FR 2639225 A1 19900525 FR 8815106 A 19881121 Compositions pharmaceutiques pour la neuroprotection contenant des aryltcycLohex Lamines. La présente invention a pour objet des compositions pharmaceutiques pour La neuroprotection contenant des arylcyclohexylamines. De façon plus précise, eLle concerne l'utili- sation d' arylcycLohexylamines ayant une structure proche de celle de La phencyclidine (PCP), c'est-à-dire de La (phényL-1 cyclohexyl)-N pipéridine de formule: N. ou de celle de la ((thiényl-2)-1 cyclohexyl)-N pipéri- dine (TCP) de formule: N La phencyclidine (PCP) dont l'activité pharmacologique a été étudiée vers 1958, a été intro- duite comme analgésique et anesthésique sous le nom de Sernyl et abandonnée ensuite en raison de ses effets secondaires de type psychodysleptiques. La TCP appartient à la série des arylcyclo- hexylamines comme la PCP et elle peut trouver des utilisations en anesthésie comme additif ou pour le traitement de l'hyperexcitabilité en raison de son effet dépressif, comme il est décrit dans le brevet américain US-A-2 921 076 de Parke, Davis & Cy. Ainsi, ces arylcyclohexylamines n'ont jamais été utilisées en neuroprotection. Des études récentes portant sur la PCP ont toutefois montré que cette molécule pouvait agir comme antagoniste non compétitif du N-méthyl-D-asparta- te (NMDA), ce qui est une propriété intéressante pour la protection cérébrale, notamment contre les dommages associés à la présence de glutamate. En effet, la toxicité d'acides aminés excita- teurs tels que les glutamates, est à la base des principaux dommages du cerveau rencontrés lors d'une ischémie, d'anoxie, d'hypoglycémie ou d'épilepsie. De même, on suppose que la toxicité des aminoacides est impliquée dans certains désordres neurodégénératifs. Les molécules agissant comme antagonistes du NMDA peuvent trouver une utilisation en neuroprotec- tion. Cependant, dans le cas de la PCP, les effets secondaires de type psychodysleptique empêchent cette utilisation. Aussi, des recherches ont été entreprises pour trouver d'autres molécules agissant comme antago- niste du NMDA sans présenter cet inconvénient. La présente invention a précisément pour objet de nouvelles compositions pharmaceutiques pour la neuroprotection qui contiennent des arylcyclohexyla- mines ayant un effet antagoniste non compétitif vis-à- vis des récepteurs du NMDA, mais ne présentant pas les effets secondaires gênants de la PCP. Selon l'invention, la composition pharmaceu- tique pour la neuroprotection comprend une arylcyclo- hexylamine répondant aux formules: Ri R3 ou R2 ( R R2 dans lesquelles:(II) û R1 représente R4 o avec R4 étant un atome d'hydrogène, un atome de fluor ou un radical méthyle, R2 représente un atome d'hydrogène, le radical OH ou le radical CH3, et R3 représente un atome d'hydrogène ou le radical CH2R5 avec R5 représentant H, OH, Cl ou CH3COO, à condition que R2 et R3 ne soient pas tous deux un atome d'hydrogène, ou un sel d'addition à un acide 'pharmaceutiquement acceptable de- cette arylcyclohexylamine. Les arylcyclohexylamines utilisées dans l'invention ont une structure proche de celle de la PCP ou de la TCP, mais elles s'en différencient par la présence de substituants qui leur confèrent les propriétés de se fixer plus sélectivement sur le site de la phencyclidine en étant des antagonistes non compétitifs du NMDA qui ne se fixent pas sur le site du NMDA, et d'avoir moins d'affinité pour les récepteurs muscariniques et les récepteurs opiacés que la PCP, donc des propriétés psychodysleptiques fortement diminuées. Ces arylcyclohexylamines sont ainsi des antagonistes non compétitifs du récepteur NMDA des acides aminés excitateurs. Ainsi, elles se fixent sur le récepteur de la PCP et bloquent sélectivement l'entrée des ions Ca+ et Na+ qui passent par le canal ionique activé par les agonistes du récepteur NMDA. Cette propriété est à la base des propriétés neuroprotectrices, en particulier contre les conséquen- ces de l'ischémie. En effet, dans les atteintes cérébrales, on observe une production importante de glutamate qui conduit à la nécrose des cellules. Cette libération est particulièrement importante lorsque la circulation sanguine se rétablit, ce qui engendre une progression de la nécrose des neurones. Cependant, en présence des arylcyclohexylamines de l'invention qui agissent comme antagonistes non compétitifs des récepteurs du NMDA, on observe un blocage des effets toxiques du glutamate. Selon un premier mode de réalisation de l'invention, l'arylcyclohexylamine répond à la formule (I) et elle a une structure proche de celle de la PCP. Dans ce cas, R1 représente un radical de formule: avec R4 représentant un atome d'hydrogène, un atome de fluor ou un radical méthyle. A titre d'exemples de telles arylcyclohexyla- mines, on peut citer: - les arylcyclohexylamines de formule (III) R4 N R3 dans laquelle: R3 représente le radical méthyle ou le radical CH2R5 avec R5 représentant OH ou CH3COO, et R4 représente un atome d'hydrogène; - les arylcyclohexylamines de formule (IV) R4 (IV) R2 NX R3 dans laquelle R2 est le radical méthyle, R3 est le radical CH2R5 avec R5 représentant OH, et R4 est un atome de fluor; et - les arylcyclohexylamines de formule: (v) HO N Selon un second mode de réalisation de l'invention, l'arylcyclohexylamine répond à la formule (I) et a une structure proche de celle de la TCP. Dans ce cas, R1 représente le radical thiényle. A titre d'exemples de telLes arylcyclohexyla- mines, on peut citer: - les arylcyclohexylamines de formule (VI) (VI) R2 dans laquelle R2 est le radical méthyle, - les arylcyclohexylamines de formule (VII) 3 N\. (VII) N R3 dans laquelle R3 est le radical CH2R5 avec R5 représen- tant OH ou Cl, - les arycyclohexylamines de formule (VIII) s/4 3 (VIII) R2 N R3 dans laquelle R2 est le radical méthyle et R3 est le radical CH20H. Selon un troisième mode de réalisation de l'invention, l'arylcyclohexylamine répond à la formule (II) et elle a une structure proche de celle de la TCP. A titre d'exemple de composé de ce type, on peut citer celui répondant à la formule: (IX) N'E Dans les arylcyclohexylamines de l'invention, la position des substituants R2, R3 et R4 a un effet sur les propriétés obtenues. De préférence, lorsque R2 est le radical CH3, il est en position para. Lorsque R2 est le radical OH, il est de préférence en position ortho. Lorsque R3 est le substituant CH2R5, sa position par rapport à l'atome d'azote a également un effet sur le résultat obtenu. Généralement, il est en position méta ou para, de préférence en position méta. Lorsque R1 est un radical phényle substitué, le substituant R4 est de préférence en position méta. Les