FR 2515188 A1 19830429 FR 8120135 A 19811027 La présente invention concerne de nouveaux dérivés de 3-amino Drégn-5-ène, ainsi que leurs sels, le procédé de préparation, l'application à titre de médicaments de ces nou- veaux dérivés et les compositions les renfermant. L'invention a pour objet de nouveaux dérivés du 3-amino urégn-5-ène, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce qu'ils répon- dent à la formule générale I: x I ou /C-%IIH R 1 dans laquelle X reprsente un groupement dans laquelle X représente un groupement 1 l traits ondulés signifient que le radical correspondant se trouve dans l'une ou l'autre des configurations a ou 3, R 1 représente un atome d'hydrogène, un radical alcoyle ren- fermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou hydroxyalcoyle renfer- mant de 2 à 5 atomes de carbone, R 2 représente un atome d'hydrogène, un radical alcoyle ren- fermant de 1 à 5 atomes de carbone, hydroxy alcoyle renfer- mant de 2 à 5 atomes de carbone, acyle ou alcoxy carbonyle renfermant de 2 à 8 atomes de carbone, ou un radical dérivé d'un acide a-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés dont l'amine est libre ou mono, ou disubstituée par un radical alcoyle renfermant de I à 5 atomes de carbone, étant entendu que d'une part, R 1 et R 2 ne représentent pas en même temps, un atome d'hydrogène, d'autre part, i) lorsque X représente un groupement C/3 si R 1 représente un radical méthyle, R 2 ne représente pas un radical hydroxyéthyle, si le groupement amino est en position 30, R 1 et R 2 ne peuvent pas représenter en même temps un radical méthyle, hydroxy éthyle ou chloroéthyle, si le groupement amino est en position 3 P et R 2 représente un radical méthyle, R 1 ne peut pas représenter un atome d'hydrogène, Cqul ii) lorsque X représente un groupement que le C/QH groupement amino est en position 3 O, et que R 2 représente un radical méthyle, R 1 ne peut pas représenter un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, CH 3 iii) lorsque X représente un groupement H-o H si R 1 représente un radical méthyle, R 2 ne représente pas un radical méthyle, si R 1 représente l'hydrogène, R 2 ne représente pas un radical méthyle lorsque le groupement amino est en position 3 a, si R 1 représente l'hydrogène, R 2 ne représente pas un radical éthoxy carbonyle lorsque le groupement amino est en position 3. Dans la formule générale I, et dans ce qui suit, le terme radical alcoylerenfermant de 1 à 5 atomes de carbone désigne, par exemple, un radical méthyle, éthy 14 propyl E isopropylp butyle isobutyle ou penty; le terme radical hydroxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone désigne, par exemple, un radical hy- droxyéthyleou hydroxypropyl; le terme radical acyl renfermant de 2 à 8 atomes de carbone désigne, par exemple, un radical acé- tyle, propionyl, n-butyryl, isobutyryle, benzoyle ou nicotinoyl, le terme radical alcoxycarbonyle renfermant de 2 à 8 atomes de car- bone désigne, par exemple, un radical méthoxy,-éthoxy ou pro- poxycarbonyl le reste dérivé d'un acide amino carboxylique peut Atre choisi par exemple dans le groupe constitué par Ala, Val Leu, Ile, Asp, Asn,Glu, Gln, Ser, Thr, Cys, Met, Lys, Arg, Phe, Tyr, Trp, His, Pro, Nva, Nle, Hyp, Orn, ces acides aminés étantsous la forme D ou L, ainsi que par Sar et Gly; lorsque R 2 représente un radical dérivé d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides o-ami- nés, ceux-cl sont choisis dans le groupe constitué par les a- cides "-aminés ci-dessus. Lorsque les acides a-aminés ou les peptides sont n-mono- ou di-alcoylés, c'est de préférence par des radicaux méthyle, éthyle ou propyle. On admettra par convention que les symboles des acides o- amino carboxyliques représentent ces acides sous leur configu- ration D ou L (par exemple, le terme Ala signifie Alanine sous forme D ou sous forme L). 2 - La nomenclature utilisée dans la présente demande est la nomenclature IUPAC, dont les règles sont publiées notam- ment dans Biochem J ( 1972) 126, 773-780. Les sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques peuvent être, par exemple, les sels formés avec les acides chlo- rhydrique, bromhydrique, nitrique, sulfurique, phosphorique, acétique, formique, propionique, benzoique, maléique, fumarique, succinique, tartrique, citrique, oxalique, glyoxylique, aspar- tique, alcane sulfoniques tels que les acides méthane ou éthane sulfoniques, arylsulfoniques,tels que les acides benzène ou pa- ratoluène sulfoniques et arylcarboxyliques. Parmi les produits, objet de l'invention, on peut citer notamment les dérivés répondant à la formule I ci-dessus, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce que, dans ladite formule I, le groupement amino est en position 3 a, R 1 représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoyle renfermant de 1 à 3 atomes de carbone, et R 2 représente un atome d'hydrogène, un radical alcoyle ou hydroxy alcoyle renfermant de 1 à 3 atomes de carbone, un radical nicotinoyle ou un