FR 2599034 A1 19871127 FR 8707118 A 19870521 La présente invention est relative à de nouveaux dérivés de 1- (hydroxystyryl)-5H-2,3-benzodiazépine de formule générale (I) et à un procédé pour leur préparation, et de plus, à-des compositions pharmaceutiques les contenant, Rd xC3 CH-C % H 1 N o RO C=NX CH dans laquelle: R est un atome d'hydrogène ou d'halogène ou un groupe alcoxy en C1 à 4 ' R1 est un atome d'hydrogène ou un groupe alcoyle en C1 4 ' R et R sont identiques et représentent un groupe alcoyle en C1 à 4 ou forment ensemble un groupe méthylène. Dans ce qui précède, le terme d'atome d'halogène"-se rapporte au chlore ou au brome, le terme de groupe alcoyle en C1 à 4 comprend des groupes hydrocarbyles aliphatiques saturés à chaîne droite ou ramifiée ayant d'un à quatre atomes de carbone ( par exemple, le groupe 35 méthyle, éthyle, npropyle, isopropyle, etc.). Le terme de groupe "alcoxy en C1 à 4 se rapporte à des groupes alcoxy à chaîne droite ou ramifiée contenant un à quatre atomes de carbone (par exemple, le groupe méthoxy, éthoxy, n-propoxy, isopropoxy, etc.). Des représentants préférés des composés ayant la formule générale (I) sont tels qu'ils sont décrits dans les Exemples. Des composés représentatifs particuliêreme.nt préférés selon la présente invention sont les dérivés sui10 vants: 1-(4-hydroxystyryl)-4-méthyl-7,8diméthoxy-5H-2,3-benzodiazépine, 1-(2-hydroxystyryl)-4-méthyl-7,8diméthoxy-5H-2,3-benzodiazépine, et 1-(4-hydroxystyryl)-4-méthy! 7,8-diéthoxy-5H-2,3-benzodiazépine. Les composés de formule générale (I) sont nouveaux et possèdent un nouveau type d'effet isotrope positif (cardiotonique) qui est inconnu chez les dérivés de 5H-2,3-benzodiazépine décrits dans la littérature (Brevet US N 3 736 315 et Brevets belges N 879 404 et 902 953). Selon un autre aspect de la présente invention, on fournit un procédé depréparation des composés de formule générale (I), caractérisé par la réaction d'un perchlorate 25 de 2-benzopyrylium de formule générale (II): p\ R OH RC H i 2 3 dans laquelle R, R, R et R sont tels que définis plus haut, dans un solvant, avec de l'hydrazine hydratée. On utilise à titre de solvants, des solvants polaires ou apolaires, de préférence l'eau, des alcools en C1 4 ' le dioxanne, le tétrahydrofuranne, le dichlorométhane, le chloroforme, le diméthylformamide, le diméthylsulfoxyde, la pyridine, et leurs mélanges. -25 La réaction est effectuée entre 0 et le point d'ébullition du solvant, de préférence dans une gamme de température entre +100 et +120 C. De l'hydrazine hydratée concentrée, de préférence à une concentration de 90 à 100 %, est appliquée 30 de préférence en excès de 2 à 4 fois molaire. Selon un aspect préféré du procédé de l'invention, on fait réagir une mole de perchlorate de 2-benzopyrylium de formule générale (II) dans de l'éthanol aqueux à une concentration de 95 à 100 % avec 3 moles d'hydrazine 35 hydratée à une concentration de 90 à 100 % à la température ambiante pendant plusieurs heures, puis on évapore le mélange réactionnel. Le résidu cristallin est traité a l'eau chaude pour éliminer les sous-produits, et le produit final est filtré et purifié, si cela est désiré, soit par 5 recristallisation, soit par remise en suspension dans un alcool chaud. Selon un autre mode de réalisation préféré du procédé de l'invention, un composé de formule générale (II) est mis en suspension dans un solvant et le mélange 10 réactionnel est