FR 2667245 A1 19920403 FR 9012073 A 19901001 La présente invention concerne de nouvelles asso- ciations vaccinales contre les pathogènes infectieux vi- raux, bactériens et parasitaires. D'une façon générale, dans le domaine de la pré- paration des vaccins humains et vétérinaires, on cherche à réaliser des vaccins purifiés, dits de sous-unités, compo- sés d'un immunogène ou des immunogènes de même nature d'un agent pathogène infectieux, ou même uniquement du détermi- nant antigénique de l'immunogène, afin d'obtenir une ré- ponse immunitaire protectrice bien définie et, également, d'éliminer des constituants mal connus ou toxiques. Quant aux associations vaccinales, elles cher- chent, généralement, à réunir des valences de pathogènes hétérologues, ou pour le moins de sérotypes différents, de façon à élargir le spectre protecteur, cette démarche s'étendant aux vaccins vivants recombinants. Certes, dans quelques cas isolés, on a suggéré de potentialiser un vaccin de sous-unités par l'administration simultanée d'une faible quantité du pathogène entier. W G LAVER et R G WEBSTER (Virology 69, 511-522, 1976) ont démontré, pour le virus de la grippe chez le hamster et la souris, la potentialisation de la réponse im- munitaire par l'injection simultanée du virus entier intact et de vaccin sous-unités neuraminidase-hémagglutinine ou par l'injection du virus intact une heure avant celle de ce vaccin sous-unités. 2 2667245 R.G WEBSTER et al (The Journal of Immunology, vol 118, N O 6, Décembre 1977, p 2073 à 2077) ont ensuite montré, chez le hamster et l'homme, l'effet potentialisateur de l'addition de virus de la grippe inactivé, au vaccin sous-unités neuraminidase- hémagglutinine. Il s'agit, là, de virus de la grippe inactivé entier, et la quantité de pathogène entier est faible et destinée à potentialiser l'effet protecteur du vaccin de sous-unités. Or la présente invention a révélé, de façon surprenante, dans le cas de pathogènes très éloignés du virus de la grippe, tels que notamment les herpèsviradae, que l'association d'un vaccin de sous-unités d'enveloppe ou paroi, c'est-à-dire d'immunogènes immédiatement apparents ou facilement apparents du même pathogène, améliore grandement l'efficacité de la vaccination, et que cette propriété s'étend à de nombreux pathogènes, y compris dans des groupes aussi différents que les virus, les bactéries et les parasites, notamment protozoaires. L'invention se propose d'améliorer de façon significative l'efficacité de la vaccination contre les maladies infectieuses des animaux ou de l'homme. La présente invention a donc pour objet une association vaccinale comprenant une première valence comportant un agent microbien à l'état vivant atténué ou un recombinant exprimant des protéines ou glycoprotéines antigéniques dudit agent, et une deuxième valence comportant une ou des glycoprotéines d'enveloppe ou de paroi antigéniques ou une protéine structurale antigénique, notamment du même sérotype. Par agent microbien dans le sens de la présente invention, on entend un virus, une bactérie ou un parasite appartenant à une espèce pathogène et pour lequel il existe déjà, ou l'on peut produire, une forme vivante ou inactivée (délétée ou non) immunogène et, au moin partiellement, protectrice, ou bien encore pour lequel il existe, ou l'on peut construire, des séquences nucléotidiques insérables dans un microorganisme hétérologue recombinant utilisable comme un vaccin et exprimant des protéines ou des glycoprotéines antigéniques au moins partiellement protectrices codées par une telle séquence. Parmi les agents viraux on peut citer notamment outre les virus herpès, les parvovirus, les coronavirus, les virus de la grippe humaine, porcine, équine, le virus de la poliomyélite, les virus de la rage. Parmi les bactéries on peut citer notamment les Brucella. Parmi les micro-organismes hétérologues, on peut citer notamment les poxvirus, par exemple la vaccine ou les pox-virus aviaires, et les virus herpès. On doit comprendre que dans la présente invention la deuxième valence provient généralement du même sérotype (lorsque des sérotypes différents existent) que l'agent fournissant la première valence, mais que dans certains cas les sérotypes peuvent différer lorsqu'il est établi qud'une protection croisée efficace existe entre les sérotypes. La présente invention a notamment pour objet une association vaccinale herpétique humaine ou animale comprenant une première valence comportant le virus herpétique considéré à l'état vivant atténué (délété ou non délété) ou un recombinant exprimant des glycoprotéines antigéniques dudit virus et une deuxième valence comportant une ou des glycoprotéines d'enveloppe antigéniques notamment du même sérotype et éventuellement d'autres éléments antigéniques dudit virus. Parmi les herpès animaux, l'invention concerne notamment les herpès virus porcin, équin, bovin, félin et aviaires. Les valences peuvent être constituées de vaccins déjà