FR 2605321 A1 19880422 FR 8714058 A 19871012 ANTHRACYCLINE GLYCOSIDES A ACTIVITE ANTITUMORALE. LEUR PREPARATION. LES COMPOSES INTERMEDIAIRES DE CETTE PREPARATION, ET COMPOSITIONS ET UTILISATION DE CES SUBSTANCES. La présente invention se rapporte à de nouvelles anthracyclines, à un procédé de préparation de ces anthracyclinesj aux compositions pharmaceutiques qui les contiennent et aux nouveaux aminosucres protégés, qui sont utilisés comme composés intermédiaires lors de leur préparation. La présente invention propose les nouveaux anthracycline glycosides IA-D, et leurs sels d'addition pharmaceutiquement acceptables: Q H O CH2R.1 = R2 CH2R1 IA: R1 = H; R = CH2NH2 1 2 3 -%& B: R = OH; R = H; R = CH2NH2 1 3 2= T";, IffC: R R H; R = CH2NH2 MeO OH 2 e O OH ÈD: R = OH; R = H; R2 = CH2NH2 H"HO Les glycosides IA et IC sont préparés par couplage de la daunomycinone, qui est un aglycone connu de l'anthracycline daunorubicine à activité antitumorale, avec des dérivés réactifs protégés des nouveaux aminosucres que sont le tridésoxy-2,3,6 aminométhyl-3 L-ribohexopyranose (IIA) et le tridésoxy-2,3,6 aminométhyl-3 L-arabinohexo- pyranose (IIB), dans les conditions décrites dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique US-A-4 098 798. NH HOH H,OH Me7 OMeOH HO HO NH2 IIA IIB 2 2605321 Les analogues lB et ID sont obtenus par une bromation des glycosides respectivement IA et IC, suivie par l'hydrolyse des dérivés bromés en position 14, de préferernce selon le procédé décrit dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique US-A-4 112 076. En conséquence, la présente invention propose un procédé de préparation d'un anthracycline-glycoside de formule (I), ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable de ce composé, ce procédé consistant: (i) à faire réagir la daunomycinone avec un dérivé réactif du tridésoxy-2,3,6 aminométhyl-3 L-ribohexopyranose ou du tridésoxy-2,3,6 aminométhyl-3 L-arabinohexopyranose, dans lesquels les groupes amine et les groupes hydroxy en position 4 sont protégés, et à éliminer les groupes protecteurs du produit ainsi obtenu, de façon à obtenir un anthracycline glycoside de formule (I) dans lequel R représente hydrogène; (ii) si on le désire, à convertir ledit glycoside de formule (I) en l'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables; (iii) si on le désire, à bromer ledit glycoside de formule (I), ou son sel pharmaceutiquement accep- table, et à hydrolyser le dérivé.bromé en position 14 ainsi obtenu, de façon à former le glycoside correspondant de formule CI), dans lequel R représente hydroxy; et (iv) si on le désire, à convertir ledit glycoside de formule (I), dans lequel R représente hydroxy en l'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. La préparation des anthracycline glycosides de l'invention et de leurs sels sera maintenant décrite plus en détail, plus spécifiquement en rapport avec la préparation des premiers composés intermédiaires 5 et 5. Deux procédés de synthèse ont été mis au point pour obtenir 5 et. La première voie, représentée sur le Schéma I ci-dessous, est basée sur l'addition de nitro- méthane au sucre connu 1 présentant une fonction cétone en position 3, fournissant le dérivé nitro a, à partir duquel, en suivant la séquence réactionnelle indiquée, on obtient un mélange de 5 et 6, avec la formation prépondérante du sucre ayant la configuration L-ribo (5:6 = 3:1) . SCHENA I CMe OH OMe eCH3NO2M7 1) Ac2O, H Me CH3NO2 _Me- HO OHO2- ' 2) NaHCO3 O CH2NO2 1i 2 Me OMe NaOMe, AcO HO NO2 NO2 3 4 CF CO 31 OMe MeoQ H 1) NiRaney 2) (CF3COtO 3) Séparation chromatographique Me 3 0 Me 7f HO NHCOCF3 Plus particulièrement, l'addition de nitrométhane en présence de méthylate de sodium fournit le nitroalcool correspondant a, avec un rendement de 85% après cristalli- sation. Le nitroène 3, obtenu facilement à partir de 2, subit le réarrangement indiqué de la double liaison, dans des conditions basiques, pour donner le nitrosucre insaturé 4. Celui-ci, une fois réduit en présence de nickel de Raney, fournit un mélange des