FR 2574411 A1 19860613 FR 8518130 A 19851206 La présente invention concerne de nouveaux dérivés de nucléosides utiles comme agents anticancéreux et antiviraux et Les procédés pour leur fabrication. Les composés selon l'invention sont des dérivés de formule (I) et Leurs sels. O CH -O -W 2 B W'- C - 0 - C -H O O0 CH2 - O - P - O - P - O -I) g I O- O- O A OH C dans laquelle B est l'adénine, la cytosine, le 5-fluorouracile, la 5azacytosine, la 6-mercaptopurine ou la 7-désazaadénine; A et C représentent chacun l'hydrogène ou un groupe hydroxy; W représente un groupe alkyle saturé ou insaturé en C8-C20 ou un groupe 2 ou 3alcoxyalkyle; W' représente un groupe alkyle saturé ou insaturé en C7-C19. Dans la formule CI), le phospholipide comprend les isomères optiques D et L et la forme DL et le nucléoside peut être illustré par la 9-9arabinofurannosyladénine (ci-après ara-A), la 1-e-D-arabinofurannosylcytosine (ci-après ara-C), la 5-fluoro-2'- désoxyuridine ou d'autres nucléosides qui peuvent être utilisés comme agents anticancéreux et antiviraux. La présente invention concerne un nouveau procédé de fabrication d'un conjugué de 1-0-alkyl-phospholipide et de nucléoside. Le nouveau composé de formule (I) a été synthétisé pour la première fois par la demanderesse. La demanderesse et d'autres chercheurs ont décrit le composé analogue, le conjugué de 1,2-diacylglycéronucléoside, voir Journal of Medical Chemistry 25, p. 1322 (1982), Biochemical and Biophysical Research Communication 85, p. 715 (1978) et Biochimica et Biophysica Acta 69, p. 604 (1980). Dans cette technique antérieure, 2574 4 1 1 faisait réagir Le nucléoside-5'-monophosphoromorphoLidate avec le 1,2-diacylgtycéro-3-phosphate pour obtenir le composé anatogue. Mais La portion phospholipide de La présente invention consiste en 1-0alkyl-2-0-acytglycéro-3-phosphate et son nouveau conjugué avec le nucléoside n'a jamais été décrit dans La technique antérieure, mais a été préparé pour la première fois par la demanderesse. La présente invention est expliquée plus en détail ci-après. L'objet de la présente invention est de proposer de nouveaux médicaments anticancéreux et antiviraux qui possèdent des structures moléculaires et des propriétés physicochimiques uniques. Un autre objet de la présente invention est de proposer des procédés nouveaux et à haut rendement pour fabriquer Lesdits agents anticancéreux et antiviraux qui possèdent des struc- tures moléculaires et des propriétés physicochimiques uniques. Un autre objet de la présente invention est de proposer un procédé pour la fabrication d'une nouvelle classe de conjugués de phospholipides comme médicaments anticancéreux et antiviraux. Un autre objet de la présente invention est de proposer une nouvelle classe de liponucléotides qui agissent comme un nouveau système pour la distribution d'agents anticancéreux et - antiviraux sur Les cellules tumorales et qui forment des véhicules Lipidiques Cliposomes) qui pénètrent les parois de la cellule can- céreuse par le processus de Lysosomotropisme ou des phénomènes de membranes voisins. Les agents anticancéreux de l'invention, après avoir pénétré dans les cellules tumorales, se séparent à l'intérieur des cellules par des réactions spécifiques phospholipide-enzyme ou des mécanismes non spécifiques, en nucléoside ou nucléotide anti- cancéreux et antiviraux et, si la cellule possède un site de fixation spécifique du phospholipide, il devient un composé spécifique de la cible. En outre, pour le nucléoside qui nécessite la phospho- rylation pour une activité efficace, un conjugué confère cette fonction et conduit à un excellent effet thérapeutique pour les cellules résistantes dépourvues de nucléoside kinase. En