FR 2665360 A1 19920207 FR 9109773 A 19910801 L'invention concerne un procédé de préparation de particules conçues pour libérer une quantité efficace d'un principe actif sur une période de temps déterminée, les dites particules comprenant un ou plusieurs principes actifs en mélange avec un polymère ou copolymère biorésorbable et/ou biodégradable Dans ce texte, le terme "principe actif" est utilisé pour désigner toute substance thérapeutiquement active ou tout mélange de telles substances qui peut être administré à l'homme ou aux animaux, pour le diagnostic, la guérison, l'atténuation, le traitement ou la prévention de la maladie. Des procédés de préparation de microparticules, utilisées comme compositions à libération prolongée, sont bien connus Dans l'état de la technique, de nombreux documents décrivent des microcapsules et des microsphères comme compositions pharmaceutiques à libération prolongée d'un ou plusieurs principes actifs. Les microcapsules sont, en général, obtenues par mise en suspension ou dissolution d'un polymère et/ou d'un copolymère dans une solution puis élimination du solvant; les microcapsules sont formées d'un noyau plutôt riche en principe actif, enfermé dans une enveloppe plutôt riche en polymère et/ou copolymère L'élimination complète du solvant n'étant jamais possible, les microcapsules contiennent au moins quelques traces de solvant dans leur composition; en outre, par cette méthode, le taux d'encapsulation, en ce qui concerne le principe actif, ne peut jamais atteindre 100 %. 2 - Les microsphères sont des microparticules obtenues, le plus souvent en utilisant des solvants, et présentent une répartition plus régulière du principe actif dans le polymère; la seconde étape de leur formation, c'est-à-dire extrusion et broyage, implique un état de surface externe irrégulier et malgré l'appellation, ces particules ne sont en aucun cas de forme sphéroidale; la présence du principe actif sur la surface externe et l'irrégularité de cette même surface ne permettent pas de contrôler précisément la hauteur du pic de libération initiale De plus, comme la première étape nécessite l'emploi de solvant, l'élimination complète de ce solvant est pratiquement impossible. Par opposition, les particules selon la présente invention et qui peuvent être appelées microbilles, sont préparées par voie sèche sans utilisation de solvant La composition solide obtenue par mélange, par voie sèche, du principe actif et du polymère, est fabriquée par des techniques conventionnelles bien connues dans le domaine pharmaceutique La répartition du principe actif dans le polymère est approximativement la même que celle des microsphères définies ci- dessus Après le broyage et le tamisage, les particules sont mises en suspension dans un gel, sous agitation énergique, puis le mélange est chauffé avec un contrôle rigoureux de la température et du temps selon les constituants employés Les particules en suspension fondent et, en raison de la tension superficielle, tendent à devenir sphériques si la viscosité du gel est suffisante; la viscosité du gel doit être choisie de façon à éviter l'agglomération; cette opération peut être désignée sous le nom de "sphéronisation" Lorsque la sphéronisation est terminée, la suspension est très rapidement refroidie (par immersion), et le gel est dissocié par addition d'un agent de lavage qui est ni un solvant du polymère, ni un solvant du principe actif La structure lisse de la surface des microbilles garantit la non-rétention de l'agent de lavage. Les microbilles selon l'invention sont des compositions pharmaceutiques biorésorbables et non- irritables, comprenant un ou plusieurs principes actifs intimement dispersé dans un polymère biorésorbable, et conçues pour libérer une quantité efficace du principe actif sur une période de temps déterminée. Ces microbilles permettent une libération prolongée des principes actifs sur une période de temps contrôlée à partir des sites de l'administration parentale, et minimisent la fréquence et ainsi l'inconfort et le dérangement associés à des formulations d'injection journalière conventionnelle Par opposition aux injections conventionnelles par dépôt, les microbilles selon l'invention subissent dans l'organisme une biodégradation en composés métaboliques normaux, ou essentiellement normaux, n'ont pas d'action sur les tissus