FR 2635526 A1 19900223 FR 8910933 A 19890816 DERIVE NUCLEOTIDIQUE La présente invention concerne des dérivés de 1'A... cyclique et des dérivés de la GTP cyclique présentant des effets pharmacologiques utiles, tels qu'une activité anti-démence, etc. Les composés selon l'invention sont nouveaux et ils peuvent être représentés par la formule générale [I] suivante: A O aI] O-P-O R R qui englobe les composés optiquement purs o R repré- sente un atome d'hydrogène, un groupe hydroxyle ou un groupe acyloxy; R représente un groupe alkyle; et A représente: 3 2. 2635526 NH-R O I C - N5N I R NH I (o R représente un atome d'hydrogène ou un groupe acyle; R représente un atome d'hydrogène ou un atome d'halogène; R représente un atome d'hydrogène ou un groupe acyle; et R représente un atome d'nydrogène ou un atome d'halogène), à l'exclusion de celui o R est un hydroxyle, R est un méthyle et A est; j'; tjY.. 3 4 {o R est un hydrognr.e et R est un hydrogène!. On sait que 1'AMP cyclique agit par exemple, comme transmetteur d'hormones et qu'elle participe à diverses réactions physiologiques dans les corps vivants. Pour cela, cn s'est intéressé à ses effets pharmacologiques. Toutefois, de nombreuses questions se posent quant à son utilité en tant cue médicament. Par exemple, le composé n'est que peu absorbé dans les corps vivants et, même après qu'il ait été absorbé, il a facilement tendance à être décomposé les enzymes présentes. L'AMP dibutyryle cyclique a été synthétisée dans le but d'améliorer la perméabilité cellulaire de l'AMP cyclique et elle a effectivement été utilisée comme médicament. Une étude récente a démontré qu'un composé (adénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique) qui cor- respond à la formule générale [I, o R est hydroxyle, respond à la formule générale [I], oti R est hydroxyle, 3- 2635526 R est un méthyle et A est NH-R lq Nl 4 N/ N/ 3 4 (o R est un hydrogène et R est un hydrogène) possède d'utiles propriétés pharmacologiques (voir la publica- tion non examinée de brevet japonais No. 135 399/38. L'étude ci-dessus est utile dans le sens o elle a prouvé qu'un dérivé de l'AMP cyclique exerce des effets pharmacologiques. Cependant, l'étude n'a décrit cqu'ur. dérivé de l'AE-P cyclique ou un groupe méthyle est présent comme seul groupe substituant sur la partie acide phosphorique, et aucune mention n'est faite con- cernant d'autres dérivés de l'AMP cyclique. Un objet de la présente invention est de fcurnir divers dérivés de l'A:>P cyclique utiles en tant que médicaments. Un autre objet de l'invention est de fournir des dérivés de la GMP cyclique présentant des activités pharmacologiques similaires à celles des déri- vés de l'AM-P cyclique. Les inventeurs ont procédé à des études sur la synthèse de différents dérivés de l'AMP cyclique et de la GMP cyclique et sur leurs effets pharmacologiques, et ils ont établi maintenant un procédé de synthèse de dérivés de l'AMP et de la GMP, confirmé leurs effets pharmacologiques et complété la présente invention. Les composés selon la présente invention sont représentés par la formule générale [I] donnée ci- dessus. Naturellement, les composés de la présente invention englobent les composés optiquement purs de la formule générale [Il. Dans la formule générale [I], l'ossature de base de 4. 2635526 l'adénine ou de la guanine est représentée par A; R représente un atome d'hydrogène ou un groupe acyle; comme exemples de groupe acyle, on peut 31 31 mentionner ceux représentés par -COR (o R représente un groupe alkyle tel que méthyle, éthyle propyle et butyle; un groupe aryle, tel que phényle et naphtyle; ou similaire); R représente un atome d'hydrogène ou un atome d'halogène: comme exemples d'atomes d'halogène, on peut mentionner le brome, le chlore, le fluor, etc; R représente un atome d'hydrogène ou un groupe acyle: comme exemples de groupes acyle, on peut 51 51 mentionner ceux représentés par -COR (o R représer.