FR 2777781 A1 19991029 FR 9805153 A 19980424 ASSOCIATIONS RILUZOLE ET L-DOPA POUR LE TRAITEMENT DE LA MALADIE DE PARKINSON La présente invention concerne une association de la L-DOPA et du riluzole ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable de ce composé et l'utilisation de cette association pour le traitement de la maladie de Parkinson. La maladie de Parkinson est liée à une destruction du locus niger (substance noire) qui a pour conséquence une dégénérescence des neurones dopaminergiques de la voie nigrostriée et donc une diminution massive des taux de la dopamine au niveau du striatum. Pour compenser la déplétion en dopamine qui est consécutive à la dégénérescence des neurones dopaminergiques de la voie nigrostriée chez les patients parkinsoniens, la L-DOPA (3-(3,4-dihydroxyphényl)-L-alanine) ou lévodopa qui est convertie en dopamine par la dopa décarboxylase est utilisée comme traitement symptomatique de la maladie de Parkinson. Après administration orale, la L-DOPA, est massivement décarboxylée au niveau périphérique en dopamine qui ne traverse pas la barrière hématoencéphalique; c'est pourquoi, elle est généralement administrée en association avec un inhibiteur de décarboxylase tel que le bensérazide ou la carbidopa. Ces inhibiteurs de la décarboxylase permettent en effet de réduire par environ 5 la dose de la L-DOPA (Rondot P. et colt, Pharmacologie Clinique, bases de la thérapeutique, publié par J.-P. Giroud, G. Mathé et G. Meyniel, 2ème édition, Expansion Scientifique Française, 1988, page 1127). Chez les patients atteints de la maladie de Parkinson, la LDOPA réduit la sévérité des symptômes tels que la bradykinésie (pauvreté des mouvements), la rigidité musculaire et les tremblements. Cependant le traitement chronique avec la L-DOPA conduit, chez 30 o à 80% des patients parkinsoniens, à des effets secondaires et, en particulier, à des dyskinésies (J.G. Nutt, Neurology, 40, 340-345, 1990). Ces dyskinésies sont également reproduites par un traitement chronique avec la Lr DOPA chez les marmousets rendus parkinsoniens suite à une injection de la MPTP (1 méthyl-4-phényl-1,2,3,6-tétrahydropyridine), une tonne qui détruit les neurones dopaminergiques de la voie nigrostriée (R.KB. Pearce et colL, Movement Disorders, vol 10, N06, 731-740, 1995; A. Ekesbo et coll., Neuroreport, 8, 2567-2570, 1997). Le riluzole (2-amino-6-trifluorométhoxybenzothiazole) est commercialisé pour le traitement de la sclérose latérale amyotrophique. I1 est également connu pour son effet neuroprotecteur dans le traitement de la maladie de Parkinson (W094/15601). Il a maintenant été trouvé que l'association de riluzole ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables et de L-DOPA améliore l'activité locomotrice des marmousets parkinsoniens et, de plus, prévient les dyskinésies induites par la L DOPA. L'activité de l'association riluzole et L-DOPA est déterminée selon le protocole suivant: 6 marmousets adultes (Callithrîx jacchus, Harlan UK) âgés de 25 mois et pesant entre 300 et 350 g sont hébergés dans des cages en acier inoxydable (50 cm de largeur x 20 cm de profondeur x 23 cm de hauteur) avec des portes grillagées, ces cages étant connectées à des plus petites cages (28 x 20 x 23 cm) dans lesquelles les marmousets peuvent dormir. Les animaux sont hébergés dans un environnement contrôlé: température de 24 + 2"C, humidité de 55%, avec un