FR 2607810 A1 19880610 FR 8716736 A 19871202 L'invention concerne de nouveaux dérivés azoliques, leur préparation, des préparations pharmaceutiques les conte- nant, ainsi que leur utilisation. L'invention se rapporte en particulier aux dérivés azoliques de formule I ! R1-.CH.$H[C0_R3 I R2 dans laquelle R1 et R2 sont identiques ou différents et re- présentent chacun un reste aryle ou hétéroaryle non substitué, mono- ou polysubstitué, R représente un reste alkyle, cycloalkyle, aryle, hétéroaryle non substitué, mono- ou polysubstitué, un reste cycloalkyle, aryle ou hétéroaryle condensé avec un cycle ben- zénique ou un groupe alcoxy et X représente CH ou N, autu9l cas, si R3 représente un méthyle et R1 et R2 représentent tous les deux un reste phényle, au moins un de ces restes phényle devra être substitué, ainsi qu'à leurs sels d'addition d'acides. Dans la formule ci-dessus, Ri, R2 et R3 en tant que restes aryles représentent en particulier un phényle, pos- sèdent en tant que restes hétéroaryles,de préférence 5 ou 6 chaînons et comme hétéro-atomes un ou plusieurs atomes de soufre ou d'azote. Les restes hétéroaryles non condensés re- présentent par exemple le reste thiényle ou pyridine, le reste hétéroaryle condensé représente par exemple le reste indolyle-2 ou indolyle-3. Comme substituants pour R1 et R2, il s'agit notam- ment d'atomes d'halogène, par exemple de F ou Cl. Une mono- substitution est préférable, en particulier en position p- Des substituants pour le reste R3 en tant que reste aryle ou hétéroaryle sont par exemple un halogène, le groupe nitro, le groupe cyano, un groupe alkyle inférieur, alcényle inférieur, alcinyle inférieur, alkylthio inférieur, alkyl- sulfinyle inférieur, alkylsulfonyle inférieur ou alcoxy infé- rieur, éventuellement mono- ou polysubstitués par un halogène ou un phényle ou un groupe phényle ou phénoxy éventuellement substitué. Comme substituants, on préfère des atomes d'halo- gène, par exemple F ou C1 et CN. R3 en tant que reste cycloalkyle, éventuellement con- densé avec du benzène possède avantageusement 5 à 7 atomes de C et est de préférence non substitué. R3 en tant que reste alkyle possède avantageusement 1 à 4 atomes de C et peut être substitué, par exemple par CN, un alcoxy, un benzyloxy ou par un groupe alcoxy-(mono, di ou tri)éthylèneoxy. R3 en tant que groupe alcoxy possède avantageusement 1 à 4 atomes de C. Au cas o les restes R3 sont substitués, une mono- substitution est préférable. Les groupes aikyles inférieurs présents comme substi- tuants ou contenus dans les substituants possèdent avantageuse- ment 1 à 4 atomes de carbone, les groupes alcényles et alci- nyles inférieurs possèdent jusqu'à 4 atomes de carbone. Dans la formule I ci-dessus, les significations sui- vantes des symboles, seuls ou en combinaison, sont préférés: R1 et R2 sont P-F- ou en particulier P-Cl-phényle X est CH R3 possède les significations préférées susmentionnées et est notamment D-F-, P-C1- ou p-CN-phényle. Conformément à l'invention, on accède aux composés de formule I en acylant, selon des méthodes connues en soi, des composés de formule I2 il -I R!-C C2S2 dans laquelle X, Ri et R2 possèdent la signification ci-des- sus, avec un acide carboxylique R3COOH ou un de ses dérivés réactifs. Le procédé selon l'invention peut être réalisé par exemple par réaction d'un composé de formule II avec un halo- génure d'acide approprié dans un solvant inerte dans les con- ditions réactionnelles, par exemple dans une base organique ou minérale qui agit en même temps comme fixateur d'acide, comme la pyridine, éventuellement avec adjonction d'un accélé- rateur d'acylation, tel que la 4-diméthylaminopyridine. Pour l'acylation, on peut également faire réagir un composé de for- mule II avec un ester actif de l'acide R3COOH. Par