FR 2523583 A1 19830923 FR 8304499 A 19830318 La présente invention concerne un procédé pour la synthèse de 6 '-alkylspectinomycines et de leurs analo- gues, ainsi que des composés intermédiaires utilisés dans le procédé L'invention se rapporte également à certains analogues d'alkylspectinomycines qui déploient une acti- vité antibactérienne particulièrement bonne. La spectinomycine A est un antibiotique connu qui a été préparé d'abord par un procédé microbiologique (voir brevet des Etats-Unis d'Amérique N O 3 234 092). Certains analogues de la spectinomycine sont décrits par Rosenbrook Jr et collaborateurs dans J. Antibiotics, 28, pages 953 et 960 ( 1975) et J Antibiotics, 31, page 451 ( 1978) En outre, Carney et collaborateurs décrivent des dérivés chlorodésoxy de spectinomycine dans J Antibiotics, 30, 960 ( 1977) De plus, la 9-épi-4 (R)- dihydrospectinomycine est rapportée par Foley et collabo- rateurs dans J Org Chem, 43, 22, pages 4355-4359 ( 1978). Toutefois, aucune activité biologique n'est mentionnée pour l'un quelconque des analogues de spectinomycine et de leurs dérivés décrits dans les références précitées. Lemieux enseigne dans Can J Chem, 51, page 53 ( 1973) une réaction préférentielle au niveau du groupe 5-hydroxyle de la 2-déoxystreptamine ( 1) avec le chlorure de tri-O-acétyl-2-désoxy-2-nitroso-a-D-glyco- pyrannosyle ( 2) pour former un a-pseudodisaccharide dans lequel C Bz est le groupe carbobenzyloxy Mallams et collaborateurs, dans J Chem Soc Perkin I, page 1118 ( 1976), étendent la réaction de Lemieux à la synthèse de di et tri-saccharides. L'élimination d'oximes est enseignée par Lemieux et collaborateurs dans Can J Chem 51, page 19 ( 1973) et Mallams et collaborateurs dans J Chem Soc Perkin I, page 1097 ( 1976). Hannessian et collaborateurs ( 1979) décrivent une synthèse chimique de spectinomycine. White et collaborateurs décrivent dans Tetrahedron Letters, de Juillet 1979, une synthèse chimique de la spec- tinomycine et de ses analogues La même synthèse est décrite 2-23583 dans la demande de brevet des Etats-Unis d'Amérique N 150 530 déposée le 26 Mai 1980, qui est une continua- tion de la demande de brevet des Etats-Unis d'Amérique N 020 172 déposée le 3 Mars 1979, à présent abandonnée. Les demandes de brevets des Etats-Unis d'Amérique N 285 164 et N 285 165, déposées toutes deux le Juillet 1981, font connattre des procédés de prépara- tion d'analogues de 6 '-méthylspectinomycines et des com- posés intermédiaires utilisés dans les procédés. La demande de brevet des Etats-Unis d'Amérique N 312 035 déposée le 16 Octobre 1981 décrit un procédé de déméthylation de spectinomycine ou de ses analogues et de réalkylation des composés intermédiaires, et la demande de brevet des Etats-Unis d'Amérique N 314 261 déposée le 23 Octobre 1981 fait connaître des analogues de spectinomycine dans lesquels des modifications ont été effectuées en position 3 '. Conformément à l'invention, une diénone est convertie en une grande variété d'analogues de 6 '-alkyl- spectinomycines par une réaction de Grignard catalysée au cuivre La séquence utilise plusieurs composés inter- médiaires très divers L'invention implique une modifi- cation au niveau de l'atome C-6 ', effectuée au moyen d'un énone-acylate. Plus particulièrement, l'invention propose un procédé de préparation de composés de formule I qui im- plique l'utilisation d'un énone-acylate VII comme matière de départ Le procédé peut être représenté et illustré par la séquence réactionnelle du schéma I o R est l'hydro- gène ou un groupe alkyle, R 1 à R 9 sont choisis dans le groupe comprenant l'hydrogène, un reste alkyle inférieur, un reste alcényle inférieur et un reste alcynyle infé- rieur; R'2, R'3, R' et R'7 sont choisis dans le groupe comprenant un reste alkyle inférieur, alcényle inférieur, alcynyle inférieur et un groupe protecteur choisi entre les groupes aralkoxycarbonyle, alkoxycarbonyle halogénés et alkoxycarbonyle; sous réserve que l'un de R 2 et R 3 soit toujours l'hydrogène et que l'un de R 6 et R 7 soit toujours l'hydrogène et sous réserve, en outre, que l'un de R'2 et R'3 soit toujours un groupe protecteur et que l'un de R'6 et R'7 soit toujours