FR 2691459 A1 19931126 FR 9206353 A 19920525 1 2691459 La présente invention concerne de nouveaux dérivés de la phénothiazine, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent. Certains dérivés de la phénothiazine ont été décrits par exemple dans les brevets US-A-2519886 et US-A-2645640 pour leurs propriétés antidyspnéiques, antihistaminiques, ganglioplégiques, spasmolytiques ou analgésiques. Les produits de la présente invention, outre le fait qu'ils soient nouveaux, présentent une activité inhibitrice vis-à-vis des cytokines dont le facteur nécrosant des tumeurs (TNF), et trouvent donc une application originale dans les affections pouvant induire un choc septique, les affections inflammatoires, les rejets de greffons, la douleur, l'hypertension, etc La présente invention concerne plus particulièrement les composés de formule générale (I) Xi X 9 N(O A dans laquelle X 1 et X 2 sont identiques ou différents et choisis dans le groupe constitué par un atome d'hydrogène ou un atome de chlore, avec la restriction qu'au moins un radical X 1 ou X 2 représente un atome de chlore, Y est choisi parmi S, SQ et 502, A étant un radical choisi parmi les radicaux alkyles (Cl-C 20) linéaires ou ramifiés, et le radical -(CH 2)3-Z t 2691459 dans lequel Z est choisi dans le groupe contenant: a/ les radicaux nitrile, carboxy ou alkoxy carbonyle, b/ les radicaux XNT 2, Bre T 3 o T 1, T 2 et T 3 sont identiques ou différents et choisis dans le groupe formé des radicaux alkyles linéaires ou ramifiés comprenant de 1 à 5 atomes de carbone, et des radicaux arylalkyle ou benzyle, c/ les radicaux -N -N COOR 1 R o R 1 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 5 atomes de carbone, un radical benzyle ou un radical arylalkyle, d/ le radical Ri 1 N R 1 o R 1 et R'1 représentent un atome d'hydrogène, un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 5 atomes de carbone, un radical benzyle ou un radical arylalkyle, ainsi que leurs éventuels sels d'addition à un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable et leurs isomères optiques, diastéréoisomères ou épimères. La présente invention a également pour objet le procédé de préparation des dérivés de formule (I), caractérisé en ce que le produit de départ est la phénothiazine de formule (II): q -3- X 1 -N X 2 H (II) dans laquelle Xl et X 2 sont tels que définis précédemment, que l'on oxyde éventuellement: en monoxyde de formule (I Ia) au moyen d'un réactif approprié, par exemple l'acide nitrique, suivi d'une neutralisation par une solution d'hydroxyde de sodium: (I Ia) X 1 H o X 1 et X 2 sont tels que définis précédemment, en dioxyde de formule (I Ib), après protection de l'azote de la phénothiazine, par exemple par l'anhydride acétique, avec un agent oxydant approprié, tel que l'eau oxygénée dans l'acide acétique: o X 2 (I Ib) dans laquelle X 1 et X 2 sont tels que précédemment définis, les composés de formule (II), (I Ia) et (I Ib) étant alors soumis: a/ soit à une alkylation, par exemple à l'aide d'amidure de sodium dans le xylène à reflux, avec le composé de formule (III): R X (III) -4- dans laquelle X est un atome d'halogène et R un radical alkyle (C 1- C 20) linéaire ou ramifié, pour obtenir les composés de formule (Ia): X 2 (Ia) o R, Y, Xl et X 2 sont tels que définis précédemment b/ soit à une alkylation, par exemple à l'aide d'amidure de sodium en solvant approprié comme le xylène ou le dioxane, avec le composé de formule (IV): /T 2 Cl-(CH 2)3-N/T 2 \T 3 (IV) dans laquelle T 2 et T 3 sont tels que définis précédemment, pour donner le dérivé de formule (V): Xl. (V) qui sera transformé par le composé de formule (VI): T 1 Br (VI) o TI est quaternaire tel que précédemment défini, en bromure d'ammonium de formule (Ib): "Y Xl 1 X 2 /T 3 N T 2 E)\T 1 (Ib) Bre o Y, X 1, X 2, T 1, T 2 et T 3 sont tels que définis précédemment, 1 % 2691459 c/ soit à une alkylation, par exemple à l'aide de sulfate de tétrabutylanunmmonium dans un mélange cétone/base, par exemple méthylisobutylcétone/hydroxyde de sodium, avec le 1-bromo-3- chloropropane, conduisant au synthon de formule (VII): Xl Y / X 2 (VII) Cl o X 1, X 2 et Y sont tels que précédemment définis, qui, traité par: a/le cyanure de tétraéthylammonium en présence d'alcool, par exemple l'isopropanol, conduit au composé