FR 2609633 A1 19880722 FR 8700371 A 19870115 UTILISATION DE L'ACIDE GLYCYRRHETINIQUE EN TANT QUE MOYEN CICATRISANT La présente invention a trait à une nouvelle uti- lisation en tant que moyen cicatrisant, d'une substance déjà connue en thérapeutique en tant que produit analgé- sique et antiinflammatoire, à savoir l'acide glycyrrhétinique. On sait notamment des brevets français NO 1306 M et NO 3810 M et du certificat d'addition NI 40 CAM, que l'aci- de glycyrrhétinique a déjà été préconisé en tant que prin- cipe actif analgésique et antiinflammatoire. On sait en par- ticulier qu'il intervient en tant que moyen analgésique et antiinflammatoire dans une formulation de pâte gingivale commercialisée sous le nom de marque d'ARTHRODONT (voir à cet effet, le Dictionnaire Vidal 61ème édition, page 107, OVP,Paris,1985). On vient de trouver de façon surprenante que (i) l'acide glycyrrhétinique, et (ii) ses dérivés (notamment ses sels et esters) présentent par voie locale des proprié- tés cicatrisantes particulièrement intéressantes. Suivant l'invention on préconise donc une nouvelle utilisation d'une substance glycyrrhétinique choisie parmi l'ensemble comprenant l'acide glycyrrhétinique, ses sels non toxiques et ses esters non toxiques, pour l'obtention d'un médicament cicatrisant destiné à une utilisation thé- rapeutique locale vis-à-vis des plaies. L'acide glycyrrhétinique peut être indifféremment l'isomère 18B ou l'isomère 18o; par commodité on préfère néanmoins utiliser plutôt l'acide B - glycyrrhétinique. Parmi les esters qui conviennent suivant l'inven- tion on peut notamment citer les glycyrrhétinates d'al- kyle en C1-C4, de phényle et de benzyle. -2- Parmi les sels non-toxiques qui conviennent sui- vant l'invention on peut mentionner en particulier les sels métalliques, notamment les sels de sodium et de potassium, et les sels d'addition avec des bases organiques. Le meilleur mode de mise en oeuvre de l'inven- tion consiste à utiliser l'acide glycyrrhétinique pur et en particulier l'acide 18B - glycyrrhétinique. De façon pratique, pour la nouvelle utilisation locale suivant l'invention, on préconise une composition thérapeutique qui renferme une substance cicatrisante choisie parmi l'acide glycyrrhétinique (de préférence l'acide 18 B13- glycyrrhétinique), ses sels non-toxiques et ses esters non-toxiques, en association avec un excipient approprié physiologiquement acceptable. Bien entendu dans une telle composition, le principe actif cicatrisant intervient à une teneur pharmaceutiquement efficace pour la cicatrisation des plaies. Selon un mode particulier de mise en oeuvre on recommande une composition thérapeutique qui ren- ferme l'acide glycyrrhétinique, un agent antiinfec- tieux tel que le formaldéhyde et un excipient appro- prié pour application locale, notamment sous forme de crème, pâte, pommade, onguent, lotion, etc... D'une manière générale les compositions thérapeutiques suivant l'invention renfermeront de 0,5 à 5 % en poids d'acide glycyrrhétinique ou d'un de ses sels ou esters non-toxiques par rapport au poids total desdites compositions. Si le formaldéhyde est incorporé dans ces compositions, il le sera à une teneur de 0,05 à 0,5 % en poids par rapport au poids total desdites compositions. De façon avantageuse, lesdites compositions -- 3 -- thérapeutiques contiendront lg d'acide glycyrrhétinique, et le cas échéant O,lg de formaldéhyde, pour 100lg desdites compositions. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention seront mieux compris à la lecture, qui va suivre, de résultats d'essais pharmacologiques et cliniques entrepris avec l'acide glycyrrhétinique en tant que moyen cicatrisant, l'ensemble de ces élé- ments n'étant pas limitatif mais donné à tttre d'il- lustration. A. ESSAIS PHARMACOLOGIQUES Les propriétés cicatrisantes de l'acide glycyrrhé- tinique ont été étudiées chez le rat mâle adulte pesant de 180 à 200g. Après avoir rasé le dos le long de la colonne vertébrale et provoqué une plaie standardisée de 1 cm 2 par brûlure au moyen d'un poinçon approprié porté à 180 C, des lots de 10 rats reçoivent une application locale quotidienne sur ladite blessure d'un excipient (lot témoin) ou d'une composition (lot traité) comprenant ledit excipient (99 parties en poids) et l'acide 18p - glycyrrhétinique pur (1 partie en poids), pendant 2 semaines. On constate que le