FR 2607391 A1 19880603 FR 8616754 A 19861201 La présente invention se rapporte aux compositions prévenant le développement de l'accoutumance pathologique à l'alcool. L'invention est applicable dans l'industrie alimentaire comme additif aux boissons alcoolisées ou sans alcool, comme moyen de prévention de l'alcoolisme, et pour améliorer la qualité biologique des produits alimentaires (confiseries, produits panifiés). On connait actuellement des agents pharmacologiques largement utilisés pour la thérapie des malades souffrant d'alcoolisme chronique, élevant la résistance générale de l'organisme (toniques, vitaminothérapie), et développant chez les malades des réflexes négatifs envers l'alcool. Par ailleurs, on utilise largement les agents qui réduisent la toxicité de l'alcool et de ses métabolites (thérapie de désintoxication), et les drogues qui coupent le syndrome d'abstinence. Cependant, l'ensemble des moyens susmentionnés de thérapie anti-alcoolique a pour objectif, avant tout, le traitement des formes cliniques manifestes de l'alcoolis- me ou revêt le caractère de thérapie anti-récidive. L'ensemble des agents pharmacologiques connus n'est pas prévu pourun large usage chez les consommateurs de produits alcooliques, ce qui exclut la possibilité d'utiliser ces agents pour la prévention primaire de l'abus d'alcool et de l'alcoolisme chronique. On connait des produits synthétiques qui neutralisent l'action pathologique de l'alcool sur l'organisme humain grâce à la réduction du taux d'éthanol dans le sang. A. titre d'ingrédient actif ces produits contiennent au moins une substance appartenant au groupe des hydrates de carbone et des alcools polyatomiques et/ou au moins une substance du groupe des composés comprenant un acide tricarboxylique cyclique et/ou des composés contenant le radical d'un tel acide, et/ou au moins un composé enrobant la muqueuse gastrique, et/ou au moins un composé cholérétique. Les divers produits jouent le rôle de protecteurs du foie et de désintoxicants à la suite de la consommation d'alcool, et, en outre, guérissent les phénomènes pathologiques provoqués par l'absorption de l'alcool (cf. le brevet d'invention français No.2340725). L'effet susmentionné est obtenu par la normalisation du rapport entre les formes oxydées des pyridine-nucléotides et les formes réduites de nucléotides, ce qui assure la réalisation du métabolisme des hydrates de carbone par le cycle des acides tricarboxyliques. Un autre composant actif desdites compositions est représenté par les substances qui réduisent l'absorption de l'éthanol par le tube digestif et la teneur en éthanol du sang. Il va de soi que dans ce cas l'effet de l'éthanol recherché par le consommateur (euphorie, relaxation) est nettement diminué. D'autre part, les compositions connues sont présentées sous la forme de produits médicamenteux dont l'emploi doit, soit précéder l'ingestion d'alcool, soit être simultanée avec l'ingestion d'alcool, soit la suivre. Néanmoins, les compositions sus- mentionnées ne sont pas des additifs alimentaires pouvant être, entre autres, ajoutés aux boissons alcoolisées, étant donné qu'elles modifient sensiblement les qualités organo- leptiques du produit. On s'est proposé de mettre au point une composition, comportant des composants dont l'ensemble assure une action efficace contre les effets négatifs de l'éthanol et des produits toxiques de son oxydation dans l'organisme grâce à la normalisation des principales voies métaboliques de dégradation de l'éthanol et de ses métabolites, sans pour autant détériorer les caractéristiques organoleptiques des boissons alcoolisées ou sans alcool dans lesquelles ladite composition peut être introduite. La composition selon l'invention, prévenant le développement de l'accoutumance pathologique à l'alcool comporte les ingrédients suivants, en mg/g: leuco-anthocyanes 219-270 catéchines 153-187 flavonols 81-99 lignine 68-83 sucres réducteurs 216-264 pectines 18-22 acides aminés libres 27-33 acides organiques 36-44 stérols 4,5-5,5 méthylstérols 1,35-1, 65 diméthylstérols 1,98-2,42 lignanes 13,5-16,5 glucosides de lignanes 911 acides phénols 13,5-16,5 aldéhydes - phénols 4,5-5,5 férulates d'alcoyles 4,5-5,5 La composition, suivant l'invention, est une association de produits largement répandus dans la nature. La composition, suivant l'invention, possède la propriété d'agir nettement sur les processus du métabolisme de l'éthanol, sans engager dans les voies défavorables à l'organisme l'utilisation de l'éthanol, ainsi que de ralentir le proces- sus de formation de la dépendance physique de l'alcool, de réduire le niveau de sa consommation et, par cela même, de réduire les excès alcooliques. Par ailleurs, la composi- tion, suivant l'invention n'est pas toxique, même après une utilisation prolongée pendant de nombreuses années, elle possède des caractéristiques organoleptiques agréables et peut être utilisées comme additif alimentaire dans les boissons alcoolisées et sans alcool. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention seront mieux compris à la lecture de la description détaillée de la composition, prévenant le développement de l'accoutu- mance à l'alcool, et des exemples de sa réalisation. La composition proposée comporte à titre de leuco- anthocyanes: la leucodelphinidine, la leucocyanidine et/ou la leucopélargonidine. Les catéchines sont représentées par l'épigallocatéchine (-), la gallocatéchine (+), l'épicatéchine (-), le catéchine (+) et/ou l'épicatéchine- gallate (-). En tant que flavonols la composition comporte: le 3monoglucoside de quercétine, le 3-monoglucoside de kampférol, le 3monoglucoside de miricétine, le 3-glucoside de quercétine et/ou l'astragaline. Les sucres réducteurs sont représentés par: le D-glucose, le D-fructose, le saccharose, le rafinose, l'arabinose et/ou le xylose. A titre d'acides aminés libres la composition de l'invention contient: la lysine, l'histidine, l'arginine, l'acide aspartique, la thréonine, la sérine, l'acide glutamique, la proline, la glycine, l'alanine, la cystine, la valine, la méthionine, l'isoleucine, la leucine, la tyrosine, et/ou la phénylalanine. Les acides organiques de la composition de l'invention sont représentés par les acides tartrique, malique, citrique, ascorbique, c -cétoglutarique, fumarique, galacturonique, glycérique, glycolique, glycouronique, oxalique, succinique et/ou shikimique. A titre de stérols la composition de l'invention comporte le S-cytostérol, le stigmastérol, le camspestérol. La composition de l'invention, contient comme méthylstérols: l'obtusifoliol et/ou le citrostadienol. Les diméthylstérols de la composition de l'invention sont: l'C-amirine, la- amirine, le lupéol, le taraxérol, le tarasastérol, le germanicol. A titre de lignanes la composition de l'invention contient: l'oxymatairésinol, le matairésinol, le pinorésinol, le liovyle, l'isolaricirésinol et/ou l'olivile. A titre de glucosides de lignanes elle contient: l'arabinoside de quérinol et/ou le xyloside de quérinol. Les acides phénols de la composition de l'invention sont les acides para-oxy- benzo;que, protocatéchique, gallique, vanillique et/ou syringique. Les phénols-aldéhydes sont représentés par la vanilline, l'aldéhyde syringique, l'aldéhyde sinaptique et l'aldéhyde de coniférol. A titre de férulates d'alkyle la compositon de l'invention, comporte les éthers alcoylés de l'acide féruli- que, dans lesquels la partie alcoolique est représentée par l'octadécanol, l'éicosanol, le docosanol, le tétracosanol et l'hexacosanol. La composition de l'invention contenant les composés énumérés ci-dessus peut être obtenue sous la forme de mélanges naturels de substances biologiquement actives d'origine végétale. La composition de l'invention est soluble et/ou dispersable dans l'eau, l'éthanol et les solutions hydro- alcooliques. La composition de l'invention présente une faible toxicité, sa DL50 étant égale à 36,5 ml par 1000 g de masse corporelle du rat. Les investigations pharmacologiques de l'action de la composition de l'invention sur les processus de consom- mation de l'éthanol et de la formation de la dépendance physique ont été effectuées sur des animaux et des hommes. Dans des conditions d'expérience chronique (durant semaines), sur des rats mâles matures de lignée Wistar, on a réalisé l'étude du niveau de