radical dérivé d'un acide a-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés. Parmi ceux-ci, on peut citer plus particulièrement les dé- rivés caractérisés en ce que, dans ladite formule I, X repré- CH sente un groupement CH ou dont l'hydroxyde est H o. en position 20 " et toutt particulièrement les dérivés préparés dans les exemples. L'invention a également pour objet un procédé de prépara- tion des dérivés, tels que définis par la formule I ci-dessus, ainsi que de leurs sels, caractérisé en ce que l'on fait réagir une amine de formule II: dans laquelle le trait ondulé et X ont la signification déjà indiquée, 3 - -4 - soit avec un halogénure de formule III Hal-R III dans laquelle Hal représente un atome de chlore, de brome ou d'iode, et R'2 représente un radical acyleou alcoxycarbonyle renfermant de 2 à 8 atomes de carbone, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle R 1 représente un atome d'hydrogène, R 2 représente un radical acylaou alcoxycarbonyle renfermant de 2 à 8 atomes de carbone, X, et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, produit de formule I que l'on iso- le et salifie si désiré, soit avec un "-amino acide ou un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés dont la fonction amine lorsqu'elle est li Lbreestprotégéeparun groupeent facilennent clivablenotamment parhydrolyse acideouparhydrogénolyse>puis traite de façon à éliminer le groupement protecteur, pour ob- tenir un produit de formule I dans laquelle P représente un atome d'hydrogène, R 2 représente un radical dérivé d'un acide "-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides "-aminés, et X, et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et salifie si désiré, soit avec un halogénure d'alcoyle Cl-C 5 ou d'hydroxyalcoyle ren- fermant de 2 à 5 atomes de carbone et dont l'halogène est un atome de chlore, de brome ou d'iode, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle l'amine-en 3 est mono ou disubstituée par un radical alcoyl renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxy alcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone et X, et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, produit de formule I que ou bien l'on isole et salifie si dé- siré, ou bien, dans le cas o R 2 représente un atome d'hydrogène, l'on fait réagir ledit produit de formule I avec un halogénure de formule IV: Hal-R" 2 IV dans laquelle R' représente un radical alcoylorenfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxy alcoylprenfermant de 2 à 5 atomes de carbone ou acyleou alcoxycarbonyle renfermant de 2 à 8 atomes de carbone et Hal a la signification déjà indiquée, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle R 1 représente un radical alcoy J Cl-C 5 ou hydroxyalcoy renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, R 2 représente un radical alcoy J renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxy alcoylerenfermant de 2 à 5 atomes de carbone ouacyleoualcoxycarbonylerenfermant de 2 à 8 atomes de car- 2515188 bone et X, et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et salifie si désiré, ou bien encore dans le cas o R 2 représente un atome d'hydrogène, l'on fait réagir ledit produit de formule I avec un o-amino acide ou un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés dont la fonction amine est monosubstituée, disubstituée, ou protégée par un groupement facilement clivable notamment par hydrolyse acide ou par hydrogénolyse, puis traite de façon à éliminer le groupe- ment protecteur pour obtenir un produit de formule I dans la- quelle R représente un radical alcoye renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxy alcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, R représente un radical dérivé d'un acide "-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides d-aminés et X, et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et salifie si désiré. Dans des conditions préférentielles de mise en oeuvre de l'invention, le procédé de préparation ci-dessus décrit, est caractérisé en ce que: la réaction de l'amine de formule II avec l'halogénure de formule III est effectuée en présence d'un agent fixateur d'a- cides, en particulier un hydroxyde alcalin, un carbonate alcalin (carbonate de potassium), un bicarbonate alcalin, un acétate alcalin, un carbonate alcalino-terreux, uno amine tertiaire (par exemple une trialcoylamine), la pyridine ou un alcoolate alcalin (éthylate de sodium). La réaction peut s'effectuer par exemple dans des solvants ou milieux de suspension inertes tels que le dioxanne, le diméthylformamide, le benzène ou le toluène Dans le cas de l'acylation, on peut également utiliser l'acide libre, ou alors un autre dérivé fonctionnel tel qu'un anhydride d'acide. Au lieu d'un halogénure de formule III, on peut utiliser l'acide libre correspondant; dans ce cas, il est nécessaire d'effectuer l'amidification avec un agent d'activation tel qu'un carbodiimide D'autres techniques sont utilisables, telles