FR 2682376 A1 19930416 FR 9112524 A 19911011 La présente invention a pour objet un réactif et un procédé pour cliver les fonctions protégées par un groupe alcoxy-carbonyle lors de la synthèse organique Il est courant de protéger une molécule en en bloquant les fonctions qui dans les conditions opératoires visées serait réactives ou réputées telles par des groupes qualifiés de protecteur. Ces techniques sont particulièrement utiles lors des synthèses peptidiques et les fonctions les plus couramment protégées sont les fonctions aminées, alcool ou thiol. Parmi les groupes les plus couramment utilisés, on peut citer le groupe BOC ou terbutyloxycarbonyle, les groupes Z ou benzyloxyle, voire même le groupe FMOC. La déprotection usuellement utilisée est une lyse en milieu acide en général en milieu halohydrique anhydre (c'est-à-dire avec une teneur en eau en général inférieure à 1 %, avantageusement à 10-3, de préférence à 104). Toutefois cette technique présente de nombreux inconvénients La réaction de clivage est parfois lente ou nécessite de gros excès de réactif Les groupements alcoxyle ont tendance à se transformer en carbocatm)n avec évolution vers les doubles liaisons lorsque cela est possible, ou vers des réactions d'alcoylation sur le noyau, ce qui est particulièrement gênant dans le cas des synthèses de peptides dont la séquence présente des résidus nucléophiles tels que des noyaux aromatiques (tryptophane, tyrosine, phénylalanine,) ou soufrés (méthionine). C'est pourquoi, un des buts de la présente invention est de fournir un procédé et un réactif qui accélèrent sensiblement la cinétique. Un autre but de la présente invention est de fournir un réactif et un procédé qui permettent de privilégier la formation d'halogénure ou de pseudo-halogénure, vis-à-vis de la formation d'insaturé(s). Un autre but de la présente invention est de fournir un procédé et un réactif qui évitent les réactions d'alcoylation des noyaux aromatiques. Plus généralement un des buts de la présente invention est de fournir un procédé permettant de piéger des espèces de type carbocation, avec une éventuelle évolution vers la formation d'halogènure ou de pseudo- halogènure. Ces buts et d'autres sont atteints au moyen d'un réactif utile notamment pour cliver les groupes alcoxy-carbonyle des fonctions qu'il protège caractérisé par le fait qu'il comporte un phénol B un diluant A un acide halohydrique ou pseudo-halohydrique dont l'acidité exprimée par la constante de Hammett est au moins égale à celle de l'acide formique, de préférence au moins égale à celle de l'acide halohydrique. La quantité de phénol B'est de préférence d'au moins 1/200 du diluant A. Il n'existe pas de limite supérieure stricte Ainsi, l'utilisation de phénol B (produit pur ou mélange) sans diluant A, fait partie de l'invention dans la mesure o les conditions suivantes sont remplies: Le point de fusion du phénol B est au plus égal à 50 OC (dans la présente description les zéros ne sont pas des chiffres significatifs sauf si cela est spécifié autrement) Le phénol B peut être séparé d'avec le produit réactionnel par distillation éventuellement ou pression réduite; Le phénol B n'est pas miscible à l'eau en toute proportion avantageusement il ne dissout au plus que 10 % en poids de préférence 5 %, plus préférentiellement 1 % d'eau i Il est également préférable que l'eau ne puisse dissoudre qu'au plus % de phénol B, avantageusement au plus 1 % en masse et ce même en présence du diluant A en tant que tiers solvant. Le phénol B ne forme pas d'émulsion stable susceptible de gêner l'élimination des co-produits par lavage à l'eau. Les halogéno phénols avantageusement di-, et de préférence monochloro, ainsi que les alcoylphénols légers répondent par exemple à ces contraintes. Il est toutefois préférable qu'il y ait un diluant A et un phénol B. Avantageusement, le rapport massique entre ledit phénol B et ledit diluant A est compris entre 1/200 et 1, de préférence entre 1/20 et 1/2. Les valeurs ci-dessus exprimées en rapport massique conviennent bien pour le phénol lui-même et pour les phénols dont la masse moléculaire n'est pas d'un ordre de grandeur différent