FR 2515645 A1 19830506 FR 8218020 A 19821027 Dérivés de la proline optiquement actifs, procédé pour leur préparation et leur application ". invention concerne des dérivée de la pro- line optiquement actifs, caractérisées en ce qu'ils répon- dent à la formule générale suivante: Ho OH 2 14 31 H 205 2 O 1 HEOOH (I), N 1 w|H 2 2 ' OHO I R oh X représente un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxyle et R un atome d'hydrogène, un groupe phényle non substi- tué ou substitué par un groupe aleoyle, ou un groupe al- coyle à chatne droite ou ramifiée, avec 1 à 20 atomes de carbones et un procédé pour la préparation de ces pro- duits caractérisé en ce que l'on fait réagir la proline ou la 4-hydroxyproline, sous forme d'énantiomère pur, en solution dans un alcanol àl à 4 atomes de carbone, avec une quantité de 0,9 à 2 fois molaire d'un alcoolate de no,99,çnmw 'no eT=p ainieqo i Io çç leúTmwcl e-1 q O -, uqc T OZA-neo ue SI= -colmo Ttir, *(II) erexquq-9 e Tnmoj: op epûrodgi T OGA 13 lG T Ot MOTU 4 T IQ 4 UWPU 069 E> = 00 UTTISOTU TU 49 M Up Ol - ulooo Tu 'CM oe le a:-ç"mgz 4-çlej: e T uo lO 4 eu O qat-o op oemolie -V q T 'q Touvo TB cm stmp auci owp Tozd-jroxpúq-> op no eu TT Oç -O-zcl e T op ejqmo T,kueug -cm inooe-çp uo lueme-ab-çqdo OUTTO-Tc, BT op sg &,F Zgp sa-l Iea:t>dgxd ino', "(,a) 'no (S) "(su) 13 Taequeag Ici 4-ned j Z uo-94- E 30 d ue euoqi:eo op emol 7 a&T Ileuq"cu:p,úqi T op eûb eso'qo empae e 4 ueo-g Idea: -g 4 (j) erexquq S e Tnmxoj: e T s=p g Z 9-un equeogzd t, uo-çq -Fsod tze euoqxw op emo,Ui T 1110 X n'O quo e T OUW,e 11 (s) 'aor,UXUSI Timoo e= e 4 mreogzd z uo-i 4 'rsod ve euoqzw op emo,- e& 7 l 07 leub -99 T axmp ( 1) e Twgugs e Tmu O j op OUTTO Zd e T op Sg ATxgp xne eotmqxodm epu MX 2 eun e-q OU 4473 UO oz oep TnbçT es-oqc T ue e-ç-qdax"oqtmoaqo aunp ue om ne Sejq O Eo-vlwmq sep UOTI Uzudgo ME moep elux Tqo esuqcl emiỏo Ioeub TTI-elgm suo-Vp sg,-a-lg-qo sexe-l&oo op emzoj v T Emos ex&neo ue jem sel: uog-nb eo tie egs-çzqlovmm (I) e Tuagug" e Tauuo X op "ej:Tqo 13 queme-nb- ld O e UT 7 l O zcl ri T VT OP 09 A Tx 9 P BGP UO- f-BOT Tddui T Md 9 ul- lOUOD 4139 UOT 4- -Ue Au Ti T OP jarqo ej:-,'av = Ileoueubgouoo ug aep-pnb' T eseqd ue e Tqdvj 2 oliomzqo aud sezqmo T,u= 9,p uo Vlsxvc Tgs v T op slo T e Texlrqo ex-çj: es-eqd euwoo Ilseab TI-L-e-k 9 W 13 UO' #P 094-16 TRO BGXG Td OEOO OP OMOZ OT enos 090- T I U e X 40 quemed (I) 9 T= 9 u 99 e Tnmxoj: op aeq-Da 4 uemenb TD Clo Ou Tioad 'e T op og &- Igp SOI -, uemmepgoqxd anb emgm 'BT 'a j 'q O e T= 9 u 92 e Tr Lmxoj op epúx Ode - Cmj P Sa' 'BTOM O-POZ T OP 91-Tlzmnb 9 un q-O "TOWBOTM&t N WMP'OEO 60 GZXOO =-l'e OT 13 Te 9,9 m s 9 s Ls Z utilise de préférence le méthanol ou l'éthanol D'autres alcanols appropriés sont le n-propanol, l'alcool isopro- pylique, le n-butanol, l'alcool butylique secondaire, l'alcool isobutylique ou l'alcool tertio-butylique. L'alcanol est utilisé en quantité comprise entre 0,5 et 5 litres, de préférence 1 et 2 litres, par mole de proline ou de 4-hydroxy-proline. I'alcoolate de métal alcalin correspon- dant à l'alcanol mis en oeuvre, de préférence l'alcoolate de sodium ou de potassium, est utilisé en quantité com- prise entre 0,9 et 2 moles, de