deux aminosucres 5 et 6, séparés par chromatographie sous forme de dérivés N-trifluoracàtylés. Une autre voie, représentée sur le Schéma II ci- dessous, permet d'obtenir les intermédiaires 5 ou 6 de façon stéréosélective, et elle est basée sur l'utilisation, comme intermédiaire clé, de l'oléfine exocyclique connue 7 (R.M. Giuliano, Carbohydr. Res. 131 (1984) 341-345), qui est facilement préparée à partir de 1. L'hydroboration de 7 fournit l'alcool correspondant 9 de façon stéréosélective. Cet intermédiaire permet de préparer l'intermédiaire 5, par formation de l'azide correspondant, hydrolyse du groupe protecteur sur O, réduction et, enfin, N-trifluoracétylation du nouvel aminosucre. Selon un autre mode de réalisation, l'oxydation de 9 en 12, suivie par un traitement alcalin, fournit l'intermédiaire 13 ayant la configuration arabino. L'intermédiaire 13 est réduit en l'alcool 14. En suivant la même séquence réactionnelle que celle utilisée pour la conversion de 9 en , on convertit l'alcool 14 en l'aminosucre 6 protégé sur N, ayant la configuration L-arabino. SoHEMA II S iil' CCH2 H3 Hâ77 Me3CMe2SiCi I OMe Me O RO C 8 c2 I 82H6, H202, OH OMe CH OH Me. RO 1) MsCl, Py 9 %%%:) NaN3 SO, (COCi)2 OMe OMe CH R' J1) F CHO O Me 2) H2 p, c MeR 3) (CF CO)2O 12 10 R' = OMs 11R'i N _ 3 TEA, 3 OMe OMe 1) MsCl, Py Na.BH42 NaN36 MMe y RO RO 3 R 2) ( 3 2 3) (CF3CO) 2 CH I.3 R M e H La préparation des analogues de la daunorubicine, IA et IC, est effectuée par réaction de la daunomycinone avec les dérives chlorés en position 1 et N,O-trifluor- acétylés, IIIA ou IIIB, 1 " F3 Ci Cl me me c z CF COO 3 3 NHCOCF3 III-A III-B obtenus par traitement de 5 ou C par l'anhydride trifluor- acétique, en faisant suivre par une réaction avec du chlorure d'hydrogène sec. Le glycoside protégé obtenu, à la suite de l'élimination du groupe protecteur N-trifluor- acétyle par une hydrolyse alcaline modérée, est converti en la nouvelle anthracycline IA ou IC. Cette anthracycline peut, si on le désire, être isolée en tant que chlorhydrate. Ceci est effectué de façon typique par traitement du glycoside par une solution méthanolique de chlorure d'hydrogène, et isolement du glycoside sous la forme de son chlorhydrate. La préparation des analogues de la doxorubicine, lB et ID, est effectuée par bromation de IA ou de IC, par exemple, avec du brome dans le dichlorure de méthylène, afin d'obtenir le dérivé bromé en position 14, à partir duquel, après une hydrolyse, typiquement avec une solution aqueuse de formiate de sodium, on obtient le nouveau glycoside IB ou ID. Egalement, le nouveau glycoside peut être isolé en tant que chlorhydrate. Ceci est effectué typiquement par traitement du glycoside par une solution méthanolique de chlorure d'hydrogène, et isolement du glycoside sous la forme de son chlorhydrate. La présente invention propose également une composition pharmaceutique comprenant, comme ingrédient actif, un anthracycline glycoside de formule IA-D, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables, conjointement avec un support ou diluant pharmaceutiquement acceptable. Des supports classiques peuvent être utilisés et la composition peut être formulée d'une manière classique. Les composés de l'invention sont utiles dans des méthodes de traitement du corps humain ou animal par thérapie. En particulier, les composés de l'invention sont utiles comme agents antitumoraux par administration d'une quantité therapeutiquement efficace du composé à un patient. Les Exemples suivants illustrent l'invention. Exemple 1 Préparation du didésoxy-2.6 nitrométhyl-3 C ca-L-ribohexopyranoside de méthyle (2) Une solution 1 fois molaire de méthylate de sodium dans le méthanol (20 ml, 20 mmoles) a été ajoutée goutte à goutte, sous agitation, à une solution de didésoxy-2,6 a-L- érythro-hexopyranosid-3-ulose de méthyle (1) (1,60 g, mmoles), dans 70 ml de nitrométhane sec. Le mélange réactionnel a été agité pendant toute une nuit, à la température ambiante, et, ensuite, il a été désionisé par la résine Dowex 50WX8 (H +>, et le filtrat a été