FR 2566397 A1 19851227 FR 8509383 A 19850620 DERIVES DE L'ACIDE GLUTAMIQUE ET DE L'ACIDE ASPARTIQUE AYANT DES ACTIVITES ANTAGONISTES VIS-A-VIS DE POLYPEPTIDES BIOACTIFS ET PROCEDE POUR LEUR PREPARATION La présente invention concerne des dérivés originaux de l'acide D,Lglutamique et de l'acide D,L-aspartique qui peuvent être représentés par les formules générales ci-dessous: COOH (CH2)n CH-NH-CO-R1 IA) (IA) CO-R2 CO-R (CH) g 2 n CH-NH-CO-R1 (IB) COOH dans lesquelles n est égal à 1 ou 2, R1 est un groupe phényle, monodi-ou tri-substitué par des groupes alkyle en C1C4 linéaires ou ramifiés, qui peuvent être identi- ques ou différents ou par des halogènes, par un groupe cyano ou trifluorométhyle, et dans lesquelles R2 est choisi dans le groupe constitué des groupes morpholino, pipéridino et amino avec un ou deux substituants qui sont des groupes alkyle linéaires, ramifiés ou cycliques en C1-C8, et qui peuvent être identiques ou différents. Les composés de la présente invention se sont révélés posséder des propriétés pharmacologiques inté- ressantes pour les mammifères. Une de ces propriétés est la capacité de potentialiser l'activité analgésique de la morphine et d'autres médicaments analgésiques. Ces propriétés peuvent être interprétées, au moins en partie, comme dues à l'activité antagoniste puissante vis-à-vis de la cholécystokinine (CCK) ou d'autres peptides biorégulateurs que présentent un grand nombre des composés en question. Les composés de l'invention peuvent ainsi être utilisés avantageusement dans le traitement de diverses maladies humaines, telles que des maladies du système digestif, comme par exemple la colite et la dyskinésie biliaire; ou ils peuvent être utilisés pour le traite- ment de douleurs de toute étiologie et de toute intensité. Sur la base de leurs caractéristiques pharmacologiques, on peut également prédire leur utilisation dans le traitement de troubles psychiques qui peuvent être imputés à des déséquilibres dans les taux de neurones physiologiques de la CCK ou d'autres polypeptides bio- actifs, et également dans le traitement de l'anorexie, ils peuvent être utilisés pour augmenter le poids des animaux d'élevage ou pour le traitement d'affections dans lesquelles une croissance cellulaire pathologique est provoquée par des peptides bioactifs (probablement tels que des tumeurs). Les composés de l'invention, comme il a déjà été mentionné ci-dessus, ont une activité anti-CCK puissante sur divers modèles expérimentaux, tant in vitro qu'in vivo. Ainsi, ils réduisent les contractions induites par la CCK de la vésicule biliaire de cobaye, tant in vitro qu'in vivo; ils inhibent les contractions provoquées du colon chez le lapin, et ils augmentent la sécrétion biliaire chez le rat. Egalement intéressant est leur effet de potentia- lisation sur l'activité analgésique de médicaments analgésiques-narcotiques et non narcotiques. Cette potentialisation, en fait, permet tout d'abord de réduire considérablement la posologie des opiacés, limitant ainsi leur multitude d'effets secondaires indé- sirables bien connus, sans réduire pour autant considé- rablement leur indice thérapeutique. Ces composés peuvent également être utilisés pour restaurer l'activité analgésique de médicaments opiacés lorsque leur effet pharmacologique a diminué à la suite du phénomène bien connu de tolérance, sans qu'il soit-nécessaire d'augmen- ter la dose thérapeutique. Ces caractéristiques thérapeu- tiques favorables pourraient également permettre une désintoxication progressive de sujets qui sont devenus toxicomanes par l'utilisation prolongée de médicaments opiacés. Dans le cas d'analgésiques non narcotiques, leur action bénéfique va plus loin que l'augmentation de leur activité analgésique, qui est en elle-même utile, en ce sens qu'ils protègent également la membrane muqueuse gastrique qui est normalement endommagée par ces produits. Cette potentialisation de l'activité des médicaments analgésiques est entre autres reliée à la capacité des composés de l'invention de bloquer la dégradation hydro- lytique des encéphalines, peptides physiologiques endogènes ayant des activités analgésiques puissantes. Ceci conférerait aux encéphalines elles-mêmes une demi- vie plus longue, et par définition, une activité plus forte. Des formes pharmaceutiques des composés de l'inven- tion peuvent être préparées par des procédés classiques,- telles que par exemple des comprimés, capsules, suspensions, solutions et suppositoires, et elles peuvent-être admi- nistrées par voie orale, parentérale ou rectale. L'ingrédient actif est administré en général aux malades en des quantités de 0,1 à 10 mg/kg de poids corporel par dose. Pour l'administration parentérale, il est préférable d'utiliser un sel hydrosoluble du composé en question tel que le sel de sodium ou un autre sel non toxique, pharmaceutiquement acceptable. Des substances communément utilisées dans l'industrie pharmaceutique comme excipients, liants, parfums, dispersants, colorants, humidifiants, etc., peuvent être utilisés comme ingrédients inactifs. Le procédé de préparation des dérivés de l'acide glutamique et de l'acide aspartique de l'invention est caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes: a) réaction d'un anhydride interne répondant à la formule - 2) 1o (II) I (IB) étant séparés. La température de la réaction est de préférence de -10 à +10 C. Les anhydrides internes répondant à la formule (II) sont des composés nouveaux qui n'ont pas été prépares jusqu'à présent. Les anhydrides internes (II) sont préparés en passant par les étapes suivantes: b) réaction de l'acide glutamique ou de l'acide aspartique dans les conditions de Schotten-Bauman avec une quantité équimolaire d'un chloure d'acyle répondant à la formule Ri-CO-Cl, dans laquelle R1 a la significa- tion donnée ci-dessus, à une température de -20 C à 30 C, pour obtenir le composé N-acylé répondant à la formule: COOH I (CH2)n I n(III) CH-NH-CO-R COOH et c) déshydratation du composé répondant à la formule (III) par réaction en présence d'anhydride acétique dans un rapport molaire de 1 à 10, soit seul, soit en présence d'un solvant inerte misicible'à ceux-ci, à une température de -10 C à celle du reflux. La série d'étapes du procédé conforme à l'invention est illustrée intégralement dans le schéma réactionnel ci-dessous: COOlI COOH S I (H2) ACYLATION (lH2)n (III) CH-NH2 R1-CO-C1 CHl-NII-CO-R1 COOH (étape b) COOH CO CQOH (CHAD AMIDATION.!(2)n oeA (étape c) 0 ------- > (--C-R CH-NH-CO-R | (tape a) (II)1 (étape a) CO-R2 CO (325 n isoakeI B E1 -NHl-M-R i CW)H 256639? L'étape d'acylation b) est de préférence effectué à une température de 0 C à 15 C pendant 1 à 24 heures, une température d'environ 5 C et un temps de réaction de 12 heures étant recommandés. Dans l'étape c), le temps de réaction est générale- ment d'environ 30 minutes à 12 heures, de préeférence d'environ 3 heures, et la quantité d'anhydride acétique est de préférence de 3 moles par mole de composé (III). Dans l'étape d'amidation a), l'amine répondant à la formule R2H est de préférence introduite dans un rapport molaire de 2,5 à 1 par rapport à l'anhydride interne (II), et la réaction est effectuée pendant environ minutes à 12 heures, de préférence pendant 3 heures. Les pourcentages relatifs des composés répondant aux formules (IA) et (IB) sont fonction du type des substituants R1 et R2 utilisés. Les isomères IA et IB peuvent être séparés soit par cristallisation fractionnée (avec les solvants indiqués dans les tableaux C et D) soit par extraction dans un milieu basique, les composés répondant à la formule (IB) étant en moyenne plus acides. Les exemples suivants sont donnés à titre d'illus- tration de l'invention. Exemple 1 Préparation de l'acide 3,4-dichloro-N-benzoyl- glutamique (composé A-4) A une solution contenant 14,7 g (0,1 mole) d'acide L-glutamique dans 200 ml de carbonate de sodium 1N refroidi à 5 C, on ajoute simultanément 100 ml de carbonate de sodium 1N et 21 g (0,1 mole) de chlorure de 3,4-chlorobenzoyle, en agitant et en refroidissant, sur une durée d'environ 30 minutes. On laisse le mélange réagir pendant 12 heures. On l'acidifie au rouge Congo avec HC1 concentré et on sépare par filtration le précipité formé. On fait recristalliser le résidu dans-H20. Point de fusion: 