FR 2729970 A1 19960802 FR 9601064 A 19960130 La présente invention concerne un gène de saccharase provenant de bactéries coryneformes. Plus particulièrement, la présente invention concerne un fragment d'ADN provenant de bactéries coryneformes et contenant un gène codant une protéine ayant une activité de saccharase, un ADN recombiné obtenu par insertion dudit fragment d'ADN dans un vecteur susceptible d'amplification génique dans des bactéries coryneformes, un micro-organisme de type bactérie coryneforme contenant ledit ADN recombiné et capable de produire un Lamino- acide ou un acide nucléique, et un procédé de production d'un Laminoacide ou d'un acide nucléique par culture dudit micro-organisme. De nombreuses études ont été décrites concernant des micro- organismes producteurs de L-aminoacides obtenus par génie génétique (voir Biotechnology Letters, vol. 2, pages 525-530 (1980), Appl. Environ. Microbiol., vol. 144, pages 181-190 (1979) et Preprint of Discussions and Lectures in the Agricultural and Chemical Society of Japan (1981), page 8. Ces études concernent toutes l'amplification de gènes pour la biosynthèse de L-aminoacides, afin d'augmenter la productivité des cellules en ce qui concerne les L-aminoacides recherchés. L'amplification n'augmente pas le rendement de production de L-aminoacides en améliorant l'assimilation par le micro-organisme des saccha- rides qui constituent les matières premières pour la fermentation. Certaines études concernent l'amélioration par génie génétique de l'assimilation des saccharides par des micro-organismes producteurs de Laminoacides (voir les demandes de brevets japonais mises à la disposition du public n 61-119185 et 2-171178). Selon ces études, l'aptitude à assimiler le sacharose a été conférée à la bactérie Escherichia coli par génie génétique. En particulier, une activité d'absorption du saccharose puis d'hydrolyse du saccharose en glucose et fructose a été conférée à une souche de Escherichia coli, de sorte que cette souche était capable d'utiliser le saccharose comme source de carbone, aptitude que la souche ne possédait pas de manière inhérente. Cependant, un succès similaire n'a pas été décrit dans le cas des bactéries coryneformes et aucune publication concernant l'amélioration par génie génétique de l'aptitude des bactéries coryneformes à assimiler les saccharides tels que le saccharose n'est apparue jusqu'à maintenant. Cest pourquoi, la présente invention a pour but d'améliorer par génie génétique l'aptitude des bactéries coryneformes à assimiler le saccharose pour augmenter la vitesse de fermentation et pour améliorer le rendement en Lamino- acides et en acides nucléiques à partir de matières premières contenant du saccharose. Plus particulièrement, la présente invention a pour but d'obtenir un fragment d'ADN provenant de bactéries coryneformes et contenant un gène codant une protéine ayant une activité de saccharase, un ADN recombiné comprenant ledit fragment d'ADN, un vecteur susceptible d'amplification génique dans les bactéries coryneformes et comprenant ledit fragment, un micro-organisme, en particulier une bactérie coryneforme, contenant ledit ADN recombiné, un micro- organisme, en particulier une bactérie coryneforme, contenant ledit vecteur, et un procédé pour améliorer le rendement de production de Laminoacides ou d'acides nucléiques par fermentation au moyen du microorganisme transformé, en particulier au moyen de la bactérie coryneforme transformée, en présence de matières premières contenant du saccharose. Ces buts sont atteints selon la présente invention grâce à des fragments d'ADN provenant de bactéries cotyneformes et contenant un gêne codant une protéine ayant une activité de saccharase et grâce à un procédé de production de L-aminoacides et d'acide nucléiques avec un rendement élevé et en une durée plus courte que les procédés conventionnels par culture de bactéries coryneformes dans lesquelles un ADN recombiné contenant le fragment d'ADN décrit ci-dessus a été introduit. Plus précisément, la présente invention concerne un fragment d'ADN provenant de bactéries coryneformes et contenant un gène codant une protéine ayant une activité de saccharase, un vecteur susceptible d'amplification génique dans des bactéries coryneformes et comprenant ledit fragment d'ADN, un micro- organisme de type bactérie coryneforme contenant ledit vecteur et capable de produire un L-aminoacide ou un acide nucléique, un ADN recombiné obtenu par insertion dudit fragment d'ADN dans un vecteur capable d'amplifier des gènes dans des bactéries coryneformes et un procédé de production d'un L-aminoacide ou d'un acide nucléique qui comprend la culture dudit micro-organisme. Tel qu'il est utilisé ici, le terme "protéine ayant une activité de sacchamse" désigne une protéine capable d'hydrolyser le saccharose pour produire du glucose et du fructose. De préférence, la protéine a une activité de saccharase d'au moins une unité/mg de protéine, de préférence de 2, 3, 4 ou 5 unités par mg de protéine ou plus. Tel qu'il est utilisé ici, le terme "bactéries coryneformes" désigne des bacilles Gram positif aérobies appartenant au genre Microbacterium, Brevibacterium ou Corynebacterium tels qu'ils sont décrits par Bergey dans Manual of Determinative Bacteriology, 8ème éd., p.599 (1974) et ce termne englobe les souches sauvages suivantes qui sont capables de produire de l'acide L-glutamique ainsi que les souches mutantes qui en dérivent: Coryncbacterium acetoacidophilum ATCC 13870 Corynebacterium acetoglutamicum ATCC 15806 Corynebacterium callunae ATCC 15991 Corynebacterium glutamicum ATCC 13032 Corynebacterium glutamicumni ATCC 13060 Brevibacterium divaricatum ATCC 14020 Brevibacterium lactofermentum ATCC 13869 Corynebacterium lilium ATCC 15990 Corynebacterium melassecola ATCC 17965 Brevibacterium saccharolyticum ATCC 14066 Brevibacterium immariophilum ATCC 14068 Brevibacterium roseum ATCC 13825 Brevibacterium flavum ATCC 13826 Brevibacterium thiogenitalis ATCC 19240 Microbacterium ammoniaphilumn ATCC 15354 Brevl'bacterium ammnoniagenes ATCC 6872 Corynebacterium equi ATCC 21280 Le gène codant une protéine ayant une activité de saccharase est un gène qui code une protéine présentant une activité d'hydrolyse du saccharose pour produire du glucose et du fructose. L'activité de saccharase est importante pour les microorganismes qui utilisent le saccharose comme source de carbone. Ce gène n'est pas limité d'une manière particulière et les séquences de bases correspondantes englobent leurs équivalents fonctionnels, en particulier ceux qui comportent jusqu'à 300 bases en plus ou en moins, à l'extrémité 3', à l'extrémité 5' ou aux extrémités 3' et 5', et ceux qui sont capables de coder une protéine ayant au moins 75 % de l'activité de saccharase de la protéine codée par la séquence préférée, ainsi que tout autre gène répondant aux conditions fonctionnelles ci- dessus. Pour obtenir un fragment d'ADN contenant un gêne codant une protéine ayant une activité de saccharase selon la présente invention, il est possible d'utiliser un procédé comprenant la construction dune