FR 2536075 A1 19840518 FR 8219199 A 19821117 t 536 O ?S La présente invention a pour objet de nouveaux dérivés de la nitroso- urée, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques les renfermant. Elle concerne particulièrement les dérivés de la nitrosourée de for- mule générale I: RO 10 R R 3 NO R' P CH N N -CH -CH -Cl ( dans laquelle R 1 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle en chaîne droite ou ramifiée renfermant de 1 à 6 atomes de carbone, ou un radical phényle pouvant porter comme substituant un atome d'halogène un radical alkyle ou alcoxy renfermant de 1 à 5 atomes de carbone. R représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle en chaîne droite ou ramifiée renfermant de 1 à 6 atomes de carbone, un radical thiényle, un radical phényle ou benzyle pouvant porter comme substituant un atome d'halogène, un radical alkyle ou alcoxy renfermant chacun de 1 à 5 atomes de carbone, R 3 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle en chaîne liné- aire ou ramifiée ayant de 1 à 6 atomes de carbone ou un radical phényle ou benzyle pouvant porter comme substituant un atome d'halogène, un ra- dical alkyle ou alcoxy ayant chacun de 1 à 5 atomes de carbone, ou bien R 2 et R 3 représentent ensemble un groupe -(CH 2) dans lequel m prend les valeurs 3 ou 4, sous forme racémique ou d'isomères optiques. La présente invention a également pour objet le procédé de préparation des composés de formule générale I, caractérisé en ce que l'on condense un dérivé ",-aminophosphoné de formule générale Il R-0 R 2 P CH NH(I) R 1 O R 3 -2- dans laquelle R 1, R 2, et R 3 ont les significations précédemment défi- nies pour la formule I, avec un excès de P-chloroethyl-isocyanate de formule III Ci CH 2 CH 2 N = C = O (III) pour conduire à des dérivés nouveaux de formule générale IV: Rl O P CH N C NH CH 2 CH 2 Cl(IV) R 10 O R 3 o dans laquelle R 1, R 2 et R 3 ont les significations précédemment définies, et on nitrose les dérivés de formule IV pour obtenir les composés de formule I. La condensation s'effectue de préférence dans l'eau ou dans un solvant choisi parmi les solvants chlorés tel que par exemple le chlo- roforme Il est avantageux d'opérer b une température comprise entre O et 10 C et, éventuellement en présence d'une base minérale ou orga- nique. La nitrosation des nouveaux dérivés (IV) en nitrosourées de for- mule générale I est effectuée par exemple par l'action du nitrite de sodium dans 'l'acide formique refroidi à 5 C, ou bien encore par le chlorure de nitrosyle dans un solvant tel que la pyridine pendant plu- sieurs heures à la température de O C, selon les méthodes décrites par J L MONTERO et Coll dans Eur J Med Chem 1981,16,539. Les matières premières de formule générale II sont des acides o C aminophosphoniques ou des o Tous les dérivés nouveaux faisant partie de cette invention peu- vent être purifiés par des méthodes physiques telles que cristallisa- tion ou chromatographie. La présente invention a également pour objet les isomères opti- ques des dérivés répondant à la formule générale I Ces isomères peu- vent être préparés à partir des formez optiquement actives de formule générale II par dédoublement des composés racémiques. Comme agent de dédoublement,'on peut citer par exemple, les aci- des (+) et (-) dibenzoyltartriques. Les dérivés de formule générale I possèdent des propriétés phar macologiques et thérapeutiques intéressantes notamment des propriétés anti-mitotiques vis à vis de cellules tumorales, supérieures aux nitroso- urées prises comme références et dont l'activité oncolytique est recon- nue depuis longtemps. Les composés selon l'invention sont testés par leur capacité à prolonger la survie de souris porteuses de cellules tumorales inoculées par voie intrapéritonéale ou intramusculaire conformément aux protoco- les établis à l'Institut National du Cancer-(U S A) et publiés par R.I GERAN et Coll dans Cancer Chemotherapy Reports 1972, part III, Vol 3 ( 2), 1-87. Il s'est révélé que les composés selon l'invention, lorsqu'ils sont administrés par voie intrapéritonéale, sont capables de prolonger la survie des souris cancéreuses dès la dose de lmg/kg et d'induire des rémissions à long terme à la dose de 25 mg/kg Administrés par os, ces composés augmentent la durée de vie des animaux cancéreux Ils peuvent freiner le développement descellules cancéreuses inoculées intratécalement et prouvent ainsi leur faculté à franchir la barrière hématoencéphalique. Le pouvoir antimétastasique des composés faisant l'objet de la présente invention est mesuré par la réduction, par rapport à des t 536075 4 animaux non traités, au nombre et du poids des métastases pulmonaires développées après inoculation intramusculaire de cellules carcinoma- teuses A la dose de 10 mg/kg, les composés selon l'invention réduisent le poids des métastases de 53 %. La toxicité hématopoitéique est évaluée notamment par le compta- ge des leucocytes circulants après une administration du produit à la dose de 50 mg/kg par voie intrapéritonfale Le nadir de la concentra- tion leucocytaire est noté 3 jours après le traitement Le retour à une formule sanguine normale s'opère dès le dixième jour après traitement, soit plus précocement qu'après administration, dans un lot témoin, d'une dose de 40 mg/kg de N-N'-bis ( 2-chloroéthyl)-M-nitrosourée ("BCNU") composé généralement pris pour référence (W C TANG et G EISENBRAND, Arch Pharm 1981, 314, 910-917) Les composés de l'invention peuvent donc être envisagés pour le traitement des tumeurs cancéreuses La présente invention a également pour objet les compositions pharmaceutiques contenant comme principe actif un dérivé de formule générale I mélangé ou associé à un excipient pharmaceutiquement approprié. Les compositions pharmaceutiques ainsi obtenues sont présentées avantageusement sous des formes diverses telles que par exemple compri- més, dragées, gélules, glossettes ou préparations galéniques appropriées pour une administration sublinguale, suppositoires, solutions injectables ou buvables. Les exemples suivants donnés à titre non limitatif illustrent l'invention Les points de fusion, sauf mention contraire, ont été dé- terminés à la plaque chauffante de KOFLER. Exemple 1: Acide lN-(Chloro-2 éthyl) N-nitrosoureîdol -1 éthyl phospho- niaue. a) Préparation de l'acide lN-(Chloro-2 éthyl Y ureidol -1 éthylphos- phonique: Une solution de 2 g d'acide i -aminoéthyl phosphonique dans 20 ml d'eau est additionnée de 32 ml d'une solution de soude i N, le milieu réaction- nel étant refroidi à O C On ajoute ensuite un équivalent ( 1,4 