FR 2526793 A1 19831118 FR 8307986 A 19830513 La présente invention concerne de nouveaux a-(N-pyrrolyl)-acides et leurs sels et esters, utiles comme médicaments et un procédé pour la préparation de tels composés. L'invention concerne plus particulièrement un procédé pour la préparation d' a-(N-pyrrolyl)-acides et de leurs sels et esters répondant à la formule I: R 1 R N-CH-COOR' (I) R) R 3 'Y R dans laquelle R, R 1, R 2, R 3 et R 4 représentent des atomes d'hydrogène ou des radicaux alkyles, aryles, alkylaryles ou hétérocycliques substitués ou non substitués et R' représente un cation métallique, une base organique ou un radical organique. L'invention concerne également de nouveaux composés parmi ceux répondant à la formule I et en particulier: le DL(-)-a -(N-pyrrolyl)-phénylacétate d'éthyle, le DL(-)-a -(N-pyrrolyl)-p-hydroxy-phényl- acétate de dibenzylamine, l'acide DL( tique, l'acide D(+)-a -(N-pyrrolyl)-phénylacêti- que et l'acide L(-)-a -(N-pyrrolyl)-phénylacéti- que L'invention concerne également des médicaments constitués de compositions contenant les composés pré- cités qui sont utiles en thérapeutique en raison de leur activité d'antiagrégation plaquettaire ou de leur activité analgésique. Les composés de formule générale I peuvent être préparés par transformation du radical amino d'un amino-acide ou d'un ester correspondant de formule générale H 2 N-CH-COOR' dans laquelle R et R' R sont comme défini ci-dessus pour le pyrrole N-substitué, par réaction avec le furanne ou un de ses dérivés. Clauson-Kaas et Tyle Z Acta Chem Scand 6, 667 ( 1952)l ont décrit la méthoxylation du 2-acétamido- mëthyl-furanne (formule II) en 2,5-diméthoxy-2-acéta- midométhyl-2,5-dihydrofuranne (formule III) On hydro- gène ce composé avec un catalyseur pour obtenir le 2,5-diméthoxy-2acétamidométhyl-têtrahydrofuranne (formule IV) qui, avec l'aniline dans l'acide acétique, fournit le 1-phényl-2-acétamidométhylpyrrole (formule V) avec un rendement moyen de 80 % selon le schéma réaction- nel suivant: 0c C 2-N -Ac OO 30 O 2 NU-Ao (II) (III) 2 CH -211-Aa OCH ' 3 CH 2-1,N o-A 2 3 O (IV) (v) Ensuite Clauson-Kaas et Tyle ont décrit un procédé général de préparation des pyrroles N-substitués par réaction d'un 2,5dialcoxytétrahydrofuranne avec des amines primaires. + R 6-NH 2 + 2 R 50 H RO R I R R 6 o R 5 représente un radical méthyle ou éthyle et R 6 représente un radical alkyle ou aryle Kaas et coll. ont appliqué la réaction précédente à diverses amines aromatiques et aliphatiques. On peut préparer les composés auxquels l'in- vention se rapporte, à partir d' o-amino-acides ou de leurs esters, par réaction avec un 2,5-dialcoxy- tétrahydrofuranne dans l'acide acétique à la température d'ébullition Les alcoxy-têtrahydrofurannes les plus utilisés sont le 2,5-diméthoxy et le 2,5-diéthoxytétra- hydrofuranne On obtient généralement des rendements de conversion plus élevés avec le premier Lorsqu'on emploie dans le mélange réactionnel un grand excès d'acétate de sodium dissous dans l'acide acétique gla- cial, la durée de réaction peut être considérablement réduite On peut représenter schématiquement ces réac- tions comme suit: R 1 R COOR' * R R 3 COOR,/R 2 l + RR R R 2 R 4 R-CH-N + 2 CH 3 CHCH 3 3 01 C 3 R 3 R 4 o R, R 1, R 2, R 3 et R 4 sont comme précédemment défini et R" a la même définition qu'eux. Comme précédemment indiqué, on peut employer les amino-acides correspondants comme produits de départ, mais on obtient des rendements accrus lorsqu'on emploie leurs esters comme produits de départ, Bien qu'en principe