FR 2584927 A1 19870123 FR 8510927 A 19850717 L'invention concerne une composition de bithionol sulfoxyde sous une forme nouvelle permettant diverses ap- plications thérapeutiques et agricoles de ce composé, plus vastes et efficaces qu'antérieurement. Elle comprend notam- ment des compositions liquides, stables, pouvant contenir - en association avec le sulfoxyde de bithionol - un dérivé de la tétramisole lévogyre. Le composé, connu dans le commerce sous la dénomi- nation de bithionol sulfoxyde, "BTS" ou "Bitin-S" est l'oxy- de de bithionol, c'est-à-dire le corps: OH OH ci Il S C1 Cl ou bis(hydroxy-2 dichloro-3,5 phényl)sulfoxyde. Ce produit est connu comme agent antiparasitaire et fongicide: il est employé avec succès en thérapeutique, en particulier celle des animaux. Ainsi, est-il couramment employé comme anthel- minthique pour le traitement de la douve du foie, surtout dans l'élevage d'ovinset de bovins. Cependant, étant donné l'insolubilité dans l'eau de ce produit(,/Pa seu1eCo'rme d'administration consistait jusqu'à présent à donner à l'animal une suspension aqueuse de ce médicament. Il fallait pour cela l'intervention de spécialistes, ou du moins de personnes très expérimentées, parce que la sédimentation des particules fines de l'anthelminthique dans leur suspen- sion fausse le dosage et peut conduire accidentellement à un sous- ou surdosage. Dans le premier cas, l'efficacité du médicament étant compromise, il y a des risques de mortali- té du cheptel du fait de la maladie; dans le second cas, on risque des intoxications plus ou moins graves. Bien que le bithionol sulfoxyde soit plus ou moins soluble dans dif- férents solvants, on ne pouvait pas en envisager l'adminis- tration par voie parentérale à cause des réactions possi- bles de ces solvants qui ne répondaient pas aux impératifs d'inocuité requis en thérapeutique vétérinaire; certains d'entre eux auraient pu convenir à condition d'être dilués avec de l'eau, mais cette solution ne pouvait pas être ap- pliquée, parce qu'une dilution aqueuse fait reprécipiter le produit actif. Pour les mêmes raisons, il était impossible d'obtenir une solution homogène d'un mélange de bithionol sulfoxyde avec un strongylicide. La présente invention apporte un progrès marqué dans les traitements des atteintes justiciables du bithio- nol sulfoxyde et des mélanges de ce composé avec d'autres anthelminthiques. Elle permet l'application des composés actifs sous la forme d'un liquide homogène, ne donnant pas lieu à la sédimentation, susceptible par conséquent d'être dosé avec précision et appliqué par des personnes non spé- cialisées. un autre avantage considérable de la composition suivant l'invention est la possibilité de l'administration de celle-ci par injection, forme qui était complètement ex- clue jusqu'à présent. Un autre avantage également très im- portant de la composition selon l'invention est qu'elle permet l'utilisation du bithionol et des autres anthelminthi- ques, composant le mélange, à des doses moindres que celles qui étaient jusqu'alors utilisées. Pour n'en donner q'un exemple pour le bithionol sulfoxyde, cette dose peut passer de 40 mg/kg de poids vif traité à 30 mg/kg pour une même efficacité. Lorsque l'on sait que la dose maximale tolérée est de 150 mg/kg, cela fait passer l'indice thérapeutique de moins de 4 à 5. Sous cette nouvelle forme de liquide homogène, stable, les propriétés fongicides du bithionol sulfoxyde peuvent être mises à profit non seulement en ce qui concer- ne l'homme ou les animaux, y compris en aquaculture, mais également vis-à-vis des plantes. Il devient en effet possi- ble de pulvériser le liquide ou solution suivant l'inven- tion sur les