FR 2652265 A1 19910329 FR 8912689 A 19890928 La présente invention est relative à un pro- cédé de préparation de suspensions de plantes entières et/ou de parties de plantes fraîches ou sèches ainsi qu'aux suspensions obtenues. On entend, au sens de la présente invention, par partie de plante, les racines, tiges, feuilles, sommités fleuries, fleurs, fruits ou graines. Il est connu que les plantes constituent de véritables réservoirs de principes actifs et sont tou- jours très utilisées soit telles quelles, sous forme sèche notamment, soit sous forme d'extraits, soit sous forme de suspensions dans de nombreuses préparations et notamment des préparations à usage pharmaceutique, vété- rinaire, cosmétologique ou alimentaire. Parmi les formes liquides à base de plantes, on peut distinguer essentiellement les extraits et les suspensions. Les extraits présentent un certain nombre d'inconvénients: - ils ne permettent pas de contenir la tota- lité des principes actifs; en effet, l'action du sol- vant, selon sa nature, n'entraîne que les composés qu'il solubilise; - le solvant d'extraction n'est pas inerte, il peut entraîner des dégradations, surtout lorsque les opé- rations d'extraction font intervenir la chaleur (par exemple macération à chaud, distillation ou autres procé- dés contraignants); _- - de plus, pour avoir la meilleure extraction il est préférable de diviser mécaniquement les végétaux, mais cette opération entraîne une élévation de tempéra- ture néfaste aussi bien pour les matériaux frais que secs, car on augmente les surfaces d'oxydation, d'évapo- ration, phénomènes intensifiés par l'élévation de chaleur. Ces inconvénients croissent avec la finesse des particules. Afin de lutter contre ce dernier inconvénient on limite la division par un broyage grossier, qui dimi- nue l'efficacité extractive du solvant. Un Brevet français n 2 608 923, décrit des procédés d'obtention de nouveaux extraits végétaux liquides de plantes fraîches, mais lesdits procédés ne permettent pas de contenir l'intégralité des principes actifs de la plante, pour les raisons invoquées ci- dessus. En ce qui concerne les suspensions, leur pré- paration comporte au moins deux grands écueils: - le premier écueil est constitué par le broyage lui-même: s'il est pratiqué sans précautions, il a pour effet immédiat de mettre en contact des sites qui, à l'état normal, étaient géographiquement séparés et, de ce fait, favoriser l'action d'enzymes sur des substrats; - un autre écueil est constitué par divers processus physiques et chimiques mis en oeuvre (tels que température, pH, solvants, etc...) qui tous ont une influence plus ou moins néfaste sur les principes actifs et l'équipement enzymatique des plantes. La lyophilisation par exemple, qui permet un séchage rapide à basse température, outre qu'elle consti- tue une technique coûteuse, provoque la perte par évapo- ration des divers principes volatils tels que les huiles essentielles, certaines amines et divers arômes. Elle provoque même certaines altérations dues à la phase ultime du séchage fait à une température voisine de 20 C. Il y a également des risques sérieux de dégra- dation par l'extraction aux divers solvants, très large- ment utilisée et qui fait appel à la solubilisation des substances contenues dans les plantes. En outre, cette solubilisation n'est pas complète, même si l'on fait appel à toute une série de solvants successifs. L'évaporation du solvant (ou même l'extraction elle- même), se fait parfois à chaud et est donc dangereuse pour les divers principes actifs. De plus, les résidus des divers solvants s'avèrent souvent toxiques. Dans le Brevet européen 85 589, un procédé de préparation de suspensions de cellules fraîches stabili- sées, qui préserve la quasi totalité des principes actifs de la cellule, est décrit. Ce procédé comporte notamment un broyage à froid de manière à obtenir une granulométrie inférieure à environ 100 gm, puis deux micronisations successives effectuées en présence d'un solvant miscible à l'eau et à froid. Un tel procédé a l'avantage