FR 2773994 A1 19990730 FR 9800728 A 19980123 La présente invention concerne des prodrogues issues d'anti-protéases inhibitrices du virus de l'immunodéficience humaine (VIH) pour l'amélioration de leur biodisponibilité, de leur tropisme vers et/ou de leur délivrance dans le système nerveux central (SNC) afin d'y inhiber la prolifération du VIH. Ces prodrogues dérivent des anti-protéases actuellementutilisées en clinique (saquinavir, indinavir, ritonavir, nelfinavir) [E.A. Emini, Merck Research Laboratories, West Point 3rd Conf. on Retroviruses and Opportunistic Infections, Washington, 1996; J. F. Delfraissy et al., IX International Conf. on AIDS, Berlin, 1993, abstract WS-B 25-1; C.K. McDonald, D.R. Kuritzkes, Arch. Intern. Med. 1997, 157, 951-959] ou en cours d'évaluation clinique (ABT-378). Les stratégies thérapeutiques anti-SIDA actuelles reposent sur l'utilisation de combinaisons de médicaments agissant au niveau soit d'une seule cible soit de différentes cibles de la réplication du VIH. Les récents résultats d'évaluations cliniques ont mis en évidence la remarquable efficacité de diverses associations d'inhibiteurs de la transcriptase inverse (TI) et de la protéase virale qui conduisent à une très forte réduction de la charge virale plasmatique ( Vancouver, 1996]. Malgré ces polythérapies, le système nerveux central constitue un sanctuaire pour le VIH [G. Pialoux et al., 4th Conf. on Retroviruses and Opportunistic Infections, Washington, 1997]. En effet, alors que la charge virale plasmatique est en dessous du seuil significatif des 200 copies/ml, la charge virale dans le liquide céphalorachidien (LCR) est supérieure à 106 copies/ml, montrant que les antiviraux actuels ont relativement peu d'emprise sur des régions comme le SNC. Ce résultat est lié au fait que la plupart des molécules anti-VIH passent très mal la barrière hémato-encéphalique (BHE) et/ou sont trop rapidement éliminées de l'organisme [H. Gisslen, International Congress on Drug Therapy in HIV Infection, A OP2.3, Birmingham, 1996]. Si les anti-protéases utilisées en clinique (saquinavir, indinavir, ritonavir, nelfinavir), associées à des nucléosides inhibiteurs de la transcriptase inverse (AZT, 3TC), se distribuent dans le système lymphatique et sont très actives contre le VIH, la plupart d'entre-elles ont une biodisponibilité faible ou moyenne, plusieurs d'entre elles se lient très fortement à une glycoprotéine plasmatique qui empêche leur pénétration cellulaire et rend souvent la molécule inefficace [J. Dormont et al., Médecine Thérapeutique, 2, 127-137]. D'autres sont trop rapidement métabolisées et inactivées au niveau du foie ou de la cellule endothéliale par les cytochromes P450 [D. Kempf et al.; S. Webber et al., 3rd Conf. on Retroviruses and Opportunistic Infections, Washington, 1996]. Enfin, leur pénétration dans le SNC reste très faible. L'infection et l'invasion du SNC par le VIH constituent ainsi des facteurs dans le développement d'infections persistantes au VIH qui pourront être à l'origine de désordres neurologiques graves. Si l'intérêt des associations médicamenteuses visant simultanément plusieurs cibles différentes du cycle de la réplication virale est acquis, il est maintenant indispensable de développer de nouveaux inhibiteurs et de pouvoir cibler ces molécules vers des régions comme le SNC. Alors que la délivrance au SNC de divers inhibiteurs nucléosidiques et nucléotidiques de la TI a bénéficié d'une attention toute particulière [J.M. Gallo, Adv. Drug. Delivery Rev. 1994, 14, 199-209; R.J. Joncs, N. Bischofberger, Antiviral Res. 1995, 27, 1-17. M.B. Yatvin et al., 3rd Conf. on Retroviruses and Opportunistic Infections, Washington, 1996; K. Shanmnuganathan et al., J. Med. Chem. 1994, 37, 821-827], celle des antiprotéases utilisées en clinique [E.A.Emini, Merck Research Laboratories, West Point 3rd Conf. on Retroviruses and Opportunistic Infections, 1996, Washington; J.F. Delfraissy et al. IX International Conf. on AIDS, Berlin, 1993, abstract WS-B 25-1; C.K. McDonald, D.R. Kuritzkes, Arch. Intern. Med. 1997, 157, 951-959] ou en cours d'essais cliniques (ABT-378), n'a pas été abordée. La présente invention concerne précisément le développement de nouvelles molécules dirigées vers et capables d'inhiber la protéase du VIH et dont la biodisponibilité, le tropisme vers le système nerveux central et la délivrance dans ce système devraient être améliorés. Ces nouvelles molécules sont des prodrogues des anti-protéases saquinavir, indinavir, ritonavir, nelfinavir ou ABT-378, mais 1) rendues plus lipophiles par couplage - à des résidus lipidiques comme le cholestérol, de longues chaînes d'acides gras, des résidus phospholipidiques, ou encore des céramides, qui sont des constituants des membranes cellulaires et qui favoriseront l'ancrage des molécules dans ces membranes; - à des groupements dihydropyridines qui traversent rapidement la BHE, et, après oxydation en sels de pyridinium plus polaires, se retrouvent piégées dans le cerveau par un mécanisme de "lock in", pour tfaciliter leur diffusion passive au travers des barrières intestinale puis hémato- encéphalique et avoir une durée de vie suffisante dans le SNC; 2) couplées à divers résidus, tels que des aminoacides (valine, tyrosine, phénylalanine, etc..) ou le D-glucose, qui sont substrats des transporteurs situés au niveau de la barrière intestinale et/ou de la BHE, pour faciliter leur diffusion active au travers de ces barrières [T. Terasaki, A. Tsuji, J. Control. Release 1994, 29, 163-1691 et augmenter, respectivement, leur concentration dans la circulation sanguine et dans le SNC, ou 3) rendues plus hydrophiles par couplage à des résidus polyéthylèneglycols pour leur protection vis à vis de protéines plasmatiques inhibitrices de leur action, pour la modulation de leur biodistribution et la limitation de leur confinement dans le foie (o les anti-protéases actuelles sont inactivées par les cytochromes P450), et donc de leur inactivation. Ces groupements polyéthylèneglycols devraient aussi augmenter leur temps de résidence dans la circulation sanguine et donc la concentration plasmatique de la drogue, ce qui devrait faciliter et améliorer la diffusion passive de la BHE. Les diverses prodrogues anti-protéases sont obtenues à partir des antiprotéases (saquinavir, indinavir, ritonavir, nelfinavir, ABT-378) par couplage de divers résidus sur leur(s) fonction(s) hydroxyle(s) libre(s) via, de préférence, des fonctions aisément hydrolysables. Il peut en effet être indispensable pour qu'il y ait inhibition de la réplication virale par ces prodrogues que celles-ci puissent générer le composé parent, actif, dont elles sont issues. Cette conversion pourra se faire par des enzymes cellulaires. Selon l'invention, les composés répondent aux formules générales I à V ci-dessous: Ph ç NHtBu I I H N OR tBuNH 0 1 (Indinavir: R 1z2=1) N.