la consommation de l'éthanol dans les conditions de libre choix entre l'eau et une dilution à 15% d'éthanol. Au préalable, les rats avaient été testés quant à leur résistance à l'éthanol suivant la méthode du "décubitus latéral" à la suite de l'injection intrapéritonéale d'une solution à 25% d'éthanol à raison de 4,5g par kg de poids corporel de l'animal. On utilisait dans l'expérience des rats présentant un même coefficient de haute tolérance à l'éthanol. Les animaux étaient par la suite placés dans des cages munies d'abreu- voirs gradués, et, dans des conditions de libre choix entre une dilution à 15% d'éthanol et l'eau, on enregistrait la consommation journalière de liquides. Le groupe témoin (12 rats) comportait les animaux consommant la solution à 15% d'éthanol. Le lot expérimental (12 rats) se caractérisait par le fait que, dans l'abreuvoir on ajoutait à la solution de 15% d'éthanol la composition de l'invention, à raison de 1 ml de ladite composition pour 50 ml de solution à 15% d'éthanol. A l'échéance de 13 semaines d'alcoolisation active, les animaux étaient privés de l'accès à l'alcool pendant une durée de 10 jours (période de privation), après quoi on enregistrait de nouveau la quantité de liquides consommés. Les résultats de cette expérience sont résumés dans le tableau 1. Dans le lot d'animaux témoins la période de privation se caractérisait par des phénomènes d'abstinence, se traduisant par une modification du comportement des animaux, l'apparition dans quelques cas de trémor, d'hérissement modéré des poils. Dans le lot expérimental les manifes- tations d'abstinence étaient absentes. Les caractères de consommation de l'éthanol à 15% dans les conditions de libre choix étaient différents dans le lot de témoins et dans le lot expérimental qui consommait la dilution d'éthanol à 15% mélangée de la composition de l'invention. A partir de la 8ème semaine on constatait une nette tendance à la réduction de la consommation de l'éthanol en association avec la composition de l'invention et, après la privation, cette différence était plus de 100%. Un critère important en faveur de la formation de la dépendance physique dans le lot témoin était l'accroissement de 12% de la consommation d'éthanol après 10 jours de privation. Dans le lot expérimental la consommation d'éthanol en association avec la composition de l'invention après la privation restait au même niveau. Tableau 1. Action de la composition de l'invention sur la quantité d'éthanol dilué à 15% consommée journellement (en mg par kg de masse corporelle d'un animal) dans les conditions de libre choix de la boisson. m,p Durée de la consommation (semaines) Indice statis- tique 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1. Quantité d'éthanol M + 28,9 20,1 22,5 26,6 28,3 25,6 27,9 à 15% consommée(lot m 1,86 1,18 2,29 2,05 1,86 1,97 2,32 témoin) 2, Quantité d'éthanol M + 33,8 32,2 37,0 34,0 25,9 26,6 29,8 à 15% + composition m 3, 88 4,09 2,93 3,11 2,53 2,26 1,3 de l'invention, consom- mée (lot expérimental) p 0,05 0,05 0,01 0,2 0,1 - - N CD \o Tableau 1. (suite) Action de la composition de l'invention sur la quantité d'éthanol dilué à 15% consommée journellement (en mg par kg de masse corporelle d'un animal) dans les conditions de libre choix de la boisson. m,p Durée de la consommation (semaines) Indice statis- que 8 9 10 11 12 13 15 11 12 13 14 15 17 1. Quantité 1%c M + 26,8 24,0 28,2 29,7 29,4 24,7 9 29,4 d'éthanol 15% con- - o. -C sommée (lot m 1,33 2,06 2,25 1,76 3,44 1,29 3,12 témoin) F F 2. Quantité M + 15,3 18,9 22,0 22,0 20,0 13,0 13,0 d'éthanol à 15% + comostiond 15%+ m 1,49 1,36 2,17 1,66 2,42 2,12 2,41 composition de m, l'invention, con- p 0,01 0,001 0,001 0,2 0,1 0,05 0,00 sommée (lot expé- rimental) no o Tableau 2. Action de la composition de l'invention sur la répartition des rats (%) par rapport à la consommation de l'éthanol à % (alcoolisation par contrainte) Group d.an u Délais de l'alcoolisationX Groupe d'animaux 3 mois 6 mois 8 mois - Petits buveurs (de 20 à 60 ml par 1000 g de masse corporelle) 26/45 73/76 67/79 - Moyens buveurs (de 60 à 80 ml par 1000 g de masse corporelle) 31/12 22/21 21/15 - Grands buveurs (plus de 80 ml par 1000 g de masse corporelle) 43/13 5/3 12/6 x Note: au numérateur - consommation d'éthanol - à 15%, au dénominateur - consommation d'éthanol à 15% associé à la composition de l'invention. L'introduction, dans l'éthanol à15 % de la composition de l'invention, dans les conditions d'alcoolisation par contrainte (absence d'eau dans la ration alimentaire) prolongée (38 mois) apporte une importante modification de la répartition des animaux par groupes de consommation de l'alcool (tableau 2). Les conditions de l'expérience susmentionnée prévoyaient le contrôle individuel de la consommation des liquides, testée dans les différents groupes d'animaux, et il fut établi que, parmi les rats consommant l'alcool avec la composition de l'invention, la quantité d'animaux grands buveurs était significativement plus grande. Pour exclure la possibilité de l'influence organo- leptique de la composition de l'invention sur le taux de consommation de l'alcool dans les conditions de libre choix de la boisson, des expériences parallèles furent réalisées, dans lesquelles la composition était introduite, non pas dans la boisson testée, mais par la voie intragastri- que. Indépendamment de la voie d'administration de la composition de l'invention, les résultats des investiga- tions furent identiques. Par chromatographie en phase gazo-liquide on déter- minait le taux d'éthanol dans le sang des animaux du lot témoin et dans celui du lot expérimental d'animaux, qui avaient consommé durant 3 mois les liquides testés. 90 minutes avant de sacrifier les animaux, on leur injectait par la voie intrapéritonéale de l'éthanol à 25% (lot témoin) et de l'éthanol à 25% en association avec la composition de l'invention dans le rapport de 50:1 (lot expérimental). Les résultats de l'expérience (tableau 3) témoignent d'une importante augmentation de l'alcoolémie (plus de 4 fois) chez les animaux qui avait reçu auparavant et de façon prolongée la composition de l'invention. il Tableau 3. Action de la composition de l'invention, sur l'élimination de l'éthanol 90 minutes après l'injection intrapéritonéale (i.p.) d'éthanol à 25% à raison de 4,5 g/kg de poids corporel de l'animal. Expérience Indice statistique Quantité d'éthanol dans le sang (%) 1 2 3 1. Entretien en animalerie (injection de l'éthanol à 25%) 7 M+m 0,72+0,14 2. Consommation durant 3 mois d'éthanol à 15% (injection d'éthanol à %) 14 M+m 1,0+0,14 p 0,2 i 2 3 3. Consommation durant 3 mois d'éthanol à 15% en association avec la com- position de l'invention (injection d'éthanol à %) 11 M+m 2,52+0,57 p 0,01 4. Consommation durant 3 mois d'éthanol à 15% en association à la com- position suivant l'inven- tion(injection d'éthanol à 25% + de la composition M+m 4,26+0,78 dans le rapport de 50:1) 0,001 La rapidité de l'élimination de l'alcool du sang dépend, en premier lieu, de l'activité de l'alcool déhydrogénase (ADH), qui fut étudiée sur un fond d'into- xication alcoolique aig e et chronique. A la suite d'une unique administration intrapéritonéale d'éthanol à 15% aux animaux à la dose de 4,5 g/kg, l'activité de l'ADH minutes après l'injection était égale à 8, 51 mM/min/1; par rapport au lot intact; l'addition de la composition de l'invention inhibait l'activité des enzymes en présence de l'éthanol, qui devenait égale à 5,86 mM/min/1. Dans les expériences chroniques, à la suite de l'administration de l'éthanol (alcoolisation passive) au cours de 1,5 mois par administration journalière d'éthanol à 15% et d'éthanol en association avec la composition de l'invention, à la dose- test de 1 g/kg nous avons obtenu des données, confirmant les résultats de l'expérience précédente (tableau 4). Tableau 4. Activité de l'alcool-déhydrogénase dans le sérum sanguin et le foie à la suite de l'ingestion d'éthanol à 15% en association avec la composition de l'invention durant 1,5 mois. Activité Activité d'ADH Ethanol dans d'ADH dans selon le pro- le sang le sérum cédé de sanguin Bonichen selon la méthode de sérum foie jM/ml Skureki mM/min/l mM/min/1 mM/min/1 1. Ethanol 15% 3,1+1,17 3,15+0,14 47, 02+1,91 16,21+1,14 2. Ethanol 15% + composition 2,63+0,49 2,86+0,05 37,4+ 1,61 21,87+2,5 