FR 2519988 A1 19830722 FR 8200821 A 19820120 1998 8 Dérivés thio Liques de L'érythromycine à activité thérapeutique, procédé de préparation, et produits pharmaceutiques dans Lesquels ils apparaissent. La présente invention a pour objet de nouveaux dérivés thioliques de l'érythromycine et de l'ester pro- pionique de l'érythromycine, notamment des sels de l'éry- thromycine avec des acides contenant dans leur molécule un atome de soufre sous forme de thio-alcool ou de thio- éther ou encore de thio-ester. Les composés de la présente invention trouvent une application thérapeutique dans les cas o l'on uti- lise déjà l'érythromycine ou son propionylester, et se caractérisent en général par une très faible toxicité et par une concentration sanguine élevée; ce sont là des aspects très importants du point de vue thérapeutique. Les dérivés suivant la présente invention répondent à la formule générale suivante: R COO X ( 1) o R représente un radical choisi parmi les radicaux suivants: 1 Acétylcystéine NH CO CH 3 CH 2 CH COOH l SH 2 Carboxymathylcystéine NH 2 CH 2 CH COOH S S CH 2 COOH 3 Acide thiazolidine-carboxylique s C 00 H N N COOH 4 Acide mercaptosuccinique HS CH COOH CH 2 COOH et X représente le radical de l'érythromycine ou du pro- pionylester de l'èrythromycine ayant pour formule: H o Rl représente H ou CH 3 CH 2 CO. Les composés suivant la présente invention se présentent tous comme des poudres blanches, microcris- tallines; certaines, comme l'a-mercaptosuccinate sont pnesque totalement insolubles En général, les sels,con- tenant de l'érythromycine monopropionylester sont moins solubles que les sels correspondants contenant de l'éry- thromycine base; pour tous les dérivés, en outre, la solubilité augmente dans des mélanges de solvants, tels que eau-éthanol ( 1 5 %), et eauglycol-éthylénique ( 1 5 %). Leur emploi est de toute façon prévu sous toutes les formes pharmaceutiques; capsules, solutions, injec- tions, aérosols, pommades, poudres et suspensions, aussi bien pour l'homme que pour les applications vétéri- naires Pour les sels de l'érythromycine base en particu-_ lier, on prévoit des formules pharmaceutiques de type injectable ou administrable par aérosol, tandis que pour les dérivés de propionyl érythromycine, on préfère des formes pharmaceutiques à administrer par voie orale en particulier, et des suspensions Presque tous les compo- sés craignent la lumière solaire, l'humidité et la cha- leur, et sont de véritables sels, chimiquement et physi- quement bien définis La méthode de préparation des déri- vés thioliques de l'érythromycine ou du propionylester de l'érythromycine, suivant la présente invention, prévoit de faire réagir de l'érythromycine base ou l'ester pro- pionique de l'érythromycine base avec l'acide, dans une proportion stoechiométrique ou en présence d'un léger excès du noyau de l'antibiotique et est caractérisée en ce que la réaction s'effectue dans un solvant organique, à une température comprise entre 20 et 40 'C et en pré- sence d'eau en quantité non supérieure à 20 %. On a en effet trouvé, et cela