale. On trouve ainsi dans les fruits des vitamines, des sucres, des oligo éléments, des protéines, des enzymes. Pour présenter un intérêt pour les domaines cités, il faut extraire ces composés et souvent les concentrer, ce qui n'est pas souvent pratique ni économique. Parmi les fruits on trouve les fruits chamus avec les baies. Parmi les baies celles dont le péricarpe contienne des graines ou pépins, comme les cucurbitacées, les agrumes, les pommes, les tomates. Dans les cucurbitacées les chercheurs ont trouvé des molécules utilisables industriellement, comme la cucumisine, de l'ascorbate oxydase. Dés 1987 la présence de superoxide dismutase (SOD) est décrite dans citrulus vulgaris, ou coloquinte. La catalase est aussi présente dans ces fruits. Des travaux récents 1997, à l'université de Grenade (Espagne) par JM Palma et LA Delrio ont été conduits sur la SOD et sa purification dans les cotylédons de melons d'eau. Dans ce cas la matière est trop chère pour des applications industrielles. L'inconvénient essentiel de concentrer ces substances à partir de fruit est l'utilisation de produit destinés à l'alimentation, ce qui représente un gaspillage. Ainsi le brevet Bio-Obtention FR 2716 884 propose un extrait protéique soluble à partir de la chair de melon. La demanderesse s'est donc intéressée aux déchets de production et de transformation des fruits au sein des unités de transformation. Description sommaire de l'invention 2 2786778 L'invention consiste a obtenir un extrait en utilisant ce qu'en agronomie on appelle le placenta des fruits. Le placenta est ce qui à l'intérieur du péricarpe contient les graines. En dehors de l'avantage que ces placentas sont souvent des déchets dans l'industrie agro alimentaire donc très peu coûteux en comparaison du fruit entier, ils se sont révélés de façon inattendue aux cours des expériences faites en vue de l'invention plus riches généralement en substances recherchées que le reste du fruit, c'est le cas notamment pour le melon. L'objectif de recherche de la demanderesse s'est centré plus particulièrement sur les propriétés anti-oxydante et antiinflammatoire de ces nouveaux extraits. Parmi ces substances plus particulièrement recherchées les enzymes comme la superoxide dismutase (SOD), la Catalase et la peroxydase, des saponines, des sérines protéases, des anti protéases. L'extraction selon l'invention s'effectue à partir de matériel végétal frais, mûr. Une autre disposition de l'invention consiste à ne pas faire appel à des solvants autre que l'eau. La demanderesse a mis au point son invention avec des placentas de melon, et a vérifié son intérêt sur d'autres matériaux comme avec les placentas de tomates. Ainsi après avoir séparé la partie placentaire du fruit, on extrait par centrifugation ou pressage le jus placentaire auquel on additionne un conservateur cosmétique ou alimentaire. Dans le cas ou les opérations d'extraction se déroulent en moins de 24 heures et à une température inférieure à 6 C, les conservateurs sont inutiles à ce stade. Le culot restant après pressage des placentas de fruit contient les graines ou pépins. Ces graines ou pépins sont séparés par tamisage du culot après avoir séché celui-ci. On peut leur faire subir un lavage à l'éthanol. Ces graines ou pépins sont pressés pour en extraire 50% en moyenne de l'huile qu'ils contiennent. Le tourteau ou gateau final d'huilerie est broyé, et ensuite extrait par macération, dans le jus placentaire. Cette opération a pour but d'enrichir le jus en éléments hydrosolubles notamment en saponines. Par centrifugation on récupère la phase liquide qui est désucrée et concentrée par dialyse, filtration tangentielle ou ultra filtration. Dans une variante seul le jus placentaire est désucré, car en tant que tel il contient déjà les composants enzymatiques décrits précédemment. L'extrait final peut être liquide ou séché par lyophilisation atomisation ou étuvage sous vide sans dépasser 40 C. Généralement l'extrait final obtenu contient de 10 à 30 grammes d'extrait sec. Les applications recherchées par l'invention sont principalement dues aux propriétés seules ou associées de la superoxide dismutase, de la catalase et de la peroxydase. 3 2786778 L'extrait liquide ou sous forme de poudre peut être utilisé dans des formulations cosmétiques pour des propriétés régénérantes, nutritives, et anti-inflammatoires au niveau du tissu conjonctif L'extrait liquide ou sous forme de poudre peut être utilisé dans des formulations alimentaires pour ses propriétés anti oxydantes. L'extrait liquide ou sous forme de poudre peut être utilisé dans des formulations diététiques pour combattre les effets des stress oxydatif Manières de réaliser l'invention l0 L'invention bien que simple dans sa description sera bien comprise à l'aide des exemples qui illustrent ses multiples applications et ses avantages: Exemple I: Extrait de placenta de melon Dans un atelier de préparation de boules de melon surgelées, chaque melon est décalotté et sa partie centrale interne (placenta) est aspirée sous vide à l'aide d'un embout jouant le rôle d'emporte pièce. A partir de 15 kilogrammes de cette matière placentaire et par centrifugation on récupère 8 litres de jus, que l'on filtre. Le jus est dialysé à 4 C afin d'éviter