un groupe protecteur; R 10 est un groupe acyle A est choisi entre l'oxygène et le soufre et B et B 1 sont égaux ou différents et sont choisis dans le groupe comprenant de l'hydrogène et les restes hydroxy, alkoxy, 0-alcényle inférieurs, thio, thio-alkyle inférieurs et thio-alcényle inférieurs. Certains des composés intermédiaires et des procédés entre VI et I sont décrits dans les demandes de brevets des Etats-Unis d'Amérique N 020 073 et Né 285 164 déposées, respectivement, le 13 Mars 1979 et le 20 Juillet 1981. Le numérotage des atomes de carbone indiqué pour le composé I sera utilisé pour tous les commentaires con- cernant ce composé dans le présent mémoire. Les composés préparés par le procédé de l'inven= tion comprennent les formes hydratées des composés de formule I Ces composés sont hydrates en position 3 ' et répondent à la formule I', dans laquelle A, B, Bl et R 1 à R 10 ont les mêmes définitions que ci-dessus L'invention couvre également les sels pharmaceutiquement acceptables des composés de formules I et I'. L'expression "alkyle inférieur" désigne les groupes méthyle, éthyle, propyle, butyle, pentyle, hexyle, heptyle, octyle et leurs formes isomères. L'expression "alcényle inférieur" désigne les groupes éthényle, propényle, butényle, pentényle, hexényle, heptényle, octényle et leurs formes isomères. L'expression "alcynyle inférieur" désigne les groupes éthynyle, propynyle, butynyle, pentynyle, hexynyle, heptynyle, octynyle et leurs formes isomères. Le terme "acyle" désigne les groupes formyle, acétyle, propionyle, butyryle et pentanoyle. L'expression "alkoxycarbonyle halogéné" désigne les groupes mono-, di et tri-halogénométhoxycarbonyle; mono-, di et tri-halogénéthoxycarbonyle; mono-, di et tri-halogénopropoxycarbonyle; mono-, di et tri-halogéno- butoxycarbonyle; mono-, di et tri-halogênopentoxycar- bonyle et leurs formes isomères. Le terme "halogéno" désigne les radicaux fluoro, chloro, bromo et iodo. Le terme "aralkoxycarbonyle" désigne les radicaux benzyloxycarbonyle, phényléthoxycarbonyle, phénylpropoxy- carbonyle, diphényloctoxycarbonyle et leurs formes iso- mères et fluorénylméthoxycarbonyle. Le terme "alkoxycarbonyle" désigne les groupes isopropyloxycarbonyle, tertio-butyloxycarbonyle et tertio- pentyloxycarbonyle. Le terme alkyle désigne un groupe alkyle contenant 1 à 20 atomes de carbone, tant à chaine droite qu'à chaine ramifiée. Il y a lieu de remarquer que dans le présent mémoire, lorsqu'il y a plus d'un groupe hydroxy ou alkoxy présent sur la portion sucre, ces groupes peuvent être égaux ou différents. L'invention concerne également les composés inter- médiaires II', III et IV nouveaux La diénone IV est un accepteur de Michael très polyvalent; il s'agit d'un excellent composé intermédiaire en vue de la modifica- tion. Le terme "a-anomère" désigne un substituant en position 1 ' situé au-dessous du plan du noyau et le terme "l-anomère" désigne des anomères qui ont la configuration au niveau de l'atome C-1 ' correspondant à la spectinomy, cine. Des composés préparés par le procédé de l'inven- tion qui déploient une activité biologique avantageuse sont les eanomères du composé I Cette configuration glycosidique s'observe dans la spectinomycine représentée sur le schéma 1. Dans l'étape 1, l'énone-acylate VII est amené à réagir avec le diméthylacétal du diméthylformamide dans un solvant pour former l'énamine VI La plage de la tempé- rature de réaction va généralement de 25 C à la température de reflux, avantageusement de 40 à 80 C La durée de réac- tion peut aller de 1 heure à 48 heures, notamment de 2 heures à 10 heures Le diméthylacétal du diméthylforma- mide est utilisé en excès La durée de réaction préconisée est de 7 heures et le solvant de choix est le diméthyl- formamide On peut aussi utiliser d'autres acétals du diméthylformamide, tels que le di-tertio-butylacétal. L'énone-acétate de départ et les procédés per- mettant de l'obtenir sont décrits dans la demande de brevet des EtatsUnis d'Amérique N 150 530 déposée le 16 Mai 1980. L'énamine peut être isolée du mélange par des opérations classiques telles qu'extraction, chromatogra- phie et des combinaisons de ces opérations. Dans