de celui du phénol proprement dit(C 6 H 50 H). Pour les phénols de poids moléculaires élevés, la concentration en mole par litre est au moins égale à 5 10-2, avantageusement entre 0,1 et 2 de préférence entre 0,5 et 1,5 M. Lorsque les diluants A et les phénols B ne sont pas miscibles en toute proportion, la limite supérieure de la teneur en phénol(s) est la plus basse des deux limites: celle mentionnée ci-dessus et la limite de solubilité. Par l'expression phénol B, il faut comprendre des phénols ou des mélanges de phénols. Les diluants A sont des solvants organiques suffisamment polaires pour dissoudre au moins 1 % de préférence au moins 2 % en masse du phénol "stricto sensu" (C 6 H 5 OH) et sont suffisamment hydrophobes pour n'être pas miscible à l'eau en toute proportion. Il est préférable que l'eau ne puisse dissoudre qu'au plus 10 % de diluant A, avantageusement au plus 1 % en masse et ce même en présence du phénol B en tant que tiers solvant. Il sont de préférence peu basiques c'est-à-dire que leur indice donneur (ou de nucléophilicité tel que défini dans l'ouvrage de REICHARDT C Solvent Effect in Organic Chemistry Verlag Chemie, Weinheim, New York 1979; b. Reichardt, C and Harbusch-Gôrnert, E Justus Liebigs Ann Chem ( 1983) 721 soit au plus égal de préférence inférieur à environ celui du tétrahydrofuranne L'indice donneur est en principe égal à moins la valeur de l'enthalpie exprimée en Kcal/moles de l'interaction entre le solvant et l'antimoine en solution de chlorure de méthylène dilué (cf 6 Gutmann, V. Electrochim Acta 21 ( 1976) 661; Gutmann, V and Wychera, E Inorg Nucl. Chem Lett 2 ( 1966) 297; Mayer, V and Gutmann, V Monatsh Chem 101 ( 1970) 912. Les diluants A peuvent être des mélanges, y compris des fractions pétrolières Naturellement, dans les conditions opératoires les diluants A doivent être inertes vis-à-vis des phénols et des réactifs de synthèse peptidique utilisés. Les familles préférées de diluants sont choisis dans le groupe constitué par les dérivés aromatiques, les éthers, les esters et les solvants halogénés. A titre de paradigmes de membres de ces familles on peut citer comme dérivés aliphatiques halogénés le dichlorométhane, le dichloro-1,2-éthane, le trichloro-1,1,1 éthane, comme dérivés aromatiques le toluène et comme dérivés aromatiques halogénés le chlorobenzène, comme esters l'acétate d'éthyle et l'acétate d'isopropyle, comme éthers, l'oxyde de tertiobutyle et de méthyle ainsi que l'anisole. Pour des raisons d'économie industrielle, il est préférable que le diluant A soit distillable sous pression atmosphérique ou sous vide primaire ou secondaire. En général le phénol B est choisi dans le groupe des composés répondant à la formule suivante I. (RI)n Ar O H (I) dans laquelle: Ar représente un radical aromatique monocyclique, polycyclique, hétérocyclique ou non Les substituants RI, semblables ou différents, représentent un motif halogène, de préférence fluor, chlore, Brome un groupe -Z-R 2, o Z peut être une simple liaison; un atome d'oxygène; o R 2 représente un atome d'hydrogène, un radical alcoyle ou aryle éventuellement hydroxylés ou mono ou poly halogénés d'au plus 8 atomes de carbone, N représente le nombre de substituants et est égal à O ou à un entier au plus égal au nombre de positions substituables sur les noyaux aromatiques et de leurs mélanges. Les groupes alcoyles (tels que définis dans le dictionnaire de la Chimie Duval Presses Scientifiques Internationale PARIS V Ie 1959) peuvent notamment être des restes aliphatiques linéaires ou ramifiés d'au plus 6 atomes de carbone ou des restes arylaliphatiques. Le nombre de positions substituables est déterminable aisément à l'aide de règles simples connues de l'homme de métier. Ainsi par exemple quand Ar = phényle N S 5 Ar = naphtyle S 7 Avantageusement le phénol B a un nombre d'atomes de carbone d'au plus 30 atomes de carbone, de préférence au plus 20 atomes de carbone. Avantageusement le phénol n'est pas basique, c'est-à-dire que lorsque il y a hétéroatome dans le cycle, ledit hétéroatome n'est pas choisi dans la colonne VB de la classification périodique des éléments (cf Bull Soc. Chim