- un groupe alkyle, tel que méthyle, éthyle, propyle et butyle; un groupe aryle tel que phényle et naphtyle; ou similaire; R représente un atome d'hydrogène ou un atome d'halogène: comrre exemples d'atomes d'halogène, on peut mentionner le brome, le chlore, le fluor, etc; R représente un groupe hydroxyle ou un groupe acyloxy; et R représente un groupe alkyle ordinaire, en particulier _n groupe alkyle inférieur tel que méthyle, éthyle, propyle et butyle. Comme exemples de composés selon la présente inven- tion, on peut mentionner ceux donnés ci-dessous. Cepen- dant l'invention ne se limite pas à eux. Bien évidem- ment, la présente invention englobe les formes diasté- réoisomériques, ainsi que les formes optiquement pures des ces composés. N-acétyladénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique. N-butyryladénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique N-benzoyladénosine3',5' méthyl phosphonate cyclique N-acétyladénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-butyryladénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique 5. 2635526 N-benzoyladénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-acétyladénosine-3', 5' propyl phosphonate cyclique N-butyryladénosine-3',5' propyl phosphonate cyclique N-benzoyladénosine-3',5' propyl phosphonate cyclique 2'-désoxyadénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique N-acétyl-2'désoxyadénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique N-butyryl-2'désoxyadénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique N-benzayl-2'désoxyadénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique N-acétyl-2'désoxyadénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-butyryl-2'désoxyadénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-benzoyl-2'désoxyadénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-acétyl-2'désoxyadénosine-3',5' propyl phosphonate cyclique N-butyryl-2'désoxyadénosine-3',5' propyl phosphonate cyclique N-benzoyl-2'désoxyadéncsine-3',5' propyl phosphonate cyclique 2'-O-butyryladénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique - N-acétyl-2'-O-butyryladénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique Nbutyryl-2'-O-butyryladénosine-3',5' méthyl phosphcnate cyclique N-benzoyl2'-O-butyryladénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique N-acétyl-2'-Obutyryladénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-butyryl-2'-Obutyryladénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-benzoyl-2'-Obutyryladénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-acétyl-2'-Obutyryladénosine-3',5' propyl phosphonate cyclique N-butyryl-2'-Obutyryladénosine-3',5' propyl phosphonate cyclique N-benzoyl-2'-Obutyryladénosine-3',5' propyl phosphcnate cyclique N-acétyl-8bromoadénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique N-butyryl-8bromoadénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8bromoadénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique N-acétyl-8bromoadénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-butyryl-8bromoadénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8bromoadénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-acétyl-8-bromoadénosine3',5' propyl phosphonate cyclique N-butyryl-8-bromoadénosine-3',5' propyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8-bromoadénosine-3',5' propyl phosphonate cyclique N-acétyl-8-bromo-2'-désoxyadénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique N-butyryl-8-bromo-2'-désoxyadénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8-bromo-2'-désoxyadénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique N-acétyl-8-bromo-2'-désoxyadénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-butyryl-8-bromo-2'-désoxyadénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8-bromo-2'-désoxyadénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-acétyl-8-bromo-2'-désoxyadénosine-3',5' propyl phosphonate cyclique N-butyryl-8-bromo-2'-désoxyadénosine-3',5' propyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8-bromo-2'-désoxyadénosine-3',5' propyl phosphonate cyclique N-acétyl-8-bromo-2'-O-butyryladénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique N-butyryl-8-bromo-2'-C-butyryladénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8-bromo-2'-O-butyryladénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique N-acétyl-8-bromo-2'-O-butyryladénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-butyryl-8-bromo-2'-O-butyryladénosine-3',5' éthyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8-bromo-2'-O-butyryladénosine-3',5e êthyl phosphonate cyclique N-acétyl-8-bromo-2'-O-butyryladénosine-3',5' propyl phosphonate cyclique N-butyryl-8-bromo-2'-O-butyryladénosine-3',5' propyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8-bromo-2'-O-butyryladénosine-3',5' propyl phosphonate cyclique Guanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique 7. 