FR 2653998 A1 19910510 FR 9013786 A 19901107 La presente invention est relative a de nouvelles -compositions pharmaceutiques aqueuses stables a usage parenteral, de prefrence des solutions injectables contenant le complexe de zinc d'alcaloïdes de tgpa bis-indole, de préférence la vîncristine (denommée par la suite: -VCPl, la vinblasttne (par la suite: VBLI et la 6 '-nor-anhydroovinblastine Ipar la suite: 65 '-nor- v JBLI L'invention concerne de plus un procédé pour preparer ces compositions au moyen d'agents conservateurs. On sait que des composés de type bis-indole faicaloidesi et en particulier la VC Pl et la VBL d'origine natureile, ainsi que la 5 '-nor- VBL réceui Hlent prépar Le de façon synfthétique, jouent un r Pâle remarquable dans le traitement anti-tumoral Ces composés ont eté commercialtisés ou décrts, respectivement dans les daiverses pharmacopees en tant que sels (principaiement en tant que sulfates ou que difumarates, respectivementi. On sait également que la forme de dosage injectable des agents actifs cidessus a un r Ple dacisif dans la bataille contre le cancer La recherche et la mise au point de formes 2 O pharmaceutiques injectables variées ont donc pris de l'importance dans les annees 1980 Dans ce domaine, il faut mentionner la formulation Injectable décrite dans le brevet US No 4 819 935, dans lequel les auteurs abandonnent les techniques de Ilyophilisation utilisées antérieurement et formulent la composition à J aspirer dans la seringue en solution aqueuse sous une forme en ampoule unique. Le principe de la solution décrite dans le brevet mentionné plus haut, comprend la dissolution dans l'eau de la VCP ou dans des publications ultérieures, (voir par exemple le brevet hongrois No 191 538), de la VBL ou de la vindesine sous forme de leurs sulfates en presence d'un système tampon a l'acetate et ensuite l'introduction dans la solution d'un agent stabilisant micr obiologique requis pour obtenir une composition oncologique stable Le 4-hydroxybenzoate de méthyle ou le 4hydroxybenzoate i 5 de propyle bien connus antérieurement sont utilisés en tant que stabili 5 ants Un élément important de cette solution réside en ce que la solution aqueuse contient du mannitol en une concentration relativement eléve ( 1 00 mg,/mll. Cependant, on ne trouve que peu de données indiquant j une réeile stabilité parmi les données impliquant une reconnaissance d'un caractère indubitablement nouveau Dans le brevet hongrois cité plus haut il est seulement indiqué que 94 à 99 % de la concentration d'origine de la solution injectable de sulfate de VCP sont conservés après 9 mois de stockage à 5 SC, tandis 1 t C qu'une stabilité de 98,7 à 100 % apres 12 mois est rapportée par les auteurs dans le cas de la VBL. Bien qu'une stabilité de 94 % après 9 mois ne puisse pas eêtre considérée comme suffisante, la solution ci-dessus a aussi un autre inconvénient en ce que les solutions injectables contiennent un nombre relativement elevé de composants Il est bien connu qu'on cherche toujours à n'introduire dans la composition injectable que les additifs les plus nécessaires et seulement en des quantités les plus faibles possibles en plus du composant actif. En raison des inconvénients ci-dessus on recherche d'autres solutions plus avantageuses Une telle solution est indiquée par exemple, dans le brevet hongrois No 195 513 Les auteurs cide ce brevet, abondamment scoutenus par des données de stabilite ont trouvé qu'on peut parfaitement stabiliser des solutions aqueuses de com,,pomés de type bis-indole en formant des complexes des bis-indoles avec certains métaux bivalents, à savoir le zinc i-Zn+ 2, le calcium (Ca 2 +) ou le magnésium (Mr-g 2 +), respectivement dans la solution aqueuse L'existence des complexes est démontre par des examens polarographiques Le produit obtenu à la suite de ce travail vraiment persuasif se révèle suffisamment stable, mais présente un inconvénient en ce qu'il consiste en un grand nombre de composants: par exemple le produit de l'exemple 