banque génomique à partir de l'ADN chromosomique de bactéries coryneformes puis le clonage d'un gène de saccharase par hybridation de la manière qui sera décrite en détail dans la suite. Il est possible de construire une banque génomique du génome de bactéries coryneformes à l'aide de techniques conventionnelles telles que celles qui sont décrites par Sambrook et al, dans Molecular Cloning: A laboratory manual, 2ème éd., CSH press, NY, 1989, en particulier aux chapitres 1 et 9. Brièvement, l'ADN chromosomique obtenu à partir de bactéries coryneformes est digéré partiellement avec une endonucléase de restriction, ligaturé dans un vecteur de clonage approprié tel qu'un plasmide et utilisé pour transformer un hôte approprié. Le plasmide pUC18 constitue un vecteur de clonage que l'on préfere pour la construction de la banque génomique de bactéries coryneformes. L'hôte que l'on préfere est E. coli, en particulier E. coli JM109. Des gènes de saccharase ou d'invertase ont été clonés avec Bacillus subtilis (Gene, Vol. 45, pages 221-225 (1986)), Zymomonas mobilis (J. Bacteriol., Vol. 172, pages 6727-6735 (1990)), Streptococcus mutans (Infect. Immun., Vol. 56, pages 1956-1960 (1998)), des levures du genre Saccharomyces (Nucleic Acids Res., Vol. 11, pages 1943-1954 (1983)), Vibrio alginolyticus (Gene, Vol. 80, 49-56 (1989)), etc., et ces gènes présentent entre eux un certain degré d'homologie (J. Bacteriol., Vol. 172, pages 6727-6735 (1990)). Sur la base des parties communes à ces micro-organismes, il est possible de préparer des ADN synthétiques par des moyens conventionnels tels que la synthèse d'ADN en solution ou en phase solide au moyen d'un synthétiseur d'ADN automatique. Ces ADN synthétiques sont phosphorylés, par exemple en utilisant comme substrat [y-32P]ATP, pour préparer des sondes marquées. La banque formée ci-dessus est alors criblée à l'aide des sondes par hybridation sur colonies. Les colonies qui expriment une activité de saccharase sont sélectionnées parmi les colonies qui s'hybrident avec les sondes. Le fragment d'ADN actif est ensuite excisé du vecteur de dclonage par des techniques conventionnelles. Le vecteur d'expression qui comprend le fragment d'ADN contenant un gène codant une protéine ayant une activité de saccharase qui est employé dans la présente invention n'est pas limité spécifiquement, et ce peut être un plasmide quelconque provenant de bactéries coryneformes. Les vecteurs utiles comprennent par exemple pHM1519 (Agric. Biol. Chem., vol. 48 (1984), pages 2901-2903), pAM330 (Agric. Biol. Chem., vol. 48 (1984), pages 2901-2903), et les plasmides basés sur ceux-ci qui sont résistants à des médicaments. Le vecteur peut être introduit dans des chromosomes par recombinaison homologue ou par le biais de séquences d'insertion. Concernant la recombinaison homologue, on dispose du procédé de recombinaison de gènes dans des chromosomes dans les coryne- bactéries qui fait intervenir une origine de réplication sensible à la température (voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 57491). Concernant les séquences d'insertion, on connaît les séquences IS714, IS719, IS903, par exemple, et on sait par le document WO93/19151 que ces séquences sont utilisécs pour l'application ci-dessus. Les bactéries coryneformes qui peuvent être utilisées comme hôtes dans la présente invention comprennent les souches sauvages de bactéries productrices d'acide L-glutamique et les souches mutantes qui en dérivent et qui sont capables de produire un autre L-aminoacide tel que l'inosine, l'acide 5'-inosinique, la guanosine et l'acide 5'-guanylique ou un acide nucléique. Les L-aminoacides comprennent ceux qui sont produits par les bactéries coryneformes, par exemple l'acide L-glutamique, la L-lysine, la L-thréonine, l'acide L-aspartique, la L-isoleucine, la L-arginine, la L-proline, la L-histidine, la L-valine, la L-leucine, la L-phénylalanine, la L-glutamine. Des exemples spécifiques d'hôtes qui conviennent pour la production de différents L-aminoacides et de différents acides nucléiques sont indiqués ci-dessous. (i) hôtes préférés pour la production d'acide L- glutamique: Brevibacterium lactofermentum AJ 12745 (FERM BP-2922); voir brevet U.S. n 5 272 062, page 561. Brevibacterium lactofermentum AJ 12746 (FERM BP-2923); voir brevet US. n 5 272 067. Brevibacterium lactofermentum AJ 12747 (FERM BP-2924); voir brevet US. n 5 272 067. Brevibacterium lactofermentum AJ 12748 (FERM BP-2925); voir brevet US. n 5 272 067. Corynebacterium glutamicum ATCC 21942; voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 5-3793, page 3, tableau 1. En outre, il est possible également d'utiliser comme hôtes les souches sauvages de bactéries coryneformes qui sont indiquées ci-dessous: Corynebacterium acetoacidophilum ATCC 13870 Corynebacterium acetoglutamicum ATCC 15806 Corynebacterium callunae ATCC 15991 Corynebacterium glutamicum ATCC 13032 Corynebacterium glutamicum ATCC 13060 Brevibacterium divaricatum ATCC 14020 Brevibacterium lactofermentum ATCC 13869 Corynebacterium lilium ATCC 15990 Corynebacterium melassecola ATCC 17965 Brevibacterium saccharolyticum ATCC 14066 Brevibacterium immariophilum ATCC 14068 Brevibacterium roseum ATCC 13825 Brevibacterium flavum ATCC 13826 Brevibactenrium thiogenitalis ATCC 19240 Microbacterium ammoniaphilum ATCC 15354 (ii) Hôtes que l'on préfere pour produire de la L-lysine: Brevibacterium lactofermentum AJ 12031 (FERM BP-277); voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 60-62994, page 525, colonne de gauche en bas. Brevibacterium lactofermentum ATCC 39134; voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 60-62994, page 473, colonne de droite en bas. Brevibacterium lactofermentum AJ 11082 (NRRL B-11470, FERM P-3840); voir brevet U.S. n 4 275 157. Brevibacterium lactofermentum AJ 12435 (FERM BP-2294); voir brevet U.S. n 5 304 476. Brevibacterium lactofermentum AJ 12592 (FERM BP 3239); voir brevet U.S. n 5 304 476. Brevibacterium lactofermentum AJ 12593 (FERM BP-3240); voir brevet U.S. n 5 304 476. Corynebacterium glutamicum AJ 12596 (FERM BP-3242); voir brevet U.S. n 5 304 476. Coriynebacterium glutamicum AJ 3463 (FERM P-1987); voir demande de brevet japonais publiée n 51-34477. (iii) Hotes que l'on préfere pour produire de la L-thréonine: Brevibacterium lactofermentum AJ 11188 (E;RM P-4190); voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 60-87788, page 473, colonne de droite en haut. Corynebacterium glutamicum AJ 11682 (FERM BP-118); voir demande de brevet japonais publiée n 2-31956, page 230, colonne 8. Brevibacterium fiavum AJ 11683 (FERM BP-119); voir demande de brevet japonais publiée n 2-31956, page 231, colonne 10. (iv) Hôtes que l'on préfère pour produire de l'acide L-aspartique: Brevibacterium flavum AJ 3859 (FERM P-2799); voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 51-61689, page 524, colonne de gauche en haut. Brevibacterium lactofermentum AJ 3860 (FERM P-2800); voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 51-61689, page 524, colonne de gauche en haut. Corynebacterium acetoacidophilum AJ 3877 (FERM