FR 2581062 A1 19861031 FR 8606108 A 19860428 Acides B-lactame hydroxamiques O-sulfatés, à action thérapeutique Les dérivés de e-lactames de formule X R1-NH (C d'une action antibactérienne. Dans la formule I et dans l'ensemble de la description, les symboles ont les définitions ci-après. R. est un radical acyle; et n et m sont chacun, indépendamment, égaux à 1, 2 ou 3, et X est une liaison carbone-carbone saturée; n et m sont chacun, indépendamment, égaux à 1, 2, 3 ou 4, O O la somme n + m 0 R4 n + m 0 0 O 0O Il Il Il Il égaux à 1 et X est -S-CH2-S-, -S-CH2-S-, -S-CH2-S- ou 2 2 e l!2le R40 R4 0 0 -N-C-N- (o R4 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou aryle). On trouvera ci-dessous les définitions des différents termes utilisés pour décrire les e-lactames de cette invention. Ces définitions s'appliquent aux termes tels qu'ils sont utilisés dans l'ensemble de la description (à moins qu'ils soient limités d'une autre manière dans des cas précis) soit isolément soit en tant que partie d'un groupement plus important. Les termes "alkyle" et "alcoxy" désignent des radicaux à chaîne droite ou ramifiée. On préfère les radicaux ayant de 1 à 10 atomes de carbone. Le terme "alcanoyle" désigne des radicaux à chaine droite ou ramifiée. On préfère les radicaux ayant de 2 à atomes de carbone. Le terme "aryle" désigne un radical phényle éventuellement substitué par 1, 2 ou 3 atomes ou groupements amine, halogène, hydroxyle, trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone, alcanoyloxy, aminocarbonyle, ou carboxy. Le terme "acyle" désigne tous les radicaux organiques dérivant d'un acide organique (c'est-à-dire d'un acide carboxylique) par élimination du groupement hydroxyle. On préfère naturellement certains radicaux acyle, mais cette préférence ne doit pas être considérée comme une limitation du champ d'application de cette invention. Des exemples de radicaux acyle sont les radicaux acyle qui ont été utilisés dans le passé pour acyler les antibiotiques de la série des S-lactames, y compris l'acide 6-amino- pénicillanique et ses dérivés et l'acide 7-aminocéphalo- sporanique et ses dérivés; voir par exemple Cephalosporins and Penicillins, édité par Flynn, Academic Press (1972), la demande de brevet allemand N 2.716.677 publiée le 10 octobre 1978, le brevet belge N 867. 994 publié le 11 décembre 1978, le brevet des Etats-Unis d'Amérique N 4.152.432 publié le ler mai 1979, le brevet des Etats- Unis d'Amérique N 3.971.778 publié le 27 juillet 1976, le brevet des Etats-Unis d'Amérique N 4.172.199 publié le 23 octobre 1979, le brevet britannique N 1.348.894 publié le 27 mars 1974, et la demande de brevet européen N 75.805 publiée le 6 avril 1983. Les parties de ces références qui décrivent divers radicaux acyle sont incorporées ici à titre de référence. La liste suivante de radicaux acyle est présentée pour donner des exemples supplémentaires du terme "acyle"; elle ne doit pas être considérée comme limitant ce terme. Des exemples de radicaux acyle sont: (a) Les radicaux aliphatiques ayant pour formule 0 R -C- a dans laquelle R est un radical alkyle; cycloalkyle; a alcoxy; alcényle; cycloalcényle; cyclohexadiényle; ou alkyle ou alcényle substitué par un ou plusieurs atomes ou groupements halogène, cyano, nitro, amine, mercapto, alkylthio ou cyanométhylthio. (b) Les radicaux aromatiques carbocycliques ayant pour formule R o @(CH 2) nC-, Rc CH-C-, Re R Rb O _ II éCH2-O-C-, R c _/ 0-OC:H2-L;- t -S-CH2-C- ou j - CH2-S-C- o n est égal à 0, 1, 2 ou 3; Rb, Rc et Rd sont chacun, indépendamment, un atome d'hydrogène ou d'halogène, un groupement hydroxyle, nitro, amine ou cyano, ou un radical trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone, ou aminométhyle; et Re est R un groupement amine ou hydroxyle, un sel carboxylique, un groupement carboxyle protdge, un radical formyloxy, un sulfosel, un sel de sulfoamine, un radical azide, un atome d'halogène, ou un radical hydrazine, alkylhydrazine, phényl- hydrazine ou [(alkylthio)thioxométhyl]thio. Les radicaux acyle aromatiques carbocycliques préférés comprennent ceux qui ont pour formule CH2-C-, e CH2NH2 HO H-C (Re est de préférence e un sel carboxylique ou un sulfosel) et un sel carboxylique ou un sulfosel). (c) Les radicaux hétéroaromatiques ayant pour formule o il Ef- (CH 2)n O Rf-CH-C- CH-C- (Re est de préférence I R e un sel carboxylique ou un sulfosel). (c) Les radicaux hétéroaromatiques ayant pour formule Il Rf-(-CH2-C-, o Il 2015 Rf-S-CH-C-, e O Il Rf-O-CH2-C- o n est égal à O, l, 2 ou 3; R eest tel que défini ci- O Il Rf-S-CH2-C- O O Il Il Rf-C--C- o n est égal à 0, 1, 2 ou 3; Re est tel que défini ci- dessus; et Rf est un noyau hétérocyclique à 5, 6 ou 7 chaînons, éventuellement substitué, contenant 1, 2, 3 ou 4 (de préférence 1 ou 2) atomes d'azote, d'oxygène ou de soufre. Des exemples de noyaux hétérocycliques sont les noyaux thiényle, furyle, pyrrolyle, pyridinyle, pyrazolyle, pyrazinyle, thiazolyle, pyrimidinyle, thiadiazolyle et tétrazolyle. Des exemples de substituants sont les atomes d'halogène, les groupements hydroxyle, nitro, amine, amine protege, cyano, trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone, ou l! HOOC-CH-CH2-O-C-NH- NH2 Les radicaux acyle hétéroaromatiques préférés comprennent les radicaux des formules ci-dessus dans lesquelles Rf est un radical 2-amino-4-thiazolyle, 2-amino- 5-halo-4-thiazolyle, 4-aminopyrimidin-2-yle, 5-amino-l,2,4- thiadiazol-3-yle, 2-thiényle, 2-furanyle, ou 6-aminopyridin- 2-yle. (d) Les radicaux [[(4-substitué-2,3-dioxo-1- pipérazinyl)carbonyl]amino]arylacétyle ayant pour formule 0 0 Il 11 -C-CH-NH-C-N N-Rh dans laquelle R est un groupement aromatique (y compris g des groupements aromatiques carbocycliques tels que ceux qui ont pour formule R et les groupements hétéroaromatiques qui sont compris dans la définition de Rf; et Rh est un radical alkyle, alkyle substitué (dans lequel le radical alkyle est substitué par un ou plusieurs atomes ou groupements halogène, cyano, nitro, amine ou mercapto), arylméthylèneamine (c'est-à-dire de formule -N=CH-R dans laquelle R est tel que défini ci- g g dessus), arylcarbonylamine (c'est-à-dire de formule o -NH-C-R dans laquelle R est tel que défini ci-dessus) g g ou alkylcarbonylamine. Les radicaux [[(4-substitué-2,3-dioxo-l-pipér- azinyl)carbonyl]amino]arylacétyle préférés comprennent ceux dans lesquels Rh est un radical éthyle, phénylméthylène- amine ou 2-furylméthylèneamine. (e) Les radicaux (oxyimino substitué)arylacétyle ayant pour formule t -C-C=N-O-R. R g dans laquelle R est tel que défini ci-dessus et R. est g J- un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, cycloalkyle, alkylaminocarbonyle, arylaminocarbonyle (c'est-à-dire de O t formule -C-NH-R dans laquelle R est tel que défini ci- g g dessus) ou alkyle substitué (le radical alkyle étant substitué par un ou plusieurs atomes ou groupements halogène, cyano, nitro, amine, mercapto, alkylthio, aromatiques (tels que définis par Rg), carboxyle (y compris les sels), amide, alcoxycarbonyle, phénylméthoxycarbonyle, diphénylméthoxycarbonyle, hydroxyalcoxyphosphinyle, di- hydroxyphosphinyle, hydroxy(phénylméthoxy)phosphinyle, di- alcoxyphosphinyle ou tétrazolyle). Les radicaux (oxyimino substitué)arylacétyle préférés comprennent ceux dans lesquels R est un radical g 2-amino-4-thiazolyle. On préfère également les radicaux dans lesquels Ri est un radical méthyle, éthyle, carboxy- méthyle, l-carboxy-l-méthyléthyle, 