3. Composition de l'invention (solution aqueuse à 1:50)2, 76+0,33 2,21+0,05 34,39+2,6 4,32+0,4 4. Soluté physio- logique 2,51+0,29 2,51+0,06 40,5+3,29 4,9+0,6 5. Animaux témoins sans aucun 2,6+0,33 2,46+0,09 40,51+1,3 4,14+0,3 traitement Dans les conditions de libre choix entre l'éthanol à 15% et l'eau (lot des témoins) et entre l'éthanol à 15% avec la composition de l'invention, et l'eau, à l'échéance de 1,5 et de 3 mois de consommation,on étudiait l'activité de l'alcool-déshydrogénase avant la privation et après la privation. Les résultats de cette étude figurent dans le tableau 5. Tableau 5. Activité de l'alcool-déhydrogénase dans les conditions de libre choix des boissons testées. Activité de l'ADH Consommation durant 1,5 mois Consommation durant 3 mois mM/min/l1 avant la privation après la privation avant la privation après la privation 1. Ethanol 15% 2,7+0,26 3, 61+0,48 2,64+0,27 4,3+0,63 2. Ethanol 15% + composition suivant l'invention 1,87+0,22 3,35+0,44 3,95+0,66 2,63+0,49 3. Témoins 4,33+1,08 4,79+0,64 2,2+0,28 3,08+0,58 \0 o- o Ainsi donc l'addition de la composition de l'invention ralentit la vitesse d'oxydation de l'éthanol dans le foie en inhibant l'activité de l'alcool-déhydrogénase. On réalisa des investigations concernant le métabolisme des lipides et des glucides chez les animaux à la suite de l'administration de la composition de l'invention sur un fond d'alcoolisation durant 3 et 6 mois. A cette fin les rats recevaient journellement, durant 3 et 6 mois, par la voie intragastrique, 2 mi des solutions sus- mentionnées par 100 g de masse corporelle des animaux. Les lots de témoins recevaient le ler lot - de l'eau distillée, le 2ème lot - de l'éthanol à 15%, le 3ème lot - de l'éthanol à 15% contenant 5% de la composition de l'invention, et le 4ème lot - de la solution aqueuse de la composition de l'invention. Les résultats obtenus sont représentés dans les tableaux 6, 7, 8 et 9. Par la suite furent entreprises des investigations pharmacologiques sur la composition de l'invention comme moyen de renforcement de la résistance générale de l'organis- me. A cette fin, on étudia l'action de la composition de l'invention sur la résistance des rats à l'égard du surchauffement. 1. Le surchauffement de rats femelles sans lignée précisée (60 animaux) était réalisé par irradiation par champ UHF au moyen de l'appareil de thérapie à microondes (2375 MHz - 17 mA) pendant 10 minutes une fois par jour durant 4 jours. La composition de l'invention était administrée à la dose de 2,5 ml/kg (dans toutes les séries d'expérience par la voie intragastrique) durant 5 jours avant le début de l'irradiation, et le jour de l'expérience, une heure avant l'irradiation par UHF. On enregistrait le nombre de rats tombés après 4 irradiations. Il fut établi, qu'au cours de la journée suivant la dernière irradiation, dans le lot témoin tombèrent 22% d'animaux, alors que dans le lot d'animaux ayant reçu la composition de l'invention,11% p 2. Le surchauffement des rats mâles de lignée Wistar était réalisé en thermostat à la température de +43 C. La composition suivant l'invention était administrée à raison de 2,5 ml/kg journellement et à titre préventif durant 20 jours. On tenait compte de la température rectale et de la létalité des animaux. Il fut établi que la mortalité dans le lot témoin des rats fut égale à 76% (28 animaux sur 37), et dans le lot expérimental, o les animaux avaient reçu la composition de l'invention, elle fut égale à 56% (22 animaux sur 39, p sur la température rectale des animaux. 3. Dans les mêmes conditionnements de surchauffement des rats mâles de lignée Wistar,on administrait la composition de l'invention, à titre préventif durant 48 jours à raison de 1 ml/kg. Tableau 6. Modification du taux de lipides neutres dans le foie des rats, ayant consommé les liquides testés durant 3 mois (en % par rapport aux lipides totaux, M+m). LOTS DES ANIMAUX I II III IV V témoins eau distillée solution aqueuse éthanol 15% éthanol à 15% de la composition + composition de l'invention de l'invention Esters de I I cholestérol 14,5+1,10 14,5+0,49 12,5+0,93) 12,5+0,48) 15,0+1,21 % du groupe témoin 100 86 86 103 Triglycérides 13,6+0,55 17,2+1,112) 20,1+0, 843) 20,6+1,773) 20,1+1,033) % du groupe témoin 127 148 151 148 Acides gras libres 12,8+1,60 12,8+0,48 12,3+0,50 11,5+0,53 10,6+0,92 I) % du groupe témoin 100 96 90 83 Cholestérol 16,6+0,9 17,2+0,63 16,1+0,91 14,2+ 0,67I) 15,3+1,22 % du groupe témoin 104 97 86 92 Fraction résiduelle 32,5+ 1,05 38,3+0,97 39,0+1,02 41,2+1,30 39,0+1,00 I) p 0,05; 2) p TABLEAU 7. Modification du taux de lipides neutres dans le foie des rats, ayant consommé les liquides testés durant 6 mois (en % par rapport aux lipides totaux M+m) LOTS DES ANIMAUX Lipides neutres I II III IV Témoins eau distillée éthanol à éthanol 15%+ compo- Solution aqueuse % sition de l'invention de la composi- tion de l'in- vention Esters de choles- térol 16,96+0,69 16,52+0,70 16,62+0,35 16,74+0,27 15,81+0,14 % du groupe témoin 99 100 100 95 Triglycérides 15,16+0,21 13,88+0,12 18,19+0,26I) 14, 18+0,22I) 13,64+0,42I) CD % du groupe témoin 92 120 94 90 Acides gras libres 16,67+0,48 17,21+0,11 14,0+0,39) 17,30+0,37 18,66+0,88 % du groupe témoin 103 84 104 112 Cholestérol 17,28+0,26 17,07+0,16 16,61+0,69 16,72+ 0,89 17,06+0,19 % du groupe témoin 99 96 97 99 Fraction résiduelle 33,93+ 0,40 35,38+0,74 34,58+0,47 35,06+0,52 34,83+0,61 I) p TABLEAU 8. Modification de l'activité des hydrolases lysosomales dans le foie des rats à la suite de la consommation d'éthanol et de composition suivant l'invention au cours de 3 et de 6 mois (nanomole/ml/min, M+m) 3 mois 6 mois LOTS DES ANIMAUX p.-glucosidase -galactosidase 6-glucosidase Pgalactosidase à..................................................... à __________________......________________...--- Témoins 0,47+0,04 0,33+0,01 0,49+0,05 0,35+0,01 1. Eau distillée 0,43+0, 01 0,35+0,01 0,54+0,08 0,43+0,02 % du groupe témoin 91 106 110 78 2. Ethanol 15% 0,58+0,08) 0,37+0,04 0,87+0,092) 0,86+0,063) % du groupe témoin 123 112 178 247 C 3. Ethanol 15% + Composition 0,50+0,05 0,35+0,06 0,66+0,081) 0,26+0,01 % du groupe témoin 106 106 135 75 4. Solution aqueuse de la 1 composition 0,40+0,02 0,31+0,03 0,38+0,05 0,25+0,011) % du groupe témoin 85 94 78 70 1) p ( 0,05; 2) p - TABLEAU 9 - Modification de la teneur du foie des rats en polymères biologiques contenant les glucides après la consommation de l'éthanol et de la composition de l'invention, durant 3 ou 6 mois (mg %, M+m) 3 mois 6 mois Lots des animaux Hexose Hexosamines Hexose Hexasamines 1. Témoins 26,68+1, 54 32,53+2,37 26,26+1,43 49,00+1,76 rM 2. Eau distillée 18,67+1,121) 29, 60+2,52 20,45+1,72 68,53+6,972) % du groupe témoin 70 91 78 140 3. Composition de l'invention 33,35+2,731) 36,02+1,47 28,91+1,34 102,43+7, 633) % du groupe témoin 125 Ili 110 209 4. Ethanol 15 % + composition 18, 43+271) 28,10+2,65 19,71+1,101) 84,72+4,213 de l'invention, 69 86 75 173 % du groupe témoin 5. Ethanol 15 % 16,67+221) 25,84+1,771) 16,32+1,002) 30,22+5,412) % du groupe témoin 62 79 62 62 1) p. 0,05 2) p 4 0,01 3) p suivants d'après la formation d'acide nicotinamide-di- nucléatide-phosphorique - ANDPxH). Il fut établi, qu'après un surchauffement des rats pendant 40 minutes, la composition de l'invention s'oppose à la réduction du taux de glycogène et de l'activité de la glucose-6-phosphate-déshydrogénase dans le foie (tableau 10). Après un surchauffement de deux heures ladite composition ne présente plus d'action sur le niveau des paramètres étudiés. Un refroidissement (hypothermie) des rats mâles de lignée Wistar fut provoqué par placement des animaux dans un réfrigérateur à la température de +5 c pendant une ou deux heures. La composition de l'invention était administrée, à raison de 1 ml/kg, 60 minutes avant le refroidissement. - TABLEAU 10 - Action de la composition de l'invention sur la modification du glycogène (mg %), de l'hexokinase (micromole NADPxH/min/g de tissu), la glucose-6phosphate-déhydrogénase (micromole NADPxH/min/g de tissu) à la suite de surchauffement (+45 C) Groupes Glycogène Hexokinase Glucose-6- d'animaux phosphate- ehydrogénase Surchauffement: 40 minutes 1. Témoin 3226+148 0,42+0,025 1, 80+0,61 2. Surchauffe- ment seul 2387+209 0,34+0,19 1,57+0,095 p 3. Surchauffe- ment + compo- sition 2968+121 0,40+0,18 1,71+0,077 