celles décrites par exemple dans "The Peptides" Vol 1 Academic press 1979. La réaction de l'amine de formule II ou du produit de formule I, dans laquelle R 2 représente un atome d'hydrogène et R repré- sente un radical alcoyle ou hydroxyalcoyle, avec l'acide m-aminé -6 2 2515188 ou le peptide dont la fonction aminée est monosubstituée, disubstituée ou protégée par un groupement protecteur faci- lement clivable, a lieu en présence d'un agent de condensa- tion L'agent de condensation a, dans ce cas, pour but d'activer la fonction acide de l'amino-acide. Comme agent de condensation, on peut utiliser un carbodii- mide de formule: A-N=C=N-B dans laquelle A et B représentent un radical alcoylerenfermant de 1 à 8 atomes de carbone éventuellement porteur d'un radical dialcoylaminoou représentent un radical cycloalcoyl: On peut citer, par exemple, le dicyclohexylcarbodiimide ou le 1-éthyl 3-( 3-diméthylaminopropyl) carbodiimide, de préféren- ce, ce dernier. On peut utiliser également un halogénure de 2-chloro N-méthyl pyridinium tel que l'iodure. On peut aussi utiliser un chloroformiate d'alcoyle comme, par exemple, le chloroformiate de méthyle, d'éthyle ou d'isobu- tyle; on peut aussi utiliser un pyrophosphite d'alcoyle, comme -20 par exemple le pyrophosphite d'éthyle. Comme groupement protecteur facilement clivable, on peut utiliser selon le cas, de préférence le groupement benzyloxycarbonyle (Z) ou le groupement terbutyloxycarbonyle (Boc). Pour éliminer le groupement protecteur facilement clivable ci-dessus on utilise comme agent de clivage de préférence un acide tel que l'acide chlorhydrique; on opère par exemple à l'aide d'une solution alcoolique d'acide chlorhydrique, ou à l'aide d'acide chlorhydrique anhydre par barbotage dans le ni- trométhane On peut aussi utiliser des acides tels que l'acide paratoluène sulfonique, l'acide formique ou l'acide trifluoro- acétique On peut utiliser également l'hydrogène en présence de palladium; pour le groupement protecteur Z par exemple. La réaction de l'amine de formule II avec l'halogénure d'al- coyle ou d'hydroxyalcoyle se fait en présence des mêmes agents fixateurs d'acides et solvants que dans le cas de la réaction avec l'halogénure de formule III. La fonction hydroxy de l'hydroxy alcoyle est avantageuse- ment bloquée par un groupement protecteur facilement clivable notamment par hydrolyse acide. 7 - La réaction du produit de formule I dans laquelle R 2 repré- sente un atome d'hydrogène, R 1 représente un radical alcoy UC 1-C 5 ou hydroxyalcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone et XI et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée avec l'ha- logénure de formule IV est effectuée selon la nature de R" 2, dans les conditions précédemment décrites pour la réaction de l'amine de formule Il avec l'halogénure de formule III ou avec l'halogénure d'alcoyle. Pour la préparation des produits de formule I N-alcoylés, il peut être intéressant dans certains cas d'opérer de façon particulière pour ptéparer un produit de foormule I N-mono-méthylé, on peut préparer un carbamate de l'amine du produit de formule Il, par exemple par action d'un haloformiate d'alcoyle tel que d'éthyle, puis réduction du carbamate, par exemple à l'aide d'hydrure d'aluminium-lithium. pour préparer un produit de formule I N-mono-éthylé on peut préparer le dérivé N-acétylé correspondant puis le réduire. Pour préparer le dérivé N-diéthylé, il suffit de répéter l'opé- ration pour préparer un produit de formule I N-mono-ou di-iso- propylé on peut faire réagir un produit de formule Il avec l'a- cétone en présence d'un réducteur tel que le cyanoborohydrure de sodium. Dans le cas o X représente un radical A H 3 lorsque la N-alcoylation nécessite une réduction, il faut protéger la cétone en 20 par exemple par action d'éthylène glycol, puis après la réduction hydrolyse acide du cétal, par exemple à l'aide d'un acide minéral tel que l'acide chlorhy- drique. Les dérivés de formule I à l'exception de ceux pour les- quels R 2 représente un radical acyleou alcoxvcarbonyle présentent t caractère basique On peut avantageusement préparer les sels d'addition des dérivés de formule I, en faisant réagir, en pro- portions sensiblement stoechiométriques, un acide minéral ou organique avec ledit dérivé de formule I Les sels peuvent être préparés sans isoler les bases correspondantes. Les dérivés, objet de la présente invention, possèdent de très intéressantes propriétés pharmacologiques; ils sont doués notamment de remarquables propriétés immunothérapeutiques Ils -8 - sont en particulier capables de stimuler les réactions immuni- taires. Ces propriétés sont illustrées plus loin dans la partie expérimentale. Ces propriétés justifient l'utilisation des dérivés du 1nmino -oregn-5-ène, ainsi que de leurs sels, à titre de médicaments. La présente demande a ainsi également pour objet l'appli- cation, à titre de médicaments, des dérivés du 3-amino vregn- 5-ne, tels que définis par la formule I; ainsi que de leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement accep- tables. Parmi les médicaments, objet de l'invention, on retient, de préférence, les médicaments caractérisés en ce qu'ils sont constitués par les nouveaux dérivés du 3-amino pregn-5-ène répondant à la formule I, dans laquelle le groupement amino est en position 3 a, R 1 représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoyle renfermant de I à 3 atomes de carbone,, et R 2 représente un atome d'hydrogène, un radical alcoyle ou hydroxy alcoyle renfermant de 1 à 3 atomes de carbone, un radical nicotinoyle ou un radical dérivé d'un acide a-aminé ou d'un peptide ccmprenant 2 ou 3 acides aminés ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables. Parmi ceux-ci, on retient notamment ceux répondant à la formule I, dans laquelle X représente un groupement f H 3 CM \ou dont l'hvdroxyle est-en position 1 / c% H c, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharma- ceutiquement acceptables. Parmi ces derniers, on retient tout particulièrement, le dérivé dont le nom suit: le 2-amino N-( 20 -oxo pregn-5-ène 3 î-yl) acétamide ainsi que ses sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables. Le; médicaments selon l'invention trouvent leur emploi par exemple, dans le traitement des immunodéficiences, et notamment des maladies autoimmunes résultant d'une déficience en certains lymphocytes, qu'il s'agisse 9 2515188 de maladies du tissu conjonctif non spécifiques d'un organe comme par exemple l'arthrite rhumatoide, le lupus érythémateux systémique ou qu'il s'agisse de maladies spécifiques d'un or- gane comme la thyroidite, le pemphigus ou l'anémie hémolytique. Les produits de l'invention peuvent être ainsi utilisés comme traitement adjuvant de l'antibiothérapie et de la chimio- thérapie anti-cancéreuse. La dose usuelle, variable selon le dérivé utilisé, le su- jet traité et l'affection en cause peut être, par exemple, de 10 mg à l g par jour, par voie orale chez l'homme du dérivé de l'exemple 4 comme adjuvant d'antibiothérapie. L'invention a enfin pour objet les compositions pharmaceu- tiques qui renferment au moins un dérivé précité ou l'un de ses sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables, à titre de principe actif. A titre de médicaments, les dérivés répondant à la formule I et leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables peuvent être incorporés dans des compositions phar- maceutiques destinées à la voie digestive ou parentérale. Ces compositions pharmaceutiques peuvent être, par exemple, solides ou liquides et se présenter sous les formes pharmaceu- tiques couramment utilisées en médecine humaine, comme par exemple, les comprimés, simples ou dragéifiés, les gélules, les granulés, les suppositoires, les préparations injectables; elles sont préparées selon les méthodes usuelles Le ou les principes actifs peuvent y être incorporés à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magné- sium, le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émul- sifiants, les conservateurs. Les produits de départ de formule II dans laquelle X représente un groupement dans lequel l'hydroxyle est H en position 20 cx, peuvent être préparés comme suit On réduit un produit de formule V: 2545188 v H N dans laquelle le trait ondulé a la signification déjà indiquée, Dar exemple à l'aide d'un métal alcalin, tel que le sodium, dans un solvant tel qu'un alcool aliphatique inférieur comme l'éthanol, pour obtenir un produit de formule VI 1 H 3 OH VI dans laquelle les traits ondulés ont la signification déjà indiquée, sous forme d'un mélange d'isomères 20 (î), 20 ( 5), que l'on sépare, par exemple par préparation du dérivé triflu- oroacétylé de l'amine et de l'alcool, chromatographie, puis hydrolyse des groupements trifluoroacétiqu-es, pour obtenir le produit de formule II cherché. Un exemple d'une telle préparation figure ci-après dans la partie expérimentale. Les acides aminés ou peptides dont la fonction amine est mono ou disubstituée, peuvent être préparés, lorsqu'ils ne sont pas connus, par les procédés classiques d'alcoylation des amines. L'invention a enfin pour objet, à titre de produits indus- triels nouveaux, utiles notamment pour la préparation des dérivés répondant à la formule I ci-dessus, les produits de formule IIA CH 3 H 2 N dans laquelle le trait ondulé à la signification déjà indiquée. Les exemples suivants illustrent l'invention, sans toute- fois la limiter. il - EXEMPLE 1: Chlorhydrate de 3 T-méthylamino prén-5-èn 20-one Stade A: ( 2 OZ 2 -x-oren-5-èn 3 cc-yl)carbamate d'éthyle. On dissout 6 g de 3 a-amino pregn-5-ène-20-one (holamine) dans 100 cm 3 de chlorure de méthylène, ajoute entre + 5 et + 100 C 22 cm 3 de soude aqueuse N, puis en 10 minutes, 2 cm 3 de chlo- roformiate d'éthyle et agite pendant 1 heure. On acidifie par 15 cm 3 d'une solution aqueuse d'acide chlorhydrique 2 N, décante, lave la phase organique à l'eau, sèche et amène à sec On reprend le résidu obtenu par 70 cm 3 d'éther