FR 2645711 A1 19901019 FR 8904834 A 19890412 -j1 Procedé de lutte contre l'Eudemis et aCochylis de la vigne. mettant en oeuvre un baculovirus de polyedrose nucleaire La présente invention a pour obJet un procédé de lutte contre Lobesia botrana et Eupoecilia ambiguella, ce procédé mettant en oeuvre un baculovirus de polyèdrose nucleaire. Lobesia btrana et Eupoecilia ambiguella sont des ravageurs bien connus de la vigne, encore appelés respectivement Eudémis de la vigne et Cochylis de la vigne. Dans le cadre de la lutte contre ces ravageurs, on a tait appel aux insecticides chimiques dont la toxicité à l'égard des vertébrés en général et de l'Homme en particulier, oblige toutefois à de sévères précautions d'emploi. Aussi, le but de la présente invention est il de proposer un insecticide d'utilisation beaucoup plus aisée et plus sure pour l'environnement. Cette invention repose sur la mise en évidence surprenante que le virus naturel (baculovirus de polyèdrose nucléaire) de la noctuelle Mamestra rssicae (parasite du chou), lorsqu'il est ingéré par les chenilles Lobesia botrana et Eupoecilia ambiguella, provoque une mortalité importante de ces chenilles. En consequence, un premier objet de la présente invention, réside dans un procédé de lutte contre les ravageurs de la vigne, Lobesia botrana et Eupoecilia ambiguella, qui se caractérise en ce qu'il comprend le traitement de la vigne par le baculovirus de la polyedrose nucléaire de la noctuelle Mamestra brassicae. Les baculovirus ayant généralement une activité virale très spécifique, il est tout à fait inattendu que le baculovirus particulier mis en oeuvre dans la présente invention, ait une activité à l'égard de ravageurs, les chenilles Lobesia botrana et Eupoecilia ambiguella, aussi différents de la chenille de la noctuelle Mamestra rassicae, puisque Lobesia botrana et Eupecilia ambguella dune part, et amestra rassicae d'autre part, occupent des positions très éloignés dans la classification systématique. Au sujet du baculovirus de la polyèdrose nucléaire de Namestra braic, on précisera qu'il a fait l'objet de plusieurs études fondamentales qui ont permis de le caracteriser. On peut citer par exemple JURKOVICOVA M., L. VAN TOUX, S. S. SUSSENBACH et J. TER SHEGGET dans Virology, vol. 93, 1979, pages 8- 19 ainsi que VLAK J. et A. GRONER dans Journal for Invertebrate Pathology, vol. 35, 1980, pages 269-278. 26457 11 -2- En outre, une souche de ce baculovirus a fait l'objet d'un dépôt dans la Collection Nationale de cultures de Xicroorganismes de l'Institut Pasteur (Paris) le 1- septembre 1982 sous le numéro I-204. On ajoutera encore qu'un procédé d'isolement dudit baculovirus a été décrit en détail dans la demande de brevet français No 87 17748. Par ailleurs, la Demanderesse a déjà eu l'occasion ces constituants pris seuls. Or, la Demanderesse vient de mettre en évidence que le traitement de la vigne infestée par Lobesia botrana et/ou Eupoecilia ambiguella, conjointement par le baculovirus défini ci-dessus et un pyréthrinoïde de synthèse, en particulier l'esfenvalérate, conduit à un taux de mortalité de Lobesia botrana et Eupoecilia ambiguella supérieur à la somme des taux de mortalité obtenus avec les principes actifs utilisés seuls. La mise en évidence de l'efficacité particulièrement intéressante d'un tel traitement contre Lobesia botrana et Eupoecilia ambiguella est tout à fait surprenante compte-tenu de la nature très différente des lépidoptères noctuidae spécifiquement mentionnés dans le brevet français No 8215097 et de Lobesa botrana et Eupoecilia ambiguella du fait de leur position très éloignée