FR 2777191 A1 19991015 FR 9804570 A 19980410 1 2777191 L'invention a pour objet l'utilisation, à titre de principe actif, dans ou pour la préparation d'une composition d'au moins un extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis en tant qu'antagoniste du peptide intestinal vasoactif ou V.l.P (Vasoactive Intestinal Peptide). L'invention a en outre pour objet I'utilisation, à titre de principe actif, dudit extrait dans ou pour la préparation d'une composition, I'extrait ou la composition étant destinés à traiter les désordres associés à un excès de synthèse et/ou de libération du V.l.P.. L'invention a également pour objet l'utilisation, à titre de principe actif, dudit extrait dans ou pour la préparation d'une composition, I'extrait ou la composition étant destinés à diminuer la transpiration. L'invention a enfin pour objet un procédé de traitement cosmétique pour améliorer l'hygiène corporelle. Le V.I.P. est un élément chimique polypeptidique élaboré et libéré par une cellule endocrine ou par une fibre nerveuse. Le V.I.P. est composé de 28 acides aminés. Il fait partie de la famille de la sécrétine. L'analyse de sa séquence révèle une forte homologie avec ce peptide ainsi qu'avec le glucagon et le PACAP (pituitary adenylate cyclase activating polypeptide). Le V.l. P. a d'abord été identifié au niveau du poumon et de l'intestin o il agit en tant que puissant vasodilatateur. De fortes concentrations de V. l.P. ont été également retrouvées dans le système nerveux central et périphérique. Au niveau du système nerveux central, le V.l.P. est impliqué dans le contrôle de l'énergie métabolique (dégradation du glycogène) et dans la régulation de la circulation sanguine cérébrale par son activité vasodilatatrice. A la périphérie, le V.l.P. est présent dans de nombreux tissus o ses fonctions peuvent être diverses. Il est souvent colocalisé dans les fibres nerveuses parasympathiques avec l'acétylcholine o sa libération potentialise l'affinité de l'acétylcholine pour son récepteur. Outre une activité vasodilatatrice sur les vaisseaux de nombreux tissus, le V.l.P. possède également des fonctions immunomodulatrices (modulation de la migration et de la prolifération des lymphocytes T). Il intervient également de façon très importante dans les échanges hydriques et électrolytiques. De nombreuses fibres nerveuses contenant du V.l.P. sont présentes au niveau du tractus digestif (estomac, intestin, pancréas), I'appareil urogénital ou des glandes salivaire. Le V.l.P. possède également des propriétés myorelaxantes en particulier du tractus gastro- intestinal et des bronches. Le V.l.P. du fait de ses propriétés vasodilatatrices est impliqué dans l'érection. Au niveau de la peau, des fibres nerveuses V.l.P. positives sont décrites autour des glandes sudoripares eccrines et autour des glandes sébacées (Br. J. of Dermatol. 1990, 123, 65-76 - Japanese J. of Physiology 1987, 3, 929-936). 2 2777191 Le V.l.P. se lie à deux récepteurs, V.l.P. 1 et V.I.P. 2 (Sreedharan et al. Biochemical and Biophysical Research Communications. 1993, vol. 2, 546-553.) qui sont tous deux couplés à une protéine G. La fixation du V. I.P. sur l'un ou l'autre de ses récepteurs active une protéine G qui à son tour active l'adénylate cyclase. Cette dernière transforme l'Adénosine TriPhosphate (ATP) en Adénosine MonoPhosphate cyclique (AMPc) qui provoque ensuite une cascade d'événements biochimiques intracellulaires aboutissant à l'effet physiologique. De part la distribution ubiquitaire du V.l.P. de très nombreux désordres sont associés à un excès de synthèse et/ou de libération du V.l.P.. L'utilisation d'antagoniste du V.l.P. est l'une des alternatives thérapeutiques efficaces dans le traitement de tous ces désordres. Pour qu'une substance soit reconnue comme un antagoniste du V.l.P., elle doit répondre à l'une des caractéristiques suivantes: - la substance antagoniste doit être capable d'inhiber la formation d'adénosine 3':5'-cyclic monophosphate (AMPc) induite par la fixation du V.l.P. sur son récepteur dans des cellules en culture (comme des kératinocytes) la substance antagoniste doit être capable de diminuer la libération d'histamine induite par le V.l.P. Iors de la dégranulation des mastocytes. Il est décrit dans la demande de brevet WO95/21194, des compositions contenant des antagonistes du V.l.P. pour inhiber la croissance des cellules tumorales contenant des récepteurs V.l.P., pour induire la mort des cellules neuronales, pour modifier le rythme circadien des mammifères et pour inhiber la division des cellules de neuroblastome. Le brevet US 5,217,953 décrit l'utilisation d'antagoniste du V.l.P. pour modifier le comportement sexuel des mammifères. Cependant