141-145 C chromatographie sur couche mince (voir note du tableau), Rf: 0,46 Quantité obtenue: 24,6 g. Rendement 76,4 %. Tous les composés répondant à la formule (III) sont préparés par le même procédé (le schéma précédent). Les composés ainsi obtenus sont donnés dans le tableau A ci- dessous en même temps que diverses caractéristiques. pour les identifier, les rendements obtenus et les solvants utilisés pour la cristallisation. TABLEAU A: Dérivés D,L-N-acylés des acides glutamique et aspartique: ?OOH (CH 2)n H-NH-CO-R OOH COMPO---- I COMPO-| _POINT DE OLVANT SES nRREDMN FO UL SES| n R1 FUSION (oC)CRISTALLISATIONRf RENDEMENTFORMULE A-I 2 2-chloro-phnyle116-8 H20 0,32 76,5 C HC12NO A-22.l-chlorophenyle134-8 H L O40 A-3 2 4-chloro-phenyle105-7 H 0444,7 2 c.No S-7 H20 0,44 84,7 Ci2Ni2CN0 A-4 2 3,42dichloro-ph*nyje141-5 H20 0546 76,4 12 C12 O A-S 2 3,5-dichloro-phenye147-9 20 048 901 C 12H il ci2NO, A-62 2,4dichloro-phrnyi125-7 12 2 5 H20 0,43 58,S C t CINO 2 2Il 2 5 A-,2 i3,4Strichloro-phenyle143-5 H20/alcool 1:10,46 35,7 C H Cl N0 A-8 2.8S,7 C12 M10 ci32go2103 A-8 1 3,4-dichloro-ph-nye158-61 H20 0,38 86,b C H9C i0$ t%_9 z 2 11925d N A-9 2 4-Eluoro-phgnyle84-86 - 037 79 C 0,3779,5 ó1HiFN05 A-10 2 3,5-difluoro-ph9nyle148-51 H0 04 8 H20>4! 85)>5 Ci2HiiPNOs A-11 2 2-broao-phlnyle127-9' H20 033 93,1 C12 HI Br 0 A-12 2 4brcmo-phényle148-50H20/alcool 7:30O43 87>8 C2 Br5s 2 >43 87>8 CI2Hl ors A -1312 -brc m -pKenyle 212 12 s A-13 i 2-bromo-phenyle147-9 H20 0o19 90,2 C iHl BrOw A-14 Z 2-iodo-phenyle135-8 H0 0o35 70)5 C 2HiNO "'15.;. ' c,,. TABLEAU A (suite) oeMPOsEn R POINT DE SOLVANT DE endemt. COMPOSE n R1 FUSION(0C) CRISTALLISATION Rf (%) FORMULE A-15 2 4-iodophényle 171-3 H20/ alcool 7:3 0,47 84,8 C12 12IN5 A-16 2 3,4,5-triiodophenyle 180-4 H2O/ alcool 11 053 870 121035 H2 0 alol11 0;53 87)0 C 12H 101I3NO5 A-17 2 3-cyano-phényle 123-6 H20 0)22 81,2 C13H12N205 A-18 1 3cyano-phényle 175-9 H O 0,12 86,5 C12H1 N2o5 A-19 2 4-cyano-phényle oil 0,27 71,0 C13H122O5 A-20 2 3-methyl-phényle 127-8 H20 0,33 800 C13 15 N5 A-21 2 4-nethyl-phényle 102-8 H20 0,34 950 C13H15 N5 A-22 2 3,4-dindthylphenyle 131-3 H20/alcool 7:3 0,38 85,0 C14 17N05 A-23 2 3,5-dinmthylphényle 153-5 H2O/ alcool 7:3 0,41 83,5 C14H17N05 A-24 2 2,4-d imc thylphényle 98-105 H2O/alcool 7:3 0,38 658 C14 17N05 2 6, yC 14H170 A-25 2 2, 4,6-trirmthyl-phény] s170-4 H2O/alcool 7:3 0,43 72,0 C15H19N0 C15 H 9 O i A-26 2 4--thyl-phenyle 154-6 H20/alcool 7:3 0,38 88,6 C14H7N05 886 14H17O A-27 2 4-n-propyl-phCnyle 108-13 H20 0)41 82,3 C15H19N5 A-28 2 4isoprcpyl-phényle 49-52 H20 0,37 508 C15 O 2 15H19;5 A-29 2 4-n-butyl-phényle oil - 0,43 61,5 C16H21N5O C16H21NO A-30 2 4-isobutl-phenyle 118-25 H20 0,40 78,0 CH NO C16 21N5 A-31 2 4-trifluorométhyl- 153-5 H20 0t30 79,0 C13H12F3NO5 phenyle (*) Eluant utilisé: Chloroforme-acide -H2O (8-2-0.1) acétique Exemple 2 Préparation de l'anhydride 3,4-dichloro-benzoyl- glutamique (composé B-4 dans le tableau B) On ajoute 30,6 g (0,3 mole) d'anhydride acétique et 60 ml d'éther isopropylique à 30,0 g (0,1 mole) d'acide 3,4-dichloro-benzoyl-glutamique. On chauffe la masse au reflux (à 73-77 C) pendant deux heures. On la refroidit, on la filtre, on la lave avec une faible quantité d'éther pour éliminer l'anhydride acétique résiduel et on la sèche. On obtient ainsi 27,0 g du composé ci-dessus. Rendement 89,3 %. Point de fusion: 188-90 C. Tous les composés répondant à la formule (II) se préparent par le même procédé (voir le schéma). De nombreux exemples de ces composés sont donnés à titre d'exemple dans le tableau B ci-dessous, en même temps que plusieurs caractéristiques qui les identifient ainsi que les rendements obtenus. TABLEAU B: Dérivés d'anhydrides N-acyl-glutamique et aspartique répondant à la formule: @- I (2)n 9-NIhC-R1 COMPOSES POINT DE FUSION REND.NT FORM=LE COMPOSES n R.( )( I(c) (%) B-1 2 2-chloro-phenyle 129-31 7995 C H CINO 12 10 4 U- 2. 3-chloro-phényle 157-8 83,8 C 1H CINO 12 10C 4 13-3 2 34-chloro-phényle 187-90 878 INO 4 1210.,04 -4 2 3,4-dichloro-phenyle 188-90 89,3 C2H CI N c129 204 -. B-5 2 3,5-dichloro-phényle 214-16 74,7 C H C1 4 NO B-6 2 24-dichloroph1nyle 155-7 74,2 C H C1 NO 12 9 2 4 U-7 2 3,4,5-trichloro-phenyle 208-10 93,3 C H C1 NO0 12 3 4 13-8 1,4-dichIoro-ph6nyle 195-7 91>4 C H Cî2NO il 7 4 B-9 2 4-fluorophnyle 171-3 72,1 C2 H1 10FNO0 3-10 2 3,5-difluoro-phényle 198-203 91,2 C H F'N0 c 9 2H904 B-11 2 2-brorro-phényle 147-9 72,8 C H BrNO 1210 4 r., B12 2 4-bromo-phényle 200-3 76)9 C 2H1 oBrNO o B-13 1 2-bromo-phényle 1614 84,1 C tHrO 1sgil 4 'o B-14 2 2-iodo-phnyle 158-60 75,6 C H INO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ î 2 _ 1 0 4 TABLEAU B (suite) COMIPOSES. n R1 POINT DE FUSION REDE FORMLE (oc) _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ B-15 2 4-iodo-phtnyle 201-3 88,0 C12H 1 0iO4 B- 16 2 3,4,5-triiodo-plényle 225-8 852 C12H813N04 C12H813NO4 B-17 2 3-cyano-phênyle 171-3 76,97 C13H1JN204 B-18 1 3-cyano-phenyle 17377 81,9 C H N O 12 8 4 4 B-19 2 4-cyano-phényle 181-5 78,8 c13H 82 4 B-20 2 3-mTrthyl1-phOnyle 1448 74,0 C13H13NO4 B-21 2 4-mrthyl-pheny3e 188-90 74,2 C H NO B-22. 13H13 N4 B-22 2 3,4-dixrthy1-phenyle 161-3 82,5 C14H15N04 B-23 2 3,5-diméthylphényle 155-7 69,0 C H NO C14H 5NO4 B-24 2 284-dim&thyl-phnyle 135-8 412 14H15 4 -8 41,2 C 14 H 15 NO4 B-25 2 2#406-trimithyl-phenyls 160-5 38,8 C15 174 B-26 2 4-éthyl-phenyle 174-6 78,0 C H NO 14H 15 O 4 B-27 2 4-n-propyl-phény!e 159-61 72,4 C15H1 4 B-28 2 4-isopropyl-phnyle 153-5 645 1517N4 B-29 153-5 64,5 C 15H l 17O4 B-29 2 4-n-butyl-phenyle 142-4 73,0 C16H19N4 B-30 2 16H9NO4 B-30 2 4-isobutyl1-phenyle 139-43 72,8 C16 H19N4 1 16H 19NO4 B-31 2 4-trifluororéthyl1-pheny 157-9 79,0 13H10F3Nq o" 13 t uO Exemple 3 Préparation de l'acide D,L-4(3,4-dichloro-benzoyl- amino)-5-(di-n-butylamino)-5-oxo-pentanoique (Composé C-6 du tableau C) On introduit dans un réacteur 30,2 g (0,1 mole) d'anhydride 3,4-dichlorobenzoyl-glutamique et on les met en suspension dans 100 ml d'eau. On refroidit la masse à C environ et on ajoute goutte à goutte 32,2 g (0,25 mâole) de di-n-butylamine sur une durée d'environ 15 minutes. On laisse le mélange réagir pendant 3 heures à cette température et on l'acidifie avec de l'acide acétique glacial. On le filtre, on le lave à l'eau jusqu'à neutralité et on le sèche. On obtient ainsi 16,4 g. Rendement 38 % Point de fusion: 81-3 C (cristallisé dans l'éther isopropylique). Chromatographie sur couche mince Rf: 0,92. Tous les composés répondant aux formules IA et IB sont préparés par le même procédé (voir schéma précédent). De nombreux exemples de ces composés sont donnés à titre d'exemple dans les tableaux C et D ci-après en même temps que plusieurs caractéristiques qui les identifient et les rendements obtenus. TABLEAU C: Dérivés répondant à la formule COOH I (CH2) (I H2) CH-NH-CO-R1 COR2 COMPO-ROINT DE SOLVANT DE Rendemt. ES n R2 FUSION (OC) CRISTAMLISATION Rf (%) C-1 2 2-chloro-phényle di-npropyl-amino 133-5 Acét'ate déthyle 0 78 53,5 C-2,2 3-chloro-phenyle di-npropyl-amino 126-8 Acétone 080 17,0 C-3 2 4-chloro-phényle di-n-propylamino 101-3 Hi20/Ethanol 3:7 0,88 50,0 C-4 2 4-chloro-phenyle di-n-pentylamino 104-7 H20/Ethanol 1:1 0,94 24,2 C-5 2 3,4-dichloro-phSnyle di-npropyl-anino 108-10 Acétate d'éthyle 0,87 28,0 C-6 2 3,4-dichloro-phényle di-n-butyl-amino 81-3 Ether isopropyli- 0,92 38,0 C-7 2 3,4-dichlorophényle di-n-pentyl-amino 106-8 9R.er isopropyli- 0,95 31,7 C-8 2 3,4dichloro-phenyle di-n-iheyl-amnino 108-10 pMer isozpopyli- 0,97 21,8 que C-9 2 3,5-dichloro-phényle di-n-butyl-amnino 165-7 Il20/Ethanol 1:4 0,95 53,4 C-10 2 2,4-dichioro-phényle di-n-butyl-amino 124-6 H20/Ethanol 1:2 0, 92 57,6 C-11 2 3,4,5-trichloro-phényE di-n-butyl-amino 132-4 H20/Ethanol 1:4 0,96 23 e3 C-12 2 4-fluoro-phényle di-n-propyl-amino '123-5 H20/Ethanol 1:1 0,85 43,5 C-13 2 3,5-dfluro-phrnyle di-n-propyl-armino 132-6 H20/Ethanol 3:7 0,88 11,4 C-14 2 2-brorro-phényle di-n-propylano î 132-3 H2O/Ethanol 1:1 0,85 54,2 TABLEAU C (suite) CoMvPO- R1 Pt de o!Solvant de cris- Rend SES n R SE Sn. _. Susion( C)tallisation Rf_. C-15 2 4-bromo-plényle di-n-propyl-amino 129-31 Acétatce d'éthyle 0,83 20, 7 C-16 1 2-bromo-phenyle di-n-propyl-amino 123-4 Acétate d'éthyle 0,63 40, 9 C-17 2 2-iodo-phényle di-n-propyl-amnno 146-8 Acétate d'éthyle 0,86 25, 2 C-18 2 4-iodo-phenyle