2635526 N-acétylguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-butyrylguanosine-3'5' méthyl phosphonate cyclique N-benzoylguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-acétylguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique Nbutyrylguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique N-benzoylguanosine-3'5' éthyl phosphonate cyclique N-acétylguanosine-3'-5' propyl phosphonate cyclique N-butyrylguanosine-3'-5' propyl phosphonate cyclique N-benzoylguanosine-3'-5' propyl phosphonate cyclique- 2'-désoxyguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique- N-acétyl-2'-désoxyguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-butyryl2'-désoxyguanosine-3'-5' méthyl'phosphonate cyclique N-benzoyl-2'désoxyguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-acétyl-2'désoxyguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique N-butyryl-2'désoxyguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique N-benzoyl-2'désoxyguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique N-acétyl-2'désoxyguanosine-3'-5' propyl phosphonate cyclique N-butyryl-2'désoxyguanosine-3'-5' propyl phosphonate cyclique 2'-O-butyrylguanosine3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-acétyl-2'-O-butyrylguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-butyryl-2'-O-butyrylguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique K-benzoyl-2'-O-butyrylguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-acétyl-2'-O-butyrylguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cycliqu.- N-butyryl-2'-O-butyrylguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique N:benzoyl-2'-O-butyrylguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique N-acétyl2'-O-butyrylguanosine-3'-5' propyl phosphonate cyclique N-butyryl-2'-Obutyrylguanosine-3'-S' propyl-phosphonate cyclique N-benzoyl-2'-Obutyrylguanosine-3'-5' propyl phosphonate cyclique N-acétyl-8bromoguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-butyryl-8bromoguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8bromoguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-acétyl-8bromoguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique N-butyryl-8bromoguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8bromoguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique N-acétyl-8-bromoguanosine3'-5' propyl phosphonate cyclique 8. N-butyryl-8-bromoguanosine-3'-5' propyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8-bromoguanosine-3'-5' propyl phosphonate cyclique N-acétyl-8-bromo-2'-désoxyguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-butyryl-8-bromo-2'-désoxyguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8-bromo-2'-désoxyguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-acétyl-8-bromo-2'-désoxyguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique N-butyryl-8-bromo-2'-désoxyguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8-bromo-2'-désoxyguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique N-acétyl-8-bromo-2'-désoxyguanosine-3'-5' propyl phosphonate cyclique N-butyryl-8-bromo-2'-désoxyguanosine-3'-5' propyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8-bromo-2'-désoxyguanosine-3'-5' propyl phosphonate cyclique N-acétyl-8-bromo-2'-O-butyrylguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-butyryl-8-bromo-2'-O-butyrylguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8-bromo-2'-O-butyrylguanosine-3'-5' méthyl phosphonate cyclique N-acétyl-8-bromo-2'-O-butyrylguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique N-butyryl-8-bromo-2'-O-butyrylguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique N-benzoyl-8-bromo-2'-O-butyrylguanosine-3'-5' éthyl phosphonate cyclique N-acétyl-8-bromo-2'-O-butyrylguanosine-3'-5' propyl phosphonate cyclique N-butyryl-8-bromo-2'-O-butyrylguanosine-3'-5' propyl phosphonate 9. 