ml) d'iso- t-25360 s - cyanate de Chloroéthyle toujours à la même température Après l'addi- tion, l'agitation est poursuivie environ 30 minutes à température am- biante Un nouvel équivalent d'isocyanate de A-chloroéthyle ( 1,4 ml) est ajouté et l'agitation est maintenue pendant 2 heures supplémentaires. A la fin de l'agitation, le précipité formé au cours de la réaction est séparé par filtration et la solution aqueuse est versée sur 30 ml de résine AG 50 W X 4, récupérée et évaporée à sec Le résidu est re- pris à sec par quelques millilitres d'alcool éthylique bouillant puis- filtré à chaud ce qui permet d'isoler 0,3 g de produit de départ n'ayant pas réagi Apres évaporation de l'éthanol, le résidu obtenu est recristal- lisé dans l'eau. Rendement: 54 % F = 180 C Analyse: Calc: C: 26,03; H: 5,21; N: 12,15; C 1 = 15,40 Trouvé C 26,32; H: 5,22; N 12,20; CI = 15,14 b) Préparation de l'acide lN-(Chloro-2 éthyl) N-Nitrosouré do l -1 éthyl phosphonique. Une solution contenant 1 g d'acide l N-(Chloro-2 éthyl) urédo 3 -1 éthylphosphonique précédemment obtenu dans 20 mi d'acide formique est refroidie à O C On ajoute alors 1 g de nitrite de sodium par petites portions et après 30 minutes d'agitation, la solution est diluée avec ml d'eau La solution est passée sur 40 ml de résine AG 50 W X 4 puis évaporée sous vide sans dépasser la température de 30 C L'huile jaune obtenue (l g) est un peu instable et n'est pas purifiée davanta- ge Elle est identifiée à l'acide lN-(Chloro-2 éthyl) nitrosouiédaol-1 éthyl phosphonique par les méthodes physiques habituelles (R M N I.R: voir tableau). Exemple 2: Acide dt lN-(Chloro-2-éthyl) N-nitrosouréidol benzyl phosphonique. L'acide d lN-(Chloro-2 éthyl) urédldol benzyl phosphonique est pré- paré par action de l Visocyanate de P-chloroéthyle et l'acide c(-ami- nobenzyl phosphonique selon la méthode décrite dans l'exemple la. Rendement: 75 %; F = 1950 C Analyse: Calculé: C: 49,33; H: 5,87; N: 10,28; C 1: 8,69. -6- Trouvé: C: 49,03; H: 5,70; N: 10,26; Cl: 8,22. L'acide t lN-(Chloro-2 éthyl) N-nitrosouréidol benzyl phosphonique est obtenu selon l'exemple lb par action du nitrite de sodium sur l'aci- de-urée^précédent. Rendement: 56 %, huile jaune légèrement instable. Données physiques: Voir tableau. Exemple'3: Ester diéthylique de l'acide t souréîdol benzyl phosphonique. a) Préparation de l'ester diéthylique de l'acide c LN-(Chloro-2 éthyl) uréldoj benzyl phosphonique. Une solution 0 05 mole d'Ester diéthylique de l'acide '-aminobenzyl phos- phonique dans 30 ml de Chloroforme est refroidie à O C dans un bain de glace puis additionnée par un large excès ( 0,06 mole) de F -chloroéthyl- iso-cyanate La température de la réaction est ensuite-maintefiue à 10 C. tout en poursuivant l'agitation jusqu'à la fin de réaction (Des examens chromatographiques sur couche mince sont pratiqués pour vérifier la dis- parition complète de l'aminophosphonate de départ) Après évaporation. du solvant sous pression réduite, le résidu cirstallin est repris à l'éther, filtré et donne 14,8 g de cristaux. Rendement: 85 %; F = 82 C. b) Préparation de l'ester diéthylique de l'Acide k lN-(Chlovo 2 éthyl) N-nitrosouréidol benzyl phosphonique. L'urée obtenue précédemment ( 0,-02 mole) est dissoute dans 60 ml d'acide formique et refroidie à 5 C Un