FR 2546886 A2 19841207 FR 8309326 A 19830606 Le présent certificat d'addition a pour objet des dérivés d'acides isoindole-dicarboxyliques substi- tués, leur préparation et les compositions pharmaceuti- ques les contenant. Spécifiquement, l'invention concerne les com- posés répondant à la formule générale: COOH N CO CH NH CH -CH CH 2 -CH I 2 2 3 CH 3 COOR dans laquelle: le cycle A est saturé ou bien benzénique, et R représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur de 1 à 4 atomes de carbone, sous forme racémique ou d'isomères optiques, ainsi que leurs sels obtenus avec une base minérale ou organique thérapeutiquement acceptable, ou leurs sels d'addition obtenus avec un acide minéral ou organique thérapeutiquement acceptable. Les composés de formule (I) comportent 3 atomes de carbone asymétrique (éventuellement 4 lorsque R = méthyl-2 propyle) dont 2 sur la chaîne latérale, le 3 ème étant le carbone du cycle qui porte le groupe carboxy. Lorsque A est saturé, le noyau perhydroisoindole correspondant n'existe pratiquement que sous la forme cis. -2- Les composés racémiques peuvent être dédoublés en leurs mélanges de diastéréoisomères ou d'épimères, ou dédoublés en leurs énantiomères de manière connue Ces divers isomères font partie de l'invention de même que les composés racémiques Toutefois, les isomères (S) sont plus actifs et par conséquent préférés. Les composés selon l'invention ainsi que leurs sels possèdent des propriétés pharmacologiques intéres- santes Ils exercent notamment une activité inhibitrice sur certaines enzymes, comme les carboxypolypeptidases, les enkephalinases ou la kininase II Ils inhibent notam- ment la transformation du décapeptide angiotensine I en l'octapeptide angiotensine II, responsable dans certains cas de l'hypertension artérielle, en agissant sur l'en- zyme de conversion. L'emploi en thérapeutique de ces composés per- met donc de réduire ou même supprimer l'activité de ces enzymes responsables de la maladie hypertensive ou de l'insuffisance cardiaque L'action sur la kininase II a pour résultat une augmentation de la bradykinine circu- lante et également une baisse de la tension artérielle. L'invention s'étend aussi aux compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un composé de formule générale I ou un de ses sels d'ad- dition, avec une base ou un acide minéral ou organique, en association avec un excipient inerte, non toxique, pharmaceutiquement acceptable. En vue de l'emploi en thérapeutique, les com- posés de formule générale I ou leurs sels sont présentés sous des formes pharmaceutiques convenant pour l'admi- nistration par voie intraveineuse ou orale Les compo- sitions pharmaceutiques selon l'invention renferment, outre le principe actif, un ou plusieurs excipients inertes, non-toxiques convenant pour l'usage pharma- ceutique et/ou un agent liant, un agent aromatisant, un agent de délitement, un agent édulcorant, un agent lu- brifiant ou bien encore un véhicule liquide adapté à l'admininistration par voie intraveineuse. Les compositions pharmaceutiques selon l'in- vention peuvent en outre contenir un autre principe actif d'action synergique ou complémentaire. Parmi ces derniers principes actifs, on pourra citer un