- il(Saquinavir: RI=H) HH ORI1 N IH OR1 Hl H =H M,, N -,R N - N/ Ph L 111 (Ritonavir: R1= R) IV HN''NY N X. 7 OR1' Ph M V (ABT-378: RI H) dans lesquelles R', R2 sont, à condi tion que R' ou R2 dans I et I V, et R' dans Il1, 1 1 et V soient différents de H, (a) H ou un cc- arninoacidc naturel ou non, ou un f3-arninoacide, ou un dérivé d'ac- aminoacide comme le dopa (ou 3-hydroxytyrosine), le merphalane qui est un dérivé de la phénylalariine ou l'oxfenicine [HO-C 6H4-CH(NH,)(COOH)], ou un peptide naturel ou non. Ces différents résidus pourront être optiquement actifs ou non. Ils sont liés aux anti-protéases I à V par leur fonction carboxvlique terminale ou, le cas échéant, par une fonction carboxylique portée par la chaîne latérale d'un résidu glutamnate ou aspartate. Ces aminoacides ou ces peptides pourrront être protégés ou non sur leur fonction N-terminale, ou sur toute(s) autre(s) fonction(s) présente(nt) sur l'aminoacide ou sur le peptide par des groupements protecteurs classiquement utilisés en chimie peptidique; (b) H ou un radical saccharide, ce radical dérivant du fructose, du ribose, de l'arabinose, du glucose, de la glucosamine, du galactose, de la galactosamine ou du mannose, ou un radical oligo- ou poly-saccharide, ce radical dérivant du saccharose, du cellobiose, du lactose ou du maltose, par exemple; (c) H ou un radical (1,4-dihydro1-methyl-3- pyridinyl)carbonyl ou nicotinoyl; (d) H ou un radical -X-R3, o X représente-C(=O)-, -C(=O)NH- ou -C(=O)-(CH2)n-Y-, o Y est -CH2-, -O-, -NR4-, -N(R4)(R5)±, -C(=O)-, -C(=O)O-, -C(=O)NR4-, OC(=O)-, ou - NR4C(=O)- n est un entier compris entre 1 et 24, R4, R sont, indépendamment l' un de l'autre, H ou R3 comme défini ci-après, R3 est a) un radical alkyle linéaire ou ramifié (C1-C24), ou un radical alkényle linéaire ou ramifié (C2-C24) contenant une ou plusieurs doubles liaisons, ou un radical alkynyle (C3-C24), ou un radical alkyloxv (C1-C24), ou un radical alkényloxy (C2-C24), ou un radical alkynyloxy (C3-C24), ou un radical aryle substitué ou non, ces différents radicaux pouvant contenir ou non un ou plusieurs hétéroatomes, un ou plusieurs atomes d'halogène; de préférence, R3 est un radical alkyle, linéaire ou ramifie (C10-C18), un radical alkényle, linéaire ou ramifié (CO10-C18), un radical alkynyle (C1O-CIs), un radical alkyloxy (C4- C18), un radical phenylc substitué par un alkyle (C1-C4) comprenant dans certains cas des héteroatomes ou un halogène, ou mieux encore un radical phényle substitué par un groupement amine, un groupement hydroxy ou un groupement -CH2-O-; ) un radical polvoxvéthylène de forme -O(CH2CH20)m-H (ou Me) ou polyoxypropylène de forme -O(CH(CH3)CH2O)mH (ou Me) avec I un peptide naturel ou non. Ces différents résidus pourront être optiquement actifs ou non. Ils sont liés par leur fonction amino terminale ou, le cas échéant, par une fonction amino portée par la chaîne latérale d'un résidu ornithine ou lysine. Ces aminoacides ou ces peptidcs pourrront être protégés ou non sur leur fonction carboxyle terminale, ou sur toute(s) autrc(s) fonction(s) présente(nt) sur l'aminoacide ou sur le peptide par des groupements protecteurs classiquement utilisés en chimie peptidique; e) un radical issu d'une phosphatidyléthanolamine, comme la di-oléoyl-, la di-palmitoyl-, la dimyristoyl- ou la di- laurylphosphatidyléthanolamine; étant entendu que - quand R3 est un radical comme défini en (d.[), (d. ô) ou (d.e), X ne peut alors représenter que -C(=O)-(CH2)n-Y-, et Y ne peut représenter que -C(=O)- ou -CH2-; - quand R3 est un radical comme défini en (d.y), X ne peut représenter que -C(=O)-(CH2)n-Y-, et Y ne peut représenter que -O-, -NR4- avec R4 comme défini en (d). L'invention sera mieux comprise d'après les exemples suivants, donnés bien entendu à titre illustratif et non limitatif, et regroupés dans les schémas 1 et 2. Ces schémas décrivent une méthode de synthèsc de prodrogues dérivées respectivement du saquinavir et de l'indinavir, étant entendu que ces dérinvés peuvent être obtenus par d'autres procédés. L'unique fonction hydroxyle du saquinavir (Schéma 1) peut être estérifiée par de l'acide myristique, de l'acide succinique monoester de polyéthylène glycol (PEG350 ou PEG2000), Boc- Val ou Boc-Tyr(OtBu)OCHCOOH en présence de DCC/DMAP comme réactif de couplage. Les composés contenant des dénvés d'aminoacides protégés peuvent ensuite être déprotégés par action de l'acide trifluoroacétique (TFA) pour conduire à Saq-Val et Saq-Tyr. Ce schéma de synthèse peut aussi s'appliquer avantageusement pour la préparation des prodrogues dérivées du ritonavir ou de l'ABT-378. Saq-Myr R =CO(CH2)12CH 3 HO [ R = COC2H4 CC4O(OCH 4) OCH3 )O i Saq-PEG35 PEG 350 n = 7 H^^^^^^ Hp J Saq-PEG2000 PEG 2000 n = 44 N N -r 11 L È/ H)Saq-VaI(Boc) R =COCH(iPr)NHBoc ueO II ov) 1i 2 tBu.H Saq-Val (TFA) R =COCH(iPr)NH, R( RH Saquinavir _ Saq- (Boc)Tyr(OtBu)R =COCHO-- H I2CHOOtBu iv) V) v)rv t H__COOH Saq- Tyr (TFA) R = COCHO CH CH 2H Schéma 1: Exemples et voies de synthèse de prodrogues dérivées du saquinavir. DCC/DMAP avec i) 1 éq. (CH3(CH2)12CO2I danms CH2Ci2, ii) I éq. ('CH30(CH2CII2O)nCOCH2CH2COOH dans CH2C12, iii) 1 éq. Boc- Val-OH dans DMF, ou iv) 1 éq. Boc-Tyr(OtBu)OCH2CO2H dans DMF; v) TFA/CH2CI2 (1:1). Concernant la synthèse des prodrogues de l'indinavir (Schéma 2), trois types de structures peuvent être obtenus selon que l'esténfication est réalisée sur l'un ou les deux hydroxyles de l'indinavir. Lorsque l'indinavir est mis à réagir avec un équivalent d'acide myristique ou d'acide succinique monoester PEG350 en présence de DCC/DMAP, par exemple, on observe principalement la formation des monoesters Ind-Myr et IndPEG350, qui correspondent à l'estérification de l'hydroxyle porté par le groupe indanyle. Les diesters pourront être obtenus par réaction avec deux équivalents d'acides. Ce schéma de synthèse peut aussi s'appliquer avantageusement pour la préparation des prodrogues monoesters et diesters dérivés du nelfinavir. L'estérificaution de l'hydroxyle " interne " dc l'indinavir peut être réalisée sélectivement à partir de l'indinavir protégé Ind(Prd). Les dérivés des aminoacldes valine et tyrosine (Boc-Val and Boc- Tyr(OtBu)OCH2COOH), par exemple, pourront alors être couplés à l'indinavir via leur fonction acide pour conduire à Ind(Prd)-Val(Boc) and Ind(Prd)-(Boc)Tyr(OtBu), puis, après déprotection par action de TFA, à Ind-Val et Ind-Tyr. tBuLNi 8 tBuNH Indinavir RI= RO 2:11 t R1 =-1 Ind-Prt ) Ind-Myr R1 = H, R2 = CO(CH2)12CH 3 -!s Ind-Myr2 R 1 = R2 CO(CH2)12CH3 Ind- PEG350 R 1 = H, R2= COC2H4 CO(OC2H4)70OCH 3 Ind-(PEG35O)2 R I =R2= COC2H4CO(OC2H4)7OCH3 vi) viii) Ind-Val (ItA) R 1 = COC)CH(iPr)NH 2 -, Ind(Prt)-Val(Boc) R 2 = H R 1 = COCH(iPr)NHBoc _T,.