FR 2636066 A1 19900309 FR 8811528 A 19880902 DERIVES DE CYCLOPEPTIDES, UTILISABLES COMME INHIBITEURS SELECTIFS, VIS-A-VIS DE PROTEASES A SERINE ACTIVE DESCRIPTION La présente invention a pour objet de nouveaux dérivés de cyclopeptides, utilisables comme inhibiteurs de protéases. - ElLe s'applique en particulier aux protéases à sérine ou à cystéine active telles que les facteurs IXa, Xa, XIa, XIIa et VIIa de coagulation du sang, la thrombine, la kallikréine du plasma, la protéine C activée, les facteurs C1r, C1s, D et B d'activation en complément, la C3 convertase, la trypsine, la chymotrypsine, l'élastase, l'entérokinase, la plasmine, les activateurs du plasminogène (urokinase, tpA), l'acrosine, la cathepsine G, les chymases, les tryptases et les protéases dépendantes de l'ATP. De façon plus précise; elle concerne de nouveaux dérivés de cyclopeptides susceptibles d'agir sélectivement comme inhibiteurs vis-à-vis d'une protéase donnée. On sait que les protéases à sérine ou à cystéine active sont impliquées dans de très nombreux processus physiologiques. Des états pathologiques peuvent s'instaurer lorsqu'il y a déséquilibre entre une protéase et ses inhibiteurs macromoléculaires naturels. Pour pallier ce déséquilibre, des inhibiteurs synthétiques pourraient être utilisés et auraient de ce fait un grand intérêt en thérapeutique, par exemple dans les pathologies suivantes: - emphysème pulmonaire, arthrite rhumatoide, inflammation et vieillissement cutané o la protéase active est l'éLastase leucocytaire, la cathepsine G intervient également; - invasion tumorale et processus métastasique lié à la présence de protéases telles que les activateurs du plasminogène ou la plasmine; - action antithrombotique et prévention des infarctus cérébraux et coronaires o la protéase responsable est la thrombine; - contrôle de la thrombolyse et de la fertilité qui concernent les activateurs du plasminogène et la plasmine; et - lutte antivirale et lutte antiparasitaire car certains virus produisent des protéases à cystéine active. Aussi, depuis quelques années, de nombreuses recherches ont été effectuées pour - synthétiser des inhibiteurs irréversibles des protéases. Parmi ceux-ci, on connaît en particulier des inhibiteurs synthétiques qui sont des dérivés de coumarines comme la 3,4-dihydro- 3,4-dibromo-6 bromométhylcoumarine qui est un inactivateur irréversible très efficace vis-à-vis des protéases à sérine et à cystéine, mais qui est malheureusement dépourvue de sélectivité. Ces dérivés de coumarine sont en particulier décrits dans le livre "Proteinase inhibitors" de A. J. Barrett et G. Salvesen, Elsevier, 1986, p. 119-121. Aussi, il serait d'un grand intérêt de synthétiser d'autres inhibiteurs des protéases qui soient spécifiques d'une protéase donnée et permettent d'inactiver celle-ci sans agir sur les protéases analogues. La présente invention a précisément pour objet un nouveau dérivé de cyclopeptide qui permet d'atteindre ce résultat. Selon l'invention, le dérivé de cyclopeptide répond à la formule: R1H2C Z - Q0 l2cI) R2 R3-C-AA Il o0 dans laquelle: - R1 est choisi parmi les atomes de fluor, de chlore, de brome et d'iode, et les radicaux 0S02R4, OP(O)R42, OC(O)R4 et S+R42 avec R4 représentant un radical alkyle, perfluoroalkyle ou aryle; - R2 est un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un atome d'halogène, N02, COOR5, CF3, CN ou S02R5 avec R5 représentant un radical alkyle ou un radical aryle; - R3 représente un atome d'oxygène, un atome de soufre ou - NH-; Z comprend une séquence peptidique Z1 d'aminoacides ou d'analogues identiques ou différents et un groupement choisi parmi -(CH2)n, -O(CH2)nou CO- à son extrémité liée au noyau aromatique avec n étant un nombre entier de 1 à 8; - -PC- est un radical dérivé d'un aminoacide ou d'un I 0 analogue d'aminoacide de formule: -NH-R6-CO- R7 2636066- dans laquelle: R6 représente -N- ou -CH-, et R7 représente un radical choisi parmi H, -CH3, -CH2CH(CH3)2; -CH CH3, -CH2-CO-NH2, CH2-CH3 - CH2-CH2-COOH, -CH2-CH2-CO-NH2-, (CH2)4-NH2, -CH20H, -CH2-SH - COOH -CH2-S-S-CH2-CH, -CH2-C6H5, NH2 -CH2-C6H40H, -(CH2)3NHC(=NH)-NH2, -CH2-COOH, -CHOH-CH3 CH NH N CH2-C=CH, (CH2)SCH3, 0 -CH2-C et -CH(CH3)2 CH \NH ou de formule: R8-CO- -N À RR9 dans laquelle R8 représente N ou CH et R9 représente le radical -(CH2)3- ou -CH2-CHOH-CH2. Dans cette formule les radicaux aLkyle utilisés ont généralement de I à 5 atomes de carbone et peuvent être linéaires ou ramifiés. Les radicaux aryle peuvent avoir de 6 à 14 atomes de carbone. A titre d'exemples de tels radicaux, on peut citer Les radicaux méthyle, éthyle, phényle, naphtyLe. Dans le dérivé de cyclopeptide de l'invention, le groupe CH2R1 permet d'inactiver la protéase et le choix de la séquence peptidique Z1 ainsi que de l'acide aminé C(O)-AA permet de conférer à l'ensemble la sélectivité voulue vis-à-vis d'une protéase donnée. De préférence, la séquence peptidique Z1 comprend de 2 à 8 aminoacides ou analogues d'aminoacides, identiques ou différents. Dans la plupart des cas, on peut utiliser des aminoacides identiques, en particulier la glycine. De préférence, dans l'invention, R3 est en position ortho ou méta par rapport à Z et en position ortho ou para par rapport à R1H2C. Cette disposition permet en effet d'obtenir les meilleurs résultats en ce qui concerne la capacité du groupe CH2R1 d'inactiver la protéase, et la capacité de la chaîne cyclopeptidique de s'adapter sélectivement à la protéase à inactiver. Le mécanisme d'inactivation correspond tout d'abord à une coupure du cyclopeptide entre R3 et