2,2,2-trifluoréthyle ou 1-carboxycyclopropyle. (f) Les radicaux (acylamino)arylacétyle ayant pour formule O O Il Il -C-CH-NH-C-R. j I J Rg dans laquelle Rg est tel que défini ci-dessus et Rj est R un radical de formule RbI un radical H2)n-0-' amine, alkylamine, (cyanoalkyl)amine, amide, alkylamide, (cyanoalkyl)amide ou un radical de formule NH NH2 O -CH2-NH-C-- IN S -CH-CH2-C-NH-CH3, HO -N(CH2 -C2-OH)2, CH OH OH - O. u 1 @ ' X xJ -CH, ou HO HO O O Les radicaux (acylamino)arylacétyle préférés de la formule cidessus comprennent les radicaux dans lesquels Rj. est un radical amine ou amide. On préfère également les radicaux dans lesquels R est un radical phényle ou 2- g thiényle. (g) Les radicaux [[[3-substitué-2-oxo-l- imidazolidinyl]carbonyl]amino]arylacétyle ayant pour formule o j i I -C IC-NH-C-N NôR R CH2-CH2 dans laquelle Rg est tel que défini ci-dessus et Rk est un atome d'hydrogène ou-un radical alkylsulfonyle, aryl- méthylèneamine (c'est-à-dire de formule -N=CH-R dans g O I laquelle Rg est tel que défini ci-dessus), -C-Rm (o Rm est un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou un radical alkyle substitué par halogène), un groupement aromatique (tel que défini par R ci-dessus), un radical alkyle g éventuellement substitué (par un ou plusieurs atomes ou groupements halogène, cyano, nitro, amine ou mercapto). Les radicaux EL3-substitué-2-oxo-l-imidazolidinyl]- carbonyl]amino] arylacétyle préférés de la formule ci-dessus comprennent ceux dans lesquels R est un radical phényle g ou 2-thiényle. On préfère également les radicaux dans lesquels Rk est un atome d'hydrogène ou un radical méthyl- sulfonyle, phénylméthylèneamine ou 2-furylméthylèneamine. Les composés de cette invention forment avec les bases minérales et organiques des sels basiques qui entrent également dans le champ d'application de cette invention. Ces sels comprennent les sels d'ammonium, les sels de métaux alcalins, les sels de métaux alcalino-terreux, et les sels formés avec des bases organiques telles que la dicyclohexyl- amine, la benzathine, la N-méthyl-D-glucamine, l'hydrabamine, et les bases similaires. Les composés de cette invention sont représentés sous la forme d'acides. Mais ils peuvent également exister sous la forme de zwitterions (sels internes ou intérieurs), et ceux-ci sont également englobés dans l'expression "sels pharmaceutiquement acceptables" et dans le champ d'application de cette invention. Les a-lactames de formule I, ainsi que leurs sels pharmaceutiquement acceptables, sont actifs contre les organismes gram-positifs et gramnégatifs. Les composés de cette invention peuvent être utilisés comme agents pour combattre les infections bactériennes (y compris les infections de l'appareil urinaire et les infections respiratoires) chez les espèces mammifères telles que les animaux domestiques (par exemple le chien, le chat, la vache, le cheval, etc.) et chez l'homme. Pour combattre les infections bactériennes chez les mammifères, on peut administrer un composé de cette invention à un mammifère malade à une dose d'environ 1,4 mg/kg/jour à environ 350 mg/kg/jour, de préférence d'environ 14 mg/kg/jour à environ 100 mg/kg/jour. Tous les modes d'administration qui ont été utilisés dans le passé pour faire agir les pénicillines et les céphalosporines au foyer de l'infection sont également envisages avec les 8-lactames de cette invention. Ces modes d'administration comprennent l'administration orale, intraveineuse, intra- musculaire et sous forme de suppositoire. On peut préparer les composés de cette invention en utilisant comme produits de départ un ester d'amino-acide protégé ayant pour formule 0 A1-NH-CH2-C-O-A2 et une cétone ayant pour formule III /X O -- (CH2)m 0op Dans la formule II et dans l'ensemble de la description, le symbole A1 désigne un groupement protecteur de la fonction amine (par exemple un radical t-butoxycarbonyle, benzyloxy- carbonyle, etc.) et le symbole A2 désigne un groupement protecteur de la fonction carboxyle (par exemple un radical alkyle, benzyle ou benzhydryle) . Une condensation d'aldol d'un composé de formule II avec une cétone de formule III donne le composé correspondant ayant pour formule IV (CH2)n A1-NH l \C C(H2)m aC "O-A2 Par élimination du groupement protecteur "A2" de la fonction carboxyle, en utilisant des techniques normales de suppression de la protection, on obtient le composé correspondant ayant pour formule 258106Z 1l V (CÉx o-C (cH2)M Par combinaison d'un acide de formule V avec une hydroxylamine O-protégée, ayant pour formule VI A3-ONH2; dans laquelle A3 est un groupement protecteur tel que le radical benzyle, trityle ou pivaloyle, on obtient le composé correspondant ayant pour formule VII (CH2)n A-NEM l CH CH C---(CH2)m OH La réaction se fait en présence d'un agent de combinaison / NH-0-A 3. La réaction se fait en présence d'un agent de combinaison tel que le léthyl-3-(diméthylaminopropyl)carbodiimide ou le dicyclohexylcarbodiimide. On peut réaliser la cyclisation d'un composé de formule VII en traitant ce composé par de la triphényl- phosphine et un azodicarboxylate de dialkyle pour obtenir le composé correspondant ayant pour formule VIII a_ (CH2)n A 1NH _ __(CH C2)m N-O-A3 Ou bien, on peut préparer un composé de formule VIII en transformant d'abord le groupement hydroxyle d'un composé de formule VII en un groupement labile (en utilisant par exemple un réactif tel que le complexe pyridine-trioxyde de soufre), puis en traitant ce composé par une base (par un carbonate de métal alcalin par exemple). On peut réaliser la réduction d'un composé de formule VIII en le composé correspondant ayant pour formule IX / X A10 IX I )m ZC N-OH par hydrogénation catalytique si A3 est un radical benzyle, par traitement avec une base telle que le sulfure de sodium ou la soude si A3 est un radical pivaloyle, ou par traitement avec de l'acide acétique aqueux à 80 % si A3 est un radical trityle. On peut traiter un composé de formule IX par un complexe de pyridine et de trioxyde de soufre pour obtenir le sel de pyridinium du composé ayant pour formule x x A,-NEI l l N.N-O-SO3E On peut mener la réaction dans un solvant organique, de préférence la pyridine. Au lieu d'utiliser un complexe pré- formé de pyridine et de trioxyde de soufre, on peut former le complexe in situ (en utilisant par exemple comme réactifs de l'ester chlorosulfonyltriméthylsilylique et de la pyridine). Ou bien, on peut utiliser un complexe de diméthyl- formamide et de trioxyde de soufre ou de 2,6-lutidine et de trioxyde de soufre. En utilisant des techniques classiques (par exemple des résines d'échange d'ions, une cristallisation ou une extraction de paires d'ions), on peut transformer en d'autres sels le sel de pyridinium formé par les réactions précédentes. On peut réaliser la suppression de la protection du substituant 3-amine d'un composé de formule X en utilisant des techniques normales de suppression de la protection, ce qui donne le composé correspondant ayant pour formule HH XI (CH2H)m -Cj N-O-S03H Si, par exemple, le groupement protecteur est un radical t-butoxycarbonyle, on peut utiliser l'acide tri- fluoracétique pour supprimer la protection du groupement amine. Si le groupement protecteur est un radical benzyl- oxycarbonyle, on peut avoir recours à une hydrogénation catalytique. Si le groupement protecteur est un radical o-nitrosulfényle, on peut utiliser l'acide para-toluène- sulfonique en association avec du p-thiocrésol. On