de formule (Ic): X Xl X 2 (Ic) Li CN o Y, X 1, et X 2 sont tels que définis précédemment qui, par hydrolyse éventuelle, donne le composé de formule (Id): X 1 l X 2 (Id) XC/ H o Y, X 1 et X 2 sont tels que définis précédemment et par estérification éventuelle conduit à son ester correspondant, P/une des amines cycliques suivantes: t H O XN o R 1 R'1 H-N pour lesquelles R 1 et R'1 sont tels que définis précédemment, en présence d'un sel alcalin, d'une base alcaline et d'éther-couronne, conduit respectivement aux composés de formules (Ie), (If), (Ig) suivants: X 2 COOR 1 COO Ri (Ie) (If) Xl- Xl Y X 2 R' N R 1 (Ig) formules dans lesquelles Y, X 1, X 2, R 1 et R'1 sont tels que définis précédemment, une variante pour l'obtention du composé de formule (Ig) étant la transformation du synthon de formule (VII) en azide puis en 6 - R 1 amine correspondante et réaction avec le composé de formule (VIII): o puis réduction par Li Al H 4 selon la méthode décrite dans J. Med Chem, ( 1990), 33, 2963, l'ensemble des composés de formule (Ia) à (Ig) formant l'ensemble des dérivés de formule générale (I) que l'on purifie le cas échéant selon une technique classique de purification et dont on sépare, si on le souhaite, les isomères par une technique classique de séparation et que l'on transforme, si nécessaire, en leurs sels d'addition à un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable, composés qui, lorsque Y = S peuvent être oxydés en S-oxyde ou S-dioxyde correspondants. Les composés de formule I possèdent des propriétés pharmacologiques nouvelles Administrés à la souris, ils inhibent la production de Facteur Nécrosant des Tumeurs (TNF) impliqué dans un grand nombre de situations pathologiques allant de l'inflammation au choc septique. Le TNF est une cytokine secrétée après activation de macrophages, de monocytes ou d'autres cellules immunocompétentes et qui, une fois libérée dans la circulation et les tissus, se fixe sur des récepteurs spécifiques. Il joue, avec l'interleukine-1 (IL-1), un rôle déterminant dans la survenue d'effets inflammatoires et métaboliques Les effets biologiques et/ou pathologiques sont multiples: fièvre, fuite capillaire, coagulation intravasculaire, inflammation, perte protéique, cachexie Les exemples suivants illustrent l'invention sans la limiter d'aucune façon Les produits de départ sont connus ou préparés à partir de modes opératoires connus. 7 - 8 2691459 Exemple A: Préparation de 2-chloro-10-( 3-diméthylaminopropyl) phénothiazine - 3,56 g ( 10 mmoles) de chlorhydrate de 2-chloro-10-( 3- diméthylaminopropyl)phénothiazine sont mis en suspension dans 15 ml d'une solution d'hydroxyde de sodium 1 N L'amine libérée est extraite à l'éther éthylique La phase organique décantée est séchée sur sulfate de sodium puis évaporée à sec. 3,13 g d'une huile correspondant au produit attendu sont obtenus. Rendement: 98 % Exemple 1: Bromure de N-l 3-( 2-chlorophénothiazin-10yl)propyll triméthylammonium A 3,2 g ( 10 mmoles) d'huile obtenue dans l'exemple A sont ajoutés à O C et sous atmosphère d'argon, 150 mmoles de bromure de méthyle (solution 2 M dans l'éther éthylique) Après 8 à 12 heures d'agitation à température ambiante, le composé formé est séparé par filtration, lavé à l'éther éthylique et séché sous vide phosphorique 2,7 g de produit attendu sont obtenus. Rendement: 65 % Point de fusion: 137-140 C Exemple B: Nitrate de 2-chloro-10-( 3- diméthylaminopropyl) phénothiazine-5-oxyde Une solution de 3,56 g ( 10 mmoles) de chlorhydrate de 2-chloro-10-( 3- diméthylaminopropyl) phénothiazine dans 50 ml d'eau est additionnée goutte à goutte à 5,5 ml d'une solution d'acide nitrique 11 N Le mélange est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 30 minutes Le p H est ensuite amené à une valeur de 3-4 par addition d'une solution d'hydroxyde de sodium 1 N Après 15 heures d'agitation à O C, le produit attendu cristallise Après filtration et séchage sous vide phosphorique, 3,7 g du produit attendu sont obtenus. Rendement: 93 % Point de fusion: 102-104 C î 1 Exemple 2: Bromure de N- l 3-( 2-chloro-5-oxo-phénothiazin-10-yl)propyll triméthylammonium Le nitrate obtenu dans l'exemple B est traité de manière analogue à celle décrite dans l'exemple A L'amine libre ainsi obtenue est méthylée selon la méthode décrite