l'acide aminé C(O)-AA, ce qui permet une fixation du cyclopeptide sur la sérine active de la protéase par le groupe C(O)-AA en formant ainsi un acylenzyme. Cette coupure du cyclopeptide confère à R1 une mobilité accrue par formation d'un dérivé intermédiaire du type méthylène quinonimine lorsque R3 représente NH, qui se transforme ensuite en méthylène aniline avec fixation sur un résidu d'aminoacide du site actif de l'enzyme par le groupement méthylène, ce qui assure ainsi une inactivation de L'enzyme. De préférence, R1 est CL, Br ou 0S02R4. Dans le cyclopeptide de l'invention, Z et AAC(O) sont choisis en fonction de la protéase à inactiver. -AA-C(O)- est dérivé d'un acide aminé qui correspond à la spécificité primaire de la classe de protéases visées. Dans le cas o l'on veut inactiver une protéase du type chymotrypsine, AA-C(O)- est de préférence dérivé de la phénylalanine, de la tyrosine, du tryptophane ou de la méthionine, et correspond à la formule: -NH-R6-CO- R7 dans laquelle R6 est CH, et R7 est CH2-C6H5, CH2-C6H4OH, -CH2-1 Z ou (CH2)2SCH3 2 5 CH/ N H Dans le cas o la protéase à inhiber appartient au genre trypsine, AA-C(O)- est de préférence dérivé de la lysine ou de l'arginine et répond à la formule: -NH-R6-CO- R7 dans laquelle R6 est CH, et R7 est -(CH2)4NH2 ou -CH2)3NH-C(=NH)-NH2. Lorsque la protéase à inactiver appartient au genre éLastase, -AA-C(O)est de préférence dérivé de l'alanine ou de la valine et répond à la formule: -NH-R6-CO- R7 dans laquelle R6 est CH et R7 est -CH3 ou -CH(CH3)2. Selon l'invention, la chaîne covalente Z est choisie également en fonction de la protéase à inactiver. Cette chaîne tient compte de l'affinité présentée par les sous-sites de fixation des substrats naturels de la protéase à inactiver. Les protéases ont en effet des centres actifs étendus et l'on peut augmenter l'efficacité et la spécificité de l'inhibiteur en choisissant une chaÂne covalente Z remplissant les conditions de spécificité des sous-sites de fixation. Dans le cas o la protéase est du genre trypsine, chymotrypsine ou élastase, on peut remplir cette condition de spécificité avec Z répondant à la formule: -C (O)-(NH-CH2-CO)m- dans laquelle m = 4, 5 ou 6. Dans Le cyclopeptide de l'invention, le noyau benzénique qui fait partie du cyclopeptide peut comporter de plus un substituant R2 qui ne modifie pas le mécanisme d'inactivation de la protéase par le groupement CH2. Ce substituant R2 peut être un atome d'hydrogène, un atome d'halogène ou différents radicaux comme on l'a vu précédemment. La présente invention a également pour objet des compositions pharmaceutiques ayant la propriété d'inhiber une protéase donnée, qui comprennent une quantité pharmaceutiquement acceptable d'un dérivé de cyclopeptide conforme à l'invention. Les dérivés de cyclopeptides de l'invention peuvent être préparés par des procédés classiques. Ainsi, on peut préparer les dérivés de cyclopeptides dans lesquels R3 représente NH à partir d'un dérivé de formule (II): C6H50-CH2 C-CO/OCl o C(II) R29 \N02 R2 en réalisant les étapes successives suivantes. a) Réaction du composé de formule (II) avec HZ1OC2H5 pour obtenir le composé de formule (III): C6H50-CH2 COZ1OC2H5 X III) R2 02 b) Réaction du composé de formule (III) avec l'hydrogène pour obtenir le composé de formule (IV): C6H5OCH2W (IV) C6H50CH2 cOZl0C2H5 R2 vNH2 + Boc-NH-R6-COOH iO 7 R7 c) Réaction du composé de formule (IV) avec l'aminoacide protégé correspondant à AA-C(0) qui répond par exemple à la formule: Boc-NH-R6COOH R7 dans laquelle Boc représente le groupement protecteur tertiobutyloxycarbonyle. Cette réaction peut être effectuée en utilisant la dicyclohexylcarbodiimide (DCC) et elle conduit au composé suivant de formule (V): C6H50CH2 COZ10OC2H5 IO I(V) R2! NH-C-_R6NHBoc 0 R 1.0 d) Réaction du composé de formule V avec l'hydrate d'hydrazine dans un solvant tel que le méthanol, pour obtenir le composé de formule (VI): C6H50CH2 COZ1NH-NH2 (VI) R NH-C-R6-NH-Boc U I 0 R7 e) Réaction du composé de formule (VI) avec l'acide trifluoroacétique pour obtenir le composé de formule (VII) C6H50CH2 COZ1NH-NH2 (VII) R2 NH-C-R6-NH3+ 0 1 0 R7 f) Réaction du composé de formule (VII) avec l'acide nitreux ou un nitrite d'alkyle pour obtenir le composé de formule (VIII) C6H50CH2 COZIN3 (VIII) R2 NH-C-R6-NH3+ 1 I O R7 263'6066 g) Réaction du composé de formule (VIII) avec une amine tertiaire, telle que la diisopropyléthylamine pour obtenir le dérivé de cyclopeptide de formule (IX): C6H50CH2 COZ1 (IX) R2 NH-C-R6-N 0 R7 A partir du composé de formule (IX), on peut obtenir le composé de formule (I) par réaction avec des réactifs appropriés choisis en fonction de la nature du groupe R1 utilisé. Dans le cas o R1 est Br, on fait réagir le composé de formule (IX) avec de l'acide bromhydrique et de l'acide acétique ce qui permet d'obtenir le composé de formule (X): BrCH cOZ1 CX) R2 NH-C-R6-NH R7 Dans Le cas o l'on veut obtenir un dérivé de cyclopeptide de formule (I) avec R1 représentant le chlore, on fait réagir le dérivé bromé de formule (X) avec de l'acétate de sodium dans du diméthylformamide (DMF), ce qui conduit au dérivé de formule (XI): o CH3-CO-CH2 COZ1 (XI) R2 NH-C-R6-NH 0 R7 que l'on transforme ensuite en dérivé de formule (XII) par réaction avec du méthanol et de la triéthylamine: 1 5 HOCH2 COZ1 (XII) R2 H-C-R6-NH ô La 0 R7 En faisant réagir ensuite le dérivé de formule (XII) avec du chlorure de thionyle, on obtient le dérivé chloré de formule (XIII): CLCH2 COZ1 (XIII) NH-C-R6-NH a7 Lorsqu'on veut obtenir le dérivé de cyclopeptide de formule (I) dans laquelle R1 représente 0S02R4, on fait réagir le dérivé bromé de formule (X) avec le sel d'argent de l'acide sulfonique R4.S03H, ce qui penmet d'obtenir le dérivé de formule (XIV): R4S02-0-CH2 COZ 1- O | 0 l (XIV) R2 NH-C-R6-NH De la même façon un sel d'argent d'un acide phosphinique conduit aux dérivés dans lesquels R1 = OP(O)R42 (formule I). L'action d'un dialkyle sulfuré sur le dérivé bromé donne le sel de sulfonium correspondant (I; R1 = S+R42). Le produit de départ de formule (II) peut être obtenu à partir de l'acide nitrobenzoique méthylé correspondant, après estérification de la fonction acide, par réaction avec du N-bromosuccinimide pour former le dérivé de formule (XV): R2 CH2Br ki30[c(XV) 02N COOCH3 que l'on fait réagir avec un phénolate de sodium puis avec de la potasse puis avec du SOCl2 en présence de diméthylformamide pour former le composé de formule (II), selon le schéma réactionnel suivant: R2 CH2Br R2 CH2OC6H5 X C6H50H + NaOH o 2 OOCH 3 02N COOCH3 02N COOCH3 R2 CH20C6H5 R2 CH2OC6H5 KOH SOC L2 CH30H DMF 02N COOH 02N COCl L'invention sera mieux comprise à la lecture des exemples suivants donnés bien entendu à titre illustratif et non limitatif. Exemple 1 Préparation du dérivé de cyclopeptide de formule: BrCH2 CO-Gly4 |O t(XVI) HN-CO-CH-NH- (CH2)4 NH2, HBr Cette formule correspond a. un dérivé de cyclopeptide de formule (I) dans laquelle R1 représente le brome, R2 représente un atome d'hydrogène, Z représente CO(Gly)4, R4 représente NH et C(O)-AA est dérivé de la lysine. 1 ) Préparation du composé de formule (II) avec R2 = H: COCl en méta par rapport à NO2 et CH50CH2 en para par rapport à NO2. COOH COOCH3 CH3 CH3 CH3COCL MeOH reflux ' NO2 -NO2 COOCH3 BrCH2 NBS CCl4 reflux -NO2 COOCH3 C6H50CH2e C6H50H NaOH Aliquat N02 H20/CH2Cl2 COOH KOH aqueux MeOH NO2 COCL C6H50C H2 S (II) DMF cat. NO2 11,7 g (63,6 mmoLes) d'acide nitro-3- méthyl-6-benzoique sont estérifiés en ester méthylique correspondant par un excès de chlorure d'acétyle dans le méthanol au reflux. L'ester obtenu est dissous dans 150 ml de CCl4 et traité par 12,5 g (70 mmoles) de N-bromo- succinimide (NBS) et 0,11 g de peroxyde de benzoyle, au reflux pendant 24 heures. Le mélange réactionnel est filtré sur fritté, et le filtrat est évaporé à sec sous pression réduite. Le produit brut obtenu de formule (BrCH2)(NO2) C6H3-COOCH3 est traité directement, sans purification préalable, par 12 g (127 mmoles) de phénol et 2,50 g (6,2 mmoles) d'aliquat (chlorure de tricaprylméthylammonium) dans 250 ml de CH2Cl2, auxquels on ajoute 5,08 g (127 mmoles) de soude en pastilles dissous dans 3 250 ml d'eau. Le mélange réactionnel est agité vigoureusement à température ambiante pendant 5 heures. La phase organique est alors séparée, Lavée avec 400 ml d'eau, séchée sur MgS04, filtrée, concentrée à environ 150 ml, et chromatographiée sur une colonne de silice (Kieselgel 60; Merck) en éluant avec du chlorure de méthylène (CH2Cl2). On recueille une fraction d'environ 600 ml qui est évaporée à sec. Le résidu obtenu est dissous dans 150 ml de CH2Cl2. On ajoute environ 200 ml de méthanol et on porte au reflux. Une cristallisation est observée dans la solution bouillante une fois que tout le CH2CL2 est évaporé. Le mélange est encore concentré jusqu'à 150 ml puis laissé à température ambiante pendant une nuit. Les cristaux blancs sont filtrés sur B chner, abondamment rincés au méthanol et séchés à l'air. On obtient ainsi 11,1 g de cristaux correspondant au dérivé (C6H50CH2) (N02) C6H3-COOCH3. Le rendement est de 60 % par rapport à l'acide de départ (CH3)(N02) C6H3-COOH. Point de fusion: 114 C. Spectre1H RMN (CDCl3/TMS): 8,93, d (J = 2 Hz), 1H (ArH1); 8,45, dd (J = 2 Hz et 8 Hz); 1H (ArH2); 8,07, d (J = 8 Hz), 1H (ArH3); 6,8 à 7,5, m, 5H (C6H50); 5,58, s, 2H (ArCH20); 4,00, s, 3H (COOCH3). Analyse élémentaire C H N Calculé pour C15H13NO5 62,71 4,56 4,88 Trouvé 62,92 4,31 4,98 On saponifie 3,59 g (12,5 mmoles) d'ester précédent par 25 ml de KOH aqueux 4N (100 mmoles) dans 100 mL de méthanol. Le mélange est agité à température ambiante pendant 4 heures. On ajoute ml d'eau et on évapore le méthanol à 35 C sous pression réduite. La solution aqueuse est extraite avec 100 ml de CH2Cl2, puis acidifiée par un excès d'acide chlorhydrique concentré. Le précipité résultant est dissous dans 400 ml de CH2CL2. La phase organique est séparée, lavée avec 200 ml d'eau, séchée sur MgSO4,filtrée et évaporée à sec, conduisant à 2,79 g d'acide de formule (C6H50CH2) (N02) C6H3-COOH obtenu sous forme de cristaux jaune pale. Le rendement est de 82 %. Point de fusion: C. Spectre1H RMN (acétone d6): 8,93, d (J = 2 Hz), 1H (ArH1); 8,55, dd (J = 2 Hz et 8 Hz), 1H (ArH2); 8,15, d (J = 8 Hz), 1H (ArH3); 6,8 à 7,7, m, 5H (C6H50-); 5,71, s, 2H (ArCH20). Analyse élémentaire C H N Calculé pour C14H11N05 61,54 4,06 5,12 Trouvé 61,98 3,84 5,12 On traite 2,79 g (10,2 mmoles) d'acide précédent par 50 ml de SOCL2 et 10 gouttes de diméthylformamide (DMF). La solution limpide obtenue est agitée 2 heures à température ambiante puis évaporée à sec sous pression réduite à 40 C. Le résidu obtenu correspond au chlorure d'acide de formule (II): (C6H50CH2)(N02) C6H3-CO-Cl et est utilisé directement, sans purification, dans l'étape suivante (2 ). 