p 0,030 p 0,030 p 2. Surchauffe- ment seul 2175+271 0,31+0,027 1,17+0,095 p 3. Surchauffe- ment + compo- sition 2869+219 0,29+0,020 1,04+0,081 p4 0,060 p - pour la comparaison des groupes 1 - 2 et 2 - 3. Il fut établi qu'au cours de la première heure de refroidissement des rats on constatait une réduction des réserves de glycogène dans le foie ainsi qu'une réduction de l'activité de l'hexokinase et de la glucose-6-phosphate- déshydrogénase hépatiques. L'administration préalable de la composition de l'invention prévenait la diminution de ces paramètres (tableau 11). Dans le cas de refroidissement durant deux heures, la composition del'invention n'avait pas d'effet de protection. - TABLEAU 11 - Action de la composition de l'invention, sur la modification du glycogène (mg %) et l'activité de l'hexokinase (micromole NADPxH/min/g de tissu) et de la glucose-6-phosphate-déshy- drogènase (micromole NADPxH/min/g de tissu) dans le foie des rats à la suite du refroidissement (+5 C). Groupes d'animaux Glycogène Hexokinase Glucose-6-phosphate déshydrogènase i heure de refroidissement 1. Témoins 4109+195 0,51+0,017 1,62+0,078 2. Ayant subi le refroidissement 2794+207 0,41+0,022 1,20+0,101 p 2. Ayant subi le refii- dissement 1754+237 0,47+0,028 1,27+0,103 pOO p 0,001l p 0,0000,037 3. Ayant subi le refroi- dissement avec consom- 1908+226 0,44+0,022 1,41+0,091 mation de la compcsition p - pour la composition des groupes 1-2 et 2-3 On réalisa l'étude de l'action de la composition, suivant l'invention, sur la résistance des animaux à l'égard de la fatigue musculaire: 1) les expériences portèrent sur des souris mâles sans lignée précise, d'une masse de 28 à 33 g. La composi- tion de l'invention était administrée par la voie entérale au moyen d'une sonde à trois lots d'animaux à trois doses différentes: 0,1; 0,15 et 0,22 ml par 20 g de poids corporel une heure avant le début du travail musculaire. Les animaux témoins recevaient un volume correspondant de sérum physiologique. Les études était réalisées sur l'appareil "corde sans fin". On enregistrait la durée de la course des souris sur la corde verticale se mouvant vers le bas, jusqu'à l'exténuation complète des animaux. Par constructions graphiques on retrouvait la dose de la composition de l'invention qui augmenterait la durée de la course des souris de 33 %. L'activité de la composition de l'invention était exprimée en unités conventionnelles de stimulation de l'action (UA33). Il fut établi que la capacité de travail muscu- laire des souris augmente proportionnellement à la dose qu'elles avaient reçue de l'invention. L'adminis- tration de la composition à la dose maximale (0,22 ml/kg) augmente la capacité de travail de 41 % par rapport aux témoins (tableau 12); - TABLEAU 12 - Action de stimulation de la composition de l'invention sur la durée de la capacité de travail musculaire des souris sur le dispositif de "corde sans fin". Durée de la course des souris Groupes d'animaux min % p (13) Sérum physiologique 27,0+2,1 100 Composition de l'invention: 0,1 ml/20 g (10) 30,0+1,8 111 0,5 0,15 ml/20 g (11) 32,0+2,8 118 0,5 0,22 ml/20 g (15) 38, 0+2,7 141 0,001 Note: entre parenthèses le nombre d'animaux de chaque lot. 2) On utilisa à titre de modèle d'action expéri- mentale la nage des rats (ici, comme dans d'autres cas, des rats mâles de lignée Wistar) pour une température de l'eau égale à +30 C. La composition de l'invention était administrée aux rats à la dose de 10 ml/kg une heure avant le début de la nage. On tenait compte de la durée de la nage jusqu'à un complet épuisement des animaux. Il fut établi que chez les témoins la durée de la nage était de 392,6+29, 0 min alors que chez les animaux ayant reçu la composition de l'invention, elle était de 519,4+40,0 min, c'est-à-dire après la nage était de 32 % plus longue (p=0,023). 3) On administra la composition de l'invention une heure avant le début de la nage à raison de 1 ml/kg, puis les animaux nageaient durant 15 minutes ou deux heures. On évaluait l'état des animaux selon la teneur en glycogène et l'activité de l'hexokinase et de la glucose-6-phosphate- déshydrogènase dans le foie. Il fut établi que la nage des rats pour ces deux durées entraîne une réduction de la teneur en glycogène du foie et une réduction de l'activité de l'hexokinase et de la glucose-6-phosphate-déhydrogènase. L'administration préalable de la composition de l'invention prévenait la diminution des paramètres étudiés pour une durée de nage de deux heures, mais n'apportait pas de modification de leur niveau par rapport aux témoins pour une nage de minutes (tableau 13). - TABLEAU 13 - Action de la composition de l'invention sur le taux de glycogène (mg 1100 9), l'activité de l'hexokinase (micromole NADPxH/min/g de tissu) et de la glucose-6-phosphate- déhydrogènase (micromole NADPxH/min/ç; de tissu) dans le foie des animaux au cours de la natation (température de l'eau 30-32 C . *Glucose-6- Groupes des animaux Glycogène Hexokinase phosphate- déhydrogènase Nage 15 minutes 1. Témoins 4216+216 0,50+0,019 1,44+0,068 2. Animaux ayant nagé 2993+278 0,31+0,029 1,01+0,094 p p - pour la comparaison des groupes 1-2 et 2-3. 4) On administrait la composition de l'invention une heure avant une séance de nage de 15 minutes. On déterminait le taux d'adénosinemonophosphate cyclique dans les surrénales, de la guanosine-monophosphate cyclique dans les surrénales et le foie en utilisant la méthode radioimmunologique (Ammerscham). Une partie des rats du lot témoin et du lot expérimental se reposait après la nage pendant une heure, puis on déterminait de nouveau les mêmes paramètres. La natation des rats provoquait la hausse du niveau de l'adénosine-monophosphate cyclique et de la guanosine- monophosphate cyclique dans les surrénales, ainsi que la réduction du taux de la guanosine-monophosphate cyclique dans le foie (stress aigu lors de l'approvisionnement énergétique par la glycolyse). Après une heure de repos le niveau de l'adénosine-monophosphate cyclique et de la guanosine-monophosphate cyclique se normalisait. La compo- sition de l'invention ne présentait pas d'influence sur le taux de l'adénosine-monophosphate cyclique et de la guanosine-monophosphate cyclique dans les surrénales, mais normalisait la biosynthèse de la guanosine-monophos- phate cyclique dans le foie une heure après la natation (tableau 14). - TABLEAU 14 - Action de la composition de l'invention sur la teneur en adénosinemonophosphate cyclique des surrénales et en guanisine-monophosphate cyclique des surrénales et du foie des rats après épreuve de surchage de l'effort musculaire et repos. Adénosine-MPC, Guanidine-MPC, Groupes d'animaux pmol pmol surrénales surrénales foie 1 2 3 4 1. Témoins 8,5+0,55(7) 0,09+0,01(7) 0,22+0,67(7) 2. Nage 15 minutes 17,9+ 1,8(7) 0,30+0,04(7) 0,14+0,035(7) p 4 0,05 p L 0,001 3. Nage 15 minutes + repos 1 heures 8,1+0,63(6) 0,18+0,02(7) 0,059+0,045(6) p t 0,05 p 4 0,001 p par jour. Au terme de l'hypokinésie on observait une réduction des réserves de glycogène hépatique, une diminution du taux de cholestérol dans les surrénales et de l'activité de l'alcool-déhydrogènase (évaluée selon la méthode de Schlesinger et al., 1966). Chez les animaux, ayant reçu la composition de l'invention la réduction des paramètres étudiés à la suite de l'hypokinésie fut moins prononcée (tableau 15). - TABLEAU 15 - Action de la composition de l'invention sur la teneur en cholestérol surrénalien (mg/g), en glycogène mg/100 g et sur l'activité de l'alcooldéhydrogènase (micromole NADPxH/min/g de tissu) dans le foie des rats en hypokinésie pendant 2 jours. alcool-dé hydro- Groupes des animaux Cholestérol Glycogène gènase gènase 1. Témoins 44+1,6 3975+222 5,04+0,234 2. Hypokinésie 96+2,4 2862+251 5,90+0,250 p agressions chimiques. 2) A titre de modèle de l'action lésionnelle a été utilisée la narcose à l'hexobarbital sodique. On adminis- trait la composition de l'invention aux doses de 2,5: ,0 et 10 ml/kg, puis, deux heures plus tard, on injectait dans le sac péritonéal l'hexobarbital sodique à raison de 19,8 mg par 100 g de poids corporel. On enregistrait la durée de décubitus latéral des animaux. Il fut établi que chez les animaux témoins la durée de la narcose était égale à 90,6+3,9 min, chez les animaux ayant reçu la composition de l'invention, à la dose de 2,5 ml/kg à 85,5+5,4 min, à la dose de 5,0 ml/kg- 75,7+3,1 min (83,6 %; p =0,009), à la dose de 10 ml/kg - à 72,9+3,7 min (80,5 %; p = 0,005), ce qui revient à dire que la composition de l'invention agit sur le réveil selon la dose reçue. 