FR 2715303 A1 19950728 FR 9414656 A 19941206 La présente invention concerne la découverte de nouvelles'in- dications thérapeutiques d'un médicament à base de vitamine B2 ou ri bonavine;ce remède prescrit par voie parentérale à des malades sidéens stest révélé présenter des effets cliniques immédiats, surprenants et très favorables. Le remède utilisé, la Beflavine, était destiné jusqu' ici à d'autres indications; il était en particulier indiqué dans le traitement de certaines affections cutanées. Selon l'état de la technique antérieure, de nombreuses molécules ont été reconnues efficaces in vitro contre le VIH mais leur utilisation in vivo n'est pas possible en raison de leur toxicité. Les principales molécules actuellement utilisées ou en voie d'utilisation appartiennent à quatre familles thérapeutiques distinctes. La première famille comprend les médicaments inhibiteurs de la transcriptase reverse subdivisés eux-même en deux catégories constituées par des inhibiteurs nucléosidiques et des inhibiteurs non nucléosidiques. Parmi les inhibiteurs nucléosidiques trois molécules sont actuellement utilisées ou en cours d'essais, ce sont l'AZT, le DDI, le DDC. L'AZT ou zidovudine est le premier et seul remède utilisé jusqu'ici à grande échelle sur les sujets séropositifs malades. Son indication vient d'être étendue aux sujets séropositifs non malades mais ce remède est susceptible d'entrainer des complications hématopoÏétiques. La DDI ou dideoxy-inosine est en cours d'essai de phase II et III. Il présenterait une certaine toxicité neurologique et pancréatique. La DDC ou dideoxy-cytidine est en cours d'étude. Il est prévu de l'utiliser en troisième intention après l'AZT et le DDI et éventuellement en seconde intention après l'AZT. Une nouvelle molécule non nucléosidique et inhibitrice de la transcriptase reverse est actuellement en cours d'étude; il s'agit de la BI-RG-587 qui appartient à la famille des dipyridodiazépinones. La deuxième classe thérapeutique est constituée par les inhibiteurs de la protéase et plus particulièrement la molécule U81749 active in vitro sur le VIH. La troisième famille thérapeutique est constituée par le CD4 soluble ou r.CD4, en cours d'étude; c'est le recepteur viral au niveau de la membrane des lymphocytes T4. I1 serait utilisé comme un leurre pour le VIH. Le ditiocarbe ou Imuthiol constitue la quatrième famille théra peutique anti-VIH. I1 est en cours de développement industriel. IL aurait une action anti-oxydante, anti-radicalaire majeure. Outre les quatre types de remedes précédemment cités, il faut signaler que certaines molécules, comme les quinolones et les tétracyclines, auraient montré certains effets in vitro sur la replication du VIH. Elles agiraient sur les mycoplasmes considérés actuellement par le Professeur MONTAGNIER comme un co-facteur du'VIH. I1 sera vu plus loin l'intérêt de ces observations. Enfin la vaccination est en cours d'étude. Les différents résultats observés jusqu'à maintenant sont controversés. Si l'on fait un bilan de la technique utilisée jusqu'ici, un constat peut être établi; à l'heure actuelle les molécules utilisées contre le VIH, si elles apportent une certaine rémission à la maladie, ne paraissent pas empêcher l'évolution fatale. Par ailleurs, leur activité est souvent entachée d'effets secondaires parfois gravissimes. Le demandeur a eu l'idée d'utiliser la riboflavine sur des malades sidéens en raison de certaines lésions cutanées présentées par ceux-ci, et surtout à la suite des recherches qu'il a effectuées à propos du corps humain et la lumière,qui l'ont conduit à formuler l'hypothèse: la photosynthèse est universelle; le virus du Sida est soumis à la photosynthèse, il est activé par l'ultra-violet; les produits de couleur jaune, fortement pigmentés, absorbent l'ultra-violet et sont donc susceptibles de protéger l'organismevis-à-vis d'une irradiation ultra-violette excessive. Les résultats obtenus ont été d'emblée spectaculaires et surprenants, semblant, par là-même, confirmer l'hypothèse de départ. Les hypothèses ayant conduit à élaborer la théorie de la photosynthèse protéique à l'échelle animale sont beaucoup trop vastes et complexes pour être exposées ci-après. On peut cependant signaler qu'en 1988 le prix Nobel de chimie a été décerné à trois chercheurs ayant démontré la photosynthèse au niveau de la bactériorhodopsine, protéine membranaire de la bactérie rhodo pseudomonas viridans. En ce qui concerne les virus, il est bien connu que les virus Herpes HSV1 et HSV2 sont activés par