arylcyclohexyLamines utilisées dans l'invention peuvent être sous la forme de différents isomères, et tous ces isomères conviennent dans l'in- vention. Toutefois, Lorsque R2 n'est pas un atome d'hydrogène, et se trouve en position ortho ou méta, on préfère généralement utiliser les isomères cis/pipé- ridine qui sont les plus efficaces. Lorsque R2 n'est pas un atome d'hydrogène et se trouve en para, on préfère utiliser les isomères trans/pipéridine. Les arylcyclohexylamines de l'invention peuvent être préparées par des procédés classiques, par exemple à partir des composés suivants: - les pipéridines de formule: HN a (X) R3 dans laquelle R3 a la signification donnée ci-dessus, - la tétrahydropyridine de formule: Heu / (XI) - les cyclohexanones de formule: O=M (XII) R2 dans laquelle R2 a la signification donnée ci-dessus, - les halogénures de benzène de formule: X O R4 (XIII) dans laquelle X représente un atome d'iode, de brome ou de chlore et R4 a La signification donnée ci-dessus, et - Les halogénures de thiophène de formule: s (XIV) X -.3l S dans LaqueLle X a la signification donnée ci-dessus. Plusieurs procédés de synthèse peuvent être envisagés et leur choix dépend en particulier de la position du substituant R2et de l'isomère que l'on veut obtenir. On décrit, ci-après, trois voies de synthèse utilisables. Voie de synthèse I. Cette voie de synthèse se déroule en deux étapes qui sont respectivement: a) la préparation d'alpha-aminonitriles à partir des pipéridines de formule (X) ou pyridines de formule (XI) et des cyclohexanones de formule (XII), puis b) la réaction des alpha-aminonitrilesavec les halogé- nures de benzène de formule (XIII) ou les halogénures de thiophène de formule (XIV). L'alpha -aminonitrile répond à la formule: CN CN ou R ou R3 X N '> R3 R (XV) (XVI) dans lesquelles R2 et R3 ont la signification donnée ci-dessus. Il est préparé par une variante de la réac- tion de Strecker qui se déroule en milieu organique anhydre. Dans ce but, on fait réagir de l'acétone cyanhydrine (donneur d'ions cyanure) avec 1 ) La pipéridine de formule (X) ou la pyridine de formule (XI), et 2 ) une cyclohexanone de formule (XII), en présence de sulfate de magnésium qui agit comme déshydratant, dans un solvant du type diméthylacétamide (DMA). Après traitement et purification, on isole l'alpha-aminonitrile correspondant avec une pureté d'au moins 95% et on l'utilise tel quel dans la suite de la synthèse. Dans la deuxième étape, on fait réagir cet alpha-aminonitrile avec un halogénure de benzène de formule (XIII) ou un halogénure de thiophène de formule (XIV) en utilisant la synthèse dite de Bruylants. Cette synthèse consiste à faire réagir l'alpha-aminonitrile avec un réactif de Grignard obtenu à partir de l'halogénure de benzène ou de thiophène de formule (XIII) ou (XIV) dans l'éther ou le tétrahydrofurane (THF) anhydre. Après traitement convenable et purification, on isole l'arylcyclohexyla- mine recherchée. On fait ensuite barboter du gaz chlorhydrique anhydre dans une solution éthérée de l'arylcyclohexylamine pure, et on précipite ainsi le chlorhydrate hydrosoluble correspondant. Cette voie de synthèse est stéréospécifique; elle ne permet donc d'accéder qu'à un seul des isomères possibles. Ainsi, lorsque le substituant R2 est en ortho ou para, on obtient l'isomère cis / pipéridine; lorsque R2 est en position méta, on obtient l'isomère trans. Voie de synthèse II. Cette synthèse se déroule en 4 étapes qui sont les suivantes: a) préparation d'alcool benzylique de formu- le: RI (XVII) R2 H On fait réagir une cyclohexanone de formuLe XII avec un réactif de Grignard obtenu à partir des halogénures de benzène ou de thiophène de formule XIII ou XIV dans de l'éther anhydre. On obtient ainsi les alcools benzyliques que L'on soumet à une rapide purification. b) Préparation des dérivés azides correspon- dants de formule: Rl R2 v R1 (XVIII) R N3 SeLon un processus proche de celui utilisé dans les réactions de Schmidt et de Curtius, on effec- tue la substitution de la fonction alcool par la fonction azide en ajoutant les alcools bruts précédents à une suspension d'azidure de sodium dans l'acide trichloracétique et le chloroforme à froid. Après traitement, on isole un mélange brut d'azides épiméres que l'on utilise tel quel dans la suite. c) réduction des azides. On fait réagir le mélange précédent avec du nickel de Raney dans de l'isopropanol pour fournir après traitement un mélange d'amines primaires épiméres utilisé tel quel dans la suite. d) Formation du cycle pipéridinique et purif i cation. On fait réagir dans l'acétonitrile à chaud le dibromo-1,5 pentane sur le mélange précédent des amines primaires. Après traitement, on isole un résidu contenant essentiellement un mélange brut de deux stéréoisomères. On peut séparer les deux isomères purs par chromatographie et obtenir ainsi le composé recherché. Par barbotage de gaz chlorhydrique anhydre dans la solution éthérée du dérivé séparé, on précipite le chlorhydrate hydrosoluble correspondant. Ainsi, la voie II permet d'accéder aux deux isomères possibles et tout particulièrement à celui non obtenu par la voie I. - Cependant la voie II ne peut être utilisée pour la préparation des dérivés de formule (II)ou pour la préparation des dérivés de formule (I)compor- tant un substituant R3. Voie de synthèse III. Cette voie de synthèse comprend les étapes suivantes: - a) formation d'alcool benzylique de formule XVII comme dans la voie de synthèse II par réaction d'une cyclohexanone de formule XII dans laquelle R2 est un atome d'hydrogène, avec le réactif de Grignard obtenu à partir de l'halogénure de benzène ou de thiophène de formule XIII ou XIV. On purifie rapidement l'alcool et on l'utilise tel quel dans la suite de la synthèse. b) Formation d'arylcyclohexène de formule: Rl (XIX) On déshydrate en milieu acide l'alcool obtenu précédemment pour fournir l'arylcyclohexène recherché. c) Formation des époxvdes correspondants. On forme l'époxyde correspondant de formule: (X) en utilisant un peracide approprié d) Ouverture des époxydes par la pipéridine. L'époxyde précédemment obtenu est ouvert à chaud par la pipéridine, en milieu méthanolique, pour donner un alcool benzylique majoritaire et une hydroxy-2 arylcyclohexylamine minoritaire de formule: R1 (XXI) H R3 constituant le produit recherché. Par barbotage de gaz chlorhydrique anhydre dans la solution éthérée du produit obtenu, on précipi- te le chlorhydrate hydrosoluble correspondant. Cette voie III est elle aussi stéréospécifi- que et conduit à l'isomère avec OH trans / pipéridine; de plus, elle ne permet d'obtenir commodément que des composés hydroxylés en position 2 qui ne