FR 2762784 A1 19981106 FR 9804385 A 19980408 AGENT DE BLANCHIMENT DE LA PEAU La présente invention concerne un type entièrement nouveau d'agent de blanchiment de la peau, qui supprime la formation de polymères de mélamine par piégeage de monomères de mélamine, et en particulier un agent de blanchiment de la peau, caractérisé en ce qu'il comprend en tant que matière active un groupe de substances qui présentent la propriété de former des complexes chimiques avec les monomères de mélamines. Différentes recherches ont déjà été effectuées, portant sur des agents de blanchiment de la peau qui puissent éliminer les taches pigmentées se trouvant sur la peau humaine telles que les mélasmes et le lentigo, tout en renforçant la possibilité pour la peau de conserver en totalité sa beauté et sa blancheur. Il est dit que la couleur de la peau humaine saine dépend de plusieurs facteurs tels que la mélanine, le carotène, la circulation sanguine, l'épaisseur et la transparence de la peau. Parmi ces facteurs, on sait aussi que le taux d'eumélanine et de phéomélanine représente une cause importante de pigmentation. De même, des recherches portant sur des produits cosmétiques pour le blanchiment de la peau sont effectuées depuis longtemps. Ces produits cosmétiques ont pour but de supprimer la formation de mélanine, qui est une cause de mélasmes et de lentigo, et d'améliorer l'aptitude de toute la peau à conserver sa beauté et sa blancheur. Récemment, en liaison avec le procédé de formation d'un polymère de mélanine chez l'animal et l'homme, et outre la voie traditionnellement connue dans laquelle il y a participation de thyrosinase, la présence et le rôle d'autres voies critiques, après le DOPAchrome et ses enzymes régulatrices, ont été élucidés: ces voies sont celles qui utilisent deux types distincts de monomères de mélanine, à savoir le DHICA (acide 5,6- dihydroxyindole-2-carboxylique) et le DHI (dihydroxy-indole), les enzymes qui assurent la régulation de ces deux monomères de mélanine étant celles 3 0 qui comprennent la DOPAchrome-tautomérase et la DHICA-oxydase. En tant que moyens pour supprimer la formation de mélanine, on utilise différents composés inhibiteurs de la tyrosinase, notamment l'acide kojique. Cependant, ces composés présentent l'inconvénient de présenter une efficacité insuffisante, ou d'avoir une action trop lente. Ainsi, on attend beaucoup de la mise au point d'agents de blanchiment de la peau qui puissent assurer en continu une efficacité élevée grâce à de nouveaux mécanismes d'action. Compte tenu de ce qui précède, la présente invention vise à mettre à disposition un type entièrement nouveau d'agent de blanchiment de la peau, dont le mécanisme d'action est entièrement différent de ceux qui sont actuellement connus. On a constaté que l'un des produits chimiques, à savoir la boronophénylalanine (abrégée ci-après en "BPA"), telle qu'étudiée dans le cadre d'un traitement par capture de neutrons, s'est révélé représenter un traitement efficace du mélanome malin, en s'accumulant d'une manière spécifique dans les cellules de mélanome. Compte tenu de ce phénomène, des recherches approfondies ont conduit à la découverte d'un mécanisme d'action entièrement nouveau, dans lequel une série de composés contenant du bore, contenant du BPA et des 1.5 substances naturelles provenant d'organelles, notamment les CV (vésicules enrobées), forment des complexes chimiques dans les cellules, avec des monomères de mélanine tels que le DHICA, le DHI et le DOPA, et suppriment la formation de polymères de mélanine dans les cellules pigmentaires pour réduire la pigmentation. La présente invention concerne plus précisément un agent de blanchiment de la peau, caractérisé en ce qu'il comprend en tant que matière active un groupe de substances qui, à partir de la voie de synthèse des polymères de mélanine, forment des