corporels, et peuvent être conçues, par contrôle de la masse moléculaire moyenne en poids ou en nombre, pour subir une hydrolyse et libérer le principe actif à partir du site d'administration, avec un taux de libération désiré. L'invention concerne donc un procédé de préparation de particules conçues pour libérer une quantité efficace de principe actif sur une période de temps déterminée, lesdites particules comprenant un ou plusieurs principes actifs en mélange avec un polymère ou un copolymère biorésorbable et/ou biodégradable et des additifs pharmaceutiques appropriés, la dimension des particules étant comprise entre des limites spécifiques, ledit procédé de fabrication des particules comprenant, dans une première phase, l'obtention de particules par des voies usuelles bien connues, comprenant une étape pour le mélange des constituants, une étape de compression et/ou d'extrusion du mélange obtenu, une étape de broyage de ce même mélange, une étape de sélection de la fourchette de taille appropriée de particules, ledit procédé étant caractérisé 4 - en ce que, dans la première phase, les composants sont mélangés par voie sèche et que cette première phase est suivie d'une deuxième phase consistant à traiter les particules obtenues dans la première phase, en les mettant en suspension, sous agitation, dans un gel qui n'est un solvant d'aucun des constituants, et ayant une viscosité, à 600 C ou plus, (la limite supérieure de la température étant définie par la stabilité des composants), comprise soit entre environ 40 et 500 m Pa s, lorsque le gel utilisé est hydrophile soit entre environ 3 000 et 12 500 m Pa S lorsque le gel utilisé est hydrophobe; en chauffant le gel à une température suffisante pour que les particules fondent jusqu'à la formation de microbilles; en refroidissant le gel; et en récupérant les microbilles par filtration. La viscosité du gel est, de préférence, comprise, à 'C ou plus, entre environ 80 et 200 m Pa S lorsque le gel utilisé est hydrophile, et entre environ 5 000 et il 000 m Pa S lorsque le gel utilisé est hydrophobe; dans un mode préféré de mise en oeuvre, la viscosité est, à 600 C ou plus, de l'ordre de 100 m Pa S si le gel utilisé est hydrophile, et de l'ordre de 9 000 m Pa S si le gel utilisé est hydrophobe. L'invention concerne aussi les microbilles ainsi obtenues, sous une forme substantiellement sphérique et dépourvues de principe actif sur la surface externe. Les additifs inertes pharmaceutiquement et qui peuvent être broyés avec le polymère ou le copolymère, comprennent le Pv P, le mannitol, le carbowax, les polyéthylène- glycols, les glycérides et l'éthyl cellulose. La fusion, telle que spécifiée précédemment, est à une température supérieure à la température de transition vitreuse (Tv) Par exemple, pour un copolymère acide lactique-co-glycolique ( 50:50), la température peut être de 750 C environ. - Le procédé fournit, dans la première phase, des comprimés classiques ou d'autres formes bien connues dans le domaine pharmaceutique qui peuvent être coupées à des longueurs par exemple de 1 cm pour le broyage, ce dernier pouvant s'effectuer dans un appareil de broyage réfrigéré. Le gel peut être hydrophobe ou hydrophile Les gels hydrophiles tels que le Pv P, la carboxyméthyl cellulose, le poloxamère et l'eau, conviennent pour des principes actifs hydrophobes et sont communément utilisés dans l'industrie. L'agitation doit être maintenue pendant toute la période de mise en suspension du mélange polymère-principe actif, essentiellement au début du procédé pour disperser les particules dans le gel Lorsque les particules sont conçues par l'injection, la filtration peut se faire sur des membranes de PTFE de 0,45 à 10 pm. Dans le procédé selon l'invention, seuls des systèmes mécaniques sont utilisés Le procédé selon l'invention est différent de l'atomisation, de l'enrobage, de l'enrobage en suspension, de la microencapsulation par coacervation ou de la microencapsulation par évaporation de solvant, aucun de ces procédés ne conduisant à des microbilles homogènes. Les classes de principes actifs qui peuvent être utilisés dans le cadre de l'invention comprennent des agents affectant le système nerveux central, c'est-à-dire des narcotiques tels que la morphine; des antagonistes narcotiques tels que le naloxone; des agents antipsycho- tiques tels que le pentobarbital de sodium, la chlorpromazine; des antidépresseurs tels que le chlorhydrate d'imipramine; des stimulants tels que le phénadate de méthyl et la nikéthamide; des hallucinogènes, des analgésiques tels que le mumorphan mépéridine et des agents anorexigènes. 