FR 2535201 A1 19840504 FR 8317274 A 19831028 -1-l La présente invention se ré ere à une préparation cosmé- tique visant à favoriser la nutrition du derme et des follicules pilaires. Plus spécialement la présente invention concerne une préparation cosmé- tique pouvant être utilisée comme agent de revitalisation de la peau et comme facteur actif pour la croissance des cheveux. Quand la peau est pale, ridée, pas très souple et déshy- dratée et quand elle présente des symptomes apparents de souffrance et de vieillissement précoce, il est très probable que sa couche germina- tive est plus ou moins sérieusement atteinte d'atrophie. Il est connu en effet que dans la couche germinative de la peau il se produit une reproduction et une croissance continuelles des cellules et qu'un apport continu de substances nutritives est nécessaire pour qu'elle conserve sa bonne santé. Il est également connu que cette nutrition est principale- ment, sinon exclusivement, le rôle de la circulation sanguine. Une perturbation de la circulation sanguine vers et dans la couche germinative, ou une diminution de l'apport de substances nutritives, entrarie une atrophie plus ou moins grave de cette couche et la peau devient ridée et pâle, elle parait vieillie. En ce qui concerne plus spécialement les cheveux, pour la matrice et la papille, qui participent à un métabolisme intensif, il est encore plus nécessaire de recevoir une quantité suffisante de sub- stances nutritives indispensables pour leur nutrition: il est bien connu qu'un manque de ces substances entraîne d'abord un affaiblissement et ensuite l'atrophie des follicules pilaires et puis l'incapacité de former des cheveux nouveaux. Les préparations pour un traitement topique plus ou moins spécifique de la peau dont l'usage est actuellement très répandu, et des- tinées à atténuer les inconvénients ci-dessus mentionnés, sont dans la plupart des cas des palliatifs, dont les limites d'efficacité sont bien connues, celles-ci étant principalement dues au fait qu'il n'est pas pos- sible d'apporter à la couche germinative de la peau le peu de substances nutritives que ces préparations pourraient éventuellement contenir. 2 - Dans des publications antérieures un certain nombre de propositions ont été décrites pour apporter une solution au problème ainsi posé. Dans la demande de brevet allemand publiée sous le n' 2 317 138 a été décrite une préparation contre la chute des cheveux, con- sistant essentiellement en un sérum extrait d'animaux, en particulier de serpents, ce sérum étant utilisé tel quel ou bien concentré et traité selon les besoins. Ce texte envisage également l'addition de molécules sim- ples telles qu'amino-acides, vitamines et hormones, etc, au sérum. Dans le brevet français n' 2 472 385 a été décrite litilisa- tion dans le domaine cosmétique d'un produit obtenu par le craquage ther- mique de sérums, extraits de tissus et similaires, ce craquage étant poursuivi jusqu'à l'obtention de peptides d'un poids moléculaire compris entre 5000 et 50 000 Il est connu en effet que ces peptides ont la pro- priété d'influencer la croissance des cellules. Le brevet français n' 2 160 285 prévoit l'utilisation dans le domaine cosmétique d'un produit lyophilisé Ce produit est obtenu à partir de plusieurs sérums, du liquide amniotique ou de placentas. Le brevet français N O 1303 571 enseigne l'utilisation dans le domaine cosmétique, de préparations contenant un ou plusieurs complexes biocatalytiques, principalement de nature protéique, formés gr 8 ce à une combinaison de produits biochimiques ou chimiques, présen- tant une certaine activité nutritive à l'égard de la peau, avec des produits biochimiques ayant pour effet une accélération du métabolisme cellulaire cutané, tels qu'hormones, vitamines, etc La caractéristique commune de tous ces produits et pré- parations est leur origine biologique et leur obtention par extraction, leur fabrication ne