lot traité cicatrise plus rapidement que le lot témoin et que l'acide glycyrrhétini- que est bien toléré par l'animal. B. ESSAIS CLINIQUES On prélève des greffons pour réaliser deux auto- greffes gingivales successives. On obtient deux plaies expérimentales identiques au niveau palatin droit et gau- che, chez la même patiente à environ un mois d'interval- le. L'une des deux plaies permet d'apprécier l'activi- téde l'onguent gingival qui renferme l'acide 18B - glycyrrhétinique par comparaison avec l'autre plaie traitée par le même onguent ne renfermant pas ledit acide (placebo) - 4- 1) - Choix des patients On a fait appel à des patientes volon- taires agées de 38 à 47 ans ne présentant aucune maladie intercurrente succeptible d'influencer favorablement ou négativement la cicatrisation, ayant des conditions ana- tomiques identiques des deux côtés du palais et s'enga- geant à n'accepter que l'onguent gingival sus-visé avec ou sans acide 183 - glycyrrhétinique et, le cas échéant, un analgésique destiné à diminuer la douleur à compter du premier jour de l'essai. 2) - Chronologie de l'étude Une plaque palatine de protection (résine autopolymérisante) est réalisée avant la première intervention, chez les patientes prises comme témoins on prélève au bistouri à l'instant J = O, un greffon ayant approximativement les dimensions suivantes: longueur: 20 mm, largeur: 8 mm, épaisseur: 1,5 mm, sur un côté du palais (droit ou gauche, indifféremment), au niveau de la muqueuse palatine, et plus précisément au voisinage de la première molaire supérieure, à environ 2 mm du collet. Ce prélèvement est effectué en vue de la réalisation d'une autogreffe du côté opposé du palais. Après le prélèvement du greffon, une hémostase est pratiquée par compression au moyen d'une ga- ze, et la plaque palatine est mise en place avec l'onguent, au niveau de la plaie. Il s'agit de l'onguent placebo qui est constitué par l'excipient de la formulation de traitement donnée ci-après. Ensuite, la patiente n'est autorisée à - absorber que des comprimés analgésiques. Elles est priée de renouveler l'onguent sous la plaque palatine dans les trois heures, le Jour de l'intervention, puis dès le len- demain Jusqu'au Jour J + 8 trois fois par jour avec, le cas échéant, un comprimé analgésique en cas de douleur. A l'instant J + 8, on apprécie l'état de cicatrisation de la plaie palatine par étude cytologi- que et mesure de la sérosité. On note également que le nombre de com- primés analgésiques (notamment de 4-hydroxyacétanilide, de glafénine, etc. ) pris par le patient, l'aspect clinique..DTD: de la plaie et les éventuelles réactions du patient. La sérosité au niveau de la plaie pa- latine est quantifiée selon la méthode décrite par FOUREL et al., Journal de Parodontologie 4, 391-398, (1985). Après séchage à l'aide de compresses de gaze, la plaie est asséchée par un Jet d'air agissant pendant 10 secondes à une distance standardisée (la pa- tiente ayant la bouche au maximum d'ouverture, l'embout de la seringue à air étant placé au niveau de l'embra- sure vestibulaire située entre la 2ème prémolaire et la lère molaire mandibulaires du même côté que la plaie). Une bande (en anglais: "strip") de papier buvard("Perio- paper"Har-601) est aussitôt placée sur la plaie o il tient par adhésion pendant 30 secondes; son degré d'humi- dité est aussitôt évalué à l'aide d'un appareil Periotron (modèle 600). L'étude cytologique a été réalisée com- me suit. Un filtre Millipor(type HA - 0,45 pm) est placé à cheval sur la plaie et la muqueuse palatine environnante. Après décollement, il est fixé au "Cytospray" et numéroté. Les filtres sont colorés au laboratoire selon la méthode de LAINSON et MACKENZIE (Journal of Periodontology 47: 469-476 (1976)] 260963e - 6 - L'interprétation des échantillons est faite en considérant les éléments suivants: - cellules basophiles et éosinophiles - cellules acidophiles - cellules pycnotiques - cellules kératinisées - flore COTE EXPERIMENTAL Un mois environ après la première, une seconde autogreffe est pratiquée chez le même patient.Le pré- lèvement du greffon palatin est fait du côté opposé au au précédent prélèvement. Le protocole expérimental est exactement le mê- me que du côté témoin, sauf que l'onguent utilisé répond à la formulation suivante: - acide 18B - glycyrrhétinique................... 