FR 2734264 A1 19961122 FR 9506000 A 19950519 La présente invention concerne l'utilisation eh thérapeutique de certains dérivés d'(a-aminométhyl-3,4-dichlorobenzyl)thioacétamide. La présente invention concerne plus spécifiquement l'utilisation de ces composés pour inhiber la recapture de la dopamine. Dans EP-0 158 545 on a déjà décrit une classe de composés de formule R X\ CH -X -CH -COY R2 Ri CH2NHZ dans laquelle X est S ou SO, Y est un groupe alcoxy en Cl-C4, un groupe NH2 ou NHOH, Z est un groupe alkyle en C0-C4, Rest H ou CH3, et Ri et R2 représentent H, F, Cl ou Br. Ces composés ont été décrits comme des antidépresseurs. Dans EP-0 406 088 on a en outre décrit l'[a-(tertiobutyl aminométhyl)-3, 4-dichlorobenzyl]thioacétamideet ses sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables. Ce composé a été décrit également comme antidépresseur et pour favoriser la prise alimentaire. La présente invention est basée sur la découverte que - I'[a(tertiobutylaminométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide et son isomère lévogyre, - I'[cr-(tertioamylaminométhyl)-3,4dichlorobenzyl]thioacétamide et ses isomères, - I'[a-(1 adamantylaminométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide et ses isomères, ainsi que les sels d'addition de ces composés avec des acides pharmaceu- tiquement acceptables, sont de puissants inhibiteurs de la recapture de la dopamine, et peuvent de ce fait être utilisés en thérapeutique. La présente invention a en conséquence pour objet l'utilisation d'un composé choisi parmi: - I'[a-(tertiobutylaminométhyl)-3,4dichlorobenzyl]thioacétamide et son isomère lévogyre, - I'[a(tertioamylaminométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide et ses isomères, - I'[a-(1 -adamantylaminométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétamideet ses isomères, ainsi que les sels d'addition de ces composés avec des acides pharmaceu- tiquement acceptables, pour la fabrication d'un médicament inhibant la recapture de la dopamine. L'inhibition de la recapture de la dopamine a pour consé- quence d'augmenter la concentration dans l'espace synaptique de la dopamine et de la 3-méthoxytyramine (3MT) sans modifier les concentra- tions d'acide 3,4-dihydroxyphénylacétique (DOPAC) et de l'acide homova- nillique (HVA). En raison de leurs propriétés d'inhibition de la recapture de la dopamine, les composés utilisés dans l'invention peuvent être utilisés dans les indications suivantes: - l'anhédonie, c'est-à-dire la perte d'intérêt et un retrait de toutes les activités habituelles apportant un plaisir, - la stimulation de la cognition, - la schizophrénie déficitaire, - la maladie de Parkinson, - la dépendance pharmacologique vis-à-vis des drogues comme la cocaïne. Dans ces indications, les composés peuvent être adminis- trés par voie orale à des doses journalières de 0,01 à 10 mg/kg et de préférence de 0,1 à 5 mg/kg. Plus généralement, les composés peuvent être administrés à l'homme ou aux animaux par voie orale ou parentérale. Les composés sont généralement administrés sous forme de compositions solides, semi-solides ou liquides. Comme exemples de compositions, on peut citer les comprimés, les gélules, les suppositoires, les solutions ou suspensions injectables, ainsi que les formes retard et les formes implantées à libération lente. Dans ces compositions, le principe actif est généralement mélangé avec un ou plusieurs excipients pharmaceutiquement acceptables habituels bien connus de l'homme de l'art. Parmi les composés définis ci-dessus, on préfère I'[a- (tertiobutylaminométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide et tout particu- lièrement