FR 2543448 A1 19841005 FR 8305441 A 19830401 PROCEDE DE FRACTIONNEMENT DU PLASMA La présente invention a pour objet un procédé de fractionne- ment des protéines du plasma par chromatographie. La méthode la plus largement répandue à l'échelle industriel- le pour séparer les principaux composants du plasma, albumine et immunoglobulines, est la méthode de Cohn dont le principe est basé sur la précipitation sélective des protéines à l'aide de solutions hydroalcooliques Les procédés de précipitation ne sont pas parfaitement sélectifs et sont partiellement dénaturants; ils impliquent des manipulations longues et coûteuses en main d'oeuvre et en investissement, rendant l'obtention de produits stériles et apyrogènes particulièrement délicate. Avec l'introduction des matériaux échangeurs d'ions, de nouvelles techniques ont été proposées pour séparer les protéines de leurs mélanges par des procédés en continu sur colonnes à lit fixe Ces procédés sont plus économiques et permettent d'obtenir avec de meilleurs rendements des protéines de plus grande pureté. Cependant leur développement dans l'industrie biologique à grande échelle requiert des supports résistants à la pression, non bio- dégradables et non dénaturants pour les protéines. L'emploi de supports à base de polysaccharides est limité par la faible stabilité dimensionnelle de la matrice sous pression. Leur productivité est faible et inadaptée au traitement d'un volume important de plasma dont le besoin est ressenti par la demande mondiale sans cesse croissante en protéines. Les supports minéraux ont, à l'inverse, d'excellentes qualités physicomécaniques mais ils présentent des sites d'adsorption non spécifiques pouvant occasionner, en fonction du p H et de la force ionique utilisable, une perte de rendement en protéines. Des supports minéraux échangeurs d'ions pour la séparation des protéines ont été décrits notamment dans les brevets FR-A 2321932, FR-A 2359634 et FR-A 2464967 La mise en oeuvre de ces supports pour le fractionnement du plasma conduit à des rendements insuffi- sants pour les degrés de pureté exigés par les utilisations théra- peutiques D'une manière générale, le rendement d'extraction de l'albumine du plasma est inversement proportionnel à sa pureté. Le but principal de l'invention est de fournir un procédé permettant de traiter des volumes importants de plasma et d'isoler des protéines de haute pureté avec un bon rendement. Un but plus particulier est de fournir un procédé d'extraction à grande échelle de l'albumine à partir du plasma, pour usage thérapeutique. Le procédé selon l'invention consiste à fractionner le plasma au moyen d'échangeurs d'ions et est caractérisé en ce qu'une solution de plasma partiellement dessalé est mise en contact avec successivement au moins un échangeur d'anions, puis un échangeur de cations, les échangeurs dont la capacité d'échange est inférieure à 2 m eq/g étant constitués d'un support minéral poreux ayant une granulométrie de 4 pm à 5 mm, un diamètre de pores de 500 à 2 500 A, une surface spécifique de 5 à 150 m 2/g revêtu d'une quantité inférieure à 15 mg/m 2 d'un film de polymère réticulé contenant ou portant des groupes amines ou sels d'ainmonium quater- naire pour au moins l'un des échangeurs, et d'un film de polyvinyl- lactame réticulé portant des groupes acide carboxylique pour l'autre échangeur. Le plasma que l'on met en oeuvre selon l'invention peut être d'origine animale, plasma bovin notamment, ou humaine Il peut être obtenu par centrifugation du sang ou par ultrafiltration sur des modules de plasmaphérèse On peut mettre en oeuvre un plasma total frais ou décongelé, ou un surnageant de cryoprécipité. Les supports minéraux servant de base aux échangeurs d'ions sont représentés par les alumines et les silices Les