plantes dont les feuilles absorbent alors le principe actif, au lieu de le laisser sous la forme d'une poudre sur leur surface: on gagne ainsi considérablement en activité. Ces nouvelles compositions sont également uti- lisables en aquaculture (eau salée et eau douce) et en pis- ciculture (eau douce) ce qui n'était pas possible jusqu'à maintenant, étant donné l'insolubilité dans l'eau de ces produits. Ce sont alors les parasites vivant à l'état li- bre dans l'eau, ou fixés sur l'hôte, qui sont tués. La nouvelle forme des compositions suivant l'in- vention est une dispersion micellaire du composé en ques- tion dans un milieu aqueux renfermant un solvant du bi- thionol sulfoxyde, ainsi qu'un agent tensio actif. Ces dis- persions présentent les caractères des micro émulsions et ont pratiquement l'aspect extérieur de solutions vraies. Elles jouissent d'une stabilité très convenable à des tem- pératures ne dépassant pas 70 C et surtout entre 0 et 60 C, ce qui veut dire qu'à ces températures, les liquides suivant l'invention peuvent être conservés indéfiniment, sans qu'il y ait sédimentation de bithionol sulfoxyde ou d'un autre constituant. De préférence, la composition suivant l'invention contient également un agent de neutralisation de l'acidité ou/et un anesthésique local, ce qui, à la fois, rend son application indolore et améliore sa stabilité au stockage. Dans une forme d'exécution préférée, la composi- tion liquide renferme en outre un ou plusieurs autres pro- duits actifs, pour augmenter le spectre d'activité du bi- thionol sulfoxyde. De tels produits sont des tétramisoles, c'est-à-dire tétrahydro-2,3,5,6 phényl-6 imidazo(2,1-b)thia- zole CH S C6H, N DL, D(+), L(-) et leurs sels, en particulier chlorhydrates. Parmi ces thiazoles, le levamisole, c'est-à-dire la forme L(-), et surtout son chlorhydrate constituent un anthelmin- thique et un immuno-potentialisateur très apprécié. Le chlorhydrate de L() levamisole est connu dans le commerce sous différents noms, entre autres comme "Ergamisol", "Levasole", "Némicide", "Solaskil" etc. Il peut être très avantageusement incorporé dans les compositions suivant l'invention, d'autant plus que sa solubilité dans l'eau est de l'ordre de 20%. Ainsi, une composition particulièrement utile en thérapeutique animale est-elle constituée par une micro- émulsion de bithionol sulfoxyde renfermant du chlorhydrate de levamisole. Bien entendu d'autres dérivés du thiazole sus-indiqué peuvent faire partie de la composition suivant l'invention, à c8té du bithionol sulfoxyde; tel est par dl exemple le cas du/tétramisole; cependant, les formes L(-) sont en général plus efficaces. Lorsque la composition suivant l'invention con- tient du chlorhydrate de levamisole ou d'un autre composé tétramisolique, il est important d'y inclure également un tampon de pH pour en assurer la stabilité; le pH préféré est alors compris entre 2 et 5, ce qui concilie la stabi- lité du chlorhydrate de levamisole avec celle du bithionol sulfoxyde. Dans ces cas, il est souhaitable d'ajouter un anesthésique local pour contrebalancer l'effet d'un milieu un peu trop acide. D'une façon générale, les compositions stables, liquides et homogènes, suivant l'invention, contenant éven- tuellement un dérivé thiazolique mentionné plus haut, pré- sentent les teneurs suivantes, % en poids: En général Préférées Bithionol sulfoxyde 1 à 25 5 à 20 Composé thiazolique 0 à 10 2-8 Solvant du bithionol sulfoxyde 1 à 50 10-35 Agent tensio actif 1 à 40 5-35 Neutralisant 1 à 15 3-10 Eau tamponnée 5 à 50 10-40 Anesthésique local 0, 5 à 1 0,5 à 1 Pour l'utilisation en aquaculture, on peut ajouter à la formule un anti-mousse à la dose de 1 pour