l'isomère lévogyre, c'est-à-dire le (-) [a(tertiobutylaminométhyl)- 3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide et ses sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables. La présente invention a également pour objet cet isomère et ses sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables. La présente invention a en outre pour objet - I'[a(tertioamylaminométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide, ses isomères et les sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables de ces composés, - I'[a-(1-adamantylaminométhyl)-3,4dichlorobenzyl]thioacétamide, ses isomères et les sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables de ces composés. Les isomères de I'[a-(tertiobutylaminométhyl)-3,4- dichlorobenzyl]thioacétamide peuvent être obtenus en séparant les sels diastéréoisomères formés respectivement avec l'acide L(-) malique et l'acide D(+) malique et l'[a-(tertiobutylaminométhyl)-3,4dichlorobenzyl]- thioacétate de méthyle racémique et ammonolyse de chacun des isomères séparés. Les composés à groupe tertioamyle ou 1-adamantyle peuvent être obtenus selon des procédés analogues à ceux décrits dans EP-A-0 158 545 et EP-A-0 406 088. Les exemples suivants illustrent la préparation des composés nouveaux. EXEMPLE 1 Préparation du chlorhydrate du I(-)[a-(tertiobutylami- nométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide (CRL 41 789) (1) Préparation du L(-)malate du (-)[a-(tertiobutylamino- méthyl)-3,4-dichlorobenzyl]thio acétate de méthyle On mélange à 20 C une solution de 42,4 g (0,121 mole) de l'[a(tertiobutylaminométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétatede méthyle racémique (cf. EP-A-0 406 088) dans 100 ml d'acétate d'éthyle avec une solution de 8,2 g (0,061 mole) d'acide L(-)malique dans 200 ml d'acétate d'éthyle, refroidit, essore et recristallise trois fois dans 250 ml d'acétate d'éthyle chaque fois, jusqu'à obtention d'un précipité présentant un point de fusion de 113-114 C. On obtient le L(-)malate du l(-)amino ester avec un rendement de 35 %. (2) Préparation du chlorhydrate du I(-)[a-(tertiobutylamino- méthyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide (CRL 41 789) On traite 18 g (0, 043 mole) du L(-) malate précédent en solution dans 200 ml de méthanol avec 100 ml d'ammoniaque à 28 %; on agite 5 heures, laisse une nuit en contact, évapore le méthanol sous vide, reprend à l'eau, extrait au CH2CI2, lave à l'eau, sèche, évapore, reprend le résidu huileux avec 50 ml d'acétone, acidifie avec 10 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 5N dans l'isopropanol, essore, sèche et obtient le composé avec un rendement de 24 %. C'est une poudre crème; il est soluble dans l'eau, I'éthanol; insoluble dans l'éther, I'acétate d'éthyle. Il fond à 1700 C et présente une rotation spécifique a 20- _ 95 +5 (2 % CH3OH). D- EXEMPLE 2 Préparation du chlorhydrate du d (+)[a(tertiobutylaminométhyl) 3,4 dichlorobenzyl]thioacétamide (CRL 41 790) (1) Préparation du D(+) malate du d(+ )[a(tertiobutylaminométhyl) 3,4 dichlorobenzyl]thioacétate de méthyle On mélange à 20 C une solution de 29 g (0,083 mole de I'a(tertiobutylaminométhyl)3,4 dichlorobenzylthioacétate de méthyle (mélange racémique récupéré après séparation du CRL 41 789, constitué en majorité de l'isomère dextrogyre dans 50 ml d'acétate d'éthyle avec une solution de 5,6 g (0,042 mole) d'acide D (+) malique dans 250 ml d'acétate d'éthyle, refroidit, essore et recristallise deux fois dans 200 ml d'acétate d'éthyle, jusqu'à obtention d'un précipité présentant un point de fusion de 114 C. On obtient le D (+) malate du d (+) amino-ester avec un rendement