1 contient 8 composants en plus du composant actif A savoir, un système tampon consistant en acide acétique et acétate de sodium et comme dans la solution de l'art antérieurn une concentration relativement élevée en mannitol sont aussi ncess 3 aines en plus des agents conservateurs, Le pnoduit publié dans le brevet européen No. 0.243 278 est egaiement désavantageux du même point de vue. Selon ce dernier brevet, on utilise 0,1 2,2 % en poids de glycine, un systeme tampon contenant des ions phosphate et des agents conservateurs (dans certains cas méme 6 composants) pour preparer des solutiuons injectables stables des bis-indoles Non seulement le nombre d'additifs utilisés est grand, mais aussi les caractéristiques de stabilité du pnroduit sont insuffisantes Selon ce brevet, la solution reste stable à un p H de 4,15 pendant 2 ans; cependant selon des mesures répétées effectuées par la O Demanderesse, le produit contient le composant actif non décomposé en une quantité de 93 à 93,5 % seulement après 6 mois de stockage. ' Ainsi, I'objet de la présente invention est de fournir une composition pharmaceutique et un procédé pour la préparer, laquelle composition est plus stable que les formulations connues jusqu'à maintenant et contient simultanément un plus petit nombre d'additifs et à une concentration minimum en fonction des e O xigences actuelles. La présente invention repose sun la constatation selon laquelle, parmi les complexes métalliques des bis-indoles, le complexe de zinc présente les propriétes de stabilité les plus avantageuses et le travail de mise au point de la Demanderesse part de ce fait. On a trouvé de façon surprenante, que la teneur en mannitol, apparaissant avec une valeur élevée (environ 100 mg/ml) dans les solutions antérieures dans chaque cas, pouvait non seulement être réduite mais aussi complètement éliminée En fait, on a établi, de façon surprenante, qu'on pouvait préparer une solution injectable aqueuse extraordinairement stable ne necessitant ni système tampon particulier ni mannitol, en ajoutant graduellement des gluconates de certains métaux bivalents au complexe de zinc-alcaloide mentionné plus haut en solution aqueuse. La présente invention concerne donc une composition pharmaceutique a usage parentéral contenant un alcaloide de ty pe bis-indole, qui comprend un complexe de zinc du sel d'alcaloïde de type bis-indole, un _luconate de métal bivalent et un agent conservateur dissous dans un alcool mono ou pol Uhydnique dans une solution aqueuse. La composition conforme a la présente invention comprend les composants suivants: la vincristine, la vinblastine ou la 5 '-nor-anhydrovinblasti Jne en tant qu'alcaloide de tygpe bis-indole; le _luconate de calcium, de zinc ou de magnesium en tant que gluconate de metal bivalent; le 4hydroxybenzoate de méthyl l et/ou de popyle en tant qu'agent conservateur: et le l'éthanol, le n-propanol, I'isopropanol ou l'éthylène glycol en tant qu'1 alcool mono ou polyhydrique. Selon un autre aspect de la présente invention, on fournit un procédé pour la préparation d'une composition pharmaceutique contenant un alcaloîde de type bis-indole qui comprend la dissolution d'un sel d'alcaloïde de type bis-indole dans I'eau, le mélange de celui-ci avec une solution aqueuse de sulfate de zinc, puis le traitement du complexe d'alcaloide-znc ainsi obtenu avec une solution aqueuse du gluconate de metal bivalent, cette solution aqueuse résultante étant complétée par addition d'un agent conservateur dissous dans un alcool mono ou pol hydrique. Dans le procédé selon la présente invention: du sulfate de vincristine, du sulfate de vinblastine ou du tartrate de 5 '-nor-anhydrovinblastine sont utilisés en tant que sels d'alcaloïde de typa bis-indole; du gluconate de calcium, de zinc ou de magnesium sont utilisés en tant que gluconates de métal bivalent; de l'éthanol, du n-propanoi, de l'isopropanol ou de l'éthylène glycol sont utilisés en tant qu'alcools mono ou polyhydriques; et du 4-h Udrox ybenzoate de