-..--,, COOH viii) v) Ind-Tyr (TFA) RI=COCH CEi 2 E-o Ind(Prt)-(Boc)Tyr(OtBu) v _ LN 2 /2C,>B OOtBu K 2 =H R _ COCH (,NiC vii) I éq. Boc-Tyr(O(CH2CO2H)-OtBu; viii) TFA/C('H2C12 (1:1). Selon l'invention, d'autres acides gras, d'autres dérivés de PEG, d'autres arminoacides, d'autres dérivés d'aminoacides et/ou d'autres réactifs de couplage peuvent être avantageusement utilisés pour la svnthèse de ces prodrogues ou de prodrogues analogues. Les molécules de la présente invention, qui sont donc construites à partir d'inhibiteurs de la protéasc, ont clles-aussi une activité antivirale importante, malgré des modifications chimiques majeures qui concernent le site directement impliqué dans la fixation de l'inhibiteur sur la protéase. En effet, les résultats collectés dans le Tableau 1 attestent de la forte activité antivirale anti-VIH, en particulier des dérivés monofonctionnalisés (des CIso50 de 10 à 360 nM), et de la non cytotoxicité des prodrogues du saquinavir et de l'indinavir. Cette activité est, comme attendu, plus faible que celle du composé parent dont ces diverses prodrogues sont issues. Ces molécules ont été évaluées in vitro sur des cellules CEM-SS et MT4 et sur différentes souches du VIH comme par exemple la souche HTLV IIIB et la souche LAI selon des protocoles décrits dans la littérature [C. Moog et al., Antiviral Res. 1994, 24, 275-288; R. Pauwels et al., J. Virol. Methods, 1988, 20, 309- 321; C. Genu-Dellac et al., Nucl. & Nucl. 1991, 10, 1345-1376]. Tableau 1. Activité anti-VIH et cytotoxicité des prodrogues du saquinavir et de l'indinavir. Composé ICS O(nM) IC50(nM) CCSO (M) CC5 o(M) CEM-SS MT4 CEM-SS MT4 Indinavir(H2S04) 104 > 104 Ind-Myr 34 360 > 10' > 10-5 Ind-Myr2 10000 > 104 > 105 > 10-5 Ind(Prd)-(Boc)Val 1900 > 104 > 10'- 7 x 106 Ind-Val(TFA) 90 27 >104 > 104 Ind(Prd)-(Boc)Tvr(O'Bu) 370 2900 > 104 > 10-5 Ind-Tyr(TFA) 19 100 > 104 > 104 Saquinavir(MeSO3H) 9 18 > 10-5 > 10-5 Saq-Val(Boc) 84 3200 > 10-5 > 10-5 Saq-(Boc)Tvr(O'Bu) 10 35 > 10u- > 10'5 Saq-Tvr(TFA) 33 270 > 10-s > 10- Les exemples ci-après illustrent ces diverses possibilités. Exemple 1: Saq-Myr 43 44 45 55 CH2CH2 (CH2)o10CH3 û 42 31 32 O 13 H O 29 30 1 4 28 33 N --IN]N i7 2627 N3 3 4 H 025219 38 36 4 2 21 239 I-N O 202322 41 16 mg (0,07 mmol) d'acide myristique et 8 mg (0,07 mmol) de diméthylaminopyridine (DMAP) sont additionnés à 50 mg (0,065 mmol) de saquinavir solubilisé dans 20 ml de CH2CI2 anhydre. Le mélange est agité, puis 16 mg (0,08 mmol) de dicyclohexylcarbodiimide (DCC) sont additionnés à 0 C. Le milieu réactionnel est agité à 0 C pendant 15 min, puis à température ambiante pendant 90 h. Le mélange est filtré et le solvant est évaporé. Le résidu brut obtenu est lavé avec une solution de NaHCO3 à 5%, puis à l'eau. La phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée puis évaporée. Le solide obtenu est chromatographié sur colonne de silice (2,5 g, éluant: AcOEt), puis recnistallisé dans l'éther. On obtient 30 mg (53%) de Saq-Myr sous forme d'un solide blanc. CCM (AcOEt/EtOH: 98/2, v/v, UV): Rf= 0,78. RMN 'H (6 ppm, CDCI): 9.20 (d, H1 1); 8.27 (d, H7); 8.17 (t, HI/6); 7.85 (d, H4); 7.78 (t, H2); 7.73 (t, H3); 6.92-7.15 (m, 5H, H21-25); 6.53 (s, H15); 6.38 (Is. H17); 5.93 (Is, H39); 5.30 (m, H26); 4.83 (m, H12); 4.40 (m, H18); 2.88-2.98 (m, H27/37); 2.57-2.75 (m, H13/29); 2.23-2.41 (m, H19/30/35/36); 1.44-2.08 (m, H31-34); 1.35 (s, H41); 1.15 (m, H44-55); 0.88 (t, H56). RMN 13C (ô ppm, CDCI): 174.1 (C42); 173.7, 173.4 (C14/16); 170.4 (C38); 164.8 (CI0); 149.1 (C8); 146. 8 (C9); 137.1 (C20); 137.5 (C6); 130.3 (CI/2); 129.5 (C5); 129.3 (C22/24); 128.6 (C21/25); 128.3 (C4); 127.8 (C3); 126.6 (C23); 118.8 (C7); 73.5 (C26); 70.9 (C37); 60.0 (C29); 57.3 (C27); 51.9 (C12); 51.1 (C40); 50.0 (C18); 37.5 (C13); 35.9 (C30); 35.6 (C19); 34.7 (C43); 34.0 (C35); 33.3 (C35); 32.1 (C53); 29.8 (C45-52); 28.9 (C41); 25.1 (C44); 22.8 (C54); 20.8/25. 9/26.3/29.5/30.8 (C31- 34, C36); 14.3 (C55). Exemple Il: Saq-PEG2000 43 44 45 CH2CH2 -C(O)-(OCH2 CH2)440CH3 042 31 32 O 13 14 29 3 3 3 Q.) Q..) H O 25 4 6 2 1 9HN O - 163 mg (0,08 mmol) d'acide méthoxypolyvéthylèneglycol (PEG2000) succinate monoester et 9 mg (0,08 mmol) de DMAP sont additionnés à 50 mg (0,07 mmol) de saquinavir solubilisé dans 20 ml de CH2C12 anhydre. Le mélange est agité, puis 16 mg (0,08 mmol) de DCC sont ajoutés à 0 C. Le milieu réactionnel est agité à 0 C pendant 15 min, puis à température ambiante pendant 90 h. Le mélange est filtré et le solvant est évaporé. Le résidu brut obtenu est chromatographié sur colonne de silice (8,5 g, éluant: CHCl3/EtOH: 100/0 à 75/25 v/v), puis punrifié deux fois sur colonne de gel séphadex LH-20 (10 g, éluant: CHCI3). Le produit obtenu est purifié par HPLC. On obtient 107 mg (60%) de Saq-PEG2000 sous forme d'un solide blanc. CCM(AeOEt/EtOH: 9/1,v/v, UV): Rf=0,25. HPLC H20O/CH3CN(1/OOOTFA)90/lOàlOO% CH3CN (1/000 TFA) en 30 min, puis 30 min à 100% CH3CN (1/000 TFA), débit Imi/min, détecteur UV à254 nm: Tr= 29,9 min. RMN 'H (8 ppm, CDCI3): 9.03 (d, HI l); 8.25 (d, H7); 8.11 (t, HI/6); 7.82 (d, H4); 7.70 (t, H2); 7.55 (t, H3); 6.91-7.11 (m, 5H, H21-25); 6. 38 (Is, H17); 6.30 (s, H15); 5.83 (1 s, H39); 5.35 (m, H26); 4.76 (m, H12); 4.35 (m, H18); 4.19 (t, (CH2CH:OC(O)); 3.57 (I s, CHz(OCH2CiH2)430); 3.31 (s, CH30); 2.17-2.88 (m, H13/19/27/29/37, H43/44); 1.42-1.96 (m, H30/35/36); 1.18-1.71 (m, H3134); 1.27 (s, H41). RMN '3C (b ppm, CDCI3): 173.7, 173.4 (C14/16); 172.7 (C45); 172.1 (C42); 170.3 (C38); 164.4 (CIO); 149.2 (C5); 146.7 (C9); 137.4/137.5 (C6/8); 130.2 (C1/4); 129.3 (C20); 129.1 (C22/24); 128.5 (C21/25); 128.1 (C2); 127.7 (C3); 126.5 (C23); 118.7 (C7); 73.7 (C26); 72.0 (CH20CH3);70.6 (C37 et (OCH2CH,)42OCH2); 69.1 (OCH2CH2OC(O)); 64.0 (CH2CH20C(O)); 59.3 (C-29); 59.1 (OCH3); 56.5 (C27); 51.7 (C12); 51.0 (C40); 49.4 (C18); 37.7 (C13); 35.7 (C30); 34.6 (C19); 33.2 (C35); 30.8 (C36); 29.5, 29.2 (C43/44); 28.8 (C41); 20.7/25.8/26.3/29.7/30.8 (C30-34). Exemple III: Saq-Val(Boc) 49 O JI HI IH 46 O 15_NH = 42 31 32 N g i 16 N i z N N 1.7 26., H 252 -7q 6 24g9 21 39 HN 24Q2 41 Dans 3 ml de DMF, sont additionnés à 0 C, 51 mg (2 éq; 0,23 mmol) de BocVal-OH, 43 mg (3 éq; 0,35 mmol) de DMAP et 90 mg (1 éq; 0,12 mmol) de saquinavir (sous la forme de son sel de mésylate). Apres 10 min, 48 mg (2 éq; 0,23 mmol) de DCC sont introduits et le mélange est agité à température ambiante pendant 18 h. La solution est alors concentrée sous videpuis filtrée sur célite. Le résidu est repris AcOEt et la phase organique est lavée à l'eau. Après séchage sur MgSO4 et filtration, le solvant est évaporé à sec. Le produit est purifié sur une colonne de gel de silice dans AcOEt. On isole 46,7 mg de Saq-Val(Boc) sous la forme d'une poudre blanche amorphe (47%). SM (ESI): 870,6 (M+H)+, 892,6 (M+Na)+. HPLC: Tr = 22,39 min avec un gradient de 80/20 en eau/acétonitrile (1/10(X) TFA) à 100% en acétonitrile (1/1000 TFA) en 30 min à 254 nm. Rf (AcOEt 100%) = 0,70. RMN 'H (ô ppm, CD3OD) 8.45 (d, J 8.4 Hz, H7); 8.14 (d, H6); 8.11 (d, J 7. 