2635526 cyclique N-benzoyl-8-bromo-2'-O-butyrylguanosine-3'-5' propyl - phosphonate cyclique. Des explications sont données ci-après concernant les effets pharmacologiques des composés selon l'invention. L'effet inhibiteur de la phosphodiestérase de l'AMP cyclique a été étudié selon la méthode de W. Joseph et col. ("Method in Enzymology", 38, 205) en utilisant la phosphodiestérase de l'AMP cyclique du coeur du boeuf (produite par Belinger Manheim Co.), de Boehringer M4annheim. A 40 mr de tampon TrisHC1 (pH = 8) contenant du chlorure de magnésium à une concentration finale de 5 mI: et du 2-rercaptoéthanol à une concentration finale de 3, 75 mM, on a ajouté 200000 cpm d'AMP cyclique marquée au [ H], 0,125 à 100 pm d'A:NP cyclique, 1 jg de phosphodiestérase de l'AMP cyclique et un composé testé à diverses concentrations (le volume total du mélange réactionnel était de 400 pl). On a laissé la réaction o s'effectuer à 30 C pendant 10 minutes et on a traité o le mélange réactionnel à 100 C pendant 2,5 minutes pour désactiver l'enzyme. Une fois la température du mélanger réactionnel descendue à la température ambiante, on a ajouté 50 pg de venin de serpent (fabriqué par Sigma o Corp.) et le mélange a été chauffé à 30 C pendant 10 minutes pour décomposer en adénosine la 5'-AMP formée par l'action de la phosphodiestérase de l'AMP cyclique. On a ensuite ajouté 0,5 ml d'une suspension aqueuse 1:3 de résine AG1-X2 produite par Bio-Rad Co.) pour arrêter la décomposition et on a laissé reposer le mélange à o 4 C pendant 15 minutes. Ensuite, le mélange obtenu a été centrifugé 2 minutes à 12000 tours/min. La radio- activité de 500 pg de surnageant a été mesurée dans un compteur de scintillations et on a calculé l'activité 1o. 2635526 inhibitrice du composé testé. Dans le cas du composé 1 préparé dans l'exemple 1 ci-après, une inhibition mar- quée de l'activité a été notée à la concentration de 100 pM. L'effet inhibiteur de composés optiquement purs selon la présente invention vis-àvis de la phosphodi- estérase de la GMP a été testée d'une manière simi- laire. Elle est décrite ci-après en détail. Ainsi, l'effet inhibiteur a été testé selon Pichard et col. (J. Bio. Chem. vol. 251, p. 5726, 1976) en utilisant la phosphodiestérase des nucléotides cycli- ques provenant du coeur du boeuf (fabriquée par Boehringer Mannheim). Plus précisément, 50 pl de composé testé à la concentration de 10 pM, et 0,1 pg de phosphodiestérase de nucléotide ont été ajoutés à 100 pl de tampon Tris-HCl 40 mM (pH 8,0) préparé de manière à ce que la concentration finale en MgCl, en 2-merca- 3 2 ptoéthanol et en H GMP cyclique soit respectivement de mM, de 0,25 % et de 1,82x10 Bq (ce qui correspond à o 0,1 Fl). La réaction s'effectue à 30 C en 10 minutes, l'enzyme est désactivé par un chauffage de 5 minutes à o 97 C, on ajoute à la température ambiante 50 pg de venin de serpent (Sigma) à la 5'-GTP obtenue, le mélange o est maintenu à 30 C pendant 10 minutes pour la décompo- sition en guanosine, puis il est bien mélangé avec 50 pl d'une suspension aqueuse 1:3 de résine AGlx8 (Bio-Rad) et centrifugé à 14000 tours/min pendant 2 minutes. Le liquide surnageant (250 pl) est soumis à un comptage de la radioactivité dans un compteur de scin- tillations. La diminution de l'activité enzymatique par suite de l'addition du composé de la présente invention est donnée en pourcentage de l'activité trouvée avec le référence, lorsque aucun composé n'était ajouté. Ce pourcentage est défini comme étant "l'effet inhibiteur" et les résultats sont donnés dans le tableau 1. 11. 2635526 Tableau 1 - Composé utilisé Effet inhibiteur [VIII].46 [IX] 32 [X] 61 [XI] 31 Les structures stéréochimiques des composés purs utilisés ici, ainsi que d'autres qui ont été synthétisés dans les exemples donnés plus loin, sont les suivantes: AI o / P7 pvlf C. x} "'- 0 H3C\i on o, fJ N,'D -'-, X/ o/ Q f C' o. Cy 's 3x Ccx 3 /4C o x o > dS oB- ?a/^,'Oox/ /.f cx'Àv- 'alm I c xl-'- q 13. 2635526 Les composés de l'invention peuvent être admini- strés à des animaux, ainsi qu'à des humains, tels quels ou sous la forme d'une composition pharmaceutique conte- nant un ou plusieurs vecteurs inertes non toxiques et acceptables sur le plan pharmaceutique en une proportion allant de 0,1 à 99,5% et de préférence de 0,5 à 90 %. Comme vecteurs, on peut utiliser un ou plusieurs diluants, charges et/ou d'autres adjuvants de fabrica- tion solides, semi-solides ou liquides. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention sont administrées de préférence sous la forme de doses unitaires. Elles peuvent être administrées par voie orale, appliquées localement (par exemple dans une administration trans- dermique), par voie rectale, ou par injection intramus- culaire. Bien évidemment, les composés de l'invention doivent être administrés sous la forme de préparations adaptées au mode particulier d'administraticf choisi. L'administration intramusculaire peut être particulière- ment souhaitable. La posologie optimale lorsque ces composés sont utilisés en tant qu'agents anti-démence peut varier, par exemple en fonction de l'age, du poids, etc, du patient, ainsi que du mode d'administration, de la nature et de la gravité de la maladie. Généralement, la quantité d'ingrédients actifs selon l'invention admini- strée à un adulte est de 300 mg à 3 g/jour/individu, de préférence de 500 mg à 1 g/jour/individu. Il existe naturellement des cas o une quantité plus faible suffit ou des cas o une quantité plus importante est néces- saire. Il est préférable d'administrer de 1 à 3 doses par jour. Les dérivés nucléotidiques cycliques selon l'invention peuvent être synthétisés par exemple confor- mément aux réactions qui suivent: A HO O O Il P il. 2/P HO R R O- Q * O=P- O R Pl [IV] ag Acylation [VII] 12 -q l (o R a la même signification que cidessus; A représente un groupe adénine ou guanine; et R repré- sente un atome d'hydrogène ou un groupe tétrahydropyra- nyloxy). Plus précisément, on laisse réagir un nucleotide représenté par la formule générale [II] avec un alkyl- O,O-bis-(l-benzotriazolyl) phosphonate représenté par la formule générale [III], puis on ajoute un 1-alkylimida- zole, tel que le 1-méthylimidazole, pour -obtenir le dérivé cyclique représenté par la formule générale [IV]. Lorsque cela est nécessaire, le groupe tétrahydropyran- yle contenu dans [TV] peut être enlevé par réaction avec un acide. Ensuite, le composé traité par l'acide de la formule générale [IV] peut être soumis à une halogéna- tion ou à une acylation pour obtenir un composé repré- senté par la formule générale [V] (dérivé 8-halogénoadé- 15. 2635526 nosine), la formule générale [VI] (dérivé 8-halogénogua- nosine) ou la formule générale [VII] (dérivé 2'- acyloxy). Le matériau de départ [II] utilisé dans le procédé ci-dessus peut être préparé par la méthode décrite par S. Honda et col,. Tetrahedron, 40, 153-163 (1984), ou par une méthode similaire. Le composé représenté par la formule générale [III] peut être obtenu à partir d'un dichlorure d'acide alkylphosphonique et de 1-hydroxyben- zotriazole, conformément à la méthode de J.H. van Boom et col., Nucleic Acid Research, 14, 2171-2185 (1986). La réaction entre le composé [II] et le composé [III] peut être réalisée dans un solvant inerte (par exemple dans solvant aprotéique tel que le dioxane anhydre, le tétrahydrcfurane, etc), habituellement en laissant reposer à température ambiante pendant 30 minutes à 3 heures. Ensuite, on ajoute un composé 1- alkylimidazole, et en laisse reposer le mélange résul- tant à température amnbiante pendant 5 à 24 heures. La quantité de [III] utilisée va de préférence de 1 à 1,2 fois celle de [Il], sur une base molaire. La quantité de 1-alkylimidazole utilisée va de 3 à 7 fois celle du produit résultant de la réaction entre les composés [II] et [III], sur une base molaire. Ensuite, on ajoute au mélange réactionnel un acide fort ayant un pH d'environ 2,0, qui est de préférence un acide volatile du type acide trifluoroacétique ou chlor- hydrique, ou similaire, et on laisse reposer le mélange o obtenu entre 0 C et la température ambiante pendant 5 à 24 heures pour donner un composé non protégé [IV]. Dans cette réaction, l'acide est généralement utilisé en un très large excès par rapport au composé [IV]. D'autre part, le composé sans sa protection [IV] peut être soumis à une halogénation. Dans le cas de la bromuration par exemple, le composé [VI] peut être 16. 16. 2635526 traité par exemple par de l'eau bromée dans un tampon acetate ou avec de l'eau bromée seule à une température o entre O C et la température ambiante pour donner le composé [V] ou [VI]. Le composé traité à l'acide de la formule générale [IV] peut être converti en [VIII par acylation avec un halogénure d'acide ou avec un anhydride d'acide conte- 3 5 nant un groupe acyle correspondant à R ou à R. Cette acylation peut être conduite dans de la pyridine à une o température entre O C et la température ambiante en en temps allant de quelques heures à 24 heures. Les composés recherchés ainsi obtenus peuvent être isolés et purifiés par des techniques connues, par exemple par une extraction au moyen de solvants, ajus- tement de l'acidité ou de la basicité du solvant, échange de solvants, condensation, cristallisation, recristallisation etc. La présente invention sera illustrée en outre par des exemples ayant trait à la production de composés selon l'invention. Les matériaux de départ suivants utilisés dans les exemples