FR 2645440 A1 19901012 FR 8904526 A 19890406 COMPOSITION POUR FAVORISER LA CICATRISATION. La présente invention concerne une composi- tion pour favoriser la cicatrisation des tissus animaux vivants, en particulier la cicatrisation der- mnique chez l'homme. On sait qu'il est très important d'obtenir une cicatrisation rapide des plaies ayant atteint le derme, et d'obtenir rapidement des cicatrices ayant une force de rupture élevée afin d'éviter toute réouverture de la plaie. La mobilité des patients après des opérations ou des accidents est ainsi plus rapidement assurée. Selon la présente invention, il a été trouvé que certaines vésicules nonioniques permettaient d'accélérer notablement la cicatrisation. Les vésicules non-ioniques sont, comme on le sait, délimitées par des feuillets constitués de lipides non-ioniques, lesdits feuillets entourant un espace fermé. La présente invention concerne une composi- tion pour favoriser la cicatrisation, caractérisée par le fait qu'elle contient, dispersées dans une phase aqueuse D, des vésicules obtenues à partir d'au moins un lipide non-ionique de formule R04-CH2-CHOH-CH2I 0---H (I) 2 2 2 formule dans laquelle R représente soit un radical alkyle en C16-Cl8 ou un mélange de plusieurs de ces radicaux, soit un radical R'CO, R' étant un radical alkyle en C 15 - C17 ou un mélange de plusieurs de ces. radicaux, ledit lipide non-ionique étant associé à du cholestérol et la concentration des lipides vésiculaires totaux dans la composition étant de 5 à % en poids, de préférence, de 6 à 10 X en poids. Le lipide non-ionique de formule (I) peut - 2645440 avantageusement être également associé -à du dicétylphosphate ou du tétradécylphosphate, notamment sous forme de sel de sodium, en complément au cholestérol. Il convient de préciser que les lipides vésiculaires totaux sont constitués par le(s) lipide(s) non-ionique(s) de formula (I), le cholestérol et, éventuellement, le dicétylphosphate ou le tétradécylphosphate. Les vésicules sont, de préférence, obtenues à partir d'un mélange de lipides contenant en poids 40 à 75 % de lipides de formule (1), 20 à 50 X de cholestérol et 0 à 10 %, de préférence 5 à 10 %, d'un dicétylphosphate ou d'un tétradécylphosphate. Les vésicules ont, de préférence, des diamètres moyens compris entre 25 et 5.000 nm, notam- ment entre 100 et 500 nm et ils présentent avan- tageusement un coefficient de polydispersité inférieur à,4. Les vésicules non-ioniques sont, de façon connue, délimitées par une ou plusieurs couches bimoléculaires ou multimoléculaires d'un lipide non- ionique, qui encapsulent une phase aqueuse E. Elles sont dispersées dans une phase aqueuse de dispersion D. Selon la présente invention, les phases aqueuses E et D peuvent être différentes mais sont, de préférence, identiques. Selon l'invention, la phase aqueuse E ét/ou la phase aqueuse D peuvent contenir au moins un addi- tif cosmétique tel que notamment des hydratants, des adoucissants, des agents gélifiants, des conserva- teurs, des filtres et/ou au moins un actif pharmaceu- tique tel que des antibiotiques ou des agents anti- inflammatoires. Les feuillets lipidiques peuvent contenir au moins un additif liposoluble cosmétique et/ou au moins un additif liposoluble pharmaceutiquement actif. Les vésicules non-ioniques des compositiQns selon l'invention sont préparées par tout procédé connu permettant d'obtenir une dispersion de vésicules en phase aqueuse, dispersion que l'on soumet ensuite éventuellement à un traitement aux ultra-sons pour réduire la taille des végicules. -Un des procédés de production de vésicules proposé par Bangham (J.Mol. Biol.,13, 238 (1965)) consiste à former sur une sur- face, par évaporation du solvant d'une solution de