FR 2528848 A1 19831223 FR 8210926 A 19820616 1 - La présente invention est relative à un nouveau dérivé de tétra- hydro-5,6,7,7 a 4 H-thiéno ( 3, 2-cl pyridinone-2, à son procédé de préparation et à son application en médecine humaine e t vétérinaire. Le composé selon l'invention répond à la formule suivante HO c I) Q O ' ST, Ci ainsi que ses sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques pharma- ceutiquement acceptables. Ce composé comportant un carbone asymétrique peut exister sous la forme de deux énantiomères L'invention concerne aussi bien chacun des énantiomères que leur mélange. L'invention a également pour objet un procédé de préparation du composé de l'invention caractérisé en ce que a) on soumet à une nitrosation le composé de formule 1-=; N-CH 2 O S Cl (II) b) le ceto-oxime ainsi obtenu de formule HON (III) est ensuite hydrogéné c) Le composé hydrogéné ainsi obtenu, de formule HON (IV) C 1 est ensuite soumis à un traitarent acide pour obtenir le le I. dérivé de ?ormu- Le composé de formule Il, Poont de départ de la préparation du composé de l'invention est décrit ainsi que son procédé de préparation dans la demande de brevet n' 80 25 274 déposée par la Demanderesse. L'opération de nitrosation permettant d'obtenir le composé de -sormule(-,) c'est-à-dire l (chloro-2 benzyl)-5 Chydroxylminod-3 tetrahycro-4,5,5,7, 3 H-thiéno l 3,2-c) pyricinone-2 s'effectue en milieu acide * acétique glacial sous atmoscn-re inerte en faisant réagir le composé de formule II avec le nirite de sodium. La chase d'hycrogénaco-n a lieu en presence d'acide perchlorique et d'un catalyseur,de préférence du palladium sur charbon en solution dans un alcool tel le méthanol, l'ézhanol, l'isopropanol, ou un solvant hydro- alcoolique, à une température variant entre 10 C et 50 C. Le traitement acide est effectué sur le composé de formule (IV) en solution dans un mélange constitué d'un alcool tel que le méthanol, i'éthanol, l'isopropanol et d'un acide tel que l'acide chlorhydrique ou bromhydrique à des concentrations comprises entre N et 3 N L'opération s'effectue à reflux, sous atmosphère inerte et pendant une durée comprise entre 3 heures et 6 heures. Les exemples non limitatifs suivants illustrent l'invention: a) (Chloro-2 benzyl)-5 (hydroxyimino)-3 tétrahydro-4,5,8,7, 3 H-thiéno ( 3,2-c) pyridinone-2 On met en suspension 25 g ( 0,0068 mole) d'oxalate de (chloro-2 benzyl)-5 tétrahydro-5,6,7,7 a 4 H-thiéno ( 3,2-c) pyridinone-2 dans 125 ml d'acide acétique glacial, sous atmosphère inerte et après refroi- dissement du milieu réactionnel entre O et 5 C, on ajoute, goutte à goutte, g ( 0,072 mole) de nitrite de sodium dissous dans 30 ml d'eau On abandonne à température ambiante pendant 7 heures Les cristaux sont filtrés, lavés à l'éther et séchés Le produit est recristallisé dans l'eau Cristaux jaunes, F = 222 C, rendement = 70 %. b) (Chloro-2 benzyl)-5 (hydroxyimino)-3 hexahydro-3 a,4,5,6,7,7 a 3 Hthiéno ( 3,2-c) oyridinone-2 On dissout 15 g l 0,0375 mole) ou composé de formule 5 ID précédemment obtenu dans un mélange de 900 ml demétranol et de 8 ml d'acide perchlorique à 70 %. On ajoute 4 g de palladium sur charbon à 10 % en suspension dans 100 mi d'âthanol, au milieu réactionnel On soumet le mélange réactionnel à l'hydro- génation dans un réacteur à pression orcinaire 1 atm) et l'abandonne pen- dant 5 neures à température ambiante Après filtration du catalyseur, on évapore à sec le milieu réactionnel. -3 Le résidu dissous cans l'eau est,seuzreaisé par rne soi Luton aqueuse saturée de bicarconate 'e sodium On extrait la phase aqueuse avec du dichlorométhane, sèche la phase organique sur sulfate de sodium sec et évapore