dans l'exemple 1. Rendement: 95 % Point de fusion: 240-243 C Exemple C: 2-Chloro-10-( 3- diméthylaminopropyl)phénothiazine-5-dioxyde Etape a/ 2-Chloro-10- acétylphénothiazine-5-dioxvde 4,2 g ( 15 mmoles) de 2-chloro-10-( 3- diméthylaminopropyl)phénothiazine sont mis en solution dans 30 ml d'acide acétique glacial 3,25 ml d'une solution de peroxyde d'hydrogène (à 20 % dans l'eau) sont ajoutés Le mélange est porté à 90 C pendant 4 heures 30 Après retour à température ambiante, l'addition d'eau provoque la précipitation du produit attendu. Après filtration, lavage à l'eau et séchage sous vide phosphorique, 4 g de sulfone sont obtenus. Rendement: 87 % Point de fusion: 195-197 C Etape b/ 2Chlorophénothiazine-5-dioxvde La sulfone obtenue dans l'étape a/ est mise sous agitation dans 100 ml d'un mélange 1:1 d'hydroxyde de sodium 1 N et d'éthanol Après deux heures de réaction à reflux, l'éthanol est évaporé Le précipité est filtré, lavé à l'eau puis séché sous vide phosphorique. Rendement: 96 % Point de fusion: 271-273 C 9 - 2691459 Etape c/ 2-Chloro-10-( 3-diméthvlaminopropvl)phénothiazine-5-dioxyde A 5, 3 g ( 20 mmoles) de la sulfone obtenue précédemment dans 200 ml de dioxane est ajouté 1,17 g ( 30 mmoles) d'amidure de sodium Le mélange est porté à reflux pendant 3 heures 4,9 g ( 40 mmoles) de 3-chloro-N,N- diméthylpropanamine dans 20 ml de toluène sont additionnés à la solution précédente Après 20 heures de reflux, le solide formé est éliminé par filtration 3 g de produit sont obtenus après évaporation du solvant et recristallisation dans l'éthanol. Rendement: 60 % Point de fusion: 105-106 C Exemple 3: Bromure de N-l 3- ( 2-chloro-5-dioxo-phénothiazin-10-yl) propyll triméthylammonium Ce composé est obtenu selon le mode opératoire décrit dans l'exemple 1 en utilisant comme produit de départ la sulfone de l'exemple C. Rendement: 73 % Point de fusion: 183-184 C Exemple 4: Bromure de N-l 3-( 2chlorophénothiazin-10-yl)propyll diméthyléthylammonium Synthèse identique à celle décrite dans l'exemple 1, l'agent alkylant étant cette fois-ci le bromure d'éthyle. Rendement: 88 % Point de fusion: 176-177 C Exemple 5: Bromure de N-l 3- ( 2-chlorophénothiazin-10-yl)propyll diméthylpropylaxmmonium Même remarque que pour l'exemple 4, l'alkylation étant réalisée ici par le bromure de propyle. Rendement: 66 % Point de fusion: 213-215 C 11 - Exemple 6: Bromure de Nl 3-( 2-chlorophénothiazin-10-yl)propyll dimethylisopropylamnonium Synthèse identique à celle de l'exemple 5 en utilisant le bromure d'isopropyle. Rendement: 61 % Point de fusion: 153-154 C Exemple 7: Bromure de N-l 3-( 2-chlorophénothiazin-10-yl)propyll butyldiméthylammonium Même remarque que pour l'exemple 4, l'agent alkylant étant ici le bromure de n-butyle. Rendement: 68 % Point de fusion: 191 C Exemple 8: Bromure de N-l 3-( 2ehloro-5-oxo-phénothiazin-10-yl)propyll butyldiméthylammonium Synthèse analogue à celle décrite dans l'exemple 2, l'agent alkylant étant dans ce cas le bromure de n-butyle. Rendement: 81 % Point de fusion: 260-264 C Exemple 9: Bromure de N-l 3- ( 2-chloro-5-dioxo-phénothiazin-10-yl) propyllbutyldiméthylammonium Une solution de 1,75 g ( 5 mmoles) de sulfone obtenue dans l'exemple C, dans 20 ml de 1-bromobutane est portée à reflux pendant 8 heures, puis laissée sous agitation à température ambiante pendant 12 heures Le précipité obtenu est filtré, puis lavé abondamment à l'éther éthylique. Après purification par recristallisation dans un mélange méthanol/éthanol, 1,58 g de produit attendu est obtenu. Rendement: 65 % Point de fusion: 270-274 C 12 2691459 Exemple 10: Bromure de N-l 3-( 2-chlorophénothiazin-10-yl)propyll benzyldiméthylammonium 3,2 g ( 10 mmoles) du composé de l'exemple A sont mis en solution dans 35 ml de tétrahydrofurane, auxquels sont ajoutés ensuite 3,18 g ( 20 mmoles) de bromure de benzyle en solution dans le tétrahydrofurane Le mélange réactionnel est porté à reflux pendant 15 heures Le précipité formé, séparé par filtration, lavé à l'éther éthylique puis séché sous vide phosphorique, fournit 2,84 g de produit attendu. Rendement: 58 % Point de fusion: 140-142 C Exemple 11: 2-Chloro-10-l 1-( 4-méthylpentyl)lphénothiazine Un mélange de 11,68 g ( 50 mmoles) de 2-chlorophénothiazine et de 2,34 g ( 60 mmoles) d'amidure de sodium dans 