la proléfiration bactériologique, pendant 12 heures. On obtient un liquide dont l'extrait sec est de 15 grammes par litre. On lyophilise une partie du liquide afin d'obtenir une poudre beige soluble. L'analyse de l'extrait sec présente une activité enzymatique superoxide dismutase au moins égale à 200 Unités par mg d'extrait sec, une activité Catalase au moins égale à 500 Unités/mg d'extrait sec, et une activité Peroxydase voisine de 10 Unités par mg d'extrait sec. Une action anti radicalaire probablement dues à la présence simultanée des enzymes contenues dans I extrait est mis en évidence en utilisant le test de Crapo JD; Mc Cord et I Fridovich ( 1978 Method Enzymol) Exemple 2 Extrait macéré: Le culot restant après pressage des placentas de fruits de l'exemple 1 contient environ 150 grammes de graines. Ces graines ayant été séparées par tamisage du culot après avoir séché celui-ci. On déshuile celles ci et le tourteau ainsi déshuilé est macéré dans le jus placentaire. Après séparation, et filtration on obtient un extrait enrichi par rapport à celui de l'exemplel, avec une activité de 300 UE SOD/mg extrait sec, et des traces de saponines. 4 2786778 Exemple 3: Extrait de placenta de tomate: A l'aide d'un dispositif tel qu'a l'exemple 1 et en faisant subir la même extraction on obtient une poudre soluble contenant des activités enzymatiques, notamment de la SOD à raison de 60 unités par mg de poudre soluble. Ce dosage s'effectue par inhibition de la SOD, méthode de Mc Cord. Exemple 4: Formulation cosmétique: A partir de poudre obtenu à partir de l'exemple 1, une crème est préparée et pour 100 grammes: poudre selon l'invention (selon ex. 1) I g huile peroxydée (Oléoxyne) 15 Tefosse 1500 (Gattefossé sa) 8 Sépilide HIB(Seppic sa) 0, 5 Germnall 115 0,2 Carbopol 934 (Goodrich) 0,3 Tri ethanol amine (TEA) 0,5 Eau 74,5 Total 100 g On constate in vitro sur culture cellulaires de fibroplastes une stimulation de leur croissance par le produit. Exemple 5: Formulation de vecteurs à usages cosmétiques: L'extrait est encapsulé avec des lécithines en liposomes selon les techniques usuelles. On obtient une solution de liposomes contenant un 100 000 unités enzymatiques SOD par litre de solution. Cette solution de liposomes permet une meilleure pénétration de la peau pour les formulations cosmétiques. Exemple 6: Produit pour la voie orale: On prépare un gel de chitosan à 1% dans un solvant obtenu en mélangeant 29% d'extrait liquide de l'exemple 1, 70% de sorbitol, et 1% d'acide acétique. Ce gel est séché dans le but d'obtenir une poudre dans le but de réaliser des comprimés de 750 mg dosés dans ce cas à 1000 UE SOD par comprimés. Ces comprimés sont utilisés en diététique pour combattre les effets du stress oxydatif, comme par exemple la récupération des efforts sportifs. 2786778 REVENDICATIONS 1/ Extrait d'anti oxydant végétal de plante fraîche caractérisé en ce qu'il provient de placenta de fruits charnus comme les baies. 2/ Extrait d'anti oxydant végétal de plante fraîche selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il provient de cucurbitacées comme le melon (cucumis melo). 3/ Extrait d'anti oxydant végétal de plante fraîche selon les revendications I et 2 caractérisé en ce qu'il contient une activité enzymatique superoxide dismutase au moins égale à Unités par mg d'extrait sec. 4/ Extrait végétal selon les revendications 1 et 2, caractérisé en ce qu'il contient une activité Catalase au moins égale à 500 Unités/mg d'extrait sec, et une activité Peroxydase voisine de 10 Unités par mg d'extrait sec. /Procédé de préparation de l'extrait selon l'une des revendications I à 4 caractérisé en ce qu'il comprend les étapes: a) A prélever puis presser ou centrifuger le placenta frais, et à recueillir le jus, auquel on additionne un conservateur cosmétique ou alimentaire. b) A sécher le gateau restant, pour en séparer par tamisage les graines. c) A extraire l'huile de ces graines par pressage et à recueillir le tourteau. d) Avec le jus obtenu en a) on fait macérer à le tourteau de façon a extraire les éléments hydrosolubles pour enrichir le jus de départ. e) On sépare par centrifugation la phase liquide que l'on concentre par dialyse ou Ultra Filtration, jusqu'à ce qu'elle contienne un extrait sec entre 10 et 30 g/I. 6/ Procédé d'extraction selon la revendication 5 caractérisé par le fait que l'on se limite aux étapes a) et à IlUltra filtration de l'étape e), c'est à dire sans extraire le gâteau de l'étape c). 7/ Procédé de préparation selon les revendications 5 et 6 consistant à lyophiliser ou atomiser l'extrait placentaire liquide de façon à obtenir l'extrait sous forme de poudre. 8/ Utilisation de l'extrait selon l'une des revendications 1 à 4 ou obtenu par le procédé selon l'une des revendications 5 à 7 dans des compositions alimentaires, diététiques, pharmaceutiques et cosmétiques. 9/ Utilisation cosmétique de l'extrait selon l'une des revendications I à 4 ou obtenu par le procédé selon l'une des revendications 5 à 7 pour son activité régénérante, nutritive, ou antiinflammatoire. / Utilisation de l'extrait selon l'une des revendications I à 4 ou obtenu par le procédé selon l'une des revendications 5 à 7 dans des compositions diététiques pour combattre le stress oxydatif l 'll