FR 2757164 A1 19980619 FR 9615415 A 19961216 La présente invention concerne de nouveaux dérivés de N-benzylpipérazine, leur procédé de préparation ainsi que les compositions pharmaceutiques qui les contiennent. L'état antérieur de la technique est illustré notamment par: - les brevets français 1 302 958 et 805 M qui concernent respectivement la préparation de N- trialkoxy benzyl pipérazines et l'utilisation comme médicament à action vaso-dilatatrice de la 2,3,4-triméthoxybenzyl pipérazine, - les articles d'Hiroshi Ohtaka et coll., Chem. Pharm. Bull., 35, 2774-3275 (1987) et Chem. Pharm. Bull., 37, 11, 2124-3122 (1989) qui mentionnent des dérivés de trimétazidine ayant une activité vasodilatatrice, et la synthèse de l[bis(4-fluorophényl)méthyl]-4-(2-hydroxy 1M 3,4diméthoxybenzyl)pipérazine, - l'article de Tsunéo Kawashima et coll., J. Pharmacobio-Dyn, 14, 449-459 (1991) relatif à l'isolation et l'identification de nouveaux métabolites du KB-2796 dont entre autres la 1- [bis(4-fluorophényl)méthyl]-4-(2-hydroxy 3,4-diméthoxybenzyl)pipérazine, le brevet européen EP 573 579 qui décrit des dérivés de Nbenzylpipérazines ayant une activité antihypoxique et antiischémique, enfin, le brevet européen EP 617 027 qui décrit des dérivés de N-benzylpipérazines utiles pour le traitement des maladies neuronales dues au dysfonctionnement du métabolisme oxydatif. Les dérivés de la présente invention, outre le fait qu'ils soient nouveaux, présentent une 2) activité pharmacologique et des propriétés thérapeutiques particulièrement intéressantes. Ils permettent, entre autres, la protection des mitochondries subissant un stress hypoxique, la restauration de la synthèse d'ATP par des organes privés d'oxygène et la protection d'un coeur isolé placé en situation d'ischémie. Enfin, ils sont capables de franchir la barrière hémato- encéphalique. Ces propriétés les rendent donc utiles pour le traitement de l'ischémie cellulaire chronique, des accidents ischémiques aigus cérébraux, cardiaques ou périphériques, pour le traitement des maladies neurodégénératives chroniques (comme la maladie d'Alzheimer ou la maladie de Parkinson) ainsi que pour l'amélioration de la conservation des organes destinés à des transplants et la survie des greffes lors du stress de reperfusion. -2- Plus spécifiquement, la présente invention concerne les composés de formule (1): R0 O-C-R2 A\"X / \I -: x/--- RO CH--N N-R3 (I) dans laquelle Ri représente un groupement alkyle (CI-C6) linéaire ou ramifié, X représente un atome d'oxygène ou de soufre, R2représente un groupement alkyle (CI-C8) linéaire ou ramifié (éventuellement substitué par un groupement carboxy ou alkoxycarbonyle (Ci-C6) linéaire ou ramifié), un groupement phényle (éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupements alkyle (Ci-C6) linéaire ou ramifié, alkoxy (Ci-C6) linéaire ou ramifié, hydroxy ou trihalogénométhyle), un groupement cycloalkyle (C3-C7) (éventuellement substitué par un ou plusieurs groupements phényle eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupements alkyle (C 1-C6) linéaire ou ramifié, alkoxy (C1- C6) linéaire ou ramifié, hydroxy, ou trihalogénométhyle), un groupement 4-(2,3- dithiacyclopent- 1 -yl)butyl, un groupement pyridyle, un groupement amino (éventuellement substitué par un ou deux groupements alkyle (C1-C6) linéaire ou ramifié), ou l'un quelconque des groupements suivants: CH3 CH3 H3C o CH3 H3C O CH3 II f 11 1 I(CH2)3 - CHCH3tCH, 3.