peuvent se préparer par les deux autres voies. Les compositions pharmaceutiques de l'inven- tion comprennent les arylcyclohexylamines répondant aux formules (I) ou (II) ci-dessus, ou leurs sets d'addition aux acides pharmaceutiquement acceptables. Les acides utilisables sont par exemple l'acide chlorhydrique, l'acide sulfurique et l'acide tartrique. Pour la préparation de ces compositions, on peut dissoudre un sel d'addition aux acides de l'arylcyclohexylamine dans une solution aqueuse injec- table ou administrable par voie orale, par exemple du sérum physiologique. On peut aussi inclure les arylcyclohexylami- nes de l'invention dans des préparations solides telles que des comprimés, administrables par voie orale, en utilisant des techniques classiques. Les doses généralement administrées peuvent varier de 0,1 à 5mg/kg. Lorsque la composition pharma- ceutique est sous la forme d'une solution, la concen- tration de la solution en arylcyclohexylamine est telle que le volume administré varie de 0,5 à 2ml. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaitront mieux à la lecture des exemples suivants donnés bien entendu à titre illustra- tif et non limitatif. Exempte 1: Préparation de cyano-l(méthyl-4 pipéridi- no)-1)-1 cyclohexane (synthon I). On mélange 9,8g (0,1M) de cyclohexanone, 13,4g (0,15M) d'acétone cyanhydrine, 63g (0,5M) de MgSO4 (séché) dans 14,9g (0,15M) de méthyl-4 pipéridine et 8,7g (0,1M) de DMA (diméthylacétamide). On agite fortement à 450 pendant 48h, puis on jette dans un grand volume d'eau et de glace violemment agité pendant min. Apres extraction à l'éther, séchage (Na2C03) , évaporation du solvant sous vide, on obtient un résidu solide qui après une cristallisation dans l'hexane ou l'éther de pétrole donne 15,5g (75%) du synthon I sous la forme d'un solide blanchâtre de pureté égale ou supérieure à 95%, suffisante pour la suite des synthèses, qui est identifié par spectrométrie infrarouge. Exemple 2: Préeparation du cyano1 ((tétrahydro-1l2,56 pyridino)-1)-1 cyclohexane (synthon II). On mélange 15,1g (0,15M) de cyclohexanone, 13,9g (0,16M) d'acétone cyanhydrine, 92g (0,77M)de MgSO4 (séché) dans 22g (0,3M) de tétrahydro-1, 2,5,6 pyridine et 26,1g (0,3M) de DMA. On agite fortement à 45 pendant 48h, puis on jette dans un grand volume d'eau et de glace violemment agité pendant 30min. Après extraction à l'éther, séchage (Na2C03), évapora- tion du solvant sous vide, on obtient un résidu solide brun-jaune qui après une cristallisation dans l'hexane ou l'éther de pétrole donne 20g (70%) du synthon II sous la forme d'un solide jaunâtre de pureté au moins égale à 95%, suffisante pour la suite des synthé- ses, qui est identifié par spectrométrie infrarouge et spectrométrie de masse couplée à la chromatographie gazeuse (GC/MS). Pour la OG/MS, on utilise une colonne capil- laire OVI de 25m. Les conditions et les résultats obtenus sont les suivants: Temp. Injecteur de 100 à 250 C (20 C/min), Temp. Four: 200 C, Temps de rétention: 4,84min, m/e 190,2. Exemple 3: Préparation du cyano-1 (hydroxyméthyl-3 pipéridino)-1 cyclohexane (synthon III). On mélange 20g (0,2M) de cyclohexanone, 26g (0,3M) d'acétone cyanhydrine, 49g (0,4M) de MgSO4 (séché) dans 30,3g (0,3M) d'hydroxyméthyl-3 pipéridine et 17,8g (0,2M) de DMA. On agite fortement à 45 pendant 48h puis on jette dans un grand volume d'eau -et de glace violemment agité pendant 30min. On obtient un précipité blanc que l'on essore et sèche sous vide. On isole ainsi 23,lg (85%) d'aminonitrile (syn- thon III) de pureté Ä 95%, suffisante pour la suite des synthèses, qui est identifié par spectrométrie infrarouge, et spectrométrie de masse couplée à la chromatographie gazeuse (GC/MS). Pour la GC/MS, on utilise une colonne capil- laire OV1 de 25m. Les conditions et les résultats obtenus sont les suivants: Temp. Injecteur de 50 à 230 C (10 C/min), Temp. Four: 250 C Temps de rétention: 13,92min, m/e 222,1. ExempLe 4: Préparation du cyano-1 r-(hydroxyméthyl-3 pipéridino)-1)-1-tméthyl-4 cyclohexane (synthon IV). On mélange 15g (0,13M) de méthyl-4 cyclohexa- none, 11,3g (0,13M) d'acétone cyanhydrine, 80,4g 263922r (0,67M)de MgS04 (séché) dans 30,8g (0,27M) d'hydroxymé- thyl-3 pipéridine et 11,3g (0,13M) de DMA. On agite fortement à 450 pendant 48h, puis on jette dans un grand volume d'eau et de glace violemment agité pendant min. Après extraction à l'éther, séchage (Na2C03) , évaporation du solvant sous vide, on obtient un résidu solide blanchâtre qui après une cristallisation dans l'hexane ou l'éther de pétrole donne 22,2g (70%) d'un solide blanc de pureté. 95% suffisante pour la suite des synthèses. Ce composé contient Le synthon IV et une faible proportion du second stéréoisomère possible, ce qui ne présente pas d'inconvénient dans la suite puisqu'en présence d'un réactif de Grignard (acide de Lewis), il s'épimérise en isomère majoritaire qui est seul à réagir. Exemple 5: Préparation du ((méthyl-4 Dipéridino)-1)-1 phényl-1 cyclohexane de formule X@ (composé n 1) iN CH3 On prépare, dans 50ml d'éther anhydre, le réactif de Grignard résultant de l'action de 8g (0, 05M) de bromobenzène sur 2g (0,08M) de magnésium en tournures. On y ajoute, lentement, 5g (0,02M) de synthon I dissous dans 50ml d'éther anhydre. On agite 12h au reflux, décompose Le complexe par une solution saturée froide de NH4Cl, puis, après décantation, on extrait les eaux à l'éther (3x50ml). Les phases éthérées réunies sont extraites par une solution aqueuse de HCl 20% (2x50ml). Les eaux acides sont neutralisées par NH40H, extraites à l'éther (3x50ml); les éthers rassemblés, après séchage (Na2SO4), sont évaporés sous vide pour donner un résidu solide jaunâ- tre de 5,8g. Ce dernier est chromatographié sur alumi- ne, dans l'éther de pétrole pur, pour donner 4,8g (77%) de composé n I sous la forme d'un solide blanc, analytiquement pur, fondant à 53-54 . Par barbotage de HCl gazeux dans La solution éthérée du composé n 1, on fait précipiter son chlorhydrate, solide blanc qui, récupéré par essorage et séché sous vide, fond à 211-212 . Analyse centésimale du produit de formule brute C18H28NCl: trouvé calculé C 73,25 73,60 H 9,78 9,54 N 4,96 4,77 ExempLe-6: Préparation du ((tétrahydro-1l,2,5,6 pyridi- no)-1)-1 (thiényl-2)-1 cyclohexane de formule: Il (composé n0 2) On prépare, dans 50ml d'éther anhydre, le réactif de Grignard résultant de l'action de 8,15g (0,05M) de bromo-2 thiophène sur 2g (O,08M) de magné- sium en tournures. On y ajoute, lentement, 2g (0,01M) de synthon II dissous dans 50ml d'éther anhydre. On agite 12h au reflux, décompose le complexe par une solution saturée froide de NH4Cl, puis, après décantation, on extrait les eaux à l'éther (3x50ml). Les phases éthérées réunies sont extraites par une solution aqueuse de HCl 20% (2x50ml). Les eaux acides sont neutralisées par NH40H, extraites à l'éther (3x50ml); les éthers rassemblés, après séchage (Na2S04), sont évaporés sous vide pour donner un résidu solide jaune-brun de 2g. Ce dernier est chromatographié sur silice dans l'éther de pétrole pur, pour donner 1,3g (53%) de composé n 2 sous la forme d'un solide blanc, analytiquement pur, fondant à 46-48 . Par barbotage de HCL gazeux dans la solution éthérée de ce composé, on fait précipiter son chlorhydrate, solide blanc qui, récupéré par essorage et séché sous vide, fond à 163-164 C. Analyse centésimale du produit de formule brute C15H22NSCL: trouvée calculée C 63,62 63,49 H 7,97 7,76 N 4,68 4,94 Exemple 7: Préparation de l' (hydroxyméthyl-3 pipéri- dino)-1]-1 (thiényl-2)-1 cyclohexane de formule: m (composé n0 3) N. CH20H On prépare, dans 350ml d'éther anhydre, le réactif de Grignard résultant de l'action de 57,6g (0,35M) de bromo-2 thiophène sur 9g (0,38M) de magné- sium en tournures. On y ajoute, lentement, 15,7g (0,07M) de synthon III dissous dans 350ml d'éther anhydre. On agite 12h au reflux, décompose Le complexe par une solution saturée froide de NH4Cl, puis, après décantation, on extrait à l'éther (3x250ml). Les phases éthérées réunies sont extraites par une solution aqueuse de HCl 20% (2x200ml). Les eaux acides sont neutralisées par NH40H, extraites à l'éther (3x250ml); les éthers rassemblés, après séchage (Na2SO4), sont évaporés sous vide pour donner un résidu huileux jaunâtre de 16,3g. Ce dernier est chromatographié sur chromatographe préparatif haute performance (2 opérations) sur silice, dans l'éther de pétrole conte- nant de l'éther (80/20 v/v), pour donner 14,5g (74%) du composé n 3 sous la forme d'huile claire, analyti- quement pure. Par barbotage de HCl gazeux dans la solution éthérée de ce composé, on fait précipiter son chlorhydrate, solide blanc qui, récupéré par essorage et séché sous vide, fond à 170-171o (analyti- quement pur). Analyse centésimale du produit de formule brute C16H26NOSCl: trouvée calculée C 60,59 60,86 H 8,11 8,24 N 4,16 4,44 Exemple 8: Préparation de l'E(hydroxyméthyl-3 pipéri- dino)-1l-1 phényl-1 cyclohexane de formule (composé n 4) \ -N=' CH20H On prépare, dans 350ml d'éther anhydre, le réactif de Grignard résultant de l'action de 55,59 (0,35M) de bromobenzène sur 9g (0,38M) de magnésium en tournures. On y ajoute, lentement, 15,?g (0O,07M) de synthon III dissous dans 350ml d'éther anhydre. On agite 12h au reflux, décompose le complexe par une solution saturée froide de NH4Cl, puis, après décantation, on extrait à l'éther (3x250ml). Les phases éthérées réunies sont extraites par une solution aqueuse de HCl 20% (2x200ml). Les eaux acides sont neutralisées par NH40H, extraites à l'éther (3x250ml); les éthers rassemblés, après séchage (Na2S04), sont évaporés sous vide pour donner un résidu huileux blanchâtre de 15,9g. Ce dernier est chromatographié sur chromatographe préparatif haute performance (2 opérations), sur silice, dans l'éther de pétrole contenant de l'éther (80/20 v/v), pour donner 13,5g (70%) du composé n 4 sous la forme d'huile claire, analytiquement pure. Par barbotage de HCl gazeux dans la solution éthérée de ce composé, on fait préci- piter son chlorhydrate, solide blanc qui, récupéré par essorage et séché sous vide, fond à 205-2070 (analytiquement pur). Analyse centésimale du produit de formule brute C18H28NOCL: trouvée calculée C 70,02 69,79 H 9,24 9,05 N 4,55 4,52 ExempLe 9: Préparation du r-(hydroxyméthyl-3 pipéridi- no)-1-c-méthyl-4 (thiényl-2)-1 cyclohexane de formule: CH3 (composé no 5) CH20H On prépare, dans 200ml d'éther anhydre, le réactif de Grignard résultant de l'action de 31g (0,19M) de bromo-2 thiophène sur 4,8g (0,20M) de magnésium en tournures. On y ajoute lentement 9g (0,04M) de synthon IV dissous dans 200ml d'éther anhydre. On agite 12h au reflux, décompose Le complexe par une solution saturée froide de NH4Cl, puis, après * décantation, on extrait les eaux à l'éther (3x150ml). Les phases éthérées réunies sont extraites par une solution aqueuse de HCl 20% (2x150ml). Les eaux acides sont neutralisées par NH40H, extraites à l'éther (3x150ml); les éthers rassemblés, après séchage (Na2S04), sont évaporés sous vide pour donner un résidu huileux jaunâtre de 9g. Ce dernier est chromato- graphié sur chromatographe préparatif haute performance sur silice, dans L'hexane contenant de l'éther (95/5 v/v), pour donner 7,5g (67%) du composé n 5 sous la forme d'huile claire analytiquement pure. Par barbotage de HCL gazeux dans la solution éthérée de ce composé, on fait précipiter son chlorhydrate, solide blanc qui, récupéré par essorage et séché sous vide, fond à 186-187 (analytiquement pur). Analyse centésimale du produit de formule brute C17H29NOSCL: trouvée calculée C 61,62 61,91 H 8,56 8,50 N 4,34 4,25 Exemple 10: Préparation de t'acétate de ((hydroxymé- thyl-3-pipéridino)-1)-1 phényl-1 cyclohexane de formu- le: (composé n 6) CH20CCH3 3 5 CH200CCH3 3g (0,01M) du composé n0 4 sont places dans un mélange de 3g (0,03M) d'anhydride acétique et 2g (0,03M) de pyridine anhydre. La solution est agitée à 25 pendant 24h, puis jetée dans un grand volume d'eau et de glace que l'on agite violemment pendant 30min. La solution est extraite à l'éther (3x50ml), les éthers séchés (Na2SO4) sont évaporés sous vide pour laisser un résidu huileux blanchâtre de 3,3g. Ce dernier est chromatographié sur alumine dans l'éther de pétrole pur pour donner 2,7g (78%) de composé n 6 sous la forme d'une huile claire, analytiquement pure. Par barbotage de HCL gazeux dans la solution éthérée de ce composé, on fait préci- piter son chlorhydrate, solide blanc qui, récupéré par essorage et séché sous vide, se décompose à 180 (analytiquement pur). Analyse centésimale du produit de formule brute C20H30N02C1: trouvée calculée C 68,25 68,28 H 8,84 8,54 N 3,66 3,98 ExemDle 11: Préparation du ((fluoro-3 phényl)-1)-1-r- ((hydroxyméthyl-3 pipéridino)-1)-1-c-méthyl-4 cyclo- hexane de formule: 2CH3 { NF (composé n 7) CH20H On prépare, dans 50ml d'éther anhydre, le réactif de Grignard résultant de l'action de 7,5g (0, 04M) de bromo-1 fluoro-3 benzène sur lg (0,04M) de magnésium en tournures. On y ajoute, lentement, 2g (O,08M) de synthon IV dissous dans 50ml d'éther anhydre. On agite 12h au reflux et décompose le comple- xe par une solution saturée froide de NH4Cl, puis, après décantation, on extrait les eaux à l'éther (3x50ml). Les phases éthérées réunies sont extraites par une solution aqueuse de HCl 20% (2x50ml). Les eaux acides sont neutralisées par NH40H, extraites