1 g - soluté officinal de formaldéhyde............... 0,10 g - rongalite............... ..................... 0,05 g - excipient q.s.p. 100 g L'excipient utilisé comprend en association pour..DTD: réaliser un onguent de l'alginate de sodium, de la go- marine, du silicate de sodium, du texapon, de la glycérine, du carbonate de calcium, de l'eugénol, du menthol, de l'essence de menthe et de l'eau bidistillée. Bien entendu, toutes les plaies sont revues au moins un mois après les interventions. 3)- Résultats L'étude a porté sur huit plaies expérimentales soit huit autogreffes gingivales, qui ont été suivies chez quatre patientes. a. Apprécitation clinigue 260963? -7- Les patientes ont pris moins de comprimés analgésiques quand elles utilisaient l'onguent renfer- mant l'acide glycyrrhétinique au lieu du placebo (15 comprimés au total pour les quatre patientes lors de la prise du placebo et 8 comprimés au total pour les patientes lors de la prise de l'onguent gingival de traitement). On constate qu'à l'instant J + 8 l'aspect des plaies a été Jugé satisfaisant, du côté de l'onguent gingival de traitement et un peu moins satisfaisant du côté placebo. A l'instant J + 30, les huit plaies ont cicatrisé sans aucune complication. Lors de contrôles effectués ultérieurement, il a été constaté que la muqueuse palatine avait retrou- vé son intégrité normale. b. Quantification de la sérosité Chez les quatre patientes, la sér.osité a toujours été moins abondante à J + 8, du côté traité par l'onguent gingival renfermant l'acide 18p - glycyrrhéti- nique que du côté recevant le placebo. Les résultats qui figurent dans le tableau I ci-après, ont trait au de&r d'humidité de la bande de papier mesuré au Périotron 600. TABLEAU I Placebo acide 18B-glycyzt-htkf Patient 1 82 66 patient 2 67 56 Patient 3 87 74 Patient 4 69 53 -8- c. Etude cYtologigue à J + 8 On constate que du côté placebo, il existe une zone inflammatoire et infectée alors que du côté de l'onguent gingival renfermant l'acide 18 - glycyrrhé- tinique, il n'y a ni inflammation ni infection, à l'instant J + 8. d.-Conclusions On constate que l'acide 18> - glycyrrhéti- nique est parfaitement toléré dans le protocole expé- rimental sus-visé, qu'il manifeste son action analgé- sique dès les 24 premières heures de la cicatrisation, qu'il favorise de façon bénéfique ladite cicatrisation en asséchant les plaies eu égard de la diminution de la sérosité à J + 8. Son action positive sur la cicatri- sation est confirmée par l'étude cytologique à J + 8. --9 -- REVENDICATIONS 1. Nouvelle utilisation d'une substance glycyrrhétinique, caractériséeen ce que l'on utilise une substance glycyrrhétinique choisie parmi l'ensem- ble comprenant l'acide glycyrrhétinique, ses sels non-toxiques et ses esters nontoxiques, pour l'obten- tion d'un médicament cicatrisant destiné à une utilisa- tion thérapeutique locale vis-à-vis des plaies. 2. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée en ce que la substance glycyrrhétiniqueest l'acide 18B - glycyrrhétinique. 3. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée en ce que la substance glycyrrhétinique est l'acide 18 - glycyrrhétinique. 4. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée en ce que la substance glycyrrhétinique est choisie parmi les glycyrrhétinates d'alkyle en C1 - C4, dephényle et de benzyle. 5. Utilisation suivant la revendication 1, caractériséeen ce que la substance glycyrrhétinique est choisie parmi les sels de sodium et de potassiumde de l'acide glycyrrhétinique. 6. Composition thérapeutique cicatrisante, caractérisée en ce qu'elle renferme, en association avec un excipient approprié à l'usage local et physiologique- ment acceptable, une substance cicatrisante, choisie par- mi l'acide glycyrrhétinique, de préférence l'acide 18. - glycyrrhétinique, ses sels non-toxiques et ses esters non-toxiques. 7. Composition suivant la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle renferme 0,5 à 5 % en poids d'acide glycyrrhétinique ou d'un de ses sels ou esters non-toxiques par rapport au poids total de ladite compo- sition. - 10 - 8. Composition suivant la revendication 6, caractérisée en ce que la substance glycyrrhétinique est associée & du formaldéhyde.- 9. Composition suivant la revendication 8, caractérisée en ce qu'elle renferme pour 100 g, 1 gram- me d'acide 18B3 - glycyrrhétinique et 0,1 g de formaldé- hyde.