-.) H';CCO -CH2CH2CO2 CH3 CH3 R3représente un groupement alkyle (C1-C6) linéaire ou ramifié éventuellement substitué par un ou plusieurs groupements: - phényle éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupements alkyle (Ci-C6) linéaire ou ramifié, alkoxy (C1-C,) linéaire ou ramifié, hydroxy ou trihalogénométhyle, -cycloalkyle (C3-C7) éventuellement substitué par un ou plusieurs groupements phényle euxmêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupements alkyle (CI-C6) linéaire ou ramifié, alkoxy (CI-C,) linéaire ou ramifié, hydroxy ou trihalogénométhyle, - alkoxy (CI-C6) linéaire ou ramifié, -3 - - ou, hydroxy, leurs isomères ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. Parmi les acides pharmaceutiquement acceptables, on peut citer à titre non limitatif les acides chlorhydrique, bromhydrique, sulfurique, phosphonique, acétique, trifluoroacétique, lactique, pyruvique, malonique, succinique, glutarique, fumarique, tartrique, maléïque, citrique, ascorbique, oxalique, méthane sulfonique, camphorique, etc... Parmi les bases pharmaceutiquement acceptables, on peut citer à titre non limitatif l'hydroxyde de sodium, l'hydroxyde de potassium, la triéthylamine, la tertbutylamine, etc... 1) L'invention s'étend également au procédé de préparation des composés de formule (I) caractérisé en ce que l'on utilise comme produit de départ un composé de formule (II): RIO RIO OH dans laquelle Rl a la même signification que dans la formule (I), que l'on fait réagir avec une pipérazine substituée de formule (III): H-N N-R3 (IEI) dans laquelle R3 a la même signification que dans la formule (I), en présence de formaldéhyde, pour conduire au composé de formule (IV); R O OH RIOHi CH2--N N-R3 (IV) ) dans laquelle RI et R3 ont la même signification que dans la formule (I), que l'on fait ensuite réagir avec un acide carboxylique de formule R2CO2H (dans laquelle R2 a la même signification que dans la formule (I), un chloroformiate d'alkyle, un chlorure d'acide -4- chlorure d'acide de formule R2COCl (dans laquelle R2 a la même signification que précédemment), un anhydride d'acide, ou un chlorocarbamate, pour conduire au composé de formule (lIa), cas particulier des composés de formule (I): RiOx ?--R2 o RI0 U '" CHH -N N-Ri (I/a) dans laquelle RI, R2 et R3 ont la même signification que précédemment, composé de formule (I/a) que l'on soumet éventuellement à l'action du réactif de Lawesson, pour conduire au thioester correspondant de formule (I/b), cas particulier des composés de formule (1): RIO -- O R2 s R 0 " CH -N N-R3 (I/b) dans laquelle RI, R2 et R3 ont la même signification que dans la formule (1), composés de formule (I/a) ou (I/b), que l'on purifie, le cas échéant, selon une technique classique de purification, dont on sépare éventuellement les isomères, et que l'on transforme, si on le souhaite, en sel d'addition à un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable. Parmi les composés préférés de l'invention, on peut citer les composés pour lesquels R2 représente un groupement cycloalkyle (C3-C7) substitué par un groupement phényle et plus particulièrement les composés dans lesquels R2 représentent un groupement 2-phénylcyclopropyle. La présente invention a également pour objet les compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un composé de formule (I) seul ou en combinaison avec un ou plusieurs excipients ou véhicules inertes non toxiques. Parmi les compositions pharmaceutiques selon l'invention, on pourra citer plus particulièrement celles qui conviennent pour l'administration orale, parentérale, nasale, les comprimés simples ou dragéifiés, les comprimés sublinguaux, les gélules, les tablettes, les suppositoires, les crèmes, pommades, gels dermiques, etc... - La posologie utile varie selon l'âge et le poids du patient, la nature et la sévérité de l'affection ainsi que la voie d'administration. Celleci peut être orale, nasale, rectale ou parentérale. D'une manière générale, la posologie unitaire s'échelonne entre 0,1 et 500 mg pour un traitement en I à 3 prises par 24 heures. Les exemples suivants illustrent l'invention mais ne la limitent en aucune façon. Les produits de départ utilisés sont des produits connus ou préparés selon des modes opératoires connus. Les structures des composés décrits dans les exemples ont été déterminées selon les techniques spectrophotométriques usuelles (infrarouge, RMN, spectrométrie de masse...). 