FR 2610934 A1 19880819 FR 8701810 A 19870213 1 2610934 La présente invention concerne de nouveaux tetrapeptldes, leur préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent On connaît de nombreux tétrapeptides naturels ou synthétiques et notamment la tuftsmne (Thr - Lys - Pro - Arg) modificateurs de la réponse biologique Certains analogues de la tuftsine, particulièrement des composés dans lesquels la threonine est remplacée par un radical carboxy - 4 oxazolidinone - 2 ont été décrits par Y. STABINSKY et coil. in Int. J. Peptide, Protéin Research 1978; 12; 130-138 Toutefois, ces derives ne retiennent seulement que la moitié environ de l'activite de la tu sine et n'ont qu'une faible activité sur la réponse anticorps, La demande de brevet européen n 0 190 058 décrit des analogues de la tuftsine dans lesquels la proline est remplacée par une structure polycyclique azotée. Ces dérivés, possèdent, en général, une activité superieure à celle de la tuftsine_ La demanderesse a maintenant découvert des analogues de la tuftsine dans lesquels la proline est remplacée par une structure polycyclique azotée de même type que celle des dérivés de la demande de brevet européen 0 190 058 et le reste thréonyle est cyclisé De façon surprenante, ces dérivés possèdent une activité supérieure à celle de la tuftsine, au moins équivalente a celle des dérives de la demande 0 190 058 mais en outre, ils présentent l'avantage supplémentaire de favonriser très nettement la réponse anticorps. Cette caractéristique permet de supposer que les composés de la présente invention agissent par un mécanisme d'action différent de celui des composes de l'art antérieur, proprieté particulièrement intéressante dans le domaine thérapeutique ou ces dérivés sont utilisables. Plus spécifiquement, I'invention concerne des dérivés tétrapeptidiques de formule générale R' R (CH2)t - CO - Lys - N - CH - CO - Arg - OH Y x tJ A Il O dans laquelle R représente: - un atome d'hydrogène, - un radical alcoyle comportant de 1 a 4 atomes de carbone, en chaîne droite ou ramifiée,. 2 2610934 - un radical aryle tel que phenyle ou heteroaryle tel que thienyle éventuellement substitué par un groupement hydroxy, amino, mercapto, methylthio, ou alcoyle inférieur, - un radical aralcoyle inférieur tel que benzyle; R' représente un atome d'hydrogene ou un groupement alcoyle comportant de 1 a 4 atomes de carbone en chaine droite ou ramifiée, X représente un atome d'oxygène ou un groupement NH, Y représente un atome d'oxygène ou de soufre lorsque X représente un groupement NH ou Y représente un groupement NH lorsque X représente un atome d'oxygène, t représente 0 ou 1, Lys et Arg représentent respectivement les restes lysyle et arginyle engages dans des liaisons peptidiques, N-- CH représente LA J * une structure bicyclique de formule: /..CH- (CH2)m (CH2)n Ra - C - (CH2)p - C- Rb ou - m est égal à 1 ou zéro, n et p représentent zéro, 1 ou 2, - Ra et Rb représentent un atome d'hydrogène ou peuvent former ensemble une liaison directe quand p = 0, - B représente une chaîne aikylene (CH2)q ou q est égal à 2, 3 ou 4 3 2610934 ou une structure insaturee (-CH = CH -)2 quand p = 0 et Ra et R forment ensemble une liaison, avec la réserve que la somme de m, n, p et q est un nombre entier compris entre 3 et 6, ou * la tetrahydro - 1, 2, 3, 4 betacarboline, leurs enantiomeres, épirmeres et diastereoisomeres, ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable. Actuellement, parmi les composes de formule 1, on préfère ceux dans lesquels la structure cyclique N - CH représente: IA I'indoline, I'isoindoline, la tétrahydroquinoleéine, la tétrahydroisoquinoleine, le perhydroindole, le perhydroisoindole, la perhydroîsoquinoléine, la perhydroquinoleine, le perhydrocyclopenta [b] pyrrole, I'aza - 2 - bicyclo [2.2.2] octane, I'aza - 2 bîcyclo [2.2.1] heptane, la tétrahydro - 1, 2, 3, 4 bétacarboline. Parmi les acides que l'on peut ajouter aux composes de formule I pour former un sel d'addition, on peut citer, a titre d'exemple, les acides chlorhydrique, sulfurique, phosphorique, tartrique, malique, maléique, fumarique, oxalique, méthane-sulfonique, ethanesulfonique, camphorique, citrique, etc... Comme bases pouvant salifier les composés de formule I on pourra utiliser des hydroxydes de sodium, potassium, calcium ou d'aluminium, des carbonates de métaux alcalins ou alcalnoterreux ou des bases organiques comme la triéthylamine, la benzylamine, la diéthanolamine, la tert butylamine, la dicyclohexylamine, Il'arginine, etc.. L'invention s'étend aussi au procéde d'obtention des composés de formule 1, caractérense en ce que l'on condense un dérivé de formule Il: tBoc- N CH - COOH Il tA obtenu comme décrit dans la demande de brevet europeen n 0 190 058, dans lequel