l'étape 2, la réduction de la chatne laté- rale de l'énamine VI est effectuée dans des conditions classiques d'utilisation d'un cyanoborohydrure pour obte- nir l'amine V L'amine peut être isolée du mélange réac- tionnel par des opérations classiques telles qu'extrac- tion, chromatographie et leurs combinaisons. L'étape 3 implique la réaction de l'amine V avec un halogénure d'alkyle en présence d'un solvant pour former la diénone IV La réaction peut être conduite à une température d'environ O à environ 100 pendant une période d'environ 1 heure à environ 30 heures et en uti- lisant un excès d'iodure de méthyle La température de réaction et la durée préconisées sont de 20 à 40 C et de 1 à 20 heures Les solvants que l'on peut utiliser comprennent le chlorure de méthylène, le chloroforme, le tétrahydrofuranne et l'éther Le solvant préconisé est le chlorure de méthylène. Une variante opératoire appréciée pour la con- duite de l'étape 3 implique la réaction de l'amine V avec l'acide métachloroperbenzoique dans un solvant pour former la diénone IV On peut conduire la réaction à une tempé- rature d'environ -20 à 50 pendant une période d'environ 1 à environ 60 minutes Les températures et les durées de réaction préconisées sont de 20 à 30 C et de 5 à minutes Les solvants que l'on peut utiliser compren- nent le mélange acétate d'éthyle/'Ske'lysolve -e", le tétra- hydrofuranne, le dioxanne et le chlorure de méthylène Le solvant de choix est le mélange d'acétate d'dthyle et de "Skellysolve B". Dans l'étape 4, la diénone IV est amenée à réagir avec un réactif de Grignard en présence d'un catalyseur au cuivre pour former le composé III Cette réaction est conduite avec un solvant à une température d'environ -130 à O C pendant une période d'environ 1 minute à 2 heures. Les plages préconisées de températures et de durées de réaction vont de 78 à -50 o et de 1 minute à 10 minutes, respectivement Des solvants que l'on peut utiliser com- prennent l'éther diéthylique, le 1,2-diméthyléthane, le tétrahydrofuranne et l'éther de diisopropyle Le solvant de choix est le tétrahydrofuranne. Dans l'étape 5, l'énone III est soumise à une réduction pour former une 6 '-alkylspectinomycine II pro- tégée Il s'agit là d'une opération très critique du procédé, pour diverses raisons Il est très difficile de réduire la double liaison 4 ',5 ' sans réduire le groupe carbonyle en position 3 ' Des catalyseurs au palladium, par exemple 10 % de palladium fixé sur du sulfate de baryum (palladium ionique, catalyseur brun> peuvent être utilisés avec un succès partiel, comme décrit ci-dessus, mais les groupes protecteurs, notamment les groupes carbo- benzyloxy, sont éliminés, en sorte que le problème de séparation est rendu plus difficile En outre, les cata- lyseurs au palladium ne fonctionnent pas bien dans le cas d'analogues qui présentent des chaînes latérales de sucre hautement substituées En conséquence, on préfère l'oxyde de platine en présence d'un solvant et d'une base. Un second avantage important réside dans le fait que les groupes protecteurs restent, en sorte que les pro- duits peuvent être purifiés par chromatographie avant l'utilisation de l'un des divers procédés d'élimination des groupes protecteurs On conduit la réaction par dissolution de l'énone III dans le solvant, addition de la base, d'oxyde de platine, puis mise en contact du mélange avec de l'hydrogène La réduction est conduite à une tempéra- ture d'environ 20 à 40 pendant une période d'environ 1 à 4 heures Des températures et des durées de réaction préconisées vont, respectivement, de 20 à 400 C et de 2 à 3 heures. Une variante opératoire appréciée pour la con- duite de l'étape 5 implique la réduction de la didéhydro- spectinomycine III en la 6 '-spectinomycine II protégée, par sa réaction avec le "Li-selectride", qui est une solu- tion de tri-sec -butylborohydrure de lithium On conduit la réaction en dissolvant la dihydrospectinomycine III dans un solvant, en ajoutant la solution de lithium, puis la base et l'eau On conduit la réduction à une tempéra- ture d'environ-100 à -10 pendant 5 à 40 minutes Des - températures et des durées de réaction appréciées vont de -78 à -100 C