1 o EXEMPLE 1: N-(3,4-Diméthoxy-2-Ephénylcyclopropylcarbonyloxy)benzyl-N'- éthyl-pipérazine, dichlorhydrate Stade A: N-(3,4-Diméthoxy-2hydroxy)benzyl-N'-éthyl-pipérazine On additionne simultanément dans un réacteur 56 mmoles de N-éthylpipérazine dans 100 ml d'éthanol et 56 mmoles de 2,3-diméthoxyphénol dans 100 ml d'éthanol en agitant vigoureusement à température ambiante. A cette solution est ajoutée goutte à goutte 45 ml d'une solution aqueuse de formaldéhyde à 38 % P/V. Le milieu réactionnel est agité 24 heures à température ambiante puis est évaporé à sec sous vide partiel. Le résidu obtenu est chromatographié sur gel de silice avec un mélange éluant de dichlorométhane/méthanol (97/3) et conduit au produit attendu. Stade B: N-(3,4-Diméthoxy-2-E-phénylcyclopropylcarbonyloxy)benzyl-N'éthyl- pipérazine, dichlorhydrate A une solution de 40 mmoles d'acide 2-Ephénylcyclopropylcarboxylique dans un mélange de dichlorométhane et de diméthylformamide (90/10) maintenue à 0 C sous atmosphère inerte, on ajoute goutte à goutte, sous agitation, une solution de 120 mmoles de chlorure d'oxalyle dans 20 ml de dichlorométhane. Le milieu réactionnel est maintenu à 0 C pendant une heure -6- puis à 25 C pendant 12 heures. L'excès de chlorure d'oxalyle et le solvant sont évaporés sous vide partiel et le résidu obtenu est repris dans 20 ml de dichlorométhane. La solution ainsi obtenue est additionnée goutte à goutte à une solution de 40 mmoles du composé obtenu au stade précédent dans 150 ml de pyridine anhydre. Le milieu réactionnel est agité à 25 C pendant 24 heures puis est évaporé à sec sous vide partiel. Le résidu obtenu est chromatographié sur gel de silice avec un mélange éluant de dichlorométhane/méthanol (95/5) et conduit au produit attendu sous forme de base. Ce composé est dissous dans le minimum d'éther anhydre puis est additionné à une quantité deux fois stoechiométrique d'HCI en solution dans l'éther anhydre. Un précipité abondant se forme aussitôt. On le recueille par filtration et on le recristallise dans un mélange éthanol/éther. Le dichlorhydrate précipite, est filtré et recristallisé dans un mélange éthanol/éther. Point de fusion: 222 C EXEMPLE 2: N-(3,4-Diméthoxy-2-E-phénvlcyclopropylcarbonyloxy)benz. yl-N'-benzyl- pipérazine, dichlorhydrate Le produit attendu est obtenu selon le procédé décrit dans l'exemple 1 en remplaçant au stade A la N-éthylpipérazine par la N-benzylpipérazine. Point de fusion: 216 C EXEMPLE 3: N-(2-Benzoyloxy-3,4-dimnéthlyl)benzylN'-benzyl-pipérazine, dichlorhydrate Le produit attendu est obtenu selon le procédé décrit dans l'exemple 1 en remplaçant au stade ) A la N-éthylpipérazine par la N-benzylpipérazine et au stade B l'acide 2-E- phénylcyclopropylcarboxylique par l'acide benzoïque. Point de fusion: 210 C Les exemples suivants ont été préparés selon le procédé décrit dans l'exemple I en utilisant les produits de départ correspondants. EXEMPLE 4: N-(2-Benzoyloxy-3,4-diméthoxy)benzyl-N'-éthyl-pipérazine, dichlorhydrate EXEMPLE 5: N-(2-Acétoxy-3,4-diméthoxy)benzyl-N'-éthylpipérazine, dichlorhydrate -7- Point de fusion: 230 C (dec.) EXEMPLE 6: N-(2-Acétoxy-3,4-diméthoxy)benzyl-N'-benzyl-pipérazine, dichlorhydrate Point de fision: 220 C (dec.) EXEMPLE 7: N-(2-tert-Butylcarbonyloxy3,4-diinéthoxy)benzyl-N'-éthyl-pipérazine, dichlorhydrate EXEMPLE 8: N-(2-tert-Butylcarbonyloxy-3,4- diinéthoxy)benzyl-N'-benzyl-pipérazine, dichlorhydrate EXEMPLE 9: N-(3,4Diméthoxy-2-octanoyloxy)benzyl-N'-éthyl-pipérazine, dichlorhydrate EXEMPLE 10: N-(3,4-Diméthoxy-2-octanoyloxy)benzyl-N'-benzyl-pipérazine, I O dichlorhydrate EXEMPLE 11: N-(3,4-Diméthoxv-2nicotinoyloxy)benzyl-N'-éthyl-pipérazine, dichlorhydrate EXEMPLE 12: N(3,4-Diméthoxy-2-nicotinoyloxy)benzyl-N'-benzyl-pipérazine, dichlorhydrate EXEMPLE 13: N-[2-(6'-Acétoxy-2',5', 7',8'-tétraméthylchroman-2-ylcarbonyloxy)-3,4- diinéthoxylbenzyl-N'-éthyl-pipérazine, dichlorhydrate Point de [ision: 215 C (dec.) EXEMPLE 14: N-[2-(6'-Acétoxy-2 ',5, 7',8'-tétraméthylchroman-2-ylcarbonyloxy)-3,4- diméthoxy]benzyl-N'-benzyl-pipérazine, dichlorhydrate EXEMPLE 15: N(2-Lipoyloxy-3,4-diméthoxy)benzyl-N'-éthvl-pipérazine, dichlorhydrate