évaporé jusqu'à obtention d'un solide. La cristallisation fractionnée du produit dans l'éther a donné 1,66 g (75%) de didésoxy-2,6 nitrométhyl-3 C a-L-ribo-hexopyranoside de méthyle (a). P.f.: 115'C, 20]= -104,25 (c = 1,CH2C12) D lC2C 2 Le spectre de résonance magnétique du proton (200 MHz, CHCl 3) a montré une absorption à 6: 1,35 (d, J = 6,2 Hz, 3H, CH-5), 2,01 (dd, J = 3,7, 15,0 Hz, 1H, H-2ax), 2,24 (bd, J = 11,7 Hz, 1H, OH-4), 2,32 (dd, J = 1,1, 15,0 Hz, 1H, H-2e), 3,06 (dd, J = 9,3, 11,7 Hz, 1H, H-4), 3,38 (s, 3H, QOC3), 3,70 (qd, J = 6,2, 9, 3 Hz, 1H, H-5), 4,26 Cd, J = 1,5 Hz, 1H, OH-3), 4,34 (dd, J = 1,5, 11,1 Hz, 1H, CH(H)-N02)), 4,74 (d, J = 11,1 Hz, 1H, CH.()-NO2), 4,84 (dd, J = 1,1, 3,7 Hz, 1H, H-l). Le spectre RKN 13C (50 MHz, CDCl3> a montre une absorption à: 17,8 (CE3-5); 36,7 (C-2); ,3 (OCH3); ,1 (C-5); 71,5 (C-3); 73,5 (C-4); ,8 (CH2NO2); 97,7 (C-1). 2 Exemple 2 Préparation du nitrométhyl-3 tridésoxy-2,3.6 hex-éno- 2pyranoside de méthvle (4) Le composé (2) (1,1 g, 5 mmoles) a été traité par 70 ml d'anhydride acétique et 0,7 g d'acide p-toluène sulfonique monohydraté, à la température ambiante, pendant toute une nuit. Le mélange réactionnel a été versé dans un melange eau-glace et traité par de l'hydrogénocarbonate de sodium sous agitation. Apres neutralisation, on a laissé le mélange se réchauffer jusqu'à la température ambiante, sous agitation, et le mélange a été extrait par l'acétate d'éthyle. L'extrait organique a été lavé avec de l'eau, puis il a été séché sur sulfate de sodium, filtré, et on l'a fait évaporer sous pression réduite, ce qui a donné 1,030 g (84%) de ({), sous la forme d'un sirop blanc, qui a été utilise pour l'étape suivante sans purification supplémentaire. Le composé _ (0,98 g, 4 mmoles), dissous dans du méthylate de sodium méthanolique 0,1M (70 m>l) a été maintenu à la température ambiante. Le progrès de la réaction a été suivi en C.C.M. sur gel de silice, à l'aide du mélange chlorure de méthylène: méthanol (10:1 v/v). Lorsque la réaction a été achevée, le mélange réactionnel a été neutralisé par de l'acide acétique dissous dans du méthanol et on l'a fait évaporer, pour donner un sirop qui a été purifié par chromatographie éclair avec un mélange chlorure de méthylène: méthanol (19:1 v/v>,ce qui a donné 0,675 g (83%) de 4, sous la forme d'un sirop. Le spectre de résonance magnétique du proton (200 MHz, CHCl) a montré une absorption à 6: 1,33 (d, J = 6,2 Hz, 3H, CQ3-5), 2,38 (bd, J = 7,0 Hz, 1H, OH-4>, 3,42 (s, 3H, OCH3) 3,76 (dq, J = 9,1, 6,2 Hz, 1H, D-5), 3,99 (ddd, J = 9,1, 7,0, 2,0 Hz, 1H, H-4), 4,86, 5,30 (deux d, J = 13,3 Hz, 2H, Q N02, 4,84 (d, J = 3,0 Hz, 1H, H-1i), ,90 (dd, J = 3,0, 2,0 Hz, 1H, H2). Exemple 3 Préparation du tridesoxy-2.3.6 trifluoracétamidomêthyl-3 a-L-ribohexopyranoside de méthyle (5) et tridésoxy-2.3.6 trifluoracétamidométhyl3 a-L-arabino-hexopyranoside de méthyle (6) Le composé (4) (0,61 g, 3 mmoles), dans 50 ml d'eau, a été hydrogéné en présence de 0,6 g de nickel de Raney neutre, sous une pression de 1,013 MPa (10 atmosphères). Après élimination du catalyseur par filtration, le pH de la solution a été aJusté à 6 par du chlorure d'hydrogène aqueux et on a fait évaporer la solution résultante. Le résidu a été traité par plusieurs fractions de toluène, en faisant suivre par une évaporation, afin de donner un sirop incolore qui a été mis en suspension dans 20 ml de dichlorure de méthylène et traité par 4 ml d'anhydride trifluoracétique à O'C. Au bout de 2 heures, on a fait évaporer le mélange réactionnel à siccité, et on l'a traité par du méthanol (20 ml). Après l'avoir laissé reposer à la température ambiante, on a fait évaporer le mélange réactionnel à siccité. La CCX du résidu avec un mélange dichlorure de méthylène: méthanol 10:1, après développement, a montré la présence de deux produits avec une Rf de 0,45 et une Rf de 0,40. Le résidu résultant a été purifié par chromatographie éclair, à l'aide d'un mélange chlorure de méthylène: méthanol 97:3 en tant que système d'élution. On a obtenu 0,55 g (67%) de _: le spectre de résonance magnétique du proton a montré une absorption à S: 1,24 (d, 3H, 0H8-5), 1,71 (ddd, J = 2,7, 5,0, 14,5 Hz, 1H, H-2ax), 1, 87 (ddd, J = 4,1, 5,5, 14,5 Hz, 1H, H-2e), 2,21 (m, 1H, H-3), 3,32 (s, 3H, OCH3), 3,53 (dd, J = 4,7, 8,1 Hz, 1H, H-4), 3,60 (m, 2H, QH2NH), 3,80 (qd, J = 6,4, 8,1 Hz, 1H, H-5), 4,61 (dd, J = 2,7, 4,1 Hz, 1H, H-I); FD- SM 271 (X+);et 0,185 g (23%) de: Le spectre de résonance magnétique du proton a montré une absorption à g: 1,26 (d, J = 6,3, 3H, QH3-5), 1,50 4,67 (dd, J = 1,3, 3,6 Hz, 1H, H-1). FD-SM 271 (M+). Exemple 4 Preparation du tert.