préférence 1 mole par mole de proline ou de 4-hydroxy-proline Il peut Otre ajouté tel quel, ou Otre prépar 4 in situ par dissolution du métal alcalin ou de l'hydroxyde de métal alcalin dans l'alcanol. L'époxyde de formule générale (II) est utilisé en une quantité comprise entre 1 et 3 moles, de préférence 1 et 2 moles, ou mieux 1 mole, par mole de proline ou de 4-bydroxy-proline Comme exemples dt'époxy- des de formule générale (II) utilisables on peut citer les oxyde d'éthylène, 1,2-époxy-propane, 1,2-époxy-bu- tane, l,2-époxy-hexne, 1,2-époxy-octane, 1,2-époxy- décane, 1,2-époxy-dodécane, 1 t 2-époxy-tétradéq ane, 1,2 6 poxy-hexadéoane, 1,2-époxy-octodécane, 1,2-époxy-eico- sane, oxyde de styrène ou oxyde de styrène substitué par un groupe méthyl sur le noyau. la réaction s'effectue en général à la pression ordinaire Ia température de la réaction peut se situer entre O et 1500 C, de préférence entre 1500 et la température d'ébullition du mélange réactionnel. Se dérivé de proline optiquement actif de formule générale (I) ainsi formé peut Otre récupéré par neutralisation du mélange réactionnel, séparation du sel de métal alcalin cristallisé et élimination de l'alcanol par distillation Une autre possibilité consiste à faire adsorber les ions de métal alcalin par un échangeur d'ions faiblement acide et concentrer la solution neu- tre d'élution On a souvent avantage aussi à ajouter de l'eau au mélange réactionnel, et séparer le dérivé de la proline optiquement actif de formule générale (I) qui cristallise. Dans le dérivé de la proline optiquement actif de formule générale (I), lorsque R représente autre chose que de l'hydrogène, l'atome de carbone en position 21 peut présenter la configuration (RS) Il se présente alors-dans le cas d'une configuration homogène de l'ato- me de carbone en position 2, ou éventuellement 4 sous forme de mélange de deux diastéréoisomères On obtient par exemple, en partant de proline (S) et du 1,2-époxy- tétradécane, un mélange des deux composés diastéréoiso- mères entre eux, soit la ( 2 'S, 2 S)-N-( 2-bydroxy-tétradé- cyl)-proline et la ( 2,R, 2 S)-N-( 2-hydroxy-tétradécyl)- proline Un mélange de diastéréoisomères de ce type peut être séparé, par exemple par cristallisation frac- tionnée, de façon à obtenir des énantiomères purs, sté- riquement homogènes. la séparation d'un tel mélange de dias- téréOisomères n'est toutefois en général aucunement néces- saire, car le mélange sous forme de complexe chélaté d'ion métallique, comme phase stationnaire chirale, est également étonnement plus stéréosélectif, en cas de séparation de racémate, que les complexes chélatés d'ion métallique d'énantiomère pur. Pour l'applioation selon l'invention des dérivés de la proline optiquement actifs de formule générale (I), sous forme de complexes chélatés d'ions métalliques, comme phase stationnaire chirale, dans la séparation d'énantiomères par chromatographie en phase liquide, on fait passer les dérivés de proline sur une colonne do Kieselgel modifiée par un silane On charge la colonne avec le produit de manière connue, comme il est décrit par exemple dans Chromatographia 13, pages 677 à 684 ( 1980) Ensuite, par adsorption d'un ion