exemple, la réaction peut être effectuée à la température ambiante avec un ester de pyridyl-2thiol dans un solvant inerte dans les conditions réactionnelles, par ex. dans un dialkyl(infé- rieur)carboxamide comme le diméthylformamide. On peut en outre faire réagir les composés de formule II avec R3COOH en présence de N-hydroxybenzotriazole et de dicyclohexylcarbo- diimide. Le produit final peut être isolé du mélance réaction- nel selon des méthodes connues en soi et être éventuellement purifié. Les produits de départ de formule II sont en partie nouveaux et peuvent être obtenus par exemple selon le schéma réactionnel suivant: R -CO-CH3 + Ni20H.HC1 - R1-C-CH3 + 2 R2MgHal NOH R1 R R2 R/Y1 Les produits de départ restants ainsi que les agents d'acylation sont connus ou peuvent être préparés selon des méthodes connues ou comme il est décrit dans les exemples. Dans les exemples qui suivent, toutes les indications de température s'entendent en degrés Celsius et sont non cor- rigées. Exemple 1: 2,2-bis-(4-chlorophényl)-2-(lH-imidazol-l-yl)-l- (4-chlorobenzoyl-amino)éthane 0,34 ml de chlorure de 4-chlorobenzoyle sont ajou- tés goutte à goutte, avec refroidissement par de la glace, à 670 mg de 2, 2-bis-(4-chlorophényl)-2-(lH-imidazol-l-yl)-l aminoéthane dans 4ml de pyridine sèche. Le mélange est agité pendant 4 heures à la température ambiante. Onverse sur une solution d'hydrogénocarbonate de sodium saturée froide et extrait avec de l'acétate d'éthyle. Les phases organiques réunies sont lavées avec:une solution d'hydrogénocarbonate de sodium saturée et une solution de chlorure de sodium, séchées sur sulfate de magnésium et concentrées par évapora- tion. Le résidu cristallise par digestion avec de l'acétate d'éthyle et de l'éther diéthylique. Cristaux incolores, pt.F : 241-244 . Le 2,2-bis-(4-chlorophényl)-2-(lH-imidazol-l-yl)- l-aminoéthane utilisé comme produit de départ peut être pré- paré comme suit: a) 2,2-bis-(4-chlorophényl)aziridine Une solution de Grignard à partir de 8,45 g de ma- gnésium et de 36 ml de bromobenzène dans 200 ml d'éther ab- solu est additionnée de 300 ml de toluène sec et l'éther est chassé par distillation jusqu'à obtention d'une température interne de 107 . 28,8 g de p-chloracétophénone oxime dans ml de toluène séché sont à présent ajoutés goutte à goutte à la solution bouillante, le mélange est chauffé au reflux pendant 1 1/2 heures et ensuite additionné, avec refroidis- sement par de la glace, de 300 ml d'une solution de chlorure d'ammonium à 20%. Après la séparation de phase, la phase aqueuse est extraite par de l'éther. Les phases organiques réunies sont lavées avec une solution de chlorure de sodium saturée, séchées sur sulfate de magnésium et concentrées par évaporation. Le résidu huileux est chromatographié sur gel de silice (0,040 à 0,063 mm) avec de l'éther de pétrole 60- et un mélange éther diéthylique/éther de pétrole (3/2). L'huile ainsi obtenue est caractérisée par le spectre RMN. H-RMN(CDC13): 2,36(2H, s, large, -CH2); 7,20-7,55 (8H, m, 3 2' aromat.). b) 2,2-bis-(4-chlorophényl)-2-(1H-imidazol-l-yl)-l-aminoéthane 3,96 g de 2,2-bis-(4-chlorophényl)aziridine sont chauffés pendant 20 heures à 95 (en fusion) avec 5,1 g d'imi- dazole. On reprend avec de l'acétate d'éthyle/eau et extrait plusieurs fois la phase aqueuse avec de l'acétate d'éthyle. Les phases organiques sont lavées avec une solution d'acide tartrique à 0, 25% et avec une solution saturée de chlorure de sodium, séchées sur sulfate de magnésium et concentrées par évaporation. Le résidu qui contient également, à côté du pro- duit recherché, l'isomère de position l,l-bis-(4-chlorophényl) -2-(lHimidazol-l-yl)-l-aminoéthane, est séparé sur gel de silice (0,040-0,063 mm) avec le mélange dichlorométhane/mé- thanol/éther de pétrole (20/1/5). On obtient une huile jaune_ brun visqueuse. 