complexes chimiques avec les monomères de mélanine et les piègent. En outre, la présente invention met à disposition un agent de blanchiment de la peau du type ci-dessus, dans lequel le groupe de substances comprend des composés et/ou substances naturelles borés provenant d'animaux, de végétaux et de micro-organismes. La présente invention met aussi à disposition un agent de blanchiment de la peau du type ci-dessus, dans lequel le composé boré est constitué d'un ou plusieurs membres de l'ensemble comprenant, mais sans limitation, la borono-phénylalanine, la boroglycine, la borodiméthylglycine, le borotartrate de potassium, l'acide borique, le dihydroxyphénylborane, la borobétaine et le borate tétrasodique. Enfin, la présente invention met à disposition un agent de blanchiment de la peau du type ci-dessus, dans lequel les substances naturelles sont des extraits de vésicules enrobées (CV), de mélanosomes, de lysosomes et/ou d'autres organelles provenant d'animaux, de végétaux et de microorganismes. L'invention sera mieux comprise en regard de la description ci-après. Le mécanisme de formation de complexes chimiques des matières actives et monomères de mélanine décrits ci-dessus, clarifié grâce à la présente invention, va être illustré ci-dessous à l'aide de BPA en tant qu'exemple. H H DRI DOICA k- BPA BPA MC=C eCCC II H H Complexe DIH-BPA Complexe DHICA-BPA 2 0 On peut citer à titre d'exemples de composés borés qui sont avantageusement incorporés en tant que matières actives selon la présente invention la boronophénylalanine, la boroglycine, la borodiméthylglycine, le borotartrate de potassium, l'acide borique, le dihydroxyphénylborane, la borobétaine et le borate tétrasodique, et plus précisément un seul ou 2 5 plusieurs de ces derniers. On peut citer à titre d'exemples de substances naturelles provenant d'animaux, de végétaux et de micro-organismes les mélanosomes tels que les organelles, par exemple les mélanosomes, les CV, les lysosomes et leurs extraits d'organelles, que l'on prépare par le procédé décrit par Wilczck et 3 o Mishima (Melanoma Res 3:255-262, 1993). Il n'y a aucune restriction spéciale quant aux formes de l'agent de blanchiment de la peau selon la présente invention, du moment qu'elles sont acceptables en utilisation externe. L'agent de blanchiment de la peau selon l'invention peut être utilisé dans de nombreuses applications, sous des formes classiques acceptables dans les produits pharmaceutiques et cosmétiques, par exemple sous forme de cataplasme, d'emplâtre, de pâte, de crème, de pommade, de teinture, d'aérosol, d'émulsion, de lotion, de lait, d'essence, de gel, de masque, de poudre, de fond de teint, d'écran solaire et de sels de bain. En outre, lors de la préparation des agents de blanchiment de la peau selon la présente invention, l'utilisation de composés classiques de blanchiment de la peau ayant un mécanisme d'action différent de celui de la matière active selon la présente invention, en particulier l'acide ascorbique, l'arbutine et l'acide kojique, conduit à un effet double remarquable, qui d'une manière arithmétique ou synergique renforce l'effet de blanchiment de la peau de l'agent de blanchiment de la peau selon la présente invention, en le rendant très efficace sur les pigmentations rebelles. Outre ces composés de blanchiment de la peau, on peut utiliser avantageusement, pour satisfaire aux différentes utilisations finales, et dans la mesure o ils n'empêchent pas d'atteindre les objectifs de la présente invention, toute une gamme de matières actives classiques, par exemple les vasodilatateurs périphériques tels que la cépharanthine, la vitamine E, le nicotinate de vitamine E, l'acide nicotinique, le nicotinamide, le nicotinate de benzyle, la teinture de gingembre et la teinture de menthe, les réfrigérants tels que le camphre, le menthol et l'essence de menthe, les