6 - D'autres classes de principes actifs pouvant être utilisées sont des agents pharmacodynamiques, c'est-à-dire des agents antihypertenseurs tels que la réserpine, et des agents antiangineux tels que la papavérine, et des médicaments pour soigner les affections pulmonaires, tels que le sel d'éthylène diamine de la théophylline D'autres classes supplémentaires sont les agents chimiothérapeu- tiques, c'est-à-dire antiviraux; antiparasites, tels que le chlorhydrate d'émétine; les agents anti-fongiques, tels que la cyclohéxémide; et les agents antinéoplastiques, tels que le triéthylène thiophosphoramide; des agents affectant des maladies métaboliques et des fonctions endocriniennes, c'est-à-dire, les prostaglandines; des athersclérosines telles que l'héparine; des stéroîdes et des composés apparentés biologiquement; des polypeptides, tels que la bacitracine, le sulfate de polymyxine B; des hormones naturelles et synthétiques, telles que la progestérone; des agents anti-inflammatoires non stéroidaux et stéroidaux, tels que l'hydrocortisone; et des agents affectant la thrombose, tels que la trypsine crystalline; des vitamines, telles que la vitamine B 12; des agents anti-épileptiques, tels que le phénobarbital, et les semblables Bien entendu, les médicaments spécifiques mentionnés sont illustratifs et non limitatifs. Des agents endocriniens comprennent une classe de composés particulièrement utile dans cette invention et peuvent être définis soit comme des hormones naturelles ou comme des principes actifs synthétiques qui, dans une certaine mesure, agissent de la même façon, ou s'opposent aux hormones naturelles, telles que la triptoréline ou la somatuline Des agents endocriniens comprennent, à la fois les stéroides et les nonstéroides qui fonctionnent comme des agents de contrôle de la fertilité mais ne sont pas limités à ces deux classes; des progestogènes, des oestrogènes, des androgènes, des antiandrogènes, des corticoides, des agents anaboliques et des agents anti-inflammatoires. -7 - N'importe quel polymère biodégradable et biologi- quement compatible peut être utilisé pour la formulation de microbilles On peut citer en exemples, de façon illustrative et non limitative: les homopolymères et copolymères de l'e- caprolactone, les protéines dénaturées, les homo et copolymères de l'acide lactique et de l'acide glycolique, les poly-ortho esters, les polyanhydrides, les poly (acide p-hydroxybutyrique), les polyphosphazènes, les poly (alcoylcyanoacrylates), les polyacétals, les polysaccharides, les polymères cellulosiques, les polypeptides. Lorsque les acides glycoliques et lactiques sont utilisés pour préparer les polymères, il est clair que les produits d'hydrolyse comprendront les acides glycoliques et lactiques qui sont des métabolites normaux du corps. Lorsque le polymère est préparé à partir d'autres composés tels que proposés ci-dessus, les produits d'hydrolyse seront apparentés à une structure simple et n'auront pas d'effet nuisible ou défavorable dans le corps. Les polymères ou copolymères nécessaires aux formulations de l'invention, peuvent être préparés selon les méthodes décrites dans les brevets américains No 27003316, 2758987 et brevet européen No 0244114. Pour l'invention, différents paramètres du polymère ont été etudiés pour une bonne préparation: la cristallinité, la quantité et le type de catalyseur, le degré de polymérisation, 8 - la masse moléculaire moyenne en poids et en nombre, la valeur de polydispersité qui correspond au rapport entre la masse moléculaire moyenne en poids et la masse moléculaire moyenne en nombre, la température de transition vitreuse, ou Tv. Ce dernier paramètre est important pour la fusion dans le gel utilisé Un contrôle du profil de libération des microbilles est possible avec les paramètres du polymère listés ci-dessus. Les proportions relatives du principe actif et du polymère peuvent varier dans un large éventail de valeurs qui est fonction de l'effet désiré Le principe actif est présent en quantité telle qu'il sera libéré sur des périodes de temps contrôlées Ceci implique