chauffé à reflux pendant une heure après addition de 3 moles d'hydrazine hydratée à 90 - 100 %. Pendant la réaction, le produit final précipite peu-à-peu. Après réaction complète, le mélange est évaporé sous pression réduite. Le résidu cristallin est digéré avec de l'eau 15 chaude pour éliminer des sous-produits, le produit final est filtré et purifié, si cela est désiré, soit par recristallisation, soit par chauffage à reflux dans l'éthanol. Selon un autre mode de réalisation préféré du procédé de l'invention, un composé de formule générale (II) est ajouté à un mélange de 3 moles d'hydrazine hydratée à une concentration de 90 à 100 % et de diméthylformamide à 5 - 10 C, et le mélange réactionnel est conservé au froid. Après addition d'eau, le produit précipite à partir de 'la solution. Cette masse cristalline est lavée à l'eau 25 pour éliminer les sousproduits et, si cela est désiré, elle est purifiée par recristallisation ou chauffage à reflux avec de l'éthanol. Les composés de départ de formule générale (II) appliqués dans le procédé de la présente invention, 30 sont des dérivés en partie nouveaux et en partie connus. Les nouveaux composés peuvent être préparés selon des procédés publiés dans la littérature: Khim. Geterosikl. Soedin. 1970, 1308 C C.A. 74, 76293 (19717, ibid. 1973, 568, 1458 (C.A. 79, 18629 (1973), 80, 70649 (1974)]. Les nouveaux composés de formule générale (I) de la présente invention possèdent d'intéressants effets inotropes positifs (cardiotoniques), qui sont conformés dans les expériences in-vivo effectuées selon les méthodes suivantes. Les composés connus, l'isoproterenol ( chlor5 hydrate de Nisopropyl-nor-adrénaline) et l'amrinone (inocor: 5-amino-3,4'-dipyridyl6(1H)-one) ont servi de composés de référence. METHODES: A) Méthode "à l'indicateur d'effort" chez des chats 10 anesthésiés à poitrine ouverte. Des chats mâles et femelles ont été anesthésiés avec un mélange 1: 5 de chloralose-uréthane et une respiration artificielle a été instauréepar l'intermédiaire d'une canule trachéale avec un respirateur Harvard 665 A. 15 Après ouverture de la poitrine et du péricarde, un indicateur d'effort a été suturé sur la surface épicardiale du ventricule gauche selon la méthode de Walton and Brodie J. Pharmacol. Exp. Ther. 90, 26 (1947)7, et la force de contraction du myocarde (MCF) a été mesurée. La pres20 sion sanguine artérielle a été surveillée en continue pao un électromanomètre, par l'intermédiaire d'un cathéter inséré dans l'artère fémorale et réuni à un transducteurStatham P 23 Db. Le rythme cardiaque a été suivi en continu par un pulsotachymètre. Les composés d'essai ont été ad25 ministrés par voie i. v. par une canule veineuse. Quinze minutes avant chaque expérience, la réactivité du coeur du chat a été contrôlée par une application i. v. de 0,2 >g/kg d'isoprotérénol. Dans ces expériences, l'isoprotérénol n'avait pas le rôle du composé de référence usuel. 