et, respectivement, de 5 à 60 minutes Des solvants que l'on peut utiliser comprennent le tétrahydro- furanne, le dioxanne, le 1,2-diméthoxyéthane et l'éther diéthylique Le solvant de choix est le tétrahydrofuranne. Dans l'étape 6, le composé de formule Il est débarrassé de sa protection en donnant le composé de for- mule I Les conditions particulières d'élimination de la protection dépendent des groupes particuliers, c'est- à-dire du groupe R'2 ou R'3 et du groupe R'6 ou R'7 qui protègent l'amine sur le noyau d'actinamine Lorsque ce groupe est un groupe benzyloxycarbonyle ou aralkoxycar- bonyle, l'élimination de la protection peut être conduite sous pression d'hydrogène allant de -0,07 à + 1,4 M Pa par passage sur un catalyseur classique tel que du noir de palladium, du palladium fixé sur du carbone, du palladium fixé sur du sulfate de baryum ou du palladium fixé sur du carbonate de baryum, en suspension dans un solvant, par exemple l'isopropanol, l'éthanol absolu, le méthanol, l'acétate d'éthyle, le toluène ou le tétrahydrofuranne. La production d'hydrogène in situ à partir d'acide formi- que dans du méthanol est parfois appréciée. A titre de variante, l'élimination de la protec- tion de composés dans lesquels R'2, R'3 et R'6 ou R'7 sont des groupes alkoxycarbonyle ou aryloxycarbonyle peut être conduite en présence d'un acide dans un solvant tel que le nitrométhane et le chlorure de méthylène. Lorsque R'2 ou R'3 et R'6 ou R'7 représentent des groupes halogénalkoxycarbonyle, l'élimination de la protection est avantageusement conduite en présence de zinc. Un procédé particulièrement efficace pour pré- parer le composé de formule VI est illustré par le schéma II. L'étape 1 implique la réaction de la N,N'-dibenzyl- oxycarbonylspectinomycine (JACS 85, 2652, 1963) avec l'acide formique en présence d'anhydride d'acide acétique, d'acétate d'éthyle et de pyridine On conduit la réaction à une température d'environ -70 à 10 pendant une période d'environ 0,5 à 30 heures en présence d'un solvant La plage de températures préconisée va d'environ -40 à O et la durée de réaction préconisée va d'environ 10 à 18 heures Des solvants que l'on peut utiliser comprennent l'acétate d'éthyle, le tétrahydrofuranne, le chlorure de méthylène, le chloroforme et le 1,2-diméthyldthane Le solvant de choix est l'acétate d'éthyle L'étape 1 donne un composé de formule IX. Dans l'étape 2, le composé de formule IX est amené à réagir avec l'anhydride d'acide acétique et une base pour former un composé de formule VIII On conduit la réaction en l'absence ou en présence d'un solvant, à une température d'environ 20 à 90 et de préférence de à 70 C, pendant une période d'environ 2 à 30 heures, notamment de 10 à 20 heures Des solvants que l'on peut utiliser comprennent l'acétate d'éthyle, le tétrahydro- furanne, le 1,2-diméthyloxyéthane et le chloroforme Le solvant de choix est l'acétate d'éthyle. Dans l'étape 3, le composé VIII est exposé à un traitement à la lumière en présence de dibromodiméthyl- hydantoine pour engendrer un groupe carbonyle en position C 3 sous la forme d'un composé de formule VII On conduit la réaction à une température d'environ 10 à 1000, de préférence de 40 à 80 et pendant une durée de réaction de 2 à 60 minutes, avantageusement de 10 à 20 minutes. Cette opération engendre également une insaturation en positions 4,5. Dans l'étape 4, le composé de formule VII est amené à réagir avec l'acétal du diméthylformamide en présence de diméthylformamide, et le produit est amené à réagir avec du méthanol ou de l'eau pour former un com- posé de formule VI L'étape 4 est conduite à une tempé- rature d'environ 30 à 90 , avantageusement de 40 à 70 et pendant une période d'environ 2 à 6 heures, notamment 3 à 5 heures Chacun des produits préparés dans les étapes ci-dessus peut être isolé du mélange réactionnel par des moyens classiques. Tout procédé connu dans l'art antérieur peut être utilisé pour isoler un analogue ou un mélange astéri- que d'un composé de formule I, et les procédés indiqués dans le présent mémoire sont considérés comme non limitatifs. Si l'isolement est conduit dans des conditions anhydres, on obtient des composés portant un groupe