FR 2623503 A1 19890526 FR 8715979 A 19871119 1 -2623503 L'invention concerne les produits optiquement actifs de dérivés de la 20, 21-dinoréburnaménine, leur procédé de préparation, leur application comme médicaments et les compositions pharmaceutiques les renfermant. L'invention a pour objet les produits optiquement actifs des produits racémiques de formule (I) dans laquelle l'atome d'hydrogène en position 3 et l'atome d'hydrogène en position 16 sont trans et dans laquelle le groupement I A \B représente soit: le radical hydroxy étant- sous la forme alpha ou béta, soit Les deux produits racémiques de formule (I) dans laquelle les atomes d'hydrogène en positions 3 et 16 sont trans et dans laquelle A représente H \B -HO___ avec le radical hydroxyle dans l'une ou l'autre des deux orientations possibles sont décrites aux exemples 2 et 4 du brevet belge 864173. Le produit racémique de formule (I) dans laquelle les atomes d'hydrogène en positions 3 et 16 sont trans et dans laquelle \ représente est décrit à l'exemple I du brevet français nu 2514357. L'invention concerne notamment les produits optiquement actifs des produits racémiques de formule (I) dans laquelle le groupement 2 2623503 A représente: H à savoir: \B-" HO - Le (14béta, 16alpha) 14,15-dihydro 20,21-dinoréburnamenin-14-ol, - le (3alpha, 14béta) 14,15-dihydro 20,21-dinoréburnamenin-14-ol, - le (14aLpha, 16alpha) 14,15-dihydro 20,21-dinoréburnamenin-14-ol, - et Le (3alpha, 14alpha) 14,15-dihydro 20,21-dinoréburnamenin-14-ol ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques. L'invention concerne aussi particulièrement les produits optiquement actifs des produits racémiques de formule (I) dans laquelle le groupement: A représente: à savoir: - la (16alpha) 20,21-dinoréburnaménine, - et la (3alpha) 20,21-dinoréburnaménine, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques. Les sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques des produits de formule (I) peuvent être, par exemple, les sels formés avec les acides chlorhydrique, bromhydrique, iodhydrique, nitrique, sulfurique, phosphorique, propionique, acétique, formique, benzolque, malélque, fumarique, succinique, tartrique, citrique, oxalique, glyoxylique, aspartique, ascorbique, les acides alcoylmonosulfoniques, tel que l'acide méthanesulfonique, l'acide éthanesulfonique, l'acide propanesulfonique, les acides alcoyldisulfoniques tels que l'acide méthanedisulfonique, l'acide alpha, béta-éthanedisulfonique, les acides arylmonosulfoniques, tels que l'acide benzènesulfonique et les acides aryldisulfoniques. L'invention concerne aussi un procédé d'obtention des produits optiquement actifs, caractérisé en ce que: a) on réduit soit le produit de formule (II) trans 3alpha, soit le produit de formule (II') trans 16alpha: (II) (IIC') H H trans 3alpha trans 16alpha 3 2623503 pour obtenir respectivement soit le produit de formule (IA) trans 3aLpha, soit Le produit de formule (I'A) trans 16aLpha, produits de formules (IA) et (I'A) correspondant aux produits de formule CI) dans laquelle le groupement: A représente le groupement: H \B HO dans lequel le radical hydroxy est en position équatoriale; b)on soumet ensuite, si désiré, soit le produit de formule (IA) soit le produit de formule acide minéral ou organique pour en former le sel. Dans les conditions préférentielles de mise en oeuvre de l'invention, le procédé décrit ci-dessus est réalisé de la manière suivante: - la réduction du produit de formule (II) ou du produit de formule (II') s'effectue avec un hydrure, tel que par exemple, l'hydrure mixte de lithium et d'aluminium, le diéthylhydrure de sodium et d'aluminium, l'acide utilisé pour obtenir le produit (IA1) à partir du produit CIA) ou le produit óI'A1) à partir du produit (I'A) est l'acide chlorhydrique. La séparation des produits (IA1) et (IA) et des produits (I'A1) et (I'A) s'effectue par chromatographie, - l'agent de déshydratation utilisé pour obtenir les produits (Ic) et (I'C) à partir des produits (IA), (IA1), (I'A) ou (I'A1) est un acide tel que l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide sulfurique, l'acide acétique, l'acide paratoluènesulfonique. 