tBoc représente le radical tertiobutoxycarbonyle et A avec les atomes de carDone et d'azote auxquels il est attache, a les mêmes significations que dans la formule 1, 4 2 6 1 0934 avec le N, - nitroarginate de méthyle (H - Arg (NO2) OCH3) ou de benzyle (H - Arg (NO2) OCH2 C6H5) pour obtenir un dérivé de formule III: tBoc - N - CH - CO - Arg(NO2) OD III A dans lequel A, avec les atomes de carbone et d'azote auxquels il est attaché, a les mêmes significations que dans la formule 1, et dans lequel D représente un radical méthyle ou benzyle que l'on déprotège ensuite par l'acide trifluoroacétique selon la méthode décrite par B. GUTTE et K.B. MERRIFIELD (J. Am. Chem. Soc i969, 91,501), en un dérivé de formule IV: HN -CH- CO -Arg(NO2)OD IV kA) dans lequel A, avec les atomes de carbone et d'azote auxquels il est attaché, a les mêmes significations que dans la formule 1, et dans lequel D a la même signification que dans la formule III, qui est ensuite condensé avec la N - tertiobutoxycarbonyl Nw benzyloxycarbonyl lysine ou (tBoc) Lys (Z) pour obtenir un composé de formule V: (tBoc) Lys (Z) - N - CH - CO - Arg (NO2) OD V dans lequel A, avec les atomes de carbone et d'azote auxquels il est attaché, a les mêmes significations que dans la formule I et D la même signification que dans la formule III, qui est soumis à l'action de l'acide trifluoroacétique et converti en un dérivé de formule Vl: Lys (Z) - N - C- C CO - Arg (NO2) OD VI A dans lequel A, avec les atomes de carbone et d'azote auxquels il est attaché, a les mêmes significations que dans la formule I et D la même signification dans la formule III que l'on condense avec un dérivé de formule VII: Z 2610934 R R R -.(CH2)t - COOH vil X Il O dans lequel R, R', X, Y et t ont la même signification que dans la formule I pour conduire à un deérive de formule VIII Y x Il o dans lequel A, avec les atomes de carbone et d'azote auxquels il est attache, R, R', x, Y et t ont la même signification que dans la formule I et D la même signification que dans la formule IliI qui peut être soit: - quand D représente CH3, déprotegé par saponification puis soumis a hydrogenation catalytique; - quand D represente le groupement benzyle soumis a hydrogenation catalytique pour conduire a un dérive de formule I que l'on peut si l'on désire: - soit salifier par un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable. - soit séparer en ses isomères, puis, si necessaire, salifier par un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable. Les dérives de formule VIII sont nouveaux et font partie de l'invention au même titre que les dérives de formule 1, dont ils constituent les intermédiaires de synthese. Les composes de formule I sont doués de proprietes pharmacologiques minteressantes En particulier, on retrouve, chez ces dérivées, a un niveau supérieur ou, au moins comparable, es principales propriétés des composes de la demande de brevet européen 0190 058 6 2610934 Notamment, ces dérives augmentent l'activité des cellules N K "Tueuses spontanees" Administrés à la souris porteuse d'un mélanome, ils inhibent de façon importante la croissance de ce mélanome. Ils assurent une promotion des défenses immunitaires chez des animaux infectés par des souches bactériennes pathogènes et, de façon inattendue par rapport a l'état de l'art, augmentent de façon importante la réponse anticorps aux antigènes de mouton chez la souris. Ces activités sont liées aux proprietes immunomodulatrices des composés de l'invention qui trouvent leur application, en thérapeutique animale ou humaine, dans le traitement des cancers, des affections d'origine virale, bactérienne ou fongique, des maladies auto-immunes comme le lupus érythémateux ou l'arthrite rhumatoide et plus généralement dans les maladies résultant d'une diminution ou d'une perturbation des réponses immunitaires naturelles de l'organisme animal ou humain. En outre, I'activité que possèdent les dérives de la présente invention sur la réponse anticorps aux globules rouges de mouton chez la souris permet de penser que ces dérivés, tout en étant utiles dans les mêmes indications thérapeutiques que les composes de la demande 0 190 058, agissent par un mode d'action à la fois différent et complémentaire de celui des dérivés de l'art antérieur, ce qui les rend particulièrement intéressants dans leur domaine d'utilisation thérapeutique. L'invention a également pour objet les compositions pharmaceutiques contenant au moins un composé de formule générale 1, ou un de ses sels d'addition a un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable, seul ou en combinaison avec un ou plusieurs excipients ou véhicules inertes non toxiques, pharmaceutiquement acceptables. Parmi les compositions pharmaceutiques selon l'invention, on