0 Hz, H1); 7.98 (d, J 8.2 Hz, H4); 7.81 (t, J 7.0 Hz, H2); 7.66 (dd, H3); 7.23 (d, J 7.2 Hz, H21/25); 6.96 (t, J 7.2 Hz, H22/24); 6.80 (t, J 7. 2 Hz, H23); 5.25 (m, H26); 4.93 (m, H12); 4.52 (m, H18); 4.03 (d, J 5.4 Hz, H43); 3.20-3.00 (m, H29/19); 2.85-2.45 (m, H27/19/13); 2.35-2.05 (m, H44, H29/36); 1.95-1.20 (m, H30-36); 1.45 (s, H50); 1.30 (s, H41); 0.95 (m, H45, H46). RMN 13C (ô ppm, CD3OD): 175.2 (C42); 174.8, 172.9, 172.1, (C14/16/38); 165.9 (CIO); 159.7 (C48); 150.1 (C8); 147.7 (C9); 139.3 (C20); 138.7 (C6); 131.4, 130.6, 129.3, 128.8, 127.0 (C1-4, C23); 130.7 (C5); 130.2 and 129. 0 (C21/25 and C22/24); 119.5 (C7); 80.6 (C49); 75.5 (C26); 70.5 (C37); 60.6 (C43); 59. 1(C29); 56.1 (C27); 52.6 (C12);51.7 (C18);51.4 (C40);37.8 (C13/19);36.8, 34.9 (C30/35);31.5 (C44); 28.8, 28.7 (C41/51);31.7, 30.5, 26.9 (2C), 22.0 (C31-34, C36); 19.6, 18.4 (C45, C46). Exemple IV Saq-Val (sel de TFA) H24N 45 O 42 31 32 N-t2 0 29 30-33 0 13 14 H O 28 33 iN 2 17 6 353 3 (M 7 H 25 9 36 4 - 6 24) 21 39 HN 23 2 + 41 Dans une solution de CH2CI2 (3ml) contenant 43 mg (0,05 mmol) de SaqVal(Boc), on introduit 3 ml de TFA. Le mélange est agité à température ambiante pendant 2 h puis les solvants sont évaporés sous pression réduitc. On recueille 54 mg (98%) de Saq-Val (sous la forme de son scl de TFA) qui est purifié par HPLC semi-préparative. SM (ESI):385,8 (M/'z7)+, 770,9 (M+H)+. HPLC: Tr = 15,59min avec un gradient de 80/20 en eau/acétonitnle (1/1000 TFA) à 100% en acétonitrile (1/1000 TFA) en 30 min à 254 nm. RMN 'H (È ppm, CD3OD): 8.45 (1H, d, J 8. 5Hz, H7); 8.12 (2H, m, H1, H6); 7.98 (1H, d, J 8.OHz., H4); 7.82 (1H, td, J 6.9Hz, J 1.4Hz, H2); 7.67 (1H, td, J 8.0Hz, J 1.1Hz, H3); 7.16 (2H, d, J 7.0Hz, H21, H25);7.03 (2H, t, J 7. lHz, H22, H24);6.88(I H, t, J 7. 2Hz, H23);5.56 (1H, m, H26);4.89 (1H, m, H12)' 4.70 (1H, m, H18); 4.06-3. 80 (2H, m, H37, H43); 3.65-3.35 (4H, m, H27, H29); 2.95-2.55 (4H, m, H13, H19); 2.20-1.95 (5H, m, H44, H30, H35, H36); 1.80- 1.20 (8H, m, H31 to H34); 1.36 (9H, s, H41); 1.15-0.97 (6H, m, H45, H46). RMN 13C (ô ppm, CD3OD): 174.7, 173.6 (CI16, C42); 169.6 (C14); 168.2 (C38); 166.1 (C10); 150.0 (C9); 147.7 (C20); 138.9 (C6); 137.7 (C8); 131.5, 130.7, 130.5, 129.6, 129.3, 128.9, 127.6 (C1, C2, C4, C5, C7, C21 to C25); 119.4 (C3); 75.9 (C26); 69.5 (C37); 60.5, 57.7 (C27, C29); 59.6 (C43); 52.8 (C12); 52.6 (C40); 51.3 (C18); 37.5, 36.4 (C13, C19); 35.3 (C30); 33.0 (C35); 31.1. 30.0 (C31-34, C36); 30.0 (C44); 29.9, 26.8 (C31-34, C31-34); 28.6 (C41); 21.2 (C31- 34); 18.9, 17.5 (C45, C46). Exemple V Saq-(Boc)Tyr(OtBu) o 1575611 H 3 u k76" H s.541 4S--- 52. 2C 5i N O 3 7 H 0/à lcM 363-5 1 O-' 42 4948 31 32 O NH2 93 13 1 4 H O 33 N i 6N N8 6 2 -/1T 17 T 62 37../33 4 - 6739HN O 24 21 2 22 + 41 Dans 3 ml de DMF, sont additionnés à 0 C, 103 mg (2 éq; 0,26 mmol) de Boc- Tyr(OCH2COOH)-OtBu, 48 mg (3 éq; 0,39 mmol) de DMAPet 100 mg (1 éq; 0,13 mmol) de saquinavir (sel de mésylatc). Après 10 min, 54 mg (2 éq; 0, 26 mmol) de DCC sont introduits et le mélange est agité à températurc ambiante pendant 18 h. La solution est alors concentrée sous vide puis filtrée sur célitc et évaporée à sec. Le résidu est repris dans AcOEt et la phase organique est lavée par une solution aqueuse de Na2CO03 (10%) puis par de l'eau. Après séchage sur MgSO4 et filtration, le solvant est évaporé à sec. Le produit est purifié sur une colonne de gel de silice dans AcOEt. On isole alors 115 mg de Saq-(Boc)Tvr(OtBu) sous la forme d'une poudre blanche amorphe (80( %). SM (APCI): 1048,5 (M+H)*. HPLC: Tr: 24,4 min avec un gradient de 80/20 en eau/acétonitnrile (1/1000 TFA) à 100% en acétonitnrile (1/1000TFA) en 30 min à 254 nm. Rf (AcOEt 100%) = 0,56. RMN 'H (ô ppm, CD3OD): H1-7 identiques à ceux de Saq-Val(Boc); 7.17-7.08 (m, H21/25/46/48); 6.91-6.78 (m, H22/24/45149); 6.69 (t, J 7.3 Hz, H23); 4. 93 (m, H12); 4.63 (s, H43); 4.31-4.07 (m, H18/51); 4.86 (m, H26); 3. 15-2.50 (m, H13/19/27/29/37/50); 2.30-2.05 (m, H29/36); 1.80-1.20 (m, H30-36); 1.35 (s, H58/55); 1.27 (s, H41). RMN 13C (ô ppm, CD3OD): Cl-10, C14/16/38, C20-25 identiques à ceux de Saq- Val(Boc); 170.2, 170.1 (C42/56); 159.8 (C44); 158.2 (C53); 131.3 (C46/48) 115.4 (C45/49); 82.6 (C57); 80.7 (C54); 71.3 (C26); 70.7 (C37); 66.0 (C43); 59.7 (C27/29); 55.1 (C18); 57.1 (C51); 51.8 (C12); 51.5 (C40); 37.8 (C13/19); 37.7 (C50); 37.1 (C30), 34. 7 (C35); 28.8, 28.5, 28.1 (C41/55/58);31.8, 29.4. 26.8, 21.8 (C31-34, C36); C47 non localisé. Exemple VI: Saq- Tyr (sel de TFA) HO-C 5s1NH2 46 52 S 43 (,.' [}),-50 O 4 471 3132 0 NH., "-- '+ 9480z--. 0 13 14 0 33 H 28 1a26 une so[ution d8 31-'"'" c32 37N. 35/x 34 (Boc)Tr(OtBu, o 1111N inroui 15 mld.TF. Le méag est 1gtéà8epr,,e mbatepndn 5.eipoartv.O obin W, 6 SM1 (I 27 38 36 24LQ 21 39 HS O 23 4 22 404 Dans une solution de CH2CI2 (2,5ml) contenant de 143 mg (0,136 mmol) de Saq- (Boc)Tvr(OtBu), on introduit 2,5 ml de TFA. Le mélange est agité à température ambiante pendant 4 h puis les solvants sont évaporés sous pression réduite. Lc produit brut est purifié par HPLC semi- préparative. On obtient SM (ESI): 892,9 (M+H)+. HPLC: Tr = 14,8 min avec un gradient de80/20 en eau (1/1000 TFA)/acétortnle(1/1000lTFA)àOO 100% enacétonitnle(1/1000TFA)en 30 min à 254 nm. RMN H (6 ppm, CD3OD): H1-7 identiques à ceux de Saq-Val(Boc); 7.45-6.95 (m, H21/22/24/25/45/46/48/49); 6.90 (t, J 8.3 Hz., H23); 5.51 (m, H26); 4.90 (m, H12); 4.81 (s, H43); 4.15 (t, J 5.5 Hz, H51): 4.05 (m, H37); 3.85 (m, H18); 3.60-2.55 (m, H13/19/27/29/150); 2.10-1.20 (m, H30-36); 1.38 (s, H41). RMN '3C (6 ppm, CD3OD): Cl-10, C20-25, C14/16/38) identiques à ceux de Saq-Val(Boc); 170.1 (C42); 168.3 (C53); 158.8 (C44); 131.7, 131.0 (C46/48), 116.2 (C45/49)74.0 (C26);69.1 (C37); 66.1 (C43); 60.4, 57.8 (C27/29); 55.1 (C18); 52.8 (C51); 52.8 (C40); 51.7 (C12); 37.7 (C13); 36.4 (C19); 36.4 (C50); 35.2 (C30); 32.8 (C35); 28.6 (C41); 31.5, 29.9 (C31/36); 27.8, 26.8 (C31/34); 21.3 (C33). C47 non localisé. Exemple VII: Ind-Myr 34 T3 38 39 40 50 32 Q24 132 CHCH2 (CH2)ioCH3 26.24 17 3óC._31 27 16 1 H 30 0 28cN., , 9.185 2 ó1H.