supports des échangeurs mis en oeuvre peuvent être de même nature ou de nature différente, et posséder les mêmes caractéristiques ou des carac- téristiques différentes, à condition de rester dans les limites indiquées ci-avant. Le support minéral mis en oeuvre selon la présente invention possède de préférence un diamètre poreux de 600 à 1 500 A, une surface spécifique de 20 à 50 m 2/g et une granulométrie de 50 pm à 1 mm. La résine échangeuse d'anions est formée d'un polymère réti- culé contenant ou portant des groupes fonctionnels: amines primaire, secondaire ou tertiaire, sels-d'ammonium quaternaire de 43448 formules générales: -NH 2, -NHR, -N(R)2, -N(+)(R)3 X(-), dans lesquelles R identique ou différent représente un groupe alkyle ou hydroxyalkyle ayant 1 à 4 atomes de carbone et X un anion miné- ral ou organique tel que, par exemple, chlorure, sulfate, nitrate, phosphate, citrate. Les groupes amines tertiaires, sels d'ammonium quaternaire font partie de la chaine du polymère réticulé, ou sont fixés au polymère réticulé qui revêt toute la surface du support et donnent des échangeurs, dont la capacité d'échange est inférieure ou égale à 2 meq/g et de préférence comprise entre 0,15 et 1,2 meq/g et plus préférentiellement entre 0,15 et 0,70 meq/g. Les polymères réticulés qui revêtent la surface des supports sont des produits en eux-mêmes connus, obtenus à partir de mono- mères, tels que les composés époxydiques, qui réticulent avec les polyamines comme catalyseurs; le formaldéhyde, qui réticule par polycondensation avec l'urée, la mélamine, les polyamines ou les phénols; les monomères vinyliques: vinylpyridine, styrène et dérivés, qui réticulent avec des monomères polyfonctionnels, comme les diacrylates ou diméthacrylates de mono ou poly alkylène- glycols, le divinylbenzène, les vinyltrialcoxysilanes, les vinyl trihalogénosilanes, le bis-méthylène acrylamide, en présence d'un initiateur ou de rayons ultraviolets. Dans le cas o le polymère réticulé ne possède pas dans sa chaine de groupements fonctionnels, il est nécessaire de le modi- fier C'est le cas notamment des polymères réticulés à base de styrène et dérivés, d'acrylates et méthacrylates d'alkyle et d'acrylonitrile Cette modification du polymère est effectuée suivant tous procédés connus. Les résines échangeuses d'anions sur support et leurs procédés de préparation ont été décrites dans les FR A 2321932 et FR-A 2464967 auxquels on peut se référer. S'agissant de l'échangeur de cations, le support minéral poreux est revêtu d'un film de polyvinyllactame réticulé portant des groupes fonctionnels -COOH. Les copolymères de vinyllactame qui revêtent le support sont des produits en eux-mêmes connus Ils sont obtenus par copolyméri- sation de monomères de formule: C = CH 2 (I) f () o R est H ou bas alkyl et x est un nombre entier compris entre 2 et 5, avec un monomère acide carboxylique insaturé de formule: R (II) H 2 C = C-R 2 o R 1 est H ou CH 3 et R 2 est un groupe -COOH qui peut être relié à l'atome de carbone insaturé par l'intermédiaire d'un radical divalent alkylène linéaire ou ramifié en C 1-C 3 o, phénylène, cyclo- alkylène, -(CH 2)n-O-(CH 2)m-, -(CH 2)n-CO-(CH 2), -(CH 2) -COO-(CH 2)-, (CH 2) SO 2-(CH 2) (CH 2) n-NR 4 -(CH 2)-, (CH 2)n-CO-NR 4-(CH 2) o R 4 est H ou alkyle en C 1-C 3 et n, m est un nombre entier allant de O à 12 - Des exemples de monomères de formule (I) sont la N-vinyl- pyrrolidone, le N-vinylcaprolactame, le N-vinyl B propiolactame, l'a méthylvinylpropiolactame On utilise de préférence la N- vinylpyrrolidone. Comme exemples d'acide carboxylique de formule (II), on peut citer l'acide acrylique, l'acide méthacrylique, llacide 4pentenoique, l'acide vinylbenzènecarboxylique, l'acide 6acrylamidohexanoique. Ces monomères peuvent être réticulés à l'aide