outre, le 25744 11 1-O-alkylphospholipide lui-même possède des effets pharmaceutiques, spécialement une activité anticancéreuse et d'immunomodulation, et la combinaison du nucléoside avec Le 1-0-alkyLphospholipide aboutit à l'avantage d'effets additifs ou synergiques. Autrement dit, parmi les 1-Oalkylphospholipides, les 1-O-alkyl-2-lysophospholipides et leurs dérivés, la 1-0-alkyl-2-O-méthylphosphatidyL-choline ou -éthanolamine,sont décrits comme ayant l'activité inhibitrice et. préventive pour divers cancers des animaux et une activité d'immuno- modulation, voir Anticancer Research 1, p. 135 & 345, (1981); Seminar in Immunopatholoq, vol. 3, p. 187-203, (1979). Pour autant qu'il reste sous forme conjuguée, le groupe amino de l'ara-C ou de l'ara-A n'est pas susceptible de désamination par la cytidine- désaminase ou l'adénosine-désaminase. Comme le conjugué lui-même est lipophile, il agit comme une sorte de précurseur de médicament à libération retardée et atteint la cellule cible et,dans la cellule, les conjugués s'hydrolysent.en phospholipide et nucléotide. Le résultat est le même que si l'on administre deux médicaments et l'on peut s'attendre que les effets pharmaceutiques des deux augmentent l'indice thérapeutique du médicament anticancéreux. Selon un mode de mise en oeuvre du procédé selon l'invention, on condense un nucléotide de formule 0 B HO - 0O HO (III) HO dans Laquelle B est comme défini ci-dessus, en son morpholidate de formule O N 0- 0 0-/ o_(YH C(VI) HO 25744 Il dans laquelle 8 est comme défini ci-dessus, ou en son P -nucléoside-5'- P -diphénylpyrophosphate de formule O O B 4 O - P - O - P - 0 (CII> HO dans Laquelte B est comme défini ci-dessus, et ensuite on fait réagir avec un 1-O-alkyl-2-O-acylglycéro-3-phosphate de formule 0 CH2 - 0 - W W' - C - O- C - H O (VIII) CH2 - 0 - P - OH OH dans laquelle W et W' sont comme définis ci-dessus, pour obtenir Le conjugué de nucléoside de formule (I) ou ses sels. Selon un autre mode de mise en oeuvre, on condense un phospholipide de formule 0 CH - O - W W' - C - 0 - C - H O (VIII) I ' CH2 - O - P - OH OH dans laqueltLe W et W' sont comme définis ci-dessus, en son phospho- lipide-morpholidate de formule O - CH2 - 0 - W W' - C - o - C -H O (IX) CH2 - Q - P - N O o_ o dans laqueLLe W et W' sont comme définis ci-dessus, ou en son P - gycéro-3-P2-diphénypyrophosphate de formue gtycéro-3-P diphênylpyrophosphate de formule O CH2 - 0 - W W' - C - - C - H 0 0 (X) CH2 - O - P -O- P -O O- P 0 2! dans laquelle W et W' sont comme définis ci-dessus, et ensuite on fait réagir avec un nucléotide de formule 0 B HO - P- o (III) tO 0 HoZ0 HO dans laquelle B est comme défini ci-dessus pour obtenir le conjugué de nucléoside de formule (I) et ses sels. Le procédé pour fabriquer le composé de formule (I) est représenté dans le schéma de réaction suivant. Le nucléotide (III) i 2 est condensé en morpholidate (VI) ou en P -nucléoside-5'-P 2-diphénylDyro- phosphate (VII) et ensuite on fait réagir avec le 1-O-alkyl-2-O-acyl- glycérophosphate (VIII) pour obtenir le conjugué (Ia) à (Id) (méthode A ou méthode B). L'autre voie consiste à condenser le phospholipide (VIII) en son morpholidate (IX) ou son Pl-glycéro-3-P2-diphényLpyro- phosphate (X) et ensuite à faire réagir avec le nucléotide (III) pour obtenir le conjugué (Ic) ou (Id) (méthode C ou méthode D). Les composés de la présente invention et leurs sels euvent être utilisés en mélange avec des supports organiques et inorganiques acceptables en pharmacie. Le composé de la présente invention peut être sous une forme acceptable classique, telle qu'émulsion, émulsion, suspension, ampoules, poudre, granulés, capsules, comprimés et autres.ELLe peut également contenir des addi- tifs classiques, tels que charge, conservateur, stabilisant, dispersant, fumigant, tampon et colorant. 