FR 2616330 A1 19881216 FR 8708320 A 19870612 La présente invention concerne un agent actif destiné prévenir ou à combattre le rejet de greffe d'organe chez l'homme, ainsi qu'un médicament contenant un tel agent. A l'heure actuelle, les greffes d'organes humains se dévelop- pant de plus en plus, le besoin de disposer de nmoyens efficaces et fiables pour prévenir ou combattre le rejet de ces greffes d'organes prend une importance considérable pour favoriser la poursuite des travaux et des recherches dans le domaine chirurgical. La présente invention fournit un tel moyen. Ce dernier est essentiellement constitué d'un anticorps monoclonal dirigé contre les récepteurs de l'interleukine 2 (IL2) humaine portés par les lymphocytes T activés, cet anticorps ayant en outre la propriété de ne pas être cytotoxique in vitro tout en inhibant la prolifération cellulaire induite par l'interleukine 2. On sait que l'interleukine 2 est un facteur de croissance nécessaire pour le développement in vitro des clones de lymphocytes T (cf. MDRGAN D.A., RUSCEITI F.W.,GALIO R., Selective in vitro growth of T lymphocyte fram normal human bone marrow. Science 1976; 193: 1007-11 (1)), qui agit par interaction avec un récepteur spécifique à forte affinité (cf. ROBB R.J., MbCK A., SMITH K.A., T-cell growth factor receptors. Quantitation specificity and biological relevance. J. Exp. Med. 1981, 154; 1455- 67 (2)). L'expression du récepteur de i'IL2 (R-IL2) à la surface de la membrane du lymphocyte T est sous le contrôle de l'activation antigénique et est soumis à une régulation supplémentaire par 1'1IL2 elle-mtme( cf. JAOCQUES Y., LE MADFF B.,GODARD A., OLIVE D., MOREAU J.F., SOULILOU J.P., Regulation of Interleukine 2 receptor expression on a human cytotoxic T lymphocyte clone, synergism between alloantigenic stimulation and II2., J Immnunol. 1986; 136: 1693 - 99 (3)) Le R-IL2 se revèle étre un complexe formé d'une chaine (55 Kd) (antigène Tac) et d'une chaine P récemment dé- crite (75 Kd), les deux chaines étant nécessaires pour l'expression du site à f.orte affinité (cf. SHARON M., KLAUSNER R.P., CULLEN 8.R., CHIZZONITE R., LEONARD W.J., Novel. Intetrleukin-2, Receptor subunit detected by cross- linking under high affinity conditions, Science 1986; 134: 859-63 (4)). On sait aussi que des anticorps monoclonaux spécifiques des R-IL2 de rongeurs et capables de suppri- mer la prolifération in vitro des lymphocytes T activés, /le processus induite par l'IL2, se sont révélés empêcher -O inverser De rejet aigu d'une allogreffe cardiaque chez la souris (cf. KIRKMAN R.L., BARRET L.V., GAULTON G.N., KELLEY V., YTHIER A., STROM T.B., Administration of an anti-inter- leukin 2 receptor monoclonal antibody prolongs cardiac allograft survival in mice, 3. Exp. Med., 1985; 162: 358-62 (5)), et retarder le rejet de peau chez la souris (cf. GRANDSTEIN R.D., GOULSTON C., GAULTON G.N., Prolon- gation of murine skin allograft survival by immunologic manipulation with anti-interleukin 2 receptor antibody, 3. Immunol. 1986, 136: 898-902 (6)) ou le rejet de rein chez le singe (cf. SHAPIRO M.E., KIRKMAN R.L., REED M. H., PlUSKAS 3.P., MAZOUJIAN G., LETVIN N.L., CARPENTER C.B., MILFORD E.L., WALDMAN T.A., STROM T.B., SCHLOSSMAN S.F., Monoclonal antl-IL2 receptor antibody in primate renal transplantation, Transpit. Proc. 1987: 594-98 (7)). De meme, chez l'homme, plusieurs anti-R-IL2 ont été obtenus à partir de la souris (cf. UCHIYAMA T., BRODER S., WALDMAN T.A., A monoclonal antibody (antl-Tac) reactive with activated and functionally mature human T cells, J. Immunol. 1981; 126: 1383-97 (8)) et du rat (cf. OLIVE D., RAYMOND 3., DUBREUIL P., CHARMOT D., JACQUES Y., MAWAS C., Anti Interleukin 2 receptor monoclonal antibody-receptor interactions in their antagonistic effects on interleukin 2-dependent T-cell growth, Eur. 3. Immunol. 