FR 2707089 A1 19950106 FR 9307927 A 19930630 La présente invention concerne de nouveaux dérivés d'acide phosphonique, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent. Les endothélines sont des peptides de 21 acides aminés ayant des activités vasoconstrictives très puissantes. Ces endothélines sont synthétisées à partir d'un précurseur, la big endothéline, par une enzyme appelée "endothelin converting enzyme" ou pro-endothéline convertase. Cette enzyme appartient à la classe des métalloprotéases et elle peut être inhibée par le phosphoramidon. Une augmentation des taux plasmatiques de l'endothéline a été démontrée dans des maladies telles que l'hypertension, l'angine, l'infarctus du myocarde, l'insuffisance rénale, le choc, le diabète, l'hypercholestérolémie, le vasospasme cérébral, la maladie de Raynaud, l'arthrite inflammatoire, l'insuffisance cardiaque et l'hypertension pulmonaire. Il a donc été postulé que l'endothéline pourrait jouer un rôle dans l'ischémie périphérique et myocardique, l'hypertension, l'insuffisance rénale, la vasoconstriction pulmonaire hypoxique, l'asthme, l'athérosclérose et l'arthrite. Il était donc particulièrement intéressant de synthétiser des substances inhibitrices de pro-endothéline convertase. L'état antérieur de la technique est illustré notamment par les brevets EP 0518299 et WO 9201468. L'invention concerne plus particulièrement les composés de formule (I): o il R4 - X2- P - X - CH - C - NH-C () i i '--CH2 OR3 R2 1I H dans laquelle: R1 représente un groupement hydroxy, alkoxy (C1-C6) linéaire ou ramifié ou amino (substitué ou non par 1 ou 2 groupements alkyle (C1-C6) linéaire ou ramifié), R2 représente un groupement alkyle (C1-C6) linéaire ou ramifié substitué ou non par un groupement phényle ou cycloalkyle (C3-C7), - 2 - Xl représente - NH-, -O- ou -S-, X2 représente -O-, -S- ou -NH-, R3 représente un atome d'hydrogène, alkyle (C1-C6) linéaire ou ramifié ou phényle, R4 représente - un groupement alkyle (C1-C6) linéaire ou ramifié toujours substitué par un ou plusieurs groupements, identiques ou différents, hydroxy, benzyloxy,benzyloxycarbonylamino, amino, mono ou dialkylamino (C1-C6) linéaire ou ramifié ou acétoxy, - un groupement cycloalkyle (C3-C7) substitué ou non par un ou plusieurs groupements hydroxy, benzyloxy ou acétoxy, ou bien, O Il R4 - X2 - P - représente l'hétérocycle suivant: I OR3 (CH2)n - O O R5 - CH p CH2 - o / \ dans lequel: n est égal à O ou 1, R5 représente un groupement hydroxy ou hydroxyméthyle, leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. Parmi les bases pharmaceutiquement acceptables, on peut citer à titre non limitatif l'hydroxyde de sodium, l'hydroxyde de potassium, l'hydroxyde de lithium, la triéthylamine, la tert-butylamine, etc... - 3 - Parmi les acides pharmaceutiquement acceptables, on peut citer à titre non limitatif les acides chlorhydrique, sulfurique, tartrique, maléique, fumarique, méthane sulfonique, camphorique, etc... L'invention s'étend également au procédé de préparation des composés de formule (I) caractérisé en ce que l'on utilise comme produit de départ l'amino-acide de formule (II), sous forme racémique ou d'énantiomère pur: o C - R'l CH |1 (II) H2N - CH-C I I N H dans laquelle: R'l représente un groupement alkoxy (C1-C6) linéaire ou ramifié ou amino (substitué ou non par 1 ou 2 groupements alkyle (C1-C6) linéaire ou ramifié), que l'on fait réagir avec un composé de formule (III) sous forme racémique ou d'énantiomère pur: P - X1 - CH - C02H (III) I R2 dans laquelle R2 et X1 a la même signification que dans la