FR 2611202 A1 19880826 FR 8800650 A 19880121 261 1re02 "Procédé de synthèse de composés alcaloïdes dimères" La présente invention concerne un procédé nouveau et perfectionné destiné notamment à la produc- tion de composés alcaloïdes dimères, en particulier du groupe des alcaloïdes de Catharanthus (Vinca), et elle concerne en particulier un procédé perfectionné de production des composés antileucémiques (antinéo- plastiques) antiviraux, à savoir la vincristine et la vinblastine, de formule I ,OH Motif indole (Catharanthine) MoItif dihydroindole. ( (vindDline) sec Le composé ci-dessus est la vinblastine (NSC 49482) lorsque R est un groupe COOCH3 et R1 est un groupe OCH3, et il est la vincristine (NSC 67574) 261 1202 lorsque R est un groupe COOCH3, R1 est un groupe OCH3 et N1 est un groupe N-CHO (N-formyle). La présente série d'alcaloïdes dimériques, comprenant des agents antitumoraux importants, est formée à partir d'un indole tel que la catharanthine (formule II, R = COOCH3) et d'un motif dihydro-indole, par exemple la vindoline (formule III), dont les moitiés sont attachées par une liaison carbone-à-carbone impli- quant un centre aliphatique C18 dans le motif indole et un atome de carbone C15 aromatique dans la portion vindoline. II III Les conditions de la réaction de couplage, comme décrit dans la présente invention, sont en rap- port avec une modification importante du procédé mis au point dans ces laboratoires [brevet des Etats- Unis d'Amérique N 4 279 817; Helv. Chim. Acta, 59, 2858 (1976)] (schéma 1). En particulier, la modifica- tion selon l'invention permet la préparation et l'iso- lement du composé intermédiaire de dihydropyridinium VI (R = COOCH3) très instable, qui est formé dans le couplage du N-oxyde de catharanthine (formule IIa) avec la vindoline (formule III). En général, le dérivé Nb-oxyde du motif indole (formule IIa) ou des analogues apparentés (for- mule IV, o R1 = R= = R= R4 = H ou R2 = R = R = H et R1 = groupe alkyle de formule (CH2)nCH3 dans laquelle n a une valeur de 0 à 10) préparés avec un peracide tel que l'acide m-chloroperbenzoique ou l'acide p- nitroperbenzolique dans un solvant organique inerte tel que le chlorure de méthylène ou d'autres solvants organiques polyhalogénés, sontobtenusà des températures variées, par exemple -77. C, 0 C, la température am- biante et au-dessus. Le N-oxyde intermédiaire ainsi formé est utilisé pour l'étape suivante sans isolement. La réaction de fragmentation, qui fragmente la liaison C5-C18 du Nb-oxyde d'indole intermédiaire, est conduite en présence d'un réactif tel que l'anhydride trifluor- acétique. Pour maximiser la réaction de couplage subsé- quente qui favorise la formation d'un dimère naturel lié au niveau de l'atome C18 (motif indole) et de l'atome C15 (motif dihydro-indole), le motif dihydro- indole peut être ajouté au mélange réactionnel avant la réaction de fragmentation. Comme autres réactifs pour le composant anhydride trifluoracétique utilisé dans la fragmentation et le couplage, on peut choisir - l'anhydride trichloracétique, l'anhydride acétique, des halogénures d'acétyle et l'anhydride tosylique. Ces réactifs provoquent une fragmentation du type Polonovski de la liaison C5-C18 dans les composés représentés par les formules IIa et IV. SCHEMA 1 H I \ 9 - / 1.vindoline O.0 e.. " Les conditions de réaction, à savoir tempé- rature, temps et pression, sont en général analogues à celles qui sont utilisées dans la réaction de Polo- novski qui, dans son application originelle, a impli- qué la déalkylation d'amines tertiaires et hétéro- cycliques par acylation des N-oxydes correspondants avec l'anhydride acétique ou le chlorure d'acétyle (voir Merck Index, 8ème édition, 1968, page 1203). La température de la réaction de fragmentation et de couplage peut varier de -70'C à 40 C et elle se situe de préférence dans la partie basse de cette plage. Les étapes de la réaction relatives à la forma- tion du N-oxyde peuvent être conduites à l'air libre ou en atmosphère de gaz inerte tel que de l'argon ou un autre gaz inerte du Groupe Zéro du Tableau Pério- dique tel que l'hélium, l'azote, le néon, etc. 