1986; 16: 611-20 (9)), 26 1 6 330 tous reconnaissant le constituant 55 Kd du R-IL2. Des travaux récents ont montré que les répertoires immunolo- giques du rat et de la souris distinguent deux épitopes principaux sur le R-IL2 humain. Un de ceux-ci, étroite- ment apparenté au site d'interaction avec l'IL2-. provo- que un blocage fonctionnel; l'autre est indépendant du site de liaison à l'IL2 et il est incapable d'inhiber la prolifération des lymphocytes T activés induite par l' L2. Or les demandeurs ont constaté de façon inattendue que des anticorps ayant justement la pro- priété de ne pas être cytctoxiques -mime en présence de complément. tout en inhibant la prolifération des cel- lules induite par l'interleukine 2 étaient bien tolérés par des patients ayant subi la greffe d'un organe et que ces anticorps étaient efficaces pour empêcher le rejet de cet organe greffé et pouvaient donc entrer dans la cam-osition de rédicaments.On citera en particulier comme anticorps selon l'invention, un anticorps monoclonal de souris de classe IgG1; un anticorps monoclonal de rat de classe IgG2a; un anticorps monoclonal humain; un anticorps monoclonal chimère comportant une partie d'origine humaine et une partie l',,rigine animale un anticorps d'origine humaine ou animale modifié chimiquement (par exemple au moyen de polyéthylèneglycol) pour supprimer les effets cytotoxiques en présence de complément. D'autres caractéristiques et les avantages de l'invention ressortiront plus clairement de la descrip- tion qui va suivre, faite en prenant comme exemple d'anticorps selon l'invention. l'anticorps connu sous l'appellation 33B3.1 qui est un anticorps monoclonal (AcMo) du type IgG2a provenant du rat. Cet anticorps est produit à partir de liquide d'ascite de souris "nude" auxquelles on a injecté les cellules de l'hybridurLtn 33B3.1. Les cellules et l'anticorps purifié ont eté vérifiés pour l'absence de virus murins et de mycoplasmes. Pour les expérimentations et les essais qui seront relatés ci-après, l'anticorps en question se preé sentait en flacons de 5 ml contenant 5 mg de 33B3.1 dans 1 ml de sérum physiologique tamponné par un phosphate. Ces flacons étaient maintenus à 4'C jusqu'à leur utili- sation. Le but de ces expérimentations et de ces essais était de montrer l'effet immunosuppresseur du 33B3.1 administre à titre de traitement préventif du rejet en transplantation rénale. Exemple d'expérimentation 1) Protocole L'AcMo 3383.1 a eté administré quotidiennement pendant 14 jours, en plus de 1 mg/kg de prednisone (CS) au jour O, close diminuée de 10 mg/semaine et avec 2 mg/ kg d'arathioprane (AZA). L'AcMo, dilué dans 100 ml. de sérum physiologique, a été injecté quotidiennement par voie intraveineuse (veine périphérique, injection intraveineuse lente pendant 10 minutes). L'administra- tion de cyclosporine A (CyA) a commencé (6 mg/kg) à la fin du traitement par le 33B3.1. Des GAT (Thymoglobulinet Institut Mérieux, Lyon, France) ont été administrées à titre de traitement de secours de sept jours. Ainsi, dans le cas du rejet prouvé par biopsie au cours d'un traitement par l'AcMo, l'administration de 33B3.1 a été interrompue et l'administration de GAT a commencé à 2 mg/kg/jour et a été ensuite adaptée au maintien d'une teneur en lymphocytes T11 circulants inférieure à 10 X. Par ailleurs, des biopsies percutanées de rein ont été effectuées. systématiquement au jour 9. Une fois l'admi- nistration de CyA commencée, les administrations de Cs et d'AZ-A ont-été progressivement dciminuées et finalement supprimées en trois semaines. Chez les patients sous CyA, les épisodes de rejets ont été traités par des injections intraveineuses lentes de méthylprednisolone pendant 5 jours (respectivement 5, 5, 4, 3 et 2 mg/kg/jour), puis par une dose orale de 1,5mg/kg/jour de stéroIdes, dose qui a été diminuée lentement jusqu'à l'arrêt. 