dans la classification systématique et de la grande spécificité de l'action virale des baculovirus de polyèdrose nucléaire. Il apparait donc que rien ne pouvait laisser supposer a priori qu'un traiteaent au moyen des compositions décrites dans ledit brevet français et en particulier d'une composition comprenant ledit baculovirus et l'esfenvalérate, pouvait présenter l'intérêt tout particulier souligné ci-dessus contre Lobesia botrana et Eupoecilia ambiguella. En conséquence, un second objet de la présente invention consiste dans un procédé de lutte contre Lobesia botrana et Eupoecilia ambiguella, comprenant le traitement de la vigne par le baculovirus de la polyèdrose nucléaire de Xamestra brassicae et au moins un pyréthrinoide de synthèse, ledit baculovirus 3- et ledit pyrethrinoïde pouvant être mis en oeuvre, soit conjointement et de préférence sous la forme d'un mélange, soit successivement c'est-à-dire appliqués successivement sur la vigne à traiter. Un troisième objet de la présente invention réside dans l'utilisation du baculovirus de la polyédrose nucléaire de Xamestra brassicae, éventuellement en mélange avec au moins un pyréthrinoïde de synthèse pour la préparation d'un insecticide utile pour la lutte contre les insectes ravageurs de la vigne, Lobesia botrana et Eupoecilia ambiguella. Dans le but de réaliser un traitement aussi efficace que possible, on préfère selon l'invention choisir le pyréthrinoïde de synthèse parmi les pyréthrinoïdes photostables. A titre d'exemples de pyréthrinoïdes de synthèse photostables, on citera les composés de formule R1 I A - CO 2- CH dans laquelle: - R represente un atome d'hydrogène, un radical alkyle renfermant de 1 à 4 Do atomes de carbone, un radical alcynyle renfermant de 2 à 8 atomes de carbone ou un groupement nitrile, - Ri et Rz représentent tous deux un atome d'hydrogène, ou représentent l'un un atome d'hydrogène et l'autre un atome de fluor ou de chlore, et - A représente: ?5 a) soit un radical: H C CH 2 dans lequel: - ou bien Z, et 2z représentent chacun un radical méthyle, ou bien Z1 représente un atome d'hydrogène et Z2 représente: soit un radical de formule: R4 -4- dans lequel Rs représente un atome d'hydrogène ou d'halogène et R4 et Rs, identiques ou différents, représentent un atome d'halogène ou un radical alkyle renfermant de 1 à 8 atomes de carbone ou forment ensemble un radical cycloalkyle comportant de 3 à 6 atomes de carbone ou un radical: o la cétone est en a par rapport a la double liaison et dans lequel X represente un atome d'oxygene ou de soufre ou un radical NH, soit un radical de formule H R dans lequel RG à Rt., identiques ou différents, représentent chacun un atome d'halogene, b) soit un radical: H C Y/CH CH (Y ou Y représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un radical alkyle renfermant de 1 à 8 atomes de carbone ou un radical aicoxy renfermant de i à 8 atomes de carbone et m = 0, 1 ou 2, ces composés pouvant se présenter sous la forme de l'un de leurs isomères ou sous la forme d'un mélange de leurs isomères. On notera que dans la formule (I) ci-dessus: lorsque R représente un radical alkyle, il s'agit de préférence du radical méthyle ou éthyle, 3 lorsque R représente un radical alcynyle, il s'agit de préférence i. radical ethynyle, lorsque R4 et Rs représentent tous deux un atome d'halogène, il s'agit de préférence du même atome d'halogène, R et Rs à Rs représentent de préférence des atomes de chlore ou de brome, lorsque Y représente un radical alkyle, il s'agit de préférence du radical méthyle, éthyle, i-propyle, n-butyle ou t-butyle, lorsque Y, R4 et/ou Rs