4 2623503 l'acide méthanesulfonique. Les produits optiquement actifs de l'invention ainsi que leurs sels d'addition avec les acides présentent d'intéressantes propriétés pharmacologiques. Certains possèdent en particulier une affinité pour les récepteurs alpha2 adrénergiques. Les résultats donnés plus loin dans la partie expérimentale montrent une dissociation importante de l'affinité pour le récepteur alpha2 entre les deux énantiomères de chaque produit racémique. Les produits optiquement actifs de l'invention présentent aussi d'intéressantes propriétés anti-amnésiantes, anti-dépressives, protectrices neuronales, anti-anoxiques, anti-ischémiques. Ces propriétés justifient leur application en thérapeutique et l'invention a également pour objet à titre de médicaments, les produits optiquement actifs tels que définis ci-dessus ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques pharmaceutiquement acceptables. L'invention a plus particulièrement pour objet, à titre de médicament: le (14alpha, 16alpha) 14,15-dihydro 20,21-dinoréburnamenin-14-ol, - le (3alpha, 14béta) 14,15-dihydro 20,21-dinoréburnaménin-14-ol et leurs sels d'addition avec les- acides pharmaceutiquement acceptables. Les médicaments, objet de l'invention, peuvent être utilisés dans le traitement des insuffisances cérébrales d'origine anoxique et- ischémique, dans les troubles de la mémoire et de l'attention. Ils peuvent également être utilisés comme antidépresseurs. L'invention s'étend aux compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif les médicaments définis ci-dessus. Ces compositions pharmaceutiques peuvent être administrées par voie buccale, rectale, par voie parentérale ou par voie locale en application topique sur la peau et les muqueuses. Ces compositions peuvent être solides ou liquides et se présenter sous les formes pharmaceutiques couramment utilisées en médecine humaine, comme, par exemple, les comprimés simples ou dragéifiés, les gélules, les granulés, les suppositoires, les préparations injectables, les pommades, les crèmes, les gels et les préparations en aérosols; elles sont préparées selon les méthodes usuelles. Le principe actif peut y être incorporé à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les gLycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émulsifiants, les conservateurs. La posologie usuelle, variable selon le produit utilisé, le sujet traité et l'affection en cause, peut être, par exemple, de 10 mg à 200 mg par jour chez l'adulte, par voie orale. Par ailleurs, les produits de formules II et II'utilisés comme produits de départ dans Le procédé de l'invention, sont décrits dans le brevet belge nu 764166. Les exemples donnés ci-après illustrent l'invention sans toutefois la limiter. Exemple I: (14bita, 16alpha) 14,15-dihydro 20,21-dinorêburnaménin-14- ol. On dissout 10,8 g de (16aLpha) (+) 20,21-dinoréburnaménin-14(15H)- one dans 110 cm3 de toluène anhydre, ajoute en dix minutes, sous atmosphère inerte, 18,9 cm3 de dihydrure de diéthyl aluminium-sodium à % dans le toluène et agite une heure à température ambiante. On hydrolyse par addition de 