2) Patients Ils étaient au nombre de vingt sept, dont le consentement a été obtenu après les avoir pleinement informés. Tous étaient receveurs d'une greffe primaire provenant de cadavre et possédaient des alloanti- corps réagissant avec moins de 50 % d'un ensemble de lymphocytes. Tous les patients ont été préalablement soumis à une transfusion et les greffes familiales ont été exclues. Neuf sujets ont reçu 5 mg/jour de 33B3.1 (groupe A) et 18 autres patients 10 mg/jour (groupe B). Les examens de contrôle ont duré du 35ème au 345 ème jour. Ces deux groupes de receveurs ont été comparés à: - un groupe " témoin historique " de 30 receveurs (groupe C) ayant subi une greffe en 1981. Ces patients n'ont reçu qu'un CS (2mg/kg/jour pendant deux semaines, dose abaissée lentaement à 15 mg/ jour à la fin du deuxième mois) et de 1 r AZA (2mg/kg et suivant leur formule leucocytaire - FL);et - un groupe de 55 receveurs ( groupe D) ayant reçu un traitement similaire à celui du groupe A ou B, sauf que les GAT ont été administrées ( fistule artério-veineuse brachiale ou cathéter cen- tral) à la place de 33B3.1. Les receveurs des groupes C et D ont été également soumis à des transplantations primaires à partir de cadavres, sans hyperim- munisation ( le tableau I ci-après présente leurs caractéristiques cli- niques et immunologiques générales). -6- Tableau I: caractéristiques cliniques et inmmunologiques des différents groupes receveurs. GROUPE A GROUPE B GROUPE C GROUPE D 33B3.1 33B3.1 Cs + AZA GAT mg/J 10 mg/j + CS + AZA +Cs + AZA + Cs + AZA (n=9) (n = 18) (n =30) (n = 55) Age* 35(11-53) 37(23-61) 30(10-49) 35(1061) Sex-ratio M/F 315 5 1Y5 1,6 Nombre de transfusions* 5(2-12) 5(2->50) 5(2-22) 6(2-25) PATIENTS avec 3 ou moins de 3 antigènes H L A A-B-DR mal appariés 22% 66% 73% 58% Réactivité globale *** Lymphocytes T 20% n=1 4 3 10 20% n=2 4 ** 21 Ischémie froide * durée (heures).35(18-48) 34,5(21-48) 215 (9-29) 34,5(650 *Moyenne et valeurs extremes **Résultats non disponibles ***Tous les patients présentaient une réactivité globale inférieure à 50% 3) Teneurs circulantes en 33B3.1 et contrôle de la réponse immunitaire aiiti-33B3.1 des receveurs Teneurs sanguines en 33B3.1: Les teneurs sanguines ont été mesurées payTSA sur des sérums obtenus a3snt et après la greffe à intervalles réguliers. Les plaques d' ELISA ont été revêtues de Mark I, un Ac de souris anti- chaine légère Kappa de rat et la présence de 33B3.1 dans les sérums a été révélée avec de l'anti-Fab' 2 de rat (marqué à la} - galacto- sidase) provenant du mouton. Les concenfrations sériques en 33B3.1 ont été déterminées d'après une courbe d'étalonnage classique obtenue avec des dilutions succesives de 33B3.1 pur. Détection de l'anti- 33B3.1: La présence d' IgG ou D4 IgM anti-33B3.1 dans les sérums recueillis pendant et après le traitement à 1' AcMD a été testée par ELISA. Des plaques ont été revêtues de 33B3.1 pur, mises à incuber avec des sérums dilués des receveurs et révélées avec une antiIgM ou IgG humaine marquée avec une peroxydase provenant de la chèvre. La réaction a été considérée catone étant positive lorsque la valeur Foyenne de la double détermination était supérieure de trois écarts-types à la valeur moyenne témoin. Résultats 1) Tolérance au traitement Le 33B3.1 a été bien toléré. Seuls 5 patients sur 27 ont présenté des effets secondaires minimres: l'un éruption cutanée, deux autres des douleurs veineuses locales, un autre un vertige et une réac- tion anaphylactoide lors de la dernière injection intraveineuse lente d'AcMoD. Enaucun cas, ces effets secondaires n'ont conduit à l'inter- ruption du traitement.Une fièvre d'intensité faible a été habituelle- ment observée au cours des premières 48 heures. A 1 'opposé, une fièvre de forte intensité a été observée chez 52 % des patients du groupe D, et. respectivement 18 et 25 % d'entre eux présentaient une éruption cutanée n une maladie sérique aigle. Aucune différence ( ni diminution) des numérations d'hématies et de plaquettes n'a été notée entre les patients des groupes A,B et C sug- gérant que le 33B3.1 possède seulement une incidence faible sur ces pa- rambtres.Le nombre de cellules polynucléaires a été multiplié par 1,7 à 2 au cours du traitement par 1' AcMo. Une faible lymphopénie a oété observée ( diminution de 20 % des valeurs de départ, culminant au jour 6), qui contrastait néanmoins avec la chute brutale des comptages de lymphocytes ( P buccale étendue. 