-o o 3 so _ 3 4 On ajoute, à 0 C, 82 mg (0,4 mmol) d'acide myristique et 45 mg (0,4 mmol) de DMAP 221 mg, puis 75 mg (0,4 mmol) de DCC (0,4 mmol) à une solution d'indinavir dans 20 ml de CH2CI2 anhydre. Le milieu réactionnel est agité à 0 C pendant 15 min, puis à température ambiante pendant 90 h. Le milieu réactionnel est filtré et le solvant est évaporé. Le résidu obtenu est chromatographié sur colonne de silice (15 g, éluant: AcOEt/MeOH 100/1 à 9/1 v/v) pour donner 128 mg (43%) de lnd-Myr sous forme d'un solide blanc. CCM (AcOEt/MeOH: 8/2, v/v, UV): Rf= 0,54. RMN 'H (ô ppm, CDCI3): 8.45 (m, H28-29); 7.62 (sl, H21); 7.51 (dd, H27); 7.08-7.23 (m, H2-5, H26, H3236); 6.22 (d, H10); 5.57 (dd, H9); 5.17 (td, H8); 3.74 (sl, H14); 3.41 (s, H24); 2.20-3.26 (m, H7/12, H15-19, H30); 1.54/1.97 (t, H13); 1.26 (sl, H23); 1.17 (m, H39-49); 0.80 (t, H51, J 6.1 Hz). RMN '3C (6 ppm, CDC13): 175.0 (CI1); 172.9 (C37); 169.4 (C20); 150.6 (C28), 149.2 (C29), 141.2, 139.8, 139.5 (C1/6/31); 137.0 (C26); 132.6 (C25); 129.0 (C33/35); 128.5 (C32/36); 128.1, 127.1, 126.5, 125.1, 123.8, 123.6 (C2-5/27/34); 75.8 (C8); 65.9 (C14); 64.1 (C19); 61.6 (C15); 60.4 (C24); 55.1 (C9); 54.8, 52.9. 48,0 (C16/17/18); 51.3 (C22); 46.3 (C12); 39.5 (C30); 38.3 (C13); 37.8 (C7); 34.3 (C38); 32.0 (C48); 29.4/29.5/29.6/29.8 (C40-47); 29.2 (C23); 24.8 (C39); 22.8 (C49); 14.3 (C50). Exemple VIII lnd-(Myr)2 R= C(O)-(CHz),2-CH3 8 39 40 50 32 Qj 7 32 CHCH2 (CH2)l1CH3 26 N24 17 3 16C313 27Q2 16 0 30 28 J2918 - 15 12 il 9 N29 19 4 1 21 0 1 +22 23 3 4 mg (0,6 mmol) d'acide mvristique et 40 mg (0,3 mmol) de DMAP sont additionnés à 188 mg (0,3 mmol) d'indinavir dans 20 ml de CHCI3 anhydre. 127 mg (0,6 mmol) de DCC sont ajoutés au mélange à 0 C. Le milieu réactionnel est agité à 0 C pendant 15 min, puis à température ambiante pendant 17 h. Le milieu réactionnel est filtré et le solvant est évaporé. Le résidu obtenu est chromatographié sur colonne de silice (12 g, éluant: AcOEt/MeOH 100/0 à 95/5 v/v). On obtient 222 mg de In-(Mvr)2 (70%). CCM (AcOEt/MeOH: 9/1, v/v, UV): Rf= 0,55. IR (v cm", KBr): 1669 (C=O amides); 1734 (C=O esters). RMN 'H (6 ppm, CDCI3): 8.47 (m. H28/29); 7.63 (dd, H27); 7. 10-7.27 (m, H2- , H26, H32-36); 6.91 (s, H21): 6.27 (d, H10); 5.59 (dd, H9); 5.27 ( td, H8); 5.11 (m, H14); 3.47 (s, H24); 2.00-3.19 (m, H7/12, H15-19, H-30); 1. 55/1.97 (t, H13); 1.31 (s, H23); 1.18 (m, H39-49/39'-49'); 0.86 (t, H50, J 6,1 Hz.). RMN 13C (ô ppm, CDCI3): 174.3 (Cl1); 174.0 (C37'); 173.0 (C37); 170.3 (C20); 150.3 (C28); 148.8 (C29); 140.9, 139.4, 139.2 (C1/6/31); 137.0 (C26); 133.0 (C25); 128.9 (C33/35); 128.6 (C32/36); 128.2, 127.3, 126.7, 125.0, 124.1, 123.6 (C2-5/27/34); 76.0 (C8); 69.8 (C14); 67.1 (C19); 60.0 (C15); 59.0 (C24); 55.7 (C9); 55.3, 52.2 (C16/17); 51.0 (C22); 50.1 (C18); 46.8 (C12); 39.8 (C30); 37. 7 (C7); 35.7 (C13); 34.3/34.7 (C37/37'); 32.0 (C48/48'); 29.2/29.4/29.5/29.6/29.8 (C4047/40'-47'); 29.0 (C23); 24.8/25.2 (C39/39'); 22.8 (C49/49'); 14.2 (C50/50'). Exemple IX: Ind-(PEG350)2 R = -C(O)-CHCH,-C(O)-(OCH2CH,)7OCH3 s 4 3 3 8 3 9 40 so0 5 1 ^" n ^4 2 CHICHI -C(O)-(OCH2CH2)70CH 3 26 2-4 1 7 3673 27 291 5 1 N 1 1 3 10 O 6 1,3 ml d'une solution 0,5 M d'acidc méthoxypolyéthylène glycol (PEG350) succinate (ROH) dans CHCI3 anhydre et 36 mg (0,3 mmol) de DMAP sont additionnés à 180 mg (0,3 mmol) d'indinavir dans 20 ml de CHCI3 anhydre. Puis, 122 mg (0,6 mmol) de DCC sont ajoutés au mélangc à 0 C. Lc milieu réactionnel est agité à 0 C durant 15 min, puis à température ambiante durant 22 h. On rajoulte 0,6 ml (0,3 mmol) d'une solution 0,5 M d'acide méthoxypolvéthylène glycol (PEG350), 18 mg (0,15 mmol) de DMAP et 60 mg (0,3 mmol) de DCC. Après 72 h, lc milieu réactionnel est alors filtré et le solvant est évaporé. Le produit obtenu est lavé avec une solution de NaHCO3 à 5%, puis à l'eau. La phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée puis évaporée. Le solide obtenu est chromatographié sur colonne de silice (6 g, éluant: CH2CI2/EtOH: /0 à 9/1 v/v), puis purifié sur colonne de gel séphadex LH-20 (9 g, éluant: CHC13). On obtient 93 mg (22%) dc Ind-(PEG350)2 sous forme d'un solide blanc. HPLC: H20/CH3CN (1/1000 TFA) 90/10 À 100% CH3CN (1/1000 TFA) en 30 min, débit lml/min,détection à 254nm: Tr= 16,6 min. RMN 'H ( ppm, CDCI3): 8. 48 (m, H28/29); 7.61 (dd, H27); 7.16-7.33 (m, H2-5, H26, H32-36); 6. 87 (d, H10); 6.68 (sl, H21); 5.68 (dd, H9); 5.32 (td, H8); 5.17 (si, H14); 3.58 (sl, OCH2); 3.45 (s, H24); 3.37 (s, CH30); 2.27-3.27 (m, H7/12, H15-19, H30);'2.12 (sl, H38/38'/39/39'); 1.54/1,87 (t, H13); 1.25 (si, H23). RMN i3C (6 ppm, CDCI3): 174.5 (C11); 173.2 (C37');172.4/172.5 (C40/40'); 171.3 (C37); 170.6 (C20); 150.5 (C28); 148.9 (C29); 140.6, 139.4, 136.7, 133.2, 131.2 (C1/6/25/26/31); 129.1 (C33/35); 128.5 (C32/36); 128.0, 127.2, 126.5, 124.7, 124.3, 123.5 (C2-5/27/34); 76.4 (C8); 72.1 (CH20,OCH3); 70.7 (2 CHCHO)sOCH2); 70.2 (C14); 69.1, 68.8 (C51/51'); 67. 5 (C19); 64.0 (C50/50'); 60.0 (C15); 59.4 (C24); 59.1 (20 OCH3); 56.0 (C9); 55.4, 52.2 (C16/17); 50.9 (C22); 52.8 (C18); 45.2 (C12); 40.2 (C30); 39.0 (C13); 37.7 (C7); 29.2, 29.0 (C38/38'/39/39'); 28.9 (C23). Exemple X Ind-PEG350 34 33 8 39 40 50 51 3/-'5-Q - 322CH., CH, -C(O)-(OCH2CH2) 70CH 3 26,24 17 3( 3_ 1 C 37 27 N ' 16 'OH 30 H O *2842918 9N5 12,N t 29) 13 2111N o o 6 23 2 0,2 ml d'une solution 0,5 M d'acide méthoxvpolyéthylèneglycol (PEG350) succinate dans CHCL3 anhydre et 18 mg (0,15 mmol) de DMAP sont additionnés à 50 mg (0,07 mmol) d'indinavir dans 20 ml de CHC13 anhydre. Puis, 16 mg (0,08 mmol) de DCC sont ajoutés au mélange à 0 C. Le milieu réactionnel est agité à 0 C durant 15 min, puis à température ambiante durant 40 h. Le mélange est filtré et le solvant cst évaporé. Le résidu brut obtenu est chromatographié sur colonnc dc silice (8 g, éluant: CHC13/EtOH 100/0 à 8/2 v/v) pour donner 63 mg d'un mélange de Ind-PEG350 et d'indinavir. Ce mélangc est purifié sur colonne de gel séphadex LH-20 (4 g. éluant: CHCI3). Le produit obtenu cst purifié par HPLC (H2O/CH3CN (1/1000 TFA) 60/40 à 40/60 en 45 min, débit 2 ml/min, 254 nm). On obtient 44 mg (61%) de Ind- PEG350 sous forme d'un solide blanc. HPLC: H20/CH3CN (1/1000 TFA) 90/10 à 100% CH3CN (1/1000 TFA) en 30 min, débit 1 ml/min, 254 nm: Tr = 14.4 min. CCM (CHCl3/EtOH: 9/1, v/v, UV): Rf = 0,65. RMN 'H (È ppm, CDCI3) 8.54 (m, H28/29); 7.68 (sl, H21); 7.64 (dd, H27); 7.16-7.33 (m, H2-5, H26,/H32-36); 6.48 (d, H10); 5.66 (dd, H9); 5.32 (td, H8); 3.74 (sl, H14); 3.66 (sl, H24/H50); 3.38 (s. CH30); 2.X18-3.14 (m, H7/H12, H15-19, H30); 1.94 (sl, H38/39); 1.45/1.52 (t, H13); 1.26 (sl, H23). RMN '3C (6 ppm, CDC13): 175.2 (Cll); 173.2 (C40); 171.0 (C37); 169.4 (C20): 150.8 (C28); 149.2 (C29)7 141.2, 139.9, 139.4 (C1/6/31); 137.0 (C26); 132.8 (C25); 129.1 (C33/35); 128.5 (C32/36); 128.1, 127.2, 126.4, 125.1, 123.8, 123.6 (C2-5/27/34); 76.4 (C8); 72.1 (CHOCH3); 70.7 ((CH2CH2O)sOH2); 69.1(C51); 65.9 (C14); 64.2 (C19); 64.0 (C50); 61.6 (C15); 60.4 (C24); 59.0 (OCH3); 55.3 (C9); 54.8, 52.9 (C16/17); 51.3 (C22); 48.0 (C18); 46.3 (C12); 39.5 (C30); 38.3 (C13); 37.8 (C7); 29.8 (C38/39); 29. 