aucun des documents ci-dessus n'envisage ni ne suggère qu'un extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis puisse avoir une activité antagoniste du V.l.P. telle que définie cidessus et donc puisse être notamment utilisé à titre de principe actif pour traiter les désordres indiqués ci- dessus. Dans l'art antérieur les végétaux de la famille des Composés, genre Bellis sont connus pour être utilisés dans des compositions destinées à favoriser la pousse des cheveux (SU 488589, SU1130347; RU2066992), dans des compositions 3 2777191 antipelliculaires (RU2044538), dans des compositions cosmétiques sous forme de masque pour la peau (RU2038070), sous forme de crème de soin anti- inflammatoire (SUl1123696, SU1799593, RU2026669, RU2026667), de crème hydratante (SU1724242, RU2026668). Aucun de ces documents ne décrit les végétaux de la famille des Composés, genre Bellis comme seul ingrédient actif. Et, à la connaissance de la demanderesse l'activité antagoniste du V.l.P. que présentent les végétaux de la famille des Composés, genre Bellis n'a jamais été décrite. La demanderesse a découvert qu'un extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis répond aux caractéristiques définies comme caractérisant un antagoniste du V.l. P. et peut donc être utilisé comme antagoniste du V.l.P.. L'invention a donc pour objet l'utilisation, à titre de principe actif, dans ou pour la préparation d'une composition d'une quantité efficace d'au moins un extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis en tant qu'antagoniste du V.l.P.. Par principe actif, on entend toute molécule ou extrait susceptible de modifier ou de moduler le fonctionnement d'au moins un système biologique donne. L'extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis peut être tout extrait préparé à partir de tout matériel végétal issu d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis. Ainsi, l'extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis utilisé selon l'invention peut être obtenu à partir de matériel végétal issu de plante entière ou de partie de plante comme les feuilles, les tiges, les sommités florales (boutons floraux), les fleurs, les pétales, les racines ou encore des cellules indifférenciées. Par cellules végétales indifférenciées, on entend toute cellule végétale ne présentant aucun des caractères d'une spécialisation particulière et capable de vivre par elle-même et non en dépendance avec d'autres cellules. Ces cellules végétales indifférenciées sont éventuellement aptes, sous l'effet d'une induction, à toute différenciation conforme à leur génome. 4 2777191 Selon la méthode de culture choisie, et en particulier selon le milieu de culture choisi, il est possible d'obtenir, à partir d'un même explant, des cellules végétales indifférenciées présentant des caractères différents. Préférentiellement selon l'invention on utilise les sommités florales. L'extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis peut être tout extrait préparé à partir de tout matériel végétal issu d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis cultivé in vivo ou issu de culture in vitro. Par culture in vivo on entend toute culture de type classique c'est à dire en sol à l'air libre ou en serre, ou encore hors sol. Par culture in vitro, on entend l'ensemble des techniques connues de l'homme du métier qui permet de manière artificielle l'obtention d'un végétal ou d'une partie d'un végétal. La pression de sélection imposée par les conditions physico- chimiques lors de la croissance des cellules végétales in vitro permet d'obtenir un matériel végétal standardisé et disponible tout au long de l'année contrairement aux plantes cultivées in vivo. Préférentiellement selon l'invention on utilise un végétal issu de culture in vivo. Toute méthode d'extraction connue de l'homme du métier peut être utilisée pour préparer l'extrait contenu dans la composition selon l'invention. On peut en particulier citer les extraits aqueux, alcooliques ou utilisant un solvant organique. Par solvant aqueux on entend tout solvant constitué totalement ou pour part d'eau. On peut citer ainsi l'eau elle-même, les solvants hydroalcooliques en toute proportion ou encore les solvants constitués d'eau et d'un composé comme le propylène glycol en toute proportion. Parmi les solvants alcooliques on peut citer notamment l'éthanol. On peut également utiliser un extrait préparé par la méthode décrite dans la demande de brevet français n0 95-02379 déposée par la demanderesse. Ainsi, dans une première étape on broie le matériel végétal dans une solution aqueuse à froid, dans une deuxième étape les particules en suspension sont éliminées de la solution aqueuse issue