d'éviter les écueils précisés ci-dessus mais ne permet toutefois d'obtenir que les principes actifs solubles dans le sol- vant utilisé; or dans certains cas, des principes non solubles présentent des propriétés intéressantes soit du point de vue thérapeutique, soit du point de vue cosméto- logique, par exemple. De plus, un tel procédé n'élimine pas les éléments structuraux des végétaux (la cellulose, l'hemi cellulose, la lignine, le suber), qui perturbent la biodisponibilité des principes actifs et de leur environnement et, entre autre, provoque des fermentations intestinales lors d'ingestion. La présente invention s'est par conséquent donné pour but de pourvoir à un procédé de préparation de suspensions de plantes entières et/ou de parties de plantes, qui répond mieux aux nécessités de la pratique que les procédés visant au même but et antérieurement connus notamment en ce qu'il permet d'obtenir tous les principes actifs de la plante tout en éliminant les élé- ments structuraux des végétaux. La présente invention a pour objet un procédé de préparation de suspensions de plantes fraîches ou sèches, comportant des étapes de nettoyage poussé de la plante ou partie de plante et/ou de séchage, de cryo- broyage à une température inférieure à 0 C jusqu'à l'obtention d'une granulométrie inférieure à environ pm, lequel procédé est caractérisé: 1) en ce qu'après un trempage des particules pendant un temps convenable dans au moins un solvant approprié, la phase liquide et la phase solide de la sus- pension obtenue sont séparées de manière appropriée; 2) en ce que la phase solide est exprimée par pressage-à froid; 3) puis en ce que la phase liquide obtenue en 1) et le pressat obtenu en 2) sont mélangés et constituent une suspension homogène et intégrale de plantes et/ou parties de plantes. Au sens de l'invention, intégrale signifie que tous les principes actifs (solubles ou insolubles dans le solvant) présents dans la plante ou la partie de plante sont présents dans la suspension. Un tel procédé, conforme à l'invention, pré- sente les avantages suivants: - il permet de traiter les plantes à froid, d'o une plus grande stabilité des principes; - il permet d'avoir une extraction totale aussi bien des corps polaires qu'apolaires, en raison de l'étape de pressage à froid; en effet, l'extraction des principes actifs solubles et insolubles dans le solvant est réalisée et est obtenue par la combinaison solvant- pressage à froid. L'extraction des principes actifs ne dépend plus de la nature du solvant et on peut ainsi évi- ter l'emploi de solvants non recommandés pour des usages _ pharmaceutiques et même cosmétologiques; - il permet de traiter en même temps des par- ties différentes de la plante (par exemple racines et/ou tiges, feuilles, fleurs ou fruits) qui, nécessiteraient des procédés d'extraction et/ou des solvants différents pour obtenir les principes actifs intéressants; - il permet par le choix du solvant, de conserver les principes dans leur état initial avant traitement, de bloquer les enzymes sans les détruire et de stabiliser la préparation. Les plantes sont de préférence des plantes à usage médicinal, tinctorial, aromatique, alimentaire ou cosmétologique. Selon un mode de mise en oeuvre avantageux du procédé conforme à l'invention, le trempage de l'étape 1) est de quelques heures à plus de 72 heures. Selon un autre mode de mise en oeuvre avanta- geux du procédé conforme à l'invention, le trempage de l'étape 1) est réalisé à l'aide d'au moins un solvant choisi dans le groupe qui comprend l'eau, les alcools comme l'éthanol, les polyalcools comme le propylène gly- col, le glycérol, le sorbitol, les alcools de sucres, les maltodextrines, les cyclodextrines, les esters d'acides gras comme le myristate d'isopropyle, les corps gras comme les huiles minérales, végétales ou animales ou les tensio-actifs. Dans le cas o le trempage est réalisé à l'aide de plusieurs solvants, ceux-ci sont miscibles entre eux ou rendus miscibles, notamment en présence d'agents tensio-actifs. Selon une disposition avantageuse de