est surprenant, que la présence de l'eau, de préférence en quantité de l'ordre de 4 à 5 % en volume par rapport au solvant de réaction, permet de compléter la réaction avec d'excel- lents rendements En revanche, les quantités d'eau supé- rieures à 20 % comportent le risque d'une redissolution du produit de réaction dans le mélange aqueux/organique. Les exemples qui suivent, donnés uniquement à titre indicatif, illustrent la préparation de quelques dérivés suivant la présente invention. EXEMPLE 1 Sel d'érythromycine avec acide mercaptosuccinique On dissout 46,26 grammes ( 0,063 mole) d'éruthro- mycine base sèche (soit un excès de 2 % par rapport à la proportion purement stoechiométrique de réaction) dans 350 ml d'acétone à une température comprise entre 15 et C On ajoute à cette solution 4,64 g d'acide mercapto- succinique, pour obtenir une solution limpide et incolore. On ajoute alors, goutte à goutte et en agitant, 15 ml d'eau; il se forme très rapidement un sel qui pré- cipite et tend à empêcher l'agitation Il se forme des microcristaux blancs et on poursuit l'agitation pendant 1 h environ. On filtre le produit sous vide au moyen d'un flacon de B Uchner, et l'on obtient des eaux-mères acéto- niques couleur jaune légèrement paille, qui après évapo- ration, laissent des quantités négligeables de cristaux. On sèche le produit à une température maximale de 40 C et l'on obtient ainsi 48,5 g de solide cristallin (poids moléculaire de 1618) avec un rendement de 97 %. EXEMPLE 2 Sel d'érythromycine avec l'acide thiazolidine-4- carboxylique. On dissout 42,32 g d'érythromycine base dans 250 ml de méthylisobutylcétone, jusqu'à ce que l'on obtienne une solution limpide; on verse ensuite en agitant l'acide thiazolidine-4-carboxylique finement broyé ( 7, 6 g) et l'on poursuit l'agitation jusqu'à ce que l'on obtienne une dispersion totale en 30 mn environ On ajoute alors, goutte à goutte, 9 ml d'eau en maintenant toujours une agitation vigoureuse Il se forme lentement un précipité cristallin, blanc et fin, en l'espace de 2 h On laisse reposer pendant 1 heure puis l'on filtre sous vide. Après séchage à la température maximale de 40 C, on obtient 45 g de produit solide avec un rendement égal à ,2 % du rendement théorique On prépare de la même manière le sel d'érythromycine correspondant à partir de ,2 g d'érythromycine et de 9,8 g de carboxyméthylcys- téine. EXEMPLE 3 Sel de propionylérythromycine avec acide mercaptosuccinique. On disperse 100 g de propionate d'érythromycine dans 400 ml d'acétone à la température ambiante et en agitant On ajoute ensuite 19 g d'acide mercaptosucci- nique en maintenant le mélange sous agitation jusqu'à ce que l'on obtienne une solution totalement limpide. On ajoute alors lentement 20 ml d'eau. Le sel précipite avec un rendement de 96 %, environ 1 heure après l'addition d'eau. On prépare de môme les autres sels du propio- nate d'érythromycine. Les composés de la présente invention ont fait l'objet d'essais toxicologiques, pharmacologiques et pharmacodynamiques ayant pour but de vérifier la toxicité (et donc leur possibilité d'emploi dans le domaine théra- peutique) et les propriétés thérapeutiques. Dans les résultats indiqués ci-après, les compo- sés de l'invention ont été référencés par les symboles suivantsó RV/01 érythromycine-a-mercaptosuccinate RV/03 érythromycine-thiazolidinecarboxylate RV/04 érythromycine-S-carboxyméthylcystéinate RV/05 érythromycine-N-acétylcystéinate RV/11 érythromycine-monopropionate-a-mercap- tosuccinate RV/13 érythromycine-monopropionate-thiazolidine- carboxylate RV/14 érythromycine-monopropionate-S-carboxy- méthylcystéinate RV/15 érythromycine monopropionate-N-acétyl- cystéinate A) Toxicité aiguë La toxicité aiguë a été déterminée sur des souris blanches Swiss par voie orale et intraveineuse. Les DL 50 ont été calculées par les méthodes des Probits, à partir de la mortalité enregistrée 10 jours après le traitement. COMPOSE VOIE D'ADMINISTRATION LIMITE DE CONFIANCE DL 5 & mg/kg ( 1 f) Erythromycine voie orale > 3000 Chlorhydrate d' rythromycine voie intraveineuse 376,58 ( 478,78-296,20) RV 01 voie orale > 3000 RV 01 voie intraveineuse 458,49 ( 518,06-405,77) RV 03 voie orale > 3000 RV 03 voie intraveineuse 491,96 ( 552,31-438,20) RV 04 voie orale > 3000 RV 04 voie intraveineuse 439,46 ( 545,44-354,08) RV 05 voie orale > 3000 RV 05 voie intraveineuse 472,84 ( 529,08-422,57) RV 11 voie orale 3000 RV 13 voie orale 3000 RV 14 voie orale 3000 RV 15 voie orale 3000 si________________________________________ B) Activité anti-bactérienne in vitro On a évalué l'activité anti-bactérienne des composés suivant l'invention en comparant les différentes concentrations minimales d'inhibition (MIC) avec celles de l'érythromycine base et de l'estolate d'érythromycine sur des souches gram-positives et gram-négatives culti- vées sur Brain Heart Infusion (Difco). Les échantillons examinés d'estolate d'érythro- mycine RV 01, RV 03, RV 04, RV 05, ont été soumis à une hydrolyse préventive suivant description contenue dans l'U S P (pharmacopée américaine), X Xe édition, page 1347. Les MIC/ml qui correspondent à la concentration la plus faible susceptible de provoquer une inhibition complète du développement bactérien, sont indiquées dans le tableau I suivant. SOUCHE érythromy érythromy- cie cine RVO 1 RV 03 1) Staph albu S SS 03 0,05 0,05 0, 1 0,05 2) SS 04 0,05 0,05 0,05 0,025 3) Staph aureus SS* 07 0,025 0,205 0,05 0,025 4) ss OS 0,025 0,025 0,025 0,025 ) SS 09 0,1 0,05 0,1 0,05 6) Ss 10 0,1 0,2 0,05 0,1 7 > Strept. haemolyticus 55 17 3 3 3 1,5 8 > 55 18 1,5 3 1,5 1,5 9 > Strep. faeca lis 55 19 0,1 0,1 0,1 0,05 ) S lutea ATCC 9341 0,01 0,01 0,01 0,025 11 > B subtilis ATCC 6633 0,025 0,01 0,01 0,05 12) 55 127 0,05 0,025 0,01 0,025 13) B cereus ATCC 11778 0,4 0,8 0,4 0,08 14) B anthranis SS OS 0,4 0,4 0, 4 0,2 14 bis) SS 09 0,4 0,4 0,4 0,4 > Br meli ternsis SS 19 3 3 3 6 16) Br abortus SS 7 12 6 6 6 17) Citrobacter SS OS > 200 > 200 > 200 > 200 18) -s S 09 > 200 > 200 > 200 > 200 19) S irnfantis SS 08 100 100 100 200 ) S heidelberg SS 18 100 100 100 100 21 > B cloacae 55 07 > 200 > 200 > 200 > O L 1 1 RVO 4 1 