2. Incidence du rejet Jusqu'à présent, pour les groupes A et B réunis, tous les patients, sauf deux, possèdent un rein fonctionnel: un s'est suicidé (jour 32, histologie durein normale) et un autre a présenté une rupture technique (élimination de la greffe par nécrose urétérale profonde, his- tologie du rein normale). Parmi les neuf patients du groupe A, trois ont présenté des symptâmes de rejet pendant la période d'injection intraveineuse lente de 33B3.1 (tableau II ci-après). -9- Tableau I: incidence d'un rejet aigU chez les divers groupes au cours du premier mois suivant la transplantation. GROUPE A GROUPE B GRDUPE C GROUPE 33B3.1 33B3.1 Témoin GAT mg/j 10 mg/j historique (n=9) (n=18) (n=30) (n=55) Rejet au cours de la période 33,3 % 5,6 * 66,6 % 4 % de traitement par l'Ac Mo, ou d'une période similaire (jours 0 à 13) Rejet au cours du 44,4 % 5,6 * 76,6 % 15 % premier mois * p non pris en considération. Dans tous les cas, des biopsies rénales ont confirmé le diagnostic. Les épisodes de rejet étalent tous reversibles après un traitement de secours. Parml 1PS 18 patients du groupe B, un seul a présenté un episode de rejet, réversible au moyen du traitement de secours. Néanmoins, des biopsies systématiques, effec- tuées au Dour 9 (4 patients du groupe A et 5 du groupe B) ont montré un certain degré d'infiltration des lym- phocytes en l'absence de symptômes cliniques de rejet, pouvant être compatible avec un "rejet histologique" faible. Bien que ces patients n'aient reçu aucun traite- ment de secours par GAT, leur fonction rénale est restée intacte et aucun rejet "clinique" ne s'est produit. A l'opposé, 6B Z des patients du groupe témoin historique ont présenté un rejet aigu dans les deux premières semaines (P > 0,001, comparativement au groupe B, test X). Quatre pou'rcents des receveurs sous GAT ont pré- senté un épisode de rejet au cours d'une période simi- Jaire. Réunis, ces résultats suggèrent un effet protec- teur fort du 33B3.1, utilisé à 10 mg/jour., contre un rejet précoce. En outre, deux patients (tous deux n'ayant présenté aucun rejet au cours du traitement par 3383.1) ont présenté un épisode de rejet après la période d'injection intraveineuse lente d'AcMo: au jour 47 (groupe A) et.au jour 35 (groupe B). 3) Teneurs sanguines en AcMo et réponse immu- nitaire anti-33B3.1 des receveurs La figure annexée montre les teneurs san- guines (24 heures après injection intraveineuse lente) en 33B3.1 circulant. Dans le groupe A, un patient (n'ayant jamais présenté de rejet) possédait une teneur en 33B3.1 circulant indétectable et les autres (compre- nant ceux présentant un rejet pendant le traitement par lF 3383.1) présentaient u-ne-teneur--sanguine allant d'une valeur indétectable a 1,6 pg/ml. Les receveurs du groupe B présentaient sans ambiguité une teneur circulante supérieure (1,5 à 9 y9/ml), y compris les seuls rece- 1 1 veurs de ce groupe ayant présenté un rejet. Cependant,un patient possédait encore une teneur basale faible (0,3,ug/mll Le tableau III ciaprës montre que, parmi les 27 patients 23 ont produit des anticorps contre le 33B3.1, d'isotype IgM (20/27) et/ou IgG (21/27). Seize patients possédaient des anticorps anti-33B3.1 détectables au cours du traitement par 1' AcMo, sans rejet. La réponse des IgM et IgG a atteint un pic environ 10 jours apres la fin du traitement par le 33B3.1 Quant à la figure annexée qui donne les teneurs sanguines en 33B3.1, mesurées au cours du traitement par 1' AcMo, les diagrammes A et B correspondent respectivement aux valeurs obtenues dans les groupes A et B avec -Odésignant des patients ayant présenté des épisodes