peut utiliser des techniques d'acylation bien connues pour transformer un composé de formule XI en un produit de formule I. Des exemples de techniques comprennent la réaction avec un acide carboxylique (R1-OH) ou l'halogénure d'acide carboxylique ou l'anhydride d'acide carboxylique correspondant. Les réactions avec un acide carboxylique se font le mieux en présence d'un carbodiimide tel que le dicyclohexylcarbodiimide, et d'une substance capable de former un intermédiaire réactif in situ, telle que le N-hydroxybenzotriazole ou la 4-diméthylaminopyridine. Dans les cas o le radical acyle (R1) contient des groupements fonctionnels réactifs (tels que les groupements amine ou carboxyle), il peut être nécessaire de protéger d'abord ces groupements fonctionnels, puis de procéder à la réaction d'acylation, et enfin de supprimer la protection du produit résultant. D'autres techniques de préparation des composés de cette invention seront évidentes pour l'homme du métier. Par exemple, on peut éliminer le groupement protecteur de la fonction amine d'un composé de formule VIII et acyler le composé résultant avant d'éliminer le groupement protecteur de l'oxygène ("A3") en position 1 des S-lactames, et sulfoner. Les radicaux acyle ("Ri") préférés de cette invention sont ceux qui ont pour formule XII 0 Y1 Y2 dans laquelle Y1 et Y2 sont chacun, indépendamment, un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, ou bien Y1 et Y2 forment, avec l'atome de carbone auquel ils sont fixés, un radical cyclopropyle, cyclobutyle ou cyclopentyle et Y3 est un groupement hydroxy, amine ou hydroxyamine. Les composés de formule I contiennent au moins un centre chiral - l'atome de carbone (en position 3 du noyau S-lactame) auquel le substituant amine ou acylamine est fixé. Cette invention a pour objet les 0-lactames qui ont été décrits ci-dessus, dans lesquels la stéréochimie au centre chiral en position 3 du noyau 0-lactame est la même que la configuration sur l'atome de carbone en position 6 des pénicillines naturelles (la pénicilline G par exemple) et que la configuration sur l'atome de carbone en position 7 des céphamycines naturelles (la céphamycine C par exemple). Les exemples suivants sont des formes de réalisation spécifiques de cette invention. Exemple 1 Sel dipotassique de l'acide (Z)-[[[1-(2-amino-4-thiazolyl)- 2-oxo-2-[[2-oxo-l-(sulfo-oxy)-l-azaspiro[3.4]oct-3-yl]- amino éthylidne aminoloxyl acétique A) Ester benzylique de la N-(tbutoxycarbonyl)glycine On a délayé de la N-(t-butoxycarbonyl)glycine (8, 75 g, 0,05 mole) et du bromure de benzyle (9,4 g, 0,055 mole) dans 20 ml de diméthylformamide, et on l'a traitée par 6,0 g (0,06 mole) de bicarbonate de potassium sous argon. Après avoir agité pendant 38 heures, on a ajouté de l'eau pour obtenir une masse de solide blanc volumineuse que l'on a filtrée et lavée avec de l'eau. On a repris le solide dans de l'acétate d'éthyle, on l'a séché sur sulfate. de sodium, on l'a fait évaporer en un solide, et on l'a recristallisé dans 600 ml d'hexane chaud. Par refroidissement à - 5 C pendant deux heures et filtration, on a obtenu 11,6 g de paillettes cristallines, point de fusion 72-73 C, en deux récoltes. B) Ester benzylique de la N-(t-butoxycarbonyl)-a-(l- hydroxycyclopentyl)glycine On a refroidi à - 40 C une solution de diiso- propylamine (3,77 ml, 23 mmoles) dans 40 ml de tétrahydro- furanne sous argon, et on l'a traitée par 13 ml d'une solution de nbutyllithium 1,71 N (21,5 mmoles). Après avoir agité pendant 20 minutes, on a refroidi le mélange à - 78 C et on l'a traité par une solution d'ester benzylique de N-(t-butoxycarbonyl)glycine (2,65 g, 10 mmoles) dans ml de tétrahydrofuranne. Le mélange a pris une couleur jaune plus foncée, mais est resté limpide. Après 0,5 heure à - 78 C, on a ajouté 0,88 ml (11,5 mmoles) de cyclo- pentanone séchée (tamis de 4 A) puis, après 15 minutes à - 78 C, on a réchauffé le mélange en 0,5 heure à - 20 C, après quoi la solution a viré au violet foncé. On a élevé la température à 0 C pendant 20 minutes, puis on a ajouté 1,32 g (22 mmoles) d'acide acétique dans 5 ml de tétrahydro- furanne, après quoi la couleur a disparu, en laissant un précipité gélatineux. On a versé le mélange dans de l'eau et on l'a extrait à l'acétate d'éthyle. On a lavé la couche organique avec de la saumure, on l'a séchée sur sulfate de sodium et on l'a fait évaporer en une huile que l'on 258 1062 a chromatographiée sur 900 ml de LPS-1 dans un mélange 3:1 d'hexane et d'acétate d'éthyle. Par évaporation des fractions de produit et cristallisation dans l'hexane, on a obtenu, en deux récoltes, 1,68 g de produit, point de fusion 68-70 C (Rf = 0,77, silice, mélange 3:1 d'hexane et d'acétate d'éthyle). C) N-(t-butoxycarbonyl)-a-(t-hydroxycyclopentyl)glycine On a traité une solution d'ester benzylique de N-(t-butoxycarbonyl)-a-(l1hydroxycyclopentyl)glycine (1,81 g, 4,98 mmoles) dans 30 ml d'éthanol absolu à 250C, par 0,4 g de palladium à 10 % sur charbon et de l'hydrogène à une pression de 1 atmosphère pendant 2,5 heures. On a filtré le catalyseur et on a fait évaporer le solvant. On a ajouté du benzène et on l'a fait évaporer. Par cristallisation dans de l'éther isopropylique (première récolte) et dans de l'hexane (seconde récolte), on a obtenu un total de 1,07 g de produit, point de fusion 132-134 C. D) N-(Benzyloxy)-N2_-(t-butoxycarbonyl)-a-(1-hydroxy- cyclopentyl)glycinamide A une solution de N-(t-butoxycarbonyl)-a-(l- hydroxycyclopentyl)glycine (0,83 g, 3,2 mmoles) dans 20 ml de tétrahydrofuranne sous argon à 0 C, on a ajouté de l'hydroxybenzotriazole monohydraté (0,43 g, 3,2 mmoles), puis du dicyclohexylcarbodiimide (0,65 g, 3,2 mmoles). On a agité le mélange réactionnel à 0 C pendant 2 heures. On a ajusté à pH 13, avec de la soude à 10 %, une solution de chlorhydrate de o-benzylhydroxylamine (1 g, 6,3 mmoles dans 10 ml d'eau). On a ajouté du chlorure de sodium à saturation, et on a extrait la base libre dans de l'éther diéthylique. Apres avoir séché sur sulfate de sodium anhydre, on a fait évaporer l'éther pour obtenir 0,8 g de l'amine libre sous la forme d'une huile. On a ajouté une solution de l'o-benzylhydroxylamine dans du tétrahydro- furanne à l'ester d'-hydroxybenzotriazole. On a réchauffé le mélange réactionnel à 20 C et on l'a agité pendant 5 heures. On a ensuite refroidi le mélange réactionnel et on l'a filtré. On a fait évaporer le filtrat en une mousse que l'on a dissoute dans de l'acétate d'éthyle et que l'on a lavée successivement avec de l'eau, avec du bicarbonate de sodium à 5 % et avec de la saumure. Après avoir séché sur sulfate de sodium anhydre, on a fait évaporer la solution en une huile. On a ensuite chromatographié cette huile sur LPS-1, en éluant avec un mélange 1:1:1 d'hexane, d'éther diéthylique et de chlorure de méthylène. On a rassemblé les fractions contenant le produit pur et on les a fait évaporer,-ce qui a donné 0,82 g de produit solide. E) l-(Benzyloxy)-3-[(t-butoxycarbonyl)amino]-2-oxo-l1-aza- spiro[3.4]octane A une solution de N-(benzyloxy)-N -(t-butoxy- carbonyl)-"-(l-hydroxycyclopentyl)glycinamide (0,82 g, 2,16 mmoles) dans 15 ml de pyridine sous argon, on a ajouté un complexe de pyridine et de trioxyde de soufre (0,47 g, 29,5 mmoles). On a chauffé le mélange réactionnel à 50-55 C. Au bout de 1,5 heure, on a ajouté une nouvelle quantité (0,150 g, 0,9 mmole) de complexe de pyridine et de trioxyde de soufre et on a chauffé le mélange réactionnel pendant encore