supplément au numéro 1 de janvier 1966). Il est souhaitable que les positions vicinales de la fonction phénol soient non substituées ou occupées par des groupes non encombrants. Sont considérés comme encombrants les radicaux reliés aux dites positions vicinales par un carbone tertiaire voire secondaire. Les composés mono cyclique sont ceux qui donnent le meilleur compromis efficacité-coût; on préfère ceux à 6 chaînons (noyau pyridinyle ou phényle). Il est également souhaitable que Z-R 2 ne puissent signifier plus de trois fois de préférence plus de 2 fois un groupe hydroxyle. Avantageusement, dans la formule I, les radicaux R sont choisis parmi le groupe constitué par les radicaux méthyle, éthyle, propyles, butyles, les radicaux trifluorométhyle et pentafluoroéthyle, les radicaux méthoxyle, éthoxyle, propyloxyles, butyloxyles, phényle, hydroxyphényles, et Ar-OH, les radicaux phényloxyles, hydroxyphényloxyles, atomes de fluor, de chlore et de brome. Pour ne pas trop alourdir la molécule de phénol, dans la formule I N soit au plus égal à 5. Parmi les phénols donnant les meilleurs résultats, il est souhaitable que il convient de citer: les mono halogéno phénols (de préférence mono chloro), les poly halogéno phénols, (de préférence polyfluoro), les phénols mono ou disubstitués par des radicaux alkyles de C 1 à C 4, alkoxy de C 1 à C 4, des perfluoroalkyle de C 1 à C 2 et le 2, 2, 2- trifluoro éthyle, les diphénols, le phénol au sens étroit, les naphtols éventuellement mono ou di substitués. Il est préférable que la quantité de phénol soit au moins égal à celle qui correspond à une molécule de phénol par motif d'acide aminé; avantageusement à trois. L'acide aminé peut être C ou N protégé; dans ce dernier cas, le groupement acide peut être activé sur la fonction acide, par les fonctions acide latérale protégé, les acides aminés peuvent être naturels ou synthétiques. Le milieu selon la présente invention permet également de dissoudre un peptide protégé. L'acide halohydrique préféré est choisi parmi l'acide bromhydrique, iodhydrique, de préférence chlorhydrique et leurs mélanges. On peut envisager également les acides correspondants aux pseudohalogènes tel que l'acide trifluorométhanesulfonique (triflique) Les groupes alcoxy-carbonyle peuvent être écrits sous la forme R-O-CO o R représente avantageusement un groupe alcoyle y compris aralcoyle, alcoyle ayant la définition du dictionnaire de Chimie DUVAL Presse Scientifique internationale, Paris V Ie, 1959. Le groupe alcoyle représente de préférence un groupe alkyle ayant au plus atomes de carbone de préférence au plus 7 atomes de carbone Le groupe R est un groupe de préférence secondaire, avantageusement tertiaire, tel que le groupe tertiobutyle qui est un des radicaux préférés Le radical peut également être un groupe aralkyle qui comporte au plus 10 noyaux de préférence de 1 à 8 noyaux. On peut citer notamment le groupe benzyle, le groupe FMOC ou les groupes décrits dans la demande de Brevet Britannique déposée le 31/12/1990 déposée sous le N O 90 28208 8 La concentration en acide halohydrique est avantageusement maintenue à une valeur au moins égale à la solubilité du gaz dans le milieu en équilibre avec une pression partielle moins égale à 103, de préférence à 104 Pascals, en général à celle obtenue par barbotage dudit acide halohydrique sous pression atmosphérique On peut également opérer sous pression plus élevée. Dans la mesure o l'on peut indiquer une fourchette, on peut considérer que exprimée en mole(s) par litre, il est souhaitable que la concentration en acide et donc la solubilité soit au moins égale à 10-4 M de préférence comprise entre 10-3 et 10-1 M. La température n'a pas besoin d'être très élevée et on peut donner à titre indicatif une température comprise entre la température de fusion commençante du milieu et 1000 C environ, ou lorsque cette température est inférieure à 100 'C, la température d'ébullition du système réactionnel. Cette technique est particulièrement bien adaptée aux synthèses des peptides notamment des oligo peptides de 2 ou 3 à 50, de préférence de 5 à acides aminés. D'une manière générale le système de solvants