on puisse employer l'un quelconque des esters (benzylique, nitrobenzylique, méthylique, etc), on emploie le plus fréquemment les esters méthyliques et éthyliques. Pour préparer les esters méthyliques, éthyliques, etc des amino-acides, on prépare une suspension de l'amino-acide dans l'alcool absolu appro- prié et on y insuffle un courant d'acide chlorhydrique gazeux sec Apres la dissolution, qui s'accompagne de la libération d'une quantité importante de chaleur, on refroidit la solution dans un bain glacé et on poursuit l'apport d'acide chlorhydrique gazeux sec jusqu'à saturation On laisse ensuite séjourner la solution pendant 3 à 4 heures à la température or- dinaire en la protégeant de l'humidité Finalement on concentre à sec et on dissout dans l'alcool corres- pondant puis on cristallise par addition d'éther. On fait réagir les esters des a amino-acides (sous la forme libre et sous forme des chlorhydrates) dans l'acide acétique glacial ou dans un mélange d'a- cide acétique glacial et d'acétate de sodium, a la tem- pérature d'ébullition pendant des durées comprises entre 1 minute et environ 1 heure Lorsque la durée de réaction s'est écoulée, on refroidit le mélange et on élimine le dérivé de type N-pyrollyl par distillation fractionnée sous vide ou par extraction liquide-liquide. Dans le second cas, bien qu'on puisse utiliser d'autres solvants, on obtient de bons résultats par dissolution du mélange réactionnel avec de l'eau et extraction du N-pyrrolyl-ester avec de l'acétate d'éthyle. On chasse ensuite le solvant pour obtenir le N-pyrrolyl- ester avec une pureté acceptable. On peut hydrolyser le N-pyrrolyl-ester selon l'un quelconque des procédés connus On obtient de bons rendements lorsqu'on dissout l'ester dans un mélange de dioxanne et d'eau et qu'on ajoute un léger excès d'un hydroxyde alcalin A la température ordi- naire, l'hydrolyse s'effectue rapidement en des durées comprises entre 15 minutes et plusieurs heures On peut, au lieu du mélange de dioxanne et d'eau, employer de façon semblable d'autres mélanges de solvants. Dès que le solvant organique a été chassé par évaporation sous vide, on extrait la solution alcaline aqueuse de 1 ' R-(N-pyrrolyl)-acide avec un solvant or- ganique (acétate d'éthyle, chlorure de méthylène, chloro- forme, méthylisobutylcétone, etc) à un p H acide, puis on cristallise par concentration et/ou addition d'un solvant d'insolubilisation tel que l'éther de pétrole, l'hexane normal, etc. Comme précédemment indiqué, on peut également partir de l'amino-acide libre Dans ce cas on solubilise l'amino-acide dans le diméthylformamide par addition d'acide p-toluènesulfonique puis on ajoute la quantité stoechiométrique du dialcoxytétrahydrofuranne en chauffant à reflux pendant 20 à 60 minutes Lorsque la réaction est achevée, on refroidit le mélange et on dilue par l'eau, on extrait par l'éther sulfurique et, après élimination de la totalité de l'éther sulfurique, on laisse la phase de diméthylformamide et d'eau cristalliser au réfrigérateur pour obtenir le N-pyrrolyl- acide correspondant. On peut également préparer les pyrroles N- substitués en employant des métallo-pyrroles comme intermédiaires Les plus fréquemment employés sont les dérivés de pyrrolyl-magnésium formés par réaction du pyrrole avec des réactifs de Grignard. + "g Y o + R 7 H N I I H Mg-Y o Y est un atome d'halogène et R 7 a la même signifi- cation que R, si ce n'est qu'il ne représente pas un atome d'hydrogène. On peut également partir des OC-halogéno- acides en les faisant réagir avec