de 50 %. (2) Préparation du chlorhydrate du d (+)[a(tertiobutylaminométhyl) 3,4 dichlorobenzyl]thioacétamide (CRL 41 790) On traite 18 g (0,043 mole du D (+) malate précédent en solution dans 200 ml de méthanol avec 100 ml d'ammoniaque à 28 %; on agite deux heures et laisse en contact 24 heures à l'ambiante. On évapore le méthanol sous vide, reprend à l'eau, extrait au CH2Cl2, lave à l'eau, sèche, évapore, reprend le résidu avec 50 ml d'acétone, acidifie avec 10 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 5N dans l'isopropanol et essore. On obtient le composé avec un rendement global de 22 %. Il se présente sous la forme d'une poudre rosée. Il est soluble dans l'eau, I'éthanol, le méthanol, insoluble dans l'éther, l'acétate d'éthyle. Il fond à 170 C et présente une rotation spécifique a 20= + 91 + 5 (2 % CH3OH). D EXEMPLE 3 Préparation du chlorhydrate de I'[a(tertioamylamino méthyl) 3,4 dichlorobenzyl] thioacétamide (CRL 42 059) (1) Préparation du chlorhydrate du 1-(3,4-dichlorophényl)- 2-(tertio amylamino) éthanol On ajoute à froid 27 g (0,1 mole) de 1-(3,4 dichloro phényl)-2 bromo éthanol dans une solution de 37,5 g (50 ml) (0,43 mole) de 2-méthyl 2-butylamine, 100 ml d'éthanol et 0,5 g de KI. Après 48 heures en contact à 200 C et 3 heures à reflux, on filtre, évapore le filtrat sous vide, reprend le résidu à l'éther, lave à l'eau. On ajoute 200 ml d'HCI N, essore, lave avec 20 ml d'eau froide et à l'éther. On obtient le chlorhy- drate (F = 184-185 C) avec un rendement de 78 %. (2) Préparation du chlorhydrate du 1-(3,4-dichlorophényl)- 2-(tertioamylamino)-1 -ch Ioroéthane Dans une suspension de 23,4 g (0,075 mole) du chlorhy- drate de l'alcool précédent dans 75 ml de CH2CI2, on ajoute une solution de ml de SOCI2 dans 40 ml de CH2CI2. On chauffe 5 heures à reflux, repos une nuit, essore, lave avec deux fois 20 ml de CH2CI2. On obtient le chlorhydrate (F = 200-2020 C) avec un rendement de 72 %. (3) Préparation du [a-(tertioamylaminométhyl)-3,4 dichlorobenzyl]thioacétate de méthyle On prépare une solution de méthylate de sodium en dissolvant à froid 2,3 g (0,1 Atg) de sodium dans 120 ml de méthanol. On ajoute à froid, en agitant, 5 ml (0,05 mole) de thioglyco- late de méthyle et 16,55 g (0,05 mole) du chlorhydrate précédent. On agite une heure à l'ambiante et 5 heures au reflux. Après une nuit au repos, on filtre le NaCI, évapore le méthanol sous vide, reprend à l'éther, lave à l'eau, extrait avec HCI N, précipite à froid avec NaOH 3N, extrait à l'éther, lave à l'eau, sèche et évapore. On obtient l'ester huileux avec un rendement de 90 %. (4) Préparation du chlorhydrate de l'[a(tertioamylamino méthyl) 3,4 dichlorobenzyl] thioacétamide (CRL 42 059) 16 g (0,044 mole) de l'aminoester précédent en solution dans 120 ml de méthanol sont traités avec 40 ml de NH4OH à 28 %. Après 48 heures en contact à 20 C, on chasse le méthanol sous vide, reprend le résidu à l'eau, extrait à l'éther, extrait celui-ci avec HCI N, précipite avec NaOH concentrée, extrait à l'éther, lave à l'eau sèche, évapore et cristallise la base (F = 840 C) dans l'éther isopropylique. Cette base en solution dans 100 ml d'acétate d'éthyle est acidifiée avec une solution d'HCI dans l'isopropanol. On essore, recristallise dans éthanol-acétate d'éthyle et obtient le composé avec un rendement de %. C'est une poudre blanche, il est soluble dans l'eau et les alcools; insoluble dans l'éther, I'acétate d'éthyle. Il fond à 155-156" C. EXEMPLE 4 Préparation de l'hemifumarate de 1'[a(1-adamantylami- nométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]-thioacétamide (CRL 42 060) (1) Préparation du chlorhydrate du 1-(3,4-dichlorophényl)- 