de la première étape, et dans une 2777191 troisième étape on stérilise la solution aqueuse issue de la deuxième étape. Cette solution aqueuse correspond à l'extrait. D'autre part, la première étape peut avantageusement être remplacée par une opération de congélation simple des tissus végétaux (par exemple à 20 C), suivie d'une extraction aqueuse reprenant les deuxièmes et troisième étapes ci-dessus décrites. Quel que soit le mode de préparation utilisé selon l'invention des étapes subséquentes visant à favoriser la conservation et/ou la stabilisation peuvent être ajoutées sans pour cela modifier la nature même de l'extrait. Ainsi, par exemple l'extrait obtenu peut être lyophilisé par toutes méthodes classiques de lyophilisation. On obtient ainsi une poudre qui peut être utilisée directement ou bien mélanger dans un solvant approprié avant utilisation. Préférentiellement, selon l'invention on utilise un extrait aqueux et encore plus préférentiellement un extrait réalisé avec un solvant composé d'eau et de propylène glycol, comme par exemple l'Herbasol vendu par la société COSMETOCHEM (Grasse, France). On a vu préalablement dans le texte des exemples de désordres liés à un excès de synthèse et/ou de libération du V.l.P.. L'invention a en outre pour objet l'utilisation, à titre de principe actif, dans ou pour la préparation d'une composition d'une quantité efficace d'un extrait d'au moins un 2 5 végétal de la famille des Composés, genre Bellis, I'extrait ou la composition étant destinés à traiter les désordres associés à un excès de synthèse et/ou de libération du V.l.P.. Ainsi, selon un aspect particulier, I'invention à pour objet l'utilisation à titre de principe actif, dans ou pour la préparation d'une composition d'une quantité efficace d'un extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis, I'extrait ou la composition étant destinés à traiter les désordres du système nerveux central, les troubles respiratoires, les troubles cardio-vasculaires, les troubles vasospastiques, les désordres gastro-intestinaux, les désordres cutanés, les troubles du tractus urogénital, les syndromes allergiques ou encore les désordres immunologiques. 6 2777191 Dans le domaine des désordres cutanés, il est connu que des fibres nerveuses V.l.P. positives sont présentes au niveau de la peau autour des glandes sudoripares eccrines et dans une moindre mesure autour des glandes sébacées. Par ailleurs des récepteurs spécifiques du V.l.P. ont été caractérisés sur les cellules sécrétrices des glandes sudoripares eccrines humaines. Une corrélation étroite a été rapportée entre la libération du V.l.P. par les fibres nerveuses autour des glandes sudoripares eccrines et un effet de ce V.I.P. sur la sécrétion sudoripare. Or on sait que certaines personnes souffrent d'une hypersécrétion des glandes sudoripares eccrines, ce qui peut entraîner des désagréments (excès de transpiration, mauvaises odeurs, etc.). Ainsi on comprend l'utilité de disposer de composés et/ou compositions ayant une activité antiperspirante. L'extrait de végétal de la famille des Composés, genre Bellis, du fait de son activité anti-V.I.P. peut donc être utilisé pour combattre l'hypersécrétion des glandes sudoripares. L'invention concerne donc plus particulièrement l'utilisation, à titre de principe actif, dans ou pour la préparation d'une composition d'une quantité efficace d'au moins un extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis, I'extrait ou la composition étant destinés à traiter l'hypersécrétion des glandes sudoripares. La famille des Composés, genre Bellis comprend 5 espèces à savoir Bellis annua, Bellis perennis, Bellis silvestris, Bellis pumila et Bellis pappulosa. Ainsi, I'extrait de végétal de la famille des Composés, genre Bellis de l'invention est un extrait préparé à partir de matériel issu d'au moins un végétal appartenant à une espèce choisie parmi Bellis annua, Bellis perennis, Bellis silvestris, Bellis pumila et Bellis pappulosa. Préférentiellement selon l'invention le végétal appartient à l'espèce Bellis perennis. Selon l'invention, la quantité d'extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis utilisée dans la composition est bien entendu fonction de lI'effet recherché et peut donc varier dans une large mesure. Pour donner un ordre de grandeur, I'extrait peut être en une quantité représentant de 0,001% à 20% du poids total de la composition et préférentiellement en une 7 2777191 quantité représentant de 0,01% à 10% du poids total de la composition. La présente invention a également pour objet une composition pour l'hygiène corporelle comprenant à titre de principe actif au moins un extrait de végétal de la famille des Composées, genre Bellis. Particulièrement la composition de l'invention est une composition pour diminuer l'hypersécrétion des glandes sudoripares. La composition de l'invention peut être une composition cosmétique ou pharmaceutique. La présente invention a en outre pour objet un procédé de traitement cosmétique en vue de diminuer l'hypersécrétion des glandes sudoripares, caractérisé par le fait que l'on utilise par application sur la peau, sur les cheveux, et/ou sur les muqueuses, une composition cosmétique comprenant au moins un extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis dans un milieu cosmétiquement acceptable. 