FR 2637803 A1 19900420 FR 8813737 A 19881019 La présente invention concerne de nouveaux ligands stéro'des spécifiques de récepteurs hormonaux estrogènes ou progestagènes. Une application des ligands selon l'invention est la thérapie ciblée et/ou l'imagerie médicale, notamment du cancer. Ces ligands peuvent toutefois également être utilisés dans le dosage desdits récepteurs hormonaux. Un but de la présente invention est de proposer des analogues d'hormones stéroides présentant une haute affinité pour le récepteur hormonal et qui se lie de manière quasi irréversible au récepteur en vue d'améliorer la proportion d'analogues fixés. Un autre but de la présente invention est que les dérivés halogènés de ces analogues soient stables dans le milieu extracellulaire, notamment dans le plasma, comme dans le cytoplasme, tout en gardant une haute affinité pour le récepteur hormonal. Soumises à ces dérivés, toutes les cellules contenant des récepteurs hormonaux, qu'elles soient malignes ou saines, peuvent être l'objet d'un accroissement de cytoxicité. Toutefois, on observe quand même une sélectivité améliorée, puisque dans les traitements de chimiothérapie de cancer conventionnel, les tissus cibles estrogènes sains ont soit un taux de prolifération de cellules faibles, soit ne sont pas essentiels à la vie. Il en est de même pour les récepteurs progestagènes. La présente invention a donc pour objet des ligands spécifiques de récepteurs d'hormones stéroYdes estrogènes ou progestagènes ayant pour formule CH ou (I) XCHci Y dans laquelle - X représente un groupement vinyl substitué sur la double liaison selon une isomérie Z par un halogène radioactif ou non radioactif, et - Y représente soit un groupe hydroxyle auquel cas le site sur lequel il est rattaché est un cycle aromatique, soit une fonction cétone auquel cas elle est conjuguée à une double liaison en C4 - C5. Ces produits de formule I sont donc caractérisés en ce qu'ils comportent notamment: a une fonction hydroxyle ou cétone en position C3, b une fonction chlorométhyle en beta sur la position C1 1, c une fonction vinyle en alpha sur la position C17 et, soit dl un halogène quelconque non radioactif, à savoir l'iode, le fluore, le chlore ou le brome, lequel halogène est substitué sur la double liaison du groupement vinyl, selon une isomérie Z, soit d2 un isotope radioactif d'un halogène choisi parmi le fluore, l'iode, le brome et l'astatine substitué sur la double liaison du groupement vinyl selon une isomérie Z, notamment les isotopes 18F, 80mBr, 211 At, 1251 et 123I Les fonctions en positions C3 et C17 confèrent à ces ligands une affinité élevée pour les récepteurs hormonaux auxquels ils sont destinés, à savoir des récepteurs, estrogènes ou progestagènes notamment. La fonction Il beta-chlorométhyle assure une liaison quasi "irréversible" entre le stéroîde et le récepteur, il s'agit en fait plutôt d'une très forte affinité pour le récepteur. La formation du lien quasi "irréversible" entre le stérorde et le récepteur améliore la stabilité du complexe et augmente sa concentra- tion dans le noyau. Les sites de liaison des hormones estrogènes et progestagènes présentent des homologies de séquences d'acide aminé, ce qui explique leur commun comportement s'agissant de la liaison irréversible entre le récepteur et le stérorde en présence d'une fonction Il betachlorométhyle. Ces dérivés possèdent une fonction vinyle en C17 en alpha de la position C17, ce qui leur confère une résistance au métabolisme et une liaison réduite aux protéines de liaison plasmatique. Selon l'invention, l'halogène est situé sur la double liaison du vinyl en alpha sur la position C17 selon une isomèrie Z. Ces ligands sont spécifiques des récepteurs estrogènes et progestagènes. Cette position a l'avantage de présenter une grande stabilité. On peut citer en particulier comme ligands selon une première variante, ceux dont la fonction en C3 est un groupe hydroxyl, le cycle sur- lequel il est attaché étant un cycle aromatique. Ces ligands sont plus spécifiques des récepteurs estrogènes. On peut également citer comme ligands selon une seconde variante de l'invention des ligands dont la fonction en position C3 est une fonction cétone conjuguée à une double liaison en C4-C5. Ces ligands sont plus particulièrement spécifiques des récepteurs progestagènes. Parmi les ligands, plus spécifiques des récepteurs estrogènes cités précédemment, on peut citer les 11 beta-chlorométhyl 17 alpha- halogénovinyl estradiol. Parmi les ligands selon l'invention les plus spécifiques des récepteurs progestagènes, on peut citer particulièrement les 11 beta- chlorométhyl 17 alpha-halogéno 17 beta-hydroxy 19-nor 