2-(1-adamantylamino) éthanol Dans une solution de 30 g (0,2 mole) de 1adamantamine, 0,1 g de KI et 100 ml d'éthanol, on ajoute 27 g (0,1 mole) de 1-(3,4- dichloro phényl)-2-bromoéthanol; on agite 48 heures à 20" C et 6 heures au reflux. On évapore le méthanol sous vide, reprend le résidu avec ml d'éther et 30 ml HCI 3N; essore, lave avec deux fois 20 ml d'eau froide et à l'éther. On obtient le chlorhydrate (F = 258-260" C) avec un rendement de 70 %. (2) Préparation du chlorhydrate du 1-(3,4-dichlorophényl)- 2-(1 -adamantylamino)-1 -chloroéthane Dans une suspension de 25 g (0,066 mole) du chlorhydrate de l'aminoalcool précédent dans 60 ml de CH2Cl2, on ajoute 15 ml de SOCI2 dans 40 ml de CH2Cl2. Après 4 heures au reflux et une nuit au repos, on essore, lave au CH2CI2 et à l'éther. On obtient le composé chloré avec un rendement de 94 %. Il sublime sans fondre à partir de 2500 C. (3) Préparation du chlorhydrate de 1'[a(1-adamantylami- nométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]-thioacétate de méthyle On prépare une solution de méthylate de sodium avec 2,76 g (0,12 Atg) de sodium et 150 ml de méthanol. On ajoute à froid 6 ml (0,06 mole) de thioglycolate de méthyle et 23,7 g (0,06 mole) du composé chloré précédent. On agite une heure à l'ambiante et 5 heures au reflux. Après une nuit en contact, on filtre le NaCI, évapore le méthanol sous vide, reprend à l'eau, extrait à l'éther, lave à l'eau. On ajoute ml d'HCI 3N, agite, essore, lave avec deux fois 20 ml H20 froide et à l'éther. Le précipité est mis en suspension dans 500 ml H20, neutralisé avec NaCO3 et extrait au CH2Cl2. On lave, sèche, évapore, reprend à l'acétate d'éthyle et acidifie avec de l'isopropanol chlorhydrique N. On essore, lave à l'acétate d'éthyle et obtient le chlorhydrate de l'amino ester (F = 153-154 C) avec un rendement de 65 %. (4) Préparation de l'hemifumarate de 1'[a(1-adamantylami- nométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]-thioacétamide On sature d'ammoniac une solution froide de 15,5 g (0,033 mole) de chlorhydrate de l'amino ester précédent dans 150 ml de méthanol. On ajoute 10 ml de NH40H et encore 10 ml de NH40H 24 heures après. On laisse 48 heures en contact en suivant la formation de l'amide en C.C. M. On évapore le méthanol sous vide, reprend à l'eau, extrait à l'éther, lave à l'eau, sèche et évapore. On reprend le résidu huileux avec 30 ml d'éthanol, ajoute 2 g d'acide fumarique, essore, lave avec 5 ml d'éthanol froid et 20 ml AcoEt. On recristallise dans l'éthanol et obtient le composé avec un rendement de 77 %. Il se présente sous la forme d'une poudre blanche. Il est soluble dans le méthanol, le DMSO, insoluble dans l'eau, I'éther, I'acétate d'éthyle. Il fond à 188 C. On donnera ci-après des résultats d'essais pharmacologi- ques mettant en évidence notamment les effets au site de recapture de la dopamine par les composés utilisés dans l'invention, en donnant à titre de comparaison les résultats obtenus avec l'isomère dextrogyre de l'[a- (tertiobutylaminométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide. Inhibition de la liaison au site de recapture de la dopa- mine in vitro dans le striatum de rat Les rats (mâles, CD Sprague Dawley, 200-250 g) sont sacrifiés par décapitation. Les striata sont immédiatement prélevés, puis conservés à -80 C jusqu'à utilisation. Le jour de la manipulation, les striata sont décongelés, recouverts de tampon, puis mis en suspension. Cette suspension est ensuite versée dans des tubes à centrifuger, complétée jusqu'à 10 ml avec du tampon pH 7,7 (Tris (HCI) 50 mM, NaCI mM, KCI 5 mM), puis centrifugée à 20.000 tours/minute pendant 15 