formule (I) et P représente un groupement protecteur approprié, pour conduire à un composé de formule (IV), dont on sépare éventuellement les isomères selon une technique classique de séparation: o Il 1 l C - R'1 il 1i P - X1 - CH - C - NH -CH (IV) R2 iCH2 R2 kN H dans laquelle R'I, R2, X1 et P ont la même signification que précédemment, - 4 - que l'on déprotège selon la nature de P par une technique appropriée, pour conduire au composé de formule (V): C R' H - X1 - CH - C - NH - CH () t "'CH2 R2 N H dans laquelle R'1, R2 et X1 ont la même signification que précédemment, que l'on fait réagir: * soit: - en milieu inerte, à température ambiante, avec une solution chloroformique préalablement préparée par agitation en milieu inerte: - d'un équivalent d'un phényl dichlorophosphate de formule (VII): C6H50x nO\ p (VII) Cl Cl - d'un équivalent du composé de formule (VIII): R'4 - X2 - H (VIII) dans laquelle X2 a la même signification que dans la formule (I), R'4 représente un groupement alkyle (substitué par un ou plusieurs groupements benzyloxy, benzyloxycarbonylamino, acétoxy ou dialkylamino (C1-C6) linéaire ou ramifié), un groupement cycloalkyle (C3- C7) (substitué ou non par un ou plusieurs groupements benzyloxy ou acétoxy), - et, de deux équivalents de triéthylamine, pour conduire au composé de formule (I/a), cas particulier des composés de formule (I): - 5 - U Il 0 X - R'l R"4 - X2 - P - l - CH - C - NH - CH (I/a) OH R2 CH2 N H dans laquelle R' 1, R2 et X2 ont la même signification que précédemment et R"4 représente un groupement alkyle (substitué par un ou plusieurs groupements hydroxy, benzyloxy, benzyloxycarbonylamino, acétoxy ou dialkylamino (C1-C6) linéaire ou ramifié) ou un groupement cycloalkyle (C3-C7) (substitué ou non par un ou plusieurs groupements benzyloxy ou acétoxy), composé de formule (I/a) dont on peut transformer le groupement R"4 lorsque celui-ci représente: - un groupement alkyle substitué par un groupement benzyloxy ou cycloalkyle substitué par un groupement benzyloxy en groupement alkyle ou cycloalkyle substitué par un groupement hydroxy, par hydrogénation catalytique, - un groupement alkyle substitué par un groupement acétoxy ou cycloalkyle substitué par un groupement acétoxy, en groupement alkyle ou cycloalkyle substitué par un groupement hydroxy, par réaction avec de l'hydroxyde de lithium ou de sodium, * soit: - en milieu inerte, à température ambiante, avec une solution chloroformique préalablement préparée par agitation en milieu inerte: - d'un équivalent de POCl3, - d'un excès du diol de formule (IX): (CH2)n - OH R'5 - CH (IX) CH2 - OH dans laquelle n a la même signification que dans la formule (I) et R'5 représente un groupement benzyloxy ou benzyloxyméthyl, - et, d'un équivalent de triéthylamine, pour conduire au composé de formule (X): Il 0 C - R'l R'5 0-0 P - X1 - CH - CO - NH - CH (X) OR2 CH2! I H dans laquelle X1, R2, R'I et R'5 ont la même signification que précédemment, que l'on déprotège par hydrogénation catalytique, pour conduire au composé de formule (I/b), cas particulier des composés de formule (II): Il 0 C - R' (I/b) __0 11 i (Z/b) R5 -/ P - X1 - CH - CO - NH - CH R2 CH2 H dans laquelle X1, R'I, R2 et R5 ont la même signification que précédemment, composés de formule (I/a) ou (I/b): - dont on peut transformer le groupement R'I lorsque celui-ci représente un groupement alkoxy ou groupement hydroxy correspondant, - que l'on peut purifier selon des techniques classiques de purification, - dont on peut séparer les isomères selon des techniques classiques de séparation, - et, que