2o Par milieu cosmétiquement acceptable, on entend compatible avec la peau, le cuir chevelu, les muqueuses, les ongles, et les cheveux. Le procédé de traitement cosmétique de l'invention peut être mis en ceuvre notamment en appliquant les compositions hygiéniques ou cosmétiques telles que définies ci-dessus, selon la technique d'utilisation habituelle de ces compositions. Par exemple: application de crèmes, de gels, de sérums, de lotions, de laits de démaquillage ou de compositions anti-solaires sur la peau ou de compositions pour spray. Quelque soit la forme de la composition selon l'invention, la quantité d'extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis utilisée dans la composition est bien entendu fonction de l'effet recherché et peut donc varier dans une large mesure. 8 2777191 Quelque soit la forme de la composition selon l'invention dans laquelle au moins un extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis est utilisé, celle-ci peut être ingérée, injectée ou appliquée sur la peau (sur toute zone cutanée du corps), les cheveux, les ongles ou les muqueuses (buccale, jugale, gingivale, génitale, conjonctive). Selon le mode d'administration, la composition selon l'invention peut se présenter sous toutes les formes galéniques normalement utilisées. Pour une application topique sur la peau, la composition peut avoir la forme notamment de solution aqueuse ou huileuse ou de dispersion du type lotion ou sérum, d'émulsions de consistance liquide ou semi-liquide du type lait, obtenues par dispersion d'une phase grasse dans une phase aqueuse (H/E) ou inversement (E/H), ou de suspensions ou émulsions de consistance molle du type crème ou gel aqueux ou anhydres, ou encore de microcapsules ou microparticules, ou de dispersions vésiculaires de type ionique et/ou non ionique. Ces compositions sont préparées selon les méthodes usuelles. Elles peuvent être également utilisées pour les cheveux sous forme de solutions aqueuses, alcooliques ou hydroalcooliques, ou sous forme de crèmes, de gels, d'émulsions, de mousses ou encore sous forme de compositions pour aérosol comprenant également un agent propulseur sous pression. Pour l'injection, la composition peut se présenter sous forme de lotion aqueuse, huileuse ou sous forme de sérum. Pour les yeux, elle peut se présenter sous forme de gouttes et pour l'ingestion, elle peut se présenter sous forme de capsules, de granulés de sirops ou de comprimés. Les quantités des différents constituants des compositions selon l'invention sont celles classiquement utilisées dans les domaines considérés. Ces compositions constituent notamment des crèmes de nettoyage, de protection, de traitement ou de soin pour le visage, pour les mains, pour les pieds, pour les grands plis anatomiques ou pour le corps, (par exemple crèmes de jour, crèmes de nuit, crèmes démaquillantes, crèmes de fond de teint, crèmes anti-solaires), des fonds de teint fluides, des laits de démaquillage, des laits corporels de protection ou de soin, des laits anti-solaires, des lotions, gels ou mousses pour le soin de la peau, comme des lotions de nettoyage, des lotions anti-solaires, des lotions de bronzage artificiel, des compositions pour le bain, des compositions 9 2777191 désodorisantes comprenant un agent bactéricide, des gels ou lotions après- rasage, des crèmes épilatoires, des compositions contre les piqûres d'insectes, des compositions anti-douleur, des compositions pour traiter certaines maladies de la peau comme l'eczéma, la rosasée, le psoriasis, les lichens, les prurits severes. Les compositions selon l'invention peuvent également consister en des préparations solides constituant des savons ou des pains de nettoyage. Les compositions peuvent aussi être conditionnées sous forme de composition pour aérosol comprenant également un agent propulseur sous pression. La composition selon l'invention peut aussi être une composition pour soins capillaires, et notamment un shampooing, une lotion de mise en plis, une lotion traitante, une crème ou un gel coiffant, une composition de teintures (notamment