pouvant pas être standardisée de façon adéquate, ce qui s'accompagne de conséquences évidentes, en particulier en ce qui con- cerne la constance des effets obtenus. -3- En outre, on ne peut pas négliger le fait que ce n'est pas seulement la présence ou l'absence, mais aussi la quantité de chacun des composants, dans les mesures en question, qui semble avoir de l'importance. Il est connu par ailleurs d'utiliser pour la culture in vitro de cellules épithéliales un milieu nutritif synthétique comprenant un mé- lange de molécules simples et quantitativement définies. Il est également connu que le milieu synthétique doit être additionné d'une quantité déterminée d'un milieu naturel afin d'obtenir une action de durée prolongée sur les cultures. Il reste un problème sans solution jusqu'à ce jour, à savoir comment on peut obtenir une préparation cosmétique qui ne comprend pas seulement toutes les substances nutritives essentielles pour main- tenir la couche germinative de la peau ainsi que la papille vasculaire dans des conditions vitales et de bonne activité, mais qui assure égale- ment un apport important, équilibré-et complet de ces substances. La solution de ce problème est apportée par la présente in- vention au moyen d'une préparation cosmétique pour le traitement topi- que de la peau afin de favoriser la nutrition des cellules, caractérisé en ce qu'elle comprend une quantité suffisante d'un milieu nutritif pour la culture in vitro de cellules épithéliales humaines isolées, ainsi qu'une quantité de sérum provenant de foetus bovins en fonction de la quantité utilisée dudit milieu nutritif. La préparation cosmétique selon l'invention comprend plus particulièrement entre 0, 1 et 1 %, de milieu nutritif pour la culture in vitro de cellules épithéliales humaines isolées et entre 2 et 10 % de sérum de foetus bovin, ces pourcentages se rapportant au poids total de la préparation. En tenant compte du mode d'application habituel des prépa- rations cosmétiques, et de l'imperméabilité de la peau vis-à-vis de presque toutes les substances nutritives ci-dessus mentionnées (il est bien connu que l'absorption cutanée est limitée par la couche cornée de 4- la peau), ces substances nutritives doivent de préférence être présentes sous leur forme la plus simple et leur poids moléculaire le plus bas, par exemple, on utilise les amino-acides plutôt que les protéines, les bases nucléiques plutôt que les acides nucléiques, les pentoses et hexoses plutôt que les polysaccharides, etc En outre, toujours pour favoriser le passage de ces substan- ces nutritives à travers la peau, la préparation cosmétique de la présente invention comprend des véhicules dermophiles, comme par exemple l'al- cool éthylique, les polyalcools ou polyglycols et en général des émulsi- fiants, habituellement utilisés à cette fin. On sait que les lotions à usage topique basées sur des mélan- ges extractifs à partir de tissus conjonctifs d'organes d'origine animale (tels que par exemple les tricosaccharides) comprenant principalement des sulphomucopolysaccharides (ou glycosaminoglycosanes), peuvent être utilisées avantageusement pour normaliser les fonctions des papilles vasculaires et des cellules germinatives associées. L'action de ces substances implique les petits vaisseaux qui irriguent le follicule sébacé, remettant en état les conditions normales de la circulation locale La gamme des concentrations de la substance active dans ces solutions peut varier entre 0, 2 et 3 %. On a maintenant trouvé de façon inattendue que la combinai- son de ces substances avec les composés actifs indiqués plus haut et qui font l'objet de la présente invention, permet d'obtenir une composition qui, non seulement agit simultanément sur les deux causes conduisant à la chute des cheveux (circulation locale insuffisante et apport insuffisant d'éléments nutritifs), mais présente également une activité supérieure inattendue à celle