cycle jour-nuit de 12 heures. Les marmousets ont libre accès à l'eau et ont à disposition chaque jour 35 g de nourriture riche en carbohydrates, protéines et vitamines mélangée avec de l'eau, du lait et du sucre et également des fruits frais. Tous les animaux reçoivent 3 injections de 2 mg/kg de MPTP par voie sous-cutanée, aux jours 1, 7 et 32. Au jour 32, les animaux sont partagés en 2 groupes. Le groupe 1 (groupe contrôle) reçoit 2 administrations orales de saccharose 10% et le groupe 2 (groupe traité) reçoit 2 administrations orales de riluzole (10 mg/kg) suspendu dans la méthylcellulose 0,5 %, chaque jour jusqu'au jour 104. Au jour 47, les deux groupes d'animaux reçoivent une administration orale de GDOPA (ModoparR 125 dispersible Roche (LDOPA (25 mg) + bensérazide (6,25 mg)). Au jour 48, ils reçoivent 2 administrations orales et à partir du jour 49 jusqu'au jour 104, ils reçoivent chaque jour 3 administrations orales de L-DOPA. ACTIVITE LOCOMOTRICE L'activité locomotrice est déterminée en plaçant les animaux dans des cages de test (50 cm x 83cm x 77 cm) qui sont équipées de 3 perchoirs sur lesquels les animaux peuvent sauter ainsi que d'une porte en plexiglass en face de laquelle est placée une caméra. Cette caméra est reliée à un système d'analyseur d'image (Vigie Primates, View PointR) qui est capable de calculer la quantité des mouvements de 8 marmousets, simultanément et indépendamment pendant la durée du test. Le principe de ce système est de quantifier les mouvements des animaux dans la cage dans une fenêtre de temps déterminée (5s). L'image est digitalisée avec une définition 800 x 600 avec 256 niveaux de gris et les changements en pixels d'une image à l'autre sont comptés. Ceci permet de classer l'activité locomotrice en mouvements petits, moyens ou grands. Chaque classe de mouvements est analysée toutes les 10 minutes pendant une période d'une heure. L'activité locomotrice des animaux est mesurée pendant la phase d'exploration c'est-à-dire immédiatement après qu'ils soient placés dans la cage de test. SCORE DYSKINESIQUE Le score dyskinésique est déterminé selon plusieurs paramètres et chacun avec un degré d'intensité différent: PARAMETRES SCORE DYSKINESIQUE 0 1 2 3 4 test du perchoir normal léger modéré marqué sévère test d'escalade normal léger modéré marqué sévère pattes (antérieures. mouvement mouvement mouvement grande postérieures) amplitude faible amplitude amplitude normale posture (dos) normale courbure courbure marquée modérée saut normal incoordonné motilité normale hyperactive chorée absente présente dystonie absente présente regard normal répétitif stéréotypies ~ absentes présentes mouvements absents présents orolinguatix vocalisation normale pour observer pour communiquer absente Ce score est mesuré aux jours 57, 60, 67 et 104. L'évaluation est faite 30 mn ou 2 h après la première injection journalière de la b DOPA (4 h après la solution de riluzole ou de saccharose). Les résultats sont reportés dans les tableaux 1 à 5 et les figures 1, 2A, 2B et 3: Le tableau 1 et la figure 1 montrent que l'administration aiguë de la L-DOPA à la dose de 25 mg/kg, 15 jours après la 3ème injection de MPIvP, augmente l'activité locomotrice en diminuant les petits mouvements et en augmentant les grands mouvements. Ces résultats démontrent donc que l'administration aiguë de la L-DOPA améliore l'activité locomotrice. Les tableaux 2, 3 et 