2 ) Préparation du composé de formule (XVII): CO-Gly4-OC2H5 C6H50C NO X (XVII) N02 3,57 g (10 mmoles) de composé H-Gly4-OC2H5, HBr et 50 ml de DMF sont agités et refroidis à 0 C. 3 ml (21 mmoles) de triéthylamine sont ajoutés. Le mélange est agité pendant 10 minutes, puis une solution de 10,2 mmoles de chlorure d'acide (II) avec R2 = H, COCl en méta par rapport à NO2 et C6H50-CH2 en para par rapport à NO2, obtenu précédemment (1 ), dans 40 ml de DMF, est additionnée goutte à goutte en environ 0,5 heure, à 0 C. Après addition, l'agitation est poursuivie à température ambiante pendant 1 nuit. Le mélange est évaporé à sec à 50 C sous pression réduite. Le résidu obtenu est trituré dans 200 ml d'eau et le précipité résultant filtré sur B chner, lavé successivement avec 200 ml H20, 200 ml HCl 0,5 N, 100 ml H20, 200 ml NaHCO3 5 %, 200 ml H20, séché à l'air puis trituré dans 50 ml de méthanol, filtré sur B chner, rincé au méthanol puis à l'éther et séché à l'air, conduisant à 3,83 g (rendement 72 %) de composé (XVII) dont le point de fusion est de 197-200 C et qui est utilisé tel quel dans l'étape suivante (3 ). Un échantillon analytique est préparé à partir de 52 mg d'échantillon précédent, dissous dans 1 ml de DMF, par cristallisation après addition de méthanol aqueux. On obtient 34 mg de cristaux dont le point de fusion est 199-2030C. L'analyse par RMN1H donne les résultats suivants. (DMSO-d6): 9,09, t (J = 5,6 Hz), 1H (NH Gly); 8, 42, d (J = 2 Hz), 1H (ArH); 8,36, dd (J = 2 Hz et 8,6 Hz), 1H (Ar Hz); 8, 34, t (masqué), 1H (NH Gly); 8,28, t (J 5,8 Hz), 1H (NH Gly); 8,23, t (J = 5,8 Hz), 1H (NH Gly); 7,88, d (J = 8,6 Hz), 1H (ArH3); 7,3, m, 2H (C6H50-); 7,0, m, 3H (C6H5-0-); 5,39, s, 2H (C6H50-CH2Ar); 4,06, q (J = 7, 1 Hz), 2H (0-CH2CH3); 3,96, d (J = 5,5 Hz), 2H (CH2Gly); 3,81, d (J = 5,5 Hz), 4H (2CH2Gly); 3,75, d (J = ,6 Hz), ZH (CH2Gly); 1,17, t (J = 7,1 Hz), 3H (OCH2CH3). Analyse élémentaire C H N Calculé pour C24H27N509, 0,5 H20 53,52 5,24 13, 00 Trouvé 53,48 5,09 12,50 3 ) Préparation du composé de formule (XIX) avec la Lysine dont le groupement aNH2 est protégé par un groupement terbutyloxycarbonyle Boc et dont le groupement eNH? est protégé par un groupement benzyloxycarbonyle CBZ. CO-Gly4-OCH2CH3 C6H50CH O| 0 | t(XIX) \NH-C0-CH-NHBoc (CH2)4 NH-CBZ (Suite formule: voir * ci-après). *(Boc = (CH3)3C-O-CO-), (CBZ = C6H5-CH2-O-CO-). On dissout tout d'abord 1,06 g (2 mmoles) du peptide de formule (XVII) dans 25 ml de DMF à chaud. On additionne 75 ml de méthanol puis 150 mg (0, 7 mmole) de PtO2. On hydrogène le mélange pendant 2 heures à température ambiante, sous environ 3 atmosphères, dans un appareil de Parr. On filtre le catalyseur et on évapore les solvants sous pression réduite. On obtient ainsi le composé de formule (XVIII): - CO-Gly4-OCH2CH3 C6H50CH2 o t (XVIII) NH2 dont L'analyse chromatographique donne un RF de 0,46 (support: silice, éluant CH2CL2 85 % - MeOH %). La présence d'une fonction amine aromatique se traduit par une absorption ultraviolette fluorescente (à 366 nm) de la tache chromatographique. Ce composé est peu stable en solution et est donc utilisé immédiatement après sa préparation, sans autre purification, pour la synthèse du composé (XIX). Ainsi, on dissout L'amine aromatique de formule (XVIII) précédemment obtenue dans I ml de DMF, on ajoute 25 ml de CH2Cl2 et on refroidit la solution à -5 C. On ajoute alors 0,912 g (2,4 mmoles) de N a-Boc-N E-CBZL-lysine, puis 0,495 g (2,4 mmoles) de dicyclohexylcarbodiimide (DCC) dans 25 ml de CH2Cl2. Le mélange est agité à -5 C pendant 2 heures puis à température ambiante pendant la nuit. On filtre alors le précipité de dicyclohexylurée formé, et on évapore les solvants. Le résidu est dissout dans 400 ml d'acétate d'éthyle et la phase organique est extraite successivement avec 200 ml NaHCO3 5 %, 200 ml H20, 200 ml HCL 0,5 N, 200 ml H20, puis séchée sur MgS04, filtrée et évaporée à sec. Le peptide obtenu est purifié sur colonne de silice (Kieselgel 60) en utilisant comme éluant un mélange méthanol/CH2CL2 dans les proportions 10 %/90 %. On obtient ainsi le dérivé de formule (XIX) avec un rendement de 71 %. L'analyse chromatographique sur silice donne un RF de 0,70 (éluant: méthanol 15 % - CH2Cl2 85 %) ou de 0,29 (éluant:méthanol 10 % - CH2Cl2 90 %). Le point de fusion est de 72 à 76 0C. Le pouvoir rotatoire est [a] 25C = 9,1 546nm=-91 (C 0,5; MeOH). L'analyse par RMN1H donne les résultats suivants: (CD30D): 8,07, s, 1H (ArH1); 7,81, d (J = 8,3 Hz), 1H (ArH2); 7,71, d (J = 8,3 Hz), 1H (ArH3); 7,51, m, 5H (ArH de CBZ); 7,44, m, 2H (C6H50-); 7,13, m, 3H (C6H50-); 5, 42, s, 2H (C6H50-CH2-Ar); 5,23, s, 2H (CH2 de CBZ); 4,35, m, 1H (CH o. Lys); 4,29, q (J = 7,1 Hz), 2H (CH2 de OEt); 4,24, s, 2H (CH2GLy); 4,09, s, 2H (CH2GLy); 4,08, s, 2H (CH2GLy); 4,07, s, 2H (CH2GLy); 3,31, m, 2H (CH2 E Lys); 1,91, m, 2H (CH2 A Lys); 1,70, m, 4H (CH2j et CH2 È de Lys); 1,63, s, 9H (3CH3 de Boc); 1,40, t (J = 7,1 Hz), 3H (CH3 de OEt). Analyse élémentaire C H N Calculé pour C43H55N7012 59,92 6,43 11,38 Trouvé 59,77 6,55 11,21 4 ) Préparation du dérivé de formule (XX): COGly4-OCH2CH3 C6 50 t (XX) NH-CO-îH-NH-Boc (CH2)4 NH-CBZ On agite 3,2 g (-3,7 mmoles) de l'ester de formule (XIX) en solution dans 150 ml de méthanol, en présence de 5,25 ml (108 mmoles) d'hydrate d'hydrazine H2NNH2, H20, à température ambiante pendant 12 heures. On évapore la solution sous pression réduite à 40 C. On reprend plusieurs fois le résidu au méthanol et on évapore à sec jusqu'à ce que l'hydrazine ait été totalement entraînée. Le résidu solide est trituré dans l'éther, et le surnageant écarté. Apres séchage, on obtient 3,109 g de dérivé (XX) sous forme de poudre blanche. Le rendement est de 98 %. Le point de fusion est de à 110 C. L'analyse chromatographique sur support de silice donne un RF de 0,46 (étuant méthanol % - CH2Cl2 80 %). 