FR 2528048 A1 19831209 FR 8308807 A 19830527 AMIDINES La présente invention concerne des produits analogues de la mitomy- cine contenant un ou plusieurs groupements amidino Ces composés sont des dérivés de la mitomycine C dans lesquels le groupe 7-amino et l'atome d'a- zote carbamido sont l'un ou l'autre ou tous les deux incorporés au sein d'un substituant amidino Ces composés sont des substances anti-tumeurs actives dans les tumeurs animales expérimentales. Nomenclature le nom systématique des Chemical Abstracts pour la mitomy- cine C est: Ila R-(laa,8 e,8 aa,8 ba) I-6 amino-8-I ((aminocarbonyl)oxy)méthyll- 1,1 a,2,8,8 a,8 b-hexahydro-8 a-méthoxy-5-méthyl-azirino 12 ',3 ',3,41- pyrrololl,2-a I indole-4,7-dione suivant lequel le système du cycle azirinopyrroloindole est numéroté comme suit: NH 2 la Un système banal de nomenclature qui a trouvé une large utilisation dans la littérature concernant la mitomycine identifie le système de cycle précédent comprenant plusieurs des substituants caractéristiques des mito- mycines sous le nom de mitosane. I I 1 % 4 N- 3 2 Mitosane Tandis que ce système est commode et approprié à un certain nombre de dérivés simples tels que ceux portant des N-substituants sur l'atome d'azote du cycle azirino ou dans les positions 7 ou 9 a, il souffre de certaines ambiguïtés et de certains inconvénients pour être utilisé géné- ralement En ce qui concerne les composés de la présente invention, dont quelques-uns comportent des substituants à la fois sur l'atome d'azote du cycle azirino et sur l'atome d'azote de la chaîne latérale carbamoyle, il n'y a pas de moyen classique de numérotation pour distinguer ces positions. De ce fait, on a choisi dans la présente demande de se référer à l'atome d'azote azirino sous le nom de N Ia et à l'atome d'azote carbamoyle sous le nom de No 10 en utilisant le système de nomenclature du mitosane Quant à la configuration stéréochimique des produits suivant la présente invention, il est entendu, lorsqu'on les identifie par leur racine "mitosane" ou par leur formule structurale, que l'on identifie leur configuration stéréochi- mique comme étant la même que celle de la mitomycine C. La mitomycine C est un antibiotique qui est produit par fermentation et qui est actuellement en vente avec l'approbation dela"Food and-Drug Administration" pour la thérapeutique de l'adénocarcinome disséminé de l'estomac ou du pancréas en combinaisons ayant fait leur preuve avec d'autres agents chimiothérapeutiques approuvés et en tant que traitement palliatif lorsque d'autres modalités ont échouées (Mutamycine Bristol Laboratories, Syracuse, New York 13201, Physicians' Desk Reference 35 ème édition, 1981 pages 717 et 718) La mitomycine C et sa production par fer- mentation sontle sujet du brevet des Etats Unis d'Amérique N O 3 660 578 publié le 2 mai 1972 et revendiquant la priorité de demandes antérieures comprenant une demande déposée au Japon le 6 avril 1957. Les structures des mitomycines A, B, C, et de la porphyromycine ont été publiées tout d'abord par J S Webb et al de Lederle Laboratories Division American Cyanamid Company, J Amer Chem Soc 84, 3185-3187 ( 1962). L'une des transformations chimiques utilisée dans cette étude de structure pour relier la mitomycine A et la mitomycine C a été la conversion de la première, 7-9 a-diméthoxymitosane, par réaction avec l'ammoniac, en la dernière, 7-amino-9 a-mnéthoxymiitosane Le déplacement du groupe 7-inéthoxy de la mitomycine A s'est avéré être une réaction d'un intérêt considéra- ble dans la préparation de dérivés anti-tumeurs actifs de la mitomycine C. Les articles et brevets suivants traitent chacun de la conversion de la mitomycine A en une mitomycine C amino-substituée en position 7 et possé- dant une activité anti-tumeur L'objet de cette recherche est de préparer des dérivés qui soient plus actifs et particulièrement qui soient moins toxiques que la mitomycine C: Matsui et al "The Journal of Antibiotics", XXI, 189-198 ( 1968). Kinoshita et al "J Med Chem " 14, 103-109 ( 1971) - Iyengar et al "J Med Chem " 24, 975-981 ( 1981). Iyengar, Sami, Remers, and Bradner, Abstracts of Papers Annual Meeting of the American Chemical Society, Las Vegas, Nevada, March 1982, Abstract n MEDI 72. Les brevets suivants traitent de la préparation de dérivés d'amino- mitosane substitués en position 7 par la réaction de la mitomycine A, de la mitomycine B ou d'un de leurs dérivés substitués en N Ia avec une amine primaire ou secondaire: Cosulich et al U S Patent n 3 332 994 publié le 25 juillet 1967; Matsui et al U S Patent n 3 420 846 publié le 7 janvier 1969; Matsui et al U S Patent n 3 450 705 publié le 17 juin 1969; Matsui et al U S Patent n 3 514 452 publié le 26 mai 1970; Nakano et al U S Patent n 4 231 936 publié le 4 novembre 1980; Remers U S Patent n 4 268 676 publié le 19 mai 1981. Les dérivés de la mitomycine C comportant dans la position 7 un amino substituant substitué, ont aussi été préparés par biosynthèse direc- te, c'est-a-dire en introduisant dans les bouillons de fermentation, toute une série d'amines primaires et en mettant en oeuvre la fermentation classi- que de la mitomycine (C A Claridge et al Abst of the Annual Metting of Amer Soc for Microbiology 1982 Abs 028). La mitomycine C est la principale mitomycine produite par fermenta- tion et elle en est la forme disponible dans le commerce La technologie actuelle de conversion de la mitomycine C en mitomycine A à utiliser dans la production de dérivés amino substitués semi-syntheciques analogue de la mitomycine C indiquée dans les publications précédentes, implique l'hydrolyse de la mitomycine C en le 7-hydroxymitosane correspondant, com- posé extrêmement instable, et ensuite la méthylation de cette substance avec le diazométhane, substance très dangereuse à manipuler Une tentative d'éviter l'utilisation du diazométhane pour la méthylation de la 7-0- diméthyl-mitomycine A qui est produite par l'hydrolyse de la mitomycine C implique l'utilisation de 7-acyloxymitosanes (Kyowa Hakko Kogyo KK Brevet Japonais n J 5 6073-085, Farmdoc n 56227 D/31). La présente invention concerne un nouveau groupe de dérivés mono- guanidino, ou mono et bis-amidino analogues de la mitomycine C dans les- quels l'atome d'azote 7-amino et l'atome d'azote No 10 carbamoyle de la mitomycine C font l'un ou l'autre ou tous les deux partie d'un substituant amidino ou bien l'azote 7-amino fait partie d'un groupe guanidino Sont également compris dans le cadre de la présente invention des analogues correspondants de la mitomycine A comportant le groupe méthoxy en position 7 et le groupe amidino dans la position N'O Les composés de la présente invention sont conformes à la formule structurale suivante: g 3 20 C-a 3 Formule I dans laquelle: A représente un groupement amino, méthoxy, hydroxy, ( 1-alkyl-inférieur- 2 ( 1 H)-pyridinylidène)amino, ou un groupement de formule: R 2 HR 2 RR 3 AI 311 3 I 3 3 RCNl-, 1 R -N-C=-N-, R C-N-, t (CI: 25 17 Cn R 2 R 25 H N-C=N-, 17OU 2 17 R B représente un groupement amino ou le groupement amidino de la formule: R 2 R 3 R 4 N-C=N- et au moins l'un d'entre A et B représente un des groupes specifiés autre que amino, méthoxy ou hydroxy; n est un entier égal à 0, 1, 2 ou 3; Ri représente un hydrogène, alkyle inférieur, alkanoyle inférieur, benzoyle ou'benzoyle substitué dans lequel ledit substituant est un alkyleinférieur, alkoxy inférieur, halo, amino ou nitro; R 2 représente un hydrogène alkyle inférieur, phényle, alkylphényle in- férieur, alkoxyphényle inférieur, halophényle, aminophényle, nitro- phényle, thiényle, furyle, cyano, dialkylamino inférieur, alkoxy in- férieur ou alkylthio inférieur; R 3 représente un alkyle inférieur, alkoxy inférieur ou en même temps que R 4 et l'atome d'azote auquel ils sont attachés, il constitue la pyrrolidine, la 2 ou la 3 alkyle inférieurpyrrolidine, la pipéridine, la 2-,3 ou 4-alkyle inférieur-pipéridine, la 2,6-di- alkyle inférieur-pipéridine, pipérazine, pipérazine-4 substituée (dans laquelle ledit substituant-4 est un alkyle ou un carbalkoxy comportant chacun de 1 à 8 atomes de carbone, phényle, méthylphényle, méthoxyphényle, halophényle, nitrophényle, ou benzyle), l'azépine, la 2-,3-,4-, ou 5-alkyle inférieur-azépine, la morpholine, thiomor- pholine, thiomorphol i ne-l-oxyde, ou thiomorpholine-1,1-dioxyde; R 4 est un alkyle inférieur ou en même temps que R 3 et l'atome d'azote auquel ils sont attachés, il constitue la pyrrolidine, le 2-, ou 3- alkyle inférieur-pyrrolidine, pipéridine, 2-, 3-, ou 4-alkyle infé- rieur-pipéridine, 2,6-di-alkyle inférieur-pip 6 ridine, pipérazine, pipérazine 4-substituée (dans laquelle le substituant-4 est un alkyle ou un carbalkoxy comportant chacun de 1 à 8 atomes de carbone, phé- nyle, méthylphényle, méthoxyphényle, halophényle, nitrophényle ou benzyle) , l'azépine, la 2-,3-,4-, ou 5-alkyle inférieur-azépine, la morpholine, thiomorpholine, thiomorpholine-1-oxyde ou thiomorpholine- 1,1-dioxyde; Rs est choisi parmi les alkyles en CI à C 18 autres que les tertioalkyles, un alkényle en Cl à C 18, un alkynyle en C 1 à Cla, un haloalkyle en Ci à C 18, un hydroxyalkyle en Cl à Cl, un cycloalkyle en C 4 à C 8 ou un aryle ou un aralkyle inférieur, comportant chacun jusqu'à 12 atomes de carbone ou un groupement hétéroalicyclique ou hétéroaromatique comportant de 3 à 8 membres dans le cycle dont au moins 2 sont des atomes de carbone; R 7 et R 9 représentent indépendamment un H ou un alkyle inférieur; dans lequel: chacun des groupements alkyle inférieur, alkanoyle inférieure et alkoxy inférieur mentionnés ci-dessus contient de 1 à 6 atomes de carbone. L'homme de l'art reconnaîtra que des formes tautomériques de quel- ques-uns des groupements amidino ci-dessus existent Il est entendu que de tels groupements sont aussi couverts par les formules précédentes et par la présente invention. Les substances précédentes de formule I ont une activité anti-tumeur dans les animaux expérimentaux Elles sont aussi utiles en tant qu'intermé- diaires pour préparer d'autres composés ayant une activité anti-tumeur sur les animaux La présente invention comprend des procédés de préparation des substances précédentes et des procédés pour leur transformation en d'autres composés utiles ayant une activité anti-tumeur sur les animaux expérimentaux comme on le décrira ci-dessous. Le procédé suivant la présente invention qui emploie les substances précédentes comme intermédiaires pour préparer d'autres composés ayant une activité anti-tumeur sur les animaux implique la réaction d'un composé de formule I dans lequel A ou bien A et B à la fois représentent le même groupe amidino possédant une amine primaire résultant du clivage du substituant N 10 o aminométhylène,lorsqu'il est présent,avec sa conversion en le groupement NH 2 tel qu'il est présent dans la mitomycine A et la mitomycine C Les ami- nes primaires à quelques exceptions près, réagissent aussi en position 7 par déplacement du groupe amidino et son remplacement par le substituant amino correspondant au produit réactif Ces procédés sont illustrés par les équations ci-après (voir page 7) R 5,représentant le substituant à l'azote de divers composés connus et nouveaux de la mitomycine C amino substituée en position 7, décrit ici, et des amines primaires capables de déplacer de groupement 7-amidino de formule II, est choisi parmi les alkyles en CI à C 18 autres que les tertioalkyle, alkoxy en C 1 à C 1, alkényle en C 1 à C 18, alkynyle en C 1 à C 18, haloalkyle en CI à C 18, hydroxyalkyle en C 1 à C, cycloalkyle en C 4 à C, aryle ou aralkyle inférieur ou aralkoxy inférieur comportant chacun jusqu'à 12 atomes de carbone ou un groupement hétéroalicyclique ou hétéroaromatique comportant de 3 à 8 membres dans le cycle dont au moins 2 sont des atomes de carbone. 