les ultra-violets: la récurrence de l'infection herpétique liée à 1'HSE'1 lors d'un ensoleillement important est bien connue. Le HSV2 à tropisme génital semble lui aussi répondre à l'irradia tion ultra-violette " HSV2 irradié par les rayons ultra-violets produit un cancer chez le hamster et transforme les cellules dç rat in vitro " (A.Mammette, virologie médicale, p.45). Quant aux virus HIV, outre leur structure très évocatrice vis-àvis de la photocaptation, s'ils sont susceptibles d'être détruits par différentes méthodes physiques, ils résistent par contre fort bien à une irradi tion ultra-violette. Les substances pigmentées en jaune et jaune-orangé absorbent les radiations ultra-violettes et bleues. La molécule de riboflavine est de coloration jaune-orangé sous forme cristalisée. En solution elle donne une fluorescence jaune-vert; son exposition, même quelques minutes, à la lumière ultra-violette entraine sa décomposition irréversible en son dérivé antagoniste la lumiflavine qui donne une fluorescence bleue en solution; par ailleurs près de 85X de la riboflavine du lait sont détruits par l'exposition au soleil. Ce fait est capital pour deux raisons: la première est que malgré une plus grande stabilité de la riboflavine en solution acide, il semble qu'un conditionnement jaune, opaque à la lumière et aux ultraviolets, serait une garantie supplémentaire à la bonne conservation des remèdes à base de vitamine B2. La deuxième raison notable est que l'exposition détruisant une majeure partie de la riboflavine, il est permis de supposer que dans des pays très ensoleillés les organismes humains puissent présenter de la même manière une carence relative en vitamine B2 par suite d'une destruction accélérée. Quelques exemples de photoprotection par des produits ou substances pigmentées en jaune sont bien connues: ainsi les béta-carotènes en stimulant la pigmentation cutanée protègent la peau contre les U.V.; les malades atteints de rétinite pigmentaire portent des lunettes jaune-orangé pour freiner l'évolutivité de la maladie. Leur vision colorée est alors amputée de sa couleur bleue; il est remarquable de noter que la riboflavine existe à l'état physiologique en quantité appréciable au niveau de la rétine. Il est alors permis de supposer qu'en cas de carence en vitamine B2 la rétine qui ne serait plus protégée par cette molécule photoprotectrice subirait une agression par les ultra-violets et les radicaux libres qu'ils génèrent, cette agression provoquant ou aggravant des lésions au niveau des cellules visuelles. Le corollaire est que l'usage de médicaments à base de riboflavine parait représenter le traitement préventif et curatif de choix de la rétinite pigmentaire. La vitamine D en solution, par exemple l'ergocalciférol ou Stérogyl des Laboratoires Roussel est conditionnée en flacons jaune-brun afin d'éviter l'inactivation de la molécule par la lumière et les ultra-violets. La quinine et ses dérivés sont extraits des écorces de quinquina de couleur jaune. Parmi les multiples indications de la quinine deux d'entre elles sont particulièrement intéressantes; la principale bien sûr est son action contre le paludisme. Or il a été noté que les zones d'endémie sidéenne et paludéenne sont très sensiblement superposables géographiquement. En supposant que le Sida présente un certain rapport avec un excès d'ensoleillement et/ou un déficit relatif en molécules photoprotectrices normalement présentes à l'état physiologique dans l'organisme, on arrive à la conclusion que l'administration de vitamine B2 à titre préventif et curatif constituerait un traitement simple et logique de l'infection sidéenne. L'administration conjointe de vitamine PP qui agit en symbiose avec la riboflavine au niveau de la chaîne respiratoire cellulaire et qui est connue pour ses effets photoprotecteurs, pourrait s'avérer intéressante. Si l'on suppose de la même façon que le paludisme puisse avoir un rapport avec un fort ensoleillement ambiant, il ne serait pas alors étonnant que des molécules comme la quinine ou ses dérivés, parfois prescrits dans les lucites, puissent soigner ou prévenir le paludisme.en fonction des mêmes effets thérapeutiques. Depuis quelques années, il est observé un regain de la morbidite et de la mortalité du paludisme qui devient de plus en plus résistant aux traitements usuels. Si la quinine inhibait le développement du d= protozoaire par son effet photoprotecteur, il serait permis de supposer qu'un autre remède photoprotecteur de même couleur tel qu'un médicament