FR 2518088 A1 19830617 FR 8123488 A 19811216 1. La présente invention est relative à de nouveaux dérivés d'aminoacides, à leurs procédés de préparation de leur application thérapeutique. Les dérivés selon la présente invention sont des inhibi- teurs d'enzymes, en particulier de l'enképhalinase qui est une enzyme dégradant les enképhalines (B bialfroy et al, Nature 276, 523 ( 1978); A Guyon et al, Life Sciences 25, 1605 ( 1979) et de peptidases, telles que des aminopeptidases impliquées dans le métabolisme des peptides cpioides(Hambrook et al, Nature ( 1976) 262, 782; Pert et al, ( 1976) Science 194,330-332; Guyon et al, Biochem Biophys Res Connun. ( 1979) 88, 919-926. Les composés susceptibles d'inhiber l'enképhalinase peuvent ainsi prolonger les effets des enképhalinases endogènes ou potentia- liser l'action d'analogues synthétiques administrés de façon exogène. Ces coeposés sont donc susceptibles de remnplacer les agents morphi- niques dans toutes leurs propriétés sans en avoir les graves in- onvénients, en particulier au niveau des phénomènes d'accoutumance et de dépendance. On connait déjà, d'après la demande de brevet FR 80/05 601, des dérivés de dipeptides ayant une acti- vité inhibitrice de l'enképhalinase. La présente invention vise à fournir de nouveaux dérivés dipeptidiques ou analogues ayant notamment cette activité. Les dérivés selon l'invention répondent à la formule générale X CH A B CH C R 3 (I) 2 I 2 (CH 2)n R 2 R 1 dans laquelle A est un groupe carbonyle ou amino; B est un groupe carbonyle; amino; amino subs- titué par un groupe alkyle en C 1 à C 4; un groupe amino 2518088 - 2. substitué dont la troisième valence forme avec le groupe R 2 une chaîne alkylénique ayant de 2 à 4 atomes de carbone et pouvant éventuellement contenir un atome de soufre ou d'azote et/ou être substituée par un groupe hydroxy ou alcoxy en C 1 à C 4; R 1 est un atome d'hydrogène; un groupe alkyle îC 1 _ 6) linéaire ou ramifié éventuellement mono ou polysub stitué par un atome d'halogène; un groupe cyclohexyle; un groupe phényle ou naphtyle éventuellement mono ou polysubstitué par un atome d'halogène> un groupe tri- fluorométhyle ou hydroxy; un groupe thiényle; un groupe thiazolyle; un groupe furyle; un groupe indolyle; un groupe imidazolyle; n est 0, 1 ou 2; R 2 est un atome d'hydrogène; un groupe alkyle en C 1 à C 6 linéaire ou ramifié; un groupe alkyle(C 1 _ 4) substitué par un reste a ou e thiényle, a ou B furyle, a ou Othiazolyle, a ou e indolyle, a ou O imidazolyle, a ou B benzothiényle, a ou O benzimidazolyle, naphtyle ou un groupe phényle éventuellement mono ou polysubstitué par u-n a t o me d' halogène -; un groupe hydroxy- alkyle; un groupe aleoxyalkyle éventuellement substitué sur la fraction alcoxy par un groupe phényle, benzhy- dryle ou pyridyle éventuellement N-substitué par un groupe phénylalkyle dont le noyau phényle est lui-même éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène; un groupe phénoxyalkyle; un groupe mercapto alkyle éventuellement substitué sur le soufre par un groupe alkyle linéaire ou ramifié, phényle ou benzyle; R 3 est un groupe hydroxy; un groupe alcoxy li- ndaire ou ramifié en C 1 à C 8 éventuellement mono ou polysubstitué par un atome d'halogène, un groupe hydro- xy, amino éventuellement mono ou disubstitué par un groupe alkyle en C 1 à C 4; un groupe phénoxy ou Phény 1 alcoxy C 1)dont le noyau phényle est mono- ou polysubstitué par un atome dhlge;un groupe amine; un groupe amnirioe mono cadiubtîu par u groupe alkyle en C 1 -à li éi on ramifié éventuellement mono ou polysubstitué pair iluiat-ore d'halogène; urn groujpe amino éventuellement rncno- s u disubstitué par un groupe phényle ou phényla-Ikyle i C ',ces d Jeux derniers radi- caux -tn é tele -t mo io o-u polysubstitués sur le noyau phényle par un atcme d'halogène; X est un atome d'halogèënez; uin groupe phosp hono; un groupe phosphonyl I S ubnti Lué î:de forcmule -PO un groupe amine; un jroupe miîno r:ozhtéde for- mule NHR' dans lequel IR': un groupe alkyle, cyclo- alk yle, phnyle, mrno ou jiÄyashnlphéinylall-yl e dont la fraction alcoxy est en,popho phospho- 2 On yl S ub St i tué d e ïo r au IL PîO O DF da i S l-e q uel 1 e St tel que défini ci&s u ulsfri un groupe aminci disuib' stitué de fo-:rmule OR" O dans laquelle R" est un atomie d ' hydrogène un groupe alkyle en 1 àC aralkvle R"' est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle éventuel- 3 Olement mono ou polysubstitué par un atome d'halogène 4. ou un groupe trifluorométhyle, un groupe aralkyle(C 1 _ 4) éventuellement mono ou polysubstitué sur le noyau aryle par un radical choisi parmi un atome d'halogène, un groupe hydroxy, amino, nitro ou trifluorométhyle; un groupe carbamoyle mono ou disubstitué de formule O OR" N R"' dans laquelle R" et R"' sont tels que définis ci-dessus; un groupe alkyle en C 1 à C 4 mono- ou polysubstitué par un atome d'halogène, un groupe- alcoxy (C 1 _ 4) carbonyle, carboxy, phosphono, phosphono disubstitué de formule -PO(OR)2 dans lequel R est tel que défini ci-dessus, ou sulfo; un groupe aminoalkyle; un groupe aminoalkyle monosubstitué de formule -(CH 2)m- NHR' dans laquelle R' est tel que défini ci-dessus, et m est un nombre entier de 1 à 4; un groupe aminoalkyle OR" disubstitué de formule-(CH 2)m i R" dans laquelle R", R"' et m sont tels que définis ci-dessus; un groupe carbamoylalkyle mono ou disubstitué de formule OR" -(CH 2)m g R'" dans laquelle R", R"' et m sont tels que définis ci-dessus; et leurs sels d'addition avec des acides ou des bases pharmaceutiquement acceptables. Parmi les composés de formule I définis ci- dessus une classe préférée de composés comprend les dérivés dans lesquels A est un groupe carbonyle ou amino; B est un groupe carbonyle, amino ou amino sub- stitué dont la troisième valence forme avec R 2 un radi- cal alkylène en C 1 à C 4 contenant éventuellement un autre hétéroatome; R 1 est un atome d'hydrogène; un groupe alkyle (C 1 4) ou un groupe phényle, éventuellement mono ou polysubstitué par un atome d'halogène;un groupe indolyle; i O 8 5. R 2 est un atome d'hydrogène; un groupe alkyle linéaire ou ramifié éventuellement substitué par un groupe indolyle; n est O ou 1; R 3 est un groupe hydroxy; alcoxy en C 1 à C 4 éventuellement mono ou polysubstitué par un atome d'halogène; un groupe phénylalcoxy (C 1 _ 4) dont le groupe phényle est éventuellement substitué par un atome d'halogène; un groupe amino; alkylamino (C 1 _ 6) dont le groupe alkyle est éventuellement mono ou polysubstitué par un atome d'halogène; phénylalkyle (C 1 _ 4) amino dont le groupe phényle est éventuellement mono ou polysubstitué par un atome d'halogène; X est un atome d'halogène; un groupe phosphono; un groupe phosphono substitué par au moins un radical benzyle; un groupe sulfo; un groupe méthylène; un groupe amino mono ou disubstitué par un radical choisi parmi un groupe hydroxy, benzyloxy, phosphono, phosphono mono ou disubstitué par un groupe benzyle, sulfo, formyle,benzylcarbonyle ou mono ou polyhaloalkyle(C 1 4) carbonyle; un groupe carbamoyle mono ou disubstitué par un radical choisi parmi un groupe hydroxy, benzyloxy dont le groupe phényle est éventuellement mono ou poly- substitué par un atome d'halogène,ou mono ou polyhalo- benzyle; un groupe alkyle éventuellement mono ou poly- substitué par un radical choisi parmi un halogène ou un groupe phosphono, phosphono disubstitué par un groupe benzyle, sulfo; un groupe aminoalkyle mono ou disubsti- tué sur l'atome d'azote par un radical choisi parmi un groupe alkyle (C 1 _ 4), hydroxy, benzyloxy, phosphono, sul- fo, formyle, acétyle, mono ou polyhalobenzylcarbonyle, mono ou polyhaloalkyle (C 1 _ 4) carbonyle; un groupe al- kyle (C 1 _ 4) substitué par un radical alcoxy (C 14) car- bonyle, carboxy; un groupe alkyle (C 1 _ 4) substitué par 2518088, 6. un radical carbamoyl mono ou disubstitué par un radical hydroxy, benzyloxy dont le groupe phényle est éventuel- lement mono ou polysubstitué par un atome d'halogène, mono ou polyhalobenzyle. A titre d'atome d'halogène on préfère parti- culièrement le fluor. Sauf indication contraire, les groupes alkyle ont de préférence 1 à 6 atomes de carbone et en parti- culier de 1 à 4 atomes de carbone. Comme groupe aryle on envisage tout noyau aro- matique mono ou polycyclique contenant éventuellement un hétéroatome tel que l'azote, le soufre ou l'oxygène, et on préfère en particulier le groupe phényle. L'invention envisage, à titre de composés spé- cifiques, les dérivés suivants (dans les formules données on désigne par le groupe phényle: 1) (-CH 20) 20 P NH-CH-CONH-CH 2-CO 2 CH 3 CH 2- 2) (HO) 20 P-NH-CH-CONH-CH 2-CO 2 CH 3 H 2- 3) (-CH 2 O) 20 P-NH-CH-NHCO-CH 2-COOCH 3 2 O 4) 4) (HO) 2 OP-NH-CH-NHCO-CH 2-CO 2 CH 3 2 2 23 ) HONH-CH-CONH-CH 2 _CO 2 H CH 2- 6) HO 3 S-NH-CH-CONH-CH 2-CO 2 H * CH 2- 7) (HO) 2 OP-CH-CONH-CH 2-CO 2 H CH 2- Il 8) (HO) OP-CH-CONH-CH CO (M 2 2 2 uni 2 _ 9 HOS-CH-CO,' 41 ï-(-'H -CO il 1 7 2 ' CH 2 _ ) HO S-CH-CO)NII-CH 2 -CO 2 CH 2 CH CH C-CONII-CIJ CO CH 1- 2 = 2 2 12) CH 2 =C-CONH-CH 2-COCH CH 2 _ 13) CH CONH-N",F CG CE, CF 2 ="_ 2 2 3 14) #ZH,=C-CONH-C Fi '-,Co CH -c H F i 2 2 6 CH ) Br-CH Co 2 2 " 2 '2-4) H 2 _ 16) Br-C' 11-1 -q H-colm-CRI-CO Cil CF 2 2 ' 2 3 17) Br-CH -CH-('C)NF-CH-1-CO CF-C H F 2 1 ú; 2 2 15 4 CH 2- 1.8) HONH-CH 2-CH-COUH-C 1 2-CO 2 CH 2 19) HONH-Ch 2-CII-COIîH-CH 2 -CO 2 CH 2-CF 3 uni 2 _ ) HONH-CH 2 _CHCONH-CH 2-co 2 CH 2-C 6 H 4 F CH 2 _ 21) HO 3 S-NH-CH 2-CH-CONH-CH 2-co 2-CH 2-C 6 H 4 F 22) (HO) 2 OP-CH 2-îH-CONH-CH 2-co 2-CH 2 _ CH 2 _ 23) HO S-CH -CH-CONH-CH CO CH 3 2 1 2 2 2 _ CH 2 _ 24) C 2 H 5 NH-CH -CH-CONH-CH 2-co 2 CH 2 _ CH 2 _ ) HONH-CH-CONH-CH 2-ço 2 H 1 - CH 3 26) F-0 3 S-NH-CH-CONH-CH 2-co 2 H uli 3 27) (-CH 20) 2 OENH-CH-CO-N CH-CO 2 CH 2 CF 3 1 -_i 1 CH 3 CH 2-S-CH 2 - 28) (HO) 2 OP-NH-CH-CO-N CH-CO 2 CH 2 CF 3 1 1 1 CH 3 CH 2-S-CH 2 29) Br-CH-CONH-CH CONH-CH -CH -CH(CH 1 2 2 2 3 2 CH 30) -CH 2 ONII-CH-CONH-CH 2-CONH-CH 2-CH 2:CH (CH 3)2 1 - CH H-C = O 31) -CH 2 ON-CH-CONH-CH 2 -CONH-CH 2-CH 2-CH (CH 3)2 CH 2 2518 O 8 a 0 OH il i 32) H-C-N-CH-CONH-CH -CONH-CH 2-CH 2-CH (CH 3) 2 CH CHO 33) -CH 2 1 ZH-CH 2-CO 2 CH 2 _ CH i 2 0 H il î 34) H-C-N-CH-CONH-CH 2 COOH CÀ ) -CH -unn- n-CONH-CH -CO CH 2 1 2 2 2 CH OH O 1 Il 36) H-N-C-CH-CONH-CH COOH 1 2 CH Il 37) -CH 2-ONH-C-CH-CONH-CH 2-co 2-CH 3 CH 2 ou 3 H-N CH-CONH-CH -CO -CH 1 2 2 3 CH 2 Il 39) ,-CH 2-vmn-, t-a-CONH-CH 2-CONH-CH 2- Cà i 2 EHD E: z z 1 z z HD OD RD-Hiq OD-HD HD-M-0 HD- (LP Ukii z HD z 1 Z HOOD HD-HNOD-HD HJ-K-D-H ( 9 P 1 il HO O HD 1 z z -ZWOOD-ZHD-r-HROD-HD HD-M-0 HD- (SV Zi HD z z z z 1 - Z HD) HD HD HD-HROD HD-HNOD-HD HD-N-D-H (PP 9 1 il HO O zt HD z ú z z z 1 -Z z HD) HD HD HD-HHOD HD-Hlq OD-HD HD-N-0 HD(EP 1 - O=D-H Z HD:- z ú z z z 1 HD) HD HD HD-HNOD HD-HROO-HD-D-K-H (ZV 0 HO zi HD z E z z z t HD) HD HD HD-HROD HD-amui-mi-D-HNO-ZHD- il ZHD ZHD-Hiq OD-ZHD-RNOD-HD-D-NH (OV il 1 0 HO OL 6808 LSZ 0 OH il 1 48) H-C-N-CH -CI-CONH-CH CO CHI 2 2 2- CH 2 _ COCH 3 49) -CH O-N-CII -CH-CON Fi-Cll CO -CH 2 2 2 2 CHI _ IDH ) CH 3 CO-N-CH 2-Cq-CONH-CH 2-CG 2 H CH 2 CGCH- 51) -CH _C O NH-CH 2 _ 2 2 CH OH r 2) CH 3 2-C Ci NH-CE 2 53) C H -Co _C(CH 2 5 2 2 2 3 3 li -ti nu-% CH 2-CH-C Oi NH-Cl-Il 2-co 2 tbu Uli il ) -CH 2-vln- %-a 2CH-CONH-CH 2-co 2 tbu CH 2 j HO 071 HD z z z 1 1 Z RD OD Ii D- (tg z z - Z HD-ú JD H 00 HZ)-HNOD-HD-M (ú 9 1 ' î HO O z HD- (zg O=D Ho M z HD z z 1 z H OD HD-HMOD-HD-N-D HD- (tg HO O -ZHD-ZôD-ZIID-HROD-HD-N-o-ZHD- ( 09 9 O=D HD- z RD-OD-HNOH ( 65 -ZHD-RNOD-ZHD-HNOD-6 z HD-00-HNO z HD- (qs zi Hz OD-z HD-Hlqo D HD-z HO-D-HNOH (Ls il zi HD z 1 z z HOOD HD-HROD-HD HD-D-Htqo HD- (gs z 5 18 ô 8 9 -, 13. OH O 1 1 ) F-C H -CH -N-C-CH-CONH-CH CO H 6 4 2 1 2 2 CH 27 O-CH 2 _ 66) FC 6 H 4 " 2 CH -îH-COI H-CH -CO tbu 2 2 2 CH 2 OCH 2 _ 67) FC 6 H 4-CH 2-N-COCH -CH-CONH-CH 2-CO 2 H CH 2 _ OH O 1 Il 68) FC 6 H 4-CH 2-N-C-CH 2-CH-CONH-CH 2-co 2 H à 27 0 OCH 2 0 1 69) FC H -CH -C-N-CH -CH-CONH-CH -CO -CH 6 4 2 2 1 2 2 2 CH 2 _ OH ) PC 6 H 4-CH 2-C-N-CH 2-CH-CONH -CH 2-CO 2 H CH 2 OCH 1 2 71) CF 3-CH 2-C-N-CH 2-CH-CONH-CH 2-CO 2-CH 2 _ CH 2 0 OH 1 1 72) CF 3-CH 2-C-N-CH 2-CH-CONH-CH 2-CO 2 H CH 2 0 OH il 1 73) H-C-N-CH 2-CH-CONH-CH 2-CONH-CH 2-C 6 H 4 F Cà 2 _ 14. 