4-androstène 3-one. Dans les ligands selon l'invention, l'halogène peut être non radioactif, les ligands seront alors utiles dans des dosages de récepteurs d'hormones stéroides, et pour tout usage thérapeutique o un effet oestrogénique ou progestatif puissant est requis. Les dérivés oestrogéniques selon l'invention peuvent égale- ment être utilisés dans l'induction de récepteurs de progestatifs en vue de la thérapie ciblée du cancer à l'aide de progestatifs radioactifs. Lorsque l'halogène est radioactif, les ligands peuvent être utiles aussi bien en imagerie médicale qu'en radiothérapie ciblée notamment du cancer mais également utiles comme réactifs dans le cas de dosage de récepteurs d'hormones stéroïdes. Toutefois, les ligands marqués selon l'invention présentent un intérêt tout particulier dans le cas de la radiothérapie ciblée du cancer. En effet, les hormones stéroldes se lient avec une haute affinité aux récepteurs protéiques cytoplasmiques des cellules cibles et, après liaison, subissent une translocation dans le noyau cellulaire et activent la transcription des portions du génome relatives à l'effet physiologique propre à l'hormone. Etant donné le passage du complexe stéroîde-récepteur à proximité du DNA, un halogène radioactif porté par le stéroYde pourra endommager gravement le DNA et avoir un effet léthal sur la cellule cible. Or, un certain nombre de cancers présentent une concentration élevée en récepteurs spécifiques soit aux estrogènes, soit aux progestagènes. Il s'agit notamment des cancers du sein, de l'utérus, de l'ovaire et de la Protaste. Par exemple, 65 % des cancers du sein présentent des niveaux détectables de récepteurs d'estrogènes (de 5000 à 50 000 molécules de récepteurs par cellule). Un halogène radioactif attaché au stéroîde permettra la destruction spécifique des cellules cancéreuses. En outre, certaines permettront de visualiser la tumeur par radioimagerie. En fait, ces ligands constituent alors des agents de pilotage d'un élément actif supplémentaire qui est leur radionucléide. Pour des sites de fixation intracellulaire tels que les récepteurs hormonaux, des analogues d'hormones présentant une haute affinité pour le récepteur et une faible affinité pour les protéines de liaison plasmitiques seront les agents de pilotage les plus appropriés. L'utilisation de radioisotopes se désintégrant en émettant des électrons Auger est très propice en radiothérapie ciblée. Due au court parcours des électrons AUGER, l'efficacité de tels radioisotopes, en ce qui concerne l'inactivité cellulaire, est totalement perdue lorsqu'ils ne sont pas liés ou tout au plus à une distance de quelques atomes de l'ADN. On a découvert selon l'invention que l'iode 123 qui a une demi-vie de 13, 21 heures et produit environ une vingtaine d'électrons AUGER par désintégration, a une demi-vie suffisamment courte pour ne pas exposer inutilement le patient à des doses de radioactivité pendant une période prolongée mais aussi suffisamment longue pour permettre la synthèse des produits radiopharmaceutiques et leur envoi par les centres de traitement situés loin du cylcotron de production, compte tenu du fait qu'il faut prévoir jusqu'à 48 heures de trajet et 24 heures de traitement. Des ligands, plus particulièrement utiles pour la radiothérapie ciblée, comporteront donc l'isotope 1231 comme iode radioactif. Toutefois, le brome 8ImBr ou encore l'iode 1251 seront également acceptables en radiothérapie en tant qu'émetteurs d'électrons Auger. Ces halogènes radioactifs ainsi pilotés présentent une forte activité cytotoxique, dans la mesure o ils sont amenés à proximité de l'ADN dont ils induisent des coupures dans la double hélice. L'astate 211At, un émetteur de rayons alpha dont l'énergie est absorbée sur une distance d'environ 50 microns, ce qui correspond à quelques diamètres cellulaires, pourra être utilisé pour une radiothérapie permettant de tuer aussi les cellules avoisinantes des cellules ayant des récepteurs de stéroTdes. Des ligands, plus particulièrement utiles pour l'imagerie médicale, notamment du cancer, porteront l'iode 123I ou le fluore 18F. Des ligands plus particulièrement utiles pour le dosage de réceptuers hormonaux porteront une iode 125I. Selon la présente invention, on a découvert que l'isomérie Z de ladite fonction halogénovinyl notamment l'isomérie Z de la fonction 17 alphahalogénovinyl et en particulier l'isomérie Z de la fonction 17 alphaiodovinyl est préférable car elle confère aux ligands selon l'invention à activité estrogène ou progestagène une meilleure accumulation que l'isomérie E correspondante dans les tumeurs riches en récepteurs. Les isomères Z sont moins hydrophobes que les