métal- lique approprié, il se forme un complexe chélaté Comme ions métalliques, on peut utiliser les ions suivants: u 2 +, Ni 2 + Zn 2 +, Cd 2 +, Pg 2 + ou Co 3 + On utilise de pré- férence Ou Ie principe de la chromatographie de sépa- ration de ligands présentant des propriétés de chiralité est représenté par des modèles de complexation d'ions métalliques et des formateurs de chélates optiquement actifs, oh aussi bien le sélecteur ici un dérivé de la proline optiquement actif de formule générale I que le sélecté, doivent présenter des caractéristiques de struc- ture formatrices du cycle chélaté Vient ensuite la for- mation de complexes chélatés mélangés, avec deux ligands d'activité différente optique Ie complexe global pos- sède alors des propriétés de diastéréoisomères Une bonne énantiosélectivité peut être obtenue, lorsque les cinétiques des opérations d'association et de dissocia- tion dans la séparation de ligands sont suffisamment différentes pour les deux couples de diast 6 réoisomères. les complexes chélatés d'ions métalliques des dérivés de la proline optiquement actifs de formule générale (I) présentent, par exemple lors de la sépara- tion de racéinates d'acides k-aminocarboxyliques, des indices d'6 nantio-sélectivité très élevées (indices-cd). Sous ce rapport, ils sont comparables aux phases sta- tionnaires chirales décrites dans Chimia 35, pages 294 et suivantes ( 1981). Un avantage technique particulièrement important des dérivés de la proline optiquement actifs de formule générale (I) consiste en ce qu'ils sont très facilement accessibles la préparation des complexes ché- latés d'ions métalliques est donc nettement plus simple que celle d'autres sélecteurs utilisés pour la même appli- catian. A l'aide des complexes chélatés d'ions métalliques des dérivés de la proline optiquement actifs de formule générale (I), l a même été possible, pour la première fois, de séparer les acides thiazolidine-4- carboxyliques racémiques en antipodes, avec une énantio- sélectivité remarquable Il est également possible de dissocier simultanément par exemple un mélange de sté- réoisomères d'un acide aminé et de son dérivé acylé, en acide aminé (R), acide aminé (S), acide N-acyl-(R)-aminé et acide N-acyl-(S)-aminé Ies complexes chélat 6 S d'ions métalliques des dérivés de la proline optiquement actifs, de formule générale (I), conviennent donc aussi de façon remarquable comme phase stationnaire dans la séparation simultanée par chromatographie en phase liquide, d'iso- mères de structure ou de stéréoisomères m Ome de diffé- rentes classes de composés Mais il est également possi- ble de séparer simultanément les stéréoisomères de diff 4- rents représentants d'une même classe de composés, par exemple les aminoacides, en particulier les acides carbo- xyliques c -aminés. Des complexes chélatés d'ions métalliques des dérivés de la proline optiquement actifs de formule générale (I) déterminés peuvent trouver une application non seulement pour la séparation de racémates, mais aussi comme catalyseurs dans la préparation de composés ayant des propriétés de chiralité, par hydrogénation asymétri- que de composés ayant des propriétés de prochiralité. les