EXEMPLE 16: N-(2-Lipoyloxy-3,4-diméthoxy)benzyl-N'-benzyl-pipérazine, dichlorhydrate -8 - EXEMPLE 17: N-(3,4-Diméthoxy-2-E-(R,R)phénylcyclopropylcarbonyloxy)benzyl-N'- éthyl-pipérazine, dichlorhydrate EXEMPLE 18: N-(3,4-Diméthoxy-2-E-(R,R)phénylcyclopropylcarbonyloxy)benzyl-N'- benzyl-pipérazine, dichlorhydrate Point de fision: 200 C EXEMPLE 19: N-(3,4-Diméthoxy-2-E-(S,S)phénylcyclopropylcarbonyloxy)benzyl-N'- éthyl-pipérazine, dichlorhydrate EXEMPLE 20: N-(3,4-Dimnéthoxy-2-LE-(S,S)phénylcyclopropylcarbonyloxy)benlzyl-N'- benzyl-pipérazine, dichlorhydrate Io EXEMPLE 21: N-[3,4-Diméthoxy-2-(3-carboxypropionyloxy)]benzylN'-éthyl- pipérazine, dichlorhydrate EXEMPLE 22: N-[3,4-Diméthoxy-2-(3-carboxypropionyloxy)]benzyl-N'-benzyl- pipérazine, dichlorhydrate EXEMPLE 23: N-[3,4-Diméthoxy-2-(7-méthoxycarbonylheptanoyloxy)]benzyl-N'éthiyl- 1 5 pipérazine, dichlorhydrate EXEMPLE 24: N-[3,4-Diméthoxy-2-[7-méthoxycarbonylheptanoyloxylbenzyl-N'- benzyl-pipérazine, dichlorhydrate EXEMPLE 25: N-[3,4-Diméthoxy-2-(3-tocophéroylpropionyloxy)]benzyl-N'éthyl- pipérazine Tocophéroyl représente le groupement: CH CH3 - O. CH3 CH Ai A d [(CH 2)3 - CHCH-J,7CH3 C - 0 CH.3 O -9- EXEMPLE 26: N-3,4-Diméthoxy-[2-(3-tocophéroylpropionyloxy)]bhenzzylN'-benzyl- pipérazine, dichlorhydrate EXEMPLE 27: N-(2-Ethoxycarbonyloxy-3,4diméthoxy)benzyl-N'-benzyl-pipérazine, dichlorhydrate A une solution de 10 mmoles de N-benzyl-N'-(3,4-diméthoxybenzyl-2-hydroxy)- pipérazine dans 100 ml de dichlorométhane anhydre, on ajoute goutte à goutte 1l mmoles d'une solution de chloroformiate d'éthyle dans 10 ml de dichlorométhane. Après agitation à température ambiante pendant 24 h, on observe la formation d'un précipité. Après neutralisation par une solution aqueuse de carbonate de sodium, le milieu réactionnel est extrait par le dichlorométhane et la phase organique est concentrée à sec sous vide partiel et le résidu est chromatographié sur colonne de silice (éluant: dichlorométhane/méthanol: 95/5). Les fractions retenues sont réunies puis concentrées sous vide partiel. mmoles du composé ainsi obtenu dissoutes dans le minimum d'éther anhydre sont additionnées à une quantité deux fois stoechiométrique d'HCI en solution dans l'éther anhydre. Un précipité abondant se forme aussitôt, est filtré et recristallisé dans un mélange éthanol/éther et conduit au produit attendu. EXEMPLE 28: N-(2-Ethoxycarbonyloxy-3,4-diméthoxy)benzyl-N'éthylpipérazinle, dichlorhydrate Le produit attendu est obtenu selon le procédé décrit dans l'exemple 27. ) EXEMPLE 29: N-(2-Diméthylaminocarbonyloxy-3,4-diinéthoxy)benzylN'-benzyl- pipérazine A une solution de 10 mmoles N-benzyl-N'-(3,4-diméthoxybenzyl2-hydroxy)pipérazine dans ml de dichlorométhane anhydre, on ajoute goutte à goutte 11 mmoles d'une solution de chlorure dc N,N- diméthylcarbamoyle dans 10 ml de dichlorométhane. Après agitation à température ambiante pendant 24 h, on observe la formation d'un précipité. Après neutralisation par une solution aqueuse de carbonate de sodium, le milieu réactionnel est extrait par le dichlorométhane et la phase organique est concentrée à sec sous vide partiel et le résidu chromatographié sur colonne de silice (éluant: dichlorométhane/méthanol: 95/5). Les -10- fractions retenues sont réunies puis concentrées sous vide partiel et conduisent au produit attendu. EXEMPLE 30: N-(2- Diméthylaminocarbonyloxy-3,4-diméthoxy)benzyl-N '-éthyl-piprazine Le produit attendu est obtenu selon le procédé décrit dans l'exemple 29. EXEMPLE 31: N-(3,4-Diméthoxy-2-thioacétoxv)benzyl-N'-éthyl-pipérazine A une solution de 10 mmoles de N-(2-acétoxy-3,4-diméthoxy)benzyl-N'-éthylpipérazine décrite dans l'exemple 5 dans 50 ml de xylène, sous atmosphère inerte, sont ajoutées, sous agitation, 12 mmoles du réactif de Lawesson. Le milieu réactionnel est porté à 130 C pendant 18heures. Après refroidissement, évaporation du solvant, le résidu est chromatographié sur gel de silice avec de l'éther de pétrole puis du dichlorométhane et conduit au produit