252804 W 2 5218 0 4 p R 3 R 2 O 2 IR 4 % ' c:-i 2 a 3;NR 1 R 5 M-12 I I' O? 3 I Formule IVF 12 O { R 6 e N Hrs 12 N le Forule r II R 3 R 2 o, Formule IV R 6,représentant le substituant à l'azote des amines primaires capables seulement de cliver le substituant No 10 amidino, estle résidu d'une amine aliphatique très faiblement basique ou d'une alkylamine ou d'une aralkyla- mine à empêchement élevé. Des exemples en sont la trifluoroéthylamine, benzhydrylamine (c'est-adire aminodiphénylméthane), ou la tertiobutylamine. Les composés de formule I sont préparés par réaction de la mitomy- cine C, 7-hydroxy-9 a-méthoxymitosane, ou de la mitomycine A ou d'un ana- logue N Ia-substitué de l'un quelconque des dérivés précédents avec un ami- de acétal Ces composés de formule I dans lesquels A, mais non B, repré- sente ledit groupe amidino, peuvent aussi être préparés par réaction de mitomycine C ou d'un dérivé analogue N 1 a-substitué de ceux-ci avec une base forte pour former un anion en N 7, ce que l'on fait suivre par la réaction de l'anion avec un réactif capable de donner naissance au groupe- ment aminométhylène tel qu'un sel d'halométhyléniminium. Les composés préférés suivant la présente invention sont les ana- logues de la mitomycine C dans lesquels le groupe 7-amino est incorporé dcrs Un groupement aiid;no substitué ou non-substitué Ils scnt une forte action anti-tumeur contre les tumeurs expérimentales des animaux Ces com- posés sont préparés par réaction de la mitomycine C avec un réactif capable de transformer le groupe 7-amino en un groupe 7-amidino Des réactifs pré- férés à cette fin sont les amides acétals qui réagissent avec un bon ren- dement et dans des conditions modérées avec la mitomycine C (exemple 1 à , et 18) Un autre groupe de réactifs formant une amidine sont les halogénures d'imidoyles (exemple 17), les sels d'halométhylèniminium (exemple 15), les halogénures de 2-halo-1-alkylpyridinium (exemple 16), et les iminoéthers et iminothioéthers (exemple 13 et 14) qui réagissent avec la forme anionique de la mitomycine C formée par déprotonation du groupe 7- amino de ceux-ci par traitement avec une base forte Les conditions de la déprotonation de la mitomycine C impliquent le traitement de la mitomycine C dans une solution de diméthylformamide avec des proportions environ 1,5 molaire d'hydrure de sodium à la température ambiante La réaction de la forme anionique ainsi produite avec l'un des réactifs précédents emploie, de préférence, des proportions de 1 à 5 molaires de ceux-ci par rapport à la mitomycine C à une température allant de la température ambiante à en- viron -60 C Des solvants organiques polaires aprotiques tels que le dimé- thylformamide hexaméthylphosphoramide, diméthylsulfoxyde, ou pyridine sont utilisés comme milieu réactionnel La méthode n'est cependant pas limitée à la formation de la mitomycine C anionique de cette façon spécifique puis- que des modifications apparaîtront à l'homme de l'art. La méthode préférée de préparation des composés de formule I dans lesquels B ou chacun de A et B représente le groupe amidino de la formule R 2 R 3 R 4 N-C=N- estla réaction de la mitomycine C ou de la mitomycine A ou d'un dérivé N 1 a-substitué de l'un ou l'autre avec un amide acétal de formule: R 3 R 2 N-C-OR" Formule V 4 1 R 8 R OR dans laquelle: R 2, R 3, et R 4 sont tels que définis ci-dessus, et R 8 représente un alkyle inférieur ou un cycloalkyle comportant jusqu'à 6 atomes de carbone et les deux groupes RB sont réunis sous la forme d'une chaîne alkylène formant avec les deux-atomes d'oxygène et l'a- tome de carbone intervenant une structure cyclique comportant 5 ou 6 membres dans le cycle. La réaction de ces amides acétals avec les amines primaires est parfaitement connue dans l'état de la technique et l'homme de l'art saura comment conduire la réaction avec la mitomycine C, la mitomycine A ou leurs dérivés Nla alkyles On se référera par exemple à IH E Winbery, Brevet des Etats Unis d'Amérique n 3 121 084 ( 11 février 1964) et à R F Abdulla et al "The Chemistry of Formamide Acetals", Tetrahedron, Vol 35 pages 1720- 24 ( 1979). On préfère mettre la réaction en oeuvre dans un milieu réactionnel anhydre liquide dans lequel le diluant est un liquide qui est compatible avec les conditions de la réaction De préférence, ce dernier est un hydro- carbure aliphatique inférieur halogéné ou un alkanol inférieur ou bien il est souhaitable que ce soit un mélange des deux Le chloroforme et le mé- thanol et leurs mélanges conviennent tout à fait La réaction est mise en oeuvre à une température de 40 à 65 C pendant une période de temps suffi- sante pour que la réaction s'achève. Lorsqu'un excès important (env 60 fois) de l'acétal est utilisé, le produit qui se forme de façon prédominante est le dérivé bis-amidino c'est-à-dire les dérivés de formule I dans lesquels A et B comprennent tous les deux le groupement amidino Le dérivé Nia-formyle se forme quel- quefois en tant que sous-produit Cependant, avec une quantité limitée (env 10 fois) de l'acétal, outre le dérivé bis-amidino, il se forme aussi un dérivé monoamidino, c'est-à-dire un dérivé de formule I dans lequel A est le groupement amino et B est le groupement amidino Des mélanges des produits de la réaction précédente se séparent facilement par chromato- graphie tel qu'on le décrira dans les exemples qui suivent. Quelques amides acétals disponibles dans le commerce qui peuvent être utilisés dans ce procédé sont énumérés sur le tableau I qui est repris de l'article de Abdulla et al page 1685 cité ci-dessus. TABLEAU I Quelques amides acétals disponibles dans le commerce. Acétal Structure A (CH 3)2 NCH(OCH 3)2 B (CH 3)2 NCH(OCH 2 CH 3)2 CH 3 C (CH 3)2 NCH(OCH 2-C-CH 3)2 CH 3 (CH 3)2 NC(CH,)(OCH 3)2 D O-CH 2 E (CH 3)2 NCH O\ O-CH 2 CH F (CH 3) 2 NCH (O 2 CH 3 G (CH 3) 2 NCH (OCH 2 CH 2 CH 3) 2 H (CH 3) 2 NP(-1 2 Les substances de formule I dans lesquelles: R 2 représente un cyano, un alkylamino inférieur, alkoxy inférieur ou alkylthio inférieur, sont préparés par substitution des dérivés d'orthocarbonates suivants pour les amides acétals du procédé pré- cédent. CN 1 ( 20 O2 C N (CH 3)2 (CH 3)2 N-C-(OC 2 H 5)2 (C 2 H 50)2 C N(CH 3)2 Formula VI Form la VII (C 2 H 50) 3 C-N(CH 3)2 (C 2 H 5 S)3 C-N(CH 3)2 Formule VIII Fnrmulp IX Ces réactifs sont disponibles à partir des sources suivantes: formule VI Kantlehner, et al, Liebigs Ann Chem, 1981, 70-84; formules VII, VIII et IX H Meerwein, et ai, Liebigs Ann Chem 641,1 ( 1961). Les dérivés amidino de formule I dans lesquels A représente: R 2 R 2 R I I I R 3 r IHC=N ou R 3 N=C-N- sont préparés à partir de la forme anionique de la mitomycine C et/ou de son dérivé N 7-substitué comme décrit ci-dessus Des sels d'halomêthyléni- minium pouvant convenir à l'utilisation dans ce procédé ont été décrits dans la littérature Des représentants en sont ceux énumérés par W Kantlehner dans 'Advances in Organic Chemistry', Vol 9, Partie 2, Wiley Interscience 1979, pages 81 et 82 Le tableau II qui suit est repris du résumé de Kantlehner. TABLEAU II Sels d'halométhyléniminium 2 '"NR R R 2 H H H H CH 3 C 2 H 5 n-C 3 Hî 7 nC 3 Il -C 3 H 7 n-C 4 H ( 0112) 3 C 6 H 5 C 6 H 5 C 6 H 5 C 6 H 5 C 6 H 5 C 6 H 5 6 H 5 C 6 H'5 C 6 HS C 6 H 5 CH 13 OH 3 O 3 a 3 OE 3 OH 3 C 2 H 5 CH 3 OH 3 CH 3 CH 3 -(OH 2) 5 (OH 2) 5 (CH 2) - CH 3 Ct'3 0 C 13 CH 3 CH 3 C 2 H 5 C 2 H 5 CH 3 H H D CH 3 (CH 2) 4 (OH 2) 5- -OH (H 2) 4-OE- CH 13 CH 3 (CH 2) 4- X y MP lo ci ci 140-145 Br Br 156-158 I I 110 ci ci 58-66 ci ci huile ci ci 150-120 ci ci 68-70 ci ci 82-85 ci ci 82-84 cil ci "-20 ci ci " 120 ci ci 50-55 ci ci 75-79 ci ci 93-95 ci Br 115-117 ci Br 115-118 ci ci 95-96 ci ci Br Br 3 Br Br 3 Br Br 3 Br Br 3 136-140 Br Br 120 d C)- Br Br 178 (dic) Br Br 195 (dkéc) R 2 c 6 H c 6 H 5 p-oe 3-C 6 H 4 P-N 02-C 6 H 4 R 3 R 4 -CH (CH 2)4- CH 3 -OE (CV 33 _':"_ -c (c))3-C CH 3 CH 3 H (CH 2)4 - n-C 3 H 7 -(CH 2) 5 a 3 CH point de X Y fusion C Br Br 160 Br Br Br Br 85-95 C 1 Cl 85 C 1 C 1 90 (d'c) CH 3 CH 3 CH 3 CH 3 C 2 H 5 C 2 H 5 O 3 *C 2 H 5 H H D D H H CH 3 C 2 H 5 Cl C 1 117-119 Cl Cl 103-104 Cl Br 132-134 (déc) C 1 C 1 103-105 C 1 Br 133-134 (dkc) C 1 C 1 93-94 C 1 Br 151-152 C 1 C 1 181-182 C 1 C 1 99-103 Lorsqu'on utilise un sel d'halométhylèniminium comme réactif tel qu'illustré dans le tableau II, il est quelquefois commode d'utiliser comme solvant l'amide correspondant, c'est-à-dire l'amide à partir duquel a été préparé le sel d'iminium Dans les cas o les amides correspondants sont solides, on peut utiliser l'hexaméthylphosphoramide ou la pyridine Ceci est illustré par les exemples 17 et 19 ci-dessous. Les chlorures d'imidoyle dérivés des formamides N-substitués sont aussi des réactifs commodes à cette fin Leur préparation est bien établie dans l'état de la technique tel qu'illustré dans le tableau III qui est repris de H Ulrich dans "The Chemistry of Imidoyl Halides", Plenum Press, New York, 1968, pages 74-76 Leur réaction avec les amines pour former des amidines est aussi bien êtablie,comme cela est illustré par S R, Sandler et W Karo dans "Organic Chemristry", Vol 12-III, A T Blomquist et H. Wasserman, éditeurs, Academic Press, New York, 1972, page 227. ID-NO 2-Ce 4- I/ , O \ R 2 R 3 E'C/mrr. (point de fusion 'C) __ __ _ 2 5 21 8 O 48 TABLEAU-III Chlorures d'imidoyle R 2 -r 3 c 6 Hll C 6 H 5 2-OEJC 6 H 4 2-FC 04 2-cic 6 H 4 2-B'C 6 % c 6 H il c 2 H 5 c 6 H il 2 CH 3 C 6 H 4 4-OE 3 C 6 H 4 4-'::"joe 6 " 4 n-C 4, c 6 H il C 21 % C" 3 c 2 H 5 -C 3 I-L 7 n-C 4 H. c 6 H il C"A H 5 COS -56/Oy O 4 ( 118-120) /0,1 /0,25 111-114/14 142-143/12 43-44/0,02 72-75/14 -41/0,001 67/0,3 -85/038 93-94/0,25 72-76/017 104-106/20 102/3 46-47/2 -92/13 47-48/1 52-54/1 -86/1 -112/1 ( 66-67) 128-130/1 -176/12 ( 40-41) 153-156/1 188-190/6 198-200/20 ( 61-63) CH 3 c 2 I,5. c Hjoe 2 cc 12 (CIY 2 oe n-C 4 H 9 (CA)CH (CH 3)3 c 6 H 10 ci c 6 HS 216-(CH 3)2 CO 3 2-CH 3 C 6 " 4 - 4-C"àoe 6 " 4 2-c 3 C H 4 4-CH 3 CH 4 4-C 1 C 6 H 4 4-Br C 6 H 4 4-OCH 3 OC 6 H 4 4-2 6 H 4 3,5-(O 2 N) 2 C 6 H 3 2,4,6-(c 3) 3 C 6 H 2 2,4 ( 02 N) 2 C 6 H 3 C H C 6 H C 6 Hs 4-Br C 6 H 4 C 6 H 5 4 '-2 NC 6 H 4 C 6 H C 6 H 5 4-ie 6 H 4 C 6 H 5 s ( 122-124) 174-177/10 141-144/1 ( 40-41) ( 66-67) ( 93-94) 183-185/3 ( 73-76) ( 40-42) ( 137-138) ( 132-134) ( 86-87) 164-165/1 ( 60-62) Les substances de formule I dans pement amidino non-substitué à l'azote: lesquelles A représente le grou- R 2 R 2 R 5 l f l H 2 N-C=N ou HN=C-N- sont préparées par réaction d'un iminoéther-amino-protégé avec la mitom y- cine C, un dérivé NT-substitué de celle-ci ou un dérivé N Ia-alkyle infé- rieur de l'un ou l'autre sous la forme anionique de la façon décrite ci- dessus Le groupe protecteur est alors éliminé de façon classique Le corps isopropylformimidate dans lequel le groupement amino est protégé par le groupement 8-triméthylsilyléthoxycarbonyle est un réactif pouvant convenir (exemple 13). Cl CO 2 CH 2 CH 2 Si(CH 3)3 (CH 3)2 CHOCH=NH-H Cl (CH 3)2 CHOCH=NCO 2 CH 2 CH 2 Si(CH 3)3 Lorsque A représente un groupement ( 1-alkyle inférieur-2 ( 1 H)- pyridinylidéne)amino ou le groupement de formule: ou C _W, (r 2)n N _'_%_ 1 R 7 les procédures préparatives impliquent la réaction de la forme anionique de la mitomycine C avec des sels cycliques d'halométhylèniminium ou des halogénures d'imidoyle dans lesquels R 2 et R 3 de la formule: R 7 R 2 l I R 3-N-C=N- sont