FR 2527212 A1 19831125 FR 8308126 A 19830517 L'invention a pour objet un procédé pour la préparation de glycosides d'anthracycline, les glycosirles obtenus par ce procédé et toute composition pharmaceutique les contenant. Le procédé de l'invention pour la préparation de glycosides d'anthracycline ayant la formule générale I ou la formule générale II qui suivent o O o I COCH 2 R 1 COCN 2 R R 2 O2 OH, O HO HO HO 3 HO (I) OH ( Ii) dans lesquelles R 1 représente un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxy, R 2 représente un atome d'hydrogène ou un groupe méthoxy, consiste à provoquer la condensation d'une anthracyclinone de formule générale III donnée plus loin, dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un groupe t-butyl- -diphényl-siloxy et R 2 est tel que défini ci-dessus, avec du chlorure de 3,4-di O acétyl-2,6 didésoxy LJ-arabino- -hexopyranosyle qui a la formule IV donnée ci-dessous, et à éliminer le ou les groupes protégeant acétyle et, si nécessaire, le groupe protégeant t-butyl-diphényl-silyle des glycosides d'anthracycline obtenus de formules généra- les V et VI données ci-dessous dans lesquelles R et R 2 sont tels que définis plus haut Le procédé de l'invention peut être illustré par le schéma réactionnel suivant: o o H o C 2 R Ho HC OHI r OOCCH R 2 NOH 3 Co C 33 H 3 C os V) (VI) suppression de suppression de À la protection la protection (I) (II) Les anthracyclinones III utilisées comme matières de départ sont les composés connus daunomycinone (III, R=H, R 2 =CH 30: ci-après I Iia) et 4-déméthoxy- -daunomycinone (III, R=R 2 =H: ci-après II Ib) et les composés nouveaux 14-0-(t-butyl-diphényl-silyl)-adriamy- cinone (III, R=t butyl-diphénylsiloxy, R 2 =CH 30: ci-après II Ic) et 14-O-(t-butyl-diphényl-silyl)-4- -déméthoxy-adriamycinone (III, R=t-butyl-diphényl-siloxy, R 2 =H: ciaprès II Id) Les composés II Ic et II Id peuvent être préparés par condensation des composés connus adriamycinone et 4-déméthoxy-adriamycinone avec le t-butyl- -diphényl-chlorosilane dans un solvant comme le diméthyl- formamide anhydre, en présence d'une base organique comme l'imidazole Le groupe protégeant t-butyl-diphényl silyle offre les avantages de rester non affecté pendant la durée de la condensation et pendant l'élimination du ou des groupes protégeant acétyle, et en plus d'être facilement clivé par traitement à l'aide de fluorure de tétra n-butyl- annmmonium L'autre matière de départ, le chloro-sucre protégé I Vest aussi un composé connu (H S El Khadem et al, Carbohydr Res 58, 1977, 230). La condensation peut être effectuée selon les conditions de la réaction Koenigs-Knorr modifiée, par dis- solution de l'anthracyclinone III dans un solvant comme le dichlorométhane et par sa réaction avec le chloro-sucre IV dans une phase hétérogène catalysée par du bromure mercuri- que et de l'oxyde mercurique ou dans une phase homogène catalysée par le trifluorométhanesulfonate d'argent On obtient un mélange de glycosides d'anthracycline V et VI. Spécifiquement, l'emploi de l'anthracyclinone II Ia donne un mélange de glycosides d'anthracycline V, R=H, R 2 =CH 30 (ci-après Va) et VI, R=H, R 2 =CH 30 (ci-après V Ia); l'emploi de l'anthracyclinone II Ib donne un mélange de glycosides d'anthracycline V, R=R 2 =H (ci-après Vb) et VI, R=R 2 =H (ci-après V Ib); l'emploi de l'anthracyclinone II Ic donne un mélange de glycosides d'anthracyclinone V, R=t-butyl- -diphényl-siloxy, R 2 =CH 30 (ci-après Vc) et VI, R=t-butyl- -diphényl-siloxy, R 2 =CH 30 (ci-après V Ic); l'emploi de l'anthracyclinone II Id donne un mélange de glycosides d'anthracycline