FR 2553413 A1 19850419 FR 8316485 A 19831017 Dérivés de 4-alkyl-2-hydroxy-3-méthyl-2-phényl- orpholine, procédé de préparation et utilisation en thérapeutique. La présente invention concerne en tant que produits industriels nouveaux, des dérivés de 4-alkyl-2-hydroxy-3-méthyl-2-phénylmorpholine Elle concerne également le procédé de préparation et l'utilisation en thérapeutique (notamment en tant qu'agents stimulants et anti-dépresseurs du SNC) de ces nouveaux composés. On sait que l'on a déjà décrit un certain nombre de dérivés de 2-phényl-morpholine o le cycle morpholinyle est simultanément substitué en position 2 et en position 4 Parmi ces dérivés, on connaît des composés appartenant à la famille des 4-alkyl-210 phényl-morpholines, notamment du brevet britannique N 851 311, du brevet américain N 2 997 469, de l'article de N BUSCH et al, Eur J Med Chem Chimica Therapeutica 11 (N 3) pages 20 I-207 ( 1976), des brevets français N 7443 M et 71-38592 (publication N 2 111 882), de la demande de brevet français N 79-30 768 (publication N 2471 378) 15 et de la demande de brevet européen N 82 402 147 1 (publication N 80 940) On sait également que plusieurs indications ont été envisagées ou préconisées pour les composés 2,4-disubstitués du type 4-alkyl-2-phényl- morpholine Ces composés sont, notamment dans les publications précitées, présentés en tant qu'agents excitants ou sti20 mulants du SNC, tranquillisants, sédatifs, anti-inflammatoires, analgésiques et hypotenseurs. On connaît enfin du brevet français N I 535 615 des composés 2,2,4-trisubstitués, à savoir les 2,2-diméthyl-4isopropylmorpholine, 2,2-diméthyl-4-l( 3-méthyl)-butyll-morpholine, 2,225 diméthyl-4-l( 2-phényl)-éthyll-morpholine et 2,2-dimêthyl-4-l( 2phényl)propyll-morpholine. On vient de trouver de façon surprenante que les composés 2,2,3,4tétrasubstitués selon l'invention (et en particulier la 4-éthyl-2-hydroxy3-méthyl-2-phényl-morpholine et ses sels d'addition), 30 qui sont structurellement différents des composés antérieurement connus, sont encore plus intéressants que ces derniers en thérapeutique, notamment en tant qu'agents stimulants et antidépresseurs du SNC. Les nouveaux composés selon l'invention qui appartiennent 35 à la famille des 2-phényl-morpholines sont caractérisés en ce qu'ils sont choisis parmi l'ensemble constitué par (i' les dérivés de 4-alkyl-2-hydroxy-3méthyl-2-phfnylmorpholine répondant à la formule générale CH OH o R est un groupe alkyle en C 1-C 4, notamment choisi parmi CH 3, CH 3 CH 2, CH(CH 3)2 et C(CH 3)3; et (ii) leurs sels d'addition. Par sels d'addition, on entend ici, d'une part, les sels d'addition d'acide obtenus par réaction d'une base libre-de formule I avec des acides minéraux ou organiques, et, d'autre part, les sels d'ammonium Parmi les acides utilisables pour salifier les bases de formule I, on peut notamment citer les acides chlorhydrique, bromhydrique, acétique, formique, propionique, oxalique, fumarique, maléique, succinique, benzolque, cinnamique, mandélique, citrique, malique, tartrique, aspartique, glutamique, méthanesulfonique, p-toluènesulfonique Parmi les composés permettant d'obtenir des sels d'ammonium, on peut notamment citer ICH 3 et Cl CH 3 D'une manière générale les sels d'addition d'acide sont préférés aux sels d'ammonium. Un certain