di-n-propyl-amino 104-11 Acétate d'éthyle 0,83 18, 3 C-19 2 3,4,5-triiodo-phénylo di-n-propyl-anrio 102-5 H20/Ethlanol 1:1 0, 88 27,6 C-20 2 3-cyano-phényle di-n-propyl-axdno 120-5 Acétate d'éthyle 0, 78 37,0 C-21 2 3-cyano-ph'nyle n-butyl-amino 130-2 H120/Ethanol 1:1 0,75 28,4 C-22 1 3-cyano-phényle di-n-propyl-amino 144-5 Acétate d'éthyle 0,63 20 0 C-23 1 3-cyâno-phényle cicldhe.yl-amino 188-92 H20 /Ethanol 3:2 0,69 90,7 C-24 2 3-cyano-plényle di-n-butyl-aminro 127-9 H20/Ethanol 1:1 0,82 54,8 C-25 2 4-bromo-phnnYl e di-n-butyl-amino 120-2 Ether isopropyliquc 0, 92 27,0 C-26 2 3,4-dichloro-pheny3o pipéridino 183-5 Ether isopropyliqu 0, 74 29,4 C-27 2 4-iodo-phifnyle di-n-butyl-anmino 86-92 H20/Ethanol 1:2 0, 81 39,8 o 2,.u CN TABLEAU C (suite) COMPOSES R R Pt de Solvant de crisendement n 1 fusion0 tallisation C-28 2 3-mnthyl-phényle di-n-propylaninc 132-3 Acêtaie d'éthyle 080 31 0 C-29 2 4-rmethyl-phényle l 137-9 0, 85 28,8 C-30 2 3,4-dimsthyl-phenyl " 142-4 0>83 44,0 C-31 2 3,5-dirmthylphényl, 144-6 éthanol/eau 3:2 0,89 23)4 C-32 2 2,4-dimethyl-phényl, 127-9 4cétate dl thyle 0,84 50,4 C-33 2 2,4,6-trinethyl- 166-8 0,89 39,5 Fhényle C-34 2 4-ethyl-phènyle 129-31 0,86 45,7 C-35 2 4-n-propyl-phényle 117-9 éthanol/ eau 1:1 0,82 38,3 C-36 2 4-isopropyl-phényle 147-150 n'thanol/ eau 7:3 0991 48,0 C-37 2 4-n-butyl-phényle 126-8 nmthanol/ eau 3:1 0>79 34,7 C-38 2 4-isobutyl-phényle.137-41 nthanol/ eau 7:3 0,85 24,5 C-39 2 4-trif luoronithyl- 119-21 ethanol 0,76 37D6 phenyle C-40 2 3,4dirmethyl-ph&nyl dl-ethyl-amino 191-2 éthanol 0,67 65,0 et 0 C-41 2 4-npropyl-phényle |"133-5 éthanol/ eau. 1:1 0,63 46,4 C-42 2 3,4-dimethy1phenyl. n-butyl-amino 155-7 gthanol/ eau 7.3 0,68 21,4 C-43 2 4-ethylphërY1e 137-9 éthanol 95% 0e68 27,6 L179hnl 5 TiBLEAU C (suite) COgrOîSES P Pt de Solvant de cris-RF(*) e nR1 R2 f usion IOC.allisation C-44 2 4-npropyl-p.l 141' fiS5 0' y C-45 2 3,4-d inythyl-hcnylh n-prpyl-ino155-7 isopropanol 0,76 20,2 COMPOSES t 1n n-propyIyl-Jmi14 eno15 78 1, C-46 2 3, 4-di'-ethyl-phéenyl n-hexyl-amino156-8aceton itcr ile 0,85 18,0 C-47 2 3, 4-dzrethyl-phenyE cyclcheiyl-ainno210-2nthanol 0 73 62 8 C-48 2 4-thylphnyle " 190-2 méthanol 0,78 31,3 I" tf C-49 2 4-isopropyl_-phenYle 20812nrthanol/eau 4.1 0,82 18,6 C-50 2 3e4-dimrthyl-henyl direthyl-amino1524_au /éthanol 9:1 0,37 29,0 C-51 2 3,4-dinathyl-phdnylE =rpholine 14750éthanol 080 40> 0 C-52 2 3,4-dinrthyl-phlnyl piperidine 172-4 nmthanol 0,82 33 8 C-53 2 3-ndthyl-phfiyledi-n-butyl-amino92-7 éthanol/eau 1:1 0, 88 12,7 C-54 2 3,4-dirrthyl-ph'eny 105-8 acétonitrile 0 91 13e3 C-55 2 3,4-dimr-thyl-pherny] di-n-pentyl-ainn 109-11 ethanol/eau 1:1 0 92 40 5 =.=.-=r== = _-"= (* Eluant utilisé:Alcool - acetane - H20 (5.2. 1) isoaxylique Lui o0 o- o _, TABLEAU D: Dérivés répondant à la formule O-R. (t2)n H-NH-CO-R1 _..._ __ _. -.... .. _. D-12 2 3,4-dimethyb di-réthyle 204-6 iréthanol 0.27 57.6 D-13 2 4-thy]e nbutyle 137-9 mrthanol 0. 48 37.5 D-1, 2 4-propyb n-butyle 138-40 O nthanol 0.40 53.8 D-15 2 3,4-direthyle di-n-propyle 118-21 n thanol - H20 0.47 28,8 (2:1)., D-16 2 3,4-dimsthyle n-propyle 167-9 H O20-acetcnitrile0.44 41,5 I2 (2:1) D-17 2 4-isopropyle piperidine 152-4 Alcool isopropyliqu.34 40.3 (*)Eluant utilisé alcool - acétone - H20 (52. 1). isoamylique Xt G%1 o\. Ov LO L'activité analgésique présentée par les composés de l'invention sera illustrée à présent par une série de tests pharmacologiques destinés à démontrer à la fois leur potentialisation de l'activité analgésique des opiacés et le mécanisme par lequel cette potentialisation est obtenue. Expérience No. 1: Augmentation de l'analgésie de médicaments analgésiquesnarcotiques chez le rat par le test de chauffage de la queue La méthode est celle décrite par Harris et coll. (J. Pharmacol. Exp. Thero 143 (1964) 141-148). On utilise des rats mâles ayant un poids d'environ -200 g, qui n'ont pas jeunéo On choisit un point de la queue et on l'irradie au moyen d&une source de chaleur (75 C), et on mesure le temps (en secondes) pendant lequel l'animal reste sans bouger sa On choisit un temps maximum de 8 secondes sous la source de chaleur, après quoi l'animal est dans tous les cas retire, pour éviter un endommagement des tissus. La mesure est effectuée avant (témoins) et après traitement par les médicaments.o L'administration des médicaments de l'invention est effectuée par voie intrapéritonéale (10 mg/kg) 10 minutes et aussitôt avant l'administration de morphine (2 mg/kg). Le pourcentage de variation est calculé pour chaque animal individuel par la formule suivante Temps après traitement (s) -temps témoin (s) % de variation = x 100 8 - temps témoin (s) - Les mesures ont été effectuées 10, 20, 30, 45, 60 et minutes après traitement par les analgésiques. Les résultats obtenus sont donnés dans le tableau 1, o figurent les groupes traités et les doses administrées, les variations moyennes en pourcentage (calculées pour des groupes de 5 animaux) de la latence de la sensation de douleur, les valeurs moyennes calculées pour la période 1 90 minutes (+ écart type) et le rapport de puissance de la morphine administrée seule ou en même temps que les composés qui font l'objet de la présente invention. Les résultats donnés dans le tableau 1 montrent que, à la dose essayée (10 mg/kg i.p.), les produits poten- tialisent l'activité de la morphine jusqu'à atteindre, pour les plus actifs, une activité qui est environ trois fois celle de la morphine seule. Tableau 1: Activité des composés de 1 'invention énumérés pour potentialiser l'analgésie des opiacés dans l'essai de chauffage de la queue. Temps J - _ Rappor Traitement 1 0. o 20t 30' 45' 60' 90 ' I0-90)ES d sance \.. _... _.. par rappor: Témoins-1072. 9,3 19,6 4,1 46,4 + 82 -8,7 * 13,5 18,2 5,1 19,9. 8>3 14.2 * 8,6 à la - morphi e seule Morphine (x) a108:60 54,2 1 77)0 46 6.21,0 41O 7 _ 16O0 32,0 17,0 -6,.10,0 29 8.23,0 l C - -I 6 5, 3 + i8,06 7 21 5,0 66, 34 O 82 7 119,0 68, 8 17O 59,3 /250 68, 2 0 22 9 c-2 27,8: 13,0 43,8: 25s0 67,5 ú20,0 64,2 À 22,0 74,: 16,0 57)3. 19,0 55,8.:17,, m. c-3 44', + 23,3 83,7: 16,3 77,8:17,1 466 0 245 7376 j 17,1) 5,8.22,8 61 9:l,2 21 M * C- 4 446 4 56 3 67,5' 13, 4 663.140O 60,4 416,3 59, a. 17,0 44 2 14,8 57, 0O,3 1 m c-s 34,5: 17,4 21, 4 16 0 59 5 21,1 8a47 15,2 63,9: 18,5 401:239 5.0,7 30 1,70 M. C-6 89,2: 6,7 91)3 * 8,7 83,6 410,0 82,1 + 16,6 79,8: 1710 38,2 10,6 77,4:19,6 2,S9 * C-7 67,9 e 14)3 71,5 o 17,6 794:10)0 84,6 o 10,5 92,9 * 2 72)6: 70 78,2 9, 225 M * C-8 67,4 420,5 74,1: 15s8 800:32s9 85,9 ú 1471 87), 12ú 9 7604; s375s810.)6 25 * C- 9 67 6 1:,0 65 8 o 20g0 71g9 ú1775 S9, 1 20J0 521 I 220 40,t. û,0 $b 11>6,c À * C-IO 56,9: 2 5, 86E,4 * 21 4 7 2 9 16i8 701 18,5 66o2 o 2i3 6 3, 223, 66 0 6 6 2! tt C-_l 25,2: 4$0 37>6 + 16,0 509:1190 54) 9,0 35,8 o O 503 00. 71 I4 M* C-I2 b4 4 16 7 78 63 I 190 6 16 16, 0 639 2 0 0 6 52 1Y7l 11,614 O 56 5I 6 t. C-13 2, 6 8,9 70,0 _ 18) 5 75,5 S15O0 566 * 19 62,3: 17,3 59)2 ú25,1 580:18,0 1,5 M * C- 4 36$5: 28,4 76,0 + 12,7 79,3 ú10,6 77,0 *6,7 9033:.3 71,9:33,2 73gl 201,0 24 M * C-I5 59,8: 14,0 84,2: 9s6 78)3.13,5 88)7 a 8e5 82j5 12,7 S 4 % 5 7'77, 2lGO51 M * C.16 4&3,2 11,0 88>7 1C0O 54, 8 5a8 473 * 11a8 26 1 11 75 22, 2:t6,7,70:24,O 58 M C-17 18,9. 10,0 37,0 12,0 45,8 +18,0 L,03 iz, 19,3 * 20,0 31,2 338,0 35,5: 3,9 H * C-18 48,9 o 31,0 659 + 24,s0 80D1 9s0 59tl J 20,0 33s,5 20s0 61,4:2,0 58,1 5, SS À C-19 3,6 + 12,0 42 8 19,0 58a) 421g0 66,1. 16jO 57,1 * 18,0 35)6:20>0 43,9 22,7 1,4 1 M * C-20 53,8 e 21, 4 85,7 + 10,0 02,0 z 8,0 99,1 + I O 91,2: 9 0 5182 9140 788:21,0 264 C - 2 1 48,6 19, 0 37, 4 12,0 54,8 a190 4 4 6 + 15,0 6 4, 0 z 1 5 49 10,0 5O7 9W 0 7 M * C-22 82,7 * 9,4 67,6 z 1 J0 884,4 9,3 83,3 *10>5 93,6 o 6:4 53J8 14,9 78,2:5,0 262 TABLEAU 1 (suite) Temps pport e puis ' 20' 30' ' 452 60' 90 M 9;ance Traitement _ ES:_:at 9,3 À i 44,appor Témoins -10,2 + 8,2 -8)7: 135 18,2 1 5,11929 _ 8.3: 8,621à la Wbrph.u(M) 10,8 4., 5,,2: 17 46,6 + 21 41,7 + 16 32 e 17 -6,t4* 10 29,8: 23 M + C-28 15,7: 10 6698. 18 68,3 e 20 68,4 + 17 74:+ Il 27,5: 5 53,5 25 M+ C-29 4 8,7 20 75 5: 10, 5 '73,6 * il 70,0 019 47,3. 23 6,0: 14 53 26 ) 53,5 26 M C-30 69,9 + 16 100 0 -' 0 95,2 + 4 8 91,8: 8 100: 0 100,0 Z 0 92,8 ""12 3,111 K + C-31 28,9 I 7 {4,3 * 25 5 4,7 + 22 68, 0 + 22 57)4. 16, 9)5 19 0,S4 D o4 1,6 M + C-32 21,8 z 5 58,6 17 83,5 + 10 89,8. 