-butyldiméthylsilyl-4 (hydroxyméthyl)-3 tridésoxy-2.3. 6 a-L-ribo-hexopyranoside de méthyle à 35 C, pendant 10 heures. Le mélange réactionnel a été versé dans un mélange eau-glace et on l'a extrait par le dichlorométhane. L'extrait a été lavé avec de l'eau, puis il a été séche sur sulfate de sodium et on l'a fait évaporer sous pression réduite, ce qui a fourni 4, 850 g (89%) de 5, sous forme de sirop. 4,5 g (16,5 mmoles) de 8, dans 30 ml de tétra- hydrofuranne anhydre, sous atmosphère d'azote, ont été traités par 27 ml d'une solution dans le tétrahydrofuranne anhydre du complexe borane-tétrahydrofuranne 1X à O C. La solution a été agitée à la température ambiante pendant 3 heures, refroidie à nouveau et traitée par 20 ml du mélange tétrahydrofuranne: eau (1:1) et 25,5 ml d'hydroxyde de sodium 2N et, au bout de 10 minutes, 20,5 ml de peroxyde d'hydrogène à 30%. Le mélange a été agité à la température ambiante pendant 2 heures, refroidi à nouveau, et traité par 50 ml de thiosulfate de sodium en solution aqueuse saturée, afin de décomposer le peroxyde en excès. Du chlorure de sodium a éte ajouté pour saturer la couche aqueuse, laquelle a été séparée et extraite par du dichlorure de méthylène. Les couches organiques ont eété séchées et on les a fait évaporer, ce qui a fourni 4,65 g (97%) de 9. Le spectre de résonance magnétique du proton a montré une absorption à 6: 0,08-0,09 (deux s, 6H, Si (CH)2), 0,88 (s, 9H, SiC(CH3)3), 1,17 (d, J = 6, 4 Hz, 3H, Q -5), 1,86 (m, 2H, QG2-2), 2,20 (m, 1H, H-3), 2,82 (m, 1H, CH2OD), 3,31 (s, 3H, O ff), 3,55 (dd, J = 5,3, 9,2 Hz, 1H,}{-4), 3,76 (ddd, J = 6,0, 6,9, 12,0 Hz, 1H, CH(H)-OH), 3,90 (qd, J = 6,4, 9,2 Hz, 1H, fl-5), 4,01 (ddd, J = 4,0, 7,0, 12,0 Hz, 1H, CH(l)-OH), 4,58 (t, J = 2,9 1H, H-1). Exemple 5 Préparation de l'azidométhyl-3 tert.-butvldiméthyl- dinméthvlsilvl-4 tridésoxv-2.3.6 a-L-ribohexopvranoside de méthyle (11) 2, 9 g (10 mmoles) de _, dissous dans 20 mi de pyridine sèche, ont été traités par du chlorure de méthane sulfonyle (2 ml), à 0'C, pendant toute une nuit. Le mélange a été versé dans un mélange eau-glace, et le mélange aqueux a été extrait par du chlorure de méthylène. Les extraits organiques combinés ont été lavés avec du chlorure d'hydrogène aqueux, de l'hydrogénocarbonate de sodium aqueux, de l'eau, et, ensuite, ils ont été séchés'sur sulfate de sodium. L'évaporation du filtrat a donné 3,40 g (92%) de 10. 3 g (8,15 nmmoles) de 10, dissous dans 30 ml de N,N-diméthylformamide sec, ont été traités par un excès d'azide de sodium (3,2 g). Le mélange a été porté au reflux pendant 30 minutes, et, ensuite, il a été versé dans un mélange eau-glace sous agitation, et le produit a été extrait par du dichlorure de méthylène. Le sirop résultant a été purifié par chromatographie éclair à l'aide de chlorure de méthylène comme éluant; rendement: 2,50 g (80%) de IL pur. -1 I.R. = 2110 cm (azide). Exemple 6 Préparation du tridésoxy-2,3.6 trifluoracétamidométhyl-3 -L-ribohexopyranroside de méthyle (5) 2,50 g (8 mmoles) de 11 ont éte dissous dans 50 ml de tétrahydrofuranne à la température ambiante. A la solution, on a ajouté 5 g de fluorure de tétrabutyl- ammonium. La solution a été agitée pendant 1 heure, puis elle a éte diluée par du dichlorure de méthylène et de l'eau. La couche aqueuse a été extraite par du chlorure de méthylène, et les solutions organiques combinées ont éte lavées avec de l'eau, séchées (Na2SO4) et concentrées à siccité. 