pourra citer plus particulièrement celles qui conviennent pour l'administration parentérale, per ou transcutanee, nasale, rectale, perlinguale, oculaire ou respiratoire, et notamment les préparations injectables, les aérosols, les gouttes oculaires ou nasales, les comprimés, les comprimés sublinguaux, les glossettes, les tablettes, les suppositoires, les crèmes, pommades, gels dermiques, etc... La posologie utile varie selon l'Age et le poids du patient, la voie d'administration, la nature de l'indication thérapeutique et des traitements éventuellement associés et s'échelonne entre 1 microgramme et 1 gramme par prise ou par application. Les exemples suivants illustrent l'invention, et ne la limitent en aucune façon. Les produits de départ sont connus de la littérature. Les points de fusion indiqués sont mesurés selon la technique microKofler. Les spectres de résonance magnétique nucléaire du '3C ont été enregistrés en utilisant le TMS comme référence 7 2610934 interne, ceux de 'H RMN ont généralement été enregistres en utilisant le CD Cl3 comme solvant Les spectres de masse sont réalisés selon la technique F.A.B. EXEMPLE 1: Cyclo (S) Thr- (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH Cyclo (S) Thr - OH = (Trans L) carboxy - 4 méthyl - 5 oxo - 2 oxazolidine 1,3 ou (S) Cyclo threonine décrit par Y. STABINSKI et al. Int. J. Peptide Prot. Res. 1978, 12, 130138. STADE A: tBoc (S) ABO - OH ou acide (tert. butoxycarbonyl - 2 aza - 2 bicyclo [2.2. 2] octane) carboxylique - 3 - (35) Préparé en utilisant la méthode décrite dans la demande de brevet européen n 0 190 058 (exemple n 8 - stade A). STADE B: tBoc (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl En utilisant la méthode de W. KONIG et R. GEIGER (Ber. 1970, 103, 788), coupler 0,05 mole de tBoc (S) ABO - OH obtenu au stade précédent avec 0,05 mole de (S) N, nitro arginate de benzyle ou (S) H - Arg (NO2) - OBzl en utilisant le diméthylformamide comme solvant, On obtient le tBoc (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl avec un rendement de 98 % sous forme d'une huile utilisée telle quelle dans le stade suivant. Caractéristiques spectrales en l.R (solution CH Cl3) v (NH (amide)) = 3400 cm' v (CO) = 1700 cm-'(large) STADE C: (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl En utilisant la méthode de déprotection par l'acide trifluoracetique dans le chlorure de methylene anhydre décrite par B. GUTTE et R.B MERRIFIELD (J. Am. Chem. Soc., 1969, 91, 501), on obtient 8 2610934 quantitativement, à partir de 0,0475 mole de tBoc (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl prepare au stade précédent, le (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl sous forme de trifluoroacetate (TFA), dont la purete est vérifiéeparchromatographiesurcouchemince(solvant: CH2CI2-MeOH: 9 - 1; RF = 0,19) STADE D: tBoc (S) lys (Z) - (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl En remplaçant dans le stade B précedent le tBoc (S) ABO - OH par la Na - tert-butoxycarbonyl N, benzyloxycarbonyl (S) lysine (ou tBoc (S) Lys (Z) - OH; 0,0475 mole) et le (S) H - Arg (NO2) - OBzl par le (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl, TFA (0, 0475 mole) préparé au stade précédent, on obtient de la même façon le tBoc(S) Lys (Z) - (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl, avec un rendement de 68 % Principales caractéristiques '"C RMN (DMSOd6 / TMS) 6 enppm C0 Lysine = 50,2 C ABO = 59,6 Ca Arg = 51,8 STADEE: (S) Lys (Z) - (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl En déprotégeant le tBoc (S) Lys (Z) - (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl par l'acide trifluoracétique, comme indiqué dans le stade C précédent, on obtient quantitativement le (S) Lys (Z) - (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl sous forme de trifluoracétate, dont la pureté est vérifiée par chromatographie sur couche mince (solvant: CH2 C12 / MeOH: 95 /5) STADE F: Cyclo (S) Thr - (S) Lys (Z) - (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl En couplant, selon la technique indiquée au stade B précédent, le (S) Lys (Z) - (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl, avec la (S) cyclo Threonine (ou Cyclo (S) Thr - OH), on obtient de la même façon le Cyclo (S) Thr - (S) Lys (Z) - (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl, qui est purifié par chromatographie sur silice (60 - 230 mesh) en utilisant comme éluant le mélange CH2 C12 - MeOH (96/4). Principales caractéristiques '1C RMN (DMSOd6 / TMS) 8 en ppm 9 2 6 1 09 3 4 CO Cyclo Thr = 60,0 C" Lys = 49,0 C, ABO = 59,7 CArg = 51,5 STADE G: Cyclo (S) Thr - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH Soumettre 0,0012 mole de Cyclo (S) Thr - (S) Lys (Z) - (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl obtenu au stade précédent, à une hydrogénation catalytique dans 80 ml d'acide acétique, sous une pression d'hydrogène de 3 bars en présence de 400 mg de charbon palladié à 10 %. Apres évaporation du i0 solvant sous pression réduite, le résidu amorphe est repris par 5 ml d'eau distillée, séparé par microfiltration et lyophilisé. On obtient le monoacetate de Cyclo (S) Thr - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg OH (rendement 90 %) Caractéristiques spectrales en Infra-rouge: v (CO): 1750 cm-1 Spectrométrie de masse: Spectre FAB + Kv (7 Kv) ion moléculaire protoné [M + H] à M/z = 567 (C2s H42 N8 07; PM = 566) EXEMPLE 2: Cyclo (S) Thr - (S) Lys - (S) THIQ - (S) Arg - OH STADE A: tBoc (S) THIQ - OH ou acide (tert - butoxycarbonyl - 2 tétrahydro - 1,2,3, 4 isoquinoléine) - carboxylique - 3 - (3S): Préparé selon la méthode décrite dans Il'exemple 1, stade A de la demande de brevet europeen 0 190 058 en remplaçant l'acide perhydroindole carboxylique - 2 (2S, 3aS, 7aS) par l'acide tétrahydro - 1.2.3_4 isoquinoleine carboxylique - 3 - (3S) ou (S) THIQ - OH. 2610934 STADE B: tBoc (S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OCH3 En utilisant le (S) N, Nitro arginate de méthyle ou (S) H - Arg (NO2) - OCH3 et le tBoc (S) THIQ - OH obtenu au stade précedent on obtient selon la méthode de l'exemple 1, stade B le tBoc (S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OCH3 sous forme d'une huile dont la pureté est vérifiée par chromatographie sur couche mince (solvant acétate d'éthyle; Rf = 0,2) Caractéristiques spectrales en IR: v(CO) = 1740cm-1 STADE C: (S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OCH3 En remplaçant dans le stade C de l'exemple 1 le tBoc (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl par le tBoc (S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OCH3 obtenu au stade précédent, on obtient de la même façon le (S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OCH3 sous forme de trifluoracétate Caractéristiques spectrales en RMN (1 H) 1,7 ppm: 4H (CH2) 3,2 ppm: 4H (CH2N,CH2- 0) 3,6 ppm: 3H (COOCH3) 4,3 ppm: 4H (N-CH-CO, N-CH2-0) 7,3 ppm: 4H (phenyl) 7,4 à 10,0 ppm: Protons échangeables. STADE D: tBoc (S) Lys (Z) - (S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OCH3 En remplaçant dans le stade D de l'exemple 1 le (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl, TFA par le (S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OCH3, TFA obtenu au stade précédent on obtient le tBoc (S) Lys (Z) - (S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OCH3 purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant: acétate d'ethyle, Rf: 0,16). Rendement: 66 % 2 6 1 0 9 34 STADEE: (S) Lys (Z) - (S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OCH3 Selon la méthode utilisée dans l'exemple 1, stade C on obtient à partir du tBoc (S) Lys (Z) - (S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OCH3. le (S) Lys (Z) - (S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OCH3 sous forme de trifluoracetate. Chromatographie sur couche mince (solvant: CH2CI2 -MeOH: 90- 10; Rf: 0,13) STADE F: Cyclo (S) Thr - (S) Lys (Z) - (S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OCH3 En remplaçant dans le stade F de l'exemple 1 le (S) Lys (Z) - (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl, TFA par le (S) Lys (Z) - (S) THIQ - (S) Arg (NO2) OCH3, TFA on obtient le Cyclo (S) Thr - (S) Lys (Z) - (S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OCH3 sous forme d'une huile épaisse utilisée telle quelle au stade suivant. STADE G: Cyclo (S) Thr - (S) Lys (Z) - (S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OH Dissoudre 0, 001 mole de Cyclo (S) Thr - (S) Lys (Z) --(S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OCH3 obtenu au stade précédent dans 20 cm3 de méthanol, ajouter 10 cm3 de soude 0,1 N et maintenir 24 heures à température ambiante Concentrer sous pression réduite, reprendre par 30 cm3 d'eau et neutraliser par addition de 10 cm3 d'acide chlorhydrique 0,1 N. Filtrer le précipité, laver à l'eau puis au chlorure de méthylène et sécher. Rendement: 78 % Caractéristiques spectrales: Spectrométrie de masse: FAB + m/z FAB- m/z [M + K] + = 806 [M-2H + Na] = 788 [M - H + 2Na] = 812 [M-H] I = 766 [M + Na] = 790 [M-H-H20] = 748 [M + H] + = 768 [M-H-CO2] = 722 IM-H-H2NNO2] = 704 12 2610934 STADE H: Cyclo (S) Thr - (S) Lys - (S) THIQ - (S) Arg - OH Dissoudre 0,0005 mole de Cyclo (S) Thr- (S) Lys (Z) - (S) THIQ - (S) Arg (NO2) - OH obtenu au stade precedent dans 50 cm3 d'acide acétique. Soumettre a une hydrogénation catalytique sous une pression d'hydrogene de 3 kg/cm2 en présence de 200 mg de charbon palladié à %. Après évaporation du solvant sous pression réduite, le