FR 2549833 A1 19850201 FR 8312333 A 19830726 La présente invention concerne de nouveaux dérivés de la pyrazolo /4,3-c/ cinnolin-3-one ainsi que leurs sels, le procédé de préparation, l'application à titre de médicaments de ces nouveaux dérivés, les compositions les renfermant et les produits intermédiaires. L'invention a pour objet de nouveaux dérivés de la pyrazolo /4,3-c/ cinnolin-3-one, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule générale ( 1): N-N R 1 O H dans laquelle R en position 7 ou 8 représente un atome d'hydrogène, un 15 atome d'halogène, un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, un radical alkoxy renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, un radical nitro ou trifluorométhyle, et R 1 représente un radical phényle éventuellement substitué par un radical alkyle linéaire ou ramifiérenfermant de 1 à 5 atomes de carbone, par un radical alkoxy renfermant de 20 1 à 5 atomes de carbone, ou par un atome d'halogène, ou R 1 représente un radical pyridyle ou thiazolyle. Dans la formule générale (I) et dans ce qui suit, lorsque R représente un atome d'halogène, il s'agit par exemple d'un atome de brome ou d'iode et de préférence, un atome de chlore; le terme radical alkyle linéaire 25 renfermant de i à 5 atomes de carbone désigne, par exemple, un radical butyle ou pentyle,et de préférence un radical méthyle, éthyle ou npropyle et dans le cas d'un radical alkyle ramifié,ce radical comporte de 3 à 5 atomes de carbone, et désigne, de préférence, un radical isopropyle ou isobutyle; le terme radical alkoxy renfermant de 1 à 5 atomes de carbone 30 désigne par exemple, un radical butoxy ou pentoxy,et de préférence un radical méthoxy, éthoxy ou propoxy. Les sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques peuvent être, par exemple, les sels formés avec les acides chlorhydrique, bromhydrique, nitrique, sulfurique, phosphorique, acétique, formique, 35 propionique, benzoïque, maléique, fumarique, succinique, tartrique, citrique, oxalique, glyoxylique, aspartique, alcane sulfoniques tels que les acides méthane ou éthane sulfoniques, arylsulfoniques, tels que les acides benzène ou paratoluène sulfoniques et arylcarboxyliques. Parmi les produits objet de l'invention, on peut citer notamment les 40 dérivés répondant à la formule (I) ci-dessus, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce que, nr,:o 2 x 2 Ci D 7 ui o J dans ladite formule (I), R représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy ou alkyle, et R 1 représente un radical phényle éventuellement substitué. Parmi ceux-ci, on peut citer plus particulièrement les dérivés 5 caractérisés en ce que, dans ladite formule (I), R se trouve en position 8 et R 1 représente un radical phényle ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, et tout particulièrement la 8-chloro2,5-dihydro-2-phényl 3 H- pyrazolo/4,3-c/ cinnolin-3-one ainsi que ses sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques. L'invention a également pour objet un procédé de préparation des dérivés, tels que définis par la formule (I) ci-dessus, ainsi que de leurs sels, caractérisé en ce que l'on fait réagir un produit de formule (Il): OH X 5 c 2 (II) O R 2 dans laquelle R a la signification déjà indiquée, et R 2 représente un 20 radical alkyle linéaire renfermant de 1 à 5 atomes de carbone avec un agent de chloration, pour obtenir un produit de formule (III) Ci R | COOR 2 (III) dans laquelle R et R 2 ont la signification déjà indiquée, que l'on fait réagir avec un dérivé de l'hydrazine de formule (IV): 30 H 2 N NH R 1 (IV) pour obtenir un produit de formule (I) dans laquelle R et R 1 ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et, si désiré, salifie L'agent de chloration peut être, par exemple, 1 'oxychlorure de phosphore ou le chlorure d'oxalyle} et de préférence le chlorure de thionyle On le fait réagir avec le produit de formule (II) de préférence au reflux d'un solvant tel que le benzène, le toluène, le xylène ou le diméthyl formamide. La réaction du produit de formule (III) avec le dérivé de l'hydrazine 3 25498353 de formule (IV) a lieu de préférence au reflux d'un solvant à point d'ébullition de l'ordre de grandeur de