1H-RMN(CDCl3): 1,40 (2H, large, -NH2); 2,90 (2H, s, -CH2; 6,9-7,5 6H, m, aromat., imidazole); 7,68 (1H, imidazole) Comme décrit dans l'exemple 1, les composés de formule I suivants peuvent également être obtenus à partir des produits de départ correspondants: lexe X R[R 3PFe- _, ._ _ Plexe_ R_ l R3 PF @ C 2 C H 6H5 6H5 - -C 193-197 3 N - C.-cl -c -162 4 CH -"- -".H 178-18.' CH --" - -C(CH>)3 131-136À 6 CH -"- -"- - / - /--/ -Ci 220.2240 \\ $' '\ /,' exe, X R1 R2 3 PFoc ple 7 CH C - I -C1 - 144-146o 8 CH -"- " amorph e 9 CH-"- OC2H5 amorph CH "- - CH(CH3)-0-CH2$" amorphe(Racmat) H Il CH 14g2325 12 CH -"- GN 233-235 13 CH -"- -"- CH2(0-CH2-CHZ)OCH3huile 14 CH " - CH2-CN 219-220 " CHt 218-221 16 CH -"- 229.'232 l7 lC--CH 17 CH -"- -"- CH 181-183 Les composés de formule I ainsi que les sels d'addi- tion d'acides pharmaceutiquement acceptables de ces composés présentent, en expérimentation animale, d'interessantes pro- priétés pharmacodynamiques. Ils peuvent par conséquent être uti- lisés comme médicaments. Les composés de formule I conformes à l'invention et leurs sels possèdent en particulier une action inhibitrice de l'aromatase. Cette inhibition de l'aromatase peut par exemple être démontrée dans les tests suivants 1.) Inhibition de l'aromatase in vitro Des microsomes de placenta humain servent de source d'enzyme. Pour la préparation de ces microsomes, des placentas humains entiers sont, immédiatement après la délivrance, amenés refroidis au laboratoire, débarrassés du sana en excès Dar un rinçage poussé avec du sazch r-su [,25 "ë,uis dc Ès en rr- ceaux et aussitôt homogénéisés sous réfrigération (1 g d'or- gane + 1,5 g de tampon au KCt/tris, pH 7,4; Ultraturrax 3 x 10 s/0 C). Après sédimentation des cellules partiellement brisées, des noyaux et des mitochondries à 200, 7000 et 11000 g pendant 10 minutes chaque fois, la récupération de la fraction microsomiale s'opère par centrifugation du surnageant postmito- chondrial à 105.000 g/60 min. Le culot une fois lavé est ensuite mis en suspension dans un tampon KC1/tris isotonique jusqu'à une concentration de Cyt P-450 de 0,5 pM. La détermination de l'activité aromatase s'effectue selon une méthode connue modifiée (Thompson E.A., Siiteri P.K. 1974, J. Biol. Chem. 249, 5364-5372) par emploi de lfp, 2e, 3H-androstènedione comme substrat, en présence d'un système re- générateur de NADPH. Les composés à examiner sont ajoutés à des concentrations de 0,01 et 1 PM. Après 30 minutes d'incuba- tion à 37 C, on termine la réaction par mélange avec un gros excès de chloroforme et sépare les phases aqueuse et organique. La radioactivité de la phase aqueuse est attribuée à 3H20 qui se forme au cours de l'aromatisation de la e(, 2/ 3H-andros- tènedione en oestrone et sert de mesure pour l'activité enzy- matique. Les composés qui inhibent l'aromatase de façon signi- ficative dans ces conditions d'essai sont ensuite évalués dans un domaine de concentration élargi en vue de la détermination des valeurs IC50 (IE= concentration d'inhibition). Pour le composé de l'exemple 1, il a été trouvé dans cet essai une IC50 de 4,2 nM (pour la substance de com- paraison, l'aminoglutéthimide, l'IC50 est de 700 nM). 