éthylique, porte au reflux, essore, lave à l'éther, sèche et obtient 6,25 g du produit attendu p F = 2020 C. Stade B: ( 20 20th: lnedixvxrén-5-èn 3-X Vl)carbamate On chauffe vers 500 C sous atmosphère inerte, 10,9 g de produit tel qu'obtenu au stade précédent avec 54,5 cm 3 d'éthy- lène glycol et 22 cm 3 d'orthoformiate d'éthyle On ajoute 220 mg d'acide paratoluène sulfonique monohydraté et agite pendant 3 heures environ On refroidit à 200 C, ajoute 4,2 cm 3 de triéthylamine, verse sous agitation sur 550 cm 3 d'eau, essore, lave à l'eau, sèche à 600 C et obtient 12 g du produit attendu. F O 2000 C. Stade C: 3 a-méthxlaminorén-5-èn 20-one (N-méthyl holamine) et son chlorhydrate. On met en suspension sous atmosphère inerte 1,145 g d'hydrure d'aluminium et de lithium dans 110 cm 3 de tétrahydro- furanne et introduit au reflux, en 30 minutes, 6,51 g du produit obtenu au stade précédent en solution dans 65 cm 3 de tétrahydro- furanne Apres I heure 5 minutes de reflux, on ramène à 15-200 C, ajoute avec précaution 15 cm 3 d'eau, puis 15 cm 3 d'acide chlorhy- drique concentré et agite pendant I heure 45 minutes On alcalinise par 25 cm 3 de lessive de potasse et 5 cm 3 d'ammoniaque concentrée, agite pendant 10 minutes, ajoute 100 cm 3 de solution de sels de Seignette, décante, extrait à l'acétate d'éthyle, lave à l'eau saturée au chlorure de sodium, sèche, amène à sec sous pression réduite, recristallise dans l'acétate d'éthyle et obtient 4,07 g du produit attendu F 1-'1390 C. Formation du chlorhydrate: On dissout 1,5 g de base dans 30 cm 3 d'acétate d'éthyle à 300 C, ajoute un excès d'acide chlorhydrique dissous dans l'acétate d'éthyle, glace, essore, lave à l'acétate d'éthyle, sèche à 40 C sous pression réduite, recristallise dans l'étha- nol et obtient 1,31 g de produit attendu F a 270 C. Analyse pour C 22 H 36 NOCI = 365,99 Calculé C % 72,20 H % 9,91 N % 3,83 Ci % 9,69 Trouvé 72, 4 10,1 3,8 9,7 EXEMPLE 2:fumarate de 2-amino N-méthl N-( 20-oxo prégn-5-ène- 3 a-vl) acétamide. Stade A:2-//hényljméthoxvl carbonyl/amin 7 _ N-/lg 20-oxo 2 prégn-=- èn-3 a-l/ N-mthyl acétamide. On dissout sous atmosphère inerte 4,43 g de la base de l'exemple 1 dans 130 cm 3 de chloroforme et 27 cm 3 de triéthy- lamine, ajoute 5,6 g de N-(benzyloxy carbonyl)glycine (Z glycine) puis en 20 minutes, sous agitation, 3,89 g d'iodure de 2-chloro N-méthyl pyridinium, I heure après ajoute encore 800 mg du sel de pyridinium cidessus, agite pendant 20 mn, ajoute encore 400 mg d'iodure, agite encore pendant 20 minutes, lave avec une solution aqueuse d'acide chlorhydrique N, puis de soude N, avec de l'eau, sèche, amène à sec, purifie par chromatographie sur silice (éluant: chlorure de méthylène acétate d'éthyle 9 I), amine à sec la fraction correspondant à un RF de 0,3, recristallise dans l'acétate d'éthyle pour obtenir 5,8 g de pro- duit attendu F = 130 C, puis 150 C. Stade B: 2-amino N-méthyl N-( 20oxo qrégn-5-ène 3 a-Yl)acétamide et son fumarate. On dissout sous atmosphère inerte 6,2 g du produit obtenu au stade A, dans 60 cm 3 de tétrahydrofuranne, ajoute 1,2 g de charbon palladié à 5 %, fait barboter de l'hydrogène après 2 heures, filtre lave le catalyseur avec du chlorure de méthylène amène à sec et obtient 4,55 g du produit attendu sous forme de résine. Formation du fumarate: On dissout 1,9 g de la base ci-dessus dans 4 cm 3 d'éthanol à 95 bouillant, ajoute une solution chaude de 560 mg d'acide fumérique dans 6 cm 3 d'éthanol à 95 , amorce la cristallisation, glace pendant I heure, essore, lave à l'éthanol glacé, sèche à 60 ? C sous vide, et obtient 2,02 g du produit attendu sous forme d'hémi-hydrate F u 160 C. 12 - 13 - Analyse oour C 24 H 38 N 202, C 4 H 404, i H 20 = 511,63 24 38 2 29 4 H 4 4 ' i 20 = 516 Calculé: C% 65,73 H % 8,67 N % 5,47 Trouvé: 65,6 8,5 5,4 EXEMPLE 3: ( 2 S) 2-amino N-( 20-oxo Dr n-5-èn-3 L-1)r mide et son chlonydrate Stade A: 2:( 1 j 1-diméthvléthoxv)carbonyl/ amnino N-( 20-oxo rén- -èn-3-Zl X) _ro 2 ionamide. On dissout sous atmosphère inerte 3,15 g de holamine et 2,08 g de tert-butyloxy carbonyl L-alamine (BOC L-alamine) dans 75 cm 3 de chloroforme et 15 cm 3 de pyridine, ajoute 2,1 g de chlorhydrate de 1-éthyl-3-( 3-diméthyl amino propyl) carbodiimi- de agite pendant 1 heure 15 minutes, lave avec une solution aqueuse d'acide chlorhydrique 2 N, avec une solution aqueuse de bicarbonate de sodium, sèche, distille à sec sous pression réduite, purifie par chromatographie sur silice (éluant: benzène méthyl éthyl cétone I 1) et obtient 4,5 g du produit attendu sous forma d'huile. Stade B: chlorhydrate de ( 2 S) 2-amino N-( 20-oxo prégn-5-èn-3- Zi)_qro 2 ionamide. On agite pendant 2 heures 30 minutes sous atmosphère inerte 4,5 g du produit obtenu au stade A en solution dans cm 3 d'une solution 2 N d'acide chlorhydrique sec dans le méthanol On distille à sec sous pression réduite à 300 C, cris- tallise dans 30 cm 3 d'acétate d'éthyle, essore, dissout dans 15 cm 3 de méthanol au reflux, filtre, ajoute 50 cm 3 d'acétate d'éthyle, concentre à mi volume, essore, sèche à 40 C sous pression réduite et obtient 2,5 g du produit attendu. F = 2600 C. Analyse pour C 24 H 39 C 1 N 202 = 423,03 Calculé: C % 68,14 H % 9,29 N % 6,62 Cl % 8,38 Trouvé: 68,4 9,3 6,5 8,5 EXEMPLE 4: chlorhydrate de 2amino N-( 20-oxo 5-en-3 x-yl) acétamide. En opérant selon un procédé analogue à celui décrit ci-dessus pour l'exemple n 2, en faisant réagir la Z-glycine ai N-(benzyloxy carbonyl) glycine avec l'holamine, on a préparé le produit attendu F O = 2950 C après cristallisation dans l'acétate d'éthyle. 