représentent un atome d'halogène, il s'agit de préférence d'un atome de chlore, et lorsque Y représente un radical alcoxy, il s'agit de préférence du radical méthoxy. Parmi les pyréthrinoïdes photostables de synthèse appropriés aux fins de l'invention, on citera à titre d'exemples les composés ci-après pour lesquels on a indiqué entre crochets la dénomination commune internationale: - 1R, cis 2,2-diméthyl 3-(2,2-dibromovinyl) cyclopropane carboxylate de (S) a-cyano 3-phenoxy benzyle údeltamethrine], - dl cis trans 2,2-diméthyl 3-(2,2-dichlorovinyl) cyclopropane 1-carboxylate de RS a-cyano 3-phenoxy benzyle (cis/trans 30/10) [cyperméthrine], - dl cis trans 2,2-diméthyl 3-(2,2-dichlorovinyl) cyclopropane 1-carboxylate de RS a-cyano 3-phénoxy benzyle (à 90 % de cis) [cyperméthrine H1 cis], - dl cis trans 2,2-diméthyl 3-(2',2'-dichlorovinyl) cyclopropane carboxylate de dl a-cyano (3-phénoxy 4-fluorophényl) méthyle [cyfluthrine], - 2parachlorophényl 2-isopropylacétate de (S) a-cyano 3-phénoxy benzyle tfenvalérate], - (S) 2-parachlorophényl 2-isopropylacétate de - dl 2-(4-difluorométhyl oxyphényl) 2-isopropyl acétate de dl a-cyano 3- phénoxy benzyle [flucitrinate}, - 1R, cis (2',2',2'-tribromo 1'bromoéthyl) 2,2-diméthyl cyclopropane carboxylate de une préférence toute particulière étant donné à l'esfenvalérate. On donnera ci-après la description d'un certain nombre d'expérimentations pratiquées, à titre d'exemple, sur Lobesia botrana ainsi que les résultats obtenus pour ces dernieres. -- I/ Expérimentation au laboratoire A/ Activité du baculovirus e la polyedrose nucleaire d amesra brassicae contre Lobesla botrana 1) XMthode et matériel Les essais ont été réalisés par ingestion libre d'un milieu nutritif contaminé par l'insecticide à tester, par des chenilles Lobesia botrana. Les constituants dudit milieu nutritif sont les suivants: eau 816 g agar 15 g farine de grains de maïs broyés 48 g germe de blé 65 g levure de bière 48 g acide ascorbique 4,2 g acide benzoïque 1,44 g Nipagine 1,44 g huile de germe de maïs 1,44 g Le milieu nutritif encore liquide est distribué dans des boites cylindriques de 25 mm de diamètre et de 7 mm de hauteur, à raison de 2 ml par boite. Après gélification complète, on dépose dans chaque boite au moyen d'une micropipette, 0,1 mi d'une suspension aqueuse présentant différentes concentrations en insecticide à tester. L'humidite ainsi apportée est éliminée par séchage par passage des boites dans une hotte à flux laminaire horizontal chauffé. Dans chaque boite on dépose un morceau de toile de nylon de 6 mm de côté (1 maille par me2) sur le milieu. Une chenille de Lobesia botrana au premier stade larvaire à l'éclosion est mise en contact du milieu traité dans chaque boite. Les chenilles sont alors élevées sur le milieu traité, en enceinte climatique, à 25' C 1' C, une humidité relative de 60 % 5 % et une photopériode 16 heures sur 24 heures. On note le pourcentage -de chenilles mortes (en prenant en compte la mortalité d'une série témoin - correction de Abbot) depuis le stade L1 jusqu'à la chrysalidation. Le baculovirus de la polyèdrose nucléaire de)amestra brassicae utilisé a été obtenu dans une unité pilote de fabrication à partir de chenilles -7de Xamestra brassicae, nourries sur milieu artificiel et infectées au cinquième stade. Chaque expérimentation comporte une référence à un insecticide chimique, à savoir l'esfenvalérate (marque de fabrique: SUXI-ALPHA). Le baculovirus et l'esfenvalérate sont chacun mis en oeuvre sous la forme d'une suspension aqueuse comprenant 0,05 % d'un mouillant dépourvu d'activité insecticide (Etaldyne) et des quantités variables soit de baculovirus, soit d'esfenvalérate. 