P-2803); voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 51-61689, page 524, colonne de gauche en haut. Corynebacterium glutamicum AJ 3876 (FERM P-2802); voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 51-61689, page 524, colonne de gauche en haut. (v) Hôtes que l'on préfere pour produire de la L-isoleucine Brevibacterium lactofermentum AJ 12404 (FERM P-10141) (voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 2-42988, page 603, colonne de gauche en bas). Brevibacterium flavum AJ 13405 (FERM P-10142) (voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n'2-42988, page 524, colonne de gauche en bas). (vi) Hôtes que l'on prifere poru produire de la L-arginine: Brevibacterium flavum AJ 12144 (FERM P-7642); voir demande de brevet japonais publiée n 5-27388, page 174, colonne 4. Corynebacterium glutamicum AJ 12145 (FERM P-7643); voir demande de brevet japonais publiée n 5-27388, page 174, colonne 4. Brevibacterium flavum ATCC 21493; voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 5-3793, page 3, tableau 1. Corynebacterium glutamicum ATCC 21659; voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 5-3793, page 3, tableau 1. (vii) Hôtes que l'on préfère pour produire de la L-proline: Brevibacterium lactofermentum AJ 11225 (FERM P-4370); voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 60-87788, page 473, colonne de gauche en haut. Brevibacterium flavumr AJ 11512 (FERM P-5332); voir demande de brevet japonais publi6e n 62-36679, page 185, colonne 2. Brevibacterium flavum AJ 11513 (FERM P-5333); voir demande de brevet japonais publiée n 62-36679, page 185, colonne 2. Brevibacterium flavum AJ 11514 (FERM P-5334); voir demande de brevet japonais publiée n 62-36679, page 185, colonne 2. Corynebacterium glutamicuram AJ 11522 (FERM P-5342); voir demande de brevet japonais publiée n 62-36679, page 185, colonne 2. Corynebacterium glutamicum AJ 11523 (FERM P-5343); voir demande de brevet japonais publiée n 62-36679, page 185, colonne 2. (viii) Hôtes que l'on préfere pour produire de la L-histidine Brevibacterium flavum AJ 3420 (FERM P-2316); voir brevet U.S. n* 5 294 547. Brevibacterium flavum AJ 12425 (FERM BP-2212); voir brevet U.S. n 5 294 547. Corynebacterium glutamicum AJ 12092 (FERM P-7273); voir brevet U.S. n 5 294 547. Corynebacterium glutamicum AJ 12426 (FERM BP-2213); voir brevet U.S. n 5 294 547. (ix) Hôtes que l'on préfere pour produire de la L-valine Brevibacterium lactofermentum AJ 3434 (FERM P-1845); voir brevet U.S. n 5 188948. Brevibacterium lactofermentum AJ 12341 (FERM BP-1763); voir brevet U.S. n 5 188948. Corynebacterium glutamicum AJ 3776 (FERM P-2601); voir brevet U.S. n 5188948. Corynebacterium glutamicum AJ 12342 (FERM BP-1764); voir brevet U.S. n 5 188948. (x) Hôtes que l'on préfere pour produire de la L-leucine: Brevibacterium lactofermentum AJ 3452 (FERM P-1965); voir brevet U.S. n 3970519. Brevibacterium lactofermentum AJ 3719 (FERM P-2517); voir brevet U.S. n 3 970 519. Corynebacterium glutamicum AJ 3453 (FERM P-1966); voir brevet U.S. n 3 970 519. Corynebacterium glutamicum AJ 3455 (FERM P-1968); voir brevet U.S. n 3970519. (xi) Hôtes que l'on préfèere pour produire de la L-phénylalanine: Brevibacterium lactofermentum AJ 12637 (FERM BP-4160); voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 5-49489. Corynebacterium acetoacidophilum AJ 11761 (FERM P-6286); voir demande de brevet japonais publiée n' 2-11235. Corynebacterium acetoacidophilum AJ 12638 (FERM P-12382); voir demande de brevet japonais publice n 2-11235. (xii) Hôtes que l'on préfère pour produire de la L-glutamine: Brevibacterium flavum AJ 12418 (FERM BP-2205); voir brevet U.S. ne 5 294 547. Corynebacterium acetoacidophilum AJ 12419 (FERMBP-2206); voir brevet U.S. n 5 294 547. (xiii) Hôtes que l'on préf/re pour produire de l'acide 5'-inosinique: Brevibacterium ammoniagenes AJ 12192 (FERM P-7949); voir demande de brevet japonais publiée n 5-998. Corynebacterium equi AJ 11347 (FERM P-4968); voir demande de brevet japonais publiée n 57-22558. Corynebacterium equi AJ 11350 (FERM P-4971); voir demande de brevet japonais publiée n 57-22558. Corynebacterium equi AJ 11352 (FERM P-4973); voir demande de brevet japonais publiée n' 57-22558. Pour introduire le vecteur ou l'ADN recombiné comprenant un gène codant une protéine ayant une activité de saccharase dans les bactéries coryneformes mentionnécs ci-dessus, il est possible d'utiliser des procédés bien connus tels que le procèdê aux protoplastes (Gene, Vol. 39, pages 281-286 (1985)) ou le procédé d'électroporation, (Bio/Technology, Vol. 7, (1989); demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 2-207791), etc. Le procédé de culture des hôtes mentionnés ci-dessus qui contiennent le vecteur ou l'ADN recombiné n'est pas nécessairement différent des procédés conventionnels de culture de micro organismes producteurs de Laminoacides. Par exemple, le milieu utilisé pour la culture peut être un milieu conventionnel quelconque contenant des sources de carbone, des sources d'azote, des ions inorganiques et, si on le souhaite, des nutriments organiques mineurs tels que des acides aminés ou des vitamines, par exemple. Les sources de carbone typiques comprennent le glucose et le saccharose ainsi que les hydrolysats liquides d'amidon et les mélasses. Cependant, il est avantageux selon la présente invention de réaliser la culture dans un milieu contenant du saccharose comme source de carbone. En effet, la vitesse de production de L-aminoacides et d'acides nucléiques augmente de manière remarquable par rapport aux procédés antérieurs dans le cas de la fermentation de matières premières contenant du saccharose telles que des mélasses de canne à sucre et des mélasses de betteraves à sucre. Comme sources d'azote, on peut utiliser par exemple l'ammoniac, l'ammoniaque, des sels d'ammonium. Lorsque l'on utilise comme hôtes des souches mutantes du point de vue nutritionnel qui exigent des aminoacides, il est nécessaire d'ajouter au milieu de culture des nutriments tels que des aminoacides qui sont ndécessaires pour les souches. De préférence, la culture est réalisée dans des conditions aérobies, le pH de la culture étant maintenu entre 6,0 et 8,0 et la température de fermentation étant maintenue entre 25C et 40'C, jusqu'à la fin de la production et de l'accumu- lation du L-aminoacide ou de l'acide nucléique voulu. Pour recueillir le L-amino- acide ou l'acide nucléique ainsi accumulé dans la culture, il est possible d'utiliser un procédé courant quelconque tel que des procédés de cristallisation ou d'échange d'ions. La présente invention va maintenant être décrite de manière plus précise à l'aide des exemples non limitatifs suivants. EXEMPLET Construction d'une banfue gnomioue De l'ADN chromosomique a été préparé à partir de Brevibacterium lactofermentum ATCC 13869 selon le procédé de Saito-Miura (Biochem. Biophys. Acta., Vol. 8278, pages 619-629 (1963)). Environ 100 pg de l'ADN ainsi préparé ont été digérés partiellement avec &I3Al et introduits dans un gradient de densité de saccharose de 10 à 40 %, puis soumis à une ultracentrifugation à 22 000 