une heure. On a ensuite concentré le mélange réactionnel sous vide et on lui a fait subir une distillation azéotropique trois fois avec de l'acétonitrile. Au résidu obtenu on a ajouté un mélange froid de solution de carbonate de potassium (3,32 g dans 9 ml d'eau) et d'acétate d'éthyle (25 ml). On a agité énergiquement le mélange réactionnel et on l'a mis au reflux pendant deux heures, après quoi la CCM indiquait que la réaction était pratiquement terminée. Après refroidissement, on a dilué le mélange réactionnel avec de l'eau et de l'acétate d'éthyle et on a séparé les phases. On a lavé la phase organique avec une solution de bisulfate de potassium à 5 % et avec de la saumure, et on a séché sur sulfate de sodium anhydre. Après avoir évaporé en un résidu, on a chromatographié l'éther benzylique brut sur du LPS-1 (mélange 3:1 d'hexane et d'acétate d'éthyle) pour obtenir 550 mg de substance pure. F) Sel monopotassique du 3-[(t-butoxycarbonyl)amino]-2- oxo-l-(sulfo-oxy)-l-azaspiro[3.4]octane On a traité une solution de l-(benzyloxy)-3-[(t- butoxycarbonyl)amino]-2-oxo-l-azaspiro[3.4]octane (0,45 g, 1,29 mmole) dans 25 mi d'éthanol absolu, par 100 mg de palladium à 10 % sur charbon, et on a agité sous une atmosphère d'hydrogène à la température ambiante pendant une heure, après quoi la CCM indiquait qu'il ne restait pas de produit de départ. Après avoir filtré sur un lit de Celite et avoir concentré sous vide en un résidu, on a ajouté 10 ml de pyridine et on a refroidi la solution à 0 C et on l'a agitée sous argon. On a ajouté 3 équivalents de complexe de pyridine et de trioxyde de soufre (643 mg) et on a agité le mélange réactionnel à la température ambiante. Au bout de deux heures, la CCM indiquait que la réaction était terminée. Après avoir concentré sous vide, on a repris le résidu dans une solution de phosphate de potassium dibasique à 10 % avec une petite quantité d'acétone pour solubiliser, et on a fait passer dans une colonne de Dowex AG-50 (K+), et on a élué avec de l'eau, puis avec un mélange de 20 % d'acétone et d'eau. On a lyophilisé les fractions contenant le produit puis on les a purifiées dans une colonne de HP-20, en éluant d'abord avec de l'eau, puis avec un gradient de 0 à 10 % d'acétone et d'eau. On a lyophilisé les fractions contenant le produit pour obtenir un total de 259 mg de produit. G) Sel monopotassique de l'ester diphénylméthylique de l'acide (Z)-t[[[1-(2-amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-[[2-oxo-l-(sulfo- oxy)-l-azaspiro[3.4]oct-3-yl]amino]éthylidène]amino]- oxy]acétique On a recouvert de 2 ml de dichlorométhane sec * du sel monopotassique de 3[(t-butoxycarbonyl)amino]-2-oxo- l-(sulfo-oxy)-l-azaspiro[3.4]octane (280 mg, 0,75 mmole), on a ajouté 0,8 ml d'anisole, et on a refroidi le mélange à -10 C. On a ajouté 3 ml d'acide trifluoracétique, et on a agité la solution entre - 10 et - 5 C pendant 1,5 heure. Au bout de 0,75 heure, il s'est formé un solide, dont le volume est devenu très important au bout de 1,5 heure. On a fait évaporer sous vide les matières volatiles et on a trituré le résidu solide avec de l'éther pour obtenir du 3-amino-2-oxo-l-(sulfo-oxy)-l-azaspiro[3.4]octane. On a traité de l'ester diphénylméthylique d'acide (Z)-2-amino-c [[[[[(diphénylméthyl)oxy]carbonyl]méthyl]- oxy]imino]-4-thiazolacétique (310 mg, 0,75 mmole) dans 4 ml de diméthylformamide sec, par 115 pl (0,82 mmole) de triéthylamine, et on a refroidi le mélange à - 30 C sous argon.On a ajouté du chlorophosphate de diphényle (155 pl, 0,75 mmole), et on a agité le mélange entre - 30 et - 20 C pendant 1 heure, ce qui a donné une solution d'un anhydride mixte de l'acide de départ. On a préparé une solution de [3-amino-2-oxo-1- (sulfo-oxy)-l-azaspiro[3.4]octane dans 2,5 ml de diméthyl- formamide. On a ajouté de la triéthylamine (500 1l, 3,6 mmoles) à la solution de l'anhydride mixte à - 30 C, puis la solution du B-lactame. On a laissé le mélange se réchauffer à - 5 C en 0,5 heure, sous argon. On a fait évaporer le mélange sous vide en une gomme. On a repris celle-ci dans de l'acétone et on a dilué avec un volume égal d'eau. On a ajusté le pH (3,45) à 6,85 avec du bicarbonate de potassium, et on a fait passer la solution dans une colonne de Dowex AG50 (K+), en éluant avec de l'acétone à 50 %. On a fait évaporer les fractions de produit en une bouillie que l'on a fait passer dans une colonne de 80 ml de HP-20, et que l'on a éluées avec de l'eau, puis avec un gradient d'acétone contenant jusqu'à 50 % d'acétone. On a rassemblé les fractions de produit (37,5 % à 50 % d'acétone) et on les a lyophilisées pour obtenir 0,31 g -1 de produit, I.R. = 1780 cm, sous la forme d'un solide blanc. H) Sel dipotassique de l'acide (Z)-[[[1-(2-amino-4- thiazolyl)-2-oxo-2-[[2-oxo-l-(sulfo-oxy)-l-azaspiro- [3.4]oct-3-yl]amino]éthylidène]amino]oxy]acétique On a délayé le sel monopotassique de l'ester di- phénylméthylique de l'acide (Z)-[[[1-(2-amino-4-thiazolyl)-2- oxo-2-[[2-oxo-l-(sulfo-oxy)-l-azaspiro[3.4]oct-3-yl]- amino]éthylidène]amino]oxy]acétique (0,31 g, 0,46 mmole) dans 6 ml de dichlorométhane sec et 0,8 ml d'anisole, et 2S81062 on a refroidi à - 10 C; on a ajouté 10 ml d'acide trifluor- acétique. Au bout d'une heure entre - 10 et - 5 C, on a ajouté 10 ml de toluene sec, et on a fait évaporer le mélange presque à siccité sous vide. On a lavé le résidu avec de l'hexane, puis on l'a repris dans de l'eau (pH 1,8) et on a rapidement ajusté le pH à 6,85 avec du bicarbonate de potassium dilué. Par chromatographie sur 60 ml de HP-20 dans de l'eau, on a obtenu le produit pur. Par lyophilisation, on a obtenu 217 mg du composé du titre sous la forme d'une poudre blanche, point de fusion 230-250 C (décomposition). Anal. - calc. pour C14H15N509S2K2.3,5 H20 C, 27,90; H, 3,68; N, 11,62; S, 10,64; K, 12,97 Trouvé: C, 27,85; H, 3,61; N, 11,94; S, 10,37; K, 13,56. Exemple 2 Sel dipotassique de l'acide (Z)-[[[1-(2-amino-4-thiazolyl)- 2-oxo-2-[[2-oxo-l-(sulfo-oxy)-l-azaspiro[3.3]hept-3-yl]- amino]éthylidène]amino]oxy]acétique A) Ester benzylique de la N-(t-butoxycarbonyl)-a-(l- hydroxycyclobutyl)glycine On a traité une solution de diisopropylamine (9, 7 ml, 70 mmoles) dans 150 ml de tétrahydrofuranne sec à - 40 C sous argon, par 39 ml (64,5 mmoles) de n-butyl- lithium 1,71 N dans de l'hexane, et on a agité la solution jaune pale à 40 C pendant 20 minutes. On a ensuite refroidi la solution à - 78 C, et on y a fait couler goutte à goutte, en 5 minutes, une solution de 7,95 g (30 mmoles) d'ester benzylique de N-(t-butoxycarbonyl)glycine dans ml de tétrahydrofuranne sec, ce qui a provoqué la formation d'une solution jaune foncé et, au bout de 20 minutes, la formation d'un léger trouble. Au bout de 0,5 heure, on a ajouté une solution de 2,42 g (2,0 ml, 34,5 mmoles) de cyclobutanone dans 30 ml de tétrahydrofuranne. On a agité le mélange trouble jaune résultant à - 78 C pendant 15 minutes, puis on l'a placé dans un bain de glace 2 58106 à 0 C pendant deux heures. A une température interne de - 25 C (1 heure), la solution devenait limpide, et à - 15 C elle virait au violet foncé. On l'a agitée à 0 C pendant 0,5 heure, puis on l'a traitée par 3,96 g (66 mmoles) d'acide acétique glacial dans 15 ml de tétrahydrofuranne, ce qui a donné un mélange jaune clair et trouble. On a versé celui-ci dans 500 ml d'eau froide et on a extrait deux fois à l'acétate d'éthyle. On a lavé les extraits avec du bisulfate de potassium à 2 %, du bicarbonate de sodium