résidu est repris par 5 cm3 d'eau distillee, séparé par microfiltration et lyophilisé. On obtient le mono acétate de Cyclo (S) Thr - (S) Lys - (S) THIQ - (S) Arg - OH. Rendement: 98 % Caractéristiques spectrales: Spectrométrie de masse: FAB + m/z FAB- m/z [M1 + H] + = 589 [M1-H] = 587 [Ml + Na] = 611 [M -H-C 2] = 543 EXEMPLE 3: Cyclo (S) Thr- (S) Lys - PHII - (S) Arg - OH En remplaçant dans l'exemple 2, stade A, I'acide tétrahydro - 1.2.3.4 isoquinoléine carboxylique - 3 - (3S) ou (S) THIQ - OH par l'acide perhydroisoindole carboxylique - 1 ou PHII - OH, on obtient successivement: tBoc PHII - OH tBoc PHII - (S) Arg (NO2) - OCH3 PHII - (S) Arg (NO2) - OCH3, TFA tBoc (S) Lys (Z) - PHII (S) Arg (NO2) - OCH3 (S) Lys (Z) - PHII - (S) Arg (NO2) - OCH3, TFA Cyclo (S) Thr - (S) Lys (Z) - PHII - (S) Arg (NO2) - OCH3 Cyclo (S) Thr - (S) Lys (Z) - PHII (S) Arg (NO2) - OH Cyclo (S) Thr - (S) Lys - PHII - (S) Arg - OH lyophilisé sous forme de mono acétate 1 3 2610934 Caractéristiques spectrales Spectrometrie de masse: FAB m/z FAB m/z [M1 + H] = 581 [M. - H] = 579 [c m1i?H] = 124 (MI - i Co2 = 535 EXEMPLE 4: Cyclo (2S, 3R) AHPA - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH Le cyclo (25, 3R) AHPA - OH ou acide oxo - 2 benzyl - 4 oxazolidine - 1,3 carboxylique - 5 (4R, 5S) décrit par H.UMEZAWA; M. OHNO, - brevet européen n 0 156 279 a ete préparé selon la méthode de Y. STABINSKY et al. (Int. J_ Peptide Prot. Res,.1978, 12, 130-138) a partir du Z (25, 3R) AHPA - OH ou ac4de hydroxy - 2 benzyloxycarbonylamino - 3 phényl - 4 butanoique ( 2S, 3R) decrit par T TAKITA et al. J. Med. Chem., 1977, 20,510-515. En remplaçant dans l'exemple 1, stade F le Cyclo (S) Thr - OH par le cyclo (2S, 3R) AHPA - OH on obtient successivement: - Cyclo (2S, 3R) AHPA - (S) Lys (Z) - (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl - Cyclo (2S, 3R) AHPA - (S) Lys (S) ABO - (S) Arg - OH lyophilisé sous forme de mono acétate. Caracteristiques spectrales: en IR: vs (C = O (oxazolidinone)): 1760 cm-' en spectrométriede masse: spectre FAB ' ion moléculaire protone [M À H]' à M/Z: 643 EXEMPLE 5 [(4R) Méthyl - 4 oxo - 2 oxazolidine - 1,3 carbonyl - 51 - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH 14 2610934 En remplaçant 'dans l'exemple 4 le Z(2S, 3R) AHPA - OH par l'acide hydroxy - 2 benzyloxycarbonylamino - 3 butanoique - (3R) décrit par T. TAKITA et al (J Med Chem., 1977, 20, 510-515), on obtient successivement: - Acide oxo - 2 méthyl - 4 oxazolidine - 1,3 carboxylique - 5 - (4R) décrit par Y. SHIMOHIGASHI et al., Bull. Chem. Soc. Jpn., 1979, 52 (3), 949-950. - [(4R) Méthyl - 4 oxo - 2 oxazolidine - 1,3 carbonyl - 5] - (S) Lys (Z) - (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl - [(4R) Méthyl - 4 oxo - 2 oxazolidine - 1,3 carbonyl - 5] - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH lyophilisé sous forme de mono acetate Caractéristiques spectrales en IR: vs (CO (oxazolidinone)): 1750cm-1 en spectrometrie de masse m/z: spectre FAB - [M + H]+ = 567 [M + Na]* = 589 [M-H + 2Na]+ = 611 EXEMPLE 6 Cyclo GABOB - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH STADE A: N-Z GABOB - OH ou acide hydroxy - 3 benzyloxycarbonylamino - 4 butanoique: Préparé selon la méthode de BERGMANN et ZERVAS (Ber, 1932 65,, 1192) à partir de l'acide hydroxy - 3 amino -.4 butanoiïque (GABOB - OH). STADE B: Cyclo GABOB - OH ou carboxyméthyl - 5 oxo - 2 oxazolidine - 1,3. En utilisant la méthode décrite par Y. STABINSKY et al ( Int. J. Peptide Prot. Res., 1978, 12, 130-138), on obtient le cyclo GABOB - OH a partir du NZ GABOB - OH préparé au stade précédent. STADEC: Cyclo GABOB - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH En remplaçant dans l'exemple 1, stade F la Cyclo (S) Thr par le cyclo GABOB - OH on obtient 2 6 2610934 successivement: - cyclo GABOB - (S) Lys (Z) - (S) ABO - (S) Arg (NO2) OBzl - cyclo GABOB -(S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH lyophilisé sous forme de mono acétate. EXEMPLE 7: Cyclo Stat - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH En remplaçant dans I'exemple 6, stade A l'acide hydroxy- 3 amino - 4 butanoique ou GABOB OH par l'acide hydroxy - 3 amino - 4 méthyl - 6 heptanoique ou statine (Stat - OH), on obtient successivement: - Stade A: N - Z - Stat - OH ou acide hydroxy - 3 benzyloxycarbonylamino 4 méthyl - 6 heptanoique. - Stade B: Cyclo Stat - OH ou oxo - 2 isobutyl - 4 carboxyméthyl - 5 oxazolidine - 1,3. - Stade C: Cyclo Stat - (5) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH. lyophilisé sous forme de mono acétate. EXEMPLE 8: TZC - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH En remplaçant dans l'exemple 1, stade F la (S) cyclo threonine par l'acide (thiazolidinone - 2) carboxylique - 4 (TZC - OH), on obtient