isomères E et plus affines pour les récepteurs estrogènes ou progestagènes. Une hydrophobicité moins importante diminue en outre la fixation non spécifique dans le tissu graisseux qui est un facteur limitant pour l'emploi des hormones stéroîdes en imagerie. La présente invention a enfin pour objet à titre de produit nouveau utile notamment comme produit intermédiaire pour la synthèse des analogues estrogènes et progestagènes selon l'invention, des dérivés de formule (I) dans laquelle un groupe tributylstannyl est substitué sur la double liaison du groupe vinyl rattaché en C17 selon l'isomérie Z, à la place de l'halogène. Un procédé objet de l'invention consiste à obtenir le dérivé halogéné à partir de ce dérivé tributylstannyl intermédiaire. D'autres caractéristiques et avantages de la présente invention apparaîtront à la lumière de la description qui va suivre. La description qui va suivre est fait en référence à la figure I qui représente l'accumulation de l'isomère Z du dérivé 16' (exemple IY dans différents tissus de souris ovarectomisés BDFI en fonction du temps. Exemple 1: LIGANDS SPECIFIQUES DU RECEPTEUR ESTROGENE Le schéma I ci-après reproduit une synthèse du ligand 11 beta- chlorométhyl-17 alpha-iodovinyl-estradiol. L'étape I consiste en une préparation du A1 adrénostérone 17 éthylène kétal à partir du à1 adrénostérone (1'). g A adrénostérone (84 mM) sont ajoutés sous forte agitation à un mélange de 500 ml de benzène, 25 ml d'éthylène glycol (environ 420 mM) et I g d'acide para-toluènesulfonique. Le mélange est porté au reflux pendant 4 heures dans un appareil de Dean-Stark. Le mélange réactionnel est extrait par 200 mi d'eau contenant I g de bicarbonate, puis par de l'eau saturée en sel, séché, puis évaporé. On obtient une masse jaunâtre qui est lavée à chaud par ml d'éther isopropylique. Les cristaux blancs sont filtrés, puis séchés à 60 C, on obtient une masse de - 26 g. L'étaDe 2 consiste en la préparation du 11 B -hydroxy 17-éthylène kétal androsta 1,4-diène 3,17-dione (2'). 340 g de (1') (88 mM) sont ajoutés sous azote à une suspension de 50 g (- 200 mM) dans 400 ml de tétrahydrofuranne. Après 24 heures de réaction à température ordinaire, on ajoute 100 ml d'éther, puis 40 ml de NaOH IN, puis 25 g de sulfate de sodium anhydre. On maintient l'agitation pendant la nuit. Le mélange est filtré, puis le filtrat est évaporé sous vide. La masse solide obtenue est lavée à chaud par 200 ml d'éther diisopropylique. On obtient, après filtration et séchage, 24 g d'une poudre blanche (70,6 mM). L'étaoe 3 consiste en la préparation du 3,11 S-dihydroxy estra 1,3.5(10)-triène 17-one 17-éthylène kétal (3'Y). - Sous atmosphère d'azote, un mélange de 3 g de lithium enrobé dans de l'huile (environ 0,4 M), 25 g de biphényl (0,16 MN) et de di- phénylméthane (0,08 M) dans 360 ml de tétrahydrofuranne est porté à reflux pendant I heure. Le mélange réactionnel bleu foncé, auquel on ajoute 20,7 g de (2'), est à nouveau porté à reflux pendant 30 minutes. Après refroidissement, on ajoute 8 ml de méthane, puis 100 ml d'eau et on évapore le solvant sous vide. Après redissolution dans la masse restantes dans l'éther. on extrait le produit formé par 300 ml de KOH 5 % qui est réacidifié avec l'acide acétique (12 ml). Le précipité jaune est réextrait par l'acétate d'éthyle. Après évaporation du solvant, on redissout le produit à chaud dans 15 ml d'un mélange acétone et éther diisopropylique. Après deux cristallisations, on obtient 10,5 g de produit. Le point de fusion corrigé est: 191,1 C. L'étaDe " consiste en la préparation du 3-benzyloxy, !3-hvdroxv estra 1,3,5(10)-triène 17-one 17-éthylène kétal (4'). Le mélange de 10,3 g de (3'1) (30 mM), 5,2 g de K2C03 anhydre broyés et 100 ml de méthyléthyl cétone est porté à reflux sous forte agitation pendant I heure. On ajoute alors 5,4 ml (45 mM) de bromure de benzyle et le reflux est maintenu pendant 48 heures. Après extraction, on obtient 15 g d'une huile jaunâtre. Cette huile est engagée telle quelle dans la synthèse de (5'). L'étape 5 consiste en la préparation du 3-benzyloxv estra 1.3,5(15)-triène 11,. 17-one 17-éthylène kétal (5'). mM de (4') brut (13 g) dissous dans 50 ml de chlorure de méthylène sec sont ajoutés en une fois au mélange de 13 g de pyridinium chlorochromate en suspension dans 200 ml de chlorure de méthylène sec. Après 3 heures d'agitation à température ambiante, on ajoute 250 mi d'éther, ce qui entraîne la précipitation d'une masse noire. Les solvants sont décantés, on lave l'insoluble avec 4 fois ml du mélange v/v CH2C12/éther. I La phase organique est percolée sur une colonne de florisa, puis évaporée. On obtient après purification sur silice 9,6 g d'une huile jaunâtre. i5 L'étape 6 est la préparation du 3-benzyloxy I l-hydroxy, I l-méthyltriméthylsilane estra 1,3,5(10)-triène 17-one 17-kétal (6'). 