250C Le pouvoir rotatoire est [a] 546C = 8,4 (C 0,6; MeOH). L'analyse par RMN1H donne les résultats suivants:(CD30D/TMS): 7,88, d (J = 1,8 Hz), 1H (ArH1); 7,62, dd (J = 1,8 Hz et 8,4 Hz), 1H (ArH2); 7,53, d (J = 8,4 Hz), 1H (ArH3); 7,30, m, 5H (ArH de CBZ); 7,24, m, 2H (C6H50-); 6,94, m, 3H (C6H50-)); 5,22, s, 2H (C6H50CH2Ar); 5,04, s, 2H (CH2 de CBZ); 4,15, m, 1H (CH e de Lys); 4,06, s, 2H (CH2 de GLy); 3,88, s, 2H (CH2 de Gly); 3,87, s, 2H (CH2 de Gly); 3,84, s, 2H (CH2 de Gly); 3,12, m, 2H (CH2 E de Lys); 1,75, m, 2H (CH2 1 de Lys); 1,51, m, 4H (CH2 Y et CH2 *de Lys); 1,43, s, 9H (3CH3 de Boc). Analyse élémentaire C H N Calculé pour C41H53N9011, 0,5H20 57,46 6,35 14, 71 Trouvé 57,36 6,37 14,46 ) Préparation du dérivé de formule (XXI): COGLy4- NH-NH2, HCl C6H5CH 0 (XXI) NH-CO-CH-NH2, HCL I (CH2)4 NH-CBZ On dissout 3,109 g (3,7 mmoles) du composé de formule (XX) dans 80 mL d'acide acétique glacial, et on ajoute 20 ml d'une solution 2M d'acide chlorhydrique dans l'acide acétique. Après J heure d'agitation, on ajoute 150 ml d'éther éthylique. Le précipité est laissé décanter et le surnageant écarté. Le résidu est rincé trois fois à l'éther éthylique, le surnageant étant à chaque fois écarté après décantation. Le précipité résiduel est dissous dans 100 mL de méthanol et la solution évaporée à sec sous pression réduite à 40 C. Cette opération est répétée une deuxième fois. Le résidu est trituré dans l'éther éthylique jusqu'à obtention d'une poudre blanche homogène. L'éther surnageant est éliminé et le solide résiduel séché sous vide. On obtient ainsi 2,947 g du dérivé de formule (XXI) sous forme de poudre blanche. Le rendement est de 98 % et le point de fusion est de 84 - 88 C (décomposition) l'analyse chromatographique sur support de silice donne un RF de 0,07 (éluant:MeOH 20 % - CH2Cl2 80 %) ou de 0,62 (éluant acétate d'éthyle/n-butanol/acide acétique/eau en proportion 1/1/1/1). 2501C Le pouvoir rotatoire est [a] 546 = +23,0 (C 0,5; MeOH). L'analyse par RMN1H donne les résultats suivants: (CD30D/TMS): 7,93, d (J = 2,1 Hz), 1H (ArH1); 7,71, dd (J = 2,1 Hz et 8,4 Hz) 1H (ArH2); 7,56, d (J = 8,4 Hz), 1H (ArH3); 7,31, m, 5H (ArH de CBZ); 7,25, m, 2H (C6H50-); 6,94, m, 3H (C6H50-); 5,24, s, 2H (C6H50-CH2-Ar); 5,01, s, 2H (CH2 de CBZ) ; 4,07, s, 2H (CH2 de Gly); 4,03, m, 1H (CH a de Lys); 3,95, s, 2H (CH2 de Gly); 3,91, s, 2H (CH2 de Gly); 3,89, s, 2H (CH2 de Gly); 3,14, m, 2H (CH2 E de Lys); 1,97, m, 2H (CH2 3 de Lys); 1,53, m, 4H (CH2 'Y et CH2 È de Lys). 6 ) Préparation du cyclopeptide de formule (XXII): CO-GLy4 C6H50CH2 | O|. (XX I) /\H H-C O-C H-NH- (CH2)4 NH-CBZ 1 0 On porte une solution de 0,820 g (1 mmole) du composé de formule (XXI) dans 20 ml de DMF à environ -30 à -40 C. On acidifie ensuite par addition de 1,45 ml (8 mmoles) d'une solution d'acide chlorhydrique 5,5 M dans le THF. On ajoute 0,200 ml (1,5 mmole) de nitrite dtisoamyle. La solution est agitée à -35 C environ pendant 30 minutes, puis diluée par addition de 200 ml de DMF froid. La solution est ensuite alcalinisée jusqu'à un pH de 8-9 par addition de 2,1 cm3 (12 mmoles) de diisopropyléthylamine, agitée à -35 C pendant 10 minutes, puis laissée au repos dans un réfrigérateur (+4 C) pendant 24 heures. On répète ces opérations plusieurs fois pour traiter au total 3,13 g (3, 82 mmoles) de composé de formule (XXI). On réunit alors les mélanges réactionnels, on ajoute 200 ml d'une solution aqueuse de K2C03 à 5 X. On concentre à environ 150 ml, sous pression réduite à 40 C, afin d'éliminer la diisopropyléthylamine, l'eau et une partie du DMF. Le mélange est alors filtré sur fritté pour éliminer les sels minéraux insolubles, et le filtrat est évaporé à sec sous pression réduite à 40 C. Le résidu est une huile qui cristallise. Par addition de 50 ml de méthanol, on obtient des cristaux blancs qui sont filtrés sur B chner, rincés au méthanol et séchés (poids obtenu: 1,798 g). Le filtrat est évaporé à sec et le résidu chromatographié sur colonne de silice (Kieselgel 60) avec pour éluant une solution de méthanol/CH2Cl2 dans laproportion 15 %/85 %. Les fractions contenant le produit sont réunies, et les solvants sont évaporés. Le résidu est cristallisé dans du méthanol comme précédemment. On obtient ainsi 0,076 g de cristaux soit au total 1,874 g de cyclopeptide de formule (XXII). Le rendement est de 68 % et le point de fusion est de 270-280 C (décomposition). L'analyse chromatographique sur support de silice donne un RF de 0,55 (éluant: MeOH 20 % - CH2Cl2 80 %) ou de 0,78 (éluant: EtOAc: 1/nBuOH: 1/AcOH: 1/H20: 1). La tache correspondante est négative à la ninhydrine. %C Le pouvoir rotatoire est[a]5465 = 40,6 (C 0,5; DMF). L'analyse par RMN1H donne les résultats suivants: (DMSO d6): 9,03, s, 1H (ArNHCO); 8,89, t (J = 5,7 Hz), 1H (NH Gly); 8,75, t (J = 4,7 Hz), 1H (NH Gly); 8,58, d (J = 7,4 Hz), 1H (NH Lys); 8,20, dd (J = 1,6 Hz et 8,4 Hz), 1H (ArH2); 8,16, t (J = 6,0 Hz), 1H (NH 6ly); 7,75, t (J = 5,6 Hz), 1H (NH Gly); 7,71, D (J = 2,0 Hz), 1H (ArH1); 7,50, d (J = 8,5 Hz), 1H (ArH3) ; 7,34, m, 5H (ArH de CBZ); 7,29, m, 2H (C6H50-); 6,94, m, 3H (C6H50); 5, 21, s, 2H (C6H50CH2-Ar); 5,00, s, 2H (CH2 de CBZ); 4,20, m, 1H (CH a de Lys); 4,10 à 3,60, m, 8H (4CH2 de Gly); 3,00, m, 2H (CH2 E de Lys); 1,93, m, 1H et 1,67, m, 1H (CH2 a de Lys); 1,41, m, 4H (CH2 'Y et CH2 & de Lys). Analyse élémentaire C H N Calculé pour C36H41N709 60,41 5,77 13,70 Trouvé 60,40 5,70 13,43 ) Préparation du cyclopeptide de formule (XVI): Un mélange de 0,145 g (0,2 mmole) du cyclopeptide de formule (XXII) et de 20, 4 ml d'acide acétique est chauffé jusqu'à obtention d'une