minutes. Le culot est remis en suspension dans 10 ml de tampon puis est soumis à une deuxième centrifugation (20.000 tours/minute pendant 15 minutes). La procédure précédente est répétée, afin que l'homogénat subisse une troisième centrifugation identique aux deux précédentes. Le culot ainsi obtenu est mis en suspension dans quelques ml de tampon, puis homogénéisée. La suspension membranaire est alors diluée dans un volume nécessaire. Des concentrations croissantes des composés testés en solution dans le tampon sont distribuées. Des aliquots de la suspension membranaire sont ensuite ajoutés. Le ligand radioactif ([3H]- mazindol) utilisé comme marqueur du type de site étudié est alors distribué manuel- lement dans les tubes qui sont ensuite mis à incuber (volume final 1 ml). L'arrêt de la réaction se fait par filtration sur un système HERVESTER (bande filtre GF/B WHATMAN). La bande filtre est ensuite lavée trois fois par 5 ml de tampon avant d'être placée dans un système automatique de découpe. Les filtres coupés tombent dans des fioles de comptage et 4 ml de liquide scintillant sont distribués automatiquement par le système. Chaque échantillon est soumis au comptage de la radioactivité à l'aide d'un compteur à scintillation liquide. Trois séries d'essais (essai 1, essai 2 et essai 3) sont réalisées avec chaque composé pour la détermination de la Cl5, chaque détermination étant réalisée sur deux échantillons différents. La liaison spécifique est définie comme la différence entre la liaison totale et la liaison non spécifique (déplacée par un excès de ligand non radioactif. Les valeurs obtenues en coups par minute (c.p.m.) sont ensuite transformées en désintégrations par minute (d.p.m.) en fonction du rendement du compteur. La Cl50 est définie comme la concentration de la substance étudiée, nécessaire pour déplacer 50 % du marqueur radioactif lié spécifiquement. Les données expérimentales issues du compteur à scintillation liquide (KONTRON) sont stockées sur disquette, gérées par un programme (CONVERT), puis analysées au moyen du logiciel LIGAND* qui calcule la concentration inhibitrice 50 % (Cl50) et la constante d'inhibition Ki C150 Ki = 1 +[L]/Kd o [L] représente la concentration du ligand radioactif et Kd la constante de dissociation de ce même ligand. (Les valeurs de la ClI. et du Ki sont inversement proportionnelles à l'affinité du produit étudié pour le site de liaison). On donnera dans le tableau I les valeurs moyennes de CI, et Ki obtenus. On donnera également dans ce tableau les valeurs de DL et DL100 chez la souris par voie i.p. 0 UU1 M U1 o Ln o Ln o Ln TABLEAU I Toxicité mg/kg Inhibition de la liaison Composé Code au site de recapture de la dopamine DLo DLIoo ClI Ki R = tertiobutyle racémate CRL 41 414 128 256 3,110-8 6,310-8 chlorhydrate R = tertiobutyle isomère CRL 41 789 64 256 4,410-18 2,410-8 lévogyre chlorhydrate R = tertiobutyle isomère CRL 41 790 128 512 1,110-6 6,210-7 dextrogyre chlorhydrate R = tertioamyle racémate CRL 42 059 30 256 7,410-8 4,610-8 chlorhydrate R = 1 -adamantyle racémate CRL 42 060 128 1024 4,010-8 4,41 0-8 chlorhydrate Effet sur les taux extracellulaires des neuromédiateurs et des métabolites dans le striatum de rat anesthésié (microdialyse intracérabrale) Cette détermination est obtenue par chromatographie liquide à haute performance couplée à une détection électrochimique. -CLHP: cartouche Sphérisorb, ODS-2 (5pm), L = 125 M, 0 = 4mm, MERCK. Phase mobile: phosphate de potas- sium 0,1 M, acide citrique 0,1 M, acide octane sulfonique 50 mg/l, EDTA 0,1 mM, méthanol 4 %, pH 4,80, débit de la pompe 0,9 ml/min. - détection éléctrochimique: détecteur BAS, LC-4C, + 