ont été prépares comme suit. N-monométhoxytrityl-2'-0-tétrahydropyranyladénosine: Ce composé a été préparé selon la méthode décrite par S. Honda et col., Tetrahedron, 40, 153-163 (1984). N-benzoyl-2'-0-tétrahydropyranyladénosine: Ce composé a été préparé à partir de N- benzoyladénosine disponible commercialement selon la méthode de S. Honda et col. susmentionnée. Nl-butyryl-2'-O-tétrahydropyranyladénosine: Ce composé a été préparé de la manière suivante. Une solution de N-benzoyl-3',5'-tétraisopropyldisilo- xane-1,3-dlyl-2'-O-tétrahydropyranyl-adénosine dans du méthanol a été traitée pendant une nuit à température ambiante avec de l'ammoniaque concentré pour donner la 17. 3',5'-tétraisopropyldisiloxane-1,3-diyl-2'-O-tétrahydro- pyranyladénosine, qui a ensuite été traitée pendant une nuit à température ambiante avec du chlorure de butyryle dans de la pyridine pour donner la N-butyryl-3',5'-O- tétraisopropyldisiloxane-l,3-diyl-2'-O-tétrahydropyra- nyladénosine. Après que le dérivé butyryle ait été dissous dans 13 ml de tétrahydrofurane, on a ajouté 13 ml d'une solution 1 M de fluorure de tétrabutyle ammonium dans du tétrahydrofurane et le mélange a été agité à la température ambiante pendant 15 minutes. Apres la réaction, 100 ml d'un mélange de dichloromé- thane et de pyridine (3:1) ont été ajoutés et le mélange obtenu a été lavé avec une solution aqueuse saturée en carbonate de sodium. La couche organique a été séchée avec du sulfate de magnésium et concentrée à sec. Le résidu a été purifié par chromatographie sur gel de silice (dichlorométhane/méthanol) pour donner le produit recherché. La N-monométhoxytrityl-2'-0-tétrahydropyra- nylguanosine a été préparée selon la méthode de S. Honda et col. susmentionnée. Exemple 1 Synthèse du 8-bromoadénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique. A la température ambiante, on a ajouté à 915 mg de N-monométhoxytrityl-2'O-tétrahydropyranyladénosine à 20,5 ml d'une solution 0,11 M dans du dioxane de méthyl- O,O-bis-(l-benzotriazolyl) phosphonate préparé selon la méthode de J. H. van Boom et col., décrite dans Nucleic Acid Research, 14, 2171-2185 (1986) . Après 30 minutes, on y a ajouté 1,4 ml de 1-méthylimidazole et on a laissé la réaction s'effectuer pendant une nuit. EnFuite, on a ajouté 2,0 ml de pyridine et le mélange résultant a été fractionné avec du dichlorométhane et de l'eau (contenant 1/10 de volume de solution saturée en chlo- rure de sodium et 1/10 de volume de tampon acétate de triéthyle ammonium 1 M [pH = 7,0]) et la couche organique a été séchée avec du sulfate de magnésium et concentrée à sec pour donner des solides bruts. Le produit a été purifié par chromatographie sur couche mince préparative pour donner 310 mg de cristaux blancs. Le produit (310 mg) a été dissous dans 20 ml de mélange de dioxane et d'eau (9:1) et de l'acide chlor- hy(rique 0,1 N a été ajouté goutte à goutte jusqu'à atteindre un pH de 2, 0. Ceci a été laissé au repos une nuit à température ambiante. Lorsque la fin de la réaction était vérifié par chromatographie sur couche mince, le mélange réactionnel à été concentré à sec. Le résidu a été purifié par chromatographie en couche mince préparative pour fournir 125 mg de substance solide blanche. Le produit a été recristallisé dans un mélange eau-éthanol (5:95) et on a ainsi obtenu des aiguilles blanches d'adénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique. o Point de fusion: 207-210 C. Dans 0,4 ml de tampon acétate 0,5 Mi (pH = 4,0) on a dissous 10 mg du composé préparé ci-dessus et 0,6 ml 2 d'eau bromne ont été ajoutés à température ambiante. Après avoir laissé reposer pendant 1 heure, le mélange réactionnel a été évaporé à sec et le résidu a été purifié par chromatographie sur couche mince prépara- tive, ce qui a permis d'obtenir 11 mg du produit recherché. Chromatographie sur couche mince (méthanol/dichlo- rométhane [1:10]: Rf = 0,65 H-RMN (D O): 1,92 (3H, d, J=18,0 Hz P-CH, 2 3 4,35 (1H, m, H-5a), 5,06 (1H, d, J=6,0, H-2'), ,47 (1H, m, H-3'), 6,08 (1H, s, H-1'), 8,12 (1H, s, arom. H-2). MOeOH UV 'eO = 273 nm. max Exemple 2: Synthèse du N-benzoyladénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique 19. 