30 I1 a été utilisé en partie pour vérifier la sensibilité du système d'essai et en partie pour évaluer l'efficacité des composés d'essai. L'efficacité relative des composés d'essai a été exprimée par comparaison de l'effet induit sur la MCF par 5 mg/kg i. v. du composé d'essai, à celui que produit 0,2 yg/kg i. v. d'isoprotérénol chez le même dct. Les valeurs obtenues sont de bonnes indications inotrope positif d'un composé dans la mesure o bilité individuelle des animaux peut être ainsi Les résultats sont présentés dans le Tableau I. TABLEAU I de l'effet la sensiexclue. Composé Dose Efficacité relative Durée de HR P PA Exemple i.v. par rapport à l'iso-l'effet min. igmn N mg/kg protérenol min. 1 5 2t04 50 + 40 -35 2 5 1,56 14 +35 -33 4 5 0,25 2 + 5 +23 6 5 1,14 8 +55 -26.6 7 5 4t00 80 +70 Amrinone 5 1t50 > 60 +40 -2893 Isoprote- 0.2 pg/kg 1 4,76 +44,5 -33i05 renol HR: changement du 25 PA: changement de mique. rythme cardiaque la pression sanguine artérielle systê- B) Evaluation chez des chiens anesthésiés à poitrine ouverte. La force myocardique 30 la procédure décrite dans A) et coronaire ont été suivis par un que. (MCF) a été mesurée selon les changements du débit débitmètre électromagnéti- Le composé de l'Exemple 1 a été administré i.v. à des doses de 0,25, 0,5 et 1,0 mg/kg et les résultats sont fournis dans le Tableau Il. L'effet d'accroissement de la MCF dépendait de la dose en ce qui concerne à la fois le niveau et la durée de l'action, tandis que le débit coronaire n'était que modérément augmenté. La MCF et les effets coronaires obtenus avec une dose de 2 mg/kg i.v. d'amrinone, utilisé comme substance de référence, ont été déjà atteintes avec des doses du composé de l'invention aussi faible que 1 mg/kg. Le composé de l'invention présente un avantage spécifique en ce que les changements induits dans les pressions sangui10 nes systolique et diastolique n'ont pas réussi à dépasser %. L'action bénéfique du composéde l'invention dans une maladie cardiaque ischémique, est un avantage supplémentaire de la molécule. Une ischémie myocardiaque a été induite par compression du segment descendant de l'artère coronaire gauche. L'activité d'augmentation de la MCF exercé par le composé de l'Exemple 1 a pu être mesurée même pendant la reperfusion (après arrêt de la compression). C) Evaluation chez des chats conscients, pourvus de canule de façbn permanente. L'expérience a été réalisée selon la méthode Rabloczky and Mader ("Measurement of Systemic and Pulmonary Arterial Pressure in Conscious Animals", lecture at the Congress of the International Union of Pharmacologists, Budapest, 1980) ou une modification de celle-ci. L'aorte et l'artère pulmonaire ont été cathét4risées chroniquement pour la mesure des pressions artérielles. Dans la modification, le ventricule droit a été aussi cachétérisé pour la détermination de la valeur dt/dt, c'est-à- dire la max MCF. Le composé de l'Exemple 1 a été administré par voie 30 orale à des doses -de 1 et 2 mg/kg. Ces doses n'ont pas réussi à induire de quelconques.changements notables de la pression sanguine systolique ou diastolique des animaux ou de leur rythme cardiaque. L'effet d'augmentation de la MCF développé en 15 à 30 minutes, a persisté à ce niveau 35 Slgnilicatit pendant 60 à 90 minutes supplémentaires. L'aûg- mentation du pic de la MCF s'élevait a 20 - 25 %. Les expériences suivantes in-vitro ont été réalisées pour prouver des effets inotropes directs. D) Le composé de l'Exemple i a induit un effet 5 inotrope positif dépendant de la dose dans le muscle papillaire ventriculaire droit isolé électrostimulé de lapinso Une dose aussi faible que 10 5M induisait déjà une réponse significative, tandis qu'une dose de 5.10 4M a induit une augmentation de 200 %. E) Le composé de l'Exemple 1 a induit une augmentation de la MCF dépendant de la dose dans la préparation d'atrium gauche isolé électrostimulée de lapin. Dans la préparation non-stimulée (atrium droit), on a constaté une augmentation modérée de 15 % du rythme cardiaque. Selon les données des Tableaux I et II, les composés de l'Exemple 1 et 7 de la présente invention se sont révélés être les plus efficaces. Ils ont atteint ou même dépassés l'activité du composé de référence, liamrinone. Dans le domaine des études biochimiques, ils exercent un 20 effet inotrope positif en inhibant des phosphodiesterases. 