méthyle et/ou de propyle sont utilisés en tant qu'agents conservateurs. Selon un mode de réalisation préféré du pnocédé de l'invention, une solution aqueuse contenant un complexe de VCR- zinc est preparée a partir d'une solution de sulfate de VCR à une concentration de 1,0 à 1,5 mg/ml et d'une solution de sulfate de zinc, puis cette solution est additionnée d'un gluconate de métali bivalent, de préférence un gluconate de zinc, de magnésium ou de calcium, jusqu'à une concentration de 1,5 à 2 mg/ml. Selon le procédé de la présente invention, des solutions aqueuses stables contenant le complexe de VBL-zinc ou de 5 '-nor-VBL-zinc peuvent de même être prepares selon la procedure decrite ci-dessus. L'avantage le plus important du procédé selon l'invention réside en ce qu'il convient pour préparer une composition à usage parentéral contenant un composant actif de l 5 type bis-indole et possedant une stabilité qui se maintient pendant au moins 24 mois, en présence d'une petite quantité d'additifs par une procédure technologique simple. Les données de stabilité sont déterminées de la façon décrite plus loin. e La stabilité des solutions injectables contenant des composants actifs de type bis-indole préparées dans les exemples ci-aprés, est contrôlée par une méthode chromatographique liquide haute pression ICLH Pl (voir: Pharmacopoea of the USA, Ed. XXI, page I 1 1 SJ La méthode CLHP est aussi utilisée dans les cas des solutions de sel de vinblastine (voir Pharmacopoea of the USA, Ed XXI, page 24531. Dans le cas de la VCPI, la méthode CLHP est accomplie avec une colonne 12 _ 50 x 4,6 mml garnie de Nucleosil 5 i C 8 avec un débit de 2,0 ml/minute et à une longueur d'onde de 297 nm L'élution -0 est effectuée avec un mélange de méthanol, d'eau et de diéthylamine (p H 7 5) La durée de rétention est d'environ 7,0 minutes. La teneur en composant actif est déterminee en fonction d'un étalon externe, c'est-à-dire une solution aqueuse pure ayant une concentration identique à celile de la solution injectable du sulfate de vincristine de la même origine que celle qui est utilisée dans la solution à déterminer. La présente invention est illustrée en détail par les exemples non limitatifs suivants. Example I Composants g Sulfate de VCP 0,1000 4-Hlydroxybenzoate de méthyle 0,1300 4Hydroxybenzoate de propyle 0,0200 Sulfate de zinc heptahydrate 0,0375 3 luconate de calcium monohydraté 0, 1900 Ethanol ( à 96 %) 5,0000 Eau distillee pour injection, q s p 100 ml Ces composants sont peses filtrés pour Gtre exempts de bactnries dans des conditions aseptiques et distr 4 ibus dans ampoules stériles. La composition est prépareée de la façon suivante. La quantité cl-dessus de sulfate de VCP est dissoute dans 40 ml d'eau et le sulfate de zinc dissous dans 5 mi d'eau est ajouté Le complexe de zinc ainsi obtenu est mélangé au gluconate de calcium dissous dans 30 ml d'eau et la solution éthanolique des 4-hydrox Jbenzoates preparée séparément est ajoutee a la solution ci-dessus La solution obtenue est complétée à 100 mi et -2 distribuée dans des ampoules dans des conditions aseptiques. Exemple 2 Composants g Sulfate de VBL 0, 1000 4-Hydroxybenzoate de méthyle 0,1300 4Hydroxybenzoate de propyle 0,0200 Sulfate de zinc heptahydrate 0,0375 13 luconate de calcium monohydraté 0,1900 Ethanol (à 968) 5,0000 Eau distillée pour injectionq s p 100 ml Ces composants sont pesés, filtrés pour être exempts de bactéries dans des conditions aseptiques et distribués dans 20 ampoules stériles ayant un volume respectif de 5 mi. La composition injectable est préparée selon la J procedure de l'exemple 1. Exemple 3 Composants Ditartrate de 5 '-nor-VBL 0,5000 4-Hydroxybenzoate de méethyle 0, 1300 4-Hydroxybenzoate de propyle 0,0200 ulfate de zinc heptahydrate 0, 0400 Sluconate de calcium monohydraté 0,2000 Ethanol 5,0000 Eau distillée pour injection q s p 100 mi La compositi Jon injectable est préparée selon la procédure de l'exemple 1. Exemple 4 La procédure de i'exemple 1 est répétée, sauf que 0,1500 