dérivés de la proline optiquement actifs, de formule générale (I) euxm Omes présentent, lorsque R est suffisamment grand pour conférer des pro- priétés hydrophobes à la cha Ine latérale, également une efficacité remarquable comme émulsionnants. L'invention sera mieux comprise à l'aide des exemples décrits ci-après: Exemple 1: On dissout 57,6 g de proline ( 25) ( 0,5 mole) dans 800 ml de méthanol contenant 0,5 mole de méthylate de sodium Après addition de 106 g ( 0,5 mole) de 1,2-époxy-tétradécane, on laisse reposer la solution pendant 20 heures à la température ambiante. A l'aide d'acide chlorhydrique méthanoli- que, on établit le p H à 6 et l'on filtre le chlorure de sodium cristallisé Après élimination du méthanol par distillation, il reste un résidu huileux, que l'on fait cristalliser par mélange avec 700 ml d'acétone On obtient 146,5 g ( 89,6 % de la théorie) de cristaux inco- lores de ( 2 S, 2 t RS)-N-( 2-hydroxy-tétradécyl)-proline La zone de fusion du mélange de diastéréoisomères s'étend de 99 à 11800. Analyse élémentaire a H N 019 E 37 N 03 trouvé 69,51 % 11,20 % 4,15 % calculé 69,68 % 11,39 % 4,28 % r 20 L D = 30,5 (c = 1: méthanol). Une colonne de chromatographie du com- merce, destinée à la chromatographie-en phase liquide sous pression élevée, 4,6 x 250 mm, remplie de particu- les de Kieselgel modifiées par de l'octylsilane, avec une dimension moyenne des particules de 101 w, a été condi- tionnée d'abord avec un mélange de 15 % en volume de méthanol et 85 % en volume d'eau On a fait passer alors sur la colonne 2 ml d'une solution méthanolique de 50 mg du mélange de diastéréoisomères, mentionné plus haut, avec un débit de 0,5 ml par minute On fait passer en- suite, par pompage, dans la colonne, 2 ml d'une solu- tion saturée d'acétate de cuivre II dans un mélange de o en volume de méthanol et 85 % en volume d'eau les sels en excès ont été éliminés par lavage avec 100 ml d'un mélange de 15 % en volume de méthanol et 85 % en volume d'eau, contenant 1 10-5 mole d'acétate de cuivre II. Sur la colonne ainsi garnie, on a in Jecté pi d'une solution à 0,1 % en poids d'acide tiazolidi- ne-4-carboxylique racémique Comme éluant on a utilisé un mélange de 15 % en volume de méthanol et 85 % en vo- lume d'une solution 10 '4 molaire d'acétate de cuivre II, On a a Justé le débit à 2 ml par minute la séparation s'est effectuée à la température ambiante avec une sélec- tivité de c = 2,1. Exemple 2: On a opéré comme dans l'exemple 1 Comme époxyde, on a utilisé 120,1 g ( 0,5 mole) de 1,2-époxy- hexadécane On a obtenu 164,4 g ( 92,5 % de la théorie) de cristaux incolores de ( 2 S, 2 'RS)-N-( 2-hydroxy-hexadécyl)- proline la zone de fusion du mélange de diastéréolsomè- res s'étend de 145 à 170 00. E Rl D = 27,70 ( c = 0,5 j méthanol) Analyse élémentaire: a H N a 21041 N 03trouvé 70,83 % 11,71 % 3,98 % calculé: 70,94 % 11,62 % 3,94 % Exemple 3: 2,3 g ( 0,1 mole) de sodium ont été dissous dans 150 ml de méthanol Après addition de 11,5 g ( 0,1 mole) de ( 2 S)-proline et 20,2 g de 1,2-6 poxydodécane ( 0,1 mole), la solution a été portée à l'ébullition sous reflux pendant 2 heures. Après refroidissement, on a fait passer la solution dans une colonne