FR 2519864 A1 19830722 FR 8300842 A 19830120 Af Composition huileuse à base de médicaments antitumoraux. La présente invention concerne une composition constituée d'un médicament antitumoral dissous ou émulsifié dans des graisses et des huiles et le but de la présente invention est de fournir une composition huileuse à base de médicament anti-tumoral capable de traiter efficacement différentes tumeurs. Jusqu'ici de nombreuses préparations ont été mises au point et commercialisées comme médicaments antitumoraux Cependant, à l'exception de quelques produits, elles sont limitées à l'administration par voie orale et par voie intraveineuse. De même, un nombre considérable de ces médicaments antitumoraux peuvent avoir une activité antitumorale excellente mais pré- sentent un effet secondaire important. De plus, si un médicament antitumoral est administré par voie orale ou intraveineuse dans le cas de la chimiothérapie pour, par exemple, des tissus néoplasiques spéciaux, non seulement l'effet thérapeutique est faible mais il y a égale- ment une possibilité de provoquer un effet secondaire dans tout le corps vivant puisque le médicament antitumoral diffuse dans l'ensemble du corps Pour résoudre ces problèmes, on a proposé une préparation qui est préparée en fixant un médi- cament antitumoral sur un support de faible toxicité ayant une affinité pour les tissus et un pouvoir de rétention et qui peut être administrée directement dans les vaisseaux sanguins et/ou lymphatiques irriguant l'organe Cependant, comme supports convenables, on connait le liposome, l'érythro- cyte, 1 'ADN, le fibrinogène, l'albumine, les microsphères d'albumine, les polymères synthétiques, et les graisses et les huiles, mais parmi ces préparations, celles qui sont utilisées en pratique sont seulement les préparations à base de médicaments antitumoraux présentant en elles-mêmes une solubilité dans l'huile telles que la solution dans l'huile de sésame de l'épitiostanol, etc De nombreux autres médica- ments antitumoraux importants qui sont insolubles dans l'huile n'ont pas pu être utilisés en pratique à l'heure actuelle parce qu'on n'a pas trouvé un moyen de solubilisation efficace dans un véhicule huileux pour les graisses et les huiles. Les inventeurs ont cherché à dissoudre de différentes manières des médicaments anti-tumoraux soltbles à l'eau ou modérément solubles dans l'huile, dans des graisses et des huiles sous la concentration nécessaire A la suite de leur recherche, ils'ont réussi à mettre au point l'invention basée sur la découverte qu'il est possible de dissoudre les médicaments antitumoraux en cause dans les graisses et les huiles en incorporant un adjuvant de solubilisation spécifique dans le véhicule huileux (Ci-après celui-ci est désigné par "solu- bilisant"). A savoir, l'invention a pour objet une composition huileuse à base d'un médicament antitumoral oemprenant au moins un médicament antitumoral modérément soluble à l'huile ou soluble à l'eau, au moins une graisse ou une huile et au moins un solubilisant choisi parmi les éthers couronnes (polyéthers cycliques contenant 5 à 10 molécules d'oxyde d'éthylène poly- mérisées circulairement), la lécithine, le polyéthylèneglycol, le propylène-glycol, la vitamine E, les aloyléthers de poly- oxyéthylène et les esters de sucrose des acides gras. Comme médicaments antitumoraux modérément solubles dans l'huile ou solubles dans l'eau utilisés dans la présente invention, on citera le Carmofur (HCFU), le Fluorouracil ( 5-FU), la Mitomycine C, le chlorhydrate d'aclarubicine (Acracinomycine), l'ancitabine (Cyclocytidine) , etc Ces médicaments antitumoraux sont utilisés seuls ou en mélange. Camme graisses et huiles utilisées dans la présente invention, on peut citer une huile fortement iodée ( 9 ème Pharmacopée Japonaise); une huile iodée ( 9 ème Pharmacopée Japonaise): un éthylester d'acide gras iodé d'huile d'oeillette (Lipiodol Ultra-Fluide, marque, d'André Guerbet); des acides gras supé- rieurs non saturés tels que l'acide linoléique, l'acide lino- lénique, l'acide oléique, etc, et leurs esters; les iodures des acides gras supérieurs non saturés précédents, des huiles végétales telles que l'huile de