FR 2558838 A1 19850802 FR 8500893 A 19850123 Procédé de préparation de dérivés N-acylés d'aspartame L'aspartame, c'est-à-dire l'ester méthylique del'u-L-aspartyl- L-phényl-alanine, est un édulcorant artificiel d'un grand intérêt. Plusieurs études ont été effectuées dans le but de:-tt:eau point des procédés de production d'aspartame, de plus en plus simples et économiques. L'un des procédés les plus étudiés est basé sur l'aminolyse de l'anhydride d'acide aspartique avec l'ester méthylique de la L-phényl- alanine, le groupe amine de l'acide aspartique étant protégé sous la forme d'un sel (voir par exemple: Bull. Chem. Soc. Japon 46, 2611, 1973; brevet US 3 901 871; et Chem. Abs., 78, 160119, 1973) ou au moyen des groupes protecteurs usuels utilisés dans la synthèse des peptides comme par exemple benzyloxycarbonyle, t-butoxycarbonyle, formyle, 2-nitrophényl- sulfonyle et similaires [voir par exemple: brevet suisse 508 590, brevet britannique 1 339 101, demande de brevet néerlandais 70 071 76 et Chem. Abs. 80, 48405 (1974)]. Une telle aminolyse conduit en fait à un mélange d' CH2C6H 126 P-NH-CH-CO-NH-CH-CH C H + P-NH-CH-CH -CONH-CH I 26H5I 2 1 1 2 6 UHM COOCH COOH CH À COOCH3 i23 3 COOH dans lequel P est un groupe protecteur de la fonction amine. La régiosélectivité est d'une importante primordiale pour le succès industriel du procédé, étant donne que l'isomère/, contrairement à l'isomère ", présente un goût amer et doit en conséquence être obliga- toirement éliminé. En conséquence, la formation de l'isomère constitue un inconvé- nient pour deux raisons: il diminue les rendements globaux en produit utile et pose de nombreux problèmes au niveau du stade de purification, car celui-ci est d'autant plus coûteux que le pourcentage en isomères est élevé. Diverses méthodes pour obtenir l'isomère Aen une proportion prédominante par rapport à l'isomère 0 sont décrites dans la littérature, comme par exemple, l'emploi de basses températures, l'utilisation d'un excès d'ester méthylique de L-phényl-alanine ou l'introduction de divers additifs dans le mélange de réaction (voir par exemple Russian Chemical Review, 50, 316, 1981). A titre indicatif, on précisera que les additifs décrits dans la littérature sont par exemple l'acide acétique (Bull. Chem. Soc.Jap. 46, 1893, 1973), l'anhydride carbonique (brevet US 3 901 871), l'acide o-phosphorique (demande de brevet allemand 2 233 535), des mélanges d'acides faibles et d'alcanols aliphatiques inférieurs (Bull. Chem. Soc. Jap. 46, 2611, 1973) et des mélanges d'alcools et d'acides forts (brevet GB 1 481 186 et Chem. Abs. 85, 6055, 1976). L'utilisation de ces additifs ou d'un excès d'ester méthylique de Lphényl-alanine, complique à la fois l'exploitation pratique du procédé et la séparation des produits de réaction ou la récupération éventuelle de l'excès de phénylalanine qui, il convient de le noter, est de loin le réactif le plus coûteux parmi ceux mis en oeuvre. La Demanderesse a maintenant trouvé de façon surprenante que si l'on fait réagir l'anhydride d'acide aspartique N-protégé de formule I: R I 1 R-N-CH-CH 2I CO Co dans laquelle R est un atome d'hydrogène et R1 représente un groupe formyle, benzyloxycarbonyle, benzyloxycarbonyle dont le noyau phényle est substitué par un ou deux groupes choisis parmi alkyle en C1_4, alcoxy en C1-4, halogène, nitro et trifluorométhyle, ou t-butoxycarbonyle, ou bien R et R1 forment avec l'atome d'azote adjacent un reste phtalimido, avec l'ester méthylique de la L-phényl-alanine de formule II: H2N-CH-CH2-C6H5 COOCH3 il est possible d'obtenir 1'_ -aspartame N-protégé de formule III R \N-CH-CO-NH-CH-CH -C H III R 1 CH2 OOCH3 COOH ou R et R1 sont tels que définis ci-dessus, avec un degré élevé de régio- sélectivité sous réserve d'effectuer la réaction de condensation en pré- sence d'un solvant