nécessairement une quantité de principe actif plus importante que la dose conventionnelle unique. Les proportions peuvent varier de 1 % de principe actif et 99 % de polymère, à 99 % du principe actif et 1 % du polymère Les rapports qui ont donné de bons résultats comprennent une partie du principe actif pour 10 à 30 parties de polymère. Les résultats de pharmacocinétiques obtenus lors de l'utilisation de microbilles selon l'invention, sont exceptionnellement bons, comparés soit aux particules non sphéroidales, soit aux microcapsules préparées par des méthodes usuelles Les microcapsules, administrées parentéralement à des rats, présentent un profil de libération qui est essentiellement biphasique, avec une phase en plateau sur une période de 20 jours pour la triptoréline: la première phase présente une libération -9 - importante du principe actif en raison du lavage par le liquide physiologique La seconde phase est une libération soutenue d'une quantité efficace du principe actif avec une phase en plateau La durée de cette phase en plateau dépend de l'association polymère-principe actif. Les microbilles selon l'invention présentent un pic de libération initiale limité par rapport aux particules non sphéroidales, et permettent, dans un environnement physiologique aqueux, une libération prolongée bien adaptée du principe actif. Une étude de microscopie électronique à balayage montre que la surface d'une microbille est homogène et sans cristaux de principe actif non-encapsulé. La composition de l'invention peut être formulée pour une injection à l'aide d'une seringue dans le tissu cellulaire sous-cutané ou musculaire, en mettant en suspension les microbilles dans une excipient liquide Les excipients liquides qui conviennent sont l'eau, une solution normale de chlorure de sodium et des huiles telles que l'huile de sésame, l'huile d'arachide ou des huiles végétales Des adjuvants peuvent être ajoutés si cela est nécessaire ou souhaitable Ceux-ci comprennent des agents de dispersion tels que le polysorbate, des épaississants tels que la carboxyméthylcellulose, des conservateurs tels que le chlorbutanol ou le méthyl parabène ou propyl parabène, et des agents de suspension tels que le monostéarate d'aluminium D'autres adjuvants tels que l'alcool benzylique peuvent être aussi employés. L'invention sera d'ailleurs mieux comprise grâce à la description des exemples qui suivent. - EXEMPLE 1 Dans cet exemple ainsi que dans les exemples 2 à 4 et 7 à 13, on utilise un poly (lactide-co-glycolide) présentant les caractéristiques suivantes: valeur de la viscosité du polymère dans le chloroforme ( 0,1 % poids/volume): 0,1-5,0 dl/g) proportion de lactide (D,L ou L): 50 à 100 % proportion de glycolide: O à 50 % valeur moyenne de la masse moléculaire Mp: 1000 à 200 000 Mn: 100 à 100 000 valeur de la polydispersité P:2 à 10 Poly (D,L lactide-co-glycolide) 50/50 l 7 inh 0,4 dl/g dans du chloroforme ( 0,1 % poids/volume); Tv: 40 C par DSC (calorimétrie à balayage différentiellel 10 g sont broyés et mélangés à 250 g d'acétate de D-Trp 6 LHRH, puis le mélange est fondu à 75 C Les comprimés sont broyés et les particules obtenues de 0,5 à 200 microns sont suspendues dans un gel: la carboxyméthyl cellulose sodique ( 10 % poids/poids dans de l'eau pure). L'élévation de température, contrôlée, ( 20 C, 80 C, C) permet de faire fondre progressivement les particules qui deviennent des microcapsules de PLGA 50/50 contenant une hormone analogue. EXEMPLE 2 Poly (D,L lactide-co-glycolide) 50/50 la inh: 0,8 dl/g dans du chloroforme; Tv: 44 C par DSCl 10 g sont utilisés de façon similaire, avec 1 g d'acétate de D-Trp 6 LHRH. 11 - EXEMPLE 3 Poly (D, L lactide-co-glycolide) 50/50 la inh: 0,4 dl/g dans du chloroforme; Tv: 40 C par DSCl 10 g sont utilisés de façon similaire avec 250 mg de pamoate de D-Trp 6 LHRH. EXEMPLE 4 Poly (D,L lactide-co-glycolide) 50/50 la inh: 0,8 dl/g dans du chloroforme; Tv: 44 C par DSCl 10 g sont utilisés de façon similaire avec 1 g de pamoate de D-Trp 6 LHRH. EXEMPLE 5 Poly L Lactide ln inh: 1,2 dl/g dans du chloroforme; Tv = 60 C par DSCl 10 g ont été utilisés de façon similaire avec 1,8 g d'acétate de somatuline La température de fusion est un peu plus haute: 85 C. EXEMPLE 6 Poly L Lactide la inh: 1,2 dl/g dans du chloroforme; Tv: 60 C par DSCl 10 g sont utilisés de façon similaire avec 1,8 