g de gluconate de magnésium est utilisé à la place de 0, 1900 g de gluconate de calcium. Exemple 5 La procédure de l'exemple 1 est répétée, sauf que 0,2500 g de g uconate de zinc est utilisé à la place de 0, 1900 g de gluconate de calcium. Exemple 6 La procédure de l'exemple i est répétée, sauf que les ml de solution stérile obtenue sont distribués dans 50 ampoules ayant chacune un volume de 2 ml pour fournir des ampoules contenant 2 mg/2 ml de VGCP en tant que composant actif. f 20 Exemple La procedure de l'exemple 1 est répétée, sauf que du sulfate de VBL est utilise à la place du sutlfate de VCP et que de l'isopnropanol est employée ila place de l'éthanol. Exemple 8 La procedure de l'exemple 7 est erépétée sauf que de l'éthlene glycol est employé à la place de l'éthanol. Tests de stabilité effectués sur la composition de l'exemple I Mvode et Teneur en composant I m p u N e t é s durée du actif en % de la Totales Ndéfoinrmyl Autras stockaae conc de départ VCR 0 100,00 1,48 0,33 i Péfrigérateur 6 mois 97 80 2,82 1 29 2 3 moisà 40 o C 80,90 12,40 7,12 > 2 3 mois à 50 o C 53,40 27,4 15,6 > 2 Q Tests de stabilité effectués sur la composition de l'exemple 2 Mode et Teneur en composant I m p u r e t e s durée du actif en % de la Totales stockade concentration de déparnt 0 10000 1,27 Péfr 4 érateur 6 mois 100,80 1,25 R Pfrilgrateur 9 mois 98,5 1,22 èfr in ateu P 12 mois 97,-3 1,50 P Rfrierateur 24 mois 97,1 1562 Temp ambiante 3 mois 98,8 1,82 Temp ambiante 6 mois 95 > 8 2,36 Temp ambiante 12 mois 95, 5 2,48 Temp ambiante 3 mois llumiare diffuse) 99,0 2,05 3 mols à 400 C 92, 7 5,12 3 mois à 5 OGC 69,7 15,60 t 10 REVENDICATIONS 1 Composition pharmaceutique à usage parentéral contenant un alcaloïde de type bis-indole, caracterimse en ce qu elle comprend en solution aqueuse, un complexe de zinc d'un sel d'alcaloïde de type bis-indole, un glucornate de métal bivalent et un agent conservateur dissous dans un alcool mono ou polyhydrique. 2 Composition suivant la revendication 1. caractérise en ce qu'elle comprend de la vincristine ou de la vinblastine en tant qu'alcaloïde de type bis-indole. 3 Composition suivant la revendication I ou la revendication 2 caractériséee en ce qu'elle comprend du gluconate de calcium, de zinc ou de magnésium en tant que gluconate de metal bivalent. 4 Composition suivant la revendication I ou la revendication 2, caractérisée en ce qu'elle comprend du 4- hydro>xybenzoate de méthyle et/ou du 4-hydroxybenzoate de propyle en tant qu'agent conservateur. Composition suivant la revendication I ou la revendication 2 caractérisée en ce qu'elle comprend de l'éthanol, du n-propanol, de l'isopropanol ou de l'éthylène glycol en tant qu'alcool mono ou polyhydrique. 6 Procédé de préparation d'une composition pharmaceutique & usage parentéral contenant un alcaloïde de type bis-indole, caractérisé en ce qu'il romprend la dissolution d'un sel fd'alcaloïde de type bis-indole dans l'eau, le mélange de celui-ci avec la solution aqueuse de sulfate de zinc, puis le traitement du complexe d'alcaloide-zinc ainsi obtenu avec une solution aqueuse d'un gluconate de métal bivalent, la solution aqueuse résultante étant complétée par addition d'un agent conservateur dissous dans un alcool mono ou polyhydrique. 7 Procédé suivant la revendication 6 caractérisé en ce qu'on utilise du suifate de vincristine ou du sulfate de vinblastine en tant que sel d'alcaloïde de type bis-indole. 8 Procédé suivant la revendication 6 ou la revendication 7, caractérisé en ce qu'on utilise du gluconate de calcium, de zinc ou de magnésium en tant que gluconate de métal bivalent. 9 g Procédé suivant l'une queaiconque des Prevendication 5 6, 8, caractérisé en ce qu'on utilise de l'éthanol, du n-propanol, de 'lisopropanol ou de l'éthylène glycol en tant qu'alcool mono ou polyhydrique. Procedé suivant l'une quelconque des revendications 6 à 8, caractérnisé en ce qu'on utilise du 4- hydroxybenzoate de méthyle et/ou du 4-hydroxybenzoate de propyle en tant qu'agent conseivateur.