14 25 5188 Analyse Dotr C 23 H 36 N 202, H Cl = 409,019 Calculé: C % 67,54 H % 9,12 Cl % 8,67 N % 6,85 Trouvé: 67,8 9,1 8,5 6,7 EXEMPLE 5: fumarate de ( 2 S) 2-amino N-( 20-oxqérn 53 -3 1 H-indole-3 -Droanamide. En opérant selon un procédé analogue à celui décrit ci-dessus pour l'exemple 3, en faisant réagir le BOC L-trypto- phane avec l'holamine, on a préparé le produit attendu. F = 1800 C après cristallisation dans le méthanol. Analyse our C 32 H 43 N 302, HOOC-CH= CH-COOH, CH 3 OH = 617,76 Calculé: C % 68,39 H % 7,91 N % 6,47 Trouvé: 68,1 8,0 6,5 EXEMPLE 6: chlorhvdrate de 2-amino N-/( 20 S)20-hydroxy prégn- -èn-3-z 1 l/acétamide. En opérant sel Dn un procédé identique à celuidécrit ci-dessus pour la préparation de l'exemple 2, en faisant réagir la Z-glycine avec le ( 20 S) 3 a-amino prégn-5-èn-20-ol, on a préparé le produit attendu PF = 2640 C avec décomposition après cristallisation dans l'acétate d'éthyle. Analyse pour C 23 H 38 N 22,HC = 47,95 23 38,N 22,Cl= 4749 Calculé: C % 67,20 H % 9,56 CI % 8,63 N % 6,82 Trouvé: 67,3 9,6 8,7 6,8 Le ( 20 S) 3 îamino prégn-5-èn-20-ol de départ peut être préparé comme suit: Stade 1: 3 a-amino Eréegn-5-èn-20-ol. On porte au reflux 100 cm 3 de propanol, ajoute en 20 minutes et simultanément 5 g de sodium par petites portions et une solu- tion de 5 g d'holamine dans 5 cm 3 de propanol et maintient le reflux pendant 50 minutes après la dissolution du sodium Après 1 heure 25 minutes, on laisse revenir à température ambiante, glace, acidifie à l'acide acétique jusqu'à p H = 6, revient à p H = 8 à l'aide de carbonate de potassium, dilue avec 500 cm 3 d'eau, évapore en partie, reprend par 300 cm 3 d'eau, laisse cristalliser pendant 24 h au refrigérateur, filtre, rince à l'eau, dissout dans 10 cm 3 de chlorure de méthylène, ajoute cm 3 d'acétate d'éthyle, 30 cm 3 d'éther isopropylique, évapore le chlorure de méthylène, laisse cristalliser 16 heures au réfrigérateur, et obtient 3 g du produit attendu F = 160 C. - Stade 2: trifluoroacétate de ( 20 S) /3 a-(trifluoroacétylamino) p.r_égn=àèn-20-vlet/ On dissout 5,5 g de produit tel qu'obtenu ci-dessus dans cm 3 de chlorure de méthylène, ajoute 5,5 cm 3 de pyridine, amène à O C, ajoute 5,5 cm 3 d'anhydride trifluoroacétique en mn, agite à température ambiante pendant 15 minutes, amène à sec, reprend au cyclohéxane, filtre, chromatographie le filtrat sur silice (éluant: cyclohéxane-acétate d'éthyle 9 1) obtient trois fractions, la première correspondant à l'isomère ( 20 R), la seconde 3,56 g à un mélange ( 20 R-20 S), la troisième 1,500 g à l'isomère ( 20 S) recherché En traitant le mélange on obtient encore 810 mg du produit attendu par cristallisation après reprise par 2,4 cm 3 de mélange cyclohéxane-acétate d'éthyle ( 95-5) et filtration, puis encore 390 mg après chromatographie du filtrat F = 1400 C. Stade 3:( 20 S) 3 a-amino prégn-5-èn-20-ol. * On refroidit au bain de glace une suspension de 2,4 g de produit tel qu'obtenu ci-dessus dans 24 cm 3 dé méthanol, ajoute 12 cm 3 de solution aqueuse de soude 2 N, agite pendant 2 heures 30 minutes à température ambiante, dilue à l'eau, extrait au chlorure de méthylène, lave la phase organique à l'eau saturée de chlorure de sodium, sèche, évapore et obtient 1,42 g de la base attendue F = 190 C. EXEMPLE 7: N-( 20-oxo-prégn-5-èn-3 c-yl)nicotinamide. On ajoute 2,1 g de chlorhydrate de 1-éthyl 3-( 3-diméthyl amino-propyl) carbodiimide à une solution de 3,15 g d'holamine et 1,35 g d'acide nicotinique dans 75 cm 3 de chloroforme et cm 3 de pyridine, gite I heure 30 minutes, distille à sec sous pression réduite, ajoute 100 cm 3 d'eau, agite pendant minutes, glace, essore, lave à l'eau, reprend au chlorure de méthylne, sèche, distille à sec sous pression réduite, purifie par chromatographie sur silice (éluant = benzène-méthyléthyl cétone ( 1-1), dissout dans 10 cm 3 de chlorure de méthylène, filtre, ajoute 50 cm 3 d'acétate d'éthyle, concentre de moitié, essore, sèche à 40 C sous pression réduite et obtient 2,6 g du produit attendu F = 166 C. " 5188 16 - Analyse pour C 27 H 36 N 202 = 420,58 (sur produit non sèché) Calculé: C % 77,10 H % 8,63 N % 6,66 ' Trouvé: 77,1 8,7 6,6 EXEMPLE 8: On a préparé des comprimés répondant à la formule chlorhydrate de 2-amino N( 20-oxo prégn-5-èn-3 c-yl) acétamide 20 mg excipient q s pour un comprimé terminé à 100 mg (détail de l'excipient: lactose, amidon, talc, stéarate Mg) ETUDE PHARMACOLOGIQUE I Adjuvant du choc