0 OH 74) H-C-N-CH 2-CH-CONH-CH-CONH-CH 2-C 6 H 4 F CH 2-e CH 2-e indolyle 0 OH ) R-C-N-CH 2-CH-CONH-CH-CONH-CH 2-C 6 H 4 F CÀ 2- CH 3 OH O 1 Il 76) H-N-C-CH-CONH-CH-CONH-CH 2-c 6 H 4 F Cà 2- Ci CH(CH 2 3 2 0 OH 77) J ' 2 CONH-CH 2-COO-CH 2-CH 2-CH 2-CH 3 CH p p F 0 OCH 2- il 1 78) H-C-N-CH -CH-NH-CO-CH -COO-CH 2 1 2 2 Uli 0 OH 79) H-C-N-CH 2-CH-NHCO-CH 2-COOH CH 0 OCH 2- ) H-C-N-CH -CH-NH-CO-CH -CONH-CH 2 1 2 2 uh 2 0 OH il 1 81 H-C-14-uii 2-CH-NH-CO-CH 2-CONH-CH 2- Un 2 1 5 H-C=O 82) -CH -0-N-CH -CH-CONH-CH -CO CH 2 2 i 2 2 2 ç-.;h, -P Indolyle 0 OH il i 83) H-C-N-CII 2-CH-CONH-CH 2-CO 2 H CH 2 5 indolyle H C=O 841 -Cli 2-0-N-Cr I_-CH-CONH-CH 2-CO,2 CH 2 _ CH 2-CH(CH 3) 2 0 ofi i ) H-C-N-CH -c 3 q-no NH-CH -CO H 2 1 2 2 CH CI-1 (CH,) 2 2 86) -"_Hi-O-NH-CO-CH-CONH-CH 2-CO 2 CH 2 _ Ulli 2-uti(CH 3)2 87) HONHCO-CH-CONH-CH 2-co 2 H CH (CH 2 3 2 *2518088 ' ' 16. Les composés de formule I ont un ou deux atomes de carbone asymétriques Ils existent donc sous forme de mélange racémique ou sous des formes diastéréoisomères. Tous ces composés entrent dans le cadre de la présente invention Les synthèses décrites ci-après peuvent utiliser le racémique ou l'un des énantiomères comme substance de départ Quand on utilise dans le mode opé- ratoire de synthèse la substance de départ racémique, on peut séparer les stéréoisomères obtenus dans le produit par des procédés classiques de chromatographie ou de cristallisation fractionnée En général, l'iso- mère L par rapport à l'atome de carbone de l'amino- acide constitue la forme isomère préférée. Les composés de formule I forment des sels qui font également partie de cette invention Les sels comprennent les sels d'addition d'acide que l'on forme par réaction avec divers acides minéraux et organiques fournissant des sels d'addition d'acide, comprenant, par exemple, les halohydrates (en particulier le chlo- rhydrate et le bromhydrate), le sulfate, le nitrate, le borate, le phosphate, l'oxalate, le tartrate, le maléate, le citrate, l'acétate, l'ascorbate, le suc- cinate, le benzènesulfonate, le méthanesulfonate, le cyclohexane sulfonate et le toluènesulfonate. On forme les sels d'addition de base par réac- tion avec des bases telles que Na OH ou par réaction d'échange d'ions. On forme les sels d'une manière classique en faisant réagir la forme libre du produit avec un ou plusieurs équivalents de la base ou de l'acide appro- prié fournissant l'anion ou le cation désiré dans un solvant ou un milieu dans lequel le sel est insoluble ou dans l'eau et en éliminant l'eau par lyophilisation. En neutralisant le sel par un acide insoluble comme 2518088 ' 17. une résine échangeuse de cations sous forme hydrogène / par exemple la résine polystyrène-acide-sulfonique Dowex 50 (Mikes, Laboratory Handbook of Chromatographic Methods (Van Nostrand, 1961), page 256 _ 7, en éluant avec un tampon volatil (par exemple pyridine/acide acé- tique) et en extrayant avec un solvant organique, on peut obtenir la formule libre et, si on le désire, on peut former un autre sel. Les composés de la présente invention sont pré- parés par les divers procédés définis ci-après. Les composés de formule I peuvent être préparés par une réaction de condensation peptidique classique entre deux restes acides aminés convenablement protégés. Par exemple, le ou les groupes fonctionnels (c'est-à-dire les groupes amino, carboxy, hydroxy) qui ne sont pas impliqués dans la réaction de formation de la liaison peptide (c'est-à-dire -CONH) lors de la réac- tion de condensation peuvent être protégés par un ou des groupes protecteurs avant la réaction de condensa- tion. Comme groupes protecteurs intermédiaires des groupes amino, on emploie des groupes usuels tels que t.butoxycarbonyle (Boc), benzyloxycarbonyle (Z), iso- bornyloxycarbonyle (IBOC), etc. Les groupes carb oxyliques peuvent également être protégés, si nécessaire, par estérification (par exemple esters méthyliques, éthyliques, benzyliques, etc). On réalise la réaction de condensation en uti- lisant de préférence le couplage des azotures sans racémisation ou le procédé au dicyclohexyl carbodi- imide/1-hydroxy-benzotriazole dit ci-après DCC/HO Bt ou DCC/3-hydroxy-4oxo-3,4-dihydro-1,2,3-benzotriazine (OO Bt) On peut utiliser en variante les esters activés des fragments. 251808 O -. 18. La réaction de condensation peut être effectuée en présence d'un solvant Le solvant peut être choisi parmi ceux qui sont connus pour être utilisables dans les réactions de condensation de peptides Ainsi, on peut mentionner à titre d'exemples les solvants anhydres ou aqueux ci-après: diméthylformamide, diméthylsulfo- xyde, pyridine, chloroforme, dioxane, dichlorométhane, tétrahydrofurane, ainsi que des mélanges appropriés de tels solvants. La température réactionnejie est choisie dans la gamme connue pour les réactions conduisant à la forma- tion des liaisons peptides, par exemple normalement dans la gamme d'environ -20 'C à environ 30 'C De plus, les matières précurseurs (peptides protégés) des composés recherchés selon la présente invention peuvent égale- ment être facilement préparés par des procédés de syn- thèse en phase solide. Après la fin de la réaction de condensation recherchée, si le produit porte des groupes protecteurs, ils peuvent être éliminés par des procédés habituels. Parmi de tels procédés, on peut citer: la réduction catalytique en présence d'un catalyseur tel que le noir de palladium, le carbone sur palladium, le platine, etc, la solvolyse au moyen d'acide fluorhydrique, d'acide trifluoroacétique, etc et la réduction avec le sodium métallique dans l'ammoniac liquide. On utilise notamment l'acide trifluoroacétique (TFA) pour éliminer les groupes Boc (amino protecteur) et une saponification pour éliminer les groupes esters protecteurs des groupes carboxyliques. Les composés de formule I dans lesquels X -NH-PO(OH)2 sont obtenus selon Li et al, J Amer Chem. Soc ( 1954), 77, 1866, par action du chlorure de diben- zylphosphoryle préparé selon Atherton et al, J Chem. Soc ( 1948) 1106, sur le dipeptide acide ou ester approprié: 19. R' désignant 'La fraction hydrocarbonèe correspond à l'ester ou l'acide défini "our R 3 (C HCH OY POC 1 + HN Cli A B CH -CO O R' 652 2 23 (C Hil O H H-C_ B-Cl-C 6 52 t 21 2 -5 (HO)H 2 OPH Cl A fB-CH CO-CR R 2 2 2 (CH)) -1 2 C 2) n R 1 R 2 L'acide est obtenu par déprotection des restes benzyle lors de l'hydrogénationi avec Pd/C ou Pd G. Les phosphonates correspondant à la formule I dans lesquels X -PMOH) 2 sont obtenus piar action du i O phosphite, de tri-îsrîi-athy Isil; le le% formule Pl JSi (CH 3)33 selon fposexnth-cl et -z-4, Tetx Lett 1975) 977, sur un dérivé bromé rit 2 -ftxnîu JU dans lequel X = r ou Ci 12 Br. P/Osi(CH 3)3/3 + Sr U 22 CH -A B C H C O R (CH) n-R 1 R 1) addition l,HO) -OP -(CH -CH A B -l C CO R 2) hydrolyse (C Hi 2) n-R R 2 avec m = 0,1. Les composés bromés dans lesquels m = O sont obtenus selon la demande de brevet FR 80/08 601, alors que les composés ou mn = 1 sontÈ obtenus par addition d'H Br sur le dérivé CH 2 = CH A B CH CO Ru 2 I 1 23 (CH 2) n-R 1 R 2 Ces dérivés éthyléniques proviennent eux-mêmes de la condensation directe de l'acide acrylique substi- tué approprié avec un ester d'aminoacide- ai 8088 20. CHH -COOH + H 2 N CH C 02 R DCC, HOBT 2 12 23 W (CH 2) n-R 1 R 2 CH 2 = CH CONH CH CO R' ( H 23 N R 1 22 Dans des conditions douces ( 20 C) et en solution dans un solvant organique, le couplage peptidique est total et on n'observe aucune addition sur la double liaison. L'action d'hydroxylamine anhydre sur les déri- vés bromés de formule I dans laquelle X = Br ou -CH 2 Br selon La Noce et al, Ann Chim Rome ( 1968) 58, 393 et Kaminski et al, Roczn, Chem ( 1973) 47, 653, conduit au dérivé hydroxylamino correspondant de formule T, dans laquelle X= -NHOH ou -CH 2-NHOH. L'action de l'anhydride sulfureux SO 2 sur les dérivés hydroxylamino précédentsfournit les acides sulfamiques correspondants par adaptation de la tech- nique de Ryer et al, J Amer Chem Soc ( 1951) 5675. SO HONH (CH 2)m CH A B CH COOR' 2 (JH 2) n-R 1 R 2 HO 3 SNH (CH 2) CH A B CH COOR' 3 2 3 (H 2) n-R 1 2 avec m = 0,1. Les sulfonates correspondant à la formule I dans laquelle X = -SO 3 H ou CH 2 SO 3 H sont obtenus selon deux voies: 1 Addition directe du bisulfite sur l'éthy- lénique selon la méthode de Schenck et al, J Org Chem. ( 1951) 16, 1686 1 Na HSO 3 CH = C A B CH COOR' 2 3 - {(CH 2) 2 02,H Br 1 N 2 i 8088 21. HO 3 S CH 2 CH A B CH COOR' (CH 2) 2 R 1 2 Oxydation par l'oxygène, H 202 ou le DMSO (Lowe, J Org Chem ( 1976) 41, 2061) des thiols corres- pondants dans lesquels X = -SH ou -CH 25 H. Les composés de formule I dans lesquels X = -NH 2 ou -NHR' sont obtenus par addition directe des amines appropriées en suivant la technique de Zilkha, J. Amer Chem Soc ( 1968) 23, 94. Les composés de formule I dans lesquels X = OR" O -N C -R"' sont obtenus en deux étapes, par action de la O benzylhydroxylamine sur l'acide bromopropionique, suivie d'une condensation du dérivé obtenu avec un ester ou un amide de la glycine, ou directement par action de la O benzylhydroxylamine sur le dérivé de formule Br CH A B CH C R I I (CH 2)n R 2 R 1 Les techniques utilisées sont décrites dans les références: K Kaminski and T Sokolowska, Rocz Chem. 47, ( 1973), 653-656 T Kolasa and A Chimiak, Tetrahedron, , ( 1974), 3591-95. Dans une deuxième étape, le dérivé obtenu de formule suivante 2 Y 51 eoee 22. H O I N C CH 2 HA B CH C R 3 (CH 2)n R 2 R 1 est acylé sur le groupe NH par un reste R"'CO approprié selon: - L'élimination éventuelle des restes -CH et/ou R 3 s'effectue par hydrogénation et/ou traitement par Na OH ou TFA (lorsque R 3 = Otbu). Les composés de formule I dans lesquels X = OR" O CH 2 C-R'" sont obtenus par addition de la O. benzylhydroxylamine sur un acide de type CH 2 = CH COOH (H 2) N R 1 ou par substitution par le même réactif de l'acide bromo-3-benzyl-2 propionique, suivie de la condensa- tion du dérivé de formule suivante CH 2 O NH CH 2 CH -COOH (CH 2) -R 1 obtenu dans les deux cas,sur un ester ou un amide de glycine approprié. On peut également obtenir ces dérivés par action directe de la O benzylhydroxylamine sur un dipeptide de type CH 2 = CH CONH CH COR 3 (CH 2) N R 1 R 2 obtenu comme décrit plus haut. Le dérivé obtenu de formule CH 2 O NH CH 2 CH -CONH -CH COR 3 (H 2) n-R 1 R 2 peut être acylé par les méthodes décrites plus haut 23. et; les divers groupemerto lmn prs le techniques classiques. Les composés de formule I dans lesquels X OR" -C-N-R' sont obtenus pa cndensa-t Jon de la Obrenzyl- hydroxylmaine sur tr malenicîue approprié suivie d'une saponification. Le composé obtrenu-, de formule -CI-2 ONIH CH Co FI > CH yi-R est condensé selon 2 e X qe de la synt Ihèse pep- tidique sur un amino es Ker ou un amincn amiide approprié pour conduire au derive. p-CH 2 ONH -C -M H CONH -CE CR Ce co Mposeé peur t, r lol u le gr O Ips HN- benzyloxy selon les technriques cl assiques. Les composés de formiile I dans lesquels X O OR", -CH sont pbfiu ar eyemrple par actîonsur 1 ' a-benzyl monc succinaîec d 3thy Ile de f-:rmuile Et OOC-H 2 C-CH-CO 2 H, d'un erin-o ester ou d'un aminci CH 2 amide approprié. Le composé obtenu de formule Eto 2 C -CH 2, C CON -3 H C (C 2 -R 1 R est saponifié pour éliminer le reste éthyle cas o R est un ester, le groupe R correspond à O tbu). 