2) Dans les expériences portant sur les souris, la narcose était provoquée par le thiopental sodique à trois doses: 62,5; 75,0 et 100 mg/kg, en injection intrapéri- tonéale. La composition de l'invention était administrée à raison de 10 ml/kg deux heures avant l'injection du thiopental sodique. Etaient évaluées: la rapidité d'appa- rition du décubitus latéral, sa durée et la létalité des animaux. Il fut établi que, parmi les souris ayant reçu le thiopental à la dose de 62,5 mg/kg, après l'administration de la composition de l'invention, 22 % d'animaux avaient pris la position de décubitus latéral, alors que dans le lot témoin (thiopental) la proportion étant 100 % d'animaux (p 40,001). La durée du décubitus latéral chez les témoins fut égale à 53,5 min et chez les animaux du lot expérimental - 120 min (p 4 0,05). Dans le lot de souris ayant reçu le thiopental sodique à la dose de 75 mg/kg la mortalité s'éleva à 28 %, alors que dans le lot de rats ayant préalablement reçu la composition de l'invention elle n'était que de 12,5 % (p fut égale à 30,0 min et, avec administration de la composi- tion de l'invention, à 15,0 min (p Pour la plus forte dose de thiopental sodique (100 mg/kg), la durée du décubitus latéral était égale à 269 + 0,2 min,et avec administration préalable de la composition de l'invention, à 260 min (p deux lots la mortalité des animaux fut la même. On étudia également l'action de la composition de l'invention sur certains aspects du métabolisme des glucides. A cette fin les expériences suivantes furent réalisées. 1) Dans les expériences sur des animaux ordinaires sans préparation spéciale dans des conditions d'alimenta- tion ordinaires, on administrait la composition de l'inven- tion, deux fois par jour pendant 5 jours. Dans cette série d'expériences, ainsi que dans les séries suivantes, on - déterminait la concentration sanguine du glucose d'après la méthode anthronique, et le taux de glycogène hépatique selon la méthode de Zeifter. Il fut établi que l'administration pendant 5 jours de la composition de l'invention aux animaux ordinaires provoquait une certaine hausse du taux de glucose dans le sang et de glycogène dans le foie (tableau 16). 2) L'étude du métabolisme des glucides fut entreprise chez des rats à jeun depuis 18 ou 48 heures. La composition de l'invention était administrée à la dose de 1 ml/kg une heure avant le sacrifice des animaux. Etaient étudiés: le taux de sucre dans le sang, le taux d'insuline dans le sérum sanguin, ce dernier étant établi d'après la méthode radio- immunologique. Il fut établi que le jeûne de 18 heures entraîne chez les rats une réduction de la glycémie. La composition de l'invention empêchait la diminution du sucre sanguin (tableau 16). Le jeûne des animaux durant 48 heures produi- sait une réduction statistiquement significative du taux de sucre sanguin et du taux de glycogène hépatique. Ce phénomène s'accompagnait de la réduction de la concentra- tion d'insuline dans le sérum sanguin. A la suite de l'administration préalable aux animaux, durant 5 jours, de la composition de l'invention, on n'obser- vait qu'une tendance au maintien de la teneur initiale en sucre sanguin et en glycogène hépatique. La concentration sérique de l'insuline était dans ce cas significativement plus grande que chez les animaux du lot témoin (tableau 16). 3) On étudia l'action de la composition de l'inven- tion sur le métabolisme des glucides chez les rats recevant une alimentation surabondante. La composition de l'inven- tion, était administrée à la dose de 1 ml/kg une heure avant le sacrifice des animaux. Dans les conditions d'alimentation surabondante des rats le composé de l'invention n'avait pas d'action sur la teneur en sucre sanguin, tout en haussant signifi- cativement la teneur en glycogène hépatique et en abaissant la concentration de l'insuline dans le sang périphérique (tableau 16). Nous avons étudié les propriétés anti-oxydantes de la composition de l'invention. Dans ce but, afin d'obtenir une activation des lipides par les peroxydes, chez les rats de la lignée Wistar (40 animaux) on provo- quait un stress en les pendant par la peau du cou pendant 24 heures. Les animaux du lot expérimental recevaient une fois la composition de l'invention, à la dose de 1 ml/kg, avant la "pendaison". On jugeait de l'accumulation des lipides dans le foie d'après la teneur de cet organe en dialdéhyde malonique. Il fut établi que la composition de l'invention ne produit pas de modification de la teneur en dialdéhyde malonique du foie des rats ternaires. Chez les rats soumis au stress susmentionné la teneur en dialdéhyde malonique augmente de 6 fois, alors dans le cas de stress après administration de la composition de l'invention, l'accumu- lation du dialdéhyde malonique est beaucoup plus faible (norme - 86,5+29, 0, stress - 452+20, stress plus composition de l'invention - 296+15) (p = 0,001). Par conséquent, la composition, suivant l'invention possède des propriétés anti-oxydantes. Tableau 16. Action de la composition de l'invention sur quelques paramètres du métabolisme des glucides chez les rats. Groupes d'animaux Sucre sanguin Glycogène Insuline dans le sang mg % hépatique micro Un/ml Alimentation habituelle des rats Référence 91+2,7 (9) 4966+406(9) Administration de la composi- tion de l'inven- tion 100,5+1,78*(13) 6071+250*(10) - après un jeûne de 18 heures Alimentation ordinaire(10) 106,8+3,7 - jeûne (8) 83,8+2,0* - Jeune + Administration de la composi- tion i ml/kg 30 min avant le sacrifice(10) 106,0+4,2* après un jeûne de 48 heures Alimentation ordinaire (10) 116,5+5,0 5059+452 17,56+1,12 jeûne (10) 86,0+5,0* 495+257* 9,56+0,69* Jeûne + adminis- tration de la com- position 91,0+5,0 593+151 14,5+1,0* suralimentation des rats Sans adminis- tration de la composition(10) 119,0+4,3 4966+406 22,8+2,3 Avec administra- tion de la composition (10) 122,3+2,7 6071+250* 17,3+1,19* * p 0,05 La composition est administrée par la voie intragastrique à raison de 1 ml/kg deux fois par jour durant 5 jours. Entre parenthèses figurent le nombre d'animaux intéressés dans chaque groupe. Nous avons également étudié les paramètres biolo- giques du sang des hommes, ayant reçu la composition de l'invention, sur un fond d'alcoolisation. Dans les conditions cliniques, nous avons examiné l'action de la composition de l'invention sur la vitesse d'élimination de l'éthanol du sang et sur l'activité de l'alcool-déhydrogènase sanguine, ainsi que les indices de l'activité des hydrolases lysosomales, le taux des hexosoamines protéinoconnectées et de la fraction des lipides neutres. Le premier groupe d'individus, participant à l'étude, était formé de malades hospitalisés souffrant d'alcoolisme chronique; le second groupe était constitué par des personnes de race mongoloîde, génétiquement into- lérantes à l'alcool, et le troisième groupe était repré- senté par des europoides pratiquement sains et n'abusant pas de l'alcool. Dans les conditions d'étude en double aveugle les individus, participant à l'étude, buvaient de l'alcool à % avec la composition de 'invention au (1:50) ou de la solution aqueuse de cette composition l'invention. Le volume de liquide consommé était égal à 200 ml pour 70 kg de poids corporel. Les intervalles entre les ingestions étaient de 4 jours. Avant l'ingestion du liquide, puis à l'échéance de 1,2 et 4 heures après l'ingestion on prélevait du sang veineux pour les investigations biochimiques. Les résultats des investigations figurent dans les tableaux 17, 18, 19, 20, 21 et 22. Tableau 17. Activité de la b -galactosidase dans le sérum sanguin des volontaires (nanomole ml/min, M+m) GROUPES Ethanol 40% départ après 1h après 2h après 4h 1 2 3 4 5 -- -- - -- - -- - -- - -- --________- - -- -- - -- - -- - ------------37- - - - - - - -- - - - - - - - 1. Europoides sains 5,95+0,62 6,66+0,21 19,94 '+1,22 35,57 +1,63 % de taux de départ 112 335 598 2. Mongoloides 5,77+0,94 5,92+0,68 12,153)+0, 87 12,613)+0,98 % de taux de départ 103 211 219 3. Malades souffrant 3) 1) d'alcoolisme 8,79+0,67 21,92 +0,94 7,98+0,20 10,46 +0,91 % de taux de départ 249 91 