excès de nitriteede sodium ( 0,08 mole) est alors ajouté par petites portions pendant 1 heure. Après évaporation sous vide de l'acide formique à une température inférieure h 35 GC, le résidu est repris par 200 ml de dichlorométhane puis lavé 3 fois par 100 ml d'eau distillée La phase organique est ensuite séchée sur sulfate de sodium, filtrée et évaporée sous pression réduite en laissant 5,5 g d'une huile qui est ensuite chromatographiée suivant la technique décrite par W C STILL dans J Org Chem 1978, 43, 2923 en utilisant le mélange CH 2 C 12-Me OH ( 99-1) comme éluant. -7- L'huile ainsi obtenue ( 4,7 g) cristallise dans de l'éther isopropyli- que en donnant des cristaux fondant à 950 C Rendement:62 % Exemple 4 à 16 Les dérivés suivants ont été préparés selon le procédé décrit dans 1 >'exemple 3 4) Ester diéthylique de l'acide VN-(Chloro-2 éthyl) N-nitrosouréidol -1 éthyl phosphonique: Rendement:52 %; F 850 C. ) Ester diéthylique de 'l'acide%'& lN-(Chloro-2 éthyl) N-nitrosouréido) (Chloro-4 benzyl) phosphonique; Rendement 68 %; F = 950 C. 6) Ester diéthylique de l'acide q lN-(Chloro-2 éthyl) N-nitrosouréidol (.fluoro j 4 benzyl) phosphonique; Rendement:74 %; F = 950 C. -7) Ester diéthylique de l' acide r N -(Chloro2 éthyl-) N-nitrosouréîdol -1 méthyl-2 propylphosphonique Rendement - 68 % 8) Ester diéthylique de l'acide lN-(Chloro-2 éthyl) N-nitrosouéridol -1 bûtd 4-ho 9 phonîque:Rendement:58 % ' 9) Ester diéthylique de l'acide N(Coo-éty)-nroord Ol -l (Méthoxy-4 phényl)-2 éthyl phosphonique: Rendement: 52 %; F * 980 C. ) Ester aiéthylique de l'acide lN-(Chloro-2 éthyl) N-nîtrosouré doj -1 phényl-2 éthyl phosphonique Rendement: 46 %; F = 680 C. 11) Ester diéthylique de l'acide {lN-(Chloro-2 éthyl) Nnitrosoamidol -1 pyrrolidin+ phosphonique: Rendement:'48 %, 12) Ester diéthylique de l'acide l N-(Chloro-2 éthyl) N-nitrosouéridol -1 (chloro-2 phényl)-2 é'fhyl phosphonique:Rendement 62 %; F = 108 'C. 13) Ester diéthylique de l'acide lN-(Chloro-2 éthyl) Nl-nitrosouréidol (thîényl-2) mnéthyl phosphonique:Rendement 35 %; F = 70 'C. 14) Ester diéthylique de l'acide ( N-(Chloro 2 éthyl) N-nitrosouéri- dol benzyl phosphonique; isomère lévogyre de l'exemple 3:Rendement %; = 2 _ 34,40(c: 2; CRCI 3) 15) Ester diéthylique de 1 'acide,: { 1-(Chloro-2 éthyl) N-nitrosouéridoi ts 36 o?s -8- benzyl phosphonique; isomère dextrogyre de l'exemple 3 Rendement 43 %; 02 = + 36 (c: 2; CHCI 3). a 16) Ester diéthylique de l'acide lN-(chloro-2 éthyl) N-nitroso, N'- benzyluréidol méthyl phosphonique. L'ester diéthylique de l'acide VN-(chloro-2 éthyl) N'-benzyl uré do J méthyl phosphonique de départ est préparé selon le procédé décrit dans l'exemple 1. La nitrosation de l'urée précédente est effectuée au moyen de chlorure de nitrosyle selon la méthode suivante On met en solution dans le dichlorométhane 0,02 moles d'urée obtenue selon le procédé décrit dans l'exemple I et après refroidissement à -10 C, on ajoute d'abord 7 ml de chlorure de nitrosyle puis 15 ml de pyridine Après 2 heures d'agi- -tation à O C, le mélange réactionnel est versé dans 250 ml d'eau gla- cée puis extrait par'3 portions de 100 ml de dichlorométhane Les pha- ses organiques réunies sont lavées d'abord par 2 portions de 50 ml d'aciae chlorydrique à 5 % et enfin par de l'eau Après séchage sur'' sulfate' de sodium, la phase organique est évaporée àous pression réduite et laisse 7 g d'une-huile-qui est thromatographiée en utilisant le mélan- ge chloroforme Acétate d'éthyle ( 95-5) comme éluant Rendement 70 %. 