2635526 A 93 mg de N-benzoyl-2'-O-tétrahydropyranyladéno- sine, on a ajouté 2,7 ml d'une solution 0,11 M dans du dioxane de méthylO,O-bis-(1-benzotriazolyl) phosponate préparé de la même manière que dans l'exemple 1. Après avoir laissé reposer le mélange obtenu à température ambiante pendant 30 minutes, 0,2 ml de 1-méthylimidazole y ont été ajoutés et on a laissé la réaction continuer pendant une nuit à la température ambiante. Ensuite, on a ajouté 1,0 ml de pyridine et le mélange résultant a été traité de la même manière que dans l'exemple 1 pour obtenir 40 mg de N-benzoyl-2',O-tétrahydropyranyladéno- sine-3',5i méthyl phosphonate cyclique, sous la forme d'une substance solide blanche. Le produit ci-dessus (40 mg) a été dissous dans 4,0 -15 ml d'un mélange de dioxane et d'eau (9:1), et on a ajouté goutte à goutte 1,4 ml d'acidechlorhydrique à la température ambiante. Après la réaction, on a laissé le mélange reposer une nuit pour terminer la réaction, le mélange réactionnel a été évaporé à sec et le résidu a été purifié par chromatographie sur couche mince prépa- rative, ce qui a permis d'obtenir 32 mg de substance solide blanche. * H-RMN (CDC1 /CD OD [8:2] C: 1,76 (3H, d, J=18, P-CH), 3 3 3 4,30-4,7 (4H, m), 4,84 (1H, d, J=5,0, H-2'), 5,30 (1H, m, H-3'), 6,11 (1H, s, H-i'), 7,50-7,70 (3H, benzoyle), 8,00-8,10 (2H, benzoyle), 8,34 (1H, s, arom.) et 8,67 (1H, s, arom.). Exemple 3: Synthèse du N-butyryladénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique mg de N-butyryl-2'-O-tétrahydropyranyladénosine- 3',5' méthyl phosphonate cyclique ont été obtenus sous la forme d'une substance blanche à partir de 134 mg de N-butyryl-2'-Otétrahydropyranyladénosine d'une manière similaire à celle de l'exemple 1. 20. 2635526 Le produit a été soumis à une hydrolyse acide similaire à celle de l'exemple 1 pour donner 30 mg du produit recherché. HR-RM. (D O) >: 1,00 (3H, t, J=7,8 CH CH), 2 2 3 1,80 (3H, sextet, J=7,8 CH CIl), 2 3 1,86 (3H, d, J=18,0 P-CH, 3. 2,60 (2H, t, J=7,8 -CO-CH -), 4,92 (1H, d, J=4,0, H-2'), ,20 (1H, m, H-3'), 6, 25 (1H, s, H-1'), 8,46 (1H, s, arom.), et 8,65 (1H, s arom.) Exemple 4: Synthèse du N-benzoyl-2'-O-désoxyadénosine- 3',5'-éthyl phosphonate cyclique. Or. a ajouté à 355 mg- de N-benzoyl-2'-désoxyadêno- sirne du commerce 14 ml d'une solution 0,11 M dans du dicxane de méthyl-O, O-bis(1-benzotriazole) phosphonate rr,:arÉ -'une manière similaire à celle de l'exemple 1. ADrès 3 7inutes, on y a ajouté 1,0 ml de 1-méthylimida- zcie. Après agitation pendant une nuit à la température 28 a7biante, on a ajouté 2,0 ml de pyridine et le mélange obtenu a été fractionné avec 100 ml d'un mélange de dichiorométhane et de dioxane (9:1), et de solution aqueuse saturée en chlorure de sodium. La couche organique a été évaporée à sec et le résidu a été purifié par chromatographie sur gel de silice pour obtenir 114 mg du composé recherché sous la forme d'une substance solide blanche. Exemple 5: Synthèse du guanosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique A 280 mg de N-monométhoxytrityl-2'-O-tétrahydropy- ranylguanosine, on a ajouté à la température ambiante 8 ml d'une solution 0,11 M dans du dioxane de méthyl-O,O- bis-(1-benzotriazole) phosphonate préparé d'une manière similaire à celle de l'exemple 1. Apres 30 minutes, on y a ajouté 0,6 ml de 1méthylimidazole. On laisse la 21. réaction s'effectuer pendant une nuit à la température ambiante, on a ajouté 1,0 ml de pyridine et le mélange résultant a été fractionnée avec du dichlorométhane et une solution saturée en chlorure de sodium. La couche organique a été évaporée à sec et le résidu a été purifié par chromatographie sur couche mince prépara- tive, ce qui a periis d'obtenir 60 mg de N-monométhoxy- trityl-2'-O-tétrahydropyranylquanosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique sous la forme d'une substance solide blanche. On a dissous dans 4,0 ml d'un mélange de dioxane et d'eau (9:1) 40 mg du composé et le pH de la solution a été ajusté à 2,0 avec de l'acide chlorhydrique 0,1 N. Après avoir laissé reposer pendant une nuit à la température ambiante, on a évaporé le mélange réaction- nel à sec et on a procédé à une purification par chromatographie sur couche mince, ce qui a permis d'obtenir 19 mg du produit recherché. o Point de fusion: 238-240 C (décomposition) H-RMN (D O) d: 1,82 (3H, d, J=18,0 P-CH), 4,34-4,90 2 3 (4H, mi, ,20 (1H, m, H-3'), 5,98 (1H, s, H-1'). et 7,85 (1H, s, H-8). UV: 252 nm ( t= 13200) max Exemple 6: Synthèse du 8-bromoguanosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique On a ajouté à 0,5 ml d'eau 2,0 mg de guanosine- 3',5' méthyl phosphonate cyclique préparée dans l'exemple 5. A ceci, on a ajouté 0,2 