remplie d'une résine échan- geuse d'ions ( 100 ml) légèrement acide (Iewatite ON P 80) puis on a concentré la solution neutre d'élution Jusqu'à g Par cristallisation fractionnée effectuée par addi- tion fractionnée de diéthyléther, on a obtenu une sépa- ration des deux diastéréoisomères de la ( 2 S)-N-( 2-hydroxy- dodécyl)-proline. Forme à fusion élevée: F = 138 13900 rl kl D 5 = -14,70 (c = 0,5: 1thanol) DO S n-Butanol: Méthanol: H 20 = 4 S 5: 1, gel de silice Rf = 0,51 Forme à basse fusion: F = 118 12000 2 lc(j D 5 3558 e (c = 1; Ethanol) DO: n-Butanol: Méthanol: H 20 = 4: 5: 1 gel de silice Rf = 0,42 Bxemple 4: On dissout 34,5 g de ( 2 S)-proline ( 0,3 mole) dans 400 ml de méthanol contenant 16,2 g de méthy- late de sodium ( 0,3 mole) Après addition de 54 g d'oxyde de styrène ( 0,45 mole), la température est montée lente- ment à 50 C. Après 20 heures de repos à la température ambiante, on a fait passer la solution claire sur une colonne contenant 250 ml d'échangeur d'ions faiblement acide (Lewatit ON P 80) la solution élevée neutre a été soumise à évaporation sous pression réduite l Ie résidu huileux cristallise par agitation avec de l'aeétone On obtient 28,3 g de cristaux incolores de ( 2 S, 2 t RS)-N-( 2- hydroxy-2-phényl-éthyl)-proline Ie mélange de diastér 6 o- isomères fond à 165 181 OC. Analyse élémentaire: C H N 13 l 7 HN 03trouvé: 66,22 % 7,29 % 5,78 % calculé S 66,36 % 7,28 % 5,95 % E xe O _ 55,80 (c 0,5 t Mthanol) Exemile 5 s 34,5 g de ( 2 S)-proline ( 0,8 mole) et 12 g d'hydroxyde de sodium ont été dissous dans 600 ml de méthanol et refroidis à 10 00 Après addition de 15,9 g ( 0,36 mole) d'oxyde d'éthylène, on a laissé reposer le mélange pendant 20 heures à la température ambiante le produit cristallise au cours de la neutralisation, et b le fait recristalliser dans le méthanol. On obtient 29,7 g de cristaux incolores de ( 2 S)-N ( 2-hydroxy-éthyl)-proline. Point de fusion: 199-2000 Analyse élémentaire: O H N 74 NO 3 trouvé: 52, 89 % 8,11 % 8,69 % calculé: 52,81 % 8,22 % 8,80 % lC O = _ 67,9 (c = 2; eau) Exemple 6: On opère comme dans l'exemple 5, mais à la place de la ( 2 S)-proline, on utilise 39,3 g de ( 25, 4 R)- 4-hydroxy-proline ( 0,3 mole) On obtient 34,4 g ( 67,4 % de la théorie) de cristaux incolores de ( 2 S, 4 R)-N-( 2- hydroxy-éthyl)-4-hydroxy-proline. Point de fusion = 202 20400 Analyse Alimentaire: a H N ci 3 N 04 trouvé: 47,97 % 7,43 % 7,89 % calculé: 47,99 % 7,48 % 8,00 % 20 D = 78,0 (c = 2; eau). xemvle 7: 78,6 g de ( 2 S, 4 R)-4-hydroxy-proline ( 0,6 mole), sont dissous dans 1 1 de méthanol contenant 32,4 g de méthylate de sodium Après addition de 76,8 g de 1,2- époxy-octane ( 0,6 mole), la solution reste au repos pen- dant 20 heures On établit alors le p H à 6 avec de l'aci- de chlorhydrique, et élimine le méthanol par distillation. Le résidu est recristallisé dans 300 ml d'eau On obtient 130, 7 g ( 84,1 i % de la théorie) de cristaux incolores de l ( 2 S, 4 R, 2,RS)-N-( 2-hydroxy-octyl)-4-hydroxy-proline. Ia zone de fusion du mélange de diastéréo- isomères se situe entre 132 et 140 C 0. Analyse élémentaire: a H N C 13 H 25 N 04trouvé: 60,13 % 9,63 % 5,28 % calculé: 60,20 % 9,72 % 5,40 % LD = 50 '50 (c = 1; Méthanol) Exem Dle 8: On opère comme dans l'exemple 7 Comme époxyde, on utilise 93,6 g de 1,2-époxy-décane ( 0,6 mole). Après recristallisation dans 900 ml d'eau, on obtient ,3 g ( 90 % de la théorie) de cristaux incolores de ( 2 S, 4 R, 2 't RS)-N-( 2-hydroxy-décyl)-4-hydroxy-proline. Ia zone de fusion du mélange de diast 6 réo- isomères va de 145 à 154 C. = 47,80 (c =: Analyse élémentaire: 015 H 29 NO 4 trouvé: calculé: 1 g méthanol) a 62,65 % 62,68 % H ,03 % ,17 % N 4,78 % 4,87 % Exemple 9 s On opère comme dans l'exemple 7 Comme époxyde, on utilise 110,4 g de 1,2époxy-dodécane ( 0,6 mole) Après la fin de la réaction, on ajoute 1,5 1 d'eau et établit le p H à 6 avec de l'acide chlorhydrique Ia ( 2 S, 4 R, 2 ' TS)-N ( 2-hydroxy-dodécyl)-4-hydroxy-proline cristallise On obtient après filtration sous vide par- tiel, lavage et séchage, 177,8 g ( 93,7 % de la théorie) de cristaux incolores. la zone de fusion du mélange de diastéréo- isomères s'étend de 98 à 106 C 0. t 4 20 = 42,20 (c = o,5 méthanol) Q yse élémentaire: C H N C 17 H 33 N 04trouvé: 64,69 % 10,49 % 4, 39 % calculé: 64,72 % 10,54 % 4,44 % Comme il est décrit dans l'exemple 1, on charge une colonne de ehromatographie du commerce avec le mélange de diastéréoisomères ci-dessus. Sur la colonne ainsi chargée, on injecte à l'aide d'un injecteur à boucle, 10)W 1 d'une solution aqueuse à 0,1 % en poids d'acide thiazolidine -4-carboxy- lique racémique la colonne est maintenue à température constante -à l'aide d'une enveloppe constituant un bain d'eau à 5000 Comme éluant, on a utilisé un mélange à 15 % en volume de méthanol et 85 % en volume d'une solu- tion 10-4 molaire d'acétate de cuivre II, avec un débit de 2 ml/minute 6 minutes après, on obtient l'élution de l'acide L-thiazolidine-4carboxylique, 18 minutes, après celle de l'acide D-thiazolidine-4carboxylique la détection des substances s'est effectuée à l'aide d'un détecteur UV à longueurs d'onde variable, avec des lon- gueurs d'onde de 200 à 250 nm. Sur la même colonne, on a dissocié un mélange de N-acétyl-DI-méthionine et de Dl-méthionine. Comme éluant, on a utilisé un mélange de 10 % en volume de méthanol et 90 % en volume d'une solution 10-4 molaire d'acétate de cuivre II, avec un débit de 3 ml par minute. l Ies durées de rétention suivantes ont été observées: N-Acétyl-Iméthionine 2,4 Minutes N-Acétyl-D-méthionine 2,7 Minutes I-Méthionine 6,8 Minutes D-M 6thionine 9,4 Minutes Comme il a été décrit pour la séparation de l'acide thiazolidine-4-carboxylique racémique, on peut dissocier, entre autres, les acides carboxyliques aminés racémiques suivants: arginine, aspargine, acide asparti- que, alanine, acide 4,4-diméthyl-thiazolidine-carboxyli- que, glutamine, isoleucine, leucine, lysine, phénylala- nine, proline, sérine et thréonine. Exemple 10: On opère comme dans l'exemple 1, avec cette différence qu'on a utilisé à la place de méthanol, 1000 ml d'éthanol et à la place du méthylate de sodium, 0,5 mole d'éthylate de sodium On obtient 150 g ( 91,7 % de la théo- rie) du mélange des diastéréoisomères de ( 2 S, 2 t S)-N-( 2 _ hydroxy-tétradécyl)-proline et ( 2 S, 2,R)-N-( 2-hydroxy-tétra- décyl)-proline. Exemple l: On a opéré