V, R=t-butyl-diphényl-siloxy, R 2 =H (ci-après Vd) et VI, R=t-butyl-diphénylsiloxy, R 2 =H (ci-après V Id). Les mélanges de glycosides d'anthracycline Va et V Ia, Vb et V Ib, Vc et V Ic, Vd et V Id peuvent être séparés en leurs composants respectifs par cristallisation fraction- née ou par les techniques chromatographiques L'élimination du ou des groupes protégeant acétyle, par traitement avec. des quantités catalytiques de méthoxyde de sodium dans du méthanol ou à l'aide d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, à partir de Va, Vb, V Ia et V Ib, donne, respective- ment, les glycosides d'anthracycline 7-0 ( 2,6-didésoxy-X- -I -arabino-hexopyranosyl)-daunomycinone (I, Ri=H, R 2 =CH 30: ci-après Ia), 4-déméthoxy-7-0 ( 2,6-didésoxy-OC-L-arabino- -hexopyranosyl)-daunomycinone (I, R 1 =R 2 =H; ci-après Ib), 4- 7-0-( 2,3,6-tridésoxy-"-L-érythro-hex-2 énopyranosyl)-dauno- mycinone (II, R 1 =H, R 2 =CH 30: ci-après I Ia) et 4-déméthoxy- -7-O-( 2,3,6-tridésoxy X-L-érythro -hex-2 énopyranosyl)- -daunomycinone (II, Ri=R 2 =H ci-après I Ib). L'élimination des groupes protégeant acétyle, comme décrit ci-dessus; suivie de l'élimination du groupe protegeant t-butyl-diphényl-silyle, par traitement avec du fluorure de tétra-n-butyl aironium dans du têtrahydrofuranne à partir de Vc, Vd, V Ic et V Id, donne, respectivement, les glycosides d'anthracycline 7-O-( 2,6-didésoxy--L arabino- -hexopyranosyl)-adriamycinone (I, R 1 =OH, R 2 =CH 30: ci-après Ic), 4-déméthoxy-7-0 ( 2,6-didésoxy-o-L arabino-hexopyrano- syl)-adriamycinone (I, R 1 =OH, R 2 =H: ci après Id), 7-O-( 2,3,6-tridésoxy-"-L érythro-hex-2-énopyranosyl)- -adriamycinone (II, R 1 =OH, R 2 =CH 30: ci-après I Ic) et 4-déméthoxy-7-O-( 2,3,6-tridésoxy--L-érythro-hex-2-énopyra- nosyl)-adriamycinone (II, R 1 =OH, R 2 =H: ci-après I Id). Les composés Ia et Ic sont des composés connus décrits dans le brevet britannique n 8128252 de la déposante. Les glycosides d'anthracycline restants I et II, c'est-à- -dire les composés Ib, Id, I Ia, I Ib, I Ic et I Id sont des composés nouveaux et font partie de l'invention Comme les composés Ia et Ic, ils ont des propriétés utiles pour le traitement de certaines tumeurs chez les animaux et l'invention couvre aussi,en consequence, toute composition pharmaceutique comprenant un glycoside d'anthracycline Ib, Id, I Ia, I Ib, I Ic ou I Id en mélange avec un diluant ou un véhicule pharmaceutiquement acceptable. On donnera maintenant, sans intention limita- tive, une description de plusieurs exemples de mise en oeuvre du procédé de l'invention; les exemples n s 3 à 6 se rap- portent au procédé lui-même et les exemples n s 1 et 2 se rapportent à la préparation de certaines matières de départ. Exemple 1 3 Préparation de la 14-0-(t-butyl-diphényl-silyl)-adriamycinone (II Ic) Une solution de 0,414 g d'adriamycinone dans ml de diméthylformamide anhydre a été traitée à l'aide de 0,28 ml de t-butyl-diphényl -chloro silane et de 0,15 g d'imidazole Le mélange en réaction a été laissé au repos pendant une nuit à la température de la pièce après quoi on a ajouté 200 ml d'eau et on a soumis la solution à extraction à l'aide de dichlorure de méthylène La couche organique a été séparée, séchée sur du sulfate de sodium anhydre et soumise à évaporation sous vide jusqu'à siccité. Le résidu a été purifié ensuite par chromatographie sur gel de silice à l'aide du mélange solvant acétate d'éthyle: :toluène ( 1:2 en volume) comme éluant Le composé II Ic pur obtenu ( 0,46 g) fond à 208-209 C; FDMS: m/z 652 (M) RMP (CDC 13): inter alia à 1,14 J (s, (CH 3)3-C), 3,98 J (s, CH 30) et 