teintures d'oxydation) éventuellement sous forme de shampooings colorants, des lotions restructurantes pour les cheveux, une composition de permanente (notamment une composition pour le premier temps d'une permanente), une lotion ou un gel antichute, un shampooing antiparasitaire, etc. Lorsque la composition est une émulsion, la proportion de la phase grasse peut aller de 5 % à 80 % en poids, et de préférence de 5 % à 50 % en poids par rapport au poids total de la composition. Les huiles, les cires, les émulsionnants et les coémulsionnants utilisés dans la composition sous forme d'émulsion sont choisis parmi ceux classiquement utilisés dans le domaine cosmétique. L'émulsionnant et le coémulsionnant sont présents, dans la composition, en une proportion allant de 0,3 % à 30 % en poids, et de préférence de 0,5 à 20 % en poids par rapport au poids total de la composition. L'émulsion peut, en outre, contenir des vésicules lipidiques. Lorsque la composition est une solution ou un gel huileux, la phase grasse peut représenter plus de 90 % du poids total de la composition. De façon connue, la composition cosmétique peut contenir également des adjuvants habituels dans le domaine cosmétique, tels que les gélifiants hydrophiles ou lipophiles, les additifs hydrophiles ou lipophiles, les conservateurs, les antioxydants, les solvants, les parfums, les charges, les filtres, les absorbeurs d'odeur et les matières colorantes. Les quantités de ces différents adjuvants sont 2777191 celles classiquement utilisées dans le domaine cosmétique, et par exemple de 0,01 % à 10 % du poids total de la composition. Ces adjuvants, selon leur nature, peuvent être introduits dans la phase grasse, dans la phase aqueuse et/ou dans les sphérules lipidiques. Comme huiles ou cires utilisables dans l'invention, on peut citer les huiles minérales (huile de vaseline), les huiles végétales (fraction liquide du beurre de karité, huile de tournesol), les huiles animales (perhydrosqualène), les huiles de synthèse (huile de Purcellin), les huiles ou cires siliconées (cyclométhicone) et les huiles fluorées (perfluoropolyéthers), les cires d'abeille, de carnauba ou paraffine. On peut ajouter à ces huiles des alcools gras et des acides gras (acide stéarique). Comme émulsionnants utilisables dans l'invention, on peut citer par exemple le stéarate de glycérol, le polysorbate 60 et le mélange de PEG6/PEG-32/Glycol Stéarate vendu sous la dénomination de TefoseR 63 par la société Gattefosse. Comme solvants utilisables dans l'invention, on peut citer les alcools inférieurs, notamment l'éthanol et l'isopropanol, le propylène glycol. Comme gélifiants hydrophiles utilisables dans l'invention, on peut citer les polymères carboxyvinyliques (carbomer), les copolymères acryliques tels que les copolymères d'acrylates/alkylacrylates, les polyacrylamides, les polysaccharides tels que l'hydroxypropylcellulose, les gommes naturelles et les argiles, et, comme gélifiants lipophiles, on peut citer les argiles modifiées comme les bentones, les sels métalliques d'acides gras comme les stéarates d'aluminium et la silice hydrophobe, éthylcellulose, polyéthylène. La composition peut contenir d'autres actifs hydrophiles comme les protéines ou les hydrolysats de protéine, les acides aminés, les polyols, I'urée, I'allantoïne, les sucres et les dérivés de sucre, les vitamines hydrosolubles, les extraits végétaux et les hydroxy-acides. Comme actifs lipophiles, on peut utiliser le rétinol (vitamine A) et ses dérivés, le tocophérol (vitamine E) et ses dérivés, les acides gras essentiels, les céramides, les huiles essentielles, I'acide salicylique et ses dérivés. Selon l'invention la composition peut associer au moins un extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis à d'autres agents actifs destinés l 1 2777191 notamment à la prévention et/ou au traitement des affections cutanées. Parmi ces agents actifs, on peut citer à titre d'exemple: - les agents modulant la différenciation et/ou la prolifération et/ou la pigmentation cutanée tels que l'acide rétinoique et ses isomères, le rétinol et ses esters, la vitamine D et ses dérivés, les oestrogènes tels que l'oestradiol, I'acide kojique ou l'hydroquinone; les antibactériens tels que le phosphate de clindamycine, I'érythromycine ou les antibiotiques de la classe des tétracyclines; - les antiparasitaires, en particulier le métronidazole, le crotamiton ou les o pyréthrinoïdes; - les antifongiques, en particulier les composés appartenant à la classe des imidazoles tels que l'éconazole, le kétoconazole ou le miconazole ou leurs sels, les composés polyènes, tels que l'amphotéricine B, les composés de la famille des allylamines, tels que la