lipides, un film mince de substance lipidique sur lad- ite surface, à mettre la surface revêtue du film en contact avec la phase aqueuse et à agiter pour obtenir une dispersion. Selon FR-A-2 221 122, on a aussi pro- posé d'ajouter un lipide à une phase aqueuse, de chauffer légèrement le mélange puis de l'agiter éner- giquement par secousses. Selon FR-A-2 315 991, on met- en contact un lipide susceptible de gonfler dans l'eau et une phase aqueuse pour former une phase lamellaire, on ajoute ensuite une phase de dispersion et on agite énergiquement. D'autres procédés sont décrits par ail- leurs, notamment dans FR-A-2 543 018 et peuvent aussi être utilisés. Pour modifier la phase aqueuse E, on introduira les additifs convenables au cours de la phase de gonflement. Les compositions selon l'invention sont administrées par voie topique sur la partie de la peau comportant la plaie. Elles sont, par exemple, appliquées à raison de 2 à 8 mg/jour/cm2. Les essais ci-après, donnés à titre purement illustratif et non limitatif, permettront de mieux comprendre l'invention. Les différents essais ont été effectués sur des lots de 40 rats wistar femelles de 230 g, sur le dos desquels on a effectué, au jour J, une incision dermique longue de 1 cm. On a ensuite effectué cinq applications par voie topique du produit de cicatris a- tion testé, au cours de chacun des jours J+5 à J+9. Les applications ont été de 0,2 mlJjour/rat pour une surface de 50 cm2. La mesure des forces de rupture des cica- trices a ensuite été effectuée au jour J+12 à l'aide du dynamomètre Instron. On a calculé, à partir de la force de rupture, l'activité du produit traité qui est exprimée en % d'augmentation de la force de rupture par rapport à un essai témoin sans application de la composition. L'activité du témoin est donc 0 X par définition. EXEMPLE 1 Les essais ont été effectués avec des compo- sitions contenant 8 % de lipides vésiculaires totaux dans l'eau. Les vésicules ont été préparées par le procédé décrit dans le brevet français 2 315 991 à partir de mélanges lipidiques contenant en poids 47,5 % de lipides non-ioniques soit A, soit B, soit C, 47,5 % de cholestérol et 5 % de dicétylphosphate de sodium. Le lipide non-ionique: A a pour formule R-O±E-CH2-CHOH-CH20 --H o R est C H33 2 2 2 16 33 B a pour formule R-CO-O4CH2-CHOH-CH20-H H 2 2 2 o R est C15H31 H31 C a pour formule R-O(CH2-îH-O)H o R est C1633 et H2OH o n (valeur moyenne statistique) = 3 Il faut noter que les compositions contenant des vésicules formées avec les lipides non- ioniques A et P sont incluses dans la présente invention et que celles contenant des vésicules formées avec le lipide non-ionique C ne fait pas partie de l'invention. On a obtenu les résultats donnés dans le tableau I (page 6). Les vésicules préparées avec le lipide C donnent un résultat non significatif compte- tenu des Imprécisions de mesure. Par contre, avec les lipides A et B on obtient une amélioration très signi- ficative de la cicatrisation par rapport au témoin non traité. Cette activité cicatrisante est supérieure à celle d'une solution d'acide acéxamique à 5 % en poids ou d'une solution de collagène humain à 0,1 X en poids. EXEMPLE 2 Des essais comoaratifs ont été effectués avec des compositions contenant 8 % en poids de lipides vésiculaires totaux dans l'eau; les vésicules contenant en poids 47,5 % de lipide non-ionique A ou d'alcool chimylique, 47,5 % de cholestérol et 5 % de dicétylphosphate de sodium. L'alcool chimylique est un éther de glycérol de formule: R-O-CH2CHOHCH20-H avec R = C16H33 et il constitue un agent cicatrisant et anti- inflammatoire connu susceptible de former des vésicules. Les résultats sont donnés dans le Tableau Il ci-après (page 