mille, particu- lièrement pour les traitements en bacs aérés. On utilise les produits commerciaux classiques tels: - Les Moussex de PROTEX (922 - 935 GL - 978 GE) - Les Rhodorsil de Rhône-Poulenc (416-426) - Le Déhydran (150) de Henkel Cet ajout ne perturbe pas la formulation. Lorsqu'on respecte les proportions appropriées, dont les limites sont définies ci-dessus, les compositions liquides sont stables, homogènes et transparentes dans le domaine de température indiqué plus haut. Elles présentent cette particularité que, si l'on s'écarte du domaine de température de stabilité, les particules, qui se séparent alors, se réémulsionnent quand la température est ramenée au domaine de stabilité; on s'en rend compte par le fait que le liquide redevient transparent. Pour les administrations parentérales, il est préférable d'utiliser des compositions dont la viscosité est inférieure à 65 cp à 37 C; les viscosités préférées se situent entre 25 et 60 cp à 37 C. La préparation d'une composition suivant l'inven- tion comprend de préférence la dissolution préalable du bithionol sulfoxyde dans la quantité appropriée de solvant. Ce dernier doit être choisi parmi les liquides admissibles en pharmacie vétérinaire. Tels sont par exemple les compo- sés suivants: diméthylacétamide, N-méthylpyrrolidone,gly- cérol, alcool benzylique, éthanol, acétone, diméthylsulfo- xyde, sulfolane, lactate d'éthyle, esters d'acides gras, par exemple myristate ou laurate d'isopropyle, glycols, tels que éthylène-propylène ou butylène-glycol,éthers de ces glycols,notamment éthyl éther de l'éthylène glycol, du propylène glycol, ou du butylène glycol; conviennent également les isopropyl éthers ou les butyl éthers corres- pondants; diglycols comme diéthylène glycol, et leurs dé- rivés comme les éthyl propyl isopropyl ou butyl éthers du diéthylène glycol; esters gras de l'éthylène glycol ou du propylène glycol, comme laurate, myristate, palmitate, oléate, stéarate de l'éthylène glycol ou du propylène gly- col; esters gras des diglycols correspondants; polyéthylè- ne et polypropylène glycols de différentes masses molécu- laires, notamment 200 à 1500 ou plus. L'énumération qui précède est donnée à titre non limitatif; il est possible d'employer encore d'autres solvants; les solvants préférés étant naturellement ceux dans lesquels la solubilité du bithionol sulfoxyde est la plus élevée. Les tensio-actifs de la composition sont, bien entendu, choisis parmi les agents de surface présentant toute garantie quant à leur emploi en pharmacie vétérinai- re; on peut indiquer à titre d'exemples non limitatifs: esters de sorbitol et leurs dérivés polyoxy éthylénés, les huiles de ricin polyoxy éthylénées, les copolymères bloc oxyde d'éthylène/oxyde de propylène, le lauryl sulfate de sodium, le dioctyl sulfosuccinate de sodium, lécithines d'oeuf ou de soja, etc. Comme mentionné plus haut, la composition suivant l'invention contient de préférence un neutralisant de l'a- cidité du bithionol sulfoxyde; celui-ci doit être compa- tible avec l'utilisation en pharmacie, lorsque la composi- tion est prévue pour des applications thérapeutiques. Des neutralisants préférés sont des amines non toxiques, notam- ment monodi- ou triéthanolamine. On peut cependant utiliser d'autres bases minérales ou organiques. Un adjuvant fort utile, stabilisant, des nouvelles compositions, est un tampon de pH qui peut être constitué par la solution aqueuse de la composition d'un système de sels tampon classiques. Conviennent particulièrement des phosphates (KH2PO4-Na2HPO4) ou, selon le cas, des tampons acétique, citrique, formique, lactique,tartrique ou man- délique. La question du pH ayant une grande importance pour