2. Inhibition de l'ovulation Des rats femelles ayant un cycle régulier reçoivent la substance à tester aux alentours de 16 heures la veille de l'ovulation et aux environs de 11 heures le jour de l'ovula- tion. L'ovulation est déterminée par le dénombrement des oeufs dans le frottis vaginal. L'ID50 (ID = dose d'inhibition orale pour le composé de l'exemple 1 est de 0,15 mg/kg. Pour les substances fe oomparaison, l'aminclutéthimSde et la 4hycrcxyandrostnedicne, les IDs0 crales se situent, dans cet essai, ë des valeurs au-dessus de 10 r-g/kg. 3. Influence sur l'aromatase ovarienne et sur la production d'E in vivo Des rats femelles adultes sont prétraités pendant 12 jours avec 25 IU/jour de PMSG (pregnant mare serum gonado- trophin) par voie sous-cutanée et le 13 ème jour la substance d'essai est administrée par voie orale à une concentration de 0,032 à 10 mg/kg. Les rates sont sacrifiées8, 24 et 48 heures plus tard, après quoi on prélève du sang et les ovaires. Des microsomes sont préparés à partir d'un ovaire de chaque animal et leur activité aromatase est déterminée comme décrit plus haut. L'oestradiol est extrait du deuxième ovaire et dosé quantitativement par RIA; il en est de même de l'oestradiol provenant du sang. Dans cet essai, l'ID50 du composé de l'exemple 1 pour l'inhibition de l'aromatase dans l'ovaire se situait au-dessous de 0,032 mg/kg après 24 heures (pour l'aminoglu- téthimide >5,6 mg). 4. Effets subchroniques in vivo La substance d'essai est administrée pendant 7 jours, une fois par jour, à de jeunes rats femelles âgés de 23 jours. Du 4ème au 7ème jour, du propionate de testostérone est in- jecté en supplément par voie sous-cutanée. Le 8ème jour, les animaux sont sacrifiés, le sang est recueilli et les utérus sont retirés, nettoyés et pesés. Des administrations de testo- stérone provoquent une nette augmentation des poids des uté- rus, liée à la conversion de la testostérone en oestradiol sous l'effet de l'aromatase. De ce fait, l'inhibition de l'hy- pertrophie de l'utérus par une substance d'essai est une me- sure précise de l'inhibition de la production d'oestrogènes par l'aromatase pendant le traitement de sept jours. Dans cet essai, l'ID50 pour le composé de l'exemple 1 s'élevait à 0,4 mg/kg/jour p.o. 5. Effets chroniques Des tumeurs mammaires oestrogènodépendantes sont provoquées chez des rats par une seule administraction orale de 7,12-diméthylbenz[a]anthracène (DMBA). Une fois que les tu- meurs ont atteint en moyenne une grosseur d'environ 1500 mm, on met en route le traitement avec la substance à tester et le poursuit jusqu'à 6 semaines. Le composé de l'exemple 1 inhibe nettement la crois- sance de la tumeur à 1 mg et 10 mg/kg p.o. par jour. La subs- tance de comparaison, l'aminoglutéthimide, est inefficace même à 100 mg/kg par jour. L'aromatase joue un rôle prédominant dans la bio- synthèse des oestrogènes chez les mammifères. Le blocage de cette enzyme par des inhibiteurs spécifiques peut induire un fort abaissement du taux normal de stéroides.Un tel abaissement chimique non êÉfàêtif du taux de stéroïdes apparaît, face à l'ablation chirurgicale d'organes producteurs d'hormones (prostate, ovaires, glandes surrénales), comme une alterna- tive souhaitable et un complément pour le traitement des tu- meurs stéroido-dépendantes, par exemple de la prostate, du syndrome ovarien polykystique, du carcinome du sein, des ovaires, de l'endomètre, ainsi que de la maladie de Cushing. Les composés de formule I peuvent par conséquent être utilisés comme inhibiteurs spécifiques appropriés de la synthèse des stéroides lors du traitement de plusieurs des tumeurs évoquées. Pour les applications précitées, la dose à employer varie bien entendu selon la substance utilisée, le mode d'ad- ministration et le traitement souhaité. Des résultats satis- faisants sont généralement obtenus avec une admihistration des composés de formule I à une dose d'environ 0,15 à 1,5 mg/kg du poids de corps vif. Pour les mammifères assez grands, la dose journalière appropriée se situe dans le domaine d'environ 10 à environ mg. Cette prise journalière peut s'effectuer en doses unitaires plus petites>2 à 4 fois par jour ou sous la forme retard. De ce fait, une dose unitaire appropriée contient pour les applications envisagées, à côté de diluants ou d'exci- pients pharmaceutiquement