d'agents de réticulation polyfonctionnels b) connus dans la technique tels que par exemple, les diacrylates de polyols comme le diacrylate ou le diméthacrylate de diéthylène glycol ou de dibutanediol 1-4 et les dérivés vinyliques ou allyliques de triazine comme le triallyliso- cyanurate Comme agent de réticulation b) on peut encore mettre en oeuvre des monomères de type silanique de formule CH 2 = CH-Si X 3 (III) dans laquelle chaque X, identique ou différent, représente un radical hydrolysable alcoxy inférieur, ou acetoxy ou phénoxy ou un halogène Desexemples de dérivés silaniques disponibles sont le vinyltriméthoxysilane, le vinyltriéthoxysilane, le vinyltri- acétoxysilane, le vinyltrichlorosilane, le vinyl tris (e methoxy- éthoxy)silane. De manière préférentielle, le revêtement du support minéral par le copolymère est réalisé par polymérisation in situ des monomères en présence du support Le vinyllactame, le réticulant et l'acide vinylcarboxylique, éventuellement un initiateur, sont mis en solution dans un solvant, la solution est imprégnée sur le support puis le solvant est évaporé et les monomères réticulés par tout procédé connu en soi tels que chaleur ou rayonnements ultraviolets Comme solvant, on met en oeuvre tous produits sol- vants des monomères dont le point d'ébullition est le plus bas possible pour favoriser son évaporation ultérieure Ce sont, par exemple, le chlorure de méthylène, les chlorofluorométhanes (Flugènes), l'éther éthylique, l'acétone, l'acétate d'éthyle. De manière générale, la quantité de monomères à mettre en oeuvre est choisie de manière à obtenir à la surface des pores du support un film de polymère compris entre 1 et 15 mg/m 2, de pré- férence entre 1 et 6 mg/m 2 Le rapport des monomères détermine la quantité de groupements fonctionnels répartis sur le film polymère De préférence, on utilise l'acide vinylcarboxylique en quantité telle que la quantité de groupes fonctionnels répartis à la surface du support soit comprise entre 0,05 et 2 m eq/g de support. La quantité de réticulant peut varier entre 1 et 50 % en poids par rapport au poids total des-monomères. Le plasma que l'on fractionne au moyen des échangeurs d'ions est préalablement traité pour le débarrasser au moins partielle- ment des sels et, avantageusement, des euglobulines qui constituent un complexe protéique instable. Le dessalage peut être obtenu par diafiltration ou chromato- graphie de permeation Selon un aspect particulier de l'invention, le dessalage est réalisé par chromatographie de perméation sur un support minéral poreux dont les pores sont revêtus d'un film de polymère hydrophile tel que, par exemple, un polyvinyllactame réticulé Le support minéral mis en oeuvre pour cette opération possède avantageusement un diamètre poreux de 40 à 300 A, une surface spécifique de 100 à 800 m 2/g et une granulométrie de 4 pm à mm. Le revêtement peut être obtenu par simple adsorption du poly- mère sur le support, mais dans un mode de mise en oeuvre préféré, on effectue le revêtement par polymérisation in situ avec une solution de Nvinyllactame, par exemple la N-vinylpyrrolidone, en présence d'un agent de réticulation polyfonctionnel choisi parmi les composés décrits précédemment et de la manière décrite pour la préparation de la résine échangeuse de cations Parmi les réticulants, on préfère mettre en oeuvre un dérivé silanique qui permet de former une liaison stable entre le support minéral et le polyvinyllactame La quantité de monomères est choisie de façon à obtenir à la surface du support un film de polymère compris entre 1 et 15 mg/m 2, de préférence entre 1 et 6 mg/m 2, la quantité de réticulant pouvant varier entre 1 et 50 % en poids par rapport au poids total des monomères. Après avoir subi le traitement de dessalage, le plasma peut