20 cm3 de soude 5N et chauffe à 90OC pendant deux heures. On distille le toluène et simultanément, on introduit 100 cm3 d'eau. On amène à température ambiante, essore le produit obtenu, lave à l'eau, sèche sous. pression réduite et récupère 10,7 g de produit attendu qui recristallise dans le méthanol et fond à 254nC. /alpha/D = 36= + 1 (c = 0,6% DMF). Dichroïsme circulaire (dioxanne) Max. 225 nm 4= - 8 Max. 237 nm A E= + 9, 5 Max. 280 nm A = -2 Spectre RMN (pyridine) 250 MHZ ppm Structure possible avec OH équatorial OH axial non détecté. -OH: 5,78 (m) Exemple 2: C3alpha,14aLpha) 14,15-dihydro 20,21-dinoriburnamênin-14- ol On opère comme à l'exemple 1 à partir de 15 g de (3alpha) (-)(20,21- dinoréburnaménin-14(15H)-one et obtient 15 g de produit attendu contenant très peu de produit ayant l'OH axial. Après recristallisation dans le méthanol, on obtient le produit fondant 6 2623503 à 254UC. /alpha/D = + 32,5u + 1 (c = 1% DMF) Dichroisme circulaire (dioxanne) Max. 227 nm,E.- = + 10 Max. 238 nm, = - 10 Max. 288 nm 4E = + 2 Spectre RMN 250 MHZ (pyridine) ppm Structure possible avec OH équatorial OH axial non détecté. \i OH: 5,79 (m) Exemple 3: (14alpha, 16alpha) 14,15-dihydro 20,21-dinorêburnaménin- 14-ol. On met en suspension 2,75 g du produit obtenu à l'exemple 1 dans 55 cm3 d'acide chlorhydrique 2N et chauffe une heure trente minutes à 50OC. On ajoute à la solution obtenue 55 cm3 d'eau glacée et amène à un pH alcalin par addition de 10 cm3 d'ammoniaque 22 Bé et agite 15 minutes à température ambiante. On essore le précipité, lave à l'eau, sèche à 50UC sous pression réduite et obtient 2,7.5 g de produit (mélange OH axial et équatorial). On chromatographie ce dernier sous pression, sur silice, élue par un mélange acétate d'êthyle - méthanol - ammoniaque (97-3-0,3). On obtient 1,70 g de produit (OH axial). F = 234zC. /alpha/D = + 150 + 2 (c = 1% DMF). Dichrolsme circulaire (dioxanne) Max.: 230 nm =+ 19 Max.: 290 nm = - 1,75 Spectre RMN 250 MHz (pyridine) ppm Structure possible avec OH axial Isomère OH équatorial non détecté. JC Q OH: 6,26 (m) Exemple 4: (3alpha, 14bkta) 14,15-dihydro 20,21-dinor6burnaménin-14- ol. On opère comme à l'exemple 3 en partant de 13,3 g de produit obtenu à l'exemple 2 et obtient 7,7 g de produit (OH axiai). F = 234mC /alpha/D = -152,5m + 2,5u (c = 1% DMF) Dichroisme circulaire (dioxanne) Max.: 228 nm e = - 20 Max.: 290 nm -- = + 1,5 7 2623503 Spectre RMN (250 MHz) pyridine ppm Structure possible avec OH axial isomère avec OH équatorial non détecté. C Q OH: 6,23 ExempLe 5:(3aLpha) 20,21-dinoriburnaminine On met en suspension 1,2 g du produit obtenu à l'exemple 2 dans 24 cm3 de toLuène anhydre, ajoute 1 % d'acide paratoLuènesulfonique et chauffe 4 heures au reflux. On amène à sec et reprend l'extrait sec par cm3 d'acétate d'éthyle. On filtre l'insoluble et concentre à sec le filtrat. On chromatographie sur silice le résidu, élue par un mélange chlorure de méthylène - acétone (1-1) et obtient 0,610 g de produit attendu. F = 139nC. /alpha/D = + 445,5n + 5m (c = 1% CHCl3) Dichroisme circulaire (éthanol) - Max.: 257 nm = + 33 Infl.: 290 nm xa = + 3,5 Infl.: 299 nm A = + 5,7 Infl. : 302 nm E = = + 6 Max.: 308 nm x& = + 7,8 Spectre RMN (CDCl3) 250 MHz en ppm Structure possible, fonction trans: éthyléniques: 5,07 (dd, J = 2 et 7,5) 6,96 (dd, J = 3 et 7,5) indole: H3/H6 : 7,05 à 7,20 H4/H7: 7,32 (d) et 7,46 (d) autres protons: 1,3 à 3,2 Exemple 6: (16aLpha) 20,21-dinoriburnamênine. On opère comme à l'exemple 5 à partir de 1,2 g du produit obtenu à L'exemple 1 et obtient 0,640 g de produit attendu. F = 139uC. /alpha/D = -439u + 5n (c = 1%X CHCL3) Dichrolsme circulaire (éthanol) Max. 257 nm u = - 31 InfL. 290 nm a ú = - 32 Infl. 300 nm É = - 5,3 Max. 307 nm = - 7,4 Spectre RMN (CDCL3) 250 MHz ppm Structure possible, fonction trans éthyléniques: 5,07 (dd, J = 2 et 7,5) 8 2623503 6,96 (dd, J = 3 et 7,5) indole H5 et H6: 7,05 à 7,20 H4 et H7: 7,32 (d) et 7,46 (d) autres protons: 1,3 à 3,2 Exemple 7: forme pharmaceutique On a préparé des comprimés répondant à la formule suivante: Produit de l'exemple 3................................ 