de rejet et -O- ceux n'ayant présenté aucun rejet. Tableau III:réponse anti-33B3.1 des patients des groupes A et B. réponse par IgM réponse par IgG nombre de temps nombre de.uombre de temps nombre de patients nécessaire patients avec patients nécessaire patients avec positifs (en jours) des IgM au positifs (en jours) des IgG au cours pour les cours du pour les du traitement teneurs traitement teneurs par Ac Mo maximales par Ac Mo maximales gOupe A 6 23+ 5 1 7 24+ 8 5 n=9 - groupe B 14 21+ 4 10 14 24+7 8 n=18 Co os o De l'exemple ci-dessus, il ressort qu'un AcMo JgG2a de rat dirige contre le site de liaison de l'IL2 sur le 'R-IL2 humain était. capable d'empêcher le rejet aigu précoce d'un greffon. Cet AcMo était trèe bien toleré. seuls des effets secondaires rares et de faible importance ont été observés. Dans un premier groupe dans lequel l'AcHo a été administré à 5 mg/jour, trois receveurs sur neuf ont présenté un épisode de rejet (réversible avec un traitement de secours par GAT) lorsqu'ils étaient sous traitement par 3383.1. Des considérations théoriques suggérant que cette première dose de 3383.1 peut être trop faible pour présenter un effet optimal, on a commence le traitement d'une seconde série à 10 mg/jour, conduisant à une protection effi- - cace. Dans ce groupe, un seul patient, sur 18, a pré- senté des sympt6mes de rejet cliniquement détectables au cours des deux premières semaines suivant la transplan- tation (période de traitement par l'AcHo), comparative- ment à l'incidence de 66 Z d'épisodes de rejet notée pendant la même période chez le groupe "témoin histo- rique" (P les groupes B, C ou D possédaient une concordance simi- laire. De plus, les patients du groupe témoin historique ont reçu une posologie initiale de stéroides double de celle des patients des groupes A et B. comme le montre le tableau Il; avec les précautions nécessaires dues à la taille limitée de l'échantillon, le pourcentage de rejet observeé chez les patients recevant 10 mg/jour de 3383.1 était sensiblement similaire à celui observé chez les patients du groupe D auxquels une GAT, thérapeutique anti-rejet bi-en--établie e-t e-fficacee a été administrée à la place du 33B3,1. Deux patients ayant reçu l'AcHo ont 1 4 présenté des épisodes de rejet au bout des deux premie- res semaines, ce qui suggère qu'aucune délétion de clones (R±IL2) n'a eu lieu chez les patients traités par le 3383.1 et que les rejets en retour ont été rares. Aucun épisode infectieux grave ne s est produit parmi les patients du groupe A ou B. Ainsi, les patients sous 33B3.1 n'ont pas présenté la lymphopénie profonde observée chez les pa- tients du groupe D. Les lymphocytes Til* T4+ et T8+ ont diminué légérement et harmonieusement (c'est-à-dire rapports T4/T8 similaires). au cours du traitement par l'AcHo. conformément au fait que les deux sous ensembles expriment les R-IL2 au cours du rejet (cf. 7 ci-dessus) et que les lymphocytes activés restent en minorité parmi les leucocytes périphériques. Tous les comptages de globules blancs ont notablement augmenté, comparativement au groupe D. Toutes ces variations con- cernant les leucocytes traduisent probablement l'asso- ciation de l'effet du CS et de l'absence de réaction croisée néfaste du 33B3.1. Le contrôle des teneurs en 33B3.1 a révélé qu'un patient du groupe A ne possédait aucune teneur sanguine détectable (bien que ne présentant aucun rejet), tandis que tous les patients du groupe B possé- daient une teneur sanguine élevée et vraisemblablement saturante en 3383. 