4,89 (s, CH 2-Sii. Exemple 2 Préparation de la 4-déméthoxy-14-0 (t-butyl-diphényl-silyl)- -adriamycinone (II Id) Une solution de 0,385 g de 4-déméthoxy- adriamycinone dans 15 ml de diméthylformamide anhydre a été traitée à l'aide de 0,3 ml de t-butyl-diphényl chloro-silane et de 0,15 g d'imidazole Le mélange en réaction a été laissé pendant 4 heures à la température de la pièce, après quoi on a ajouté 200 ml d'eau et on a soumis la solution à extraction à l'aide de dichlorure de méthylène On a séparé la couche organique, on l'a fait sécher sur du sulfate de sodium anhydre, filtrée et on l'a soumise à évaporation sous vide jusqu'à siccité On a purifié ensuite le résidu par chromatographie sur gel de silice à l'aide du mélange toluène: :acétone ( 95:5 en volume) comme éluant Le composé pur II Id obtenu ( 0,6 g) fond à 101-1020 C FD-MS: m/z 622 (M +). RMP (CDC 13): inter alia à 1,13 J (s, CH 3)3, 3,41 J (d, OH-C-7), 4,87 c (s, CH 2-Si-), 5,24 (m, C-H-7). Exemple 3 Préparation de la 7-0 02,6-didésoxy-"-L-arabinohexopyranosyl)- -daunomycinone (Ia) et 7-0-( 2,3,6-tridésoxy L-érythro-hex- -2-énopyranosyl-daunomycinone (I Ia) A une solutio; de 2 g de daunomycinone (II Ia) dans 200 ml de dichlorure de méthylène anhydre on a ajouté 1,25 g de chlorure de 3,4-di-0-acétyl-2,6-didésoxy-%-L- -arabino-hexopyranosyle (IV) en solution dans 30 ml de dichlorure de méthylène en présence de 12 g de tamis moléculaires ( 4 Merck) Le mélange a été traité à l'aide de 1,28 g de trifluorométhane sulfonate d'argent en solution dans 30 ml d'éther diéthylique anhydre Après 5 minutes, on a neutralisé le mélange en réaction à l'aide de 0,65 ml de collidine anhydre Après 30 minutes à la température de la pièce on a lavé la solution organique à l'aide d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodiumr d'eau, d'acide chlorhydrique aqueux 0,1 N et finalement avec de l'eau On a séparé la phase organique et on l'a soumise à évaporation sous vide jusqu'à siccité Le résidu résultant a été purifié par chromatographie sur une colonne d'acide silicique à l'aide du mélange acetate d'éthyle:cyclohexane ( 1:1 en volume) comme éluant On a obtenu séparément 0,9 g du produit Va, pf 117-118 C, RMP (CDC 13): inter alia à 1,23 J (d, CH 3-C-5 '), 1,95 J (s, CH 3 COOC), 2,07 c J(s, C Ha COOC), 2, 43 J (s, CH 3 CO), 5,20 J (CHI-7) et 5,53 J Cf (CH-I'), et 0,9 g du produit V Ia, p f 83-84 C. Le composé Va ( 0,7 g) a été mis en solution dans de l'acétone ( 45 ml) et traité à l'aide de 50 ml d'hydroxyde de sodium aqueux 0,2 N à la température de la pièce Après une heure la solution a été ajustée au p H 7 et soumise à extraction à l'aide de chloroforme L'évapora- tion du solvant organique sous vide a permis d'obtenir le composé pur Ia avec un rendement quantitatif: p f 161- -162 C, FD-MS: m/z 528 (M) De manière analogue, le composé V Ia a donné après traitement basique dans les conditions mentionnées ci-dessus le composé pur I Ia: p f 181-182 C, FD-MS: m/z 510 (M), RMP (CDC 13): inter alia à 1,40 J (d, CH 3-C-5 '), 2,42 cf(s, CH 3 CO), -3 1- ,33 J (CH-7), 5,58 J (CH-l') et 5,5-6,0 J (m, CH-2 '), CH-3 '). Exemple 4 3 Préparation de la 4-déméthoxy-7-0-( 2,6-didésoxy-"-L-arabino- -hexopyranosyl)-daunomycinone (Ib) et de la 4-déméthoxy-7- -0-( 2,3,6-tridésoxy--L-étythro-hex-2-énopyranosyl)- -daunomycinone (I Ib) A une solution de 0,74 g de 4-déméthoxy- -daunomycinone (II Ib) dans du dichlorure de méthylène anhydre ( 70 ml) on a ajouté 0,65 g du halosucre IV dans ml de dichlorure de méthylène en présence de 5 g de tamis moléculaires ( 4 A Merck) On a traité le mélange avec 0,64 g de