diurétique et, notamment, un saliurétique, comme par exemple un thiazide, un dihydrothiazide, un chloro- sulfamide, un acide dihydrobenzofuranne 2-carboxylique ou un dérivé de l'acide phénoxy acétique Des exemples de tels composés sont la N ( 3 '-chloro 4 '-sulfamoyl benzami- do) 2-méthyl indoline, l'acide éthacrynique, le furosé- mide. La posologie utile peut varier largement en fonction de l'âge, du poids du patient, de la sévérité de l'indication thérapeutique ainsi que la voie d'adminis- tration La voie d'admininistration préférée est la voie buccale mais la voie intraveineuse est également parfai- tement appropriée au traitement de l'hypertension D'une manière générale, la posologie unitaire s'échelonnera de préférence entre 1 et 100 mg. Les composés de l'invention peuvent être pré- parés par condensation d'un dérivé de carboxy-iso-indole de formule: COOR II 4- dans laquelle A a la même signification dans la formule I et, R' représente un groupe alkyle de 1 à 6 atomes de car- bone, de préférence un groupe tertiobutyle, ou un de ses sels d'addition, avec un dérivé fonctionnel d'un amino-acide substitué de formule HOCO-CH-NH-CH-CH 2 CH 2 CH 3 III I I CH 3 COOR dans laquelle R a la même signification que dans la formule I et l'atome d'azote est protégé par un radical habituel de protection de la synthèse des peptides, par exemple benzyloxycarbonyle ou tertbutoxycarbonyle, et le composé intermédiaire obtenu est soumis aux procédés de déprotection habituels tels que par exemple saponifica- tion totale ou partielle et/ou hydrogénolyse, et est ainsi transformé en un composé de formule I. Le dérivé fonctionnel de l'amino-acide (III) peut être préparé in situ avec un agent tel que le dicyelohexyl- carbodiimide seul ou en présence de hydroxy-1 benztria- zole dans un solvant aprotique, par exemple le diméthyl- formamide. Les composés de formule II sont décrits dans la littérature (G CIGNARELLA et coll, Gazz Chim Ital. 106,65-75,1976, et demande de brevet européen N 31 741). Les amino-acides de formule III (R=C 2 H 5) sont connus (M VINCENT et coll, Tetr Lett 23,N 16,P 1677- 1680,1982) ou peuvent être synthétisés de manière sem- blable. Les exemples suivants illustrent l'invention. EXEMPLE 1: EN-((S)-ethoxycarbonyl-1 butyl)-(S) alanyll -2 (S)- carboxy-1 isoindoline, sel de tert-butylamine. Stade A: Chlorhydrate de (R,S) tert butyloxycarbonyl-1 isoindoline. Par réaction de 30 g de chlorhydrate de (RS) méthoxycarbonyl-1 isoindoline (préparée selon G. CIGNARELLA et coll, Gazz Chim Ital 106,65-75,1976) avec 31 cm 3 de chlorure de benzyloxycarbonyle selon la méthode décrite par J P GREENSTEIN et M WINITZ dans "'Chemistry of the Amino Acidsl' vol 2, page 887, on ob- tient 47,2 g de N-benzyloxycarbonyl (R,S) méthoxycarbo- nyl-1 isoindoline qui donnent par saponification 39,4 g de Nbenzyloxycarbonyl (R,S) carboxy-1 isoindoline Cet acide est traité en totalité dans 200 cm 3 de chlorure de méthylène par 100 mg d'isobutylène en présence d'un cm 3 d'acide sulfurique selon la méthode décrite par G W. ANDERSON, F M CALLAHAN, î A C S 82,3359,( 1960) On ob- tient ainsi 43,5 g de N-benzyloxycarbonyl (R,S) tertbuty- loxycarbonyl-1 isoindoline qui après hydrogénolyse (étha- nol, Pd/C 10 %; 2,5 