2) Résultats Les résultats obtenus sont rassemblés dans le tableau i ci- après. Ces résultats montrent tout d'abord une action du virus liée à la dose mise en oeuvre. Par ailleurs, ils mettent en évidence une action insecticide tout à fait intéressante du virus contre Lobesia botrana, la dose léthale 50 (dose provoquant une mortalité de 50 % des insectes par application de l'insecticide) pouvant être estimée a environ 352 polyêdres/mm2. B/ Activité de l'association du baculovirus d polyèdrose nucléaire de Xamestra brassicae et d pyréthrinoïd de synthèse contre Lobesia botrana 1) Méthode et matériel La méthode est identique à celle décrite sous le point A/ 1) ci-dessus. Le baculovirus de la polyèdrose nucléaire de amestra brassicae est le même que celui dont il est fait état au point A/ 1) ci-dessus. Le pyréthrinoïde de synthèse est constitué par l'esfenvalérate (marque de fabrique SUXI-ALPHA). Les expérimentations sont menées: - avec le baculovirus seul, - avec l'esfenvalérate seul, et - avec l'association baculovirus/esfenvalérate, ceux-ci étant chacun mis en oeuvre sous la forme d'une suspension aqueuse comprenant 0,05 % d'un mouillant dépourvu d'activité insecticide (Etaldyne). 2) Résultats Les résultats obtenus sont rassemblés dans le tableau 2 ci- après. 264571 1 8- Ces résultats montrent que le traitement conjoint par le baculovirus et l'esfenvalerate provoque de manière tout à fait inattendue une mortalité supérieure & la somme des mortalités provoquées par les principes actifs utilisés seuls. Ainsi, l'esfenvalérate utilisé seul à la dose de 3,13.10-' g/mm2 provoque une mortalité qui n'est que de 6 %, alors qu'en association avec le baculovirus, il conduit à des mortalités de 26, 35 et 44 % supérieures aux mortalités maximales auxquelles on pouvait normalement s'attendre, c'est-à-dire respectivement 17, 25 et 28 %. Il apparait également que l'association selon l'invention permet, en dépit de la faible dose d'esfenvalérate mise en oeuvre (3,13.10-12 g/mm2), d'obtenir de façon surprenante une protection contre Lobesia botrana supérieure à celle obtenue quand l'esfenvalérate est utilisé seul à une dose aussi élevée que 100.10-'2 g/mm2. Il est donc clair que l'association selon - l'invention est d'une utilisation beaucoup plus sure pour l'environnement. II/ Expérimentation sur le terrain de l'activité du baculovirus de la polyèdrose nucléaire de Mamestra brassicae contre Lobesia botrana 1) Matériel et méthode mis en oeuvre pour les expérimentations Le baculovirus, préparé de la même manière que ci-dessus, est mis sous la forme d'une formulation dénommée ci-après Xamestrin et dont le titre est 2,5 x 101-- polyedres/litre. Mamestrin est appliquée sur la vigne par pulvérisation sous la forme d'une suspension aqueuse comprenant Namestrin et 0,05 % d'Etaldyne (agent mouillant). Tous les essais sont exécutés sur des populations naturelles de ravageurs Lobesia botrana. Les méthodes de notation et de mesure sont inspirées de la méthode objet de la note n' 100 de la Commission Des Essais Biologiques. Les chenilles vivantes de Lobesia botrana sont dénombrées sur 100 grappes consécutives par parcelle élémentaire en fin de vie larvaire, soit 23 à 30 jours après l'application du baculovirus. La méthode d'extraction des chenilles est la méthode dite "de la saumure", qui consiste à tremper les grappes récoltées dans une solution aqueuse de chlorure de sodium, puis à compter les chenilles surnageant à la surface. 