'Les mêmes conditions en atmosphère inerte sont utilisées dans les étapes de fragmentation et de couplage de la réaction et avec un réglage positif de température de préférence dans l'intervalle de -40'C à -60 C. X v lVI - CIoIc Vil or aIre vIii A cause de la basse température nécessaire pour les réactions à un stade ultérieur, la durée de réaction peut varier de quelques heures à plusieurs jours. Le premier composé intermédiaire dimérique indole-dihydro-indole formé, après la réaction (stéréo- spécifique) de couplage, possède une fonction sel d'iminium au niveau de l'atome Nb du groupement indole comme représenté par les formules V ou VI. La réduction de ce sel d'iminium intermédiaire par réaction avec un borohydrure de métal alcalin (NaBH4, KBH4, LiBH4) produit le ou les alcaloïdes dimériques comme décrit dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique N 4 279 817 précité. Dans la présente invention, le sel d'imi- nium intermédiaire (formule V ou VI) peut être isolé tel quel par une manipulation effectuée avec précau- tion. Lorsque la réaction de couplage est terminée, le mélange réactionnel est traité directement sur un système chromatographique approprié tel que chroma- tographie sur colonne, chromatographie sur couche mince ou chromatographie en phase liquide à haute performance, de préférence avec inversion de phase et/ou par des opérations de séparation par exclusion dimensionnelle. La température de l'opération peut varier de 4 C jusqu'à la température ambiante. En variante, des réactifs et des solvants volatils qui sont présents conjointement avec le sel d'iminium intermédiaire dans le mélange réactionnel peuvent être éliminés sous pression et à température réduites, de préférence au-dessous de -10 C. La matière solide résultante (formule V ou VI) est ensuite dissoute dans divers solvants organiques tels que des hydrocar- bures halogénés, des éthers, des alcools, l'acéto- nitrile, etc., et/ou divers tampons aqueux. Le pH du tampon peut varier de 2 à 10. La solution du sel d'iminium intermédiaire (formule V ou VI) peut ensuite être purifiée par les opérations chromatographiques décrites ci-dessus, avant d'autres caractérisations. A titre de variante, la solution de sel d'iminium intermédiaire peut être utilisée directement pour des réactions subséquentes. L'utilisation d'une atmo- sphère inerte peut ou non être nécessaire. Lorsque le motif indole de départ a une double liaison en C3-C4 (par exemple la catharanthine (II)), le composé intermédiaire de couplage résultant contient un groupe fonctionnel iminium à non-saturation a,5 comme représenté par la formule VI. La réduction de VI avec un borohydrure de métal alcalin (NaBH4, KBH4, LiBH4) donne des composés de 3',4'-déhydrovinblastine (formule VII). Le procédé de l'invention utilise. un mode nouveau de réduction dans lequel la transformation du sel d'iminium intermédiaire (formule VI) en l'énami- ne (formule VIII) peut être réalisée. Des réactifs utilisés pour cette réduction comprennent des composés de 1,4-dihydropyridine (que l'on appelle modèles de NADH) comme représenté par la formule IX: N RLz *1, o R1, R2, R3, R4, R5 et R6 peuvent être n'importe quel représentant du groupe comprenant H, un radical alkyle, alkyle substitué, aryle et aryle substitué. Deux séries de tels composés sont aisément disponibles [Chem. Rev. 82, 232 (1982); Chem. Rev. 72, 1 (1972)]. La première série est connue sous le nom d'esters de Hantzch o R3 et R5 dans la formule IX sont des esters carboxyliques, par exemple carbéthoxy (COOC2H5). La seconde série comprend les 1,4-dihydronicotinamides substitués sur l'atome d'azote (formle IX) o R1 est une fonction alkyle substitué ou aryle substitué, par exemple benzyle, et R est un groupe CONR7R8 dans lequel 3 7 8 R7 et R8 peuvent être n'importe quel représentant du groupe comprenant l'hydrogène et les fonctions alkyle, alkyle substitué, aryle et aryle substitué. Les réducteurs ci-dessus peuvent être utilisés individuellement ou en association. Lorsqu'on utilise des 1,4-dihydropyridines pour réduire le sel d'iminium VI, on se sert de solvants organiques tels que des alcools, l'acétonitrile ou des représentants supérieurs de cette série, le diméthylsulfoxyde,, le diméthylformamide, divers éthers tels que le dioxanne, le tétrahydrofuranne, etc., des hydrocarbures chlorés, etc., normalement sans utiliser de tampon aqueux comme co-solvant. On contrôle la progression de la réduction par l'analyse directe du mélange réactionnel sur un système chromatographique approprié, de préférence par chromatrographie en phase liquide à haute perfor- mance à inversion de phase. Ce procédé est utilisé pour optimiser la température, le temps et la pression de la réaction et la concentration des corps réaction- nels. La température de réaction peut varier de -60 C à +60 C et de préférence de 4 C à la