antiseptiques tels que l'hinokitiol, le chlorure de benzalkonium et l'acide undécylénique, les anti- inflammatoires tels que l'hormone cortico-surrénale, l'acide c- aminocaproïque, le chlorure de lysozyme, la glycyrrhizine et l'allantoine, et de nombreux extraits provenant d'animaux, de végétaux et de micro-organismes tels que l'extrait placentaire, l'extrait de réglisse, l'extrait de racine de lithosperme, et l'extrait fermenté par les bactéries de l'acide lactique. De plus, dans l'agent de blanchiment de la peau selon la présente invention, et outre les matières actives classiques décrites ci-dessus, on peut utiliser si nécessaire, dans la mesure o ils n'empêchent pas d'arriver aux objectifs de la présente invention, toute une gamme d'agents classiques, tels que des agents de rétention de l'humidité, des antiseptiques, des anti- oxygènes, des chélatants, des régulateurs de pH, des aromatisants, des colorants, des absorbants UV et des agents de dispersion. 3 5 La présente invention va être expliquée ci-après à l'aide de plusieurs expériences et formulations. Expérience [ Essai d'inhibition de la formation de mélanochrome à partir de DOPA-chrome (a) Procédé Pour préparer une solution de DOPAchrome 5 mM en tant que réactif, on mélange des volumes égaux d'une Solution A constituée de DOPA 10 mM et d'une Solution B constituée d'une solution aqueuse de métaperiodate de sodium 20 mM, pour obtenir une solution de couleur vermillon. La solution est préparée immédiatement avant utilisation. Mode opératoire On mélange d'abord des aliquotes de 1 ml d'un tampon phosphate 1000 mM avec de la boronophénylalanine, du borotartrate de potassium, du dihydroxyphénylborane, de la boroglycine, du borate tétrasodique ou de l'acide borique, pour obtenir les différentes concentrations consignées dans les Tableaux 1 à 7, puis avec de l'eau pure pour porter les volumes totaux à 1,8 ml. Les solutions obtenues sont ensuite placées dans un bain-marie à 37 C, rapidement mélangées après addition d'aliquotes de 0,2 ml de DOPAchrome 5 mM frais, puis on les laisse réagir sous agitation. Après 30 minutes de réaction au bain-marie, on mesure immédiatement à 500 nm l'absorbance des mélanges réactionnels, et on observe la couleur à l'oeil nu. (b) Résultats Les résultats sont consignés dans les Tableaux 1 à 6. Il y a formation d'un mélanochrome foncé, et la formation d'un sédiment fin et foncé est amorcée après 30 minutes dans les mélanges réactionnels ne contenant pas les matières actives selon la présente invention. Inversement, les mélanges réactionnels qui contiennent l'une quelconque des matières actives de la présente invention virent au brun, mais ne conduisent à aucune sédimentation, comme le prouve une observation macroscopique. Ces résultats indiquent que les matières actives selon l'invention suppriment en fait la formation du mélanochrome, d'une manière dépendant de la concentration. De plus, une mesure de l'absorbance à 500 nm donne des résultats analogues à ceux que l'on obtient par observation macroscopique. Enfin, après abandon jusqu'au lendemain, on observe nettement un sédiment foncé, bleuâtre, dans les mélanges réactionnels ne contenant pas les matières actives selon la présente invention, tandis que les mélanges réactionnels contenant l'une quelconque des matières actives selon la présente invention restent brun transparent et ne contiennent pas de sédimentation. (c) Explicaltion La suppression des mélanochromes est supprimée dans les mélanges réactionnels contenant l'une quelconque des matières actives selon la présente invention. On peut l'expliquer par le mécanisme dans lequel les matières actives selon la présente invention' forment des complexes l0 chimiques avec les monomères de mélanine qui ont été formés à partir du DOPAchrome, de sorte que ce piégeage des monomères de mélanine inhibe la polymérisation du