celui du xylène ou du diméthyl formamide, et tout particulièrement au reflux de l'anisole. Les produits de départ de formule (II) sont connus, ou peuvent être préparés comme indiqué dans J Chem Soc ( 1961) 2828 et J Chem Soc Suppl I ( 1964) 5659. Certains dérivés de formule (I) présentent un caractère basique On peut avantageusement dans ce cas préparer les sels d'addition des dérivés de formule (I) en faisant réagir, en proportions sensiblement 10 stoechiométriques, un acide minéral ou organique avec ledit dérivé de formule ( 1) Les -sels peuvent être préparés sans isoler les bases correspondantes. Les dérivés objet de la présente invention, possèdent de très intéressantes propriétés pharmacologiques; ils sont doués notamment de 15 remarquables propriétés anxiolytiques. Ces propriétés sont illustrées plus loin dans la partie expérimentale. Ces propriétés justifient l'utilisation des dérivés de la pyrazolo /4,3-c/ cinnolin-3-one, ainsi que de leurs sels, à titre de médicaments. La présente demande a ainsi également pour objet l'application, à titre 20 de médicaments, des dérivés de la pyrazolo /4,3-c/ cinnolin-3-one, tels que définis par la formule (I), ainsi que de leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables. Parmi les médicaments, objet de l'invention, on retient, de préférence, les médicaments caractérisés en ce qu'ils sont constitués par les nouveaux 25 dérivés de la pyrazolo /4,3-c/ cinnolin-3-one répondant a la formule (I), dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy ou alkyle et R 1 représente un radical phényle éventuellement substitué, ainsi que par leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables. Parmi ceux-ci, on retient notamment ceux répondant à la formule (I), dans laquelle R se trouve en position 8, et R 1 représente un radical phényle, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables. Parmi ces derniers, on retient tout particulièrement la 8-chloro-2,535 dihydro-2-phényl 3 H-pyrazolo/4,3-c/ cinnolin-3-one, ainsi que ses sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables. Les médicaments selon l'invention trouvent leur emploi, par exemple, dans le traitement des états anxieux tels que l'anxiété chronique, associée ou non à de l'insomnie ou à des troubles du comportement, de l'angoisse 40 chez l'adulte ou l'enfant, ou en complément lors des traitements par neuroleptiques ou antidépresseurs dans les états psychotiques ou dépressifs. La dose usuelle, variable selon le dérivé utilisé, le sujet et l'affection en cause peut être, par exemple, de 1 mg à 500 mg par jour Par voie orale, chez l'homme, le dérivé de l'exemple 1 peut être administré à la dose quotidienne de 2 mg à 200 mg, par exemple pour-le traitement de l'anxiéte chronique, soit environ de 0,03 mg à 3 mg par kilogramme de poids corporel. L'invention a enfin pour objet les compositions pharmaceutiques qui 10 renferment au moins un dérivé précité ou l'un de ses sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables, à titre de principe actif. A titre de médicaments, les dérivés répondant à la formule (I) et leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables peuvent être incorporés dans des compositions pharmaceutiques destinées à la voie 15 digestive ou parentérale. Ces compositions pharmaceutiques peuvent être, par exemple, solides ou liquides et se présenter sous les formes pharmaceutiques couramment utilisées en médecine humaine, comme par exemple, les comprimés, simples ou dragéifiés, les gélules, les granulés, les suppositoires, les préparations 20 injectables; elles sont préparées selon les méthodes usuelles Le ou les principes actifs peuvent y être incorporés à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou 25 végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émulsifiants, les conservateurs. L'invention s'étend en outre aux produits industriels nouveaux utiles notamment pour la préparation des dérivés répondant à la formule ( 1), à savoir les produits de formule (III) Cl R I COOR 2 X (III) dans laquelle R et R 2 ont la signification déjà indiquée. Il va être donné maintenant, à titre non limitatif, des exemples de mise en oeuvre de l'invention. EXEMPLE 1: 