l'on peut transformer en sel d'acide ou de base correspondant. La présente invention a également pour objet les compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un composé de formule générale (I) ou un de ses sels d'addition à un acide pharmacologiquement acceptable, seul ou en combinaison avec un ou plusieurs excipients ou véhicules inertes, non toxiques. -7 - Parmi les compositions pharmaceutiques selon l'invention, on pourra citer plus particulièrement celles qui conviennent pour l'administration orale, parentérale, nasale, les comprimés simples ou dragéifiés, les comprimés sublinguaux, les gélules, les tablettes, les suppositoires, les crèmes, pommades, gels dermiques, etc... La posologie varie selon l'âge et le poids du patient, la nature et la sévérité de l'affection ainsi que la voie d'administration. Celle-ci peut être orale, nasale, rectale ou parentérale. D'une manière générale, la posologie unitaire s'échelonne entre 0,1 et 1000 mg pour un traitement en 1 à 3 prises par 24 heures. Les abréviations utilisées dans les exemples sont les suivantes: Leu à la place du résidu leucine Trp à la place du résidu tryptophane Et à la place d'éthyle Exemple 1:N-[(2,3Dihydroxypropoxy)hydroxyphosphinyl]-(S)-Leu-(S)-Trp-OH, disel de sodium Stade A: N-[(2,3-Diacétoxypropoxy)hydroxyphosphinyl]-(S)-Leu-(S)-Trp-OEt 4,8 mmoles de 2,3-diacétoxypropanol en solution dans du chloroforme anhydre sont ajoutées à 0 -5 C à un mélange contenant 4,8 mmoles de phényldichlorophosphate et 9,6 mmoles de triéthylamine dans le chloroforme anhydre. L'ensemble est agité 3 heures à température ambiante. Une solution contenant 4,8 mmoles de (S)-Leu-(S)-Trp-OEt dans le chloroforme anhydre (préparée par couplage peptidique selon la technique décrite par W. KONIG et R. GEIGER (Ber, 103, 788, 1970) de Z- Leu-OH et de H-Trp-OEt) est alors ajoutée au mélange précédent. Après 48 heures d'agitation à température ambiante, le mélange réactionnel est lavé à l'eau, puis avec une solution saturée de chlorure de sodium, séché, filtré et évaporé sous vide. L'huile obtenue est purifiée par chromatographie sur colonne de silice en utilisant un mélange dichlorométhane/acétate d'éthyle (70/30) et conduit au produit attendu. -8 - Stade B: N-[(2,3-Dihydroxypropoxy)hydroxyphosphinyl]-(S)-Leu-(S)Trp-OH, disel de sodium Le produit obtenu au stade A est saponifié dans un mélange contenant 1,75 ml de soude 1N et 20 ml d'éthanol refroidi à 0 -5 C. Après évaporation de l'éthanol, l'huile résiduelle est diluée à l'eau, lavée plusieurs fois au dichlorométhane puis lyophilisée. Le lyophilisat est purifié par passage sur colonne SEPHADEX (LH20). Les phases aqueuses réunies sont à nouveau lyophilisées. Rendement: 50 % Spectre de masse: FAB: [M+Na]+: m/z = 538 Exemple 2: N-[(2-Benzyloxyéthoxy)hydroxyphosphinyl]-(S)-Leu-(S)-Trp-OH, disel de sodium Le produit attendu est obtenu selon le procédé décrit dans l'exemple 1 en remplaçant au stade A le 2,3-diacétoxypropanol par le 2-benzyloxyéthanol. Spectre de masse: FAB: [M+H]+: m/z = 576 Exemple 3: N-[(2Hydroxyéthoxy)hydroxyphosphinyl]-(S)-Leu-(S)-Trp-OEt, sel de sodium Le produit attendu est obtenu par hydrogénation catalytique de 2,7 mmoles du composé obtenu au stade A de l'exemple 2, à pression atmosphérique et à température ambiante, en présence de 50 ml d'éthanol, de 230 mg de bicarbonate de sodium et de 6 ml d'eau et d'un mélange (50/50) PtO2 - Pd/C1o% comme catalyseurs. Après 48 heures d'hydrogénation, les catalyseurs sont filtrés et la solution évaporée. L'huile résiduelle est reprise à l'eau, lavée au