0% Oxi a% ú i'll- IdOl.- 9 01- 6'!!- (;Y- 9'Liq' 86 i p- - f9,::t{: 0 0i 9o. O Z't X Mx iSzz sI -l----66--- lloulilLiv - -- -- ------ - ------ - -------617 --------- --------7- -------- -- -T-7---- - ---- - ------ --------...------t--- f...----- i-'-- - -- - - P. -- f. ci- ------i__-__OJ! T- 8*ú '! fi'ú lO- L40I- t t {;"'I l[dZ- L'61t x O;Zt ' xx o 6Et B64 6'9 S'9 t 01SO I _________--T - - -!-179 t-819- - - ap 9sodwoD e'idt 9s45l ô MILTz X6'5ú s' W! 0o s a O!i w( o ci 8J 9 L Tloi- f60 - '-- l'- - S O' s'iT oz 84PIt B Ioc4 XE&+ x96; + Ip so - o' xú6c 96S K6'>3 t 01 9;'O.,Td axs.N _ _ -9 -- 7 =--'=-617Lf-7- - ---- - --- - -O---f-- a oIo P tIf 5 51t 5I Et xo4S9 9 6 OSiv COI 9 s I'' a dwx a I Z"__ ' _ _..... -- --:......Z';Y -....5' _-.-.. E'---..-'--C % ua sdwa à np uoT;:6uo4 ua 0uwebuPqD a ald4waeXl b Zil. s sd G axe MO qz XX9 6z OIS 9' p qsodmozD - ' ' -' - '-' - -5i -- ------------ ---EI9.a z 84J2 6/12[ OO[ [ sz O a2l euoloD Ulna oz 'u!na I 'ulm Ol ' ul z T 'ulna;, : 'ul I;k 'ugh T:O 'a'l % ua sdwaq np uoTqauoj ua quawlabuuqD au aqteu / j 'aqlaanO auT.ZnTolCI 'SPTS9-4XaUL sutqD sop) zo4q JuouaUWe.[ ap 4J l > ldwoxat op gsodwoa I iflV û 1V& np uoL 4LentuLa o 0% Ln CM -0 > d x 0'0 > d x o ààZ à - 9 6.- 018 L'e-î OT Ii 0 o- 0Df XX tZ,K1D,x'v _X.s = G 8Os o (p14TflS) II LnvI'IUVL Selon un autre aspect de la présente invention, on fournit de nouvelles compositions pharmaceutiques contenantà titre de produit actif, au moins un composé de formule générale (I) avec un ou plusieurs supports, diluants et/ou additifs pharmaceutiques. Les compositions pharmaceutiques peuvent contenir aussi d'autres substances biologiquement actives, en particulier d'autres agents cardiotoniques. Les compositions pharmaceutiques peuvent être 10 formulées dans des formes solides (comme des comprimés, des comprimés enrobés, des capsules, etc) ou liquides (comme des solutions, des suspensions, des émulsions, etc). Les supports peuvent être ceux qui sont utilisés généralement en pharmacie (par exemple l'amidon, le stéarate de magnésium, le carbonate de magnésium, le talc, la stéarine, la gélatine, le lactose, la cellulose, le carbonate de calcium, une polyvinylpyrrolidone, l'eau, un polyalcoylèneglycol, etc). Les compositions peuvent aussi contenir des additifs convenables (par exemple des agents de suspension, 20 d'émulsion, de stabilisation, tampons, etc) et d'autres agents intéressants-du point de vue thérapeutique. Les compositions peuvent être présentées sous la forme de préparations administrables par voie orale ou parentérale. Les compositions pharmaceutiques peuvent être préparées par des méthodes généralement appliquées dans l'industrie pharmaceutique. La dose quotidienne des nouveaux composés selon la présente invention est d'environ 10 à 420 mg, la dose précise dépendant du poids du corps, de l'àge et de l'état général du patient. - Les composés de l'invention ont été identifiés au-delà de l'analyse élémentaire, par spectroscopie RMN pour H et IR et spectrométrie de