attendu. EXEMPLE 32: N-(3,4-Diméthoxy-2-thioacétoxy)benzyl-N'-benzyl-pipérazine Le produit attendu est obtenu selon le procédé décrit dans l'exemple 31. ETUDE PHARMACOLOGIQUE DES DERIVES DE L'INVENTION Les composés de l'invention ont été étudiés comparativement à la trimétazidine (2,3,4- triméthoxybenzyl pipérazine). EXEMPLE 33: Etude des composés de l'invention sur la fonction contractile du myocarde et sur la réponse métabolique énergétique myocytaire au cours d'une séquence ischémie-reperfusion (coeur isolé de rat). Les effets anti-ischémiques de la trimétazidine s'accompagnent, lors d'un essai effectué sur un coeur isolé de rat, d'une réduction de l'acidose ischémique et d'une protection des mécanismes producteurs d'ATP (LAVANCHY et col., Advances in Studies on Heart Metabolism, pp. 257- 262, 1987). Cette étude était conduite grâce à l'utilisation de la spectroscopie de RMN du:'P, technique qui permet le suivi, sur un coeur isolé et perfusé, de la variation des contenus en composés phosphorylés (ATP, phosphocréatine, phosphate inorganique) et du pH intracellulaire. Elle permet d'explorer en continu un certain nombre de variables liées à l'état énergétique du myocarde et d'évaluer d'une manière comparative les propriétés anti- ischémiques de plusieurs produits. Méthodes Le coeur isolé de rat est perfusé par voie aortique sous une pression constante (100 cm d'eau) durant 30 min., puis il est soumis à une ischémie globale partielle (débit coronaire réduit à 1,3 % du débit initial) durant 24 min., enfin, le coeur est reperfusé sous pression constante pendant 30 min. Durant toute l'expérience, des spectres de RMN correspondant à des acquisitions d'une durée de 3 min. sont enregistrés. Après exploitation numérique, ils servent à déterminer la concentration intracardiaque de l'ATP, de la phosphocréatine (PC) et du phosphate inorganique (Pi), ainsi qu'à évaluer le pH intracellulaire. A partir de ces données, peuvent être déterminées les évolutions cinétiques de ces variables durant l'ischémie et au cours de la reperfusion. Protocole expérimental Ce protocole est destiné à apprécier l'effet de la présence du produit avant et durant l'ischémie. A cet effet, le produit est administré dans le milieu de perfusion après 20 min. de perfusion normoxique; il reste présent dans la solution de perfusion durant le reste de l'expérience. La concentration de 5. 10-6M a été choisie pour cette étude comparative. n 10mnn 24mn 30 mn NORMOXIE ' -ISCHEMIE-- REPERFUSION PRODUIT Ire série expérimentale: Elle est destinée à évaluer les effets des produits sur la fonction cardiaque. Le coeur est perfusé dans les conditions définies plus haut, et un catheter relié à un capteur de pression est introduit dans le ventricule gauche (via l'oreillette) afin de suivre les modifications de la -12 - pression développée par le VG. La fréquence cardiaque et le débit coronaire sont également suivis. 2e série expérimentale: Elle est réalisée au sein d'un aimant supraconducteur de 5,9 T afin d'enregistrer des spectres de RMN du 31P. Cette série d'expériences est destinée à évaluer l'impact du produit sur l'équilibre énergétique du myocarde à la fois en normoxie, en ischémie et en reperfusion. Résultats Les résultats obtenus dans cette étude montrent que l'effet cytoprotecteur de la trimétazidine, lors d'une séquence ischémiereperfusion du myocarde, se trouve être très augmenté avec les composés de l'invention et plus particulièrement avec le composé de l'exemple I qui exerce même un effet statistiquement significatif sur le contenu intracellulaire d'ATP. L'effet du composé de l'exemple I est également particulièrement net sur l'acidose intracellulaire induite par l'ischémie: le pH intracellulaire s'effondre de pH 7,2 à pH 6,0 en fin d'ischémie chez les groupes de contrôle, il est maintenu à pH 6,35 dans le groupe traité par les trimétazidine et à 1 5 pH 6,50 dans le groupe traité par le composé de l'exemple 1, ce qui au plan physiopathologique est une différence considérable. EXEMPLE 