à %, et de la saumure, on a séché sur sulfate de sodium, et on a fait évaporer en une huile épaisse. Par chromatographie sur 800 ml de LPS- 1 dans un mélange 2:1 d'hexane et d'acétate d'éthyle, et par assemblage des fractions de produit (Rf = 0,29), on a obtenu 7,8 g de produit sous la forme d'une huile. B) N-(t-Butoxycarbonyl)-a-(1-hydroxycyclobutyl)glycine On a hydrogéné l'ester benzylique de N-(t-butoxy- carbonyl)-"-(l-hydroxycyclobutyl)glycine (7,8 g, 23,3 mmoles) sous 1 atmosphère sur 1,0 g de palladium à 10 % sur charbon dans 150 ml d'éthanol absolu pendant 4 heures à 25 C. On a filtré le catalyseur et on a fait évaporer le solvant sous vide. On a ajouté du benzene et on a fait évaporer deux fois, pour obtenir 5,0 g de produit sous la forme d'une mousse dure. C) N-(Benzyloxy)-N2-(t-butoxycarbonyl)-a-(l-hydroxycyclo- butyl glycinamide) On a dissous de la N-(t-butoxycarbonyl)-a-(1- hydroxycyclobutyl)glycine (5,0 g, 20,4 mmoles) dans 150 ml de tétrahydrofuranne sec sous argon. On a ajouté de l'hydrate d'hydroxybenzotriazole (3,12 g, 20,4 mmoles), et on a refroidi le mélange à 0 C, puis on l'a traité par 4,20 g (20,4 mmoles) de dicyclohexylcarbodiimide. Au bout de 1,75 heure à 0 C, on a ajouté une solution d'O-benzyl- hydroxylamine dans 15 ml de tétrahydrofuranne, et on a agité le mélange à 0-25 C pendant 17 heures. On a ensuite refroidi le mélange avec le tétrahydrofuranne à - 10 C pendant 20 minutes, et on a filtré les solides résultants et on les a lavés avec du tétrahydrofuranne sec. On a fait évaporer le filtrat et on a repris le résidu dans de l'acétate d'éthyle, puis on l'a lavé rapidement avec du bisulfate de potassium à 10 %, de la saumure, du bicarbonate de sodium à 5 %, et à nouveau avec de la saumure, puis on a séché sur sulfate de sodium, et on a fait évaporer en une mousse. Par trituration avec de l'éther isopropylique, on a obtenu 4,69 g de produit sous la forme d'un solide blanc, point de fusion 95-97 C. D) l-(Benzyloxy)-3-[(t-butoxycarbonyl)amino]-2-oxo-l-aza- spiro[3.3]heptane On a traité de la N-(benzyloxy)-N2-(t-butoxy- carbonyl)-a- ( l-hydroxycyclobutyl)glycinamide (3,50 g, 10 mmoles) dans 200 ml de tétrahydrofuranne sec, à 0 C sous argon, par 2,4 ml (15 mmoles) d'azodicarboxylate de diéthyle, puis par une solution de triphénylphosphine (5,2 g, 20 mmoles) dans 50 ml de tétrahydrofuranne, en 10 minutes, et on a agité le mélange à 0 C pendant une heure. La couleur jaune persistait, aussi a t-on ajouté encore 0,52 g (2 mmoles) de triphénylphosphine. Au bout de 15 minutes, on a obtenu une huile par évaporation sous vide. Par trituration avec 100 ml d'un mélange 2:1 d'hexane et d'acétate d'éthyle, on a obtenu un solide blanc que l'on a filtré. Par chromatographie du filtrat sur 800 ml de LPS-1, on a obtenu des fractions de produit (Rf = 0,8 dans un mélange 1:1 d'hexane et d'acétate d'éthyle) contaminées par une impureté que l'on a éliminée par trituration avec de l'éther iso- propylique, ce qui a donné le produit sous la forme d'un solide blanc, 1,07 g, point de fusion 156-157 C. E) Sel monosodique du 3-[(t-butoxycarbonyl)amino]-2-oxo- l-(sulfo-oxy)-l-azaspiro[3.3]heptane On a hydrogéné du l-(benzyloxy)-3-[(t-butoxy- carbonyl)amino]-2-oxo-l-azaspiro[3.3]heptane (1,07 g, 3,22 mmoles) sous 1 atmosphère, dans 30 ml d'éthanol absolu, sur 0,4 g de palladium à 10 % sur charbon, pendant 3 heures à 25 C. On a séparé le catalyseur par filtration et on a chassé le solvant sous vide à 10 C pour obtenir un solide. On a repris celui-ci dans 19 ml de pyridine sèche et on 258 1062 a traité par 1,44 g (9 mmoles) d'un complexe de pyridine et de trioxyde de soufre, à 25 C sous argon. Au bout de 4 heures, on a chassé sous vide les matières volatiles, on a repris le résidu dans de l'eau, et on a ajusté le pH (5,40) à 6,45 avec du bicarbonate de sodium dilué. Par passage dans une colonne de 40 ml de Dowex AG50 (K+) dans de l'eau, on a obtenu le produit dans les 300 premiers ml. Par lyophilisation, on a obtenu un solide blanc, que l'on a chromatographié sur HP-20, d'abord dans de l'eau, puis avec un gradient progressif d'acétone (20 %). On a lyophilisé les fractions de produit pour obtenir 0,75 gde produit sous la forme d'une poudre blanche. F) Sel monopotassique de l'ester diphénylméthylique de l'acide (Z)-[[[1-(2-amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-[[2- oxo-l-(sulfo-oxy)-l-azaspiro[3.3]hept-3-yl]amino]- éthylidène]amino]oxy]acétique On a délayé du sel monosodique de 3-[(t-butoxy- carbonyl)amino]-2-oxo-l-(sulfo-oxy)-1-azaspirot[3.3]heptane (0,3 g, 0,87 mmole) dans 2,5 ml de dichlorométhane sec et 1,0 ml d'anisole, à - 10 C sous argon, puis on a traité par 4,0 ml d'acide trifluoracétique. Au bout de 0,5 heure, un solide s'était formé. Au bout de 1,5 heure, on a ajouté 4 ml de toluène sec, et on a fait évaporer le mélange sous vide pour obtenir un solide, le 3-amino-2-oxo-l-(sulfo-oxy)- 1-azaspiro[3.3]heptane, que l'on a trituré deux fois avec de l'hexane et que l'on a séché sous vide à 25 C pendant une heure. On a séché l'ester diphénylméthylique de l'acide (Z)-2-amino-a-[[[[[(diphénylméthyl)oxy]carbonyl]méthyl]- oxy]imino]-4-thiazoleacétique (0,42 g, 1,0 mmole) pendant 2 heures à 25 C sous vide, sur du pentoxyde de phosphore. On a traité une solution du solide obtenu dans 5,0 ml de diméthylformamide sec, sous argon, par 0,10 g (1,0 mmole) de triéthylamine, et on a refroidi à - 35 C. On a ajouté du chlorophosphate de diphényle (207 pl, 269 mg, 1,0 mmole), et on a agité le mélange entre - 30 et - 40 C pendant 50 minutes, ce qui a donné une solution trouble jaune d'un anhydride mixte. On a repris le 3-amino-2-oxo-i-(sulfo-oxy)-l-aza- spiro[3.3]heptane (provenant de l'opération ci-dessus) dans ml de diméthylformamide sec à 0OC, et on a ajouté la solution résultante à l'anhydride mixte, en même temps que 0,4 g (4 mmoles) de triéthylamine. Au bout d'une heure entre - 350 et - 50C, on a fait évaporer le diméthylformamide sous vide à 100C et on a repris le résidu dans de l'acétone et de l'eau, pH 4,35. On a utilisé du bicarbonate de potassium dilué pour ajuster le pH à 6,75, et on a fait passer la solution dans une colonne de 30 ml de Dowex AG50 (K+) dans 50 % d'acétone dans l'eau. On a fait évaporer les fractions de produit sous vide pour obtenir une bouillie aqueuse que l'on a chargée dans une colonne de 40 ml de HP-20 et que l'on a éluée avec de l'eau. Par introduction d'un gradient de 50 % d'acétone, on a obtenu le produit. La lyophilisation a donné 400 mg de produit sous la forme d'une poudre blanchâtre. G) Sel dipotassique de l'acide (Z)-[[[1-(2-amino-4-thia- zolyl)-2-oxo-2-[[2-oxo-1-(sulfo-oxy)-l-azaspiro[3.3]- hept-3-yl]amino]éthylidène]amino]oxy]acétique On a délayé du sel monopotassique d'ester diphénylméthylique d'acide (Z)-[[[1-(2-amino-4-thiazolyl)-2- oxo-2-[[2-oxo-1-(sulfo-oxy)-1-azaspiro[3.3]hept-3-yl- amino]thylidène]amino]oxyjacétique (325 mg, 0,51 mmole) dans un mélange de 6 ml de dichlorométhane sec et de 1 ml d'anisole, à - 10 C sous argon, et on a traité par 10 ml d'acide trifluoracétique. Au bout de 45 minutes entre - 10 et 0 C, on a ajouté 10 ml de toluène sec, et on a fait évaporer les matières volatiles sous vide à 10 C. On a trituré le résidu deux fois avec de l'hexane, on l'a essoré sous vide, puis on l'a repris dans 10 ml d'eau (pH 1,8) et on l'a ajusté à pH 6,75 avec du bicarbonate de potassium dilué. Par chromatographie dans une colonne de 40 ml de HP20 dans de l'eau, on a obtenu, avec 