trifluorométhane sulfonate d'argent en solution dans 15 ml d'éther diéthylique anhydre Apres 5 minutes on a neutralisé le mélange en réaction à l'aide de 0,4 ml de collidine anhydre Après 1 heure à la température de la pièce, on a lavé la solution organique à l'aide d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium, d'eau, d'acide chlorhydrique aqueux 0,1 N et finalement avec de l'eau La phase organique a été séparée et soumise à évaporation sous vide jusqu'à siccité Le résidu résultant a été purifié par chromatographie sur colonne d'acide silicique à l'aide du mélange chloroforme: acétone ( 96:4 en volume) comme éluant On a obtenu 0,48 g du produit Vb, p.f 65-66 C, FD-MS: m/z 582 (M +'), et 0,45 g du produit V Ib. Le composé Vb a été mis en solution dans 20 ml d'acétone et traité avec 20 ml d'hydroxyde de sodium aqueux 0,2 N à la température de la pièce Apres 1 heure la solution a été ajustée au p H 7 et soumise à extraction à l'aide de chloro- forme L'évaporation du solvant organique sous vide a donné le composé pur Ib avec un rendement quantitatif: p f. 165 166 C, FD-MS: m/z 498 (M+') De façon analogue le composé V Ib a donné après traitement basique dans les condi- tions mentionnées ci-dessus le composé pur I Ib RMP (CD C 13) inter alia à 1,39 (CH 3-C-5 '), 2,42 J (s, Ci 13-CO), 3,50- -4,00 J (m, C-H-4 ' et C-H-5 '), 4,08 J (s, CH 30), 5,33 cf (bs, C-H-7), 5,58 J (bs, C-H-1 '), 5,65 {d, C-H-3 '), ,93 cf (d, C-H-2 '). Exemple 5 Préparation de la 7-0-( 2,6-didésoxy-"-L-arabinohexopyranosyl)- -adriamycinone (Ic) et de la 7-0-( 2,3,6-tridésoxy-"-L- -érythro-hex-2-énopyranosyl)-adriamycinone (I Ic) A une solution de 1,25 g du composé II Ic, préparé comme décrit dans l'exemple 1, dans 100 ml de 252 Z 212 dichlorure de méthylène anhydre, on a ajouté 2,4 g d'oxyde mercurique, 0, 75 g de bromure mercurique, 8 g de tamis moléculaires ( 4 Merck) et 0, 85 g du chlorosucre IV Le mélange a été agité à la température de la pièce pendant une nuit puis soumis à filtration Le filtrat a été soumis à évaporation sous vide jusqu'à siccité et a donné un résidu qui a été purifié par chromatographie sur une colonne d'acide silicique à l'aide du mélange toluène:acétone ( 9:1 en volume) comme éluant On a obtenu 1,2 g du produit Vc: p f 55-56 C, FD-MS: m/z 866 (M+'), et 0,15 g du produit V Ic: p f 88- -89 C Le composé Vc ( 0,87 g) a été mis en solution dans du dichlorure de méthylène anhydre ( 10 ml) et traité à l'aide de 200 ml d'une solution 0,01 N de méthoxyde de sodium dans du méthanol anhydre Apres trois heures à la température de la pièce les groupes protégeant acétyle ont été éliminés. Le mélange en réaction a été acidifié à l'aide d'acide acétique puis soumis à évaporation sous vide L'huile obtenue a été mise en solution dans 200 ml de tétrahydrofuranne et traitée à l'aide de 0,7 g de fluorure de tétra-n-butylammo- nium Après 1,5 heure l'hydrolyse du groupe t-butyl- -diphényl-silyle était complète Le résidu obtenu par évaporation sous vide du solvant a été purifié par chroma- tographie sur une colonne de gel de silice à l'aide du mélange toluêne:acetone ( 1:1 en volume) comme éluant et on a obtenu le composé pur Ic ( 0,35 g): p f 189-190 C, RMP (CD C 13) inter alia à 1,34 J (d, CH 3-C-5 '), 4,08 J (s, CH 30), 4,77 c (s, CH 20 H), 5,30 J (d, CH-7), 5, 50 J (d, CH-1 '). De manière analogue le composé V Ic a donné par hydrolyse des groupes protecteurs le composé I Ic; p f 205- -207 C, RMP (CDC 13) inter alia à 1,38 J (d, CH 3-C-5 '), 3,25-4,00 cf (m, C-H-4 ' et C-H-5 '), 4,08 J (s, CH 30), 4,76 (s large, C-HI'), 5,63 J (d, C-H-3 '), 5,93 J (d, C-H-2 '). Exemple 6 Préparation de a 4-déméthoxy-7-0-( 2,6-didésoxy-"-L-arabino- -hexopyranosyl)-adriamycinone (Id) et de la 4-déméthoxy- -7-0 ( 2,3,6-tridésoxy-X-L-érythro hex-2 énopyranosyl)- -adriamycinone (I Id) A une solution de 0,63 g du composé II Id, préparé comme décrit à l'exemple 2, dans 50 ml de dichlorure de méthylène anhydre, on a ajouté 1,2 g d'oxyde mercurique, 0,4 g de bromure mercurique, 8 g de tamis moléculaires ( 4 R Merck) et 0,75 g du chlorosucre IV Le mélange a été agité à la température de la pièce pendant une nuit puis soumis à filtration Le filtrat a été soumis à évaporation sous vide jusqu'à donner un résidu qui a été purifié par chromatographie sur une colonne d'acide silicique à l'aide du mélange toluène:acétone ( 96:4 en volume) comme éluant. On a obtenu 0,585 g du produit Vd, p f 212-213 C, FD-MS: m/z 236 (M+') et 0,200 g du produit V Id. Le produit Vd ( 0,5 g) a été mis en solution dans du dichlorure de méthylène anhydre ( 10 ml) et traité à l'aide de 150 ml d'une solution 0, 01 N de méthoxyde de sodium dans du méthanol anhydre Après trois heures à la température de la pièce l'élimination des groupes protégeant acétyle était complète Le mélange en réaction a été acidifié à l'aide d'acide acétique puis soumis à évaporation sous vide jusqu'à siccité Le résidu a été mis en solution dans 100 ml de tétrahydrofuranne et traité avec 0,5 g de fluorure de tétra-n butyl-ammonium Après 2 heures l'hydrolyse du groupe t-butyl-diphényl-silyle était complète Le résidu obtenu par évaporation du solvant sous vide a été purifié par chro - matographie sur une colonne de gel de silice à l'aide du mélange toluène:acetone ( 1:1 en volume) comme éluant et on a obtenu 0,2 g du composé pur Id, p f 204-206 C, FD-MS m/z 514 (M), RMP (CDC 13): inter alia à 1,3 j (d, H 3 C-5 '), 4,78 J (s, CH 2 OH), 5,34 J (s large, CH-7), 5,54 J (bs, C-H-1 ') De manière analogue le composé V Id a donné par hydrolyse des groupes protecteurs le composé Ild, p.f 166-167 C, RMP (CDC 13): inter alia à 1,39 J (d, CH 3-C-5 '), 3,96 Cf (d, C-H 4 ') 4,77 J (s, CH 2 OH), 5,35 (s large, C-H-7), 5,55 J (s large, C-H-1 '), 5,71 J (m. CH-3 '), 5,95 J(d, C-H-2 '). ACTIVITE BIOLOGIQUE DES COMPOSES I Ia, Ib, I Ic et Id Les composés I Ia et I Ic ont été essayes en comparaison de la daunorubicine (DNR) et de la doxorubicine (DX) respectivement, in vitro et in vivo afin de vérifier leur cytotoxicité et leur activité antitumorale. Le tableau 1 résume l'effet sur l'activité clonique des cellules He La in vitro. Le composé I Ia est environ 25 fois moins cytotoxique que DNR et le composé I Ic est environ 5 fois o 10 moins cytotoxique que DX. Le triage primaire in vitro a été effectué sur des souris CDF-1 portant la leucémie ascitique P 388 ( 106 cellules/souris) Les résultats sont reportés sur le tableau 2 Les deux composés I Ia et I Ic étaient en suspension dans du Tween 80 à 10 % et ils ont été injectés par voie intra- péritonéale Les deux composés se sont révélés moins toxiques et moins puissants que les médicaments apparentés DNR et DX Le composé I Ia était inactif sur la leucémie ascitique P 388 aux deux doses essayées, y compris la dose maximale tolérée (Mx TD) de 100 mg/kg, tandis que le composé I Ic a montré une certaine activité antitumorale qui est faible en comparaison de celle de DX. Les composés Ib et Id ont été étudiés in vitro sur des cellules He La et sur des cellules de leucémie P 388 sensibles (P 388) et résistantes (P 388/DX) à DX et in vitro sur la leucémie P 383 et la leucémie de Gross Les résultats reportés sur le tableau 3 montrent que le composé Ib