terbinafine, ou encore l'octopirox; - les agents antiviraux tels que l'acyclovir; - les agents anti- inflammatoires stéroïdiens, tels que l'hydrocortisone, le valérate de bétaméthasone ou le propionate de clobétasol, ou les agents anti- inflammatoires non-stéroïdiens tels que l'ibuprofène et ses sels, le diclofénac et ses sels, I'acide acétylsalicylique, I'acétaminophène ou l'acide glycyrrhétinique; - les agents anesthésiques tels que le chlorhydrate de lidocaïne et ses dérivés; - les agents antiprurigineux comme la thénaldine, la triméprazine ou la cyproheptadine; - les agents kératolytiques tels que les acides alpha- et bêta- hydroxycarboxyliques ou bêta-cétocarboxyliques, leurs sels, amides ou esters et plus particulièrement les hydroxyacides tels que l'acide glycolique, I'acide lactique, I'acide salicylique, I'acide citrique et de manière générale les acides de fruits, et l'acide n-octanoyl-5salicylique; - les agents anti-radicaux libres, tels que l'alphatocophérol ou ses esters, les superoxyde dismutases, certains chélatants de métaux ou l'acide ascorbique et ses esters; - les antiséborrhéiques tels que la progestérone; - les antipelliculaires comme l'octopirox ou la pyrithione de zinc; - les antiacnéiques comme l'acide rétinoïique ou le peroxyde de benzoyle; - les extraits végétaux ou d'origine microbienne. Les exemples et compositions suivants illustrent l'invention sans la limiter aucunement. Dans les compositions les proportions indiquées sont des pourcentages en poids. 12 2777191 Exemple 1 Préparation d'un extrait de Bellis perennis: 100 g de fleurs séchées de Bellis perennis sont broyées dans un broyeur à fléau, équipé d'un tamis de 1 mm de diamètre. Ces 100 g de broyat sont ensuite mis à macérer dans 1 litre d'eau déminéralisée pendant 15 minutes à 4 C. (bain de glace). La préparation ainsi obtenue est filtrée à 0,22 pm (filtration stérilisante). L'extrait ainsi préparé est conservé à 4 C. L'extrait obtenu peut être lyophilisé. Le traitement à froid permet de geler les activités enzymatiques, la filtration stérilisante évite la dégradation des actifs par les microorganismes de l'environnement. Enfin, le véhicule eau facilite les formulations cosmétiques ou pharmaceutiques. Exemple 2: Activité pharmacologique d'un extrait de Bellis perennis: 1) Test d'affinité réceptorielle: Ce test est réalisé sur des cellules de la lignée HT-29 (adénocarcinome de colon humain) (Biochem. J., 1985, vol.231, p 139-143). Les cellules sont ensemencés à 40000 cellules/cm2 en flacon de 25 cm2 en milieu DMEM (vendu par la société Gibco BRL) contenant 10% de sérum de veau foetal et incubées à 37 C en atmosphère CO2/air (1:9). Les cellules sont récupérées après 4 à 5 jours (en phase exponentielle de croissance) à l'aide d'une solution saline 0.13 M phosphate pH 7,2 contenant 3 mM d'EDTA. Elles sont centrifugées à 2000 g pendant 5 min à 4 C. Le culot est repris par un tampon Hepes 5 mM hypo- osmotique à pH 7,5. Après 15 min. dans la glace, la suspension est homogénéisée. L'homogénat est alors centrifugé à 30000 g pendant 10 min..Le culot est lavé trois fois avec un tampon Hepes 60 mM pH7,5. La préparation membranaire ainsi obtenue est conservée à -80 C; les proteines sont dosées selon la méthode de Bradford (avec la BSA comme standard). Le test consiste à incuber la préparation membranaire précédente (environ 100 pg/ml) pendant 60 minutes à 30 C en présence de '251-V.I.P. (et autres composés si nécessaire) en tampon Hepes 60 mM pH 7,5 contenant 2% de sérum albumine bovine et 0,1% de bacitracine. La réaction est stoppée en transférant le milieu d'incubation dans du tampon froid. Le V.l.P. radioactif lié à la préparation membranaire est ensuite séparé par centrifugation à 30000 g pendant 10 min à 4 C puis la radioactivité est mesuree au moyen d'un compteur à scintillation. 13 2777191 La mesure de l'affinité réceptorielle de l'extrait de Bellis perennis pour le récepteur au V.l.P. est mise en évidence en ajoutant dans le milieu d'incubation des doses croissantes de l'extrait. Les valeurs décroissantes de radioactivité mesurée sont le reflet d'une compétition sur le récepteur entre le ligand naturel radiomarqué, 1251-V. I.P., et l'extrait de Bellis perennis. L'extrait de l'exemple 1 (à 10% de sommités florales broyées par volume d'eau équivalent) et un extrait commercial dénommé Herbasol vendu par la société COSMETOCHEM (à 5% de somités florales broyées par volume de mélange propylèneglycole/eau/phenonix) ont été testés en parallèle. Les valeurs d'lC50 (concentration inhibant 50% de la liaison spécifique du ligand naturel pour son recepteur) obtenue avec les deux extraits sont présentées dans le tableau ci-dessous IC50 Extrait Herbasol de