2 (C23). Exemple XI: Ind(Prt) 34 33 26, 17 '3 Q 3 82 _3 3 37 ( 27Q24N 16 OH 30 278 2 N 15 2 - 77 721 1413 10 7 21HFN 2 Q6 4 Dans une solution (7 ml) de diméthoxypropane (DMP) contenant 500 mg (1 éq; 0,70 mmol) d'indinavir (sous la forme de son sel de sulfate) sont introduits 196 mg (1,2 éq; 0,84 mmol) d'acide camphorsulfonique et du sulfate de magnésium (MgSO4) en quantité catalytique. Le milieu réactionnel est agité durant 5 h à 80 C puis 3 h à température ambiante. Après évaporation du DMP, le résidu est repris dans une solution aqueuse de carbonate de sodium à 10%. Le produit est extraitavec AcOEtet les phases organiques sont lavées à l'eau. Après séchage sur MgSO4 et filtration, le solvant est évaporé sous pression réduite. Le résidu est purifié sur une colonne de gel de silice (éluant: AcOEt/McOH de 100/0 à 80/20 v/v). On isole alors 291 mg d'Ind(Prd) sous la forme d'une poudrc blanche amorphe (63 %). SM (APCI+): 654,4 (M+H)+. HPLC: Tr = 14,8 min avec un gradient de 80/20 en eau/acétonitnrile (1/1000 TFA) à 100% en acétonitnle (1/1000 TFA) en 30 min à 254 nm. Rf (AcOEt/MeOH 1/1) = 0,69. RMN 1H (6 ppm, CDC13): 8.47 (2H, m, H28, H29); 7.69 (1H, bs, H26); 7.52 (1H, mn, H27); 7.23-6.86 (9H, m, H32 to H36, H2 to H5); 5.87 (1H, d, J=4.3Hz, H9);4.72 (1H, m, H8);3.71 (IH, m, H14);3.41 (2H, s, H24); 3.15-2.15 (14H, m, H16, H17, H19, H18, H7, H30, H15, H12);2.10 (1H, m, H13); 1.75 (1H, m, H13); 1.57 (3H, s, H38a); 1.25 (12H, bs, H23, H38b). RMN '3C (6 ppm, CDCI3): 172.5 (CI); 169.3 (C20); 150.6 (C28); 149.3 (C29); 141.3, 140.5, 139.8 (C1/6/31); 136.9 (C26); 132.5 (C25); 129.7 (C33/35); 128.8 (C32/36): 128.1, 127.3, 126.8, 125.7, 124.3, 123.5 (C2-5/27/34);96. 7 (C37); 79.3 (C8); 66.0, 65.6 (C14/19); 64.1 (C9); 61.7 (C15); 60.4 (C24); 54.7, 52.8, 47.8 (C16-18); 51.3 (C22); 43.6 (C12);40.1 (C30); 39.7 (C13);36.3 (C7);29.2 (C23);26.7,24.4 (C38a, b). Exemple XII Ind(Prt)-Val(Boc) O 44 43 -7 IIlH 41 47 O-C-N -,, 42 4 40 35 34 39 OC 36 33 2616 17 \ o/38a -27-,24N 60 3/ -- - -O nJ 29 1 i CN O -" 4 21 0 Dans 3 ml de DMF, sont additionnés à 0 C, 133 mg (2 éq; 0,61 mmol) de Boc-Val-OH, 75 mg (2 éq; 0,61 mmol) de DMAP et 200 mg (1 éq; 0,30 mmol) d'Ind(Prt). Après 10 min, 126 mg (2 éq; 0,61 mmol) de DCC sont introduits et lc mélange est agité à température ambiante pendant 18 h. La solution est alors concentrée sous vide, puis filtrée sur célite. Le résidu est repins par AcOEtet la phase organique est lavée à l'eau. Après séchage sur MgSO4 et filtration, le solvant est évaporé à sec sous pression réduite. Le produit est purifié sur une colonne de gel de silice avec (éluant AcOEt/MeOHde 100/0 à 90/10 v/v). On isole alors 217 mg de Ind(Prt)-Val(Boc) sous la forme d'unc résine incolore (83%). SM (APCI): 853,5 (M+H)*. HPLC: Tr = 23,3 min avec un gradient de 80/20 en eau (1/1000 TFA)/acétonitrile (1/1000 TFA) à 100% en acétonitrile (1/1000 TFA) en 30 min à 254 nm. Rf (AcOEt/McOH6/4) = 0,91. RMN 'H (? ppm, CD3OD): 8.38 (2H, m, H28, H29); 7.65 (1H, d, J 8.0Hz, H26);7.45-7. 05 (10H, m, H27, H32 to H36, H2 to H5); 5.68 (1H, d, J 4.5Hz, H9); 5.15 (1H, m, H14); 4.82 (1H, m, H8); 3.82 (1H, d, J 9.0Hz, H40); 3.32 (2H, s, H24); 3.21- 2.13 (15H, m, H7, H16, H17, H18, H19, H30, H15, H12, H13); 2.00 (1H, m, H41); 1.75 (1H, m, H13); 1.63 (3H, s, H3Xa); 1.36 (9H, s, H23); 1.30 (9H, s, H47); 1.25 (3H, s, H38b); 0.89 (6H, m, H42, H43). RMN 13C (6 ppm, CD3OD): 173.6, 173.3, 171.9 (C11/20/39); 155.3 (C45); 150.6 (C28); 148.9 (C29); 142.2, 141.9; 141.0 (C1/6/31); 139.0 (C26); 134.9 (C25); 130.4 (C33/35), 129.7 (C32/36), 129.0, 128.0, 127.8, 126.5, 125.4, 124.9 (C2-5, C27, C34); 97.6 (C37); 81.1 (C8); 80.5 (C46); 70.8 (C14); 68.1, 67.3 (C9/19); 61.0, 60.0, 59.9 (C15/24/40); 56.2, 52.6, 51.5 (C16-18); 51.9 (C22); 46.1 (C12); 39.0, 38. 5 (C13/30); 36.7 (C7); 31.8 (C41); 28.9 (C23); 28.5 (C47); 26.8, 24.3 (C38a,b); 19.5, 18. 1 (C42/43). Exemple XIII Ind-Val (sel de TFA) HN 39 40 "3 35 34 OC 336 Q 33 173 27Q N 16 0 30,7 3 H OH :skr.j29,.L82. N1 410 7 13 2X 11I O' C) >li 6 22 23 Dans une solution de CH2Cl2 (4 ml) contenant 217 mg (0,25 mmol) de Ind(Prt)-Val(Boc), on introduit 4 mi de TFA. Le mélange est agité à température ambiante pendant 2 h puis les solvants sont évaporés. Le résidu est repris dans l'eau puis la phase aqueuse est lavée avec AcOEt, puis évaporée à sec. Le résidu est purifié par HPLC semi-préparative pour recueillir 223 mg (76%) de Ind-Val sous la forme de son sel de TFA. SM (ESI):356,9 (M/2z), 713,6 (M+H)+. HPLC: Tr = 8,89 min avec un gradient de 80/20 en eau (1/1000 TFA)/acétonitrile (1/1000 TFA) à 100% en acétonitrile (1/1000 TFA) en 30 min à 254nm. RMN 'H (6 ppm, CD3OD): 8. 78 (2H, m, H28, H29); 8.20 (1H, d, J 7.8Hz, H26); 7.75 (1H, m, H27); 7. 40-7.10 (9H, m, H32 to H36, H2 to H5); 5.25 (1H, d, J 5.0Hz, H9); 4.45 (2H, m, H8, H14),3.90 (1H, d, J 4.7Hz, H38); 3.35 (2H, s, H24); 3.25-2. 60 (14H, m, H19, H18, H17, H16, H30, H7, H12, H15); 2.25 (1H, m, H39); 1.80, 1.40 (2H, m, H13); 1.35 (9H, lX s, H23); 1.08 (3H, s, H41); 1.03 (3H, s, H40). RMN '3C (6 ppm, CD3OD): 170.3, 170.0, 168.8 (Cll/20/37); 145.7 (C28); 141.9, 141.7; 141.6; 140.0 (C1/6/29/31); 138.7 (C26); 137.7 (C25); 130.0 (C33/35), 129.4 (C32/36), 128.8, 127.6, 127.5, 127.1, 126.1, 125.2 (C2- /27/35); 73.9 (C8): 72.6 (C14); 59.3 (C19); 58.6 (C9); 58.5, 58.4, 58.3 (C15/24/38); 52.7, 52.6, 52.4 (C16-18);52.6 (C22);45.9 (C12);40.5, 40.1 (C13/30); 35.1 (C7); 30.7 (C39); 28.6 (C23); 18.3, 18.2 (C40/41). Exemple XIV Ind(Prt)-(Boc)Tyr(OtBu) O 52 jI H + O--C/NCOO--+' 49 5,311 451 4 -43 Q 4 46?--41 -3 34 39OC 3 17 3 3 77.. 24A_ 0 236 27Q 291v 1 '1 Dans 5ml de DMF à 0 C, sont additionnés 242 mg (2 éq; 0,61 mmol) de Boc- Tyr(OCH2COOH)-OtBu, 75 mg (2 éq; 0,61 mmol) de DMAP et 200 mg (1 éq; 0, 30 mmol) d'Ind(Prt). Après 10 min, 126 mg (2 éq; 0,61 mmol) de DCC sont introduits et le mélange est agité à température ambiante pendant 18 h. La solution est alors concentrée, puis filtrée sur célite et évaporée. Le résidu est repris dans CH2CI2 ct la phase organique est lavée à l'eau. Après séchage sur MgSO4 et filtration, le solvant est évaporé. Le produit est purifié sur une colonne de gel de silice (éluant: CH2CI2/McOH de 100/0 à 90/10 v/v). On isole 247 mg de Ind(Prt)- (Boc)Tyr(OtBu) sous la forme d'une résine incolore (80 %). SM (APCI): 1032,1 (M+H)+. HPLC: Tr = 25,4 min avec un gradient de 80/20 en eau (1/1000 TFA)/acétonitrile (1/1000 TFA) à 100%' en acétonitnle (1/1000 TFA) en 30 min à 254 nm. Rf (AcOEt/MeOH8/2) = 0,65. RMN 'H (b ppm, CD3OD): 8.40 (2H, m, H28, H29); 7.50 (1H, dt, J=7.8Hz, H26); 7.43-7. 