FR 2573075 A1 19860516 FR 8414089 A 19840914 La présente invention a pour objet de nouvelles (pyridyi-2)-1 pipérazines substituées en position 4 et leurs sels, ainsi que le procédé de preparation et l'application en thérapeutique de ces composés. Les nouvelles pipérazines selon l'invention répondent plus préci- sément à la formule générale: N N N-R (I) dans laquelle R représente: - un groupement cycloalkylméthyle possédant de 4 à 7 atomes de carbone; R, - un groupement de structure -A-N R1 ou -A- symbolise une chaîne hydro- R2 carbonée, linéaire ou ramifiée, comportant jusqu'à 4 atomes de carbone et R1 et R2 désignent chacun un groupe alkyle de 1 à 4 atomes de carbone ou forment conjointement avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, un radical hétérocyclique choisi parmi les suivants: pyrrolidino, pipéridino, perhydroazépino, morpholino, diméthyl-2,6 morpholino; - un groupement anilinocarbonylméthyle dont le noyau phényle est éventuel- lement substitué par un ou plusieurs atome(s) de fluor ou par un ou plu- sieurs groupe(s) trifluorométhyle; ou - un groupement benzyle substitué par l'enchaînement méthylènedioxy ou par un ou plusieurs groupe(s) méthoxy et éventuellement également par un atome d'halogène. La présente invention a en outre pour objet, les sels d'addition des composés (I) avec les acides minéraux tels que i'acide chlorhydrique, L'acide sulfurique et l'acide phosphorique ou avec les acides organiques tels que l'acide oxalique, l'acide maléique, l'acide citrique et l'acide méthanesulfonique. Entre également dans le cadre de la présente invention le procédé de préparation des composés (I) et de leurs sels, procédé qui consiste à conden- ser la (pyridyl-2)-1 pipérazine de formule: C N v(TT) avec un dérivé de formule: R - X (III) ou R a la même signification que dans la formule (I) et X représente un groupe électrophile bon partant, notamment un atome de brome ou de chlore ou un groupe mesyloxy ou tosyloxy. Cette condensation est de préférence réalisée à chaud dans un sol- vant organique inerte tel que l'alcool isopropylique, l'acétate d'éthyle ou le diméthylformamide. On peut par ailleurs opérer en présence d'un agent de neutra- lisation des acides tel que le carbonate de sodium ou de potassium par exemple. Quant aux sels des composés (I), ils sont obtenus de manière tout à fait classique par réaction avec un acide organique ou minéral, de préférence au reflux dans un solvant inerte approprié tel que l'acétone ou le méthanol par exemple. La préparation ci-après est donnée à titre d'exemple pour illustrer l'invention. Exemple (Pyridyl-2)-1 cyclopropylméthyl-4 pipérazine (1) Une solution de 25 g (0, 153 mole) de (pyridyl-2)-1 pipérazine dans 45 ml de diméthyl formamide est additionnée de 16,2 g (0,153 mole) de carbonate de sodium. La suspension est agitée fortement et chauffée à 60 C. On ajoute alors goutte à goutte 20,7 g (0,225 mole) de chlorométhylcyclopropyle, puis on chauffe pendant 4 heures à 80 C avec agitation. Après refroidissement, 200 ml d'eau sont ajoutés puis la phase aqueuse est extraite trois fois avec 100 ml d'éther éthylique. Les phases éthérées réunies sont lavées, séchées sur sulfate disodique anhydre puis concentrées à sec sous vide. On obtient ainsi 30 g (ren- dement = 90 %) d'une huile jaune constituée par le composé attendu. Monooxalate (la) Le monooxalate est obtenu par réaction de la (pyridyl-2)-l cyclopro- pylméthyl-4 pipérazine base avec un équivalent d'acice oxalique par chauffage au reflux pendant 1 heure dans l'acétone. Ce sel se présente après cristallisation dans l'acétonitrile, sous