organique convenable choisi parmi les solvants non polaires ou légèrement polaires et les solvants aprotiques faiblement basiques, dans des conditions particulières de concentration qui dépendent de la nature du solvant employé. En fait, on sait que les solvants polaires diprotiques, par exemple le diméthylsulfoxyde, le diméthylformamide et similaire, conduisent toujours à l'isomèred en des proportions de loin prédominantes (plus de %)i et en conséquence on doit les éviter. Les solvants protiques nucléo- philes, tels que l'eau, les alcools et similaires sont également à éviter car ils peuvent réagir avec l'anhydride de l'acide aspartique en provoquant ainsi des réactions secondaires qui abaissent considérablement les rende- ments en aspartame. De même, les solvants fortement basiques comme par exemple la pyridine, les picolines, les amines et ainsi de suite, condui- sent essentiellement à l'isomère ? et en conséquence on ne peut pas les utiliser avantageusement. Au contraire, les solvants qui conviennent pour la présente inven- tion sont ohoisis parmi les solvants polaires, les solvants légèrement polaires et les solvants aprotiques faiblement basiques, avec une préférence pour les solvants non polaires et les solvants légèrement polaires. Comme exemples de solvants non polaires ou légèrement polaires pouvant avantageusement être utilisésdans le procédé de l'invention, on peut citer les hydrocarbures aliphatiques et aromatiques, éventuellement substitués par des atomes d'halogène, comme le benzène, toluène, xylène, n-hexane, n-pentane, 1,2-dichloro-éthane, chloroforme, tétrachlorure de carbone, chlorure de méthylène, et similaires, alors que parmi les solvants aprotiques faiblement basiques on peut citer les éthers, le tétrahydro- furanne, le dioxanne et similaires. Parmi les solvants non polaires ou légèrement polaires, on pré- fère les hydrocarbures aromatiques comme le toluène et les hydrocarbures aliphatiques halogénés comme le chlorure de méthylène ou le 1,2-dicloro- éthane; ces solvants ont l'avantage de dissoudre les réactifs à un dégré suffisant et, en même temps ne solubilisent que de manière négligeable les produits finals de réaction, ces derniers pouvant de ce fait être aisément séparés du milieu de réaction sous forme de précipité cristallin et les liqueurs mères pouvant être recyclées telles quelles. La seule utilisation de ces types de solvants n'est pas suffisante pour obtenir un rapport ( /, élevé; en effet, un autre élément important est la concentration constante des réactifs dans le mélange de réaction. En particulier, si l'on-utilise des solvants non polaires ou légèrement polaires tels que des hydrocarbures ou des hydrocarbures halo- génés, il est nécessaire de maintenir pendant la réaction la concentration constante en ester méthylique de L-phényl-alanine à un niveau relativement bas. En fait, si l'on utilise des rapports stoechiométriquesde l'anhydride d'acide aspartique N-protégé à l'ester méthylique de L-phényle-alanine dans ces solvants, le rapporteo / / aspartame N-protégé varie considérable- ment avec la concentration des réactifs dans le sens d'une augmentation de ce rapport avec la dilution (voir par exemple les Tableaux I->VII Une solution pratique particulièrement efficace consiste à ajouter lentement l'ester méthylique de L-phényl-alanine à la solution d'anhydride d'acide aspartique N-protégé; en fait on obtient des résultats très dif- férents suivant que les deux réactifs sont soudainement mélangés ensemble (rapporte /i/ plus faible) ou que l'ester méthylique de L-phényl-alanine est ajouté à la solution d'anhydride d'acide aspartique N-protégé sur une période de temps prédéterminée (rapporte /I plus élevé, Tableau V). En considérant que la vitesse de réaction est déjà suffisamment élevée à la température ambiante, il est possible