8" 78,4 13 52,2 22 6 4.0 À 252 >.5 g C-33 -., 1I 2 30 9,: 8 3 8 z 21 4,7.7 16 48Y7: 21 46,6: 12 34, ,i 418 1,35 M C-34 19,6 + 23 59 17 85,5;10 778, 91,6 67 e 20 59,1. 23 60, 6. 23 2,2 M C-35 39,9 15 62,,3 ú 23 13,7 ú 26 63,2 1 7 61,3ú 20 28,8 a31 4,9 * 21 1,5: M +C-36 8a6: 13 100,O I 0 à 96,9_3 90,0 10 96, 9ú3 924 25 80,8: 36 2,71 M C-37 27,6 I 13 45,8: 18 55,0j 1-6 51! 18 23,421 12,4 I 13 35>9 - 17 M. C-38 53,8 21 85,7 + 10 92,,0 8 991 * ' 191,2:. 9 5 1 g + C-40 43,8 * 15 69,1 '14 49,0 + 23 85, 6 76,5: 17 61,5, 14 64,2, 16 2, 15 A + C-41 32, 1 ' 18 *6 00 022 400 z 17 4 67,23 1{1S5 14 P: 20' 321,9. 20 M C-4. 29,0 z. 31 65m9 +24 0 8 0{'19 59,1 20 33)5: 20 61)4 z 12 58a2 16 K C-43 54,' 17 4 m _+ 23 38 9 z 26 36,8, 27 4,7 8+'23 225 13 40,7 Il 1 M C-44 - 1,6 Z il 17,0 '6 24,9 10 26,9 19 35 1:' 17 39,8 8 23,7 À 15 0,.; M C'45. 57,2: 18 9 z 03 95,7 +4 931 zl 7 77 7: 1 80,: 8 40 zO1 62,5 M + C46 14,7.: 9.60,0 z 18 28,0,5 55,2:20 30,2: 17 12,2 * I1 32,9 * 21, M C-'. 7 2 4,5: 4 63.}5 ú!8 52:)3 ú 17 80,1.22 73 2 '17 4 9. 19 a?,1 z 20 1,92 R C-48 42,1: 14 59 z z 521 78,4 ú 18;37 30 449 18 5 31_ 14, M + C-49 6 2 9 100;O:0 97,5.: 2 99,5. 0,5 99,2. 0,5 65,8 0:8 87,4 o 18 2,93 C-50 22,3: 13 68 9. 9 60,2'2 19 49,4 z 14 73,5s 15 24,7, 6,98 z 22 1.. M + C-51 78,7 + 18 82,8 - 12 90,5 '1 0 86 6,414 65,6 13 4,8,5 + tO. 7.5, *4 162, ' C-S? 72,8,,. 15 958. 3 986.3 4 8, 5 - 10 87.6. 8 453. 6 80..6 19 2,7D ' M + C-53 31,2 15 46,67: 28 70 >2 '23 76,9 22 4'5 6. 27 12,6 25 47,2 24 1, 55, M + C-5'. 77,0 1 0 8 9 y 1 zI 1 0 O 0 9 9, 20 0,869,6 ' 16 63,2,. 19 83,0 t 15 2,?7 M + C-55 89,3 +_ 16 86,2 i12 94,4 + '5 100 O 0 100 Z O 81,7 _193 88/6 +_ 122,97 TABLEAU 1 (suite) e puiss ce ' 20' 30'" 45' 60M 90' 1 (0-90).E rapp rt rraitemnent __.. .... à la mor- phine se le X * C-23 33,1 o 19,0. 49o9 * 15,O 58,2 e 17.06G93, 20,0 72,0 o 18,058,7 22,0 56,7 I 3,0 1,90 M. C-24 80,3 * 13,6 87,2 13,0 9619 3.0 100 0 I0g0 74,0 ú 16,0 75,3 o 14,0 85,6.!lO 2,87. M * C-25 59,7 15,0 49,0: 13,0.715 * 13.0 A,Q 2 22,0490 722,0 20,4 6,0 51, 9 18>G0 1,t4 C-26 501 * 17,A 80,3 * 20,0 84,7 o 11.071,8 ú 15,0 32,2 *7,0 4,9 6,0 S4,0 311 I SlI M * C-27 52,3 * 13,0 81,4 * 12,0 90,2. 7.0 85,9 * 105060,3 * 15>0 50,3 À13,0;o,n,17,8 2,35 H. 0-1 75)0 16,0 100,0 * 0,0 100, 0 *0.0 0694 14,i0100,0 *0,0 51,0. 21,0 8IQ.4.q,7 2,86 M À 0-2 85,6 * 14,0 9801 * 2,0 95,9 I 4.0 9696 ú3,0 95,5 * 3,0 87$5: 6,0 93,2. $3 3,3e "M * À0-3 63,8 170 79,9 3JO,0 100,O 0.0 58,6 18,0 33,8 o 18,0 3299 G 10,0 61,5 26,2 2,06 ). 0-4 72,8 * 15d0 95,8 * 3,0 96,3.o0 8595 0o 1,0795 o8,0 5s3 o 6,0 8005 o19,3 2,?0 O-5 72,2: 37 0 92 25 o7,0 95 3 5.0 96 9: 4, 0 773 o 10 75, c5: 33,0 e 11i 2,83 3 M. 0-6 33,2 * 22,0 45,8 4 23,0 50,7 o 20.0 44,5 o 24,045,3 o 24',020,2: 19,0 3,0O.. 9,0 3,3; 0. D-7 318a *9,0 48,0 16,0 70,5 o 15.073,7 o 13,0 8PG6 o 33,0 2: ' A 23,5 3293 o-8 29,0 * I5,0 50,I9:80 619b i 22.0 57,7 9 18,052,9 20p0 2OS3 * 32,0 1.6,7 14 4 1,56 M. 20-9 68,5. 19,0 74,0. 16,0 70,9 16.0 730 o 0 y 32,0 &5 o79 12)0;Sl6,0 2, S2 M. 0-10 41)0 * 8,0 58,6 o 17,0 59,8 o 17.062>7 o 150 6790: 1590 35D i 1;,0 50, o i!2 1>70 M À D-ll 25,3. 7,0 68)3 * 2030 76)! 180o 82,8 17 0 06 2 o 140 77, 0 13 0 69j1. 22,3 2)32 ..')o . . \éro TABLEAU 1 (Suite) Rapport Tem ps Il 490'HtIO 9O).E e puiss ence loi8 20e 30j.5' 60" 90D (10290).ESe puissce -.)r rapp rt à la mor- TraitetI___D__ hine s ale M + 0-12 45,5 * 2363,9 ú 158 416 I O 0 'O78,5 15 56,1,j2,l -320 239 N + 7,1 a 32: 1962$5. 2331)8e 2148,5+ 22 50,9 * 1438,8: 201,30 M + O-i 6 14 9394 e 74668b 157113: 17891 9.. 60,3: 2071e1. 12,41 11M + D-1 Sl,5o16 68437 I872,6o..1960e1I 2359,2181 345 3245 96 I 1, 83 M,, O-16'29;! 2!t2,8! 1810a p11'2219 6 I MH + 0-16:29 e7 o 2142,o 118to21 i2235C4: 1833,3e 2023,3 + 2034el17 114 M* D-17 62,3 z 15929 o7 00 O0 100 0 100 ' 0 100* O 92,515 3$10 . %00 Cr%) O' 0% o, Expérience No. 2: Essai à la plaque chaude La méthode est celle décrite par Eddy et coll. (J. Pharmac. Exp. Ther. 107, 385 (1953)). On utilise des groupes de cinq rats mâles d'un poids d'environ 150 g, et qui n'ont pas jeuné. Les animaux sont placés sur une plaque métallique au bas d'un cylindre transparente qui est chauffé à 55 + C par un mélange azéotropique bouillant (acétone - formiate d'éthyle 1!1). Le temps de réaction est défini comme l'intervalle qui s'écoule entre le moment o Vianimal est placé sur la plaque chaude et le moment o soit il se lèche les pattes, soit il essaie de sauter hors du cylindre. Le temps de réaction témoin est mesuré 10 et 5 minutes avant administration des médicaments et 10, 20, 30, 45, et 90 minutes après. Les animaux sont laissés sur la plaque pendant un temps maximum de 30 secondes. La réaction à l'administration du produit est considérée comme positive si l'on observe au moins un doublement du temps de réaction normal. Les résultats obtenus sont donnés dans les tableaux 2a et 2b, qui donnent les groupes traités, les doses administrées et les temps de séjour sur la plaque exprimés en nombre * de réactions positives par rapport au nombre traité. Tableau 2a Capacité de plusieurs composés de l'invention de potentialiser l'activité de médicaments analgésiques - dans l'essai à la plaque chaude. S _ - - -. __ ___ Posologie TOTAL TRAITEMENT mg/kg lop. 10' 20' 30' 45' 601 90' positifs x/30 Propoxyphène(Pr.) 15 2/5 2/5 3/5 3/5 1/5 3/5 12 Pr + composé C-20 15+ 1 (C-20)2/5 2/53/5 3/5 3/5 3/5 16 "I+,, "- 15+3 " 3/5 5/5 4/5 5/5 4/5 4/5 25 " + * 15+10 " 4/5 5/5 5/5 5/5 5/5 3/5 27 Oxyphénylbutazone (Oxy) 50 2/5 1/5 2/5 2/5 0/5 0/5 7 1/5 2/52/ / / Oxy+ canposé D-2 50+3 (D-2) 2/5 1/5 2/5 3/5 3/5 1/5 12 " + S 50+10" 1/5 1/5 3/5 3/5 2/5 2/5 12 +, , 50+30" 3/5 4/5 4/5 4/5 4/5 4/5 23 Acide acétylsalicilique 100 1/5 2/5 2/5 2/5 0/5 1/5 8 (AAS) Aas + corposé C-20 100+5 (C-20) 2/5 2/5 2/5 3/5 3/5 0/5 12 I! +,. 100+20 " 1/5 3/5 3/5 3/5 4/5 3/5 17 _ + _, 100+50" 3/5 2/5 5/5 5/5 4/53/5 22 Les résultats du tableau montrent que même à des doses de 3 mg/kg i.p., le composé C-20 peut doubler l'activité analgésique du propoxyphène. I1 y a, dans la pratique un effet maximum pour une dose de 10 mg/kg i.p. Total Posologie 10' 20' 30' 45' 60' 90' ositifs TRAITEMENT mg/kg i.p. x/30 propoxyphène (Prop.) 10 1/5 2/5 2/5 2/5 1/5 0/5 8 Prop. +composé C30 10+0.3 (C-30) 2/5 1/5 3/5 3/5 2/5 0/5 11 "0 + " " 10+1 (C-30) 3/5 4/5 4/5 4/5 2/5 2/5 19 " + " " 10+3 (C-30) 3/5 5/5 5/5 5/5 4/5 3/5 25 t4thadone (Mét.) 1 1/5 2/5 1/5 2/5 1/5 1/5 8 bMt. + COmPOsé C-36 1+0.3 (C- 36) 2/5 2/5 3/5 3/5 1/5 1/5 2 +,r,, + Hei l1+1 (C-36) 3/5 5/5 4/5 3/5 3/5 1/5 19 oC "+ " " 1+3 (C-36) 5/5 5/5 3/5 4/5 5/5 2/5 24 Co Oxyphény1butazone (oxy) 50 2/5 1/5 2/5 2/5 0/5 0/5 7 Oxy + composé C-30 50+3 (C-30) 1/5 1/5 3/5 2/5 2/5 2/5 11 " +" ". 50+10 (C-30) 1/5 2/5 2/5 3/5 3/5 2/5 12 " +" " 50+30 (C-30) 2/5 3/5 4/5 4/5 4/5 3/5 20 Acide acétylsalicylique (Asa) Asa +composéC-36 100 1/5 2/5 2/5 2/5 0/5 1/5 8 fi +" " 100+10(C-36) 1/5 2/5 3/5 2/5 1/5 1/5 10 et + " 100+30(C-36) 1/5 2/5 2/5 3/5 3/S 3/5 14 + " 100+100(C-36) 3/5 3/5 4/5 4/5 4/5 2/5 20 t- O' o '.1... _...0 Z566397 Les résultats du tableau 2b montrent que même des doses de i mg/kg iopo des composés en question sont capables d'au moins doubler l'activité analgésique du propoxyphène et de la méthadone. Pour augmenter l'activité analgésique des médicaments non narcotiques, des doses plus élevées des médicaments de l'invention sont nécessaires, et la significativité est généralement comparable aux doses plus élevées. Expérience No. 3: Influence de plusieurs des composés de l'invention sur les activités analgésiques d'opiacés endogènes libérés par choc transcutané chez le rat et mesurées par l'essai de chauffage de la queue La méthode est celle décrite par Lewis et coll. J. Neurosc. 