kg/cm 2) et précipitation de chlorhy- drate dans l'acétate d'éthyle par la quantité stoechio- métrique d'acide chlorhydrique donnent 27,6 g de chlorhy- drate de (R,S) tertbutyloxycarbonyl-1 isoindoline. F= 152 C (Décomposition). Analyse: C 13 H 17 N 02, H Cl C H N Cl Calculé: 61,05 7,09 5,48 13,86 Trouvé: 60,82 7,05 5,42 13,29 6 - -6 Spectre IR: NH 2 +: 2300-2800 cm-1 CO (ester) 1730 cm-1 Stade B: lN-((S)-éthoxycarbonyl-1 butyl)-(S) alanyll -2 (S) tertbutyloxycarbonyl-1 isoindoline. Dans un ballon muni d'une agitation et d'une garde à chlorure de calcium, on introduit 6 g de chlorhy- drate de (R,S) tertbutyloxycarbonyl-1 isoindoline (ob- tenus au stade A), 40 cm 3 de diméthylformamide anhydre et 3,4 cm 3 de triéthylamine On ajoute successivement 4,6 g de N l(S) éthoxycarbonyl-1 butyll -(S) alanine (préparée selon M VINCENT et coll, Tetrahedron Letters, Vol 23, N O lb, P 1677-1680 ( 1982)) en solution dans 50 cm 3 de diméthylformamide anhydre, une solution de 3,05 g de N- hydroxybenzotriazole dans 80 cm 3 de diméthylformamide anhydre puis une solution de 4,82 g de dicyclohexyl- carbodiimide dans 40 cm 3 de chlorure de méthylène On agite 24 heures à température ambiante, filtre la dicy- clohexylurée formée et évapore le filtrat sous vide Le résidu est dissous dans 200 cm 3 d'acétate d'éthyle, on lave cette solution par 2 fois 50 cm 3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium puis 3 fois par 50 cm 3 d'une solution saturée de chlorure de sodium On sèche sur sulfate de calcium et évapore à sec Le résidu ( 7,3 g est chromatographié sur gel de silice (éluant acétate d'éthyle) On sépare ainsi le lN-(S)-éthoxycarbonyl1 butyl)-(S) alanyll-2 (S)-tertbutyloxycarbonyl-1 isoin- doline (Rf= 0,45-2,5 g) du lN-(S)-éthoxycarbonyl-1 butyl)-(S) alanyl)l -2 (R)-tertbutyloxycarbonyl-1 isoin- doline (Rf= 0,30-1,7 g). Stade C: lN-((S) éthoxycarbonyl-1 butyl-(S) alanyli -2 (S) carboxy-1 isoindoline, sel de tertbutylamine. On dissout 1,2 g de lN-((S)-éthoxycarbonyl-1 butyl)-(S) alanyll -2 (S)-tertbutyloxycarbonyl-1 isoin- 7 - doline (obtenu au stade précédent) dans 100 cm 3 d'acétate d'éthyle chlorhydrique 4 N On abandonne la solution 18 heures à température ambiante puis évapore à sec Le résidu est repris par 100 cm 3 d'eau et extrait une fois par 100 cm 3 d'éther éthylique La phase aqueuse est amenée à PH= 4 par de la soude 1 N puis évaporée à sec On reprend par 50 cm 3 d'éthanol anhydre, filtre le chlorure de sodium et évapore à sec le filtrat Le résidu est re- pris par 50 cm 3 d'éther éthylique anhydre On filtre sur talc et ajoute 1, 5 cm 3 de tertbutylamine au filtrat, le sel précipite immédiatement; on filtre et lave 2 fois par 20 cm 3 d'éther éthylique anhydre On obtient ainsi 0,8 g de produit. Analyse: C 19 H 26 N 205, C 4 H 11 N C H N Calculé: 63,42 8,56 9,65 Trouvé: 63,05 8,49 9,47 Spectre I R: bande NH 3 + 2100-2800 cm-1 C 00-1580 cm 1 CO (ester): 1725-1740 cm 1 CO (amide): 1645 cm 1 EXEMPLE II: lN-(S)-éthoxycarbonyl-1 butyl) -(S) alanyll -2 (R)- carboxy-1 isoindoline. On dissout 1 g de lN-((S)-éthoxycarbonyl-1 butyl)-(S) alanyll -2 (R)-tertbutyloxycarbonyl-1 isoin- doline (obtenu au stade B de l'exemple I) dans 80 cm 3 d'acétate d'éthyle chlorhydrique 4 N et abandonne la