testé in vitro sur l'activité clonique des cellules He La en comparaison des composés apparentés DNR et 4-déméthoxy DNR ( 4-dm DNR) est 3 et 6 fois moins cytotoxique que DNR et que 4-dm DNR respectivement, cependant que le composé Id s'est révélé aussi cytotoxique que DX au cours du même essai. Le composé Ib a été étudié sur des cellules P 388/DX in vitro. Les cellules leucémiques P 388 et P 388/DX ont été recueillies du fluide ascitique de souris et adaptées pour se développer en suspension in vitro Les essais de cytotoxicité ont été effectués par exposition des cellules 1.1 à diverses concentrations de médicaments pendant 48 heures; à la fin de la période d'exposition, les cellules ont été comptées à l'aide d'un compteur de cellules coulter et la dose ID 50 (dose qui donne 50 % de réduction du nombre des cellules en comparaison des cellules témoins non traitées) a été calculée. Le tableau 4 montre que le composé Ib est à peu près aussi cytotoxique que DNR sur les cellules leucémi- ques P 388 et qu'il était très actif sur les cellules leucémiques P 388/DX DNR était environ 500 fois moins actif sur les cellules résistantes que sur les cellules sensibles. Les résultats du triage primaire in vivo effectué sur des souris CDF-1 porteuses de leucémie asciti- que P 388 et traitées par voie i p le jour après la trans- plantation de la tumeur sont reportés sur le tableau 5. Le composé Ib s'est montré 2 fois plus puissant que DNR et environ 1,5 fois moins puissant que 4-dm DNR; la comparaison à la dose Mx TD a montré que le composé est moins actif que DNR et que 4-dm DNR Le composé Id s'est montré 5 fois plus puissant que DX L'activité antileucémi- que contre la leucémie P 388 était bonne mais inférieure en comparaison de celle de DX. Les résultats des études effectuées sur des souris C 3 H/Me porteuses de leucémie de Gross transplantée par voie i v et traitées par voie i v le jour après la transplantation de la tumeur sont reportés sur le tableau 6. Les deux composés Ib et Id se sont montrés moins toxiques et plus puissants que les composés apparentés La comparaison à la dose Mx TD montre que Ib est plus actif que DNR et que Id a une bonne activité antitumorale qui est du même ordre de grandeur que celle de DX Les composés lb et Id ont été soumis à d'autres investigations de leur activité par voie orale sur la leucémie de Gross transplantée par voie i v, en comparaison avec DNR, DX administréspar voie i v et 4-dm DNR administré par voie orale. Les renseignements reportés sur le tableau 7 montrent que le composé Ib avait une bonne activité anti- tumorale quand il a été donné oralement le jour 1, comparable à celle de 4-dm DNR (dont on a déjà démontré l'activité par voie orale) et de DNR injecté par voie i v. Les renseignements sur l'activité antitumorale du composé Id donné par voie orale le jour 1 ou les jours 1, 2, 3 après la transplantation de la tumeur sont reportés aussi sur le tableau 7. Quand il est donné par voie orale le jour 1, le composé Id à la dose Mx TD était moins actif que DX par voie i v Toutefois, avec un programme de traitement diffé- rent ( 1, 2, 3), l'activité antitumorale du composé était supérieure à celle de DX administré par voie i v. TABLEAU 1. Essai d'inhibition des colonies contre les cellules He La in vitro (traitement pendant 24 heures). Composé Dose a ID (ng/ml) (ng/ml) 50 DNR 25 12 12,5 74 16 6,2 106 Composé I Ia 400 146 136 400 143 6,2 127 1,5 120 DX 25 24 10 12,5 40 6,2 69 Composé I Ic 400 4 33, 50 65 6,2 68 1,5 86 a) Nombre de colonies; % destémoins non traités. TABLEAU 2. Activité antitumorale contre la