dichlorométhane et lyophilisée. Le lyophilisat est alors dissous dans l'eau, purifié sur colonne SEPHADEX (LH20) puis à nouveau lyophilisé et conduit au produit attendu. Spectre de masse: FAB: [M+H]+: m/z = 492 Exemple 4: N-[(2Hydroxyéthoxy)hydroxyphosphinyl]-(S)-Leu-(S)-Trp-OH, disel de sodium Le produit attendu est obtenu par hydrogénation catalytique du composé décrit dans l'exemple 2 en utilisant la méthode décrite dans l'exemple 3. -9 - Spectre de masse: FAB: [M+H]+: m/z = 486 Exemple 5: N-[(3Hydroxypropoxy)hydroxyphosphinyl]-(S)-Leu-(S)-Trp-OH, disel de lithium Le produit attendu est obtenu selon le procédé décrit dans l'exemple 1 en remplaçant au stade A le 2,3-diacétoxypropanol par le 3- acétoxypropanol et par saponification à l'aide d'hydroxyde de lithium. Spectre de masse: FAB: [M+H]+: m/z = 468 Exemple 6: N-[[2-(Benzyloxycarbonylamino)éthoxy]hydroxyphosphinyl]-(S)- Leu-(S)-Trp-OEt, sel de lithium Le produit attendu est obtenu selon le procédé décrit dans l'exemple 1 en remplaçant au stade A le 2,3-diacétoxypropanol par le 2- (benzyloxycarbonylamino) éthanol. La saponification est réalisée à l'aide d'hydroxyde de lithium. Spectre de masse: FAB: [M+H]+: m/z = 609 Etude pharmacologique des composés de l'invention Exemple 7: Etude in vivo des composés de l'invention sur le rat spinalisé Des rats Sprague-Dawley (300-400 g) sont anesthésiés avec de l'éther. Ensuite, les animaux sont spinalisés et placés sous respiration artificielle. Les nerfs vagues sont sectionnés et les artères carotides ligaturées. Un cathéter est introduit dans une des artères carotides pour la mesure de la pression artérielle. Un deuxième cathéter est introduit dans la veine du pénis pour permettre l'injection des substances. Après une période de stabilisation, les animaux reçoivent une injection d'endothéline-1 (ET-1; 0,5 nmol/kg) ou de son précurseur, la big endothéline-1 (big ET-1; 1 nmol/kg). Les réponses pressives sont enregistrées et après retour à la pression initiale (1 h 30 à 2 heures) une deuxième injection de l'ET-1 ou de la big ET-1 est donnée en présence ou en absence d'une infusion d'un produit de l'invention ou de la substance de référence, le phosphoramidon. Le phosphoramidon et les produits de l'invention n'ont pas influencé les hypertensions produites par l'ET-1. Par contre, ils ont inhibé de façon - 10 - dose-dépendante les réponses pressives induites par la big ET-1 indiquant une inhibition de l'ECE. Les résultats des IC50 de ces substances vis-à-vis de la big ET-1 sont rassemblés ci-dessous. Exemple IC50 (gg/kg/min) 1 100 3 400 4 600 Phosphoramidon 125 Exemple 8: Etude in vitro des composés de l'invention sur le rein isolé perfusé de rat Les études sont effectuées sur des reins préparés chez des rats Wistar mâles (300-400 g). Les rats sont anesthésiés avec du sodium O10 pentobarbitone (50 mg/kg i.p.) et le rein gauche est préparé afin de permettre la perfusion avec de la solution Tyrode. Les variations de la pression de perfusion sont mesurées de façon continue. Le débit de perfusion est de 6 ml/min. Après stabilisation, une injection en bolus d'ET-1 (0,03 nmol) ou de big ET-1 (0,4 nmol) est effectuée et la réponse pressive est enregistrée. Après retour à la pression basale, une seconde injection d'ET-1 ou de big ET-1 est faite, soit en solution contrôle, soit en présence du phosphoramidon ou d'un des produits de l'invention. Aucun des produits n'a influencé les réponses pressives à l'ET-1. Par contre, le phosphoramidon et les composés de l'invention ont inhibé de façon importante les réponses pressives obtenues avec la big ET-1. Les ICo50 des produits sont calculés et les résultats sont donnés en gM. Exemple IC50 (PM) 1i 4 3 5 4 7 Phosphoramidon 0,9 - 11 - Exemple 9: Composition pharmaceutique Formule de composition pour 1000 comprimés dosés à 10 mg Composé de l'exemple 1. ........g Hydroxypropylcellulose. .............. 