de maintenir une faible concentra- tion constante en ester méthylique de L-phényl-alanine en ajoutant ce réactif au cours d'un intervalle de temps compris entre 0,5 et 3 heures environ, pour obtenir ainsi l'isomère c avec un degré élevé de régio- sélectivité. En considérant que la vitesse de réaction augmente avec la tempéra- ture, on peut réduire les durées d'addition de l'ester méthylique de L- phényl-alanine en augmentant la température, tout en même temps, en main- tenant toujours une faible concentration constante en ester méthylique de L-phényl-alanine. En conséquence, si l'on effectue l'addition de cet ester méthylique à 50 C, la même sélectivité (" I/ = 80/20) que celle obtenue à 20 Cen 60 minutes, peut être obtenue en 6 minutes (Tableau V). Au contraire, si on laisse inchangées les autres conditions, on obtient les plus faibles degrés de sélectivité en isomère Sen ajoutant lentement l'anhydride d'acide aspartique N-protégé à la solution de l'ester méthylique de L-phényl-alanine. Une solution différente mais tout aussi sélective consiste à ver- ser les deux réactifs (l'ester méthylique et l'anhydride) dans le solvant de réaction sur une période suffisamment longue (de préférence 10 à 120 minutes, selon les températures) afin de maintenir toujours à une valeur basse la concentration des réactifs. Des résultats obtenus par une série de tests il ressort que quand on utilise des solvants non polaires ou légèrement polaires, on peut obtenir une grande sélectivité (en moyenne supérieure à 70 %) eno celles décrites pour les solvants non polaires ou légèrement polaires. Dans ces cas, une condition nécessaire pour obtenir l'isomère favec un degré élevé de sélectivité est que la concentration en anhydride d'acide aspartique N-protégé soit toujours relativement élevée, indépendamment de la concentration en ester méthylique de L-phényl-alanine. Ainsi, dans ce cas, si l'on opte pour des rapports stoechiométri- ques: anhydride d'acide aspartique N-protégé/ester méthylique de L- phényl-alanine dans le dioxanne, le rapport ' /i aspartame N-protégé varie considérablement avec la concentration; plus précisément, ce rapport diminue avec la dilution, ce qui est contraire à ce que l'on constate avec les solvants non basiques. Si l'on ajoute lentement l'anhydride d'acide aspartique N-protégé à la solution de l'ester méthylique de L-phényl-alanine, la sélectivité est faible dans tous les cas, tandis que si l'on ajoute lente- ment l'ester méthylique à la solution de l'anhydride, la sélectivité en isomèret augmente fortement avec la concentration de l'anhydride (voir Tableaux VIII-->XII. Dans ce cas, les résultats expérimentaux montrent en moyenne, que lorsque la concentration en anhydride d'acide aspartique N-protégé est supérieure à 0,1 M, la réaction conduit de préférence à l'isomère y(. Avec les deux catégories de solvants, on effectue en général les réactions à des températures situées entre 0 et 100 C, de préférence, entre 0 et 80 C, pendant une durée avantageusement comprise entre 5 et minutes. De préférence, le rapport: anhydride d'acide aspartique N- protégé/ester méthylique de L-phényl-alanine est compris entre 1 et 1,5. Dans tous les cas, l'isomère( de l'aspartame N-protégé, renfer- mant de petites quantités d'isomère f, précipite à partir du solvant de réaction et peut donc être recueilli par filtration, décantation ou cen- trifugation, alors qu'on peut recycler les liqueurs-mères telles quelles pour des opérations ultérieures. Dans chaque cas, le phénomène de sélectivité est plus marqué et, par conséquent, on obtient une sélectivité plus élevée quand on protège le groupe amino de l'anhydride d'acide aspartique sous forme de dérivé for- mylé ou benzyloxycarbonylé; cela est particulièrement utile aux fins de l'invention si l'on a présent à l'esprit que la déprotection