connus destinés à l'homme ou aux animaux Ainsi, on -3 - connaît notamment des vaccins à base de virus vivant atté- nué ou des vaccins à base de sous-unités virales, notamment de glycoprotéines d'enveloppe et de nucléocapsides Pour la maladie d'Aujeszky, on peut citer par exemple le vaccin Geskalone de Rhône Mérieux, France, qui est un vaccin vi- vant lyophilisé atténué en solvant aqueux ou huileux, et le vaccin Geskypur , également de Rhône Mérieux, qui est un vaccin de sous-unités, liquide ou lyophilisé, avec adju- vant, constitué de glycoprotéines d'enveloppe purifiées. Selon l'invention, cette association vaccinale peut se présenter sous la forme d'une préparation unique, d'un mélange extemporané ou avec les deux valences séparées pour une administration simultanée séparée Par administra- tion simultanée séparée, on entend des injections en des points différents de l'organisme, dans un intervalle de temps réduit, ne dépassant pas quelques heures et, de pré- férence, quelques minutes. Dans le cas d'une préparation prête à l'emploi, la valence à glycoprotéines et la valence de l'agent ou vi- rus atténué ou de recombinant sont en solution dans un sol- vant aqueux ou huileux. De préférence, dans les autres cas, la valence atténuée ou de recombinant se présente sous forme lyo- philisée et la valence à glycoprotéine, sous forme liquide ou lyophilisée. Les deux valences peuvent se trouver soit à l'état lyophilisé et en mélange dans un même flacon pour être ensuite reprises simultanément avec un solvant aqueux ou huileux, soit la première valence peut être reprise avec la deuxième valence initialement à l'état liquide en milieu aqueux ou huileux ou encore chacune des valences, lyophili- sées et séparées, peuvent être reprises avec un solvant de même nature, aqueux ou huileux, puis mélangées. Dans le cas d'une administration simultanée sépa- rée, les solvants des valences peuvent être aqueux, huileux ou respectivement aqueux et huileux. L'association vaccinale sera de préférence pré- sentée dans un emballage unique. Dans le cas d'une préparation unique, l'associa- tion vaccinale est présentée prête à l'emploi Son adminis- tration est notamment intramusculaire ou intradermique. Dans le cas d'un mélange extemporané, les deux valences sont à l'état lyophilisé dans un même flacon et doivent être reprises avec un solvant aqueux ou huileux, ou chaque valence est présentée séparément et les deux va- lences doivent donc être réunies au moment de l'administration, de la manière décrite ci-dessus Le mode d'administration est notamment intramusculaire ou intrader- mique. Dans le cas d'une administration simultanée sépa- rée, les deux valences sont présentées séparément La va- lence à glycoprotéines peut être prête à l'emploi ou, comme la première valence, peut se présenter sous forme lyophi- lisée et doit donc être mise en solution avant utilisation. Le mode d'administration est notamment intramusculaire ou intradermique pour la valence comportant l'agent ou virus atténué ou un recombinant tandis que, pour l'autre, le mode d'administration peut être intradermique, intramusculaire ou sous-cutané. Comme association vétérinaire herpétique, on peut citer par exemple l'association Geskalone O-Geskypur . Il va de soi que l'association selon l'invention concerne tous les vaccins atténués ou à sous-unités à gly- coprotéines connus Pour les herpès équin, bovin, félin et aviaire (y compris laryngotrachéite), on connaît déjà des vaccins vivants atténués et l'on peut citer, à titre d'exemple, les vaccins sous-unités suivants: équin: PNEUMEQUINE (Rhône Mérieux), vaccin de la rhino- pneumonie équine; bovin: IBEPURO (Rhône Mérieux), vaccin de la rhinotra- chéite infectieuse des bovins; félin: CORIFELIN ou LEUCORIFELINO (Rhône Mérieux), vac- cin du coryza; aviaire: laryngotrachéite. L'invention a aussi pour objet un procédé de vac- cination, notamment contre les herpès-virus humains ou ani- maux, comprenant l'administration simultanée des deux va- lences décrites ci-dessus, mélangées ou séparées, par le mode d'administration approprié mentionné ci-dessus. L'invention va être maintenant décrite plus en détail à l'aide d'exemples de réalisation et d'essai in vivo. I ESSAI On a vacciné 18 porcs contre la maladie d'Aujesz- ky Ces porcs provenaient de truies vaccinées avec le vac- cin TOLVID (vaccin atténué délété pour g X) (deux fois par an) Le protocole a été le suivant: 6 porcs non vaccinés servent de témoins, 6 porcs sont vaccinés une fois avec la souche Bartha re- prise dans un adjuvant de Solvay huile en eau, le vaccin titrant 105 î 5 CCID 50 par dose, 6 porcs sont vaccinés une fois avec une dose de GESKA- LONE g I-, titrant 10515 CCID 50 par dose, repris dans 2 ml de GESKYPUR. Tous ces porcs sont stabulés ensemble et 4 se- maines après la vaccination, ils ont tous été éprouvés par voie oronasale avec 105,5 CCID 50, cette dose ayant été ad- ministrée trois fois durant 24 heures: Résultats sérologiques (anticorps séroneutralisants) les animaux témoins restent négatifs jusqu'à l'épreuve titre 7 2667245 1 animal: titre de 32 4 animaux ont des titres de 96 Epreuve: Paramètre de l'excrétion virale5 : Durée: Titre: Nombre : d'animaux : excrétant : témoins: 5/6 jours: tous : Bartha: 2/3 jours 102 à 3: 4 sur 6 : GESKYPUR 1 jour: à peine: 2 sur 6 : /GESKALONE:: détectable On obtient donc des titres sérologiques et des résultats d'épreuve exceptionnels. II Exemples 1/ On réalise une préparation unique contenant une dose de Geskalone reprise avec 8 ml de Geskypur Cette préparation est prête à l'emploi et peut être administrée par voie intramusculaire ou intradermique. 