24. L'acide obtenu est condensé selon les techniques de la synthèse peptidique avec la O benzylhydroxylamine. On obtient un dérivé de formule: CH 2 O NH CO CH 2 -CH CONH CH COR 3 (CH 2)n-R 1 2 qui peut être acylé ou alcoylé sur le reste -O-NH par les techniques classiques. Les composés dans lesquels la liaison A-B de la formule générale (I) est constituée des groupes A=NH, B=CO sont obtenus par inversion de Curtius à partir de l'acide approprié selon les différentes tech- niques décrites par M Goodman et M Chorey dans Pers- pectives In Peptide Chemistry, Eds A Eberlé Karger, Basel ( 1981) pp 283294 Parmi celles-ci on utilise de préférence la technique au DPPA, selon le schéma type: 0 OCH 2 4, OCH 2 D DPPA Il 1 il H-C-N-CH -CH-COOH -_ H-C-N-CH -H-Nil C-R 2 ROH (R=tbu ou C 6 HBCH 2) O OCH -2 H 2 Pd/C Il 2 DCC ) H-C-N-CH -CH-NH + HOOC-CH-COR 3 - ou H Br/Ac OH 2 2 HOBT CH 2 PR 2 4, O OCH 2-4 Il 1 > H-C-N-CH 2-CH-NHCO-CH-COR 3 CL 2 R CH 2 Les exemples ci-après sont donnés à titre d'illustration de la préparation des composés selon la présente invention. EXEMPLE 1 Ester méthylique de la N-(dibenzylphosphoryl) L- phénylalanine-glycine 2 g de chlorhydrate de l'ester méthylique de la L-phénylalanine-glycine ( 7,4 mmoles)sont mis en suspen- sion dans 20 ml de chloroforme anhydre On ajoute 1,50 g de triéthylamine ( 15 mmoles) Le solide passe en solution On refroidit à O C et ajoute 2, 17 g ( 7,4 mmles) de chlorure de dibenzyl phosphoryle fraîche- ment préparé à partir de phosphite de dibenzyle et de chlorure de sulfuryle, sous agitation en 30 minutes. On laisse 20 heures à température ordinaire Le pré- cipité formé est filtré et le filtrat est lavé succes- sivement par 30 ml de HC 1 1 N, 20 ml d'eau, 20 ml de bicarbonate à 10 %, puis deux fois 30 ml d'eau La solution organique est séchée sur Na 2 SO 4 anhydre et évaporée sous vide On obtient un solide jaune pale qui est recristallisé dans l'acétate d'éthyle. P = 1,8 g; F = 106 C Structure confirmée par RMN. Analyse CHN correcte. EXEMPLE 2 Ester méthylique de la N-phosphoryl L-phénylalanine- glycine 26. 1,5 g du composé précédent est dissous dans ml de méthanol anhydre, puis hydrogéné pression ordinaire après addition de 0,08 g d'oxyde de palladium. Apres 2 heures d'agitation, la quantité théorique d'hy- drogène a été absorbée On filtre, évapore à sec sous vide Le résidu pâteux obtenu est recristallisé dans un mélange éther-hexane, 50/50. P = 0,62 g; F = 138-145 C. EXEMPLE 3 N-(dibenzylphophoryl) N'-(méthoxycarbonyl-2 acétyl) diamino-1,1 phényl-2 éthane 1 g de chlorhydrate de N-(méthoxycarbonyl-2 acétyl) diamino-1,1 phényl)2 éthane, obtenu comme décrit dans la description du brevet FR 8 008 601 est traité comme dans l'exemple 1 Après lavagesde la solution chloroformique, on obtient par évaporation sous vide un solide blanc qui est cristallisé dans l'éther. F = 98-102 C; P = 0,7 g. EXEMPLE 4 N-phosphoryl, N'-(méthoxycarbonyl-2 acétyl) diamino- 1,1 phényl-2 éthane 0,5 g du composé précédent en solution dans ml de méthanol, est hydrogéné comme dans l'exemple 2 On obtient après cristallisation dans l'éther un solide gris. F = 168-172 C; P = 0,21 g. EXEMPLE 5 N-hydroxy L-phénylalanine-glycine 4 g de N-(R, bromo-2 phényl-3 propanoyl)-gly- cine ( 14 mmoles) prépares comme décrit dans le brevet FR 8 008 601 sont dissous dans 100 ml d'éthanol anhydre On ajoute une solution d'hydroxylamine, 0,5 g ( 15 mmoles) anhydre préparée selon La Noce et al ( 1968) 2 o 1008 a 27. Ann Chim Rome, 58, 393, dans 50 ml d'éthanol anhydre. Le mélange est laissé 48 heures à température ambiante, puis évaporé à sec sou-s vi'de Le résidu huileux est dissous dans 20 ml decu et Acidifài à p H I par H Cl concentré La solution acide est 1-3 vée par deux fois ml de CHC 13, puis amenée à p H 4 par NH 4 OH concentré et à nouveau extraite avec 30 m I de CHC 13 Les phases organiques sont rdunies, séchées puis évaporées à sec. On obtient un solide vitreux sui est purifié par cris- tallisation dans un mdlarnge H:O/Et OH, 50/50. P = 2,8 g; Rf 0,32 dansr B A/- Z_ 20, 4,/11 (solvan'_ A) EXEMPLE 6 N-(sulfoamino 2 ényl 3 pr anovl qiln;e 1 g du composé obtenu à l'exemple 5 est dissous dans un mélange de 30 i de C'fi C e-t 20 iml de dlioaneo On fait barboter durant minti S a O C un r' ', ; d'anhydride sulfureux, 02 à i'abri de lhumiliié On arrête le courant gazeux et on laisse à te 're > 'ature ordinaire durant 30 miirutes % 1 ze forme un précip'te gélatineux qui est f nré On ceorista J lise dans l'acé- tate d'éthyle. P = 0,168 g; F = 273 (. EXEMPLE 7 N (phos n-2 phono-2 nyl-3 potnovl lycine 2 g de N-(R, bromo-2 phényl-3 propancyl)-glycine sont mélangés avec un large excs, 'Il g ( 5 équivalents) de tris-triméthyl silyl phosphiate, préparé selon Orlov et al ( 1970) Chem Abstr 72, 21738 Y, et chauffésà C durant 20 heures sous atmosphère d'azote Le ré- sidu huileux obtenu est épuisé à l'acétonitrile pour éliminer l'excès de réactif Il reste une cire marron claire qui est agitée durant 12 heures à température ordinaire avec un mélange de tétrahydrofuranne (THF) et d'eau, 50/50 Le précipité formé est recueilli, dissous 28. dans le méthanol puis purifié par passage sur colonne de DEAE cellulose (LH 20) On obtient 0,186 g d'un composé jaune. F > 250 C. EXEMPLE 8 Ester benzylique de la N-(phosphono-2 phényl-3 propa- noyl)-glycine. La réaction précédente conduite avec 5 g de l'ester benzylique de la N-(R, bromo-2 phényl-3 propa- noyl)-glycine dans les mêmes conditions ( 8 équivalents de réactif) conduit à un meilleur rendement en ester benzylique de la N-(phosphono-2 phényl-3 propanoyl)- glycine. P = 2,10 g; F = 208-228 C. Ce dernier produit peut être transformé quanti- *tativement lytique en en produit précédent par hydrogénation cata- présence de Pd/C, dans le méthanol. EXEMPLE 9 N-(sulfo-2 phényl-3 propanoyl)-glycine 3 g ( 12 imoles) de N 1-(S, mercapto-2 phényl-3 propanoyl)-glycine préparé comme décrit dans le brevet FR 8 008 601 sont dissous dans 30 ml de diméthylsulfo- xyde pur On ajoute 0,43 mi d'eau ( 24 mmoles) et 0,3 ml d'une solution d'H Br à 48 % Le mélange placé dans un ballon tricol équipé d'une tête de distillation est lentement porté à la température de 100-110 C Le di- méthylsulfide formé lors de la réaction distille à 40- C Lorsque la distillation s'arrête (environ 3 h), le résidu liquide du ballon tricol est additionné de Na OH 2 N jusqu'à p H 9 L'addition de 100 ml d'acétate d'éthyle provoque la précipitation de 1,4 g de sel de sodium Celui-ci est recristallisé dans un mélange méthanol/H 20, 50/50. P = 0,9 g; F > 300 C. 29. Ce composé peut également être obtenu avec un rendement inférieur par oxydation de la N-(S, mercapto- 2 phényl-3 propanoyl)-glycine selon la méthode de Vasi- levskii et al, Z Org Khimii, ( 1970), 244. EXEMPLE 10 Ester benzylique de la N-(sulfo-2, phényl-3 propanoyl)- glycine 2 g de l'ester benzyliquede la N-(S,mercapto-2 phényl-3 propanoyl) -glycine obtenu comme décrit dans le brevet FR 8 008 601, sont traités dans les mêmes conditions que précédemment Toutefois, à la fin de la réaction, le résidu du ballon tricol est dilué dans ml d'eau et séparé du DMSO résiduel par chromatogra- phie sur résine Dowex 50-X 8 sous forme acide Le frac- tionnement est suivi par chromatographie en couche mince (CCM) sur plaque de gel de silice Eluant Bu OH/Ac OH/ H 20, 4/1/1, révélateur iode. Les fractions de Rf = 0,61 sont réunies, évapo- rées sous pression réduite Le miel obtenu est cristal- lisé dans l'acétate d'éthyle bouillant. P = 0,42 g; F = 260-280 C. EXEMPLE 1 l Ester benzylique de la N-(benzyl-2 propènoyl)-glycine 2,42 g ( 15 mmoles) d'acide benzyl-2 acrylique sont dissous dans 30 ml de THF et 10 ml de CHC 13 On ajoute une solution dans 50 ml de THF de 1,87 g de chlorhydrate de l'ester benzylique de la glycine, 2,2 g de triéthylamine, puis 2,20 g de HOBT et 3,4 g de DCC. On agite 20 heures à température ambiante On recueille le précipité de DCU formé On évapore à sec, reprend par l'acétate d'éthyle et lave successivement la phase organique par deux fois 20 ml d'acide citrique, puis trois fois 20 ml de Na HCO 3 On concentre sous vide, essore le reste de DCU formé On obtient une huile jaune qui cristallise lentement. 30. P = 2,3 g; F = 60 C. EXEMPLE 12 N-(benzyl-2 propènoyl)-glycine 2,10 g ( 6,8 mmoles) de l'ester benzylique de la N-(benzyl-2 propènoyl)-glycine, F = 60 C, sont agités à 10 C durant 2 heures avec un mélange de 30 ml de méthanol et 0,27 g de Na OH ( 6,8 mmoles), dissous dans ml d'eau On amène le p H à 1 par addition d'H Cl 2 N et extrait à l'acétate d'éthyle Le solvant est lavé par deux fois 20 ml d'eau, séché et évaporé sous vide. On obtient 1,36 g de cristaux. F = 82 C Rf = 0,78 dans CH C 13/Me OH, 9/1. Ce composé peut être obtenu par condensation de l'acide benzyl-2 acrylique avec l'ester méthylique de la glycine, suivie de saponification selon la tech- nique suivante. 4,86 g ( 30 mmoles) d'acide benzyl-2 acrylique sont dissous dans 50 ml de THF sec On ajoute succes- sivement une solution de 3,76 g de chlorhydrate de l'ester méthylique de la glycine ( 1 équivalent) et 4,2 ml de triéthylamine ( 1 équivalent), puis une solution de 4,59 g de HOBT et 6,8 g de DCC dans 40 ml de THF. On agite 18 heures à 25 C On filtre le DCU formé, évapore à sec et reprend par acétate d'éthyle On lave par deux fois 20 ml d'acide citrique, puis trois fois ml de Na HCO 3 et deux fois 20 ml d'eau On sèche sur Na 2 SO 4, concentre sous vide On essore le DCU restant. On obtient une huile jaune pâle. P = 6,67 g Rf = 0,43 dans CH C 13/Me OH, 9/1. 6,57 g de l'ester méthylique de la N-(benzyl-2 propènoyl)-glycine obtenu sont agités deux heures à température ambiante dans une solution de 25 ml de Na OH et 28,2 ml de Na OH 1 N. On évapore le méthanol, ajoute 5 ml d'eau, acidif ie par HC 1 2 N jusi:R 1, mtraït à l 'acétate d'éthyle Après évaporat-;û-r, f s btiecnt 6, 7 g de l'acide 12. F = 820 C. EXEMPLE 13 Ester trifluoro-2 t 7 qr de 1 a l- glycine Obtenu comme dans _ 1 exfanple il en remplaçant ester benzylique de 'la g iyc re par -J'ster tr-iflioro- éthylique obtenu par a SO 2 Ci sur une solution de glycine dansac 1 f orthiue Huile jaune pâle Reî = O K; 2 dans CHC 1,/Meo H',I EXEMPLE 14 Ester pfurbnlied N (I Le1 2 p Dropènl-) - glie Obtenu comme dans Y eremre Ien conelo enant l'acide benzyi'-2 criqeavsec l'ester foreny lique. Huile jaune 0,72. EXEMPLE 15 Ester ber Lzyliquc, de, la rmiaz 12 pool 3 g de i edrbny u e la =bez 12 propènoyl) -glycine (exem-ple cont dissous dans 20 -MI de CHC 13 secOn aJoutcà i; huid et à00 C 240 ml d'une solution de H Br '3 iaetj obtenue par dissolution d'HIBP gazeu X Le mêlange est agité I heure à Q O C puis 10 heures à température ambiante On concentre à 10 ml sous vide, ajoute 20 ml d'eau et on extrait par deux fois 30 ml de CHCI 13 La phase orga- nique est lavée par 20 ml de solvant saturé de Na HCO 3 puis par deux fois 20 ml d'eau on sèche sur Na 25 O 4 évapore à sec Le solide blanc obtenu est cristallisé dans l'éther. P = 2,10 g; F = 151 'C. 32. EXEMPLES 16 et 17 La méthode de l'exemple 15 est appliquée aux composés des exemples 13 et 14 permettant d'obtenir les esters trifluoroéthylique, 16, et p fluorobenzy- lique, 17, de la N-(bromo-3 benzyl-2 propanoyl)-glycine. EXEMPLE 18 Ester benzylique de la N-(hydroxyamino-3, benzyl-2 propanoyl)-glycine 1,2 g du composé de l'exemple 15 est traité comme dans l'exemple 5 par l'hydroxylamine anhydre Après heures d'agitation, le mélange est évaporé sous vide. L'extraction comme dans l'exemple 5 fournit 0,45 g d'un composé amorphe. Rf = 0,62 dans Bu OH/Ac OH/H 20, 4/1/1. EXEMPLES 19 et 20 La méthode de l'exemple 18 appliquée aux compo- sés des exemples 16 et 17 fournit respectivement l'es- ter trifluoro éthylique de la N-(hydroxyamino-3 benzyl- 2 propanoyl)-glycine, 19, et l'ester p fluorobenzylique de la N(hydroxyamino-3 benzyi-2 propanoyl)-glycine, 20. EXEMPLE 21 Ester p fluorobenzylieue de la N-(sulfoamino-3, benzl- 2 propanoyl)-glycine 0,25 g du composé 20 traité par l'aanhydridesulfu- reux, SO 2, selon la méthode décrite dans l'exemple 6, conduit au dérivé de l'acide sulfamique suivant: ester p.fluorobenzylique de la N-(sulfoamino-3 benzyl-2 pro- panoyl)-glycine. P = 0,160 g; F > 260 C. EXEMPLE 22 Ester benzylique de la N-(phosphono-3 benzyl-2 propa- noyl)-glycine 33. 