122 1) p ( 0,05 2) p 4 0,01 3) p __________________________________________________________________________ ____________________________________ Composition aqueuse de la composition __________________________________________________________________________ _________ départ après lh après 2h après 4h __________________________________________________________________________ ____________________________________ 6 7 8 9 1)1 1. Europoides sains 5,72+0,19 5,09+0,27 4,06 1)+0,44 6,85 1+0,48 % de taux de départ 89 71 120 2. Mongoloides 6,89+0,47 6,30+0,33 6,87+0,57 7, 50+0,44 % de taux de départ 91 99 109 3. Malades souffrant 3) d'alcoolisme 11,72+0,72 11,95+0,83 13,94+0,85 24,26 +1,58 % de taux de départ 102 119 207 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ o' no TABLEAU 17. (suite) Activité de la (-galactosidase dans le sérum sanguin des volontaires (nanomole ml/min, M+m) Ethanol 40% + composition __________________________________________________________________________ _______ départ après lh après 2h après 4h __________________________________________________________________________ ______________________________________ 11 12 13 1. Europoides sains 5,90+0,42 5,78+0,54 6,55+0,42 18,03)+1,6 % de taux de départ 98 111 305 2. Mongoloides 6,33+0,44 9,39+0,71 9,23+0,84 16,4+1,5 c. w % de taux de départ 148 146 259 3. Malades souffrant 2 2) 2) d'alcoolisme 10,45+0,39 15,15 2+0,72 14,002) +0,86 12,82) +0,9 % de taux de départ 145 134 122 __________________________________________________________________________ _____________________________________ os -J oM Tableau 18 Modification de la teneur en hexose-amines du sérum sanguin humain (mg dans 100 ml, M+m) Groupes volontaires I. Europoides sains Départ Après 1 h Après 2 h Après 4 h __________________________________________________________________________ _____________ 1 2 3 4 5 6 1. Ethanol 40% 72,57+3,55 66,93+4,10 66,00+2,51 61,20+2,62 % de taux de départ 92 91 85 2. Ethanol à 40% + composition 53,33+2,39 50,40+3,85 42, 532)+1,79 50,53+3,27 % du taux de départ 95 80 95 3. Composition 72,16+4, 01 94,133)+3,92 93,44 3)+0,04 87,52 2)+1,90 % du taux de départ 131 130 122 __________________________________________________________________________ _____________ 1) pe 0,05 2) p 0,01 3) p J "o (suite tableau 18) Modification de la teneur en hexose-amines du serum sanguin humain (mg dans 100 ml, M+m) Groupes volontaires II. Mongoloides sains Départ Après 1 h Après 2 Après 4 h 7 8 9 10 1. Ethanol 40 % 48,93+3,31 46,40+1,72 48,64+2,93 53,20+3,75 % du taux de départ 95 99 109 2. Ethanol à 40 % + Composition 84,60+3,70 63,203)+1,21 100,642)+3j,70 93,33+4,22 % du taux de départ 75 119 110 3. Composition 36,68+3,71 45,211)+3,00 53,201)+1,52 53,203)+2,74 % du taux de départ 127 149 149 1) pu 0,05 2) p 11 12 13 14 E 4 % 1 61)-) 1. Ethanol 40 % 68,30+2,76 56,06 +2,81 54,64 +3,43 57,371)+3,32 N % du taux de départ 82 80 84 2. Ethanol à 40 % + Composition 75,94+4,41 73,71+ 3,10 66,97+5,37 70,42+4,16 % du taux de départ 97 88 93 3. Composition 60, 11+4,81 62,27+3,15 69,94 1)+3,00 60,23+3,30 % du taux de départ 103 116 100 1) p Tableau 19 Modification de la teneur en différentes fractions de lipides du sérum des individus ayant pris de l'éthanol à 40 % (en % par rapport aux lipides totaux, M+m) Fraction Groupe I - Europoides sains Départ Après 1 h Après 2 h Après 4 h 1 2 3 4 5 6 __________________________________________________________________________ _______________ 1. Esters de cholesterol 21,72+1,81 27,031) +1,32 23,06+1,15 23,95+0,90 % du taux de départ 125 106 110 2. Triglycérides 17,40+0,72 16,53+0,97 19, 11+0,75 19,08+0,78 % du taux de départ 95 110 110 3. Acides gras libres 17,06+0,65 16,88+0,50 15,87+0,42 17,24+0,95 % du taux de départ 99 93 101 4. Cholestérol 19,64+0,86 18,25+0,87 19,04+0,24 19,08+0,48 % du taux de départ 93 97 97 5. Fraction résiduelle totale 24,18+0,52 24,29+1,85 22,92+ 0,73 20,65+0,70 1) p __________________________________________________________________________ _______________- 7 8 9 10 1. Esters de choles- terol 26,66+1,19 27,89+1,33 21,22+0,54 29,62+1,44 % du taux de départ 105 80 11 2. Triglycérides 17,45+0,76 16,63+0,86 16,48+0,71 19,02+0,22 % du taux de départ 95 94 110 3. Acides gras libres 15,10+0,47 16,57+1,08 18, 452)+0,57 13,87+1,15 % du taux de départ 110 122 92 4. Cholesterol 18,54+ 0,50 17,79+0,26 20,04+0,66 17,03+0,71 % du taux de départ 96 108 92 5. Fraction résiduelle totale 22,25+0,31 21,12+0,64 23,75+0,97 20,46+0,93 1) p 0,05; 2) p 11 12 13 14 1. Esters de choles- terol 25,90+2,14 26,47+2,16 22,66+1,05 25,37+2,48 % du taux de départ 102 88 98 2. Triglycérides 15,28+1,05 15,40+0,76 16,37+0,69 15,99+1,24 % du taux de départ 101 107 105 3. Acides gras libres 15,29+1,35 18,641)+1,47 19,292)+0,47 16,69+1,99 % du taux de départ 122 126 109 4. Cholesterol 17, 94+0,99 18,71+1,74 21,65+1,96 19,82+0,71 % du taux de départ 104 121 111 5. Fraction résiduelle totale 25,60+1,68 20,78+0,81 20,03+1,16 22,13+1,29 1) p 0,05; 2) p 0,01 o LQ Tableau 20 Modification du taux des différentes fractions des lipides dans le sérum sanguin des individus après ingestion de solution aqueuse de la composition de l'invention (en % par rapport aux lipides totaux, M+m) Fraction Groupe I - Europoîdes sains Départ Après 1 h Après 2 h Après 4 h 1 2 3 4 5 6 1. Esters de cholestérol 23,07+1,47 22,74+2,10 23,44 0,54 23,10+089 % du taux de départ 99 102 101 2. Triglycérides 17,24+0,82 16,75+0,67 20,49+1, 29 17,63+0,75 % du taux de départ 97 119 102 3. Acides gras libres 16,14+ 1,20 17,17+0,39 16,85t0,42 17,90+0,63 % du taux de départ 110 104 111 4. Cholestérol 17,43+1,57 18,69+1,93 19,97+0,54 17,89+0,93 % du taux de départ 107 115 103 5. Fraction résiduelle totale 26,12+2,30 24,05+1,70 19, 25+0,74 23,48+0,71 __________________________________________________________________________ ________________ Lq no (suite tableau 20) Modification du taux des différentes fractions des lipides dans le sérum sanguin des individus après ingestion de solution aqueuse de la composition de l'invention (en % par rapport aux lipides totaux, M+m) Fraction Groupe II - Mongoloides sains ____________________________________________________________ Départ Après lh Après 2h Après 4h 7 8 9 10 1. Esters de cholestérol 23,12+1,32 21,34+1,38 23,59+0,54 23,17+0,46 % du taux de départ 92 102 100 2. Triglycérides 16,79+2,02 18,99+0,47 17,73+0, 33 18,08+0,56 % du taux de départ 113 106 108 3. Acides gras libres 17,77+ 1,03 18,05+0,48 16,41+0,67 17,38+0,56 % du taux de départ 102 92 98 4. Cholestérol 18,09+0,60 20,33+0,37 20,51+0,55 20,88+0,44 % du taux de départ 112 113 115 5. Fraction résiduelle totale 24,23+1,60 21,29+0,92 21, 76+0,46 20,49+0,52 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ - - - - - - - - - - - - - - - - (suite Tableau 20) Modification du taux des différentes fractions des lipides dans le sérum sanguin des individus après ingestion de solution aqueuse de la composition de l'invention (en % par rapport aux lipides totaux, M+n) Fraction Groupe III - Malades souffrant d'alcoolisme Départ Après lh Après 2h Après 4h 11 12 13 14 1. Esters de cholestérol 22,49+0,44 24,87+0,54 24,43+0,86 24,05+0,62 OD % du taux de départ 111 109 107 2. Triglycérides 19,36+1,0 17,16+0,48 17,29+ 0,39 17,58 0,84 % du taux de départ 89 89 91 3. Acides gras libres 17, 77 0,65 17,77+0,55 17,76 0,36 15,05+0,99 % du taux de départ 100 100 85 4. Cholestérol 19,37+0,35 19,39+0,43 18,46+0,79 17,34 0,49 % du taux de départ 100 95 90 5. Fraction résiduelle totale 21,01 0,61 20,81 0,82 23, 06 l,10 25,96+1,13 Q ______________------------------------------------------------------------------------- os Tableau 21 Modification du taux des fractions de lipides dans le sérum sanguin des individus après ingestion d'éthanol à 40% (en % par rapport aux lipides totaux, M+m) avec administration de la composition de l'invention. Fraction Groupe I - Europoides sains Départ Après lh Après 2h Après 4h 1 2 3 4 5 6 1. Esters de cholestérol 24,35 2,04 23,91+0,67 22,04+0,41 21,43+0,68 % du taux de départ 98 91 88 2. Triglycérides 16,41+0,71 18,14+0,30 18,48+1,24 19,511) +0,69 % du taux de départ 111 113 119 3. Acides gras libres 15,96+ 0,76 16,19+0,57 16,30+0,26 15,90+0,24 % du taux de départ 101 102 106 4. Cholestérol 19,21+0,86 18,87+0,38 18,06+0,84 20,06+1,58 % du taux de départ 98 94 104 