le pyrrole ou un de ses dérivés. Dans les exemples ci-après, on se réfère aux figures 1 à 3 dans lesquelles: - la figure 1 est le spectre infrarouge à 0,5 % dans le K Br de 1 ' -(Npyrrolyl}-phénylacétate d'éthyle. la figure 2 est semblable mais concerne l'acide (N-pyrrolyl)-phénylacétique. La figure 3 est semblable mais concerne 1 'acide c (N-pyrrolyl)-p-chlorophényl-propionique. Dans toutes les figures, le pourcentage de transmission est représenté en ordonnées et le nombre d'onde (cm-1) et la longueur d'onde en pm sont repré- sentés en abscisses. EXEMPLE 1 Chlorhydrate de 1 ' l C-phénylglycinate d'éthyle On insuffle un courant d'acide chlorhydrique sec sur une suspension de 50 g d'y-phénylglycine dans 500 ml d'éthanol absolu L'amino-acide se dissout avec un dégagement important de chaleur. Après dissolution de l'amino-acide, on re- froidit le mélange réactionnel avec un bain glacé et on poursuit l'insufflation de l'acide chlorhydrique sec jusqu'à saturation à une température de 0-5 C Ensuite on arrête le courant d'acide chlorhydrique, et on laisse le mélange réactionnel, convenablement protégé de l'humidité, reposer pendant 3 à 4 heures à la température ordinaire On concentre ensuite le mélange réactionnel sous vide à une température inférieure à 50 C jusqu'à ce qu'il soit sec On dissout le résidu dans 200 ml d'éthanol absolu et on répète la concen- tration à sec. On dissout le résidu dans 150 ml d'éthanol absolu et on cristallise par addition de 600 ml d'éther éthylique On laisse le mélange au réfrigérateur jus- qu'au lendemain Finalement on filtre et on lave avec ml d'éther sulfurique Le produit obtenu pèse 62,8 g ( 88 %). EXEMPLE 2 C-(N-pyrrolyl)-phénylacétate d'éthyle. On dissout 52,8 g ( 0,24 mol) de phénylglycinate d'éthyle dans 136 ml d'acide acétique glacial On ajoute ensuite 39 g ( 0,24 mol) de 2,5diéthoxytétrahydrofuranne en 10 à 15 minutes en agitant On chauffe le mélange à reflux pendant une heure Ensuite on laisse le mé- lange refroidir et on chasse la majeure partie de l'a- cide acétique sous pression réduite Finalement on distille le résidu sous vide et on recueille la frac- tion distillant à 115-118 C/O,26 mbar On obtient le produit sous forme d'une huile incolore qui cristallise par refroidissement en prenant un aspect cireux et qui pèse 46,5 g ( 70 %) P f 51-53 C Composi- tion centésimale: 73,31 % C; 6,08 % N; 6,53 % H Le spectre IR à 0,5 % dans le K Br est illustré par la figure 1. EXEMPLE 3 Acide a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique On dissout à chaud 18,5 g ( 0,33 mole) d'hydro- xyde de potassium dans un mélange de 65 ml d'éthylène- glycol et 13 ml d'eau On ajoute à la solution ci-dessus en agitant: 52,2 g ( 0,23 mole) d'a-(N-pyrrolyl)-phényl- acétate d'éthyle en agitant et en chauffant à reflux ( 112-120 C) pendant 5 heures. Ensuite, on refroidit le mélange réactionnel et on le verse sur une solution de 100 ml d'eau et 100 ml d'éthanol à 96 % On acidifie le mlélange à p H 2 avec de l'acide chlorhydrique 2 N Apres une heure d'agitation avec refroidissement( 5 C), on filtre le mélange et on le sèche Le produit sec pèse 36 g ce qui correspond à un rendement de 80 %. On dissout le produit obtenu dans 100 ml de chloroforme, on traite avec du charbon activé et on filtre. On concentre le filtrat sous vide au tiers du volume ini- tial puis on ajoute 70 ml de méthylcyclohexane Le produit obtenu pèse, après séchage, 27 g ( 75 %); p f 127 C. Equivalent de neutralisation 204 Composition centésimale 71,6 % C; 5,52 % H; 6,90 % N (théorique: 71,64 % C; ,47 % H; 6,97 % N) Le produit n'a pas d'activité optique Le spectre infrarouge à 0,5 ' dans le K Br est illustré par la figure 2 730 cm 1 (déformation asymétri- que de CH du cycle); 1090 cm 1 (déformation symétrique de CH du cycle). EXEMPLE 4 Acide a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique On ajoute 21,6 g ( 0,1 mole) de chlorhydrate de phénylglycinate d'éthyle à une solution de 50 g d'acétate de sodium dans 50 ml d'acide acétique glacial et on chauffe à reflux Après dissolution, on ajoute 16,5 ml ( 0,1 mole) de 2,5-diméthoxytétrahydrofuranne. -9- On chauffe le mélange réactionnel pendant une minute A la fin de cette période, on verse le mélange réactionnel sur environ 1000 g de glace On extrait deux fois la solution aqueuse avec de l'acétate d'éthyle, la première fois avec 550 ml et la seconde fois avec 250 ml. On mélange ensemble les phases organiques eton lave avec 350 ml d'une solution aqueuse à 5 % de carbonate de sodium puis avec 350 ml d'une solution saturée de chlorure de sodium (deux fois) On évapore la phase organique à sec avec un appareil Rotovapor à une température inférieure à C On dissout le résidu dans 250 ml d'un mélange à % de dioxanne et d'eau et on ajoute une quantité suf- fisante d'hydroxyde de sodium 2 N pour obtenir une alca- linité élevée constante On poursuit l'agitation pendant une heure puis on laisse reposer le mélange jusqu'au lendemain. Le p H est alors de 13 et on l'abaisse à 6,5 avec de l'acide chlorhydrique 5 N On concentre le mé- lange avec un Rotovapor pour chasser le dioxanne On porte le volume à 250 ml avec de l'eau; On extrait deux fois le mélange avec 200,ml de chloroforme, chaque fois à un p H de 1,5-2 On mélange ensemble les phases chloro- formiques et on concentre avec un Rotovapor à environ ml puis on cristallise par addition d'éther de pétrole Le produit obtenu pèse 12,9 g (rendement 64 %) après séchage. EXEMPLE 5 Acide a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique On met en suspension 15,1 g ( 0,1 mole) d'a- phénylglycine dans 450 ml de diméthylformamide puis on ajoute 15 g d'acide p-toluènesulfonique et 13,2 g ( 0,1 mole) de 2,5diméthoxytétrahydrofuranne On chauffe le mélange à ébullition, à environ 95 C tout le produit solide se dissout, et on maintient la température d'ébullition pendant environ 60 minu Ltes Ensuite, on refroidit le mélange, on ajoute 400 ml d'eau froide et on refroidit la totalité du mélange entre 0 et 5 C On extrait deux fois le mélange avec chaque fois 200 ml d'éther éthylique et on rejette les phases éthérées. On extrait la phase aqueuse avec 500 ml de chloroforme à p H 1,5 On traite l'extrait chloroformique avec 600 ml d'eau et on ajoute le p H à 11 Apres séparation des phases; on ajoute 500 ml de chloroforme à l'extrait aqueux et on ajuste le p H à 1,5 avec de l'acide chlo- rhydrique 2 N On concentre la phase chloroformique pour obtenir une huile qu'on cristallise dans un mélange de méthanol et d'eau Après séchage, on obtient 5,8 g d'acide a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique. EXEMPLE 6 DL-()-a-(N-pyrroly 1)-p-hydroxvphénylacdtate de dibenzylamine On dissout 50 g d'acétate de sodium dans 500 ml d'acide acétique On ajoute à la solution 23,2 g ( 0,1 mole) de p-hydroxyphénylglycinate d'éthyle On chauffe la solu- tion obtenue à ébullition puis on ajoute 15,3 g ( 0,11 mole) de diméthoxytétrahydrofuranne en maintenant l'ébullition pendant une minute. Ensuite, on ajoute le mélange réactionnel à 1,5 kg d'un mélange de glace et d'eau puis on extrait deux fois par