17) Ester diphénylique de l'acide lN-(chloro-2 éihyl) N-nitrosouréido 3 -1 éthylphosphonique: Rendement: 80 %; F = 84 C. Les caractéristiques physiques des composés décrits dans les exemples ci- dessus sont rassemblées dans le tableau suivant RO O R 2 NO PCH N C N CH CH Ci 1 o/l 2 2 R O, R 3 o 9 - R R H -CH 3 H C 2 5 c 2 H 5 -CH 3 C 2 H 5 ci C 2 H 5 CH 3 C _CH-, CH C H -(CH)-CH 2 5 2 Z 3 CH OCH R I R (c -1) 3: O (,UH) râ '"CO) m : : 1,10 à 1 '50 d de d (J = 15,4 Hx, 3 -7 RO, 3 H; : 3,50 t, (J= Hz), 2-H; X 10,te 2 H; 9,70 à 4,30, M, : 1 H. 3,40-t, 2 M; 3,95,1 $ 2 H; 5,10,-d, QPH 2 O Hz), 1 H 7,20,m,5 H. 1,10,t, 3 H; 1,25,t,3 H; 3,45,m, 211; 3,7 à 4,5,m, GR; 5,55 d de d, (j PH = 21 Hz et JHH = 9 Hz), 1 H 6,9 à 8 'l'm' 6 H. 1,20 à 1,80,m,'9 H; 3,40 à 3,70,m, 2 H; 3,90 à 5,00, lq, 5 H; 7,4 È',m, IH échangeable. 1,20,m, 6 H; 3,45,t, 2 H; 3,70 à 4,40,m, 6 H 5,50, de d, 1 H; 7,40,S$ 4 H; 7,80,m, IH échangeable, 1,00 à 1,50,mp 6 H; 3,30 à 4 i 4 Om$ 8 H; 5,50, ml H; 6,90 à 8,00 pm,5 H. i,00 à 1,50,m,12 H; 1,90 à 2,60,m IH; 3,50,ti 2 R; 3,90 à 4,70,m,5 H; 7,203 m$ IH éjhangeable - OAO à 2,10,m,13 H; 3,50,t,2 H; 3,90 è 4,50,m, GE 4:50 à 5,00,-m IH; 7,30,ml H échangeable. 1,10,t,3 H; 1,50,t,3 H; 2,80 à 3,50,m,411; 3,90 à 4,50,m,6 H; 3,75,s,3 H; 4,50 à 5,00,m IH; 6,70 à 7,30,m,4 H, 7,40,m IH échangeable. H H H H H H H H H 1715 1 P* %A uë i c> c> 1 -*à, %A p 12 C 2 H 5 13 C H 2 5 14 Y 5 C 2 H 5 16 C 2 H 5 17 C 6 H 5 - EX P,1 R 3 R 3 Io C 2 H 5 _CH 270 H 3240 1 1 C-H (CH_) -1 %) (Co): UN 1720: 11101113 H; 1,50,-t, 3 H; 3,00 à 3,50,-m,4 H 3,90 à : 4,50,m,6 H; 4,50 à 5,00,ml H; 7,30,9,5 H 7,60,m, : 1 H éc Kangeable. 1690: 1,20 à 1,50,m,6 H; 1,80 à 2,70,m,4 H; 3,40 à 4,00, t m,4 H; 4,00 à 4,50,m,6 H; 4,80,m IH. 1725 1,20 à 1,60,m,6 H; 3,00 à 3,50,m,4 H; 3,50 à 4,50, t 6 H; 4,50 5,20, m IH; 7,00 li 7,50,m,4 H; 7,50,m,) IH êchangeable. z J 12-Q H ci H q S, H \ j _n\ H Isomère, Isomère 1720 1,00 à 1,50,2 t,6 H; 3,40 à 3,60,t,2 H; 3,90 à 4,50, M 16 H; 6,90 à 7,50,m,3 H; 7,60 à 7,90,m, 1 H échan- geable. lévrogyre " = " 34940 (C-2 c Hc 13 D I.R et R M N Idem Exemple 3. dextrogyre O(D = + 360 C (C= 2; CH Cl 3) I.R et R M N Idem Exemple 3. 1690: 1,20,t,3 H; 1,40,t,3 H; 3,30 à 4,50,m,10 H 4,90,s, : 2 H; 7,40,s,5 H. r,\ -H: -CH C.H H 3220 P 41. %A uà c'à c> 11 * 4 ffl 1710: 1,60, d de d, (J = 17 Hz, J = 7 Hz); 3 H; 3,35,t, PDO t (J gflz) ,2 H; 4,75,m I (j HR = 6 Hz),2)i 4 "b_$ - 7,S,10 H; 7,35 $ ,1 H échlangeable. -ci -S 236075 11 - R E V E N D I C A T I O N S 1) Dérivés de la nitrosourée répondant à la formule générale I: R 10 NO RO 1 i 2 2 / cs:N c CRc 2 s Cl() R 1 O O 1 il) RI O o R 3 O dans laquelle: R 1 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle en chaine droi- te ou ramifiée de 1 à 6 atomes de carbone, ou un radical phényle, R 2 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle en chaîne droi- te ou ramifiée renfermant de 1 à 6 atomes de carbone, un radical thiény- le, ou un radical phényle pouvant porter comme substituant un-atome d'halogène, un radical alkyle ou alcoxy renfermant de 1 à 5 atomes de carbone R 3 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle en chaîne li- néaire ou ramifiée de 1 à 6 atomes de carbone, ou un radical phényle pouvant porter comme substituant un atome d'halogène, un radical alkyle ou alcoxy ayant chacun de 1 à 5 atomes de carbone, ou bien R 2 et R 3 représentent ensemble un groupe -(CH 2)m dans lequel m prend les valeurs 3 ou 4, sous forme racémique ou isomères optiques. 