à base de vitamine B2 puisse être une solution thérapeutique à l'infestation paludéenne avec comme avantage la non toxicité reconnue d'un tel remède. Les quinolones sont des substances antibiotiques apgurenrEtffls au noyau quinone. Elles auraient démontré certains effets sur le VIH in vitro. I1 en est de même pour les tétracyclines. Celles-ci comme les quinolones sont connues pour leurs effets de photosensibilisation lors qu'elles sont administrées in vivo. D'autre part les tétracyclines,qui présentent une coloration jaune en solution, sont susceptibles de provoquer des pigmentations tissulaires anormales, de même couleur, par exemple au niveau des bourgeons dentaires, ce qui les contre-indique chez la femme enceinte et l'enfant jusqu'à sept ans. ta morbidité de l'infection sidéenne par rapport aux ethnies montre une prédominance décroissante en fonction des races, noire, puis blanche, et enfin jaune; la pigmentation de la peau semblerait donc conférer un certain effet protecteur vis-à-vis de l'infection sidéenne chez les sujets de race jaune. Enfin, pour en terminer avec ce paragraphe sur les produits et sub tances pigmentés, il faut rappeler que la DDI en solution est jaune et que les sels biliaires,qui inhibent in vitro le VIH,présentent une coloration jaune-vert. I1 ressort de toutes ces considérations que les substances et produits pigmentés en jaune absorbent les rayonnements ultra-violets et auraient par là-même un effet photoprotecteur. Par ailleurs différentes substances de couleur jaune exercent un effet inhibiteur sur la replication du VIH. Une recherche bibliographique plus approfondie sur la vitamine B2 montre qu'en plus de ses propriétés colorimétriques la riboflavine présente d'autres propriétés susceptibles de confirmer son action inhibitrice sur la replication du VIH. Tout d'abord il est intéressant de constater que dans son devenir métabolique, la riboflavine passe par deux métabolites actifs, le FMN et le FAD ou flavine-mononucléotide et flavine-adénine-dinucléotide; il est utile de rappeler ici qu'un dinucléotide correspond à un dinucléoside phosphorylé. Donc,dans son transfert vers le FAD,la molécule de riboflavine passe vraisemblablement par un intermédiaire dinucléosidique avant d'être phosphorylée. Or il a été vu précédemment que certaines molécules dinucléosidiques telles que 1'AZT, la DDI, la DDC sont inhibitrices de la transcriptase reverse du VIH. La riboflavine ou ferment jaune de Warburg joue un râle essentiel au niveau de la chaîne respiratoire cellulaire où elle agit en symbiose avec la vitamine PP elle même connue pour certains effets photoprotecteurs puisqu'elle est prescrite dans les lucites. Ces deux vitamines sont des transporteurs d'hydrogène; cette action de transfert entre hydrogène et oxygène au niveau des membranes cellulaires et mitochondriales laisse soup çonner un effet anti-radicalaire, c'est-à-dire anti-oxydant,des vitamines B2 et PP; un tel effet anti-oxydant peut se vérifier à l'échelle macroscopique par une expérience simple, un clou rouillé trempe dans une solution de riboflavine est libéré de sa rouille après quelques heures. Cette action symbiotique des vitamines B2 et PP permet aussi d'envisager la possibilité d'une synergie thérapeutique dans le traitement du Sida et de certaines maladies en rapport avec la lumière,si les hypothèses photosynthétiques émises précédemment s'avèrent exactes. Dans le cadre du Sida, la synergie thérapeutique serait d'autant plus intéressante que nombre de symptômes connus de la carence en vitamine B2 ainsi que de la carence en vitamine PP se retrouvent chez les malades sidéens. Parmi d'autres propriétés de la riboflavine, il faut préciser les rapports interférentiels existant entre cette vitamine et les sels biliaires, le glutathion, l'érythropoïétine; les sels biliaires sont nécessaires à l'absorption alimentaire de la vitamine B2. ils peuvent donc en quelque sorte servir de t'véhicule" à la riboflavine; la vitamine B2 est ensuite sécrétée par la bile avant d'être réabsorbée puis excrétée principalement dans les urines; les sels biliaires qui présentent une coloration de même nature que la vitamine B2 présentent,comme il a eté vu précédemment,un effet inhibiteur in vitro sur le VIH. Ceci laisse donc supposer que la vitamine B2 est très vraisemblablement douée des memes propriétés. Le glutathion, lui aussi, a été reconnu capable d'inhiber le VIH in vitro; le glutathion est une molécule composée de trois acides aminés, l'acide glutamique, la cystéine et le