masse. On a constaté que les protons de la liaison oléfine sont soit exclusi- vement soit principalement en position trans. L'invention est davantage illustrée par les Exempies non-limitatifs suivants EXEMPLE 1 1-(4-Hydroxystyryl)-4-méthyl-7,8-diméthoxy-5H-2,3-benzodiazépine 4,5 g (10,6 nM4) de perchlorate de 1-(4-hydroxystyryl)-3-méthyl-60 7-diméthoxy2-benzopyrylium (p.f. 298 à 300 C d.) sont mis en suspension dans 90 ml d'éthanol à 99,5 %, additionnés de 1,6 ml (31,8 mM) d'hydrazine hydratée à 100 % et la solution est agitée pendant 2 heures à la température ambiante. Après évaporation sous pression réduite, le résidu est mis en suspension dans 100 ml d'eau, filtré, lavé 3 fois avec 5 ml d'eau, le produit brut est 15 remis en suspension dans de l'eau chaude, filtré, lavé 3 fois avec 5 ml d'eau et séché à 80 - 100 C. Rendement 2,65 g, p.f. 205 à 207 C (décomp.). Ce produit brut est purifié par chauffage & reflux dans 12 ml d'éthanol et séchage ultérieur. Rendement: 2,37 g (66,4 %), p.f. 209 20 à 211 C (décomp.). Les composés de formule générale (I) préparés selon le procédé de l'Exemple 1 sont énumérés dans le Tableau III. TABLEAU III Exemple Position du R Rende- p.f. (C) N groupe OH merit % No groupe OH R R' R2 R3 ment % (Solvant de recristallisatio1 2 2 H H Me Me 35,3 227-229 d. (éthanol à 50 > 3 2 3-méthoxy H Me Me 11,0 180-182 (éthanol à 50 t) 4 2 5-chloro H Me Me 75,7 238-240 d. (éthanol) 2 5-bromo H Me Me 59,4 232- 234 d. (éthanol) 6 3 H H Me Me 73,5 220-222 d. (éthanol) 7 4 H H Et Et 60, 0 191-193 d. (éthanol-eau) 8 4 H Et Me Me 65,4 195-197 d. (éthanol I 50 %) d..- décomposition i-J w r'j o o o >4 EXEMPLE 9 1-(4-Hydroxystyryl)-4-méthyy-7,8-méthylènedioxy-5H-2 Zbenzodiazépine Un mélange de 5 g î!2,3 mM) de perchlorate de 1-(4-hydroxystyryl)-3-méth'lr7-eéthylnedioxy-2-benzoPyrylium (p.f. 306 à 308 C d.), de 100 ml d'éthanol à 99,5 % et de 1,85 ml (36,9 -re)d'hydrazine hydratée à 100 %, est chauffé à reflux pendant une heureo Le produit fina cz=mmence déjà à précipiter dès les premières minutes de réac10 tion. Le mélange est évapore sous pression réduite, le résidu partiellement cristallin est mis en suspension dans 100 ml d'eau, les cristax sont filtrés, lavés avec 3 fois 10 ml d'eau, le prcduit brut est remis en suspension dans 300 ml d'eau chaude, agité pendant 30 minutes, fil tr a chaud, lavé avec 2 fois 20 ml d'eau chaude et séché à 80 1000 C. Rendement de 2,18 g= p.f. = 243 à 248 C d. Pour une purification supplémentaire, ce produit est chauffe à reflux dans 10 ml d'éthanol à 99,5 %, filtré après re- froidissement, lavé avec 3 fois 2 ml d'éthanol et séché Rendement de 2,08 g (52s,8 %), p.f. = 246 à 248 C (dêcomm.). EXEMPLE 10 1-(3-Méthoxy-4-hydroxystyryrl)-4-méthyl-7,8-méthylened&ox--5H-2,3benzodiazépine Un mélange de 12r5 ml de diméthylformamide et de 2,1 ml (42 mM) d'hydrazine hydratée à 100 % est refrcidi à 5 - 6 C avec de l'eau glacée, puis 6,14 g (14 mM) de perchlorate de 1-(3-méthoxy-4hydroxystyryl -__-r hy'6,7-méthylènedioxy-2-benzopyrylium (p.f. = 300OC carbonisation) sont ajoutés sous agitation pendant 15 minutes. La 30 solution orange est agitée pendant 15 minutes de plus, puis 12,5 ml d'eau distillée sont ajoutés sous refroidissement, ce qui favorise la précipitation du produit final. La bouillie de cristaux est conservée pendant 12 heures à 5 C, filtrée, lavée avec 3 fois 20 ml d'eau distillée 35 et séchée à 80 - 100 Co Rendement de 4,81 g, p.f. = 