0,7 g de l'ester p fluorobenzylique de la N- bromo-3, benzyl-2 propanoyl)-glycine (exemple 17) sont traités comme dans l'exemple 7. On obtient 0,18 g de l'ester benzylique de la N-(phosphono-3 benzyl-2 propanoyl)-glycine. Produit jaune F > 250 C; Rf = 0,32 dans Bu OH/Ac OH/H 20, 4/1/1. EXEMPLE 23 Ester benzylique de la N-(sulfo-3 benzyl-2 propanoyl)- glycine 4 g ( 13 mmoles) de l'ester benzylique de la N- (benzyl-2 propnoyl)-glycine 11 sont dissous dans un mélange de 10 ml de CH 3 OH et 50 ml d'eau contenant 0,37 g de Na 2 SO 4 ( 3 mmoles) et 1,04 ( 10 mmoles) de Na HSO 3 Le ballon est alors raccordé à un appareil à hydrogénation à pression ordinaire, rempli d'oxygène. Après purge du ballon par l'oxygène, la réaction est agitée magnétiquement Après 20 heures d'agitation, ,5 ml d'oxygène ont été absorbés La solution est évaporée sous vide jusqu'à un volume de 10 ml puis extraite par deux fois 20 ml d'acétate d'éthyle Le solvant, séché est évaporé à sec sous vide On obtient un solide amorphe qu'on recristallise dans le méthanol. On obtient ainsi 1,7 g du sel de sodium de l'exemple 23. F > 260 C. Ce composé peut également être obtenu par oxy- dation au DMSO selon la méthode décrite pour le composé , en partant de l'ester benzylique de la N-(mercapto- 3 benzyl-2 prorènoyl)-glycine. EXEMPLE 24 Ester benzylique de l'éthylamino-3 benzyl-2 propanoyl glycine 4 g ( 13 mmoles) de l'ester p fluorobenzylique de la N-(benzyl-2 propènoyl)glycine, 14, sont dissous 2518088 - 34. dans 15 ml de pyridine On ajoute 1,02 g ( 13 mmoles) d'éthylamine en solution dans la pyridine La solution est chauffée à 120 C pendant 2 heures A la fin de la réaction, on concentre jusqu'à 5 ml, ajoute 50 ml d'éther Un produit blanc précipite On le filtre, le lave à l'eau, puis à l'éther On recristallise dans un mélange CH 3 OH/H 20, 50/50 On obtient des cristaux blancs. P = 1,8 g; Rf = 0,81 dans Bu OH/Ac OH/H 2 O 4/1/1. EXEMPLE 25 N-hydroxy L-alanine-glycine 3 g de N-(R, bromo-2 propanoyl)-glycine obtenu par condensation de l'acide bromo-2 propionique (préparé selon E Fischer et al,Annalen, 357, 1 ( 1907)) avec la glycine sont dissous dans 100 ml d'éthanol anhydre et agité durant 48 heures avec l'hydroxylam Lne anhydre selon l'exemple 5. On obtient, après cristallisation dans l'éthanol bouillant, 0,7 g d'un solide blanc. F = 260-270 C. EXEMPLE 26 - N-(sulfoamino-2 propanoyl)-glycine On fait barboter un courant de SO 2 dans 0,5 g du composé précédent dissous dans un mélange de 10 ml de CHC 13 et 10 ml de dioxanne Apres traitement comme dans l'exemple 6, on obtient 0,130 g d'un solide. F = 210-230 C. EXEMPLE 27 Ester trifluoro-2 éthylique de la N-(dibenzylphosphonyl) L-alanine-Lthioproline 4 g de carboxy-4 thiazolidine sont dissous dans ml de trifluoroéthanol On ajoute 2 ml de SO C 12 et on porte au reflux 15 mn Après repos, 20 heures à 25 C on essore 3,2 g de chlorhydrate de l'ester trifluoro- Z.MWO 808 35. éthylique de la catx -4 hiazolidine. Le couplage ert i, lat o -ane et l'ester précédent est effect-né au rc,ven du mélange DCC + 11 OBT selon les techniques llsius 1 e comzposé ob'tetl L e Fs( déprotégé par le TFA et fournit après évaporation et lavage à l'éther 3,7 a -', l'ester tri 4 fluoroéthylique die la L Aa Ltipoie 2 g du tr Jiflucroacéta e de l'ester trifluoro- éthylique de la a-tiori e 5 inoes sont rais en suspension das Ciild CCI sec or ajoute à O 00 C un miélange de 1, q U ( 51 mrn Lo Ies de chlorure de dibenzylphosphoryle franchement prépe-aré, puis 1,02 g de triéthylamine dans 2 ml Ce CHC 1 I sec On agite 20 heures à température ambiantes Le précipié Zcrmé 6 est filtré La phaseo 9 iqe traitée co-mr Lie dansl'xpe 1 fournit un soliee blanc. P= 2,20 g;F 3 i EXEMPLE 218 Ester tiloot 12 Äela Npohr, L-anns thioproline i,8 du op: prï-àécédent sont dissous daiis nil de imétha nol,l sec et à 1 ojn pression ordinaire en présence de i quarÀzité theraqe 2 rf ve 1 l,n t S)J ' a N été al:-sorbce. on friltre, éva Pore ';ds reprend par le mét 21 hanol et chxonatogra Iphie orur 2 'n Cr ';âu- O Cr H 3 oe On obt>îient 1,1 g d'un solide blanc, vitze;-u Y, sol-uble dans l'eau, F > 2500 C; Rf L 0,82 dans Bu OH'/'Ac OH/Ii O, 4/i/i. EXEMPLE 29 Isoamylar aide de la bromo-2-phènvl-3-rropanovl glycine on place dans un ballon d'un litre 11,56 g d'acide bromo-2 phényl-3 propanoique dans 50 mil de THF sec On ajoute Successivement a 5 'C, 6,34 g de chic- rhydrate de l'ester méthylique de la glycine et 5,1 de triéthylamine, puis '7,73 g d'HOBT dans 50 ml de 36. THF, enfin 10,42 g de DCC dans 50 ml de CHC 13 On agite 72 heures à 25 C On filtre le DCU formé, concentre sous vide Le résidu solide est repris par 100 mil d'acé- tate d'éthyle La solution est lavée successivement par 50 ml d'H 20, puis par 2 x 20 ml d'acide citrique à 10 %, et enfin par 2 x 20 ml de Na HCO 3 à 10 % La solution organique est séchée sur Na 2 SO sec, puis évaporée sous vide Le précipité cristallin est recristallis 6 Ac O Et. P = 11,2 g; F = 116 C; Rdt: 74 % Analyse C,H,N RMN conforme Rf = 0,53 dans CHC 13/CH 3 OH, 9/1. 2 g de l'ester méthylique prézeedent sont placés dans 20 ml de THF On ajoute successivement à O C, 0,61 g d'isoamylamine dans 10 ml de CHC 13, puis 1,87 gd'HOBT, H^O, et 1,44 ade DCC dans 10 ml de CHC 13 Le mélange est agité 12 heures à température ambiante Le préci Dité de DCU est essoré Ie so Ivant évaporé à sec sous aide donne un résidu sirureux qui est repris par Ac O Et { 50 mi). La solution or 9 anique est lavée comnne précédemment par l'acide citrique, le bicarbonate et l'eau Après évapo- ration à sec et cristallisation dans Ac O Et, on obtient 2,34 g d'un solide blanc. F = 110 C; Rdt = 94 %,i MN correct CHN EXEMPLE 30 Isoamylamide de la N-{benzyio'vamiro-22 hénvl-3 ropa- noyl)-lycire 1,78 g de l'amide précédent sont dissous dans mlde Me CH On ajoute alors 1,60 g de chlorhydrate de O benzylhydroxylamine et 2,59 g de diisopropyléthyl amine On chauffe au reflux pendant 8 jours On con- centre à sec sous vide, reprend par Ac O Et ( 30 ml), filtre le précipité de sels de diisopropyl éthylamine. Le solvant est évaporé sous vide et conduit à une huile ( 2,61 g) qui est purifiée sur colonne de silice avec le 37. mélange C It C 13/CH 3 OH, 98/2 comme éluant. On obtient 1,04 g de produit huileux. R 4 N correct C,H,N EXEMPLE 31 Isoamylamide de la N ( 1-benzyloxy formamido-2 phényl-3 propanoyl)glycine 0,42 g du compose précédent sont ajoutés à 5,2 ml d'acide formique (d = 1,23) On refroidit à O C, ajoute 0,52 ml d'anhydride acétique, agite à température ordinaire pendant 2 heures, concentre à sec sous vide. L'huile est purifiée par passage sur colonne de gel de silice avec le Me OH comme éluant Les fractions de Rf = 0,32 dans CH C 13/CH 30 H, 95/5 sont réunies et évaporées à sec On obtient 0,22 g d'huile jaune pâle. RMN correct C,H,N EXEMPLE 32 Isoamylamide de la N-(N-hydroxy formamido-2 phényl-3 propanoyl)-glycine 127 mg du composé de l'exemple 31 sont dissous dans 3 ml de mélange CH 3 OH/Ac OH/H 20, 4/5/1 et hydrogénés à pression ordinaire en présence de 30 mg de Pd/C ( 10 %). Après 1 heure, le volume théorique est absorbé ou filtré, concentré à sec solide blanc 88 mg. Rdt = 88 %; Rf = 0,85; Bu OH/Ac OH/H 20, 4/1/1/. EXEMPLE 33 a) Acide N-benzyloxy formamido-2 phényl-3 propanoique 0,5 g de Nbenzyloxy phénylalanine (obtenu par action de la O benzylhydroxylamine sur l'acide bromo-2 phényl-3 propanoique,selon La Noce et al, Ann Chim. Rome, 1968, 58, 393, sont ajoutés ' 9,2 ml de HCO 2 H On verse sur le mélange 0,5 ml d'anhydride acétique et on agite 3 heures à O C On concentre à sec sous vide Le solide résineux est cristallisé dans Et OH. 2518088- 38. P = 500 mg; Rdt: 90 %; F = 186 C; Rf = 0,55 dans CH C 13/CH 3 OH, 5/1 RMN correct C,H,N. b) Ester benzylique de la N-{N-benylxry formamido-2 phényl-3 propanoyl) glycine 0,49 g du composé précédent sont ajoutés à 0,552 g de tosylate de l'ester benzylique de la glycine en présence de 0,165 g de triéthylamine On ajoute alors 0,25 g de HOBT, H 20 dans 10 ml de THF, puis 0,69 g de tosylate de N-cyclohexyl-N'-/2-( 4-morpholinoéthylv car- bodiimide On agite une nuit à température ordinaire, filtre le DCU formé et concentre la solution à sec On reprend par Ac O Et, filtre le DCU restant, et traite comme dans l'exemple 29 On obtient 0,50 g d'une huile épaisse. Rdt: 68 %; Rf = 0,74 dans CHC 13/Ac OH, 9/1/0,5 RMN correct Produit utilisé brut. EXEMPLE 34 N-(N-hydroxy formamido-2 phényl-3 propanoyl) glycine 477 mg du composé précédent sont hydrogénés dans les conditions de l'exemple 32 On obtient 263 mg. Rdt: 92 % d'un solide; F = 203 C; RMN correct; C,H,N,O EXEMPLE 35 a) Acide (N-benzyloxycarbamoyl-2 phényl-3 propanoique 1,5 g de monoester éthylique du benzylmalonate d'éthyle sont couplés avec 1,08 g de 0-benzylhydroxyl- amine, H Cl dans les conditions de la synthèse pepti- dique (exemple 29) Après traitement comme pour le composé 29, on obtient 2,17 g (Rdt: 98 %) d'une huile jaune pâle qui est saponifiée sans purification par 20 ml de Na OH 1 N dans 15 ml d'Et OH durant 8 h à 5 "C. On filtre d'un léger insoluble, évapore Et OH, extrait la phase aqueuse par H Cl 1 N jusqu'à p H 2-3 Le produit cristallise en paillettes blanches. F = 180 C; P = 1,25 g; Rdt = 64 % RMN correct;C,H,N. b) Ester benzylique 3 e Ira 1,1 'l (-ii:"-bei 2 z,,le),-,y carbanoL 1) -2 yj-3 prop qy _L -u L 0,5 g du cor -ipcsé obtenu en (a) sont couplés a,ec 0,56 g de l'estt-r beîzv-'J-que la glycine salon les conditions 3 b i, r,7 zès -traitement, oïl obtient 0,56 c. Rdt = 75 % d'un sol ide lilan G amornhe F 7 PMN N EXEMPLE 36 1 O N/ -2 0,5 g -du sjnt hydroge-ntès dans les conditions de 32, 274 rig. F 0-,47 dons A. EXEMPLE -37 -1 5 z 2 ny 13 o ine 0 du. C, 5 -h 'l 1 loi. drate de v-c Lfie-,z; 0 èI -1naît F 1 O 7 E t 4 G 7 di a N S Cli OH 'Ac Ci 11, C EXEMPLE 38 I î I Ester Z-à, la 1-3 lm.,Y 0,4 Q du composé 37 Front hydrogénés à pres,ion ordinaire dans les conditicno de Ilememple 32 On c-à- tient 242 mg d'un solide blanc. F = 1740 C Rdt = 80 % 121 f = 0,44 dans (B) CF-Cl 3 CH 3 OH/Ac OH 9/l/0,5 EXEMPLE 39 Benzylamide de la N/ N-benz loxy carbamoyl)-2 phényl-3 propanoyl/ glycine 40. 