DOPAchrome. Tableau 1 Inhibition, par le BPA, de la formation du mélanochrome à partir du DOPAchrome Exemple Concentration Absorbance à une longueur Observation macroscopique du BPA (mg/ml) d'onde de 500 nm Juste après la mesure Après abandon à la température ambiante jusqu'au lendemain Témoin 0 1,19 Foncé, sédimentation fine Foncé, sédimentation foncée, bleuâtre 1 0,25 0,80 Brun Brun 2 0,50 0,70 Brun Brun 3 1,00 0,58 Brun Brun 4 2,50 0,43 Brun Brun 5,00 0,33 Brun.Brun 6 7,50 0,27 Brun Brun 7 10,00 0,24 Brun Brun C. -J Tableau 2 Inhibition, par le borotartrate de potassium, de la formation du mélanochrome à partir du DOPAchrome Exemple Concentration du Absorbance à une Observation macroscopique borotartrate de longueur d'onde de 500 potassium (mg/ml) nm Juste après la mesure Après abandon à la température ambiante jusqu'au lendemain Témoin 0 1,245 Foncé, sédimentation fine Foncé, sédimentation foncée, bleuâtre 1 0,25 1,127 Brun Brun co 2 0,50 1, 119 Brun Brun 3 1,00 1,045 Brun Brun 4 2,50 0,806 Brun Brun 5,00 0,635 Brun Brun 6 7,50 0,553 Brun Brun 7 10,00 0,480 Brun Brun o co. - 4 o0 Tableau 3 Inhibition, par le dihydroxyphénylborane. de la formation du mélanochrome à partir du DOPAchrome Exemple Concentration du Absorbance à une Observation macroscopique dihydroxyphénylborane longueur d'onde de (mg/ml) 500 nm Juste après la mesure Après abandon à la température ambiante jusqu'au lendemain Témoin 0 1,305 Foncé, sédimentation fine Foncé, sédimentation foncée, bleuâtre 1 0,25 0,924 Brun Brun o 2 0,50 0,771 Brun Brun 3 1,00 0,602 Brun Brun 4 2,50 0,381 Brun Brun 5,00 0,283 Brun Brun 6 7,50 0,240 Brun Brun 7 10,00 0,172 Brun Brun oh to Tableau 4 Inhibition, par la boroglycine, de la formation du mélanochrome à partir du DOPAchrome Exemple Concentration de la Absorbance à une Observation macroscopique boroglycine (mg/ml) longueur d'onde de 500 nm Juste après la mesure Après abandon à la température ambiante jusqu'au lendemain Témoin 0 1, 144 Foncé, sédimentation fine Foncé, sédimentation foncée, bleuâtre 1 0,50 0,873 Brun Brun c 2 0, 100 0,817 Brun Brun 3 2,00 0,703 Brun Brun 4 5,00 0,380 Brun Brun 8,00 0,217 Brun Brun au Io' -J Oh Tableau 5 Inhibition, par le borate tétrasodique, de la formation du mélanochrome à partir du DOPAchrome Exemple Concentration du Absorbance à une Observation macroscopique borate tétrasodique longueur d'onde (mg/ml) de 500 nm Juste après la mesure Après abandon à la température ambiante jusqu'au lendemain Témoin 0 1,269 Foncé, sédimentation fine Foncé, sédimentation foncée, bleuâtre 1 0,25 1,098 Brun Brun 2 0, 50 0,988 Brun Brun 3 1,00 0,749 Brun Brun 4 2,50 0,523 Brun Brun 5,00 0,329 Brun Brun 6 7,50 0,227 Brun Brun 7 10,00 0,153 Brun Brun o Io' -. o0 Tableau 6 Inhibition, par l'acide borique, de la formation du mélanochrome à partir du DOPAchrome Exempl Concentration de Absorbance à une longueur Observation macroscopique e l'acide borique d'onde de 500 nm (mg/ml) Juste après la mesure Après abandon à la température ambiante jusqu'au lendemain Témoin 0 1,226 Foncé, sédimentation fine Foncé, sédimentation foncée, bleuâtre 1 0,25 0,955 Brun Brun 2 0,50 0,759 Brun Brun 3 1,00 0,602 Brun Brun 4 2,50 0,417 Brun Brun 5,00 0,279 Brun Brun 6 7,50 0,223 Brun Brun 7 10,00 0,172 Brun Brun oh oo Expérience 2 Effet de blanchiment sur des cellules de mélanome en culture (a) Mode opératoire On ensemence 1.105 cellules B16F10 dans un milieu couramment utilisé, qui après 8 heures est remplacé par différents milieux, contenant respectivement de la borophénylalanine, du borotartrate de potassium, du dihydroxyphénylborane, de la boroglycine, du borate tétrasodique et de l'acide borique, aux concentrations respectives données dans les Tableaux 7 à 12, puis on procède à une culture. Le milieu de-culture est changé 3 jours après le début de la culture, et, 6 jours plus tard, on recueille les cellules