prévisible en additionnant les activités de chacun des compo sants. Selon l'invention on a trouvé en effet que les mélanges ex- tractifs et les compositions nutritives pour milieux de culture de cellules présentent entre certains rapports limitatifs, un effet de synergie dans le domaine considéré améliorant l'efficacité des deux substances actives, 25352 O 1 -5- la combinaison de ces dernières permettant en outre, comme indiqué ci-dessus, d'agir sur l'ensemble des causes de la chute des cheveux. L'invention a par conséquent aussi pour objet une composition synergique pour la stimulation de la trichogénèse, essentiellement ca- ractérisée en ce qu'elle comprend un premier composant actif formé par des mélanges extractifs obtenus à partir de tissus conjonctifs d'ori- gine animale et un second composant formé par un milieu nutritif pour la culture in vitro de cellules épithéliales humaines. Il est connu qu'un milieu nutritif pour la culture in vitro de cellules humaines isolées contient tout les éléments nutritifs nécessai- res pour assurer le maintien en vie et la reproduction des cellules. L'application topique d'une préparation cosmétique selon l'in- vention qui s'effectue in vivo, est réalisée en général dans les zones de la peau o la circulation sanguine, et de ce fait l'apport de substances nutritives, sont le plus entravés et ralentis, et on a constaté qu'elle permet d'obtenir une amélioration substantielle des conditions trophiques locales et, par conséquent, une normalisation de la vitalité et de l'activi- té reproductrice des cellules. Il a été trouvé en outre, que les sels minéraux, normalement présents dans un milieu de culture in vitro de cellules humaines isolées, ne doivent pas, de préférence, être présents dans le milieu nutritif incorporé dans la préparation cosmétique selon la présente invention. En effet, si les sels minéraux ne sont pas des substances nutritives dans le sens strict du mot, ils sont par ailleurs bien présents dans les liquides cellulaires. En outre, afin de tenir compte de l'inévitable dispersion des substances nutritives au moment de l'application de la préparation cos- métique selon l'invention, la concentration des substances nutritives dans le milieu incorporé dans cette préparation doit être de 3 à 5 fois supérieure à la concentration de ces substances dans un milieu simi- laire utilisé pour la culture in vitro de cellules épithéliales humaines isolées. -6 - D'autres caractéristiques de la présente invention apparar- tront plus clairement dans la description qui suit, dans laquelle une composition de milieu nutritif sera décrite plus en détail, qui peut être utilisée dans une préparation selon l'invention La description contien- dra également quelques exemples non limitatifs de formules cosmétiques basées sur le produit ci-dessus mentionné. Exemple d'une composition d'un milieu nutritif en poudre destinée à être incorporée dans une préparation selon l'invention (formule pour 100 g) Lalanine L-arginine acide L-aspartique sel disodique de L-cystine Lcystéine HC 1 acide L-glutamique L-glutamine glutathione glycine Lhistidine HCI H 20 L-hydroxyproline L-i soleucine L-leucine L-lysine HC 1 L-méthionine L-phénylalanine L-proline L-sérine L-tryptophane L-tyrosine L-valine acide L-ascorbique biotine calciphérol 3,1997 g 8,9595 g 3,8397 g 3, 0282 g 0, 0126 g 8, 5524 g 12,7991 g 0,0063 g 6,4086 g 2, 8004 g 1, 2799 g 2, 5598 g 7, 6795 g 8,9594 g 1,9198 g 3, 1997 g ,1196 g 3,1997 g 1, 2799 g ,1196 g 3, 1997 g 0,0063 g 0,0012 g 0,0127 g D-pentothénate de calcium chlorhydrate de choline acide folique i -ino sitol Na-bisulfite de ménaphtone acide nicotinique nicotinamide acide p-aminobenzoi-que pyridoxal HC 1 pyridoxine HC 1 riboflavine thiamine HC 1 Na-phosphate de DL- tocophérol acétate de vitamine A sulfate d'adénine -AMP sel disodique de ATP S-déoxiribose hypoxanthose ribose thymine uracile xantine 0,0012 g 0, 0639 g 0,0012 g 0,0063 