tr/min pendant 22 h à 20'C. Le fond du tube a été percé avec une aiguille pour permettre le soutirage de portions aliquotes de 1 ml afin d'obtenir une fraction d'environ 1 500 à 6 000 paires de base (pb). Cette fraction a été dialysée contre du tampon TE (Tris 10 mM, EDTA 1 mM, pH 8,0) et ligaturée à l'aide de l'ADN ligase de T4 avec le vecteur pUC18 qui avait été coupé avec]1mHI. Des cellules de Escherichia coli JM 109 ont été transformées avec l'ADN résultant, ce qui a conduit à une banque génomiquc comprenant environ 10 000 clones. Formation de sondes Les séquences de bases des gènes de la saccharase, de la lévanase et de l'invertase mentionnés ci-dessous ont déjà été déterminées. Il s'agit des gènes de la lévanase (Mol. Genet., Vol. 208, pages 177-184 (1987)) et de la saccharase (Gene, Vol. 45, Pages 221- 225 (1986)) provenant de Bacillus subtilis, de la saccharase provenant de Streptococcus mutans (Infect. Immun., Vol. 56, pages 1956-1960 (1988)), de l'invertase provenant de Saccharomyces cerevisiae (Nucleic Acids Res., Vol. 11, pages 1943-1954 (1983)), de la saccharase provenant de Zymomonas mobilis (J. Bacteriol., Vol. 172 (1990), pages 6727-6735), et de la saccharasc provenant de Vibrio alginolyticus (Gene, Vol. 60, pages 49-56 (1989)). Les séquences de ces gènes sont partiellement homologues entre elles (J. Bacteriol., Vol. 172, pages 6727-6735 (1990)). Sur la base de ces informations, des ADN ayant les séquences de bases n 1, 2 et 3 ci-dessous ont été synthétisés au moyen d'un synthétiseur d'ADN et utilisés comme sondes. - séquence n' 1: GGGCCGTAA ATGACCCAAA TGGG longueur: 24 paires de bases - séquence n 2: TACATGTGGG AATGCCCTGA TITG longueur: 24 paires de bases - séquence n 3: GATCAAGG1T TGATITITA CGCGCCGCAA ACA longueur: 33 paires de bases aXkm La banque ainsi formée a été utilisée pour une hybridation sur colonies dans le but de sélectionner les colonies qui s'hybrident avec les sondes, selon le procédé de Derck (FOCUS, Vol. 6, pages 1-4 (1984)). La température d'hybridation était de 50C et la température de lavage des filtres était de 48C. Le clone qui s'hybridait avec chaque sonde a été cultivé dans 100 ml de milieu M9 (Molecular Cloning, 2ème Ed., Cold Spring Harbor Press (1989); Maniatis et al., A.3). Les cellules recueillies ont été lavées avec du sérum physiologique à 0,9 %, puis mises en suspension dans 5 ml de tampon phosphate de sodium 0,1 M (pH 7,3) pour être ensuite lysées par traitement aux ultrasons. La suspension a ensuite été centrifugée à 33 000 tr/min pendant 1 h pour séparer le surnageant et former un extrait brut. 150 l de cet extrait brut ont été mélangés avec 50/zl de saccharose 0,5 M et mis à réagir à 30'C pendant 1 h puis chauffés à 100*C pendant 3 min pour inactiver l'enzyme. Le glucose produit a été détecté à l'aide du test Glucose C Wako (produit par la sociégé Wako Pure Chemicals), pour déterminer l'activité de saccharase. La souche d'un clone détecté à l'aide de la sonde présentant la séquence n 2 manifestait une forte activité de saccharase (tableau 1 ci-dessous). Le tableau 1 montre l'activité de saccharase (sous forme d'activité relative) par mg de protéine. Une unité est définie comme étant l'activité nécessaire pour produire 1 mg de glucose en 1 h à 30 C. Le plasmide présent dans la souche manifestant l'activité de saccharase est appelé pBS3-43. TAB.EAU 1 Plasmide/hôte Activité de saccharasc (unités/mg de protéine) pUC18/JM109 0 pBS3-43/JM109 3,1 Analyse du clone Un fragment SminaI d'environ 6 kb a été retiré de l'ADN inséré par clivage et a été inséré dans le site SmaI de pSAC4, un vecteur navette pour Escherichia coil et pour les bactéries coryneformes qui confere à l'hôte une résistance au chloramphénicol. Le plasmide résultant a été appelé pSSM30 et ce plasmide exprimait une activité de saccharase dans Escherichia coli (données non représentées). Les cellules Escherichia coli JM109 contenant le plasmide pSSM30 ont été appelées AJ13047 et déposées conformément au traité de Budapest auprès du National Institute of Bioscience and Human-Technology, Agency of Industrial Science and Technology, 1-3, Higashi 1 chome, Tsukuba-shi, Ibarakiken 305, Japon, sous le numéro de dépôt FERM BP-4800. Des cellules de Brevibactenrium lactofermentum ATCC13869 ont été tarnsformées avec pSSM30 par électroporation (demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 2-207 791). Le transformant contenant pSSM30 a été appelé ATCC13869/pSSM30. Celui-ci a été cultivé dans 100 ml de milieu CM2G (extrait de levure 10 g/l, polypeptone 10 g/l, glucose 5 g/l, NaCI 5 g/l, pH 7,0). Les cellules recueillies ont été lavées avec du sérum physiologique à 0,9 % puis mises en suspension dans 5 ml de tampon phosphate de sodium 0,1 M (pH 7,3) et ensuite lysées par traitement aux ultrasons. La suspension a ensuite été centrifugée à 100000G pour séparer le surnageant et former un extrait brut. 150,dl du surnageant ont été mélangés avec 50 1d de saccharose 0,5 M et mis à réagir à 30'C pendant 1 h puis chauffés à 100'C pendant 3 min pour inactiver l'enzyme. Le glucose produit a été détecté à l'aide du test Glucose C Wako (produit par la société Wako Pure Chemicals), pour déterminer l'activité de saccharase. Comme Brevibacterium lactofermentum ATCC13869 présente initialement une activité de saccharase à l'intérieur de ses cellules, le transformant danslequel Brevibacterium lactofermentum ATCC13869 est l'hôte et pSAC4 est le plasmide a été utilisé comme témoin. Le résultat est représenté dans le tableau 2 ci-dessous. Le tableau 2 montre l'activité de saccharase (sous forme d'activité relative) par mg de protéine. Comme le montre le tableau 2, l'activité de saccharase de la souche contenant pSSM30 était renforcée. TABLEAU 2 Hôte/plasmide Activité de saccharase (unités/mg de protéine) ATCC13869/pSSM30 5,7 ATCC13869/pSAC4 0,72 Détermination de la séquence de bases Environ 7 kb des fragments d'ADN comprenant le fragment SmaI mentionné ci-dessus qui a été inséré dans pSSM30 ont été séquences par un procédé de marquage fluorescent pour déterminer leur séquence de bases. La séquence obtenue est la séquence n 4 représentée ci-dessous: - séquence n 4: AGTCCGTCGA CGCCACCATT GATGTGGTGG TCACCGAGCT TGCGGAGGCT TTCTACATCT ACGCTCCCGT CGGCGTGGAG TGGGGTCATT ACGGGTGGGA TCACGCCGGT GAAAGTTGCG GAACCCATGG TGTTCCTTGT GGGTTGAGGG AACGAGTGCG GGTGAGAAGT TTTTCAAGTG TCTGCAGTTT TTAAGTTATG CATCATCAGC TTGGAAGGCT GAGGTAATTC AGTAGACCTG CAACAGCAGG CCTCAAGTCC GAAGATAATT AACCTAGATC CGTAGACATA AGACATCATA CGTCCTATGC TTGCTGGAAG GAACCAAATA ACCTCAGAAA GATGGCAGAA GTGGTGCATT ATCAAGAAAA TGCAGGTCAA GCAGTTAAAA AAATTGAGGG AAGAATTGTT CCCCCCCTCG GGGTGATTGA TGGCTTTCTC CAACTCGAAA ACGGCATCAT CACGGAACTC TCTGGAGAAC CAGCACCTAA AAACGCAGGA TTCCACCCCG AACTCCCCAC GATTGTTCCC GGTTTTATTG ATCTTCATAA TCACGGTGGA PACGGTGGCG CGTTTCCTAC GGGAACGCAG GACCAGGCGA GGAACACCGC GCAGTATCAC CGCGAACATG GCACGACCGT GATGTTGCCA AGCATGGTTT CGGCGCCGGC TGACGCACTG GCAGCGCAGG TGGAAAACCT TATTCCCTTG TGTGAAGAGG TCCTGCTGTG CGGCATTCAC CTCGAGGGCC CTTTCATCAA CGCATGCCGT TGTGGTGCTC AAAACCCGGA TTTCATTTTT CCCGGCAACC CAACAGATCT TGCCCGGGTG ATCCATGCGG GAAAAGGTTG GATCAAATCG ATCACAGTAG