carbonyle en position 3 ' (formule I) Si on le conduit dans des condi- tions aqueuses, on peut obtenir des composés hydratés en position 3 ' (formule I'), à l'exclusion des composés VII et VI qui ne s'hydratent pas. Les analogues bruts peuvent être purifiés par adsorption sur une colonne d'une résine d'échange ionique faiblement acide telle que la résine Amberlite IRC-50 ou CG-50, suivie d'une élution avec un solvant tel que l'eau, le méthanol, l'éthanol, l'éther, le tétrahydrofuranne, le 1,2diméthoxyéthane ou le p-dioxanne contenant de l'acide chlorhydrique, bromhydrique, iodhydrique ou sul- furique. Des sels acides peuvent être obtenus par neutra- lisation de composés de formule I avec l'acide approprié à un p H inférieur à 7,0 et, avantageusement, à un p H d'en- viron 2 à 3 Des acides qui conviennent à cette fin come prennent les acides chlorhydrique, sulfurique, phosphori- que, sulfamique, bromhydrique, etc Des sels d'acides et de bases des composés peuvent être utilisés aux mêmes fins biologiques que le composé lui-même. Les composés de formule I inhibent le développe- ment de micro-organismes dans divers milieux Par exemple, des composés de formule I ayant la configuration 3 sont actifs contre Escherichia coli et peuvent être utilisés pour réduire, arrêter et interdire la production d'un mucilage dans des circuits de fabrication du papier, par suite de leur action antibactérienne contre ce micro- organisme Ces B-anomères peuvent aussi être utilisés pour prolonger la vie de cultures de Trichomonas foetus, Trichomonas hominis et Trichomonas vaginalis en les débarrassant d'une contamination par Escherichia coli. De plus, des e-anomères sont actifs contre Bacillus subtilis et on peut donc les utiliser pour minimiser ou supprimer l'odeur du poisson ou de caisses à poisson sous l'effet de cet organisme Les 9-anomères peuvent aussi être utilisés pour le nettoyage des paillasses et du matériel dans un laboratoire de mycologie Des B- anomères sont également efficaces contre Klebsiella pneumoniae. Les composés de formule I sont également effi- caces pour le traitement d'infections bactériennes telles que la gonorrhée chez les mammifères, ainsi que chez l'homme. Des composés qui présentent une bonne activité antibactérienne correspondante sont des composés de for- mule I, dans laquelle R' est un groupe alkyle à chatne droite, cyclique ou à chaîne ramifiée, dont la plus longue extension de chaine ou de système cyclique contient 1 à 4 atomes de carbone; des exemples de R' comprennent les groupes éthyle, propyle, isopropyle, butyle, tertio-butyle et cyclohexyle La 6 '-n-propylspectinomycine, la 6 '-n- butylspectinomycine et la 6 '-pentylspectinomycine sont des agents antibactériens particulièrement puissants. il Les compositions de la présente invention sont présentées en vue de leur administration à des êtres humains et à des animaux sous des formes posologiques unitaires telles que solutions ou suspensions parentérales stériles, gouttes ophtalmiques et émulsions du type eau- dans-huile contenant des quantités convenables du composé de formule I. En vue d'une administration parentérale, des formes posologiques unitaires liquides sont préparées au moyen du composé et d'un véhicule stérile, l'emploi de l'eau étant préconisé Le composé, selon le véhicule et la concentration que l'on utilise, peut être en sus- pension ou en solution dans le véhicule Dans la prépara- tion de solutions, le composé peut être dissous dans l'eau en vue de son injection et stérilisé par filtration avant l'introduction dans une fiole ou une ampoule convenable - qui est ensuite scellée On peut avantageusement dissoudre dans le véhicule des adjuvants tels qu'un anesthésique local, un préservateur et des tampons Pour améliorer la stabilité, on peut congeler la composition après son introduction dans la fiole et chasser l'eau sous vide. La poudre sèche lyophilisée est ensuite enfermée dans la fiole et une fiole d'eau pour injectables est fournie en même temps pour reconstituer le liquide avant l'usage. On peut préparer une suspension parentérale de manière pratiquement identique,à la différence que le composé est mis en suspension dans le véhicule