RVO 5 1 RV Il -1 RVI 3 RV 14 RVI 5 -J 2519,988 0 'l 0,05 0,025 0,05 0,025 0,2 1,5 0,05 0,025 0,025 0,025 0 'l 0,025 0,8 0,2 0,01 0,01 0,01 0,4 0,4 0,4 > 200 > 200 > 200 1) 2) 3) 4) ) 6) 7) 0 'l 0,05 0,025 0,05 0 'l 0,2 1,5 0,8 0,05 0,01 0, 025 0,05 0,4 0,4 O's > 200 > 200 > 200 0,25 0,05 0,025 0,025 0,05 0,05 1, 5 0,05 0,01 0,01 0,025 0,4 0,4 0,4 > 200 > 200 > 200 0,05 0,05 0,05 0,025 0 'l 0,025 1,5 1,5 0,05 0,01 0,025 0,05 0,8 0,8 0,4 > 200 > 200 > 200 0, 05 0,025 0,025 0,05 0, 1 0 'l 1,5 1,5 0,05 0,'025 0,025 0,025 0,8 0,4 0,4 > 200 > 200 > 200 8) 9) ) 11) 12) 13) 14) 14 bis) ) 16) 17) 18) 19) ) 21) 1,5 0,05 0,01 0,025 0,025 0,2 0,4 0,2 > 200 > 200 > 200 SOUCHOE érythromy 4 rythromy- cine cine RV 01 RVO. estolate 22) E aerogçnes SS 011 100 50 50 50 23) Ps aeruginosa SS 10 100 100 200 100 24) ss 12 > 200 200 200 200 ) E coli ss 04 100 100 50 100 26) Ss O 5 50 100 50 50 27) ss 06 100 50 100 50 28) ss 07 50 50 25 50 29) Pr mirabilis ss 09 > 200 > 200 > 200 > 200 ) Pr vulgaris ss 10 > 200 > 200 > 200 > 200 31) Kl aerogenes SS 71 50 100 100 50 32) K 1 pneumoniae SS 04 100 100 100 100 33) Sr ma cescens SS 03 200 > 200 200 100 34) C diphteriae SS 19 0,01 0,025 0,025 0,025 ) D pneumoniae SS 23 0,05 0,05 0, 05 0,025 36) N goriorreae SS 27 0,8 0,8 0,8 0,8 37) N men ingitidis SS 04 0,8 1,5 0,8 1,5 38) B Imfluentiae SS 02 1,5 1,5 1,5 1,5 39) H pertussis SS 03 0,4 0,4 0,4 0,4 ) H Tubercolosis SS 03 50 50 50 25 41) C albîcans ss 04 100 200 > 200 200 42) Cl tetanii SS 17 0,4 0,2 0,2 0,4 1 RVO 4 1 RVO 5 1 RV 11 1 Rv 13 f RV 14 1 RV 15. 2 5 1 9 9 8 8 1 1 :200 > 200 0,205 0,05 0,8 - 1,5 1,5 0,8 0,2 22) 2 3) 24) ) 26) 27) 28) 29) ) 31) 32) 33) 34) ) 36) 37) 38) 39) ) 41) 42) > 200 > 200 0,02 0,05 0,8 O's 1,5 0,2 - 0,2 > 200 > 200 0 05 0,05 0,8 0,8 O's 0,2 0,2 > 200 > 200 2 O o 1 0, 25 0,4 1,5 0,8 0,4 0,2 > 200 > 200 0,01 0,025 0,8 0,8 1,5 0,2 0,2 > 200 > 200 O 0,01 0,05 0,8 0,8 1,5 0,4 0,2 C) Activité anti-bactérienne in vitro Infection expérimentale par Staph aureus et D pneumoniae On a utilisé des souris blanches Swiss de 20 g infectées par introduction parentérale avec une quantité de gènes pathogènes de Staph aureus SS 07 et D pneumoniae SS 23 en quantité léthale. On a évalué l'activité protectrice exprimée par ED (mg/kg) d'érythromycine base, d'estolate d'érythromy- cine, RV 01, RV 03, RV 04, RV 05, RV 11, RV 13, RV'14, RV 15, par voie orale ainsi que l'érythromycine éthyl- succinate RV 01, RV 03, RV 04, RV 05, par voie sous- cutanée. Les antibiotiques ont été administrés au moment de l'injection du germe infectant et après 6 et 24 heures, Sur la base de la survie après 7 jours, on a déterminé les ED 50 indiquées dans les tableaux II et II Isuivants o figurent entre parenthèses les limites de fiabilité. 