successivement: - TZC - (S) Lys (Z) - (S) ABO - (S) Arg (NO2) - OBzl - TZC- (S) Lys- (S) ABO - (S) Arg OH lyophilisé sous forme de mono acétate EXEMPLE 9: Cyclo (S) Thr - (S) Lys - (S) PHI - (S) Arg - OH En remplaçant dans l'exemple 1, stade B, le tBoc (S) ABO - OH par l'acide (tert butoxycarbonyl - 1 perhydroindole) carboxylique- 2 (2S, 3a S, 7a S) ou tBoc (S) PHI OH préparé comme indiqué dans la 16 2610934 demande de brevet europeen n 0 190 058 (exemple 1 -stade A) et en procedant ensuite comme indiqué dans l'exemple 1 de la présente invention, du stade B au stade G, on obtient le derive: Cyclo (S) Thr - (S) Lys - (S) PHI - (S) Arg - OH lyophilise sous forme de mono acetate EXEMPLE 10: DMT - (S) Lys- (S) ABO - (S) Arg - OH En remplaçant dans l'exemple 1, stade F la cyclothreonine par la dimethyl - 5,5 carboxy - 4 thiazolidinone - 2 ou DMT - OH préparée selon F.P DOYLE, D.O HOLLAND, P. MAMALIS et A. NORMAN (J.C.S 1958, 4605-4614), on obtient successivement: DMT - (S) Lys (Z) - (S) ABO - ( lyophilisé sous forme de mono acétate. EXEMPLES 11 à 13 En opérant comme indiqué dans l'exemple 1, stade B, mais en remplaçant l'acide (tert butoxycarbonyl - 2 aza - 2 bicyclo [2.2.2] octane) carboxylique - 3 (35) ou tBoc (S) ABO - OH par l'acide (tert butoxycarbonyl - 2 isoindoline) carboxylique - 1 - (15) ou tBoc (S) I.S.I. - OH ou par l'acide (tert butoxycarbonyl - 2 aza - 2 bicyclo[2.2.1] heptane) carboxylique - 3 ou tBoc ABH - OH ou par l'acide (tert butoxycarbonyl - 2 tétrahydro 1, 2, 3, 4 bétacarboliné) carboxylique - 3 (35) ou tBoc (S) THC - OH, on obtient les composes suivants: Exemple 11: Cyclo (S) Thr - (S) Lys - (S) ISI - (S) Arg - OH lyophilisé sous forme de mono acétate. Exemple 12: Cyclo (S) Thr - (S) Lys -.ABH - (S) Arg - OH lyophilisé sous forme de mono acétate. Exemple 13: Cyclo (S) Thr - (S) Lys - (S) THC - (S) Arg - OH lyophilisé sous forme de mono acetate. 17 2610934 EXEMPLES 14 et 15: En opérant comme indiqué dans l'exemple 9, et en remplaçant le tBoc (S) PHI - OH par l'acide (t, butoxycarbonyl - 2 perhydroisoquinoleine) carboxylique - 3 ou tBoc PHIQ - OH ou par l'acide (t butoxycarbonyl - 1 perhydrocyclopenta [b] pyrrole).carboxylique - 2 ou t.Boc PCP - OH, on obtient les composés suivants: Exemple 14: Cyclo (S) Thr - (S) Lys - PHIQ - (S) Arg - OH lyophilisé sous forme de mono acetate. Exemple 15: Cyclo (S) Thr - (S) Lys - PCP - (S) Arg - OH lyophilisé sous forme de mono acétate EXEMPLES 16,17 et 18: En remplaçant dans l'exemple 4, le cyclo (2S, 3R) AHPA - OH par: - I'acide oxo - 2 phényl - 4 oxazolidine - 1,3 carboxylique - 5 ou PH cyclo AHPA - OH - l'acide oxo - 2 (thiényl - 2) - 4 oxazolidine - 1,3 carboxylique - 5 ou Thi cyclo AHPA OH - I'acide oxo - 2 (hydroxy - 3 phényl) - 4 oxazolidine - 1,3 carboxylique - 5 ou OHPh cyclo AHPA - OH on obtient les produits suivants: Exemple 16: PH cyclo AHPA - (S) Lys (S) ABO - (S) Arg - OH lyophilisé sous forme de mono acetate. Exemple 17: Thi cyclo AHPA - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH lyophilisé sous forme de mono acétate Exemple 18: OHPh cyclo AHPA - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH lyophilisé sous forme de mono acétate. EXEMPLE 19: Promotion del'activité N.K. Les composés selon l'invention ont été testés pour leur pouvoir promoteur de l'activite "Tueuse spontanée" ("Natural killer"). Les cellules dotées de ce pouvoir forment la premiere ligne de défense 18 2610934 de l'organisme vis-a-vis de l'envahissement septique, viral ou tumoral. Pour apprécier leur pouvoir stimulant, des composes selon l'invention ont éte étudies selon la technique REYNOLDS, et coll 1981, (J. Immunol 127, 282). Les composés sont injectes par vote intravemineuse a la dose de 20 a 50 pig/kg a des souris de souche 86D2F1 Trois jours après le traitement, les animaux sont sacrifiés, leur rate prélevée et dissociée en ses cellules constituantes qui sont ensemencées en culture en présence de cellules tumorales YAC-1 préalablement marquées au chrome radioactif. A l'issue de l'incubation, le pouvoir destructeur des composés de l'invention est mesure par la quantité de chrome libérée. A titre d'exemple, le composé de l'exemple 1, a la dose de 25 pg/kg, induit par rapport au témoin, une augmentation de la libération de chromede 15 %, identique à celle provoquée par le composé de l'exemple 8 de la demande de brevet européen n 0 190 058, alors que la tuftsine à la dose de 40 pg/kg ne provoque qu'une libération de 10 %. EXEMPLE 20: Inhibition de croissance du mélanome B 16. Les mélanomes sont des tumeurs cancéreuses sensibles a la réaction du système immunitaire du malade. Ils constituent donc un modèle de choix pour apprécier toute stimulation de défense antitumorale. Le compose selon l'exemple 9 s'est, par exemple, montré