nombre de composés selon l'invention est consigné de façon nullement limitative dans le tableau I ci-après TABLEAU I CH 3 { -R Produit N de code R Ex.l (a) CRL 41 000 CH 2 CH 3 Ex.2 (b) CRL 41 000 A CH(CH 3)2 Ex.3 (a) CRL 41 000 B CH Ex.4 (c) CRL 41 000 C C(IH 3)3 Notes (a): chlorhydrate (b): fumarate (c): méthanesulfonate 25534 1 3 Les composés préférés selon l'invention du point de vue de leurs propriétés thérapeutiques, sont la 4-éthyl-2-hydroxy-3méthyl-2phényl-morpholine et ses sels d'addition d'acide, notamment le chlorhydrate. Les composés de formule I peuvent être préparés selon une méthode connue en soi par application de mécanismes réactionnels classiques Le procédé que l'on préconise ici consiste à faire réagir l'"-bromopropiophénone de formule O CO-CH Br-CH (II) avec un excès par rapport aux conditions stoechiométriques de 2-(N-alkyl)-amino-l-éthanol de formule R-NH-C-CH -CH 2-OH (III) o R est défini comme indiqué ci-dessus, dans un solvant inerte, notamment l'éther diméthylique ou diéthylique. De façon avantageuse on utilisera environ 2 moles de III pour 1 mole de II, la durée de réaction étant comprise entre 4 et 24 heures et la température entre 5 et 25 C. Selon l'invention on préconise une composition thérapeutique qui est caractérisée en ce qu'elle renferme, en association 20 avec un excipient physiologiquement acceptable, au moins un composé de formule I ou l'un de ses sels d'addition, en tant que principe actif. Bien entendu, dans une telle composition le principe actif, qui est choisi parmi l'ensemble corstitué par les composés 25 de formule I et leurs sels non toxiques, intervient en quantité pharmaceutiquement efficace. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention seront mieux compris à la lecture qui va suivre d'un exemple de préparation et des résultats d'essais pharmacologiques, l'ensemble 30 de ces éléments n'étant nullement limitatif mais donné à titre d'illustration. PREPARATION Obtention du chlorhydrate de 4-dth l-2-hydroxy-3-methyl-2-ph Enylmorpholine CH 3 S f N-CH 2 CH 2 3 H Cl (Exemple 1; N de code: CRL 41 000) Dans une solution de 41,78 g ( 0, 469 mole) de 2-9thylaminoéthanol dans 800 ml d'éther anhydre, on coule goutte à goutte, 50 g ( 0,235 mole) d'a-bromopropiophénone On laisse en contact 24 heures, coule 500 ml d'eau et décante la phase éthérée qu'on lave à l'eau. On extrait la phase éthérée par un mélange de 500 ml d'eau et 25 ml 15 d'H Cl concentré(d = 1,19), lave la phase aqueuse à l'éther On alcalinise la phase aqueuse jusqu'à p H 11 au moyen de Na OH, extrait à l'éther, lave à l'eau et sèche la phase éthérée sur Mg SO 4 On filtre, précipite le chlorhydrate au moyen d'éthanol chlorhydrique et recristallise les cristaux dans le mélange ac 6 tone-éthanol ( 1:1) 20 v/v On obtient 15 g (rendement: 25 %) de CRL 41 000 F = 196 C (avec décomposition). ( % Cl mesuré: 14,02 % Analyse % Cl théorique: 13,79 % On a résumé ciaprès les résultats des essais qui ont été entrepris avec le produit de l'exemple 1 (CRL 41 000) qui est le composé préféré selon l'invention Dans ces essais, en l'absence de précisions contraires, le CRL 41 000 a été administré en solution dans de l'eau distillée (p H 5), par voie intrapéritonéale, sous un 30 volume de 20 ml/kg chez la souris mile, et sous un volume de 5 ml/kg chez le rat