à sec Le résidu huileux est purifié par chrcmatographie sur une colonne ds silice (élution: toluène-acétate d'éthyle 1/1 i. La purification finale s'effectue par l'intermédiaire de l'oxa- late Cristaux beiges, F = 200 C, rendement: 65 %. c) (Chloro-2 benzyl)-5 hydroxy-3 tétrahydro-5,8,7,7 a 4 H-thiéno C 3,2-cl pyridinone-2 On dissout 10,4 g ( 0,0334 mole) du composé de formule IV obtenu à l'étape précédente dans un mélange de 250 ml d'alcool isopropylique et de ml d'acide chlorhydrique 2 N On porteau reflux sous atmosphère inerte pendant 4 heures On évapore à sec et reprend le résidu par une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium On extrait la phase aqueuse avec le dichlorométhane La phase organique est séchée sur du sulfate de sodium sec et évaporée à sec Le résidu huileux obtenu est purifié par filtration sur un lit de silice (élution: toluène-acétate d'éthyle 1/1) La base ob- tenue avec un rendement de 81 % se présente sous forme de cristaux beiges, F = 121 C. Oifférents sels ont été préparés selon les méthodes classiques: hemioxalate: cristaux crème, F = 170 C (recristallisation dans un mélange d'alcool isopropylique et d'acetonitrile), nitrate: cristaux roses, F = 181 O C (recristallisation dans un mélange d'isopropanol et de méthanol), chlorhydrate: cristaux beiges, F = 139 C Crecristallisation dans l'isopro- panol). L'invention a encore pour objet un médicament ayant en particulier des propriétés anti-agréganze plaquettaire et anti- thrombctique, caractérisé an ce qu'il contient, à titre de erincipe actif, un dérivé de formule T, ou un sel d'addition avec un acide minéral ou organique pharmaceutiquement ac- ceptable. L'étude toxicologique qui a porté sur les toxicités aiguë, zhroni- que, succhronique et retarsce, a mis en 6 vicence la bonne tolérance 't;a faible toxicité du dérivé te l'invention. Les essais effectués sur les souris, rats et laoins ont montré que l'administration, aussi bien orale ou'intra-péritonéale, du cérivé e l'in- vention n'avait prcvoqué tout au long c-es différents essais pratiqués, aucune réaction Eocale ou générele, aucune certurbotion dans les ocntrles io:icgi- 4 C -ues réguliérement ef 2 ectcs, aucune lésion acroscooicue nu icroscooique. 2 8 8 11 + 8 -3 t an 'LJ t _-;:r N N î 7: î z E Z r 3 Z _ t î or z z 2 t -: 3 4 r e 2 S t t e ex c à esz S'r i 2 rat OP 7 3 reçu, Cen- zier jojrs, zar __,::f_ zu zc:7 cos -rven-c 4 onz,,-xic- i,-21 et -crier, :r ze 3 arig a a L-_ =-ire e a -2 nestnésié est ze sanz i tr-3 té est j 41 îsè ans les 79 surgs 3 = 5 z a Zn r e r r scr- _ jersés:ans;-r C:113 r sr r 3 m L r 7 a z e e j r vZ e -D a r r -3a nt à ez s :.e 7 Z_'e Ssecondes Zn be he-no'-, il-1C' e s c 4-3 N c o N t =en a r t z d à N o S i N e d f D l -_ S r a t e O P) P ar r A s C Se_cndes zr Procède à zeux pré->Ilverrentus de 0,5 -_ 1 ze sarc le premier est mélangé avec C,5 mi d'_ne scl,, tl;on c-D-LA-For-,rol, le deuxième est rné:arcé avec J_ 7 7-7 z'ine solution =-S-1 A seulement. L'add 4-': 'cn -'EDTA Pjrmoi a Dcur but de stabiliser le sanz et lonc de -Fixer l'agrégazion tandis que l'EDTA mrovoque au contraire la désagrège- tion de tous les amas plaquettaires. Après un repos de 10 minutes et une centrifugation des 2 mélanges à vitesse lente pendant 5 minutes, afin de séparer les -lobulee rcuzes, le plasma riche en placueutes (PRP) surnageant est prélevé, jilué et rumérâ en plaquettes. L'intsnsité de l'agr 5-at 4-cn est déterminée car le rapport nombre de plaquettes Jans ESTA-Formol :W = pourzentage e non ronbre de placuettes::an-= ED 7 A azrègees e =odu 4 à rester es d'autant olus irhii 3 i 9 ur ze plaq-,ettaire zue le rapcort ma raooro Che ze 4 M. On a 3 insi zn_ zars _'ezt '3 ratsl 3 ar __ 9 z CîTP Csé 3 C -e le zz:-2 n_ ze '4 + 13 A-'L- rsque-,C,-rleIcz te'-rcin" 7rats,',le e St'-aS: Z. zi mesure ze ril-9 sanc -e ml C'jre sc,-:-3 n corr-er:,r, ce zar L-2 =tan, er aq tatior, r 7,ctage 'es est -a r=nre:e 1'nrz-s 2 z 7 c-:4 _zr -:u temps S-'vîeen collants et;erme-:: fe-:racer m zcurbe:Ont la:,Sntc:Crrela Pcur le zz ats zar z: 7 c c Sze r v -3 r-_ _ 4 -Le Po-r témo 4 n est ze Z' -esse irizi le 1, alz. icn r Er=-z-z J',elle-3stce _ 2528848 L'étude de l'activité inhibitrice de l 'agrégation plaquettaire a porté aussi sur l'action du composé de l'invention vis-à-vis du temps de saignement. La méthode utilisée est une adaptation de la technique de L STELL M B, DONATI et G de GAETANO, Thromb Res, 1975, 7, 709-716. L'expérimentantion est effectuée sur le rat qui a reçu 65 heures, 41 heures et 17 heures auparavant un traitement per os de 200 mg du composé de l'invention en suspension dans 10 ml/kg d'une solution aqueuse de gomme arc que à 5 % Après anesthésie au pentobarbital, la queue du rat est sectionnée à 5 mm de l'extrémité Le sang est soigneusement épongé toutes les 15 se- condes en prenant soin de ne pas toucher la plaie. L'hémostese est atteinte lorsqu'il y a arrêt du saignement pendant une minute. Les temps de saignement sont exprimés en secondes et les temps. supérieurs à I 200 secondes ( 20 minutes) ne sont plus comptés. On'a ainsi déterminé que pour les témoins qui n'ont reçu que la gomme arabique, le temps moyen de saignement est de 390 secondes, alors que pour les animaux traités, il est supérieur à 1 200 secondes. 2 ) Activité anti-thrombotique Cette activité a été étudiée selon 2 méthodes: a) méthode de la thrombose expérimentale sur fil de soie Le principe de cette étude est une adaptation de la méthode de la thrombose expérimentale par circulation extra-corporelle, décrite par TERUHIKO UMETSU et KAZUKO S At NAI (THROMB HAEMOST, 39,1,1978). Sur le rat anesthésié par une injection intra-péritonéale de pentobarbital, la jugulaire gauche et la carotide externe droite sont mises à nu. Le shunt artério-veineux est constitué par un catheter central et deux catheters latéraux un fil de soie naturelle blanche est introduit dans la partie centrale et la circulation rétablie pendant 20 minutes. Après arrêt de la circulation par clampage, le fil est retiré doucement et pesé immédiatement Le poids moyen d'un fil de soie humide a été déterminé au préalable. Le traitement est pratiqué 48 heures, 24 heures et 2 heures avant le début de la circulation sanguine dans le shunt par l'administration orale de 200 mg/kg du composé de l'invention en suspension dans IC ml/kg de gomme arabique à 5 %, le témoin ne recevant que la solution de gomme ara- bique à 5 %. 2528848 On a ainsi déterminé que le poids moyen du thrombus cens les 2 lots de 10 rats était de 38,82 + 1,18 mg pour les animaux témoins et de ,00 + 6,42 mg pour les animaux traités (-35 p 100). b) méthode de la thrombose veineuse a la vrille =le consiste en une adaptation de la méthode de FRIEDMAN et COLL lAM_ T PYSIOL, 1960, 139, 770-774) Une spirale métallique (bourre-pàte ce dentiste 2 recoupée est insérée dans la veine cave inférieure du rat oui a renu 48 heures, 24 heures et 2 heures auperavant un traitement per os ce mg/kg du composé à tester,en suspension dans 10 ml/kg c'une solution aoueuse 1 ce gomme arabique à 5 E. Cinq heures après, cette spirale est prelevée avec le thrombus qu'elle retient, séchée délicatement par tamponnements successifs sur papier filtre et pesée La spirale est ensuite débarrassée du thrombus, séchée de nouveau et pesée de nouveau On obtient ainsi par différence le poids moyen du thrombus, qui