être débarrassé des Euglobulines qu'il contient par acidification à un p H voisin de 5, puis centrifugation et séparation de la solution de plasma clarifié. Le fractionnement du plasma dessalé, et de préférence clarifié, se fait successivement avec le ou les échangeurs d'anions, le p H de la solution étant compris entre 5,0 et 5,3, puis avec l'échangeur de cations, le p H de la solution étant compris entre 5 et 5,6 en fonction de la force ionique. La mise en contact de la solution de plasma dessalé, dont la concentration en protéines peut être comprise entre 20 et 65 g/ litre, avec le support échangeur d'anions préalablement équilibré permet de fixer majoritairement l'albumine et les a globulines. Par élution au moyen d'une solution tampon de p H compris entre 4,4 et 4, 8 et de force ionique convenablement choisie, on obtient une solution riche en albumine, contenant des a et a globulines rési- duelles A titre d'exemple, on peut utiliser un tampon acétate 0,025 M La solution éluée, ajustée à un p H compris entre 5,0 et ,6 est ensuite mise en contact avec l'échangeur de cations préalablement équilibré avec un tampon de p H identique sur lequel est retenue la quasi-totalité des protéines autres que l'albumine. Selon le procédé,-les quantités d'échangeur d'anions à mettre en oeuvre peuvent être comprises entre 400 et 1000 g pour 1 litre de plasma et les quantités d'échangeur de cations peuvent Etre comprises entre 100 et 500 g Le temps de contact de la solution avec chacun des échangeurs est supérieur à environ 15 minutes. Le procédé de l'invention permet d'obtenir une albumine en solution dont la pureté, déterminée par électrophorèse est supé- rieure ou égale à 99 Z et dont l'analyse par filtration sur gel montre l'absence totale de polymères de l'albumine Cette solution d'albumine peut être concentrée par tous procédés connus, par exemple par ultrafiltration, puis ajustée en concentration saline en vue de la rendre injectable Les protéines autres que l'al- bumine, qui sont retenues par les échangeurs peuvent être éluées au moyen d'une solution de régénération Les protéines en mélange contenues dans les solutions effluente et de régénération peuvent gtre ultérieurement séparées les unes des autres par des techniques chromatographiques. Le traitement du plama peut être effectué en discontinu, en semi-continu ou en continu avec des séries de colonnes, cette dernière possibilité étant particulièrement adaptée aux réalisa- tions industrielles Le procédé en continu en colonnes permet d'obtenir une meilleure productivité, un meilleur rendement et une plus grande pureté des produits dans des conditions de stérilité plus favorables. On donne ci-après, à titre indicatif et non limitatif, des exemples de réalisation de l'invention. Exemple 1 On prépare: A un support pour chromatographie d'exclusion (GPC) g de silice ayant une granulométrie de 40 à 100 pm, une surface spécifique de 400 m 2/g, un diamètre poreux moyen de 80 A et un-volume poreux de 1 ml/g sont séchés à 150 C sous pression réduite pendant 5 heures. La silice sèche obtenue est introduite dans une solution homo- gène contenant 500 ml de flugène 11 (CC 13 F), 160 ml de N-vinyl pyrrolidone, 30 ml de vinyltriéthoxysilane et 1 g de péroxyde de dilauroyle Le flugène 11 est évaporé à température ambiante puis la silice imprégnée est chauffée à 80 C pendant 17 h pour obtenir la réticulation. La silice est alors mise en suspension dans 800 ml d'eau per- mutée et portée à l'ébullition pendant 5 h Après filtration, la silice est lavée à l'eau permutée, à l'acétone puis séchée sous vide à 40 C L'analyse donne un taux de carbone de 12 % en poids par rapport à la silice revêtue. B un échangeur d'anions sur support constitué d'une silice ayant-une granulométrie de 100 à 300 pm, une