mâle. A TOXICITE La DL-O (dose maximale non mortelle) chez la souris est supérieure à 256 mg/kg et inférieure à 512 mg/kg. 25534 13 B ETUDE NEUROPSYCHOPHARMACOLOGIQUE I COI 1 ORTEMENT GLOBAL ET REACTIVITES Des lots de 3 animaux sont observes avant, puis 15 min, 30 min, 1 h, 2 h, 3 h, et 24 h après l'administration de CRL 41 000 o 1 ) Chez la souris, on observe aux doses suivantes: 128 mg/kg: une excitation avec présence de mouvements stéréotypés et hyperréactivitê pendant 3 h, et une mydriase modérée pendant 2 h; 32 mg/kg: une excitation fugace ( 30 min) À 2 ) Chez le rat, on observe aux doses suivantes: 64 mg/kg: une excitation avec augmentation de la réaction de peur et de la réactivité au toucher pendant 3 h, la présence de mouvements stéreotypés ( 3 h) une pilodrection pendant 2 h, et une mydriase pendant 3 h; 16 mg/kg: des stéréotypies 2 h après administration, et une mydriase pendant 2 à 3 h; 4 mg/kg: une mydriase pendant 1 à 3 h. II RECHERCHE DE MOUVEMENTS STEREOTYPES A la suite de l'observation de mouvements stéreotypés, parmi les symptômes notés, on a recherché les éventuelles stéréotypies que pourrait induire le CRL 41 000 Des groupes de 6 rats reçoivent le CRL 41 000 ou l'amphétamine immédiatement avant d'être places dans des enceintes de petites dimensions o leur comportement stéréotypé 25 est noté toutes les 10 min jusqu'à extinction de l'effet. On constate que le CRL 41 000 induit chez le rat l'apparition de mouvements stéreotypés L'intensité observée après 16 mg/kg de CRL 41 000 est comparable à celle obtenue après 2 mg/kg d'amphétamine. III INTERACTION AVEC L'APOMORPHINE 1 I) Chez la souris Des lots de 6 souris reçoivent le CRL 41 000 une demiheure avant l'injection sous-cutanée de 1 ou 16 mg/kg d'apomorphine. On observe que le CRL 41 000 aux doses de 8 et surtout de 32 et de 128 mg/kg s'oppose à l'action hypothermisante de l'apomorphine, sans modifier le comportement de verticalisation et les stéréotypies. 2 ) Chez le rat Le CRL 41 000 est administré à des lots de 6 rats une demi-heure avant l'injection sous-cutanée de 0,5 mg/kg d'apomorphine. 10 On constate que, à forte dose ( 64 mg/kg),le CRL 41 000 entratne une potentialisation des stéréotypies induites par l'apomorphine. IV INTERACTION AVEC L'AMPHETAMINE L'amphétamine ( 2 mg/kg) est injectée par voie intrapéritonéale à des lots de 6 rats, une demi-heure après l'administration 15 de CRL 41 000 On note que, aux doses de 16 et 64 mg/kg, le CRL 41 000 potentialise nettement les stéréotypies amphétaminiques. V INTERACTION AVEC LARESERPINE Quatre heures après l'injection intrapéritonéale de 2,5 mg/kg de réserpine, des lots de 6 souris reçoivent le CRI 41 000. 20 On observe l'action du produit à tester vis-à-vis de l'hypothermie et du pt$sis induits par la réserpine On constate que, aux doses de 8 mg/kg, 32 mg/kg et 128 mg/kg, le CRI 41 000 s'oppose à l'hypothermie réserpinique L'intensité du ptosis réserpinique est diminuée aux doses de 32 mg/kg et 128 mg/kg de CRL 41 000. VI INTERACTION AVEC L'OXOTREMORINE Le CRL 41 000 est administré à des lots de 6 souris une demi-heure avant l'injection intrapéritonéale de 0,5 mg/kg d'oxotrémorine. 1 ) Action sur la température Aux doses de 2 mg/kg et 8 mg/kg mais surtout de 32 mg/kg et de 128 mg/kg le CRL 41 000 s'oppose à l'action hypothermisante de l'oxotrémorine. 