100 ml de xylène est porté à reflux pendant 1 à 2 heures 50 ml de 1bromo-4-méthylpentane dans 25 ml de xylène sont ajoutés, puis le mélange est à nouveau porté à reflux pendant une nuit. Après refroidissement du milieu réactionnel et filtration du résidu solide, le filtrat est évaporé à sec 5,88 g d'huile sont obtenus après distillation sous pression réduite. Rendement: 37 % Point d'ébullition: 140 C (sous 0,5 m Bar) Exemple 12: 2-Chloro-10-l 1-( 4-méthylpentyl)lphénothiazine-5-dioxyde 1,6 g ( 5 mmoles) du composé de l'exemple 10 sont soumis à l'action de peroxyde d'hydrogène comme décrit dans l'exemple C, étape a/, 1,28 g de produit attendu est recueilli. Rendement: 73 % Point de fusion: 90-92 C t 13 - Exemple 13: 2-Chloro-10tétradécylphénothiazine Condensation de 2-chlorophénothiazine et de 1bromotétradécane selon la méthode décrite dans l'exemple 11. Rendement: 67 % Point de fusion: 27-28 C Exemple D: 2-Chloro-10-( 3chloropropyl)phénothiazine Une solution de 2,34 g ( 10 mmoles) de 2chlorophénothiazine, 4,73 g ( 30 mmoles) de 1-bromo-3-chloropropane et de 0,34 g ( 1 mmol) de sulfate de tétrabutylammonium dans 40 ml de 4méthylpentan-2-one est additionnée de 40 ml d'une solution d'hydroxyde de sodium ( 50 % en poids) Le mélange est agité à température ambiante pendant 48 heures Après traitement habituel de la phase organique, séchage sur sulfate de sodium, évaporation du solvant et purification par chromatographie sur gel de silice, 2,17 g de produit pur sont obtenus (Eluant: éther de pétrole). Rendement: 70 % Point de fusion: 51-52 C Exemple 14: 1-l 3-( 2-Chlorophénothiazin-10-yl)-l-propyllpyrrole-2- carboxylate de méthyle Sous atmosphère d'argon sont introduits successivement 3,17 g ( 25 mmoles) de pyrrole-2-carboxylate de méthyle, 2,07 g ( 15 mmoles) de carbonate de potassium, 27,5 ml d'hydroxyde de potassium et 0,66 g ( 2,5 mmoles) d'éther 18-couronne-6, en solution dans 120 ml de toluène Une agitation pendant 2 heures à température ambiante provoque la précipitation de l'anion pyrrolique 7, 75 g ( 25 mmoles) de composé obtenu dans l'exemple D dans 25 ml de toluène sont ajoutés goutte à goutte Le mélange est ensuite porté six heures à reflux Après hydrolyse par une solution saturée de chlorure de potassium, extraction à l'éther éthylique et lavage à l'eau des phases organiques réunies, celles-ci sont séchées sur sulfate de sodium et le solvant est évaporé. Après purification par chromatographie sur gel de silice, 5,98 g de produit attendu sont obtenus (Eluant: dichlorométhane/cyclohexane). Rendement: 60 % Point de fusion: 90-92 C Exemple 15: Acide 1-l 3-( 2ehlorophénothiazin-10-yl)-l-propyllpyrrole-2- carboxylique 3,99 g ( 10 mmoles) de composé obtenu dans l'exemple 14 sont mis en solution dans 15 ml d'éthanol et 7,5 ml de diméthylsulfoxyde 0,8 g ( 20 mmoles) d'hydroxyde de sodium (en solution 1 N) est ajouté et le mélange est porté à reflux sous agitation pendant 7 heures Après acidification par une solution 1 N d'acide chlorhydrique et traitement habituel des phases organiques, 3,62 g de produit attendu sont obtenus. Rendement: 94 % Point de fusion: 162-163 C Exemple 16: 8-l 3-( 2-Chlorophénothiazin-10-yl)-1 l-propyll-2-oxo-3,8diaza- 1-oxa-spirol 4 5 ldécan-2-one Réaction identique à celle décrite dans l'exemple 14 en condensant la 3, 8- diaza-1-oxa-spirodécan-2-one (composé décrit dans US-A-3594386). 6,01 g de produit sont obtenus après recristallisation dans l'acétate d'éthyle. Rendement: 56 % Point de fusion: 142-143 C Exemple 17: 2-Chloro-10-l 1- ( 4-cyanopropyl)lphénothiazine A 2,48 g ( 8 mmoles) du composé de l'exemple D en solution dans 25 ml d'isopropanol est ajouté 1, 7 g ( 12 mmoles) de cyanure de tétraéthylammonium dans 12 ml d'isopropanol. Le mélange est porté à reflux pendant 72 heures Après évaporation de l'isopropanol, le chlorure de tétraéthylammonium est précipité par l'éther éthylique et éliminé par filtration Une purification par chromatographie 14 - - sur gel de silice (éluant cyclohexane/acétate d'éthyle) conduit à 2,10 g de produit attendu. Rendement: 87 % Point de fusion: 75-77 C Exemple 18: Acide 4-( 2chlorophénothiazin-10-yl)butanoique 2,10 g ( 7 mmoles) de produit de l'exemple 17 sont mis en solution dans 20 ml d'éthanol 1,57 g ( 28 mmoles) d'hydroxyde de potassium en solution dans