34: Activité sur la production énergétique mitochondriale lors d'une surcharge calcique expérimentale La mitoehondrie joue un rôle essentiel dans la production énergétique cellulaire sous forme ) d'ATP. La situation d'hypoxie cellulaire consécutive à une ischémie entraîne une surcharge calcique intracellulaire (MARBAN et coll., 80, 17- 22, 1989) et en particulier mitochondriale, liée à la chute de synthèse d'ATP: il a été démontré que le stockage exagéré de calcium par la mitochondrie diminuait la synthèse d'ATP (TUENA de GOMEZ-PUYOU et coll., Biochem. Biophys. Acta, 532, 396-405, 1980) et que cet excès de calcium était à l'origine des désordres cellulaires caractéristiques des pathologies ischémiques (CHEUNG et coll., New Engl. J. Med., 314, 1670-1676, 1986). Cet effondrement de la synthèse mitochondriale d'ATP peut être créé expérimentalement sur des mitochondries isolées placées dans un milieu contenant de la cyclosporine A. Cette dernière bloque l'extrusion du Ca2+ mitochondrial provoquant l'accumulation d'ions Ca2+ dans - 13- la mitochondrie et une diminution de la phosphorylation oxydative productrice d'ATP (CROMPTON et coll., 1988; BROEKEMEIER et coll., Biochem. J., 255, 357360, 1989). Matériel et méthode Le protocole suivi est celui qui a été décrit par SALDUCCI et coll. (J. Pharmacol. Exp. Ther., 277, 417-422, 1996). En bref, les mitochondries sont extraites de foies de rats. La respiration mitochondriale (1,5 mg de protéines placées en chambre de réaction) est provoquée par l'addition de succinate de Na, utilisé comme substrat (à 6.10-4M) et la phosphorylation oxydative est déclenchée par l'adjonction d'ADP au milieu de survie jusqu'à la concentration finale de 1.10-5M. L'enregistrement des vitesses de consommation d'oxygène (en nmol/min./mg de protéine mitochondriale) permet le calcul des paramètres caractéristiques de la synthèse énergétique mitochondriale sous forme d'ATP. Résultats Les résultats obtenus dans cette étude montrent que les composés de l'invention restaurent de manière significative la synthèse mitochondriale d'ATP. 100 % de restauration ont été observés avec le composé de l'exemple 1 alors que cette restauration n'est que de 47 % avec la trimétazidine. EXEMPLE 35: Etude de l'aptitude de substances chimiques à franchir la barrière hémato-encéphalique Description du modèle de barrière hémato-encéphalique Afin d'étudier "in vitro" les fonctions des capillaires cérébraux, nous avons mis au point un modèle de coculture qui permet de recréer la situation "in vivo". Les cellules cndothéliales de capillaires et les astrocytes sont cultivés de part et d'autre d'un filtre. cellules endothéliales l.'T * T *T * 1' 1 - '' l' *'m 'l' Ifiltr' compartlmenI intérlutl troc teS o o o O - 14- Les cellules endothéliales sont cultivées dans le compartiment supérieur sur le filtre et les astrocytes dans le compartiment inférieur sur le fond de la boîte de Pétri. Dans ces conditions, les cellules retiennent tous les marqueurs de cellules endothéliales (présence du facteur VIII, surface non thrombogène, production de prostacycline, présence de l'enzyme de conversion) et de la barrière hémato-encéphalique (présence de jonctions serrées, rareté des vésicules de pinocytose, présence de monoamine oxydase et yglutamyl- transpeptidase (Dehouck et col., J. of Controlled Release., 21, 81-92, 1992). Méthode (Dehouck et col., J. of Controlled Release, 21, 81-92, 1992). Le jour de l'expérience, une solution de Ringer-HEPES (NaCI, 150 mM; KCI, 5,2 mM I0 CaCI2, 2,2 mM; MgCI2 6H20, 0,2 mM; NaHCO3, 6 mM; HEPES, 5 mM; glucose 2,8 mM) est placée dans le compartiment inférieur d'une boîte à 6 puits (3 ml par puits). Un filtre recouvert d'une monocouche de cellules endothéliales est transféré dans le premier puits de la boîte à 6 puits. 