température ambiante. Le temps de réaction peut varier de quelques minutes à plusieurs jours selon d'autres paramètres. La réduction est conduite en vase clos dans des condi- tions inertes, par exemple sous argon ou dans un gaz inerte du Groupe Zéro du Tableau Périodique (azote, hélium, néon, etc.). L'énamine (formule VIII) formée dans la réduction ci-dessus peut être utilisée directement pour la réaction subséquente ou isolée par une manipu- lation effectuée avec précaution. Le mélange réaction- nel est traité directement sur un système chromatogra- phique approprié, par exemple par chromatographie sur colonne, sur couche mince ou chromatographie en phase liquide à haute performance, de préférence avec inversion de phase, et/ou soumis à des opérations de séparation par perméation sur gel. La température de l'opération peut varier de 4 C à la température ambiante. A titre de variante, les réactifs et les solvants volatils présents dans le mélange réactionnel sont chassés sous pression et à température réduites, de préférence au-dessous de -10' C. Le résidu résultant peut être purifié par les opérations chromatographiques décrites ci-dessus avant d'être caractérisé ou trans- formé. Le traitement de l'énamine VIII avec un borohydrure de métal alcalin (NaBH4, KBH4, LiBH4) pro- duit des composés de 4'-déoxovinblastine (formule X, R = COOCH3) et des composés de 4'-déoxo-4'-épi- vinblastine (formule XI, R = COOCH3). Tandis que dans des conditions oxydantes, l'énamine VIII peut être transformée en la série vinblastine/vincristine en passant par le sel d'iminium intermédiaire (formule XVI). t X XI Des conditions oxydantes qui sont utilisées pour convertir une énamine (formule VIII) en un sel d'iminium intermédiaire (formule XVI) comprennent les suivantes: (1) aération/oxygénation réglée; (2) addition de coenzymes de flavine [ribo- flavine, formule XII, R = H; flavine-mononucléotide 2- (FMN), formule XII, R= PO3; flavine-adénine-di- 2- nucléotide (FAD), formule XII, R = (P03)2 -adénosine] suivie d'une opération d'aération/oxygénation réglée; 9H 0 H o XII (3) addition de la forme réduite des co- enzymes de flavine [dihydroriboflavine, formule XIII, R = H; dihydroflavine-mononucléotide (FMNH2), formule 2- XIII, R = PO3; dihydroflavine-adénine-dinucléotide 3 2- (FADH2); formule XIII, R = (PO3) -adénosine], suivie d'une.opération d'aération/oxygénation réglée; XIIIo XIII 1 1 (4) addition d'analogues de coenzymes de flavine à structure d'iso-alloxazine comme repré- senté par la formule XIV dans laquelle R1, R2 et R3 peu- vent être des représentants du groupe comprenant les fonctions alkyle, alkyle substitué, aryle et aryle substitué, suivie d'une opération d'aération/oxygéna- tion réglée; V oy o 15.XIV (5) addition de la forme réduite (1,5- dihydro) des analogues de coenzymes de flavine ci- dessus, comme représenté par la formule XV dans laquelle RRe R, R2 et R3 peuvent appartenir au groupe comprenant les fonctions alkyle, alkyle substitué, aryle et aryle substitué, suivie d'une opération d'aération/oxygéna- tion réglée; (6) addition de peroxyde d'hydrogène et/ou d'hydroperoxydes comme représenté par la formule R-OOH, dans laquelle R peut être une fonction alkyle, alkyle substitué, aryle ou aryle substitué; (7) addition de peracides comme représenté par la formule R-CO3H, dans laquelle R peut être une fonction alkyle, alkyle substitué, aryle ou aryle substitué; (8) addition de superoxydes; (9) addition d'un radical hydroxyle (OH) engendré de diverses façons, par exemple par l'uti- lisation de peroxyde d'hydrogène en présence de l'ion ferreux; (10) addition d'un ion métallique qui est un bon accepteur d'électrons, par exemple l'ion ferrique (Fe 3); l'ion cuivrique (Cu 2); l'ion cui- vreux (Cu), l'ion mercurique (Hg2 2) et l'ion argent (Ag 1), suivie d'une opération d'aération/oxygénation réglée. Les processus d'oxydation impliquant une aération/oxygénation réglée (condition (1)), les analo- gues de coenzymes de flavine (conditions (4), (5)), des peroxydes (condition (6)), des peracides (condi- tion (7)), des superoxydes (condition (8)), le radical hydroxyle (OH) (condition (9)) et des ions métalliques capables d'un transfert d'électrons (condition (10)) peuvent être effectués dans des solvants organiques tels que des alcools, l'acétonitrile ou des représen- tants supérieurs de cette série, le diméthylsulfoxyde, le diméthylformamide, divers éthers tels que le dioxan- ne, le tétrahydrofuranne, des hydrocarbures aromatiques tels que le