à l'éther (3x50ml); les éthers rassemblés, après séchage (Na2S04), sont évaporés sous vide pour donner un résidu huileux brunâtre de 1,7g. Ce dernier est chromatographié sur chromatographe préparatif haute performance sur silice, dans le pentane contenant de l'éther (80/20 v/v), pour donner 1,2g (46%) du composé n 7 sous la forme d'huile claire, analytique- ment pure. Par barbotage de HCl gazeux dans la solution éthérée de ce composé, on fait précipiter son chlorhy- drate, solide blanc qui, récupéré par essorage et séché sous vide, se décompose à 218 (analytiquement pur). Analyse centésimale du produit de formule brute C19H29NOFCl: trouvée calculée C 66,68 66,76 H 8,39 8,49 N 3,88 4,10 ExemDle 12: Préparation du [ (chlorométhyl-3 pipéri- dino)-1]-1 (thiényl-2)-1 cyclohexane de formule: (composé n0 8) CH2C l A 2,59 (0,009M) du composé n 3 et lml de chlorure de méthylène, on ajoute très lentement (avec évacuation ou piégeage pour gaz acides), sous agitation, lg de chlorure de thionyle dissous dans lml de chlorure de méthylène. On chauffe ensuite 6h à 60 , puis évapore le solvant sous vide. Le résidu obtenu est dilué dans lOmL d'eau et neutralisé avec précaution par NH40H 20%. On extrait les eaux à L'éther (3x20ml), sèche les éthers rassemblés (Na2SO4) et les évapore sous vide ce qui fournit un résidu huileux brunâtre de 2,49. Celui-ci est purifié par flash chromatographie sur silice, dans l'éther de pétrole, pour donner 2,lg (78%) du composé n 8 sous la forme d'huile claire analytiquement pure. Par barbotage de HCl gazeux dans la solution éthérée de ce composé, on fait précipiter son chlorhydrate, solide blanc qui, récupéré par essorage et séché sous vide, fond à 150-151 (analytiquement pur). Analyse centésimale du produit de formule brute C16H25NSCL2 trouvée calculée C 57,18 57,49 H 7,58 7,49 N 4,28 4,19 Exemple 13: Préparation du c-méthyl-2-r-(pipéridi- no-1>-1 (thiényl-2)-1 cyclohexane de formule: (compos n (composé n0 9) CH3 N / A) On prépare, dans 75ml d'éther anhydre, le réactif de Grignard résultant de l'action de 8,25g (0;05M) de bromo-2 thiophène sur 2g (O,08M) de magné- sium en tournures. On y ajoute 5,6g (O,05M) de méthyL-2 cyclohexanone dissous dans 75mL d'éther anhydre. On agite 3h au reflux, décompose le complexe par une solution saturée froide de NH4CL, puis, après décantation, on extrait les eaux à L'éther (3x50ml). Les éthers, après séchage (Na2S04), sont évaporés sous vide pour donner 8, 7g (88,8%) de mélange d'alcools épimères (Ir). La réaction suivante procédant par carbocation, les alcools ne sont pas autrement puri- fiés. B) On prépare à -5 une suspension contenant 6,5g (0,l1M) d'azidure de sodium, 82g (0,5M) d'acide trichloracétique et 100ml de chloroforme fortement agitée. On y ajoute, lentement, dissous dans 70ml de chloroforme et à la même température, 8,7g (0,045M) des alcools obtenus précédemment. L'agitation et la température sont maintenues pendant 3h (ou jusqu'à disparition des alcools), puis on neutralise, à froid, par NH40H, décante, extrait la phase aqueuse ou chloro- forme (2x50ml) et lave les phases organiques rassem- blées jusqu'à pH neutre. Apres séchage (Na2S04), évaporation sous vide, on récupère un résidu huileux pesant 8,85g, contenant essentiellement deux dérivés insaturés (très minoritaires) et deux azides épimères (IR) qui, compte tenu de leur relative instabilité, ne sont pas autrement purifiés. C) Le mélange des deux azides précédemment obtenu de 8,85g est dissous dans 100ml d'isopropanol et chauffé à 65 . On ajoute par portions du Nickel de Raney (en maintenant la température) jusqu'à cessa- tion de dégagement gazeux. On chauffe alors à 70 pendant 15min, refroidit à la température ambiante, filtre sur célite, lave celle-ci avec 100ml d'isopropa- nol, ajoute aux phases alcooliques 200ml d'HCl à % et évapore sous vide pour éliminer l'isopropanol. La phase aqueuse restante, refroidie, est neutralisée par NH40H. On extrait ensuite à l'éther (3x50ml), sèche (Na2CO3) et évapore le solvant sous vide pour obtenir un résidu huileux de 4,6g qui contient essentiellement deux amines primaires épimères (IR, GC/MS). D) Les amines précédentes, 4,6g, sont dissou- tes dans 100ml d'acétonitrile contenant 5,2g de dibro- mo-1,5 pentane et 13g de K2C03. Le mélange, fortement agité, est porté au reflux pendant 72h puis refroidi à température ambiante. Après filtration, on ajoute ml d'HCI 20%, extrait à l'éther (2x50ml), les eaux acides, neutralisées par NH40H, sont à leur tour extraites à l'éther (3x50ml). Après séchage (Na2C03), les éthers sont évaporés sous vide pour donner un résidu huileux de 3,7g contenant essentiel- lement deux amines tertiaires isomères (IR, GC/MS). Le mélange obtenu est chromatographié sur chromatogra- phe préparatif haute performance sur silice, dans l'hexane contenant de l'éther (95/5 v/v) pour donner une première fraction d'huile claire qui cristallise lentement (40-41 ), analytiquement pure, de 1,7g de t-méthyl-2-r-(pipéridino-1)-1 (thiényl-2)-1 cyclo- hexane; une deuxième fraction de cristaux blancs de 1,4g (80-81 ), analytiquement pure, du composé nQ 9 ou c-méthyl-2-1-(pipéridino-1)-1 (thiényL-2)-1 cycLohexane et deux autres fractions de 400mg au total, constituées d'amines primaires n'ayant pas réagi dont le mélange est recyclabLe lors d'une synthè- se ultérieure. Par barbotage de HCl gazeux dans la solution éthérée des bases cristallisées, on fait précipiter leurs chlorhydrates, solides blancs qui, récupérés par essorage et séchés sous vide, fondent respectivement à 152-153 et 220-221 pour le composé n0 9, HCl. Le rendement en composé n 9 base à partir de la cétone de départ est de 10,5%. Les deux structu- res stéréoisomères sont aisément différenciées par RMN du 13C (CDCl3) des chlorhydrates (conformations anancomères): dans Le composé n 9, HCl, le méthyle, les carbones C2, C4 et C6 sont plus blindés que dans L'isomère de plus bas point de fusion, en raison de la position axiale du méthyle (au lieu d'équatoriale dans l'autre isomère). Analyse centésimale du produit de formule brute C16H26NSCl: trouvée calculée C 64,23 64,11 H 8,69 8,68 N 4,59 4,67 Exemple 14: Préparation du t-méthyl-4-r-(pipéridi- no-1)-1 (thiénYl-2)-1 cyctohexane de formule: CH3 (composé n 10) N A) On prépare, dans 300mL d'éther anhydre, le réactif de Grignard résultant de L'action de 49,5g (0,3M) de bromo-2 thiophène sur 8,75g (0,35M) de magnésium en tournures. On y ajoute 22,4g (0,2M) de méthyl-4 cyclohexanone dissous dans 300ml d'éther anhydre. On agite 3h au reflux, décompose le complexe par une solution saturée froide de NH4Cl, puis, après décantation, on extrait les eaux à l'éther (3x200ml). Les éthers, séchés (Na2S04), sont évaporés sous vide pour donner un solide jaunâtre qui, après une cristal- lisation dans l'éther de pétrole, donne un solide blanc de 31,4g (80%) de mélange d'alcools épimères (IR). La réaction suivante procédant par carbocation, les alcools ne sont pas autrement purifiés. B) On prépare à -5 une suspension contenant 4,9g (0,075M) d'azidure de sodium, 61g (0,37M) d'acide trichloracétique et 35mL de chloroforme et fortement agitée. On y ajoute, lentement, dissous dans 50ml de chloroforme et à la même température, 6g (0,031M) des alcools obtenus précédemment. L'agitation et la température sont maintenues pendant 3h (ou jusqu'à disparition des alcools), puis on neutralise, à froid, par NH40H, décante, extrait la phase aqueuse au chloro- forme (2x50ml) et lave les phases organiques rassem- bLées jusqu'à pH neutre. Après séchage (Na2SO4), évaporation sous vide, on récupère un résidu huileux pesant 5,75g, contenant essentiellement un dérivé insaturé (très minoritaire) et deux azides épimères (Ir) qui, compte tenu de leur relative instabi lité, ne sont pas autrement purifiés. C) Le mélange des deux azides précédemment obtenu de 5,75g est dissous dans 100ml d'isopropanol et chauffé à 65 . On ajoute par portions du Nickel de Raney (en maintenant la température) jusqu'à cessa- tion de dégagement gazeux. On chauffe alors à 70 pendant 15min, refroidit à la température ambiante, filtre sur célite, lave celle-ci avec 100ml d'isopropa- nol, ajoute aux phases alcooliques 200ml d'HCl à % et évapore sous vide pour éliminer l'isopropanol, la phase aqueuse restante, refroidie, est neutralisée par NH40H. On extrait ensuite à l'éther (3x50ml), sèche (Na2CO3) et évapore le solvant sous vide pour isoler finalement un résidu huileux de 3,8g qui con- tient essentiellement deux amines primaires épimères (IR, GC/MS). D) Le mélange d'amines précédent, 3,8g, est dissous dans 50mL d'acétonitrile contenant 4,3g de dibromo-1,5 pentane et 11g de K2C03. Le mélange, fortement agité est porté au reflux pendant 72H puis refroidi à température ambiante. Apres filtration, on ajoute 100ml d'HCl 20%, extrait à l'éther (2x5Oml), Les eaux acides, neutralisées par NH40H, sont à Leur tour extraites à l'éther (3x50ml). Après séchage (Na2C03), ces éthers sont évaporés sous vide pour donner un résidu huileux de 3,2g contenant essentiel- lement deux amines tertiaires isomères (IR, GC/MS). Le mélange obtenu est chromatographié sur alumine. L'éther de pétrole élue une première fraction d'huile claire, analytiquement pure, de 1,lg de c_-méthyl-4-r-(pipéridino-1)-1(thiényl-2)1 cyclohexane; une deuxième fraction de cristaux blancs de 1,5g (68-69 ), analytiquement pure du composé n 10 ou t-méthyl-2-r-(pipéridino-1)-1 (thiényL-2)-1 cyclohexane et deux autres fractions de 300mg au total constituées d'amines primaires n'ayant pas réagi dont le mélange est recyclable lors d'une synthèse ultérieure. Par barbotage de HCl gazeux dans la solution éthérée des bases cristallisées, on fait précipiter leurs chlorhydrates, solides blancs qui, récupérés par essorage et séchés sous vide, fondent respectivement à 206-208 et 162-163 pour le composé n0 10, HCl. Le rendement en composé n 10 base à partir de la cétone de départ est de 18,5%. Les deux structures stéréoisomères sont aisément différenciées par RMN du 13C (CDCl3) des chlorhydrates (conformations anancomères): dans le composé n 10, HCl, le méthyle, les carbones C2, C6 et C4 sont plus déblindés que dans l'isomère élué en tête, en raison de la position équatoriale du méthyle (au lieu d'axiale dans l'autre isomère). Analyse centésimale du produit de formule brute C6H26NSCL: trouvée calculée C 63,88 64,11 H 8,64 8,68 N 4,64 4,68 Exemple 15: Préparation du t-hydroxy-2 phényl-1-r-(pi- péridino-1)-1 cyclohexane de formule: (compose no 11) ONQ A) On prépare, dans 300ml d'éther anhydre, le réactif de Grignard résultant de l'action de 48,9g (0,3M) de bromobenzène sur 8,75g (0,35M) de magnésium en tournures. On y ajoute 19,6g (0,2M) de cyclohexanone dissous dans 300ml d'éther anhydre. On agite 3h au reflux, décompose le complexe par une solution saturée froide de NH4Cl, puis, après décantation, on extrait les eaux à l'éther (3x200ml). Les éthers, séchés (Na2S04), sont évaporés sous vide pour donner un solide jaunâtre qui, après deux cristallisations dans l'éther de pétrole, donne 25g de phényl-1 cyclo- hexanol blanc (70%) fondant à 60-61 (IR). B) A 17,6g (0,1M) d'alcool fondu précédent on ajoute, sous agitation, 20ml d'un mélange d'acide sulfurique et d'acide acétique (20/80 v/v). Apres 30sec., le mélange est jeté sur 100ml d'eau et de glace, puis extrait à l'éther (3x20ml); les éthers lavés à l'eau puis séchés (Na2CO3) sont évaporés sous vide et le liquide restant distillé sous pression réduite (0,5mmHg) pour donner une fraction (86-88 ) de 11,8g (75%) de phényl-1 cyclohexène pur (IR). C) On place 20g (0,125M) du phényl-1 cyclo- hexène précédent dans 200mL d'éther anhydre, on y ajoute, lentement, sous agitation, 26,6g (0,15M) d'acide m-chLoroperbenzoique dissous dans ZOOml d'éther anhydre. On agite à 25 pendant 12h, puis ajoute une solution de NaOH à 10% en quantité suffisante pour neutraliser exactement l'acide mis en réaction. On décante, lave les éthers regroupés jusqu'à pH neutre, les sèche (Na2SO4) puis les évapore sous vide pour obtenir 20,8g d'époxyde brut. Cet époxyde est chromatographié sur alumine neutre, dans l'éther de pétrole contenant de l'éther (95/5 v/v), pour obtenir 17,8g d'une huile transparente (81%) analyti- quement pure. D) On dissout 10,5g (0,06M) d'époxyde et ,8g (0,36M) de pipéridine dans 47g de méthanol. Apres six jours de reflux sous agitation, on jette dans un mélange d'eau et de glace, extrait à l'éther (3x100ml), extrait ces derniers par HCl 20% (2x100ml) et neutralise la phase acide par NH40H. Les eaux sont extraites à l'éther (3x100ml), les éthers séchés (Na2SO4) sont évaporés sous vide à chaud pour donner 13,4g de solide jaunâtre. Ce dernier après plusieurs cristallisations dans l'hexane donne 2,4g (15,4%) du composé nO 11 sous la forme de solide blanc, analytiquement pur, fondant à 133-134 . Par barbotage de HCl gazeux dans la solution éthérée de ce composé, on fait précipiter son chlorhydrate, solide blanc qui, récupéré par essorage et séché sous vide, fond à 203-205o. Analyse centésimale du produit de formule brute C17H25NO: trouvée calculée C 78,61 78,77 H 9,80 9,65 N 5,22 5,40 Dans le tableau I joint, on a regroupé les résultats des spectres de RMN du 13C des composés 1 à11. Les spectres ont été enregistrés dans CDCl3, à 20,147 MHz en ppm par rapport au tétraméthylsilane (TMS), les composés étant soit sous forme de base, soit