glycocolle; il faut souligner ici que la biogénèse de la vitamine B2 s'effectue à partir du glycocolle, de l'acide formique et du C02, et que par ailleurs , le FAD , par son aptitude à réoxyder le NADPH, stimule l'activité de lagluttbion réductase érythrocytaire. I1 est également reconnu que la cystéine possède des propriétés photocaptrices par rapport aux ultra-violets. Il existe donc d'après ces considérations un rapport évident entre la vitamine B2, la vitamine PP et le glutathion ainsi que les ultra-violets. Enfin il est écrit dans les manuels de références que la ribofla vine serait susceptible d'initier I'érythropoétine qui, elle-même, stimulerait la synthèse de l1hème; or il a été constaté récemment que l'hème , seul ou associé avec 1'AZT, inhiberait la replication du VIH in vitro. Ainsi donc les sels biliaires, le glutathion et l'hème se sont révélés actifs in vitro vis-à-vis du VIH, mais leur emploi in vivo n'est pas dénué d'inconvénients, ce qui n'est pas le cas de la vitamine B2. En conclusion , la vitamine B2, par ses propriétés colorimétriques, biologiques et physiologiques,parait être un traitement de choix de l'infection sidéenne et cela d'autant plus qu'il pourrait exister une carence de cette vitamine par excès d'ensoleillement et/ou par déséquilibre de la ration alimentaire avec excès de lipides et de glucides aux dépens de la ration protéique; ce déséquilibre nutritionnel, fréquent dans les pays sous-développés, provoque une élimination excessive urinaire de la vitamine B2. I1 semble que d'autres remèdes photoprotecteurs et plus particulièrement la vitamine PP pourrait lui être adjoints dans le but de rechercher une action synergique. Cette nouvelle approche thérapeutique du Sida par un remède à base de riboflavine, c'est-à-dire la Béflavine, utilisé par voie parentérale intraveineuse à raison d'une injection quotidienne de 20 mg. a permis d'observer une amélioration clinique spectaculaire; 11Agence Natiz- nale de Recherches contre le Sida auprès de laquelle le nom du remède n'a pas été divulgué a accorde un accord de principe pour effectuer des tests in vitro ainsi que des essais cliniques. Les avantages de la thérapeutique du Sida par l'utilisation d'un remède composé de vitamine B2 :.paraissent capitaux par rapport aux traitements déjà existants,en raison tout d'abord de l'absence de contreindications et d'effets secondaires connus à l'utilisation thérapeutique de la vitamine B2. I1 est d'ailleurs bien connu qu'un surdosage s'accompagne de l'éli- mination urinaire immédiate de I'excés-.de- Vitamine B2. Le deuxième avantage est lié à la fabrication industrielle de remèdes à base de vitamine B2, à destinée orale ou parentérale et à usage préventif ou thérapeutique. Ce mode de fabrication est simple et peu onéreux; il faut toutefois souligner qu'un mode de conditionnement jaunebrun ou jaune-orangé, opaque à la lumière et aux ultra-violets parait indispensable. Le troisième avantage,enfin, est constitué par le fait que d'après les nombreuses références et hypothèses citées auparavant, il semblerait que la vitamine B2 représente le traitement étiopathogéqique par excellence de l'infection sidéenne. REVENDICATIONS 1. Utilisation du FAD, métabolite de la riboflavine, et/ou du NAD ou de leurs dérivés pour l'obtention d'un médicament destiné au traitement préventif et curatif du Sida. 2. Utilisation du FAD, métabolite de la riboflavine, et/ou du NAD ou de leurs dérivés pour l'obtention d'un médicament destiné au traitement préventif et curatif de la rétinite pigmentaire. 3. Utilisation du FAD, métabolite de la riboflavine, et/ou du NAD ou de leurs dérivés pour l'obtention d'un médicament pour le traitement préventif et curatif du paludisme. 4. Utilisation du FAD, métabolite de la riboflavine, et/ou du NAD ou de leurs dérivés pour l'obtention d'un médicament destiné au traitement préventif et curatif des maladies en rapport avec la lumière. 5. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 4 caractérisée en ce que la riboflavine et/ou la vitamine PP sont associées en quantités synergiques au FAD et/ou au NAD. 6. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 5 caractérisée en ce que ledit médicament est à usage oral ou parentéral. 7. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 6 caractérisée en ce que ledit médicament est sous conditionnement opaque à la lumière et aux ultra-violets. 8. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 7 caractérisée en ce que les dérivés sont des sels ou des esters du FAD ou du NAD.