300 mg Excipient q.s. pour un comprimé...................... 350 mg. (Détail de l'excipient: talc, stéarate de magnésium, aérosil). ETUDE PHARMACOLOGIQUE 1) Affinité Dour les récepteurs alpha2 adrêneraiaues. On homogénéise dans 90 ml de sucrose 0,32M, 10 cortex prélevés sur des cerveaux de rats mâles pesant 150 g en moyenne. Après centrifugation à 1000 g du mélange homogénéisé pendant 10 minutes à OC, le surnageant est centrifugé à 30 000 g pendant 10 minutes à O0+4=C. Le nouveau culot obtenu est mis en suspension dans 480 ml de tampon NaKPO4 pH 7,4 5OmM. On fait ensuite incuber pendant 45 minutes à 25mC, 2 ml de suspension en présence de 3H rauwolscine à la concentration 0,15 nM: i) seule, ii) avec des concentrations croissantes du produit à tester ou, iii) pour déterminer la fixation non spécifique, avec de la phentolamine non radioactive à la concentration 10- M Les suspensions incubées sont filtrées sur Whatman GF/C et les filtres sont lavés par trois fois 5 ml de tampon NaKPO4 pH 7,4 à OnC. La radioactivité des filtres est mesurée par scintillation liquide. L'affinité du produit testé pour les récepteurs alpha2 adrénergiques est donnée relativement à la phentolamine comme produit de référence. CD = concentration de phentolamine inhibant 50 % de la fixation spécifique de la 3H rauwolscine; CX = concentration du produit à tester inhibant 50 % de la fixation spécifique de la 3H rauwolscine. L'affinité relative est donnée par la relation: ARL = 100 CD CX Produits ARL Exemple 3 0,3 Exemple 4 57 Exemple 5 8 Exemple 6 633 2) Test d'anoxie hypobare chez la souris. Il consiste à mesurer sur une durée maximale de 3 minutes le temps 9 2623503 de survie de souris placées dans une enceinte de 2 litres dans laquelle on réalise une dépression de 600 mmHg. On utilise des souris à jeûn depuis 6 heures. Les produits sont administrés par voie i.p. sous un volume de 0,2 ml/10 g 60 mn avant l'épreuve. Produit de l'exemple 3 temps de survie RU 49 684 + 37% 3) Test de protection neuronale chez la souris. Une lésion cérébrale est réalisée chez la souris par injection dans le striatum droit de 2zg9 d'acide kainique sous un volume de 0,5/l. Dans les heures qui suivent, le dommage se traduit par une libération sérique du marqueur neuronal Cénolase gamma-gamma) proportionnelle à l'étendue lésionnelle. Les produits sont injectés par voie intrapéritonéale 60 mn avant le neurotoxique et les prélèvements sanguins sont effectués 24 heures plus tard. Produit de l'exemple 3 énolase gamma-gamma RU 49 684 -24 % 4) Test d'activité antidépressive Les essais sont effectués sur des lots de 5 rats Sprague Dawley. Les animaux, naïfs, sont placés pendant 15 minutes dans un cylindre vertical en plexiglass (diamètre: 18 cm, hauteur: 40 cm) contenant de l'eau à nC sur une hauteur de 15 cm (épreuve initiale de nage). Ils sont ensuite séchés pendant 15 minutes dans une enceinte chauffée à 32uC, 24 heures plus tard, ils sont replacés dans le cylindre rempli d'eau et la durée totale des périodes d'immobilité est mesurée pendant 5 minutes. Le composé est administré i.p. successivement 24, 5 et 1/2 heure avant le test. La première administration a lieu