8,6 g de (5') dissous dans 100 ml d'éther (20 mM) sont ajoutés rapidement à 165 ml d'une solution I M de chlorure de méthyltriméthyl- silane de magnésium. Le mélange est porté à reflux pendant 5 heures. puis décomposé et extrait. Le produit brut est purifié sur silice, on obtient 5,7 g d'une huile visqueuse qui cristallise. L'étape 7 est la préparation du 3-benzyloxy 1 l-méthyvlène 1,3,5(1 0)-estratriène 17-one (7'). Après addition de 0,5 ml d'HCL concentré, une solution de 5,2 g de (6') (10 mM) dans 50 ml d'acétone est agitée pendant 2 heures à température ambiante. Le mélange réactionnel est neutralisé par HCO3 concentré sous vide, extrait par CH2CI2. Le produit brut est recristallisé dans l'acétone. On obtient 3,4 g de cristaux jaunâtres. Le point de fusion corrigé est: 168,1 C. L'étape 8 consiste en la préparation du 3-benzyloxy 11-méthylène 1,3,5(10)-estratriène 17-one, 17-kétal (8'). Une solution de 3 g de (7'), 7 mM, 100 ml de benzène, 3 ml de diéthylène glycol, 150 mg d'acide paratoluènesulfonique est refluée avec "Dean Stark" pendant 4 heures. L'extraction puis l'évaporation des solvants donnent 3.3 g d'une huile blanche qui est employée telle quelle. L'étape 9 consiste en la préparation du 3-benzyloxy Il-hydroxyméthyl 1,3,5(10)-estratriène 17-one 17-kétal (9'). Une solution de 2,84 g de (8') (- 6 mM) dans 20 ml de THF sec est additionnée de 0,5 ml du complexe borane oxathione (- 6 mM). Après I heure de réaction, on ajoute 6 ml d'éthanol, puis 4 ml de NaOH 3M (- 12 mM), enfin 10 ml de H202 30 % (- 12 mM). Après une nuit à température ambiante, la réaction est extraite par CH2CI2. On obtient une huile blanche qui cristallise rapidement (poids: 2,4 g). L'étape 10 consiste en la préparation du 3-benzyloxy 11 -chlorométhyl 1,3,5(10)-estratriène 17-one (10'). A une solution de 2 g de (9') d'environ 4 mM dans 20 ml de tétrahydrofuranne est ajoutée la suspension formée dans 30 mi de THF par la réaction de 2,1 g de triphénylphosphine (8 mM) et de 1,07 g (* 8 mM) de N-chlorosuccinimide. Le mélange devenu limpide après à peu près I heure est laissé à température ambiante pendant la nuit. Le THF est évaporé sous vide. ie résidu brut est redissout dans 50 ml d'acétone, auquel on ajoute 5,5 mi d'HCl concentré. On laisse sous agitation pendant 2 heures. L'extraction puis la purification sur silice donnent des cristaux blancs pour 1,52 g. S.M. (FAB) 435 (M+I). L'étape 11 consiste en la préparation du 3-benzyloxy 11-chlorométhyl 1,3,5(10)-estratriène 17L-éthynyl 17e-hydroxy (11'). A une solution de 0,93 g de (10') (à peu près 2 mM) dans 10 ml de tétrahydrofuranne, on rajoute 400 mg ( 4 mM) du complexe éthylènediamine Acétylure de lithium. Après 4 heures de réaction, on réajoute 400 mg de réactif. On laisse réagir la nuit à température ambiante. L'extraction par CH2CI2 puis la purification sur silice nous donnent un solide légèrement jaunâtre d'environ 500 mg (1,02 mM). L'étaoe 12 consiste en la préparation du I 1-chlorométhyl 3.17 ú-dihvdroxy 1 7c-éthynyl 1.3,5(1 0)-estratriène (12'). 440 mg de (1l') 0.9 mM sont dissous à froid dans 20 ml de chlorure de méthylène. On ajoute alors 4,5 ml (4,5 mM) d'une solution I M du complexe BF3/(CH3)2S. Le mélange réactionnel est agité à froid pendant 45 minutes. L'extraction puis la purification sur silice nous donnent une huile qui cristallise avec une masse d'environ 150 mg (0,375 mM). 263-7803 L'étape 13 consiste en la préparation du dérivé (E)-l 1-chloro- méthyl-3,17 B-dihydroxy-1 7 a -(2-tributylstannylvinyl)-1,3,5( I 0)estratriène (13'). A une solution de 50 mg de (12'): 0,15 mM dans I ml de THF, on ajoute, sous N2, 150 Il de tributylétainhydrure (à peu près 0,55 mM) et mg de AIBN (à peu près 0,03 mM). Le tube est hermétiquement fermé puis agité au bain d'huile à C pendant 1 heure. La réaction est extraite par un mélange acétate d'éthyle/eau. L'huile brute est purifiée par silice; on obtient 55 mg d'une huile blanche. L'étape 14 consiste en la préparation du dérivé (E)-I l-chloro- méthyl-3, 1 7-dihydroxy-1 7a-(2-iodovinyl)- 1,3,5(1 0)-estratriène (14'). A une solution de 32 mg de (13') (0,05 mM) dans 3 ml de CH2C12, on ajoute goutte à goutte une solution d'iode 0,1 mM dans CH2C12 jusqu'à persistance de la coloration rosée. Après 30 minutes, on ajoute à peu près 10 ml d'H20 avec un peu de NaHSO3, on extrait par Et20. Le produit brut est alors purifié sur silice; on obtient 20 g de cristaux blancs pour une masse de 20 mg. Données spectroscopiques: RMN (CDci3, (CD3)2SO) S 1.1 (S,13CH3), 3.45 (m, CHHcl), 