ce mode de mise en oeuvre, le/les solvants sont au moins dans un rapport 1:1 par rapport au poids de la plante à traiter. La quantité de solvant ajoutée doit être suffisante pour pouvoir imbiber la plante; en effet, une imbibation correcte de la plante, permet lors du pres- sage, d'extraire tous les principes actifs insolubles. La séparation de la phase liquide et de la phase solide est réalisée par une technique de séparation connue en soi, notamment par décantation, par centrifuga- tion ou par filtration. Selon un autre mode de mise en oeuvre avanta- geux du procédé conforme à l'invention, la pression exer- cée lors de l'étape 2) dépend de la plante ou partie de plante à traiter. Conformément à l'invention, elle peut avanta- geusement être comprise entre 1 bar et 100 bars. De plus hautes pressions pourraient, dans cer- tains cas, également être appliquées. La vitesse de montée en pression dépend égale- ment de la plante à traiter et est de l'ordre de quelques minutes. Selon un autre mode de mise en oeuvre du pro- cédé conforme à l'invention, le pressage est réalisé à l'aide d'une presse à compression radiale, la phase so- lide étant répartie en fines couches. On obtient ainsi de très bons résultats, à savoir l'extraction de tous les principes actifs inso- lubles dans le/les solvants précédemment utilisés, sans échauffement. De plus, le cryobroyage du matériel végétal de départ offre une plus grande surface de contact au solvant, une meilleure hydratation et donc une meilleure expression. La présente invention a également pour objet une suspension intégrale de plantes entières et/ou de parties de plantes fraîches ou sèches obtenues au moyen du procédé conforme à l'invention. Selon un mode de réalisation avantageux de ladite suspension, celle-ci est concentrée de manière appropriée. La présente invention a également pour objet - une composition liquide, caractérisée en ce qu'elle com- prend une suspension intégrale conforme à l'invention as- sociée à au moins l'un des agents suivants: arômes, édulcorants, épaississants, parfums, gélifiants, agents thixotropes, apétents. Selon un mode de réalisation avantageux de ladite composition liquide, elle comprend une suspension intégrale de plantes conforme à l'invention, au moins un arôme, au moins un édulcorant et au moins un agent thixo- trope. Ledit agent thixotrope est notamment adapté au solvant utilisé lors du trempage, de manière à obtenir une composition homogène et agréable à prendre. La présente invention a également pour objet une composition solide, caractérisée en ce qu'elle com- prend une suspension intégrale de plante conforme à l'invention mise sous une forme solide. Selon un mode de réalisation avantageux de ladite composition, la suspension intégrale de plante est absorbée sur un support solide absorbant approprié. On peut citer notamment comme support solide, et ce de manière non limitative, les cyclodextrines, les maltodextrines ou tout autre support absorbant. Selon un autre mode de réalisation de ladite composition, la suspension est solidifiée par une opéra- tion physique telle que dessiccation, évaporation, lyo- philisation ou atomisation. Les suspensions et compositions conformes à l'invention trouvent application dans le domaine pharma- ceutique, cosmétologique ou alimentaire. Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions, qui ressortiront de la description qui va suivre, qui se réfère à des exemples de mise en oeuvre du procédé objet de la présente invention. Il doit être bien entendu, toutefois, que ces -- exemples sont donnés uniquement à titre d'illustration de l'objet de l'invention dont ils ne constituent en aucune manière une limitation. EXEMPLE i: Préparation intégrale de Bardane (Arctium majus ou Lappa major). On prépare une suspension comme précisé ci- après avec les constituants suivants: partie utilisée: racines fraîches quantité mise en oeuvre: équivalent à 10% de racines sèches (taux R) solvants utilisés éthanol-eau (30/70) On détermine le taux R de matière sèche comme décrit dans le Brevet européen 