acceptables, environ 2,5 à environ mg des composés de formule I. Les composés de formule I peuvent être administrés sous forme de base libre ou de sels d'addition d'acides pharmaceutiquement acceptables, par voie entérale (par ex. par voie orale, sous forme de comprimés ou de capsules) ou par voie parentérale (par ex. sous forme de solutions ou de suspensions à injecter). L'invention concerne également des préparations pharmaceutiques contenant un composé de formule I ou un de ses sels d'addition d'acides pharmaceutiquement acceptables. Ces préparations, par exemple une solution ou un comprimé, peuvent être réalisées selon des méthodes connues par emploi des adjuvants et excipients usuels. L'invention concerne en outre les composés de for- mule I ou leurs sels d'addition d'acides pharmaceutiquement acceptables en vue de leur emploi comme médicaments notam- ment comme inhibiteur de l'aromatase. il REVENDICATIONS 1. Dérivés azoliques de formule I C R C-CH2- tH-CO-R3 I 2' 3 R2 dans laquelle R1 et R2 sont identiques ou différents et re- présentent chacun un reste aryle ou hétéroaryle non substitué, mono- ou polysubstitué, R3 représente un reste alkyle, cycloalkyle, aryle, hétéroaryle non substitué, mono- ou polysubstitué, un reste cycloalkyle, aryle ou hétéroaryle condensé avec un cycle ben- zénique ou un groupe alcoxy et X représente CH ou N, et, au cas o R3 représente un méthyle et R et R représentent tous les deux 1 2 un reste phényle, au moins un de ces restes phényle devra être substitué, ainsi que leurs sels d'addition d'acides. 2. Dérivés azoliques de formule I selon la revendi- cation 1, formule dans laquelle R] et R2 sont identiques ou différents et représentent chacun un reste phényle éven- tuellement monosubstitué, R3 représente un groupe alkyle avec 1 à 4 atomes de carbone, éventuellement substitué par CN, un alcoxy (C1 à C4), un benzyloxy ou un alcoxy (C1 à C4)-(mono-, di- ou tri-)éthy- lèneoxy, un groupe alcoxy avec 1 à 4 atomes de C, un groupe phényle éventuellement substitué, un groupe cycloalkyle avec 5 à 7 atomes de C, éventuellement condensé avec un cycle benzénique ou un hétérocycle avec 5 ou 6 chaînons, éventuel- lement condensé avec un cycle benzénique et contient comme hétéroatomes un ou plusieurs atomes de soufre ou d'azote, ainsi que leurs sels d'addition d'acides. 3. Dérivés azoliques selon la revendication 1 ou 2, dans lesquels R1 et R2 représentent p-C1- ou p-F-phényle, ainsi que leurs sels d'addition d'acides. 4. Dérivés azoliques selon l'une des revendications 1 à 3, dans lesquels R3 représente p-F-, p-Cl- ou p-CN-phényle, ainsi que leurs sels d'addition'd'acides. 5. Le composé. 2,2-bis(4-chlorophényl)-2-(lH-imida- zol-l-yl)-l-(4-chlorobenzoyl-amino)éthane, ainsi que ses sels d'addition d'acides. 6. Procédé de préparation des dérivés azoliques de formule I selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on acyle, selon des méthodes connues en soi, des composés de formule i l II ÈN R2 dans laquelle X, R1 et R2 possèdent la signification indiquée dans la revendication 1, avec un acide carboxylique R3COOH o R3 possède la signification indiquée dans la revendica- tion 1 ou avec un dérivé réactif de celui-ci. 7. Composés tels que définis dans une des revendi- cations 1 à 5, destinés à l'emploi comme médicament$. 8. Composés tels que définis dans l'une des reven- dications 1 à 5, destinés à l'emploi comme inhibiteurs de l'aromatase. 9. Utilisation des composés selon l'une des reven- dications 1 à 5 pour la préparation de médicaments inhibant l'aromatase. 10. Préparations pharmaceutiques contenant un com- posé de formule 1, tel que défini dans la revendication 1, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables, avec un adjuvant ou un excipient pharmaceutiquement acceptable pour celui-ci.