solution limpide, puis refroidi à température ambiante. On ajoute 3,6 cm3 d'une solution de HBr à 33 % dans l'acide acétique. Le mélange est agité à température ambiante pendant 1 heure. On ajoute alors 25 cm3 d'éther éthylique, ce qui entraîne la précipitation du cyclopeptide bromé. Apres décantation, le surnageant est écarté. Le précipité est agité dans l'éther puis centrifugé, le surnageant étant alors écarté. Cette opération est reproduite de nombreuses fois afin de bien éliminer les acides du milieu. Le précipité est alors séché sous vide. On obtient 0,131 g du cyclopeptide de formule (XVI) sous forme de poudre blanche. Le rendement est de 99 % et le point de fusion est de 190-200 C (décomposition). L'analyse chromatographique sur support de silice donne un RF de 0,43 (éluant: EtOAc: 1/nBuOH: 1/AcOH: 1/H20: 1). La tache est négative à la ninhydrine. Le pouvoir rotatoire est [a]5245C = 35,50 (C 0,2; MeOH). L'analyse par RMN1H donne les résultats suivants: (CD30D): 8,27, dd (J = 2,2 Hz et 8,4 Hz), 1H (ArH2); 7,93, d (J = 2,2 Hz), 1H (ArH1); 7,66, d (J = 8,4 Hz), 1H (ArH3); 5,03, d (J = ,1 Hz) et 4,98, d (J = 8,1 Hz), 2H (BrCH2Ar); 4,59, dd (J = 4,4 Hz et 9,7 Hz), 1H (CH a de Lys); 4,38, d (J = 16,9 Hz) et 4,13, d (J = 16,9 Hz), 2H (CH2 de GLy); 4,30, s, 2H (CH2 de Gly); 4,24, d (J = 16,9 Hz) et 4,13, d (J = 16,9 Hz), 2H (CH2 de Gly); 4, 15, d (J = 15,8 -Hz) et 4,01, d (J = ,8 Hz), 2H (CH2 de GLy); 3,15, t (J = 7,5 Hz), 2H (CH2 E de Lys); 2,25, m, 1H et 2,03, m, 1H (CH2 f de Lys); 1,89, m, 2H (CH2 È de Lys); 1,74, m, 2H (CH2 'y de Lys). Analyse élémentaire C H N Calculé pour C22H31N706Br2 40,69 4,81 15,10 Trouvé 40,88 5,01 13,64 Spectre de masse (FAB > O): 568 (MH+ pour 79Br); 570 (MH+ pour 81Br). ExemDle 2 On vérifie les propriétés du dérivé de cyclopeptide de formule (XVI), en particulier sa capacité d'inactiver la trypsine bovine ou l'urokinase humaine en utilisant les méthodes de Kitz et Wilson (pour trypsine et urokinase) et la méthode de Hart et O'Brien (pour trypsine) (1973) publiée dans Biochemistry, 12, 2940-2945. La constante apparente d'inactivation kj/Ki est dans ce cas de: - 53 moll1s-1 pour la trypsine bobine, et - 4,2 mol1s-1 pour l'urokinase humaine. En revanche, ce dérivé de cyclopeptide n'a pas d'action sur la chymotrypsine et L'éLastase car il n'y a aucune hydrolyse du dérivé de cyclopeptide catalysée par la sérine active de ces protéases. Exemple 3 Préparation du dérivé de cyclopeptide de formule (XXIII): CO-Gly4 BrCH (XXIII) NH-CO0-CH-NH- (CH2)3 4H Z5 N( de NH2, HBr Cette formule correspond à un dérivé de cyclopeptide de formule (I) dans laquelle R1 représente le brome, R2 représente un atome d'hydrogène, Z représente CO(Gly)4, R3 représente NH et C(CO)-AA est dérivé de l'arginine. On suit un mode opératoire similaire à celui de l'exemple 1 pour préparer ce dérivé de cyclopeptide sauf que dans la troisième étape, on fait réagir le composé de formule (XVIII) avec l'arginine dont le groupement aNH2 est protégé par un groupement butyloxycarbonyle Boc. On obtient ainsi le cyclopeptide de formule (XXIII). Celui-ci présente les caractéristiques suivantes: RF = 0,52 (support: silice, éluant: EtOAc: 1/nBuOH: 1/AcOH: 1/H20: 1). Point de fusion: 205-215 C (décomposition). C 0 Pouvoir rotatoire: [Q]546 = -210 (C 0,2; MeOH). Analyse par rénonance magnétique nucléaire: (CD30D): 8,25, dd (J = 2,0 Hz et 8,4 Hz), 1H (ArH2); 7,96, d (J = 2,0 Hz), 1 H (ArH1); 7,66, d (J = 8,4 Hz), 1H (ArH3); 5,01, s, 2H (BrCH2Ar); 4,61, dd (J = 4,7 Hz et 9,2 Hz), 1H (CH a de Arg); 3,9 à 4,5, m, 8H (4CH2 de Gly); 3,45, m, 2H (CH2 È de Arg); 2,28, m, 1H et 2,06, m, 1H (CH2 i de Arg); 1,93, m, 2H (CH2 Y de Arg). Spectre de Masse (FAB > O): 596 (MH+ pour 79Br) et 598 (MH+ pour 81Br). Exemple 4 On vérifie les propriétés du dérivé de cyclopeptide de formule (XXIII), en particulier sa capacité d'inactiver la trypsine bovine en utilisant la même méthode que dans l'exemple 2. La constante apparente d'inactivation kj/Ki est de 150 moll1s-1 pour la trypsine bovine. En revanche, ce dérivé de cyclopeptide n'a pas d'action sur la chymotrypsine et L'élastase car il n'y a aucune hydrolyse du dérivé du cyclopeptide de formule (XXIII) avec R1 = H catalysée par ces protéases. Exemple 5 Préparation du dérivé de cyclopeptide de formule (XXIV): CO-GLY4 BrCH2 Q| 0 I(XXIV) HN-CO-CH-NH- i5 CH2 I C6H5 Ce dérivé de cyclopeptide correspond à un dérivé de formule (I) dans laquelle R1 représente le brome, R2 représente un atome d'hydrogène, Z représente CO(Gly)4, R3 représente NH et CO-AA est dérivé de la phénylalanine. Pour préparer ce dérivé de cyclopeptide, on suit un mode opératoire similaire à celui de l'exemple 1, sauf que l'on utilise dans la troisième étape la phénylalanine dont le groupement NH2 est protégé par un groupement butyloxycarbonyle Boc. On obtient ainsi le dérivé de cyclopeptide de formule (XXIV). Ses caractéristiques sont les suivantes: RF = 0,50 (éluant: MeOH 20 % CH2Cl2 X); 0,69 (éluant: EtOAc: 1/nBuOH: 1/AcOH: 1/H20: 1). Analyse par résonance magnétique nucléaire: - (CD30D): 8,15, dd (J = 2,1 Hz et 8,5 Hz), 1H (ArH2); 7,92, d (J = 2,2 H), 1H (ArH1); 7,66, d (J = 8, 5 Hz), 1H (ArH3); 7,47, m, 5H (ArH de Phe); 5,00, s, 2H (BrCH2Ar); 4,86, m, 1H (CH a Phe); 3,7 à 42, m, 8H (4CH2 Gly); 3,59, m, 1H et 3,20, m, 1H (CH2 de Phe); - (CD3COOD): 8,03, d (J = 8,3 Hz), 1H (ArH2); 7,79, s, 1H (ArH1); 7,56, d (J = 8,5 Hz), 1H (ArH3); 7,36, m, 5H (ArH de Phe); 4,93, dd (J = 5 Hz et 10 Hz), 1H (CH a de Phe), 4,86, s, 2H (BrCH2Ar); 4,43, d (J = 16,4 Hz), 1H et 4,35, d (J = 16,4 Hz), 1H (CH2 de Gly); 