réunis pour former un cycle Des réactifs pouvant convenir pour la réaction avec l'anion de la mitomycine C sont les iodures de 2-chloro-1- méthylpyridinium (exemple 16), chlorure de 2-chloro-4,5-dihydro-1-méthyl- 1 ( 3 H)-pyrrolidinium (tableau II), chlorure de N,N'-diméthyl-N,N'triméthy- lène-chloroformamidinium (exemple 28) et d'autres halogénures d'imidoyle cyclique dérivés des 2-azétidinones, 2-pyrrolidinones, 2-pipéridinones, et 2-azépinones De nouveau, lorsque R 7 ou R 9 du produit final représente l'hydrogène, on emploie un groupe protecteur tel que ci-dessus dans le sel d'halométhylèniminium cyclique intermédiaire. Les substances de formule I dans lesquelles A ou bien A et B à la fois représentent un groupe amidino de la formule: R 2 R 3 R 4 N-C=N- réagissent avec des amines primaires de la formule Rs NH dans laquelle Rs est choisi parmi les alkyles en CI à C 18 autres que les, alkyle:tertiaire', alkényle en C 1 à Cl,, alkynyle en C 1 à C Ie, haloalkyle en C 1 à C 18, hydro- xyalkyle en C 1 à C 1 s, cycloalkyle en C 4 à C 8, ou aryle ou aralkyle infé- rieur comportant chacun jusqu'à 12 atomes de carbone ou un groupement hétéroalycyclique ou hétéroaromatique possédant de 3 à 8 membres dans le cycle dont au moins 2 sont des atomes de carbone La seule limitation au choix de l'amine primaire autre que l'absence de groupements fonctionnels qui soient incompatibles avec les conditions de la réaction, est que l'atome d'azote amino soit attaché à un atome de carbone qui porte au noins un atome d'hydrogène et moins de deux groupemenets aryles Un composé organi- que liquide anhydre est employé comme milieu réactionnel et toute substance de cette sorte peut être employee pour autant qu'elle soit compatible avec les conditions de la réaction et ne participe pas à la réaction de façon nocive On emploie généralement un excès du réactif amine primaire sur une base moléculaire On préfère une température de réaction se situant dans la gamme d'environ -15 C à + 50 C Le produit résultant de cette réac- tion est un amino-9 a-méthoxymitosane-7-substitué, à savoir un dérivé de la mitomycine C portant un substituant tel que défini pour R 5 sur le groupement 7-amino De tels composés sont connus dans l'état de la technique pour posséder un degré important d'activité anti-tumeur sur les animaux expéri- mentaux. Quelques amines primaires, désignées par la formule R 6 NH 2, ont été trouvées incapables de déplacer le groupement 7-amidino selon le procédé décrit dans le paragraphe précédent R 6 représente&un radicalalkyle, cy- cloalkyle, cycloalkylakyle, aralkyle, ou hétéroalycyclique comportant de 4 à 18 atomes de carbone dans lesquels l'atome de carbone portant le groupe amino est un atome de carbone tertiaire ou un atome de carbone secondaire portant deux groupements aryles Certaines autres amines aliphatiques fai- blement basiques telles que la trifluoroéthylamine échouent aussi dans le déplacement du groupement 7-amidino Ces amines sont utiles pour trans- former un composé de formule I dans lequel A et B sont à la fois ledit groupe amidino de la formule: R 2 R 3 R 4 N-C=N- en un composé de formule I dans lequel A seulement représente ledit groupe- ment amidino Ces amines, tout en manquant de la capacité à déplacer le groupement 7-amidino, ont néanmoins la capacité de cliver le groupement amidino désigné par B en NH 2 pour procurer la fonction carbamido carac- téristique des mitosanes non-substitués L'amine elle-même peut servir de milieu réactionnel ou l'on peut employer un système de solvant tel que défini dans le paragraphe précédent Le présent procédé est, de préférence, mis en oeuvre dans une zone de réaction de 20 'C à 60 'C. Les points de fusion sont enregistrés sur un appareillage de point de fusion à capillaire de Thomas-Hoover et ne sont pas corrigés Les tem- pératures sont exprimées en degrés centigrades Des spectres (Nl IR) de résonnance magnétique nucléaire protonique sont enregistrés sur un spectro- mètre Varian XL 100 dans la pyridine-d 5 à moins que ce ne soit indiqué au- trement Des spectres (IR) infra-rouges sont obtenus avec un spectrophoto- mètre Beckman 4240 et l'échantillon est comprimé en pastille avec du bromure de potassium Les chiffres infra-rouges sont v max en cm-1 Les spectres d'UV visibles sont enregistrés sur un spectrophotomètre Varian- Cary 219. Une chromatographie en couche mince (tic) est mise en oeuvre sur des plaques de gel de silice prérevêtues de 0,25 mm en utilisant la lumière UV comme agent de visualisation Une chromatographie flash est mise en oeu- vre en utilisant de la silice Woelm ( 32-63 pm) Les solvants sont évaporés sous pression réduite et à moins de 50 'C. EXEMPLE 1 Composé V 7-J(diméthylamino)méthyl ène J amino-N 1 o-(diméthylamino)- méthyl ène-9 a-méthoxymi tosane Composé VI 7-I (diméthylamino)méthylènelamino-Nio-(diméthylamino)- méthylène-N a-formyl -9 a-méthoxymitosane O I 01 NH 2 C H 2 02 CH NC NN I (CH 302) CN(CH 3) 2 Mitomycine C O O 0 fi 0 Il (C 3) 2 NN, H 2-c H =CHN:(CH 3)2(CH 3)2 NCH=N, H 2 N: (CH> 2 +C HOCH 3 CH + NCH l, o __l o JLLIC V VI A une suspension de 500 m 9 ( 1,50 m M) de mitomycine C dans 25 rml ', chloroforme, on ajoute au total 9,6 ml (par portion de 2,4 ml à 0, 18, 21 et 23 heures) de N,N'-diméthylformamide diméthylacétal et la suspension est agitée à environ 50 pendant 41 heures Par évaporation du solvant et du réactif en excès sous pression réduite, on obtient un résidu vert sombre; une tic (chlorure de méthylène/méthanol 20/1) révèle l'absence de mitomycine C et la présence de deux nouveaux composants verts (Rf = 0,16 et 0,22) Le composant majeur (Rf = 0,16) est isolé par chromatographie flash en utilisant comme éluant un mélange chlorure de méthylène/méthanol /1, sous la forme d'un solide vert ( 340 mg, 51,5 %) qui, par dissolution dans le diéthyléther suivie par une addition d'hexane donne le composé V sous la forme d'une poudre amorphe vert sombre. NMR (pyridine d 5,6); 2,18 (s, 3 H), 2,70 (bs, 1 H), 2,76 (s, 3 H), 2,82 (s, 3 H), 2,86 (s, 6 H), 3,22 (s, 3 H), 3,30 (bs, 1 H), 3,60 (d, J= 12 Hz) , 4,12 (dd, 1 H, d= 10, 4 Hz), 4,43 (d, 1 H, J= 12 Hz), 4,90 (bs, 1 H), 5, 10 (t, 1 H, J=l O Hz) ,52 (dd, 1 H, J= 10, 4 Hz), 7,85 (s, 1 H), 8,64 (s, 1 H). IR(K Br) Vmax, cm-': 3300, 2930, 1675, 1620, 1545, 1230, 1060. UV(H 20) àmax' nm: 390 et 244. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 2 l H 28 N 605 et on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 56,71 6,08 18,90 trouvées 56,20 6,28 17,88 Le composant mineur (Rf = 0,22), isolé ( 180 mg, 25,35 %) sous la forme d'un solide amorphe par précipitation dans le diéthyléther et l'he- xane est identifié comme étant le composé VI. NMR (pyridine d 5,6); 2,20 (s, 3 H), 2,60-3,00 ( 3 singulets, 12 H), 3,2 (s, 3 H), 3,65 (m, 2 H), 4,04 (d, 1 H, J= 4 Hz), 4,16 (dd, 1 H, J= 12, 4 Hz), 4,60 (d, 1 H, J= 13 Hz), 4,86 (t, 1 H, J= 12 Hz), 4,90 (s, 1 H), ,48 (dd, 1 H, J= 12, 4 Hz), 7,90 (s, 1 H), 8,64 (s, 1 H), 9,06 (s, 1 H) IR(K Br) Vmax' cm-1: 2490, 2860, 1698, 1630, 1600, 1540, 1250, 1060. UV(H O) Xmax' nm: 390 et 244. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 22 H 28 N 606 et on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 55,89 5,93 17,78 trouvées 55,41 5,96 16,99 Par séjour à la température ambiante pendant plus de 10 heures, des solutions des composés V et VI, que ce soit dans l'acétate d'éthyle ou dans le N,Ndiméthylformamide diméthylacétal, révèlent par tlc que le composé VI (Rf = 0,22) s'est transformé en composé V (Rf = 0,16) pour donner une solu- tion hautement enrichie en ce dernier. Les exemples 2 à 7 sont mis en oeuvre selon la méthode de l'exemple 1 avec les modifications indiquées ci-dessous pour préparer divers autres composés suivant la présente invention. EXEMPLE 2 Composé VII 7-1 (diisopropylamnino)méthylènelamino-N 1 o-(diisopropylamino)- méthylène-9 a-méthoxymitosane Une suspension de mitomycine C ( 200 mg, 0,6 m M) dans le N,N-diiso- propylformamide diéthylacétal ( 3 ml) est chauffée sous agitation à 53 C pendant 15 heures Le mélange réactionnel est versé dans 50 ml d'eau et extrait avec de l'acétate d'éthyle ( 3 x 30 ml) L'extrait organique ras- semblé est séché (Na 2 SO 4) et évaporé, ce qui donne un sirop vert sombre; une tlc (chlorure de méthylène/méthanol 10/1) révèle un constituant majeur vert à Rf = 0,43 avec des impuretés plus rapides (Rf = 0,45-0,50) Le com- posant majeur VII est isolé comme solide vert sombre ( 156 mg, 46,8 %) par deux procédures de chromatographie flash en utilisant un mélange chlo- rure de méthylène/méthanol 20/1 comme solvant d'élution. NMR (CD C 13,6): 1,10-1,50 ( 5 singulets, 24 H), 1,94 (s, 3 H), 2,78 (dd, 1 H, J= 4, 2 Hz), 3,05 (d, 1 H, J= 4 Hz), 3,22 (s, 3 H), 3,60 (m, 5 H), 3, 75 (dd, 1 H, J= 10, 4 Hz), 4,24 (d, 1 H, J= 12 Hz), 4,56 (t, 1 H, J=l O Hz), 4,88 (dd, 1 H, J= 10, 4 Hz), 7,83 (s, 1 H), 8,67 (s, 1 H). IR (K Br) vmax', cm-': 3320, 2990, 2940, 1680, 1630, 1600, 1550, 1235, 1060. UV(Me OH) Xmax' nm: 246 et 393. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 29 H 44 N 605 et on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 62,55 7,91 15,10 trouvées 62,03 7,80 14,60 EXEMPLE 3 Composé XIV 7-1 (diméthylamino)méthylènelamino-N'O-(diméthylamino)- méthylène-9 a-méthoxy-N 1 a-méthylmitosane Dans cet exemple, la porphyromycine (N 1 a-méthylmitomycine C), 130 mg, p,37 m M) en tant que matière première est substituée dans la réaction avec 0,8 ml ( 1,5 m M) de N,N-diméthylformamide diméthylacétal en utilisant comme solvant réactionnel 10 ml-de chloroforme et 2 ml de méthanol, la durée de la réaction étant de 50 mn à 50 C Le composé XIV est obtenu sous forme de sirop après évaporation du solvant réactionnel; on le purifie par chroma- tographie flash en utilisant 20 g de gel de silice et un mélange chlorure de méthylene/méthanol ( 20/1) comme solvant d'élution. NMR (pyridine ds,a): 2,22 (bs, 4 H), 2,28 (s, 3 H), 2,70 (d, 1 H, J= 4 Hz) , 2,80 (s, 3 H), 2,84 (s, 3 H), 2,90 (s, 6 H), 3,20 (s, 3 H), 3,52 (dd, 1 H, J= 2, 12 Hz), 4,10 (dd, 1 H, J= 4, 11 Hz), 4,38 (d, 1 H, H= 12 Hz), 4, 92 (t, 1 H, J= 11 Hz), 4,96 (bs, 1 H), ,46 (dd, 1 H, J= 4, 11 Hz), 7,86 (s, 1 H), 8,70 (s, 1 H). Rf = 0,53, chromatographie en couche mince avec un mélange chlorure de méthylene/méthanol 9/1. IR (K Br) Vmax, cm-': 2930, 1680, 1620, 1545, 1230, 1115. UV(Me OH) Xmax' nm: 386 et 243. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 22 H 30 N 605 et on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 57,60 6,55 18,33 trouvées 57,11 6,11 17,99 Cette façon de procéder donne le composé XV, 7-amino-N 1 -diméthyla- minométhylène-9 a-méthoxy-N 1 a-méthylmitosane, en tant que sous-produit avec un rendement de 30 %, tic Rf = 0,40 (chlorure de méthylene/méthanol 9/1). NMR (pyridine ds,6): 2,02 (s, 3 H), 2,16 (dd, 1 H, J= 2, 5 Hz), 2,25 (s, 3 H), 2,66 (d, 1 H, J= 5 Hz), 2,76 (s, 3 H), 2 N 86 (s, 3 H), 3,18 (s, 3 H), 3,51 (dd, 1 H, J= 2, 12 Hz), 4,08 (dd, 1 H, J= 4, 10 Hz), 4,50 (d, 1 H) J= 10 Hz), 4,90 (t, 1 H, J= 10 Hz), 5,05 (bs), ,43 (dd, 1 H, J= 4, 10 Hz), 8,70 (s, 1 H). IR (K Br) Vmax' cm-r: 3430, 3330, 3270, 2940, 2960, 1690, 1625, 1553, 1230, 1125. UV(Me OH) Xmax' nm: 358, 244 et 216 A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule C 1 g H 25 N 505 et on obtient les valeurs suivantes: C H N * calculées 56,53 6,20 17,38 trouvées 54,68 6,13 16,59 EXEMPLE 4 Composé IX 9 a-méthoxy-7-1 ( 1-pi péridinylamino)méthylè nelamino-N lo ( 1- pipéridinylméthyl ène)mi tosane De la N-(diéthoxyméthyl)pipéridine, 3 ml, et de la mitomycine C, mg, sont portées en réaction à 60 C pendant 2,5 heures dans une solu- tion de chloroforme ( 3 ml) Le produit est obtenu avec un rendement de 27,6 %, tic Rf = 0,20 (chlorure de méthylène/méthanol 20/1). NMR (pyridine ds,6): 1,38 (bs, 12 H), 2,20 (s, 3 H), 2,80 (bs, 1 H), 3,24 (s, 3 H), 3,00-3,40 (m, 5 H), 3,40-3,80 (m, 5 H), 4,13 (dd, 1 H, J= 10, 4 Hz), 4,45 (d, 1 H, J= 12 Hz), 4,90 (bs, 2 H), 5,12 (t, 1 H, J=l O Hz), , 56 (dd, 1 H, J= 10, 4 Hz), 7,87 (s, 1 H), 8,70 (s, 1 H). IR (K Br) vmax' cm-': 3300, 2950, 2870, 1680, 1630, 1610, 1550, 1200, 1070. UV(H 20) Àmax' nm: 394 et 246. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 27 H 36 N 605 et on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 61,79 6,87 16,02 trouvées 61,01 6,85 15,34 Le dérivé N 1 aformylé de la substance précédente, le composé VIII Nla-formyl-9 a-méthoxy-7-1 ( 1-pipéridinylamino)méthylènelamino-N -( 1pipé- ridinylméthylène)mitosane, est obtenu en tant que constituant majeur, rendement 43 %, tic Rf = 0,25 (chlorure de méthylène/méthanol 20/1). NMR (pyridine d 5,6): 1,38 (bs, 12 H), 2,23 (s, 3 H), 3,00-3,40 (m, 4 H), 3,23 (s, 3 H), 3,40-3,90 (m, 6 H), 4,07 (d, 1 H, J= 4 Hz), 4,18 (dd, 1 H, J= 11, 4 Hz), 4,63 (d, 1 H), 4,90 (t, 1 H, J=ll Hz), 4,94 (bs, 1 H), ,54 (dd, 1 H, J= 11, 4 Hz), 7,94 (s, 1 H), 8,71 (s, 1 H), 9,08 (s, 1 H). IR (K Br) Vmax' cm-1: 2490, 2860, 1698, 1630, 1600, 1540, 1250, 1060. UV (H 20) Àmax' nm: 394 et 247. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 28 H 36 N 606 EXEMPLE 5 Composé X 9 a-méthoxy-7-1 ( 1-morpholino)méthylèneamino-N'O-( 1-morpholino- méthylènemitosane Une suspension agitée de mitomycine C ( 200 mg, 0,6 m M) , dans le chloroforme ( 10 ml) et la N-diéthoxyméthyle morpholine ( 4 ml) est chauffée à approximativement 53 C pendant 42 heures Le mélange réactionnel est concentré en un sirop sous vide poussé Une séparation par chromatographie de flash brute (chlorure de méthylène/méthanol 25/1) est effectuée pour isoler les composants colorés en vert de l'excès des réactifs Les compo- sants verts rassemblés sont dissous dans 20 ml d'acétate d'éthyle et lavés à l'eau ( 3 x 20 ml) Les eaux de lavage combinées sont réextraites avec de l'acétate d'éthyle ( 3 x 15 ml) Toutes les fractions d'acétate d'éthyle sont rassemblées, séchées (Na 2 SO 4) et évaporées en un sirop vert sombre, leur tic (chlorure de méthylène/méthanol 10/1) révèle un composant vert distinct à Rf = 0,33 avec plusieurs impuretés vertes (Rf = 0,35 à 0,40) Par une chromatographie flash, le composant de Rf = 0,33 est isolé ( 130 mg, 56,8 %) sous la forme d'un solide amorphe vert sombre qui est caractérisé comme étant le composé X. NMR (CDC 13,6): 1,91 (s, 3 H), 2,80 (bs, 1 H), 3,13 (d, 1 H, J= 2 Hz), 3,22 (s, 3 H), 3,30-3,94 (m, 18 H) , 4,20 (d, 1 H, J= 12 Hz), 4,40 (bs, 1 H), 4,54 (t, 1 H, J= 10 Hz), 4,88 (dd, 1 H, J= 10 Hz, 4 Hz), 7,74 (s, 1 H), 8,51 (s, 1 H). IR (K Br) Vmax' cm-1: 3300, 2970, 2920, 1680, 1625, 1550, 1235, 1070. UV(Me OH) À max nm: 386 et 244. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 25 H 32 N 607 et on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 56,78 6,06 15,90 trouvées 53,07 6,03 15,37 EXEMPLE 6 Composé XVI 7-amino-N' -diméthylaminométhylène-9 a-méthoxymitosane De la mitomycine C, ( 200 mg, 0,6 m M) est dissoute dans 10 ml de chloroforme et l'on ajoute 2 ml de méthanol, du N,N-diméthylformamide diméthylacétal ( 0,64 ml, 4,8 m M), et la solution est agitée à approxima- tivement 50 C pendant 50 minutes Une chromatographie en couche mince (chlorure de méthylène/méthanol 90/10) révèle une quantité trace de mito- mycine C n'ayant pas réagi (Rf = 0,22) et deux nouveaux composants (Rf= 0, 42, et 0,33 respectivement) La solution est concentrée sous pression réduite en un sirop que l'on passe en chromatographie flash ( 25 9 de gel de silice) en utilisant comme solvant d'élution un mélange chlorure de méthylène/ méthanol ( 20/1). Le composant plus rapide (Rf = 0,42) est isolé sous la forme d'un solide amorphe vert ( 60 mg, 22,5 %) et identifié comme étant le composé V par son spectre NMR (pyridine d 5). Le composant bleu majeur (Rf = 0,33) est isolé sous la forme d'un solide amorphe ( 148 mg, 63,3 %) et caractérisé comme étant le composé XVI. Un échantillon analytique est obtenu par précipitation dans le chlorure de méthylène et le n-pentane. NMR (pyridine d 5,6): 2,02 (s, 3 H), 2,76 (bs, 4 H), 2,86 (s, 3 H), 3,21 (s, 3 H) 3,28 (d, 1 H, J= 4 Hz), 3,62 (dd, 1 H, J= 2, 13 Hz), 3,94 (bs), 4,14 (dd, 1 H, J= 4, 12 Hz), 4,56 (d, 1 H, J= 13 Hz) ,12 (t, 1 H, J=O 10 Hz), 5,52 (dd, 1 H, J= 4, 10 Hz). IR (K Br) Vmax, cm-': 3430, 3320, 3280, 2930, 1675, 1615, 1650, 1230, 1115. UV (H 20) Àmax' nm: 364, 244 et 219. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 18 H 23 N 505 et on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 55,48 5,91 17,98 trouvées 54,70 6,14 17,95 EXEMPLE 7 Composé XVII 7,9 a-diméthoxy-N 1 O-diméthylaminométhylènemitosane De la mitomycine A ( 170 mg) est substituée à la mitomycine C de l'exenple 1 et on fait réagir avec du N,N-diméthylformamide diméthylacétal ( 0,6 ml) dans une solution chloroforme/méthanol ( 10/1) à 50 C pendant une heure Le produit désiré est obtenu avec un rendement de 48 %, tlc Rf = 0,50 (chlorure de méthylène/méthanol 9/1). NMR (pyridine d 5,6): 1,83 (s, 3 H), 2,76 (bs, 4 H), 2,86 (s, 3 H), 3,22 (s, 3 H), 3,28 (d, 1 H), 3,56 (dd, 1 H, J= 2, 13 Hz), 4,02 (s, 3 H), 4,10 (dd, 1 H, J= 4, 10 Hz), 4,24 \d, J= 1 ',z'j, J,10 (t, 1 H, J=O 10 Hz), , 50 (dd, 1 H, J= 4, 10 Hz), 8,67 (s, 1 H). IR (K Br) Vmax, cm-': 3300, 2930, 1675, 1655, 1625, 1500, 1235, 1120. UV (H 20) Xmax' nm: 530, 316 et 244. A l'analyse, on conctate que le produit obtenu présente la formule: C 19 H 24 N; 06- et on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 56,39 5,94 13,85 trouvées 56,51 5,92 13,71 Le dérivé N 1 aformylé du composé XVII est obtenu en tant que composé XVIII, 7,9 adiméthoxy-N'O-diméthylaminométhylène-N a-formylmitosane avec un rendement de 16,5 %, tic Rf = 0,61 (chlorure de méthylène/méthanol 9/1) . NMR (pyridine d 5,a): 1,88 (s, 3 H), 2,76 (s, 3 H), 2,85 (s, 3 H), 3,54 (d, 1 H), 3,62 (bs, 1 H), 4,05 (s, 3 H), 4,05 (bs, 1 H), 4,14 (dd, 1 H, J= 4, 12 Hz), 4,40 (d, 1 H, J= 13 Hz), 4,86 (t, 1 H, J= 12 Hz), ,42 (dd, 1 H, J= 4, 12 Hz), 8,66 (s, 1 H), 9,08 (s, 1 H). EX 4 EMPLE 8 Composé XIX 7-(diméthylaminométhylène)amino-9 a-méthoxymitosane Au composé V ( 600 mg, 1,35 m M)) dissous dans le méthanol ( 10 ml) on ajoute de l'aminodiphénylméthane ( 2,2 ml, 10,8 m M) et la solution qui en résulte est agitée à 54 C pendant 4 heures L'avancement de la réaction est surveillé par tic (chlorure de méthylène/méthanol 90/10) Au bout de 4 heures, le matériau de départ (Rf = 0,35) est disparu et, à la place, il apparaît une nouvelle zone verte importante (Rf = 0,29) La solution est concentrée sous pression réduite et le sirop qui en résulte est passé en chromatographie de flash ( 25 g de gel de silice en utilisant un mélange chlorure de méthylène/méthanol 20/1 comme éluant Les fractions contenant le composant vert (Rf = 0,29), sont rassemblées, séchées (Na 2 SO 4) et con- centrées Le composé XIX est obtenu sous la forme d'un solide amorphe ( 215 mg, 41 %). NMR (pyridine, d 5,6): 2,18 (s, 3 H), 2,70 (bs, 1 H), 2,80 (s, 3 H), 2,88 (s, 3 H), 3,08 (bs, 1 H), 3,24 (s, 3 H), 3,56 (bd, 1 H, J= 12 Hz), 4,00 (dd, 1 H), 4,44 (d, 1 H, J= 12 Hz), 5,06 (t, 1 H, J=O 10 Hz), ,56 (dd, 1 H, J= 10, 4 Hz), 7,58 (bs, 2 H), 7,88 (s, 1 H). IR (K Br) Vmax, cm-': 3300-3450, 2960-2910, 1715, 1620, 1535, 1050. UV (HO 20) Amax' nm: 390 et 226. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 1 H 23 N 505 et on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 55,48 5,91 17,98 trouvées 54,83 5,67 16,90 Lorsque le dérivé N Ia-formylé, composé VI, est substitué en tant que matériau de départ au composé V dans l'exemple 8, mais en utilisant la température ambiante pendant 20 heures comme condition de la réaction, on produit le composé XIX sensiblement de la même façon et avec le même rendement. EXEMPLE 9 Composé XX 7-(diméthylaminométhylène)amino-9 a-méthoxy-N'a-méthylmitosane Le composé XIV, 1 g ( 2,18 m M), est dissous dans du méthanol ( 20 ml) on ajoute de l'aminodiphénylméthane ( 3, 5 ml, 17,18 m M) et la solution qui en résulte est agitée à la température ambiante pendant 5 heures et à 40 C pendant 5 heures Une chromatographie en couche mince (CH 2 C 12/Me OH 90/10) du mélange réactionnel révèle que presque tout le matériau de départ (Rf = 0,55) a été consommé et qu'une nouvelle zone verte importante (Rf= 0,48) est apparue Une élaboration semblable à celle décrite dans l'exemple 8 procure le composé XX sous la forme d'un solide amorphe ( 350 mg) On effec- tue une purification supplémentaire par chromatographie flash ( 7 g, gel de silice), en utilisant CH 2 C 12/Me OH ( 250 ml, 96/4 v/v) et la précipitation du solide qui en résulte (Rf = 0,48) dans le chlorure de méthylène ( 5 ml) et l'hexane ( 50 ml) donne le composé XX analytiquement pur ( 314 mg, 35,7 %) sous la forme de solide. NMR (CD C 13,6): 1,93 (s, 3 H), 2,26 (bs, 1 H), 2,26 (s, 3 H), 3,06 (s, 3 H), 3,08 (bs, 1 H) 3,10 (s, 3 H), 3,20 (s, 3 H), 3,46 (bd, 1 H, J= 12, 1 Hz), 3,58 (dd, 1 H, J= 4, 10 Hz), 4,17 (d, 1 H, J= 12 Hz), 4,38 (t, 1 H, J=l O Hz), 4,68 (m, 2 H), 4,76 (dd, 1 H, J= 4, 10 Hz), 7,72 (s, 1 H). IR (K Br) vla 3 x, cm-1: 3440, 3190, 3020, 2940, 2910, 1725, 1630, 1550, 1055. UV (M e i) Amax, nm: 386 et 231. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule Clg H 25 N 505 et on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 56,53 6,20 17,36 trouvées 53,90 5,13 15,81 EXEMPLE 10 Composé XI 7-(n-propyl)amino-9 a-méthoxymitosane Le composé V ( 330 mg, 0,74 m M), est dissous dans le méthanol anhy- dre ( 10 ml) et on y ajoute de la n-propylamine ( 1,0 ml) Le mélange réac- tionnel est agité pendant 6 heures à la température ambiante et pendant 16 heures à environ O à 4 Le solvant et le réactif en excès sont évapo- rés sous pression réduite et le résidu est passé en chromatographie flash en utilisant le gel de silice comme adsorbant Le composant bleu (Rf = 0, 40) obtenu par élution avec un mélange chlorure de méthylene/méthanol' 30/1 est reprécipite dans le chlorure de méthylène avec de l'hexane pour donner le composé XI sous la forme d'une poudre grise amorphe ( 125 mg, 44,5 %). NMR (pyridine do,â): 0,80 (t, 3 H) 1,42 (m, 2 H) 2,11 (s, 3 H) 2,74 (bs, 1 H) 3,12 (bs, 1 H) 3,22 (s, 3 H), 3,36 (g, 2 H), 3,60 (d, 1 H, J= 12 Hz), 3,96 (dd, 1 H, J=ll Hz, 4 Hz), 4,54 (d, 1 H, J= 12 Hz), ,00 (m, 3 H), 5, 36 (dd-, 1 H, J= 11, 4 Hz), 6,90 (t, 1 H). IR (K Br) vmax, cm-': 3440, 3300, 2960, 2940, 1715, 1630, 1600, 1550, 1510, 1220, 1060. UV (H 20) Xmax, nm: 372 et 222. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 18 H 24 N 405 et l'on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 57,40 6,38 14,88 trouvées 57,28 6,41 14,-08 EXEMPLE 11 Composé XII 7-( 2-hydroxyethyl)amino-9 a-méthoxymitosane Le composé V ( 330 mg, 0,74 m M) est dissous dans le méthanol anhy- dre ( 5 ml) et l'on ajoute de l'ethanolamine ( 2 ml)i Le mélange réactionnel est agité à la température ambiante pendant 2 heures et ensuite dilué à l'eau ( 50 ml) et extrait avec de l'acétate d'éthyle ( 5 x 60 ml) Les extraits à l'acétate d'éthyle rassemblés sont séchés (Na 2 SO 4) et concentrés en un résidu pourpre bleuâtre qui, par chromatographie sur colonne en uti- lisant 10 % de méthanol dans le chlorure de méthylène et par concentration des fractions rassemblées contenant le composé bleu, donne 105 mg ( 37 %) de composé XII sous la forme d'un solide amorphe. NMR (pyridine d 5,6): 2,14 (s, 3 H), 2,81 (bs, 1 H), 3,18 (d, 1 H, J= 4 Hz), 3,24 (s, 3 H), 3,65 (dd, 1 H, J= 2, 12 Hz), 3,70-4,20 (m, 5 H), 4,52 (d, 1 H, J= 13 Hz), 4,96 t, 1 H, J= 12 Hz), 7,38 (t, 1 H), 7,58 (bs). IR (K Br) Vmax, cm-1: 3300-3500, 2930, 1710, 1630, 1600, 1540, 1510, 1200, 1055. UV (H 20) Àmax, nm: 371 et 221. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 17 H 22 N 406 et on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 53,92 5,82 14,80 trouvées 51,20 5,88 14,80 EXEMPLE 12 Composé XIII 7-12-benzylthioéthyllamino-9 a-méthoxymitosane Le composé V ( 200 mg, 0,45 m M) est dissous dans du méthanol ( 2 ml), on ajoute du Sbenzyl-2-aminoéthanethiol ( 0,5 ml) et la solution est agitée à la température ambiante pendant 16 heures Le résidu obtenu par évapora- tion du solvant à pression réduite est passé en chromatographie de flash ( 45 g, gel de silice) en utilisant un mélange de 6 % de méthanol/chlorure de méthylène ( 400 mll comme éluant Le composant bleu (Rf = approximativement 0,5 dans 10 % Me OH/CH 2 C 12) est isolé sous la forme d'un solide amorphe ( 65 mg, 29,8 %) Ces données spectrales (NMR, IR, UV et spectres de masse) sont en accord avec la structure assignée. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 24 H 28 N 4055 et l'on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 59,49 5,82 11,56 trouvées 59,72 5,94 11,08 EXEMPLE 13 H 0 OCO Nl H 2 hl 2 Préparation de NH 2 -O C 3 CH 3 N o l "N (A) A une solution de chlorhydrate d'isopropylformimidate ( 1 mol) dans le diméthylformamide (DMF) 2 ml, on ajoute lentement de la diisopropyléthylamine ( 2,1 mmol) à O C sous une atmosphère d'azote. A la solution qui en résulte, on ajoute goutte à goutte du chloro- formate de e-triméthylsilyléthyle à O C La solution claire qui en résulte est appelée solution A. (B) Une solution de mitomycine C ( 1 mmol) dans 5 ml de DMF est ajoutée à une suspension d'hydrure de sodium ( 1,5 mmol) dans 3 ml de DMF. La solution est agitée à la température ambiante pendant 20 minutes et refroidie à -40 O '-50 C, avant l'addition de la solution A (ci- dessus) La solution est maintenue à -40 C pendant une heure et en- suite on la laisse se réchauffer jusqu'à la température ambiante. Après un séjour à la température ambiante pendant approximativement 6 à 18 heures, le mélange réactionnel est dilué avec CH 2 C 12 et filtré Le résidu solide obtenu après évaporation du filtrat est passé en chromatographie sur gel de silice pour isoler le composé du titre protégé par un amidino. (C) Le groupe protecteur amidino de l'intermédiaire précédent est éliminé par la façon de procéderpublié de Carpino et Tsao (J Chem Soc. Chem Comm 358 ( 1978) pour donner le composé du titre non-amidino- substitué. EXEMPLE 14 H O x___ J Préparation de h NCH 3 Me N (A) A une solution de chlorhydrate d'isopropylformimidate ( 1 mmol) dans le DMF ( 2 ml) on ajoute lentement de la diisopropyléthylamine ( 21 mmol) à O C sous une atmosphère d'azote A la solution qui en résulte on ajoute de l'iodure de méthyle àO C La solution qui en résulte est appelée solution B. (B) La façon de procédé décrite dans l'Exemple 13 (B) est répétée avec substitution de la solution B à la solution A pour obtenir le com- posé du titre. EXEMPLE 15 N(CH 3)2 - NH " CCCNH 2 ( 1) Na H 2 N^ EOCHDMF H |l CH N( X 2) m 3 N(CH 3) 2 N=CH Cl C 11 Composé XIX Mitomycine C Une solution 0,5 M de chlorure de N,Ndiméthylchlorométhylèniminium est préparée par addition goutte à goutte de chlorure d'oxalyle ( 1,7 g, 12,5 mmoles) à O C à une solution de DMF ( 915 mg, 12,5 mmoles) dans 25 ml de CH C 13, que l'on fait suivre par une agitation à la température ambiante pendant 30 minutes Séparément, une solution de mitomycine C ( 334 mg, lmmole) dans 5 ml de DMF est ajoutée à une suspension de Na H ( 36 mg, 1,5 mmole) dans 3 ml de DMF La solution est agitée à la température ambiante pendant 20 minutes et refroidie à -40 O -50 C et la solution ci-dessus de chlorure de N,N-diméthylchlorométhylèniminium ( 3 ml, 1,5 mmole) est alors ajoutée. Du Na H supplémentaire ( 18 mg, 0,75 mmole) est ajouté après 10 minutes d'agi- tation à -40 C La solution est maintenue à -40 C pendant une heure et en- suite diluée avec CH 2 C 12 et filtrée Le résidu obtenu après évaporation du filtrat est passé en chromatographie par chromatographie en couche mince tic/gel de silice ( 10 % CH 30 H-CH 2 Cl comme éluant) Une extraction dans la bande verte majeure donne 78 mg ( 43 % par rapport à la mitomycine C récupé- rée) d'un solide amorphe dont le spectre NMR et le comportement tlc sont identiques à ceux du composé XIX préparé dans l'exemple 8 L'extraction de la bande pourpre donne 150 mg de mitomycine C. EXEMPLE 16 7 ( 1-méthyl-2-(H)-pyridinylidène)amino-9 a-méthoxymitosane H 2 q N f, o 1 i ( 1) Na H DMF ( 2) 1 ci ai 3 A un mélange de mitomycine C ( 242 mg, 0, 725 mmole) et de Na H ( 43,5 mg, 1,81 mmole) on ajoute 4 ml de DMF Après agitation pendant 15 minutes, on ajoute de l'iodure de 2-chloro-1méthylpyridinium ( 370 mg, 1,45 mmole) à la température ambiante La solution est agitée pendant 1,5 heure et ensuite diluée avec de l'acétate d'éthyle (Et O Ac) et filtrée Le résidu obtenu après évaporation du filtrat est passé en chromatographie (tlc) sur gel de silice ( 5 % CH 30 H-CH 2 C 12 comme éluant) Le produit mineur ( 12 mg) est le composé XIX(exemple 8) Le composé majeur ( 75 mg) est encore purifié par tic gel de silice ( 10 % CH 30 H-CH 2 C 12) pour donner 6 mg ( 2 %) du composé du titre. NMR (pyridine d 5,6): 2,11 (s, 3 H), 2,76 (bs, 1 H) 3,20 (m, 1 H), 3,26 4, 01 ,10 ,99 6,95 (s, 3 H), 3,49 (s, 3 H), 3,63 (dd, 1 J, J= 13,1 Hz), (dd, 1 H, J= 11, 4 Hz), 4,51 (d, 1 H, J= 13 Hz), (t, 1 H, J= 10 Hz), 5,43 (dd, 1 H, J= 10, 4 Hz), (dt, 1 H, J= 9, 2 Hz), 6,09 (dd, 1 H, J= 9, 1 Hz), (dd, 1 H, J= 9, 7, 2 Hz), 7,32 (dd, 1 H, J= 7, 1 Hz). EXEMPLE 17 7 (méthylalnaminométhylène)aminoj-9 a-méthoxymitosane H 2 N qoec MH 2 O cx H 3 C 13 N o ( 1) Na H ) ( 2) CH 3 N=C 1 De l'hydrure de sodium ( 12 mg, 0,5 mmole) est ajouté sous atmosphère d'azote à une solution de mitomycine C ( 167 mg, 0,5 mmole) dans 2 ml d'he- xaméthylphosphoramide A cette solution, on ajoute du chlorure de N-méthyl- formimidoyle ( 19 mg, 0,25 mmole), N H Bosshard et H Zollinger, Helv. Chim Acta, 42, 1659 ( 1959) La solution est agitée à la température ambiante pendant 10 minutes et l'on ajoute ensuite du Na H ( 6 mg, 0,25 mmole) et du chlorure de N-méthylformimidoyle ( 9,5 mg, 0,13 mmole) Apres agita- tion pendant 6 à 12 heures, la solution est diluée avec de l'acétate d'é- thyle et filtrée L'évaporation du solvant suivie par une purification chromatographique du résidu donne le composé du titre. EXEMPLE 18 Composé XXI 9 a-méthoxy-7-( 1-morpholinométhylène)aminomitosane H 0 2 c H 3 O N H A de la mitomycine C ( 600 mg, 1,8 m M) en suspension dans du chloro- forme ( 3 ml), on ajoute de la 4-diéthoxyméthylmorpholine ( 12,5 ml) et la suspension qui en résulte est chauffée à 58 C pendant 48 heures A la fin des 48 heures, une tic ( 20 % Me OH dans CH 2 C 12) révèle que la réaction est incomplète La solution est concentrée sous pression réduite et au si- rop qui en résulte on ajoute de l'eau ( 100 ml) Apres agitation pendant minutes, la solution vert foncé est extraite avec du chlorure de méthy- lène ( 5 x 50 ml) et l'extrait rassemblé est séché et concentré en un sirop. A ce sirop, dans le méthanol ( 20 ml), on ajoute de l'aminodiphénylméthane ( 6,5 ml) et la solution qui en résulte est agitée à 30 à 35 C pendant 18 heures Une chromatographie en couche mince ( 20 % Me OH dans CH 2 C 12) révèle une zone verte majeure en même temps qu'une zone pourpre mineure plus lente. La solution est concentrée sous pression réduite et le sirop qui en résulte est purifié par la technique habituelle de chromatographie flash pour obte- nir le composé du titre sous la forme d'un solide amorphe vert sombre. Un échantillon analytique est obtenu par précipitation dans une solution de chlorure de méthylène avec du n-hexane. NMR (pyridine ds 5,): 2,16 (s, 3 H, 2,76 (dd, 1 H, J= 5 et 1 Hz), 3,16 (d, 1 H, J= 5 Hz), 3,24 (s, 3 H), 3,28-3,80 (m, 10 H), 4,02 (dd, 1 H, J= 10 et 4 Hz), 4,40 (d, 1 H, J= 12 Hz), ,06 (t, 1 H, J=l O Hz), 5,46 (dd, 1 H, J= 10 et 4 Hz), 7,90 (s, 1 H). IR (K Br) Vmax, cm-1: 3360, 3280, 2960, 2920, 1720, 1600, 1520, 1230, 1050. UV (Me OH)tmax,: 384 et 234. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 2 o H 25 N 506 et l'on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 55,64 5, 80 16,23 trouvées 55,07 5,55 15,88 EXEMPLE 19 Composé XXII 7-( 1-pyrrolidinylméthylène)amino-9 a-méthoxymitosane ( 1) Na H ( 2) 3 c H 10 ami C"IC D Une solution 0,5 molaire de chlorure de pyrrolidinylchlorométhylè- niminium est préparée par addition goutte à goutte de chlorure d'oxalyle ( 3,17 g, 25 mmoles) à O C à une solution de 1-formylpyrrolidine ( 2,48 g, 25 mmoles) dans 50 ml de CH C 13 que l'on fait suivre par une agitation à la température ambiante pendant 30 minutes Séparément, de l'hydrure de so- dium ( 24 mg, 1 mmole) est ajouté sous une atmosphère d'azote à une solution de mitomycine C ( 334 mg, 1 mmole) dans 3 ml de 1formylpyrrolidine Après minutes d'agitation à la température ambiante, la solution est refroidie à -40 C -50 C et la solution de sel d'iminium préparée ci-dessus ( 1 mg, 0,5 mmole) est ajoutée A ce mélange, on ajoute successivement, à 10 minu- tes d'intervalle, 12 mg ( 0,5 mmole) de Na H, 0,5 ml ( 0,25 mmole) de la solu- tion de sel d'iminium, 6 mg ( 0,25 mmole) de Na H, 0,25 ml ( 0,125 mmole) de la solution de sel d'iminium et finalement 3 mg ( 0,125 mmole) de Na H et 0,125 ml ( 0,063 mmole) de la solution de sel d'iminium Après 30 minutes d'agitation à -30 C, le mélange est réchauffé à la température ambiante. On dilue avec de l'acetate d'éthyle et on élimine le sel minéral par fil- tration Le résidu obtenu après évaporation du solvant, est passé par chro- matographie en couche mince sur gel de silice ( 10 % CH 30 H-CH 2 C H 12) L'extrac- tion de la bande verte donne 120 mg ( 15 % de rendement) du composé du titre. NRM (pyridine d 5,6): 1,58 (m, 4 H), 2,29 (s, 3 H), 2, 73 (m, 1 H), 3,06-3,50 (m, 8 H), 3,59 (dd, 1 H, J= 13 Hz), 4,03 (dd, 1 H, J= 10, 4 Hz), 4,44 (d, 1 H, J= 12 Hz), ,05 (t, 1 H, J=l O Hz), 5,45 (dd, 1 H, J= 10, 4 Hz), 8,04 (s, 1 H) - IR (K Br) Vmax, cm-': 3420, 3280, 2960-2870, 1715, 1625, 1560, 13 ( EXEMPLE 20 7 N-méthyl-N-(méthylamino)méthyl amino-9 a-méthoxymitosane o 0 H " O 2 H CHCO il o E &N>LNH ( 1) Na H 3 C ( 2) CH 3 Y:C 1 00, 1055. o La façon de procéderdel'exemple est répétee avec substitution du 9 améthoxy-7-(N-méthylamino)mitosane (Matsui et al, The Journal of Antibiotics, XXI, 189-198 ( 1968)) à la mitomycine C en quantité moléculaire égale. EXBEMPLE 21 Composé XXIII 7- 11-diméthylamino)ethylidènelamino-N" 0- 11-(diméthylamino)éthyli- déne J-9 a-méthoxymitosane CH 3 N (CH 3) 2 N/ " O N(CH 3 1 1 N (CH 3)2 CH 3 * Une suspension de 600 mg ( 1,79 m M) de mitomycine C dans 2 ml de mé- thanol est préparée et traitée avec 3 ml de N,N-diméthylacétamide diméthyla- cétale La suspension est chauffée à 75-80 C avec agitation pendant 2 heu- res A cette étape, une tic (CH 2 C 12/méthanol 10/1) révèle que presque toute la mitomycine C a été consommée dans la réaction Le produit apparaît sous la forme d'une zone verte Les solvants et les matériaux volatiles sont éliminés par concentration du mélange réactionnel à siccité sous pression réduite, ce qui donne un sirop qui est dissous dans le chlorure de méthylène et chargé sur une colonne de gel de silice ( 40 g de gel de silice) et la colonne est développée avec 1 % de méthanol dans le chlorure de méthylène ( 200 ml), 2 % de méthanol dans le chlorure de méthylène ( 200 ml) et 5 % de méthanol dans le chlorure de méthylène ( 400 ml) Les fractions contenant la zone verte représentant le produit sont rassemblées et concentrées en un solide amorphe pesant 110 mg ( 13 % de rendement) Ce matériau est dissous dans 2 ml d'acétone et précipité de la solution par addition d'hexane. Le produit est recueilli par filtration. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 23 H 32 N 605 et l'on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 58,46 6,83 17,79 trouvées 58,89 6,89 17,64 UV (Me OH)Xmax, nm: 235, 364. IR (K Br) vmax' cm-': 3440, 3295, 2925, 1770, 1660, 1620, 1580, 1550, 1300, 1055 Le spectre 1 H NMR dans la pyridine ds, est cohérent avec la structu- re du composé du titre. EXEMPLE 22 Composé XXIV 7-11-(diméthylamino)éthylidèneamino J-9 a-méthoxymitosane CH 3 o (CH 3) N 7 -N CH 2 OCNH 2 CH 3 CH 3 o O NH Une solution de 100 mg ( 0,21 m M) de composé XXIII dans 2 ml de chloroforme est ajoutée à 2 ml d'aminodiméthylméthane et la solution est chauffée à environ 55-60 C pendant x heures A ce stade, des quantités traces de composé XXIII substituent dans le mélange réactionnel mais il est néanmoins concentré et le résidu est passé par chromatographie sur alumine neutre en utilisant un gradient d'élution en commençant avec du chlorure de méthylène et en terminant avec un mélange méthanol/chlorure de méthylène 2,5/1 La zone verte majeure est isolée sous la forme d'un solide vert amorphe pesant 25 mg ( 29,4 % de rendement) Ce matériau est purifié par dissolution dans l'acétone et addition d'hexane à la solution d'acétone jusqu'à ce qu'il se produise une précipitation Le produit est recueilli par filtration et séché. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 25 H 32 N 605 et on obtient les valeurs suivantes: c calculées 56,58 trouvées 55,71 UV (H 20) max, nm: 374, 230 (épaulement) IR (K Br) vmax' cm-1: Le spectre 'H NMR dans la pyridine ds, H 6,20 6,34 N 17,37 ,23 est cohérent avec la struc- ture. EXEMPLE 23 Composé XXV 7-( 1-m 6thyl-2-pyrrodilinylidene)amino I-N'0-1 ( 1-méthyl-2- pyrrolidinylidene)aminol-9 a-méthoxymitosane O CI/ I CH 2 OCN NI OCH 3 CH 3 CH 3 De la 2,2-diméthoxy-1-méthylpyrrolidine (H Eilingsfeld et al Angew. Chem 72, 836 ( 1960)), 1,5 g ( 10,3 m M) et 280 ml de mitomycine C ( 0,34 m M) dans 20 ml de méthanol sont chauffés à 55 C pendant 5 heures Le melange réactionnel est examiné par chromatographie en couche mince sur une plaque CH 3 N ut% 3 d'alumine en utilisant comme solvant un mélange chlorure de méthylène/métha- nol 97/3 Une tlc révèle une tache verte majeure représentant le produit et une tache bleue mineure représentant la mitomycine C, matière de départ. Le solvant est éliminé par distillation sous vide à 40 C et le résidu est dissous dans le chlorure de méthylène et chargé sur une colonne de 4, 5 cm contenant 150 g d'alumine L'élution se fait avec 50 ml de chlorure de mé- thylène, suivie par 600 ml de 1 % de méthanol dans le chlorure de méthylène. Les impuretés grossières sont enlevées, mais l'on n'isole pas de fractions pures L'éluat rassemblé est concentré par distillation à 20 C en un résidu huileux qui contient apparemment un peu de 2,2-diméthoxy-1méthylpyrrolidine. Ce matériau est de nouveau passé en chromatographie sur une colonne d'alumine ( 25 g d'alumine) en utilisant 200 ml de chlorure de méthylène que l'on fait suivre par 100 ml de 1 % de méthanol dans le chlorure de méthylène Ceci a comme résultat d'éliminer la 2,2-diméthoxy-1méthylpyrrolidine et encore comme résultat de donner un certain nombre de fractions contenant des impu- retés mineures et plusieurs fractions pures confirmees par une tlc (une ta- che verte)représentant le produit désiré, rendement 53 mg. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 25 H 32 N 605 et l'on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 58,66 6,64 lb,4 Z trouvées 58,63 6,46 16,50 UV (Me OH) Xmax' nm: 354, 239. IR (K Br) vmax' cm-': 3300, 3220, 2940, 1660, 1620, 1550, 1290, l Le spectre 'H NMR dans la pyridine d 5, est cohérent avec ture du composé du titre. EXEMPLE 24 7-1 ( 1-méthyl-2-pyrrolidinylideneaminol-9 a-méthoxymitosane L 055, la struc- o Il ,CH 2 OCNH 2 N Cu 3 CH 3 2 c A 048 Une solution de 80 mg ( 0,16 m M) de composé XXV et 0,48 ml de n-butyl- amine dans 15 ml de chloroforme est chauffée à reflux pendant 48 heures. Une tic Péthanol/chlorure de méthylène, 2 % sur alumine) révèle une tache verte majeure et une petite tache bleue en tête et une petite tache rouge en arrière entraînant toute la matière de départ La solution réactionnelle est chargée sur une colonne contenant 50 g d'alumine et, éluée avec 200 ml de 1 % de méthanol dans du chlorure de méthylène que l'on fait suivre par 400 ml de 2 % de méthanol dans du chlorure de méthylène Ces fractions con- tenant un composant vert majeur unique,comme le révèle une tic,sont com- binées et concentrées en un résidu du produit désiré pesant 24 mg. NMR (pyridine d 5,a): 1,72 (q, 2 H), 2,04 (s, 3 H), 2,16 (q, 2 H), 2,72 (bs, 1 H), 2,84 (s, 3 H), 3,12 (m, 3 H), 3,24 (s, 3 H), 3,60 (dd, 1 H, J= 14, 2 Hz), 4,00 (dd, 1 H, J= 12, 6 Hz), 4,40 (d, 1 H, J= 14 Hz), 5,04 (t, 1 H, J= 14 Hz), 5,38 (dd, 1 H, J= 12, 6 Hz), 7,48 (bs, 2 H). EXEM 4 PLE 25 Composé XXVI 7-1 (méthoxyamino)méthylènelamino-9 a-méthoxymitosane 0 OCONH 2 CH ONH CE NE Une solution du composé XIX, 660 mg ( 1,7 m M), dans 10 ml de méthanol est préparée, et l'on y ajoute 170 mg ( 2,0 m M) de chlorhydrate de méthoxy- amine La solution est agitée à 10 C pendant 3 heures et à température am- biante pendant 2 heures Une tic révèle seulement une trace de composé XIX n'ayant pas réagi Un précipité noir s'étant formé pendant le séjour est rassemblé et lavé à l'acétone donne 380 mg du produit désiré ( 57 %). A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 17 H 21 N 506 et on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 52,19 5,40 17,90 trouvées 51,64 5,40 17,83 UV (Me OH)Xniax, nm: 376, 242 - IR (K Br) vmax, cm-': 3440, 3250, 3140, 2920, 1730, 1645, 1615, 1560, 1450, 1320, 1050. Le spectre "H M 4 R dans la pyridine d 5, est cohérent avec la struc- ture soit du composé du titre, soit de son tautomère en C-7, c'est-adire: H H CH 3 ON EXEMPLE 26 Composé XXVII 7-1 (benzyloxyamino)méthylènelamino-9 a-méthoxymitosane \C N O OCCNH 2 H C 6 H 5 CH 2 ONH Une solution de composé XIX, 100 mg ( 0,26 m M), dans 2 ml de méthanol contenant 0,5 ml de triéthylamine est préparée et l'on y ajoute 400 ml ( 2,5 m M) de chorhydrate de O-benzylhydroxylamine On laisse la réaction se poursuivre pendant 2,5 heures à la température ambiante Une tic (CH 2 C 12/ méthanol 10/1) révèle une zone brun-orange majeure en avant de la zone verte, cette dernière correspondant au composé XIX Le mélange réactionnel est con- centré en un résidu que l'on traite par chromatographie flash sur gel de silice ( 20 g) en utilisant CH 2 Cl 2/méthanol 20/1 comme solvant d'élution. La zone brune majeure constituant le produit désiré est recueilli sous la forme d'un solide amorphe pesant 80 mg ( 65,6 % de rendement). A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 23 H 25 Ns 06 et l'on obtient les valeurs suivantes: C H N calculées 59,10 5,35 14,97 trouvées 58,43 5,48 14,62 252 0048 UV (Me OH)Xmax, nm IR (K Br) vmax' cm-l Le spectre 'I ture soit du compose : 376, 245, 209. : 3460, 3300, 2945, 2920, 1745, 1720, 1570, 1275, 1220, 1060. H M 4 R dans la pyridine ds, est cohérent avec la struc- du titre, soit de son tautomère en C-7, c'est-à-dire: C-7 i e H N- C 6 H 5 CH 2 ON On récupère du matériau de départ n'ayant pas réagi, XIX, pesant 10 mg. EXEMPLE 27 Composé XXVIII 7-( 1,3-diméthyl-2-imidazolinylidéne)-9 a-méthoxymitosane De la mitomycine C 0,34 9 ( 1 ml) est dissoute dans 5 ml de 1,3- diméthyl-2-imidazolidone et l'on y ajoute 0,1 g d'hydrure de sodium ( 50 % dans l'huile, 2,8 n M) à la température ambiante Le mélange est maintenu à la température ambiante pendant 20 minutes et ensuite refroidi sur un bain de sel glacé (-15 C) Le mélange est maintenu pendant 10 minutes à cette température et l'on y ajoute ensuite 0,65 g ( 2 m M) de chlorure de 2-chloro-1,3-diméthyl-4,5-dihydro-3 H-imidazoliminium On le maintient à -15 C pendant une heure et on le dilue ensuite avec de l'acetate d'éthyle et on le soumet à une chromatographie sur une colonne d'aluminium La colonne d'aluminium est éluée avec du chlorure de méthylene et ensuite par du chlorure de méthylène comportant 2 % v/v de méthanol Une fraction colorée en vert est obtenue qui est constituée du produit désiré que l'on purifie ensuite par chromatographie sur alumine en utilisant du chlorure de méthylene contenant 10 % v/v de méthanol, rendement 20 mg ( 5 %). A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 20 H 26 N 605 et on obtient les valeurs suivantes: le composé. CH 3 ( y_ N. N CH 3 CH 3/ C H N calculees 53,03 6,34 18,55 trouvees 52,68 6,21 18,15 NMR (pyridine ds,a): 2,32 (s, 3 H), 2,47 (s, 3 H), 2,59 (s, 3 H), 2,74 (m, 1 H), 3,03-3,32 (m, 5 H), 3,26 (s, 3 H), 3,66 (bd, 1 H, J= 12 Hz), 4,02 (dd, 1 H, J= 11, 4 Hz) , 4,75 (d, 1 H, J= 12 Hz), 5,09 (bt, 1 H, J=ll Hz), ,44 (dd, 1 H, J= 11, 4 Hz). IR (K Br): 3400, 3280, 2930, 1700, 1610, 1480, 1330, 1055 cm-1. UV (Me OH)Xmax: 600, 375, 252 (sh), 222 nm. EXEMPLE 28 Composé XXIX 7-1 ( 1,3-diméthyltêtrahydropyrimidinylidène)amino-9 améthoxymitosane CH 3 O 0 ti O s% 2 CH c H De l'hydrure de sodium (dispersion à 50 % dans l'huile, 200 mg, 4,2 m M), est ajouté sous azote à une solution de mitomycine C ( 680 mg, 2 m M) dans 8 ml de 1,3-diméthyl-3,4,5,6tétrahydro( 1 H,3 H)-2-pyrimidinone Le mélange est maintenu pendant 20 minutes à la température ambiante et ensuite refroidi à-25 C On y ajoute du chlorure de 2-chloro-1,3-dimêthyl-2,3,4,5- tétrahydro-pyrimidinium, 0,73 g ( 4 m M) et le mélange est alors maintenu à -25 C pendant 3 heures On le dilue alors avec de l'acetate d'éthyle et 2 ml de méthanol Sans autre traitement, le mélange est chargé sur une colonne chromatographique d'alumine sèche et éluee tout d'abord avec du chlorure de méthylene et ensuite avec 2 % v/v de méthanol/chlorure de méthy- lene pour donner le produit désire, 0,35 g 39,5 % en rendement), point de fusion 138-140 C. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 21 H 27 N 605H 20 et on obtient les valeurs suivantes: 252 048 C calculées trouvées NMR (pyridine d 5,6 a IR (K Br) UV (Me OH)À,m= H N 54,65 6,33 18,21 54,78 6,18 18,21 1,80 (m, 2 H), 2,42 (s, 3 H), 2,52 (s, 3 H), 2,64 (s, 3 H), 2,76 (m, 1 H), 2,90-3,30 (m, 5 H), 3,26 (s, 3 H), 3,74 (d, 1 H, J= 12 Hz), 4,05 (dd, 1 H, J= 11, 4 Hz), 4,97 (d, 1 H, J= 12 Hz), 5,09 (t, 1 H, J=ll Hz), ,41 (dd, 1 H, J= 11, 4 Hz). 3430, 3280, 2930, 1710, 1570, 1480, 1450, 1350, 1050 cm-,. 