FR 2617013 A1 19881230 FR 8708871 A 19870624 Agent pour l'accroissement de la capacité germinative de graines d'orchidées" L'invention concerne un agent pour l'accrois- sement de la capacité germinative de graines d'orchidées dans l'ensemencement asymbiotique. Le procédé asymbiotique, qui est générale- ment utilisé pour la germination de graines d'orchidées, n'est jusqu'à présent pas encore universel. Les graines d'un certain nombre de variétés d'orchidées ne germent que très difficilement ou ne germent pas du tout. On par- vient à une certaine amélioration en utilisant la techni- que de désinfection des graines, qui a également une in- fluence sur le tégument embryonnaire. Toutefois, même dans ce cas, des graines de nombreuses variétés ne ger- ment pas ou ne germent que lorsque sont présentes, dans le milieu de culture, certaines vitamines, ainsi, qu'éven- tuellement, d'autres substances, qui ont été introduites dans le milieu, seules ou conjointement avec des compo- sants naturels, par exemple lait de coco, farine de bana- nes, suc de bouleau et similaires. Un agent, selon l'invention, pour l'accrois- sement de la capacité germinative élimine dans une large mesure l'inconvénient précité. La substance active de cet agent est l'acide N-(4'-diméthylaminobenzylidène)-4-amino- 2.- benzoïque ou un sel cytophysiologiquement acceptable de celui-ci, qui est ajouté aux milieux pour ensemencement asymbiotique, à une concentration allant de 10-6 à 10- 2 g par litre du milieu. L'avantage essentiel de l'agent, selon l'in- vention, réside dans le fait que celui-ci accroit le pour- centage de capacité germinative de graines d'orchidées dans l'ensemencement asymbiotique et permet dans plusieurs cas la germination de variétés dont les graines mûres ne germent sinon absolument pas. Un autre avantage réside dans le fait que l'acide N-(4'-diméthylaminobenzylidène)- 4-aminobenzoique ou les sels cytophysiologiquement accep- tables de celui-ci sont facilement accessibles et, comme il s'agit de composés chimiques stables, il est possible de les ajouter en doses rigoureusement reproductibles, à la différence de composants naturels dont l'activité dé- pend la plupart du temps des procédés de préparation, des conditions et de la durée de stockage, éventuellement d'au- tres facteurs. Le mode d'action de l'agent, selon l'inven- tion, est illustré plus en détail à l'aide des exemples descriptifs et non limitatifs, ci-après: EXEIMLE 1 - Des graines mrores d'orchis morio L. ont été secouées pendant 20 minutes dans une solution aqueuse d'hypochlorite de sodium, puis semées dans un milieu ayant la composition suivante par litre: 0,216 g de LI2P04; 0,245 g de Mg S04. 7 H20, 0,150 g de 1Ol, 0,132 g de (NH4)2S04, 0,022 g de CaC12, 0,192 g d'acide citrique, 1,0 g de peptone, 10,0 g de glucose, 8,0 g de gélose, dont le pH avait été ajusté à 5,2 au moyen de KOH 1 M. Le semis a été placé dans l'obscurité à une température de 15 à 20 C. Au bout de 140 jours après l'en- semencement, il n'a été constaté aucun signe de Èermri- nation. 3.- EXE!PLE 2 - Des graines mares d'Orchis morio L. ont été désinfectées et semées de la même façon que dans l'exem- ple 1, dans le m8me milieu, auquel il avait été ajouté un sulfate de l'acide N-(4'-diméthylaminobenzylidène)-4- aminobenzolque, de manière que la concentration de celui- ci dans le milieu s'élève à 1.10-4 g/litre. Après 140 jours l'ensemencement, environ 40 % des graines, avaient germé, et les plantules avaient formé des feuilles d'une longueur de 5 à 10 mm. EXOEI2-7 Des graines LiIreF d'orchis morio L ont été désinfectées et semées de la même façon que dans l'exemple 1, dans le meme milieu, auquel onr. avait ajouté un sulfate de l'acide N-(4'-dimêthylaninobenzylidène)-4aminobenzoIque, de manière que la concentration de celui-ci dans le milieu s'élève à 1.10-2 g/litre. Au bout de 60 jours, les premiers signes de la germination ont été constatés, au bout de jours, les protocormes étaient fanés. EXEIILE 4 - Des graines mares d'orchis morio L ont été désinfectées et semées de la même façon que dans l'exemple 1, dans le méme milieu, auquel il avait été ajouté de l'acide N-(4 ' -diméthylaminobenzylidènne)-4-aminobenzoIque, de manière que la concentration de celui-ci dans le milieu s'élève à 1.10-4 g/litre. Au bout de 140 jours après l'en- semencement, environ 45 % des graines avaient fermé et les plantules avaient formé des feuilles d'une longueur de à 10 mm. E: X L 5 - Des graines mûres d'orchis morio I ont été désinfectées et semées de la même façon que dans l'exemple 1, dans le même milieu, auquel il avait été ajouté un sel de potassium de l'acide N-(4'-dimêthylaminobenzylidène)-4- amninobenzoique, de manière que la concentration de celui-ci 4.-- dans le milieu s'élève à 1.10-4 g/litre. Au bout de jours après l'ensemencement, 40 %f des graines avaient germé et les plantules avaient formé des feuilles d'une longueur de 5 à 10 mm. EXE'PLE 6 - Des germes mûres de cypripedium calceolus L ont été désinfectées en les secouant pendant 40 minutes dans une solution aqueuse à 1 % d'hypochlorite de sodium, et puis semées dans le même milieu que celui utilisé dans l'exemple 1o Les semis ont été placés à l'obscurité, à une température de 15 à 200C. 200 jours après l'ensemence- ment, il n'a été constaté aucun signe de germination EXvaLE 7- Des graines mOres de cypripédium calceolus L ont été désinfectées de la même façon que dans l'exemple 6, puis semées dans le même milieu, auquel il avait été ajouté un sulfate de l'acide N-(4'-diméthylaminobenzylidène)- 4-aminobenzoique, de manière à ce que la concentration de celui-ci dans le milieu s'élève à 1,10-4 g/litre. Au bout de 200 jours après l'ensemencement, environ 10 5 des graines avaient germé et les protocormes avaient atteint une longueur de 1 à 1,5 mm. E)>ILE 8 - Des graines mûores de cypripedium calceolus L ont été désinfectées puis semé, de la même façon que dans l'exemple 6, dans le même milieu, auquel il avait été ajouté un sulfate de l'acide N-(4'-diméthylaminobenzylidène)-4- amino-benzoIque, de manière que la concentration de celui- ci dans le milieu s'élève à 1.10-3 g/litre. Au bout dé 200 jours, environ 15 % des graines avaient germé et les protocormes avaient atteint une longueur de 1 à 1,5 min. 5.- R E V E N D I C A T I 0 N Agent pour l'accroissement de la capacité germinative de graines d'orchidées dans l'ensemencement asymbiotique, caractérisé en ce qu'il contient en tant que substance active l'acide N-(4'-diméthylaminobenzylidène)- 4-aminobenzolque ou un sel cytophysiologiquement accepta- ble de celui-ci, qui est ajouté au milieu d'ensemencement à une concentration de 10-6 à 10-2 g par litre du milieu.