4,34, d (J = 16,5 Hz), 1H et 4,17, d (J = 16,4 Hz), 1H (CH2 de Gly); 4,27, d (J = 16,6 Hz), 1H et 4,10, d (J = 16,5 Hz), 1H (CH2 de Gly); 4,09, d (J = 16,0 Hz), 1H et 3,92, d (J = 16, 1 Hz), 1H (CH2 de Gly); 3,47, dd (J = 5 Hz et 15 Hz), 1H, et 3,17, dd (J = 10 Hz et 15 Hz), 1H (CH2 de Phe). Point de fusion: 180-200 C (décomposition). Pouvoir rotatoire 25C = -46,7 (C 0,12; DMF). Analyse élémentaire C H N Calculé pour C25H27N606Br, 3,5H20 46,16 5,26 12, 92 Trouvé 46,23 4,71 11,78 Spectre de masse (FAB 588 (M pour 81Br). Exemple 6 On vérifie Les propriétés du dérivé de cyclopeptide de formule (XXIV), en particulier sa capacité d'inactiver la chymotrypsine bovine en utiLisant les mêmes méthodes que dans L'exemple 2. La constante apparente d'inactivation kj/Ki est dans ce cas de 7 mol-l1s-1. En revanche, le dérivé de ce cyclopeptide avec R1 = H n'est pas hydrolysé par la trypsine. Exemple 7 Préparation du dérivé de cyclopeptide de formule (XXV): CO-GLy4 CLCH2 O I (XXV) N-CO-CH-HN- 1I CH2 C6H5 Ce dérivé correspond à un dérivé de cyclopeptide de formule (I) dans laquelle R1 représente Cl, R2 représente un atome d'hydrogène, Z représente CO-Gly4, R3 représente NH et CO-AA est dérivé de la phénylalanine. On part du dérivé de cyclopeptide de formule (XXIV) et on le traite successivement par de l'acétate de sodium dans du diméthylformamide (DMF) puis par la triéthylamine dans du méthanol et enfin par le chlorure de thionyle. Dans ce but, 0,025 g (0,04 mmole) de cyclopeptide de formule (XXIV) sont agités vigoureusement à température ambiante, en présence de 0,300 g (3 mmoles) d'acétate de potassium et 3 ml de DMF. Le mélange est ensuite évaporé à sec sous pression réduite. On additionne 25 ml d'un mélange méthanol/chlorure de méthylène 20: 80, on agite quelques minutes, on filtre et on évapore les solvants. Le résidu est chromatographié sur colonne de silice (KieseLgel 60), un éluant avec un mélange de méthanol (20 %) et de CH2Cl2 (80 %). Les fractions adéquates sont réunies et les solvants évaporés. Le résidu est dissous dans 2 ml de méthanol. L'addition d'éther provoque une précipitation. Le précipité est centrifugé, rincé à l'éther, centrifugé de nouveau, et séché. On obtient ainsi 0,018 g d'acétate correspondant à la formule (XXVI): CO-Gly4 CH3CO-O-CH (XXVI) H-CO-CH-NH CH2 I 2 C6H5 Le composé de formule (XXVI) ainsi obtenu avec un rendement de 75 % possède les caractéristiques suivantes: Point de fusion: 190-210 C (décomposition). RF (silice) = 0,5 (éluant: MeOH 20 % - CH2Cl2 80 %); 0,55 (éluant: EtOAc: 1/nBuOH: 1/AcOH: 1/H20: 1). Analyse par résonance magnétique nucléaire: (CD30D): 8,20, dd (J = 2,1 Hz et 8,4 Hz), 1H (ArH2); 7,93, d (J = 2,2 Hz), 1H (ArH1); 7,64, d (J = 8,4 Hz), 1H (ArH3); 7,47, m, 5H (ArH de Phe); 5,49, d (J = 12,9 Hz) et 5,43, d (J = 12,9 Hz), 2H (AcOCH2Ar); 4,85, dd (J = 4,6 Hz et 10,1 Hz), 1H (CH a de Phe); 4,32, d (J = 16,7 Hz), 1H et 4,09, d (J = 16,9 Hz), 1H (CH2 de Gly); 4,25, s, 2H (CH2 de Gly); 4,24, d (J = 17,1 Hz), 1H et 4,09, d (J = 16,9 Hz), 1H (CH2 de Gly); 4,01, d (J = 15,6 Hz), 1H et 3,82, d (J = 15,7 Hz), 1H (CH2 de Gly); 3,60, dd (J = 4,5 Hz) et 14,0 Hz), 1H et 3,18, dd (J = 10,3 Hz et 14,0 Hz), 1H (CH2 de Phe); 2,25, s, 3H (CH3COO-). Pouvoir rotatoire [a25] C = -36,9 [a546 (C 0,13; DMF). Spectre de masse (FAB 600 (M-H-CH3COOH)-. On dissout 0,066 g (0,12 mmoles) de dérivé de formule (XXVI) dans 18 ml de méthanol, on ajoute 2 ml de triéthylamine et on agite la solution à température ambiante pendant 48 heures. Le mélange est alors évaporé à sec à 40 C sous pression réduite, et le résidu chromatographié sur une colonne de silice (Kieselgel 60) en éluant avec un mélange MeOH: 20 %/CH2Cl2: 80 %. Les fractions adéquates sont réunies et la solution con. entrée à environ 2 ml. L'addition de 15 ml d'éther éthylique provoque une précipitation. Le précipité est centrifugé, trituré dans l'éther et centrifugé de nouveau, puis séché sous vide. On obtient ainsi 0,043 g de dérivé de formule (XXVII). Le rendement est de 70 %. CO-GlY4 HOCH2 j (xxvii) T l (XXVII) \NH-CO-CH-NH- CH2 1 0 C6H5 Le dérivé de formule (XXVII) possède les caractéristiques suivantes: Point de fusion: 200-220 C (décomposition). RF (silice): 0,50 (éLuant: MeOH 20 % - CH2Cl2 80). [0t] 0o1 Pouvoir rotatoire: [a]546 = 80,0 (C 0,2; DMF). Analyse par résonance magnétique nucléaire: (CD30D): 8,23, dd (J = 2,2 Hz et 8,3 Hz), 1H (ArH2); 8,00, d (J = 2,2 Hz), 1H (ArH1); 7,63, d (J = 8,3 HX), 1H (ArH3); 7,49, m, 5H (ArH de Phe); 4,87, s, 2H (OCH2Ar); 4,85, dd partiellement masqué (J = 4,4 Hz et estimé 10,6 Hz), 1H (CH a de Phe); 4, 38, d (J = 16,8 Hz), 1H et 4,11, d (J = 16,8 Hz), 1H (CH2 de Gly); 4,30, d (J = 16,3 Hz), 1H et 4,23, d (J = 16, 3 Hz), 1H (CH2 de Gly); 4,28, d (J = 17,1 Hz), 1H et 4,00, d (J = 17,1 Hz), 1H (CH2 de Gly); 4,03, d (J = 15,4 Hz), 1H et 3,78, d (J = 15,4 Hz), 1H (CH2Gly); 3,65, dd (J = 4,3 Hz et 14,2 Hz), 1H et 3,17, dd (J = 10,6 Hz et 14,2 Hz), 1H (CH2 de Phe). Finalement, on dissout 0,0157 g (0,03 mmole) du dérivé de formule (XXVII) dans 0,5 ml de DMF. La solution est agitée à 0 C, et on y additionne 0,25 ml d'une solution fraîchement préparée et maintenue à 0 C, de 0,17 ml de SOCI2 dans 5 ml de DMF. Le mélange est agité 1 minute à 0 C puis 3 minutes à température ambiante, et aussitôt évaporé à sec sous pression réduite. On répète ces opérations plusieurs fois pour traiter au total 0,0443 g (0, 08 mmole) de dérivé de formule (XXVII). Les résidus obtenus après évaporation des solvants sont réunis. On purifie par chromatographie sur colonne de silice, en éluant