surface spécifique de m 2/g, un diamètre-poreux moyen de 1 250 R, un volume poreux de 1 ml/g, revêtue de 3,6 mg/m 2 d'un copolymère obtenu par réticula- tion du vinyltoluène portant des groupes fonctionnels -N(+)-(CH 3)3 C(-) et présentant les caractéristiques suivantes: Taux de carbone 6,1 % Taux d'azote 0,42 % Capacité ionique 0,30 m eq/g C un échangeur de cations sur support g de silice ayant une granulométrie de 100 à 300 pm, une surface spécifique de 25 m 2/g, un diamètre poreux moyen de 1 o 250 et un volume poreux de 1 ml/g sont séchés à 150 C sous pression réduite pendant 5 h. La silice sèche obtenue est introduite dans une solution de 250 ml de flugène 11 dans laquelle ont été homogénéisés 50 ml de N-vinylpyrrolidone, 2 ml d'acide acrylique, 15 ml de vinyltri- éthoxysilane et 0,50 g de péroxyde de dilauroyle Après avoir éva- poré le solvant à température ambiante, la silice imprégnée est chauffée à 80 C pendant 16 h pour obtenir la réticulation. La silice est alors mise en suspension dans 400 ml d'eau permutée et portée à I'ébullition pendant 5 h Apres filtration, la silice est lavée à l'eau permutée, à l'acétone puis séchée sous vide à 40 C. La silice greffée échangeuse de cations faible ainsi obtenue présente les caractéristiques suivantes: % C 6,05 % H 1,09 % N 0,3 Capacité ionique: 0,20 m eq/g Quantité de polymère fixé: 3,2 mg/m 2 Prétraitement du plasma Dans une colonne de 2,6 cm de diamètre sont placés et maintenus comprimés 100 g du support A. Sur cette colonne sont injectés successivement à un débit de 30 ml/h, 200 mi de tampon acétate de sodium 0,025 M, 60 ml de plasma frais provenant d'un module de plasmapherèse et à nouveau ml de tampon acétate 0,025 M La totalité des protéines est collectée dans 65 ml de solution dont la résistivité est voisine de celle du tampon utilisé. Le p H de la solution protéique est ajusté à 5,1 par addition lente d'une solution d'acide acétique à 6 Z Les euglobulines précipitées sont séparées par centrifugation. La solution protéique ainsi obtenue présente les caractéris- tiques suivantes: Résistivité: 520 N cm 2/cm Protéines totales: 43,8 g/litre avec la composition suivante:- Albumine 66,8 % a globulines 9,2 B globulines 6,6 Z globulines 17,4 % Fractionnement de la solution plasmatgue Dans une colonne I de 1,6 cm de diamètre sont placés et maintenus comprimés 25 g de l'échangeur d'anions B La colonne est équilibrée avec un tampon acétate de sodium 0,025 M à p H: 5,1. Dans une colonne II de 1 cm de diamètre, sont placés et maintenus comprimés 10 g de l'échangeur d'anions B Cette colonne est équilibrée avec un tampon acétate de sodium 0,025 M à p H: 4,7. Dans une colonne III de 1 cm de diamètre sont placés et maintenus comprimés 5 g de l'échangeur de cations C Cette colonne est équilibrée avec un tampon acétate de sodium 0,1 M à p H: 5,5. Dans la colonne I sont injectés successivement 58 ml de la solution plasmatique prétraitée à un débit constant de 70 ml/h, ml de la solution tampon acétate de sodium 0,025 M à p H 5,1 puis 185 ml d'une solution tampon acétate 0,025 M à p H: 4,7. Cette dernière solution appelée éluat de la colonne I dont la teneur en protéines totales est de 8,8 g/1 présente la compo- sition suivante: Albumine 93 % a globulines 1,6 Z B globulines 3 Z y globulines 2,4 Z Le rendement d'extraction en albumine de cette colonne est de 89,2 Z. ml de l'éluat de la colonne I sont injectés à un débit constant de 40 ml/h dans la colonne II 110 ml de tampon acétate 0,025 M à p H: 4,7 sont ensuite injectés dans la colonne II Les solutions effluente et de lavage sont mélangées pour donner une solution dont la teneur en protéines totales est de 4,2 g/1 avec la composition suivante: Albumine 96,5 Z a globuline 0,8 Z B globuline 2,7 % Le rendement d'extraction en albumine sur