FR 2672467 A1 19920814 FR 9101529 A 19910211 La présente invention concerne la lutte contre la parasitose des abeilles par le varroa Plus particulièrement l'invention concerne un dispositif renfermant un mélange d'un acaricide et d'une substance attractive pour les abeilles et la mise en oeuvre de ce dispositif pour décontaminer les ruches. Le varroa est un acarien, ectoparasite des abeilles Le Varroa jacobsoni parasite l'abeille asiatique Apis cerana de manière équilibrée et sans mettre l'espèce en danger L'introduction de l'espèce Apis mellifica en Asie et le développement du commerce des essaims d'abeilles et des reines ont favorisé la contamination de cette espèce par le varroa L'adaptation du varroa à l'Apis mellifica s'est révélée létale pour celle-ci: une colonie contaminée peut être détruite en 2 ans Sur l'espèce Apis mellifica, le varroa contamine l'abeille dès son stade larvaire: les varroas femelles s'installent dans le couvain de la ruche avant l'operculation des alvéoles Quand les alvéoles sont operculées, les varroas se reproduisent sur les larves tout au long de leur cycle de développement Quand l'abeille adulte sort de l'alvéole, elle est parasitée par plusieurs acariens et peut présenter des atrophies Les parasites passent d'une abeille à l'autre au cours des contacts sociaux entre abeilles La propagation du parasite se fait de plusieurs manières: par la dérive des ouvrières, par le pillage des ruches par les colonies les plus fortes, par les mâles qui peuvent être porteurs de varroas et qui sont acceptés dans toutes les ruches. Le varroa se nourrit de l'hémolymphe de l'abeille ce qui l'affaiblit, diminue son activité et provoque sa mort précoce De plus lors de sa prise de nourriture le varroa est capable de transmettre à l'abeille des microorganismes et des virus pathogènes. La varroatose se propage depuis une vingtaine d'années dans le monde entier Partie d'Asie, elle a progressivement touché l'Europe, l'Afrique et l'Amérique En URSS, en 1971, par exemple, 55 000 colonies ont disparu En Europe, la parasitose progresse d'environ 250 km par an Sa première détection en France date de 1982. Cette parasitose entraîne une importante diminution de la rentabilité des exploitations apicoles et de plus pose des problèmes sur le plan écologique et agronomique par la réduction du taux de pollinisation des fleurs de nombreuses variétés de plantes et d'arbres fruitiers. Différents traitements sont déjà appliqués le poudrage d'une zone intérieure de la ruche par des produits acaricides qui sont diffusés par l'activité de la colonie; la fumigation avec diverses substances répulsives ou acaricides; la pulvérisation ou l'aérosolisation d'émulsions à base de produit acaricide dans la ruche; la mise en place, dans la ruche, de rubans en matière plastique qui diffusent de l'acaricide. Dans une perspective d'avertissement, ces différentes méthodes peuvent généralement couplées à la mise en place, sur le plancher de la ruche, d'un "lange" en tissu imbibé de matière collante pour récolter et éliminer les acariens morts. Les traitements ponctuels sous forme de poudrage, fumigation, et pulvérisation doivent être répétés régulièrement en dehors des périodes de couvain puisque les parasites présents dans le couvain operculé sont inaccessibles De plus les colonies peuvent être recontaminées par des abeilles visiteuses ou par des contacts extérieurs avec des essaims sauvages parasités. Parmi les produits chimiques de synthèse efficaces comme acaricides on peut citer principalement: le coumaphos (vendu par Bayer sous le nom de Perizin(M)) qui s'utilise par aspersion des cadres de la ruche; la substance active est absorbée par les abeilles et est répartie dans toute la colonie au cours des échanges sociaux de nourriture Ce produit ne peut être utilisé qu'en absence de couvain et en dehors de la période de miellée. l'amitraz, acaricide dont l'efficacité a été démontrée contre les tiques et autres acariens des bovins, des ovins et des animaux de compagnie et qui est également commercialisé pour le traitement des ruches par aérosol (vendu par Schering sous le nom dlanti-varroa(M)) Ce produit est dangereux pour l'utilisateur et le dosage doit être soigneusement ajusté parce qu'il peut également tuer les abeilles. le fluvanilate, acaricide qui imprègne des lanières de chlorure de polyvinyle et diffuse lentement dans la ruche, permettant ainsi un traitement prolongé (vendu par Sandoz sous le nom