CGCCGGAAAC TGACAATCTT TCTGAGCTTC TCGATCTCTG CGCAGCGCAC CACATCATTG CTTCCTTCGG GCACACTGAT GCAGATTTTG ATACCACTAC CAGCGCAATT GCCTTGGCTA AAGAGAAAAA TGTGACGGTC ACGGCTACGC ATTTGTTCAA TGCGATGCCT CCGCTGCATC ATAGGGCTCC CGGCAGCGTG GGCGCTTTGC TTGCTGCGGC ACGTGCCGGG GACGCATATG TTGAGTTGAT CGCCGACGGC GTGCATTTGG CCGATGGAAC GGTCGATCTA GCTCGTTCCA ACAACGCCTT TTTCATCACG GACGCCATGG AAGCCGCCGG AATGCCAGAC GGTGAGTACA TTTTGGGCGT TTTGAACGTC ACCGTCACCG ATGGAGTCGC-CCGTCTGCGC GATGGCGGCG CCATCGCCGG GGGCACCAGC ACACTAGCGA GTCAGTTCGT GCACCACGTG CGCAGGGGTA TGACGCTTAT CGACGCGACC CTCCACACCT CAACCGTCGC CGCTAAAATT CTCGGTCTTG GCGATCACGA AATCGCTAAA TCCAACCCTG CAAATTTTGT GGTCTTTGAC TCAAACGGCC AGGTGCAAAA GGTCCATTTA GGTCATCAAG TACTTTAAGT ACGAGTAAAA CTATCCTGAT TTTAAAGGAG TCCCACCATG GAAATCACTA TCTGCAAAGA CGAGCAAGAA GTCGGCAAAG CAGTTGCAGT CCTAATCGCA CCCTTCGCCA ACAAGGGTGG AACCTTGGGG CTTGCAACAG GATCCTCACC ACTGAGTACC TACCAAGAGC TCATTCGCAT GTATGAAGCT GGGGAAGTGT CATTCAAGAA CTGCAAGGCA TTCTTGTTGG ATGAATACGT GGGACTAACC CGTGACGATG AAAACAGCTA CTTTAAAACC ATTCGCAAAG AGTTCACTGA CCACATCGAC ATCGTTGATG AAGAGGTCTA CAGCCCAGAT GGTGCAAACC CTGATCCATA CGAAGCAGCT GCAGAGTATG AGGCAAAGAT CGCTGCAGAA TCCGTTGAAG TTCAAATCCT TGGCATCGGC GGAAACGGCA CATCGCTTTC ATTGAACCAT CATCTTCTCT GTCAGGACTG ACAAAGGTCC AGGCGCTGCA CCCTAAAACT GTGGAGGACA ACGCTCGATT CTTCAACACC ATCGAAGAGG TCCCAACCCA CGCCGTCACC CAGGGTTTGG GCACTTTGTC CCGCGCGCAA AACATCGTGT TGGTGGCAAC TGGTGAAGGA AAAGCCGACG CCATCCGCGG AACTGTGGAA GGCCCAGTGA CTGCTTCTTG CCCAGGTTCC ATCCTGTAGA TGCACAACAT GCCACCATCA TCGTTGGATG AAGCAGCAGT ATCCAAGCTG GAAAACGCTG ATCACTACCG TCTCATGGAG CAATTAAAGC TGCGCTAGAA ACAAAAAGGA AAGTACTGTG TGGGGCTATG CACACAGAAC TTTCCAGTTT GCGCCCTGCG TACCATGTGA CTCCTCCGCA GGGCAGGCTC AATGATCCCA ACGGAATGTA CGTCGATGGA GATACCCTCC ACGTCTACTA CCAGCACGAT CCAGGTTTCC CCTTCGCACC AAAGCGCACC GGCTGGGCTC ACACCACCAC GCCGTTGACC GGACCGCAGC GATTGCAGTG GACGCACCTG CCCGACGCTC TTTACCCGGA TGCATCCTAT GACCTGGATG GATGCTATTC CGGTGGAGCC GTATTTACTG ACGGCACACT TAAACTTTTC TACACCGGCA-ACCTAAAAAT TGACGGAAAG CGCCGCGCCA CCCAAAACCT TGTCGAAGTC GAGGACCCAA CTGGGCTGAT GGGCGGCATT CATCGCCGTT CGCCTAAAAA TCCGCTTATC GACGGACCCG CCAGCGGTTT CACACCCCAT TACCGCGATC CCATGATCAG CCCTGATGGT GATGGTTGGA ACATGGTTCT TGGGGCCCAA CGCGAAAACC TCACCGGTGC AGCGGTTCTA TACCGCTCGA CAGATCTTGA AAACTGGGAA TTCTCCGGTG AAATCACCTT TGACCTCAGT GATGCACAAC CTGGTTCTGC TCCTGATCTC GTTCCCGATG GCTACATGTG GGAATGCCCC AACCTTTTTA CGCTTCGCGA TGAAGAAACT GGCGAAGATC TCGACGTGCT GATTTTCTGT CCACAAGGAT TGGACCGAAT CCACGATGAG GTTACTCACT ACGCAAGCTC TGACCAGTGC GGATATGTCG TCGACAAGCT TGAAGGAACG ACCTTCCGCG TCTTGCGAGG ATTCAGCGAG CTGGATTTCG GCCATGAATT CTACGCACCG CAGGTTGCAG TAAACGGTTC TGATGCCTGG CTCGTGGGCT GGATGGGGCT GCCCGCGCAG GATGATCACC CAACAGTTGC ACAGGAAGGA TGGGTGCACT GCCTGACTGT GCCCCGCAAG CTTCAITTGC GCAACCACGC GATCTACCAA GAGCTCCTTC TCCCAGAGGG GGAGTCGGGG GTAATCAGAT CTGTATTAGG TTCTGAACCT GTCCGAGTAG ACATCCGAGG CAATATTTCC CTCGAGTGGG ATGGTGTCCG TTTGTCTGTG * GATCGTGATG GTGATCGTCG CGTAGCTGAG GTAAAACCTG GCGAATTAGT GATCGCGGAC GATAATACAG CCATTGAGAT AACTGCAGGT GATGGACAGG TTTCATTCGC TTTTCCGGGC CTTCAAAGGT GACACTATTG AGAGATAAGT CATATAAAAG GGTCTTTTGT GGCGAATTGT ACAAATACTT CGCAAAATCC CTTGATCTAG TTATTGTCAC TGATGACAAC CCTCGTTCAG AGGTGCCTGC CACGATTCGC GCAGCAGTCA CTGCAGGAGC ACAGCAGGGT GCTTCAGAGT CCGAACGACC GGTGGAAGTC CTAGAAATTG GTGACCGTGC AGAAGCAATT CGCGTTTTGG TCGAGTGGGC ACAGCCTGGA GATGGCATTG TAGTAGCTGG AAAAGGCCAT GAAGTTGGAC AACTAGTTGC TGGTGTCACC CACCATTTTG ATGACCGCGA AGAAGTTCGC GCTGCTTTGA CAGAAAAGCT CAACAATAAA CTTCCCCTTA CTACGGAAGA AGGATAGGCC ACAGTCATGA TCACAATGAC CCTTGGGGAA ATCGCTGACA TCGTTGGAGG CAGGCTTACT GGCGGTGCTC AAGAAGATAC GCTTGTGAGC TCCAGCGTGG AATTTGATTC TCGATCCCTC ACACCGGGTG GCTTGTTTTT AGCACTTCCG GGTGCTCGTG TAGACGGGCA TGATTTTGCT GCAACTGCAA TTGAGAAAGG TGCGGTCGCA GTATTGGCAG CCCGTGAGGT TGACGTACCT GCGATCGTCG TGCCTCCAGT AAAAATCCAG GAATCCAATG CTGACATTTA TGCTCATGAT CCAGATGGGC ATGGCGCGGC GGTAGTGGAG GCGTTGGTCT CGGTTGGCTC GCCACGTGGT GGATATCTGC GTGGATGGCC ATCAATTGAA CGTTGTGGCT ATTACTGGTT CTGTGGGAAA GACTTCTATG AAGGATTTCA TCGCGACGGT TCTTGGCCAA GATGGGCCAA CTGTGGCTCC TCCGGGCTCG TTTAACAATG AGCTTGGTTT GCCACACACC GCGCTCCGCT GCACAACCGA TACTAAGTAT TTGGTGGCTG AGATGTCCGC GCGTGGCATT GGACATATTA AGCACCTGAC AGAGATTGCT CCGCCACGGA TTGCAGCTGT GCTCAACGTC GGCCATGCGC ACCTGGGTGA ATTTGGATCC CGCGAGAATA TCGCGCAGGC AAAAGGCGAG ATCATTGAAG CGCTGCCCTC GAAGAAAACG GGTGGGGTAG CAGTCCTTAA CGCTGACGAT CCTTTTGTCG CCCGGATGGC TCCACGCACT AAGGCGCGCG TGGTGTGGTT TACCACCGAT GCAGGTCAAG CAAAAAAGTC TGATTATTGG GCAACGAGTA TTTCACTGGA CGCTGTTGCG CGGGCAAGCT TTACGCTGAA CACGAAGGAC GGGTCTTGGC CGGTCGCCCT GCAGGTTTTT GGTGAGCACC AGGTTGCTAA TGCACTTGCT GCTGCTGCCA TTGCCATGGA AGCTGGCGTC GCCCCAGAAT TGGTGGTTGC TGGATTGGAA GCACATTCAG CGGCTTCCGC GCACCGCATG GATGTAAAGA CCCGCGCCGA CGGCGTGACC ATCATCAACG ATTCTTACAA CGCGAATCCT GATTCTATGC GTGCAGGTAT CGCGGCTCTT GCGTACACAG CTAGTGGTCG TTCTCTGAAG CAACAAGCTG GGCAGTGCTT GGTCAAATGG GTGAGCTTGG CGATGACGCC TCGGAAGCCC ATGCCGAACT TGGTGCTGAG CTGCCTAAAT ACAATGTTCA AGAACTTGTC GCAGTGGGGG AGAACCCTAC CTGTGCAGCA CTTGCAGAGT CCGCAGCGAG CCTGGGTGTG AGTACTCACG TAGTTTCAGA CGTTGATGCA GCGCTCGAGT TGCTCGCAGC CCATATTAAG CGGGATGATG TAGTGCTGGT TAAGGCTTCA AATGCTGATC GCCTGTGGAG GGTCGCAGAA GCACTACATG GCATGGTGCC GGCCTCAAAA ACACAGGTGG CTCGGTCAAC GACGATTCTC GTCGGAACGT GGAAGGACAG TAGAAAACAA TGCAACAGAT TATGGTCAGT GGAACGGTTG CGTTCCTCGT CTCAATCTTT CTCACCCCGG TGTTGATCCG TTATTTCACT AACCGCCAGT TGGGCCAGGA AATCCGTGAA GAAGGCCTGC AGTCTCACTT GCGTAAGCGT GGCACTCCAA CCATGGGTGG CATTGCGATT ATCGCGGGCA TTGTTGTGGC CTATGTGTTT ACCAATATCT TGGCCATGAT CCAAGGCGTT GGTGGATTCA CAGTCTCCGG CTTGCTCGTG TTGGGTCTGA CCTTGGGCCT TGGTGCCACT GGCTTCGCCG ATGACTTCAT CAAGCTGTAC ATGAACCGAA ACCTTGGTTT GAACAAGACC GCTAAGCTGG TGTCTCAGCT GGCCATTGCG TTGATCTTTG GTTTTTTGGT ACTGCAGTTT CCCGATGAAA ACGGTCTGAC CCCAGCATCA ACCCACCTGT CATTCATTCG CGATATCGAC ACCATTGACC TTGGCTTCGG GGACAGCGTT TTTGGCATCA TCGTGTTCCT CATTTTTATC TACGTTGTGG TCAGCGCGTG GTCGAATGCC GTGAACATCA CTGATGGTTT GGATGGTTTG GCTGCAGGTA CCACAGCATT TGTCATGGGT GCTTACACCT TGATCACGTT CTGGCAGTTC CGAAACTCCT GCGATACTGC AGTGGAAGCG GGTTGCAATA CGGTGCGTGA TCCACTGGAT TTGTCTGTGT TGTGCGCTGC TGGTCTGGCG CCACCTTGGG CTTTCTGTGG TGGAATGCGG CACCGACAAA GATCTTCATG GGCGATACTG GTTCTTTGGC ACTGGGCGGT TTGGTTGCAG GTATTTCTGT GGTTAGCCGC ACCGAGCTGC TCATGGTTAT CATCGGCGCG CTGTTTGTCA TTGAGGTCGC TTCTGTTGCG ATCCAGATCG GCGTGTTTAA GACCCGCGGT AAGCGTGTGT TCAAAATGGC TCCGATCCAC CACCACTTCG AGGCCCTTGG GTGGACTGAA ACTACCGTGA CCATCCGTTT CTGGCTGATC ACGATCATGA CTGTGTTGGC GGGTGTCGGT GTGTTTAACA GCGACTGGCT CCACTTAGCG GAGGTATAAA TAATTATGGT TTCTCTGTCC CATTTACCTC AGGCGCTGCA GGGCCGTATT CTTGTGGCCG GCGCTGGTGT TTCCGGCCTG TCCATAGCAA AGATGCTCAG TGAGTTGCAT TGCGATGTTG TGGTCACCGA CGAGAACGAA ACTGCACGTC ACATGCTCAT TGAAGTAGTA GACGTTGCAG ATATCAGCAC CGCCCAGGCT CAGGAACAGC TGGATTCTTT CTCCATTGTG GTCACCTCCC C longueur: 6911 paires de bases. Il existe quatre cadres de lecture ouverts (CLO) dans cette séquence (CLO-F1: de 342 à 1 505, CLO-F2: de 2 338 à 3 609; CLO-F3 de 4 438 à 5 358 CLO-F4 de 5 570 à 6 577). Sur la base de l'homologie entre le gène et un gène de saccharase connu, le gène de structure de la saccharase est supposé être CLO-F2 qui code 424 acides aminés. Les autres cadres de lecture ouverts supposés ont été examinés pour détecter l'homologie, si tant est qu'il