1H2 Schéma de réaction tr qs O Bi H2-0-1,'- z}-g-0 n1 p/ \ (VITLI) b-" t1IT)\> [1 té 11 /I C112-0-C181137IV-à (&9 C 1 513 1- 0-IL,- ON (111> 110 Mdthode B5 1 B - cytosine. ' adénine (VII) 0 111" ara-CUI'-Dl.PIIA) 1tJ HONH2 Cli -0-(CH2) |CH3 C2- 1C6 33 t yCH3(CH2)"n-C-o-C-1l C1513(--o--i t Me'tihod Ic a era-CDIW-DL-PSAC)Ho 2H C"2 "- -c,6"3 ',4 Ivltr > CH2-0- (rH2)lr.-H3 fZOC630\ CH3(CH2)m--C-0 C-1H Cs5H31-L-O-C--11 il CHZU- o-i /, - * Ix) |s 11. - hoe (Zc,zac-CI[-DL' ^ J Les exemples suivants illustrent L'invention sans toutefois en limiter la portée. EXEMPLE 1 1 --D-Arabinofurannosvlcvtosine-5'-di ohosohate-1--octadéc l-2-0- palmitovl-sn-qlycérol ou alcool 1-:_-D-arabinofurannosylcytosine-5- di hooh m-:2- i.t o li uL, ara-CDP-L-PBA, mth ode A). On soumet 1,7 g (2,6 mmol) de 1-0-octadécyl-2-0- palmitoyl-Sn-glycéro-3-phosphate (VIII, n=17, m=14, isomère L) à la coévaporation avec la pyridine à siccité, et ensuite on mélange avec 1,8 g (2,6 mmot) d'ara-CMP morpholidate de 4-morpholine-N,N'- dicyclohexylcarboxamidinium (VI, B=cytosine). On dissout le mélange dans 150 ml de pyridine anhydre et on agite à la température ambiante pendant 5 jours en conditions anhydres. On élimine ensuite la pyridine sous pression réduite et on élimine une faible quantité de pyridine par coévaporation avec le toluene. On dissout le résidu dans 15 ml d'acide acétique anhydre et 150 ml de mélange chloroforme- CH O30H-eau 2:3:1 (solvant CMW), et on agite à la température ambiante pendant 1 h et on ajoute à la solution 250 ml de chloroforme. On sépare la couche de solvant organique et on concentre sous pression réduite et on élimine une-faible quantité d'acide acétique restant par coévaporation avec 10 ml de toluène en trois étapes. On dissout le résidu dans 100 ml de solvant CMW et on l'adsorbe sur une colonne d'acétate de cellulose DE- 52 (2,5 x 50 cm, enveloppe, 5 C) et ensuite on élue la colonne avec le solvant CMW (chaque fois 1500 ml) avec un gradient linéaire de NH40Ac 0-0, 15 M. On recueille 900-915 mL d'éluat et on évapore sous pression réduite à une température infé- rieure à 30 C jusqu'a ce qu'il se forme des cristaux blancs. On lave à l'eau et on filtre la poudre cristalline blanche (sel d'am- monium du composé recherché) et,pour la transformer en sel de sodium, on la dissout dans le solvant CMW et on l'applique ensuite sur une colonne (2,5 x 15 cm) d'Amberlite CG-50 (forme Na+ et on recueille l'éluat et on l'évapore sous pression réduite. On recristallise le résidu dans le chloroforme et l'acétone pour obtenir 820 mg (31,2%) du composé recherché blanc. 1) Point de fusion: 199-202 C 2) rai5 = +33,50 CC=0,23, chloroformeméthanol-eau 2:3:1) 3) RMN (90 MHz): Solvant (CDCl3-CD30D-D20, 2:3:1): ô ppm 0,95 (6, t, 2CH3); 1,14-1,87 (58, m, 29CH2); 2,29 (2, t, CH2-C=0); 3, 27-4,42 (11, m, H2,, H31, H4,, H5,, CH2-0-CH2 et CH2-0); 5,15 (1, m, CH glycé- rol); 5,94 (1, d, J=7 Hz, H5 cytosine); 6,18 (1, d, J=5 Hz, H1); 7,80 (1, d, J=7 Hz, H6 cytosine) 4) Analyse élémentaire: C46H87N3014P2, 1 1/2 (CH3) 2CO,H20 C H N P Calculé: 56,51 9,20 3,92 -5,77 Trouvé: 56,81 9,27 3,69 5,87 EXEMPLE 2 1-8-D-Arabinofurannosylcytosine-5'-diphosDphate-rac-1-0-octadécyl- 2-O-palmitoyLglycérol (Ib, ara-CDP-DL-PBA) (1) Méthode A On prépare ce composé par condensation de rac-1-O- octadécyl-2-O-palmitoylglycéro-3-phosphate (VIII, n=17, m=14, mélange DL) avec l'ara-CMP-morpholidate (VI, B=cytosine) et ensuite on Le sépare comme décrit ci-dessus pour obtenir le composé recherché avec un rendement de 35%. Les mobilités chromatographiques et les paramètres de RMN sont en accord avec