12 (10H, m, H27, H32 to H36, H2 to H5); 6.95-6.63 (4H, m, H42, H43, H45, H46);5.52 (1H, d, J 3.7H/z, H9);5.18 (lH, m, H14);4.80 (1H, m, H8);4.65 (2H, s, H40); 4.07 (1H, m, H48); 3.30 (2H, s, H24); 3.20-2.15 (17H, m, H13, H17, H16, H18, H19, H47, H7, H30, HI5, H12); 1.75 (1H, m, H13); 1. 62 (3H, s, H38a); 1.40-1.32 (27H, s, H23, H55, H51); 1.29 (3H, s, H38b). RMN 13C (ô ppm, CD3OD): 173.3, 172.8, 171.9, 170.1 (C11l/20/39/49); 158. 0 (C41); 150.7 (C28); 148.9 (C29); 142.2, 141.8; 140.7 (C1/6/31); 139.0 (C26); 135.0 (C25); 131.3 (C43-45), 130.4 (C33-35), 129.7 (C32-36), 129. 1, 128.0, 127.8, 126.5, 125.3, 124.9 (C27, C2-5/27/34); 115.2 (C42/46); 97.6 (C37); 82.5 (C50); 80.7 (C8); 80.4 (C54); 71.0 (C14); 67.6; 67.3 (C9/19); 66.3 (C40); 60.2 (C15); 59.9 (C24); 57.0 (C48); 55.9; 52.6, 51.2 (Cl6-18); 51.9 (C22); 45.6 (C12); 38.9; 38.0 (C13/30); 37.8 (C47); 36.6 (C7); 28.9 (C23); 28.5, 28.1 (C51/55); 26.7, 24.4 (C38a,b). Exemple XV Ind-Tyr (sel de TFA) HOOC 4 NH I 3 41 44 39 3 34 26 17 O731 27Q N. " 16 0 30 H OH 28 2') N o,/ 291v "13 _ 2Q5 1 ( i 6 22 23 Dans une solution dc CH2C12 (5ml) contenant 200 mg (0,194 mmol) de Ind(Prt)- (Boc)Tyr(OtBu), on introduit 5 ml dc TFA. Le mélange est agité à température ambiante pendant 5 h puis les solvants sont évaporés. Le résidu est repris dans l'eau puis la phase aqueuse est lavée par AcOEt et l'eau est évaporée àa sec. Le résidu est purifié par HPLC semipréparative et on recueille 220 mg (80 %) de Ind-Tvr sous la forme de son sel de TFA. SM (ESI+): 418,2 (M/2z.)*+; 835,7 (M+H); 858,0 (M+Na)+. HPLC: Tr = 10,4 min avec un gradientde 80/20 on cau (1/1000 TFA)/acétonitnrilc (1/1000 TFA) à 100% en acétonitrile (1/1000 TFA) en 30 min à 254 nm. RMN 'H (6 ppm, D0O): 8.98-8.58 (3H, m, H28, H26, H29); 8.10 (1H, m, H27); 7.42-7. 01 (11 IH, m, H41, H43, H2 to H5, H32 to H36); 7.00-6.78 (2H, m, H40, H44); 5.10 (1H, d, J 6.9Hz., H9);4.73 (2H, s, H38); 4.40 (1H, m, H8); 4. 22 (1H, t, J 6.8Hz, H46); 4.01 (1H, m, H14);3.30 (2H, s, H24); 3.40-2.63 (17H, m, H45, H16 to H18, H7, H30, H12, H19, H15, H13); 1.75 (1H, m, H13); 1.31 (9H, s, H123). RMN 3C (6 ppm, CD3OD) 177.2, 176.9, 170.8, 169. 9 (Cll/20/37/47); 158.7 (C39); 142.1, 141.7, 141.6, 140.3, 140.0 (C1/6/28/29/31); 131.6 (C42), 131.5 (C41/43), 130.1 (C33/35), 129.3 (C32/36), 128.7, 128.4, 128.1, 127.6, 127.3, 126.5, 125.9, 125.4 (C2-5/34/25-27); 116.1, 116.0 (C40/44); 73.7 (C8); 71.5 (C14);66.6 (C19);66.2 (C38);64.8 (C15); 62.6 (C24); 58.5 (C9); 58.2; 55.1, 51.4 (C16- 18); 52.5 (C22); 48.6 (C46), 45.8 (C12); 40.5, 40.2 (C13/30); 38.5 (C45); 36.3 (C7); 28.6 (C23). Exemple XVI Evaluation de l'activité anti-VIH des composés sur les cellules MT4. La multiplication du VIH-1 (souche fHTLV IIIB) dans des cellules MT4 (cellules T4 transformées par le HTLV-1) est suivie par l'effet cytopathogene induit par le virus. Les cellules sont infectées avec une dose dc VIH-1 produisant, après 5 jours de culture, une diminution de % du nombre de cellules vivantes. Les composés testés sont ajoutés après l'adsorption du virus dans le milieu de culture à différentes concentrations. La viabilité des cellules est mesurée par la réaction colonmétriquc (MTT) basée sur la capacité des cellules vivantes à réduire le bromure de 3- (4,5-diméthylthliazol-2-yl)-2,-diphénvltétrazolium en formazan, propriété due aux deshydrogénases mitochondriales. La quantité de formazan (DO à 540 nm) est proportionnelle au nombre de cellules vivantes. Le pourcentage de protection A des cellules infectées par le traitement avec les composés est calculé selon la formule: DOs i (les ccllules infelcctées traitées (T) - IX)z4 des cellules infectées Téimoin (S2) DOs4o des cellulcs non-infectées (S 1) - DOi40 dcs ccllules infectées Témoin (S2) L'effet toxique des composés sur les cellules MT4 non infectées est mesuré par la même réaction colorimétnrque. La concentration cytotoxique 50% (CC50) est la concentration de composé provoquant une diminution de moitié de la DO5,4 par rapport à celle des cellules témoins. S'il y a lieu, la concentration du composé conférant une protection de 50% (CIso, c'est à dire la concentration inhibant la réplication virale de 50%) est calculée. Les résultats sont rassemblés dans le tableau 1. Evaluation de l'activité anti-VIH des composés sur les cellules CEM-SS. La multiplication du VIH-1 (souche LAI) dans les cellules CEM-SS (infectées avec une dose infectieuse pour 50%' de la culture, TCIDS0, égale à 20) est évaluée, après 5 jours de culture, par dosage de la transcriptasc inverse (TI) dont l'activité traduit la présence de virus relargué dans le surnageant de culture. Les composés testés sont ajoutés dans le milieu de culture après adsorption du virus par les cellules. On détermine un pourcentage d'inhibition et une CI-0 (concentration pour laquelle il y a a50% d'inhibition) de la TI par rapport aux cellules non traitées. L'effet toxique des composés sur les cellules CEM-SS non infectées est apprécié par la réaction colorimétnque(test MTT) après cinq jours d'incubation cn présence de différentes concentrations en composé. Les résultats sont également rassemblés dans le tableau I. La présente invention a également pour objet des préparations à usage thérapeutique anti- virale comprenant au moins une des molécules répondant à une des formules I à V de l'invention. Les préparations peuvent comprendre, en outre, une ou plusieurs molécules inhibant la réplication virale, par exemple dans le cas des VIH, des molécules agissant sur la transcriptase inverse du VIH ou sur d'autres cibles virales ou cellulaires conduisant à une diminution de la prolifération du virus. Les préparations peuvent être sous forme de solutions, de dispersions dans l'eau ou tout autre solvant approprié, dc gélules, de comprimés, de cachets, de suppositoires, de capsules ou de pilules. Les molécules peuvent aussi être utilisées incluses dans un système transporteur ou vecteur de médicaments comme des liposomes. des microsphères ou des nanoparticules ou encore associées avec des polymères naturels ou synthétiques. 