0,368 g du composé 35 a sont couplés avec 0,32 g de trifluoroacétate de glycine benzylamide dans les condi- tions de l'exemple 33 b On obtient 0,47 g d'un soli de blanc. F = 140 C; Rdt = 88 %; Rf = 0,63 dans B; RMN correct; C,H,N EXEMPLE 40 Benzylamide de la N/ N-hydroxy carbamoyl)-2 phényl-3 propanoyl) glycine 0, 25 g du composé precédent sont hydrogénés dans les conditions de l'exemple 32 On obtient 0,20 g d'un solide blanc. F = 166 C; Rdt = 87 %; Rf = 0,84 dans (A) RMN correct; C,H,N EXEMPLE 41 Isoamylamide de la NAN-benzyloxy carbamoyl)-2 phényl-3 propanoyl -_glcine 0,7 g du composé 35 a sont couplés avec 0,65 g de trifluoroacétate de glycine isoamylamide dans les condi- tions de l'exemple 34 On obtient 0,94 g de cristaux blancs. F = 143 C; Rdt = 88 %; Rf = 0,95 dans (A) RMN correct; C,H,N EXEMPLE 42 Isoamylamide de la N/(N-hvdroxy carbamoyl)-2 phényl-3 propanoyî 7 glycine 0,4 g du composé précédent sont hydrogénés dans les conditions de l'exemple 32 On obtient 0,30 g de cristaux blancs. F = 1860 C; Rdt = 90 %; pf = 0,84 dans (B) EXEMPLE 43 a) Acide benzyloxyamino-3 benzyl-2 propanoique On ajoute à O C sous agitation 5,07 g de 41. triéthylamine à une solution de 7,87 g de chlorhydrate de O benzylhydroxylamine dans un mélange de 50 ml d'eau et 50 ml de CH Cl 3 On sépare la phase organique, lave avec 3 x 50 ml d'eau, sèche et évapore sous vide On obtient 6 g de O benzylhydroxylamine base Celle-ci est ajoutée à l'abri de l'air en solution dans 20 ml * de Me OH à une solution de 2 g d'acide benzyl-2 acry- lique dans 10 ml de Me OH On chauffe à reflux durant 7 jours On concentre sous vide L'huile obtenue est mise en solution dans 100 ml d'Ac O Et et on ajoute Na OH N jusqu'à p H 10 On décante la phase aqueuse et acidifie par H Cl N jusqu'à p H 1-2 On extrait la phase acide par Ac O Et ( 2 x 50 ml, sèche et évapore sous vide L'huile obtenue cristallise lentement. F = 40 C; P = 1,6 g; Rdt = 46 %; Rf = 0,47 dans CHC 13/Me OH,9/1 RMN correct; C,H,N b) Acide (N-benzyloxy formamido)-3 benzyl-2 propanoique 1, 08 g du composé précédent sont ajoutés à 19 ml de HCO 2 H (d = 1,23) On verse à O C sous agita- tion 1,9 ml d'anhydride acétique, agite 5 heures à 0 C, concentre à sec sous vide L'huile épaisse est triturée dans le n-hexane On obtient un solide. F Le composé est utilisé sans purification ulté- rieure pour les couplages. c) Isoamylamide de la N/ N-benzyloxy formamido-3 benzyl-2 propanoyl 7glycine 0,15 g du composé obtenu sous (b) en solution dans 15 ml de THF sec sont ajoutés à 0,12 g de trifluo- roacétate de glycine isoamylamide et 0,048 g de tri- éthylamine dans 20 ml de THF On ajoute au mélange successivement 73 mg d'HOBT dans 5 ml de THF puis 0,2 g de DCC (tosylate) dans 5 ml de THF La solution obtenue 42. est agitée 12 heures à température ordinaire Le mé- lange est traité comme dans l'exemple 29 L'huile obte- nue ( 98 mg) est chromatographiée sur colonne de gel de silice (éluant CH 3 OH/CH Cl 3 2/98) On obtient 64 mg d'huile. Rf = 0,28 dans CH C 13/Me OH, 9/1; Rdt = 30 %; RMN correct EXEMPLE 44 Isoamylamide de la N(N-hydroxy formamido-3 benzyl-2 propanoyl)-glycine 60 mg du composé précédent sont hydrogénés comme dans l'exemple 32 On obtient 33 mg d'un solide blanc. Rdt = 70 %; Rf = 0,52 CH Cl /Me OH, '9/1; MDI correct, C,H,N EXEMPLE 45 - Ester benzylique de la N(N-benzyloxy formamido-3 benzyl- 2 propanoyl)-glycine 0,15 g du dérivé 43 b en solution dans 20 ml de THF sec sont mis en réaction avec 0,16 g de tosylate de l'ester benzylique de la glycine dans aes conditions similaires à l'exemple 45 c On obtient après les la- vages successifs 0,21 g d'huile épaisse. Rdt = 97 %; Rf = 0,7 (B); RMN correct; C,H,N EXEMPLE 46 N(N-hydroxy formamido-3 benzyl-2 propanoyl)-glycine 0,19 g du composé précédent sont hydrogénés à pression ordinaire dans les conditions de l'exemple 32. On obtient 103 mg d'un solide blanc. F = 182 C; Rf = 0,52 dans (A) EXEMPLE 47 Ester méthylique de la N(N-benzyloxy formamido-3 benzyl-2 propanoyl)glycine 0,6 g du composé 43 b sont mis en réaction dans les conditions du couplage peptidique (exemple 29) avec 0,24 g de l'ester méthylique de la glycine (chlorhy- drate) Après les traitements usuels on obtient 0,36 g d'une huile. 4 3. Rdt = 5 O % Rf G,77 dans 5/1 Le composer est utiliser oars -ourification ulté- rieure pour prëparer le 48. EXEMPLE 48 Ester néthvlj-,,Iue de la formar-iiido-3 benz,71-2 0,30 g du dérivé 47 oeii 2 t hvdrogénés à -oression ordinaire comme dans I'exempli L 11 On objzic- n-b 226 mg d'un solide blaiii:l. Rdt 98 % Rf = 0,51 dans CECI CHOH, 5/1 RMN c o r r c c, il, N j EXEMPLE 49 a) Acide (N-ben blenz-1-9 cinoïque 0,4 a -Iu compcs, 4, en solution dans 7 mi de pyridint- A Q'r c-n a 4 oute 0,7 ml d'ar-1 wydride acétique Zprès à t maire, on concentrer à Cil 1 '6ther éthylique, cri ob-tient 0, 41 êçj d'une, ouii-e épaisse. Rf = 0,69 dans 93 WMI 7 Qrrect - , b) Ester de 1-a berizyl-2 pro I), îpuv " 0, 52g cor;-k'Se rilise-ri dans '40 ntl de s,-,-( et Alors les cloîidîtO; 2 S cru couplage pert-idique -1 -osyla-te dre, berizylique de 1-, glycine lep-rès traitemei Yt corume pour l'exemple 29, on cobtient G,-421 g d'une la-que. Pf = ,51 d'ans OP, 57 il; Rdt = 53 MIN correct CHN EXEMPLE 50 N(N-hydroxy acétam-ido 3 propanoyl)-glycine 0,2 g du composu" pré-LA Adent sont hydrogénés à pression ordinaire comme durs l'exemple 32 On obtient 120 mg d'un solide blanc. 2 5 1 8 O 8 8 251808 8 44. Rdt = 100 %; F = 176 C; Rf = 0,5 dans (A) RMN correct; C,H,N EXEMPLE 51 Benzvlamide de la N(N-benzyloxy acétamido-3 benzyl-2 propanoyl)-glycine 0, 4 g du composé 49 a sont couplés dans les conditions de l'exemple 29 à 0, 35 g de trifluoroacétate de glycine benzylamide Apres traitementsusuels on obtient 0,28 g d'un solide. F = 82 C; Rdt = 46 %; Rf = 0,73 dans CHC 13 CH 30 H, 5/1 RMN correct; C, H N EXEMPLE 52 Benzylamide de la N(N-hydroxy acétamido-3 benzyl-2 propanoyl)-glycine 0,2 g du composé précédent sont hydrogénés à pression ordinaire dans les conditions de l'exemple 32. Après traitement on obtient 136 mg de cristaux blancs. F = 147 C; Rdt = 84 %; Rf = 0,58 dans CHC 13/CH 3 OH; RMN correct; CHN EXEMPLE 53 Ester tertiobutylique de la N(éthoxvcarbonyl-3 benzyl- 2 propanoyl -glycine 7 g d'acide éthoxycarbonyl-3 benzyl-2 propa- noique ( 0,03 mole} préparé selon S G COHEN (J A C S, 90, 3495-3502, 1968) sont dissous dans un mélange de ml de THF sec et 10 ml de DMF anhydre On ajoute sous agitation à O C successivement 7,5 g du trifluoro- acétate de l'ester tertiobutylique de la glycine et 3,1 g de triéthylamine dans 10 ml de THF, puis 4,02 g d'HOBT et 5,40 g de DCC dans 20 ml de THF On agite 12 heures à température ordinaire, filtre le DCU formé, concentre à sec sous vide On obtient un résidu sirupeux repris par Ac O Et 100 ml On filtre un nouveau précipité de DCU et lave la solution organique par de l'acide 45. citrique à 10 % ( 3 x 20 ml), Na HCO 3 10 -% ( 3 x 20 ml) puis une fois avec 30 ml d'eau On sèche et évapore sous vide, on obtient une huile jaune pâle. Rf = 0,61 dans (B); P = 8,1 g; Rdt = 82 %; RMN correct C,H,N EXEMPLE 54 Ester tertiobutylique de la N(carboxy-3 benzyl-2 propanoyl)-glycine g du composé précédent sont places en solution dans 10 ml du mélange, 5 ml de CH 30 H, 20 ml d'eau On ajoute 1 ml de Na OH et agite 4 heures à température ordinaire On filtre d'un léger insoluble et extrait une fois par 50 ml d'éther La phase aqueuse alcaline est acidifiée à p H 1-2 par H Cl N et extrait par 3 x 20 ml d'Ac O Et Les phases organiques sont réunies, lavées à l'eau ( 2 x 20 ml) puis séchées et évaporées à sec sous vide On obtient un solide blanc recristallisé dans Me OH/Et OH, 20/80. P = 4,0 g; Rdt = 87 %; F= 92-95 C; Rf = 0,76 (A) RMN correct; C,H,N EXEMPLE 55 Ester tertiobutylique de la N(N-benzyloxy carbamoyl-3 benzyl-2 propanoyl)glycine 2,0 g ( 6,5 mmoles) du dérivé précédent sont placés en solution dans 20 ml de THF et 50 ml de DMF. On ajoute 1,0 g de chlorhydrate de O benzylhydroxyl- amine dans 10 ml de CH C 13, puis successivement 0,65 g de triéthylamine, l g de HOBT, FI 2 O et 1,25 g de DCC en solution dans 10 ml de CH C 13 On agite 12 heures à température ambiante, filtre le DCU, évapore sous vide à sec, reprend par 50 ml d'Ac O Et et effectue les lavages comme dans l'exemple 29 On obtient ainsi 2,1 g d'une huile incolore. Rdt = 80 %; Rf = 0,38 dans (B); 46. L'huile est utilisée sans purification ulté- rieure pour les étapes suivantes. RMN correct. EXEMPLE 56 N(N-benzyloxy carbamoyl-3 benzyl-2 propanoyl)-glycine 0,5 g du composé précédent sont dissous dans 2 ml de TFA en présence de 0,1 ml d'anisole On agite à O C pendant 30 mn, puis 1 heure à température am- biante On évapore à sec sous vide L'huile obtenue est triturée par 3 x 10 ml d'éther sec Un précipité gommeux apparait après lavage par 5 x 10 ml d'éther sec, la poudre obtenue est cristallisée dans Et OH. Cristaux blancs F = 176 C; P = 0,21 g; Rdt = 51 % RMN correct; C,H,N EXEMPLE 57 N-(N-hydroxy carbamoyl-3 benzyl-2 propanoyl)-glycine 0,15 g du composé précédent sont hydrogénés à pression ordinaire dans les conditions de l'exemple 32. On obtient 0,11 g d'un solide blanc cristallisé. F = 252 C; Rdt = 100 %; Rf = 0,61 dans (A) RMN correct; C,H,N EXEMPLE 58 Benzylamide de la N(N-benzyloxy carbamoyl-3 benzyl-2 propanoyl)-glycine 1 g d'acide éthoxycarbonyl-3 benzyl-2 propa- nolque sont dissous dans un mélange de 30 ml de THF sec et 10 ml de DMF anhydre On ajoute sans agitation 1,2 g de trifluoroacétate de glycine benzylamide On effectue le couplage dans les conditions de l'exemple 29 Après les lavages usuels, on obtient 1,5 g d'une huile qui cristallise lentement. F = 62 C; P = 0,92 g; Rdt = 76 %; Rf = 0,52 dans (B) k MN correct; C,H,N 47. EXEMPLE 59 Benzylamide de la N Nhy 3:xjcarbamoyl-3 benzyl-2 propanoyl) -gyie 0,3 g de l'exemple précédent sont 'Hydroegenés à pression ordînal I e dans les conditions de l'xemple 32 On obtient 0,121 g d'lin solide blanc. F= 207 'C; P 0,12-; Rât = 50 %; MN correct; C,H,N EXEMPLE 60 1 O a) Acide__(N bpr-loxv z L 1 arboxmid _ hérvi-3 trop anolique 2 l g de N-tenzyloxy phénylalanine (KOLASA, tétrahlàdron, 30, 3591-3595, 1974) sont placés dans un mé 1 ance de 10 mil d 'eau, et 110 ml de Me OH On ajoute à 00 C '1,00 g de cir: de b-he'ylacé-tyle on extrait une fois avec 20 ml d'ét A-er, puiis la phase aquel se est acidifiée rà -11 2 M-C-I l On -extrait par 3 x 10 ml 't 2,se-e Scus 7 Ie ir) On' 1,7 g de cri-staux. O P 12 "C d Bi 72 I% -j,42 (B'; N correct,- C -H,N o E-trben li(ie ' j n; 1 aso xamido) -2 1 g du es'p'Jtt dissous dans- 20 mi de THE' sec t Or -io cdans O ml de THF, et 10 ml de 01 k H du 7 g de tcylate de l'aceter benzylique de la g' yo nioe t 0, g qk d-rié- thyiamine. Après agitation 3 mni O"'C nn -2 joute successivement à OOC, 1 ml de HOBT, H 20 et 1 ml de DCC dans les condi-tions du coupia 3 e pept-, dique (exeinple 29) Après 12 heures en effectue le traitement habituael On obtient 1,3 g d'une huile i 1 ncolorce putrifiée par chroma- tographie sur colonne de silic* (CHC 13/CH 3 OR, 80/20) Rdt 91 %; Rf = 0 é,65 dans le même solvant. RMN correct; C,l HIN 46. EXEMPLE 61 NI (N-hydroxy benzylcarboxamido)-2 phényl-3 proparnoyl/- glycine 1 g du composé précédent est hydrogéné à pres- sion ordinaire comme dans l'exemple 32 On obtient 0,42 de cristaux blancs (Et OH). Rdt = 62 %; F = 125 C; Rf = 0,34 dans(B) RMN correct; C,H,N EXEMPLE 62 a) Acide /(N-benzyloxy g-trifluoroéthyl carboxamido)-2 phényl-37propanoique 2 g de N-benzyloxy phénylalanine sont traités comme dans l'exemple 60 a par 1,10 g du chlorure de l'acide trifluorométhyl acétique On obtient 1,5 g d'huile qui cristallise lentement. F = 82 C; Rdt = 53 %; Rf = 0,21 dans (B); RMN correct; C,H,N b) Ester benzylique de la N/(-j Denzylo e-tuee éthyl carboxamido)-2 phény-3 prcpanoy 17-glycine 1 g du composé précedent est couplé dans les conditions du couplage peptidique (exemple 29) avec 0,9 g de tosylate de l'ester benzylique de la glycine. Après traitementshabituels on obtient 1,1 g d'un solide pâteux qui est utilisé sans purification préa- lable pour l'expérience suivante. Rf = 0,42 dans (B) EXEMPLE 63 N/(N-hydroxy B-trifluoroëthy carboxamido)-2 phényl-3 propanoy 17-glycine 0,5 g du composé précédent sont hydrogéné dans les conditions habituelles (exemple 32) On obtient 0,25 g d'un solide blanc. F = 208 C; Rdt = 83 %; Rf = 0,64 dans (A) 49. EXEMPLE 64 Ester benzylique de la N/ N-benzylox N-p fluorobenzyl carbamoyl)-2 phényl3 propanoyl 7-glycine 0,5 g du composé 35 b sont dissous dans 30 ml de THF sec On ajoute un équivalent ( 0,084 g) d'-thy- late de sodium franchement préparé On agite 10 heures à température ambiante sous courant d'azote, puis on ajoute lentement 0,14 g de chlorure de p fluorobenzyle et on laisse à nouveau 10 heures à température ordi- naire puis 2 heures à reflux On concentre à sec, reprend par Ac O Et, lave à l'eau, sèche, évapore sous vide On obtient 0,12 g d'une huile incolore que l'on purifie par passage sur une colonne de gel de silice (éluant CHC 13/Et 2 O, 50/50) Rf = 0,75 dans (B) EXEMPLE 65 N/i N-hydroxy N-p fluorobenzyl carbamoyl)-2 phényl-3 propanoy 17-glycine 0,08 g du composé précédent sont hydrogénés à pression ordinaire comme dans l'exemple 32 On obtient 0,035 g d'un solide blanc. F = 164 C; Rf = 0,12 dans (A); RMN correct; C,H,N EXEMPLE 66 Ester tertiobutylique de la N/ N-benzyloxy N-p fluoro- benzyl carbamoyl-3 benzyl-2 Pr oy 17-glcine 0,5 g du composé 55 sont traités comme dans l'exemple 64 par le chlorure de p fluorobenzyle Après traitement on obtient 0,42 g d'une huile (Rf = 0,55 dans (B)) utilisée sans purification ultérieure pour préparer le composé 74. EXEMPLE 67 N/i N-benzyloxy N-p fluorobenzyl carbamoyl-3 benzyl-2 propanoy 17-glycine 50. 