la forme de cristaux blancs fondant à 198 C. Bis chlorhydrate (lb) Le bis chlorhydrate est obtenu par réaction de la (pyridyl-2)-1 cyclopropylméthyl-4 pipérazine base avec une solution d'acide chlorhydrique dans le méthanol. Ce sel présente, après cristallisation dans l'alcool isopro- pylique, un point de fusion de 265 C. Les composés répertoriés dans le tableau I ci-après sont préparés par mise en oeuvre de conditions opératoires analogues à celles mises en oeuvre dans l'exemple ci-dessus. TABLEAU I N N-R, Hr bVUD"néo Conditons $ Sof vent Rende- Fobmue de. R HY de - de men b.tuA éu4ion;. : * DMF,reflux Acitrile (1): 2 Cn2 -,5 17h 179 méU'ol. (1) 95 C17H24N306 COOH)2 RX=RBr 2 DMF, reflux :3 CH2 1 (COOHXh =Rr 178 Acétonitrile 90 C20H29N308 X)2 R RBr._ CH(CH3)2 3 ' Reflux,17h 4 ls)4CH () 2(CO) isopropanol 157 Ethanol à 9 95 C23H36N4012 "2) 2"CH (CH3)2 (COOH)21 RX = RCI 2H6l1 2 Reflux, 17h (CH2)2NC GtOOH)2 isopropanol 204 Ethanol à 95 90 C19H28408- 26 2NRX = t 94RCIC24 3 Reflux,17h (CH2) 2N 62 (CH2) N 3 COOH) isopropano l 200 Ethanol à 80r 90 C2zH34N4012 920CH233N - (COH)2 RX = RC1 C.2 H5 3 Reflux,17h 7 (CH N] 3N CDO isopropanol 195 Ethanol à 9o 90 C22H34N4012 233 C2H5 CH2 R=CRX = RCl. 3 Reflux,17h NO(CH2)3 isopropano 188 Ethanol à 5or95 C22H32N4012 (CH2)3 COOH)2RX = RCl 2 Reflux,.17h 9 g CH isopropanol 172Ethanol à 95 90 C21H32N408 COOH)2 RX = RCl ]Refl ux; 17h (H N sopropano 187 Ethanol à 95 90 C20H32N404 [çOOH) 2 RX RCI TABLEAU I (suite) NuumAo conditionsot Sotvant Rende R om:Yde oFdeoAmute de R HY de 6uzion cniatfi- m bu:te compo4. ItacLUon Vl C) C6ation4d 1 2 Reflux, 17h il (CH2)3NJO OOH) 2 Isopropanol196 Ethanol à 9570 C20H30N409 O0H)2 PRX = RC1 r- CH3 2 Reflux, 17h 12 (CH2)3N CH) isopropanol201 Ethanol à 50095 22H34N409 \--= CH3 OH)2RX=RCI CHCH 3 Reflux, 17h 1 C CH3CH OH isopropanol163 Ethanol à95 90 C22 34 4 12 3 'CH2-N-C2H5.C0H)2 RX = RC 1 3 1 (il ciiF 1 Reflux 4h Ethanol (1): 14 2 COOH)2 DMF 158 Acêtonitrile70 C19H21FN405 MF- lR=RC(1) F 1 Reflux,4h Méthanol (1): C00H)O20 011,eMFRCl 199 Acétonitrile70 C19H20F2N405 _ -S 'OO) RX = RC1 (1) 2 Reflux 4h Méthanol (1): 16 c F3' 00H)2 DMF 183 Acétonitrile70 C22H23F3N405 :RX = RC1 (1) C 0CH3 2 Reflux 4h 191 Acêtonitrile95 17 OH0CH3 DMF C23H29N3011 3 COOH)2!RXDM FC H -1 18CH 2 0 i Reflux, 3h 182@ > 'COOH)2 2 el MF h213 Acétonitrile95 C19H20ClN 3e6 _ H0 RX = RC 1 Les composés (I) selon l'invention et leurs sels pharmaceutiquement acceptables ont été testés sur l'animal de laboratoire et se sont montrés doués d'activités pharmacologiques et notamment d'une activité cardiotrope en particu- lier inotrope positive et bradycardisante. A/ Mise en évidence in vitro de l'effet bradycardisant L'effet bradycardisant a été révélé par l'étude de l'action chrono- trope sur l'oreillette droite isolée de Cobaye. Des Cobayes de sexe indifférent, ont été assommes et saignés, l'oreillette droite a été rapidement prélevée et aussitôt immergée dans une solution de Krebs-Henseleit, thermostatée à la température de 36 C - 0,5 C et aérée par un mélange de 02 et CO2 (95 % et 5 %). La préparation a été reliée à un myographe isométrique (F.50 Narco) puis à un système d'enregistrement (Psy- siograph M-K III - Narco). Un délai de 60 minutes a été nécessaire pour assurer la stabilité d'action chronotrope. Les composés (I) selon l'invention et leurs sels pharmaceutiquement acceptables ont été ajoutés aumilieu nutritif à la concentration de 1.104 g.ml-1 et laissés en contact avec l'oreillette 30 minutes. L'action a été appréciée par le pourcentage de diminution du nombre de battements/minutes (batt./mn.) par