leucémie ascitique P 388 Traitement par voie i p. le jour 1. - c Composé Dose T/C a LTS b Morts par c (mg/kg) % toxicité DNR 2,9 160 0/10 0/10 4,4 d 165-170 0/10 0/20 6,6 d 150-160 0/10 7/20 Composé I Ia 75 120 0/5 0/5 90 0/10 1/10 DX 4,4 d 220-227 2/18 0/18 6,6 e 227-305 2/26 0/26 e 268-> 610 7/26 3/26 Composé I Ic 17,6 118 0/8 0/8 23 127 0/7 0/7 d 125-136 0/17 0/17 130 0/10 0/10 67,5 140 0/10 0/10 150 0/7 0/7 a) temps médian de survie; %O par rapport aux témoins non traités. b) survivants à long terme ( > 60 jours). c) évaluées sur la base des constatations d'autopsie sur les souris mortes - d) résultats de deux expérimentations (gamme). e) résultat de trois expérimentations (gamme). TABLEAU 3 Essai d'inhibition des colonies contre les cellules He La in vitro (traitement pendant 24 heures). Composé Dose % a ID 50 (ng/ml) 50 (ng/l) (ng/ml) DNR 12,5 6,2 4-dm DNR Composé Ib DX Composé Id 12,5 6,2 3,1 6,2 1,5 12,5 6,2 6,2 1,5 o o O o o N 12 ^, 6,3 -v 7,5 N, 7 a) Nombre de colonies; % traités. par rapport aux témoins non TABLLAU 4. Effet in vitro sur la leucémie P 388 ou résistante à la doxorubicine. sensible Composé ID 50 (ng/ml) a R d P 388 b P 388/DX e DNR 1,7 800 470 Coeiposé Ib 1,2 30 25 a) Dose donnant 50 % de réduction du nombre des cellules en comparaison de témoins non traités. b) Cellules leucémiques P 388 sensibles à DX. * c) Cellules leucémiques P 388 résistantes à DX. d) Rapport entre ID 50 sur P 388/DX et ID 50 sur P 388. TABLEAU 5. Activité antitumorale des composés Ib et Id contre la leucémie ascitique P 388. Traitement par voie i p le jour 1. Composé Dose T/C a LTS b Morts parc (mg/kg) % toxicité DNR 2,9 d 159-194 0/18 0/8 4,4 d 140-184 0/18 7/18 4-dm DNR 0,75 163 0/8 0/8 Composé Ib 1, 25 140 0/8 0/8 2,5 163 0/9 3/9 63 0/10 10/10 DX 4,4 220 1/10 0/10 6,6 305 0/10 0/10 > 610 5/10 0/10 Composé Id 1,12 170 0/10 0/10 1,68 185 0/10 0/10 2,53 230 1/10 2/10 a,b,c,d voir tableau 2. TABLEAU 6. Activité antitumorale contre la leucémie de Gross injectée par voie i v. Traitement par voie i v le jour 1. ab Composé Dose T/C Morts par (mg/kg) % toxicité DNR 15 171 0/8 22,5 171 0/8 Composé Ib 2,9 214 0/7 4,4 100 7/8 DX 10 171 0/10 13 200 0/10 16,9 207 3/10 Composé Id 1,2 171 1/10 2,16 200 1/10 3,8 114 5/9 a,b) voir tableau 2. TABLEAU 7 Activité par voie orale des composés Ib et Id contre la leucémie de Gross. Traitementbc ______Traitement _T/C % Morts par a toxicite Voie programme Composé Dose (mg/kg) iv. + 1 Orale + 1 DNR 4-dm DNR 22,5 3,6 4,3 0/10 6/10 0/6 0/6 0/3 Orale + 1 i.v. + 1 Orale + 1 Composé Ib DX Composé Id Orale 1,2,3 Composé Id 0,48 0,62 0,8 d 233-258 a) jours après la transplantation de la tumeur. -b-c) voir tableau 2. d) résultats de deux expérimentations (gamme). 2,9 4,4 6,6 d 13 d 16,9 d 1,2 2,1 3,8 171-171 -200 -207 0/10 0/10 4/9 1/20 1/20 3/13 0/9 0/8 3/8 0/10 0/10 2/20 REVENDICATIONS 1 Composés glycosides d'anthracycline de formule générale I: i R 2 (I} dans laquelle R 1 est un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxy et R 2 est un atome d'hydrogène. 2 Composés glycosides d'anthracycline de formule générale II: OA/ O \? V C CH 2 R 1 (II) dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxy et R 2 est un atome d'hydrogène ou un groupe méthoxy. 3 Composé selon la revendication 1 constitué par la 4-déméthoxy-7-0 ( 2,6 didésoxy-"-L-arabino-hexopyrano- syl)-daunomycinone ou la 4-déméthoxy-7-0 ( 2,6-didésoxy-c- -L-arabino-hexopyranosyl)-adriamycinone. 