y en ait, à l'aide de la base de donnces concernant les protéines NBRF et les résultats présentés dans le tableau 3 ci-dessous ont été obtenus. On a constaté que CLO-F3 et CLO-F4 présentaient entre eux une grande homologie. TABLEAU 3 CLO n Nombre Degré d'acides Nom d'homologie aminés (protéine homologue de type différent) (%) Fl 388 N- acétylglucosamine-6-phosphate 24 désacétylase E. coli (382aa) F3 307 UDP-N-acétylmuramoylalanyl-D- 36 glutamyl-meso-6-diaminopimélate synthétase B. sub. (494a.a) F4 336 phospho-N-ac6tylmuramoylpentapeptide 39 transférase B. sub. (324a.a) EXEMPLE 2 Introduction d'un plasmide portant le gène de la saccharase dans des bactéries gproductrices de L-lysine. Le plasmide pSSM30 portant le gène de saccharase a ét6 préparé à partir de Escherichia coli AJ13047 (FERM BP-4800) et introduit dans des bactérics productrices de L-lysine de la souche Brevibacterium lactofermentum AJ 11082 (NRRL B-11470) par électroporation (voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n* 2-207791). Les cellules ont été cultivées sur une boîte de M-CM2G (contenant 5 g de glucose, 10 g de polypeptone, 10 g d'extrait de levure, 5 g de NaCI, 0,2 g de DL-méthionine et 15 g d'agar par litre d'eau distillée et ayant un pH de 7,2) contenant 5 Wg/ml de chloramphénicol, afin dc sélectionner le transformant voulu qui a été appelé AJ 11082/pSSM30. Production de L- lysine à partir de saccharose à l'aide de bactéries contenant un g-nc de saccharse amplifié Des cellules AJ 11082 et AJ 11082/pSSM30 ont été cultivées séparément dans un milieu contenant du saccharose pour produire de la L-lysine par fermentation. Les cellules ont été introduites dans un fermnnenteur de 1 1 contenant 300 mi d'un milieu pour la production de lysine contenant du saccharose comme source de carbone (c'est-à-dire contenant 100 g de saccharose, 55 g de (NH4)2SO4, 1 g de KH2PO4, 1 g de MgSO4.7H20, 50ml d'hydrolysat de protéines de soja, 10 mg de FeSO4.7H20, 10 mg de MnSO4.4H20 et 5 mg d'amide d'acide nicotinique par litre d'eau distillée) et la culture a été réalisée à 31,5'C et à pH 7,0 (ajusté avec de l'ammoniac gazeux) sous agitation et aération. Lorsque le saccharose ajouté initialement au milieu a été totalement consommé par les cellules, un mélange comprenant 60 g/dl de saccharose et 8 g/dl de sulfate d'ammonium, qui avait été stérilisé séparément, a été introduit en continu dans le fermenteur de sorte que la concentration du saccharose dans la culture a été contrôlée de manière à être située dans le domaine de 1 g/dl à 3 g/dl. La culture a été prolongée jusqu'à ce que 150 ml de solution introduite soient consommés. Le tableau 4 ci-dessous indique la durée de culture et la quantité de L- lysine accumulée. Du fait de l'amplitification du gène de la saccharase, la vitesse à laquelle la L-lysine a été produite par fermentation du saccharose était sensible- ment accrue. Apres la culture, une enzyme brute a été extraite des cellules par un procédé connu et son activité de saccharase a été mesurée. Ce résultat est représenté également dans le tableau 4. ABF- Souche Durée de Quantité de L-lysine Activité de saccharase culture (h) accumulée (g/dl) (unités/mg de protéine) AJ11082 65 9,5 0,35 AJ11082/pSSM30 34 9,4 3,54 EXEMPLE3 Introduction d'un plasmide contenant le gène de la saccharase dans une souche sauvage de Brevibacterium lactofermentum Le plasmide pSSM30 contenant le gène de la saccharase a été introduit par électroporation dans une souche sauvage de Brevibacterium lactofermentum ATCC 13869 (voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 2-207791). Les cellules ont été cultivées sur une boîte de M- CM2G (contenant g de glucose, 10 g de polypeptone, 10 g d'extrait de levure, 5 g de NaCI, 0,2 g de DL-méthionine et 15 g d'agar par litre d'eau distillée et ayant un pH de 7,2) contenant 5 ug/ml de chloramphénicol, afin de sélectionner le transformant voulu qui a été appelé ATCC 13869/pSSM30. Production d'acide L-glutamique à partir de saccharose à l'aide de bactéries à gne de la saccharase amplifié Des cellules ATCC 13869 et ATCC 13869/pSSM30 ont été cultivées séparément dans un milieu contenant du saccharose pour produire de l'acide L-glutamique par fermentation. Les cellules ont été introduites dans des fermenteurs de 1 1 contenant 300 ml d'un milieu pour la production d'acide L-glutamique contenant du saccharose comme source de carbone (c'est-à-dire contenant 100 g de saccharose, 15 g de (NH4)2S04, 2,5 g de KH2PO4, 0,4 g de MgSO4.7H20, 50 ml d'hydrolysat de protéines de soja, 10 mg de FeSO4.7H20, mg de MnSO4.4H20, 350 jug de thiamine.HCl et 3,5/g de biotine par litre d'eau distillée) et cultivées à 31,5'C et à pH 6,5 (ajusté avec de l'ammoniac gazeux) sous agitation et aération. Lorsque le saccharose ajouté initialement au milieu a été totalement consommé par les cellules, un mélange comprenant 60 g/dl de saccharose et 8 g/dl de sulfate d'ammonium, qui avait été stérilisé séparément, a été introduit en continu dans le fermenteur, de sorte que la concentration du saccharose dans la culture a été contrôlée pour être située dans le domaine de 1 g/dl à 3 g/dl. Ainsi, la culture a été prolongée jusqu'à ce que 150 ml de la solution introduite soient consommés. Le tableau 5 ci-dessous indique la durcée de culture et la quantité d'acide L-glutamique accumulée. Du fait de l'amplification du gène de la saccharase, la vitesse à laquelle l'acide L-glutamique a été produit par fermentation du saccharose était sensiblement accrue. TABLEAU 5 Quantité d'acide L- Souche Durée de culture (h) glutamique produite (g/dl) ATCC13869 45 10,7 ATCC13869/pSSM30 29 10,9 EXEMLE 4 Réduction d'un fragmnent de gène de la saccharase Pour identifier la région essentielle pour augmenter la vitesse de métabolisation du saccharose dans pSSM30, le fragment d'ADN a été réduit. Un fragment de gène d'environ 1,5 kb qui s'étend du site SacII qui commence à la 2 155e base au site UwiI qui commence à la 3 722ce base dans la séquence de bases n 4, qui contient le CLO-F2 supposé coder l'activité de saccharase, a été extrait de pSSM30 et ses deux extrémités ont ét6 rendues franches à l'aide de l'ADN polymérase de T4. Ce fragment a été introduit dans le site mI de pHSG399, un vecteur pour E. coli. De plus, pour rendre le plasmide réplicable dans des cellules de bactéries coryneformes, l'origine de réplication d'un plasmide de Corynebacterium glutamicum a été introduite. Plus précisément, du plasmide pHC4 (voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 5-7491) de Corynebacterium glutamicum contenant une origine de réplication a été extrait un fragment d'ADN de 3 kb contenant l'origine de réplication, ses deux extrémités ont été rendues franches à l'aide de l'ADN polymérase de T4 et ses sites de restriction ont été transformés en sites]l=HI à l'aide de lieurs. Ce fragment a été inséré dans le site flâm de pHSG399 ligaturé au gène de saccharase d'environ 1,5 kb. Le plasmide ainsi obtenu a été appelé pSSM30BS. EEMfEL 5 Introduction du plasmide à gène de saccharase réduit dans des bactéries produc- trices de L-lsine Le plasmide à gène de saccharase