ml d'eau est ajouté et le mélange est porté à reflux pendant 12 heures, puis abandonné une nuit à température ambiante Le milieu est alors acidifié par une solution d'acide chlorhydrique 1 N Le traitement de la phase organique par le dichlorométhane puis l'acétone fournit 1,17 g d'acide. Rendement: 52 % Point de fusion: 142-144 C Exemple 19: 2-l 3-( 2-Chlorophénothiazin-10-yl)-1 l-propyll-8tertiobutyl-2- azaspirol 4 5 ldécane Etape a/ 10-( 3-Azidopropyl)-2-chlorophénothiazine 3,10 g ( 10 mmoles) de 10-( 3-chloropropyl)-2-chlorophénothiazine, 0, 98 g ( 15 mmoles) d'azoture de sodium et une quantité catalytique d'iodure de potassium sont dissous dans 40 ml de diméthylsulfoxyde La solution est portée à 55 C sous agitation pendant 25 heures Le traitement habituel de la phase organique conduit à 2,79 g de produit attendu. Rendement: 88 % Point de fusion: 47-48 C Etape b/ 2-Chloro-10-( 3aminopropvl)phénothiazine 0,46 g ( 12 mmoles) d'hydrure double de lithium et d'aluminium sont mis en suspension sous argon à O C dans 12 ml de tétrahydrofurane anhydre 2,53 g ( 8 mmoles) du composé obtenu dans l'étape a/ sont ajoutés Le mélange est 16 2691459 hydrolysé, la phase organique lavée avec un mélange dichlorométhane/ méthanol pour donner 2,18 g du produit attendu. Rendement: 94 % Etape c/ 2 l 3-( 2-Chlorophénothiazin-10-vl)-1-propy 11-8-tertiobutvl-2- azaspirol 4 51 décan-1,3-dione Un mélange équimoléculaire du composé obtenu dans l'étape b/ et de 8- tertiobutyl-2-oxaspirol 4 5 ldécan-1,3-dione (préparée selon J Med Chem, ( 1990), 33, 2963) dans le toluène est porté à reflux en présence de tamis moléculaire pendant 4 jours Après élimination du tamis moléculaire et l'évaporation du solvant, une huile correspondant au produit attendu est obtenue. Rendement: 88 % Point de fusion: 139-140 C Etape d/ 2-l 3-( 2-Chlorophénothiazin-10-yl)-1-propyll-8-tertiobutyl-2- azaspirol 4 51 décane La réduction du produit obtenu dans l'étape c/ est effectuée dans les mêmes conditions que la réduction effectuée dans l'étape b/. Rendement: 75 % Point de fusion: 227-2280 C ETUDE PHARMACOLOGIQUE Exemple 20: Inhibition de la production de TNF Le test est réalisé chez la souris Trente minutes après l'administration intrapéritonéale de la molécule à tester, les souris sont traitées par 2,5 pg de LPS provenant d'Escherichia coli par voie intrapéritonéale Le taux de TNF est mesuré dans le sérum après 1 heure, par une méthode biologique. i 7 - Inhibition (par rapport au lot Tableau I de la production de TNF témoin ayant reçu uniquement LPS) Les composés ici décrits diminuent nettement les taux sériques de TNF et améliorent pour certains très nettement la survie de la souris chez laquelle a été administrée préalablement par voie intra-péritonéale de l'endotoxine (ou lipopolysaccharide (LPS). Exemple 21: Effet protecteur des composés vis-à-vis du choc au LPS Le test est réalisé chez la souris Le composé à tester est administré par voie intrapéritonéale ou par voie orale Dans le premier protocole (voie ip), le composé est administré 30 minutes avant l'injection de 1 pg de LPS chez la souris La mortalité est déterminée 72 heures après. Composé % inhibition après adm ip Composé doe (dose) Exemple 1 75 % ( 5 mg/kg) Exemple 2 50 % ( 5 mg/kg) Exemple 3 69 % ( 5 mg/kg) Exemple 6 95 % ( 5 mg/kg) Exemple 7 71 % ( 5 mg/kg) Exemple 8 75 % ( 5 mg/kg) Exemple 9 27 % ( 5 mg/kg) Exemple 10 52 % ( 5 mg/kg) Exemple 11 75 % ( 5 mg/kg) Chlorpromazine 100 % ( 4 mg/kg) 18 2691459 Tableau II % Survie des souris après administration de LPS Composé % survie 72 h après administration ip Exemple 1 80 % ( 5 mg/kg) Exemple 6 40 % ( 5 mg/kg) Exemple 9 60 % ( 5 mg/kg) 36 % ( 1 mg/kg) Chlorpromazine 77 % ( 4 mg/kg) Exemple 21: Effet périphérique des composés Par rapport à la chlorpromazine, les composés brevetés ne possèdent qu'un effet périphérique A titre d'exemple, le composé de l'exemple 1 administré en ip ( 8 mg/kg) au rat, ayant reçu ensuite une injection intracérébroventriculaire de LPS, diminue chez l'animal, comme la chlorpromazine, le taux sérique de TNF mais non son taux cérébral comme il est observé chez le rat traité par la chlorpromazine (Figure I). ll LPS TNF (ng/ml) TNF (ng/ml) M CPZ/LPS 80 l Exemple 1/ LPS 40 o o SERUM HYPOTHALAMUS FIGURE I 19 - Exemple 23: Activité