2/ On dispose, dans un emballage unique, d'une dose de Geskalone lyophilisée et d'une dose de Geskypur prête à l'emploi Au moment de l'administration, on reprend le Geskalone avec le Geskypur L'administration s'effectue par voie intramusculaire ou intradermique. 3/ Idem 2/, mais on reprend le Geskalone avec un solvant approprié, aqueux ou huileux, et on administre les deux valences de façon simultanée et séparée, par voie in- tradermique ou intramusculaire, ou encore sous-cutanée pour le Geskypur. Par voie intradermique, les deux volumes de dose sont de préférence de 0, 2 ml pour chaque valence ou pour les deux valences réunies. Pour les porcs reproducteurs, on prévoit par exemple une primovaccination avec 2 injections à 3 ou 4 semaines d'intervalle et des rappels tous les six mois. REVENDICATIONS 1 Association vaccinale contre une maladie in- fectieuse, caractérisée en ce qu'elle comprend une première valence comportant un agent microbien à l'état vivant atté- nué ou un recombinant exprimant des protéines ou glycopro- téines antigéniques dudit agent, et une deuxième valence comportant une ou des glycoprotéines d'enveloppe ou de paroi antigéniques ou une protéine structurale antigénique, nota&mient du même sérotype. 2 Association selon la revendication 1, caracté- risée en ce que l'agent est choisi parmi les virus les bactéries et les parasites. 3 Association selon la revendication 2, caracté- risée en ce que l'agent est choisi parmi ceux pour lesquels on connaît une forme vivante atténuée au moins partielle- ment protectrice ou un recombinant au moins partiellement protecteur. 4 Association vaccinale selon l'une quelconque des revendications 2 et 3 dirigée contre un virus de la fa- mille des herpès-virus animaux ou humains et comprenant, dans une préparation unique, une première valence compor- tant ledit virus à l'état vivant atténué ou un recombinant exprimant des glycoprotéines antigéniques dudit virus et une deuxième valence comportant des glycoprotéines d'enveloppe antigéniques dudit virus. 5 Association vaccinale selon la revendication 4, caractérisée en ce que les deux valences sont mélangées de façon extemporanée. 6 Association vaccinale selon l'une quelconque des revendications 2 et 3 dirigée contre un virus de la fa- mille des herpès-virus animaux ou humains et comprenant sé- parément, pour l'administration simultanée, d'une part une première valence comportant ledit virus à l'état vivant at- ténué ou un recombinant exprimant des glycoprotéines anti- géniques dudit virus et d'autre part une deuxième valence comportant des glycoprotéines d'enveloppe antigéniques du- j1 O 2667245 dit virus. 7 Association vaccinale prête à l'emploi selon la revendication 4, caractérisée en ce que les deux va- lences sont en solution dans un solvant aqueux ou huileux. B Association vaccinale selon la revendication , caractérisée en ce que les deux valences se présentent sous forme lyophilisée et en mélange pour être reprises si- multanément avec un solvant huileux ou aqueux. 9 Association vaccinale selon la revendication 5, caractérisée en ce que la première valence est lyophili- sée et la deuxième, liquide, la première devant être re- prise avec la deuxième. Association vaccinale selon la revendication , caractérisée en ce que chaque valence est lyophilisée et doit être reprise avec un solvant, de même nature, aqueux ou huileux puis mélangée avec l'autre valence. 11 Association vaccinale selon la revendication 6, caractérisée en ce que les deux valences sont lyophili- sées et doivent être reprises séparément avec un solvant aqueux ou huileux. 12 Association vaccinale selon la revendication 6, caractérisée en ce que la deuxième valence est liquide et prête à l'emploi, tandis que la première est lyophilisée et doit être reprise avec un solvant aqueux ou huileux. 13 Association vaccinale selon l'une quelconque des revendications 4 à 12, caractérisée en ce que le virus animal concerné est un virus herpétique porcin, équin, bo- vin, félin ou aviaire. 14 Association vaccinale selon la revendication 13, caractérisée en ce que le virus concerné est le virus de la maladie d'Aujeszky. Association vaccinale selon l'une quelconque des revendications 1 à 14, caractérisée en ce qu'elle est présentée dans un emballage unique.