du groupe amino a lieu le plus facilement en partant de ces deux dérivés. Ainsi, selon un mode de réalisation préféré de l'invention, on effectue la condensation en utilisant l'anhydride d'acide N-formyl- ou N-benzyl-oxycarbonyl- aspartique et l'ester méthylique de L-phényl- alanine à une concentration inférieure à 0,2 M. Selon un mode de réalisa- tion particulièrement préféré, on effectue la réaction dans le toluène, le chlorure de méthylène ou le 1,2-dichloroéthane et on maintient la con- centration de l'ester méthylique de L-phényl-alanine dans le mélange de réaction au-dessous de 0,05 M. Les exemples suivants, dans lesquels toutes les proportions sont en poids sauf stipulation contraire, servent à illustrer l'invention sans aucunement en limiter la portée: Exemples 1 - 3 (Tableau I) On verse 6 ml de toluène précédemment additioné avec la quantité d'ester méthylique de L-phênyl-alanine indiquée dans le Tableau I, immédia- l0 tement dans 6 ml de toluène mélangé avec la quantité d'anhydride d'acide N-formyi-aspartique également indiquée dans le Tableau I à 20 C sous agitation. On agite le mélange pendant 30 minutes supplémentaireSà la même température, puis on ajoute 30 ml d'acétonitrile et on analyse la solution par chromatographie liquide à haute pression (HPLC) en utilisant i5 une colonne Merck RP 18 de 7 microns, avec élution avec une solution aqueuse de tampon phosphate (pH 2,5) acétonitrile = 70/30 (vol/vol), avec un débit de lml/min et en utilisant l'o ml de toluène mélangé avec la quantité d'anhydride d'acide N-benzyloxy- carbonyl-aspartique également indiquée dans le Tableau II, à 20 C avec agitation. On poursuit l'agitation pendant 30 minutes supplémentaire , puis on homogénéise le mélange de réaction par addition d'acétonitrile et effectue l'analyse HPLC (Colonne Merck RP 18, 7 microns) en éluant avec une solution aqueuse de tampon phosphate (pH 4): acétonitrile = 70: 30, avec un débit de 1,2 ml/min. Les rendements et sélectivités obtenus sont donnéa. dans le Tableau II. Exemples 7-9 (Tableau III) En opérant comme décrit dans les exemples 4 à 6 mais en utilisant l'anhydride 3-phtalimido-succinique, (II, R R = R au lieu de l'anhydride d'acide N-benzyloxycarbonyl-aspartique, on obtient les résultats apparaissant dans le Tableau III. Exemples 10-12 (Tableau IV) On verse 6 ml de 1,2-dichloroéthane précédemment additioné avec la quantité d'ester méthylique de L-phénylalanine indiquée dans le Tableau IV, immédiatement dans 6 ml de 1,2dichloroéthane mélangé avec la quantité d'anhydride d'acide N-formylaspartique également indiquée dans le Tableau IV, à 20 C sous agitation. Après agitation à la même température pendant 30 minutes et addition de 30 ml d'acétonitrile, on analyse la solution par HPLC comme décrit dans les exemples 1 à 3. Les rendements et sélectivités obtenus sont donnés dans le Tableau IV. Exemples 13-19 (Tableau V) On ajoute sous agitation à un mélange d'anhydride d'acide N- formyl-aspartique et 6 ml de 1,2-dichloroéthane (0,4M), 6 ml d'une solution (0,4 M) d'ester méthylique de L-phényl-alanine à la température et sur la période indiquées dans le Tableau V. On agite ensuite le mélange résultant pendant 30 minutes. Puis on ajoute 30 ml d'acétonitrile et on analyse la solution obtenue par HPLC comme expliqué dans les exemples 1 à 3. Les résultats sont rassemblés dans le Tableau V. Exemples 20-22 (Tableau VI) On répète les procédures des exemples 4 à 6 en utilisant du 1,2- dichloroéthane au lieu du toluène. Les rendements et les sélectivités sont donnés dans le Tableau VI. Exemples 23-25 (Tableau VII) On répète les procédures des exemples 7 à 9 en utilisant du 1,2- dichloroéthane au lieu du toluène. Les résultats obtenus sont donnés dans le Tableau VII. Exemples 26-28 (Tableau VIII) On répète les procédures des exemples 4 à 6 en utilisant