7). uoqeuDTJTu9Ts ep snid e,u squelnuwno sap apoqqw el jed aaInoleD 'satln3Tsa)A sap uaeow ujjjweTp np analeA el anb alla Isa aTspadsTpIod el i'o ap e8ap-nV ajajweTP aaw ai quo SaInDoTsaA soi salnol Is 0 o lea sa II uaxoW alJawnep inal e îuenb sainTlsaA sap qa uaOowoqt quesTiJaqéaeD ainsaw aun Isa sxaadsTpgTod ap 4uae3jjaoD al (I) {doTqeDIdde sues) % 0 6'LL + L' OE- uTowai % 6l + L'5Z + Z'09E úZ' wu OL D % ú9 + O'oE + 0'S6 Od'O Wu Eú S % E5 '81+ 5 Y'9g 8Z'O WU 9úl V aJowauep ua salnOTsGA ND ua Tadsptod ap sap uaàow 9,1TATIV aanqdni ap aoijo (I) DUaTFJJaoDGJ3aweTa qslq apTdT- - I nealqui - - Tableau 1I- Lipide Diamètre moyen Coefficient de Activité des vésicules polydispersité en diamètre A 134 nm 0,23 + 30 % Alcool chimylique 180 nm 0,18 + 14 % Témoin (aucune application) - 0 % Le résultat avec l'alcool chimylique donne des valeurs non significatives. Par contre, avec le lipide A, on constate une amélioration significative de la cicatrisation. FXEMPLE 3: Fffet de taille des vésicules et influence du procédé de préparation de celles-ci sur l'activité cicatrisante. On a effectué trois essais avec des composi- tions contenant 8 X en poids de lipides vésiculaires totaux dans l'eau; les vésicules étaient préparées A partir de mélanges lipidiques contenant en poids 47,5 % de lipide non-ionique A, 47,5 % de cholestérol et 5 % de dicétylphosphate de sodium. Les essais 1 et 3 ont été effectués avec des vésicules non-ioniques préparées par un procédé connu, par exemple celui de FR-A-2 315 991, mettant en oeuvre une fusion des lipides par chauffage suivie' d'une dispersion dans l'eau par secouage. La'dispersion (1) - 2645440 est testée telle quelle, la dispersion (3) est affinée aux ultrasons. L'essai 2 a été effectué avec des vésicules non-ioniques préparées par le procédé avec formation d'un film par évaporation de solvant. Les résultats sont consignés dans le Tableau II: - Tableau III- Essai Diamètre moyen Coefficient'de Activité des vésicules polydispersité en diamètre 1 > 1000 nm hétérogène + 26 % en taille 2 189 nm 0,33 + 43 % 3 183nm 0,31 + 34 % Témoin - - 0 % (aucune application) On note que l'activité des vésicules non- ioniques augmente lorsqu'on diminue la taille des vésicules. Par contre, le procédé de fabrication n'a pas d'influence significative. EXEMPLE 4 On a mis en solution, à raison de 8 % en poids dans le dipropylèneglycol, un mélange contenant 47,5 % en poids de lipide non-ionique A, 47,5 X en poids de cholestérol et 5 % en poids de dicétylphosphate de sodium. Dans ces conditions, les lipides ne forment pas de vésicules. L'essai de cicatrisation montre que les lipides non-ioniques de l'invention, seuls ou associés au cholestérol et au dicétyl phosphate, mis en solu- tion dans un solvant, n'ont pas d'activité cica- trisante. EXEMPLE 5 On a mis en solution, à raison de 3,8 % en poids, dans différents solvants, les lipides non- ioniques A ou B. Dans ces conditions, ils ne. forment pas de vésicules. Les essais de cicatrisation ont donné les résultats consignés dans le tableau IV. On obtient une activité de O % comme c'est d'ailleurs aussi le cas avec des animaux traités avec le solvant seul. - Tableau IV- Lipide Solvant Activité A Méthyléther du dipropylène glycol (*) % B Méthyléther du dipropylène glycol c*) 0 % A Dipropylène glycol 0 % Rien Méthyléther du dipropylène glycol 0 % Rien Dipropylène glycol 0 % Témoin (aucune application) 0- % I (*) Vendu par la Société "DOW CHEMICAL" sous la dénomination commerciale "DOWANOL DPM". Ces essais montrent que, lorsque les lipides non-ioniques A et B ne sont pas sous forme de vésicules, ils n'ont pas d'action cicatrisante. EXEMPLE 6: Préparation d'une lotion cicatrisante. Dans un bêcher en acier inoxydable, on pèse les