capable de ralentir de 45 % la croissance du mélanome B 16 de la souris, lorsque le produit est administré a raison de 20 ig/kg, 3 fois par semaine par voie intrapéritonéale. Dans les mêmes conditions le pourcentage obtenu avec l'exemple 1 de la demande de brevet européen n 0 190 058 n'est que de 40 % et la tuftsine s'est montrée incapable de favoriser le ralentissement de croissance de la tumeur greffée. EXEMPLE 21: Augmentation de la résistance des animaux a l'infection. Certaines souches bactériennes pathogènes sont capables de tuer l'hôte sain chez qui elles sont inoculées. C'est le cas, par exemple, de Klebsiella Dneumoniae, agent responsable de la pneumonie (Parent, M.; et coll. Proc. Natl, Acad. Sci.USA, 1978, 75, n 7, 3395). Le composé de l'exemple 1, de façon identique au compose de l'exemple 8 de la demande de brevet européen nO 0 190 058, par exemple, est capable a la dose de 60 pg par animal de proteger de 19 2610934 la mort par infection toutes les souris Swiss, femelles, de 20 a 25 g, auxquelles la souche Klebsiella pneumoniae 7823 est inoculée par voie IP, lorsqu'il est administre 48 heures avant l'infection Dans les mêmes conditions, la tuftsine.n'a été capable de sauver que 20 % des animaux EXEMPLE 22: Mesure de la réponse anticorps. Les composés selon l'invention ont été testés pour leur pouvoir d'augmenter la réponse anticorps aux globules rouges de mouton chez la souris. La réponse anticorps est mesurée in vitro selon la technique de JERNE (Science, 1 5S3, 140, 405). Des souris C 57 BI/6 males, de poids moyen 23 g, ont été traitées par voie intraveineuse par les composés selon l'invention 48 heures avant l'inoculation intrapéritonéale de globules rouges de mouton. Cinq jours plus tard, la production d'anticorps spécifiques diriges contre les globules rouges de mouton est détectée dans une suspension de cellules de la rate de ces animaux A titre d'exemple, le composé selon l'exemple 1 s'est montre capable, lorsque administré à la dose de 1 mg/kg-1 d'augmenter de 50 % la réponse anticorps aux globules rouges de mouton chez la souris. A titre de comparaison, le dérive de Y. STABINSKI et al, appelé [O = C Thr] tuftsine n'a été capable dans les mêmes conditions, d'augmenter cette réponse anticorps que d'une valeur de 35 %. Le dérivé correspondant de la demande de brevet européen n 0 190 058, exemple 8, s'est révelé inactif sur ce test. EXEMPLE 23: Compositions pharmaceutiques. Soluté iniectable Cyclo (S) Thr - (S) Lys - (S) PHI - (S) Arg - OH: 0,050 g eau pour préparation injectable: 2 cm3 Crème dermique Cyclo [(S) Thr] (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH 5 g polypropylèneglycol 25 g vaseline blanche 10 g alcool à 950 10 g eau purifiée q.s.p 100 g 2610934 REVENDICATIONS 1/ Composes de formule générale: R * R. (CH2)t - CO - Lys - N - CH - CO Arg - OH c A Il O dans laquelle R représente: - un atome d'hydrogene - un radical alcoyle comportant de 1 a 4 atomes de carbone, en chaine droite ou ramifiée, un radical aryle tel que phenyle ou hétéroaryle tel que thiényle éventuellement substitue par un groupement hydroxy, amino, mercapto, methylthio, ou alcoyle infeérieur, un radical aralcoyle minférieur tel que benzyle, R' représente un atome d'hydrogene ou un groupement alcoyle comportant de 1 a 4 atomes de carbone en chaîne droite ou ramifiée, X représente un atome d'oxygène ou un groupement NH, Y représente un atome d'oxygène ou de soufre-lorsque X représente un groupement NH ou Y représente un groupement NH lorsque X représente un atome d'oxygene, t représente 0 ou 1, Lys et Arg représentent respectivement les restes lysile et arginyle engagés dans des liaisons peptidiques, N-CH représente AA) * une structure bicyclique de formule: 2 1 22610934 --N Ch-- / \ (CH2)m (CH2)r Ra - C- (CH2)p - C - Rb kB o - m est égal à 1 ou zéro, - n et p représentent zéro, 1 ou 2, - R. et Rb représentent un atome d'hydrogène ou peuvent former ensemble une liaison directe quand p = 0, B représente une chaîne alkylene (CH2)q o q est égal a 2, 3 ou 4 * ou une structure insaturee (-CH = CH -)2 quand p = 0 et Ra et Rb forment ensemble une liaison, avec la réserve que la somme de m, n, p et q est un nombre entier compris entre 3 et 6, ou * la tétrahydro - 1, 2, 3, 4 bétacarboline, leurs énantiomeres, épimeres et diastéreoisomeres, ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable 2/ Composés selon la revendication 1 dans lesquels la structure cyclique - N - CH kA) A représente l'indoline, I'isoindoline, la tétrahydroquinoléine, la tetrahydroisoquinoleine, le perhydroindole, le perhydroisoindole, la perhydroquinoléene, la perhydroisoquinoleine, le perhydrocyclopenta [b] pyrrole, I'aza - 2 bicyclo [2.2.2] octane, I'aza 2 bicyclo [2.2 1] heptane, la tétrahydro - 1, 2, 