rapport au nombre de batt./mn. avant l'administration du composé à tester. Les résultats ont été répertoriés dans le tableau II suivant. TABLEAU IIl Activité bradycardisante des composés selon l'invention étudiée sur l'oreillette droite isolée de Cobaye Numéro du Diminution de l'effet chroiotrope, composé testé à la concentration de 1.10- g.ml-' % la 24 2 7 3 13 4 9 19 6 Arythmie 7.16 8 20 9 17 0 11 Arythmie 12 0 13 Arythmie 14 18 0 16 18 171 31 18 11 B/ Mise en évidence in vitro et in vivo de l'effet inotrope positif 1/ Etude in vitro ______________ L'étude in vitro a été faite sur la force contractile de l'oreil- lette gauche isolée de Cobaye. La technique utilisée était celle de P. LUMBEY et Coll. (Cardiovascular Research, II, 17-25, 1977). Elle a permis l'étude de la fonction inotrope a1 cardiaque. Des cobayes de sexe indifférent sont assommés et saignés, l'oreil- lette gauche étant rapidement prélevée et aussitôt immergée dans une solution de Krebs-Henseleit, thermostatée à la température de 36 C et aérée par un mélange de 02 et de CO2 (95 % et 5 %). La préparation a été reliée à un myogra- phe isométrique (F-50 Narco), puis à un système d'enregistrement (Physiograph M-K III Narco). Pendant toute la durée de l'essai, l'oreillette a été entraînée électriquement par un neurostimulateur (Equipement Industriel II) à la fréquence de 90 à 120 batt./mn. Les agonistes, c'est-à-dire le produit de référence et les composés selon l'invention,ont été ajoutés aumilieu nutritif suivant la méthode cumulati- ve de VAN ROSSUM (Arch. Inter. Pharmacodyn., 143, 299-330, 1963). La quantification de l'effet inotrope positif effectuée par le cal- cul du pD2 [d'après E.J. ARIENS et J.M. VAN ROSSUM - Arch. Intern. Pharmacodyn. CX, n 2, 2, 19 et Arch. Inter. Pharmacodyn. 143, 299-330, 1963] qui caractérise l'affinité du composé testé pour les récepteurs ainsi que l'activité intrinsèque (4) qui définit la puissance relative de l'agoniste par rapport à un produit de référence (DOPAMINE), ont été déterminées. Les résultats obtenus à titre d'example avec le composé la selon l'invention, ont été réunis dans le tableau III suivant. TABLEAU III Activité inotrope du composé la sur l'oreillette isolée de Cobaye Produit PD2 (a) Kb (b) (c) la 4,68 - 0,42 2,09.10'5M 0,60 - 0,30 DOPAMINE -6 (produit de réfé- 5,13 - 0,18 7,41.10 M 1,00 rence) (a) pD2= log. négatif de la concentration molaire de l'agoniste qui produit un effet égal à 50 % de son action maximum. (b) Kb = concentration molaire de l'agoniste qui produit un effet égal à 50 % de son action maximum. (c) a =rapport entre l'effet maximum d'un agoniste et l'effet maximum de l'agoniste de référence ( = 1). 2573075- 2/ Etude in vivo On a par ailleurs procédé à l'étude de l'effet inotrope positif des composés (I) selon l'invention et de leurs sels pharmaceutiquement accep- tables sur la dynamique cardiaque de l'animal anesthésié et sur l'animal éveillé implanté chroniquement. a. Etude sur le chien anesthésié au NEMBUTAL Deux protocoles d'étude ont été réalisés, l'un sur le chien à thorax ouvert, l'autre sur le chien à thorax fermé. Les pres- sions intraventriculaires gauches (PIVG) et aortiques (sus sigmoúdiennes) (PAO) ont été mesurées avec des microcapteurs haute fidélité (Millar 5F), la dérivée première de la Pression Ventriculaire Gauche (dP/dt) a été enregistrée ainsi que l'élec- trocardiogramme. La PCO2 alvéolaire instantanée a été mesurée en continu. Enfin, divers débits sanguins ont été mesurés, à savoir i5 le débit fémoral et carotidien chez les animaux à thorax fermé, aortique et coronarien chez ceux ou une