635, 377, 264 (sh), 223 nm. "IIA EXEMPLE 29 Composé XXX 7-(tétraméthyldiaminométhyl ne)amino-9 a-méthoxymitosane (CH 3 > 2 N C -N. (CH 3) 2 N CH 3 De la mitomycine C 425 mg ( 1,42 m M), est mélangée avec une dispersion à 504 dans l'huile d'hydrure de sodium, 85,3 mg et 4 ml de diméthylformamide y sont ajoutés Le mélange est agité à la température ambiante sous une at- mosphère d'argon pendant 10 minutes et ensuite refroidi à -35 C On ajoute du chlorure de tétraméthylcloroformamidimium, 289 mg ( 2,13 m M) et on laisse le mélange se réchauffer à 5 C pendant une période de 2 heures De la glace sèche broyee est alors ajoutée au mélange pour tremper la réaction et le solvant est éliminé par distillation sous pression réduite Le résidu est soumis à une chromatographie sur colonne d'alumine ( 100 g) en employant 3 % v/v de méthanol dans du chlorure de méthylène pour l'élution Ce matériau est encore purifié par une tlc sur alumine ( 5 % v/v de méthanol dans du chlorure de méthylène) pour donner deux fractions de 17 mg et 76 mg Cette' dernière est cristallisée dans un mélange acétone-éther pour donner le pro- duit désiré, point de fusion 193-195 C, ( 12 % de rendement). A l'analyse, ol constate que le;otduit obienr la fcrmule: C 2 o H 28 N 605 et on obtient les valeurs suivantes: calculées trouvées NMR (pyridine d 5,6): C H ,54 6,53 54,92 6,53 2,26 (s, 3 H), 2,59 (s, 6 H), 2 2,75 (m, 1 H), 3,15 (d, 1 H, J=i 3,65 (d, 1 H, J= 12 Hz), 4,00 (d( 4,62 (d, 1 H, J= 12 Hz), 5,04 (t 4,38 (dd, 1 H, J= 11, 5 Hz). N 19,43 19,29 68 (s, 6 H), 4 Hz), 3,26 (s, 3 H), d, 1 H, J= 11, 5 Hz), 1 H, J= 11 Hz), IR (K Br): 3430, 3280, 2920, 1710, 1610, 1495, 1: UV (Me OH)Xmax: 610, 380, 260, 220 nm. EXEMPLE 30 Composé XXXI 7-( 1-piperidinylméthylène)amino-9 a-méthoxymitosane / OCH 3 CN %JO 2 NH 3 OCH 3 335, 1055 cm-i. Une solution 0,5 M de chlorure de pipéridinylchlorométhylèniminium est préparée par addition goutte à goutte de chlorure d'oxalyle ( 380 mg, 3 m M) à 6 ml de chloroforme contenant 0,34 g ( 3 m M) de 1formylpipéridine. Séparément, de l'hydrure de sodium (dispersion dans l'huile à 50 %, 96 mg, 2 m M), est ajouté sous azote à une solution de mitomycine C ( 334 mg, 1 m M) dans 3 ml de 1-formylpipéridine Après 15 minutes d'agitation à la tempé- rature ambiante, la solution est refroidie à-25 C et la solution de celle d'iminium préparée ci-dessus ( 4 ml, 2 m M) est ajoutée Le mélange réaction- nel est maintenu à -25 C pendant une heure et trempé par addition de glace sèche Apres addition de méthanol ( 1 ml), le mélange produit est absorbé sur alumine neutre Ce matériau est placé sur une colonne d'alumine ( 30 g) . La colonne est éluée tout d'abord avec du chlorure de méthylène et ensuite avec 3 % v/v de méthanol dans du chlorure de méthylène pour donner 360 mg ( 84 %) du composé du titre, point de fusion 68-70 C. A l'analyse, on constate que le produit obtenu présente la formule: C 21 H 25 N 506 1-1/4 H 20 et on obtient les valeurs suivantes: calculées trouvées NMR (pyridine d 5, 6) IR (K Br) UV (Me OH)Xmax EXEMPLE 31 7-hydroxy-N' C H N ,80 6,58 15,49 ,57 6,21 15,91 ): 1,42 (bs, 6 H), 2,19 (s, 3 H), 2,72 (m, 1 H), 3,06-3,30 (m, 3 H) 3,25 (s, 3 H), 3-48-3,70 (m, 2 H), 3,57 (d, 1 H, J= 13 Hz), 4,01 (dd, 1 H, J= 11, 4 Hz), 4,43 (d, 1 H, J= 13 Hz), 5,02 (bt, 1 J, 3 = 11 Hz), ,55 (dd, 1 H, J= 11, 4 Hz), 7,86 (s, 1 H). : 3440, 3350, 3300, 2935, 2835, 1710, 1615, 1520, 1445, 1305, 1250, 1200, 1055 cm-1. : 590, 389, 262 (sh), 234, 212 (sh) nm. 0-diméthylaminométhylène-9 a-méthoxymitosane o H, 0 A C N Me 2 J H( CH 3 A une solution de 7-hydroxy-9 a-méthoxymitosane, ( 20 mg) dans du chlorure de méthylène ( 3 ml) on ajoute du diméthylformamide diméthylacétal ( 1 ml) et la solution est agitée à environ 65 C pendant 30 minutes L'avan- cement de la réaction est suivie par tlc ( 10/1 CH 2 C 12/Me OH) Le produit est récupéré par concentration du mélange sous pression réduite et le résidu est soumis à une chromatographie sur gel de silice pour donner le composé du titre. Activité contre la Leucémie P-388 des muridés Le tableau IV contient les résultats des tests de laboratoire sur des souris femelles CDF, implantées intrapéritonêalement par un inoculum de tumeur de 106 cellules d'ascitès de leucémie P-388 des muridés et traités avec divers doses soit d'un composé test de formule I, soit de mitomycine C. Les composés sont administrés par injection intrapéritonéale 'Vn uciiie des groupes de six souris pour chaque niveau de dosage et elles sont traitées avec une dose unique du composé le jour n 1 seulement Un groupe de dix souris de contrôle traitées par une solution saline est inclus dans cha- que série d'expérience Les groupes traités à la mitomycine C sont inclus à titre de contrôle positif On emploie un protocole de 30 jours et le temps de survie moyen en jour est déterminé pour chaque groupe de souris et l'on note le nombre de survivant au bout de la période de 30 jours. Les souris sont pesées avant traitement et de nouveau le jour n 6 Le changement de poids est pris comme mesure de la toxicité du médicament. Des souris pesant 30 g chacune sont employées et une perte de poids allant jusqu'à environ 2 g n'est pas considérée comme excessive Les ré- sultats sont déterminés en terme de T/C %, ce qui est le rapport du temps moyen de survie du groupe traité au temps moyen de survie du groupe de contrôle traité par une solution saline multiplié par 100 Les animaux de contrôle traités par une solution saline meurent habituellement dans les neuf jours Le "effet maximum" dans le tableau suivant est exprimé en T/C % et l'on indique la dose donnant cet effet Les valeurs entre parenthèses sont les valeurs obtenues avec la mitomycine C en tant que contrôle posi- tif dans la même expérience Ainsi, on peut estimer une mesure de l'acti- vité relative des substances présentes par rapport à la mitomycine C, Un effet minimum en terme de T/C % est considéré comme étant de 125 La dose efficace minimum reproduite sur le tableau suivant est la dose donnant un T/C % d'approximativement 125 Les deux valeurs dontées dans chaque exemple dans la colonne de "changement de poids moyen" sont respectivement le chan- gement de poids moyen par souris pour la dose maximum efficace et pour la dose minimum efficace. TABLEAU IV Inhibition de la-leucémie P-388 des muridés Composé Effet maximum dose changement Exemple n % T/C dosefficace de poids xempendose minimum moyen 2 V ( 1) 311 ( 244) 6,4 ( 3,2) 183 ( 272) 6,4 ( 3,2) 0,1 -1,0, + 0,3 VI ( 1) 233 ( 244) 6,4 ( 3,2) VII ( 2) 141 ( 224) 25,6 ( 3,2) 0,8 -1,2; + 0,2 IX ( 4) 165 ( 224) 12,8 ( 3,2) 0,2 -0,7, + 0,8 X ( 5) 300 ( 224) 12,8 ( 3,2) 0,2 -2,1, aucun XIII ( 12) 161 ( 211) 12,8 ( 3,2) 3,2 -0,3, + 0,2 TABLEAU IV (suite) XIV ( 3) 233 ( 272) 12,8 ( 3,2) 0,2 -3,8, + 0,7 XV ( 3) 144 ( 272) 25,6 ( 3,2) 6,4 -1,4, + 0,2 XVI ( 6) 144 ( 272) 6,4 ( 3,2) 3,2 -0,4, -0,3 XVII ( 7) 144 ( 272) 0,8 ( 3,2) 0,02 -0,2, -0,3 XVIII ( 7) 167 ( 272 6,4 ( 3,2) 0,05 -1,0, + 0,3 XIX ( 8) 333 ( 294) 1,6 ( 3,2) ( 239) 0,8 ( 3,2) XX ( 9) 333 ( 294) 3,2 ( 3,2) XXI ( 18) 189 ( 183) 1,6 ( 3,2) 0,025 -0,5, -0,1 XXXI ( 30) 150 ( 144) 6,4 ( 4,8) 1,6 -1,6, -2,3 267 ( 267) 3,2 ( 4,8) XXX ( 29) 206 ( 263) 3,2 ( 4,8) XXVI ( 25) 183 ( 239) 0,4 ( 3,2) XXVII ( 26) 144 ( 239) 0,2 ( 3,2) 0,025 -1,3, -0,9 XXIII ( 21) 194 ( 319) 12,8 ( 3,2) 0,2 -1,2, + 0,2 XXIV ( 22) 313 ( 319) 6,4 ( 3,2) XXV ( 23) 188 ( 331) 25,6 ( 4,8) 0,4 -2,2, + 0,1 XXVIII( 27) 119 ( 313) 3,2 ( 3,2) 3,2 + 2,2, + 2,2 * XXIX ( 28) 331 ( 319) 25,6 ( 3,2) 0,4 -2,8, + 0,6 mg/kg de poids de corps. 2 grammes par souris, jours No 1 à 6 aux doses efficaces maximum et minimum. Les composés XIX et XX sont d'un intérêt exceptionnel puisque leur activité dépasse nettement celle de la mitomycine à la fois en terme d'ef- fet maximum et de puissance par mg (tailles de dose comparative pour des effets équivalents) Ce sont chaque fois des composés de formule I dans lesquels A est ledit groupe amidino et B représente -NH 2 ou,en d'autres termes,des dérivés de la mitomycine C substituée en N 7 par un groupement aminométhylène de la formule R 2 R 3 R 4 N-C= dans lesquels: R 2, R 3, et R 4 sont tels que définis ci-dessus. Les composés bis-amidino suivant la présente invention de formule I dans laquelle A et B representent chaque fois ledit yroupe ariho suih aussi d'un intérêt important en tant qu'entité efficace anti-tumeur On se réfé- rera aux données du tableau pour les composés V, VI, VII, IX, X et XIV qui se conforment à ces exigences de structure. Le tableau V contient les résultats des tests anti-tumeur faisant usage des mélanomes B 16 cultivés sur les souris Des souris BDFI sont em- ployées et on leur inocule par voie intrapéritonéale l'implant de la tumeur. On utilise un protocole de 60 jours On utilise des groupes de dix souris pour chaque quantité de dose testée et l'on détermine le temps moyen de survie pour chaque groupe Des animaux de contrôle,inoculés de la même fa- çon que les animaux d'expérience et traités avec le véhicule d'injection et aucun médicament présentent un temps moyen de survie de 21 jours Le temps de survie relatif à celui des animaux de contr Ole (T/C %) est utilisé comme une mesure d'efficacité et l'on détermine la dose efficace maximum et la dose efficace minimum pour chaque composé essayé La dose efficace minimum est définie comme étant la dose donnant une valeur de T/C % de Pour chaque niveau de dosage, les animaux d'expérience sont traités avec le composé à essayer les jours n 1, 5 et 9 par voie intrapéritonéale. Le changement de poids moyen au jour indiqué pour la dose maximum efficace et pour la dose minimum efficace est utilisé comme mesure de toxicité. Une perte de poids de 2 g pour une souris de 20 g n'est pas excessive. TABLEAU V Inhibition du mélanome B 16 Composé Effet maximum dose changement Exemple no % T/C dose efficace de poids Exempl N T Cdoseminimum moyen (jour) V (I) > 298 ( 256)* 0,8 ( 3,2)* X ( 5) > 295 ( 198) 2,0 ( 3,0) XXI ( 18) > 295 ( 198) 0,4 ( 3,0) XX ( 9) 262 ( 198) 0,8 ( 3,0) XIX ( 8) > 235 ( 165) 1,2 ( 3,0) * Les valeurs entre parenthèses sont les valeurs de contrôle de la mitomycine C. Le composé XXX (Exemple 29) et le composé XXIX (Exemple 28), sont testés vis-à-vis du mélanome B 16 des muridés en employant la voie sous- cutanée pour implanter la tumeur et le traitement par le médicament par la voie intraveineuse Le programme de traitement et les évaluations de temps de survie (on emploie un protocole de 40 jours) sont déterminés comme ci- dessus Le changement de poids le jour n 12 est mesuré La dose efficace maximum du composé XXX est de 1 mg/kg, procurant un T/C % de 156 et un gain de poids de 1,5 g Des groupes de six animaux sont employés et trois animaux survivent pendant la durée entière du protocole de 40 jours avec cette dose. La dose efficace minimum est de 0,25 mg/kg, dose à laquelle le changement de poids le jour N O 12 est de 1,0 g Pour le composé XXX, la dose efficace maximum est de 8 mg/kg pour un T/C % de 177 et un changement de poids de -0,6 La dose efficace minimum est de 4 mg/kg avec un changement de poids de + 0,8 Dans la même expérience, la dose efficace maximum de mitomycine C - est de 3 mg/kg pour un T/C % de 195 et un changement de poids de -0,5 La dose efficace minimum de mitomycine C n'a pas été déterminée. Dans un protocole toxicologique court utilisant des groupes de cinq souris mâles BDFI par dose auquelle on donne une simple dose intrapéritoné- ale de composé XIX, aucune réduction significative du compte des lymphocytes ne se produit à la dose efficace optimum de ce composé ( 1,6 mg/kg i p). A cette dose, il n'y a pas d'élévation significative de l'azote de l'urée du sang (BUN) ou de la phosphotransférase glutamique du sérum (SGPT), ce qui indique qu'il n'y a pas d'effet nocif sur la fonction du rein ou du foie ou de suppression de l'activité lymphocytique. Etant donné l'extraordinaire activité anti-tumeur observée dans les tumeurs des animaux expérimentaux et la toxicité réduite par comparaison avec celle de la mitomycine C, l'invention comprend l'utilisation des sub- stances de formule I pour l'inhibition des tumeurs mammaires A cette fin, elles sont administrées systématiquement à un mammifère portant une tumeur à doses anti-tumeurs substantiellement non toxiques. REVENDICATIONS 1. Composé ayant la