locomotrice de la souris Ce test consiste à déterminer l'activité motrice spontanée de la souris placée dans une enceinte constituant un environnement nouveau et équipée d'un système de rayons infra-rouges dont l'interruption lors du passage de l'animal sert de critère de mesure ("Activity monitor" Digiscan-Omnitech Electronics, Sufraco France). Les molécules sont administrées par voie intrapéritonéale 30 minutes avant le test aux doses de 1, 2, 2,5, 4, 5 et 10 mg/kg L'activité locomotrice (nombre de mouvements) est mesurée pendant 15 minutes. Contrairement à la chlorpromazine, les composés se montrent peu ou non sédatifs (cf Tableau III). Tableau III Nombre de mouvements (en % par rapport à un lot témoin) DOSE IP 1 mg/kg 2 mg/kg 2,5 mg/kg 4 mg/kg 5 mg/kg 10 mg/kg Exemple 1 -20 % ns -9 % ns Exemple 6 -27 % ns -43 %** -63 % ** Chlorpromazine -20 % ns -58 % ** -64 % ** La différence observée entre chlorpromazine (très sédative dès 2 mg/kg alors que la dose efficace est de 4 mg/kg) et les composés étudiés tient à leur passage limité de la barrière hématoencéphalique comme le montre la détermination de la corticostéronémie après administration d'IL-1. Exemple 24: Mesure de la corticostéronémie après administration d'IL-1 Trente minutes après administration intrapéritonéale de la molécule à tester, les souris sont traitées par 1 pg d'IL-1 injecté par voie intrapéritonéale La corticostéronémie est déterminée 2 heures après par une technique appropriée Un lot témoin reçoit dans les mêmes conditions une administration intrapéritonéale du composé, puis d'une solution saline Sous l'influence de IL-1, la corticostéronémie augmente de façon très importante (contrôle: + 735 %) Les composés revendiqués ne modifient pas sensiblement le taux basal de corticostérone Après administration par IL-1, les niveaux de la corticostéronémie ne sont pas non plus différents de celui observé chez les témoins En revanche, la chlorpromazine (qui traverse la barrière hématoencéphalique), abaisse l'hyper-corticostéronémie de l'ordre de 60 %. Tableau IV Corticostéronémie après administration d'IL-1 (ng de corticostérone/ml de sérum) Composé Solution Après adm Baisse de la C( 5 mg/kg) saline prsd' N I- corticostéronémie par ( 5 mg/kg)saline d'IL rapport au contrôle Exemple 1 91 18 480 64 4 % Exemple 2 72 26 489 15 2 % Exemple 6 22 6 411 82 18 % Exemple 7 111 88 467 79 7 % Exemple 9 111 66 551 14 O % Chlorpromazine 126 56 189 92 60 % ( 4 mg/kg) Contrôle 60 46 501 65 Exemple 25: Effet hypotenseur Contrairement à la chlorpromazine, les composés sont dénués d'effet hypotenseur chez le rat. Aucune hypotension n'est observée à 20 mg/kg par voie intra-péritonéale chez le rat pour les composés des exemples 1, 2, 6 et 7 Ceci n'est pas le cas de la chlorpromazine qui, à la même dose, entraîne une hypotension sévère dès la 15 ème minute. 21 - Exemple 26: Affinité des composés vis-à-vis des récepteurs monaminergiques Contrairement à d'affinité pour psychotrope de dopaminergiques, la chlorpromazine, les composés présentent peu ou pas les récepteurs monoaminergiques impliqués dans l'activité la chlorpromazine (Récepteurs alpha-1 adrénergiques, sérotoninergiques) (Tableau V). Tableau V Affinité des composés vis-à-vis des récepteurs (p IC 50 (M)) aminergiques * Récepteur alpha 1 NA D 1 D 2 HT-1 A HT-1 B HT uptake ligand: 3 H-prazosine 3 H-SCH 23390 3 H-spiperone 3 H-80 H-DPAT 3 H-5 HT 3 H-paroxétine (localisation (localisation (localisation (localisation (localisation (localisation cortex) striatum) striatum) hippocampe) striatum) cortex) Les résultats rassemblés dans le tableau sont exprimés en p IC 50 (M) Sur les récepteurs dopaminergiques D 1 et D 2, les différences observées entre chlorpromazine et composés sont d'au moins de 2 log. Récepteur* Exemple Exemple Exemple Exemple Chlorpromazine 1 2 6 7 Alpha-1 NA 6 57 4 96 6 40 5 32 7 87 D 1 4 69 D 2 5 22 HT-1 A HT-1 B HT uptake 22 2691459 Exemple 27: Inhibition de l'activité phospholipase PLA 2 de porc En plus de leur effet sur le TNF, les molécules possèdent également une activité inhibitrice de la phospholipase A 2 (PLA 2) La PLA 2 hydrolyse les phospholipides membranaires des cellules en libérant de l'acide arachidonique (AA) L'inhibition de cette enzyme entraîne une réduction des taux d'AA libre non estérifié