5. Fraction résiduelle totale 24,07+1,93 22,89+0,55 24, 52+1,61 22,94+1,17 ud o - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - IJ (suite Tableau 21) Modification du taux des fractions de lipides dans le sérum sanguin des individus après ingestion d'éthanol à 40% (en % par rapport aux lipides totaux, M+m) avec administration de la composition de l'invention. Fraction Groupe II - Mongoloides sains Départ Après lh Après 2h Après 4h 7 8 9 10 1. Esters de cholestérol 22,30+1,01 24,32+0,55 23,15+1,45 22,89+0,70 % du taux de départ 109 104 103 C 2. Triglycérides 19,95+1,71 18,15+0,55 18,87+ 2,11 19,47-0,28 % du taux de départ 91 95 98 3. Acides gras libres 16,12+ 0,46 16,17+1,10 15,83+0,58 19,95 084 % du taux de départ 100 98 105 4. Cholestérol 17,84+0,28 18,02+0,93 17,66+0,89 19,22+0,45 % du taux de départ 101 99 108 5. Fraction résiduelle totale 23,79+2,03 23,34+0,60 24, 46+1,45 21,47+1,33 _-- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -_-- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -_-- - _-- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - (suite Tableau 21) Modification du taux des fractions de lipides dans le sérum sanguin des individus après ingestion d'éthanol à 40% (en % par rapport aux lipides totaux, M+m) avec administration de la composition de l'invention. Fraction Groupe III - Malades souffrant d'alcoolisme Départ Après lh Après 2h Après 4h 11 12 13 14 1. Esters de cholestérol 24,60+0,59 24,05+0,62 24,26+0,34 22,94+0,90 % du taux de départ 100 101 95 2. Triglycérides 17,05+0,52 16,50+0,56 17,43+0, 49 18,77+0,66 % du taux de départ 97 102 110 3. Acides gras libres 15,95+ 0,53 16,63+0,41 17,00+0,50 17,01+0,52 % du taux de départ 104 107 107 4. Cholestérol 18,37+0,73 17,85+0,44 19,07+0,42 19,89+0,49 % du taux de départ 97 104 108 5. Fraction résiduelle totale 24,03+0,79 24,97+1,08 22, 24+1,20 21,39+0,51 os. o -4 No Tableau 22. Système alcool-déhydrogénase/éthanol chez les individus, ayant absorbé la solution d'éthanol avec administration de la composition de l'invention. __________________________________________________________________________ ______________________________________ Ethanol à 40% __________________________________________________________________________ ______________________________________ départ après lh après 2h après 4h 1 2 3 4 5 6 1. alcool- déhydrogénase 0,46+0,16 1,24+0,56 1,83+0,58 2,39+0,66 2. éthanol 0 0,27+0, 01 0,198+0,023 0,113+0,014 3. alcool I déhydrogénase 2,81+0,97 3,15+0,67 3,17+0,87 3,15+0,89 Crm oC c 'H 4 E éthanol 0,012+0,007 0,174+0,033 0, 188+0,024 0,64+0,028 5. u alcool- -o H déhydrogénase 2,90+0,58 1,73+0,29 3,04+0,42 0,52+0,28 6. O éthanol 0, 023+0,002 0,263+0,028 0,124+0,013 0,035+0,000035 M rM _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ ____ _' __ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ . TABLEAU 22 (suite) Système alcool-déhydrogénase éthanol chez les individus, ayant absorbé la solution d'éthanol avec administration de la composition de l'invention. Ethanol 40% + composition départ après lh après 2h après 4h __________________________________________________________________________ ______________________________________ 7 8 9 10 __________________________________________________________________________ ______________________________________ 1. O alcool-déhydrogénase 2,28+0,68 3,56+0,66 1,85+0,39 0,70+0,25 2. éthanol 0,138+0,032 0,182+0,054 0,203+0,022 E 3. ô Dalcool-déhydrogénase 1,74+0,32 1,69+0,31 2,34+0,87 1,57+0,31 3a O....- 4. C, éthanol 0 0,206+0,023 0,105+0,029 0,103+0,033 Ex 5.. alcooldéhydrogénase 2,56+0,23 1,78+0,68 2,35+0,57 0,69+0,34 H- H - 6. O i éthanol 0,049+0,0004 0,174+0,025 0,174+0,016 0,86+0,01 DO--- -- - DE C o km W TABLEAU 22 (suite) Système alcool-déhydrogénase éthanol chez les individus, ayant absorbé la solution d'éthanol avec administration de la composition de l'invention. __________________________________________________________________________ _____________________________________ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __Compositionseule -_ _ _ _ _ _ _ _ départ après 1h après 2h après 4h ___......._b.. . ..._b...... ______________________________________________ il 12 13 14 1.. alcooldéhydrogénase 1,06+0,46 0,79+0,27 1,79+0,35 1,67+0,47 2., éthanol 0,04+0, 012 0,14+0,014 0,076+0,024 0,082+0,018 "i E 3., alcool-déhydrogénase 2,48+ 0,64 1,59+0,58 1,69+0,47 2,37+0,76 on, 4. éthanol 0 0 0 0 E 1 Vn 5., alcool-déhydrogénase 1,00+0,37 1,64+0,40 1,37+0,47 1,27+0,36 6. 0 éthanol 0,006+0,000008 0,042+0,032 0,076+0,035 0,015+0,00004 ro os C.> 0o %O Par ailleurs, nous avons réalisé au cours d'une pé- riode de 10 mois les essais cliniques de la composition de l'invention, chez 8 mille hommes. A cette fin, nous avons utilisé des boissons alcoolisées, contenant la composition de l'invention. Durant toute la période de l'essai, les volontaires n'utilisèrent pas d'autres boissons alcoolisées. La réduction totale de consommation d'alcool au cours des 10 mois d'essai fut égale à 28,01%. Durant les 10 mois d'essai clinique le nombre de psychoses alcooliques dans le groupe susmentionné d'individus se réduisit à 4 cas contre 12,5 cas en moyenne pour 6 périodes analogues précédentes. L'évolution des intoxications alcooliques se modi- fia: forme plus légère du syndrome d'abstinence, réduction du besoin de prendre de l'alcool pour pallier à l'abstinence, apparition de plaintes somatique prévenant la dipsomanie chez les personnes abusant de l'alcool. Parmi les individus, soumis à l'essai, nous n'avons noté aucun cas de phénomènes démographiques ou sociaux excessifs. Ainsi donc, au terme des expériences et des recher- ches réalisées nous pouvons conclure que l'effet,sommaire, de la composition de l'invention contre les conséquences néga- tives de la consommation d'alcool est constitué par l'action des ingrédients de ladite composition sur les principales manifestations biologiques de l'éthanol: - l'action membranotrope de l'éthanol se réduit grâce à la normalisation de la stabilité de la membrane aux dépens de la régulation de la synthèse du cholestérol, son estérification et son inclusion dans la structure de la mem- brane. Par ailleurs, se produisent une normalisation de l'activité des enzymes membranodépendantes et des autres paramètres de la perméabilité dans le système vitamine P-acti- vité; * - l'oxydation de l'éthanol se réalise essentielle- ment dans le foie, ce processus s'accompagnant de l'épui- sement de la forme oxydée de la nicotinamide-dinucléotide - NAD+. Les autres processus d'oxydation, s'effectuant avec la participation de NAD sont inhibés. Les ingrédients de la composition, de l'invention, jouent le rôle d'accepteurs de l'ion Hydrogène et contribuent à la réduction du coeffi- cient NADH/NAD; - au cours de l'oxydation de l'éthanol dans l'or- ganisme se forme le métabolite le plus toxique - l'acé- taldéhyde, dont la présence dans les tissus assure par la suite la constitution des caractéristiques toxicologique et narcotique de l'éthanol. La vitesse d'oxydation de l'éthanol et de l'acétaldéhyde dépend en premier lieu de l'activité de l'alcool-déhydrogènase et de l'acétaldéhyde- déhydrogènase. Les ingrédients de la composition de l'in- vention possèdent la capacité de réduire l'activité de l'alcooldéhydrogènase, en ralentissant ainsi l'oxydation de l'éthanol, et, par ailleurs, d'entrer en compétition avec l'éthanol en tant que substrat pour l'alcooldéhydro- génase. Dans ce cas s'effectue grâce à la présence de l'alcooldéhydrogénase, l'oxydation en premier lieu, non pas de l'éthanol, mais du substrat concurrent de la composition de l'invention; - l'effet calorigène de l'éthanol, grâce auquel il entre avec succès en compétition avec les autres sources d'énergie en les surpassant par son critère d'accessibili- té, entraîne le rétrécissement du principal faisceau méta- bolique de transformation de différentes substances alimen- taires aux dépens de l'isolement compétitif des déhydrogé- nases spécifiques et leurs groupes prosthétiques. La com- position, suivant l'invention, contribue à la conservation, et même, à la suite d'une consommation prolongée d'alcool, à la restitution des autres voies d'énergie, en particulier, par le biais de la gluconéogénèse. Les études de la composition de l'invention, réa- lisées dans les expériences chez les animaux et