2 ) Action sur les tremblements Aux doses de 32 mg/kg et 128 mg/kg le CRL 41 000 diminue l'intensité des tremblements dus à l'oxotrémorine. 3 ) Action sur les symptômes cholinergifues_ priphériuesj Le CRL 41 000 ne modifie pas de façon sensible les signes 10 de stimulation cholinergique périphérique provoqués par l'oxotrémorine. VII ACTION SUR LE TEST DES QUATRE PLAQUES, LA TRACTION ET L'ELECTROCHOC Le test est pratiqué sur des lots de 10 souris, une demiheure après l'administration de CRL 41 000 On observe que, aux doses 15 de 8 mg/kg, 32 mg/kg et 128 mg/kg, le CRL 41 000 entratne une augmentation du nombre de passages punis, qu'il ne provoque pas d'incapacité motrice majeure et que, à forte dose ( 128 mg/kg), il s'oppose aux effets convulsivants de l'électrochoc. VIII ACTION SUR LA MOTILITE SPONTANEE Une demi-heure après avoir reçu le CRL 41 000, les souris sont placées en actimètre o leur motilité est enregistrée pendant min On constate que, aux doses les plus fortes que ont été utilisées ( 64 mg/kg et 128 mg/kg), le CRL 41 000 provoque une augmentation très nette de l'activité motrice spontanée de la souris. IX ACTION SUR L'AGRESSIVITE INTERGROUPES Après avoir séjourné pendant 3 semaines dans chacune des moitiés d'une cage séparée par une cloison opaque, des groupes de 3 souris reçoivent le CRL 41 000 Une demi-heure plus tard, les deux groupes d'une meme cage sont réunis par retrait de la cloison et on note le nombre de combats qui surviennent en 10 min On constate que, à 25534 13 forte dose ( 128 mg/kg), le CRL 41 000 entraîne une diminution nette du nombre de combats. X ACTION VIS-A-VIS DE QUELQUES CO 1 TORTEENTS PERTURBES PAR DIVERS AGENTS 10) Motilité réduite=Rarhabituation à l'en=ceinte Après 18 h de séjour dans les actimètres, les souris ( 6 par dose, 12 témoins) reçoivent le CRL 41 000 Elles sont aussitôt replacées dans leurs enceintes respectives et, une demi-heure plus tard, on enregistre leur motilité pendant 30 min. On constate que, aux doses de 32 mg/kg et surtout 128 mg/kg, le CRL 41 000 provoque une reprise de l'activité motrice chez la souris habituée à son enceinte. 2 ) Motilité réduite p Ra Egresion hvp 2 ?Fll ============ ====_====_== ======_= == = Une demi-heure après avoir reçu le CRL 41 000, les souris 15 ( 10 par dose, 20 témoins) sont soumises à une anoxie hypobare aiguë /Uépression de 600 mml Ig (soit environ 8 x 104 pascals) en 90 S; détente de 45 S 7, puis elles sont placées en actimètre o leur motilité est enregistrée pendant 10 min. On observe que, à forte dose ( 128 mg/kg), le CRL 41 000 20 entraîne une amélioration très sensible de la récupération motrice chez les souris dont la motilité a été déprimée à la suite d'un séjour bref dans une enceinte à pression réduite. ) Anoxieasphytltaue Des lots de 10 souris reçoivent le CRL 41 000 une demi25 heure avant l'administration intrapéritonéale de 32 mg/kg de triiodoéthylate de gallamine (agent curarisant de référence) On constate que le CRL 41 000 n'entraîne pas de modifications du délai d'apparition des convulsions et de la mort consécutives à une anoxie asphyxique provoquée par un curarisant. XI INTERACTION AVEC LE BARBITAL Une demi-heure après l'administration de CRL 41 000, des lots de 10 souris reçoivent une injection intrapéritonéale de barbital ( 220 mg/kg). 