sésame, etc; l'ODO (marque d'un glycéride d'acide gras à chaîne' moyenne fabriqué par Nisshin Seiyu K K), etc. De même des exemples pratiques du solubilisant ci-dessus mentionné, utilisables dans la présente invention sont les suivants A savoir comme éther couronne, il est préférable d'utiliser le 18-couronne-6, le dibenzo-18-couronne-6, le dicyclohexyl-18-couronne-6, le dibenzo-24-couronne-8, le dicyclohezyl-24-couronne-8, ou le 15-couronne-5; comme léci- thine, il est préférable d'utiliser la lécithine de soja, la lécithine de jaune d'oeuf, etc, et comme polyéthylèneglycol (PEG), on préfère utiliser un polyéthylèneglycol de type liquide, en particulier le polyéthylène 400 Comme alopyléther de polyoxyéthylène, on peut utiliser le "Renex" (marque, produit par Atlas Powder Co) Egalement, en tant que "Renex", le w Renex 35 " qui est un complexe d'un aloyléther de poly- oxyéthylène et d'urée est utilisé de préférence De même, comme esters de sucrose d'acide gras, les esters ayant un bilan hydrophilelipophile (BLH) inférieur à 10 sont utilisés. Des exemples de ces esters sont les "Ryoto Sugar Esters S- 370, S-570, S-770, S-970, etc " (marques) (Dans ces marques S représente l'acide stéarique, et le premier chiffre par exemple 3,' 5, etc, indique la valeur HLB et les deux chiffres suivant, par exemple 70, etc, indiquent la teneur en % en acide stéarique). La composition de la présente invention est préparée comme suit A savoir, lorsqu'un médicament antitumoral peut être dissous dans un solubilisant à la température ambiante ou sous chauffage, le médicament antitumoral est tout d'abord dissous dans un adjuvant de solubilisation et la solution est dissoute dans des graisses et huiles ou ces trois consti- tuants sont mélangés simultanément l'un avec l'autre et le mélange est brassé pour dissoudre le médicament antitumoral. De même, lorsque le médicament antitumoral est modérément soluble dans un solubilisant ou perd sa stabilité sous chauf- fage: (a) le médicament antitumoral et un solubilisant sont tout d'abord dissous dans un solvant convenable et,après avoir chassé le solvant par distillation, la dispersion solide ainsi formée est dissoute dans des graisses et huiles sous brassage (méthode au solvant), (b) le médicament antitumoral, le solubilisant et les graisses et huiles sont dissous dans un solvant organique convenable et le solvant est ensuite chassé par distillation, ou (c)>les trois constituants précédents sont mélangés simulta- nément l'un avec l'autre et brassés pour dissoudre le médica- ment antitumoral. Dans ce cas on peut utiliser tous les solvants organiques qui peuvent dissoudre les constituants précédents De même, lorsqu'un solubilisant est tensio-actif comme, par exemple, la lécithine, de l'eau est ajoutée au médicament-antitumoral 19864 -5 et à la lécithine, le mélange est émulsifié par brassage, et, après avoir éliminé l'eau de l'émulsion, le résidu peut être dispersé (émulsifié) dans des graisses et des huiles. Dans ce cas, il arrive parfois que la composition (émulsion) obtenue se sépare en deux couches mais ceci n'est pas dû à la recristallisation du médicament antitumoral mais à la lécithine et une émulsion uniforme peut être obtenue facilement en secouant, si nécessaire sous chauffage Ainsi les composi- tions de la présente invention englobent non seulement la solution d'un médicament antitumoral dans des graisses et des huiles mais également l'émulsion d'un médicament anti- tumoral dans des graisses et des huiles De plus, dans la méthode au solvant précédente, la dispersion solide du médi- cament antitumoral dans le solubilisant peut être utilisée comme une préparation du type à dissolution qui est dissoute dans les graisses et les huiles sous brassage lors de la mise en oeuvre Lors de la dissolution de la préparation sous brassage, il est préférable d'utiliser un mixeur mélan- geur, un bain avec générateur d'ultrasons, etc. Le rapport entre la teneur en médicament antitumoral et celle en solubilisant dans la composition de la présente invention dépend du type de solubilisant mais la proportion du solubi- lisant est généralement de 0,05 à 1000 parties en poids, de préférence 1 à 100 parties en