0,42 g du composé précédent sont mis en solution dans 1 ml de TFA à O C On laisse sans agitation durant minutes, évapore sous vide L'huile résiduelle est lavée par 10 x 10 ml d'éther sec jusqu'à p H neutre. On obtient une poudre blanche hygroscopique. Bf = 0,75 dans (B); P = 0,30 g; Rdt = 80 %; RMN correct. EXEMPLE 68 N/(N-hydroxy N-p fluorobenzyl carbamoyl-3 benzyl-2 propanoyl 7-glycine 0, 3 g du composé précédent sont hydrogénés comme dans l'exemple 32 On obtient 0,15 g d'un solide cristallisé. F = 212 C; Rdt = 62 %; RMN correct; C,H,N EXEMPLE 69 a) Acide (N-benzyloxy p fluorobenzylcarboxamido)-3 benzyl-2 propanoique g du composé 43 a sont condensés avec 3,05 ml de chlorure de p fluorophényl acétyle comme dans l'exem- ple 60 On obtient après traitement usuel 3,8 g de cristaux jaune pâle. F = 96 C; Rdt = 51 %; RMN correct; C,H,N b) N/i N-benzyloxy p fluorobenzylcarboxamido)-3 benzyl-2 propanoy 17-glycine 3 g du composé précédent sont condenses comme dans l'exemple 29 avec 2,32 g de tosylate de l'ester benzylique de la glycine On obtient 3,52 g d'huile utilisée sans purification pour préparer le composé 70. EXEMPLE 70 N/(N-hydroxy p fluorobenzylcarboxamido)-3 benzyl-2 propanoyl 7-glycine 3 g du composé 69 b sont hydrogénés à pression ordinaire dans les conditions de l'exemple 32 On ob- tient après cristallisation dans Et OH 1,10 g d'un solide blanc. F 174 'C;Rêt = W 1 % Rf 0,32 dans (A) RMN correct C,HYN EXEMPLE 71 a) Acide (N-benzy 4 oxy çv -i luooé -carboxam-ido) -3 benz 1-2 pr r q 2 àoâ:iu 3 g du composdr 43 a sont condensés avec 1,54 g du chlorure de i'cd rfurmty acétique colime dans l'exemple 6 G On obtient 3,12 g de cristaux jaunes. F= 640 C; Rdt= 76 Rf 0,45 dans (B) RI 4 N correct; C,HN b) Ester benzv Liaue d la N/{ ezlx trifluorométh l acétami-do) -3 yez i r p N y/ -9 jcinhe 2 g du composé prévmddert sont condeinsés commec dans l'exemple 29 avec ( ie tosylate de l'ester benzylique de la glycine- t On bten U 2 g d'huile faune que -'on szijsupur-fica-tion u Itéieure. pour la préparation du conpo-sé 72. EXEMPLE 72 N/(N-hr 1 r xy truronméthyl jc-5 ami Cào' -3 ordina-,, re dans les 'tc xm 2 ',2On obtient aprèscrsa aldrs Ac O Etq D,2 g d'un solide jaune clair. F= 131 'C; Rr It 92 % R f 0,4 '4 danq (A) RMN correct CHN "l EMPLE 73 foa (-ho-3 v beazyl-2 propanovl) -glycine 0,6 g du composé 45 b sont mis en réaction dans les conditions du couplage peptidique (exemple 29) avec 0,4 g de l'amide para-f luoro benzylique de la glycine Après traitements usuels on obtient 0,46 g d'une huile. Rdt = 50 %; Rf = 0,712 dans CH Cl 3/CH 3 OH 1, 5/1 52. Le composé est alors hydrogéné à pression ordinaire comme dans l'exemple 32 On obtient 360 mg (Rdt = 95 %) d'un solide blanc. F = 175 C; Rf = 0,53 dans CHC 13/CH 3 OH, 5/1 RMN correct; C,H,N EXEMPLE 74 p-fluoro benzylamide du N(N-hydroxy formamido-3 benzyl-2 propanoyl)tryptophane 0,6 g du composé 45 b sont mis en réaction dans les conditions du couplage peptidique (exemple 29) avec 0,6 g de l'amide para-fluoro benzylique du tryp- tophane Après traitementsusuels, on obtient 0,54 g d'une huile. Rdt = 50 %; Rf = 0,7 dans CH Cl 3/CH 3 OH, 5/1 0,50 g de ce composé sont utilisés sans purifi- cation ultérieure pour une hydrogénation à la pression ordinaire, comme dans l'exemple 32 On obtient 395 mg d'un solide blanc. Rdt = 95 %; Rf = 0,52 dans CHC 13/CH 3 OH, 5/1 RMN correct; C,H,N EXEMPLE 75 p-fluoro benzylamide de la N(N-hydroxy formamido-3 benzyl-2 propanoyl)alanine 0,600 g du composé 45 b sont mis en réaction dans les conditions du couplage peptidique {exemple 29) avec 0,20 g de l'amide p-fluoro benzylique de l'alanine. Après traitements usuels, on obtient 0,38 g d'une huile. Rdt = 55 %; Rf: 0,79 dans CHC 13/CH 30 H, 5/1 0,35 g de ce composé sont employés sans purifi- cation ultérieure pour être hydrogénés à la pression ordinaire, comme dans l'exemple 32 On obtient 220 mg d'un solide blanc. Rf = 0,58 dans CHC 13/CH 3 OH, 5/1; RMN correct C,H,N 53. EXEMPLE 76 p-fluoro benzylamide de la /(N-hydroxy carbamoyl)-2 phényl-3 propanoy 17leucine 0,600 g du composé 35 a sont couplés avec 0,50 g de l'amide pfluoro benzylique de la leucine selon les conditions de l'exemple 34 Apres traitement, on obtient 730 mg d'un solide blanc amorphe (Rdt = 75 %). 0,700 g de ce composé sont hydrogénés dans les conditions de l'exemple 32 On obtient 520 mg d'un composé solide instable blanc. Rdt = 90 %; F = 175 C; Rf = 0,48 EXEMPLE 77 Ester butylique de la N(N-hydroxy formamido-2 penta fluorophényl-3 propanoyl)-glycine On condense 9 g de pentafluorobenzaldéhyde sur 7 g de malonate de diéthyle en suivant le procédé décrit dans Organic Synthesis vol III, page 377 On obtient 10 g ( 69 %) de pentafluorobenzalmalonate de diéthyle qui est hydrogéné à pression ordinaire en pré- sence de palladium surcharbon en pentafluorobenzyl- malonate de diéthyle ( 92 %). En suivant le procédé décrit dans le brevet FR 8 008 601 pour préparer l'acide benzylacrylique, on obtient l'acide pentafluorobenzyl acrylique Ce der- nier composé conduit par les procédés décrits dans les exemples 45 et 46 à l'acide (N-benzyloxyformamido)-3 pentafluorobenzyl-2 propanoique Par condensation de ce dernier composé avec l'ester butylique de la gly- cine suivant le procédé de l'exemple 49 et hydrogéna- tion catalytique dans les conditions de l'exemple 32, on obtient le dérivé 77. Solide blanc Rf = 0,53, CH C 13/CH 3 OH, 5/1; F = 55 C. RMN correct; C,H,N 54. EXEMPLE 78 a) N-benzyloxy formamido-2 benzyl-1 éthylamine 1 g du composé 43 b est traité suivant le procédé de Ninomiya et al (Chem Pharm Bull 22, 1398 ( 1974) par le diphénylphosphorazide dans le benzène en pré- sence de triéthylamine, puis par l'alcool tertiobu- tylique pour donner 610 mg ( 50 %) d'un composé huileux jaune pâle. L'huile est traitée par l'acide trifluoroacé- tique et libère 540 mg de trifluoroacétate de 78 a ( 85 %). Solide blanc. F = 125 C; Rf = 4/1/1/ = 0,42. b) /N-formyl N-benzyloxy N'(benzyloxycarbonyl-2) acéty 17 diamino-1,2 benzyl-2 éthane 500 mg de trifluoroacétate 78 a sont couplés avec 245 mg du monobenzylester de l'acide malonique en présence de DCC/HOBT selon le procédé classique de couplage peptidique (exemple 43 c) On obtient après les lavages successifs 500 mg d'une huile incolore épaisse. Rdt = 90 %; Rf = 0,55 dans CHC 13/Me OH, 5,1. EXEMPLE 79 /N-formyl N-hydroxy N'(carboxy-2) acétyl/ diamino-1,2 benzyl-2 éthane 300 mg du composé précédent sont hydrogénés à pression ordinaire dans les conditions de l'exemple 32 On obtient 160 mg d'un solide blanc. F = 182 C ( 90 %); Rf = 0,20 dans CH C 13/Me OH/acide acétique, 9/1/0,5. EXEMPLE 80 /N-formyl B-benzyloxy N'(benzylcarboxamido-2) acéty 17 diamino-1,2 benzyl2 éthane 500 mg du trifluoroacétate de 78 a sont couples avec 245 mg monobenzylamide de l'acide malonique en présence de DCC/HOBT selon le procédé de l'exemple 43 c. * on cbtient apres les la-vages successifs 510 mg d'une huile incolore épaisse qui cristallise lente- ment. Rdt -= 91 %; Rf 0,40 dans CE-C 13/Me OH-/acide acétique 9/1/0,5. EXEMPLE 81 di amino-1,2 benzyl-2 tai 300 mg du composé' précédent sont hydrogénes à pression ordinaire dans les conditions de l'exemple 32 On obtient 215 ' mq d'u solidle bl Ianc ( 90 i) F = 1450 C; Rf 0,30 dans CH C 13 ie OI:/acide acétique XPLL 82 a) Acide réh èe-dl 13opanloitqup i,61 o (u oi dllester thylique de l'1 acide carboxy-2 P zrcranor Clque obteau par nique, lute Jîl O rt act ion du chlororiéthl-l,7-2 indole agur la main ' ôJith Lbyle selon Orgar,lo Sy- thesis, vol 2,pp 279, _:i Jtés à température ambiante durant 2-4 heur Es selon Mannich (Ber 57, 1116 ( 1924) avec '2,23 g de -frormol à 30 5 et 0,73 g de di- éth,ylaniine oin aj-out es d'eau, etitpar trois ois 50 mil déLe es 2 asoraiques sont lavées successivement pzir 20 mi de HOI 0,5 N, puis 20 mil d'eau et enfin 20 O ml de s ' Oltion de Na Ol saturée On sèche sur Na so 4 et ci-: nïcentre a sec. On obtient une huile jaune pale qui cristal- lise lentement. F= 40-60 'C; P 2,10 g; Rf 0,89 dans CH Cl,/Et OH ( 9/1) RMN correct. 2 2 g de l'ester précéCent sont dissous dans ml d'éthanol et agités avec 1,21 équivalent de 56. solution de Na OH 1 M, durant 20 heures à température ambiante On évapore à sec, reprend par 20 ml d'eau, extrait une fois à l'éther La phase aqueuse est aci- difiée à p H = 2 par H Cl 2 N On extrait par deux fois 50 ml d'éther, lave à l'eau, sèche sur Na 25 O 4 et évapore à sec. L'huile jaune pâle obtenue cristallise en plaques. F = 101-108 o C; P = 1, 6 g; Rf = 0,40 dans CHC 13/Me OH, 7/3; C,Hr N. b) Acide (N-benzyloxy formamido)-3 (e-indolylméthyl)-2 propanoique 1 Préparation de l'acide benzyloxyamino-3 e-indo- lylméthyl-2 propanoique 5 On ajoute à température ordinaire une solution de 1,12 g ( 0,009 mole) de O benzyl hydroxylamine en solution dans 20 ml de CH 3 OH, à 1,5 g ( 0,008 mole) du composé de l'exeple 82 a-2 dissous dans 20 ml de CH 3 OH. On chauffe à reflux durant cinq jours On traite alors comme dans l'exemple 43 L'huile obtenue cristallises F = 67 C; P = 1,4 g; Rf: 0,23 dans CH C 13/Me OH, 9/1. RMN correct. 2 1,3 g du composé précédent sont ajoutés à 17 ml de HCO 2 H puis le mélange est traité et extrait dans les conditions de l'exemple 35 On obtient une huile épaisse qui ne cristallise pas. Rf = 0,4 dans CHC 13/CH 3 OH, 9/1 P = 0,7 g La RMN étant correcte, le produit est utilisé sans purifica- tion pour les réactions suivantes. c) Ester benzylique de la N-/(N-benzyloxy formamido)- 3 e-indolylméthyl-2 propanoy 17 glycine 0,5 g du composé obtenu à l'étape (b) en so- lution dans 50 ml de THF sec sont couplés avec 0,4 g de tosylate de l'ester benzylique de la glycine selon 57. l'exemple 43 c Après traitements successifs habituels, on obtient 0,66 g d'une huile marron. Rf = 0,57 dans CHC 13/Me OH, 9/1 RMN correct. EXEMPLE 83 N-/(N-hydroxy formamido)-3 e-indolylméthyl-2 prpanoyl/ glycine 0,55 g du composé 82 sont hydrogénés à pres- sion ordinaire dans les conditions de l'exemple 32. On obtient 0,42 g d'un solide blanc. F = 228 C; Rf: 0,38 dans (A). EXEMPLE 84 Ester benzylique de la N/{N-benzyloxy formamido)-3 isobutyl-2 propanoy 7 l/ glycine a) 3,12 g ( 0,017 mole) du monoester éthylique de l'iso- butyl malonate obtenu par action du chlorure d'isobu- tyle sur le malonate de diéthyle suivie de monosaponi- fication, sont agités à température ambiante 24 heures avec 1,5 g de formol à 30 % et 1,24 g de diéthylamine. Après traitement comme dans l'exemple 82 a-1, on obtient 2,8 g d'une huile. Rf = 0,92 dans CH C 13/Me OH, 9/1 RMN correct L'huile est utilisée brute pour l'étape suivante. b) 2,5 g de l'ester précédent sont dissous dans 20 ml d'éthanol et saponifiés selon les conditions de l'exem- ple 82 a-2 On obtient 1,8 g de solide jaune pale. F = 65 C RMN correct, C,H,N correspond à l'acide iso- butyl-2 acrylique. c) 1,5 g d'acide isobutyl-2 acrylique sont condenses avec la O benzylhydroxylamine selon l'exemple 82 b-1. L'huile obtenue possède un spectre RMN correct. P = 1,6 g; Rf = 0,18 dans CH C 13/Me OH. d) 1,2 g de l'huile précédente sont ajoutés à 16 ml de HCO 2 H et le mélange traité comme dans l'exemple 35. L'huile obtenue, P= 1,35 g; Rf = 0,31 