3.62 (dd, CHHcl), 6.27 (d, CH=CHI, 3=14 Hz), 6.53 (d, H(4)), 6.66 (dd, H(2)), 6.81 (d, CH=CHI, 3=14 Hz), 7.03 (d, H(I)). Marquage à partir du dérivé tributyletain fIl d'une solution du dérivé (E)-17 alpha-tributylétainvinyl- 1 beta-chlorométhylestradiol (13' du schéma 1 bis) dans l'éthanol absolu à I mg/ml sont ajoutés à I mCi de NaI123 (10 Il dans H20 pH 7-11) contenu dans un tube d'environ 500 pil avec bouchon à visser. On ajoute 10 il d'une solution de chloramine-T à I mg/ml et on agite vigoureusement pendant secondes. Ensuite, on ajoute 10 Il d'une solution de Na25205 à 2 mg/ml et 200 pl de tampon phosphate pH 7,4. Le mélange est passé sur cartouche SPE C18 (i ML, BAKER) et le stéroYde est élué avec I ml d'éthanol. Après évaporation du solvant, le stéroîde marqué est purifié sur colonne HPCL p BONDAPAK C18 avec phase mobile 50 % H20 et 50 % d'acétonitrile. Le temps de rétention est de l'ordre de 17 minutes. C - SYNTHESE DE L'ISOMERE Z (SCHEMA I BIS) L'étape 15 consiste en la préparation du dérivé (Z)- 11 -chlorométhyl-3, 17 beta-dihydroxy-17 alpha-(2-tributylstannylvinyl)-1, 3, 5 (I 0)-estratriène (15'). mg (0,3 mmole) de dérivé (1i2'), 0,6 ml de HMPTA (hexamethyl phosphoretriamide, 0,3 ml de tributylétain hydrure (0,6 mmole) sont placés dans un tube à visser, sous argon. Le mélange est mis en réaction pendant 60 heures sous forte agitation dans un bain d'huile à 70 C. Ensuite, on verse 5 ml d'eau et on extrait avec 3 x 5 ml d'acétate d'éthyle. Après évaporation du solvant, on obtient une huile blanchâtre qui est purifiée sur silice à l'aide d'un mélange CH2CI2 et CH3OH. On obtient 40 mg d'une huile blanche (23 %); % du produit est récupéré. TLC: 2 6 CH3OH dans CH2CI2 Rf: 0,58. L'étape 16 consiste en la préparation du dérivé (Z)-11 beta-chlorométhyl3,17 beta-dihydroxy-17 alpha-(2-iodovinyl)-l, 3, 5 (10)-estratriène (16'). mg du dérivé (15') sont dissous dans 10 ml de CH2CI2; on y ajoute une solution lm de 12 dans le CH2C12 jusqu'à persistance de coloration rose. On neutralise '12 en excès par une solution d'H20 bisulfite. Après extraction, on receuille le produit brut qui est purifié par chromatographie sur silice (CH2CI2 98 % éther 2 %). On obtient environ mg de cristaux blancs. TLC: 2 % CH3OH dans CHI22Ci2 Rf: 0,4 RMN: (CDC13 / 1,1 (s, I3CH3), 3,45 (m, CHHCI), 3,58 (dd, CHHCI), 6,38 (d, CH=CHI, 3J=8Hz), 6,55 (d, H(4)), 6, 65 (dd, H(2)), 6,85 (d, CH=CHI, 3J=8Hz), 7,05 (d, H(I)). Marquage du dérivé (16') à 125I ou 123I et stabilité de la solution radioactive Exemple avec Na125I La méthode est la même que pour le marquage de ( 14'). Le produit de départ est le dérivé (15'). Les conditions de séparation HPLC sont différentes: la phase mobile est: 60 9% éthanol dans l'eau; le débit est de 1 ml/min; le produit final est collecté à 12 minutes. Le produit marqué est conservé tel quel dans l'éluat de la colonne (60 % éthanol). Dans ces conditions, il est stable au moins 12 jours à -20 C (déodination inférieure à 2 9%). Hydrophobicité L'isomère Z (16') est moins hydrophobe que l'isomère E (14') si l'on se réfère à un index d'hydrophobicité basé sur le temps de rétention de ces 2 produits en HPLC (phase inverse). Ainsi, avec un débit de I ml/min de M éthanol dans H20 sur une colonne microBondapack CS18, l'isomère Z (16') a un temps de rétention de 12,1 minutes et l'isomère E (14') de 14,3 minutes. Une hydrophobicité moins importante diminue la fixation non spécifique dans le tissu graisseux, fixation qui est un facteur limitant pour l'emploi des hormones stéroîdes en imagerie. SCHEMA 1 O HO - r OH [OH, APTS Li(t Butoxy) 3Al: HO @>2| t/HO [Li, t2' 2CH2 HO] Bromure de benzyl PCC'CH2C12 CH _CH 2o c2 CH (4') (4'> SCHEA 1suite HO ((CH3) À H2C Mg CH 2 2 5, (6') H, ACETONE (7' [oH LOH ',APTS O O CH 2OH H I 2 i2 2 02tOH.DE CH2 (9' CH2 (8') *H2 I9, 1. NCS 2. H0 CH2 (9--) ?C. H2(8__')E^ OH 2 NH 1222CH2C LiC -CH. NH2 (CH2) 2NH2 0H CH0 /_H2 CH2 " 1 ') 3 (101J') SCHEMA 1. fin OH OH CHI,-C CH2 -HCCH BF3 DIMETHYL B3SULFIDE. H O CH (11 (12') 2_(BU) SnH, (Bu) 3SrH, / t(Bu) 3SnH, H-MPTA A1BN, THF, 1h, h,700C 70 C 1wCH Cl |>.4aI1J CE2C1;4aIH (BU OR'HH CH2C OH 3 CH.C! - Sn(Bu)3 (Z) (E) HO O (15') 4(13) 21 2)123 2C ai 23 1) cri2ClNaI >CH2Chloramine Chloramine T 12 Chi Orainiie Ti2 ETOH ETOH- NaHS. NaHS03 HaS OHE H CH ci OH _ OH HO (16') (14') Exemple 2: BIODISTRIBUTION DE L'ISOMERE Z (16'> La biodistibution de l'isomère Z (16') dans des souris ovarectomisées BDF est très favorable. 8 souris BDF1 ovarectomisés ont été injectées avec 1 pci de 11 betachlorométhyl 17 alpha (2-iodovinyl) estradiol (1251). 