les valeurs théoriques. (2) Méthode B On peut également préparer ce composé par te procédé cidessous. On dissout 323 mg (1 mmol) d'ara-CMP (III, B=cytosine) et 371 mg (1 mmol) de tri-n-octadécylamine dans 7 ml de méthanol chaud et ensuite on évapore le solvant sous pression réduite et on dissout à nouveau le résidu dans le N,N-diméthytformamide (DMF) et on évapore sous pression réduite pour éliminer les traces d'eau restant dans le résidu. On dissout le sel de tri-O-octylammonium -d'ara-CMP sec ainsi obtenu dans 10 mL de dioxanne et 5 ml de DMF et on ajoute à la solution 0,3 ml de chlorophosphate de diphényle 0,45 ml de tri-n-butylamine et on fait réagir le mélange à la tempé- rature ambiante pendant 2 à 3 h en conditions anhydres. On élimine le solvant par évaporation sous pression réduite et ensuite on ajoute 25744 1 1 ml d'éther au P -(1-f-D-arabinofurannosylcytosine-5'-yl)-P - diphénylpyrophosphate (VII, B=cytosine) précipité et on maintient à 0 C pendant 30-60 min et ensuite on élimine l'éther. On dissout le précipité dans 2 ml de dioxanne et on élimine les traces d'eau dans le précipité par évaporation sous pression réduite. On sèche sur P205 pendant une nuit 663 mg (1 mmol) de rac-1-0-octadécyl-2-0- palmitoylglycéro-3-phosphate (VIII, n=17, m=14, mélange DL) et ensuite on dissout dans 1 ml de pyridine anhydre,et ensuite on fait réagir avec une solution du pyrophosphate (VII) ci-dessus dans 0,5 ml de dioxanne à température ambiante pendant 1 jour en condi- tions anhydres. Après la réaction, on élimine le solvant par évapo- ration sous pression réduite et l'on ajoute au résidu ainsi obtenu ml d'éther et on précipite le composé recherché. On dissout le précipité ainsi obtenu dans 100 ml de solvant CMW et on l'adsorbe sur une colonne (2,5 x 50 cm, enveloppe, 5 C) d'acétate de cellulose DE-52 et ensuite on élue et on purifie comme décrit ci-dessus pour obtenir le composé recherché avec un rendement de 30%. Les mobilités chromatographiques et les paramètres de RMN sont en accord avec les valeurs théoriques. EXEMPLE 3 1-0-D-Arabinofurannosylcytosine-5'-diphosphate-rac-1-0-hexadécyl- 2-0-palmitoylqlycérol ou alcool 1-f-D-arabinofurannosylcytosine-5'- diphosphate-e-palmitoyl-DL-chimylique (Ic, ara-CDP-DL-PCA) (1) Méthode A En principe, ce composé est préparé par le même procédé que décrit à l'exemple 1. On fait réagir 4,19 g (6,6 mmol) de rac-1-0-hexadécyl-2-0palmitoylglycéro-3-phosphate (VIII, n=15, m=14, mélange DL),qui a été coévaporé avec la pyridine, avec 3,43 g (5 mmol) d'ara-CMP-morpholidate (VI, B=cytosine) dans 300 ml de pyridine anhydre à température ambiante pendant 5 jours en condi- tions anhydres. On évapore la pyridine sous pression réduite et on traite le résidu comme décrit à l'exemple 1 et on l'adsorbe sur une colonne (2,5 x 50 cm, enveloppe, 5 C) d'acétate de cellulose DE-52 et ensuite on élue par le solvant CMW contenant un gradient linéaire de NH40Ac 0-0,15 M (chaque fois 1500 ml), on recueille la 25744 11 portion qui contient le composé recherché et on concentre au-dessous de 300C sous pression réduite jusqu'à formation de cristaux blancs. On transforme les cristaux ainsi obtenus en sel de sodium par trai- tement sur une colonne d'Amberlite CG-50 (forme Na) pour obtenir le composé recherché avec un rendement de 30%. 