4 et les figures 2A et 2B montrent que la L-DOPA, après un traitement répété de 10 jours et de 20 jours, n'a pas ou a peu d'effet bénéfique sur l'activité locomotrice des marmousets parkinsoniens. Les tableaux 2, 3 et 4 et les figures 2A et 2B montrent aussi que le riluzole à la dose de 10 mg/kg, par voie orale, 2 fois par jour pendant 72 jours est capable d'améliorer l'activité locomotrice et ceci est observé aussi bien après 10 jours qu'après 20 jours de traitement avec la L-DOPA. Le tableau 5 et la figure 3 montrent que les administrations répétées de la L-DOPA (25 mg/kg, par voie orale, 3 fois par jour) produisent des dyskinésies observées aux jours 57, 60, 67 et 104, avec un effet maximal au jour 104. Le tableau 5 et la figure 3 montrent aussi que le riluzole (à la dose de 10 mg/kg, par voie orale, 2 fois par jour) réduit les dyskinésies induites par la L-DOPA et ceci est observé du jour 57 au jour 104. TABLEAU l: Effet de la L-DOPA sur l'activité locomotrice des marmousets parkinsoniens Groupe 1 (saccharose) Marmouse 1 2 3 1 2 3 1 2 3 n . Intervalle de Classe des avant MPTP avant la 1ère 30 mn après la 1ère aministration de la administration de la mesures L-DOPA L-DOPA 1 - 10 290 15 10 90 175 50 5 305 20 11 - 20 25 0 40 135 35 115 25 35 10 Mouvements 21 - 30 215 20 5 85 95 485 5 20 0 petits 31 - 40 40 0 0 45 0 455 15 60 55 41 - 50 60 35 0 45 5 560 45 15 10 51 - 60 120 5 5 115 50 545 30 35 35 Moyenne # 49 # 19 171 # 46 40 # 16 E.S.M.. * + 1 - 10 140 185 60 255 285 375 235 270 250 11 - 20 165 75 60 260 270 475 190 290 240 Mouvements 21 - 30 200 245 165 275 175 75 225 205 110 moyens 31 - 40 270 115 15 310 130 130 355 205 255 41 - 50 270 265 125 280 95 40 260 165 165 51 - 60 280 150 155 255 110 55 240 200 215 Moyennee # 163 # 19 214 # 28 226 # 13 E.S.M.. * 1 - 10 175 405 535 260 145 180 365 30 335 11 - 20 410 525 500 205 295 10 385 275 350 Mouvements 21 - 30 185 335 430 240 330 40 370 375 490 grands 31 - 40 290 485 585 245 470 15 230 335 290 41 - 50 270 300 475 275 500 0 295 420 425 51 - 60 200 445 440 230 440 0 330 365 350 Moyenne # 388 # 30 216 # 38 334 # 23 E.S.M.. ** + Différence significative versus la valeur avant MPTP : * P#0,01 ** P#0,001 (test Student); différence significative versus la valeur avant la L-DOPA: + P Student) TABLEAU 2 : Effet du riluzole sur l'activité locomotrice chez les marmousets dyskinésiques Avant MPTP Temps passé en déplacements Intervalle de Classe temps de des mesure (mn) Groupe 1 Groupe 2 mouvements Marmouset n . 1 2 3 4 5 6 1 - 10 290 15 10 35 10 5 11 - 20 25 0 40 25 0 0 Mouvements 21 - 30 215 20 5 70 25 40 petits 31 - 40 40 0 0 45 0 5 41 - 50 60 35 0 105 0 10 51 - 60 120 5 5 25 55 5 Moyenne # 37 # 10 E.S.M. 1 - 10 140 185 60 50 60 35 11 -20 165 75 60 45 85 35 Mouvements 21 - 30 200 245 165 105 95 150 moyens 31 - 40 270 115 15 80 60 80 41 - 50 270 265 125 160 60 145 51 - 60 280 150 155 245 215 95 Moyenne # 132 # 13 E.S.M. 1 - 10 175 405 535 520 535 565 11 - 20 410 525 500 530 515 565 Mouvements 21 - 30 185 335 430 425 480 410 grands 31 - 40 290 485 585 475 540 515 41 - 50 270 300 475 335 540 445 51 - 60 200 445 440 330 330 500 Moyenne # 432 # 19 E.S.M. TABLEAU 3 : Effet du riluzole sur l'activité locomotrice chez les marmousets dyskinésiques 10jours après la L-DOPA Temps passé en déplacements (évalué 30 mn aprés la 1ère administration journalière de la Classe temps L-DOPA) des des emsures Groupe 1 Groupe 2 mouvements (mn) (saccharose) riluzole (2 x 10 mg/kg) Marmouset n . 