réduit pSSM30BS a été introduit dans une souche productrice de L-lysine de Brevibacterium lactofermentum AJ 11082 (NRRL B-11470) par électroporation (voir demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 2-207791). Les cellules ont été cultivées sur une boite de M-CM2G (contenant 5 g de glucose, 10 g de polypeptone, 10 g d'extrait de levure, 5 g de NaCa, 0,2 g de DL-méthionine et 15 g d'agar par litre d'eau distillée et ayant un pH de 7,2) contenant 5 ug/ml de chloramphénicol, afin de sélectionner le transformant voulu qui a été appelé AJ 11082/pSSM30BS. Production de L-lysine à prtir de saccharose à l'aide de bactéries à gène de saccharase réduit amplifié Des cellules AJ 11082 et AJ 11082/pSSM30BS ont été cultivées séparément dans un milieu contenant du saccharose pour produire de la L-lysine par fermentation. Les cellules ont été introduites dans un fermenteur de 1 1 contenant 300 ml d'un milieu de production de lysine contenant du saccharose comme source de carbone (c'est-à-dire contenant 100 g de saccharose, 55 g de (NH4)2S04, 1 g de KH2PO4, 1 g de MgSO4.7H20, 50 ml d'hydrolysat de protéines de soja, 10 mg de FeSO4.7H20, 10 mg de MnSO4.4H20 et 5 mg d'amide d'acide nicotinique par litre d'eau distillée) et la culture a été réalisée à 31,5'C et à pH 7,0 (ajusté avec de l'ammoniac gazeux) sous agitation et aération. Lorsque le saccharose ajouté initialement au milieu a été totalement consommé par les cellules, un mélange comprenant 60 g/dl de saccharose et 8 g/dl de sulfate d'ammonium, qui avait été stérilisé séparément, a été introduit en continu dans le fermenteur de manière que la concentration du saccharose dans la culture puisse être contrôlée afin d'être située dans le domaine de 1 g/dl à 3 g/dl. La culture a été prolongée jusqu'à ce que 150 ml de solution ajoutée soient consommés. Le tableau 6 ci-dessous indique la durée de culture et la quantité de L- lysine produite. Du fait de l'amplification du gène de la saccharase, la vitesse à laquelle la L-lysine a été produite par fermentation du saccharose était notablement accrue. Après la culture, une enzyme brute a été extraite à partir des cellules et son activité de saccharase a été mesurée. Le résultat obtenu est représenté aussi dans le tableau 6. TA LAU 6 Souche Durée de Quantité de L-lysine Activité de saccharase culture (h) accumulée (g/dl) (unités/mg de protéine) AJ11082 67 9,9 0,39 AJ11082/pSSM30BS 35 9,5 4,10 EXEMPE 6L Introduction d'un plasmide à gène de la saccharase r&éduit dans une souche sauvage de Brevibacterium lactofermentum Le plasmide pSSM30BS à gène de la saccharase réduit a été introduit dans une souche sauvage de Brevibactenium lactofermentum ATCC 13869 par électroporation (voir la demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 2-207791). Les cellules ont été cultivées sur une boîte de M-CM2G (contenant g de glucose, 10 g de polypeptone, 10 g d'extrait de levure, 5 g de NaCI, 0,2 g de DL-méthionine et 15 g d'agar par litre d'eau distillée et ayant un pH de 7,2) contenant 5 ig/ml de chloramphénicol, afin de sélectionner le transformant voulu qui a été appelé ATCC 13869/pSSM30BS. Production d'acide L-glutamique à partir de saccharose à l'aide de bactéries à gène de la saccharase réduit amplifit Des cellules ATCC 13869 et ATCC 13869/pSSM30BS ont ét6 cultivées séparément dans un milieu contenant du saccharose pour produire de l'acide L-glutamique par fermentation. Les cellules ont été introduites dans un fermenteur de 1 I contenant 300 ml d'un milieu de production d'acide glutamique contenant du saccharose comme source de carbone (c'est-à-dire contenant 100 g de saccharose, 15 g de (NH4)2S04, 2,5 g de KH2PO4, 0,4 g de MgSO4.7H20, 50ml d'hydrolysat de protéines de soja, 10 mg de FeSO4.7H20, 10mg de MnSO4.4H20, 350 jg de thiamine.HCl et 3,5/lg de biotine par litre d'eau distillée) et la culture a été réalisée à 31,5 C et à pH 6,5 (ajusté avec de l'ammoniac gazeux) sous agitation et aération. Lorsque le sacchanrose ajouté à l'origine au milieu a été totalement consommé par les cellules, un mélange comprenant 60 g/dl de saccharose et 8 g/dl de sulfate d'ammonium, qui avait été stérilisé séparément, a été introduit en continu dans le fermenteur de manière que la concentration du saccharse dans la culture puisse être contrôlée afin d'&être situ&ée dans le domaine de 1 g/dl à 3 g/dl. Ainsi, la culture a été prolongée jusqu'à ce que 150 ml de solution introduite soient consommées. Le tableau 7 ci-dessous indique la durée de culture et la quantit6 d'acide L-glutamique produite. Du fait de l'amplification du gène de la saccharase, la vitesse à laquelle l'acide L-glutamique a 6t6 produit par fermentation du saccharose 6tait notablement accrue. TABLEAU 7 Quantité d'acide L- Souche Durée de culture (h) glutamique produite (g/dl) ATCC13869 43 10,2 ATCC13869/pSSM3BS 30 10,3 On voit d'après ce qui précède qu'il est possible selon l'invention d'obtenir un fragment d'ADN provenant de bactéries coryneformes et contenant un gène codant une protéine ayant une activité de saccharase et un ADN recombiné contenant ledit fragment d'ADN et susceptible d'amplification dans des bactéries coryneformes, d'améliorer l'activité d'assimilation du saccharose de bactéries coryneformes dans lesquelles cet ADN recombiné a été introduit et de produire efficacement des L- aminoacides et des acides nucléiques en une courte durée à l'aide de ces bactéries. REVENDICATIONS 1. Fragment d'ADN caractérisé en ce qu'il provient de bactéries coryneformes et en ce qu'il contient un gène codant une protéine ayant une activité de saccharase. 2. Fragment d'ADN selon la revendication 1 caractérisé en ce que le gène comprend la séquence qui s'étend de la 2 338e base à la 3 609e base de la séquence de bases suivante: AGTCCGTCGA CGCCACCATT GATGTGGTGG TCACCGAGCT TGCGGAGGCT TTCTACATCT ACGCTCCCGT CGGCGTGGAG TGGGGTCATT ACGGGTGGGA TCACGCCGGT GAAAGTTGCG GAACCCATGG TGTTCCTTGT GGGTTGAGGG AACGAGTGCG GGTGAGAAGT TTTTCAAGTG TCTGCAGTTT TTAAGTTATG CATCATCAGC TTGGAAGGCT GAGGTAATTC AGTAGACCTG CAACAGCAGG CCTCAAGTCC GAAGATAATT AACCTAGATC CGTAGACATA AGACATCATA CGTCCTATGC TTGCTGGAAG GAACCAAATA ACCTCAGAAA GATGGCAGAA GTGGTGCATT ATCAAGAAAA TGCAGGTCAA GCAGTTAAAA AAATTGAGGG AAGAATTGTT CCCCCCCTCG GGGTGATTGA TGGCTTTCTC CAACTCGAAA ACGGCATCAT CACGGAACTC TCTGGAGAAC CAGCACCTAA AAACGCAGGA TTCCACCCCG AACTCCCCAC GATTGTTCCC GGTTTTATTG ATCTTCATAA TCACGGTGGA AACGGTGGCG CGTTTCCTAC GGGAACGCAG GACCAGGCGA GGAACACCGC GCAGTATCAC CGCGAACATG GCACGACCGT GATGTTGCCA AGCATGGTTT CGGCGCCGGC TGACGCACTG GCAGCGCAGG TGGAAAACCT TATTCCCTTG TGTGAAGAGG TCCTGCTGTG CGGCATTCAC CTCGAGGGCC CTTTCATCAA CGCATGCCGT TGTGGTGCTC AAAACCCGGA TTTCATTTTT CCCGGCAACC CAACAGATCT TGCCCGGGTG ATCCATGCGG GAAAAGGTTG GATCAAATCG ATCACAGTAG CGCCGGAAAC TGACAATCTT TCTGAGCTTC TCGATCTCTG CGCAGCGCAC CACATCATTG CTTCCTTCGG GCACACTGAT GCAGATTTTG ATACCACTAC CAGCGCAATT GCCTTGGCTA AAGAGAAAAA TGTGACGGTC ACGGCTACGC ATTTGTTCAA TGCGATGCCT CCGCTGCATC ATAGGGCTCC CGGCAGCGTG GGCGCTTTGC TTGCTGCGGC ACGTGCCGGG GACGCATATG TTGAGTTGAT CGCCGACGGC GTGCATTTGG CCGATGGAAC GGTCGATCTA GCTCGTTCCA ACAACGCCTT TTTCATCACG GACGCCATGG AAGCCGCCGG AATGCCAGAC GGTGAGTACA