Bellis perrenis 1,2 Extrait aqueux de Bellis perrenis 2,8 Ces résultats mettent clairement en évidence une affinité de l'extrait de Bellis perennis, quelque soit sont mode de préparation pour le récepteur au V.l. P. 2) Mesure de l'augmentation du taux d'AMPcyclique (AMPc) induit par le V. l.P. effet d'un extrait de Bellis perrenis. Ce test est réalisé sur des cultures primaires de kératinocytes issus des cellules glandulaires. Les cellules sont cultivées en milieu KGM (Keratinocytes Growth Medium) à 37 C en atmosphère contenant 5% de CO2. Elles sont ensemencées à 20000 cellules/cm2 en plaques de 24 puits et utilisées entre 3 et 7 jours après l'ensemencement. Le test consiste à incuber les cellules dans le milieu de culture habituel pendant min à 37 C en présence de V.l.P. (et/ou d'autres composés) et d'un agent bloquant la dégradation d'AMPc tel que 1'3-isobutyl-1-méthylxanthine (IBMX). La réaction est stoppée par addition d'acide perchlorique (70%, 11N) et l'AMPc produit est mesuré dans le surnageant par une méthode immunoenzymatique (kit Amersham cAMP EIA System RPN 225). Le dosage est basé sur la compétition 14 2777191 entre l'AMPc produit par les cellules et une quantité donnée d'AMPc couplé à la peroxydase, pour un nombre limité de sites de liaison AMPc. La quantité d'AMPc couplée à la peroxydase liée aux sites est révélée par addition d'un substrat (tetramethylbenzidine hydrogen peroxyde) et mesurée par lecture spectrophotométrique. La quantité d'AMPc à doser dans le surnageant de culture sera donc inversement proportionnelle à la quantité d'AMPc couplé à la peroxydase ainsi mesurée. Ce test complémentaire du test d'affinité permet de mettre en évidence non seulement une compétition entre le V.l.P. et l'échantillon à tester pour le récepteur au V.l.P., mais également un effet agoniste ou antagoniste. L'extrait de l'exemple 1 et un extrait commercial dénommé Herbasol ( vendu par la société COSMETOCHEM's ont été testés dans 2 expériences en parallèle. Les résultats présentés dans le tableau ci-dessous sont exprimés en pourcentage d'inhibition de la liaison spécifique du ligand naturel. pmole d'AMPc/10000 cellules Milieu de culture 7,4 V.l.P. (10-6M) 25,6 V.l.P. (10-6M) + Herbasol de Be/lis perrenis 5,8 (à 10% de matière sèche) _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ ___ pmole d'AMPc/10000 cellules Milieu de culture 1,08 V.l.P. (10'M) 10,51 V.l.P. (10-6M) + extrait aqueux de Bellis perrenis 4,27 (à 5% de matière sèche)(exemple 1) Ces résultas démontrent que l'extrait de Bellis perrenis, quelque soit son mode de préparation, agit comme un antagoniste du V.l.P.. 2777191 Exemple 3: Exemples de compositions comprenant au moins un extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis illustrant l'invention. Ces compositions, sauf indication contraire sont obtenues par simple mélange des divers ingrédients: Composition 1: Crème antitranspirante aqueuse (huile/eau) (nomenclature CTFA) Phase A: grasse - Alcool cétéarylique (corps gras, gélifiant) 4,00 % - Stéarate de glycérol (corps gras, gélifiant) 2,50 % - Steareth-25 (émulsionnant) 1,05 % - Alcool stéarylique (corps gras, gélifiant) 1,05 % - Cetéareth-33 (émulsionnant) 1,00 % - Diméthicone 1,00 % - Céteth-20 (émulsionnant) 0,40 % Conservateur qs Phase B: aqueuse - Herbasol de Be/lis perrenis 5,00 % Conservateur qs - Eau qsp 100 % Phase C: - Parfum qs - Bactéricide qs Phase D: - Talc 1,00 % Mode opératoire: Chauffer la phase B à 70-80 C, sous agitation. Chauffer la phase A à 70-80 C. Lorsque les deux phases sont bien homogènes, incorporer A dans B, sous agitation forte pendant 10 min. Refroidir sous agitation plus faible. A C, ajouter la phase C prémélangée. Agiter fortement pendant 5 min. Refroidir sous agitation plus faible. Vers 30 C, incorporer lentement la phase D. Poursuivre le refroidissement jusqu'à la température ambiante. On obtient une crème souple et douce, à effet poudré à l'étalement procurant une protection efficace contre la transpiration. 16 2777191 Composition 2: Crème anhydre antitranspirante (nomenclature CTFA) Phase A: - Stearalkonium hectorite (gélifiant) 4,20 % - Propylène carbonate (agent de mise en suspension) 1,40 % - Caprylic/Capric Triglycerides 29,40 % Diméthicone 5,00 % - Isohexadecane (solvant) qsp 100 % Phase B: Herbasol de Bellis perrenis 3,00 % O10 - Talc 1,00 % Phase C: - Parfum qsp Phase D: - Talc 6,00 % Mode opératoire: Mélanger les composés de la phase A à température ambiante. Incorporer ensuite la phase C, toujours à température ambiante. Lorsque tout est homogène, incorporer B et D lentement. La crème obtenue est particulièrement douce, non grasse, non collante, et procure par son impact sec, une sensation de plus