à partir duquel sont produits des métabolites tels que les leucotriènes et les prostaglandines proinflammatoires. L'acitivité PLA 2 est mesurée en prenant comme substrat des membranes d'E. coli marquées avec de l'acide oléique tritié La PLA 2 pancréatique de porc est incubée avec la préparation pendant 30 minutes à 37 C Après centrifugation, la radioactivité du surnageant est comptée L'activité inhibitrice du composé (lm M) est exprimée par rapport au contrôle. Tableau VI Composé % Inhibition à 1 m M Exemple 1 72 % Exemple 6 97 % Exemple 9 98 % Exemple 10 27 % Exemple 11 37 % Chlorpromazine 76 % Mépacrine 67 % 23 - REVENDICATIONS 1 Composés de formule générale (I): Xl X 2 (I) A dans laquelle: X 1 et X 2 sont identiques ou différents et choisis dans le groupe constitué par un atome d'hydrogène ou un atome de chlore, avec la restriction qu'au moins un radical X 1 ou X 2 représente un atome de chlore, Y est choisi parmi S, SO et 502, A étant un radical choisi parmi: les radicaux alkyles (C 1-C 20) linéaires ou ramifiés, et le radical -(CH 2)3-Z dans lequel Z est choisi dans le groupe contenant: a/ les radicaux nitrile, carboxy ou alkoxy carbonyle, b / les radicaux e i NT 2 Br" T 3 o T 1, T 2 et T 3 sont identiques ou différents et choisis dans le groupe formé des radicaux alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 5 atomes de carbone, et des radicaux arylalkyle ou benzyle, c/ les radicaux COOR 1 R 24 2691459 o R 1 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 5 atomes de carbone, un radical benzyle ou un radical arylalkyle, d/ le radical R' l -N o R 1 et R'I 1 représentent un atome d'hydrogène, un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 5 atomes de carbone, un radical benzyle ou un radical arylalkyle, ainsi que leurs éventuels sels d'addition à un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable et leurs isomères optiques, diastéréoisomères ou épimères. 2 Composés selon la revendication 1 dans laquelle A est le groupe TI - (CH 2)3-NI -T 2, Br O \ T 3 o T 1, T 2 et T 3 sont tels que définis dans la revendivcation 1. 3 Composés selon la revendication 1 dans laquelle Y représente le groupe 502. 4 Composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 dans lesquelles X 1 est un atome de chlore et X 2 est un atome d'hydrogène. Composés selon la revendication 4 dans laquelle l'atome de chlore est en position 2. 6 Composé selon l'une quelconque des revendications 1, 2, 4, ou 5 qui est le bromure de N-l 3-( 2-chlorophénothiazin-10yl)propylltriméthylammonium. 7 Composé selon l'une quelconque des revendications 1, 2, 4, ou 5 qui est le bromure de N-l 3-( 2-chloro-5-oxo-phénothiazin-10- yl)propylltriméthyl- ammonium. - 8 Composé selon l'une quelconque des revendications 1, 2, 4, ou 5 qui est le bromure de N-l 3-( 2-chlorophénothiazin-10-yl)propylldiméthyl- éthylammonium. 9 Composé selon l'une quelconque des revendications 1, 2, 4, ou 5 qui est le bromure de N-l 3-( 2-chlorophénothiazin-10-yl)propylldiméthylpropylammonium. Composé selon l'une quelconque des revendications 1, 2, 4, ou 5 qui est le bromure de N-l 3-( 2-chlorophénothiazin-10-yl)propylldiméthyl- isopropylammonium. 11 Composé selon l'une quelconque des revendications 1, 2, 4, ou 5 qui est le bromure de N-l 3-( 2-chlorophénothiazin-10yl)propyllbutyldiméthyl- ammonium. 12 Composé selon l'une quelconque des revendications 1, 2, 4, ou 5 qui est le bromure de N-l 3-( 2-chloro-5-oxo-phénothiazin-10-yl)propyllbutyl- diméthylammonium. 13 Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 qui est le bromure de N-l 3-( 2-chloro-5-dioxo-phénothiazin-10yl)propyllbutyldiméthyl- ammonium. 14 Composé selon l'une quelconque des revendications 1, 2, 4, ou 5 qui est le bromure de N-l 3-( 2-chloro-phénothiazin-10yl)propyllbenzyldiméthyl- ammonium. Composé selon l'une quelconque des revendications 1, 3, 4, ou 5 qui est la 2-chloro-10-l 1-( 4-méthylpentyl)lphénothiazine-5-dioxyde. 16 Composé selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2 qui est le bromure de N-l 3-(phénothiazin-10-yl)propyllbutyldiméthylammonium. 17 Composé selon l'une quelconque des revendications 1, 4 ou 5 qui est la 2-chloro-10-l 1-( 4-méthylpentyl)lphénothiazine. 26 - 18 Composé selon l'une quelconque des revendications 1, 4 ou 5 qui est le 1-l 3-( 2-chloro-phénothiazin-10-yl)-1-propyllpyrrole-2-carboxylate de méthyle. 