g 0,0024 g 0,0031 g 0,0031 g 0,0063 g 0,0031 g 0, 0031 g 0,0012 g 0, 0012 g 0,0012 g 0,0146 g 1,2799 g 0, 0256 g 1,2799 g 0, 0639 g 0,0384 g 0,0639 g 0,0384 g 0,0384 g 0,0384 g 7 - Cette composition est préparée entravaillant dans un endroit o l'humidité est inférieure à 40 %; tous les composants sont pesés dans l'ordre indiqué et le mélange obtenu est introduit dans un broyeur à billes o il est moulu finement La poudre obtenue est stockée à l'abri de l'humidité. Quelques exemples de formules pour produits anti-rides, hydratants et revitalisants, pour les soins de la peau seront décrits ci- après: Exemple 1 Crème milieu selon l'invention 0, 4 g sérum foetal bovin 2, 5 g stéarate de polyglycol 5, O g stéarine 6,5 g huile de lanoline 6 g squalane 2 g spermaceti 8 g conservateurset parfum au besoin H 2 O q s p 100 l O Og Exemple 2 Lait milieu selon l'invention 0, 3 g sérum foetal 2 g polyoxyéthylèneglycol - palmitostéarate 5 g huile de lanoline 5 g monostéarate de glycéryl -1 g propylèneglycol' 4 g conservateurs et parfums au besoin H 2 O q s p 100 g -8 - Exemple 3 milieu concentré sérum foetal glucose alcool 95 extrait d'hamamélis lanoline éthoxylée glycérine conservateurs et parfums H 2 O q s p. Lotion 0,2 g 2,5 g 0,1 g 18 ml lg 2 g g au besoin ml- Exemples de lotions pour la croissance des cheveux Exemple 4 milieu concentré sérum foetal glucose alcool 95 conservateurs et parfums Z O H 20 q s p. Exemple 5 milieu concentré sérum foetal alcool 95 propylène glycol conservateurs et parfum H 2 O q s p. Exemple 6 milieu concentré sérum foetal 0,5 g 8 g 0,1 g 3,5 ml au besoin ml 0,3 g g ml 3 g au besoin ml 0,2 g 2 g _ 9 _ Tween 80 0,01 g extrait d'ortie 3 extrait de piment I conservateurs et parfum au besoin H 20 q s p 100 ml Comme indiqué ci-dessus, il a été trouvé aussi selon l'inven- tion que les compositions nutritives décrites ci-dessus et les mélanges extractifs à partir de tissus conjonctifs provenant d'organes d'animaux, présentent dans certaines limites une synergie dans le présent domaine d'application ayant pour effet une amélioration de l'efficacité des deux substances actives. Ainsi qu'il a été décrit ci-dessus, parmi les agents ayant une activité stimulative sur la circulation sanguine locale, on préfère pour la présente invention les mélanges extractifs à partir de tissus conjonc- tifs provenant d'organes d'animaux, connus sous le nom de "tricosaccha- rides", sous forme de lotions Bien entendu, selon la présente invention on peut employer des composants actifs déjà connus, tels qu'extraits végétaux, par exemple les extraits d'orties, d'hamamélis, de bouleau ou d'autres composants susceptibles de stimuler le cuir chevelu en tant qu'agents vasodilatateurs, comme la capsai'cine et les esters d'acide nicotinique (par exemple les nicotinates de méthyle et d'éthyle) Quel- ques exemples de formules des composants actifs pour les préparations selon l'invention et de leurs mélanges sont donnés ci-dessous. Exemple 7 Exemple de la composition de la lotion basée sur le mélange extractif (composition A) alcool éthylique à 95 % 15 m I propyléneglycol 1, 5 g conservateur et parfum 0,8 g mélange extractif (tricosaccharide) 1 g eau q s p 100 ml ? 535201 - Exemple 8 Exemple d'une composition contenant le milieu, le sérum foetal bovin et le véhicule, conformément à l'invention (composition B) milieu + sérum foetal bovin 62, 5 g inositol 12,5 g mannitol 25 g Exemple 9 Exemples de lotions synergiques selon la présente invention (composition C) composant B (mg) 100 400 700 1 000 composant A (g ou ml) 100 100 100 100 concentration de B 0, 1 % 0,4 % 0,7 % 1 % La composition C selon l'invention est soumise à un essai par comparaison à une préparation selon l'art antérieur, à savoir une lotion à base de mélanges extractifs (composition A). Pour cette expérience on emploie 5 lapins bruns de Bour- gogne, les animaux étant normalement nourris, pesant 2, 8 kg et étant