1 2 3 4 5 6 1 - 10 5 510 375 5 5 5 11 - 20 0 500 295 0 5 45 Mouvements 21 - 30 0 560 365 0 125 50 petits 31 - 40 10 485 370 0 145 25 41 - 50 10 465 230 30 195 40 51 - 60 205 225 240 35 210 100 Moyenne # 269 # 47*** 57 # 16+++ E.S.M.. 1 - 10 115 55 190 40 105 80 11 - 20 70 70 295 35 140 185 Mouvements 21 - 30 100 40 235 60 120 115 moyens 31 - 40 155 35 175 140 215 190 41 - 50 155 115 370 155 205 175 51 - 60 165 305 235 135 125 190 Moyenné # 160 # 23 134 # 13 E.S.M.. 1 - 10 485 40 40 560 495 520 11 - 20 530 30 10 565 455 370 Mouvements 21 - 30 500 0 0 540 355 435 grands 31 - 40 435 80 55 460 240 385 41 - 50 435 20 - 415 200 385 51 - 60 230 70 125 430 265 310 Moyenne # 171 # 48*** 410 # 25+++ E.S.M. Différence significative versus valeur avant MPTP : *** P # 0,0001 (test de Student) Différence significative versus valeur de contrôle: +++ P # 0,0001 (test de Student). TABLEAU 4: Effet du riluzole sur l'activité locomotrice chez les marmousets dyskinesiques 20 jours après la L-DOPA Temps passé en déplacement (évalué 30 mn après la 1ère administration journalière Intervalle de Classe temps de la L-DOPA) des des mesures Groupe 1 Groupe 2 mouvements (mn) (saccharose) riluzole (2 x 10 mg/kg) Marmouset n . 1 2 3 4 5 6 1 - 10 105 5 45 5 130 35 11 - 20 40 0 45 5 395 5 Mouvements 21 - 30 120 10 105 0 170 20 petits 31 - 40 125 0 65 5 275 15 41 - 50 130 15 265 0 135 15 51 - 60 185 0 230 0 345 15 Moyenne # 83 # 19 78 # 30 E.S.M.. 1 - 10 360 0 475 155 140 80 11 - 20 260 20 475 255 160 105 Mouvements 21 - 30 225 35 400 175 250 100 moyens 31 - 40 325 55 300 180 175 80 41 - 50 265 95 280 95 220 125 51 - 60 315 30 315 90 180 105 Moyenne # 235 # 37** 148 # 13+ E.S.M.. 1 - 10 140 600 85 445 335 490 11 - 20 300 580 80 340 45 490 Mouvements 21 - 30 255 555 95 425 180 480 grands 31 - 40 150 545 235 415 150 505 41 - 50 205 490 55 505 245 460 51 - 60 100 570 55 510 75 480 Moyenne # 283 # 50** 365 # 37 E.S.M.. Différence significative versus valeur avant MPPP: ** P Différence significative versus valeur de contrôle : + P # 0,01 (test de Student). TABLEAU 5 : Effet du riluzole sur les marmousets dyskinésiques Score dyskinésique total (évalué 30 mn après la 1ère adminisution journalièìe de la L-DOPA) Jour après la Groupe 1: contrôles Groupe 2: riluzole 1- injection de (saccharose) (2 x 10 mg/kg p. o.) MPTP Valeurs individuelles Moyenne Valeurs individuelles Moyenne Marmouset n . 1 2 3 # E.S.M.. 456 # E.S.M.. 57 4 11 5 6,7 # 2,1 3 3 1 2,3 f 0,7 60 4 11 12 9,0 # 2,5 3 3 1 2,3 # 0,7+ 67 4 14 12 10 # 3,0 3 3 1 2,3 # 0,7+ 104 4 17 12 11 # 3,8 1 3 3 2,3 # 0,7+ Score dyskinésique total (évalué 2h après la 1ère administration journalière de la L-DOPA) Jour après la Groupe 1: contrôles Groupe 2: riluzole 1- injection de (saccharose) (2 x 10 mglkg p. o.) MPTP Valeurs individuelles | Moyenne Valeurs individuelles Moyenne Marmouset n . 