la colonne II est de 91,4 Z. La solution collectée dans la colonne II est ajustée à p H: ,5 et à la résistivité de 180 'n cm 2/cm par addition de chlorure de sodium 94 ml de cette solution sont injectés dans la colonne III à un débit de 40 ml/h La colonne est lavée avec 26 ml de tam- pon acétate 0,1 M à p H: 5,5 Les solutions effluente et de lavage sont mélangées pour donner une solution dont la teneur en protéines totales est de 3,0 g/l et dont la composition est la suivante: Albumine 99,5 % a globuline 0,5 % Le rendement d'extraction en albumine de cette colonne III est de 94 %. Le rendement d'extraction en albumine obtenu par l'ensemble du fractionnement est de 76,6 %. Les colonnes I et II peuvent être régénérées avec un tampon acétate de sodium 1 M à p H: 4,0 tandis que la colonne III peut être régénérée avecune solution HC 1 0,5 N. Exemple 2 ml de plasma stocké à -40 C provenant d'un module de plasmaphérèse est décongelé lentement à + 4 C et centrifugé pour éliminer le précipité contenant le facteur VIII Le plasma obtenu "surnageant de cryoprécipité" est dialysé par diafiltration contre un tampon acétate 0,005 M à p H 7,4 Après acidification de la solution à p H 5,1 par de l'acide acétique à 6 % puis centrifugation pour éliminer les euglobulines, la solution protéique obtenue présente les caractéristiques suivantes: Résistivité: 1 066 N cm 2/cm Protéines totales: 39,4 g/litre avec la composition: Albumine 67,3 % a globulines 9,1 % B globulines 7,2 % y globulines 16,3 % Fractionnement du plasma 58 ml de la solution protéique ci-avant sont injectés à un débit de 70 ml/h sur la colonne I décrite à l'exemple 1, contenant l'échangeur d'anions B et préalablement équilibrée avec un tampon acétate de sodium 0,025 M à p H 5,1. La colonne est lavée avec 100 ml de la même solution tampon puis éluée avec une solution tampon acétate 0,025 H à p H 4,5. L'éluat ainsi collecté ( 125 ml) dont la teneur en protéines totales est de 10,1 g/l présente la composition suivante Albumine 95,0 % a globulines 1,8 % B globulines 3,2 % y globulines O % Le rendement d'extraction en albumine de cette colonne est de 78 % - ml de l'éluat sont injectés à un débit constant de 40 ml/h sur une deuxième colonne identique à la colonne III de l'exemple 1 contenant l'échangeur de cations C et préalablement équilibrée avec un tampon acétate 0,1 M à p H 5,5 La colonne est lavée avec 15 ml du même tampon Les solutions effluente et de lavage sont mélangées pour donner une solution dont la teneur en protéines totales est de 7,27 g/l avec la composition suivante: Albumine 99,0 % a globulines 1,0 % Le rendement en albumine de cette colonne est de 97,5 %, le rendement global d'extraction en albumine obtenu par le procédé 25434-48 de fractionnement est de 76 %. Exemple 3 ml de plasma bovin obtenu par centrifugation sont dia- lysés par diafiltration contre un tampon acétate 0,005 M à p H 7,4. La solution protéique obtenue après-élimination des euglo- bulines, comme décrit dans les exemples précédents a une résis- tivité de 1 164 D cm 2/cm et une teneur en protéines totales de 39,1 g/l avec la composition suivante: Albumine 66,1 % a globulines 8,0 % 8 globulines 10,0 % y globulines 15,9 % 58 ml de la solution protéique sont injectés à un débit de ml/h sur la colonne I décrite à l'exemple 1 contenant l'échan- geur d'anions B et équilibrée avec un tampon acétate 0,025 M à ph 5,1 La colonne est traitée comme dans l'exemple précédent. L'éluat collecté ( 167 ml) renferme 7,5 g/1 de protéines dont la composition est la suivante: Albumine 95,3 % a globulines 1,6 % $ globulines 3,1 % y globulines O 61 ml de l'éluat sont ensuite injectés à un débit de 40 ml/h sur une seconde colonne identique à la colonne III décrite à l'exemple 1 contenant l'échangeur de cations et équilibrée