poids, pour une partie en poids du médicament antitumoral. La composition de la présente invention peut être administrée en l'état ou elle peut être administrée après y avoir ajouté des composants de combinaison convenables pour la préparation ou d'autres médicaments. De même, si nécessaire, la composition de la présente invention peut être utilisée après avoir été stérilisée de la manière usuelle. Ensuite, pour prouver l'utilité de la composition de la pré- sente invention, l'effet antitumoral de la composition sur des lapins sera exposé ci-après ensemble avec la procédure expérimentale. Procédure expérimentale: En utilisant 22 lapins blancs de Nouvelle-Zélande, des doses de 0,2 ml de suspensions contenant 1 000 000 à 1 500 000 cellules cancéreuses VX 2 dans lml ont été injectées dans le tissu subséreux du lobe latéral gauche du foie de chaque lapin et lorsque le diamètre de la tumeur a atteint environ 2 cm après deux semaines à partir de l'injection de la suspen- sion, les lapins ont été soumis à l'expérience suivante. Groupe 1: à ce groupe ( 12 lapins) a été administrée une solu- tion huileuse de Mitomycine C (MMC). La solution huileuse de Mitomycine C (MMC) obtenue dans l'Exemple 16 a été diluée au double avec du Lipiodol Ultra- Fluide et on a administré sous laparotomie 0,2 ml de la solution diluée dans l'artère hépatique commune de chaque lapin. Groupe 2: à ce groupe ( 6 lapins) (contr 8 le) on a administré du Lipiodol Le lipiodol ( 0,2 ml) a été administré sous la- parotomie dans l'artère hépatique commune de chaque lapin. Groupe 3: Ce groupe ( 4 lapins) a reçu une solution aqueuse de Mitomycine C (contrôle). Une solution ( 1 ml) contenant 2 mg/ml de Mitomycine C a été administrée sous laparotomie dans l'artère hépatique commune de chaque lapin. En ce qui concerne le Groupe 1 et le Groupe 2, une semaine après l'administration les lapins ont été sacrifiés Le foie disséqué a été coupé en lamelle épaisses de 0,5 cm d'épaisseur. Ensuite des radiographies Softex et des spécimens microscopi- ques de ces lamelles ont été réalisés. Pour la radiographie Softex, on a utilisé un appareil Softex MR, la distance était de 34 cm, le potentiel du tube était de 25-30 k V en pointe et la durée d'exposition était de 1- 1,5 minute. En ce qui concerne le Groupe 3, les sections du foie disséquées une semaine après l'opération comme dans le Groupe 1 et le Groupe 2, ont été teintées avec de l'hékatoxyline et de l'éosi- ne et examinées. De plus, outre les Groupes 2 et 3 et comme expérience de contrôle, on a essayé une forme de dosage obtenue en ajoutant de la poudre de Mitomycine C pour injection aqueuse au Lipiodol. Toutefois la Mitomycine C ne se dissolvait pas dans le Lipiodol. Lorsque la préparation est injectée par voie intra-artérielle, les particules de Mitomycine C provoquent une embolie des vaisseaux sanguins périphériques, ce qui montre que la prépara- tion ne convient pas pour une utilisation pratique. Résultat expérimental: Groupe 1: Le tissu néoplasique était assoupli au moment du sacrifice, et les dimensions des cellules étaient les mêmes que celles observées au moment de l'injection intra- artérielle de la solution huileuse. Sur la radiographie Softex la présence de Lipiodol était limitée aux tissus néoplasiques. Sur la surface de coupe, les tissus néoplasiques se sont modifiés en un blanc grisâtre et souple Histologiquement, la plupart des tissus néoplasiques étaient dégénératifs et nécrotiques et à la périphérie de la tumeur, on a observé une infiltration inflammatoire marquée de la cellule, en particulier une infiltration lymphocytaire. Groupe 2: les tissus néoplasiques étaient blancs, élastiques, durs et s'étaient développés notablement par comparaison avec ceux examinés préalablement lorsque du Lipiodol avait été administré. Sur la photographie Softex, la présence de Lipiodol dans la tumeur a été observée dans la même mesure que pour le Groupe 1 Il existait une portion montrant histologiquement des modifications dégénératives très légères mais, dans la ploe grande partie, des cellules cancéreuses VX 2 viables ont été observées et on n'a pas observé d'infiltration inflam- matoire dans la cellule. Gràupe 3: En dépit de