750 mV - analyseur: Millenium, WATERS Des rats (mâles, SPRAGUE-DAWLEY, CD, Charles RIVER, 280-300 g) anesthésiés à l'hydrate de chloral (400 mg/kg, i.p.) sont placés dans un appareil stéréotaxique. La sonde à microdialyse (CMA/11 L = 3 mm,,= 0,24 mm, CARNEGIE) est implantée suivant les coordonnées de l'atlas de Paxinos et Watson dans la partie antérieure du striatum gauche: I = 10, L = 2,4, H = -6,1. Du liquide de Ringer (CaCI2 = 2,4 mM, KCI = 4 mM, NaCI = 147 mM) est perfusé à 2 pI/min dans la sonde. Les dialysats recueillis toutes les 20 minutes sont réfrigérés (à environ 6 C) puis analysés. Après une heure de recueil, des lots de 6 rats reçoivent, par voie intrapéritonéale, sous un volume de 5 ml/kg: - soit une injection de soluté isotonique de chlorure de sodium, - soit le composé testé en solution dans l'eau distillée aux doses de 16, 32 ou 64 mg/kg. Dans le dialysat, les concentrations en dopamine (DA), acide 3,4dihydroxyphénylacétique (DOPAC), acide homovanillique (HVA), 3méthoxytyramine (3MT), sont mesurées par détection électrochimique, quantifiées par rapport à une gamme étalon et sont corrigées en fonction du rendement de la sonde effectué in vitro avant chaque essai. Seuls sont pris en compte les essais dont les sondes présentent un rendement supérieur à 5 %. On observe avec le composé CRL 41 789 une augmenta- tion significative des concentrations de dopamine et de 3 MT, sans modification des concentrations de DOPAC et de HVA, qui confirme les résultats obtenus dans le test de l'inhibition de la dopamine. Il est à noter qu'en revanche l'isomère dextrogyre (CRL 41 790) ne provoque aucune modification des concentrations de dopamine et de 3 MT. REVENDICATIONS 1. Utilisation d'un composé choisi parmi - I'[a-(tertiobutylaminométhyl)3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide et son isomère lévogyre, - I'[a(tertioamylaminométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide et ses isomères, - I'[a-(1 -adamantylaminométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide et ses isomères, ainsi que les sels d'addition de ces composés avec des acides pharmaceu- tiquement acceptables, pour la fabrication d'un médicament inhibant la recapture de la dopamine. 2. Utilisation d'un composé I choisi parmi - I'[a(tertiobutylaminométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide et son isomère lévogyre, - I'[a-(tertioamylaminométhyl)-3,4- dichlorobenzyl]thioacétamide et ses isomères, - I'[a-(1 adamantylaminométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide et ses isomères, ainsi que les sels d'addition de ces composés avec des acides pharmaceu- tiquement acceptables, pour la fabrication d'un médicament destiné au traitement de l'anhédonie. 3. Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2, dans laquelle on utilise un composé choisi parmi l'[a(tertiobutylaminomé- thyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide et son isomère lévogyre. 4. Utilisation selon la revendication 3, dans laquelle le composé est l'isomère lévogyre. 5. Isomère lévogyre de l'[a-(tertiobutylaminométhyl)-3,4- dichlorobenzyl]thioacétamide et ses sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables. 6. Chlorhydrate de l'isomère lévogyre de I'[a-(tertiobutyla- minométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]thioacétamide. 7. [a(tertioamylaminométhyl)-3,4-dichlorobenzyl] thioacétamide, ses isomères et les sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables de ces composés. 8. [a-(1 -adamantylaminométhyl)-3,4-dichlorobenzyl]- thioacétamide, ses isomères et les sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables de ces composés.