produits: - Lipide amphiphile non-ionique de formule A défini dans l'exemple 1 3,8 g Cholestérol 3,8 g - Dicétyl phosphate de sodium 0,4 g On réalise le mélange de ces trois produits par fusion à la température de 110'C sous atmosphère d'azote, puis on ramène la température du mélange fondu à 90'C. On ajoute 20 g d'eau déminéralisée. On homogénéise le mélange obtenu à la température de 90'C. On ajoute alors 0,3 g de parahydroxybenzoate de méthyle dissous dans S1,3 g d'eau déminéralisée. A la température de 70'C, on homogénéise le mélange à l'aide d'un ultradisperseur "Virtis" jusqu'à ce que la taille moyenne des vésicules obtenues soit de 200 nm. On ajoute enfin les substances suivantes: - Mélange d'acides carboxyvinyliques commercialisé sous la dénomination commerciale "Carbopol 940" par la 0,2 g Société GOODRICH - Triéthanolamine 0,2 g - Eau déminéralisée 20,0 g La lotion ci-dessus est appliquée sur une plaie à raison de 3 mg/ jour/cm2. On observe qu'au bout de 12 jours, la phase aiguë de la cicatrisation est terminée. EXEMPLE 7: Gel cicatrisant Dans un bécher en acier inoxydable, on pèse les produits suivants: - Lipide amphiphile non-ionique de formule A défini dans I'exemple 1. 5,0 g - Cholestérol 5,0 g On réalise le mélange de ces deux produits par fusion à la température de li C sous atmosphère d'azote, puis on ramène la température du mélange fondu à 90'C. On ajoute alors 20 g d'eau déminéralisée. On homogénéise le mélange obtenu à la température de 90'C. On ajoute alors 0,3 g de parahy- -droxybenzoate de méthyle dissous dans 48,88 g d'eau déminéralisée. A la température de 70'C, on homogénéise le mélange à l'aide d'un ultradisperseur "Virtis" jusqu'à ce que la taille moyenne des vésicules obtenues soit de 500 nm. On ajoute enfin les substances suivantes: - Mélange d'acides carboxyvinyliques commercialisé sous le nom commercial de "Carbopol 940" par la Société GOODRICH 0,42 g - Triéthanolamine 0,4 g - Eau déminéralisée 20 g Le gel ci-dessus est appliqué sur une plaie à raison de 2 mg/jour/ cm2. On observe qu'au bout de 12 jours, la phase aiguë de la cicatrisation est terminée. EXEMPLE 8: Lotion cicatrisante Dans un bêcher en acier inoxydable, on pèse les produits: - Lipide amphiphile non- ionique de formule A défini dans l'exemple 1. 3,25 g - Cholestérol 1,25 g - Dicétyl phosphate de sodium 0,50 g On réalise le mélange de ces trois produits par fusion à la température de 110'C sous atmosphère d'azote, puis on ramène la température du mélange 'à 'C. On ajoute alors 10,0 g d'eau déminéralisée. On homogénéise le mélange obtenu à la température de 90'C. On ajoute alors 0,3 g de parahy- droxybenzoate de méthyle dissous dans 84,7 g d'eau déminéralisée. A la température de 70'C, on homogénéise le mélange à l'aide d'un ultradisperseur "Virtis" jusqu'à ce que la taille moyenne des vésicules obtenues soit de 100 nm. La dispersion obtenue est fluide et peut Otre appliquée à partir d'un flacon pompe. La lotion ci-dessus est appliquée sur une plaie à raison de 4 mg/ jour/cm2. On observe qu'au bout de 12 jours, la phase aiguë de la cicatrisation est terminée. EXEMPLE 9: Lotion cicatrisante ' Dans un ballon rond en verre de 1 litre, on dissout, dans 200 ml d'un mélange de solvants chloroforme/méthanol dans le rapport 2/1, les produits suivants: - Lipide amphiphile non- ionique de formule B défini dans l'exemple 1. 