1, 358 (1961). On utilise des rats males qui n'ont pas jeuné et dont le poids est de 200 g environ. Les animaux sont soumis à un stress par application d'un courant de 60 Hz - 2,5 mA sur la patte de devant en Impulsions d'une durée d'une seconde toutes les secondes pendant 20 minutes. Ce régime de stress provoque la libération d'opiacés endogènes. Aussitôt après la stimulation électrique, les animaux sont soumis à l'essai de chauffage de la queue pendant les temps indiqués dans le tableau. Les composés sont administrés par voie i.v. aussitôt avant le choc électrique aux doses indiquées dans le tableau 3. TABLEAU 3 Latence moyenne (en s) déterminée par l'essai de chauffage de la queue pour des temps différents (minutes) à partir du choc électrique (valeurs moyennes pour des groupes de cinq animaux + ET) emps - Traitement e mJ/kg iv 50 10' 15' A: Témoins - -2983 t 0,113,04 0,292,70 È027 T5moins soumis B:à uon stresumis - 5,16 + 0,23 3,98 0,203 3,10 + 0, 19 t v. A 8_7407 2354j} 1 073 C: composé C-20 + stress 1 7"5 + 0,3 5,34 0, 46 3,88 + 0,29 t.v. A 11,18 (***) 4,21('*) 2,79 (*) t v. B 6f03 (**) 2,67 2,20 D: composé C-20. + stress 3 8,48 + 0,626,42 + 0,214,98 i 0,36 t vo A 8,81 (***) 9,23 (*4) 4,92 (**) t v. B 4,97 (**) 8,77 (***) 4,0 (**) E: composé D-2 + stress -1 9,2 0,53 7,0 i 0,86 5,28 i 0,64 t v. A 10,50 (***) 4,42 (**) 3,59 (**) ___6__94(***) __ 4 3_9_( 322*_*) F: composé D-2 + stress 3 9,6 " 0,46 7>24 i 0,585,08: 0,52 t v. A 12,42 (***) 6,38 (***) 3,97 (**) t v. B 8,47 (**) 5,29 (**) 3,57 (**) Note: (*) P (**) P (***) P 3 o 6 3 - 31 - Tableau 3 (suite) DOSE Traitement -5' 10' 15' Mi/Kg iv G: composé C-30 + stress 1 7,26 + 0,52 6910 -1 0,49 4,68 + 0,5 t v. A 8,11'** 5,34** 3,10** t v. B 3,64** 3,97** 2,67* H: composé C-30 + stress 3 9,46 + 0,64 7996 + 0,61 6,82 + 0,78 t v. A - t v. A10,06**- 7,22*** 4,95** t V. B 6 96,28*** 6,14*** 4,65** I: composé C-34 + stress 1 5,40 + 0,35 4,9 + 0,25 3,4 + 0; 16 t v. A 7,05*** 4,80** 2,24 t v. B 0,76 2,82* 1,44 L: composé C-34 + stress 3 6,56 + 0,33 5,58 + 0,31 3,98 + 0,32 t v. A 7,11*** 5,92*** 2,92* t v. B 3,45** 4,26** 2,36* M: composé C-36 + stress 1 6,9 +F 0,74 6,5 + 0, 42 4,66 + 0,55 t v. A 5,34*** 6,72*** 2,92* t v. B 3,31** 5,36*** 2,48* N: composé C-36 + stress 3 9>22 + 0,67 8,1 + 0,43 9,28 + 0,64 t v. A 7, 70*** 9,84*** 9,30*** t v. B 5 66*** 8,74*** 9,18*** _L _ _ __ _ _. _ (LO'O 1,s6 t *,Ugcj :;s0 ó] *A. +' 80 LO 86s S9 0 PSL SS.- S + _ _ _ - - - 6ú-D ssoduoo:d 6ú-D 9SOdUI OD: 9cO p O't'SE'lO+ 8Ss eo -+ E'9 L ss;Daqs+ 6ú-3 gsoduioQoi *L ' 0. __ '.. A'T I t/ftNn -qSOCa (s;9ns) ú n qT Z6ú99 Z Les résultats du tableau montrent que même à des doses de 1 mg/kg, les composés de l'invention peuvent augmenter l'activité analgésique d'encéphalines endogènes généralement dans une mesure hautement significative. - cette augmentation est fonction de la dose, l'effet augmentant en fait à la fois en intensité et en durée en fonction de la dose. Expérience No. 4: Potentialisation des activités analgésiques des encéphalines induite par certain des cgmposès de l'invention Pour vérifier l'un des mécanismes possibles de l'action des composés de l'invention, à savoir leur inhibition possible de la dégradation enzymatique des encéphalines endogènes, on a effectué l'expérience suivante: une canule a été- implantée dans le ventricule latérale droit de rats mâles d'un poids de 150 - 200 g (on a utilisé des groupes de cinq animaux) pour permettre l'administration intracérébroventriculaire (i.c.v. )- de médicaments conformément à la méthode de Noble et coll. Les animaux ont ensuite été traités (i.c.v.) par 3 mg de D-ala-méthionine-encéphalinamide (DALA) immédiate- ment après une injection (i.c.Vo) des composés en question aux doses indiquées dans le tableau 4. L'analgésie a été déterminée par l'essai de chauffage de la queue déjà mentionné, pendant les temps donnés dans le tableau. D'après les résultats donnés, on peut constater l'action de potentialisation des composés essayés sur l'effet analgésique de l'encéphalinamide (DALA) tant en intensité qu'en durée. Cette activité, qui est hautement significative, même à des doses de 0,01 pg/kg est probablement liée - à une activité inhibitrice d'une enzyme (ou de plusieurs enzymes) responsable du métabolisme des encéphalines. TABLEAU 4 Augmentation de l'activité analgésique de la DALA induite par plusieurs composés de l'invention, déterminée par l'essai de Chauffage de la Queue chez le rat GROUPIT e s ttd e GROU TRAITEMENT Temps 10' 20' 30' 45' 60' 90' Moyenne Student Doses TRAITEMEINTDose Student /4,g/kg (ICV) | A Témoins - -3,3+ 0,3+ 0 9+ -4,3+ -3,0+ -1,1+ -2,0+ 496 5,2 4,5 5,0 5,5 5,0 2,1 B DALA (D) 10 21,9+ 25,9+ 26,2+ 26,0+ 7,3+ 5,0+ 18,7+ v. A: ,0 19,2 18,8 192- 7,1 5,7 ' 9,9 5,07 *** v. A: C DALA + 10(D)+0,003 5,7+ 44,6+ 32,3+ 30,1+ 24,5+ 72,+ 24,1+ 4,20 ** w composé ' 4,4 15,6 14 9,3 7,7 3,6 13,8 v. B: ' C - 20. 0,72 V. A: D DALA + 10(D)+0,01 16,5+ 62 5+ 64.,1+ 45,4+ 45,3+ 16 3+ 41,7+ 5,0 *** composé 4,7 18,7 22,2 18s4 20,8 5,8 21,2 v. B: C - 20 2,41 * I. v. A: E DALA + 10(D)+05003 34,9+ 54,0+ 45,5+ 27,5+ 23e5+ 14,9+ 33,4+ 5, 95 *** composé 24,1 26;7 21,6 15,4 9,2 8,1 14,5 v. B D - 2 2,05 v. A: F DALA + 10(D)+0,01 38,2+ 53,7+ 52;6+ 38,5+ 33,7+ 26,3+ 40,5 9,59 *** composé _18,3 19,8 16>0 16,4 16,9 13,0 9,8 3,66 **B: D - 23,6* Tableau 4 (suite) TEMPS Test t de GROUF TRAITEMENT 10_ 20' 30' 45' 60' 90' Moyenne Student Doses- -_ mg/kg(ICV) AA Témoins - 0,68+ 5,64+ 1943+ 4, 86+ 4,21+ 4>91+ 3,62+ ,45 4,83 4>42 3,90 4>41 2,25 2)05 BB DALA (D) 10 4,1+ 6,24+ 9,19+ 8,29+ 6,20+ 10,56+ 7,51- v. A: 8,89 4,0 2,92- 1,69- 2,60 3,87 2>31 3,08 * v. A: G DALA + 10(D)+0901 58 + 60,8+ 7790+ 66,4+ 48,8+ 45,0+ 59,33+ 11,5 '** composé 15,3- 14,2- 16,7- 12,4- 16,2 11- 1 11,7 v. B: C - 30 10,6 v. A: H DALA + 10(D)+0)01 59,1+ 67>8+ 86,0+ 83,3+ 83,3+ 55,1+ 73,26+ 11,6 *** composé 15,2 16,0 9,5 874 6,41 16D2 14,5 v. B: C - 30 11,0 *** v. A: I DDALA + 10(D)+0,03 41>1+ 55,6+ 38,5+ 35,88+ 32,63+ 25,44+ 38,19+ 8,2 *** compose 14,7 15,0 19,61 14,31 15,89 16>59 10,1' v. B: D - 36 7,25 * V. A: L DALA + 10(D)+0>03 55,82+ 70,58+ 53,13+ 35,17+ 38 00+ 20962+ 45,55+ 5.75 ***) composeé 1,89 18>43 17,63 15,95 13,60 9,35 17,7 v. B: D - 36 5,2 *** î'I cN Note: (*) P c0 05 (**) P 2566397, Expérience No. 5: Antagonisme de plusieurs produits de l'invention au développement de la tolérance induite chez -le rat par l'administration répétée de chlorhydrate de morphine Plusieurs des composés de l'invention ont été exa- minés pour déterminer leur capacité possible d'antagoniser le développement de la tolérance induite par la morphine. On a utilisé des groupes de 6 rats mâles d'un poids d'environ 200 - 250 grammes. A des intervalles de 24 heures à partir du premier traitement (temps 0), chaque animal (excepté le groupe témoin traité physiologiquement) a reçu 5 mg/kg de chlorhydrate de morphine iopo en même que 10 mg/kg i.op. des composés indiqués (à l'exception du groupe traité uniquement par la morphine). La détermination du seuil de douleur a été effectuée ', 30', 45' et 60' à partir du traitement par l'essai de Chauffage de la Queue. Les résultats donnés dans le tableau 5 se rapporte à des valeurs moyennes de ces quatre déterminations et indiquent les variations en pourcentage du temps de latence (apparition de douleur) avant et après traitement par les médicaments. Le tableau donne également les valeurs du test t de Student pour divers temps, pour les groupes traités par les médicaments par comparaison avec le groupe témoin et le groupe traité par la morphine. Tableau 5: Antagonisme de plusieurs produits de l'invention pour le développement de la tolérance induite chez le rat par l'administration répétée de chlorhydrate de morphine Traitement Dose Temps Temps Temps I Temps Temps Temps Temps Temps mrj/}:g ip O 24h 48h 72h 96h 120h 144h 168h J Jl0._J .=-._L 1,0 A: Témoins -.0,73+ 0,86+ 5,43+ 1,09+ 3,97+ 1,47+ 1,08+ -0,77+ _4*10 10_ _ - __1__._, ___ _158_ __-_-I. 12 __1203_ Effet %= -0,0040o h + 1l89 (r = 0l11 =t = 0,27.'S) B: Morphine5 mg/kg 58, 03+ 42,09+ 26,54+ 19,96+ 10,79+ 4,45+ 3,58+ 212 -- 445+ 378 2,1 + (ó) __ 20 - 1_9,20 * 90 ___ Zo3 _ L_05 3 _ _ L, 34_7 Effet % - 0,327. h + 48,42 (r = 0,95;t = 7.22***) ---=--- - -= - -=- o- - Compose 03k C Composé 10r/kg 47,32 J4365 32,80 31,78 35,45 42,08 29,33 19, 17 D-8 + (N) Effet %= -.0,118. h + 45,08 (r = 0,76; t = 2,89*) ........ == --T r---- = D: Compose 10g/kg 72,15 53,36 48,17 53,67 31,56 417 14,48 13,75 C-20 + (M) _I. Effet % = - 0>320. h + 67,97 (r = 0>93; t = 6,12***) E: compose 10rra/kg 74,14 45,73 59,50 51,52 340 37,60 21,43 J 29,75 D-2 t (M) Effet % =- 0,251. h + 66,47 (r = 0,89; t 4,65**) ui 0% o, c" No __== - -_ - - e--=_ --=_= _=-==--== i+*6LC g4 >+,69" E*Z49 EMZ0 z 004 Zú Z' zuni ap '4 4sEIL FPba6. *Z6' V *,ésL, 5** úZ tZ9 bY 98 **Z8' 5+**L9' 8***ZE4 bPL_ uaeniSA ap.4 qsal O4tZ bO4OL+ llE6 +ol82LO L'Sl- S CSl -+sL L"6 (W) + aurq'6a l( + CD LS" LL LpzL6 9I PE' 596Z C6, EL9L9os05ú5'99 L0bL fX/w OL OE-D esodlloo. ' L L ' L*Svb-úL6 * *8 l *P9e Z**6 Z' b**f 984 6 -k1A _aupnqs op::4ss, + Lúgc+69'-È0+GO'L.96'6L + 6SL9 605L+ zELL+(11) + zO z 8S'E SPI, 6L'Ol 96"6t PgI9Z 60&Zb ú0C8o 6/fl G)U!.qdoNi:O a ' l,+ ZL' t SG4 L+ 0 L+ eO'L+ L' oL+ P 4L l 7L+ LsO - 80o, L LO/ L L6CE 60* t. Lú'5S 98'0 úL'o- _, L Y qS91L qtL+ q0[tl+qL 96 +'ZL + q9p + tqpz + 0 dF b:/fu sdimT sda ra sduamisdmE s s sso( -ueurTel (a,4ms) 9 nLolqej, Tableau 5 (suite) Traitement Dose Temps Teps Temps Temps Teps Teps Teps Teps rrg /kg ip O +24h +48h +72hi +96h +120h +144h 168h G: composé C-3 0 10 mg/g 44,52 67,27 67,31 56,04 49,48 34,34 27,50 17,47 + Morphine + (M) +17,2 + 9,6 +14,0 + 8,55 + 2,26 +10,34 + 6,13 + 8,07 test t de Student v. A 5, 11** 13,78*** 8,83*** 12,54*** 36 76*** 6,18*** 7,91*** 4,47** test t de Student v. B.1 ,31 2,35 3,84** 6,51***. 10,45*** 5,76** 6,86*** 3,49** ==- --------= __== _-= Note: (*): (P (**): (P(K0,01) (***): (P Groupe 'B:= Activité = - 0,327 xheure+ 48,41 (coefric. de corrélation = 0, 95) C:= Activité = - 0,118 xheure+ 45,08 (coeffic. de corrélation = 0,76) Groupe D:= Activité = - 0,320 xheure+ 67,97 (coeffic. de corrélation = 0, 93) Groupe E:= Activité =- 0251 xheure+ 66,47 (coeffic.de corrlation = 0, 89) Groupe F:= Activit' = - 0,314 xheure+ 70,38 (r = 0,96) Groupe G.:= Activité- - 05,45 x heure + 66:,0G (r = 09,79) o Groupe G:= Activité = - 0,245 xheure+ 66,06 (r = 0,79) - 2566397, Les données du tableau 5 et les droites de régression calculées montrent qu'à partir du troisième traitement jusqu'à la fin de l'expérience, les groupes C-G étaient significativement plus actifs que le groupe B traité seulement par la morphine. En outre, après le cinquième traitement, le groupe traité par la morphine n'était pas significativement différent du groupe témoin, tandis que les groupes C-G conservaient une activité significative par comparaison avec les témoins jusqu'au traitement final au bout de 168 heures. A partir du calcul des droites de régression, on peut également constater que, tandis que l'activité du groupe traité par la morphine tombe à zéro au sixième jour du traitement, les groupes C-G atteignent le niveau d'inactivité entre le neuvième et le seizième jours. L'activité anti-CCK, l'activité anti-spastique, et l'activité cholérétique des composés de l'invention seront à présent illustréeso ACTIVITE ANTI-CCK SUR DES VESICULES BILIAIRES DE COBAYES IN VITRO On place une bande longitudinale de vésicule biliaire de cobaye dans un bain pour membres isolés en présence d'une solution de Krebs à une température de 32 C avec oxygénation continue par un mélange oxygène-C02 (95-5V/V). - Les contractions isométriques sont détectées au moyen d'un transducteur de force et enregistrées. La vésicule biliaire est amenée à se contracter en utilisant une concentration de CCK-8 de 10 ng/ml; on détermine l'activité antagoniste des composés de l'inven- tion sur l'effet contractant de la CCK en utilisant diverses concentrations, et on détermine la DE 50, c'est- à-dire la concentration en pg/ml d'un composé capable d'antagoniser 50 % de l'effet contractant de la CCK. Les résultats obtenus sont donnés dans le tableau suivant, qui indique les composés essayés et les valeurs de DE 50 calculées par la méthode de régression à partir d'un essai d'au moins trois expériences pour chaque composé étudié. Tableau 6 Activité anti-CCK-8 in vitro des composés de l'invention (concentration utilisée: 10 ng/ml) sur des vésicules biliaires de cobaye, exprimée par la DE 50 en pg/ml. Composés Activité Composés Activité ED 50 (/g/ml) ED 30 (2q/ml) Composé C1 >200 C-20 ?200 " C-2 >200 ' C-21 >200 C-3 34,4 " C-22 >200 " C-4 1,1 " C-23 >200 " C-5 4,2 " C-24 >200 " C-6 0,33 " C-25 30,3 " C-7 0,06 " C-26 146,5 C-8 0,93 " C-27 10,2 " C-9 7,40 " D-1 >200 " C-10 43,7 " D-2 0200 " C-11 0,85 " D-3 >200 C-12 64,7 " D-4 >200 C-13 >200 " D-5 7200 " C-14 118,4 " D-6 >200 " C-15 >200 " D-7 >200 " C-16 >200 " D-8 >200 C-17 ?200 " D-9 >200 C-18 60,3 " D-10 ?200 " C-19 >200 "l D-11 >200 " C-28 >300 " C-36 13,4 " C-29 262 " C-42 50,1 -" C-30 33,5 " C-47 35,1 le C-31 22,9 " C-48 119)1 " C-32 >300 " D-12 >300 "l C-33 131,7 " D-15 245,0 " C-34 40,1 " D-17 ?300 " C-35 367,1 " C-54 1,2 " C-55 0,5 Les résultats indiqués dans le tableau montrent que les composés selon l'invention antagonisent 50 % de l'activité de la CCK-8 à une concentration qui, pour les composés les plus actifs (par exemple pour le composé C-7), n'est qu'environ 10 fois supérieure à celle de l'antagoniste spécifique, montrant ainsi une extraordinai- re spécificité d'action. Pour confirmer les indications des études in vitro, on a essayé in vivo plusieurs des composés les plus intéressants sur des vésicules biliaires de cobayes in situ. La méthode utilisée est celle décrite par Ljungberg (Svensk. Farm. Tidskr. 68, 351-354, 1964). On utilise des cobayes d'un poids d'environ 400 g, anesthésiés avec de l'uréthane; les substances examinées sont administrées par voie intraveineuse dans la veine jugulaire. Les réactions des vésicules biliaires aux substances essayées sont détectées au moyen d'un transducteur de force et enregistrées par un microdynamomètre- La dose contractante optimale a été choisie à 10 ng/kg de CCK-8.. Les composés antagonistes essayes ont été administrés à des doses croissantes pour permettre le calcul des valeurs de DE -50, c'est-à-dire de la dose (en mg/kg i.v.) capable d'inhiber 50 % de l'effet contractant de ng/kg i.Vo de CCK-8; Les résultats obtenus sont donnés dans le tableau 7 ci-dessous, qui indique les doses utilisées et les effets obtenus exprimés en pourcentage d'inhibition de l'effet contractant de la CCK-8 ainsi que la DE 50 trouvée. TABLEAU 7 Activité anti-CCK-8 de plusieurs des composés de l'inven- tion (concentration utilisée - 10 ng/kg) sur des vésicules biliaires de cobaye in situ, exprimée par la DE 50 en mg/kg i.v. OMPeSESt DS I CEEPREJNCEEEXPEREIENEXPEXîE DE50(mr/kg iv) C;PS(g/kg iv). 2 3 r:(coeff. de (g/hg iv.L I correlation 0,03 - - 0,30 0,10 - 36,7 - 49,3 - 40,0 090) (r: 0>90) C-4 030 - 44,6 - 68,4 - 5e>7 1,00 - 92,1 - 88,5 t 5,46*- 0,01 - - - 129 0,03 - 49,7 - 40,0 r 0,9) C-6 0,10 - 72,6 - 55,8 - 62,9) 0,30 - 97,0 - 8298 - t 9,07* 1,00 -100,0 - 0,003 - - 10.6 0 0,01 - 36,8 - 28,2 - 25,9 (r 0,98) C-7 0.03 - 62,1 - 57,0 - 59,2. 0,10 - 77,5 - 89,8 - 94,7 t- 13>9*.*j (**H) P TABLEAU 7 (suite) COMPOSES DOSE EPREC COMPOSES DO SE YEPTCE EXPERIENCE EXPERIENCE DE 5 0 (mg/kgi.v.) 1 2 3 4 (mg/kg iv..) Cceposé C-30 3 16,7.0 6,0 - 13.8 Coefficient de 146 20,8 31,1 Coefficient de corrélation 82,1 92 5 79,5 (r) : 0,91 Ccanposé C-31 3 16,7 O 22,8 - 16,3 14,6 0 31,7 (r): 0.80 82,1 92,5 58,7 - -n Composé C-36 1 4,3 15,7 32,7 - 5,1 3 30,0 12,1 40,0 20,3 64,8 71,6 63,3 78,7 (r): 0,91 - - 100 uV os as Les résultats obtenus confirment essentiellement ce que l'on avait observé dans les expériences in vitro, c'est-à-dire que plusieurs des composés de l'invention sont des agonistes de la CCK extrêmement puissants qui même à des doses aussi faibles que 0,1 mg/kg, dans le cas des composés C-6 et C-7, peuvent bloquer les contrac- tions de la vésicule biliaire induite par la CCK, même à des concentrations certainement supérieures aux concen- trations physiologiques. L'activité anti-spastique des composés de l'inven- tion sur le système digestif entier est également notable. Mesurée chez des souris par l'essai au carbone végétal, (vitesse de transit a travers l'estomac et l'intestin), cette activité est illustrée dans le tableau suivant. *TABLEAU 8 Exemples d'activité anti-spastique pour les composés selon l'invention, administrés par voie intrapéritonéale chez la souris. Les valeurs sont exprimées par la DE 50 en mg/kg, c'est-à-dire par la dose qui réduit le transit intestinal de carbone de 50 %. COMPOSE ACTIVITE ANTI-SPASTIQUE DE 50 mg/kg (i.p.) Composé C-28 91,8 Composé C-30 7797 Composé C-34 6595 Composé C-35 18079 Composé C-36 208 Composé C-37 160,1 Composé C-41 182,4 Composé C-46 66,9 Composé C-4 38,8 Composé C-6 29,5 Composé C-7 16,8 Composé C-20 77,5 Composé C-27 40,3. Composé D-2 50,7 Composé D-5 74,9 Une activité anti-spastique plus spécifique, c'est- à-dire plus proche de la situation physiologique, est illustrée par l'expérience suivante. On ouvre l'abdomen d'un lapin anesthésié pour exposer le colon transverse. On insère un petit ballon plein d'eau au point établi et on le relie à un transducteur de pression au moyen d'une canule de polythène remplie d'eau. La sensibilité optimale est fixée en relation avec les conditions physiologiques, et les produits sont administrés par la veine fémoraleo Des contractions sont induites par l'administration de 100 ng/kg de CCK. L'activité du produit de l'invention est illustrée dans le tableau 9. Tableau 9 Activité anti-spastique dans le colon de lapins stimulé par la CCK-8 COMPO- DOSES E NCE EPE CE E50(mgA/kg iv) SES / r:(coeff. de SE-(gk! 2 3 corrélatlon 20... . .,. _. l l- -,1 DE$50 1 53 0,3 - 24, - 14,9 - 8,5 r- 1,53 C-6 79 - 745,0 - 41-8 t 8,0s(%09 325 -917 -775 - 87. _ 25....J 0,1 o - - 10,7 DE5s=1,1! 