et on les soumet à une observation macroscopique. (b) Résultats Les résultats sont consignés dans les Tableaux 7 à 12. Les cellules B16F10 cultivées dans un milieu ne contenant aucune des matières actives selon la présente invention présentent un blanchiment plus marqué que celles qui ont été cultivées dans un milieu ne contenant aucune des matières actives selon la présente invention. Tableau 7 Effet de blanchiment de la peau que présente le BPA sur des cellules de mélanome en culture Concentration du BPA ([tg/ml) Observation macroscopique Témoin 0 Inchangées 1 500 Légèrement blanchies 2 1000 Blanchies Tableau 8 Effet de blanchiment de la peau que présente l'acide borotartrique sur des cellules de mélanome en culture Concentration de l'acide borotartrique (ag/ml) Observation macroscopique Témoin 0 Inchangées I 200 Légèrement blanchies 2 400 Blanchies au IoX -J Oh Tableau 9 Effet de blanchiment de la peau que présente le dihydroxyphénylborane sur des cellules de mélanome en culture Concentration du dihydroxyphénylborane (gg/ml) Observation macroscopique Témoin 0 Inchangées 1 200 Légèrement blanchies 2 500 Blanchies Tableau 10 Effet de blanchiment de la peau que présente la boroglycine sur des cellules de mélanome en culture H Concentration de la boroglycine (pg/ml) Observation macroscopique Témoin 0 Inchangées 1 200 Légèrement blanchies 2 500 Blanchies ao o ro oo Tableau I 1I Effet de blanchiment de la peau que présente le borate tétrasodique sur des cellules de mélanome en culture Concentration du borate tétrasodique (pg/ml) Observation macroscopique Témoin 0 Inchangées 1 100 Légèrement blanchies 2 200 Blanchies Tableau 12 Effet de blanchiment de la peau que présente l'acide borique sur des cellules de mélanome en culture H Concentration de l'acide borique (gg/ml) Observation macroscopique Témoin 0 Inchangées 1 200 Légèrement blanchies 2 400 Blanchies -J ado co. -J Oe Exemples de formulations On présente ci-après des exemples de formulations selon la présente invention. Dans les formulations, le terme "complément" se rapport à la quantité de l'ingrédient considéré, nécessaire pour porter la quantité totale à 100 % en poids dans les différentes formulations. Formulation 1 - Crème Ingrédients Quantités (% en poids) BPA 1,00 Hyaluronate de sodium 2,00 Polyéthylèneglycol 400 3,00 Oxyde de cétyle polyoxyéthyléné à 25 moles d'oxyde d'éthylène 5,00 Acide stéarique 5,00 Huile d'avocat 1,00 Huile d'amande 10,00 Solution de dl-pyrrolidonecarboxylate de sodium 5,00 Parahydroxybenzoate 0,70 Edétate disodique 0,01 Eau purifiée Complément 2 o Formulation 2 Crème Ingrédients Quantités (% en poids) Mélanosome 2,0 Acide borique 0,5 Monostéarate de polyéthylèneglycol à 40 moles d'oxyde d'éthylène 2,0 Monostéarate de glycérol auto-émulsifiant 5,0 Acide stéarique 5,0 3 o Alcool béhénylique 1,0 Paraffine liquide 10,0 Trioctanoate de glycéryle 10,0 Glycérine 5,0 Ethylparaben 0,1 3 5 Eau purifiée Complément Formulation 3 - Lotion-lait Ingrédients Quantités (% en poids) Dihydroxyphénylborane 4,00 2-octyoldodécanol 3,00 Oxyde de cétyle polyoxyéthyléné à moles d'oxyde d'éthylène 0,50 Oxyde d'oléyle polyoxyéthyléné à moles d'oxyde d'éthylène 1,00 Acide stéarique 0,50 Beurre de karité 0,50 Huile d'avocat 4, 00 4-tert-butyl-4'-méthoxydibenzoylméthane 5,00 Parahydroxybenzoate 0,20 Extrait de pépin de coing 5,00 Gomme xanthane 0,14 Edétate disodique 0,01 Eau purifiée Complément Formulation 4 - Lait Ingrédients Quantités (% en poids) 2 0 Borate tétrasodique 0,50 Salicylate de glycol 0,10 Alcool butylique 3,50 Arbutine 2, 00 Monoéthanolamine de l'acide gras dérivé de l'huile de coprah 2,00 Acide stéarique 0,50 Acide myristique 0,50 Huile d'avocat 4,00 Monooxycinnamate d'octyle 2,00 3 o Vitamine E naturelle 0,04 Parahydroxybenzoate 0, 20 Hyaluronate de sodium 5,00 Extrait de racine de scutellaire 0,14 Edétate disodique 0,01 