la stabilité de la composition, il convient de distinguer entre les cas o le bithionol sulfoxyde est seul ou accom- pagné d'un chlorhydrate de tétramisole. Dans le premier cas, les pH les plus favorables s'échelonnent de 5 à 9, la con- centration en les sels-tampon étant généralement de 0,005 M à 1 M, et principalement entre 0,01 M et 0,1 M. En présence de chlorhydrate de tétramisole ou de levamisole, le pH est compris dans les limites entre 2 et 5. Pour les compositions renfermant à la fois du bithionol sulfoxyde et chlorhydrate de levamisole, le milieu est tamponné, à pH 2 à 5, au moyen d'un des tampons acides mentionnés plus haut, de préférence additionné d'un anesthésique local du type lidocaine. Les compositions suivant l'invention peuvent être stérilisées, avant leur emploi, par chauffage à une tempé- rature suffisamment élevée; en effet, comme déjà signalé dans la présente description, lorsqu'une séparation s'est produite au sein de la microémulsion, notamment du fait de la stérilisation, la composition initiale, limpide et homo- gène, se refait d'elle-même lorsque la température est ra- menée dans le domaine de stabilité de la composition. Un avantage, important pour les emplois thérapeu- tiques, est que, si l'on ajoute une quantité limitée - géné- ralement de 1 à 10% - de la nouvelle composition à une so- lution de sérum physiologique (9 g NaCl/l), on obtient une solution limpide ou, au moins, une dispersion extrêmement fine de la composition. Il en résulte pour la composition la possibilité de pénétrer les milieux physiologiques, fait très important pour les applications parentérales. Une bonne ré- sorption de la composition injectée est ainsi assurée. L'invention est illustrée par les exemples non limitatifs qui suivent. Dans le souci de simplification, certains com- posants ont été désignés au tableau 1 par leur dénomination commerciale, dont "Pluriol 9400" "Pluriol 6800" ou Pluronic F 68 "Cremophor EL" "Mergital EL 33" voici les significations. Copolymère bloc oxyde d'éthylène-oxyde de propylène à 40% d'oxyde d'éthylène, commercialisé par la Société BASF. Copolymère bloc oxyde d'éthylène-oxyde de propylène à 80% d'oxyde d'éthylène, commercialisé par la BASF et Atochem Huile de ricin éthoxylée vendue par la société Cremophor EL Huile de ricin éthoxylée vendue par la société Henkel. (Voir Tableau 1 à la page suivante). TABLEAU 1 f t T! t $....... COMPOSANTS 1 2 3 1 4 5 6 7 8 9 I i I _L I Bithionol sulfoxyde......... 15 16 12 10 6,21 16 16 16 8 ____________ ____.__ i 16____ Levamisole chlorhdyrate...... 19 2 3,8 1,9 381,9 i2[38 Tetramisole chlorhydrate...2,4 Monoéthyléther du diéthylène-_ glycol............... 25,5 30 32 32,5 46,2 24,1 23,9 25 26 Lactate d'éthyle............ 6,0 6 4,2 4,8 Diméthylacétamide............ 21,5 22, 4 6 Alcool benzylique............6,0 Monoéthanolamine..............2,5 2 2 1,5 1,5 115 3 1,2 Triéthanolamine..............2 2 Pluriol 9400........ 20 18 16 Cremophor EL.................. 30 l _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 2 3 0 ri tn o 41% %O m N% TABLEAU 1 (suite) [Composants 1 2 3 4 5 6 1 7 8 9 Pluronic F 68............... 22 Mergital EL 33............... 25 35,2 Pluriol 6800................. 15,0 Eau p. injections avec tampon phosphate 0,025 M............... 30 30 30 27,5 |. avec tampon mandelique 0,025 M............... 15,2 17 18,2 17 22,9 pH........................... 7,6 7,4 8 2,7 4 4,81 4 Viscosité à 37 C (cp) ...... 60 '44 51 43 38 o N Co..DTD: TABLEAU 1 COMPOSANTS C OMPOSANTS f10 11 12 13 14 15 J Bithionol sulfoxyde...............16 16 16 16 16 16 Levamisole chlorhydrate............ 1,95 3,2 3,2 4,3 1,95 1, 95 Lidocaine........................ 