ce que la dose de Mitomycine C était, dans ce Groupe, 10 fois plus importante que celle dans le Groupe 1, les effets antitumoraux contre les cellules cancé- reuses VX 2 ont été à peine observés sur trois lapins et, dans un des lapins, une modification dégénérative diffuse a été observée dans les tissus néoplasiques mais des cellules cancéreuses viables ont été également observées. D'après les résultats expérimentaux ci-dessus, il est clair que les comupositions de la présente-invention ont des effets antitumoraux remarquables. L'invention sera maintenant expliquée d'une manière plus pratique par les Exemples suivants. EXEMPLE 1 A 10 Omg d'ancitabine ont été ajoutés l O Omg de 'Renex 35 N et le mélange a été chauffé au bain marie pour fournir un liquide transparent homogène Ensuite, en ajoutant 3 ml d'acide linoléique au liquide et en secouant puis en laissant le mélange au repos à la température ambiante, on a obtenu un liquide transparent. EXEMPLE 2 En secouant un mélange de 20 mg de Flu Drouracil, de 200 mg de PEG 400 et de 3 ml d'acide linoléique, on a obtenu un liquide transparent. EXEMPLE 3 En secouant un mélange de 2 mg (produit efficace) de Mitomycine C, lml de PEG 400 et 1,5 ml d'acide linoléique, on a obtenu un liquide transparent. EXEMPLE 4 A 2 mg (produit efficace) de Mitomnycine C cnt été ajoutés 100 mg d'ctocophérol et 4 ml de méthanol Après avoir dissous en secouant le mélange, le méthanol a été chassé par distilla- tion sous pression réduite au moyen d'un évaporateur rotatif. De plus, après séchage sous vide du résidu pendant une nuit à la tem Dprature ambiante, 2 ml d'acide linoléIque ont été ajoutés au résidu et le mélange a été ensuite immergé dans un bain avec générateur ultrasonique pendant 5 minutes pour donner un liquide clair et transparent. EXEMPLE 5 A 2 mg (produit efficace) de Mitomycine C cr t été ajoutés 1,5 ml de propylène-glycol et 1,5 ml d'acide linoléique et ensuite le mélange a été secoué parfaitement pour donner un liquide transparent. EXEMPLE 6 Dans 20 ml d'eau ont été dissous 50 mg de Fluorouracil et ensuite l.OO Omg de lécithine de soja ont été dispersés dans la solution aqueuse de Fluorouracil ainsi obtenue La dispersion a été chauffée à 50 C et ensuite l'eau a été chassée par distillation sous pression réduite au moyen d'un évaporateur rotatif. De plus le résidu a été séché sous vide pendant une nuit à la température ambiante sur du pentoxyde de phosphore. Au résidu ont été ajoutés 2,5 ml d'acide linoléique et le mélange a été immergé dans un bain avec générateur d'ultrasons pendant 5 minutes pour fournir une émulsion homogène. EXEMPLE 7 Dans 1,5 ml d'acide linoléique ont été dissous 25 mg de lécithine de soja dans un bain avec générateur d'ultrasons et la solution ainsi obtenue a été ajoutée à 2 mg (produit actif) de Mitomyvine C En immergeant le mélange dans un bain avec générateur d'ultrasons pendant 5 minutes, on a obtenu une solution claire et transparente. EXEMPLE 8 A 80 mg d'ancitabine (base) ont été ajoutés 250 mg de lécithine de soja et ensuite 20 ml d'eau et après avoir immergé le mélange dans un bain avec générateur d'ultrasons pendant 5 minutes, l'eau a été chassée par distillation sous pression réduite à 50 C Ensuite le résidu a été de plus séché sous vide pendant une nuit à la température ambiante sur du pentoxyde de phos- phore et 1,5 ml d'acide linoléique ont été ajoutés au résidu pour fournir une émulsion homogène. EXEMPLE 9 Dans 10 ml de chloroforme ont été dissous 2 mg (produit actif) de Mitomycine C et 100 mg de lécithine de jaune d'oeuf et, après avoir ajouté 3 ml d'huile de sésame à la solution, le mélange a été brassé Lorsque le chloroforme a été complè- tement chassé par distillation sous pression réduite à 30 C en utilisant un évaporateur rotatif, on a obtenu un liquide clair et transparent. EXEMPLE 10 Dans 4 ml d'acétone ont été dissous 2 mg (produit actif) de Mitomycine C et 20 mg de 18-couronne-6 et ensuite l'acétone a été évaporée jusqu'à siccité Le résidu ainsi obtenu a été de pbua séché sous vide pendant une nuit à la température ambiante et après avoir ajouté à celui-ci 2,Oml d'acide lino- léique, le mélange a été fortement secoué pour fournir une