8-chloro-2,5-dihydro-2-phényl 3 H-pyrazolo/4,3-c/ cinnolin-340 one. STADE A: 4,6-dichloro 3-cinnoline carboxylate d'éthyle. On agite pendant 16 heures au reflux une solution de 6 g de 6-chloro 4hydroxy 3-cinnoline carboxylate d'éthyle dans 300 cm 3 de chlorure de thionyle et 1 cm 3 de diméthyl formamide, concentre sous pression réduite le 5 chlorure de thionyle en le reprenant plusieurs fois par 50 cm 3 de toluène et obtient 6 g d'un résidu verdâtre F_ 50 C. STADE B: 8-chloro-2,5-dihydro-2-phényl 3 H-pyrazolo/4,3-c/ cinnolin-3-one. On mélange sous atmosphère inerte 6 g du produit obtenu au stade précédent à 60 cm 3 d'anisole, filtre l'insoluble, ajoute 2,4 cm 3 de phényl 10 hydrazine et place le mélange dans un bain à 150 C pendant 2 heures 30 mn. On refroidit, essore, lave à l'acétate d'éthyle, essore à sec, lave avec une solution aqueuse d'acide chlorhydrique N, dissout le solide obtenu dans 100 cm 3 d'une solution de 25 cm 3 d'ammoniaque concentrée et 75 cm 3 d'eau, filtre, extrait à l'éther la phase aqueuse On précipite le produit attendu 15 à l'aide de phosphate acide de sodium, purifie en empâtant à l'éthanol, puis à l'eau, sèche et obtient 2,22 g du produit attendu F 280 C. Analyse: C 15 H 9 C 1 N 40 = 296,718 Calculé: C% 60,71 H% 3,05 N% 18,88 C 1 % 11,94 Trouvé: 60,4 3,1 18,8 11,8. EXEMPLE 2 On a préparé des comprimés répondant à la formule: 8-chloro-2,5-dihydro-2phényl 3 H-pyrazolo /4,3-c/ cinnolin-3-one 10 mg; Excipient q s pour un comprimé terminé a 100 mg. (Détail de l'excipient: lactose, amidon, talc, stéarate de magnésium). Etude pharmacologique. 1) Affinité pour les récepteurs des benzodiazépines. La technique est inspirée de celle de M 6 hler et Okada: Science, Vol. 198 p 849-851 ( 1977). On homogénéise au vingtième (poids/volume) dans le sucrose 0,32 M, les cortex prélevés sur des cerveaux de rats mâles pesant 150 g en moyenne. Après centrifugation de l'homogénat à 1000 g pendant 10 minutes à O O C, le surnageant est centrifugé à 30 000 g pendant 20 minutes à + 4 C Le culot est mis en suspension dans 20 volumes de tampon Tris HC 1 50 m M p H 7,4 et 35 centrifugé à 30 000 g pendant 20 minutes à + 4 C Le nouveau culot obtenu est mis en suspension dans 50 ml de tampon Krebs Tris HC 1 p H 7,4. On fait ensuite incuber pendant 30 minutes à O C, 2 ml de suspension en présence de 3 H diazepam à la concentration 10-9 M, seul, avec des concentrations croissantes du produit à tester, ou, pour déterminer la 40 fixation non spécifique, avec du diazepam non radioactif à la concentration 6 2549833 -6 M. Les suspensions incubées sont filtrées sur Whatman GF/C et les filtres sont lavés par deux fois 5 ml de tampon Krebs Tris H Cl p H 7,4 à O C. La radioactivité des filtres est mesurée par scintillation liquide. L'activité du produit est exprimée en C I 50: concentration inhibant % de la liaison spécifique de 3 H diazepam déterminée graphiquement. Le produit de l'exemple 1 a une C I 50 de 1,4 n M soit une affinité environ quatre fois celle du diazepam. 2) Test de l'escalier. L'appareil et le protocole utilisés ont été décrits par THIEBOT et coll (Psychopharmacologia (Berlin) 1973, 31, 77). L'expérimentation est réalisée sur des lots de 15 rats naïfs Les animaux sont déposés individuellement dans l'enceinte 1 heure après l'administration du composé étudié Le nombre de redressements effectués et 15 le nombre de marches montées sont comptés pendant 3 mn. A la dose de 20 mg/Kg, le produit de l'exemple 1 diminue de 46 % le nombre de redressements, sans modification notable du nombre de marches montées Il présente donc une bonne activité anxiolytique. 31 Test des 4 plaques. L'appareil (Apelab) et le protocole utilisés ont été décrits par BOISSIER et coll (European J Pharmacol 1968, 4, 145) Les plaques sont reliées à un stimulateur (U Sachs, Roucaire) qui permet de délivrer des chocs électriques de 120 volts pendant 0,5 s Les essais sont réalisés sur des lots de 10 souris ou rats 1/2 h après administration per os du composé 25 étudié Chaque animal est déposé individuellement sur l'appareil Apres 15 s d'exploration libre, il est soumis à un choc électrique chaque fois qu'il passe d'une plaque à l'autre, un minimum de 3 secondes étant observé entre deux chocs Le nombre de chocs délivrés est compté pendant 1 minute Les résultats obtenus sont comparés à ceux observés chez des animaux témoins 30 par un test de Dunnett. A la dose de 20 mg/Kg de produit de l'exemple 1, le nombre de chocs délivrés est augmenté de 63 % chez les souris, et de 41 % chez les rats. Le produit de l'exemple 1 présente donc une bonne activité anxiolytique. 