19 Composé selon l'une quelconque des revendications 1, 4 ou 5 qui est l'acide 1-l 3-( 2-chloro-phénothiazin-10-yl)-1-propyllpyrrole-2carbo- xylique. Composé selon l'une quelconque des revendications 1, 4 ou 5 qui est le 8-l 3-( 2-chloro-phénothiazin-10-yl)-1-propyll-3,8-diaza-1-oxa-spirol 4 5 l- décan-2-one. 21 Composé selon l'une quelconque des revendications 1, 4 ou 5 qui est le 2-l 3-( 2-chlorophénothiazin-10-yl)-1-propyll-8-tertiobutyl-2-azaspirol 4 5 l - décane. 22 Procédé de préparation des dérivés de formule (I), caractérisé en ce que le produit de départ est la phénothiazine de formule (II): s Xl X 2 (II) H dans laquelle X 1 et X 2 sont tels que définis précédemment, que l'on oxyde éventuellement: en monoxyde de formule (I Ia) au moyen d'un réactif approprié: o (I Ia) Xl X 2 H o X 1 et X 2 sont tels que définis précédemment, 27 - o -' Il /\,,,,> (I Ia) Xl X 2 H o X 1 et X 2 sont tels que définis précédemment, en dioxyde de formule (I Ib) avec un agent oxydant approprié, après protection de l'azote de la phénothiazine: o o Xl X 2 (I Ib) H dans laquelle Xl et X 2 sont tels que précédemment définis, les composés de formule (II), (I Ia) et (I Ib) étant alors soumis: a/ soit à une alkylation avec le composé de formule (III) R X (III) dans laquelle X est un atome d'halogène et R un radical alkyle (C 1- C 20) linéaire ou ramifié, pour obtenir les composés de formules (Ia): Xl X 2 (Ia) R o R, Y, Xl et X 2 sont tels que définis précédemment b/ soit à une alkylation avec le composé de formule (IV): Cl-(CH 2)3 -/T 2 (IV) \T 3 28 - dans laquelle T 2 et T 3 sont tels que définis précédemment, pour. donner le dérivé de formule (V): X ^g 2 Y (V) /T 2 \T 3 qui sera transformé par le composé de formule (VI): T 1 Br (VI) o T 1 est tel que précédemment défini, en bromure d'ammonium quaternaire de formule (Ib): xl -Y x 2 L/T 3 -l N-T 2 $\T 1 (lb) Bre o X 1, X 2, T 1, T 2 et T 3 sont tels que définis précédemment, c/ soit à une alkylation dans un mélange cétone/base, avec le 1-bromo- 3-chloropropane, conduisant au synthon de formule (VII): Xl. (VII) Cl o X 1, X 2 et Y sont tels que précédemment définis, qui traité par: a/ le cyanure de tétraéthylammonium en présence d'alcool, par exemple l'isopropanol, conduit au composé de formule (Ic): % 29 - X 2 (Ic) o Y, X 1, et X 2 sont tels que définis précédemment qui, par hydrolyse éventuelle, donne le composé de formule (Id): X 2 (Id) o Y, X 1 et X 2 sont tels que définis précédemment et par estérification éventuelle son ester correspondant, P/ une des amines cycliques suivantes: X; O o 1,pour lesquelles R 1 et R'l sont tels que définis précédemment en présence d'un sel alcalin, d'une base alcaline et d'éther-couronne, conduit aux composés de formules (Ie), (If), (Ig) suivants: y Xl 2 X 2 N" N COOR 1 (Ie) j I 1 2691459 X 1 R 1 v N/ (If) N v Ri (Ig) R'I NR o X 1, X 2 et R 1 sont tels que définis précédemment, une variante pour l'obtention du composé de formule (Ig) étant la transformation du synthon de formule (VII) en azide puis amine correspondante et réaction avec le composé de formule (VIII): Ri (VIII) R'1 puis réduction par Li Al H 4, l'ensemble des composés de formule (Ia) à (Ig) formant l'ensemble des dérivés de formule générale (I) que l'on purifie le cas échéant selon une technique classique de purification et dont on sépare, si on le souhaite, les isomères par une technique classique de séparation et que l'on transforme, si nécessaire, en leurs sels d'addition à un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable, composés qui, lorsque Y = S peuvent être oxydés en S-oxyde ou S-dioxyde correspondants. 23 Composition pharmaceutique contenant comme principe actif au moins un composé selon l'une des revendications 1 à 21 en combinaison avec un ou plusieurs excipients ou véhicules inertes, non toxiques, pharmaceutiquement acceptables. A b 31 2691459 24 Composition pharmaceutique selon la revendication 23 contenant au moins un principe actif selon l'une des revendications 1 à 21 possédant une activité inhibitrice vis-à-vis des cytokines et utiles dans le traitement de la douleur, de l'hypertension, des rejets de greffons, des affections inflammatoires et des affections pouvant induire un choc septique.