benzène, le toluène, etc. Les processus d'oxydation impliquant des coenzymes de flavine (conditions (2), (3)) nécessitent un tampon aqueux (par exemple tampons auxphosphates, au chlorhydrate de tris, au MES)) à pH 5-9, mais de préférence dans la plage de 6 à 8, comme solvant. Un co-solvant organique, par exemple des alcools, l'acétonitrile ou un membre supérieur de cette série, le dioxanne, le tétrahydrofuranne, le diméthylsul- foxyde, le diméthylformamide, peut être utilisé. L'évolution du processus d'oxydation est contrôlée par l'analyse directe du mélange réactionnel sur un système chromatographique approprié, de préfé- rence par chromatographie en phase liquide à haute performance avec inversion de phase. Cette méthode est utilisée pour optimiser la température, le temps, la pression de réaction et la concentration des corps réactionnels. La température de la réaction peut variei de -60-à +60 C et de préférence de 4 C à la température. ambiante. La durée de la réaction peut varier de quel- ques minutes à plusieurs jours, selon les autres para- mètres. La réaction est conduite à la pression atmosphé- rique. La transformation du composé intermédiaire (formule XVI) en vinblastine (formule I) peut être effectuée par réaction du composé XVI avec un boTo- hydrure de métal alcalin (NaBH4, KBH4, LiBH4) dans des solvants convenables (organiques ou aqueux) comme on en utilise dans le processus d'oxydation (condi- tions (1)-(10)). A des fins pratiques, un isolement des composés intermédiaires (formules V, VI, VIII, XVI) n'est pas requis et le processus entier depuis le motif indole (formule II) et le motif dihydro-indole (formule III) jusqu'à la vinblastine (formule I) consti- tuant le produit final peut être conduit de préférence dans une opération en récipient unique. g/a-|;inc îvI XVII lI ^3 -,,o xv:I % % ? çe 1eOecSMeA XIX CM Me Hm En résumé, le procédé de l'invention est applicable à l'obtention de produits dimères à partir de catharanthine et de dihydrocatharanthine avec la vindoline comme matière de départ et des dérivés phény- liques, alkyliques et amidiques répondant aux formules suivantes 4 z ú, 3H5 XXIIRi 3 5 XXIII La formule XXI correspond à la représenta- tion qui en est donnée et dans cette formule, alk représente un groupe alkyle inférieur en C1 à C6 et de préférence en C1 à C3; aryle est un groupe mono-aryle tel que benzyle, styryle et xylyle; R1 est un membre du groupe comprenant l'hydrogène, des radicaux alk, CHO et COR o R est un groupe alkyle ou aryle; 5 R2 et R3 sont des représentants du groupe comprenant l'hydrogène et un radical -CO-alk; R4 est un représen- tant du groupe comprenant les radicaux COO-alk, CONH-NH2, CONH2, CONHR6 et CON(R6)2 o R6 est un groupe alkyle; Z est un membre du groupe comprenant les radicaux -CH2-CH2- et -CH=CH- et R est un membre de la famille de l'indole représenté par la formule XXII dans laquel- le R7 est choisi dans le groupe comprenant l'hydrogène ou un radical COO-alk; R8 est un membre du groupe c'om- prenant l'hydrogène, un radical OH, O-alk, OCO-alk ou alkyle; Re est un membre du groupe comprenant l'hydrogène, un radical OH, O-alk, OCO-alk ou alk; R10 est un membre du groupe comprenant l'hydrogène, un radical OH, Oalk, OCO-alk, ou de formule XXIII dans laquelle Ril est un représentant du groupe compre- nant l'hydrogène ou un radical COO-alk; R12 est un groupe alkyle. La présente invention diffère de l'art antérieur [brevet des Etats-Unis d'Amérique N 4 279 817] dans plusieurs opérations importantes, notamment l'isolement et la caractérisation de composés intermédiaires V, VI, VIII et XVI instables et leur transformation ultérieure en vinblastine et vincristine qui sont des médicaments à usage clinique. L'art anté- rieur décrit un procédé de production d'alcaloides dimères qui sont des analogues des médicaments à usage clinique, par exemple la 3',4'déhydrovinblastine de formule VII. 261 1202 On prépare des composés intermédiaires V et VI par mise en contact de vindoline ou d'un dérivé de vindoline [formule XXI dans laquelle R représente H] avec un dérivé d'indole représenté par un composé de formule XXIV dans laquelle R13 est un représentant du groupe comprenant l'hydrogène ou un radical COO- alk, ou par un composé de formule XXV dans laquelle R14 est un membre du groupe comprenant H ou un radical COO-alk et R15 est un membre du groupe comprenant l'hydrogène ou un radical alkyle. N N V xxiv xJXV Er. plus de la catharanthine, tout motif d'indole représenté par la formule