251998-8 Tableau II Infection expérimentale par Staph aureus SS 07 (ED 50) mg/kg d'êrythromycine COMPOSE VOIE D'ADMINISTRATION LIMITE DE CONFIANCE ED 50 mg/kg Etylsuccinate d'érythromycine sous-cutanée 1,03 ( 1,34-0,79) RV 01 sous-cutanée 0,95 ( 1,18-0,71) RV 03 sous-cutanée 1,00 ( 1,36-0,73) RV 04 sous-cutanée 1,00 ( 1,24-0,80) RV 05 sous-cutanée 1,33 ( 1,61-1,10) érythromycine orale 2,09 ( 2,36-1,86) Estolate d'èrythromycine orale 2,20 ( 2,44-1,99) RV 01 orale 2,36 ( 2,68-2,08) RV 03 orale 2,14 ( 2,42-1,89) RV 04 orale 2,31 ( 2,55-2,09) RV 05 orale 2,08 ( 2,38-1,83) RV il orale 2, 14 ( 2,40-1,91) RV 13 orale 2,20 ( 2,44-1,99) RV 14 orale 2,26 ( 2,49-2, 05) RV 15 orale 2,10 ( 2,49-1,92) Tableau III Infection expérimentale par D-pneumoniae SS 23 (ED 50) mg/kg d'érythromycine CCMPOSE VOIE D'ADMINISTRATION LIMITE DE CONFIANCE ED 50 mg/kg Etylsuccinate d'érythromycine sous-cutanée 54,23 ( 69,76-42, 16) RV 01 sous-cutanée 52,70 ( 64,91-42,79) RV 03 sous-cutanée 47,98 ( 59, 13-38,93) RV 04 sous-cutanée 60,17 ( 70,74-51,18) RV OS sous-cutanée 50, 22 ( 62,33-40,46) érythromycine orale 113,53 ( 147,33-87,48) estolate d'érythromycine orale 127,89 ( 156,42-104,57) RV 01 orale 108,98 ( 137,6086,32) RV 03 orale 119,21 ( 142,60-99,65) RV 04 orale 119,21 ( 152,88-92, 95) RV 05 orale 119,31 ( 150,05-94,87) RV 1 orale 100,41 ( 122,52-82,30) RV 13 orale 113,88 ( 144,73-89)60) RV 14 orale 123,74 ( 148,77-102,92) RV 15 orale 110,90 ( 135,28-90,92) D) Pharmacodynamie a) Chez le rat L'absorption par voie orale des différents sels d'érythromycine est étudiée chez les rats mâles Sprague- Dawley auxquels on a administré, par lot de 6 animaux à jeun depuis 12 heures, de l'érythromycine, de l'estolate d'érythromycine, RV 01, RV 03, RV 04, RV 05, RV 11, RV 13, RV 14, RV 15, à la dose de 100 mg/kg (exprimée en érythro- mycine) par voie orale (sondage gastrique). Les échantillons de sang ont été prélevés 0,30 1 2 3 4 5 6 heures après l'absorption. Pour le dosage, on a utilisé la méthode microbiologique et comme micro-organisme test, le B subtilis Les résul- tats expérimentaux sont indiqués dans le tableau IV sui- vant: Tableau IV Niveaux hématiques chez le rat (Moyennes + E S) COMPOSE Nombre mcg/ml après heures Animaux 0,30 1 2 3 4 5 6 érythromycine 6 0,71 1,03 1,-15 1,05 0,37 0,26 0,03 0,19 0,23 0,24 0,22 0,10 0,08 - estolate d'éry 6 0,68 1,74 2,49 1,49 0,61 0,37 0,04 thromycine 0,07 0,14 0,35 0,22 0,10 0,05 0,01 RV 01 6 0,48 0,79 1,18 0,77 0,44 0,24 0,03 0,11 0,15 0,24 0,17 0,12 0,08 0,05 RV 03 6 0,58 0,71 1,30 0,77 0,59 0,36 0,07 0,14 0,14 0,34 0,17 0,14 0,10 0,02 RV 04 6 0,50 0,71 1,30 1,04 0,68 0,43 0,15 0,14 0,17 0,29 0,28 0,21 0,15 0,08 RV 05 6 0,44 0,83 1,41 1,03 0,59 0,40 0,08 0,07 0,22 0,38 0,28 0,16 0,12 0,01 RV 11 6 0,72 1,64 2,50 1,31 0,58 0,38 0,08 0,16 0,19 0,27 0,21 0,22 0,14 0,02 RV 13 6 0,81 1,80 2,47 1,10 0,72 0,52 0,12 0,07 0,10 0,23 0,17 0,11 0,11 0,05 RV 14 6 0,72 1,85 2,55 1,39 0,65 0,54 0,07 0,10 0,09 0,12 0,08 0,10 0,10 0,01 RV 15 6 0,05 1,90 2,68 1,19 0,55 0,44 0,03 0,23 0,08 0,15 0,08 0,03 0,04 - b) Chez le volontaire en bonne santé A des groupes de 5 volontaires en bonne santé à jeun depuis 24 heures, on a administré par voie orale de l'estolate d'érythromycine RV 11, RV 13, RV 14, RV 15, à une dose de 500 mg d'érythromycine. Les échantillons de sang ont été prélevés 0,30 - 1 2 3 4 heures après l'absorption. Pour le dosage, on a appliqué la méthode micro- bioloqique en utilisant une souche de B subtilis. Les résultats sont indiqués dans le tableau V suivant: Tableau V Niveaux hématiques chez le volontaire en bonne santé (moyennes + E S) Nombre COMPOSE Nombre mcg/ml après heures Sujets. 