solution claire et transparente. EXEMPLE 11 Dans 20 ml de méthanol ont été dissous 50 mg d'ancitabine (base) et 150 mg de 18-couronne-6 Le méthanol a été évaporé jusqu'à siccité et le résidu a été de plus séché sous vide pendant une nuit à la température ambiante Ensuite 1,5 ml d'acide linoléique ont été ajoutés au résidu Le mélange a été immergé dans un bain avec générateur d'ultrasons pendant 5 minutes pour fournir une solution claire et transparente. EXEMPLE 12 Dans 20 ml de méthanol ont été dissous 50 mg de chlorhydrate d'ancitabine et 150 mg de 18-couronne-6 Le méthanol a été évaporé jusqu'à siccité et le résidu a de plus été séché sous vide pendant une nuit à la température ambiante Ensuite, 1,5 ml d'acide linoléique ont été ajoutés au résidu Le mélange a été immergé dans un bain avec générateur d'ultrasons pendant minutes pour fournir une solution claire et transparente. EXEMPLE 13 Dans 2 ml d'acétone ont été dissous O lmg de Fluorouracil et mg de 18couronne-6 et l'acétone a été évaporée jusqu'à siccité Après avoir de plus séché sous vide le résidu pendant une nuit à la température ambiante, 1,5 ml d'acide linoléique ont été ajoutés au résidu Le mélange a été secoué pour fournir une solution claire et transparente. EXEMPLE 14 Dans 90 mg de Carmofur ont été ajoutés 3 ml de Lipiodol Ultra- Fluide et 180 mg de 18-couronne-6 et après avoir chauffé le mélange à environ 50 C pour assurer la dissolution, la solution a été laissée au repos à la température ambiante pour fournir une solution claire et transparente. EXEMPLE 15 Dans 5 ml de chloroforme ont été dissous 10 Omg de Carmofur et 300 mg de 18-couronne-6 et après avoir chassé le chloroforme par distillation sous pression réduite à 30 C, le résidu a été séché sous vide pendant 18 heures Au résidu ont été ajoutés 3 ml de Lipiodol Ultra-Eluide et le mélange-a été- secoué pour fournir une sol tion claire et transparente. EXEMPLE 16 Dans 11 Oml de chloroforme ont été dissous 26 mg (produit actif) de Mitomnyine C et 2,6 g de lécithine de jaune d'oeuf et, après avoir chassé le chloroforme par distillation sous pression réduite à 30 C, le résidu a de pirs été séché sous vide pendant 2 heures à 30 C Au résidu ont été ajoutés 13 ml de Lipiodol Ultra-Fluide et le mélange a été secoué légèrement pour fournir un liquide clair et transparent. EXEMPLE 17 Dans 5 ml de chloroforme ont été dissous 10 Omg de Carmofur,250 mg de 18couronne-6 et l O Omg de lécithine de soja et, après avoir chassé le chloroforme par distillation sous pression réduite à 301 C, le résidu a été de plus séché sous vide pendant 18 heures à la température ambiante Au résidu ont été ajoutés 3 ml de Lipiodol Ultra-Fluide et le mélange a été secoué pour fournir une solution claire et transparente. EXEMPLE 18 Dans 5 ml de chloroforme ont été dissous 2 mg (produit actif) de Mitomycine C et 200 mg de lécithine de jaune d'oeuf et, après avoir chassé le chloroforme par distillation sous pres- sion réduite à 300 C, le résidu a de plus été séché sous vide pendant 2 heures à 301 C Au résidu ont été ajoutés 2 ml d'huile fortement iodée ( 9 ème Pharmacopée Japonaise) et le mélange a été secoué pour fournir un liquide clair et transparent. EXEMPLE 19 Dans l Oml de chloroforme ont été dissous 2 mg (produit actif) de Mytomycine C et 200 mg de lécithine de jaune d'oeuf et, après avoir chassé le chloroforme par distillation sous pression réduite à 301 C, le résidu a de plus été séché sous vide pendant une nuit à la température ambiante Au résidu ont été ajoutés 20 mg de chlorhydrate d'aclarubicine et ensuite 2,5 ml d'acide linolélque suivi par un brassage pour fournir un liquide clair et transparent. Revendication 1 Une composition huileuse à base d'un médicament antitumoral comçrenant au moins un médicament antitumoral très peu sol ble dans l'huile ou sol île dans l'eau et au moins une graisse ou huile caractérisée en ce qu'elle comporte en plus au moins un adjuvant de sol bilisation dans un véhicule huileux choisi dans le groupe constitué par les éthers couronnes, la léci- thine, le polyéthylène-glycol, le propylène-glycol, la vitamine E, les éthers alcoyliques de polyoxyéthylène et les esters de sucrose des acides gras.