XXVI peut être utilisé. Dans la formule XXVI, R, R1, R2 et R3 sont des membres du groupe comprenant l'hydrogène, un radical OH, O- alk, OCO-alk, alkyle ou aryle. Dans la formule XXVI, comme indiqué ci- dessus, alk est un groupe alkyle inférieur en C1 à C6, de préférence en C1 à C3,et aryle est un groupe mono-aryle tel que benzyle, xylyle, etc. 12 m XXVI Dans les formules XXI à XXVI et d'une manière générale dans la présente demande, alk et alkyle désignent un groupe alkyle inférieur tel que défini pour la formule XXI, et aryle désigne un groupe mono-aryle tel que défini de façon similaire dans la formule XXI. Le composé intermédiaire VI ainsi obtenu est utilisé dans un procédé nouveau et très spécifique impliquant une réduction en positions 1,4 en vue de former le composé intermédiaire VIII qui est le suivant par ordre d'importance. Le composé intermédiaire VIII est en outre converti par un procédé nouveau en le composé intermédiaire XVI nouveau et ce dernier est utilisé dans un autre procédé nouveau de réduction pour former les composés de structure générale XXI lorsque R est un composé de formule XXII. Dans une série similaire de réactions, le composé intermédiaire V conduit à des composés de structure générale XXI lorsque R est un composé de formule XXIII. Une autre particularité nouvelle et très importante de la présente invention est que l'isolement de composés intermédiaires VI, VIII et XVI n'est pas essentiel et que le procédé en entier, soigneusement contrôlé par chromatographie en phase liquide à haute performance pour VI, VIII et XVI, peut être mis en oeuvre en vue de l'obtention de produits dimériques de formule XXI à partir des motifs indole (formules II, XXII et XXIII) et dihydro-indole (formule XXI, R = H) de départ dans une opération en réacteur uni- que. PARTIE EXPERIMENTALE Préparation du sel d'iminium intermédiaire (formule VI) par la réaction de Polonovski modifiée La réaction a été conduite dans des condi- tions anhydres. Toute la verrerie a été séchée à l'étuve à 120 C. Le chlorure de méthylène utilisé comme solvant et l'anhydride trifluoracétique utilisé comme réactif de couplage ont é:é distillés sur P205 avant leur uti- 2 5 lisation. De l'acide m-chloroperbenzoique (132 mg, 0,8 mmole) a été ajouté à une solution de catharan- thine (II, 200 mg, 0,6 mmole) dans du chlorure de méthylène anhydre (2 ml) à -20 C sous atmosphère posi- tive d'argon et le mélange a été agité pendant 5 minu- tes. Une solution de vindoline (III, 270 mg, 0,6 mmole) dans du chlorure de méthylène (1 ml) a été ajoutée au N-oxyde de catharanthine (IIa) ainsi formé et le mélange a été refroidi à -60 C. De l'anhydride trifluor- acétique (0,2 ml, 1,5 mmole) a été ajouté au mélange réactionnel sous agitation maintenu à -60 C pendant 2 heures. Après cette période, le solvant et les réac- tifs en excès ont été chassés sous vide à -20 C en laissant un résidu brun rougeâtre contenant le sel d'iminium intermédiaire. Ce dernier a été caractérisé par chromatographie en phase liquide à haute perfor- mance (CLHP) à inversion de phase (cartouche Waters Radial-Pak C18 ou CN, système de solvants formé de méthanol-H20-Et3N). Il a été montré que le rendement en VI dans cette réaction dépassait 80 % par réduction de VI (NaBH4, méthanol, 0 C) en la 3',4'-déhydrovin- blastine connue (formule VII). Réduction du sel d'iminium intermédiaire (formule VI) avec le 1-benzyl-1, 4-dihydronicotinamide (formule IX, R1 = benzyle, R2 = R4 = R5 = R6 H; R3 = CONH2) - Synthèse de l'énamine (formule VIII) - (Mode opératoire A) Du 1-benzyl-1, 4-dihydronicotinamide (135 mg, 0,63 mmole, 6 équivalents) sous atmosphère positive d'argon à la température ambiante (200 C) a été ajouté en une période de 5 heures à une solution sous agitation du sel d'iminium intermédiaire (VI, mg) dans de l'acétonitrile (5 ml) dégazé. Après cette période de 5 heures, le mélange réactionnel, comme contrôlé par CLHP avec l'inversion de phase (cartouche Waters Radial-Pak C18 ou CN, système de sol- vants formé de méthanol/H20/Et3N) a indiqué la transfor- mation totale de VI en un mélange d'énamine VIII' et de 3',4'déhydrovinblastine (VII) dans un rapport de 1:1 (rendement 75 %). A titre de variante, on a ajouté goutte à goutte ou par portions une solution de 1-benzyl- 1,4-dihydronicotinamide (56 mg, 0,26 mmole, 2,5 équi- valents) dans du méthanol (2 ml) sous pression positive d'argon en une période de 5 heures à une solution sous agitation du sel d'iminium intermédiaire (VI, 100 mg) dans