Eau purifiée Complément Formulation 5 Lotion pour le visage Ingrédients Quantités (% en poids) BPA 1,00 Boroglycine 0,25 Ethanol 15,00 Ethylparaben 0,10 Acide citrique 0,10 Citrate de sodium 0,30 1,3- butylèneglycol 4,00 Edétate disodique 0,01 Eau purifiée Complément Formulation 6 Emplâtre-crème pour le visage - Ingré. ients Quantités (% en poids) Borodiméthylglycine 3,00 Polyéthylèneglycol 1500 5,00 Diéthanolamide de l'acide stéarique 5,00 Acide stéarique 5,00 2 o Acide myristique 5,00 Huile de coprah 15,00 Vitamine E naturelle 0,04 Parahydroxybenzoate 0,20 Solution de dl-pyrrolidonecarboxylate de sodium 5,00 Edétate disodique 0,01 Eau purifiée Complément Formulation 7 Pommade Ingrédients Quantités (% en poids) Borobétaine 1,00 Salicylate de phényle 0,40 Hydroxyméthoxybenzophénonesulfonate de sodium 1,00 Gallate d'isoamyloctyle 2,00 Monoéthanolamide de l'acide gras dérivé de l'huile de coprah 5,00 Vaseline 10,00 Acide stéarique 5,00 Acide oléique 1,00 Huile d'olive 10,00 Parahydroxybenzoate 0,30 Carragénane 5,00 Edétate disodique 0,01 Eau purifiée Complément Formulation 8 Cataplasme Ingrdiens Quantités (% en poids) Borotartrate de potassium 0,50 Boroglycine 0,10 Allantoine 0,10 Diéthanolamide de l'acide stéarique 3,00 Poly(acide acrylique) 27,00 Extrait éthanolique de glycyrrhiza 0,10 Extrait aqueux de scutellaire 0,05 Edétate disodique 0,05 Méthoxycinnamate 4,00 3 0 Poly(acrylate de sodium) 7,00 Chlorure d'aluminium 0,30 Glycérine concentrée 20,00 Oxyde de titane 4,00 Eau purifiée Complément Formulation 9 Essence Ingrédients Quantités (% en poids) Lysosome 1,00 Acide urocanique 0, 50 Isopropanol 0,50 Alcool benzylique 0,05 Solution aqueuse de kéfir 1,50 Monoéthanolamide de l'acide gras dérivé de l'huile de coprah 2,00 Acide stéarique 0,50 Acide linolénique 0,50 Huile d'avocat 2,00 Huile de tortue 3,00 Vitamine E naturelle 0,04 Parahydroxybenzoate 1,00 Solution aqueuse à 1 % d'un polymère carboxyvinylique 5,00 Extrait de placenta 0,14 Edétate disodique 0,01 Eau purifiée Complément Il s'est confirmé que les agents de blanchiment de la peau comportant ces formulations présentent un rendement et une efficacité analogues à ceux que l'on trouve dans les Expériences décrites ci-dessus. La présente invention a mis à disposition un nouvel agent de blanchiment de la peau, comprenant en tant que matière active un groupe de substances qui forment des complexes chimiques avec les monomères de mélanine. Ces agents de blanchiment de la peau présentent une grande innocuité pour l'homme et un excellent effet de blanchiment de la peau. Bien entendu, l'invention n'est pas limitée aux exemples de réalisation ci-dessus décrits et représentés, à partir desquels on pourra prévoir d'autres modes et d'autres formes de réalisation, sans pour autant sortir du cadre de l'invention. Revendications 1. Agent de blanchiment de la peau, caractérisé en ce qu'il comprend en tant que matière active un groupe de substances présentant la propriété de former des complexes chimiques avec les monomères de mélanine. 2. Agent de blanchiment de la peau selon la revendication 1, caractérisé en ce que le groupe de substances comprend des composés borés et/ou des substances naturelles provenant d'animaux, de végétaux ou de microorganismes. 3. Agent de blanchiment de la peau selon la revendication 2, caractérisé en ce que le composé boré est constitué d'un ou plusieurs composés choisis parmi l'ensemble comprenant la borophénylalanine, la boroglycine, la borodiméthylglycine, le borotartrate de potassium, l'acide borique, le dihydroxyphénylborane, la borobétaine et le borate tétrasodique. 4. Agent de blanchiment de la peau selon la revendication 2, caractérisé en ce que les substances naturelles sont des extraits de vésicules enrobées, des mélanosomes, des lysosomes et/ou des organelles provenant d'animaux, de végétaux et de micro-organismes.