anapohlactique Princi Re: L'administration à des animaux d'un produit capable de stimuler l'activité des systèmes immunitaires se traduit par une augmentation du choc en réponse à l'administration d'un antigène auquel l'animal était sensibilisé. Des souris m Ales pesant 30 à 35 g sont sensibilisées par voie intraplantaire avec l'albumine sérique de boeuf 8 jours plus tard, elles reçoivent cet antigène par voie intra-veineuse. Dans des conditions de sensibilisation minimum les animaux té- moins ne font pas de choc mortel lors de cette dernière admi- nistration. Le produit à tester est injecté par voie intra-plantaire mélangé avec l'antigène: si ce produit est adjuvant, il va augmenter la sensibilisation et il en résultera un choc mortel lors d'une administration par voie intraveineuse. On retient comme dose active la dose qui provoque une mortalité égale ou supérieure à 50 % des animaux. Résultats: ( Produit de l'exemple Dose par animal en mg) () ( 4:1) ( 6: 4 (: 2 Test des rosettes aux gjobules rouges de mouton Princie: L'administration à des animaux d'un produit capable de stimuler l'activité des systèmes immunitaires se traduit par une augmentation de leur capacité de réaction à l'injection 17 2515188 d'un produit immunogène. Des rats màles agés de 3 mois sont sensibilisés par voie intra-péritonéale avec des érythrocytes de mouton (jour 0). 7 jours plus tard (Jour 7) leur rate est prélevée et les spléno- cytes sont mis en contact avec des érythrocytes de mouton: on compte ensuite le pourcentage de leucocytes autour desquels les érythrocytes ont formé des rosettes. Le produit à étudier est administré per os quotidiennement du jour -1 au jour 1. On considère comme dose immunostimulante la dose de pro- duit qui multiplie environ par 2 le pourcentage de rosettes observé chez les animaux témoins. Résultats: : Dose par animal en (Produit de l'exemple: mg/kg per os -3: 2) j _ _: ) ( 4 __: -9) 3 Etude de la toxicité aig 2 e. On a évalué les doses non létales DL O de différents composés testés après administration par voie orale chez la souris. On appelle DL 0 la dose maximale ne provoquant aucune mor- talité en 8 jours. Les résultats obtenus sont les suivants: ( Produit de l'exemple:DL 0 en mg/kg) à:) (:) ( 3 > 400) 4: 600 6 >) 400 (: IV 18 2515188 REVENDICATIONS 1 ) Nouveaux dérivés du 3-amino prégn-5-ène, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéra:ux organiques, carac- térisés en oe qu'ils répondent à la formule générale (I): x I R 5 C 3 dans laquelle X représente un groupement ou) les traits ondulés signifient que le radical correspondant se trouve dans l'une ou l'autre des configurations a ou À, R 1 représente un atome d'hydrogène, un radical alcoyle ren- fermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou hydroxyalcoyle renfer- mant de 2 à 5 atomes de carbone, R 2 représente un atome d'hydrogène, un radical alcoyle ren- fermant de 1 à 5 atomes de carbone, hydroxy alcoyle renfer- mant de 2 à 5 atomes de carbone, acyle ou alcoxy carbonyle renfermant de 2 à 8 atomes de carbone, ou un radical dérivé d'un acide a-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés dont l'amine est libre ou mono, ou disubstituée par un radical alcoyle renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, étant entendu que d'une part, R 1 et R 2 ne représentent pas en même temps, un atome d'hydrogène, d'autre part, i) lorsque X représente un groupement Cj si R 1 représente un radical méthyle, R 2 ne représente pas un radical hydroxyéthyle, si le groupement amino est en position 3 R, R 1 et R 2 ne peuvent pas représenter en même temps un radical méthyle, hydroxy éthyle ou chloroéthyle, si le groupement amino est en position 30 et R 2 représente un radical méthyle, R 1 ne peut pas représenter un atome 19 - d'hydrogène, ii) lorsque X représente un groupement/ " H que le groupement amino est en position 3 a, et que R 2 représente un radical méthyle, R 1 ne peut pas représenter un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, CH 3 iii) lorsque X représente un groupement AH- si R 1 représente un radical méthyle, R 2 ne représente pas un radical méthyle, si R 1 représente l'hydrogène, R 2 ne représente pas un radical méthyle lorsque le groupement amino est en position 3 c, si R 1 représente l'hydrogène, R 2 ne représente pas un radical éthoxy carbonyle lorsque le grouement amino est en position 3 ". 