2) L'acide lN-(chloro-2 éthyl) N-nitrosouréidol 1 éthylphosphonique 3) L'acided-lN-(chloro-2 éthyl) N-nitrosouréidol benzyl phosphonique. 4) L'ester diéthylique de l'acidec(-lN-(chloro-2 éthyl) N-nitrosouréîdol benzylphosphonique. ) L'ester diéthylique de l'acide lN-(chloro-2 éthyl) N-nitrosouréidol -1 éthylphosphonique. 6) L'ester diéthylique de l'acidea& lN-(chloro-2 éthyl) N-nitrosouréîdo (chloro-4 benzyl) phosphonique. 7) L'ester diéthylique de l'acideç(-lN-(chloro-2 éthyl) N-nitrosouréîdol (fluoro-4 benzyl) phosphonique. 8) L'ester diéthylique de l'acide lN-(chloro-2 éthyl) N-nitrosouréidol t 51369 l S -12- -1 miéthyl -2 propyl phosphonique. 9) L'ester diéthylique de l'acide L-N-(chloro-2 éthyl) N-nitrosouréidoi -1 butyl phosphonique. ) L'ester diéthylique de l'acide LN-(chloro-2 éthyl) N-nitrosouréido J 1 (méthoxy-4 phényl) -2 éthyl phosphonique. 11) L'ester diéthylique de l'acide EN-(chloro-2 éthyl) N-n'itrosouré dol -1 phényl-2 éthyl phosphonique. 12) L'ester diéthylique de l'acide {EN-(chloro-2 éthyl) N-nitrosouréT-i dolj-1 pyrrolidinej -2 phosphonique. O 13) L'ester diéthylique de l'acide EN-(chloro-2 éthyl) N-nitrosouréî- do 3 -1 úCchlowe-2 phényl)-2 éthyl phosphonique. 14) L'ester diéthylique de l'acide E:N-(chloro-2 éthyl) N-nitrosouréi- do 2 (thiényl-2) mnéthyl, phosphonique. ) L'ester diéthylique de l'acide EN-(chloro-2 éthyl) N-nitroso, N'benzyl uréîdo 3 iméthyl phosphonique. 16) L'ester diphénylique de l'acide úN- dol -1 éthyl phosphonique. 17) Procédé de préparation des comnposés de la revendication 1, procédé caraotérisé en ce que l'on condense un dérivé'cg-aminophosphone de for- mlnue générale I Il RO O R 2 P CH -NI 1 3 (II-) dans laquelle R 11 2 et R 3 ont les significations définies -dans la reven- avec un excès de /3-choroéthylisocyanate de formule III cCH 2 CH 2 N= C = pour conduire à des dérivés de formule générale IV (III) 2536 Q ? 5 13 - R 10 R 2 RO 2 P -CH N C CH 2 -CH 2 -C (IV) R 1 O R o R 3 dans laquelle R 1, R 2 et R 3 ont les significations définies dans la re- vendication 1, qui sont ensuite nitrosés par un agent nitrosant. 18) Procédé selon la revendication 17 caractérisé en ce que les compo- sés de formule générale II sont condensés avec le p-chloroéthylisocya- nate III dans l'eau ou dans un solvant chloré tel que chloroforme h une température comprise entre O et 10 C et en présence ou en l'absence d'une base organique ou minérale. 19) Procédé selon la revendication 17 caractérisé en ce que les composés de formule générale IV sont nitrosés en composés de formule générale I au moyen de nitrite de sodium dans l'acide formique ou par le chlorme de nitrosyle dans la pyridine. ) Compositions pharmaceutiques contenant comme principe actif un compo- sé selon l'une quelconque des revendications 10 à 15, en association ou en mélange avec un excipient ou un véhicule inerte non toxique; pharmaceu- tiquement acceptable.