dans CH C 13/Me OH 58. possède un spectre RMN correct et est utilisée pour la condensation peptidique suivante. e) 1,07 g du composé précédent sont couplés en solution dans le THF avec 1,20 g de tosylate de l'ester benzy- lique de la glycine, puis le mélange est traité comme dans l'exemple 43 c On obtient 1,84 g du composé 84. Huile jaune pâle obtenue pure par chromatographie sur colonne de gel de silice en utilisant ie mélange CHC 13/ Me OH, 8/2, comme éluant. RMN correct; C,H,N; Rf: 0,34 dans CH C 13/Me OH, 9/1 EXEMPLE 85 N-/7 N-hydroxy formamido)-3 isobutyl-2 propanoyl) glycine 1,2 g du composé précédent sont hydrogénés à pres- sion ordinaire dans les conditions de l'exemple'32 pour conduire à 0,62 g d'un solide blanc. F = 164-1700 C; RMN correct; C,H,N. EXEMPLE 86 a) Acide N-benzyloxycarbamoyl-2 isopropyl-3 propanoique - 2 g ( 0,0106 mole) du monoester éthylique de l'iso- butylmalonate préparé selon 84 a sont couplés avec 1,30 g de Obenzylhydroxylamine base dans les conditions de la synthèse peptidique (exemple 29) Après traite- ment habituel, on obtient une huile incolore qui est saponifiée par Na OH 1 N à 5 C durant 5 heures dans l'éthanol Après acidification, extraction à l'éther et évaporation à sec, on obtient un solide blanc. P = 2,1 g; F = 161 C (Et OH) RMN correct C,H,N. b) Ester benzylique de la N/(N-benzyloxycarbamoyl)-2 isopropyl-3 propanoy 17 glycine 1,5 g du composé précédent sont couplés avec 2,2 g de l'ester benzylique de la glycine (tosylate) selon les conditions de l'exemple 33 b Après traitement, on 59. obtient 1,21 g d'un soi-ide jaune pâle. F 50-603 C RMN correc t; CH, N. EXEMPLE 87 NI(N-hydoyal) iso ro l-3 propano l/ lcine i g du composé pn est hydrogéné à pression ordinaire comme dans -1 e-xemnple 32 on obtient 527 mg d'un solide blanc. F = 14-7-1510 C (H 20 >; R 1 f 0,38 dans A; RMNH correct; C,H,,N. Les résultat ds 4 ds biologiqiues et phar- macologiques rapport&e c-Jczr S mettent ein évidence les interessant L:s orcm UirDbit Llxède i phalinase, antai 1 g-J-iqt r' -ve nt ique et hypotensive dé f O-rïI Cle ú. La prÈîoent a * uorx encore pour objet un médicament r otmrent des propriét-és inhibitrices de 1 'e' n L a antalgique, tdé piessive, anti-diarr Ilè-L 1 r'e et liypotensivre, caractâf- risé en ce qu'il,àttede princi pe actif un composé, ue fim un-sel d'addition a-vecun ac ide ou ux ae hi uienct Acetbe de ce composé. A Etude bicologiue I) Dosage de l'activité "anképhalinasigue" (enképhaline dipeptidylcarboxypeptidasique) et détermination de l'effet des inhibiteurs. La préparation enzymatique utilisée est une fraction membranaire provenant du striatum de rat ou de souris. a 518088 60. Cette fraction est obtenue par homogénéisation à 4 C dans 20 volumes de tampon Tris-H Cl O O;-05 M (p H 7,4) suivie de deux centrifugations successives ( 1000 g x min et 200 000 g x min) au terme desquel- les le culot de la deuxième centrifugation est retenu. Il est lavé par remise en suspension dans 10 ml du tampon suivie de centrifugation ( 200 000 g x min) et le culot obtenu est lui-même lavé superficiellement afin de compléter l'élimination des enzymes solubles. La fraction membranaire ainsi obtenue est reprise dans le tampon à 4 C de manière à obtenir une suspension comportant environ 1,5 mg de protéines par ml. Une prise aliquote de 50 4 l de la suspension membranaire est alors incubée dans un volume final de 100 Al à 25 C en présence de 10 n M de leucine-enké- phaline 3 H ( 39 Ci/mmole), préalablement purifiée par chromatographie sur une colonne de Porapak Q ( 100- mesh, Waters Assoc) et de 0,1 m M de puromycine, un inhibiteur d'aminopeptidases La durée des incuba- tions est généralement fixée à 15 mn de manière à mesurer la vitesse initiale de formation du tripeptide Tyr-Gly-Gly-3 H caractéristique de l'activité enképha- line dipeptidylcarboxypeptidasique (enképhalinasique). La réaction est arrêtée par addition de 25 il d'H Cl 0,2 N et le tripeptide est isolé par chromatographie sur colonne de Porapak Q ou sur une couche mince de silice suivant des méthodes décrites par Malfroy et al (B Malfroy, J P Swerts, C Llorens et J C Schwartz, Neuro-Science Letters, 11, 329, 1979). Les résultats obtenus par chacune de ces deux méthodes ont toujours été en bon accord. La mesure de la radioactivité du tripeptide est effectuée par spectrométrie en scintillation li- quide. L'effet des inhibiteurs est établi en pratiquant 61. des expériences en présence de concentrations crois- santes de ces produits, ce qui conduit à la détermi- nation des concentrations inhibitrices 50 % calculées au moyen de l'analyse des données par la méthode de Parker et Waud (J Pharmacol Exper Ther 177, 1, 1971) Dans certains cas, la nature compétitive de l'inhibition a été établie par des expériences d'in- cubation en présence de l'inhibiteur en concentration fixe et du substrat en concentrations croissantes. Composé n Concentration inhibitrice 50 % 2 7 x 10-8 M 4 1 x 10-7 M 36 8 x 10-9 M 38 1 x 10-7 M 46 3 x 10-9 M -9 48 5 x 10-9 M 57 3 x 109 M 73 5 x 10-8 M 79 7 x 10-9 M 81 2 x 10-7 M II) Protection des enképhalinases endogènes libérées par dépolarisation de coupes de cerveau. Des coupes de stratium de rat son incubées dans un milieu de Krebs-Ringer et la (Met 5) enképhaline libérée par addition de KC 1 50 m M est évaluée par do- sage radio-immunologique (Patey et coll, Science, 1981, 212, 1153-1155) En présence de thiorphan un inhibiteur d'enképhalinase, on observe une récupéra- tion accrue du pentapeptide, laquelle est approxima- tivement doublée. En présence de plusieurs des composés faisant l'objet du présent brevet, on constate une récupération significativement supérieure à celle qui est observée Z 518088 62. sous l'effet du thiorphan, même lorsque ce dernier est présent en concentration supramaximale La protection supérieure des enképhalineslibérées qu'apportent ces composés est, dès lors, attribuée à l'inhibition de peptidases (probablement des aminopeptidases) autres que celles qui sont sensibles au thiorphan. TABLEAU I Protection des enképhalines endogènes libérées par dépolarisation de coupes de stratium de rat B Etude pharmacologique L'étude pharmacologique des produits décrits ci-dessus a permis de mettre en évidence un effet an- talgique, antidiarrhérique, antidépresseur et un effet hypotenseur propre ainsi qu'une action potentialisa- trice des effets d'une enképhaline, la D Ala 2 Met Enké- phaline (notamment antalgique et hypotenseur). Les épreuves pharmacologiques réalisées ont été les suivantes. (Met 5) enk&épal ie libérée Ieiibiteur ajcuté( (pmole/g/min) Aucun 120 25 Thiorphan ( 10 -7 M) 280 30 * Composé n 36 ( 10-6 M) 550 40 * Composé n 46 ( 10 7 M) 600 30 * Composé n 57 ( 10-7 M) 630 50 * p CH 2-% 63. I -Toxicité a u La détermination de la mortalité chez la souris est observ-éc à la suite de 'L'administration unique par voie intrav'eineuse, par voie intrapérito- néale de doses croissaint-es des composés àn tester. La DL,,, pour tous les composés étudiés, est supérieure à 10 m/giv et 400 mpg/kg par voie intrapéritonéal e. Il -Toxiitésubaiquë Le composé 73, a éité administré pair voie intrapéritonéale pendant trois semaines à des souris à la dnse de 50 mng/kg trois fois par jour ( 150 mg/kg par j our', Aucune modif ication de L'éo lution Pondérale et auicur si-lgne de toxiciteé n'oint été' présentés par arnimaux par rapp-ort aux reonLe poids des organes et leur Autamien anatono-path-clogique après sacrifice des amann'ont morrtrré aucune dif- fé-rence par ra Qport 1 ux temains solvants. Par Lsus ches les animaum: c-hez qui on procédait à une épreuvve de r 6 vers-bilieté à l'arrêt du trailement, aucun signe d 1 e tolé ran-ce, ni d'accoutumance et aucun rdlhéncomène de sevrage n'ont été observés. III Activité antalg 4 e 1) Tast de la plaque chauffante Réflexe de lèchement de la souris sur une plaque c-hauffdé-e à 55 'f" sel on la méthod;z de Jacob et coll (Arch lnt Ptarmacodyn 1221, 287-300, 1959 133, 296300, 19 51)k a) Potentialisation de l'effte antalgigue de la D Ala, Met Enképhaline a) Par voie intraventricula-ire it Le tableau I ci-après montre que l'effet d'une dose subactive ( 0,3 y) de LI Ala 2 Met Enképhaline admi- nistrée par voie intraventriculaire est significative- ment potentialisée (p la Naloxone. B) Par voie intraveineuse Par voie intraveineuse, les N O 2, 38 et 73 à la dose de 30 mg/kg entraînent une augmentation de 100 % du temps de lèchement par rapport aux animaux traités avec la D Ala 2 Met Enképhaline ( 0,3 Y intraventriculaire). TABLEAU I Plaque chaude Potentialisation de l'effet antalgique de la D Ala 2 Met Enképhaline et antagonisme par la Naloxone Dose J Augnentation du tenps Y/ Nbre de lechement % par Produit souris de rapport aux traités souris D Ala 2 Met enképhaline ivt ( 1) n 36 ( 1) 30 6 350 + D Ala 2 et Enk + Naloxone( 10 mg/kg ss. cut) _ _ _ _ _ __ I_ _ _ _ _ _ ( 1) la dose de D Ala 2 iet Enképhaline est de 0,3 y/souris, dose inactive par elle-iime, P Z 518088 65. b) Effet antalgique propre Par voie intraveineuse. Le Tableau ci-dessous montre que les composés 2, 38 et 73 présentent un effet antalgique dans le test de plaque chaude à 55 C. Produit DE 50 mg/kg/i v. 2 30 38 18 73 3 2) Test chez la souris du retrait de la queue trempée dans l'eau chauffée à 48 C selon la méthode de Sewell et Spencer (Neuropharmacology, 1976, 15, p. 683-688). Les composés 2 et 38 administrés par voie intraveineuse à la dose de 30 mg/kg: potentialisent très significative- ment la D Ala 2 Met Enképhaline administrée 15 minutes après par voie intraventriculaire, à des doses subac- tives variant de 10 à 30 y/souris. Cet effet est durable et supérieur à 2 heures; il est également observé à la dose de 5 mg/kg pour le n '73. 3) Test à la phénylbenzoquinone ou "writhing test" selon la méthode de Siegmund et coll. (Proc Soc Expert Biol Med 1957, 95, 729-731). Les composés 2, 38 et 73 injectés respectivement à la dose de 15, 18 et 1 mg/kg I V. protègent de la douleur induite par la phénylbenzoqui- none les animaux traités, avec une différence signifi- cative par rapport aux témoins p est antagonisé par la Naloxone. 66. Ici encore, en comparant les effets antinociceptifs de ces composés à ceux du thiorphan, un inhibiteur sélectif de l'enképhalinase, on constate un effet maximal nettement supérieur Par exemple, le thiorphan,même à dose forte, ne supprime jamais complè- tement les étirements abdominaux de la souris, tandis qu'on observe une suppression complète dans le cas de ces composés Cet effet analgésiqu'e plus poussé est attribuable à une meilleure protection des peptides opioides endogènes, en rapport avec l'inhibition non seulementde l'enképhalinase, mais d'aminopeptidases intervenant dans leur hydrolyse. IV Activité antidépressive Test de la nage forcée ou "Mice Despair" selon la méthode de Porsolt. Ce test est représentatif d'un effet antidépresseur. Le composé 73, à la dose de 1 mg/kg i v. diminue significativement(p des périodes d'immobilité par rapport aux témoins. V Activité antidiarrhéique Elle a été étudiée selon la méthode de Niemegeers et coll (Arzneim, Forsh 22, 516, 1972) o la diarrhée est provoquée chez le rat par l'huile de ricin. Cet effet a été retrouvé chez la souris à des doses de 10 à 30 mg/kg et est antagonisé par la Naloxone. VI Activité hypotensive propre potentialisatrice de-l'enképhaline, (Laubie M Schmith H, Vincent M, Remon D Central cardiovascular effets of Morphinometic peptids in dogs. European Journal of Pharmacology, vol 46, 67-71, 1977). 