grande sécurité contre l'humidité axillaire. Composition 3: Aérosol (nomenclature CTFA) Phase A: -Cyclométhicone qsp 100 % - Quaternium-18 bentonite 3,00 % - Triéthylcitrate 7,00 % Diméthiconol 1,40 % - Isopropyl palmitate 6,00 % Phase B: - Herbasol de Bellis perrenis 5,00 % Phase C: - Talc 1,50 % Mode opératoire: Mélanger les ingrédients de la phase A à froid. Ajouter lentement le chlorohydrate d'aluminium, puis le talc. Mélanger vigoureusement 1 7 2777191 pour obtenir une suspension homogène. Cette dernière peut ensuite être pressurisée de la façon suivante: 13 % de jus, 87 % de gaz comprimé ou liquéfié. Le jus délivré laisse un impact doux, poudré sur la peau assurant la protection contre la transpiration. Composition 4: Poudre compactée Chlorure de magnésium (antitranspirant) 5,00 % - Kaolin 10,00 % Herbasol de Bellis perrenis 5,00 % - Parfum 0,30 % - Talc qsp 100 % Composition 5: Stick déodorant - Herbasol E) de Bellis perrenis 8,00 % Alcool stéarylique 24,00 % - Distéarate de PEG-400 6,00 % - Cire hydrocarbonnée 4,00 % - Cyclométhicone 46,00 % 18 2777191 REVENDICATIONS 1. Utilisation, à titre de principe actif, dans ou pour la préparation d'une composition, d'une quantité efficace d'au moins un extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis en tant qu'antagoniste du V.l.P.. 2. Utilisation, à titre de principe actif, dans ou pour la préparation d'une composition, d'une quantité efficace d'au moins un extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis, I'extrait ou la composition étant destinés à traiter les désordres associés à un excès de synthèse et/ou de libération du V.l. P.. 3. Utilisation, à titre de principe actif, dans ou pour la préparation d'une composition, d'une quantité efficace d'au moins un extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis, I'extrait ou la composition étant destinés à traiter les désordres du système nerveux central, les troubles respiratoires, les troubles cardio-vasculaires, les troubles vasospastiques, les désordres gastro- intestinaux, les désordres cutanés, les troubles du tractus urogénital, les syndromes allergiques ou encore les désordres immunologiques. 4. Utilisation, à titre de principe actif, dans ou pour la préparation d'une composition d'une quantité efficace d'au moins un extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis, I'extrait ou la composition étant destinés à traiter l'hypersécrétion des glandes sudoripares. 5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée par le fait que l'extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis est obtenu à partir de matériel végétal issu de plante entière ou de feuilles, de tiges, de fleurs, de pétales, de racines ou encore de cellules indifférenciées. 6. Utilisation selon la revendication 5, caractérisée par le fait que l'extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis est obtenu à partir de sommités florales (boutons floraux). 7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée par le fait que l'extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis est obtenu à partir de matériel végétal issu d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis cultivé in vivo. 19 2777191 8. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée par le fait que dans la composition l'extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis est en une quantité représentant de 0, 001% à 20% du poids total de la composition et préférentiellement en une quantité représentant de 0,05% à 10% du poids total de la composition. 9. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisée par le fait que l'extrait est un extrait préparé à partir de matériel issu d'au moins un végétal appartenant à une espèce choisie parmi Bellis annua, Bellis perennis, Bellis silvestris, Bellis pumila et Bellis pappulosa. 10. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisée par le fait que le végétal appartient à l'espèce Bellis perennis. 11. Composition cosmétique ou pharmaceutique pour l'hygiène corporelle comprenant à titre de principe actif au moins un extrait de végétal de la famille des Composées, genre Bellis tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 10. 12. Composition selon la revendication précédente, caractérisée par le fait qu'elle est destinée à diminuer l'hypersécrétion des glandes sudoripares. 13. Procédé de traitement cosmétique en vue de diminuer l'hypersécrétion des glandes sudoripares, caractérisé par le fait que l'on utilise par application sur la peau, sur les cheveux, et/ou sur les muqueuses, une composition cosmétique comprenant au moins un extrait d'au moins un végétal de la famille des Composés, genre Bellis dans un milieu cosmétiquement acceptable.