0,30 1 2 3 4 5 6 Estolate d'éry 5 0,27 0,58 2,10 1,41 1,31 thromycine 0,05 0,09 0,17 0,07 0,08 RV 1 l 5 1,28 1,70 2,16 1,48 1,21 0,12 0,09 0,12 0,08 0,05 RV 13 5 1,16 1,67 2,21 1,67 1,29 0,03 0,07 0,11 0,09 0,10 RV 14 5 1,20 1,70 2,20 1,60 1,21 0,07 O,04 0,06 0,14 0,06 RV 15 5 1,10 1,58 2,17 1,72 1,38 0,09 0,05 0,14 0,09 0,06 " 18-18 E) Action mucolytique On a utilisé la méthode décrite par Quevauviler * et COM (Thérapie 22, 485, 1967) qui consiste à provoquer une hypersécrétion bronchique après exposition de l'animal à une séance d'aérosol de 502 Cette étude a été effectuée sur des rats mâles de race Sprague-Dawley. Tous les rats ont été soumis quotidiennement à des inhalations de 502 d'une concentration de 0,03 %. Après 50 heures d'inhalation, les animaux ont été regrou- pés en lots de 10 éléments chacun. Un lot n'a reçu aucun traitement (animaux de contrôle), tandis que les autres ont été soumis 2 heures par jour, pendant 15 jours consécutifs à des inhalations de 502 et traités respectivement avec l'estolate d'éry- thromycine, RV 11, RV 13, RV 14, RV 15, par voie orale à la dose de 500 mg/kg et avec de l'érythromycine éthyl- succinate RV 01, RV 03, RV 04, RV 05, par voie intra- musculaire à la dose de 250 mg/kg. Le jour suivant le dernier traitement, les animaux anesthésies ont été sacrifiés, on a prélevé et préparé les poumons pour l'examen microscopique et macros- copique Les résultats sont indiqués dans le tableau sui- vant. Tableau VI Estimation qualitative et quantitative de l'obstruction de l'arbre bronchique (% d'incidence) VOIE OBSTRUCTION TOTALE OBSTRUC- D 'ADMINIS- TRAITEMENT 'ADMITION TRATION Bouchon Amas Amas PARTIELLE ____________ _ compact nodulaire bulleux 502 (contr) 40 13,33 6,66 26,66 502 +estolate d'érythromycine orale 46,66 20 6,66 20 502 + RV 11 orale 20 6,66 6,66 13,33 500 mg/kg 502 + RV 13 orale 20 6,66 13,33 20 500 mg/kg 502 + RV 14 orale 26,66 6,66 6, 66 13,33 500 mg/kg 502 + RV 15 orale 20 13,33 6,66 6,66 500 mg/kg 502 +érythromy intra- cine éthylsucci muscu 53,33 26,66 13,33 20 nate 250 mg/kg laire 502 + RV 01 " 26,66 6,66 13,33 13,33 250 mg/kg 502 + RV 03 26,66 20 6,66 6,66 250 mg/kg 502 + RV 04 20 13,33 6,66 13,33 250 mg/kg 502 + RV 05 " 20 13,33 6,66 6,66 250 mg/kg _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ J _ _ _ _ _ _ _ _ 1 _ _ _ _ _ _ _ _ I_ _ _ _ _ _ _ On a ensuite procédé à un examen histologique sur les animaux de contrôle et sur les animaux traités. 1) Animaux de contrôle soumis à une inhalation de 502 Les obstructions bronchiques macroscopiques relevées à l'examen histologique correspondent à un amas * de mucus mêlé de fibrine et infiltré d'éléments polynu- cléaires L'hypersécrétion concerne également les bron- chioles périphériques et les alvéoles En ce qui concerne l'épithélium bronchique, on constate une prolifération des cellules caliciformes L'hyperplasie de la bronche princi- pale se traduit par une stratification de 7 à 8 couches, associée à une hypertrophie des bronches. 