d'Apistan(M)). L'évaporation du produit est dépendante des conditions climatiques et son efficacité est donc variable. Cette méthode est particulièrement efficace pour la décontamination des reines et l'expédition aux apiculteurs des cagettes contenant la reine avec quelques suiveuses. Malgré l'existence de ces divers produits, de nombreuses recherches sont encore menées pour améliorer les méthodes de traitement afin de diminuer les risques de toxicité pour l'apiculteur ou pour les abeilles et de garantir l'absence de produit chimique dans le miel ou la cire. De plus, des parasites résistant aux acaricides déjà utilisés peuvent toujours apparaître et il est prudent de continuer à développer des méthodes de traitement alternatives. La présente invention repose sur un principe original qui ne vise ni l'attraction ni la répulsion des varroas mais l'attraction olfactive des abeilles vers un dispositif qui contient une composition acaricide, qui agit par contact et par diffusion sur les varroas portés par les abeilles attirées par une substance attractive appropriée contenue dans ladite composition La quantité d'acaricide peut ainsi être réduite et localisée à un point précis, plus particulièrement dans la ruche, au centre du couvain ou sur un chemin de passage obligé des abeilles qui y pénètrent Le dispositif peut rester en place pendant plusieurs semaines jusqu'à ce que la décontamination totale soit réalisée. Comme dans d'autres méthodes, les varroas morts peuvent être recueillis sur un "lange" adsorbant placé sur le plancher de la ruche Le comptage régulier des varroas permet d'évaluer l'efficacité du traitement et le degré de décontamination de la ruche Cette méthode sert donc d'avertissement et de traitement. La présente invention a été mise au point spécifiquement pour le traitement de la varroatose qui est le problème le plus aigu, actuellement, pour les apiculteurs Il est évident que, en cas de nouvelle contamination épidémique, par un autre parasite, le même principe de traitement comprenant l'association d'une substance attractive pour les abeilles et d'une substance antiparasitaire ne constituerait qu'une variante de la présente invention. Des substances attractives des abeilles ont déjà été analysées et décrites; elles sont particulièrement étudiées pour favoriser la pollinisation et la colonisation des ruches au moment de l'essaimage. Une substance attractive qui s'est révélée particulièrement efficace dans la colonisation des ruches est un mélange artificiel de trois constituants des phéromones sécrétées par la glande de Nasonov des abeilles ouvrières: le citral, le géraniol et l'acide nérolique en solution dans de l'hexane, utilisés à une dose correspondant à la sécrétion de 5000 ouvrières. Une dose plus faible de ce mélange a été incorporée dans la composition acaricide selon la présente invention de manière à attirer les abeilles de la colonie vers le dispositif qui contient cette composition. Plus particulièrement, on utilise un mélange, en proportions égales, de citral et de géraniol, le mélange 2672467 étant additionné aux autres constituants à raison de 0,05 % à 0,2 % en poids sec du mélange final D'autres substances attractives pourraient encore être incorporées dans cette composition comme, l'acide géranique, le farnesol, les constituants de la gelée royale comme l'acide adipique, l'acide pinélique, l'acide subérique, l'acide hydroxy-4 benzoïque (Voir l'article "Compounds which affect the behaviour of the honeybee Apis mellifera Bee world 69- 1988-104-123). L'acaricide utilisé dans le mélange de la présente invention est préférentiellement l'amitraz, à une concentration n'excédant pas 10 % en poids sec du mélange final L'amitraz peut être d'origine commerciale ou préparé selon la méthode décrite dans le brevet 2 073 091. Un autre acaricide pourrait être utilisé de manière équivalente. La substance à propriétés attractives pour les abeilles et l'acaricide sont incorporés dans un véhicule neutre Selon un mode préféré de réalisation de l'invention, ce véhicule neutre est une poudre purifiée de polymère de polyvinylpolypyrrolidone (PVPP). Les ingrédients actifs sont incorporés dans la masse du polymère par brassage à température élevée (de 60 à 'C) dans un rapport final de 0, 05 à 0,2 % de substance attractive, de 5 à 10 % d'amitraz et de 90 à 95 % de PVPP, les % étant exprimés en poids sec. Pour être utilisée dans les ruches, la composition acaricide selon l'invention, qui