2-5 Au sirop dissous dans du méthanol sec (75 ml), a été ajouté du palladium à 20% sur carbone (1 g), et le mélange a été hydrogéné à 1, 013 MPa (10 atmosphères>, pendant 3 heures, filtré et concentré à siccité. Une solution du sirop résultant dans du chlorure de méthylène anhydre (40 ml), à O C, a été traitée par de l'anhydride trifluoracétique ( méthylène: méthanol 97:3, en tant que système d'élution. On a obtenu 1,540 g (71%) de 5. Exemple 7 Préparation du tert.-butyldimthylsilyl-4 formyi-3 tridésoxy-2.3.6 a-Lribo-hexopyranoside de méthyle (12) A 0,5 ml (5,5 mmoles) de chlorure d'oxalyle, dissous dans 15 ml de chlorure de méthylène à -60 C, on a ajouté sous agitation, 0,85 ml (11 mmoles) de diméthyl- sulfoxyde dissous dans 5 ml de chlorure de méthylène. Le mélange réactionnel a été agité pendant 5 minutes et, ensuite, on y a ajouté 1,45 g (5 mnmoles) de 9_ dissous dans ml de chlorure de méthylène. Au bout de 15 minutes, on a ajouté 3,5 ml de triéthylamine, et le mélange réactionnel a été agité pendant 5 minutes.puis on l'a laissé se réchauffer jusqu'à la température ambiante. De l'eau (25 ml) a été ajoutée, et la couche aqueuse a été réextraite par du chlorure de méthylène. Les couches organiques ont été combinées, lavées avec du chlorure de sodium saturé, et séchées sur sulfate de magnésium anhydre, et on les a fait évaporer, ce qui a fourni 1,34 g (93%) de 12. Le spectre de résonance magnétique du proton a montré une absorption à g: 0,03, 0,06 (deux s, 6H, Si (CH3)2), 0,84 (s, 9H, SiC(CL3)3), 1,25 (d, J = 6,2 Hz, 3H CH3-5), 1,97 (ddd, J = 3,4, 6,0, 14,0 Hz), 1H, H-2ax), 2,09 (ddd, J = 1,4, 2,6, 14,0 Hz, 1H, H-2e), 2,54 (dddd, J = 3,0, 2,6, 5,6, 6, 0 Hz, 1H, H-3), 3,30 (s, 3H, OQ3), 3,54 (dd, J = 5,6, 9,7 Hz, 1H, D-4), 4, 03 (qd, J = 6,2, 9,7 Hz, 1H, H-5), 4,56 (dd, J = 1,4, 3,4 Hz, 1H, H-I), ,02 (d, J = 3,0 Hz, 1H, CEO). Exemple 8 Préparation du tert.-butyldiméthylsilyl-4 formyl-3 tridésoxy-2.3.6 a-Larabino-hexopvranoside de méthyle (13) 1,30 g (4,5 mmoles) de 12, dissous dans 30 ml de triéthylamine sèche, ont été agités au reflux. Le progrès de la réaction a été suivi en C.C.X. sur gel de silice, à l'aide d'un mélange toluène-acétone 9:1 comme agent de développement. Lorsque l'on a fait évaporer le mélange réactionnel et que le résidu résultant a été filtré à travers une courte colonne de gel de silice à l'aide du toluène comme éluant, on a obtenu 1,25 g (96%) de 13. Le spectre RMN a montré une absorption à 6: 0,01, 0,08 (deux s, 6H, Si(QC1)2), 0,86 (s, 9H, SiC(CH3), 1,22 (d, J = 6,2 Hz, 3H, 0H3-5), 1,6-1, 9 (m, 2H, CH2-2), 2,93 (dddd, J = 2,5, 5,0, 9,2, 12,0 Hz, 1H, H-3), 3,33 (s, 3H, OH), 3,51 (dd, J = 9,2, 9,2 Hz, 1H, H-4), 3,66 (qd, J = 6,2, 9,2 Hz, 1H, IH-5), 4,68 (dd, J = 1,5, 3,5 Hz, 1H, H-i), 9,77 (d, J = 2,5 Hz, 1H, CHO). Exemple 9 Préparation du tert.-butyldiméthylsilyl-4 hydroxyméthyl-3 tridésoxy-2.3.6 a-L-arabino-hexopyranoside de méthyle (14) 1,2 g (4,15 mmoles) de 13, dissous dans 50 ml de méthanol, a été réduit par du borohydrure de sodium (0,1 g), à 0'C, pendant 20 minutes. Le borohydrure de sodium en excès a été consommé par l'addition d'acétone. Après addition de 25 ml d'eau, la solution a été neutralisée par de l'acide acétique et, ensuite, elle a été extraite par du chlorure de méthylène. On a fait évaporer les extraits organiques à siccité, ce qui a fourni 1,2 g (100%) de 14. Le spectre de résonance magnétique du proton a montré une absorption à 6: 0,08, 0,09 (deux s, 6H, Si (CH3)2), 0,88 (s, 9HSiC( H3)3), 1,20 (d, J = 6, 3 Hz, 3H, CH-5), 1,66 (ddd, J = 3,6, 13,0, 1H, H-2ax), 1,85 (ddd, J = 1,4, 2,5, 13,0 Hz, 1H, H-2e), 1,9-2,0 (m, 1H, H-3), 3,22 (dd, J = 9,4, 9,4 Hz, 1H, H-4z), 3,33 (s, 3H, OCH3), 3,6-3,7 (m, 3H, H-5, CH20H), 4,68 (dd, J = 1,4, 3,6 Hz, 1H, H-1). Exemple 10 Préparation du tridésoxv-2. 