2) Animaux traités à l'estolate d'érythromycine à la dose de 500 mg/kg par voie orale et à l'érythromycine éthylsuccinate à la dose de 250 mg/kg par voie intramus- culaire De l'examen histologique, il ressort que l'obstruction bronchique est formée par un abondant mucus mêlé de fibrine. Sous l'effet irritant de 502, l'épithélium bronchique réagit par une profilération de cellules, notamment de cellules caliciformes L'hyperplasie est associée dans de nombreux cas à une hypertrophie des bronches Dans quelques cas, il y a apparition dans les bronchioles périphériques de cellules sécrétant du mucus. 3) Animaux traités aux RV 11, RV 13, RV 14, RV 15, à la dose de 500 mg/kg par voie orale Chez les animaux qui à l'examen macroscopique présentaient un arbre bronchique libre non obstrué, l'examen histologique a révélé la présence de bronches à l'aspect presque normal On a constaté une hyperplasie épithéliale avec de nombreuses cellules caliciformes et des amas muco-purulents intra-bronchiaux réduits. L'aspect histologique des arbres bronchiques obstrués est tout à fait semblable à celui des animaux de contrôle. 4) Animaux traités aux RV 01, RV 03, RV 04, RV 05, à la dose de 250 mg/kg par voie intramusculaire L'examen histologique effectué sur les animaux qui à l'examen macroscopique présentaient un arbre bron- chique libre d'obstructions, a mis en évidence un aspect pratiquement normal Chez certains animaux, on a cons- taté la présence d'une hyperplasie épithéliale avec cellules caliciformes associées à des amas muco-purulents intra-bronchiques. L'examen histologique effectué chez les animaux qui présentaient un arbre bronchique obstrué, a mis en évidence un aspect semblable à celui des animaux de con- trôle. CONCLUSIONS Il résulte des essais de toxicité que les sels d'érythromycine sont dépourvus de toxicité lorsqu'ils sont administrés par voie orale Injectés, ils peuvent être légèrement toxiques et présentent de toute façon une DL 50 tout à fait comparable à celle de l'érythromycine. Il résulte des essais des activités anti- bactériennes in vitro que les sels d'érythromycine sont actifs dans une proportion analogue à l'érythromycine base. Il résulte des essais d'activité anti- bactienne in vivo et des essais de pharmacodynamie, que les composés RV 01, RV 03, RV 04, RV 05, sont faiblement absorbés par voie orale et dans la même mesure que l'éry- thromycine base. Les dérivés propioniques (RV 11, RV 13, RV 14, RV 15) sont absorbés par voie orale dans une proportion pratiquement analogue à l'estolate d'érythromycine. Contrairement à l'érythromycine estolate, les médicaments suivant la présente invention sont dotés d'une bonne activité mucolytique que l'on constate chez les animaux soumis à une inhalation de 502. REVENDICATIONS 1 Dérivés thioliques de l'érythromycine et de l'ester propionique de l'érythromycine ayant pour formule: R C 00 X (I) o R représente un radical choisi parmi les radicaux sui- vants: 1 acétylcystéine NH C O CH 3 CH 2 CHCOOH SH 2 carboxyméthylcystéine NH 2 CH 2 CH C 00 H l S CH 2 COOH 3 acide-thiazolidine-carboxylique S C 0)H 4 acide mercaptosuccinique HS CH COOH CH 2 COOH et X représente le radical de l'érythromycine ou du pro- pionylester de l'érythromycine, ayant pour formule: CH 3 H H OR o R 1 représente H, ou CH 3 CH 2 C O - 2 Sel d'érythromycine avec acétylcystéine suivant la revendication 1. 