2 ) Nouveaux dérivés du 3-amino prégn-5-ène tels que définis par la formule I de la revendication 1, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce que le groupement amino est en position 3 a, R 1 représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoyle renfermant de 1 à 3 atomes de carbone, et R 2 représente un atome d'kiydrogène, un radical alcoyle ou hydroxy alcoyle renfermant de 1 à 3 atomes de carbone, un radical nicotinoyle ou un radical dérivé d'un acide a-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 ac Ldes aminés. ) Nouveaux dérivés du 3-amino prégn-5-èn selon la revendication 2, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce que X représente un groupement CH C CH ou /% /k OH dont l'hydroxyle est en position 20 x. ) Le 2-amino N-( 20 -oxo prégn-5 -en 3 a -yl)acétamide ainsi que ses sels. ) Procédé de préparation des dérivés du 3-amino prégn-5-ène, tels que définis par la formule I de la revendication 1, ainsi que de leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organi- ques, caractérisé en ce que l'on fait réagir une amine de formule II: 2 15188 x I X dans laquelle le trait ondulé et X ont la signification déjà indiquée, soit avec un halogénure de formule III Hal-R III dans laquelle Hal représente un atome de chlore, de brome ou d'iode, et R'2 représente un radical acyleou alcoxycarbonyl- renfermant de 2 à 8 atomes de carbone, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle R 1 représente un atome d'hydrogène, R 2 représente un radical acyle ou alcoxycarbonyle renfermant de 2 à 8 atomes de carbone, X et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, produit de formule I que l'on iso- le et salifie si désiré, soit avec un "-amino acide ou un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés dont la fonction aminellorsqu'elle est libreestprotégéeparun grcupementfacilement clivable notamment par hydrotyseacideouparhydrogénolysepuis traite de façon à éliminer le groupement protecteur, pour ob- tenir un produit de formule I dans laquelle P représente un atome d'hydrogène, R 2 représente un radical dérivé d'un acide "-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides "-aminés, et X, et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et salifie si désiré, soit avec un halogénure d'alcoyle C 1-C 5 ou d'hydroxyalcoyle ren- fermant de 2 à 5 atomes de carbone et dont l'halogène est un atome de chlore, de brome ou d'iode, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle l'amine en 3 est mono ou disubstituée par un radical alcoyl renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxy alcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone et X, et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, produit de formule I que ou bien l'on isole et salifie si dé- siré, ou bien, dans le cas o R représente un atome d'hydrogène, l'on fait réagir ledit produit de formule I avec un halogénure de formule IV: Hal-R"' IV dans laquelle R'I représente un radical alcoylyrenfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxy alcoyl renfermant de 2 à 5 21 - 15188 atomes de carbone ou acyleou alcoxycarbonyle renfermant de 2 à 8 atomes de carbone et Hal a la signification déjà indiquée, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle R 1 représente un radical alcoyl C 1-C 5 ou hydroxyalcoye renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, R 2 représente un radical alcoye renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxy alcoylerenfermant de 2 à 5 atomes de carbone ouacyleoualcoxycarbonylerenfermant de 2 à 8 atomes de car- bone et X, et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et salifie si désiré, ou bien encore dans le cas o R 2 représente un atome d'hydrogène, l'on fait réagir ledit produit de formule I avec un "-amino acide ou un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés dont la fonction amine est monosubstituée, disubstituée, ou protégée par un groupement facilement clivable notamment par hydrolyse acide ou par hydrogénolyse, puis traite de façon à éliminer le groupe- ment protecteur pour obtenir un produit de formule I dans la- quelle R représente un radical alcoye renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxy alcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, R 2 représente un radical dérivé d'un acide i-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides d-aminés et X, et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et salifie si désiré. 6 ) Médicaments, caractérisés en ce qu'ils sont constitués par les nouveaux dérivés du 3-amino prégn-5-ène, tels que définis par la formule I de la revendication 1, ainsi que par leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables. 7 )eédicaments, caractérisés en ce qu'ils sont constitués par les nouveaux dérivés du 3-amino-prégn-5-ène tels que définis dans l'une des rerendications 2 ou 3, ainsi que par leurs sels d'addition avec les asides pharmaceutiquement acceptables. ) Médicaments, caractérisés en ce qu'ils sont constitués par le dérivé du 3-amino prégn-5-ène, tels que défini à la revendication 4, ainsi que par ses sels d'addition avec les acides pharmaceu- tiquement acceptables. 9 ) Compositions pharmaceutiques, caractérisées en ce qu'elles renferment, à titre de principe actif, l'un au mo ns des médi- caments, tels que définis à l'une des revendication 6, 7 ou 8. A titre de produits industriels nouveaux nécessaires pour la préparation des dérivés répondant à la formule I de la re- vendication 1, les produits de formule IIA 22 4 5188- I 3 R 2 N> dans laquelle le trait ondulé à la signification déjà indiquée.