2Z, 2773994 REVENDICATIONS I - Des pr.odroucs inhibitrices de la protéase du virus de l'immunodéficicnce humaine (VIH), issues d'antu-protéases anti-VIH pour améliorer leur biodlisponibilité, tfaciliter leur tropisme vers le système nerveux central (SNC) et/ou leur délivrance dans le SNC afin d'inhiber la prolitfération du virus dans le SNC, caractérisées en ce qu'elles dérivent de ces anti-protéases par couplage (a) à des résidus lipidiques (comme le cholestérol, de longues chaînes d'acides gras, des résidus phospholipidiques, des céramides ou encore des groupements dihydropyridines qui traversent rapidement la barrière hémato-encéphalique et, après oxydation en sels de pyridinium plus polaires, se retrouvent piégés dans le cerveau par un mécanisme de "lock in"), pour les rendre plus lipophiles afin de faciliter leur diffusion passive au travers des barrières intestinale et/ou hémato-encéphalique et avoir une durée de vie suffisante dans le SNC; (b) à divers résidus, tels que des aminoacides (valine, tyrosine, phénylalanine, etc..) ou le D- glucose, qui sont substrats des transporteurs situés au niveau de la barrière intestinale et/ou de la barrimère hémato-encéphalique, afin de faciliter leur diffusion active au travers de ces barrières et augmenter, respectivement, leur concentration dans la circulation sanguine et dans le SNC, ou (c) à des résidus polvéthylèneglycols pour les rendre plus hydrophiles pour leur protection vis-à-vis des protéines plasmatiques inhibitrices de leur action, pour la modulation de leur biodistribution, pour la limitation de leur confinement dans le foie et leur inactivation, pour l'augmentation de leur temps de résidence dans la circulation sanguine et de leur concentration plasmatique, ce qui devrait faciliter et améliorer leur diffusion passive au travers de la barrière hémato-encéphalique. 2 - Des composés selon la revendication 1 caractérisés en ce qu'ils dérivent des anti- protéases indinavir, saquinavir, ritonavir, nelfinavir ou ABT-378, et qu'ils répondent aux formules générales I à V f"llu I ( I ']" 2 Pli NHtBu CN N N > N H tlBuNII -,' O 111 (Iitnavir' R; - h IV (baqunmvlr: R L-H) ?vie.M Ph B I1 Rioair1)IV(eliair = R H H) M Me H N. H H ( V ( ABT -37X: R 1= H) dans lesquelles R', R2 sont, s. condition que R- ou R: dans Iet IV, et R dans II, III et V soient différents de Me hî, N OR' H,. Mec 'VI Ph Me Ph-S NHtBu (a) H ou un (R-aminoacide naturel ou non, ou un B-amin avir:oacide, ou un d Rv d'tx-aminoacide comme le dopa (ou 3- hydroxtyrosine), le merphalane qui est un dv de la phnylalanine o Me / OR' Ph V (ABT-378: R LHI dans lesquelles R', R2 sont, à condition que R' ou R2 dans I et IV, et RI dans Il, 1II et V soient différents de H. (a) H ou un ci-aminoacide naturel ou non, ou un f0-aminoacide, ou un dérivé d'ax-ami'noacidelV- comme le dopa (ou 3-hydroxvtyrosine), le merphalane qui est un dérivé de la phénylalanine ou l'oxfenicine [HO-C6H4-CH(NH2)(COOH)], ou un peptide naturel ou non. Ces différents résidus pourront être optiquement actifs ou non. Ils sont liés aux anti-protéases I à V par leur fonction carboxvlique terminale ou, le cas échéant, par une fonction carboxylique portée par la chaîne latérale d'un résidu glutamate ou aspartate. Ces aminoacides ou ces peptides pourrront être protégés ou non sur leur fonction N-terminale, ou sur toute(s) autre(s) fonction(s) présente(nt) sur l'aminoacide ou sur le peptide par des groupements protecteurs classiquement utilisés en chimie peptidique; (b) H ou un radical saccharide, ce radical dérivant du fructose, du ribose, de l'arabinose, du glucose, de la glucosamine, du galactose, de la galactosamine ou du mannose, ou un radical oligo- ou poly-saccharide, ce radical dérivant du saccharose, du cellobiose, du lactose ou du maltose, par exemple; (c) H ou un radical (1,4-dihydro1-méthyl-3- pyridinyl)carbonyl ou nicotinoyl; (d) H ou un radical -X-R', o. X représente -C(=O)-, -C(=O)NH- ou -C(=O)-(CH2)11-Y-, o Y est - CH2-, -O-, -NR4-, -N(R4)(R)'-, -C(=O)-, -C(=O)O-, -C(=O)NR4-, -OC(=O)-, ou - NR4C(=O)- n est un entier compris entre I et 24, R4', Rs sont, indépendamment l'un de l'autre, H ou R3 comme défini ci-après, R3 est (ce) un radical alkyle linéaire ou ramifié (C -C24), ou un radical alkényle linéaire ou ramifié (C2-C24) contenant une ou plusieurs doubles liaisons, ou un radical alkynyle (C3-C24), ou un radical alkyloxy (CI-C24), ou un radical alkényloxy (C2-C24), ou un radical alkynyloxv (C3-C'4), ou un radical arvle substitué ou non, ces différents radicaux pouvant contenir ou non un ou plusieurs hétéroatomes, un ou plusieurs atomes d'halogène; de préférence, R3 est un radical alkyle, linéaire ou ramifié (C1o-C18), un radical alkényle, linéaire ou ramifié (CI0-C18x), un radical alkynyle (Clo-C18), un radical alkyloxy (C4-C18), un radical phényle substitué par un alkyle (CI-C4) comprenant dans certains cas des hétéroatomes ou un halogène, ou mieux encore un radical phényle substitué par un groupement amine, un groupement hydroxy ou un groupement -CH,-O-; (tl) un radical polyoxvéthylène de forme - O(CH2CH20)m-H (ou Me) ou polyoxypropylène de forme - O(CH(CH3)CH2O)mH (ou Me) avec 1 2773994 toutic(s) autrc(s) 'lonction(s) présentc(nt) sur l'aminoacidc ou sur le peptide par des roupcmencnts protectcurs classîquemcnt utilisés cri chimie pcptidique: (u) Un radical issu d'une phosphatlldlélhanlolamine, comme la dl-oleoyl-. la di-palmitoyl-, la dimvrisiovl- ou la dilaurvlphosphatidvléthanolamine; étant entendu que - quand R3 est un radical comme défini en (d.3), (d.â) ou (d.E), X ne peut alors représenter que -C(=O)-(CH2)n,-Y-, et Y ne peut représenter que -C(=O)- ou -CH2-; - quand R3 est un radical comme défini en (d.y), X ne peut représenter que -C(=O)-(CH2)n- Y-, et Y ne peut représenter que -O-, -NR4- avec R4 comme délfini en (d). 3 - Des préparations à usage thérapeutique anti-virale caractérisées en ce qu'elles comprennent au moins une des molécules selon la revendication 1 répondant à une des formules définies dans la revendication 2. 4 - Des préparations à usage thérapeutique anti-virale selon la revendication 3 caractérisées en ce qu'elles comprennent, en outre des molécules définies dans la revendication 2, une ou plusieurs molécules inhibant la réplication virale, par exemple dans le cas des VIH, des molécules agissant sur la transcriptase inverse du VIH ou sur d'autres cibles virales ou cellulaires conduisant à une diminution de la prolifération du virus. - Des préparations à usage thérapeutique anti-virale selon les revendications 3 et 4 caractérisées en ce qu'elles peuvent être sous forme de solutions, de dispersions dans l'eau ou tout autre solvant approprié, de gélules, de comprimés, de cachets, de suppositoires, de capsules ou de pilules. 6 - Des préparations à usage thérapeutique anti-virale selon les revendications 3, 4 et 5 caractérisées en ce que les molécules selon les revendications 1 et 2 sont utilisées en association avec un système transporteur ou vecteur de médicaments comme des émulsions, des liposomes, des microsphères, des nanoparticules, ou encore des polymères naturels ou synthétiques.