3.6 trifluoracétamidométhvl-3 a-L-arabinohexopyranoside de méthyle (6) On a effectué la synthèse du composé de l'intitulé à partir de 14, par l'intermédiaire d'une mésylation suivie d'une azidolyse,en suivant le mode opératoire décrit aux Exemples 5 et 6. Exemple 11 Préparation du chlorure de tridésoxy-2.3.6 trifluoracétamidométhyl-3 trifluoracétyl-4 a-L-ribo- hexopyranosyle (III-A) On a fait réagir une solution de 0,5 g (1,84 mmoles) de 5 dans 10 ml d'acide acétique et 40 ml d'eau, à 100 C, pendant 1 heure. On a fait évaporer la solution sous vide. Le résidu a été dissous dans 25 ml de dichlorure de méthylène, et il a été traité à 0'C par 3 ml d'anhydride trifluoracétique. Au bout de 2 heures à 0 C et d'l heure à la température ambiante, on a fait évaporer le mélange réactionnel pour obtenir un sirop qui a été direc- tement dissous dans 15 ml d'éther diéthylique anhydre. La solution a été saturée à O C par du chlorure d'hydrogerie sec. Après un repos à 0 C pendant toute une nuit, on a fait évaporer le mélange réactionnel sous vide, ce qui a fournit le compose de l'intitulé approprié pour la réaction ultérieure sans purification supplémentaire. Exemple 12 Préparation de la désamino-3' aminométhyl-3' épi-3'.4' daunorubicine (I-A) A une solution de daunomycinone (0,400 g, 1 mmole) dans 50 ml de dichlorure de méthylène anhydre, on a ajouté du chlorure de tridésoxy-2,3, 6 trifluoracétamidométhyl-3 trifluoracétyl-4 L-ribohexapyranosyle (0,37 g, 1 mmole>) préparé comme décrit à l'Exemple 11, dans 15 ml de dichlorure de méthylène et 4 g de tamis moléculaire (0,4 nn (4A), Merck). Le mélange a ensuite été traité par 0,28 g de trifluorométhanesulfonate d'argent dans 15 ml de d'éther diethylique anhydre, sous agitation énergique. Au bout de 15 minutes, le melange réactionnel a été traité par une solution aqueuse saturée d'hydrogéno- carbonate de sodium. La phase organique séparée a été lavée avec de l'eau, puis on l'a fait évaporer à siccité. Le résidu solide a été dissous dans du méthanol sec (25 ml) et gardé pendant toute une nuit. Le produit brut obtenu par évaporation du solvant a été chromatographié sur une colonne de gel de silice, à l'aide d'un mélange dichlorure de méthylène: acétone = 19:1 comme agent d'élution, ce qui a donné de la désamino-3' trifluoracétamidométhyl-3' épi-3',4' daunorubicine pure (0,410 g, 63%); p.f.: 161-163'C. Le spectre de résonance magnétique du proton a montré une absorption à 6S: 1,30 (d, J = 6,1 Hz, 3H, Q3-5') 1 7-2,5 (m, 5H, CH2-8, 2-2', CH-3' 2, 41 (s, 3H, COCH3)>, 2,88 (d, J = 18,9 Hz, 1H, H-lOax), 3,18 (dd, J = 1,5, 18,9 Hz, 1H, H-lOe), 3,4-3,8 (m, 3H, C12-NH, H-5'), 4,07 (s, 3H, O Qj-4), 4,53 (s, 1H, Q2-9), ,23 (m, 1H, H-7), ,29 (dd, J = 13,97 (s, 1H, OH-6). Une solution de 0,4 g du composé indiqué ci-dessus dans 10 ml d'acétone a été traité par 40 ml d'hydroxyde de sodium aqueux O;1N et agité sous azote à 15 C. Au bout d'! heure, le mélange réactionnel a été ajusté à pH 3,5 par du chlorure d'hydrogène aqueux 1N et, ensuite, il a été extrait par du dichlorure de méthylène, afin d'éliminer les impuretés. La phase aqueuse, ajustée à pH 8,0, a été extraite par du dichlorure de méthylène. Les extraits organiques combinés ont été séchés sur sulfate de sodium, concentrés jusqu'à un petit volume et acidifiés à pH 4,5 par du chlorure d'hydrogène méthanolique 0,25N. L'addition d'éther diéthylique en excès a donné de la désamino-3' aminométhyl-3' épi-3',4' daunorubicine (I-A), sous la forme de son chlorhydrate (0,300 g), p.f.: 151-153 C (avec décomposition). Exemple 13 Préparation de la désamino-3' aminomethyl-3' èpi-3'.4' doxorubicine (I-B) Une solution de 0,200 g de chlorhydrate de désamino-3' aminométhyl-3' épi3'-4' daunorubicine (I-A), préparée comme décrit à l'Exemple 12, dans un mélange de 3 ml de méthanol anhydre, 8 ml de dioxanne et 0,2 ml d'orthoformiate d'ethyle a été traitée par 0,45 ml d'une solution contenant 0,95 g de brome dans 10 ml de dichlorure de méthylène. Au bout d'1,5 heure à 15 C, le mélange réactionnel a été versé dans un mélange de 40 ml d'éther diéthylique et de 40 ml d'éther de pétrole. Le précipité rouge résultant, après avoir eété recueilli par filtration et lavé avec de l'éther diéthylique, a été dissous dans un mélange de 7,5 ml d'acétone et 7,5 ml de bromure d'hydrogène aqueux 0,25N. Au bout d'une Journée à 30 C, le