140 ml d'éluant, les fractions de produit. La lyophilisation a donné 205 mg du composé du titre sous la forme d'un solide blanc. Anal. - calc. pour C13H13N509S2K22,95 H20: C, 26,98; H, 3,29; N, 12,10; S, 11,08; K, 13,51 Trouvé: C, 26,98; H, 2,68; N, 12,04; S, 10,81; K, 14,78. Exemple 3 Acide (Z)-[[[1-(2-amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-[[2-oxo-1- (sulfo-oxy)-7-oxa-l-azaspiro[3.5]non-3-yl]amino]éthylidène]- amino]oxy]acétique A) Ester benzylique de la N-(t-butoxycarbonyl)-a-(4- hydroxy-2,3,5,6-tétrahydro-4-pyranyl)glycine On a traité une solution de diisopropylamine (17,5 ml, 0,127 mole) dans 300 ml de tétrahydrofuranne sec, à- 45 C sous argon, par 70 ml (0,117 mole) den-butyllithium 1,71M dans de l'hexane. Au bout de 20 minutes à - 45 C, on a refroidi le mélange à - 72 C et on l'a traité par 13,3 g (0,05 mole) d'ester benzylique de N-(t-butoxycarbonyl)- glycine séché, dans 60 ml de tétrahydrofuranne sec. Au bout de 50 minutes, on a traité la solution homogène jaune foncé par 5 ml (5,43 g, 0,0543 mole) de tétrahydro-4-pyranone dans 50 ml de tétrahydrofuranne et on a laissé la température s'élever à 0 C en 1,5 heure. On a ajouté à la solution violette une solution de 7,2 g (0,12 mole) d'acide acétique glacial dans 20 ml de tétrahydrofuranne, et on a versé le mélange trouble jaune clair résultant dans 1 1 d'eau, et on a extrait à l'acétate d'éthyle. On a lavé la couche organique avec du bisulfate de potassium à 2 %, du bicarbonate de sodium à 5 % et de la saumure, on a séché sur sulfate de sodium, et on a fait évaporer en une huile. Par chromatographie sur 800 ml de LPS-1 dans un mélange 1:1 d'hexane et d'acétate d'éthyle, et rassemblement des fractions de produit (Rf = 0,32 dans le même solvant), on a obtenu une huile qui s'est solidifiée par trituration avec de l'hexane, ce qui a donné un total de 10,34 g de produit sous la forme d'un solide blanc, point de fusion 90-93 C. B) N-(t-Butoxycarbonyl)-a-(4-hydroxy-2,3,5,6-tétrahydro- 4-pyranyl)glycine On a traité de l'ester benzylique de N-(t-butoxy- carbonyl)-a-(4-hydroxy-2,3,5,6-tétrahydro-4-pyranyl)glycine (10,34 g, 28, 3 mmoles) et du palladium à 10 % sur charbon (2,0 g) dans 200 ml d'éthanol absolu, par de l'hydrogène sous 1 atmosphère, pendant 2 heures. On a séparé le catalyseur par filtration et on a chassé le solvant sous vide, finalement par co-évaporation avec du benzène. L'addition d'une petite quantité d'acétate d'éthyle a provoqué la cristallisation. On a trituré la suspension avec de l'éther isopropylique, on a filtré et on a lavé avec de l'éther isopropylique et de l'hexane, et on a séché à l'air pour obtenir 6,84 g de produit sous la forme d'un solide blanc, point de fusion 140-141 C. C) N-(Benzyloxy)-N2-(t-butoxycarbonyl)-a-(4-hydroxy-2,3,- 5,6-tétrahydro-4-pyranyl)glycinamide On a traité de la N-(t-butoxycarbonyl)-a-(4- hydroxy-2,3,5,6-tétrahydro-4-pyranyl)glycine (6,84 g, 24,9 mmoles) et de l'hydrate de N-hydroxybenzotriazole (3,80 g, 24,9 mmoles) dans 150 ml de tétrahydrofuranne à 0 C, par du dicyclohexylcarbodiimide (5,12 g, 24,9 mmoles), et on a agité pendant une heure. Au mélange résultant on a ajouté une solution de O-benzylhydroxylamine dans 50 ml de tétra- hydrofuranne. On a agité la suspension résultante pendant 14 heures entre 0 et 25 C, puis on l'a refroidie à 0 C et on l'a filtrée. On a fait évaporer le filtrat en une mousse. On a partagé celle-ci entre de l'acétate d'éthyle et du bicarbonate de sodium à 5 %. On a séparé la couche organique et on l'a lavée avec du bisulfate de potassium à 3 %, on a séché sur sulfate de sodium, et on a fait évaporer en un solide. Par trituration avec de l'éther iso- propylique et de l'hexane, on a obtenu 8,14 g de produit, point de fusion 154-157 C. D) l-(Benzyloxy)-3-[(t-butoxycarbonyl)amino]-2-oxo-7-oxa- 1-azaspiro[3.5]nonane On a traité du N-(benzyloxy)-N2-(t-butoxycarbonyl)- a-(4-hydroxy-2,3,5,6-tétrahydro-4-pyranyl)glycinamide (1,9 g, 5 mmoles) dans 20 ml de pyridine sèche, sous argon, par 1,05 g (6,5 mmoles) d'un complexe de pyridine et de 258 1062 trioxyde de soufre, et on a chauffé à 57 C pendant 2 heures. On a chassé les matières volatiles sous vide. On a ajouté de l'acétonitrile sec et on a fait évaporer quatre fois, et on a traité le résidu par une solution de 5 g (36 mmoles) de carbonate de potassium dans 12,5 ml d'eau, puis par ml d'acétate d'éthyle. On a chauffé le mélange au reflux, en agitant énergiquement, pendant 6 heures. On a refroidi le mélange, on l'a dilué avec de l'eau, et on a séparé les couches. On a lavé la couche organique avec du bisulfate de potassium à 3 % et de la saumure, on a séché sur sulfate de sodium, et on a fait évaporer en un solide. Par chromatographie sur 350 ml de LPS-1 dans un mélange 1:1 d'hexane et d'acétate d'éthyle, et évaporation des fractions de produit pur (Rf = 0,56 dans le même solvant), on a obtenu un solide. Par trituration avec de l'éther isopropylique et séchage à l'air, on a obtenu le produit sous la forme d'un solide blanc, 0,78 g, point de fusion 144-146 C. E) Sel monopotassique du 3-[(t-butoxycarbonyl)amino]-7-oxa- 2-oxo-l-(sulfo-oxy)-l-azaspiro[3.5]nonane On a délayé du l-(benzyloxy)-3-[(t-butoxycarbonyl)- amino]-2-oxo-7-oxa-l-azaspiro[3.5]nonane (0,78 g, 2,15 mmoles) dans 20 ml d'éthanol absolu, et on a traité par 0,25 g de palladium à 10 % sur charbon et par de l'hydrogène sous 1 atmosphère pendant une heure. On a séparé le catalyseur par filtration et on a chassé les matières volatiles sous vide pour obtenir une huile. On a repris cette huile dans 15 ml de pyridine sèche sous argon, et on l'a traitée par 0,69 g (4,34 mmoles) d'un complexe de pyridine et de trioxyde de soufre à 25 C pendant 3 heures. On a chassé sous vide les matières volatiles, on a-repris le résidu (solution partielle) dans de l'eau, et on a ajusté le pH à 6,75 avec du bicarbonate de potassium à 5 %. On a versé la suspension résultante dans une colonne de 20 ml de Dowex AG50 (K+), et on a élué complètement avec de l'eau. La lyophilisation a donné un solide, que l'on a chromatographié dans une colonne de 80 ml de HP-20 dans. un gradient d'eau et de 20 % d'acétone dans de l'eau. La 258106Z lyophilisation des fractions de produit a donné 0,64 g de produit sous la forme d'un solide blanc. F) Sel monopotassique de l'ester diphénylméthylique de l'acide (Z)-[[[1(2-amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-[[2-oxo-1- (sulfo-oxy)-7-oxa-l-azaspiro[3.5]non-3-yl]amino]- éthylidène]amino]oxy]acétique On a délayé du sel monopotassique de 3-[(t-butoxy- carbonyl)amino]-7-oxa-2-oxo-l-(sulfo-oxy)-1-azaspiro- [3.5]nonane (0,39 g, 1,0 mmole) à - 10 C sous argon, avec 2,5 ml de dichlorométhane sec et 1,0 ml d'anisole. On a ajouté une fraction de 6 ml d'acide trifluoracétique. Au bout d'une heure entre - 10 et 0 C, on a ajouté 6 ml de toluène sec et on a fait évaporer le mélange sous vide à 10 C. Par trituration avec de l'hexane, on a obtenu le 3- amino-7-oxa-2-oxo-l-(sulfo-oxy)-l-azaspiro[3.5]nonane sous la forme d'un solide blanc. On a traité de l'acide (Z)-2-amino-a-[[[[[(di- phénylméthyl)oxy]carbonyl]méthyl]oxy]imino]-4-thiazolacétique (0,42 g, 1, 0 mmole) dans 4 ml de diméthylformamide sec, à - 35 C, par 140 P1 (1,0 mmole) de triéthylamine, puis par 207 41 (1,0 mmole) de chlorophosphate de diphényle. Après avoir agité pendant une heure, on a ajouté une solution de 3-amino-7-oxa-2-oxo-l-(sulfo-oxy)-1-azaspiro- [3.5]nonane (provenant des opérations ci-dessus) dans