comme dans l'exemple 10 avec cette différence qu'à la place de l'éthanol, on a utilisé 1000 ml de tert-butanol et à la place de l'éthylate de sodium, 0,5 mole de tert -butylate de potassium On obtient 141 g ( 86,2 % de la théorie) de cristaux incolores du mélange de diastéréoisomères. Exemple 12: On opère comme dans l'exemple 7 avec cette différence qu'on utilise, à la place du 1,2 époxy-octane, 127,2 g ( 0,6 mole) de 1,2-époxy-tétradécane Après la fin de la réaction, on ajoute 1,5 1 d'eau au mélange réaction- nel, et l'on établit le p H à 6 avec de l'acide chlorhydri- que La ( 2 S, 4 R, 2 'RS)-N-( 2-hydroxy-t 6 tradécyl)-4-hydroxy- proline cristallise On obtient après filtration par aspi- ration, lavage à l'eau et séchage, 185,1 g ( 90 % de la théorie) de cristaux incolores. la zone de fusion du mélange de diastér 6 o- isomères s'étend de 136 à 1540 C. =D = -36,80 ( c = 0,5 méthanol) Analyse élémentaire À a H N C 19 H 37 NO 04trouvé: 66,09 % 10,65 % 4,10 % calculé: 66, 43 % 10,86 % 4,07 % Comme décrit dans l'exemple 1, une colonne de chromatographie est garnie avec ce mélange de diastéréo- isomères. Ia colonne ainsi garnie a dissocié, dans les conditions indiquées dans l'exemple 1, la proline racémique avec une sélectivité dei = 3. Egalement comme il a été décrit dans l'exemple 1, on a garni une colonne toujours du type courant, mais dont le remplissage était constitué de particules de gel de silice modifiées par de l'octadé- cylsilane, avec une dimension moyenne des particules de 5 ", avec le mélange de diastéréoisomères ci-dessus. Sur la colonne ainsi garnie, on a injecté 5 " 1 d'une solution à 0,1 % en poids d'alaniue racémi- que Comme éluant, on a utilisé un mélange de 15 % en volume de méthanol et 85 % en volume d'une solution 104 molaire d'acétate de cuivre II On règle le débit à 2 ml/minute la dissociation s'effectue à la tempéra- ture ambiante Ia I-alanine a été éluée apres 5,9 minu- tes, la D-alanine après 8,2 minutes. REVENDICATIONS 1 ) Dérivés de la proline optiquement actifs, caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule générale suivante s H OH 2 14 31 H 205 2 CLOOH (), N l E 2 O HOH R oi X représente un atome d'hydrogène ou un groupe hydro- xyle et R un atome d'hydrogène, un groupe phényle non substitué ou substitué par un groupe alcoyle, ou un groupe alcoyle à chalne droite ou ramifiée, avec 1 à 20 atomes de carbone. 2 ) Procédé pour la préparation des déri- vés de proline optiquement actifs de formule générale (I), caractérisé en ce que l'on fait réagir la proline ou la 4-hydroxy-proline, sous forme d'énantiomère pur, en solution dans un alcanol à 1 à 4 atomes de carbone, avec une quantité de 0,9 à 2 fois molaire d'un alcoolate de métal alcalin correspondant à l'aloanol, et une quantité de 1 à 3 fois molaires d'un époxyde de formule générale: R O H,-H 2 o oh R a la m&me signification que précédemment. 3 ) Application des dérivés de la proline optiquement actifs, de formule générale (I) caractérisée an ce qu'on les met en oeuvre, sous la forme de complexes ohélatés d'ions métalliques, comme phase stationnaire chirale dans la S 4 paration des 4 nantiomères au moyen d 'ume chr'omatographie on phase liquide.