du tétra- hydrofuranne au lieu du toluène. Les résultats obtenus apparaissent dans le Tableau VIII. Exemples 29-31 (Tableau IX) On répète les procédures des exemples 7 à 9 en utilisant du tétra- hydrofuranne au lieu du toluène. Les résultats obtenus apparaissent dans le Tableau IX. Exemples 32-33 (Tableau X) 6 ml de dioxanne précédemment additionné de la quantité (indiquée dans le Tableau X) d'ester méthylique de L-phénylalanine, sont ajoutés immédiatement à 6 ml de dioxanne mélangé à la quantité d'anhydride d'acide N-formyl-aspartique également indiquée dans le Tableau X, à 20 C sous agitation. On agite le mélange de réaction à la même température pendant minutes supplémentairespuis on ajoute 30 ml d'acétonitrile et on analyse la solution obtenue par HPLC comme décrit dans les exemples 1 à 3. Les rendements obtenus apparaissent dans le Tableau X. Exemples 31-35 (Tableau X) On ajoute à un mélange d'anhydride d'acide N-formyl-aspartique (quantité indiquée dans le Tableau X) et de 6 ml de dioxanne, sous agita- tion à 20 C et en 60 minutes, 6 ml d'une solution d'ester méthylique de Lphényl-alanine (quantité également indiquée dans le Tableau X). Une fois l'addition terminée, on agite le mélange à 20 C pendant 30 minutes supplé- mentaires,puis on ajoute 30 ml d'acétonitrile et on analyse la solution obtenue par HPLC comme dans les exemples 1 à 3. Les résultats obtenus ap- paraissent dans le Tableau X. Exemples 36-38 (Tableau XI) On procède comme dans les exemples 4 à 6 mais en remplaçant le toluène par le dioxanne. Les résultats obtenus apparaissent dans le Tableau XI. Exemples 39-41 (Tableau XII) On procède comme dans les exemples 7 à 9 mais en remplaçant le toluène par le dioxanne.Les résultats obtenus sont donnés dans le Tableau XII. Exemples 42-44 (Tableau XIII) On procède comme dans les exemples 10 à 12 avec la seule diffé- rence que l'on remplace le 1,2-dichloroéthane par du diméthylsulfoxyde. Les résultats obtenus sont donnés dans le Tableau XIII. Exemple 45 (Tableau XIII) On opère sensiblement comme décrit dans les exemples 17 et 34 avec la seule différence que l'on remplace le 1,2dichloroéthane et le dioxannepar du diméthylsulfoxyde. Les résultats obtenus apparaissent dans le Tableau XIII. Exemples 46-48 (Tableau XIV) On procède comme dans les exemples I4 à 6 mais en remplaçant le toluène par du diméthylsulfoxyde. Les résultats obtenus sont donnés dans le Tableau XIV. Exemples 49-51 (Tableau XV) On procède comme dans les exemples 7 à 9 mais en remplaçant le toluène par du démithylsulfoxyde. Les résultats obtenus sont donnés dans le Tableau XV. Tableau I Effet de la concentration des réactifs sur le rapport " /I formylaspartame dans le toluène à 20 C Ester méthylique Anhydride d'acide -Formylaspartamn B-Formylaspartame Rend(- IExemple imn xempe de L-phényl- N-formyl-aspartique % %ment N alanine ( Molarité) global (Molarité) % 1 0O8 0,8 52,5 47)5 94 2 O,2 0,2 63,7 36,3 93 3 0,02 0,02 78 3 21,7 96 tn co oo A t Tableau II - Réactions dans le toluène Exemple Ester méthylique 'Anhydride d'acide Exemple Ester méthylique Anhydride d'aoide N-benzyloxycarbonyl- NIenzyloxycarbonyl Rende- de L-phényl- N-benzyloxycarbonyl- m N alanine aspartique -asprtae aspartame ment ____ (Molarité) (Molarité) % global 4 0,8 0O8 61 39 96 0,2 0O2 74 26 98 6 0,02 0,02 85 15 96 vl w Tableau II - Réactions dans le toluène Exemple Ester méthylique Anhydride d'acide Ester méthylique de Ester méthylique de Rende- de L-phényl- 3-phtalimido-suc- N-3-phtalimido-suc- N-2-phtalimido-sucment N alanine cinique cinoyl-phényl-alanine cinoyl.-phéiyl-alnine global (Molarité) (Molarité) ("-isomère) (,5-isomère) _.,, l_,., _ ".] _. ( -is m.re.).....