1) Point de fusion: 202-205 C (décomposition) 2) RMN (90 MHz)-: solvant (CDCL3-CD30D-D20, 2:3:1): 6 ppm 0,87 (6, t, 2CH3); 1,07-1,78 (54H, m, 27CH2); 2,35 (2, t, CH2-C=O); 3,274,35 (11, m, H2,, H3,, H4, H51, CH2-O-CH2, CH2-O); 5,15 (1, m,.CH glycérol); ,92 (1, d, J=7 Hz, H5 cytosine); 6,14 (1, d, J=5 Hz, H1,); 7, 88 (1, d, J=7 Hz, H6 cytosine) 3) Analyse élémentaire = C44H81N3014P2Na2, 1/2 H20 C H N P Calculé: 53,21 8,43 4,23 6,24 Trouvé: 53,69 9,27 3,92 5,72 2) Méthode B A un mélange au reflux de 3,17 g (5 mmol) de rac-1-O- hexadécyl-2-0-palmitoylglycéro-3-phosphate (VIII, m=15, n=14, mélange DL), 1,7 ml (20 mmol) de morpholine et 50 ml d'atcool t-butylique, on ajoute goutte à goutte une solution de 4,12 g (20 mmol) de N,N'- dicyclohexylcarbodiimide (DCC) et 75 ml d'alcool t-butylique et on fait réagir au reflux pendant 2 h. On agite le mélange de réaction à température ambiante pendant une nuit et ensuite on ajoute 20 ml d'eau et on agite à la température ambiante pendant 2 h pour décom- poser le DCC restant. On filtre et on sépare les cristaux blancs ainsi formés et on concentre le filtrat par évaporation sous pression réduite et on l'extrait par l'éther. On évapore l'extrait sous pres- sion réduite et on coévapore le résidu résultant (IX, n=15, m=14, mélange DLC) deux fois avec le toluène, et on ajoute ensuite 2,13 g (6,6 mmol) d'ara-CMP (III, B=cytosine) et 4,67 g (13,2 mmol) de tri-n-octylamine et on sèche le mélange à nouveau par coévaporation avec la pyridine en trois étapes,et ensuite on dissout dans 200 ml de pyridine et on agite et on fait réagir à température ambiante pendant 7 jours en conditions anhydres. On élimine la pyridine par évaporation sous pression réduite et on élimine complètement les traces de pyridine restant encore par coévaporation avec une faible quantité de toluène. On dissout le résidu dans 30 ml d'acide acétique et 300 mt de solvant CMW et on agite à la température ambiante pendant I heure et ensuite on ajoute 500 ml de chloroforme. On sépare la couche organique et on la concentre sous pression réduite et on élimine complètement les traces éventuelles d'acide acétique par coévaporation avec 10 ml de toluène en trois étapes. On dissout le résidu dans 100 ml de solvant CMW et on t'adsorbe sur une colonne (2,5 x 50 cm, enveloppe, 5 C) d'acétate de cellulose DE-52 et ensuite on élue par le solvant CMW contenant un gradient linéaire de NH40Ac 0-0,15 M selon la technique décrite à l'exemple1'l pour obtenir le produit recherché avec un rendement de 30%. Les mobilités chromato- graphiques et les paramètres de RMN sont en accord avec les valeurs théoriques. EXEMPLE 4 9-0-D-Arabinofurannosyladénine-5'-diphosphate-rac-1-0-hexadéc -2-0- palmitoylqly.cérol ou alcool 9-_-D-arabinofurannosyladénine-5'- diphosphate-L-palmitoyl-DL-chimylique (I d ara-ADP-DL-PCA, schéma. réactionnel, méthode A) On sèche 1,90 g (3 mmol) de rac-1-0-hexadécyl-2- O-palmitoylglycéro-3-phosphate (VIII, n=15, m=14, mélange DL) par coévaporation avec ta pyridine en trois étapes et on dissout 2,13 g (3 mmol) d'ara-AMP-morpholidate de 4-morpholine-N,N'-dicyclohexyl- carboxamidinium (VI, B=adénine) dans 200 ml de pyridine anhydre et on agite la solution à température ambiante pendant 7 jours en conditions anhydres. On élimine la pyridine par évaporation sous pression réduite et on traite le résidu par le même procédé que décrit à l'exemple 1 et on l'adsorbe sur une colonne (2,5 x 50 cm, enveloppe, 5 C) d'acétate de cellulose DE-52 et on élue par le solvant CMW contenant un gradient linéaire de NH40Ac 0-0,15 M, et ensuite on fait passer à travers une colonne d'Amberlite CG-50 (forme Na+) pour obtenir 851 mg (rendement 29%) du sel de sodium. 