g de pamoate de somatuline. EXEMPLE 7 Poly (D,L lactide-co-glycolide) 75/25 lr inh: 1,03 dl/g dans du chloroforme; Tv: 55 C par DSCl 10 g ont été similairement utilisés avec 1 g d'acétate de D-Trp 6 LHRH La température de fusion est de 82 C. 12 - EXEMPLE 8 Poly (D,L lactide-co-glycolide) 50/50 ln inh: 0,8 dl/g dans du chloroforme; Tv: 44 C par DSCl 10 g sont utilisés de façon similaire avec 1,4 g de corticotropine (ACT Hl-3 g). EXEMPLE 9 Poly (D,L lactide-co-glycolide) 50/50 ln inh: 0,8 dl/g dans du chloroforme; Tv: 44 C par DSCl 10 g sont utilisés de façon similaire avec 250 mg d'acétate de D-Trp 6 LHRH séché par atomisation. EXEMPLE 10 Poly (D,L lactide-co-glycolide) 50/50 ln inh: 0,8 dl/g dans du chloroforme; Tv: 44 C par DSCl 10 g sont utilisés de façon similaire avec 1,8 g de somatuline séché par atomisation. EXEMPLE 11 Poly (D,L lactide-co-glycolide 50/50 l 7 inh: 0,8 dl/g dans du chloroforme; Tv: 44 C par DSCl 10 g sont utilisés de façon similaire avec 500 mg de lD-Trp 6, des Glyl Ol - LHRH Ethylamide. EXEMPLE 12 Poly (D,L lactide-co-glycolide) 50/50 l 7 inh: 0,8 dl/g dans du chloroforme; Tv: 44 C par DSCl 10 g sont utilisés de façon similaire avec 250 mg d'acétate de Nafaréline. 13 - EXEMPLE 13 Poly (D,L lactide-co-glycolide) 50/50 lô inh: 0,4 dl/g dans du chloroforme ( 0,1 % poids/volume); Tv: 40 C par DSCl 10 g sont broyés et mélangés avec 250 mg d'acétate de D-Trp 6 LHRH Le mélange est fondu à 75 C Les comprimés sont broyés et les particules résultantes de 0,5 à 200 microns, sont mises en suspension dans de l'huile de silicone (viscosité: correspondant à 9 000 m Pa S à 60 C). L'élévation de température, contrôlée ( 20 C, 80 C, 20 C) permet une fusion progressive des particules qui deviennent des microbilles de PLGA 50/50 contenant une hormone analogue au LHRH. EXEMPLE 14 Poly (e caprolactone-co-D, L lactide) 20/80 lE inh: 0,5 dl/g dans du chloroforme; Tv: 18 C par DSCl 10 g sont utilisés de façon similaire avec 250 g d'acétate de D-Trp 6 LHRH La température de fusion est très basse: C. 14 - REVENDICATIONS 1 Procédé de préparation des particules conçues pour libérer une quantité efficace de principe actif sur une période de temps déterminée, lesdites particules comprenant un ou plusieurs principes actifs en mélange avec un polymère ou copolymère biorésorbable et/ou biodégradable, et la taille desdites particules étant comprise entre des limites spécifiques, ledit procédé de fabrication des particules comprenant, dans une première phase, l'obtention des particules par des voies usuelles bien connues, comprenant une étape pour le mélange des constituants, une étape de compression et/ou d'extrusion du mélange obtenu, une étape de broyage de ce même mélange, une étape de sélection de la fourchette des tailles appropriées de particules, caractérisé, en ce que, dans la première phase, les constituants sont mélangés, par voie sèche et que la première phase est suivie par une seconde phase consistant à traiter les particules obtenues dans la première phase en les mettant en suspension, sous agitation, dans un gel ayant une viscosité, à 60 'C ou plus, la limite supérieure étant définie par la stabilité des constituants, soit entre environ 40 et 500 m Pa S quand le gel est hydrophile ou entre environ 3 000 et 12 500 m Pa S quand le gel est hydrophobe; à chauffer le gel à une température suffisante pour faire fondre les particules jusqu'à la formation des microbilles; à refroidir le gel et à récupérer les microbilles par filtration. 2 Procédé de préparation selon la revendication 1, dans lequel la viscosité du gel est comprise entre environ 80 et 200 m Pa s, à 600 C ou plus, quand le gel utilisé est hydrophile. - 3 Procédé de préparation selon la revendication 1, dans lequel la viscosité du gel est comprise entre environ 5 000 et 11 000 m Pa s, à 60 'C ou plus, quand le gel utilisé est hydrophobe. 4 Procédé de préparation selon la revendication 2, dans lequel la viscosité du gel est d'environ 100 m Pa S à 600 C ou plus, quand le gel utilisé est hydrophile. Procédé de préparation selon la revendication 3, dans lequel la viscosité du gel est d'environ 9 000 m Pa S à 60 'C ou plus, quand le gel est hydrophobe. 6 Particules préparées selon les revendications 1 à 5, sous une forme substantiellement sphéroidale et subtantiellement dépourvues de principe actif sur la surface externe.