2 ml de la solution de Ringer-HEPES contenant la molécule à tester sont placés dans le compartiment supérieur du filtre. Aux temps 10, 20, 30, 60, 90 et 120 minutes après addition de la molécule, les filtres sont transférés dans un autre puits de la boîte à 6 puits afin de réduire au maximum le passage possible de la molécule du compartiment inférieur au compartiment supérieur. Les expériences sont réalisées en triplicate avec des filtres couverts d'une monocouche de cellules endothéliales de capillaires cérébraux ou de collagène seul comme témoin. Ceux-ci ) sont placés sous agitation et à 37 C tout au long de l'expérience. Analyse des résultats - Détermination du coefficient de perméabilité Afin de déterminer les coefficients de perméabilité des molécules, la clearance de chaque substance est déterminée suivant la formule: X clearance (gl) = Cl (gl) = - - Cd o X est la quantité de substance dans le compartiment inférieur, o Cd est la concentration de substance dans le compartiment supérieur. -15 - Pendant 60 minutes, la clearance augmente linéairement avec le temps. Sur le graphe clearance = f(t), la mesure de la pente nous donne la valeur "PSt" o PS = perméabilité x surface de la monocouche (en pl/min) pour les filtres recouverts de cellules endothéliales de capillaires cérébraux. Pour les filtres témoins "PSf" est calculée de la même façon. La perméabilité pour la monocouche de cellules endothéliales seule (PSe) est donnée par: 1 I 1 PSe PSt PSf Le coefficient de perméabilité endothéliale "Pe" est calculé en divisant "PSe" par la surface de la monocouche de cellules endothéliales. "Pe" s'exprime en "cm/min". Conclusion IO La trimétazidine se caractérise par un coefficient de perméabilité de la BHE extrêmement faible (0,42) indiquant que la molécule pénètre mal dans le cerveau et que son utilisation pour le traitement de pathologies cérébrales ne peut être envisagé. Les composés de l'invention quant à eux présentent un coefficient de perméabilité de la BHE nettement plus important. Le composé de l'exemple 1 en particulier qui présente un coefficient de perméabilité de la BHE supérieur à 1, pénètre au contraire très facilement dans le cerveau, de façon exactement proportionnelle à sa concentration dans le torrent circulatoire. EXEMPLE 36: Composition pharmaceutique Formule de préparation pour 1000 comprimés dosés à 10 mg Composé de l'exemple 2...................... ....................................................................... . 1 g Hydroxypropylcellulose.............................................. .DTD: ..................................................2 g A m id o n de b lé.....................................................................DTD: ......................................... 10 g Lactose..... .... ... .. DTD: ......................................................................... DTD: ................................ 100 g Stéarate de magnésium............ DTD: ......................................................................... DTD: ............. 3 g Talc. .... .. ... .. .. ..........................DTD: ......................................................................... DTD: ............... 3 g - 16-..DTD: REVENDICATIONS 1/ Composé de formule (I): R O - C - R RO HCH-N N-R (T) R10 2 3 dans laquelle: Rl représente un groupement alkyle (Ci-C6) linéaire ou ramifié, X représente un atome d'oxygène ou de soufre, R2 représente un groupement alkyle (CI-C8) linéaire ou ramifié (éventuellement substitué par un groupement carboxy ou alkoxycarbonyle (Ci-C6) linéaire ou ramifié), un groupement phényle (éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupements o alkyle (Ci -C6) linéaire ou ramifié, alkoxy (CI -C6) linéaire ou ramifié, hydroxy ou trihalogénométhyle), un groupement cycloalkyle (C3-C7) (éventuellement substitué par un ou plusieurs groupements phényle eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupements alkyle (Ci-C6) linéaire ou ramifié, alkoxy (Cj- C6) linéaire ou ramifié, hydroxy, ou trihalogénométhyle), un groupement 4-(2,3- dithiacyclopent-l-yl)butyl, un groupement pyridyle, un groupement amino (éventuellement substitué par un ou deux groupements alkyle (Ci-C6) linéaire ou ramifié), ou