4 souris ont été sacrifiées 2 heures après l'injection et 4 à 24 heures après l'injection. Les pourcentages de doses injectées par gramme de tissu sont donnés au tableau I et représentés à la figure 1. Il est remarquable que les rapports de concentrations utérus/sang, utérus/graisse et utérus/foie à 24 heures (reporté au tableau 2 ci-après et à la figure 1) soient de loin supérieurs à ceux décrits dans la littérature pour d'autres stéroîdes (par exemple, dans Hanson et al., Synthetis and Biodistribution of 1-125 17 iodovinyl II ethylestradiol, in 7th International Symposium on Radiopharmaceutical Chemistry, Groningen, Netherlands, July 4-8, 1988: dans des rats femelles immatures normales à 24 heures, les rapports donnés sont: - utérus/foie = 3,89 - utérus/poumon = 52,8; - utérus/sang = 40,4. Outre son intérêt pour l'hormonoradiothérapie, ce stéroîde 16' est très intéressant en tant qu'agent imagerie et comme réactif des dosages de récepteurs estrogènes. TABLEAU I TISSU 96 dose injectée/g tissu (+S.D.) temps 2 heures temps: 24 heures Sang 1.08 - 0.24 0.14 + 0.02 Utérus 6.66 * 0.91 9.21 - 1.44 Foie 5.10 + 0. 72 0.91 + 0.05 Reins 1.84 + 0.27 0.20 + 0.02 Rate 0.97 - 0.18 0.12 + 0.01 Graisse 2.29 + 0.25 0.26 + 0.09 Muscle 0.89 + 0.07 0.10 + 0.02 TABLEAU 2 RAPPORT TEMPS 2 h TEMPS: 24 h Utérus/sang 6,16 65,80 Utérus/muscle 7,48 92,10 Utérus/foie 1,30 10,12 Utérus/graisse 2,90 35,42 Exemple 3: EMPLOI DU 11 BETA CHLOROMETHYL 17 IODOVINYL OESTRADIOL 123 I EN RADIOTHERAPIE CIBLEE L'inhibition de la fixation d'oestradiol tritié sur des cytosols de tumeur humaine mammaire MCF7 riche en récepteurs oestrogéniques montre qu'à 25 C, le Il beta chlorométhyl 17 iodovinyl. oestradiol a une affinité comparable au 11 beta chlorométhyl oestradiol et nettement supérieure à celle de l'oestradiol ("relative binding affinity" supérieure à 1000). Vingt neuf souris BDF1 femelles ont été greffées à l'aide de tumeurs mammaires syngénéîques MXT implantées en sous-cutané. Quatorze souris ont reçu trois injections intraveineuses de 100 IpCi de I I beta chlorométhyl 17 iodovinyl 123I d'isomérie E à deux semaines d'intervalle. Les 100 pCi d'hormone marquée étaient injectés dilués dans 200 pl de solution contenant 9 gr/l NaCI, 5 96 éthanol et 1 % de Tween 80. Les quinze souris contrôlées ont reçu aux mêmes dates 200 pI de la solution NaCI, éthanol Tween. Aucune toxicité aigue n'a été décelée dans ces deux groupes sur une période de 60 jours. Le groupe de souris traitées à l'hormone radioactive a montré un ralentissement significatif de la croissance tumorale par rapport au groupe témoin (inférieur à 45 96 de la croissance tumorale moyenne au jour 18). Le groupe traité a aussi montré une meilleure survie. Ces résultats démontrent un effet in vivo d'une hormono- radiothérapie ciblée à l'aide d'isotopes émetteurs d'électrons AUGER. Exemple 4: INTERET DES PRODUITS FROIDS (16') ET (14') ET MARQUES A L'IODE 125 (DOSAGE DE RECEPTEUR DANS LES TUMEURS Des essais de liaison au récepteur estrogène de cytosol d'utérus de veau (25 C, I h) à une dose saturante d'hormone marquée (16' à l'iode 125 (5mM final) montrent une liaison du même ordre que l'estradiol tritié (également à 5mM final) avec un niveau de sensibilité plus important, grâce à l'activité spécifique plus élevée, et un niveau de liaison non spécifique beaucoup plus bas (23 9% de la liaison non spécifique contre 62 % pour le ligand tritié). La liaison non spécifique aux protéines de transport est diminuée grâce à la présence des groupements en 1l1 beta et 17 alpha. Ces caractéristiques apportent une amélioration au dosage du récepteur estrogène dans les tissus tumoraux provenant de biopsies en clinique. L'analogue froid (16') est nécessaire pour l'estimation du niveau de non spécifique (excès d'hormone froide) dans ce type de dosage. En outre, 16' constitue potentiellement un estrogène agoniste puissant. Exemple 5: SYNTHESE DE DERIVES HALOGENES PAR L'INTERME- DIAIRE DES DERIVES TRIBUTYLETAIN L'intérêt des dérivés tributylétain (15') et (13') et les analogues de la famille progestagènes est que ceux-ci sont des intermé- diaires-clé dans la synthèse de stéroTdes dont un des hydrogènes terminaux de la fonction vinylique en 17 alpha est substitué par un halogène (F, Cl, Br, 1, At) ou un autre atome dont la forme cationique peut substituer la fonction tributylétain. On peut ainsi notamment préparer de nouveaux dérivés selon l'invention intéressants pour l'imagerie ( 18F) ou la thérapie (80mBr ou 21 1At). La synthèse de dérivés fluorés (froid ou i8F) s'effectue de la manière suivante: le dérivé tributylétain (10 pmole) dans CFCI3 à - 78 C est mis en réaction avec 0,1 % F2 (19F ou 18F) dans N2 (50 pmole) pendant minutes. Après passage sur HPLC, on obtient le produit pur. Pour les dérivés SOmBr ou 211At, on