ml de diméthylformamide sec, en même temps que 550 P1 (4 mmoles) de triéthylamine. On a chassé les matières volatiles à 10 C sous vide, et on a dissous le résidu dans ml d'acétone, puis on l'a dilué avec de l'eau jusqu'à formation d'un trouble. On a ajusté le pH à 6,75 avec du bicarbonate de potassium -dilué, et on a fait passer la solution dans une colonne de Dowex AG50-(K+) dans un mélange de 50 % d'acétone dans l'eau. L'évaporation a donné une suspension que l'on a chromatographiée dans une colonne de 60 ml de HP-20, dans un gradient d'eau et de 50 % d'acétone dans l'eau. On a lyophilisé les fractions de produit pour obtenir le produit sous la forme d'un solide blanc, 0,39 g. G) Acide (Z)-[[[1-(2-amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-[[2-oxo- 1-(sulfo-oxy)-7-oxa-l-azaspiro[3.5]non-3-yl]amino]- éthylidène]amino]oxy]acétique On a délayé du sel monopotassique d'ester diphényl- méthylique d'acide (Z)-[[[1-(2-amino-4-thiazolyl)-2-oxo- 2-[[2-oxo-l-(sulfo-oxy)-7-oxa-l-azaspiro[3.5]non-3-yl]- amino]éthylidène]amino]oxy]acétique (0,39 g, 0,57 mmole) dans 6 ml de dichlorométhane sec et 1,5 ml d'anisole, à - 10 C sous argon, et on a traité par 10 ml d'acide trifluor- acétique. Au bout d'une heure, on a ajouté 12 ml de toluène sec et on a chassé les matières volatiles sous vide à 10 C. On a lavé le résidu deux fois avec de l'hexane, puis on l'a repris dans de l'eau et on a ajusté le pH à 6,75 avec du bicarbonate de potassium dilué. Par chromatographie sur HP-20 dans de l'eau, on a obtenu le produit mélangé à des matières minérales. On a lyophilisé ce produit impur, on l'a repris dans de l'eau et on a ajusté le pH à 2,5 avec de l'acide chlorhydrique dilué. Par chromatographie sur HP-20 dans un gradient d'eau et de 50 % d'acétone dans l'eau, puis lyophilisation des fractions de produit pur, on a obtenu le composé du titre sous la forme d'une poudre blanche, 177 mg. Anal. - calc. pour C14H17N5010S2.2,08 H20 C, 32,53; H, 4,13; N, 13,55 Trouvé: C, 32,53; H, 3,52; N, 13,18. Exemple 4 Sel dipotassique de l'acide [3S(Z),4S]-[[[1-(2-amino-4- thiazolyl)-2-oxo-2-[[2-oxo-l-(sulfo-oxy)-6-thia-l-azaspiro- [3.4]oct-3-yl]amino]éthylidène]amino]oxy]acétique A) Ester benzylique de la N-(t-butoxycarbonyl)-a-(3-hydroxy- 2,3,4,5-tétrahydro-3-thiofuranyl)glycine On a traité une solution de 17,5 ml (0,125 mole) de diisopropylamine dans 300 ml de tétrahydrofuranne sec, à - 35 C sous argon, par 70 ml de n-butyllithium 1,71 M dans de l'hexane (0,12 mole), on a agité pendant 20 minutes, puis on a refroidi à - 70 C et on a traité par une solution d'ester benzylique de t-(butyloxycarbonyl) glycine (13,3 g, 0,03 mole) dans 60 ml de tétrahydrofuranne. Au bout de 45 minutes à - 70 C, on a traité la solution jaune foncé par une solution de 3-tétrahydro thiofuranone (5,0 g, 0,049 mole) dans 50 ml de tétrahydrofuranne. On a refroidi la solution à - 10 C, après quoi la couleur jaune foncé limpide a viré à un brun limpide. Au bout de 20 minutes à - 10 C, on a ajouté 7,2 g (0,12 mole) d'acide acétique glacial dans 20 ml de tétrahydrofuranne, et on a versé le mélange jaune clair trouble résultant dans 1 1 d'eau, puis on a extrait à l'acétate d'éthyle. On a lavé la couche organique avec du bicarbonate de sodium à 5 %, on a séché sur sulfate de sodium, et on a fait évaporer en une huile. Par chromatographie dans un mélange 2:1 d'hexane et d'acétate d'éthyle sur 900 ml de LPS-1, on a obtenu une séparation partielle des impuretés du produit. Par évaporation des fractions de polarité intermédiaire (Rf = 0,22 à 0,60) et trituration avec de l'éther iso- propylique, on a obtenu un total de 6,61 g de produit sous la forme d'un solide blanc, point de fusion 101-102 C. B) N-(t-Butoxycarbonyl)-a-(3-hydroxy-2,3,4,5-tétrahydro- 3-thiofuranyl)glycine On a traité une suspension d'ester benzylique de N-(t-butoxycarbonyl)-a-(3-hydroxy-2,3,4,5-tétrahydro- 3-thiofuranyl)glycine (2,65 g, 7,22 mmoles) dans 20 ml d'eau, par du bicarbonate de potassium (1,0 g, 7,8 mmoles), puis par 15 ml de méthanol. Par-agitation à 25 C pendant 14 heures, on a obtenu une solution homogène que l'on a diluée avec de l'eau et que l'on a extraite à l'acétate d'éthyle. On a acidifié la couche aqueuse avec du bisulfate de potassium à 10 %, on a saturé de chlorure de sodium, et on a extrait à l'acétate d'éthyle. Par séchage sur sulfate de sodium et évaporation de la couche organique, puis trituration du résidu avec de l'éther isopropylique, on a obtenu le produit sous la forme d'un solide blanc, 1,25 g, point de fusion 116-118 C. C) N-(Triphénylméthoxy)-N2-(t-butoxycarbonyl)-a-(3-hydroxy- 2,3,4,5-tétrahydro-3-thiofuranyl)glycinamide On a traité un mélange de N-(t-butoxycarbonyl)- a-(3-hydroxy-2,3,4,5-tétrahydro-3-thiofuranyl)glycine (0,92 g, 3,32 mmoles) et d'hydroxybenzotriazole hydraté (0,91 g, 3,33 mmoles), dans 30 ml de tétrahydrofuranne à 0 C, par de la dicyclohexylurée (0,68 g, 3,30 mmoles). Au bout d'une heure à 0 C, on a ajouté 0,91 g (3,30 mmoles) de otrityl hydroxylamine, et on a continué l'agitation entre 0 et 25 C pendant 18 heures. On a fait évaporer la suspension sous vide en un solide, puis on a trituré avec 300 ml de méthanol à 2 % dans du dichlorométhane et on a filtré. On a lavé le filtrat avec de la soude à 5 %, on a séché sur sulfate de sodium, et on a fait évaporer en un solide. On a placé une suspension de ce solide dans une colonne de 800 ml de LPS1, dans 1 % de méthanol dans du dichlorométhane. On a élué le produit avec le même solvant, et on a rassemblé les fractions pures (Rf = 0,46 dans du méthanol à 2 % dans le dichlorométhane), on les a rassemblées et on les a fait évaporer pour obtenir le produit sous la forme d'un solide blanc; 1,62 g, point de fusion 220-225 C. D) l-(Triphénylméthoxy)-3-[(t-butoxycarbonyl)amino[-2-oxo- 6-thia-l-azaspiro[3.4]octane On a traité une solution de 2-picoline distillée (0,28 g, 3,0 mmoles) dans 2 ml de dichlorométhane sec à - 70 C, par une solution d'acide chlorosulfonique (0,14 g, 1,2 mmole) dans 1 ml de dichlorométhane, et on a réchauffé le mélange à 25 C pendant une demiheure. A ce mélange homogène on a ajouté une suspension de 0,53 g (1,0 mmole) de N-(triphénylméthoxy)-N2-(t-butoxycarbonyl)-a-(3-hydroxy- 2,3,4,5-tétrahydro-3-thiofuranyl)glycinamide dans 5 ml de dichlorométhane, et on a mis le mélange au reflux vigoureusement pendant 3 heures. On a fait évaporer la solution limpide résultante à siccité sous vide, puis on l'a recouverte d'un mélange de 2 ml d'eau, de 7 ml de méthyl- isobutylcétone et de carbonate de potassium (0,52 g, 3,8 mmoles). On a mis le mélange au reflux, en l'agitant énergiquement, sous argon pendant 3 heures, on a refroidi, on a séparé les couches, et on a séché la couche organique sur sulfate de sodium et on l'a fait évaporer en une mousse. Par trituration avec de l'éther isopropylique, on a obtenu un solide. On a repris celui-ci dans un mélange 2:1 d'hexane et d'acétate d'éthyle et on l'a lavé sur une petite épaisseur de LPS-1. Par évaporation et trituration avec de l'éther isopropylique, on a obtenu 0,19 g de produit sous la forme d'un solide blanc, point de fusion 204-205 C. E) 3-[(t-Butoxycarbonyl)amino]-6-thia-2-oxo-l-hydroxy-1- azaspiro[3.5]octane On a agité pendant une heure à 25 C une suspension de 1-(triphénylméthoxy)-3-[(t-butoxycarbonyl)amino]-2-oxo- 6-thia-l-azaspiro[3.4]octane (0,41 g, 0,79 mmole) dans ml d'acide acétique à 80 % (20 % d'eau). Par évaporation sous vide, on a obtenu un solide