1) RMN (90 MHz): solvant (CDCL3-CD3OD-D20, 2:3:1): ô ppm 0,92 (6, t, 2CH3) ; 1,07-1,78 (54H, m, 27CH2); 2,35 (2, t, CH2-C=O); 3,27-4,35 (11, m, H21, H3,, H4,, H51, CH2-0-CH2; CH2-O); 5,07 (1, m, CH glycérol); 6,33 (1, d, J=4,5 Hz, Hi,); 8,17 (1, s, H2 adénine); 8,40 (1, s, H8 adénine) - EXPERIENCE 1 Activité antitumorale contre les cellules de Leucémie lymphoide L 1210 inoculées i.D. chez la souris On inocule par voie i.p. à des souris DBA/2J (mâles, poids moyen 25 g) 1.106 ou 1.105 cellules de leucémie lymphoide L 1210 et, apres 24 h, on dissout le médicament dans une solution à 0,9% de NaCl et on l'injecte aux souris et on compte le degré de survie apres 45 jours. Le test effectué selon Les United States Nationalt Cancer Institute Protocots (Cancer Chemothe- rapy Reports 3, p. 1-103, 1972). Le schéma de traitement (qd) est 1er jour; 1er, 5e et 9e; ou ler à 5e. La dose optimale dans le tableau est la quantité qui produit l'activité maximale. On étudie une Large gamme de doses. On mesure l'activité en comparant l'augmentation de la durée de vie. Ceci est effectué par comparaison des durées de vie moyennes des souris du groupe essayé et du groupe témoin. Le tableau I montre les résultats thérapeutiques de l'ara-C et de ses conjugués l'ara-CDP-DL-PBA (Ib) et L'ara-CDP-DL-PCA (Ic). La première partie montre les résultats de souris atteintes de leucémie lymphoïde L 1210 sensible à l'ara-C. Les souris témoins non traitées meurent 7 ou 8 jours après l'inoculation des cellules tumorales. Lorsque l'ara-C est injectée à une seule dose optimale de 400 mg (1644 micro- moles) par kg, l'augmentation de la durée de vie (ILS %) est de 14% et l'injection de 200 mg (822 micromoles) 1 fois par jour pendant jours donne une ILS de 129%. Mais, les conjugués ara-CDP-OL-PRA (Ib) et ara-CDPDL-PCA (I) à une seule dose optimale de 400 mg b c (395 et 407 micromoles, respectivement) par kg donnent une excel- lente ILS de 257 et 293%, respectivement. Lorsque la dose optimale est injectée 5 fois, elle conduit encore à une excettllente ILS de 229 et 264%, respectivement. La comparaison de la dose unique pour l'ara-C et ses conjugués est extérieure à la gamme. Dans le programme à 5 doses, les conjugués présentent une efficacité double à une dose de 1/8 ou 1/10 de la dose molaire d'ara-C, et les toxicités sont très inférieures. En second lieu, les résultats des traitements thérapeutiques de souris inoculées par des cellules de leucémie lymphoide L 1210 résistantes à l'ara-C, ce qui est dû à la désoxy- cytidinekinase existant en faibles quantités, montrent que les souris témoins non traitées meurent 8 à 11 jours après l'inoculation des cellules tumorales. Les traitements à une seule dose par l'ara-C ne présentent pratiquement pas d'effets (ILS, 6%) et' les traitements sur 5 jours donnent une ILS de 65%. Ces résultats indiquent que l'ara-C contient de la désoxycytidinekinase, mais en faibles quantités. Mais, les conjugués de l'ara-C, c'est-à-dire l'ara-CDP-DL- PBA (Ib) et l'ara-CDP-DL-PCA (I c), produisent des résultats théra- peutiques remarquables et sont prometteurs de grands espoirs dans la lutte contre le cancer. A la dose optimale de 400 mg/kg, soit en une seule dose, soit en quantités de 80 mg/kg/j pendant 5 jours, le résultat est une ILS de 259 à > 356% et, sur les 6 souris, 1 à 3 survivent plus de 45 jours et sont complètement guéries. En outre, à une dose de 167 mg/kg/j le premier, le cinquième et le neuvième jour (programme sur 3 jours), l'ara-CDP-PBA (Ib) donne une ILS de plus de 290%, et l'ara-CDP-DL- PCA (Ic) une ILS de plus de 374% c et plus de 3 souris, spécialement 6 souris sur 6 dans le cas de l'ara-CDP-DL-PCA, survivent plus de 45 jours et sont guéries. Donc, une dose 1/3 molaire d'ara-C donne une efficacité de 5 fois. Le fait que le conjugué soit efficace pour les souris inoculées avec des cellules de leucémie tympholde L 1210 résistantes à l'ara-C manquant de désoxycytidinekinase montre que le conjugué est intro- duit dans les cellules par endocytose ou un autre mécanisme et s'hydrolyse sous l'action d'une enzyme en phospholipide et ara-CMP, l'ara-CMP libérée étant