solu- tion 18 heures à température ambiante On évapore à sec, reprend par 100 cm 3 d'eau et extrait par 100 cm 3 d'éther éthylique La phase aqueuse est amenée à PH= 4 par de la 2; 46886 soude 1 N puis évaporée à sec Le résidu est repris par 50 cm 3 d'éthanol anhydre, on filtre le chlorure de sodium et évapore le filtrat Le résidu est repris par 50 cm 3 de chlorure de méthylène, on filtre sur talc, amène à sec, redissout dans 25 cm 3 d'eau et lyophilise on obtient ainsi 0,42 g de produit. Analyse: C 19 H 26 N 205 C H N Calculé: 62,97 7,23 7,73 Trouvé: 62,93 7,03 7,56 Spectre I R: bande OH et NH 2000-3700 cm 1 CO: 1655 et 1735 cm 1 EXEMPLE III: EN-((S)éthoxyearbonyl-1 butyl)-(S) alanyll -2 (S) carboxy-1 perhydroisoindole, maléate Stade A: Chlorhydrate de (R,S) tertbutyloxycarbonyl-1 perhydroisoindole. Dans un autoclave d'un litre, on introduit 300 g de tertbutanol fondu, 20 g de chlorhydrate de (R,S) tertbutyloxycarbonyl-1 isoindoline (Stade A exemple I) et 4 g de Rhodium sur alumine On hydrogène 24 heures à 40 C sous une pression de 60 kg/cm 2 On filtre, lave le catalyseur par 50 cm 3 d'éthanol anhydre et évapore à sec le filtrat Le résidu est repris par 50 cm 3 d'acétone anhydre, on filtre le précipité et le lave deux fois par 30 cm 3 d'acétone anhydre, on obtient ainsi 7,7 g de chlorhydrate de (R,S) tertbutyloxycarbonyl-1 perhydro- isoindole F= 171 C. Stade B: lN-((S)-éthoxycarbonyl-1 butyl)-(S) alanyll -2 (S) tertbutyloxycarbonyl-1 perhydroisoindole. En utilisant le mode opératoire décrit dans l'exemple I stade B, on obtient à partir de 6,2 g de chlorhydrate de tertbutyloxycarbonyl-1 perhydroisoindole (obtenu au stade A) et après chromatographie sur gel de silice (éluant acétate d'éthyle) 3 g delN- bonyl-1 butyl)-(S) alanyll -2 (S) tertbutyloxy-carbonyl- 1 perhydroisoindole (Rf= 0,42) et 2,1 g del N-((S)-éthoxy- carbonyl-1 butyl)-(S) alanyll -2 (R)-tertutyloxycarbo- nyl-1 perhydroisoindole (Rf= 0,30). Stade C: Maléate de lN-((S)-éthoxycarbor:l-1 butyl)-(S) alanyll -2 (S)-carboxy-1 perhydroisoindole. On dissout 1,5 g de lN-((S)-éthoxycarbonyl-1 butyl)-(S) alanyll -2 (S)-tertbutyloxycarbonyl-1 perhy- droisoindole obtenu au stade B dans 100 cm 3 d'acétate d'éthyle chlorhydrique 4 N et abandonne la solution 24 heures à température ambiante On évapore à sec et reprend par 100 cm 3 d'eau et 100 cm 3 d'éther éthylique. La phase aqueuse est amenée à PH= 4 par de la soude 1 N puis saturée par du chlorure de sodium On extrait 4 fois par 100 cm 3 de chlorure de méthylène, les phases orga- niques sont jointes et lavées 1 fois par 50 cm 3 d'une solution saturée de chlorure de sodium Oni sèche sur sulfate de calcium et évapore à sec On reprend par 100 cm 3 d'éther éthylique, filtre sur talc un trouble et ajoute au filtrat une solution de 2 g d'acide maléique dans 100 cm 3 d'éther éthylique; le maléate (hygros- copique) précipite On décante l'éther et lave le résidu 2 fois par 100 cm 3 d'éther éthylique On redissout dans cm 3 d'eau et lyophilise on obtient ainsi 1 g de pro- duit. - Analyse: C 19 H 32 N 205, C 4 H 404 Calculé: Trouvé: C 57,01 56,84 H 7, 49 7,20 N ,78 ,80 Spectre I R: bandes OH et NH 2 + 2200-3600 cm CO (amide et ester) 1740 cm-1 COO 1620-1660 cm-1 EXEMPLE IV: lN-((S)-éthoxycarbonyl1 butyl)-(S) alanyll -2 (R)-carboxy-1 perhydroisoindole En remplaçant dans le procédé décrit pour l'exemple II le lN-((S)-éthoxycarbonyl-1 butyl)-(S) alanyll-2 (R) tertbutyloxycarbonyl-1 isoindoline par 1,1 g de N-((S)-éthoxycarbonyl-1 butyl)-(S) alanyl l-2 (C) tertbutyloxycarbonyl-1 perhydroisoindole obtenu dans l'exemple III stade B, on obtient après lyophilisation 0,7 g de lN-((S)-éthoxycarbonyl-1 butyl)-(S) alanyll -2 (R) carboxy-1 perhydroisoindole. Analyse: C 19 H 32 N 205 C Calculé: Trouvé: 61,93 61,79 N 8,75 8,54 N 7, 60 7,60 Spectre I R: bande OH et NH+ 2300-3600 cm-1 2-1 CO ester 1730 cm COO et amide 1600-1650 cm 1. Les composés de l'invention ont été soumis à une étude pharmacologique chez le rat anesthésié selon le 11 - protocole décrit par D M GROSS et coll (J Pharma- col and Exp Ther 216,552-557,( 1981). La dose I V capable d'inhiber 50 % de l'acti- vité de l'angiotensine convertase présente dans la circu- lation (DE 50) a été déterminée Les résultats sont les suivants: COMPOSE DE L'EXEMPLE DE 50 (mg/kg) I 0,022 II 0,170 III 0,020 IV > 300 EXEMPLE DE FORMULATION lN-((S) éthoxycarbonyl-1 butyl) (S) alanyl -2 (S) carboxy-1 perhydroisoindole (maléate) 10 Mg amidon de blé 120 mg amidon de mais 115 mg caséine formolée 20 mg stéarate de magnésium 15 mg talc 20 mg. pour 1 comprimé. 12 - R E V E N D I C A T I O N S 1 Composés répondant à la formule générale I: COOH CO CH NH CH CH CH CH l l 223 l I CH 3 COCOR dans laquelle: le cycle A est saturé, ou bien benzénique, et R représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur de 1 à 4 atomes de carbone, sous leur forme racémique ou d'isomères optiques, et leurs sels obtenus avec une base minérale ou organique thérapeutiquement compatible, ou leurs sels d'addition obtenus avec un acide minéral ou organique pharmaceu- tiquement compatible, selon la revendication 1 du brevet principal. 2 La lN-((S)-éthoxycarbonyl-1 butyl)-(S) alanyll-2 (R,S) carboxy-1 perhydroisoindole, som isomère (SJ, ainsi que leurs sels. 3 La lN-((S)-éthoxycarbonyl-1 butyl)-(S) alanyll -2 (R,S) carboxy-1 isoindoline, son isomère (S), ainsi que leurs sels. 4 Composition pharmaceutique contenant -comme principe actif un composé selon l'une queleonque des reven- dications 1 à 3 ainsi qu'un excipient pharmaceu- tiquement acceptable. 13 - Procédé de préparation des composés selon la reven- dication 1, procédé caractérisé en ce que l'on effectue la condensation d'un dérivé de carboxy- isoindole de formule: COO Rt dans laquelle A a la même signification dans la formule I et, R' représente un groupe alkyle de 1 à 6 atomes de carbone de préférence un groupe tertiobutyle, ou un de ses sel d'addition, avec un dérivé fonctionnel d'un amino-acide substitué de formule III HOCO-CH-NH-CH-CH 2 CH 2 CH 3 III t f CH 3 COOR dans laquelle R a la même signification que dans la formule I et l'atome d'azote est protégé par un radical habituel de protection de la synthèse des peptides, par tel que benzyloxycarbonyle ou tertbutoxycarbonyle, et le composé intermédiaire obtenu est soumis aux procédés de déprotection habituels tels que par exemple saponifi- cation totale ou partielle et/ou hydrogénolyse, et est ainsi transformé en un composé de formule I.