du méthanol (5 ml), initialement mainte- nue à 0OC pendant 0,5 heure. Pendant cette période de 5 heures, on a laissé la solution se réchauffer à la température ambiante. Un contrôle par CLHP effec- tué comme ci-dessus a indiqué la transformation totale de VI en un mélange d'énamine VIII et de 3',4'-déhydro- vinblastine (VII) dans un rapport de 1:1 (rendement %). Dans un essai, le mélange d'énamine (VIII) et de 3',4'-déhydrovinblastine (VII) obtenu comme décrit ci-dessus a été traité avec du borohydrure de sodium en excès (500 mg) à O C. Le mélange réaction- nel a ensuite été rendu basique avec de l'hydroxyde d'ammonium et il a été extrait à l'acétate d'éthyle (3 x 200 ml). Les phases organiques rassemblées ont été déshydratées sur du sulfate de magnésium. Le produit obtenu, après élimination du solvant organi- que, a été soumis à une chromatographie préparative sur couche mince, sur gel de silice (élution avec un mélange méthanol/acétate d'éthyle). Il a été montré que le produit consistait en un mélange de 3',4'- déhydrovinblastine (VII) n'ayant pas réagi et de com- posés connus, à savoir la 4'-déhydrovinblastine (X, R = COOCH3) et la 4'déoxo-4'-épivinblastine (XI, R = COOCH3). La présence de ces derniers composés a mis en évidence sans ambiguité la structure de l'éna- mine VIII. Réduction du sel d'iminium intermédiaire (formule VI) avec la 3,5-diéthoxycarbonyl-2,6-diméthyl-4-phényl- 1,4-dihydropyridine (analogue d'ester de Hantzch, formule IX, R1 =H;R3 = R5 = COOCH2CH3; R2 = R6 = CH3; R4 = phényle) - Variante de synthèse d'énamine (formule VIII) - (Mode opératoire B) De la 3,5-diéthoxycarbonyl-2,6-diméthyl- 4-phényl-1,4-dihydropyridine (264 mg, 8 équivalents) dans de l'éthanol (12 ml) sous atmosphère positive d'argon a été ajoutée à une solution sous agitation du sel d'iminium intermédiaire (VI, 100 mg) dans de l'acétonitrile dégazé (3 ml). Le mélange réactionnel a été chauffé au reflux pendant 3 heures. Après cette période, l'analyse par CLHP avec inversion de phase (comme décrit ci-dessus) a indiqué la formation, entre autres produits, d'énamine VIII et de 3',4'-déhydro- vinblastine (VII) dans un rapport de 1:1 (rendement %). Synthèse de la vinblastine (formule I) par oxydation d'énamine (formule VIII) en sel d'iminium intermédiaire (formule XVI) avec le flavine-mononucléotide (FMN, formule XII, R = P032) - Procédé 1 Du FMN (80 mg, 1 équivalent) en solution dans un tampon au chlorhydrate de tris (2 ml) sous atmosphère positive d'argor a été ajouté à un mélange réactionnel sous agitation contenant l'énamine (VIII) obtenue comme décrit ci-dessus (mode opératoire A) à partir du sel d'iminium VI (100 mg). La solution a été maintenue à l'obscurité à la température ambiante (20'Q C) pendant 16 heures. Ensuite, l'atmosphère inerte d'argon a été remplacée par de l'air et le mélange réactionnel a été agité pendant encore 2,5 heures. Des analyses par CLHP avec inversion de phase ont indiqué la transformation de l'énamine VIII en le sel d'iminium intermédiaire XVI ainsi qu'en d'autres produits (voir plus loin). Du borohydrure de sodium (500 mg) a été ajouté à 0OC et le mélange réactionnel a été rendu basique avec de l'hydroxyde d'ammonium et extrait à l'acétate d'éthyle (3 x 200 ml). Les extraits organiques rassemblés ont été déshydratés sur du sulfate de magnésium et le solvant a été chassé sous vide en donnant un produit brut (85 mg). La puri- * fication de ce dernier produit par chromatographie sur couche épaisse (gel de silice, méthanol:acétate d'éthyle 1:5) a permis la séparation des produits dimrériques suivants: vinblastine (formule I, 22 mg, 23 %): 3',4'-déhydrovinblastine (formule VII, 16 mg, 17 %); leurosine (formule XVII, 8 mg, 9 %), catharine (for- mule XVIII, 7 mg, 7,5 %); vinamidine (formule XIX, mg, 5,6 %) et le produit de réduction de la vinami- dine (formule XX, 19 mg, 20 %). Synthèse de la vinblastine (formule I) par oxydation de l'énamine (formule VIII) au peroxyde d'hydrogène en le sel d'iminium intermédiaire (formule XVI) - Procédé 2 Du peroxyde d'hydrogène (30 %, 1,2 ml, équivalents) sous atmosphère inerte d'argon a été ajouté à une solution contenant l'énamine (VIII) obte- nue à partir du sel d'iminium.ntermédiaire VI (100 mg, mode opératoire A). Le mélange réactionnel a été agité à la température ambiante pendant 5,5 heures aux ter- mes desquels des analyses par CLHP avec inversion de phase ont indiqué la transformation complète de l'énamine VIII. Du borohydrure de sodium (500 mg) a été ajouté à 0 C