avec un mélange MeOH 15 % - CH2Ci2 85 Z. Les fractions adéquates sont réunies et la solution évaporée à sec. Le résidu est dissous dans 2 ml de méthanol et précipité par addition d'éther éthylique. Le précipité est centrifugé, trituré dans l'éther, centrifugé de nouveau et séché sous, vide. On obtient ainsi 0, 0268 g de chlorure de formule (XXV). Le rendement est de 58 %. Le dérivé de formule (XXV) possède les caractéristique suivantes: Point de fusion: 170-230 C (décomposition à l'état solide). RF (silice): 0,67 (éluant: MeOH 20 Z- CH2Cl2 80 %); 0,74 (éluant: EtOAc: 1/nBuOH: 1/AcOH: 1/H20: 1). Pouvoir rotatoire []5546C = -31,8o (C 0,8; MeOH). Analyse par résonance magnétique nucléaire: (CD30D): 8,17, dd (J = 2,1 Hz et 8,4 Hz), 1H (ArH2); 7,94, d (J = 2,1 Hz), 1H (ArH1); 7,68, d (J = 8,4 Hz), 1H (ArH3); 7,48, m, 5H (ArH de Phe); 4,86, dd (J = 4,7 NZ et 10,0 Hz) , 1H (CH a de Phe); 4,83, s, 2H (ClCH2Ar); 4,32, d (J = 17,0 Hz), 1H et 4, 12, d (J = 17,0 Hz), 1H (CH2 de Gly); 4,29, s, 2H (CH2 de Gly); 4,23, d (J = 16,9 Hz), 1H et 4,09, d (J = 16,8 Hz), 1H (CH2 de Gly); 4,01, d (J = 15,8 Hz), 1H et 3,85, d (J = 15,8 Hz), 1H (CH2 de Gly); 3,59, dd (J = 4,7 Hz et 14,0 Hz), 1H et 3,19, dd (J = 10,1 Hz et 14,0 Hz), 1H (CH2 de Phe). Analyse élémentaire C H Calculé pour C25H27N606Cl, 1,5H20 52,68 5,31 Trouvé 52,43 4,69 Spectre de masse (DCI): 542 (M pour 35Cl); 544 (M pour 37Cl). Exemple 8 On vérifie les propriétés du dérivé de cyclopeptide de formule (XXV), en particulier sa capacité d'inactiver la chymotrypsine bovine en utilisant les mêmes méthodes que dans l'exemple 2. La constante apparente d'inactivation kj/Ki est dans ce cas de 2,8 mol-ls-1. En revanche, ce dérivé de cyclopeptide n'a pas d'action sur la trypsine car il n'y a aucune hydrolyse du dérivé de ce cyclopeptide avec R1 = H par la trypsine. Ainsi, les dérivés de cyclopeptides de l'invention sont des inhibiteurs spécifiques de certaines protéases, et ils peuvent être utilisés à titre de substance active dans des compositions pharmaceutiques. Ces compositions pharmaceutiques peuvent trouver une application thérapeutique dans les pathologies évoquées précédemment. REVENDICATIONS 1. Dérivé de cyclopeptide utilisable comme inhibiteur de protéase, caractérisé en ce qu'il répond à la formule: R1H2C Z o C (I) R -.R3-C-AA N dans laquelle: - R1 est choisi parmi les atomes de fluor, de chlore, de brome et d'iode, et les radicaux 0S02R4, OP(O)R42, OC(Q)R4 et S+R42 avec R4 représentant un radical alkyle, perfluoroalkyle ou aryle; - R2 est un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un atome d'halogène, NO2, COOR5, CF3, CN ou S02R5 avec R5 représentant un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou un radical aryle; - R3 représente un atome d'oxygène, un atome de soufre ou -NH-; - Z comprend une séqwence peptidique Z1 d'aminoacides ou d'analogues identiques ou différents et un groupement choisi parmi (CH2)n-, -O(CH2)n- ou -CO- à son extrémité liée au noyau aromatique, avec n étant un nombre entier de 1 à 8; - -AAC- est un radicaL dérivé d'un aminoacide I O ou d'un analogue d'aminoacide de formule: -NH-R6-CO- R7 dans Laquelle: R6 représente -N- ou -CH-, et R7 représente un radical choisi parmi H, -CH3, -CH2CH(CH3)2; -CH CH3, -CH2-CO-NH2, CH2-CH3 - CH2-CH2-COOH, -CH2-CH2-CO-NH2-, (CH2)4-NH2, -CH20H, -CH2-SH -COOH -CH2-S-S-CH2-CH, -CH2-C6H5, NH2 -CH2-C6H40H, -(CH2)3NHC(=NH)-NH2, -CH2-COOH, -CHOH-CH3 CH NH N I I CH2-C=CH, (CH2)SCH3, -CH2-C -9et -CH(CH3)2 C / NNH ou de formule: R8-CO- -N I' R9 dans laquelle R8 représente N ou CH et R9 représente le radical -(CH2)3- ou -CH2-CHOH-CH2. 2. Dérivé de cyclopeptide selon la revendication 1, caractérisé en ce que la séquence peptidique Z1 comprend 2 à 8 aminoacides ou analogues d'aminoacides identiques ou différents. 3. Dérivé de cyclopeptide selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que R3 est en position ortho ou méta par rapport à Z et en position ortho ou para par rapport à R1H2C. 4. Dérivé de cyclopeptide selon l'une quelconque des revendications I à 3, utilisable comme inhibiteur de chymotrypsine, caractérisé en ce que: -AA-C- o II répond à la formule: -NH-R6-CO dans laquelle R6 est CH et R7 est CH2-C6Hs, CH2- C6H40H; (CH2)2SCH3 ou CH2- NH 5. Dérivé de cyclopeptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, utilisable comme inhibiteur de trypsine, caractérisé en ce que -AA-C-(0)- répond à la formule: -NH-R6-CO- R7 dans laquelle R6 est CH et R7 est -(CH2)4NH2 ou -(CH2)3 NH-C(=NH)-NH2. 6. Dérivé de cyclopeptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, utilisable comme inhibiteur d'élastase, caractérisé en ce que -AA-C(0)- répond à la formule: -NH-R6-CO- R7 dans laquelle R6 est CH et R7 est -CH3 ou -CH(CH3)2. 7. Dérivé de cyclopeptide selon l'une quelconque des revendicatiçns 4 à 6, caractérisé en ce que R1 est Cl, Br ou 0S02R4. 8. Dérivé de cyclopeptide selon l'une quelconque des revendications 4 à 7, caractérisé en ce que R2 est un atome d'hydrogène. 9. Dérivé de cyclopeptide selon l'une quelconque des revendications 4 à 8, caractérisé en ce que Z répond à la formule: -C(O)-(NH-CH2-CO)m- avec m = 4,5 ou 6. 10. Composition pharmaceutique ayant la propriété d'inhiber une protéase donnée, caractérisée en ce qu'elLe comprend une quantité pharmaceutiquement acceptable d'un dérivé de cyclopeptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 9. 11. Composition selon la revendication , caractérisée en ce que la protéase appartient au groupe de la trypsine, de la chymotrypsine, de l'élastase ou des protéases à cystéine active.