2 g Amidon de blé. ............. ... 10g Lactose. ..................... 100 g Stearate de magnésium. ... DTD: ........... 3 g Talc....................... . 3g..DTD: - 12 - REVENDICATIONS 1. Composés de formule (I): o0 II ? R c- R1 R4 - X2 - P - Xl - CH - C- NH - CH(I) 1 - CH C2 OR3 R2 N H dans laquelle: R1 représente un groupement hydroxy, alkoxy (C1-C6) linéaire ou ramifié ou amino (substitué ou non par 1 ou 2 groupements alkyle (C1-C6) linéaire ou ramifié), R2 représente un groupement alkyle (C1-C6) linéaire ou ramifié substitué ou non par un groupement phényle ou cycloalkyle (C3-C7), X1 représente - NH-, -O- ou -S-, X2 représente -O-, -S- ou -NH-, R3 représente un atome d'hydrogène, alkyle (C1-C6) linéaire ou ramifié ou phényle, R4 représente - un groupement alkyle (C1-C6) linéaire ou ramifié toujours substitué par un ou plusieurs groupements, identiques ou différents, hydroxy, benzyloxy,benzyloxycarbonylamino, amino, mono ou dialkylamino (C1-C6) linéaire ou ramifié ou acétoxy, - un groupement cycloalkyle (C3-C7) substitué ou non par un ou plusieurs groupements hydroxy, benzyloxy ou acétoxy, ou bien, R4 - X2 - P représente l'hétérocycle suivant: OR3 - 13 -2707089 (CH2)n - O O R5 - CH p \ CH2 - O dans lequel: n est égal à O ou 1, R5 représente un groupement hydroxy ou hydroxyméthyle, leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. 2. Composés de formule (I) selon la revendication 1 tels que X1 représente un groupement -NH-, leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. 3. Composés de formule (I) selon la revendication I tels que X2 représente un atome d'oxygène, leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. 4. Composés de formule (I) selon la revendication 1 tels que R4 représente un groupement alkyle (C1-C6) toujours substitué par un ou plusieurs groupements hydroxy, leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. 5. Composé de formule (I) selon la revendication 1 qui est le N-[(2,3- Dihydroxypropoxy)hydroxyphosphinyl]-(S)-Leu-(S)-Trp-OH ainsi que ses sels d'addition à un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable. 6. Procédé de préparation des composés de formule (1) selon la revendication 1 caractérisé en ce que l'on utilise comme produit de départ l'amino-acide de formule (II), sous forme racémique ou d'énantiomère pur: - 14 - o Il C - R'l I CH I (II) H2N - CH-W H N H dans laquelle: R'l représente un groupement alkoxy (Cl-C6) linéaire ou ramifié ou amino (substitué ou non par 1 ou 2 groupements alkyle (Cl- C6) linéaire ou ramifié), que l'on fait réagir avec un composé de formule (III) sous forme racémique ou d'énantiomère pur: P - Xl - CH - C02H (III) I R2 dans laquelle R2 et X1 a la même signification que dans la formule (I) et P représente un groupement protecteur approprié, pour conduire à un composé de formule (IV), dont on sépare éventuellement les isomères selon une technique classique de séparation: Il 0 C - R'I Il I P - X1 - CH - C - NH - CH (IV) 1 '1CH2 R2 N H dans laquelle R'I, R2, X1 et P ont la même signification que précédemment, que l'on déprotège selon la nature de P par une technique appropriée, pour conduire au composé de formule (V): - 15 - C -R'l H - X1 - CH - C - NH - CH R2 \CH2 () R2 n I I H dans laquelle R'I, R2 et