1 2 3 # E.S.M.. 4 5 6 # E.S.M.. 57 3 10 5 6,0 # 2,1 3 3 0 2,.0 # 1,0 60 4 9 12 8,3 i 2,3 2 3 1 2,0 # 0,6+ 67 4 13 13 10 # 3,0 3 3 1 2,3 # 0,7+ 104 5 17 12 11 # 3,0 1 3 3 Différence significative intergroupe versus valeur de contrôle égale : + P# 0,05 (test de Student). En conclusion, ces résultats démontrent que, d'une part, la L-DOPA après une administration aiguë a amélioré l'activité locomotrice en diminuant les petits déplacements, et en augmentant les grands déplacements des marmousets parkinsoniens. Au contraire, la LDOPA, après un traitement répété, a non seulement produit peu ou pas d'effet sur l'activité locomotrice, mais a en plus produit des effets secondaires, les dyskinésies chez les marmousets parkinsoniens. D'autre part, ces résultats montrent que chez les marmousets parkinsoniens, le riluzole améliore l'activité locomotrice et prévient le développement des dyskinésies induites par le traitement chronique de la DOPA. L'association riluzole et GDOPA a donc un double effet bénéfique chez les marmousets parkinsoniens, en améliorant l'activité locomotrice et en diminuant les effets secondaires, les dyskinésies, induits par la DOPA. Le riluzole ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables et la L-DOPA peuvent être administrés sous forme d'une combinaison et éventuellement associés à tout autre produit pharmaceutiquement compatible, pouvant être inerte ou physiologiquement actif. Le riluzole ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables et la GDOPA peuvent également être administrés séparément ou d'une manière étalée dans le temps de façon à obtenir le maximum d'efficacité. Ainsi au sens de la présente invention, les associations ne sont pas uniquement limitées à celles qui sont obtenues par mélange physique des constituants mais aussi à celles qui permettent une administration séparée qui peut être simultanée ou étalée dans le temps. On peut également ajouter à cette association un inhibiteur de la décarboxylase tel que le bensérazide ou la carbidopa. Dans les associations selon l'invention, on utilise généralement 10 à 400 parties en poids de riluzole pour 100 à 6000 parties en poids de L-DOPA et, de préférence, 200 à 4000 parties en poids de L-DOPA ou l'équivalent de cette quantité lorsque la GDOPA est en mélange avec un inhibiteur de décarboxylase. Généralement, la quantité de L-DOPA lorsque celle-ci est en mélange avec un inhibiteur de GDOPA est de 50 à 1500 parties en poids. Lorsque l'inhibiteur de décarboxylase est le bensérazide, on en utilise généralemnt une quantité en poids 2 à 6 fois moindre que la quantité de L-DOPA et plus particulièrement 4 fois moindre que la quantité de L-DOPA. Lorsque l'inhibiteur de décarboxylase est la carbidopa, on en utilise généralement une quantité en poids 2 à 15 fois moindre que la quantité de L-DOPA et plus particulièrement 4 à 10 fois moindre que la quantité de L-DOPA. L'association peut être employée par voie orale, parentérale ou rectale. Comme sels pharmaceutiquement acceptables du riluzole peuvent être notamment cités les sels d'addition avec les acides minéraux tels que chlorhydrate, sulfate, nitrate, phosphate ou organiques tels que acétate, propionate, succinate, oxalate, benzoate, funarate, maléate, méthanesulfonate, iséthionate, théophilline-acétate, salicylate, phénolphtalinate, méthylène-bis-ss-oxynaphtoate ou des dérivés de substitution de ces dérivés. Comme compositions solides pour administration orale, peuvent être utilisés des comprimés, des pilules, des poudres (capsules de gélatine, cachets) ou des granulés. Dans ces compositions, les principes actifs sont mélangés à un ou plusieurs diluants inertes, tels que amidon, cellulose, saccharose, lactose ou silice, sous courant d'argot Ces compositions peuvent également comprendre des substances autres que les diluants, par exemple un ou plusieurs lubrifiants tels que le stéarate