2553 4 X Dès la dose de 2 mg/kg le CRL 41 000 diminue la durée du sommeil barbiturique L'effet est maximal aux doses de 32 à 128 mg/kg. XII ACTION SUR LE "DESESPOIR COMPORTEIENTAL" Une demi-heure après avoir reçu le CRL 41 000, des lots de 6 souris sont placés dans un bêcher rempli d'eau sur une hauteur de 6 cm On note la durée totale d'immobilité entre la 2 e et la 6 e minute suivant l'immersion On observe que, aux doses de 32 mg/kg et de 128 mg/kg le CRL 41 000 entraîne une diminution nette de la durée 10 de l'immobilité dite de "désespoir". XIII RECHERCHE D'UNE TOXICITE PARTICULIERE CHEZ LES SOURIS GROUPEES Aussitôt après l'administration de CRL 41 000 les souris groupées par lots de 10, sont placées dans des boites en Plexiglass ( 20 x 10 x 10 cm) On note le nombre d'animaux morts, toutes les heures pendant 4 heures et après 24 heures La toxicité du CRL 41 000 est déterninée dans les mêmes conditions sur des lots de 10 souris placées à raison d'une par botte. Dans ces conditions on observe une absence de toxicité particulière chez les souris groupées, le rapport R = DL-50 souris 20 isolées/DL-50 souris groupées étant inférieur ou égal à 2 Pour comparaison, dans les mêmes conditions le rapport R est de 8 pour l'amphétamine et le diéthylpropion, de 6 pour le méthylphénidate, de 4 pour la benzphétamine et de 3 pour la nimifensine. XIV ACTIVITE ANTIDEPRESSIVE PAR VOIE ORALE. On a étudié, selon deux tests prévisionnels (intéraction avec l'apomorphine et interaction avec la résaerpine) les effets antidépresseurs du CRL 41000 administré par voie orale chez la souris mâle (le CRL 41000 étant dans ces deux tests administré en solution dans de l'eau distillée au moyen d'une soude gastrique 30 sous un volume de 20 ml/kg). Dans ces tests le CRL 41000 s'est révélé très actif en tant qu'agent antidépresseur. Par ailleurs au cours des essais cliniques entrepris chez l'homme l'activité antidépressive du CRL 41000 a été obtenue par voie orale. XV ACTION CHEZ LE RAT DEMEDULLE. Le CRL 41000 administré en solution aqueuse dans de l'eau distillée, par voie intraveineuse, a été comparé à l'amphétamine et à la tyramine selon trois techniques différentes chez le rat 10 démédullé Les résultats obtenus f-variation de la pression artérielle systolique APA en mm Hg ( 1 mm Hg correspond approximativement à 1,333 x 102 pascals 17 ont été consignés dans les Tableaux II, III et IV ci-après. Les résultats des Tableaux II, III et IV montrent que 15 a) l'activité hypertensive de la tyramine est totalement bloquée après pré-traitement avec la réserpine, alors qu'elle n'est pas modifiée par pré-traitement avec l'ç(-méthyltyrosine; b) l'activité hypertensive de l'amphétamine n'est pas totalement bloquée par la tyramine (déplétion en catécholamines) , par l'"-méthyltyrosine (blocage de la synthèse des catécholamines) et par l'association de ces deux réactifs; c) en revanche l'activité hypertensive ( 2 è phase progressive et de durée supérieure ou égale à I h) du CRL 41000 est totalement bloquée par la tyramine, l' -méthyltyrosine, et l'association 25 des deux réactifs. VARIA Ti ON DE LA PRESSION ARTERRIELLE SYSTOLIQUE (à PA) CHIEZ LE i RT DE Mi EDULLE * TABLEAU I Après déplétion en catécholamines par pré-traitement au moyen de réserpine ( 7,5 mg/kg I P 20 h avant administration