0,3 - 19,1 - 36,8 8 r 0,919 c-7 - 42,6 - 74J2 64,5 r 0' te 6,(' 3 -100,0 -100,0 - (***) P Les résultats du tableau indiquent que plusieurs des composés essayés qui font l'objet de la présente invention, sont également antagonistes, comme il a déjà été montré pour la vésicule biliaire, vis-à-vis des contractions intestinales induites par la CCK administrée à des doses élevées (100 ng/kg). L'activité anti-spastique apparaît à de très faibles doses, entre 1 et 3 mg/kg pour le meilleur des composés utilisés Une autre caractéristiques intéressante de ces composés est qu'ils augmentent considérablement l'écoule- ment biliaire. L'expérience suivante a été effectuée: une canule a été insérée dans le canal biliaire d'un rat anesthésié par de l'uréthane, en même temps qu'une petite aiguille reliée à un tube de polythène, et le liquide biliaire a été ainsi recueilli. La collecte a été effectuée pendant une heure avant l'administration intraveineuse des composés essayés, et pendant 2 heures supplémentaires après l'administration des échantillons recueillis à des intervalles de 30 minutes étant pesés. Pour éviter une déshydratation possible des animaux, 0,5 ml de solution physiologique a été administré à des intervalles de 30 minutes jusqu'à un total de 3 ml. Les résultats obtenus pour plusieurs des composés de l'invention sont donnés dans le tableau suivant, exprimés par la DE 50, c'est-à-dire par la quantité de substance en mg/kg i.v. capable de provoquer une augmen- tation de 50 % de l'écoulement biliaire apres le traite- ment par les médicaments (valeur moyenne déterminée sur la période de 2 heures) par rapport aux valeurs des témoins (valeur moyenne déterminée pendant une heure de collecte avant le traitement par les médicaments). - Les résultats du tableau montrent que les composés en question ont une puissante activité cholérétique; en moyenne, la DE 50 pour les composés essayes est de à 25 mg/kg i.v. et il existe une correspondance remarquable entre la dose et la réaction pharmacologique (les coefficients de corrélation sont en fait supérieurs à 0,90 dans tous les cas). TABLEAU 10 Pourcentage de variation de l'écoulement biliaire chez le rat, induit par plusieurs composés de l'invention SOSES EFFET (% d'aug- DE 50(ng/kg i.v.) COMPOSES D(mg/kg mentation par rap- r= (coeff de i.v.) port aux témoins) corrélation) Composé C-6 3 + 40,4 42 + 69,8 (r= 0,93) + 88,7 Composé C-20 1295 + 48,5 19,4 ,0 + 63,9 (r= 0,98) ,0 +108,0 Composé D-11 12,5 + 33,718,5 ,0 + 80,0 (r= 0,98) ,0 +118,8 Composé C-30 12,5 + 33,7 18,5 + 60,2 (r= 0,99) +121,2 +197,8 Composé C-35 12,5 + 9,6 29,5 ,0 + 51,9 (r= 0,98) ,0 + 91,9 +159,7 Composé C-36 12,5 + 15,5 26,75 ,0 + 48,5 (r= 0,99) ,0 +215,8 Pour vérifier l'hypothèse selon laquelle l'activité anti-CCK présentée par la plupart des composés de l'invention peut être utilisée avantageusement dans le traitement de l'anorexie chez l'homme, ou comme stimulant de l'appétit pour les animaux d1élevage, on a effectué l'expérience suivante On a utilisé des rats mâles d'un poids d'environ g, divisés en groupes de 10 animaux. Chaque groupe a reçu le médicament quotidiennement, aux doses indiquées pendant trois semaines. Le médicament, sous la forme du sel de sodium, est dissous dans de l'eau et administré dans un volume de ml de H20/kg, tandis que le groupe témoin reçoit un égal volume de solvant seulo Les tableaux suivants donnent les valeurs moyennes de la consommation d'aliments et le poids moyen de chaque groupe d'animaux, calculés toutes les semaines ainsi que la valeur t du test de Student, calculée à partir des divers groupes traités.et du groupe d'animaux témoins. Les résultats des tableaux 11 et 12 montrent que des doses quotidiennes de 0,3 mg/kg du composé C-7 entraînent une augmentation d 'environ 15 % de la consomma- tion d'aliments par comparaison avec les témoins; cette augmentation est d'environ 30 % pour les autres doses essayées et elle est à chaque fois hautement significa- tive. L'accroissement pondéral des animaux traités par comparaison avec l'accroissement pondéral des animaux témoins présente une évolution similaire; tous les groupes traités par le C-7 donnent une augmentation de poids significativement plus importante que les animaux témoins pour tous les temps étudiés. TABLEAU 1 1l Détermination du poids corporel (en g) de divers groupes, mesurée à des temps différents GROUPS. DOSE GROUPESmg/kg os) TEMPS 0 TEMPS i TEMPS 2 TEMPS 3 (mng/kg os)TEP A: Témoin - i66,1 + 4,5 197,4 + 3,8 238,6 + 4,09 280,0: 3,94 B: Composé C-7 0,3 162, 1 + 2,48 2013 + 2,7 254,5 _> 2,66 315,2 _ 2,72 t de Student vsA 0,78 0,83 3,26"' 7,3 C: W omposé C-7 166,o + i,56 214,7 i1,93 267,5 2 2,6 319,8 2,49 t de Student vsA 0,021 4,06s- 5,96e-' D: Composé C-7. 3 166,6 + 1,73 227,9 +!,65 290,9 t 2,6 34'),52,2 O t 7 | |çr* I 1,3*Z"14,,32*. t de Student vsA 01 14, 37: Note: * (P (' o', (Ioo00'o0 >d) (10'0 7 cI)::ao (Io' d 899gI=-.>801'sI=4**Z9= *9o9' ZSA=4 uapnS ap 9ó 9+1 88bS+IZeS-Leb6 &L+6'ILfb 'L+L OS ++tZ'6=4***99'91--4 ***Z66'8=64 4=. /.E'1= Auapn4s aP - -+úc LtúV66'4+L a 60' S9+94 08:10'L+'0tú['8+8'OLZC 0Oú-DpsoduloD z+i' ú8ú60'2+94Z5úL' V+8680úZO'L+6'BGLZIL'L+'Z bSZ_ TOuW9m (so)./Vu Sc IsTú s. wdslTE scdWal,I sNi sWaTl 0SQ s.,aoo (a;TflS) ilne.qOI TABLEAU 12 Consommation d'aliments (en g/semaine) dans les divers groupes traités déterminée a des temps différents' DOSE GROUPES (mg/kg os) SEMAINE 1 SEMAINE 2 SEMAINE 3 A: Témoin - 166>1 4 1,87 197,6 _, 196 208? _7 2,16 B: _. Composé C-7 M03 176)4 + 3070 2168 + 4,71 239,3 _ 4,07 Tést t de 2 Student vsA 2s5* 375*72* C:.. Composé C-7 1 199>6 + 3,88 230,5 + 3,09 261,4 + 4, 24 test t de 778*** 99 112* Student vA. 78**' 8,99*12 D: Composé C-7 3 198,4 + 3,66 244,8. 3,09 268,8 + 4,86 Test de Student vsA 7,87**. 12>87** 12*68 * Note: * (P * (P (P TABLEAU 12 (suite) GROUPES Dose SEMAINE SEINE 2 EMAINE 3 SEMNE 4 mz/kg (os) 4 TEMIN_ 174,3 + 5,07 209,6 + 50 175,4 + 4,34 180,3 + 3,78 Composé C-30 3 193,7 + 3,58 233,2 + 4,56 187,1 + 8940 204,0 + 3,63 t de Student vsA. t de Student vsA t = 3,128** t = 3,482*; t = 1,237N.S t = 4,527***. Caoposé C-30 test t de 10 219,8 + 5962 264,3 + 5e61 2345 + 5,05. 234,6 + 3,99 Student vsAt = 6,012* t = 7v273*'** t = 8D875*** t = 9,884*** Composé C-30 233,7 + 5,45 267,9 + 4,92 247D0 + 5,19 244,5 + 4,06 test t de Studenit VSA t 7v982** t = 8,307'***_ t = 10,582*** t= 11,655** Note: ** (P 0,01) *** (P 0,001) N.S. 0% o% ski ACTION DE L'ACTION SUR LA CROISSANCE D'UN ADENOCARCINOME PANCREATIQUE INDUIT PAR LA CCK-8 L'effet anti-cholécystokinine du plus puissant des composés de l'invention à savoir le composé C-7, sur l'activité trophique de la CCK sur des cellules pancréati- ques normales et sur celles d'un adénocarcinome pancréa- tique, doit être étudiéo On inocule à des hamsters -mâles, dans les poches jugales une suspension de 1 x 105 cellules tumorales d'un adénocarcinome pancréatique. Cinq jours après l'inoculation, les animaux sont divisés au hasard en quatre groupes de dix animaux chacun, à savoir un groupe témoin, un groupe d'animaux traités par T0 -g/kg de CCK-8 trois. fois par jour, un groupe d'animaux traités par 5 mg/kg i.p. du composé C- 7 trois fois par jour et un quatrième groupe traité simultanément par le composé C- 7 et par la CCK-8 de la manière décrite ci-dessus. Au bout de 15 jours de traitement, les animaux sont sacrifiés et le pancréas normal et les tumeurs pancréa- tiques inoculées dans les poches jugales sont recueillis et pesés. L'ADN est extrait et mésuré par des techniques