4) Etude de la toxicité aig e. On a évalué la dose létale DL O du composé de l'exemple 1 après administration par voie orale chez la souris. On appelle DL O la dose maximale ne provoquant aucune mortalité en 8 jours. La DL O du produit de l'exemple 1 est supérieure à 400 mg/Kg. 7 2549833 REVENDICATIONS 1) Les dérivés de la pyrazolo /4,3-c/ cinnolin-3-one, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule générale (I): N-N R ( o() H dans laquelle R en position 7 ou 8 représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de i,5 atomes de carbone, un radical alkoxy renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, un radical nitro ou trifluorométhyle, et R 1 représente un radical phényle éventuellement substitué par un radical alkyle linéaire ou ramifié 15 renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, par un radical alkoxy renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou par un atome d'halogène, ou R 1 représente un radical pyridyle ou thiazolyle. 2) Nouveaux dérivés de la pyrazolo /4,3-c/ cinnolin-3-one tels que définis par la formule (I) de la revendication 1, ainsi que leurs sels 20 d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce que R représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy ou alkyle et R 1 représente un radical phényle éventuellement substitué. 3) Nouveaux dérivés de la pyrazolo /4,3-c/ cinnolin-3-one selon la revendication 2, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux 25 ou organiques, caractérisés en ce que R se trouve en position 8, et R 1 représente un radical phényle. 4) La 8-chloro-2,5-dihydro-2-phényl 3 H-pyrazolo /4,3-c/ cinnolin-3-one, ainsi que ses sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques. ) Procédé de préparation des dérivés de la pyrazolo /4,3-c/ cinnolin30 3one tels que définis par la formule (I) de la revendication 1, ainsi que de leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisé en ce que l'on fait réagir un produit de formule (Il): OH R CO R 2 (II) v C LOQXX 8 j,v dans laquelle R a la signification déjà indiquée, et R 2 représente un radical alkyle linéaire renfermant de 1 à 5 atomes de carboneavec un agent de chloration, pour obtenir un produit de formule (III) Cl R COOR 2 O dans laquelle R et R 2 ont la signification déjà indiquée, que l'on fait réagir avec un dérivé de l'hydrazine de formule (IV): H 2 N NH R 1 (IV) pour obtenir un produit de formule (I) dans laquelle R et R 1 ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et, si désiré, salifie. 6) Procédé selon la revendication 5, caractérisé en-ce que: la réaction du produit de formule (II) avec l'agent de chloration est effectuée au reflux dans le chlorure de thionyle en présence de diméthyl 20 formamide; la réaction du produit de formule (III) avec le dérivé de l'hydrazine est effectuée au reflux dans l'anisole. 7) Médicaments, caractérisés en ce qu'ils sont constitués par les dérivés de la pyrazolo /4,3-c/ cinnolin-3-one tels que définis par la 25 formule (I) de la revendication 1, ainsi que par leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables. 8) Médicaments caractérisés en ce qu'ils sont constitués par les dérivés de la pyrazolo /4,3-c/ cinnolin-3-one tels que définis à l'une quelconque des revendications 2,3 ou 4 ainsi que par leurs sels d'addition 30 avec les acides pharmaceutiquement acceptables. 9) Compositions pharmaceutiques, caractérisées en ce qu'elles renferment, à titre de principe actif, l'un au moins des médicaments tels que définis à l'une des revendications 7 ou 8. ) A titre de produits industriels nouveaux nécessaires pour la 35 préparation des dérivés répondant à la formule (I) de la revendication 1 les produits de formule (III): COOR 2 (III) dans laquelle R et R 2 ont la signification déjà indiquée.