l'acétate d'éthyle. il - On réunit les extraits dans l'acétate d'éthyle et on lave d'abord avec du carbonate de sodium à 5 % puis avec une solution saturée de chlorure de sodium. Enfin, on concentre sous vide l'extrait dans l'acétate d'éthyle pour éliminer la majeure partie du solvant, on ajoute 150 ml de dioxanne et 100 ml d'hydroxyde de sodium 2 N et on maintient l'agitation pendant 2 heures à la température ordinaire. On laisse le mélange réactionnel reposer pendant une nuit, également à la température ordinaire. On ajoute 190 ml d'eau et on neutralise le mélange à p H 7,5 avec de l'acide chlorhydrique 6 N puis on chasse le dioxanne par distillation du mélange sous vide. 1.5 On ajoute 180 ml de chloroforme et on ajuste le p H à 2 avec de l'acide chlorhydrique 6 N puis on sépare les phases On extrait à nouveau la phase aqueuse avec ml de chloroforme On rassemble les extraits chloro- formiques et on rejette la phase aqueuse. On ajoute 200 ml d'eau à l'extrait chloroformi- que, on ajuste le p H à 7,5 avec de l'hydroxyde de sodium N et on sépare ensuite les phases. On extrait à nouveau la phase chloroformique avec 100 ml d'eau On réunit les extraits aqueux et on dilue à environ 600 ml. On ajoute lentement 180 ml d'une solution aqueuse à 15 % d'acétate de dibenzylamine àla solution précédente On effectue l'addition sous agitation et refroidissement en 1,5 heure puis on filtre et on lave à l'eau froide. On sèche le produit sous vide à 40 'C pour obtenir 7,3 g du sel de dibenzylamine de l'acide a-(N-pyrrolyl)-p-hydroxyphénylacétique, p f 175179 o C. Le spectre infrarouge à 0,5 % dans le bromure de potas- sium montre les bandes typiques des dérivés de type 12 - -1 N-pyrrolyle ( 1080 cm, déformation symétrique de CH du -1 cycleet 730 cm, déformation asymétrique). EXEMPLE 7 Séparation des énantiomères de l'acide a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique On dissout 35,1 g de chlorhydrate d'yohimbine dans 1800 ml d'eau chaude à 4050 C Apres dissolution, on précipite l'yohimbine base par addition d'ammoniaque 2 A jusqu'à un p H constant de 9 Après deux heures au réfrigérateur ( 4 C) on filtre et on lave à l'eau, puis on laisse le gàteau s'égoutter fortement Sans séchage, on verse la totalité de l'yohimbine base précipité sur un mélange constitué de 1381 ml d'eau et 284 ml d'éthanol contenant 18 g d'acide a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique dissous. On porte la suspension à reflux pendant une heure puis on filtre à chaud et on sépare la matière solide insoluble qui pèse 17 g après séchage On laisse le filtrat refroidir, des aiguilles apparaissant rapi- dement pour se regrouper sous forme d'une rose Apres refroidissement à la température ordinaire, on laisse le solide au réfrigérateur à 4 C Le lendemain, on filtre et on lave à l'eau puis on sèche à 4 C sous vide. Le produit sec pèse 26 g. On concentre les liqueurs mères sous vide jusqu'à apparition de la cristallisation (environ la moitié du volume initial) On ajuste ensuite le p H à 9 avec de l'hydroxyde d'ammonium 2 A et on laisse l'yohimbine base cristalliser pendant une heure Ensuite, on filtre et on lave à l'eau et finalement on sèche l'yohimbine base obtenue On extrait le filtrat avec la moitié de son volume de chlorure de méthylène à p H 1,5 On répète deux fois l'extraction en utilisant chaque fois un demi-volume de chlorure de méthylène Finalement, on évapore le 13 - chlorure de méthylène pour obtenir 2,3 g d'acide D(+)-a- (N-pyrrolyl)-phénylacétique ayant un pouvoir de rotation de + 830. On