TTTTGGGCGT TTTGAACGTC ACCGTCACCG ATGGAGTCGC CCGTCTGCGC GATGGCGGCG CCATCGCCGG GGGCACCAGC ACACTAGCGA GTCAGTTCGT GCACCACGTG CGCAGGGGTA TGACGCTTAT CGACGCGACC CTCCACACCT CAACCGTCGC CGCTAAAATT CTCGGTCTTG GCGATCACGA AATCGCTAAA TCCAACCCTG CAAATTTTGT GGTCTTTGAC TCAAACGGCC AGGTGCAAAA GGTCCATTTA GGTCATCAAG TACTTTAAGT ACGAGTAAAA CTATCCTGAT TTTAAAGGAG TCCCACCATG GAAATCACTA TCTGCAAAGA CGAGCAAGAA GTCGGCAAAG CAGTTGCAGT CCTAATCGCA CCCTTCGCCA ACAAGGGTGG AACCTTGGGG CTTGCAACAG GATCCTCACC ACTGAGTACC TACCAAGAGC TCATTCGCAT GTATGAAGCT GGGGAAGTGT CATTCAAGAA CTGCAAGGCA TTCTTGTTGG ATGAATACGT GGGACTAACC CGTGACGATG AAAACAGCTA CTTTAAAACC ATTCGCAAAG AGTTCACTGA CCACATCGAC ATCGTTGATG AAGAGGTCTA CAGCCCAGAT GGTGCAAACC CTGATCCATA CGAAGCAGCT GCAGAGTATG AGGCAAAGAT CGCTGCAGAA TCCGTTGAAG TTCAAATCCT TGGCATCGGC GGAAACGGCA CATCGCTTTC ATTGAACCAT CATCTTCTCT GTCAGGACTG ACAAAGGTCC AGGCGCTGCA CCCTAAAACT GTGGAGGACA ACGCTCGATT CTTCAACACC ATCGAAGAGG TCCCAACCCA CGCCGTCACC CAGGGTTTGG GCACTTTGTC CCGCGCGCAA AACATCGTGT TGGTGGCAAC TGGTGAAGGA AAAGCCGACG CCATCCGCGG AACTGTGGAA GGCCCAGTGA CTGCTTCTTG CCCAGGTTCC ATCCTGTAGA TGCACAACAT GCCACCATCA TCGTTGGATG AAGCAGCAGT ATCCAAGCTG GAAAACGCTG ATCACTACCG TCTCATGGAG CAATTAAAGC TGCGCTAGAA ACAAAAAGGA AAGTACTGTG TGGGGCTATG CACACAGAAC TTTCCAGTTT GCGCCCTGCG TACCATGTGA CTCCTCCGCA GGGCAGGCTC AATGATCCCA ACGGAATGTA CGTCGATGGA GATACCCTCC ACGTCTACTA CCAGCACGAT CCAGGTTTCC CCTTCGCACC AAAGCGCACC GGCTGGGCTC ACACCACCAC GCCGTTGACC GGACCGCAGC GATTGCAGTG GACGCACCTG CCCGACGCTC TTTACCCGGA TGCATCCTAT GACCTGGATG GATGCTATTC CGGTGGAGCC GTATTTACTG ACGGCACACT TAAACTTTTC TACACCGGCA-ACCTAAAAAT TGACGGAAAG CGCCGCGCCA CCCAAAACCT TGTCGAAGTC GAGGACCCAA CTGGGCTGAT GGGCGGCATT CATCGCCGTT CGCCTAAAAA TCCGCTTATC GACGGACCCG CCAGCGGTTT CACACCCCAT TACCGCGATC CCATGATCAG CCCTGATGGT GATGGTTGGA ACATGGTTCT TGGGGCCCAA CGCGAAAACC TCACCGGTGC AGCGGTTCTA TACCGCTCGA CAGATCTTGA AAACTGGGAA TTCTCCGGTG AAATCACCTT TGACCTCAGT GATGCACAAC CTGGTTCTGC TCCTGATCTC GTTCCCGATG GCTACATGTG GGAATGCCCC AACCTTTTTA CGCTTCGCGA TGAAGAAACT GGCGAAGATC TCGACGTGCT GATTTTCTGT CCACAAGGAT TGGACCGAAT CCACGATGAG GTTACTCACT ACGCAAGCTC TGACCAGTGC GGATATGTCG TCGACA-AGCT TGAAGGAACG ACCTTCCGCG TCTTGCGAGG ATTCAGCGAG CTGGATTTCG GCCATGAATT CTACGCACCG CAGGTTGCAG TAAACGGTTC TGATGCCTGG CTCGTGGGCT GGATGGGGCT GCCCGCGCAG GATGATCACC CAACAGTTGC ACAGGAAGGA TGGGTGCACT GCCTGACTGT GCCCCGCAAG CTTCATTTGC GCAACCACGC GATCTACCAA GAGCTCCTTC TCCCAGAGGG GGAGTCGGGG GTAATCAGAT CTGTATTAGG TTCTGAACCT GTCCGAGTAG ACATCCGAGG CAATATTTCC CTCGAGTGGG ATGGTGTCCG TTTGTCTGTG GATCGTGATG GTGATCGTCG CGTAGCTGAG GTAAAACCTG GCGAATTAGT GATCGCGGAC GATAATACAG CCATTGAGAT AACTGCAGGT GATGGACAGG TTTCATTCGC TTTTCCGGGC CTTCAAAGGT GACACTATTG AGAGATAAGT CATATAAAAG GGTCTTTTGT GGCGAATTGT ACAAATACTT CGCAAAATCC CTTGATCTAG TTATTGTCAC TGATGACAAC CCTCGTTCAG AGGTGCCTGC CACGATTCGC GCAGCAGTCA CTGCAGGAGC ACAGCAGGGT GCTTCAGAGT CCGAACGACC GGTGGAAGTC CTAGAAATTG GTGACCGTGC AGAAGCAATT CGCGTTTTGG TCGAGTGGGC ACAGCCTGGA GATGGCATTG TAGTAGCTGG AAAAGGCCAT GAAGTTGGAC AACTAGTTGC TGGTGTCACC CACCATTTTG ATGACCGCGA AGAAGTTCGC GCTGCTTTGA CAGAAAAGCT CAACAATAAA CTTCCCCTTA CTACGGAAGA AGGATAGGCC ACAGTCATGA TCACAATGAC CCTTGGGGAA ATCGCTGACA TCGTTGGAGG CAGGCTTACT GGCGGTGCTC AAGAAGATAC GCTTGTGAGC TCCAGCGTGG AATTTGATTC TCGATCCCTC ACACCGGGTG GCTTGTTTTT AGCACTTCCG GGTGCTCGTG TAGACGGGCA TGATTTTGCT GCAACTGCAA TTGAGAAAGG TGCGGTCGCA GTATTGGCAG CCCGTGAGGT TGACGTACCT GCGATCGTCG TGCCTCCAGT AAAAATCCAG GAATCCAATG CTGACATTTA TGCTCATGAT CCAGATGGGC ATGGCGCGGC GGTAGTGGAG GCGTTGGTCT CGGTTGGCTC GCCACGTGGT GGATATCTGC GTGGATGGCC ATCAATTGAA CGTTGTGGCT ATTACTGGTT CTGTGGGAAA GACTTCTATG AAGGATTTCA TCGCGACGGT TCTTGGCCAA GATGGGCCAA CTGTGGCTCC TCCGGGCTCG TTTAACAATG AGCTTGGTTT GCCACACACC GCGCTCCGCT GCACAACCGA TACTAAGTAT TTGGTGGCTG AGATGTCCGC GCGTGGCATT GGACATATTA AGCACCTGAC AGAGATTGCT CCGCCACGGA TTGCAGCTGT GCTCAACGTC GGCCATGCGC ACCTGGGTGA ATTTGGATCC CGCGAGA3TA TCGCGCAGGC AkAAGGCC-GAG ATCATTGAAG CGCTGCCCTC GAAGAAAACG GGTGGGGTAG CAGTCCTTAA CGCTGACGAT CCTTTTGTCG CCCGGATGGC TCCACGCACT AAGGCGCGCG TGGTGTGGTT TACCACCGAT GCAGGTCAAG CAAAAAAGTC TGATTATTGG GCAACGAGTA TTTCACTGGA CGCTGTTGCG CGGGCAAGCT TTACGCTGAA CACGAAGGAC GGGTCTTGGC CGGTCGCCCT GCAGGTTTTT GGTGAGCACC AGGTTGCTAA TGCACTTGCT GCTGCTGCCA TTGCCATGGA AGCTGGCGTC GCCCCAGAAT TGGTGGTTGC TGGATTGGAA GCACATTCAG CGGCTTCCGC GCACCGCATG GATGTAAAGA CCCGCGCCGA CGGCGTGACC ATCATCAACG ATTCTTACAA CGCGAATCCT GATTCTATGC GTGCAGGTAT CGCGGCTCTT GCGTACACAG CTAGTGGTCG TTCTCTGAAG CAACAAGCTG GGCAGTGCTT GGTCAAATGG GTGAGCTTGG CGATGACGCC TCGGAAGCCC ATGCCGAACT TGGTGCTGAG CTGCCTAAAT ACAATGTTCA AGAACTTGTC GCAGTGGGGG AGAACCCTAC CTGTGCAGCA CTTGCAGAGT CCGCAGCGAG CCTGGGTGTG AGTACTCACG TAGTTTCAGA CGTTGATGCA GCGCTCGAGT TGCTCGCAGC CCATATTAAG CGGGATGATG TAGTGCTGGT TAAGGCTTCA AATGCTGATC GCCTGTGGAG GGTCGCAGAA GCACTACATG GCATGGTGCC GGCCTCAAAA ACACAGGTGG CTCGGTCAAC GACGATTCTC GTCGGAACGT GGAAGGACAG TAGAAAACAA TGCAACAGAT TATGGTCAGT GGAACGGTTG CGTTCCTCGT CTCAATCTTT CTCACCCCGG TGTTGATCCG TTATTTCACT AACCGCCAGT TGGGCCAGGA AATCCGTGAA GAAGGCCTGC AGTCTCACTT GCGTAAGCGT GGCACTCCAA CCATGGGTGG CATTGCGATT ATCGCGGGCA TTGTTGTGGC CTATGTGTTT ACCAATATCT TGGCCATGAT CCAAGGCGTT GGTGGATTCA CAGTCTCCGG CTTGCTCGTG TTGGGTCTGA CCTTGGGCCT TGGTGCCACT GGCTTCGCCG ATGACTTCAT CAAGCTGTAC ATGAACCGAA ACCTTGGTTT GAACAAGACC GCTAAGCTGG TGTCTCAGCT GGCCATTGCG TTGATCTTTG GTTTTTTGGT ACTGCAGTTT CCCGATGAAA ACGGTCTGAC CCCAGCATCA ACCCACCTGT CATTCATTCG CGATATCGAC ACCATTGACC TTGGCTTCGG GGACAGCGTT TTTGGCATCA TCGTGTTCCT CATTTTTATC TACGTTGTGG TCAGCGCGTG GTCGAATGCC GTGAACATCA CTGATGGTTT GGATGGTTTG GCTGCAGGTA CCACAGCATT TGTCATGGGT GCTTACACCT TGATCACGTT CTGGCAGTTC CGAAACTCCT GCGATACTGC AGTGGAAGCG GGTTGCAATA CGGTGCGTGA TCCACTGGAT TTGTCTGTGT TGTGCGCTGC TGGTCTGGCG CCACCTTGGG CTTTCTGTGG TGGAATGCGG CACCGACAAA GATCTTCATG GGCGATACTG GTTCTTTGGC ACTGGGCGGT TTGGTTGCAG GTATTTCTGT GGTTAGCCGC ACCGAGCTGC TCATGGTTAT CATCGGCGCG CTGTTTGTCA TTGAGGTCGC TTCTGTTGCG ATCCAGATCG GCGTGTTTAA GACCCGCGGT AAGCGTGTGT TCAAAATGGC TCCGATCCAC CACCACTTCG AGGCCCTTGG GTGGACTGAA ACTACCGTGA CCATCCGTTT CTGGCTGATC ACGATCATGA CTGTGTTGGC GGGTGTCGGT GTGTTTAACA GCGACTGGCT CCACTTAGCG GAGGTATAAA TAATTATGGT TTCTCTGTCC CATTTACCTC AGGCGCTGCA GGGCCGTATT CTTGTGGCCG GCGCTGGTGT TTCCGGCCTG TCCATAGCAA AGATGCTCAG TGAGTTGCAT TGCGATGTTG TGGTCACCGA CGAGAACGAA ACTGCACGTC ACATGCTCAT TGAAGTAGTA GACGTTGCAG ATATCAGCAC CGCCCAGGCT CAGGAACAGC TGGATTCTTT CTCCATTGTG GTCACCTCCC C 3. Vccteur caractérisé cn cc qu'il comprend lc firagmet d'ADN selon l'une quelconque des revendications précédentes et en ce qu'il est susceptible d'amplification génique dans des bactéries coryneformes. 4. Bactéries coryneformnnes caractérisces en ce qu'elles comprennent le vecteur selon la revendication 3 et en ce qu'elles sont capables de produire un L-aminoacide ou un acide nucléique. 5. Procédé de production d'un L-aminoacide ou d'un acide nucléique caractérisé en ce que des bactéries coryneformes selon la revendication 4 sont cultivées dans un milieu liquide contenant du saccharose pour produire et accumuler un L-aminoacide ou un acide nucléique dans la culture. 6. Procédé selon la revendication 5 caractérisé en ce que le L-amino- acide est la L-lysine. 7. Procédé selon la revendication 5 caractérisé en ce que le L-amino- acide est l'acide L-glutamique.