l'un quelconque des groupements suivants: CH3 CH3 H3C CH3 H3C o CH3 | 11 S 1 f[(CH2)3 - CHCH3tCH, H3CCO _ -CH2CH2CO2 CH3 CH3 R3 représente un groupement alkyle (CI-C6) linéaire ou ramifié éventuellement substitué par un ou plusieurs groupements: - phényle éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupements alkyle (Ci-C6) linéaire ou ramifié, alkoxy (Ci-C6) linéaire ou ramifié, hydroxy ou trihalogénométhyle, - cycloalkyle (C3- C7) éventuellement substitué par un ou plusieurs groupements phényle eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs atomes d'halogène ou -17 groupements alkyle (Ci-C6) linéaire ou ramifié, alkoxy (Ci-C6) linéaire ou ramifié, hydroxy ou trihalogénométhyle, - alkoxy (C1-C6) linéaire ou ramifié, - ou, hydroxy, leurs isomères ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. 2/ Composé de formule (I) selon la revendication 1 tel que X représente un atome d'oxygène. 3/ Composé de formule (I) selon la revendication 1 tel que X représente un atome de soufre. 4/ Composé de formule (1) selon la revendication 1 tel que R2 représente un groupement cycloalkyle (C3-C7) linéaire ou ramifié éventuellement substitué par un groupement phényle eux-mêmes éventuellement substitués. / Composé de formule (I) selon la revendication 4 tels que R2 représent un groupement 2- phénylcyclopropyle. 6/ Composé de formule (I) selon la revendication 1 qui est le N-(3,4diméthoxy-2-E- phénylcyclopropylcarbonyloxy)benzyl-N'-éthyl-pipérazine, ses isomères ainsi que ses sels d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable. 7/ Procédé de préparation des composés de formule (I) caractérisé en ce que l'on utilise comme produit de départ un composé de formule (II): RIO RIO OH X (Il) dans laquelle RI a la même signification que dans la formule (I), que l'on fait réagir avec une pipérazine substituée de formule (Il): H-N N-R3 (i) \-/ - 18- /2757164 dans laquelle R3 a la même signification que dans la formule (I), en présence de formaldéhyde, pour conduire au composé de formule (IV); RIO OH RIO CH2- N N-R3 (IV) dans laquelle RI et R3 ont la même signification que dans la formule (1), que l'on fait ensuite réagir avec un acide carboxylique de formule R2CO2H (dans laquelle R2 a la même signification que dans la formule (I), ou un chloroformiate d'alkyle ou bien encore un chlorure d'acide de formule R2COC1 (dans laquelle R2 a la même signification que précédemment), I( pour conduire au composé de formule (I/a), cas particulier des composés de formule (1): RIO)- -R2 R10 RIO - - CH-ON \ N-R3 ((/a) dans laquelle RI, R2 et R3 ont la même signification que précédemment, composé de formule (I/a) que l'on soumet éventuellement à l'action du réactif de Lawesson, pour conduire au thioester correspondant de formule (I/b), cas particulier des composés de formule (I): R,O 0 - - R2 S R0 CH-N N-R (I-b) dans laquelle Ri, R2 et R3 ont la même signification que dans la formule (1), composés de formule (I/a) ou (I/b), que l'on purifie, le cas échéant, selon une technique classique de purification, dont on sépare éventuellement les isomères, et que l'on transforme, si on le souhaite, en sel d'addition à un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable. 8/ Compositions pharmaceutiques contenant comme principe actif au moins un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6 seul ou en combinaison avec un ou plusieurs excipients ou véhicules inertes, non toxiques, pharmaceutiquement acceptables. - 19- 9/ Compositions pharmaceutiques selon la revendication 8 contenant au moins un principe actif selon l'une quelconque des revendications I à 6 utiles pour le traitement de l'ischémie cellulaire chronique, des accidents ischémiques aigus cérébraux, cardiaques ou périphériques, pour le traitement des maladies neurodégénératives chroniques comme la maladie d'Alzheimer ou la maladie de Parkinson, ainsi que pour l'amélioration de la conservation d'organes destinés à des transplants et la survie des greffes lors du stress de reperfusion.