formule: FORMULE I dans A laquelle: représente un groupement amino, méthoxy, hydroxy, ( 1-alkyl inférieur- 2 ( 1 H)-pyridinylidène)amino, ou un radical de formule: R 2 34 I R 2 H 2 X R R R 3 Il R -I-C-IN-, 1 (î 2)n b.,- R 2 B est un groupement amino ou amidino de formule R 3 R 4 N-C=N et au moins l'un d'entre A et B représente l'un des groupes spécifiés autre que amino, méthoxy ou hydroxy, n représente un entier égal à 0, 1, 2 ou 3, Ri représente un hydrogène, alkyle inférieur, alkanoyle inférieur, benzoyle ou benzoyle substitué dans lequel ledit substituant est un alkyle inférieur, alkoxy inférieur, halo, amino ou nitro, R 2 est un hydrogène, alkyle inférieur, phényle, alkylphényleinférieur, alkoxyphényle inférieur, halophényle, aminophényle, nitrophényle, thiényle, furyle, cyano, di-alkyl inférieur-amino, alkoxy inférieur ou alkylthio inférieur, R 3 représente un alkyle inférieur, alkoxy inférieur, ou même temps que R 4 et l'atome d'azote auxquels ils sont attachés, il constitue la pyrrolidine, la 2 ou 3 alkyl inférieur- pyrrolidine, pipéridine, 2-, 3 ou 4 alkyl inférieur-pipéridine, 2,6-di-alkyl inférieur- (c 2)n k.9 (N R( 7 H 2 OC-B pipéridine, pipérazine, pipérazine-4 substituée, (dans laquelle le substituant-4 est un alkyle ouuncarbalkoxy comportant chacun de 1 à 8 atomes de carbone, phényl, méthylphényle, méthoxyphényle, halophényle, nitrophényle ou benzyle), azépine, 2-, 3-, 4 ou 5- alkyl inférieur-azépine, morpholine, thiomorpholine, thiomorpho- line-loxyde ou thiomorpholine-1,1-dioxyde, R 4 représente un alkyle inférieur ou même tant que R 3 et l'atome d'azote auxquels ils sont attachés, il constitue la pyrrolidine, la 2-, ou 3-alkyl inférieur-pyrrolidine, pipéridine, 2-, 3 ou 4-alkyl inférieur-pipéridine, 2,6-di-alkyl inférieurpipéridine, pipérazine, pipérazine-4 substituée (dans laquelle le substituant-4 est un alkyle, ou un carbalkoxy comportant chacun de 1 à 8 atomes de carbone, phényle, méthylphényle, méthoxyphényle, halophényle, nitrophényle ou benzyle) azépine, 2-, 3-, 4 ou 5-alkyl inférieur- azépine, morpholine, thiomorpholine, thiomorpholine-1-oxyde ou thiomorpholine-l,l-dioxyde, Rs est choisi parmi les alkyles CI à Ce 18 autres que les tertio-alkyles, alkényl C 1 à C,8, alkynyl C 1 à C,8, haloalkyle Cl à C 18, hydroxy- alkyl C, à Ci 8, cycloalkyle C 4 à C 8 ou aryle ou aralkyle inférieur comportant chacun jusqu'à 12 atomes de carbone, ou un groupement hétéroalicyclique ou hétéroaromatique comportant de trois à huit membres dans le cycle dont au moins deux représentent des atomes de carbone. R 7 et R 9 représentent indépendamment un H ou un alkyle inférieur dans lesquels: chacun des alkyle inférieur, alkanoyle inférieur et alkoxy infé- rieur mentionnés ci-dessus contient de 1 à 6 atomes de carbone. 2. Composé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que A et B représentent chacun indépendamment ledit groupe amidino de formule: R 2 R 3 R 4 N-C=N- 3. Composé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que RI et R 2 représentent chacun un hydrogène, et R 3 et R 4 représentent cha- cun un méthyle. 4 Composé suivant la revendication 1, 7-{(diméthylamino)méthylène} amino-Nîo-(diméthylamino)méthy 11 ne-9 a-méthoxymitosane. 5. Composé su vant la re:endication 1, 7-{(di,,;écyid,,io)nècnyle}e amino-N 1 o-(diméthylamine)méthylène-9 a-méthoxymitosane. 6. Composé suivant la revendication 1, 7-l(diisopropylamine) méthylène} amino-N 1 O-(diisopropylamino)miéthylène-9 a-méthoxymitosane. 7. Composé suivant la revendication 1, 7-{(diméthylamine) a méthylène}amino-N-o-(diméthylamine)méthylène-9 a-méthoxy-Naméthylmitosane. 8 Le composé de la revendication 2 caractérisé en ce que RI et R 2 représentent chacun un hydrogène, et R 3 et R 4 en même temps que l'atome d'azote auxquels ils sont attachés, forment le groupement pipéridine. 9. Le composé suivant la revendication 1, N'a-formyl-9 a-méthoxy- 7-( 1-pipéridinyl-méthylène)amino-N'O-( 1-pipéridinylméthylne)mitosane. 10 Le composé de la revendication 1, 9 a-méthoxy-7-( 1-pipéridinylmé- thylène)-amino-NO -( 1-pipéridinylméthylène)mitosane. 11. Le composé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que RI et R 2 représentent chacun un hydrogène, et R 3 et R 4 en même temps que l'atome d'hydrogène auxquels ils sont attachés, forment le groupement mor- pholine. 12. Le composé suivant la revendication 1, 9 a-méthoxy-7-( 1-morpho- linométhylène)-amino-N'O-( 1-morpholino-méthy 11 ne)mitosane. 13. Le composé suivant la revendication 1, caractérisé en ce-que A représente un amino et B représente le groupement amidino de formule R 2 l R 3 R 4 N-C=N- 14. Composé suivant la revendication 13, caractérisé en ce que R 3 et R 4 représentent chacun un méthyle. 15. Composé suivant la revendication 1, 7-amino-NI -diméthylamir méthylène-9 a-méthoxy-N a -méthylmitosane. 16. Composé suivant la revendication 1, 7-amino-N 1 -diméthylamit méthylène-9 a-méthoxymitosane. 17. Composé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que A représente un méthoxy et B représente le groupe amidino de formule: no- R 2 R 3 R 4 N-C=N- 18. Composé suivant la revendication et R 4 représentent chacun un méthyle. 19. Composé suivant la revendication amino-méthylènemitosane. 20. Composé suivant la revendication aminométhylène-Nia-formylmitosane. 21. Composé suivant la revendication est l'un desdits groupements amino et B est 17, caractérisé en ce que R 3 1, 7,9 a-diméthoxy-N 1 -diméthyl- 1, 7,9 a-diméthoxy-NI -diméthyl- 1, caractérisé en ce que A un amino. no- 22. Composé suivant la revendication 21, caractérisé en ce que A représente le groupement amino de formule R 2 R 3 R 4-C=N et R 3 et RI représentent un méthyle. 23. Composé suivant la revendication 1, 7(diméthylaminométhylène) amino -9 a-méthoxymitosane. 24. Composé suivant la revendication 1, 7-(dimêthylaminométhylène) - amino-9 a-méthoxy-Nla-méthylmitosane. 25 Procédé de préparation d'un composé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé choisi dans le groupe constitué par la mitomycine C, la mitomycine A ou un dérivé N a-alkyle inférieur de l'un ou l'autre avec un amide acétal de formule R \ 1 8 N-C-OR dans laquelle: R 2, R 3 et R 4 sont tels que définis d'ans la revendication 1, et chaque R 8 représente indépendamment un alkyle inférieur ou un cycloalkyle comportant jusqu'à 6 atomes de carbone ou ils peuvent ensemble représenter un alkylène formant avec les atomes d'oxygène attachés et le carbone inter- posé une structure cyclique comportant 5 ou 6 membres dans le cycle en so- lution dans un milieu réactionnel organique liquide anhydre compatible avec la réaction à 40 à 65 C jusqu'à ce que se forme un produit réactionnel dans lequel B ou A et B à la fois dans la formule de la revendication 1 repré- sentent le groupement amidino de la formule: R 2 R 3 R 4 N-C=N- 26 Procédé suivant la revendication 25, caractérisé en ce que le- dit milieu réactionnel organique liquide comprend un hydrocarbure alipha- tique halogéné inférieur et plus de 2 proportions molaires dudit amide acétal par rapport à la mitomycine C sont employees, ce par quoi est pro- duit un composé dans lequel A et B représentent chacun un groupement ami- dino. 27. Procédé suivant la revendication 26, caractérisé e ce que le- dit milieu réactionnel est le chloroforme. 28. Procédé suivant la revendication 26, caractérisé en ce que le milieu réactionnel est un mélange d'un hydrocarbure aliphatique inférieur halogéné et d'un alkanol inférieur. 29. Procéde suivant la revendication 26, caractérisé en ce que ledit milieu réactionnel est un mélange de chloroforme et de méthanol. 30. Procéde de préparation d'un amino-9 a-méthoxymitosane-substi- tué en 7 caractérise en ce que l'on fait réagir un composé suivant la revendication 1, dans lequel B ou A et B à la fois représentent ledit grou- pement amino de formule R 2 I R 3 R 4 N-C=N- avec une amine primaire aliphatique, alicyclique, aromatique, hétéroaro- matique ou hétéroalicyclique, dans laquelle l'atome de carbone portant le groupement aminé porte au moins un atome d'hydrogène et moins de deux groupements aryles dans un milieu réactionnel organique liquide anhydre compatible avec la réaction à une température allant d'environ -15 C à + 50 C. 31. Procédé consistant à traiter un premier composé de la revendi- cation 1, dans lequel A et B représentent chacun ledit groupement amidino de formule R 2 R 3 R 4 N-C=N- avec plus d'une proportion moléculaire d'une amine choisie dans le groupe constitué par les aminodiphénylméthane, trifluoroethylamine et tertio- butylamine à une température de 20 à 60 C jusqu'à ce que ledit composé de la revendication 1 ait été conyerti en un second composé suivant la reven- dication 1 dans lequel le A représente ledit groupement amidino et B le groupement amino. 32. Procéde suivant l'une des revendications 30 ou 31, caractérisé en ce que l'on emploie un milieu réactionnel organique liquide anhydre compatible avec la réaction comprenant les méthanol, chloroforme, chlorure de méthylène ou un autre haloalkane inférieur. 33. Procéde de préparation d'un composé de la revendication 1, caractérisé en ce que B représente -NH 2, A représent ( 1-alkyleinférieur- 2 ( 1 H)-pyridinylidéne)amino ou un groupement de la formule R 2 H R 2 R 2 %)H 2 R 3 R 4 N-C'=N, R 3 N-O=N y 2 C, ou RI 2 N-c=--' \k N,ou R et R 1, R 2, R 3, R 4, R 5, R 7, et N sont tels que définis dans la revendication 1 consistant à faire réagir une solution dans le diméthylformamide (ou dans un autre solvant compatible) de mitomycine C avec des proportions 1,0 à 1, 5 moléculaire d'hydrure de sodium produisant ainsi une forme anionique de la mitomnycine C et à faire réagir ladite forme anionique avec un réactif électrophile capable de former ledit groupement amino choisi parmi un iminoéther, un iminothioéther, un halogénure d'halométhyleniminium et un sel d'iminohalogénure. 34. Composé suivant la revendication 1, 7-( 1-méthyl-2 (H)-pyridinyli- déne)amino-9 a-méthoxymitosane. 35. Composé suivant la revendication 1, 9 a-méthoxy-7-( 1-morpholino- méthylene)-aminomitosane. 36.- Composé suivant la revendication 1, 7-( 1pyrrolidinylméthylene) amino-9 a-méthoxymitosane. 37 Médicament pour l'inhibition de la croissance d'une tumeur de mammi- fère,caractérisée en ce qu'il contient une dose antitumorale efficace, substantiellement non toxique et destinée à être administrée par voie systémique d'un compose suivant une quelconque des revendications 1 à 37. 38. 7-( 2-benzylthioéthyl)amino-9 a-méthoxymitosane, 39 Composé suivant la revendication 1,17 1-(diméthylamino)éthyl- idènel'amino-N' -Il-(diméthylamino)éthylidénel-9 a-méthoxymitosane. 40. Composé suivant la revendication 1, 7-11-(diméthylamino)éthyl- lidéneaminol-9 a-méthoxymitosane. 41. Composé suivant la revendication 1, 7-1 ( 1-méthyl-2-pyrrodidiny- lidène)aminol-N' -j( 1-méthyl-2-pyrrolidinylene)aminol-9 améthoxymitosane. 42. Composé suivant la revendication lidène)aminol-9 a-méthoxymitosane. 43. Composé suivant la revendication amino-9 a-méthoxymitosane. 44 Composé suivant la revendication amino-9 a-méthoxymitosane. 45. Composé suivant la revendication lidylidène)-9 a-méthoxymitosane. 46. Composé suivant la revendication pyrimidinylidène)-amino-9 a-méthoxymitosane. 47. Composé suivant la revendication lène)amino-9 a-méthoxymitosane. 48. Composé suivant la revendication amino-9 a-méthoxymitosane. 1, 7-1 ( 1-méthyl-2-pyrrodidiny- 1, 7-1 (méthoxyamino)methylènel 1, 7-j (benzyloxyamino)méthylènej 1, 7-( 1,3-diméthyl-2-imidazo- 1, 7-1 ( 1,3-diméthyltétrahydro- 1, 7-(tétraméthyldiaminométhy- 1, 7-( 1-pipéridinylmethylene)