2) Résultats Une analyse statistique effectuée sur l'ensemble des essais réalisés [analyse de variance apres transformation des données initiales (x)3, conduit aux moyennes (pour une probabilité de 0,05 %) rassemblées dans le 3 tableau 3 ci-après. -9- Ces résultats confirment la sensibilite des chenilles Lobesia botrana au baculovirus de la polyèdrose nucléaire de Mamestra brassicae. En vue du traitement selon l'invention des vignes infestées par Lobesia botrana et Eupoecilia ambiguella, le baculovirus de la polyèdrose nucléaire de Mamestra brassicae et l'association de ce baculovirus avec un pyréthrinoïde de synthèse, peuvent notamment être utilisés sous la forme de poudre, granulés, suspension, émulsion ou autres formulations habituellement employées dans le domaine des insecticides, de préférence en combinaison avec d'autres ingrédients tels qu'un véhicule comme l'eau, des alcools, des solvants organiques; des poudres comme le talc, les argiles, les silicates ou le Kieselguhr; des agents tensio-actifs par exemple des agents tensio-actis non ioniques; ou d'autres agents pesticides. On notera que ledit baculovirus et le pyréthrinoïde de synthèse peuvent être conditionnés séparément et mis en oeuvre séparément; en variante, ils peuvent être conditionnés séparément, par exemple sous forme de poudres mouillables pour le baculovirus et de concentrés émulsifiables pour le pyréthrinoïde, puis mélangés, avant utilisation, avec les ingrédients sus- mentionnés. Enfin, conformément a l'invention, le baculovirus de la polyèdrose de Xamestra brassicae, lorsqu'il est mis en oeuvre seul, pourra être utilisé à raison de 1.10'" à 1.101- polyèdres/ha de vigne traitée. Dans le cas de la mise en oeuvre de l'association baculovirus/pyréthrinoïde de synthèse, le baculovirus pourra être utilisé à une dose de 101' à 1012 polyèdres/ha conjointement avec une dose de pyréthrinoïde de 1 à 10 g/ha, notamment 2 à 2,5 g/ha. 264571 t -10- TABLEAU 1 (résultats de l'expérimentation en laboratoire sur l'activité du baculo- virus de la polyèdrose nucléaire de Mamestra brassicae sur Lobesia botrana) Variante Dose de matière active/mm2 Nombre de Mortalité de milieu nutritif chenilles- (%) traitées Témoin - CcrrectionAbbDt SUMI- ALPHA -1,56.102g 100 5 -12 3,13.10 g 200 13 6,26.102 g 200 15 12,50.10- 12g 150 30 ,00.10-12g 100 36 100,00.10 12g 100 4Q !5 1 400,00.10 12g 100 97 Baculovirus 50 polyèdres 150 7 " 150 19 250 " 200 23 500 " 150 78 1000 " 150 83 6250 " 100 98 -11- TABLEAU 2 (résultats de l'expérimerntation en laboratoire sur l'activité de l'asso- ciation esfenvalérate/baculovirus de la polyèdrose nucléaire de Mamestra brassicae, sur Lobesia botrana) Variante Dose de matière active/mm2 Nombre de Mortalité de milieu nutritif chenilles (%) traitées Témoin - Correction Abot -12 SUMI-ALPHA 3,13.10 2g 200 6 (esfenvalérate) 100,00.10 -12g 100 40 Baculovirus 50 polyèdres 100 11 "100 19 250 " 100 22 SUMI-ALPHA 3,13.10 ' + + 100 26 Baculovirus 50 polyèdres SUMI-ALPHA 3,13.10 -2g + + 100 35 Baculovirus 125 polyèdres SUMI-ALPHA 3,13.10-12g + + 100 44 Baculovirus 250 polyèdres -12- TABLEAU 3 (résultats de l'expérimentation sur le terrain sur l'activité contre Lobesia botrana du baculovirus de la polyèdrose nucléaire de Mamestra brassicae) Variante Dose de matière active/ha Moyene du SiSIMcaticn de vigne traitée nombre de che- nilles restantes vivantes par grappes Témoin - 435,14 d SUi -ALPHA 2,5 186,87 a (esfênalérate) Baculovirus 2,5.1012 polyèdres 214,62 b 1 î 1.1013 polyèdres 221,71 c -13- REVENDICATIONS 1. Procédé de lutte contre les insectes ravageurs de la vigne, Lobesia botrana et Eupoecilia ambiguella, caractérisé en ce qu'il comprend le traitement de la vigne par le baculovirus de la polyèdrose nucléaire de Mamestra brassicae et, éventuellement, par au moins un pyréthrinoïde de synthèse. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit baculovirus et ledit pyréthrinoïde sont mis en oeuvre conjointement. 3. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que ledit baculovirus et ledit pyréthrinoide sont mis en oeuvre sous la forme d'un mélange. 4. Procéde selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit baculovirus et ledit pyréthrinoïde sont mis en oeuvre successivement. 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le pyréthrinoïde de synthèse est choisi parmi les pyréthrinoïdes photostables. 6. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que le pyréthrinoïde de synthèse photostable est un composé de formule I R A - C 2- CH R2() dans laquelle: - R représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle renfermant de 1 & 4 atomes de carbone, un radical alcynyle renfermant de 2 à S atomes de carbone ou un groupement nitrile, - R, et R2 représentent tous deux un atome d'hydrogène, ou représentent l'un un atome d'hydrogène et l'autre un atome de fluor ou de chlore, et - A représente: a) soit un radical: H3C CH 2 -14- dans lequel: - ou bien Z1 et Z2 représentent chacun un radical méthyle, - ou bien Z1 représente un atome d'hydrogène et Z2 représente: soit un radical de formule: R4 R3 dans lequel Ra représente un atome d'hydrogène ou d'halogène et RA et R1, identiques ou différents, représentent un atome d'halogène ou un radical alkyle renfermant de 1 à 8 atomes de carbone ou forment ensemble un radical cycloalkyle comportant de 3 à 6 atomes de carbone ou un radical: Ixt o la cétone est en a par rapport à la double liaison et dans lequel X représente un atome d'oxygène ou de soufre ou un radical EH, soit un radical de formule: R. H R 8 9 dans lequel R6 à Re, identiques ou différents, représentent chacun un atome d'halogène, b) soit un radical: 3CBCH3 ( y) H -15- o Y représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogene, un radical alkyle renfermant de I à 8 atomes de carbone ou un radical alcoxy renfermant de 1 à 8 atomes de carbone et m = 0, 1 ou 2, ce composé pouvant se présenter sous la forme de l'un de ses isomères ou sous la forme d'un mélange de ses isomères. 7. Procédé selon la revendication 5 ou 6, caractérisé en ce que le pyréthrinoïde est le (S) 2- parachlorophényl 2-isopropylacétate de (S) ao-cyano 3-phénoxy benzyle Lesfenvalérate]. 8. Procédé selon l'un quelconque des revendications précédentes, dans lequel seul le baculovirus est mis en oeuvre, caractérisé en ce que ce dernier est utilisé à une dose de 1.1012 à 1.10"l polyèdres/ha de vigne A traiter. 9. Procédé selon l'une quelconque de revendications i à 7, dans lequel le baculovirus et le pyréthrinoïde sont mis en oeuvre, caractérisé en ce que le baculovirus est utilisé à une dose de 10l à 0ll-' polyèdres/ha de vigne à traiter et en ce que le pyréthrinoïde est l'esfenvalérate utilisé à une dose de i à 10 g/ha. 10. Utilisation du baculovirus de la polyèdrose nucléaire de Mamestra brassicae ou d'un mélange de ce baculovirus et d'au moins un pyréthrinoïde de synthèse pour la préparation d'un insecticide utile pour la lutte contre les insectes ravageurs des vignes, Lobesia botrana et Eupoecilia ambiguella. 11. Utilisation selon la revendication 10, caractérisée en ce que le pyréthrinoïde est un pyréthrinoïde de synthèse photostable répondant à la formule (I) définie à la revendication 6. 12. Utilisation selon la revendication 11, caractérisée en ce que le pyréthrinoïde de synthèse photostable est l'esfenvalérate.