immédiatement après l'épreuve initiale de nage, juste avant de replacer les animaux dans leur boite d'élevage. Les moyennes des groupes traités sont comparées à celles du groupe témoin par le test de Dunnett. Résultats: Durée d'immobilité (s) variation X Produit de l'exemple 3 Produit de l'exemple 4 201 25 201 25 176 + 16 (-12,5) 122 + 11* (-39,5) 208 12 (+ 3,5) 110 + 17* 114 + 11**(-43) 61 22**(-70) degré de signification * p (0,05 ** p 2623503 REVENDICATIONS 1) Produits optiquement actifs des produits racémiques de formule (I): dans laquelle l'atome d'hydrogène en position 3 et l'atome d'hydrogène en position 16 sont trans et dans laquelle le groupement: A représente soit: OH OH le radical hydroxy étant sous la forme alpha ou bêta, soit: ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques. 2) Produits optiquement actifs tels que définis à la revendication 1 des produits racémiques de formule (I) dans laquelle le groupement: A. représente: H à savoir: - le (14béta, 16alpha) 14,15-dihydro 20,21dinoréburnamenin-14-ol, - le (3alpha, 14béta) 14,15-dihydro 20,21dinoréburnamenin-14-ol, - le (14alpha, 16alpha) 14,15-dihydro 20,21dinorêburnamenin-14-ol, - le (3alpha, 14alpha) 14,15-dihydro 20,21dinoréburnamenin-14-ol ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques. 3) Produits optiquement actifs tels que définis à la revendication 1 des produits racémiques de formule (I) dans laquelle le groupement: A représente à savoir: B - la (16alpha) 20,21-dinoréburnaménine, - la (3alpha) 20,21-dinoréburnaménine, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques. 4) ProcédE d'obtention des produits optiquement actifs tels que définis à la revendcation 1, caractérisé en ce que: a)l'on réduit soit le produit de formule (II) trans 3alpha, soit le produit de formule (TI') trans 16alpha: CN (II) (II') H H 1G trans 3alpha trans 16alpha pour obtenir respectivement soit le produit de formule (IA) trans 3alpha, soit le produit de formule (I'A) trans 16alpha, produits de formules óIA) et (I'A) correspondant aux produits de formule (I) dans laquelle le groupement: représente le groupement: H dans lequel le radical hydroxy est en position équatoriale; b) on soumet ensuite, si désiré, soit le produit de formule (IA) soit le produit de formule (I'A) à l'action d'un acide pour obtenir soit le produit de formule (IA1) trans 3alpha, soit le produit de formule (I'A1) trans 16alpha produits de formules (IA1) et (I'A1) correspondant aux produits de formule (I) dans laquelle le groupement: I A représente le groupement: H B\s-- HO dans lequel le radical hydroxy est en position axiale c)on déshydrate ensuite, si désiré, soit l'un des deux produits de formules (IA) ou (IA1) soit L'un des deux produits de formules (I'A) ou (I'A1), pour obtenir soit le produit de formule (Ic) trans 3alpha, soit le produit de formule (I'C) trans 16alpha, produits de formule (IC) et (I'C) correspondant aux produits de formule (I) dans laquelle Le groupement: i A représente le groupement: A B "" produits optiquement actifs que l'on soumet, si désiré, à l'action d'un acide minéral ou organique pour en former le sel. 5) A titre de médicaments, Les produits optiquement actifs tels que définis à la revendication 1. 12 2623503 6) A titre de médicaments, Les produits optiquement actifs dont les noms suivent: - le (14alpha, 16alpha) 14,15-dihydro 20,21-dinoréburnamenin-14ol, - le (3alpha, 14béta) 14,15-dihydro 20,21-dinoréburnaménin-14-oL et leurs sels d'addition avec Les acides. 7) Les compositions pharmaceutiques contenant à titre de principe actif, l'un au moins des médicaments tels que définis par les revendications 5 ou 6.