X1 ont la même signification que précédemment, que l'on fait réagir: * soit: - en milieu inerte, à température ambiante, avec une solution chloroformique préalablement préparée par agitation en milieu inerte: - d'un équivalent d'un phényl dichlorophosphate de formule (VII): C6H50 O P (VII) Cl Cl - d'un équivalent du composé de formule (VIII): R'4 - X2 - H (VIII) dans laquelle X2 a la même signification que dans la formule (I), R'4 représente un groupement alkyle (substitué par un ou plusieurs groupements benzyloxy, benzyloxycarbonylamino, acétoxy ou dialkylamino (Cl-C6) linéaire ou ramifié), un groupement cycloalkyle (C3- C7) (substitué ou non par un ou plusieurs groupements benzyloxy ou acétoxy) - et, de deux équivalents de triéthylamine, pour conduire au composé de formule (I/a), cas particulier des composés de formule (I): -16 - 2707089 1 l I l 8Il 0 c - R'I R"4 - X2 - P - Xl - CH - C - NH - CH (I/a) OH R2 CH2 N H dans laquelle R' 1, R2 et X2 ont la même signification que précédemment et R"4 représente un groupement alkyle (substitué par un ou plusieurs groupements hydroxy, benzyloxy, benzyloxycarbonylamino, acétoxy ou dialkylamino (C1-C6) linéaire ou ramifié) ou un groupement cycloalkyle (C3-C7) (substitué ou non par un ou plusieurs groupements benzyloxy ou acétoxy), composé de formule (I/a) dont on peut transformer le groupement R"4 lorsque celui- ci représente: - un groupement alkyle substitué par un groupement benzyloxy ou cycloalkyle substitué par un groupement benzyloxy en groupement alkyle ou cycloalkyle substitué par un groupement hydroxy, par hydrogénation catalytique, - un groupement alkyle substitué par un groupement acétoxy ou cycloalkyle substitué par un groupement acétoxy, en groupement alkyle ou cycloalkyle substitué par un groupement hydroxy, par réaction avec de l'hydroxyde de lithium ou de sodium, * soit: - en milieu inerte, à température ambiante, avec une solution chloroformique préalablement préparée par agitation en milieu inerte: - d'un équivalent de POCl3, - d'un excès du diol de formule (IX): (CH2)n - OH R'5 - CH (IX) CH2 - OH dans laquelle n a la même signification que dans la formule (I) et R'5 représente un groupement benzyloxy ou benzyloxyméthyl, - et, d'un équivalent de triéthylamine, pour conduire au composé de formule (X); - 17 - 0o Il 0 C - R'I 0 11 i 1 R'5 0 - / P - X1 - CH - CO - NH - CH (X) R2 CH2 H dans laquelle Xl, R2, R'I1 et R'5 ont la même signification que précédemment, que l'on déprotège par hydrogénation catalytique, pour conduire au composé de formule (I/b), cas particulier des composés de formule (I): on Il 0 C - R' (I/b) / O0 X 1jI1 (I/b) R5 - P - X1 - CH - CO - NH - CH R2 CH2 o/ i N H dans laquelle X1, R'I, R2 et R5 ont la même signification que précédemment, composés de formule (I/a) ou (I/b): - dont on peut transformer le groupement R'l lorsque celui-ci représente un groupement alkoxy ou groupement hydroxy correspondant, - que l'on peut purifier selon des techniques classiques de purification, - dont on peut séparer les isomères selon des techniques classiques de séparation, - et, que l'on peut transformer-en sel d'acide ou de base correspondant. 7. Composé pharmaceutique contenant comme principe actif un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, seul ou en combinaison avec un ou plusieurs excipients ou véhicules inertes, non toxiques, pharmaceutiquement acceptables. 8. Composé pharmaceutique selon la revendication 7 contenant un principe actif selon l'une quelconque des revendicatons 1 à 5 utiles en tant qu'inhibiteur d'endotheline convertase.