3,8 g - Cholestérol 3,8 g - Dicétyl phosphate de sodium 0,4 g On évapore ensuite les solvants à l'aide d'un évaporateur rotatif et on élimine les dernières traces de solvants par mise sous la pression réduite d'une pompe à palettes pendant une heure. On met en contact l'association de lipides obtenue avec 20 g d'eau déminéralisée mélangée à 3 g de glycérine. On homogénéise le mélange à la température de 90'C. On ajoute ensuite: Parahydroxybenzoate de méthyle 0,3 g - Eau déminéralisée 48,3 g On soumet le tout à l'action d'un ultra- disperseur du type "Virtis" jusqu'à ce que la taille des vésicules obtenues soit inférieure à 0,2 micron. On ajoute enfin les substances suivantes: - Mélange d'acides carboxyvinyliques - 2645440 commercialisé sous la dénomination commerciale "Carbopol 940" par la Société GOODRICH 0,2 g - Triéthanolamine 0,2 g. - Eau déminéralisée 20,0 g La'lotion ci-dessus est appliquée sur une plaie à raison de 3 mg/jour /cm2. On observe qu'au bout de 12 jours, la phase aiguë de la cicatrisation est terminée. EXEMPLE 10: Gel cicatrisant Dans un bécher en acier inoxydable, on pèse les produits suivants: - Lipide amphiphile non-ionique de formule A 11,875 g - - Cholestérol 11,875 g - Dicétyl phosphate de sodium 1,250 g On réalise le mélange de ces trois produits par fusion à la température de 110'C sous atmosphère d'azote, puis on ramène la température du mélange fondu à 90'C. On ajoute 50 g d'eau déminéralisée. On homogénéise le mélange obtenu à la température de 90'C. On ajoute alors 0,3 g de parahy- droxybenzoate de méthyle dissous dans 24,7 g d'eau déminéralisée. A la température de 70'C, on homogénéise le mélange à l'aide d'un ultradisperseur "Virtis" jusqu'à ce que la taille moyenne des vésicules obtenues soit inférieure à 1000 nm. Le gel ci-dessus est appliqué sur une plaie à raison de 2 mg/ jour/cm2. On observe qu'au bout de 12 jours, la phase aiguë de la cicatrisation est terminée. 26ô5440 REVENDICATIONS 1 - Composition pour favoriser la cicatrisa- tion, caractérisée par le fait qu'elle contient, dispersées dans une phase aqueuse D, des vésicules obtenues à partir d'au moins un lipide nonionique de formule ROD4-CH2CHOHCH2Li l, (I) formule dans laquelle R représente soit un radical alkyle en C16-C18 ou un mélange de plusieurs de ces radicaux, soit un radical R'CO, R' étant au moins un radical alkyle en C15- C17 ou un mélange de plusieurs de ces radicaux, ledit lipide non-ionique étant associé A du cholestérol et la concentration des lipides vésiculaires totaux dans la composition étant de 5 à 25 % en poids, de préférence, de 6 à 10 % en poids. 2 - Composition selon la revendication 1, caractérisée par le fait que le.lipide non-ionique est également associé au dicetylphosphate ou au tétracétylphosphate, de préférence sous forme de sel de sodium. 3 - Composition selon les revendications 1 ou 2, caractérisée par le fait que les vésicules sont obtenues à partir d'un mélange de lipides contenant en poids 40 à 75 % de lipides de formule 1, 20 à 50 X de cholestérol et 0 à 10 %, de préférence 5 à 10 %, - d'un dicétylphosphate. 4 - Composition selon l'une des revendica- tions I à 3, caractérisée par le fait que les vésicules ont des diamètres moyens compris entre 25 et 5000 nm, de préférence entre 100 et 500 nm. - Composition selon l'une des revendica- tions 1 à 4, caractérisée par le fait que les vésicules ont, de préférence, un coefficient de polydispersité inférieur à 0,4. 6 - Composition selon l'une des revendica- tions t à 5, caractéris4e par le fait que la phase aqueuse E encapsulée dans les vésicules et la phase de dispersion D sont identiques. 7 - Composition selon l'une des revendica- tions 1 à 6, caractérisée par le fait que la phase aqueuse E et/ou la phase aqueuse D contiennent au moins un additif cosmétique et/ou au moins un additif pharmaceutiquement actif. 8 - Composition selon l'unp des revendica- tions 1 à 7, caractérisée par le fait que les feuil- lets lipidiques contiennent au moins un additif lipo- soluble cosmétique et/ou au moins un additif liposolu- ble pharmaceutiquement actif.