est de 3,4 + 0,4 mg pour les rats témoins ( 10 rats) qui n'ont reçu que la gomme arabique et 2,1 + 0,3 mg pour les rats traités ( 10 rats) par le médicament de l'invention (-36 %). Les études toxicologique et pharmacologique qui viennent d'être rapportées ont mis en évidence la faible toxicité du composé de l'invention et son excellente tolérance ainsi que ses intéressantes propriétés inhibi- trice de l'agrégation plaquettaire et anti-thrombotique qui les rendent très utiles en thérapeutique humaine et vétérinaire. Le médicament de l'invention peut être présenté pour l'administra- trion orale sous forme de comprimés, comprimés dragéifiés, capsules, gouttes, granulés ou sirop Il peut aussi être présenté pour l'administration rectale, sous forme de suppositoires et pour l'administration parentérale, sous forme de soluté injectable. Chaque dose unitaire contient, avantageusement de 0,010 g à 0,5 C 00 g du composé de l'invention, les doses administrables journellement pouvant varier de 0,025 g à 1,50 g de principe actif en fonction de l'âge du malade et de la sévérité de l'affection traitée. On donnera ci-après, à titre d'exemples non limitatifs, quelques =ormulations pnarmaceutiques du médicament de i' nvention. 1/ Ccmorm 4 és Principe actif 0,150 g Excipient: lactose, amidon, gomme arabique, stéarate ce magnésium. 7- 2528848 2/ Comprimés dragéifiés Principe actif 0,100 g Excipients: polyvidoneexcipient, gélatine, acide stéarique, amidon de mais, lactose, sucre blanc, gomme arabique, tartrazine, coccine nouvelle. 3/ Gélules Principe actif 0,250 g Excipients: amidon de mals, stéarate de magnésium, sulfate de calcium anhydre. 4/ Soluté injectable Principe actif 0,100 g Solvant isotonique q s p 5 ml / Suppositoires Principe actif 0,150 g Excipient: triglycérides semi-synthétiques. Par ses propriétés inhibitrice de l'agrégation plaquettaire et anti-thrombotique, le médicament de l'invention est indiqué dans la pré- vention et le traitement des maladies provoquant une modification patholo- gique de l'agrégation plaquettaire, telle que les maladies thromboemboliques R E Il E N; O I C A T 0 N S 1/ Dérivé de la tézrahycro-g 5,S,7, 7 a 4 H-thiénc l 3,2-c) pyridinone-2 répondant ala ezrmule c 6-velsppée suivante ainsique ses sels c;-rxzcarue are iumr:acce Qtac:bss. 2/ zrcc e pr-o ara-i:7 N - u d -iv e cr-nule j sezn la revendic'ati 4 on 1 Caractérisé en ce que a) on soumet à une nitrosation le composé de formule N\-CH- 2 \ b J on hydrogène le ceto-oxi rne obtenu de formule suivante HON-C 2 H \ c) on fait subir un traitement acide au dérivé hydrogéné obtenu, de formule suivante HON cour obtenir le dérivé je 'ormule 'I). 3/ Procédé selon la revendication 2 l caractérisé en ce que la nitrcsation est effectuée par le nîtrite de sodiumi er milieu acétioue gllaci-al et sous atmoschère inerte. 4/ Procédé selon la revendication 31 caract--ri 4 sé en ce que ll'hydrogénation see-eectue en orésence d'ncatalyseur et m'cc erchicrique. / Procédé selon la revendication 3 caractérisé en ce que le traitement acide est effectué de préférence par de l'acide chlorhydrique à la con- centration 2 N, à reflux et sous atmosphère inerte. 6/ Médicament ayant notamment des activités anti-agrégante plaquettaire et anti-thrombotique caractérisé en ce qu'il contient, à titre de prin- cipe actif, le dérivé selon la revendication 1. 7/ Médicament selon la revendication 6 caractérisé en ce qu'il est pré- senté sous une forme appropriée à l'administration orale, parentérale ou rectale. 8/ Médicament selon l'une des revendications 6 ou 7 caractérisé en ce qu'il est présenté sous forme de doses unitaires contenant de 0,010 g à 0,500 g de principe actif.