mélange réactionnel a été traite par 0,35 g de formiate de sodium dans 4 ml d'eau, et agite à 30 C pendant 2 jours. Le mélange réactionnel a été extrait par du dichlorure de méthylène de façon à éliminer quelques impuretés lipophiles. La phase aqueuse, après avoir été ajustée à pH 7,6 par du bicarbonate de sodium aqueux, a été extraite de façon répétée par du dichlorure de méthylène. Les extraits organiques combinés ont été séches sur sulfate de sodium, et on les a fait évaporer jusqu'à obtenir un petit volume sous vide. A la solution rouge résultante, ajustée à pH 3,5 par du chlorure d'hydrogène méthanolique anhydre, on a ajouté de l'éther diéthylique en excès, ce qui a permis d'obtenir de la désamino-3' aminométhyl-3' épi- 3',4' doxorubicine (I-B, 0,180 g). Exemple 14 Préparation du chlorure de tridésoxy-2.3.6 trifluoracétamidométhyl-3 trifluoracétyl-4 L-arabino- hexopyranosyle (III-B) La synthèse du composé de l'intitulé à partir de _, a été effectuée conformément au mode opératoire décrit a l'Exemple 11. Exemple 15 Préparation de la désamino-3' aminométhyl-3' épi-4' daunorubicine (I-C) La synthèse du composé de l'intitulé, à partir de la daunomycinone et du chlorure de tridésoxy-2,3,6 trifluoracétamidométhyl-3 trifluoracétyl-4 L-arabino- hexopyranosyle (III-B) a été effectuée conformément au mode opératoire décrit à l'Exemple 12. Le spectre de résonance magnétique du proton de la désamino-3' trifluoracétamidométhyl-3' épi-3',4' daunorubicine a montré une absorption à S: 1,32 (d, J = 6,0 Hz, 3H, CH-', 1,5-1,9 (m, 3H, CH_-2', H- 3'), 2,0-2,4 (m, 2H, Q%-8), 2,42 (s, 3H, COCH3>, 2,64 (d, J = 5,3 Hz, 1H, OH-4), 2,94 (d, J = 18,9 Hz, 1H, H-lOax), 3,05 (m, 1H, H-4'), 3,23 (dd, J = 1,5, 18,9 Hz, 1H, H-1lOe), 3,6-3,8 (m, 2H, QH2-NH), 3,87 (qd, J = 6,0, 9,2 Hz, 1H, H-5'), 4,08 (s, 3H, O L3-4), 4,59 (s, 1H, QH-9), ,30 (dd, J = 1,9, 3,7 Hz, 1H, H-7), 5,45 (dd, J 7,78 (dd, J = 8,1, 8,1 Hz, 1H, H-2). 8,03 (d, J = 8,1 Hz, 1H, H-l), 13,28 (s, 1H, QlH-11), 14,00 (s, 1H, OH-6). La désamino-3' aminométhyl-3' épi-4' daunorubicine (I-C) a été obtenue en tant que chlorhydrate sous forme de cristaux rouges, p.f. = 164-165'C (avec décomposition). Exemple 16 Préparation de la désamino-3' aminométhyl-3' épi-4' doxorubicine (I-D) Le composé I-C, préparé comme décrit à l'Exemple 15, a été transformé en le dérivé correspondant hydroxyle en position 14, conformément au mode opératoire décrit à l'Exemple 13. La désamino-3' aminométhyl-3' épi-4' doxorubicine (I-D) a eté obtenue en tant que chlorhydrate sous la forme de cristaux rouges (p.f.: -172 C) avec décomposition). Activité biologique de IB Le composé IB a été testé, en comparaison avec la daunorubicine (DNR), à l'encontre des cellules HeLa et P388 in vitro (Tableau 1). L'effet in vivo de IB, à l'encontre de la leucémie de Gross disséminée est rapporté dans le Tableau 2. Ici, IB, administré par la voie intraveineuse, était moins puissant que DNR; cependant, le nouveau composé, à la dose maximale tolérée (32,11 mg/kg> était plus actif que DNR (XxTD = 15 mg/kg). Tableau 1 - Activité cytotoxique de IB par comparaison avec la daunorubicine COMPOSE DI (ng/ml) - - - - - - - - - - HeLa + P3888 DNR 10,5 8,4 *IB G,4 10 + = Essai d'inhibition de la colonie au bout de 24 heures d'exposition aux médicaments. ++ = Cytotoxicité évaluée au bout de 48 heures d'exposition aux médicaments par la technique de comptage des cellules. Tableau 2 - Effet à l'encontre de la leucémie de GrossA) COMPOSE DOSE B) MORTS PAR mg/kg T/C% C) TOXICITE DNR 10 150 0/10 183 0/10 22,5 217 2/10 IB 19 167 0/10 24,7 183 0/10 32,11 200 1/10 ___ _____ ____ A) = Les expériences ont été effectuées chez les souris C3H, inoculées par 2 x 10 cellules de leucémie par la voie intraveineuse. B) = Traitement par la voie intraveineuse au jour 1 après l'inoculation de la tumeur. C) = Temps de survie moyen des souris traitées/temps de survie moyen des témoins x 100. D) = Evaluées sur la base des découvertes de l'autopsie. 