se présente sous forme de poudre, doit être incorporée dans un dispositif empêchant sa dispersion dans la ruche et en particulier dans le miel. Selon un mode de réalisation de l'invention, ce dispositif est un sachet en matériau microporeux, permettant la diffusion des ingrédients actifs. Selon un mode de réalisation particulier, le sachet est fabriqué en polyéthylène et, après remplissage et thermosoudure, il est soumis à un chauffage, de préférence à 800 C pendant 4 heures, pour favoriser l'imprégnation du polyéthylène par les ingrédients actifs et ainsi augmenter l'efficacité de l'action acaricide par contact direct avec les abeilles. Selon un autre mode de réalistion de l'invention, le dispositif est une plaque de polysorbate polymérisé dans laquelle la composition acaricide a été incorporée en cours de polymérisation, ce dispositif favorisant également le contact direct des abeilles avec l'acaricide. Selon un mode préféré de réalisation de l'invention, ce polysorbate polymérisé renfermant la composition acaricide et attractive est moulé autour d'une bandelette grillagée en matière plastique semi-rigide qui en assure le support et le maintien au sein de la ruche et le rend plus résistant à la destruction par les abeilles. La bandelette grillagée n'est imprégnée de polysorbate et de composition active que dans sa partie centrale, la partie supérieure servant à l'accrochage dans les rayons supérieurs de la ruche et la partie inférieure permettant le décrochage du dispositif par simple traction sans ouvrir la ruche. La présente invention concerne également la mise en oeuvre du dispositif renfermant la composition décrite pour décontaminer les ruches parasitées par le Varroa Jacobsoni Plus particulièrement l'invention concerne la mise en place du dispositif au sein de la ruche, sur un lieu de passage obligé des abeilles ouvrières Le dispositif conçu pour la décontamination d'une ruche renferme une quantité de la composition attractif-acaricide-véhicule neutre comprise entre 1,5 et 15 grammes. Les exemples suivants illustrent l'invention sans en limiter la portée. EXEMPLE 1: Une préparation commerciale de PVPP est repurifiée par trois traitements successifs par mise en contact avec deux volumes d'eau bouillante, filtration et essorage; par un lavage à l'éthanol bouillant pour 7 2672467 éliminer les traces d'eau résiduelles; par séchage sous vide ( 1 mm de mercure) à 100 C pendant au moins 2 heures. Après abaissement de la température entre 80 et 60 'C et fermeture de la vanne de vide, les ingrédients actifs, préalablement mis en solution dans l'alcool, sont incorporés dans la masse du polymère, sans laisser pénétrer d'air dans le récipient, dans les proportions suivantes, exprimées en % du poids total, amitraz 5 % substance attractive (comprenant en proportions 1:1, du citral et 0,05 % du géraniol) Les substances attractives sont d'origine commerciale (Index Merck Nos 2293 et 4263). Le mélange est maintenu à 80 'C sous brassage continu pendant 8 heures puis la température est ramenée à la normale et de l'air préalablement déshumidifié est introduit dans l'enceinte. La poudre ainsi obtenue sera conditionnée selon le mode d'utilisation choisi, comme décrit dans les exemples suivants ( 2 à 4). EXEMPLE 2: La poudre obtenue par le procédé décrit dans l'exemple 1 est conditionnée en sachets de polyéthylène à basse densité ou en sachets de matière tissée ou non tissée microporeuse. On dispense de 1,5 à 15 grammes de poudre par sachet. EXEMPLE 3 Pour favoriser le contact des abeilles avec l'acaricide, les sachets en polyéthylène, chargés de 15 grammes de poudre, sont thermosoudés puis chauffés à 80 'C pendant 4 heures, pour favoriser la diffusion de l'acaricide dans le polyéthylène. EXEMPLE 4: La poudre obtenue par le procédé décrit dans l'exemple 1 est incorporée dans du polysorbate, substance non toxique, polymérisable à froid et qui forme une plaque assez résistante pour ne pas être détériorée par les abeilles. La solution de polysorbate comprend de l'eau déminéralisée 68 % de l'alcool polyvinylique 10 % du polysorbate 20 2 % de l'éthanol absolu 20 % L'alcool polyvinylique est dissous dans l'eau à 700 C sous agitation mécanique Puis la température est abaissée à 300 C pour ajouter le polysorbate et l'éthanol. On incorpore ensuite 15 g de poudre obtenue par le procédé décrit dans l'exemple 1, dans 85 g de solution de polysorbate; quand la solution est homogène, on l'étale sur un plateau