210 à 213 C, d. Pour une purification supplémentaire ce produit est chauffé à reflux avec 24 ml d'éthanol & 99, 5 %, refroidi, filtré, lavé avec 3 fois 20 ml d'éthanol et séché. Rendement de 4,59 g (93,7 %); p.f. = 214 & 216 C (décomp.). La procédure décrite dans l'Exemple 10 est appliquée pour préparer les composés suivants: EXEMPLE 11 1-(3-Méthoxy-4-hydroxystyryl)-4-méthyl-7,8-diméthoxy-5Lî10 2,3benzodiazépine Rendement 87,2 %, p.f. 192 à 193-C d. (éthanol). EXEMPLE 12 1-(3-méthoxy-4-hydroxystyryl)-4-méthyl-7,8-diéthoxy-5H2,3-benzodiazépine Rendement 78,2 %, p.f. 190 à 191 C d. (éthanol). EXEMPLE 13 Préparation de comprimés Composition (pour 1000 comprimés) g Composé décrit dans l'Exemple 1 10 Lactose 185 Cellulose microcristalline 25 Talc 5 Amidon de mais 73 Stéarate de magnésium 2 TOTAL 300 Les composants ci-dessus sont mélangéshomogénéisés et empastillés en comprimés contenant 10 mg de pro30 duit actif chacun.- EXEMPLE 14 Préparation d'une solution injectable Composition (pour deux litres de solution) Composé décrit dans l'Exemple 1 2 g Chlorure de sodium 20 g Eau pour préparations injectables q.s.p. 2000 ml La solution est introduite dans des ampoules contenant 2 ml de solution chacune. RÉPUBLIQUE FRAN AISE INSTITUT NATIONAL DE LA PROPRIÉTÉ INDUSTRIELLE PARIS 2 599 035 Ce numéro n'a donné lieu à aucune publication LO o un O oL N cc> M. REVENDICATIONS 1.- Dérivés de l-(Hydroxystyryl)-5H-2,3-benzodiazépine représentés par la formule générale (I): R RO- A..CH- - - 3 N C. Nx R OH dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou d'halogène ou un groupe alcoxy en C1 à 4 ' R est un atome d'hydrogène ou un groupe alcoyle en C 4 t R et R sont identiques et représentent un groupe alcoyle en C1 à 4 ou forment ensemble un groupe méthylène. 2.- Composés suivant la revendication 1, dans lesquels R et R sont chacun un atome d'hydrogène et R 30 et R3 représentent chacun un groupe alcoyle en C1 4 - 3.- 1-(4-Hydroxystyryl)-4-méthyl-7,8-diméthoxy5H-2,3-benzodiazépine. 4.- Procédé de préparation des dérivés de 1(hydroxystyryl)-5H-2,3benzodiazépine représentés par la 35 formule générale (I): R4 I /CH3 RO CH-C% N C ( R ON dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou d'halogène ou un groupe alcoxy en C1 à.4 ' R1 est un atome d'hydrogène ou un groupe alcoyle en C 2 3 -1 à R et R sont identiques et représentent un groupe alcoyle en C1 à 4 ou forment ensemble un groupe méthylène,25 caractérisé par la réaction d'un perchlorate de 2-benzopyrylium de formule générale (II): RO CH tR0 o clo,., - C (1) R OH i 2 3 dans laquelle R, R, R et R sont tels que définis à pro20 pos de la formule (I), dans un solvant, avec de l'hydrazine hydratée. 5.Composition pharmaceutique exerçant un effet inotrope positif, contenant à titre de composant actif une quantité efficace d'au moins un composé de formule i 2 3 générale (I), o R, R, R et R sont tels que définis dans la revendication 1, et éventuellement d'autres substances biologiquement actives, avec un ou plusieurs supports, diluants et /ou additifs pharmaceutiques. 6.- Procédé de préparation d'une composition pharmaceutique possédant un effet inotrope positif, caractérisé par le mélange d'au moins un composé de formule - i 2 3 générale (I), o R, R, R et R sont tels que définis dans la revendication 1, et éventuellement d'autres substances biologiquement actives, et d'un ou de plusieurs 35 supports, diluants et/ou additifs pharmaceutiques.