thoracotomie a été pra- tiquée. Ces divers débits ont été mesurés par la méthode électro- magnétique. - RESULTATS Etude chez l'animal à thorax ouvert A titre d'examples, deux doses du composé la ont été testées: 0,5 et 1 mg.kg1 i.v. Les résultats sont répertoriés dans le tableau IV ciaprès. Pour la dose de 1 mg.kg 1 i.v., le débit aortique s'accroît signi- ficativement de 21 % et il en est de même du volume d'éjection systolique qui s'accroit de 16 %, l'acmé de l'action se situant 45 minutes après l'injection. Une augmentation non significative de 15 % de la dP/dt est observée. Parallèle- ment, la pression télédiastolique ventriculaire gauche diminue significativement (28 %). Les autres paramètres mesurés ne varient pas significativement. -1 Pour la dose de 1 mg.kg i.v., les résultats sont approximativement similaires à ceux observés à la dose inférieure, à l'exception de la dP/dt posi- tive qui s'accroît significativement (+ 31 %) durant les 90 minutes qui suivent l'injection. - i Etude chez l'animal à thorax fermé Une analyse de larelation dose/effet sur trois chiens (voir résul- tats répertoriés dans le tableau V ci-après) confirme les résultats obtenus chez le chien à thorax ouvert pouar le composé la. L'acmé de l'effet inotrope positif du composé la apparait dès la dose e 0, mg.k -1, dose de 0,5 mg.kg- i.v., l'augmentation de la posologie n'accroit pas l'effet. L'activité inotrope positive chez l'animal à thorax fermé est plus intense pour -1 une posologie de 0,5 mg.kg que chez l'animal à thorax ouvert; il y a une aug- mentation de la dP/dt + maximale de 52 %. La durée d'action de l'effet inotrope 0 positif excède 3 heures. Il est important de souligner que le composé la possède un effet analeptique respiratoire net et durable. - 25730?75 TABLEAU IV Effet du composé la sur l'hémodynamique cardiaque chez le chien anesthésié (nombre d'animaux utilisés pour le test: 3) Animaux à thorax ouvert Modification Modification 0,5 mg.kg-1 i.v. (en%) lmg.kg-li.v. (en %) D.A.0. (a) + 21 + 23 V.E.S. (b) + 16 + 13 dP/dt+ (c) + 15 + 31 TABLEAU V Effet du composé la sur l'hémodynamique cardiaque chez le chien anesthésié (nombre d'animaux utilisés pour le test: 3) Animaux à thorax fermé Modification Modification 0,5mg.kg-1 i.v. (en%) 2mg.kg- 1i.v. (en %) P.Ao m (d) + 11 + 8 (c) dP/dt+ (c+ 52 + 28 PtdVG (e) 35 -31 (a) D.A.0.: Débit aortique (b) V.E.S.: Volume d'éjection systolique (c) dP/dt+: Dérivée première de la pression ventriculaire gauche (d) P.Ao m: Pression Aortique moyenne (e) Pression Télédiastolique-Ventriculaire Gauche b. Etude chez le chien éveillé chroniquement implanté Les composés ont été testés par voie orale et intraveineuse sur des chiens préalablement implantés, avec une sonde de pres- sion placée dans le ventricule gauche (Janssen) et un capteur de débit Doppler placé sur l'aorte, les essais étant réalisés au minimum 8 jours après l'implantation. RESULTATS Voie orale (voir tableau VI) Le composé la a été étudié à deux doses: 5 et 10 mg.kg- (voie orale). On observe un accroissement des performances cardiaques traduit par l'augmentation de la dP/dt + (57 %), de la dP/dt+ (32 %), du débit aortique (27 %). Parallèlement, la fréquence cardiaque s'accroit de 31 %. P Les résultats sont approximativement similaires pour les deux doses. Voie intraveineuse -1 Le composé la a été étudié à deux doses: 0,5 et 1 mg.kg 1. L'effet semble, dans ce cas, dépendant de la dose et se caractérise, comme pour la voie orale, par une augmentation des performances de la dynamique cardiaque, l'accrois- -1 sement de la dP/dt + atteignant 136 % pour la