remet en suspension le premier solide inso- luble dans un litre d'eau à 40-45 C, on ajuste le p H à 9 avec de l'hydroxyde d'ammonium 2 A et on maintient le p H pendant une demi-heure On refroidit à 4 C pendant une heure et on filtre On extrait deux fois le filtrat avec du chlorure de méthylène à p H 1,5 en utilisant un demi- volume à chaque fois Finalement, on chasse le chlorure de méthylène par évaporation pour obtenir 6 g d'acide L(-)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique ayant un pouvoir de rotation de -20 . On remet en suspension les 26 g d'a-(N-pyrrolyl)- phénylacétate d'yohimbine dans un mélange de 1460 ml d'eau et 137 ml d'éthanol On chauffe le mélange à ébullition pendant une heure puis on filtre à chaud Le produit insoluble sec pèse 5 g On laisse tout d'abord le filtrat cristalliser à la température ordinaire puis on le laisse au réfrigérateur pendant une nuit Ensuite, on filtre et on lave à l'eau puis on sèche à 40 C sous vide Le produit sec pèse 16 g On concentre les liqueurs mères sous vide jusqu'au début de cristallisation et on ajuste le p H à 9 avec de l'hydroxyde de sodium 2 N On laisse les liqueurs cristalliser à froid pendant une heure puis on filtre et on lave à l'eau On extrait deux fois le filtrat avec du chlorure de méthylène à p H 1,5 en utili- sant à chaque fois un demi-volume Enfin,on rassemble les phases organiques et on précipite l'acide D-(+)-a- (N-pyrrolyl)-phénylacétique Après séchage, il pèse 1,3 g et a un pouvoir de rotation de + 49,6 On traite comme indiqué ci-dessus le produit insoluble obtenu dans cette seconde recristallisation pour obtenir 1,6 g d'acide L-(-)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique ayant un pouvoir de rotation de -17 . 14 - On recristallise selon la même technique que celle indiquée ci-dessus les 16 g d'a-(N-pyrrolyl)- phénylacétate d'yohimbine pour obtenir 3,2 g d'un sel insoluble qu'on transforme en acide L-(-)-a-(N-pyrrolyl)- phénylacétique pesant 1 g avec un pouvoir de rotation de -17,5 . Le sel d'yohimbine recristallisé pèse 9,3 g et après conversion en acide, on obtient 3 g d'acide L-(-)- a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique ayant un pouvoir de rotation de -19,2 . EXEMPLE 8 Acide c-(N-pyrrolyl)-p-chlorophénylpropionique On dissout 48 g d'acétate de sodium dans 480 ml d'acide acétique On chauffe la solution à ébullition puis on ajoute 24 g ( 0,091 mole) de chlorhydrate de p- chlorophénylanilinate d'éthyle puis 13,5 g ( 0,097 mole) de 2,5diméthoxytétrahydrofuranne Après avoir laissé réagir à la température ordinaire pendant une minute, on verse le mélange réactionnel sur 950 g d'eau glacée On extrait le mélange avec 900 ml d'acétate d'éthyle On obtient l'a-(N-pyrrolyl)-ester par évaporation de l'acé- tate d'éthyle On hydrolyse ensuite le produit avec un alcali dans un mélange de dioxanne et d'eau comme décrit dans les exemples précédents Après élimination du di- oxanne, on extrait le mélange à p H 1,5-2 avec du chloro- forme puis on cristallise le produit avec de l'éther de pétrole Apres séchage, l'acide a-(N-pyrrolyl)-p-chloro- phénylpropionique obtenu pèse 15,2 g et a un point de fusion de 124-126 C Le spectre infrarouge à 0,5 % dans le bromure de-potassium est illustré par la Figure 3. Les résultats d'essais des propriétés thérapeu- tiques des composés selon l'invention figurent ci-après. - Activité d'anti-agrégation plaquettaire On sait depuis de nombreuses années que l'agré- * gation des plaquettes joue un rôle fondamental dans l'hémostase et la pathogénêse des