3, 4 bétacarboline, leurs énantioméres, épimeres et diastéréoisomeres, ainsi que leurs sels d'addition a un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable. 22 2610934 3/ Composés selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2 dans lesquels la structure cyclique - N - CH représente le perhydroindole ou l'azablcyclo [2.22] octane, A leurs enantiomeres, epimeres et diastereoisomeres, ainsi que leurs sels d'addition a un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable 4/ Le Cyclo (S) Thr - (S) Lys - (S) ABO- (S) Arg - OH et ses sels d'addition a un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable. / Le Cyclo (S) Thr - (S) Lys - (S) PHI - (S) Arg - OH et ses sels d'addition a un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable. 6/ Le Cyclo (S) Thr - (S) Lys - (S) THIQ -. (S) Arg - OH et ses sels d'addition a un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable. 7/ Le Cyclo (S) Thr - (S) Lys - PHII - (S) Arg - OH ses enantiomeres et diastéreoisomères ainsi que ses sels d'addition a un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable. 8/ Le Cyclo (25, 3R) AHPA - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH et ses sels d'addition à un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable 9/ Le [(4R) Méthyl - 4 oxo - 2 oxazolidmne -1,3 carbonyl - 5] - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH, ses énantiomères et leurs sels d'addition à un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable. / Le Cyclo GABOB - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH, ses enantiomeres, et leurs sels d'addition a un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable 11/ Procédé de préparation des composés de formule I caractérise en ce que l'on condense un dérivé de formule Il tBoc - N - CH - COOH Il A obtenu comme décrit dans la demande de brevet européen n 0 190 058. dans lequel tBoc représente le radical tertiobutoxycarbonyle et A avec les atomes de carbone et d'azote auxquels il est attaché, a les mêmes significations que dans la formule 1, 23 2610934 avec le N, - nitroarginate de méthyle (H - Arg (NO2) OCH3) ou de benzyle (H - Arg (NO:) OCH2 C6Hs) pour obtenir un dérivée de formule III tBoc - N - CH - CO - Arg(NO2) OD I A dans lequel A, avec les atomes de carbone et d'azote auxquels il est attaché, a les mêmes significations que dans la formule 1, et dans lequel D représente un radical méthyle ou benzyle que l'on déprotège ensuite par l'acide trifluoroacétique en un dérivé de formule IV HN - CH - CO - Arg (NO2) OD IV -AJ dans lequel A, avec les atomes de carbone et d'azote auxquels il est attache, a les mêmes significations que dans la formule 1, et dans lequel D a la même signification que dans la formule Ill 0 qui est ensuite condensé avec la N - tertiobutoxycarbonyl N. benzyloxycarbonyl lysine ou (tBoc) Lys (Z) pour obtenir un composé de formule V tBoc Lys (Z) - N - CH - CO - Arg (NO2) OD V kAJ dans lequel A, avec les atomes de carbone et d'azote auxquels il est attaché, a les mêmes significations que dans la formule I et D la même signification que dans la formule III. qui est soumis à I'action de l'acide trifluoroacétique et converti en un dérivé de formule VI Lys (Z) - N - CH - CO - Arg (NO2) OD VI iL J A dans lequel A, avec les atomes de carbone et d'azote auxquels il est attaché, a les mêmes significations que dans la formule I et D la même signification dans la formule III que l'on condense avec un dérivé de formule VII 24 2610934 R' R (CH2)t - COOH VilI Y X ""C '" C- Il o dans lequel R, R', X, Y et t ont la même signification que dans la formule I pour conduire à un dérienve de formule VIII R' R '-.----(CH2) t - CO - Lys (Z) - N - CH - CO - Arg (NO2) - OD Vil yN l- A I dans lequel A, avec les atomes de carbone et d'azote auxquels il est attache, R, R', X, Y et t ont la même signification que dans la formule I et D la miême signification que dans la formule III qui peut-être soit - quand D représente CH3, deprotégé par saponification puis soumis a une hydrogénation catalytique - quand D représente le groupement benzyle, soumis a hydrogénation catalytique pour conduire à un dérivé de formule I que l'on peut si l'on désire soit salifier par un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable, - soit séparer en ses isomères, puis, si nécessaire, salifier par un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable 12/ Composés de structure générale VIII selon la revendication 11 utiles pour la préparation des composes selon la revendication 1. 2610934 13/ Composition pharmaceutique contenant comme principe actif au moins un compose selon la revendication 1 a 10 en combinaison avec un ou plusieurs excipients ou vehicules inertes non- toxiques, pharmaceutiquement acceptable.