3 Sel d'érythromycine avec acide mercaptosuc- cinique suivant la revendication 1. 4 Sel d'érythromycine avec acide thiazolidine- 4-carboxylique suivant la revendication 1. Sel d'érythromycine avec carboxyméthylcys- téine suivant la revendication 1. 6 Sel d'ester propionique d'érythromycine avec acétylcystéine suivant la revendication 1. 7 Sel d'ester propionique d'érythromycine avec acide mercaptosuccinique suivant la revendication 1. 8 Sel d'ester propionique d'érythromycine avec acide thiazolidine-4-carboxylique suivant la revendica- tion 1. 9 Sel d'ester propionique d'érythromycine avec carbosyméthylcystéine suivant la revendication 1. Procédé de préparation des dérivés thioli- ques d'érythromycine et de l'ester propionique d'érythro- mycine dans lesquels l'érythromycine base ou son ester propionique réagit avec l'acide souhaité, caractérisé en ce que la réaction s'effectue dans un solvant organique, à une température comprise entre 20 et 40 C et en pré- sence d'eau. 11 Procédé de préparation suivant la revendica- tion 10, caractérisé en ce que l'eau présente dans le solvant de réaction n'est pas supérieure à 20 % en volume du solvant de réaction. 12 Procédé de préparation suivant la revendica- tion 11, caractérisé en ce que le volume d'eau est de 4 à 5 % de celui du solvant de réaction. 13 Procédé de préparation suivant la revendica- tion 10, caractérisé en ce que ledit solvant organique est de l'acétone ou du méthylisobutylcétone. 14 Préparation pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle contient pour ingrédient actif, un dérivé thiolique suivant la revendication 1, ainsi que des véhi- cules et des supports de type usuel, et acceptables d'un point de vue pharmaceutique. Préparation pharmaceutique à àctivité anti- bactérienne et mucolytique, caractérisée en ce qu'elle contient pour ingrédient actif un dérivé suivant la revendication 1. 16 Préparation pharmaceutique suivant l'une des revendications 14 et 15, caractérisée en ce qu'elle se présente sous une forme qui lui permet d'être adminis- trée par voie orale en particulier sous forme de capsules et de suspensions, et en ce qu'elle contient pour ingré- dient actif un dérivé de l'érythromycine suivant la revendication 1, ainsi que les excépients et véhicules usuels. 17 Préparation pharmaceutique suivant l'une des revendications 14 et 15, caractérisée en ce qu'elle se présente sous une forme qui lui permet d'être administrée par voie parentérale et par aérosols et en ce qu'elle contient pour ingrédient actif, un dérivé de l'ester propionique d'érythromycine ainsi que les excipients et véhicules usuels.