siliconé de manière à former une couche de 2 mm. La polymérisation est terminée après 4 jours On obtient des plaques blanches, granuleuses, souples et élastiques Le matériau obtenu est ensuite découpé en bandelettes dont la taille est déterminée en fonction de la dose d'amitraz choisie pour le traitement d'une ruche. EXEMPLE 5: Un dispositif mécanique est utilisé pour rigidifier ou "armer" les bandelettes décrites dans l'exemple 4 On utilise un fin grillage en matière plastique semi-rigide (comme du polyéthylène de "qualité alimentaire", d'origine commerciale) qui répond aux critères suivants: semi-rigide pour faciliter son introduction dans la ruche et son retrait; mémorisant un pliage destiné à faciliter sa fixation dans les rayons; favorisant l'adhésion et la cohésion du polymère contenant la composition active, pour empêcher son arrachage ou son écaillage par les abeilles. Ainsi, dans un grillage à mailles carrées de 5 mm de côté, on découpe des bandelettes de 420 mm de long et de mm de large, ces dimensions étant compatibles avec tous les modèles de ruches couramment disponibles La composition active incorporée dans le polysorbate n'est mise à polymériser qu'autour de la partie centrale de la bandelette, sur une longueur de 150 mm, c'est-à-dire qu'on laisse d'un côté 60 mm, de l'autre 210 mm de grillage vierge de substance active. Ainsi, quel que soit le format de la ruche, la partie imprégnée de composition active sera placée au niveau des deux tiers inférieurs des cadres et la partie supérieure vierge, sera accrochée entre les rayons supérieurs et adaptée, par des pliures appropriées, à l'épaisseur des rayons et à la taille de la ruche Ces manipulations laissent l'apiculteur à l'abri de tout contact avec la substance active La zone non imprégnée, de 60 mm, qui dépasse de la partie inférieure du cadre de la ruche permet de retirer le dispositif quand le traitement est terminé, sans ouvrir la ruche, par simple crochetage par la fente de sortie des abeilles, au niveau de la planche d'envol. La facilité de manipulation due à la semi-rigidité de ce dispositif permet un gain de temps considérable au moment de la mise en place comme au moment de son décrochage Ceci est particulièrement important pour les traitements par temps froid parce qu'un refroidissement à 10 C peut tuer tout le couvain. Le gain de temps, pour des exploitations pouvant atteindre 4000 ruches, est aussi un avantage appréciable EXEMPLE 6: Les différents conditionnements décrits dans les exemples 2 à 5 sont contrôlés pour la quantité d'ingrédients actifs présents pour la stabilité des ingrédients actifs au cours du temps. a) Les quantités d'acaricide et de substance attractive sont contrôlées en chromatographie liquide à haute performance après extraction par un solvant organique (éthanol absolu ou acétone), par référence à des échantillons témoins fraîchement préparés et dosés. b) Une cinétique de disparition des ingrédients actifs au cours du temps, par le même dosage qu'en a), est réalisée sur les différents conditionnements maintenus dans des conditions de température et d'humidité reproduisant celles de la ruche, c'est-à-dire une enceinte thermostatée à 320 C et avec une humidité relative de 90 % Après 6 semaines, il reste plus de 70 % de la concentration initiale des différents constituants. EXEMPLE 7: L'efficacité et l'innocuité de la méthode de traitement sont évaluées dans des ruches contaminées. a) Efficacité. Le dispositif est placé dans la ruche au sein du couvain. Pour mesurer l'efficacité du traitement, selon la méthode classique, on place sur le plancher de la ruche un "lange" imbibé de matière collante qui recueille les varroas morts et on les dénombre au cours du temps. On peut considérer que le traitement a entraîné l'élimination totale des parasites quand on ne recueille plus aucun varroa pendant 3 jours Cette décontamination totale est atteinte en moins de 30 jours. Le tableau suivant montre la mortalité des Varroas dans 20 ruches surveillées pendant 24 jourss Le jour O correspond à la pose de la bandelette imprégnée de la composition active décrite dans l'exemple 5. Voir tableau page suivante N de a ruche I Jour s -3 -2 -1 1 l l 5 o o o o o o o o o o o o o o o o o TABLEAU 2 3 4 5 6 7 8 9 10 8 o 1 l o o o o l o o o o o o o o o o o 0 O 1 12 0 O 0 O 312 480 87 18 17 17 4 5 12 O 2 2 3 2 O 8 O 3 O 3 O I O 3 4 6 21 0 5 O 1 0} 3 0 3 0 O O O 0 O 0 O 0 O 0 O o I 7 0 o l O o o o o o 0 1 1 2 6 8 0 O 