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 Monoéthyléther du diéthylène glycol............... 24,1 22,1 22,1 21 24,1 24,1 N Méthyl pyrrolidone............... 25,9 25,9 25,9 23 Diméthylacétamide................ 25,9 25,9 Alcool benzylique.................. Monoéthanolamine.................. 0,8 0,8 0,8 0,8 0,8 0,8 Triéthanolamine.................. Pluriol 9400.................... 18 18 18 18 18 18 Cremophor EL..................... Pluronic F 68..................... Mergital EL 33..................... Pluriol 6800....................... Eau p.injections avec tampon phosphate 0,025 M. avec tampon mandelique.... . 12,8 13,5 13,5 13,5 12,8 15,7 pH................................. 2, 37 2,7 2,34 2,31 2,46 2,34 Viscosité à 37 C (cp).............. 30,8 28,9 42,46 42,46 39,48 44,80i N rn 4- N N (suite) --à Essai d'efficacité et de tolérance a. - Ruminants % d'efficacité contre Fasciola hepatica..DTD: obtenu avec la solution 2 du tableau 1. TABLEAU 2 Des tests réalisés, aussi bien par injection intramusculai- re que par injection intrapéritonéale ou par administration orale, sur plusieurs séries d'animaux, ont montré une ex- cellente tolérance aussi bien locale que générale. Aucun effet secondaire n'a été observé. L'efficacité du bithionol sulfoxyde, sous forme de micro- émulsion a été confirmé au cours de différentes expérimenta- tions sur ruminants. Après infestation artificielle, à l'ai- de de métacercaires de Fasciola hepatica, on a trouvé des pourcentages d'activité résumés dans le tableau ci-dessus. A noter que, dans les expérimentations sur le lot de réfé- rence recevant du bithionol sulfoxyde suspension, par voie orale, à la dose de 40 mg/kg, on a trouvé une efficacité de 99,9%. Le terme "efficacité désigne, comme on le sait, le rapport % (N-Nt):N o N est le nombre de parasites trou- vés chez le lot témoin et Nt le nombre de parasites chez le lot traité. Voir Tableau 3 à la page suivante. Voes ose s Orale Intra- Intra- mqg/kgq péritonéale musculaire 71,8 75 82,7 84,3 94 91 100 99,8 100 1 0 Bithionol sulfoxydeLLevamisole - 30 mgL6 _mkg Py % d'efficacité obtenu avec la solution 12 du Tableau 1. TABLEAU 3 |- oies Orale Intra- Intra- Paaitspérito- muscu- néale laire Fasciola hepatica 100 99,9 100 Ostertagia ostertagi 99,6 99,5 99,8 Cooperia ancophora 98,3 99,6 99,5 Trichlostrongylus sp. 99,9 100,0 99,8 Oesophagostomum sp. 100,0 100,0 100,0 Dictyocaulus viviparus 99,5 99, 1 100,0 Des essais réalisés avec la solution 12: association de Bithionol sulfoxyde et de Levamisole montrent une réelle activité, aussi bien contre Fasciola hepatica que contre Dictyocaulus viviparus et contre les espèces de strongles digestives (Cooperia, Ostertagia, Trichostrongylus). Par ailleurs, sur les animaux traités, il n'a été observé aucun effet secondaire tant du point de vue local que du point de vue général. b. - Poissons - Solution 3 L'efficacité de la Solution 3 du Tableau 1 en aquaculture a été démontrée. C'est ainsi qu'à la dose de 30 mg de BTS par litre d'eau, tous les parasites sont tués alors que le poisson supporte parfaitement le traitement. La solution 3 est active sur les monogènes du poisson et, par exemple, sur le Diplectanum aequens. Elle est tolérée par les poissons couramment élevés en aquiculture comme le Dicentrarchus labrax. Essais de stabilité Des échantillons de la composition de l'exemple 9, qui contient 8% de bithionol sulfoxyde et 1,9% de chlorhydrate de levamisole, sont amenés à différents pH et conservés aux différentes températures, comme indiqué au tableau 4 ci- - après. Les pH inférieurs à 7 sont ajustés avec du tampon mandéli- que (1 M), tandis que les phosphates habituels ont servi (0,025 M) à fixer le pH