( t-smr _ _ 7 0,8 0,8 46 54 96 8 0,2 % 0,2 53 47 98 9 0,02 0,02 57 43 98 Co y. Co _, Tableau IV Effet de la concentration des réactifs sur le rapport A/, formylaspartame dans le 1,2-dichloroéthane à 20 C. Exemple Ester méthylique Anhydride d'acide de L-phény l- N- formyla sparartiqee e de L-phényl- N-formyl-aspartique BFormylasPartanfB-FormylaspartanfRende- NO alanine % %ment __ _(MoNlarîté) (Molarité) global 0,8 0,8 64,2 35,8 94 il 0,2 052 76,5 23,5 96 12 0,02 0,02 84, 7 15,3 98 LN CO W 1 Co Tableau V Effet de la vitesse d'addition de l'ester méthylique de L-phényl-alanine (0,4 M dans le 1,2-dichloroéthane) à l'anhydride d'acide N-formyi-aspartique (0,4 M dans le 1,2- dichloroéthane) sur le rapport! Exemple Temperature Durée d'additior Q-Fortmylaspartame B-Formylaspartame Rendement global NO ( C) (minutes) % % 13 20- 1320 _69,3 30,6 94 14 20 6 71,5 2875 96 20 12 77,2 22,8 95 16 20 24 78,0 22,0 98 17 20 60 79,6 204 98 18 20 180 82,6 17,4 97 19 50 6 _i_79,9 20,1 96 Pli Ul Ln co Go GO ce4 Tableau VI Réactions dans le 1,2-dichloroéthane ExempleEster méthylique Anhydride d'acide-Benzyloxycarbonyl-NBenzyloxycarbo-Rende- de zo-phanyl-N-bexycarbonyl- nyl-B-aspartaoe ny-B-aspartaoement NO alanine aspartiquel ame (Molarité) (Mo]arité) % % global 0,8 0,8 65 35 96 21 0,2 0,2 77 23 98 22 0,02 0,02 81 19 92 n Cul o Lw no Tableau VII Réactions dans le 1,2-dichloroéthane Exemple Ester méthylique Anhydride d'acide Ester méthylique de Ester méthylique de rede- de L-phényl- de 3-phtalimido-suc- N-3-phtalimido-succi- N-2-phtaJ imidosuc- nert No alanine cinique noyI-phényI-aialine ci nFl -phnyJ-; lobal (Molarité) (Molarité) (0(-isomère) % alanine V-isomère)% % 23 0,8 08 53 47 99 24 0,2 0O2 57 43 99 0,02 0,02 60 40 98 Co co Tableau VIII Réations dans le tétrahydrofuranne Exemple Ester méthylique Anhydride d'acide N-enzyo xny- N-benzyloxyarbony Rende- N-benzyloxycarbonyl- N-benzyl xycarb nyl-' de L-phényl- Nbenzyloxycarbonyl -aspartam -aspartam t NO alanine aspartique % global (Molarité (Molarité).__ _ 26 0,8 0,8 63 37 95 27 0;2 0,2 58 42 97 28 0,02 0;02 41 59 97 M Ce w CD ,, ,, i0 U4 Tableau IX Réactions dans le tétrahydrofuranne Efster me6thÉyl.uea ExempleEster méthyliqueAnhydride d'acideméthylque aeEster méthylique deRende- N-3PltlidOueN2-phtalimido-suc-mn de L-phényl-3N-2-phtalimido-suc-nI-ph ment No alanine cinique (MlOyî-Phny1-g1ohiI (Molarité)(Molarité)alanine(. 29 0,8 0,8 46 54 98 0,2 02 44 56 99 31 0,02 0,02 16 84 99 Ln ul Co Co wL Co O0 w, O0 Tableau X Effets de la concentration des réactifs et de la vitesse d'addition de l'ester méthylique de L-phényl-alanine, sur le rapport- / -formylaspartame dans le dioxamneà 20 C. Exemple Ester méthylique Anhydride d'acide Durée d'addi- de L-phényl- N-formyl-asparti- tion de l'ester "-FrMYl- -Formyl- Rende- NO alanine que (Minutes) aspartame aspartame ment (Molarité) (Molarité) % % global 32 0J2 0,2 77,1 22,9 97 *33 0,02 0,02 58,0 42,0 94 34 054 0,4 60 80,5 49)5 96 0,02 0,02 60 51,3 48,7 93 Ul' oe oe aD Tableau XI Réactions dans le dioxanne Ester méthylique Anhydride d'acide N-enzyloxycarbonyl- Nbenzyloxycarbonyl- ende- Exemple de L-phényl- N-benzyloxycarbonyi- N a].anine aspartique "-aspartame 6-aspartame en t (Molarité) (Molarité) %lobal 36 0,8 0;8 77 23 93 ro 37 0O2 O2 58 42 96 38 0,02 0;02 48 52 95 r Ln ol CO Tableau XII Réactions dans le dioxanne Ester méthylique Anhydride d'acide Ester méthylique de Ester méthylique de Rende- Exemple de L- phényl- 3-phtalimido-succi- N-3-phtalimido-succi N-2phtalimido-suc- ment N alanine nique noyl-phényl-alanine cinoyl-phénylalanine global (Molarité) (Molarité) ("-isomère) % ( -isomère) % % ., ,..,,.... 39 0X8 0,8 54 46 94 0,2 02 49 51 97 ,.,,_........ 