thromboses, en parti- culier des thromboses artérielles. L'agrégation plaquettaire est généralement étudiée in vitro selon une technique photométrique (agrégomètre) décrite par G V R Born, Nature, 194, 927 ( 1962) On emploie pour étudier l'agrégation plaquet- teire provoquée "ex vivo" chez le rat par l'ADP, des rats Wistar ITA 177, exempts d'organismes pathogènes spécifi- ques, pesant 100-250 g. On emploie comme standard l'acide acétyl- salicylique à une dose de 100 mg/kg per os. On administre les produits à étudier à la dose maximale de 200 mg/kg per os. On administre le standard et les produits en solution ou en suspension dans une solution à 10 ml/kg de Tween. On fait jeûner les animaux pendant l'essai et les 17 heures précédentes, mais on leur fournit de l'eau à volonté. Cinq heures après l'administration des produits, on anesthésie les animaux ( 5 par groupe) et on prélève le sang à la veine jugulaire avec une seringue contenant du citrate de sodium à 3,8 %. On calcule le pourcentage d'agrégation par mesure de la différence en mm de l'enregistrement entre le stade initial de l'agrégation et la hauteur de la courbe de l'échantillon 6 minutes après le début de l'agrégation. On exprime ensuite cette valeur en pourcentage en prenant pour 100 % la valeur en mm de la différence entre le plasma riche en plaquette et le plasma pauvre 16 - en plaquettes obtenue lors de l'équilibrage de l'appareil pour l'échantillon examiné. Les résultats obtenus figurent dans le tableau I ci-dessous. ACTIVITE D 'ANTI-AGAEGATION TABLEAU I PLAC)UETTAIREI "EX VIVO" CHEZ Inhibi- Dose tion de Traitement Dgkos N O animaux Poids moyen en g Plaquettes % l'aggré- mg/kg p o gation Contrôle 5 160,0 4,47 86,4 2,15 - Acide acétylsalicy-' 100 5 160 P 0-3,16 20,1-1,49 76,,7 lique Phénylbutazone 100 5 160,O 5 o 48 58,2-7,35 32,6 Acide DL(+) -aloha- (N-pyrroly 1) - phénylacétique 100 5 158,0 O:3,74 25,3 + 9,28 70,7 Acide alpha-(N pyrrolyl)-acétique 100 5 5, ,46 ±> 2 2, DL (+) -alpha (N-pyr- rolyl> -phénylacétate++ d'éthyle 00 ___ 5 162,0-3,74 42, 0-2,58 51,4 Test de Duncan Kramer, P LES RATS -J m% %A O> w K 0, 05 18 - Activité analgésique périphérique contractions provoquées par l'acide acétique Les médicaments qui ont de façon prédominante un effet de suppression de la douleur sont appelés anal- gésiques et sont généralement divisés en narcotiques et non-narcotiques. Les non-narcotiques ne provoquent pas de sommeil ni d'accoutumance et sont inefficaces contre certaines formes de douleur Les plus caractéristiques de ce groupe sont les salicylates. La méthode expérimentale consiste à injecter un irritant tel que l'acide acétique dans le péritoine du rat pour provoquer des contorsions douloureuses évi- dentes telles qu'un étirement des pattes arrière et une torsion des muscles dorso-abdominaux. Le mécanisme d'action de l'acide acétyl- salicylique en tant qu'analgésique semble se situé à deux niveaux, l'un central et l'autre périphérique avec antagonisme de l'action périphérique de la bradykinine, soit à l'endroit o le stimulus nociceptif se produit soit par inhibition-du passage de la bradykinine à tra- vers la barrière hémato-encéphalique. On utilise deux lots de souris NMRI élevées dans notre centre d'élevage d'animaux exempts d'organismes pathogènes spécifiques dans des conditions de température et d'humidité constantes de 23 + 0,50 C et 70 + 5 %. Standard: acide acétylsalicylique Véhicule: propylèneglycol/eau: 40/60 v Cages en plastique transparent. On répartit les souris en groupes de 10 ani- maux On fixe au hasard l'ordre des essais et le traite- ment de chaque groupe. On fait jeaner les souris pendant 15-18 heures en leur fournissant de l'eau à volonté et on leur admi- nistre les traitements prévus per os ( 10 mg/kg) en solu- tion ou en suspension dans le véhicule. 