supérieur à 7. Dans chaque cas, le dosage des deux corps actifs est effec- tué aux différentes périodes choisies et les teneurs en ces corps sont notées au tableau 4. TABLEAU 4 (solution 9) Une étude de stabilité dans le temps a été effectuée avec les différentes formulations du tableau 1. Les tableaux 5,6,7 montrent deux exemples pour les stabi- lités des solutions n 2,6 et 12. TABLEAU 5 1. STABILITE de la solution 2 (pH 7,4) Bithionol Chlorhydrate de sulfoxyde Levamisole pH 3,5 6 8 pH 3,5 6 8 Apres 10 jours à 0 C 8,0 8,0 8,0 1,9 1,8 1,7 C 7,9 8,0 8,0 1,9 1,7 1,6 37 C 7,8 7,9 7,9 1,85 1,55 1,4 Après 5 mois à 0 C 7,8 7,95 8,0 1,85 1,6 1,5 C 7,6 7,9 7,9 1,7 1,4 1,3 37 C 7,3 7,8 7,8 1,65 1,3 1,25 Temps 0 2 3 6 1 2 18 24 I (en mois). 3 i 1 Bithionol 16 15,9 16,1 16 15,9 16 16 sulfoxyde (en %) il_ TABLEAU 6 2. STABILITE de la Solution 6 (pH 2,7) Temps 0 3 6 12 18 (en mois) 3 Bithionol sulfoxyde 16 16 15,9 16 16 (en %) Levamisole chlorhydrate 1,9 1, 9 1,85 1,85 1,9 (en %) TABLEAU 7 3. STABILITEde la Solution 12 (pH 2,34) Temps Temps 0 3 6 12 18 (en mois) Bithionol sulfoxyde 16 15,9 15,8 16 15,9 (en %) Levamisole chlorhydrate 3, 2 3,2 3,1 3,0 3,1 (en %) On voit que le bithionol sulfoxyde se conserve bien aux pH de 6 à 8,et que même à pH 2 à 4 sa conservation est encore tout à fait satisfaisante. Par contre, le chlorhydra- te de levamisole tient mal aux pH 6 à 8, d'o obligation de le conserver à des pH plus bas. Le pH 2 à 4 convient prati- quement à ces deux principes actifs. 9r Revendications 1. Composition anthelminthique et fongicide compre- nant le bithionol sulfoxyde en tant que principe actif, caractérisée en ce que ce sulfoxyde se trouve à l'état de microémulsion dans un liquide renfermant de l'eau, du solvant du bithionol sulfoxyde et un ou plusieurs agents tensioactifs. 2. Composition suivant la revendication 1, caracté- risée en ce que le solvant et le tensioactif sont choisis parmi ceux dont l'utilisation en thérapeutique animale est admise. 3. Composition suivant la revendication 1 ou 2, carac- térisée en ce qu'elle est constituée en poids % de 1 à 25 de bithionol sulfoxyde, 1 à 50 d'un solvant de ce sulfoxyde, 1 à 40 d'agent tensioactif, 1 à 15 d'un neutralisant du sulfoxyde et 5 à 50 d'eau. 4. Composition suivant la revendication 3, caractéri- sée en ce que l'eau qu'elle contient est tamponnée à un pH de 5 à 9. 5. Composition suivant la revendication 3, caractéri- sée en ce qu'elle renferme en outre un autre composé actif, anthelminthique, hydrosoluble, en particulier composé thia- zolique, notamment le levamisole. 6. Composition suivant la revendication 5, caractéri- sée en ce que l'autre composé anthelminthique est le chlo- rhydrate de L(-) levamisole. 7. Composition suivant la revendication 5 ou 6, carac- térisée en ce que la teneur en le composé thiazolique, par- ticulièrement en chlorhydrate de levamisole, est comprise entre 0 et 10% en poids et le milieu aqueux est tamponné à un pH de 2 à 4. 8. Composition suivant la revendication 7, caractéri- sée en ce qu'elle contient en poids %: 5 à 20 de bithionol sulfoxyde, 1 à 8 de chlorhydrate de levamisole ou de tétra- misole, 10 à 55 d'un solvant dudit sulfoxyde, 5 à 35 d'agent tensioactif, 3 à 10 d'une alcanolamine, O à 1 d'un anesthé- sique local type lidocalne et 10 à 40 d'eau tamponnée à un pH de 2 à 4. une 9. Composition suivant/des revendications précédentes, utilisable comme remède contre des atteintes d'animaux, particulièrement ovins et bovins, notamment contre la fas- ciolose et les strongles gastro-intestinaux ou pulmonaires. 10. Composition suivant une des revendications 1 à 8, utile pour la destruction de parasites en aquaculture et dans la pisciculture.