dose de 1 mg.kg TABLEAU VI Effet du composé la sur l'hémodynamique cardiaque chez le chien éveillé chroni- quement implanté (nombre d'animaux pour le test: 3) Chien non anesthésié Modification Modification chroniquement implanté 5 mg.kg- p.o. (en %) 10 mg.kg- p.o. (en %) (a) dP/dt + () + 57 + 55 D.A.0. (b) + 27 + 27 PIVG Syst. (c) + 15 + 26 F.C. (d) + 31 + 45 (a) dP/dt+: Dérivée Première de la Pression Ventriculaire gauche (b) D.A.0.: Débit Aortique (c) PIVG Syst.: Pression Intraventriculaire Gauche systémique (d) F.C.: Fréquence Cardiaque La toxicité des composés selon l'invention a également été étudiée. Il s'agit plus précisément de l'étude de la toxicité par administration unique qui a été réalisée pour tous les composés, chez la souris (5 animaux par lot) de sexe mâle, E.O.P.S. de souche SWISS. Les composés à tester ont été solubilisés dans une solution aqueuse à 9c/oo de NaCl, à des concentrations variables et les solutions obtenues ont été injectées par voie veineuse à raison de 10 ml.kg-1 de poids corporel. L'administration a été faite en 20 secondes, les animaux étant gardés en observation clinique pendant une durée de 3 heures après l'amdminis- 3 tration, puis quotidiennement pendant 7 jours. Les doses létales 50 % (DL50mg.kg) ont été calculées par la méthode de Litchfield et Wilcoxon (J. Pharm. Exp. Therap., 96-99, 1949) à partir des diverses mortalités constatées. Les résultats de cette étude sont répertoriés dans le tableau VII. TABLEAU VII Toxicité par administration unique chez la Souris par voie intraveineuse N des DL50 mg.kg1-Ca) N des DL50mg.Icg lsaJSymptomatologie clinique (b) composés 95% limite confiance Symptomatologie clinique l47 4- 5- Sédation puis phénomène de Straub, la 47 (43 - 52 _ cris, convulsions. 2 67 ( 58 - 78) - Tonneaux, convulsions, salivation. 3 81 ( 74- 89) - Hypersensibilité, stéréotypie. 4 95 ( 87 -104) - Cyanose, sursauts. 142 (117 -172) - Exophtalmie, apnée, sursauts _.- ......._, 6 84 ( 78 - 91) - Convulsions, sauts, phén. de Straub. 7 96 ( 81 -113) -Cyanose, apnée 8 142 (129 -156) - Polypnée, agitation, stéréotypie 9 117 (102 -135) - Phén. de Straub + convulsions. 74 ( 67 - 82) - Apnée, convulsions, hypersensibilité 12 149 (136 -163 Convulsions, phén. de Straub, tremblements, salivation. 13 76 ( 64 9)- 9 Hypersensibilité, exophtalmie, 7-90)- début de convulsions. 14 129 (118 -141) - Apnée, sédation 16 109 ( 99 -121) - Apnée, phén. de Straub, convulsions, tonneaux, salivation, lacrymation. 17 130 (122 -139) - Apnde, phén. de Straub, convulsions. D (a) DL cc(aZculZe par Za méthode de LitchfieZd et WiZcoxon. (b) Symptômes àZiniques observes d Za dose o iZ n'y a pas de mortaZité. L'étude pharmacologique ci-dessus montre l'intérêt thérapeutique des composés (I) et de leurs sels pharmaceutiquement acceptables. Ces composés et sels trouvent donc leur application en tant que médicaments pour l'homme et l'animal en particulier pour le traitement des maladies cardiaques et notamment des insuffisances cardiaques (défaillances et troubles caractérisés par un débit cardiaque trop bas). La présente invention s'étend par ailleurs aux compositions pharma- ceutiques contenant au moins l'un des composés (I) ou au moins l'un des sels d'addition d'acide pharmaceutiquement acceptablesde ces composés (I), ainsi qu'un ou plusieurs véhicule(s) pharmaceutiquement acceptable(s). Ces compositions peuvent être formulées notamment en vue de leur administration orale et se pré- senter alors par exemple sous forme de dragées, gélules, comprimés ou solutions buvables, ou en vue de leur administration parentérale et se