au cours des essais thérapeutiques portant sur des volontaires, ont établi que ladite composition possède la propriété d'assurer des voies rationnelles de haute résistance et de restitu- tion de l'organisme. Dans tous les cas d'application de sur- charges extrêmes sur les animaux (d'ordre physique, chimique et biologique) on a constaté un net effet de protection. Par ailleurs, la composition de l'invention présente également des propriétés biologiques spécifiques, d'inhibi- tion de la constitution de la dépendance physique du sujet à l'alcool et de réduction des effets négatifs de métabo- lites toxiques de l'alcool ethylique. Le large éventail d'action biologique de la compo- sition de l'invention s'explique par le fait qu'elle contient un lot de substances, assurant des variantes optimales du métabolisme, visant à conserver les réserves énergétiques de l'organisme par synthèse des glucides à partir de méta- bolites non glucidiques par la voie de la glucogénèse. Exemple 1 Composition comportant, en mg/g: leucodelphinidine 120; leucocyanidine 80; leucopélargo- nidine 45; (-) épigallocatéchine - 42; (+) gallocatéchine - 31; (-) épicatéchine - 29; (+) catéchine 60; (-) épicatéchinegallate 18; kampférol-3-monoglucoside 17; 3-monoglucoside de quercétine 22; 3-monoglucoside de mi- ricétine - 14; 3-glucoside de quercétine-24; astragaline 13; lignine 75; D-glucose - 83,6; D-fructose - 64; saccharose -33,5; rafinose 24; arabinose - 25; xylose - 31,6; pectine -20; lysine 3,4, histidine -0,2; arginine - 0,4; acide aspargique - 4,3; thréonine - 1,1; sérine -2,0; acide glumatique - 3,0; proline - 3,3; glycine - 2,2; alanine - 3,8; cystine - -0,3; valine - 1,8; méthionine - 0,4; isoleucine - 0,8; leucine - 2,8; tyrosine - 0,5; phénylalanine - 0,3; acide tartique -4,2; acide malique - 3,8; acide citrique - 4,0; acide ascor- bique - 4,0; acide - cétoglutarique - 1,9; acide fuma- rique - 2,1; acide galacturonique- -2,2; acide glycérique - 1,8; acide glycolique - 1,7; acide glyco-uronique -3,0; acide oxalique - 2,3; acide succinique - 5,0; acide shiki- mique - 3,0; C -amirine- - 0,4;. -amarine - 0,4; lupéol - 0,3; taraxastérol - - 0,4; taraxérol - 0,4; germa- nicol - 0,3; obtusifoliol 0,8; citrostadienol - 0,7; -citrostérole - 3,2; stigmastérol - 1,0; campéstérol - 0,8; oxymatairésinol - - 2,9; matairésinol - 2,3; pinorésinol - 2,5; liovyle - 2,7; isolaricirésinol - 2,7; olivile - 1,9; arabinoside de quérinol - 6,2; xyloside de quérinol - 3,8; acide-paraoxybenzoique - 1,2; acide protocatéchique - 3,5; acide gallique -1,9; acide vanil- lique - 4,3; acide syringique - 4,1; vanilline - 1,5; aldéhyde syringique - 1,3; aldéhyde sinapique - 0,9; aldéhyde de coniférol - 1,3; octadécanolférulate - 1,5; eicosanol-férulate - 1,4; docosanol-férulate - 1,1; tétra- cosanol-férulate - 0,5; hexacosanol-férulate - 0,5. On dissout cette composition à raison de 5 g dans ml d'une solution aqueuse à 40 % d'éthanol. La solution hydro-alcoolique obtenue a une couleur rouge-brune, une faible odeur caractéristique et un goût doux-amer. La solution présente une faible toxicité, sa DL50 représente 36,5 ml/1000 9 de poids corporel du rat. Cette solution a le pouvoir d'assurer les voies rationnelles de résistance et de restitution de l'organisme, elle inhibe la constitution de la dépendance physique du sujet à l'al- cool et réduit les effets négatifs de métabolites toxiques de l'éthanol. Exemple 2 La composition comporte les mêmes ingrédients que ceux énumérés dans l'exemple 1 mais dans les quantités suivantes, en mg/g: leuco-anthocyanes - - 197,1; catéchines - 137,7; flavanols - 72,9; lignine - - 61,2; sucres réducteurs - 410,76; pectine - 16,2; acides aminés libres 24,3; acides organiques - 32,4; stérinols - 4,05; méthylstérols - 1,21; diméthylstérols - 1,78; lignanes - 12,1; glucosides de lignanes - - 8,1; acides-phénols - 12,1; aldéhydes-phénols - 4,05; férulates d'alcoyles- 4,05. Dissoudre la composition à raison de 5 g dans 100 ml d'une solution aqueuse d'alcool à 4C %. La solution obtenue a une couleur rouge-brune, une faible odeur caractéristique et un faible goût sucré. La solution présente une faible toxicité, sa DL50 représente 41,2 ml/1000 g de poids cor- porel du rat. Cette solution a le pouvoir d'assurer les voies ra- tionnelles de résistance et de restitution de l'organisme, elle inhibe faiblement la constitution de la dépendance physique du sujet à l'alcool et réduit dans une certaine mesure les effets négatifs des métabolites toxiques de l'éthanol. L'activité biologique de cette composition, est médiocre, et dans certains tests biologiques cette activité ne peut pas être enregistrée. Exemple 3 La composition comporte les mêmes ingrédients que ceux mentionnés dans l'exemple 1, mais dans les quantités suivantes, en mg/g: leucoanthocyanes - - 219; catéchines - 153; flavanols - 81; lignine - 68; sucres rédacteurs - 345, 17; pectine - 18; acides aminés libres - 27; acides organiques - 36; stérinols - 4,5; méthylstérinols - 1,35; diméthylstérinols - 1,98; lignanes- 13,5; glu- cosides de lignanes - 9; acides-phénols - - 13,5; al- déhydes-phénols - 4,5; férulates d'alcoyles - 4,5. Dissoudre la composition à raison de 5 g dans ml d'une solution aqueuse à 40 % d'alcool. La solution a-une couleur rouge-brunâtre, une faible odeur caractéris- tique et une goût doux amer. La solution présente une faible toxicité, sa DL50 représente 36,5 ml/1000 g de poids pondérai pour le rat. La solution a le pouvoir d'assurer les voies ra- tionnelles de résistance et de restitution de l'organisme inhibe la constitution de la dépendance physique du sujet à l'alcool et réduit dans une certaine mesure les effets négatifs des métabolites toxiques de l'alcool. Exemple 4 La composition comporte les mêmes ingrédients que ceux mentionnés dans l'exemple 1, mais pris dans les quan- tités suivantes, en mg/g: leuco-anthocyanes - - 270; catéchines - 187; flavanols - 99; lignine - 83; sucres réducteurs 197,5; pectine - 22; acides aminés libres - 33; acides organiques - 44; stérols - 5,5; méthylstérols - 1,65; diméthylstérols - 2,42; ligna- nes - 16,5; glucosides de lignanes - 11; acides-phénols - 16,5; aldéhydesphénols - 5,5; férulates d'alcoyles - 5,5. Dissoudre la composition à raison de 5 g dans 100 ml d'une solution aqueuse à 40 % d'alcool. La solution obtenue a une couleur rouge-brOnatre, une faible odeur caractéris- tique et un goût doux amer. La solution possède une faible toxicité, sa DL50 représentant 36,5 ml/1000 g de poids pondéral pour le rat. La solution a le pouvoir d'assurer la voies ration- nelles de résistance et de restitution de l'organisme, inhibe la constitution de la dépendance physique du sujet à l'alcool et réduit des effets négatifs de ses métabolites toxiques. Exemple 5 La composition comporte les mêmes ingrédients que ceux mentionnés dans l'exemple 1, mais dans les quantités suivantes, en mg/g: leucoanthocyanes - - 297; catéchines - 205; flavonols - 109; lignine - 91; sucres réducteurs - 120,6; pectine - 24; acides aminés libres - 36; acides organiques - 48; stérols - 6; méthylstérols - 1,8; diméthylstérols - 2,6; lignanes - - 18; glucosides de lignanes - 12; acides-phénols - 18; aldéhydes-phénols -6; férulates d'alcoyles-6. Dissoudre la composition à raison de 5 g dans 100 ml d'une solution aqueuse à 40 % d'alcool. La solution obtenue a une couleur rouge-brunâtre, une nette odeur caractéris- tique et un goût amer. La solution possède une faible toxi- cité, sa DL50 représentant pour le rat 33,3 m/lO/1000 g de poids pondéral. La solution a le pouvoir d'assurer les voies ration- nelles de résistance et de restitution de l'organisme,.elle inhibe la constitution de la dépendance physique du sujet de l'alcool et réduit les effets négatifs de ses mètabo- liques toxiques. R EV E N D I C A T I 0 N Composition, prévenant le développement à l'accou- tumance pathologique à l'alcool, caractérisé en ce qu'elle contient les ingrédients suivants: en mg/g: leuco-anthocyanes - 219-270 catéchines 153-187 flavanols - 89-99 lignine - 68-83 sucres réducteurs - 216-264 pectine - 18-22 acides aminés libres - 27-33 acides organiques - 36-44 stérols - 4 5-5,5 méthylstéiols - 1,35-1,65 diméthylstérols - 1,98-2,42 lignanes - 13,5-16,5 glucosides de liganes - 9,11 acides-phénols - 13,516,5 aldéhydes-phénols - 4,5-5,5 férulates d'alcoyles - 4,5-5,5.