19 -. Le lot témoin reçoit le véhicule Comme standard on emploie l'acide acétylsalicylique à une dose de 100 mg/kg en suspension dans le meme véhicule et on l'adminis- tre per os. Après 30 minutes, on administre par voie intra- péritonéale 0,25 ml de solution d'acide acétique à 0,5 % pour 20 g de poids corporel. On laisse s'écouler 15 minutes, puis on observe les souris pendant une demi-heure en les plaçant chacune dans une cage en plastique transparent retournée. On compte le nombre des contorsions douloureuses et pour évaluer le résultat, on calcule la moyenne du nom- bre des étirements de chaque lot et on l'exprime par le pourcentage d'inhibition relativement aux témoins, selon l'équation suivante: % de protection c b x 100 c o c est la moyenne du nombre des étirements du groupe témoin et b la moyenne du nombre des étirements du groupe traité. On peut évaluer la significativité statistique entre les lots selon le test de Duncan-Kramer avec p II ci-dessous. TABLEAU II Activité analgésique Contorsions induites par 0,05 % d'acide acétique d'une des souris m Ales NMRI (n= 10) TraitementDose No contorsions % inhibition parN orsae Traitementmg/kg X + s e rapport au contrôle des _ contorsions Contrôle 100 27 o 1 4,3 10/10 Acide acétylsalicylique100 17 f 3,5 37,27 10/10 Acide DL(+) -alpha (N- pyrrolyl)-phényl 1055, 9771 acétiques O ' 1879771 Acide D (+> -alpha (N- pyrrolyl) -phényl- acétique 100 7,9 f 2,6 70,9 8/10 Acide L (-) -alpha (N- pyrrolyl)-phényl 1064197, acétique O 419 62/0 DL (+) -a'lpha (N- pyrrolyl) -p-hydroxy- phénylacétate de dibenzylamfinle 100 7 t 5 + 2,2 72 t 3 9/10 Test de Duncan Kramer: p NO w 21- REVENDICATIONS 1. Procédé pour la préparation d'a-(N-pyrrolyl)- acides et de leurs sels et esters, répondant à la formule I: R 1 R 2 N-CH-COOR' () R 3 3 A R 4 dans laquelle R, R 1, R 2, R 3 et R 4 représentent des atomes d'hydrogène ou des radicaux alkyles, aryles, alkylaryles ou hétérocycliques substitués ou non substitués et R' représente un cation métallique, une base organique ou un radical organique, dans lequel on fait réagir un amino-ester correspondant de formule générale: R-CH-COO-R' I NH 2 dans laquelle R est comme défini ci-dessus et R' repré- sente un cation métallique, une base organique ou un radical organique, avec un dialcoxytétrahydrofuranne ou un de ses dérivés. 22 - 2. Procédé selon la revendication 1 dans lequel on fait réagir un ahalogéno-ester répondant à la formule: R-CH-COOR' Y dans laquelle Y représente un atome d'halogène et R et R' sont comme précédemment défini, avec le pyrrole ou un de ses dérivés pour obtenir les N-pyrrolyl-acides. 3. DL(+)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétate d'éthyle. 4. DL(+)-a-(N-pyrrolyl)-p-hydroxyphénylacétate de dibenzylamine. 5 Acide DL(+)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique. 6. D(+) (N-pyrrolyl)-phénylacétique. 7. Acide L(-)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique. 8. Nouveaux médicaments ayant notamment une activité analgésique et d'anti-agrégation plaquettaire, contenant comme ingrédient actif une quantité thérapeu- tique efficace d'un ou plusieurs des composés selon l'une quelconque des revendications 3 à 7 en association avec des excipients et/ou d'autres substances actives accep- tables en pharmacie.