4 Composé selon la revendication 2 constitué par: 7-0-( 2,3,6-tridésoxy-C-L-érythro-hex-2-énopyranosyl)- -daunomycinone 4-déméthoxy-7-0-( 2,3,6 tridésoxy-X-L-érythro-hex-2 énopyranosyl)-daunomycinone 7-0-( 2,3,6-tridésoxy-Oc-L-érythro- hex-2énopyranosyl) -adriamycinone 4-déméthoxy-7-0-( 2,3,6 tridésoxy-c-Lérythro-hex-2 -énopyranosyl)-adriamycinone Procédé pour la préparation de glycosides d'anthracycline ayant la formule générale I et la formule générale II: H R OCH 2 R R 2 OR 2 O OH et o HO 'c y (l) OH ( JI) dans lesquelles R 1 est un groupe hydroxy et R 2 est choisi dans le groupe composé d'un atome d'hydrogène et du groupe méthoxy, caractérisé en ce qu'une anthracyclinone de formule générale III: O OH rac A I / COCHR OH Il I O OH OH (III) dans laquelle R est un groupe hydroxy et R 2 est choisi dans le groupe composé d'un atome d'hydrogène et du groupe méthoxy, en solution dans du diméthylformamide anhydre. est mise à réagir à la température de la pièce avec du t-butylchlorodiphénylsilane en présence d'imidazole pour donner l'éther 14-tert-butyl diphénylsilylique correspondant qui est condensé, dans du chlorure de méthylène anhydre, avec du chlorure de 3,4 di-0 acétyl-2,6 didésoxy-OG-L-arabino- hexopyranosyle de formule IV: H 3 CCO C (IV) OOCCH 3 en présence d'un r-elange de bromure mercurique/oxyde mercu rique et de tamis moléculaires pour donner un mélange de glycosides protégés de formules V et VI 0 H H o o T H H 2 R 9 X v A 2 R H 3 CCOV 5) (v (v I) Cu 3 dans lesquelles R est un groupe t-butyl-diphényl -siloxy et R 2 est un atome d'hydrogène ou un groupe méthoxy, que l'on sépare et que l'on purifie par chromatographie sur une colonne de gel de silice à l'aide du mélange toluène: :acétone ( 1:1 en volume) comme éluant, on élimine le ou les groupes protégeant 0-acétyle de chaque moitié sucre par traitement avec une quantité catalytique de méthoxyde de sodium dans du méthanol et ultérieurement le groupe protégeant 14-t-butyl-diphényl- silyle sur chaque moitié aglycone par traitement avec du fluorure de tétra-n-butyl- ammonium dans du tétrahydrofuranne pour obtenir sous forme pure les glycosides de formules I et II. 6 Procédé pour la préparation de glycosides d'anthracycline ayant la formule générale I et la formule générale II: R 2 OH 'R 2 OOH COC 2 R H 2 R 1 È O HO H 3 OH (Il OH ( II) dans lesquelles R 1 est un atome d'hydrogène et R 2 est choisi dans le groupe composé d'un atome d'hydrogène et du groupe méthoxy, caractérisé en ce qu'une anthracyclinone de formule générale III: O OH OCH R 2 00 H R 2 O OH OH (III) dans laquelle R est un atome d'hydrogène et R 2 est choisi dans le groupe composé d'un atome d'hydrogène et du groupe méthoxy, en solution dans du chlorure de méthylène, est mise à réagir en présence de trifluorométhane sulfonate d'argent et de tamis moléculaires avec du chlorure de 3,4-di-0 acétyl-2,6 didésoxy-o-L-arabino-hexopyranosyle de formule IV: (Iv) pour obtenir un mélange des glycosides protégés de formules V et VI: 0 (I O O Cs H 3 CC*OX dans lesquelles R est un atome d'hydrogène et R 2 est choisi dans le groupe composé d'un atome d'hydrogène et du groupe méthoxy, que l'on sépare et que l'on purifie par chromato- graphie sur une colonne de gel de silice en utilisant le mélange acetate d'éthyle:cyclohexane ( 1:1 en volume) comme éluant, on élimine le ou les groupes protégeant 0-acétyle de chaque moitié sucre par traitement avec de l'hydroxyde de sodium aqueux 0,2 N à la température de la pièce pour obtenir les glycosides purs de formules I et II. 7 Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend à titre de substance active un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, seul ou en mélange avec un diluant ou un vecteur pharmaceutiquement acceptable.