sous forme de chlorhydrate (repérés par un astérisque). Exemple 16: Test simDle de la tige tournante. Dans cet exemple, on teste les propriétés des composés nI 1 à 5 et 8 à 11 sur des souris de race Swiss. -* On administre aux souris par voie sous-cuta- née différentes doses des composés à tester, puis on place les souris sur une tige tournante par lots de 10, isolées les unes des autres par des disques de séparation. Cette tige est en bois gratté et a un diamètre de 3cm et elle est animée horizontalement d'un mouvement circulaire uniforme autour de son axe à la vitesse de lOt/min. On détermine la DE50 qui est la dose pour laquelle on observe la chute de 50% des animaux d'expé- rience. Cette dose est exprimée en mg/kg. Les résultats obtenus sont donnés dans le tableau 2 joint. Au vu de ces résultats, on constate que tous les composés de l'invention sont actifs, puisque la DE50 est inférieure à 25mg/kg à l'exception du composé n 8 qui présente une activité faible compara- tivement aux autres composés. Exemple 17: Affinité des composés pour les sites de la PCP et de la TCP. Dans cet essai, on détermine l'affinité de certains composés des exemples 5 à 15 par des expériences de compétition sur des homogénats de cerveaux de rats. Les ligands radioactifs utilisés sont (3H)PCP à une activité de 45Ci/mmol et (3H)TCP à une activité de 62Ci/mmol. On incube une concentration fixe du ligand tritié (lnmol) en présence de concentrations crois- santes du composé à tester et de l'homogénat (lmg de protéine par ml) en milieu tampon 5OmM Hepes-Tris à pH 7,7, à 25 C. A l'équilibre, la concentration du composé testé empêchant la fixation de 50% du ligand tritié (IC50) reflète l'affinité de ce dernier pour le récepteur considéré. Les résultats obtenus sont donnés dans le tableau 2 joint. Au vu de ces résultats, on constate que les composés de l'invention sont très actifs car les concentrations nécessaires pour empêcher la fixa- tion de 50% du ligand tritié sont très faibles. Exemple 18: Test d'inhibition de la prise striatale synaptosomale de (.H)DA. Ce test est effectué selon la méthode utili- sée par Vignon et Lazdunski en opérant de la façon suivante. Des rats Wistar pesant 200-250g sont tués par dislocation cervicale. Leurs cerveaux sont raptide- ment prélevés et les striata sont disséqués sur de la glace. Les striata sont ensuite homogénéisés avec un homogénéiseur Potter en verre Téflon dans 50 volumes de tampon Tris HCl 10mM contenant 0,32M de sucrose, à pH 7,4, et ils sont centrifugés à 1000g pendant min. Les surnageants sont centrifugés de plus à 10000g pendant 20min. Les culots résultants P2 conte- nant les synaptosomes bruts sont utilisés sans purifi- cation supplémentaire. On équilibre les synaptosomes avec le composé à tester pendant 30min à 30 C dans un milieu de Ringer (mM 140NaCl, 5KCl, 2,6CaCl2, 1,3MgS04, 10 Tris-HCl, pH = 7,4) + 200uM de pargyline. On ajoute alors de la dopamine marquée (3H)DA à une concentration finale de 5nM pendant min à 30 C, et on interrompt la prise par filtration de l'incubat (150pl) sur des filtres GF/B. La prise non spécifique est mesurée à 4 C dans des incubations parallèles et est soustraite de la prise totale à C. La IC50 est la concentration en composé qui empêche 50% de la capture spécifique par rapport au témoin en l'absence d'inhibiteur. Les résultats obtenus sont donnés dans le tableau 2 joint. Exemple 19: Test de compétition avec la 3H-QNB pour le récepteur muscarinique cholinergique cérébral. Dans ces essais, on fait incuber une concen- tration fixe de ligand tritié (3H-QNB) en présence de concentrations variables des composés à tester et d'un homogénat de cerveau de rat à lmg de protéine par ml environ. La concentration de composé empêchant la fixation de 50% du ligand tritié (IC50) est une mesure de l'affinité de ce composé pour le récepteur muscari- nique cholinergique cérébral. La fixation des ligands tritiés à l'homogénat est déterminée par la technique de filtration rapide sur les filtres de verre Whatman GF/B. Les résultats obtenus sont donnés dans le tableau 2 joint. Au vu de ces résultats, on constate que les composés testés ont pour la plupart très peu d'affinité pour le récepteur cholinergique muscarini- que. Exemple 20: Test de compétition avec la H3DHM pour le récepteur des opiacés. Dans cet essai, on fait incuber une concentration fixe de morphine marquée 3H-DHM en présence de concentrations variables du composé testé et d'un homogénat de cerveau de rat. La concentration de composé empêchant la fixation de 50% de 3HDHM (IC50) est une mesure de l'affinité du composé pour le récepteur des opiacés. Le résultat obtenu est donné dans le tableau 2 joint. Dans le tableau 2 joint, on a reporté égale- ment les résultats obtenus avec la PCP et la TCP, ainsi que les rapports H3DA/3H-TCP, 3HQNB/3H-TCP, et 3HDHM/3HTCP obtenus avec les différents composés testés. Au vu de ce tableau, on constate que la sélectivité des composés de l'invention pour le site PCP par rapport aux sites DA, QNB et DHM est beaucoup plus importante que dans le cas de la PCP et de la TCP. On remarque notamment que le rapport 3HDA/3H- TCP est supérieur r 100 avec les composés utilisés dans l'invention alors qu'il n'est respectivement que de 2,5 et-25,39 pour la PCP et la TCP. Exemple 21. Cet exemple illustre l'effet des arylcyclo- hexylamines de l'invention sur des cultures "in vitro" de cellules de cerveaux de rats comme neuroprotecteur contre les atteintes aiguës provoquées par la présence de glutamate. On prépare des cultures de neurones corticaux et hippocampaux à partir de foetus de rats âgés de 17 à 18 jours. Les hémisphères ou les hippocampes sont disséqués et immergés dans un tampon contenant de l'EDTA (Versène) pendant 10min. Les tissus sont ensuite dissociés mécaniquement dans une solution saline PUCK libre de calcium et de magnésium et centri- fugés à 70g pendant 10min. Le culot de centrifugation est remis en suspension dans un milieu de culture constitué de 60% du milieu essentiel minimal de Eagle (MEM), 25% d'une solution saline de Hank, 5% de sérum humain, 5% de sérum de foetus de veau, 5% d'extrait d'embryon, qui sont complémentés avec 6% de glucose. 