obtient les dérivés marqués respectivement à partir de Na 80mBr ou Na 211At mis en réaction pendant 10 minutes avec le précurseur tributylétain dans l'éthanol et un volume égal d'une solution 2: I (v/v) de 30 H202 et acide acétique glacial. Après -addition d'une solution de bisulfite, les dérivés halogénés sont extraits sur cartouche SPe C18 (IML, BAKER) et ensuite purifié par HPLC (I BONDAPACK C18 avec 50 à 60 % de EtOH dans H20 comme phase mobile. Exemple 6: LIGAND SPECIFIQUE DE RECEPTEUR PROGESTAGENE La voie de synthèse des dérivés (E) et (Z) 11 beta-chlorométhyl I G 17 alpha-iodovinyl 17 beta-hydroxy 19-nor 4-androstène 3-one (respective- ment (29') et (27') est décrite au schéma 2 ci-après. Il s'agit d'une modification du schéma I décrit précédemment pour les ligands spécifiques de récepteurs estrogènes. Le point de départ est le 3,11 beta-dihydroxy estra 1. 3, 5 (10) triène 17-one 17-éthylène Kétal (3'). L'étape I' consiste en la méthylation en position C3 de (3') par l'action de K2CO3 et CH3I et chauffage à reflux pendant 24 heures dans l'acétone. L'étape 2' consiste en l'oxydation en position Ci1 par le pyridinium chlorochromate (PCC) selon un procédé analogue à celui décrit dans l'étape 5 du schéma 1. L'étape 3' consiste en la préparation du dérivé silylé en position C11 par le magnésien de chlorure de méthyltriméthylsilane selon la méthode de l'étape 6 du schéma 1, suivie par l'hydrolyse acide décrite dans l'étape 7 du schéma 1, elle-même suivie par la protection en C17 par l'action de l'éthylène glycol en milieu acide comme décrit de façon analogue dans l'étape 8 du schéma 1. On obtient ainsi le composé (20'). L'étape 4' consiste en la préparation d'un dérivé borane fixé sur le carbone porté par C11 et son oxydation par H202 en milieu basique pour donner le dérivé hydroxyméthyl en C 1 (21') selon la méthode analogue de l'étape 9 du schéma 1. L'étape 5' consiste en la protection de l'hydroxyl attaché en C1 1 par une fonction tétrahydropyranyle. La méthode de synthèse consiste en l'action de DHP (dihydropyrane) dans le THF en présence d'acide paratoluène sulfonique à température ambiante durant une nuit. Après évaporation des solvants, le dérivé (22') est extrait par CH2CI2 après ajout d'H20. L'étape 6' consiste en la réduction par réaction de Birch du composé (22') suivie par acidification par HCI pour libérer la cétone alpha, beta conjuguée du dérivé (23'), simultanément la fonction en C11 est déprotégée. Le mode opératoire est le suivant: 0,75 g de Lithium sont dissous dans 75 ml de NH3 liquide, on obtient une coloration bleue foncée. Pendant la réduction, la température est maintenue en dessous de - 500 C par un bain de carbobglace. On ajoute 3,1 g du stéroïde (22'). On agite le mélange pendant I h 30. Ensuite, on ajoute goutte à goutte 50 ml d'isopropanol et 20 ml d'éthanol. La décoloration est complète. On remonte lentement la température à 22 C et on laisse évaporer le NH3 pendant une nuit. Après extraction au CH2CI2, on obtient environ 3 g d'une masse blanchâtre. On chauffe celle-ci à reflux 20 minutes dans un mélange 2g de 100 ml de CH3OH et 30 ml d'HCI 10 à dans H20. Après extraction au CH2Ci2, on obtient 1,7 g d'un solide jaunâtre. Après chromatographie sur gel de silice avec 15 96 d'acétone dans CH2C12, on obtient un produit pur en TLC et RMN. TLC: Silice, CH2CI2 (85 6) et acétone (15 %) Rf = 0,20 Silice, CH2CI2 (95 6) et méthanol (5 %) Rf = 0,27 Données spectroscopiques RMN (CDCI3, TMS); déplacement chimique (ppm) 0.95 (s, 13CH3), 3.7 (m, CHHOH), 3.95 (m, CHHOH), 5.85 (s, CH = C) L'étape 7' consiste en la chlorination de la fonction carbonée en CI, par N-chlorosuccinimide selon la méthode de l'étape 10 du schéma I. On obtient le composé 24'. L'étape 8' consiste en l'éthynylation de la fonction en C17 alpha du composé 24' par la méthode au complexe éthylène diaminie- acétylure de lithium selon la méthode analogue à l'étape Il du schéma I. On obtient le composé 25'. L'étape 9' consiste en la préparation du dérivé (Z) tribu- tylétain (26') par la méthode analogue à celle décrite dans l'étape 15 du schéma 1. L'étape 10' consiste en la préparation du dérivé (Z) Il beta- chlorométhyl 17 beta-hydroxy 17 alpha-(2-iodovinyl) 4-estrène 3-one (27'). Quand il s'agit d'un iode froid (127I), on utilise la méthode de l'étape 16 du schéma 1, et quand il s'agit d'un marquage à 1'123I ou 1254. on utilise la méthode de marquage également décrite pour le schéma 1. L'étape 11' consiste en la préparation du dérivé (E) tributylétain (28') par la méthode décrite dans l'étape 13 du schéma 1. L'étape 12' consiste en la préparation du dérivé (E) 1l beta- chlorométhyl 17 beta-hydroxy 17 alpha-(2-iodovinyl)-4-estrène 3-one (29'). Quand il s'agit d'un iode froid (127I), on utilise la méthode de l'étape 14 du schéma 1, et quand il s'agit d'un marquage à I'1231 ou 125I, on utilise la méthode de marquage également décrite à l'occasion du schéma 1. (,8L) (,LL) 11À t--, I'úH L- À %o ODZ (úHD) 1 i EHD úOD Y Glie 1 e t'.: Z ViiHDS ú08 ú9E 263780D SCHEMA 2 SUITE "'O' sj,-' mnL3SiCH..