et extrait à l'acétate d'éthyie (3 x 200 ml). Les extraits organiques rassemblés ont été déshydratés sur du sulfate de magnésium et, le solvant a été chassé sous vide. Le produit mixte résul- tant a été séparé par chromatographie sur couche épaisse (gel de silice, méthanol/acétate d'éthyle) en donnant les alcaloïdes dimériquies suivants: vinblastine (I, 4 mg, 4 %), 3',4'-déhydrovinblastine (VII, 5 mg, 4,8 %), leurosine (XVII, 13 mg, 12,5 %), catharine (XVIII, 5 mg, 4,8 %), forme réduite de la vinamidine (XX, 30 mg, 27,6 %). Synthèse de la vinblastine (I) par oxydation de l'éna- mine (VIII) en présence d'air en le sel d'iminium intermédiaire (formule XVI) - Procédé 3 Une solution contenant l'énamine (VIII) obtenue à partir du sel d'iminium intermédiaire (VI, 100 mg) par le mode opératoire A a été agitée à l'air libre à la température ambiante pendant 3 heures. Après cette période, du borohydrure de sodium (500 mg) a été ajouté à 0 C et le mélange réactionnel a été rendu basique avec de l'hydroxyde d'ammonium et extrait à l'acétate d'éthyle (3 x 200 ml). Les extraits organi- Z611202 ques rassemblés ont été déshydratés sur du MgS04 et chassés sous vide. Le produit brut résultant a été séparé par chromatographie préparative sur couche épaisse (gel de silice, méthanol/acétate d'éthyle) en donnant la vinblastine (I, 4 mg, 4 %). Synthèse de la vinblastine (I) par oxydation de l'éna- mine (formule VIII) à l'air en présence de chlorure ferrique en le sel d'iminium intermédiaire (XVI) - Procédé 4 Du chlorure ferrique (1 équivalent) a été ajouté à une solution sous agitation contenant l'énamine (VIII) obtenue à partir du sel d'iminium intermédiaire (VI, 100 mg, mode opératoire A) et on fait barboter de' l'air dans la solution a5i OC pendant une période de 0,5 heire. On a ajouté du borohydrure de sodium (500 mg) à 0 C et on a rendu le mélange réactionnel basique avec de l'hydroxyde d'ammonium avant l'extraction à l'acétate d'éthyle (3 x 100 ml). Les extraits organiques rassemblés ont été déshydratés sur du Na 2S4 et le solvant a été chassé sous vide. Le produit brut a été purifié par chromatographie sur couche épaisse (gel de silice, méthanol/acétate d'éthyle) en donnant la vinblastine (I, 37 mg) . Sur la base de l'énamine (50 mg) présente dans le mélange, le rendement dans cette étape est de 70 %. REVENDICATIONS 1. Procédé de production de composés repré- sentés par les formules suivantes: Ir XXII 1:\/: XXIII o, dans la formule XXI alkyle est un groupe CH3 ou un groupe (CH2)nCH3 dans lequel n a une valeur de 1 à 5 R1 représente CH3 ou CHO R2 représente H ou un groupe CO-alk R représente H R4 représente un groupe - COO-alk ou CONR13R14 o R13 et R14 peuvent être un membre quelconque du groupe comprenant l'hydrogène, une fonction alkyle, alkyle substitué., aryle ou aryle substitué Z représente un groupe -CH=CH- ou -CH2-CH2- R représente la formule XXII ou XXIII R7 représente H ou un groupe COOalk R8 représente H, un groupe OH, O-alk, OCO-alk ou alkyle R9 représente H, un -groupe OH, 0-alk, OCO-alk ou alkyle R10 représente H, un groupe OH, O-alk, OCO-alk Rl représente H ou un groupe COO-alk R12 représente H ou un groupe alkyle procédé destiné à la synthèse d'un dimère dérivé d'un motif indole de la famille naturelle des alcaloldes de l'Iboga contenant une portion aza-bicyclo-octane et un motif dtihydro-indole de la famille naturelle des alcaloldes d'Aspidosperma et de Vinca, la stéréo- chimie de la liaison carbone-à-carbone entre ces deux motifs étant identique à celle de la vinblastine, caractérisé en ce qu'il consiste: (a) à former un N-oxyde intermédiaire à froid à une température de -70 C à + 40 C à partir dudit motif indole par oxydation de l'azote de pontage et sans isolement dudit composé intermédiaire; (b) à traiter le N-oxyde intermédiaire dérivé d'indole en présence d'un membre du groupe comprenant l'anhydride acétique, un anhydride acétique halogéné et le chlorure d'acétyle pour effectuer une réaction de fragmentation du type de Polonovski; (c) sans isolement du produit de l'étape (b), à coupler ledit produit de réaction avec un motif dihydro-indole en présence d'anhydride acétique, d'anhy- dride acétique halogéné et de chlorure d'acétyle à une basse température d'environ -7Q C à +40C dans des conditions inertes; (d) le produit de l'étape (c) est isolé par évaporation du solvant de préférence à basse tempé- rature dans l'intervalle de -20 à O C; (e) le produit de l'étape (d) est réduit par des composés de 1,4-dihydropyridine