préalablement rasés dans la région dorsale. Afin de rendre les résultats de l'expérience plus rapidement visibles, on a préféré une injection sous-cutanée des préparations à l'application topique, qui ne permet pas de mettre en évidence la stimu- lation d'une nouvelle croissance chez l'animal. Un jour après le rasage on injecte aux animaux 0, I ml de chacune des solutions suivantes, instantanément préparées: ( 1) mélange extractif (composition A) en solution aqueuse à 1 % pds/vol ( 2) 1 % de mélange extractif et 0, 5 % de composition B (pds/vol) en solution aqueuse. On injecte les deux solutions dans le dos à des hauteurs différentes et on fait deux essais par solution Les injections sont répé- tées pendant deux périodes de cinq jours en succession, avec un inter- valle de deux jours de repos. il - Les essais donnent les résultats suivants La solution ( 1) provoque la croissance de nouveaux poils autour de la zone rasée La croissance nouvelle est clairement visible 15 jours à peu près après le début des injections La solution (Z) cependant provo- que chez chacun des animaux une croissance plus rapide, en outre sur une plus grande zone que la solution ( 1) seule. Comme indiqué ci-dessus, la présente invention concerne également les activités anti-rides, hydratante et revitalisante de la peau. Dans les exemples suivants 10 à 13, ont été décrites les préparations d'une crème, d'un lait et d'une lotion. Exemple 10 Un équipement traditionnel en acier inoxydable est rempli de 90 % de l'eau nécessaire pour la préparation de la crème, puis on augmente la température entre 70 et 80 'C Parallèlement, on introduit dans une chaudière à fusion du stéarate de polyglycol, de la stéarine, de l'huile de lanoline, du squalane et des conservateurs, et on porte la température à une valeur comprise entre 70 et 80 'C après quoi on com- mence le travail de mélange le plus tôt possible. Quand les températures de la phase aqueuse et de la phase grasse sont en équilibre, la phase grasse est versée dans l'eau L'équi- pement de mélange est mis en route et le mélange est refroidi lentement. Lorsque la masse a atteint les 350 C, elle est ajoutée au milieu concentré, préalablement dispersé dans 10 % d'eau, de sérum foetal bovin et de parfum Le refroidissement est achevé en poursuivant l'agi- tation de la masse. Exemple 1 1 Un équipement traditionnel en acier inoxydable est rempli de 90 % de l'eau nécessaire pour la préparation du lait et avec du pro- pylèneglycol et la température est portée à une valeur comprise entre et 80 'C. 12 - Parallèlement on introduit dans un mélanger séparé du stéarate de polyglycol, de l'huile de lanoline, du monostéarate de glycé- ryle et des conservateurs, on porte la température à une valeur entre 70 et 80 'C et on commence le travail de mélange le plus tôt possible Quand les températures de la phase aqueuse et de la phase grasse sont en équilibre, la phase grasse est versée dans l'eau L'équi- pement de mélange est mis en route et la masse est refroidie lentement. Lorsque la masse atteint la température de 350 C, on ajoute le milieu concentré sous la forme d'une prédispersion de 10 % dans le mélange d'eau, de sérum foetal et de parfum Le refroidissement est complété en poursuivant l'agitation de la masse. Exemple 12 Un récipient en acier inoxydable équipé d'un agitateur est rempli dans l'ordre de 90 % de l'eau nécessaire, puis du sérum, du glu- cose, de l'extrait d'hamamélis, de glycérine, de conservateurs et de parfum. Le mélange est mis en route, puis on ajoute l'éthoxylate de lanoline sous forme prédissoute dans les 10 % d'eau chaude restante La masse est agitée pendant 15 mn, puis additionnée d'alcool et agitée de nouveau. Le p H est porté à 6, 5 avec du Na OH ou HCI dilué, ensuite la masse est filtrée sur un filtre du type Seitz US et mise en bouteille. Exemple 13 Un récipient en acier inoxydable, équipé d'un agitateur-est rempli de l'eau nécessaire puis de