des produits à tester) Tyramine 200/Lg/kg I V. Amphétamine 250/ Ag/kg I V. CRL 41000 30 mg/kg I V. lère phase 2 è phase PA (mm Hg) O + 49 + 30 | O i TABLEAU II Après blocage de la synthèse des catécholamines par pré-traitement au moyen d'" -méthyltyrosine ( 250 mg/kg I P 20 h avant, puis 250 mg/kg I P 2 h avant administration des produits à tester Tyramine Amphétamine CRL 41000 /4 g/kg I V 250/ g/kg I V 30 mg/kg I V. lere phase 2 é phase i APA(mm Hg) + 19 + 17 r+ 24 p ___________ + 7 + 24 l O TABLEAU III Après blocage de la synthèse pari 1-méthyltyrozine et déplétion par réserpine administrées, selon les modalités données ci-dessus,avant les produits à tester Tyramine 200/À g/kg I V. Amphétamine 250/xg/kg I V. CRL 41000 mg/kg I V. lère phase 2 é phase It PA (mm Hg) O + 20 + 60 o 1 ru Ln 'n VI Wy Note * sur lots de 3 animaux par produit à tester. D CONCLUSIONS Il résulte des résultats donnés ci-dessus que le CRL 4 l 000 présente un profil d'agent stimulant du SNC (excitation chez la souris et le rat, hyper-réactivité, augmentation du nombre de passages punis selon le test des quatre plaques, reprise de l'activité motrice chez la souris habituée à son enceinte, présences de mouvements stéréotypés notamment potentialisation des stéréotypies induites par l'apomorphine et l'amphétamine -, antagonisme du sommeil barbiturique). A c 6 té de ces effets stimulants, le CRL 41 000 présente des effets antidépresseurs (antagonisme des hypothermies induites par l'apomorphine, la réserpine et l'oxotrémorine, d'une part? et diminution de la durée d'immobilité dite de "déserpoir"). Ces propriétés stimulantes et anti-dépressives suggèrent 15 que le CRL 41 000 agit comme les substances amphétaminiques, avec en particulier deux différences d'effet (toxicité groupée et activité hypertensive). En clinique, on a observé que le CRL 41 000 a donné, en tant qu'agent anti-dépresseur, de bons résultats chez l'homme quand il a été administré par voie orale sous forme de comprimésou de gélules (renfermant chacun 10 mg dudit CRL 41 000) à raison de 2 à 3 comprimés ou gélules par jour, dans le traitement des états dépressifs. 25534 13 REVENDICATIONS 1 Dérivé de 2-phinyl-morpholine, caractérisé en ce qu'il est choisi parmi l'ensemble constitué par (i) les dérivés de 4-alkyl-2-hydroxy-3-m éthyl-2phényl5 morpholine répondant à la formule générale CH 3 (I) OH o R est un groupe alkyle en C -C 4 notamment choisi parmi CH 3, CH 3 CH 2, CH(CH 3)2 et C(CH 3)3; et, (ii) leurs sels d'addition. 2 4-Ethyl-2-hydroxy-3-mdthyl-2-phényl-morpholine et ses sels d'addition. 3 Composition thérapeutique, caractérisée en ce qu'elle renferme, en association avec un excipient physiologiquement acceptable au moins un dérivé de 4-alkyl-2-hydroxy-3-méthyl-2-phénylmorpholine de formule I selon la revendication 1 ou l'un de ses sels d'addition non toxiques. 4 Procédd de préparation d'un dérivé de 4-alkyl-2-hydroxy3-méthyl-2phényl-morpholine de formule I, selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on fait réagir l'a-bromopropioph 9 none de formule CO-CH Br-CH 3 (II) avec un 2-(N-alkyl)-amino-l-éthanol de formule R-NH-CH -CH -OH (III) 2 2 o R est défini comme indiqué ci-dessus, à raison de, environ 2 moles de III pour 1 mole de II, à une température comprise entre 5 et 25 C pendant 4 à 24 heures.