263922S On introduit Les ceLluLes à une densité de 106 celLules par ml dans 24 puits Well revêtus préalablement avec de la polylysine D. On laisse croitre les cultures pendant 3 semaines, 1/3 du milieu de culture étant renouvelé tous Les 3 jours. On poursuit ensuite l'essai de la façon suivante. On ajoute du glutamate dissous dans 10>l de MEM au milieu afin d'atteindre une concen- tration finale en glutamate de 5.10-4M. Après une exposition de 5min, on change le milieu. Pour l'étude des dérivés antagonistes du glutamate, on ajoute au milieu de culture le composé à tester dans lOpl de MEM de façon à obtenir une concentration finale de 200, 20, ou 0,2.10-6M en composé. Cinq minutes plus tard, on ajoute du glutamate au milieu, puis on renouvelle le milieu après une exposition de 5min. On examine alors les cultures protégées et non protégées, et on les photographie à des intervalles allant de 30min à 24h. Après 3 semaines de culture, les neurones corticaux apparaissent comme un mélange de cellules brillantes allant d'une taille petite à une taille moyenne o Les noyaux et les nucLéoles sont quelquefois brillants. Elles croissent au sommet d'une monocouche de cellules plates qui sont en majorité des astrocytes immunoréactifs à la protéine acide fibrillaire. Dans les cultures de neurones hippocampaux et de neurones corticaux, une exposition aiguë au glutamate a pour effet un gonflement rapide associé à une granularité augmentée des corps des cellules. Un tel phénomène est également observé dans les cellules témoins après un rapide lavage. Après 3h d'exposition au glutamate, les cellules se rétractent et une nécrose progressive des neurones est observée et 24h après il y a une perte maximale des neurones. Dans la plupart des cas, les seuls neurones survivants sont trouvés après 24h dans les cultures de cortex alors que Les neurones hippocampaux sont complètement endommagés. En revanche, lorsqu'on ajoute aux cultures pmol du composé n 2 de l'invention, les cultures ne sont que très peu endommagées. Avec des quantités de 2pmol du composé n0 2, on obtient seulement une protection limitée et avec 0,2pmol aucune protection comme l'indiquent les résultats du tableau 3 obtenus 24h après une exposition de Smin au glutamate. Cet effet protecteur est observé contre le gonflement aigu qui est moins intense et la nécrose qui est complètement bloquée. Apres 24h, alors que la nécrose est maximale dans les cultures traitées au glutamate, les cultures de cellules hippocampales et corticales apparaissent saines comme les cultures témoins. Ainsi, le composé de l'invention a un effet protecteur efficace sur les neurones hippocampaux et corticaux contre les dommages dûs au glutamate "in vitro". Ces résultats confirment l'effet protecteur des antagonistes non compétitifs du NMDA. En ce qui concerne le mécanisme mis en oeuvre pour cette protection, on suppose qu'un afflux massif de Ca2+ produit par l'activation des récepteurs NMDA est impliquée dans la mort des neurones. Les composés utilisés dans l'invention atténuent ou bloquent l'afflux de Ca2+ et ses consé- quences Léthales. Cet effet protecteur doit de plus être probablement renforcé par la présence du glutamate libéré de façon exogène ou endogène, et les composés sont donc très efficaces pour le traitement des attein- tes aiguës dûes à la présence du glutamate. TA LEAU 1 SPECTRES DE RMN DU 13C 6 I'46 X 6 1 'RI 6" 5"- R2 2__.'2 R, COMPOSES Ne 1* 2* 3* 4 4 6 7* 8* 9 10* 11* 1 70,6 69,2 69,8 60,5 58,8 60,5 71,3 69,9 63,5 68,8 73,4 2 30,5 32.7 33.3 33,5 35,6 33,5 25,4 33,Z 30,5 32,8 75,8 3 22,4 22,6 22,9 22,1 29,7 22,1 28,3 23,0 28,9 31,0 33,1 4 24,3 23,7 23,9 26,2 32,2 26,2 25,7 23,9 19,8 30,3 24,7 22,4 2 6 22,9 22,1 29,6 22,1 28,3 23,0 22,8 31,0 22,6 6 30.5 32.6 33.0 33. 3 35.4 33.0 25,4 33,2 26,9 32,8 33,1 1' 130,1 135,6 135,9 140,3 147,6 140,3 132,7 136,0 137,3 136,3 133,7 2" 46,5 43.7 49,7 48,7 49,0 48,7 50,1 48,9 46,0 47,0 53,2 3" 30-3 119,4 36,6 36,1 38,9 36,1 36,8 34,5 27,0 22,6 23.5 * 4" 29,3 125,5 25,3 25,1 25,3 25,1 25,7 26,1 25,2 22,1 22,6 " 30.3 23,2 22,2 27,4 27,6 27,4 22,2 21,7 27,0 22,6 24,1 6" 46,5 42,9 46,8 46,1 46,0 46,1 47,0 46.4 46,0 47,0 50,2 R2 - - - - 22,1 - 17,7 - 13,7 21,0 - R3 20,4 - 64,2 66,3 67,0 67,0 64,2 47.5 - - - CO - - -__ 170,6- - - - CH3 - - - - - 20,6 - - - *: composé sous forme de chltorhydrate : les vateurs soulignées peuvent être interverties. Ch09'7Z úúú 6ú'52 L 12 9'L ú90'0 920'0 ú'Z d3l IN Wbn Oç0ú1 OSL S'Z 9Z 0ú S'0 0Z'0 SZ' O d3d NO Cu S'90L S2L ZLdL L LL Z9 S0L ú'6Z 9'ú 7ú0'0 7L'0 0'6L 0L ú9Z Lú9 SL9 0'S 2zL 6'z 6L0'0 O'0 S 'ú 6 ú551 Ozu 9S'0 OSL 2 29L 09i 5's z ZZL 0Lt L.L 9 01î 68Z 0LL 8ú'0 o 2 OOL OOL D'A. gL SZL 06 zoo q'o 8ZL 06 1 '0899'0 ú L96 S2 L'7 920'0 ZL0'0 Os' Z _ -2L - O'S - 9'O OZ L d3lHú d3lHú d3l-H (W9-O) (H9-0L) (W9-0l)0O)(W9_0-) (9.0L/)w) u sodwc dH d3o- 3 0o21 03s osai /WHOHú /SNOHú /VaHú WHQHú ONOHú V Hú d3lHú d3d-Hú Os3a 2nv 3 1 v 1 T A B L E A U 3 _________________ Composé n 2 200 pM 20 pM 2 pM 0,2 pM Traitement de cellu- les corticales - + ++ Traitement de cellu- les hippocampales - + ++ ++: dommage sévère +: protection partielle t -: aucun dommage.\ - aucun dommage. -n REVENDICATIONS 1. Composition pharmaceutique pour la neuro- protection, caractérisée en ce qu'elle comprend une arylcyclohexylamine répondant aux formules: Rl R' ou R2 R2 R3 (I) (II) dans lesquelles: R1 représente R4 ou avec R4 étant un atome d'hydrogène, un atome de fluor ou un radical méthyle, R2 représente un atome d'hydrogène, le radical OH ou le radical CH3, et R3 représente un atome d'hydrogène ou le radical CH2R5 avec R5 représentant H, OH, Cl ou CH3COO, à condition que R2 et R3 ne soient pas tous deux un atome d'hydrogène, ou un sel d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable de cette arylcyclohexyla- mine 2. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisée en ce que L'arylcyclo- hexylamine répond à la formule: R4 N R3 -dans laquelle: R3 représente le radical méthyle ou le radical CH2R5 avec R5 représentant OH ou CH3COO, et R4 représente un atome d'hydrogène. 3. Composition pharmaceutique selon -la revendication 1, caractérisé en ce que l'arylcyclo- hexylamine répond à la formule: R4 1 0 y z & (IV) R2N R3 dans laquelle: R2 est le radical méthyle, R3 est le radical CH2R5 avec R5 représentant OH, et R4 est un atome de fluor. 4. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'arylcyclo- hexylamine répond à la formule: (y) HO 5. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'arylcyclo- hexylamine répond à la formule: R2 N dans laquelle R2 est Le radical méthyle. 6. Composition pharmaceutique selon La revendication 1, caractérisée en ce que L'aryLcycLo- hexylamine répond à la formule N R3 dans laquelLe R3 est le radical CH2R5 avec R5 représen- tant OH ou Cl. 7. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'arylcycLo- hexylamine répond à la formule (VIII) R2 N\ R3 dans Laquelle R2 est le radical méthyle et R3 est le radical CH20H. 8. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'arylcyclo- hexylamine répond à la formule: F - Es (lx) N revendications 1, 3, 4, 5 et 7, caractérisée en ce que R2 est en position para.