24 2605321 REVENDICATIONS 1 - Anthracycline de formule (I): 1" ^C C2 R1 NeO OH OH Me t O HO o: Me- O - R représente hydrogène ou hydroxy; et soit R soit R3 représente hydrogène, l'autre étant aminométhyle, - et ses sels d'addition pharmaceutiquement acceptables. 2 - Composé selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'il consiste en la désamino-3' aminométhyl-3' épi-3',4' daunorubicine ou son chlorhydrate. 3 - Composé selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'il consiste en la désamino-3' aminométhyl-3' épi-3',4' doxorubicine ou son chlorhydrate. 4 - Composé selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'il consiste en la désamino-3' aminométhyl-3' épi-4' daunorubicine ou son chlorhydrate. - Composé selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'il consiste en la désamino-3' aminométhyl-3' épi-4' doxorubicine ou son chlorhydrate. 6 - Procédé de préparation d'un anthracycline glycoside de formule (I), tel que défini à la revendication 1, ou d'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables, ce procédé étant caractérisé par le fait qu'il consiste: (i) à faire réagir la daunomycinone avec un dérivé réactif du tridésoxy-2,3,6 aminométhyl-3 L-ribohexopyranose ou du tridêsoxy-2,3,6 aminométhyl-3 L-arabinohexopyranose, o les groupes amino et les groupes hydroxy en position 4 sont protégés, et à éliminer les groupes protecteurs du produit ainsi obtenu, de façon à obtenir un anthracycline glycoside de formule (I) o R représente hydrogène; (ii) si on le désire, à convertir ledit glycoside de formule (I) en l'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables; (iii) si on le désire, a bromer ledit glycoside de formule (I) ou son sel pharmaceutiquement acceptable, et hydrolyser le dérive bromé en position 14 ainsi obtenu, de façon à former le glycoside correspondant de formule (I), o R1 represente hydroxy; et (iv) si on le désire, convertir ledit glycoside de formule (I) , o R représente hydroxy en l'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. - Procéde selon la revendication 6, caractérise par le fait que l'on effectue l'étape (i) en faisant réagir o0 la daunomycinorne avec un composé de formule (III-A) ou fIII-B): 33C C1 CF 000e CF3CO 3 NHCOCF3 iii-A III-B et en éliminant ensuite les groupe protecteurs trifluoracétyle. 8 - Procédé selon l'une des revendications 6 ou 7, caractérisé par le fait que l'on effectue l'étape (ii) en traitant ledit glycoside de formule (I) par une solution méthanolique de chlorure d'hydrogène et en isolant ledit glycoside de formule (I) sous la forme de son chlorhydrate. 9 - Procédé selon l'une des revendications 6 à 8, caractérisé par le fait que l'on effectue l'étape (iii) en traitant ledit glycoside de formule (I) par du brome dans du chlorure de méthylène et en hydrolysant le dérivé bromé en position 14 ainsi obtenu par une solution aqueuse de formiate de sodium. - Procédé selon. l'une des revendications 6 à 9, caractérisé par le fait que l'on effectue l'étape (iv) en traitant ledit glycoside de formule (I), o R1 représente hydroxy, par une solution méthanolique de chlorure d'hydrogène, et en isolant ledit glycodise de formule (I) o R1 représente hydroxy sous la forme de son chlorhydrate. 11 - Composition pharmaceutique comprenant un anthracycline de glycoside de formule (I) ou l'un de ses sels d'addition pharmaceutiquement acceptables, tel que défini à l'une des revendications I à 5, en mélange avec un diluant ou un support pharmaceutiquement acceptable. 12 - Anthracycline glycoside de formule (I) tel que défini à la revendication 1, ou l'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables, destiné à être utilisé dans une méthode de traitement du corps humain ou animal par thérapie. 13 - Anhtracycline glycoside ou son sel selon la revendication 12, destiné à être utilisé comme agent antitumoral. 14 - Chlorure de tridêsoxy-2,3,6 trifluor- acétamidométhyl-3 trifluoracétyl-4 a-L-ribo-hexopyranosyle de formule (III-A): Cl CF3CO III-A - Chlorure de tridsoxy-2,3,6 trifluoracétamidométhyl-3 trifluoracétyl-4 o-L-arabino- hexopyranosyle de formule (III-B): CF oeo NHCOCF3 III-B