avec un tampon acetate 0,1 M à p H 5,5 La colonne est lavée avec 23 ml du même tampon. Les solutions éluente et de lavage sont mélangéeso On obtient une solution dont la teneur en protéines totales est de 5,1 g/l avec la composition suivante: Albumine 99,1 % a globulines 0,9 % Le rendement en albumine obtenu par le procédé de fraction- nement est de 75,6 %. REVENDICATIONS 1 Procédé de fractionnement du plasma au moyen d'échangeurs d'ions caractérisé en ce que une solution de plasma partiellement dessalé est mise en contact avec successivement au moins un échan- geur d'anions puis un échangeur de cations, les échangeurs dont la capacité d'éohange est inférieure à 2 m eq/g étant constitués d'un support minéral poreux ayant une granulométrie de 4 pm à 5 mm, un diamètre poreux de 500 à 2 500 A, une surface spécifique de 5 à m 2/g, revêtu d'une quantité inférieure à 15 mg/m 2 d'un film de polymère réticulé contenant ou portant des groupes amines ou sels d'ammonium quaternaire pour au moins l'un des échangeurs, et d'un film de polyvinyllactame réticulé contenant des groupes acide carboxylique pour l'autre échangeur. 2 Procédé selon la revendication i dans lequel le support minéral poreux possède un diamètre poreux de 600 à 1 500 A, une surface spécifique de 20 à 50 m 2/g et une granulométrie de 50 pm à 1 mm. 3 Procédé selon l'une des revendications 1 ou 2 dans lequel le polymère réticulé qui revêt la surface du support de(s) échangeur(s) d'anions est obtenu à partir de monomères choisi dans le groupe des composés époxydiques, du formaldéhyde, des mono- mères vinyliques. 4 Procédé selon l'une des revendications 1 à 3 caractérisé en ce que la capacité d'échange du/des échangeur(s) d'anions est comprise entre 0,15 et 1,2 m eq/g, préférentiellement entre 0,15 et 0,70 m eq/g. Procédé selon l'une des revendications 1 ou 2 dans lequel le polyvinyllactame qui revêt la surface du support échangeur de cations est obtenu par copolymérisation d'un vinyllactame et d'un acide carboxylique insaturé en présence d'un agent de réti- culation polyfonctionnel. 6 Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que le vinyllactame est la N-vinylpyrrolidone. 7 Procédé selon la revendication 5 caractérisé en ce que l'acide carboxylique est l'acide acrylique. 8 Procédé selon l'une des revendications 1 à 7 caractérisé en ce que la solution de plasma dessalé est obtenue par diafil- tration. 9 Procédé selon l'une des revendications 1 à 7 caractérisé en ce que la solution de plasma dessalé est obtenue par chromato- graphie de perméation sur un support minéral poreux revêtu d'un film de polymère hydrophile. Procédé selon la revendication 9 caractérisé en ce que le support minéral possède un diamètre poreux de 40 à 300 A, une surface spécifique de 100 à 800 m 2/g et une granulométrie de 4 pm à 5 mm. 11 Procédé selon l'une des revendications 9 ou 10 caractérisé en ce que le support minéral poreux est revêtu de polyvinylpyrro- lidone obtenu par polymérisation in situ de N-vinylpyrrolidone en présence d'un dérivé silanique. 12 Procédé selon l'une des revendications 1 à 11 caractérisé en ce que la mise en contact de la solution de plasma se fait à un p H compris entre 5,0 et 5,3 avec l'échangeur d'anions et à un p H compris entre 5,0 et 5,6 avec l'échangeur de cations. 13 Procédé selon l'une des revendications 1 à 12 caractérisé en ce que les quantités d'échangeurs d'anions sont comprises entre 400 et 1 000 g par litre de plasma et les quantités d'échan- geur de cations sont comprises entre 100 et 500 g. 14 Procédé selon l'une des revendications 1 à 13 caractérisé en ce qu'il est réalisé en continu avec des séries de colonnes. Albumine de pureté déterminée par électrophorèse supérieure à 99 %, obtenue par le procédé selon l'une des reven- dications 1 à 14.