41 0,02 0,02 41 59 98 98t n col Tableau XII Rapport entreo(- et/5-aspartame dans le d:Lmtthylsuifoxyde à 20%C Exemple Ester méthylique Anhydride d'acide Durée d'addi- O-Formyl- B-FornylRendement N de L-phényl-alaninE N-formyl-aspartique tion de l'ester aspatan- aspartane Rnebal (Molaritée) (Molarité) (Minutes) % % % 42 0,8 098 _20,6 79,4 94 43 0,2 0,2 19,1 80,9 93 44 0,02 0,02 18, 6 81,4 95 O04 04 60 17,0 83,O 94 rC co cu ce Tableau XIV Réactions dans le diméthylsulfoxyde Exemple Ester méthylique Anhydride d'acide N-benzyloxycarbonyl- Nbenzyloxycarbonyl Rende- de L-phényl- N-benzyloxycarbonyl- Q-aspartam 8-aspartame ment N alanine aspartique % % global (Molarité) (Molarité) a. % 46 0O,8 08 19 81 93 47 0.2 072 4 96 95 48Y 0,02 0,02 9 91 98 n n. co 0G 9 91 98P LA Co Co Tableau XV Réaction dans le diméthylsulfoxyde Exemple Ester méthylique Anhydride d'acide Ester méthylique de Esterméthylique de Rende- de L-phényi- 3-phtalimido-succi- N-3-phtlimido-succi- -?-phtalimido-suci.ment NO almine nique noyl-phenyl-alanine noyl-phényl-alanine global oM tarite) (nMoarité ( 49 0,8 0,8 8 92 99 012 0,2 3 97 99 51 0,02 0,02 9 91 99 rV Co co Co REVENDICATIONS 1. Procédé de préparation d'un i-aspartame N-protégé répondant à la formule III: gR CH2 COOCH3 COOH dans laquelle R représente un atome d'hydrogène et R1 représente un groupe formyle, benzyloxycarbonyle, benzyloxycarbonyle dont le noyau phényle est substitué par un ou deux groupes choisis parmi les groupes alkyle en Cl-C4, alcoxy en C1-C4, halogéno, nitro et trifluorométhyle, ou un groupe t- butoxycarbonyle ou bien R et R1, considérés conjointement avec l'atome d'a- zote adjacent, représentent un groupe phtalimido, qui consiste à faire réagir un anhydride d'acide aspartique N-protégé de formule I R_ 1 1 R-N-CH-----CO / CH 2-CO dans laquelle R et R sont tels que définis ci-dessus, avec un ester méthylique de L-phényl-alanine de formule II H2N-CH-CH2-C6H5 (II) COOCH3 en l'absence d'additifs, caractérisé en ce qu'on effectue la réaction: a) en présence d'un solvant non polaire ou légèrement polaire, en maintenant une concentration constante en ester méthylique de L-phényl-alanine infé- rieure à 0,2 M; ou b) en présence d'un solvant aprotique faiblement basique, en maintenant la concentration en anhydride d'acide aspartique Nprotégé au-dessus de 0,1 M. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le sol- vant non polaire ou légèrement polaire est un hydrocarbure aliphatique ou aromatique éventuellement substitué par des atomes d'halogène- 3. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que le sol- vant est le benzène, le toluène, le xylène, le chlorure de méthylène ou le 1,2-dichloroéthane. 4. Procédé selon la revendication 2 ou 3, caractérisé en ce qu'on maintient la concentration en ester méthylique de L-phényl-alanine au- dessous de 0,05 M. 5. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le solvant aprotique faiblement basique est un éther. 6. Procédé selon la revendication 2, 3 ou 4, caractérisé en ce qu'on maintient la concentration constante en ester méthylique de Lphényl- alanine au faible niveau désiré en opérant dans des solutions diluées ou en ajoutant progressivement l'ester méthylique de L-phényl-alanine au mé- lange du solvant et de l'anhydride d'acide aspartique N-protégé. 7. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce qu'on main- tient la concentration en anhydride d'acide aspartique N-protégé audessus de 0,2 M. 8. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, carac- térisé en ce que le rapport anhydride d'acide aspartique N-protégé/ester méthylique de L-phényl-alanine est compris entre 1 et 1,5. 9. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 8 carac- térisé en ce que l'on opère à une température comprise entre 0 et 100 C. 10. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisé en ce que R est un atome d'hydrogène et R1 est un groupe formyle ou behzyloxycarbonyle. i. Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce que R1 est le groupe formyle. 12. A titre de produit industriel nouveau, l'ester méthylique de N-3phtalimido-succinoyl-phényl-alanine.