(CHJ CH3 2H '191) HACETONE (7 -OH a..;, APTE s OH 1. B2H2 2. a202t OH f CH{3 CIi-a (20-)i 53 (21 ') DAP APTS c'riOIHP O CH 1, Li, NH3 liquide (22' 2. HCl (23') SCH-.5A 2 SUITE -IH 0 CH Cl 1. NCS 2. H 9D (23') (241'J / /.- Li+ C _ CH N2 (CH2) 2 '2 OH "-,.r tC H 2 2 cc rl H C'/"'-,L-_"'.7Sn (Bu)3 (BU) 3Sn H I, THF, 1h (25') (Bui3Sn Hi EPTA, 60 h(28' CI H OH Sn (Bu)3 (26') SCHIEA 2 SUITE OH CHci OH CH |5 4Sn(Bi," CH 2C1 Sn (Bu3 - (26') l(Z).(E) (28') -1 I2,CH2C12 ou 2) Na 123I ou Na 125I Chloramine T 1) I2, CH2Cl2 2 2 (271) I 127 I (froid) o2ou 2 a 12 ou Na12, Chioramine T C H2C1 (z) O (E) (2_7') I = 127 (froid) ou125t ou 1231 REVENDICATIONS 1. Ligands spécifiques de récepteurs d'hormones stéroïdes estrogènes ou progestagènes ayant pour formule CH C -CH3 CO (I) dans laquelle X représente un groupement vinyl substitué sur la double liaison selon une isomérie Z par un halogène radioactif ou non radioactif, et Y représente soit un groupe hydroxyl auquel cas le cycle sur lequel il est rattaché est un cycle aromatique, soit une fonction cétone auquel cas elle est conjuguée à une nouvelle liaison en C4 - C5. 2. Ligands spécifiques de récepteurs d'hormones stéroïdes selon la revendication I utiles pour la thérapie ciblée ou le dosage desdits récepteurs, caractérisés en ce qu'ils comportent un halogène non radioactif choisi parmi l'iode, le fluore, le brome et le chlore, substitué sur la double liaison du groupement vinyl rattaché en alpha de la position C17 selon l'isomérie Z de la double liaison. 3. Ligands spécifiques de récepteurs d'hormones stéroîdes selon la revendication I utiles notamment pour la thérapie ciblée ou l'imagerie notamment du cancer ou le dosage desdits récepteurs, caractérisés en ce qu'ils comportent un halogène radioactif choisi parmi les isotopes radioactifs du fluore, de l'iode, du brome et de l'Astate, substitué sur la double liaison du groupement vinyl rattaché en alpha sur la position C17 selon l'isomérie Z de la double liaison. 4. Ligands spécifiques de récepteurs d'hormones stéroides selon la revendication 3 utiles notamment pour la radiothérapie ciblée notamment du cancer, caractérisés en ce qu'ils comportent un isotope radioactif choisi parmi 123I, 211At et 8omBr substitué sur la double liaison du groupement vinyl, en alpha sur la position C17 selon l'isomérie Z de la double liaison. 5. Ligands spécifiques de récepteurs d'hormones stéroîdes selon la revendication 3, utiles notamment pour l'imagerie médicale notamment du cancer, caractérisés en ce qu'ils comportent un isotope radioactif choisi parmi 123I et 18F. 6. Ligands spécifiques selon la revendication 3, utiles notamment pour le dosage de récepteurs d'hormones stéroides, caractérisés en ce qu'ils comportent l'isotope 125I substitué selon l'isomérie Z sur la double liaison du groupement vinyl en alpha de la position C17. 7. Ligands selon l'une des revendications I à 6, caractérisés en ce que la fonction en position C3 est un groupe hydroxyle attaché à un cycle aromatique. 8. Ligands selon l'une des revendications I à 6, caractérisés en ce que la fonction en position C3 est une fonction cétone conjuguée à une double liaison en C4-C5. 9. Ligands selon la revendication 7, caractérisés en ce que c'est un Il beta-chlorométhyl 17 alpha-halogénovinyl-estradiol. 10. Ligands selon la revendication 8, caractérisés en ce que c'est un 11 beta-chlorométhyl 17 alpha-halogénovinyl 17 beta-hydroxy-19- nor-4-androstène-3-one. 1 1. Ligand selon la revendication 7, caractérisé en ce que c'est un I I beta-chlorométhyl 17 alpha-iodovinyl-estradiol d'isomérie Z. 12. Ligand selon la revendication 8, caractérisé en ce que c'est un Il beta-chlorométhyl 17 alpha-iodovinyl 17 betahydroxy-19-nor-4andorstèn-3-one d'isomérie Z. 13. A titre de produit nouveau utile notamment dans la synthèse des ligands spécifiques selon l'une des revendications précédentes un produit de formule C CH 2 Y y dans laquelle X' représente un groupement vinyl en alpha de la position C17 sur la double liaison duquel le groupe tributylstannyl est substitué selon une isomérie Z, et Y a la signification donnée précédemment. 14. Procédé de synthèse des ligands selon l'une des revendi- cations I à 13, caractérisé en ce que le dérivé halogéné est préparé à partir du produit selon la revendication 13.