ml d'eau bromée et on a laissé la réaction s'effectuer à température ambiante pendant 5 minutes. On a confirmé par chromatographie sur couche mince que la substance de départ avait complètement disparu [chromatographie sur couche mince: méthanol/dichlorométhane (2:8), Rf de la 22. substance de départ = 0,13, Rf du produit = 0,45]. Le mélange a été concentré à sec et le résidu a été purifié par chromatographie sur couche mince, ce qui a permis d'obtenir 2,5 mg du composé recherché. UV 1,0 = 261 nm (t= 18500). mrrax Exemple 7: Synthèse du N-n-butyryl-2'-0-n- butyryladénosine 3',5' méthyl phosphonate cyclique A la température ambiante, on a ajouté 60 pl de chlorure de n-butyryle à 6,0 ml d'une solution de 5 mg d'adénosine-3',5' méthyl phosphonate cyclique dans de la pyridine. Après avoir laissé reposer pendant une nuit, le mélance a été évaporé à sec et le résidu a été fractionné avec du dichlorom'thane et de l'eau. La couche crganique a été séchée et évaporée à sec et le résidu a été purifié par chromatographie sur couche mince préparative, ce qui a permis d'obtenir 3 mg du rc-uit recherché. -?X: fCDCl) J: 1,72 (3H, d J=19,0), 2,60 (2H, t, NHCO-CH -), 2,84 (2H, t, OCO-CH -), 5,28 (1H, d, H- 2'), 6,02 (1H, s, H-i'), 8,10 (1H, s, arom), et 8,71 (1H, s, arom). Exemple 8: Synthèse de [VIII] et de [IX] On a dissous 90 mg de guanosine3',5' méthyl phosponate cyclique préparé dans l'exemple 5 dans 20 ml d'eau, - et la solution a été soumise à une chromatographie en phase inversée sur du silicagel (40 ml; 20-80 pm) avec élution successive par de l'eau, du méthanol aqueux 5%, du méthanol aqueux 10% et du méthanol aqueux 15%. 8 mg de [IX] ont été élues en premier, suivis de 75 mg de [VIII]. L'élution permet de les séparer complètement. 23. [VIII]: H RMN (D O, 220 MHz): 1,82 (3H, d, J=19,0, p-CH), 4,34-4,90 (4H, m), 5,20 (1H, m, H-3'), ,80 (1H, s, H-i'), 7,86 (1H, s, H-8). [IX]: H RMIN (D O, 220 MHz): 1,88 (3H, d, J=18,0, p-CH), 4,34-4,90 (5H, m), 6, 02 (1H, s, H-I'), 7,86 (1H, s, H-8). Exemple 9: Synthèse de [X] et de [XII On a fait réagir 32 mg de [VIII] préparé dans l'exemple 8 avec 1,0 ml d'eau bromée à la température ambiante pendant 5 minutes dans 1,0 ml d'eau. Le brome a été évaporé par aspiration, et le précipité obtenu a été recueilli, lavé avec de l'eau froide et rinsé avec de l'acétone pour fournir 30 mg de [X] sous la forme d'une poudre jaune. On a préparé d'une manière similaire 28 mg de [XI] sous la forme d'une poudre jaune, à partir de 32 mg de [IX]. Exemple 10: Synthèse de [XII] mg de [VIII] préparés dans l'exemple 8 ont été laissés pendant une nuit 2 la température ambiante en mélange avec 0,5 ml d'anhydride acétique et 1,0 ml de pyridine, puis on a concentré et évaporé à sec le mélange de réaction sous vide et on a broyé le résidu dans un mélange 100:5:0,5 de n-hexane, de dichloromé- thane et méthanol, ce qui a permis d'obtenir 32 mg de [XII]. H RMN [CD OD-CDC1 (1:1), 220 MHz]: 1,75 (3H, d, 3 3 J=18,0, p-CH), 2,20 (3H, s, OCOCH, 4,00-4,65 (3H, mi, 3 3 ,80 (1H, d, J=8,0, H-1'), 5,75-5,85 (2H, m, H-2',3' chevauchant H-1'), 7,60 (1H, bs, H-8). Exemple 11: Synthèse de [XIII] On a mis en suspension 30 mg de [VIII] préparé dans l'exemple 8 dans 3,0 ml de pyridine et on les a faits réagir avec avec 72 mg de chlorure de palmitoyle pendant 12 heures. Apres la réaction, on a concentré le rélange 24. 2635526 et on l'a fractior.nné avec du dichlorométhane et de l'acide chlorhydrique dilué. La couche brganique a été concentrée et évaporée à sec. Le résidu a été purifié par chromatographie sur couche mince préparative (20 x 20 cm; 2 mm d'épaisseur) en utilisant du méthanol (5%) - chlorure de mréthylène comme solvant d'élution, ce qui a permis d'obtenir 43 mg de [XIII]. 25. 26355Z6 25. REVENDICATIONS 1. Composés représentés par la formule générale [I] suivante: A i 07 O0P - O R R [o R représente un atome d'hydrogène, un groupe hydroxyle ou un groupe acyloxy; R représente un groupe alkyle; et A représente: NF-R O ! I1 I 'Rou R j RNH I (o R représente un atome d'hydrogène ou un groupe acyle; R représente un atome d'hydrogène ou un atome d'halogène; R représente un atome d'hydrogène ou un groupe acyle; et R représente un atome d'hydrogène ou un atome d'halogène)], à l'exclusion de celui o R est un hydroxyle, R est un méthyle et A est: NH-R Yf Nô I N 3 4 (o R est un hydrogène et R est un hydrogène). 2. Composé selon la revendication 1, o ledit composé est optiquement pur.