présenter alors sous la forme de solutions injectables, les méthodes de préparation de ces diffé- rentes formes étant bien connues de l'homme de l'art. Les médicaments et les compositions pharmaceutiques selon l'inven- tion peuvent être administrées, en une ou-plusieurs prises, à des doses quoti- diennes correspondant à une quantité de principe(s) actif(s) pouvant aller, selon les cas, de 50 mg à 1 g. REVENDICATIONS 1. (Pyridyl-2)-1 pipérazines répondant à la formule générale: N N N - R- dans laquelle R représente: - un groupement cycloalkylméthyle possédant de 4 à 7 atomes de carbone; - un groupement de structure -A-N 1 ou -A- symbolise une chaîne hydro- R2 carbonée, linéaire ou ramifiée, comportant jusqu'à 4 atomes de carbone et R1 et R désignent chacun un groupe alkyle de 1 à 4 atomes de carbone ou forment conjointement avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical hété- rocyclique choisi parmi les suivants: pyrrolidino, pipéridino, perhydro- azépino, morpholino, diméthyl-2,6 morpholino; - un groupement anilinocarbonylméthyle dont le noyau phényle est éventuel- lement substitué par un ou plusieurs atome(s) de fluor ou par un ou plu- sieurs groupe(s) trifluorométhyle; ou - un groupement benzyle substitué par l'enchaînement méthylènedioxy ou par un ou plusieurs groupe(s) méthoxy et éventuellement également par un atome d'halogène; ainsi que leurs sels d'addition d'acide minéral ou organique. 2. Composés selon la revendication 1, pour lesquels R = cyclopropyl- méthyle, cyclobutylméthyle ou cyclohexyméthyle. 3. Composés selon la revendication 1, pour lesquels -A- est une chaîne -(CH2)2- et le groupe NR1R2 = N(iPr)2, pyrrolidino ou perhydroazépino. 4. Composés selon la revendication 1, pour lesquels -A- est une chaîne -(CH2)3- et le groupe NR1R2 = N(C2H5)2, pyrrolidino, pipéridino, perhydro- azépino, morpholino ou diméthyl-2,6 morpholino. 5. Composés selon la revendication 1, pour lesquels -A- est une chaTne CH(CH 3)-CH 2- et NR1R2 = N(C 2H5)2 (3) 2 1 2 (2 5)2 6. Composés selon la revendication 1, pour lesquels R est soit un groupement anilinocarbonylméthyle dont le noyau phényle porte un substituant fluor en position 3, ou deux substituants fluor respectivement en positions 3 et 5 ou un substituant trifluorométhyle en position 3, soit un groupement tri- méthoxy-3,4,5 benzyle ou un groupement chloro-2 méthylènedioxy-3,4 benzyle. 7. Médicament notamment à activité cardiotrope, caractérisé en ce qu'il est constitué par l'une des (pyridyl-2)-1 pipérazines de formule (I) objet de l'une quelconque des revendications précédentes ou par l'un des sels pharmaceutiquement acceptables de ces (pyridyl-2)-1 pipérazines. 8. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins l'une des (pyridyl-2)-1 pipérazines de formule (I) objet de l'une des reven- dications 1 a 6, ou aunmoins l'un des sels pharmaceutiquement acceptables de ces (pyridyl-2)-1lpipé- razines, en combinaison avec un véhicule phannaceutiquament acceptable. 9. Procédé de préparation des (pyridyl-2)-1 pipérazines et de leurs sels d'addition d'acide selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il con- siste à condenser la (pyridyl-2)-1 pipérazine de formule: N N N-H respectivement avec les composés de formule: R - X (III) o R a la même signification que dans la revendication 1 et X est un groupe électrophile bon partant, puis éventuellement à salifier les composés (I) ainsi obtenus. 10. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que X = Cl ou Br et en ce que l'on opère en présence d'un agent de neutralisation des acides et d'un solvant organique inerte.