tous les composants selon l'exemple 7, tandis que le mélange solide est préparé séparément selon les indications de l'exemple 8 La masse est mélangée pendant 20 mn environ, puis on vérifie le p H qui doit être de 6, 5; au besoin le p H est ajusté avec du Na OH ou du HCI dilué Après contrôle du volume final la masse est agi- tée de nouveau pendant 5 mn et la solution est gardée au repos pendant la nuit, puis filtrée dans un filtre clarifiant du type Seitz US. Après la filtration on met sous emballage, c'est-à-dire que la solution est embouteillée et la dose de mélange solide est disposée dans le bouchon. 13 - REVENDICATIONS 1 Préparation cosmétique pour favoriser la nutrition de la peau et des follicules pilaires qu'elle comporte, caractérisée en ce qu'elle comprend une quantité efficace d'un milieu pour la culture in vitro de cellules épithéliales humaines isolées et une quantité de sérum foetal bovin en fonction de la quantité de milieu nutritif utilisé. 2 Préparation cosmétique selon la revendication 1, carac- térisée en ce qu'elle comprend entre 0, 1 et 1 % du milieu nutritif pour la culture in vitro de cellules épithéliales humaines isolées et entre 2 et 10 % de sérum foetal bovin, les pourcentages se rapportant au poids total de la préparation. 3 Préparation cosmétique selon la revendication 1, carac- térisée en ce que le milieu nutritif est exempt de sels nutritifs. 4 Préparation cosmétique selon la revendication 1, carac- térisée en ce que le milieu nutritif présente la composition suivante (pour faire 100 g): L-alanine L-arginine acide L-aspartique sel disodique de L-cystine L-cystéine HC 1 acide L-glutamique L glutamine glutathione glycine L-histidine HCL H 2 O L-hydroxyproline L-isoleucine L-leucine Llysine HC 1 L-méthionine L phénylalanine 3,1997 g 8, 9595 g 3,8397 g 3, 0282 g 0,0126 g 8,5524 g 12,7991 g 0,0063 g 6,4086 g 2, 8004 g 1,2799 g 2, 5598 g 7,6795 g 8,9594 g 1,9198 g 3,1997 g D-pentothénate de calcium chlorhydrate de choline acide folique i -ino si tol Na-bisulfite de ménaphtone acide nicotinique nicotinamide acide p-aminobenzoique pyridoxal HC 1 pyridoxine HC 1 riboflavine thiamine HC 1 Na-phosphate de DL- tocophérol acétate de vitamine A sulfate d'adénine 0,0012 g 0, 0639 g 0, 0012 g 0,0063 g 0,0024 g 0,0031 g 0,0031 g 0, 0063 g 0,0031 g 0,0031 g 0, 0012 g 0,0012 g 0,0012 g 0,0146 g 1,27 99 g 14 - L-proline 5,1196 g 5-AMP 0,0256 g L-sérine 3,1997 g sel disodique de ATP I,2799 g L-tryptophane 1, 2799 g S-déoxiribose 0, 0639 g L-tyrosine 5,1196 g hypoxanthose 0,0384 g L-valine 3,1997 g ribose 0,0639 g acide L-ascorbique 0,0063 g thymine 0, 0384 g biotine 0,0012 g uracile 0,0384 g calciphérol 0,0127 g xantine 0, 0384 g Préparation cosmétique selon la revendication 4, caractériséeen ce qu'elle comprend également un véhicule dermophile choisi parmi l'alcool éthylique, les polyalcools ou polyglycols, les émul- sifiants et produits similaires. 6 Préparation cosmétique selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un ingrédient actif sous la forme d'un mélange extractif obtenu à partir de tissus conjonctifs d'or- ganes d'animaux. 7 Préparation cosmétique selon la revendication 6, caractérisée en ce que la concentration en %-pds du second ingrédient actif est comprise entre 0, 1 et 10 % pour 100 parties en poids de la composition. 8 Préparation cosmétique selon la revendication 7, caractérisée en ce que la concentration en %-pds est comprise entre 0,3 et O,6 % 9 Préparation cosmétique selon la revendication 6, caractérisée en ce que l'ingrédient actif est le tricosaccharide. Préparation cosmétique selon la revendication 7, caractérisée en ce qu'elle se trouve sous une forme qui convient comme crème, lait hydratant et revitalisant ou lotion capillaire. 11 Préparation cosmétique selon la revendication 6, caractérisée en ce qu'elle se trouve sous une forme qui convient comme crème, lait hydratant et revitalisant ou lotion capillaire.