de magnésium ou le talc, un colorant, un enrobage (dragées) ou un vernis. Comme compositions liquides pour administration orale, on peut utiliser des solutions, des suspensions, des émulsions, des sirops et des élixirs pharmaceutiquement acceptables contenant des diluants inertes tels que liteau, méthanol, le glycérol, les huiles végétales ou l'huile de paraffine. Ces compositions peuvent comprendre des substances autres que les diluants, par exemple des produits mouillants, édulcorants, épaississants, aromatisants ou stabilisants. Les compositions stériles pour administration parentérale, peuvent être de préférence des solutions aqueuses ou non aqueuses, des suspensions ou des émulsions. Comme solvant ou véhicule, on peut employer l'eau, le propylèneglycol, un polyéthylèneglycol, des huiles végétales, en particulier l'huile d'olive, des esters organiques injectables, par exemple l'oléate d'éthyle ou d'autres solvants organiques convenables. Ces compositions peuvent également contenir des adjuvants, en particulier des agents mouillants, isotonisants, émulsifiants, dispersants et stabilisants. La stérilisation peut se faire de plusieurs façons, par exemple par filtration aseptisante, en incorporant à la composition des agents stérilisants, par irradiation ou par chauffa Lorsque l'inhibiteur de décarboxylase est le bensérazide, il est préférable d'administrer par jour, par voie orale, pour un adulte, 10 à 400 mg de riluzole, 50 à 1500 mg de L-DOPA et une quantité de bensérazide en poids 2 à 6 fois moindre et particulièrement 4 fois moindre que la quantité en poids de L-DOPA. Lorsque l'inhibfteur de décarboxylase est la carbidopa, il est préférable d'administrer par jour, par voie orale, pour un adulte, 10 et 400 mg de riluzole, 50 à 1500 mg de DOPA et une quantité de carbidopa en poids 2 à 15 fois moindre et particulièrement 4 à 10 fois moindre que la quantité en poids de DOPA. D'une façon générale, le médecin déterminera la posologie appropriée en fonction de l'âge, du poids et de tous les autres facteurs propres au sujet à traiter. REVENDICATIONS 1 - Associations de la lévodopa et du riluzole ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable de ce dernier. 2 - Associations selon la revendication 1 comprenant également un inhibiteur de décarboxylase. 3 - Associations selon la revendication 3 dans lesquelles l'inhibiteur de décarboxylase est le bensérazide ou la carbidopa. 4 - Associations selon la revendication 1 dans lesquelles on utilise 10 à 400 parties en poids de riluzole pour 100 à 6000 parties en poids de lévodopa. 5 - Associations selon la revendication 1 dans lesquelles on utilise 10 à 400 parties en poids de riluzole pour 200 à 4000 parties en poids de lévodopa. 6 - Associations selon la revendication 2 dans lesquelles on utilise 10 à 400 parties en poids de riluzole, 50 à 1500 parties en poids de lévodopa en mélange avec un inhibiteur de décarboxylase. 7 - Associations selon la revendication 6 dans lesquelles on utilise le bensérazide comme inhibiteur de décarboxylase. 8 - Associations selon la revendication 6 dans lesquelles on utilise la carbidopa comme inhibiteur de décarboxylase. 9 - Associations selon l'une des revendications 1 à 8 comme préparation combinée pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps. 10 - Associations selon l'une des revendications 1 à 9 pour le traitement de la maladie de Parkinson.