85 589. Les racines fraîches, aussitôt après la récolte, sont triées, lavées soigneusement sous un cou- rant d'eau froide, égouttées sur un grillage en acier inoxydable puis plongées dans de l'azote liquide (-196 C). On prélève 13,4 kg de racines fraîches conge- lées et on les place dans un broyeur à couteau, travail- lant en continu, préalablement refroidi et maintenu à - C par addition d'azote liquide. On réalise un mélange éthanol-eau dans une cuve (30/70) et on refroidit l'ensemble à une température inférieure à 10 C. On ajoute la plante cryobroyée, on agite en maintenant la température au voisinage de 10 C. On ajuste le volume à 100 litres avec de l'eau et/ou de l'éthanol, afin d'avoir un degré alcoolique voisin de 30 % (m/m). Le mélange est conservé pendant 48 heures puis la phase liquide et la phase solide sont séparées par - centrifugation à 1 000 t/mn. Le pressage est réalisé, par exemple, comme suit, à titre d'exemple non limitatif: La phase solide est récupérée et est répartie en couche mince, de l'ordre de 1 à 2 cm sur une toile de pressage (10) qui est déroulée en continu et qui, après la répartition de la phase solide, est embobinée sur une grosse bobine (20); ladite grosse bobine (20) est ensuite insérée dans une virole (30). La pression est alors montée à 50 bars en 5 minutes et maintenue à cette pression pendant un quart d'heure. Le liquide exprimé s'écoule à travers la toile de pressage (10) et est récu- péré. Ce procédé de pressage a l'avantage d'exercer une pression homogène sur l'ensemble de la phase solide. La phase liquide et le pressat obtenu sont mélangés et homogénéisés. On obtient une suspension intégrale et homo- gène de Bardane, d'aspect brunâtre et à odeur caractéris- tique et donc le degré alcoolique est de 29,7 . Une étude analytique de la plante fraîche et de la suspension a été réalisée. Les résultats sont exprimés par rapport aux racines séchées pour la plante fraîche ou l'équivalent en racines séchées pour la sus- pension. $* $* plante franche $ suspension $ $ ELEMENTS MINERAUX $ $ $ $ Azote $ 1,22 % $ 1,4 % $ $ Potassium $ 1,2 % $ 1,3 % $ $ Calcium $ 0,32 % $ 0,2 % $ $ Silicium $ 0,27 % $ 0,1 % * $ Phosphore $ 0,21 % $ 0,16 % $ $ Magnésium $ 0,11 % $ 0,12 % $ $ PROTIDES $ $ $ $ totaux $ 1,21 % $ 1,6 % $ * ac. aminés libres * 0,185% $ 0,3 % $ * ac. aminés après hydrolyse $ 0,94 % $ 1,2 % $ $ SUCRES $ $ * t totaux $ 8,35 % $ 9 % $ * inuline $ 8 % * 8,3 % $ $ glucose $ 0,165 % $ 0,3 % * $ saccharose $ 0,165 % $ 0,2 % $ $ $ $ $ $ DIVERS $ $ t $ lipides $ traces $ traces $ $ vitamine E $ 0,000015 % $ 0,000012% $ $ flavonoïdes $ 0,07 % $ 0,13% * $ stérols $ 0,001 % $ 0, 0007% $ $ tanins $ présence * présence $ $ saponosides $ présence * présence * On remarque la forte similitude entre les deux analyses avec un peu plus de composés polaires extraits dans la suspension dû au choix du solvant. EXEMPLE 2: Préparation intégrale de Mélilot (Melilotus officinalis) On prépare la suspension selon le protocole de fabrication énoncé ci-dessus avec les constituants suivants: partie utilisée: sommités fleuries quantité mise en oeuvre: équivalent à 10% de plantes sèches (taux R) solvants utilisés: éthanol-eau (30/70) Contrôle du produit: Aspect: liquide fluide marron clair à odeur caractéristique degré alcoolique: 29, 5 Une étude analytique de la plante fraîche et de la suspension a été réalisée. Les résultats sont exprimés par rapport à la plante séchée pour la plante fraîche ou l'équivalent en plante séchée pour la suspen- sion. $* *$ plante franche t suspension t $ ELEMENTS MINERAUX * $ $ Azote $ 2,8 % $ 2,7 % * t* Potassium t 1,8 % t 1,9 % * $* Calcium $ 1, 43 % $ 0,9 % * $* Phosphore $ 0,24 % * 0,26 % $ $ Magnésium $ 0,22 % t 0, 21 % * $ $ $ $ PROTIDES $ $ $* totaux $ 2,07 % $ 2,3 % $ ac. aminés libres t 0,168 % * 0,24 % * $ ac. aminés après hydrolyse $ 1,56 % t 2 % $ $ $ $ $ SUCRES $ $ t $ totaux $ 6,96 % $ 7,3 % $ $ glucose $ 0,66 % $ 0,72 % t $4 lactose $ traces $ traces $ t saccharose $ absence t absence $ $ $ $ $ $ DIVERS 4 t lipides $ 0,148 % $ 0,134 % $ $ vitamine C $ 0,00174 % $ 0,0019% $ $ vitamine K $ 0,0001% $ 0,00008% $ $4 flavonoïdes t 0,23 % $ 0,38 % t $ stérols $ 0,003 % $ 0,0027% $ t4 coumarine t 0,25 % 4 0,27 % t t saponosides $ présence $ présence $ $ allantoïne $ 0,2 % $ 0,2 % $ Mêmes remarques que pour l'exemple 1. Ainsi que cela ressort de ce qui précède, l'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes de mise en oeuvre, de réalisation et d'application qui vien- nent d'être décrits de façon plus explicite; elle en embrasse au contraire toutes les variantes qui peuvent venir à l'esprit du technicien en la matière, sans _ s'écarter du cadre, ni de la portée, de la présente invention. REVENDICATIONS 1 ) Procédé de préparation de suspensions de plantes fraîches ou sèches, comportant des étapes de nettoyage poussé de la plante ou partie de plante et/ou de séchage, de cryobroyage à une température inférieure à 0OC jusqu'à l'obtention d'une granulométrie inférieure à environ 100 pm, lequel procédé est caractérisé: 1) en ce qu'après un trempage des particules pendant un temps convenable dans au moins un solvant approprié, la phase liquide et la phase solide de la sus- pension obtenue sont séparées de manière appropriée; 2) en ce que la phase solide est exprimée par pressage à froid; 3) puis en ce que la phase liquide obtenue en 1) et le pressat obtenu en 2) sont mélangés et constituent une suspension homogène et intégrale de plantes et/ou parties de plantes. 2 ) Procédé selon la revendication 1, caracté- risé en ce que le trempage de l'étape 1) est de quelques heures à plus de 72 heures. 3 ) Procédé selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisé en ce que le trempage de l'étape 1) est réalisé à l'aide d'au moins un solvant choisi dans le groupe qui comprend l'eau, les alcools comme l'éthanol, les polyalcools comme le propylène gly- col, le glycérol, le sorbitol, les alcools de sucres, les maltodextrines, les cyclodextrines, les esters d'acides gras comme le myristate d'isopropyle, les corps gras _ comme les huiles minérales, végétales ou animales ou les tensio-actifs. 4 ) Procédé selon la revendication 3, caracté- risé en ce le/les solvants sont au moins dans un rapport 1:1 par rapport au poids de la plante à traiter. ) Procédé selon l'une quelconque des reven- dications 1 à 4, caractérisé en ce que la pression exer- cée lors de l'étape 2) dépend de la plante ou partie de plante à traiter et est de préférence comprise entre 1 et bars. 6") Procédé selon l'une quelconque des reven- dications 1 à 5, caractérisé en ce que le pressage est réalisé à l'aide d'une presse à compression radiale, la phase solide étant répartie en fines couches. 7") Suspension intégrale de plantes entières et/ou de parties de plantes fraîches ou sèches obtenues au moyen du procédé selon l'une quelconque des revendica- tions 1 à 6. 8 ) Suspension selon la revendication 7, caractérisée en qu'elle est concentrée de manière ap- propriée. 9 ) Composition liquide, caractérisée en ce qu'elle comprend une suspension intégrale de plantes selon la revendication 7 ou la revendication 8, au moins un arôme, au moins un édulcorant et au moins un agent thixotrope. ) Composition liquide selon la revendica- tion 9, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre au moins l'un des agents suivants: épaississants, parfums, gélifiants, apétents. 11') Composition solide, caractérisée en ce qu'elle comprend une suspension intégrale de plante selon la revendication 7 ou la revendication 8 mise sous une forme solide. 12 ) Composition selon la revendication 11, caractérisée en ce que la suspension intégrale de plante est absorbée sur un support solide absorbant approprié. 13") Composition selon la revendication 11, caractérisée en ce que la suspension est solidifiée par une opération physique telle que dessiccation, évapora- tion, lyophilisation ou atomisation. 14 ) Application des suspensions selon la revendication 7 ou la revendication 8 et des compositions selon l'une quelconque des revendications 9 à 13 à l'usage pharmaceutique, cosmétologique ou alimentaire.