représentés par la formule IX R 1R3 IX 3 Il Xl R6 y 2 dans laquelle R3 et R5 sont des esters calboxyliques (C00alk) et R1, R2, R4 et R6 sont des membres du groupç comprenant H, des radicaux alkyle, aryle (de la série des esters de Hantzch) ou des 1,4dihydronicotinamides substitués sur l'atome d'azote, R1 est une fonction alkyle substitué ou aryle substitué, par exemple benzyle, et R3 est un groupe CONR 7R8 dans lequel R7 et R8 peuvent être tous membres du groupe comprenant l'hydrogène et des fonctions alkyle ou aryle; ladite réduction est conduite dans une atmosphère inerte entre -60 et +6Q C et de préférence dans l'intervalle de température de 4 à 20 C et en utilisant des solvants choisis dans le groupe compre- nant des alcanols à groupe alkyle inférieur, l'acéto- nitrile, le diméthylsulfoxyde, le diméthylformamide, le dioxanne, le tétrahydrofuranne et des hydrocarbures inférieurs chlorés; (f) le produit de l'étape (e), qui est une énamine de formule VIII, est isolé par évaporation du solvant, de préférence à basse température dans l'intervalle de -2Q C à Q C; (g) l'énamine obtenue dans l'étape (f) est utilisée pour préparer un sel d'iminium intermé- diaire de formule XVI par un processus d'oxydation comprenant: (1) une opération d'aération/oxygénation réglée à l'air libre; (2) une opération d'aération/oxygénation réglée plus un ion métallique; (3) une opération d'aération/oxygénation réglée plus un coenzyme de flavine; (4) une opération d'aération/oxygénation réglée plus un agent traitant choisi entre le peroxyde d'hydrogène et des hydroperoxydes; en utilisant une large gamme de solvants organiques à pH 5-9 et une température de réaction de -60 C à +60 C; (h) le produit, qui est un sel d'iminium intermédiaire, obtenu dans l'étape (g) est isolé par évaporation du solvant, de préférence à basse tempéra- ture dans l'intervalle de -20 à O C; (i) le produit obtenu dans l'étape (h) est converti en le composé désiré de formule XXI, dont la vinblastine et la vincristine constituent des exemples, par réduction avec un borohydrure de métal alcalin. 2. Procédé suivant la revendication 1, dans lequel le processus comportant le produit rinal de formule XXI est conduit dans une opération en réac- teur unique. 3. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'un N-oxyde intermédiaire dérivé d'indole est couplé avec un motif dihydro-indole et est réduit par des composés de 1,4-dihydropyridine représentés par la formule IX: EN Pû R5 A 3 2 dans laquelle R3 et R5 sont des esters carboxyliques (C00-alk) et R1, R2, R4 et R6 sont des membres du groupe comprenant H, un radical alkyle, aryle (série des esters de Hantzch) ou des 1,4-dihydronicotinamides substitués sur l'atome d'azote, R1 est une fonction alkyle substitué ou aryle substitué, par exemple benzyle,et R est un groupe CONR7R8 dans la formule du- 3 7 8 quel R7 et R8 peuvent être l'un quelconque des repré- sentants du groupe comprenant l'hydrogène, des fonc- tions alkyle ou des fonctions aryle; dont ladite. réduction est conduite en atmosphère inerte entre -60 et +600Q C et de préférence dans la plage de températures de 4 à 2Q C et en utili- sant des solvants choisis dans le groupe comprenant des alcanols à radical alkyle inférieur, l'acétonitrile, le diméthylsulfoxyde, le diméthylformamide, le dioxan- ne, le tétrahydrofuranne et des hydrocarbures infé- rieurs chlorés; et le produit de l'étape (e), qui est une énamine de formule VIII, est isolé par évaporation du solvant, de préférence à basse température dans l'intervalle de -20 à 0 C. 4. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comporte une étape qui consiste à isoler une énamine et à oxyder ladite énamine en un sel d'iminium intermédiaire de formule XVI par un processus d'oxydation comprenant: (1) une opération d'aération/oxygénation réglée à l'air libre; (2) une opération d'aération/oxygénation réglée plus un ion métallique; (3) une opération d'aération/oxygénation réglée plus un coenzyme de flavine. 5. Procédé suivant la revendication 4, caractérisé en ce que, dans l'étape (1) du processus d'oxydation, un agent traitant choisi entre le peroxyde d'hydrogène et des hydroperoxydes est ajouté. 6. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que le sel d'iminium intermédiaire produit isolé par évaporation du solvant à basse tempé- rature dans l'intervalle de -20 à O' C est réduit en In alcaloide de Vinca choisi entre la vinblastine et la vincristine par réduction avec un borohydrure de métal alcalin.