phosphorylée en continu pour donner l'ara-CTP. En conséquence, au moment o l'ara-CMP est libérée du conjugué, la désoxycytidinekinase nécessaire pour la phosphorylation de l'ara-C n'est pas nécessaire. Avantages Comme le montrent les tests ci-dessus, ces conjugués manifestent des activités plus grandes que le médicament père, l'ara-C, même à des doses plus faibles, et ceci peut à son tour contribuer à l'améLioration de L'indice thérapeutique du médicament d'origine. En outre, l'ara-C a une courte période et il est nécessaire de L'administrer en continu pour qu'iL soit efficace, mais Le conjugué a une activité supérieure, même en une seule dose. Donc, les conjugués peuvent être utilisés comme médicaments à Libération retardée. Spé- cialement, le fait que le conjugué soit efficace chez des souris inoculées avec des cellules de leucémie lympholde L 1210 résistantes à l'ara-C signifie qu'il s'hydrolyse et libère dans les cellules cancéreuses l'ara-CMP et le phospholipide et exerce un effet important sur les cellules résistantes dépourvues de désoxycytidinekinase. Le phospholipide est le 1-0-alkyl-2-0- acylglycéro-3-phosphate et,après réaction biochimique, il est converti en 1-0-alkyl-2-lysophosphatidyl- choline ou -éthanolamine et, comme ces composés ont eux-mêmes égale- ment des activités retardant la croissance et le transfert contre les cellules cancéreuses et une activité d'immunomodulation, on peut s'attendre qu'ils exercent des effets additifs et synergiques. Le conjugué n'est pas simplement un précurseur de l'ara-C, mais il est considéré plutôt comme un nouveau médicament. En outre, par rapport aux autres précurseurs lipophiles de médicaments, les conjugués de l'invention ont l'avantage de former une suspension transparente dans l'eau par action des ultrasons. On a indiqué dans la littérature que, dans le traitement de patients leucémiques par l'ara-C, la production d'une force de résistance contre le médicament est Liée à la teneur relative de la cellule en désoxycytidinekinase et en cytidinedésaminase, voir Annals of New York Academy of Science 255, p. 247, (1975). Par contre, le conjugué de l'ara-C est doué de résistance à la cytidinedésaminase et le groupe amino ne s'hydrolyse pas. Il est raisonnable de penser qu'il aura un effet important dans le traitement de patients atteints de leucémie résistant à l'ara-C. Tableau I Activite antitumorale contre les cellules de leucémie lymphoide LC 1210 inoculées i.p. chez la souris b Programme de Dose optimale Jours de survie Composé traitement mg (pmoLe)/kg Composé traitement mg jmole)/kg gamme moyenne (T/C) ILSc % Survivants par jour à 45 jours Cont re L210/Od ara-C 1 400(1644) 8 - 10 8,0/7,0 14 0 1 - 5 200(822) 7 - 18 16,0/7,0 129 0 ara-CDP-DL-PBA (Ib) I 400(395) 15 - 29 25,0/7,0 257 0 1 - 5 100(99) 18 - 32 23,0/7,0 229 1 ara-CDP-DL-PCA (Ic) 1 400(407) 20 - 33 27,5/7,0 293 0 1 - 5 80(81) 21 - 30 25,5/7,0 264 0 Contre Li 2/ara-Ce ara-C 1 300(1233) 9- 10 9,5/9,0 6 0 1 - 5 60(247) 14 14,0/9,0 65 0 ara-CDP-DL-PBA (Ib) 1 400(395) 25 ->45 36,0/9,0 300 2 1 - 5 80(79) 30 -> 45 >41,0/9,0 >356f 3 1,5,9 167(165) 24 ->45 >39,0/10,0 >290f 3 ara-CDP-DLPCA (Ic) I 400(407) 11 ->45 >38,5/9,0 >328f 3 1 - 5 80(81) 26 ->45 30,5/8,5 259 1 1,5,9 167(169) - >45,0/9,5 >374f 6 ara-CMP et DL-PCA-P9 1 131 et 258 3 10 10,0/9,0 11 0 (407 chaque) 1 - S 26,2 et 51,4 4 - 15 14,0/9,0 56 0 (81 chaque) ,.............,,,..,... a: Chaque groupe de 6 souris DBA/2J (mâles, poids moyen 25 9) est inoculé par voie i.p. avec 1.106 cellules de L 1210/0 ou 1.105 cellules de L 1210/ara-C le jour 0. b: Produisant l'activité maximale. c: Pourcentage d'augmentation de la durée de vie: (T/C -1) x 100. d: L 1210 semblable à l'ara-C. e: L 1210 