67. Par la voie intraveineuse, le composé 73 a entraîné une dim-inutijon de la pression artérielle à la dose de 10 mg/kg. Les résult-ats de ces étudzas mettent en Dévidence la faible toiteet les -intéressantes pro- priétés inhibitrices de l'néhlnsantalgique, antidépressive, antidiarrhéitj ue et hypotensive des dérivés de l' inv En-ution qui les rendent ut-iles en mnéde- cine humaine et vétérinaire. Le médicayi-ert de l'invention est adminis- trable à l'homme par voie or,3 Àe, parentérale ourecta-le. Chaque dose untiecontient avantageu- semerit de 0,5 c à 100 iri F:lce prîluîci Jpe actif, les ele-es administrables journelleixent cpoutvan-t varier -le i', mc à 1200 mg de prnieachtli. 68. REVENDICATIONS 1 Dérivés d'aminoacides répondant à la formule générale o X CH A B CH R 3 (I) I I ( linéaire ou ramifié éventuellement mono ou polysub- stitué par un atome d'halogène; ur groupe cyclohexyle; un groupe phényle ou naphtyle éventuellement mono ou polysubstitué par un atome d'halogène, un groupe tri- fluorométhyle ou hydroxy; un groupe thi Lényle; un groupe thiazolyle; un groupe furyle; un groupe indolyle; un groupe imidazolyle; n est 0, 1 ou 2; R 2 est un atome d'hydrogène; un groupe alkyle en C 1 à C 6 linéaire ou ramifié; un groupe alkyle(C 14) substitué par un reste a ou $ thiényle, a ou 5 furyle, a ou Bthiazolyle, aou indolyle, c ou B imidazolyle, aou S benzothiényle, a ou e benzimidazolyle, naphtyle ou un groupe phényle éventuellement mono ou polysubstitué par u N a to me d' halogène; un groupe hydroxy- 69. alkyle; un groupe alcoxyalkyle éventuellement substitué sur la fraction alcoxy par un groupe phényle, benzhy- dryle ou pyridyle éventuellement N-substitué par un groupe phénylalkyle dont le noyau phényle est lui-même éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène; un groupe phénoxyalkyle; un groupe mercapto alkyle éventuellement sugstitué sur le soufre par un groupe alkyle linéaire ou ramifié, phényle ou benzyle; R 3 est un groupe hydroxy; un groupe alcoxy li- nêaire ou ramifié en C 1 à C 8 éventuellement mono ou polysubstitué par un atome d'halogène, un groupe hydro- xy ou amino éventuellement mono ou disubstitué par un groupe alkyle en C 1 à C 4; un groupe phénoxy ou phényl- alcoxy (C 1 _ 4) dont le noyau phényle est mono ou poly- substitué par un atome d'halogène; un groupe amino; un groupe amino mono ou disubstitué par un groupe alkyle en C 1 à C 8 linéaire ou ramifié éventuellement mono ou polysubstitué par un atome d'halogène; un groupe amino éventuellement mono ou disubstitué par un groupe phé- nyle ou phénylalkyle (C 1 _ 4), ces deux derniers radicaux étant éventullement mono ou polysubstitués sur le noyau phényle par un atome d'halogène; X est un atome d'halogène; un groupe phosphono; un groupe phosphonyl substitué de formule -PO(OR)2 dans lequel R est un groupe alkyle en C 1 à C 4 ou un groupe aralkyle; un groupe sulfo; un groupe alkylidène (C 1 4); un groupe amino; un groupe amino monosubstitué de formule NHR' dans lequel R' est un groupe alkyle, cycloalkyle, phényle, mono ou polyhalophényle, phényl- alkyle (C 1 4),mono ou polyhalophénylalkyle (C 1 4), hydroxy, alcoxy en C 1 à C 6, aralcoxy, mono ou polyhalo-;' aralcoxy dont la fraction alcoxy est en C 1 _ 4, phospho- no, phosphonyl substitué de formule -PO(OR)2 dans le- quel R est tel que défini ci-dessus ou sulfo; un groupe 2518088 ' 70. OR" amin disubstitué de formule -N C-R"'dans laquelle R"' est un atomre d'hydrogène, un groupe alkyle en C 1 à C 6, aralkyle (C 1 4) éventuellement mono ou polysubstitué sur le noyau aryle par un radical choisi parmi un atome d'halogène, un groupe hydroxy, amino, nitro ou trifluorométhyle, R'" est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle éventuel- lement mono ou polysubstitué par un atome d'halogène ou un groupe trifluorométhyle, un groupe aralkyle(C 14) éventuellement mono ou polysubstitué sur le noyau aryle par un radical choisi parmi un atome d'halogène, un groupe hydroxy, amino, nitro ou trifluorométhyle; un groupe carbamoyle mono ou disubstitué de formule 0 OR" N Rm dans laquelle R" et R'" sont tels que définis ci-dessus;-un groupe alkyle en C 1 à C 4 mono- ou polysubstitué par un atome d'halogène, un groupe alcoxy (C 1 _ 4) carbonyle, carboxy, phosphono, phosphono disubstitué de formule -PO(OR)2 dans lequel R est tel que défini ci-dessus, ou sulfo; un groupe aminoalkyle; un groupe aminoalkyle monosubstitué de formule -(CH 2)m- NHR' dans laquelle R' est tel que défini ci-dessus, et m est un nombre entier de 1 à 4; un groupe aminoalkyle disubstitué de formule-(CH 2) R' dans laquelle m R", R' et m sont tels que définis ci-dessus; un groupe carbamoylalkyle mono ou disubstitué de formule 0 OR" -(CH 2) m R" dans laquelle R", R"' et m sont tels que définis ci-dessus; et leurs sels d'addition avec des acides ou des bases pharmaceutiquement acceptables. 71. 2 Dérivés d'zimirioec 2 Ldes selon la revendication 1 caractérisés en ce que A est Ur -jrcupe carbonyle ou amino; B est un groupe amino ou a,r Lino sub- stitué dont la roisième valence forme avec P, 2 un radil- cal a Lcylène en C à ronten_tnt éventuellement un autre hétéroatome; RI 1 est un atom d'hydrogène; un groupe alkyle (C un groupe phény-le, vent,,ie 11 ement mono ou 1-4 1 polysubstitué par -un groupé indol,, 7- "e; R est un ato:î-L 1 z un gros,, 2 De alk-,,Ie lin 6 aïre ou ramffié substitué par un groupe indolyle; n est O ou 1 - -R_ est: i_n cruuc, is 1 hydr-,7 Yy en cl. J t J.t 1 ué par lin a toïne d'ha'I Logèn, ungr L,ap (C groupe Phéiivi- e c'se substitué pair un ha 2,3 , il e, Ur I g r-C ec 1-6 2 odont le groupe al J, y Ie 1-nor r 1,1 1 0- pcly Fzubst J tri -' rmr ur, phèn -j-al kvie (C amino ulont 1-4 r-ionci ou r Olysu Isî:itué par li-n atopte e,-t,),n atore_ d-1 h; iogè-ne; un groupe phospbono; un groupe phosphono ubstîtii L; Dar au moins un radical benzyle, un groupe suif;D, Li'r, groupe méthylène-,,an groupe amino inono ou clisubstltué par un radical choisi parmi un groupe hydro - cy, b-erzv Io -,y, phosphono, phosphono mono ou disubst Jàtu par un gro-upz Ibenzyle, sulfo, formyle,benzylcarbcreyle eu niono ou polyhaloalkyle(C 1 _ 4 carbonyle; un groupe carbazziiov Ie mono ou disubstitué par un radical choisi parmi un gr;-)iipe hydroxy, benzyloxy dont le groupe phényle est iventuellement mono ou poly- substitué par un atome dlhz:tloçjèneou mono ou polyhalo- 72. benzyle; un groupe alkyle éventuellement mono ou poly- substitué par un radical choisi parmi un halogène ou un groupe phosphono, phosphono disubstitué par un groupe benzyle, sulfo; un groupe aminoalkyle mono ou disubsti- tué sur l'atome d'azote par un radical choisi parmi un groupe alkyle (C 1 _ 4), hydroxy, benzyloxy, phosphono, sul- fo, formyle, acétyle, mono ou polyhalobenzylcarbonyle, mono ou polyhaloalkyle (C 1 _ 4) carbonyle; un groupe al- kyle (C 1 _ 4) substitué par un radical alcoxy (C 1 _ 4) car- bonyle, carboxy; un groupe alkyle (C 1 _ 4) substitué par un radical carbamoyl mono ou disubstitué par un radical hydroxy, benzyloxy dont le groupe phényle est éventuel- lement mono ou polysubstitué par un atome d'halogène, mono ou polyhalobenzyle. 3 Dérivés selon la revendication 1 ou 2, choisis parmi les suivants: 1) ( 1 2 2 3 CH 2-c 2) (HO) 2 OP-NH-CH-CONH-CH 2-CO 2 CH 3 &J 2-% i) (-CH 20) 2 OP-NH-CH-NHCO-CH 2-COOCH 3 H 2- 4) (HO) 2 OP-NH-CH-NHCO-CH 2-CO 2 CH 3 H 2- ) HONH-CH-CONH-CCH 2-co 2 H C 2 CH 2- 6) HO 3 S-NH-CH-CONH-CH 2-CO 2 H f CH 2 f 7) (Ho) 20 P-CH-CONH-CH 2-CO 2 H CH 2- 73. 8) (HO) 2 OP-CH-CONH-CH -CO,CH 2- 9) H 3 S-CH-CONH-CH 2-CO 2 H ) HO S-CH-CONH-CH -CO C 3 2 22 C Hi 2 _ il) CH 2 =C-CONH-CH 2-CO 2 CH 2-4 12) CH 2 =C-CONH-CH 2-COOH 13) CH =C-CONH-CH -CO CH -CF 21 22 2 3 14) CH 2 =C-CONH-CH 2-CO 2 CH 2-C 6 H 4 F ) Br-CH 2-CH-CONH-CH 2 -C 2 H i H 2 _O 2 C 2- 16) Br-CH -CH-CONH-CH -CO CH -CF 2 1 2 2 2 3 17) Br-CH 2-CH-CONH-CH 2-C 2 HC 64 & 2 _ C 2 C 2 C 64 18) HONH-CH 2-CH-CONH-CH 2-CO CH - 19) HONH-CH 2-CH-CONH-CH 2-CO 2 CH 2-C 3 ) HONH-CH 2-CH-CONH-CH 2-CO 2 CH 2-C 6 H 4 F 251808 8 74. 21) HO 3 S-NH-CH -CH-CONH-CH 2-CO 2-CH 2-C 6 H 4 F CH 2 12) (HO) 2 OP-CH 2-CH-CONH-CH 2-co -CH 1 2 2 _ Cki 2-(P 23) HO 3 S-CH 2-CH-CONH-CH 2-co -CH 1 2 2 Uki 2 24) C 2 H 5 NH-CH 2-CH-CONH-CH 2-CO 2 CH 2 _ CH 2-4 ) HONH-CH-CONH-CH CO H 2 2 CH 3 26) HO 3 S-NH-CH-CONH-CH 2-co 2 H 1 - CH 3 27) (-CH 20) 2 OFNHCH-CO-N CH-co 2 CH 2 CF 3 1 i 1 CH 3 CH 2 -S-CH 2 28) (HO) OP-NH-CH-CO-N CH-CO CH CF 2 1, 1 1 2 2 3 CH 3 CH 2-S-CH 2 29) Br-CH-CONH-CH CONH-CH -CH -CH(CH 1 2 2 2 3 2 CH 30) -CH ONH-CH-CONH-CH -CONH-CII 2 1 2 2 _CH 2:-CH (CH 312 CH H-C = O 31) -CH 2 ON-CH-CONH-CH 2-CONH-CH 2-CH 2-CH (CH 3)2 CH z HD-HNOD-àD-D-H No HD 4 il HD HD OZ) HZ)-HNOD-HD-0-M-H HO HJ 7- 11 D OD- HO HOOD HD-HMOD-HD-D-N-H li D-HiOD-HD-N-D-H m 011 Liu v 5 -1808 8 76. OH O 1 Il ) HN-C-CH-CONH-CH -CONH-CH 1 2 2 CH 2 il 41) -CH 2-ONH-C-CH-CONH-CH 2-CONH-CH 2-CH 2-CH (CH 3)2 CH OP O 1 II 42) H-N-C-CH-CONH-CH -CONH-CH -CH -CH (CH 1 2 2 2 3 2 CH H-C=O 43) -CH 20-N-CH 2-CH-CONH-CH -CONH-CH -CH -CH (CH 3)2 1 2 2 2 CH 2 0 OH il 1 44) H-C-N-CH 2-CH-CO Nlî-CH 2-CONH-CH 2-CH 2-CH (CH 3)2 ' CH i 2 CHO 1 - ) -CH O-N CH -CH-CONH-CH -COOCH 2 2 1 2 2 CH 2 0 OH 46) H-C-N-CH 2-CH-CONH-CH 2-COOH CH CHO 47) -CH 20,-,CONH-CH 2-co 2-CH 3 CH 2 _ 77. 0 OH Il 1 48) H-C-N-CH 2-ci-CONH-CH 2-co 2-CH 3 CH 2 _ COCH 3 49) e-CH O-N-CH -CH-CONH-CH -Co 2 2 1 2 2-CH 2-e CH OH ) CH CO-N-CH -CH-CONH-CH -CO H 3 2 1 2 2 CH 2 COCH 3 51) -CH O-N-CH -CH-CONH-CH -CONH-CH 2 2 1 2 2 _ Un 2- OH 52) CH 3 CO-N-CH 2-CH-CONH-CH 2-CONH-CH 2 _ CH 2 _ 53) C H 0-% -C'n -CH-CONH-CH -CO -C (CH 2 5 2 1 2 2 3 3 CH 2-e il 54) HO-C-CH 2-CH-CONH-CH 2-co 2 tbu C 12 e il ) e-CH -vmn-%'-% N 2-CH-CONH-CH 2-CO 2 tbu 2 1 CH e 78. 56) -c H -ONH-C-CH -CH-CONH-CH 2 2 i 2-COOH CH il 57) HONH-f-- -n 2--n-,-ONH-CH -CO 2 H à 58) -c H 2-ONH-CO-CH 2-CI-CONH-CH 2-CONH- CH - CH 2- 591 HONH-CO-CH -CY-CONH-CH 2-CONH-CH 2- CH 2- -CH -C=o 2 1 1 60) -CH 2-0-N-CH-CONH-CH 2-co 2-CH 2-e CH 2- 0 OH Il 1 61) -CH -C-N-CH-CONH-CH -Co H 2 1 2 2 CH CF 3-CH 2 - =O 62) -CH 2-0-N-CH-CONH-Cli 2-co 2-CH 2- C Hr 0 OH 63) CF 3-CH 2 i-N-CHCONH-CH 2-co 2 H CH 2- 64) -CH 2-0-N C-CH-CONH-CH 2-co 2-CH 2-e 1 1- CH 2 " CH 27 151 9E 4,-Z v D z il D HD-HNOD-ZHD-HNOD-HD HD-N-D-H (úL 1 il HO O H 0,1 HD-H-b' OD-HD HD-N-D HD ID (ZL 1 Il HO O (LL H OD HD H Da (OL I-10 O z t 9 HD H D'i ( 69 9 z 7 9 HD-HHOD-AD FJD-D-t Z HD Fi Da ( 89 0 qo -ZHD H ol) l 'IlZHD O N -? 11 DH 9 Da(L 9 L -7 1 z ET D OD HD KT-ZHD-'H 9 D, ( 99 z z il OD HD H D-11 ( 99 0 HO 8 is ( 2 , -; 251808 8 0 OH 74) H-C-N-CH 2-CH-CONH-CH-CONH-CH 2-C 6 I-I 4 F CH 2 _ CH 2 _ 5 indolyle 0 OH ) H-C-N-CH 2-CH-CONH-CH-CONH-CH 2-C 6 H 4 F à 2 _ CH 3 OH O 1 il 76) H-N-C-CH-CONH-CH-CONH-CH 2-C 6 H 4 F d 2 _ Ci, 2-CH(CH 3) 2 0 OH 1 1 77) H N-CH -CH-CON Ii-CH -COO-CH -CH -CH -CH 2 1 2 2 2 2 3 UH F F F 0 OCH 2 _ il 1 78) H-C-N-CH -CH-NH-CO-CH 2 -COO-CH 2 2 1 un 0 OH 1 1 79) H-C-N-CH -CH-NHCO-CH -COOH 1 2 CH 0 OCH 2 _ il 1 ) H-C-N-CH 2-CH-NH-CO-CH 2-CONH-CH 2 _ CH 2 0 OH il 1 81) H-C-N-Cli 2-uh-NH-CO-CH 2-CONH-CH 2 _ CH 2 2518 O H-C=O 82) _CH 2-0-N-CH 2-CH-Co NH-CH 2-CO 2 CH 2 _ CH 2 indolyle 0 OH il 1 83) H-C-N-CH 2-CH-CONH-CH 2-co 2 H un -Pinualyle H-C=O 84) -CH 2-0-N-CH 2-CH-CONH-CH 2-CO 2 CH 2 Uki 2 _Cki (CH 3)2 0 OH 1 1 ) H-C-N-CH -CH-CONH-CH 2 -CO 2 H un -L;n j un 2 3 2 86) -CH 2-0-NH-CO-CH-CONH-CH 2-CO 2 CH 2 _ Uki 2-u H(CH 3)2 87) HONH-CO-CH-CONH-CH 2-CO 2 H %.n 2-CH(CH 3)2 82. 4 Dérivés selon la revendication 3, choisis parmi les suivants: 73 Médicament ayant notamment des activités inhibitrices de l'enképhalinase, antalgique, antidé- pressive, antidiarrhéique et hypotensive, caractérisé en ce qu'il contient à titre de principe actif un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4. 6 Médicament selon la revendication 5, carac- térisé en ce qu'il est présenté sous une forme appro- priée pour l'administration orale, parentérale ou rectale, le principe actif étant associé à un véhicule thérapeutique convenable. 7 Médicament selon l'une quelconque des reven- dications 6 à 7, caractérisé en ce qu'il est présenté sous forme de doses unitaires contenant de 0,5 à 100 mg de principe actif.