permet au(x) carbocation(s) engendré(s) par l'action sur un substrat ou un réactif de l'acide ou halo ou pseudohalohydrique d'évoluer vers une forme Halogénure ou un pseudohalogénure. Les exemples non limitatifs suivants illustrent l'invention. EXEMPLES MODE OPERATOIRE Un oligo-peptide protégé est dissous dans un mélange chorure de méthylène et un hydroxy aromatique On soumet ce mélange réactionnel au barbotage de l'acide chlorhydrique gazeux jusqu'au moment o l'on est plus capable de déceler l'existence de l'oligo-peptide protégé. Exemple 1 La réaction est menée sur l'oligo-peptide BOC Phe Leu OGPC dans le chlorure de méthylène en présence de phénol, en présence d'orthocrésol ou sans rien du tout Les résultats sont rassemblés dans le tableau suivant: Résultats du clivage Modèle Boc Phe Leu OGPC GPC: groupement O-protecteur de type benzylique. | Ar-OH | temps de clivage l | dans CH 2 C 12 l I | 1 I 60 mn l l l 30 mn l | O OH I l I ( 10%) l l | 1 CH | I OH 30 mn l l l l Déprotection à température ambiante barbotage HCI (débit 11/h). Déprotection en présence de phénol (ou ortho-crésol) Il a été démontré que H Cl est très peu soluble dans un mélange CH 2 C 12 - Ar OH ( 10 %); Avec phénol ( 10 % dans CH 2 C 12): après 40 mn de barbotage HC 1, dosage d'acidité: ler dosage: 0,06 M/1 HC 1 dans le solvant; 2 ème dosage: 0,03 M/1 HC 1 dans le solvant. L'accélération de la vitesse de réaction ne s'explique pas par une plus grande solubilisation HC 1 dans CH 2 C 12. Différence de mécanisme. Au cours du clivage, la présence de l'intermédiaire Ar-O-C(CH 3)3 a été. décelée. Celui-ci ne s'accumule pas dans le milieu réactionnel: il est lui-même clivé par HC 1. Cette réaction semble rapide: CH 3 Ar-O-C CH 3 HC 1 gaz CH 3 CH 2 C 12/Ar OH CH 3 Ar OH + C 1-C CH 3 CH 3 REVENDICATIONS 1) Réactif utile notamment pour cliver les groupes alcoxy-carbonyle des fonctions qu'il protège caractérisé par le fait qu'il comporte un phénol B un diluant A un acide halohydrique ou pseudo-halohydrique dont l'acidité est au moins égale à celle de l'acide formique. 2) Réactif caractérisé par le fait que ledit phénol est choisi dans le groupe des composés répondant à la formule générale suivante I (Rj)n-Ar0-H (I) dans laquelle: Ar représente un radical aromatique monocyclique, polycyclique, hétérocyclique ou non; Les substituants RI, semblables ou différents, représentent un motif halogène, de préférence fluor, chlore, brôme un groupe -Z-R 2-, o Z peut être une simple liaison; un atome d'oxygène; o R 2 représente un atome d'hydrogène, un radical alcoyle ou aryle éventuellement hydroxylés ou mono ou poly halogénés d'au plus 8 atomes de carbone, N représente le nombre de substituants et est égal à O ou à un entier au plus égal au nombre de positions substituables sur les noyaux aromatiques et de leurs mélanges. 3) Réactif selon l'une des revendications 1 à 2 caractérisé par le fait que ledit phénol B a un nombre d'atomes de carbone d'au plus 30 atomes de carbone de préférence au plus 20 atomes de carbone. 4) Réactif selon l'une des revendications 1 à 3 caractérisé par le fait que les positions vicinales de la fonction phénol sont non substituées ou occupées par des groupes non encombrants. 5) Réactif selon l'une des revendications 1 à 4 caractérisé par le fait que le radical -Ar est un aromatique monocyclique ayant de préférence 6 chaînons. 6) Réactif selon les revendications 1 à 5 caractérisé par le fait que ledit diluant A est choisi parmi les aromatiques les éthers, les esters et les solvants halogénés. 7) Réactif selon les revendications 1 à 6 caractérisé par le fait que le rapport massique entre ledit phénol B et le diluant A est compris entre 1/200 e et 1, de préférence entre 1/20 e et 1/2. 8) Réactif selon l'une des revendications 1 à 7 caractérisé par le fait que l'acide halohydrique est choisi parmi les acides chlorhydrique, bromhydrique, iodhydrique, de préférence chlorhydrique. 9) Procédé de traitement des molécules protégées caractérisé par le fait que ladite molécule est protégée par un groupement alcoxy-carbonyle et par le fait que ladite molécule est soumise aux réactifs selon l'une des revendications 1 à 8.