680 1860 103 207 48 61 31 23 14 113 l 9 Il 25 I 9 0 22 0 10 0 25 0 21 0 23 0 24 0 5 0 3 0 3 0 2 0 O 0 O 0 O 0 O 0 O 0 O o o o o I o o o o o o o o o 1 1 TABLEAU (suite et fin) N O de \la ruche Il 12 Jours \ 13 14 16 17 18 19 20 10 3 2 12 9 0 O 1225 1789 234 58 41 28 17 68 6 8 13 22 I Il 2 5 0 5 0 34 0 23 0 30 0 24 0 5 0 3 O 3 0 2 0 O 0 O 0 O 0 O 0 O o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o 0 4 12 1 1 17 0 O 789 2320 22 68 12 11 9 26 0 3 0 15 4 5 0 2 0 4 0 2 0 101 0 73 4 24 17 8 3 19 0 17- 0 2 0 O I O 0 O 0 O 0 O 0 O 0 4 12 1 0 17 0 O *762 3245 145 17 12 3 24 0 3 1 17 2 8 0 1 0 4 0 2 0 132 0 60 14 45 9 13 11 I 17 3 3 1 0 O 0 O O O 0 O 0 O 0 O O O O O O O O O TOTAL -3 -2 -1 l 1 1 2 15 12 22 0 17 O O 467 3150 18 123 18 29 7 12 0 6 41 3 9 0 1 0 4 0 5 0 112 0 84 29 18 7 3 13 0 12 0 6 1 O 0 O 0 O 0 O 0 1 0 O 124 o o o o o b) Innocuité. Dans les essais préliminaires plusieurs dosages d'amitraz ont été testés et un surdosage a entraîné la mort de plusieurs colonies. Avec le dosage retenu, c'est-à-dire n'excédant pas 750 mg par conditionnement destiné à une ruche, on n'observe aucune mortalité anormale des abeilles ni aucune modification de leur activité ou de leur comportement. Dans un test de contrôle, une dose de poudre libre (ni conditionnée en sachet ni incorporée dans un polymère solide) a été répandue dans la ruche; même dans ces conditions, on n'a pas observé de mortalité des abeilles. REVENDICATIONS 1. Composition acaricide destinée à la décontamination des élevages d'abeilles caractérisée en ce qu'elle comprend, outre l'acaricide capable de tuer les parasites, une substance à propriétés attractives pour les abeilles et un véhicule neutre. 2. Composition acaricide selon la revendication 1, caractérisée en ce que la substance à propriétés attractives pour les abeilles est un mélange de citral et de géraniol, en proportions égales, la quantité totale de ce mélange étant comprise entre 0,05 et 0,2 % du poids sec du mélange total. 3 Composition acaricide selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que l'acaricide est l'amitraz, à une concentration finale comprise entre 5 et 10 % du poids sec du mélange. 4. Composition acaricide selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que le véhicule neutre est une poudre purifiée de polymère de polyvinylpolypyrrolidone. 5. Procédé de préparation d'une composition acaricide selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu'on effectue un brassage à chaud des ingrédients attractifs avec la poudre de polymère. 6 Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce qu'on effectue le brassage des ingrédients actifs avec la poudre de polymère à une température de 60 à 80 'C pendant 8 heures. 7. Dispositif d'application d'une composition acaricide selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 consistant en un support ou un contenant pouvant, sans danger pour les abeilles, être placé au sein de la ruche, caractérisé en ce qu'il est constitué par un sachet en matériau microporeux empêchant la dispersion de la composition acaricide dans la ruche. 8. Dispositif selon la revendication 7, caractérisé en ce que le matériau microporeux est un polyéthylène. 9. Procédé de traitement d'un dispositif selon la revendication 7 ou 8, caractérisé en ce que le sachet renfermant la composition acaricide est chauffé à 80 'C pendant 4 heures. 10. Dispositif d'application d'une composition acaricide selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 consistant en un support ou un contenant pouvant, sans danger pour les abeilles, être placé au sein de la ruche,caractérisé en ce qu'il est constitué d'une plaque polymérisée de polysorbate. 11.-Dispositif selon la revendication 10, caractérisé en ce que la plaque polymérisée de polysorbate est moulée autour d'une bandelette grillagée en matière plastique semi-rigide. 12. Dispositif selon la revendication 11, caractérisé en ce que la plaque polymérisée de polysorbate n'est intégrée que dans la zone centrale de la bandelette grillagée et que les deux extrémités de celle- ci qui sont vierges de toute substance active servent à l'accrochage et au décrochage du dispositif au sein de la ruche. 13. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 7, 8 et 10 à 12 contenant la dose de composition acaricide nécessaire pour le traitement d'une ruche, caractérisé en ce qu'il renferme une quantité de ladite composition acaricide comprise entre 1,5 et 15 grammes en poids sec.