blanc. On a repris celui- ci dans de l'acétate d'éthyle, on a lavé avec du bicarbonate de sodium à 5 %, et on a séparé la couche aqueuse. La saturation de la couche aqueuse avec du chlorure de sodium et des extractions répétées à l'acétated'éthyle étaient nécessaires pour récupérer le produit. Par séchage sur sulfate de sodium, évaporation, et trituration avec de l'éther isopropylique et de l'hexane, on a obtenu 0,275 g de produit, point de fusion 155-157 C. F) Sel de tétrabutylammonium de 3-[(t-butoxycarbonyl)- amino]-6-thia-2-oxo-l-(sulfo-oxy)-1-azaspiro[3.4]octane On a ajouté 0,23 g de 3-[(t-butoxycarbonyl)amino]- 6-thia-2-oxo-l-hydroxy-l-azaspiro[3.4]octane à une suspension, préparée au préalable, d'acide chlorosulfonique (0,31 g, 2,7 mmoles) et de pyridine (0,5 g, 6,3 mmoles) dans 8 ml de dichlorométhane à 25 C, et on a agité pendant deux heures et demie. On a ensuite ajouté, en secouant, 6 ml de bisulfate de potassium à 10 % et 0,34 g (1,0 mmole) de bisulfate de tétrabutylammonium. On a séparé les couches et on a extrait la couche aqueuse quatre fois avec du di- chlorométhane. On a séché la couche organique sur sulfate de sodium, on a fait évaporer, on a recouvert d'acétate d'éthyle à 0 C pendant 16 heures, on a filtré, et on a fait évaporer pour obtenir 0,63 g de produit sous la forme d'une mousse. G) 3-Amino-6-thia-2-oxo-l-(sulfo-oxy)-l-azaspiro[3.4] octane On a traité par 4 ml d'acide trifluoracétique une solution de 0,63 g de sel de tétrabutylammonium de 3- [(t-butoxycarbonyl)amino]-6-thia-2-oxo-l-(sulfo-oxy)-l1-aza- spiro[3.4] octane dans 5 ml de dichlorométhane et 1 ml d'anisole à 0 C. Au bout de 1, 75 heure, on a dilué la suspension résultante avec du dichlorométhane et on a filtré pour obtenir un solide blanc, après lavage avec du dichloro- méthane et de l'éther. Par séchage à l'air, on a obtenu mg de produit, point de fusion 150-155 C. H) Sel monopotassique de l'ester diphénylméthylique de l'acide [3S(Z),4S]-[[[1-(2-amino-4-thiazolyl)-2-oxo- 2-[[2-oxo-l-(sulfo-oxy)-6-thia-l-azaspiro[3.4]oct-3- yllaminoléthylidène]amino]oxy]acétique On a traité de l'acide (Z)-2-amino-a-[[[[[(di- phénylméthyl)oxy]carbonyl]méthyl]oxy]imino]-4-thiazole- acétique (0,21 g, 0,5 mmole) et de la triéthylamine (0,053 g, 0,52 mmole) dans 3 ml de diméthylformamide sec à - 40 C sous argon, par 0,134 g (0,5 mmole) de chloro- phosphate de diphényle, et on a agité pendant une heure entre - 40 et 20 C. A la solution résultante on a ajouté une solution de 3-amino-6-thia-2-oxo-1-(sulfo-oxy)-l-aza- spiro[3.4]octane (0,11 g, 0,43 mmole) dans 1 ml de diméthyl- formamide, puis 0,1 g (1 mmole) de triéthylamine. Au bout de 15 minutes à - 15 C, on a chassé les matières volatiles sous vide à 15 C, on a repris la gomme résultante dans de l'acétone et on a ajouté une quantité suffisante d'eau pour obtenir un mélange trouble (pH = 3,45), et on a ajusté le pH à 6,75 avec du bicarbonate de potassium. On a fait passer le mélange dans une colonne de Dowex AG50 (K+) dans un mélange 1:1 d'acétone et d'eau, et on a fait évaporer l'éluant en une bouillie. Par chromatographie sur HP-20, en utilisant une élution avec un gradient d'eau et d'acétone, et par lyophilisation des fractions de produit (Rf = 0,7 dans un mélange 5:1:1:1 d'acétate d'éthyle, d'acide acétique, d'eau et de butanol), on a obtenu le produit sous la forme d'un solide blanc, 0,21 g. I) Sel dipotassique de l'acide [3S(Z),4S -[[[1-(2-amino- * 4-thiazolyl)-2-oxo-2-[[2-oxo-l-(sulfo-oxy)-6-thia-1- azaspiro[3.4]oct-3-yl]aminoléthylidène]amino]oxy]- acétique On a traité par 8 ml d'acide trifluoracétique une suspension de sel monopotassique d'ester diphényl- méthylique d'acide [3S(Z),4S]-[[[1-(2-amino-4-thiazolyl)- 2-oxo-2-[[2-oxo-l-(sulfo-oxy)-6-thia-l-azaspiro[3.4]oct- 3-yl]amino]éthylidène]amino]oxy]acétique (0,21 g, 0,3 mmole) dans 8 ml de dichlorométhane et 1,5 ml d'anisole à - 10 C. Au bout de 15 minutes, on a ajouté 8 ml de toluene sec, et on a fait évaporer le mélange sous vide à 15 C. On a lavé le résidu avec de l'hexane. Par addition d'eau, on a obtenu une gomme insoluble. On a ajusté le pH de 1,50 à 6,75, ce qui a donné une solution légèrement trouble. Par chromatographie sur HP-20 dans de l'eau et lyophilisation des fractions de produit (Rf = 0,25 dans un mélange 5:1:1:1 d'acétate d'éthyle, d'acide acétique, d'eau et de butanol), on a obtenu le produit sous la forme d'un solide blanc, 118 mg. L'analyse a révélé que le produit contenait bien 2,55 moles d'eau. Anal. - calc. pour C13H 13N509S3K2.2,55 H20 C, 25,87; H, 3,02; N, 11,60; S, 15,93; K, 12,96 Trouvé: C, 25,86; H, 2,70; N, 11,48; S, 15,96; K, 13,31. REVENDICATIONS 1. Composé de formule -X R1-NH (C l (C2)M N-O-SO3H, éventuellement sous la forme d'un sel pharmaceutiquement acceptable, formule dans laquelle R1 est un radical acyle; n et m sont chacun, indépendamment, égaux à 1, 2 ou 3 et X est une liaison carbone-carbone saturée; n et m sont chacun, indépendamment, égaux à 1, 2, 3 ou 4, 0 la somme n + m R2 R3 n + m O O O O R40 R .. I..I4.,, 4..CLMF: -S-CH2-S-, -S-CH2-S-, -S-CH2-S- ou -N-C-N- O O R2 est un radical alkyle, aryle, hydroxy, alcoxy, alcanoyloxy, carbamoyloxy, alcanoylamine ou uréide; R3 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, aryle, alcanoyle ou carbamoyle; et R4 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou aryle. 2. Composé selon la revendication 1, dans la formule duquel R est un radical de formule S_ 0 et Y1 et Y2 sont chacun, indépendamment, un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, ou bien Y1 et Y2 forment, avec l'atome de carbone auquel ils sont fixes, un radical cyclopropyle, cyclobutyle ou cyclopentyle, et Y3 est un groupement hydroxy, amine ou hydroxyamine. 3. Composé selon la revendication 1, dans la formule duquel n et m sont chacun, indépendamment, égaux à 1, 2 ou 3 et X est une liaison carbone-carbone saturée. 4. Composé selon la revendication 1, dans la formule duquel n et m sont chacun, indépendamment, égaux 1, 2, 3 ou 4, la somme n + m 1, 2 ou 3, la somme n + m 6. Composé selon la revendication 1, dans la formule duquel n et m sont chacun, indépendamment, égaux OR " 4 à 1 ou 2, la somme n + m 7. Composé selon la revendication 1, dans la formule duquel n et m sont chacun égaux à 1 et X est un O O O O Il Il tl Il radical de formule -S-CH2-S-, -S-CH2-S-, -S-CH2-S- ou ROR O O 4.,4 N-C-N-. 8. Composé selon la revendication 1, qui est l'acide (Z)-[[[1-(2-amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-[[2-oxo-1- (sulfo-oxy)-l-azaspiro[3.4]oct-3-yl]aminoj]éthylidêne]- amino]oxy]acétique ou un sel de celui-ci. 9. Composé selon la revendication 1, qui est l'acide (Z)-[[[1-(2-amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-[[2-oxo-1- (sulfo-oxy)-l-azaspiro[3.3]hept-3-yl]aminoléthylidène]- amino]oxy]acétique ou un sel de celui-ci. 10. Composé selon la revendication 1, qui est l'acide (Z)-[[[1-(2-amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-[[2-oxo- l-(sulfo-oxy)-7-oxa-l-azaspiro[3.5]non-3-ylJamino]- éthylidène aminol oxy] acétique ou un sel de celui-ci. 11. Composé selon la revendication 1, qui est l'acide [3S(Z),4S]-[[[1-(2amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-[[2- oxo-l-(sulfo-oxy)-6-thia-l-azaspiro[3.4]oct-3-yl]amino]- éthylidène]amino]oxy]acétique ou un sel de celui-ci. 12. Composition à action thérapeutique, en particulier à action antibactérienne, caractérisée en ce que son principe actif est un composé selon la revendication 1.