1 (conformément à l'affinité de l'AcMo pour le R-IL2) pouvant expliquer l'incidence de rejet très faible observée dans le groupe B. La plupart des patients ont produit des anticorps contre le 33B3.1. De même, dans cette petite série, aucune corrélation n'a pu être trouvée entre la manifestation d'un rejet (groupe A ou B) et la détection d'anticorps IgG et/ou IgH anti- 33B3.1. Des tentatives pour estimer la présence d'anti- corps anti-idiotypes ont toujours échoué en raison de concentrations contaminantes détectables de R-IL2 solubles. Chez certains patients, (tableau III), il a été observé de manière inattendue des anticorps 26 16330 anti-3383.1 dès le dixième jour après transplantation, ce qui-était plus précoce que ce qui a été observé chez des receveurs traités par l'OKT3 (cf. GOLDSTEIN G., FUCELLO A.J., NORMAN P.3., SHIELD C.F., COLVIN R.8., COSINI B., OKT3 monoclonal antibody plasma levels during therapy and the subsequent development of host antibodies to OKT3, Transplantation 1986; 42: 507-10 (12) et cf. CHATENOUD L., 8AUDRIHAYE M.F., CHKOFF N., KREIS H., GOLDSTEIN G., BACH J.F., The restriction of the human in vivo immune response against the mouse monoclonal antibody OKT3, 3. Immunol. t986; 137: 830-38 (13)). Ce nouveau traitement, utilisant un AcHo dirigé contre un récepteur de facteur de croissance présent seulement sur les lymphocytes T activés, médi- calement bien toléré et efficace dans la prévention d un épisode de rejet précoce, présente ainsi un intérêt primordial dans la modulation de la réponse allogénique chez l'homme. Il est donc applicable i n'importe quel type de greffe, non seulement le rein, mais aussi le coeur, le foie, le poumon, l'intestin, la moelle osseuse, etc... Du fait que l'anticorps agit par simple compé- tition avec l'interleukine 2, il est naturellement rem- plaçable par tout autre anticorps monoclonal de spéci- ficité comparable de souris ou d'homme.-Egalement, on doit considérer qu'un anticorps chimère combinant un site actif bloquant le récepteur de l'interleukine 2, apporté par un anticorps d'origine murine et une région constante d'origine humaine, sera également convenable. L'important est de bloquer la fonction du récepteur sans tuer la cellule, ce qui évite tous les-symptGmes d'into- xication (le syndrome des brûlés) observés avec les anticorps cytotoxiques. Enfin, il est possible d'utiliser un anticorps quel conque dont on aurait fait disparaitre la cytotoxlcité par greffage de groupements chimiques, et notamment de polyethyleneglycol. Toutes ces substitutions qui respec_ tent le concept d'antlcorps bloquant les effets de l'interleukine 2 sans tuer les lymphocytes sont partie intégrante de l'invention. REVENDICATIONS 1. Agent actif destiné à prévenir ou à combattre le rejet de greffe d'organe chez 1' homme, caractérisé en ce qu'il comprend un anticorps monoclonal capable de se fixer au récepteur de l'interleukine 2 humnaine porté par les lymphocytes et ayant la propriété de ne pas être cytotoxique in vitro même en présence de omplément, tout en inhibant la prolifération cellulaire induite par l'interleukine 2. 2. Agent actif selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'anticorps est un anticorps monoclonal de souris de classe IgG1. 3. Agent actif selon la revendication 1,caractérisé en ce que l'anticorps est un anticorps xmDnoclonal de rat de classe IgG2a. 4. Agent actif selon la revendication 3 caractérisé en ce que 1 'anticorps monoclonal de rat est l'anticorps 33B3.1. 5. Agent actif selon la revendication 1,caractérisé en ce que l'anticorps est un anticorps monoclonal humain. 6. Agent actif selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'anticorps est un anticorps monoclonal chimère comportant une partie d'origine humaine et unepartie d'origine animale. 7. Agent actif selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'anticorps est un anticorps monoclonal d'origine humaine ou animale modifié chimiquement pour supprimer les effets cytotoxiques en présence de complément. 8.Agent actif selon la revendication 6, caractérisé en ce que ledit anticorps d'origine humaine ou animale est chimiquement modifié au moyen de polyéthylèneglycol. 9.Médicament contenant au moins un agent actif selon 1 'une quelconque des revendicationts. 1 à 7. 10. Médicament selon la revendication 9 contenant l'anti- corps 33B3.1.