résistant à l'ara-C par défaut de désoxycytidine. f: 45 jours g: ara-CMP (III, B=cytosine) et rac-1-0-hexadécyl-2-0-palmitoyl- glycéro-3-phosphate (VIII, n--15, m=14, mélange DL). Il est entendu que l'invention n'est pas limitée aux modes de mise en oeuvre préférés de l'invention décrits ci- dessus à titre d'illustration et que l'homme de l'art peut y apporter diverses modifications sans toutefois s'écarter du cadre de l'invention. R E V E N D I'C A T I O N S 1. Conjugué de nucléoside et ses sels, caractérisé en ce qu'il répond à la formule O CH2 - - W I, I W' - C - 0 - C - H t IlIl CH2 - 0 - P-0- - 0 O k. I O-- O- HO C dans laquelle B représente t'adénine, la cytosine, le 5-fluorouracile, la 5-aza- cytosine, la 6-mercaptopurine ou la 7-désazaadénine; A et C représentent chacun l'hydrogène ou un groupe hydroxy; W représente un groupe alkyle saturé ou insaturé en C8-C20 ou un groupe 2 ou 3-alcoxyalkyle; et W' représente un groupe alkyle saturé ou insaturé en C7-C19. 2. Procédé pour la fabrication des conjugués de nucléosides de formule *O. CH2 - 0 - W llI B W' - C - O - C - H o o II Il -() CH2 - 0 - P - 0 - P - 0 - (C i t O- O- HO C dans laquelle B, A, C, W et W' sont tels que définis à la revendication 1, 257441 1 caractérisé en ce que L'on condense un nucléotide de formule B l i H-HO O--/ t HO dans Laquelle B est comme défini ci-dessus, en son morpholidate de formule O. -P-O I Il Ta', (VI) O- HO dans Laquelle B est comme défini ci-dessus, ou en son P1-nucLéoside-5'- 2_ P-diphénylpyrophosphate de formule- 0 0 B O - P - O - P - O t ' 0 (VII) O i 0 0 HO dans Laquelle B est comme défini ci-dessus, et ensuite on fait réagir avec un 1-0-alkyl-2-0-acylglycéro-3-phosphate de formule 0 - CH2 0 - W W' - C - 0 - C - H O (VIII) CH2 - O - P - OH OH dans laquelle W et W' sont comme définis ci-dessus pour obtenir Le conjugué de nucléoside de formule (I) ou ses sels. 3. Procédé de fabrication du conjugué de nucléoside de formule 25744 11 0 CH2- 0 - W ll I W' - C - O - C - H o B () I Il -Il B (I) CH2- 0 - P - O - P - O -- 0 O- HO C dans laquelle A, B, C, W et W' sont tels que définis à la revendication 1, caractérisé.en ce que l'on condense un phospholipide de formule O CH - 0 - W a, 2 W' - C - O - C - H O (VIII) I ' CH2 - 0 - P - OH OH dans laquelle W et W' sont comme définis ci-dessus, en son phospho- lipide-morpholidate de formule O CH2- 0 - W Il I W'- C - O - C - H o (IX) 1 11 / - CH2- 0 - P - N C O- dans laquelle W et Wl' sont comme définis ci-dessus ou en son P 1_ glycéro-3-P -diphénylpyrophosphate de formute O CH2- 0 - W Il. I W'- C C - H O C (X) CH 0 0 ( X) CH2 - 0 - P -0 - P -0 - I i O- 0 o 2574 4 1 1 dans laquelle WtW' sont comme définis ci-dessus, et ensuite on fait réagir avec un nucléotide de formule O " B HO - P - - | HO r HO dans laquelle B est comme défini ci-dessus pour obtenir te conjugué de nucléoside de formule (I) et ses sels. 4. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il consiste en 1-i-D-arabinofurannosylcytosine-5'-diphosphate- 1-0-octadécyl-2-0-patmitoyl-sn-glycérol. 5. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il consiste en 1-i-D-arabinofurannosyLcytosine-5'-diphosphate- rac-1-0-octadécyl-2-0-palmitoylgLycérol. 6. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il consiste en 1-1-D-arabinofurannosylcytosine-5'-diphosphate- rac-1-0-hexadécyl-2-0-patmitoylglycérol. 7. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il consiste en 9- -D-arabinofurannosyladénine-5'-diphosphate- rac-1-0-hexadécyl-2-0-palmitoylglycérol. 8. Nouveau médicament utile notamment comme agent anticancéreux, caractérisé en ce qu'il contient comme ingrédient actif un conjugué de nucléoside de formule (I) selon la revendica- tion 1.