classiques. Les résultats ainsi obtenus exprimés en valeurs moyennes (+ E.T) sont donnés dans le tableau 13. Les résultats du tableau montrent que l'hormone cholécystokinine (dont la CCK-8 est le constituant biologiquement actif) qui possède une action trophique sur les cellules pancréatiques normales, stimule égale- ment la croissance d'un adénocarcinome pancréatique. Le composé C-7, un antagoniste puissant spécifique de la CCK, antagonise ces deux actions de la CCK-8 d'une manière hautement significative. Les données expérimentales ci-dessus paraissent constituer une indication que l'utilisation du composé C-7 ou d'autres composés anticholécystokninnes qui font TABLEAU 13 Action inhibitrice du composé C-7 sur la croissance des cellules pancréatiques normales et tumorales induite par la CCK-8 _, Poids d car- -i t- Nbre iPoids du test t dePoidsd cartest t l DNAde traitementd'ani- DOSE Il pancréas pancra- de l cnai tuparder trae student student.cratiquestudent Istudet Il ( -tique, Il hII () II (ng) " l _Itl-tl_ _ tl _ _ *1I I tl] A: Témoin lo - B 38o+29'7' I 0o.a0,10- 113+7,66 _ 1 0,4+0,05 - -,, -'i II - II l C: CCposéC-710 Smg/kg. (3 foisjil 118 i 93+0091,03 I II II II 11 B: CCK-8 8(0 1O0mcg/kg (3fois:1>600_+54,13,76u -%+01 4,7- 18+1, 4-7,.,3 2 hI 11 I II par jour I i II0930,091,3JJ l 0,4,2.0:02 C: CCPOS C7 10 5 mg/kg (3 foiCCK-33822,6 8 lI { C-7 + GGK-ô + S mg/kg C-7 1 374+25D4 vsA 05,15 1 15,0+0,0 vsA 1,53 lt 109,5+6+2 VSA: 0,3X; J4+OO S pa8jour i0 I4 I u lili n4053,61 i2,5i ( ) 2 aniaux sont morts pendant le. traiteM^nt (*): P (*):P (1*) p (*):P (**): P ("): P 0%. l'objet de l'invention aura des résultats particulièrement favorables dans le traitement de tumeurs entretenues par des polypeptides bioactifs endogènes (en particulier la CCK) telles que des tumeurs gastrointestinales et pancréatiques. Les résultats expérimentaux ci-dessus paraissent également fournir une indication que l'utilisation des médicaments de l'invention en association avec la morphine ou d'autres médicaments analgésiques (qu'ils soient narcotiques ou non) est uneinnovation thérapeutique considérable qui peut fournir-aux médecins des composés d'un intérêt de premier plan pour le traitement de la douleur quelle qu'en soit l'étiologie. Ce traitement semblerait particulièrement indiqué dans le cas d'adminis- trations prolongées d'opiacés, dans lesquelles il existe un très grand besoin que le médicament ne provoque pas d'accoutumance, ou au moins que celle-ci soit maintenue dans des limites acceptables. En outre, leur utilisation possible dans la désintoxication de malades qui sont devenus dépendants de l'usage prolongé de médicaments opiacés paraît être d'un énorme intérêt thérapeutique et social. Les données expérimentales ci-dessus montrent égale- mentl'utilité de ces composés dans le traitement de divers états pathologiques concernant le système gastro- intestinal, par exemple dans des syndromes spastiques et dans le soulagement de la douleur en général et en particulier dans le traitement de la dyskinésie biliaire et du colon irritable. On peut aussi tenir présente à l'esprit la puissante activité anti-CCK que présentent de nombreux composés de l'invention, une utilisation thérapeutique favorable dans le traitement de l'anorexie ou dans certains états patho- logiques du SNC liés à des déséquilibres et des taux de neurones physilogiques de la CCK ou d'autres peptides bio-actifs. REVENDICATIONS 1. Dérivés pharmaceutiquemenrt actifs des acides D,L-glutamique et D,Laspartique répondant aux formules COOH - ( CH12}r; (IA) (CH2)n CH-NH-CO-R CO-R2 0-CO-R2 O0 i 2 (CH9> B CH-NH-CO-R1 COOH dans lesquelles n est égal à i ou 2, R est un grospe phényle mono-, di- ou tri-substitué avec des groupes alkyle enC1-C4 linéaires ou ramifiés, qui peuvent être identiques ou différents, ou avec des halogèues, avec un groupe cyano ou avec un groupe trifluoronéthyle, et dans lesquelles R2 est choisi dans le groupe constitué des radicaux morpholino, pipéridino et amino avec un ou deux groupes alkyle linéaires, ramifiés ou cycliques en Ci-C8 comme substituants, lesquels peuvent être identiques ou différents, et leurs sels pharmaceutiquement accepta- bles. 2. Composé dérivant de luacide glutamique selon la revendication 1, répondant à la formule (IA), dans laquelle n est égal à 2r R1 est choisi dans le groupe constitué des groupes 3,4-dimnéthyl-phényle et 3,4- dichloro-phényle, et R2 est un groupe amino bi-substitué par des groupes alkyle en C4-C5 linéaires et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. 3. Composé dérivant de l'acide glutamique selon la revendication 1, répondant à la formule (IB), dans laquelle n est égal à 2, R1 est un groupe 4-cyano-phényle et R2 -est un groupe amino bi-substitué par des groupes alkyle en C4-C5 linéaires, et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. 4. Préparation pharmaceutique contenant un composé selon la revendication 1, ou un de ses sels pharmaceuti- quement acceptable comme ingrédient actif. 5. Préparation pharmaceutique selon la revendica- tion 1, pour le traitement d'états pathologiques du SNC liés à des déséquilibres des taux neuronaux physiologi- ques de polypeptides bioactifs, en particulier de la cholécystokinine. 6. Préparation pharmaceutique selon la revendication 4, destinée à être utilisée dans des traitements reposant sur son activité anti-spastique. 7. Préparation pharmaceutique selon la revendication 4, destinée à être utilise dans des traitements reposant sur son activité cholérétique. 8o Préparation pharmaceutique selon la revendication 4, pour le traitement de l'anorexie. 9. Preparation pharmaceutique selon la revendication 4, pour le traitement des affections tumorales dans lesquelles sont impliqués des polypeptides bioactifs, tels que la cholécystdcinine et des mécanismes analogues. 10. Composition pharmaceutique selon la revendication 4, destinée à être utilisée comme médicament combattant la douleur chez l'homme et contenant également un médicament analgésique en combinaison avec ces composés. Il. Préparation pour l'utilisation zootechnique destinée à être utilisée comme stimulant de l'appétit pour des animaux d'élevage pour augmenter le taux de croissance pondérale, et contenant au moins un des composés selon la revendication 1, comme ingrédient actif. 12. Procédé pour la préparation d'un dérivé de l'acide D,L-glutamique et de l'acide D,L-aspartique, répondant aux formules (Ia) et (IB) COOH C2)n (IA) CH-NH-CO-R CO-R2 CO-R O-2 (CH 2)n (iB) CH-NH--CO-R COOH dans lesquelles n est égal à I ou 2, R1 est un groupe phényle mono-, diou tri-substitué avec des groupes alkyle en C 1-C4 linéaires ou ramifiés, qui peuvent être identiques ou différents, ou avec des halogènes, avec un groupe cyano ou un groupe trifluorométhyle et dans lesquelles R2 est choisi dans le groupe constitué des radicaux morpholino, pipéridino et aminog avec un ou deux substituants alkyle linéaires, ramifiés ou cycliques contenant 1 à 8 atomes de carbone, et ses sels pharmaceutiquement acceptables, caractérisé en ce qu'il comporte l'étape consistant: a) -à faire réagir un anhydride interne répondant à la formule (II): (CH2)n I O (II) MH-NH-CO-R1 CO dans laquelle n et R1 ont les significations données ci- dessus, avec une amine répondant à la formule R2H, dans laquelle R2 a la signification donnée ci-dessus dans un rapport molaire de 1 à 5, à une température de -20 C à 30 C, les composés (IA) et (IB) étant récupérés dans la masse réactionnelle et les composés (IA) et (IB) étant séparés. 13. Procédé selon la revendication 12, dans lequel l'anhydride interne répondant à la formule (II) est obtenu par les étapes consistant à b) faire réagir l'acide glutamique ou l'acide aspartique dans des conditions de la réaction de Schotten- Bauman avec une quantité équimolaire d'un chlorure d'acyle répondant à la formule R!-CO-Cl dans laquelle R! a la signification donnée dans la revendication 12, à une température de -20 C à 30 C, pour obtenir le composé N-acylé répondant à la formule COOH (CH2) n i (III) ?H-NH-CO-R COOH et c) à déshydrater le composé répondant à la formule (III) par réaction en présence d'anhydride acétique dans un rapport molaire de 1 à 10 soit seul, soit en présence d'un solvant inerte miscible à une température de 10 C à celle du reflux