au lieu d'être dissous et qu'une stérilisation ne peut pas être effectuée par filtration On peut stériliser le composé par exposition à l'oxyde d'éthylène avant la mise en suspension dans le véhicule stérile Un agent surfactant ou mouillant est avantageusement inclus dans la composition pour faciliter la distribution uniforme du composé. L'expression "forme posologique unitaire" utilisée dans le présent mémoire se réfère à des unités physique- ment distinctes qui conviennent comme doses unitaires pour des êtres humains et des animaux, chaque unité contenant une quantité prédéterminée de substance active calculée de manière à produire l'effet thérapeutique désiré en asso- ciation avec le diluant, le support ou le véhicule pharma- ceutique exigé Les spécifications concernant les nouvelles formes posologiques unitaires de l'invention sont dictées par des critères dont elles dépendent directement, à savoir (a) les caractéristiques remarquables de la substance active et l'effet particulier à obtenir et tations inhérentes au mode de formulation d'une telle substance active en vue de son administration à des êtres humains et à des animaux, comme décrit dans le présent mémoire, conformément à la présente invention Des exemples de formes posologiques unitaires convenables, conformément à l'invention, comprennent des ampoules, des fioles, des aérosols déchargeant des quantités mesurées, des multiples groupés de toutes les formes indiquées ci-dessus, ainsi que d'autres formes comme décrit dans le présent mémoire. Une quantité efficace du composé est utilisée dans un traitement La posologie du composé pour le trai- tement dépend de nombreux facteurs qui sont bien connus de l'homme de l'art Ils comprennent, par exemple, la voie d'administration et la puissance du composé particulier. Pour des êtres humains, une dose allant d'environ 2 à en- viron 4000 mg de composé en une seule prise, administrée par voie parentérale ou dans les compositions de l'inven- tion, est efficace contre des infections bactériennes. Plus particulièrement, la dose individuelle va de 5 à environ 200 mg de composé. Les Préparations, décrites ci-après, d'analogues de spectinomycine et de composés intermédiaires utiles à leur préparation, sont données afin d'illustrer à titre non limitatif le cadre de la présente invention L'homme de l'art reconnaltra rapidement les variantes opératoires tant dans les analogues que dans leurs précurseurs dans le cadre de la définition des composés nouveaux ainsi que des conditions réactionnelles et des techniques de mise en oeuvre du procédé de l'invention. Par exemple, pour chacune des Préparations et pour chacun des Exemples qui suivent, on considère que le stéréo-isomère correspondant à chaque composé nommé entre dans le cadre de la présente invention. Préparation 1: N,N'-dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-formylspectinomycine On charge dans un ballon de 5 litres équipé d'un agitateur et d'un thermomètre, 1,33 litre d'acétate d'éthyle et 255 ml d'acide formique à 97 % On ajoute 618 ml d'anhy- dride acétique en refroidissant avec un mélange de neige carbonique et d'acétone de manière que la température se tienne en dessous de -40 C On ajoute lentement 1,09 litre de pyridine de manière que la température soit égale à environ -40 C On ajoute 100 g de N,N'-dibenzyloxyspecti- nomycine et on laisse le bain de refroidissement se ré- chauffer à la température ambiante sans interrompre l'agi- tation pendant environ 16 heures On dilue la solution avec 1,65 litre d'acétate d'éthyle, on la lave avec 5 fofs 675 ml d'acide chlorhydrique 0, 5 N, 2 fois 675 ml d'eau, 2 fois 675 ml de bicarbonate de sodium aqueux à 10 % et 2 fois 175 ml de solution saturée de sel Par déshydra- * tation et concentration de la phase organique, on obtient g de N,N'-dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-formylspecti- nomycine. RMC (d 6-acétone): 201,6, 161,4, 161,0, 157,1, 13,6, 129,1, 128,4, 128,1, 97,1, 92,1, 73,7, 71,7, 68,3, 67,7, 67,6, 65,9, 56,1 ppm - En utilisant un mode opératoire semblable à la Préparation 6, mais en remplaçant la N,N'-dibenzyloxy- spectinomycine par la N,N'-dibenzyloxyspectinomycine convenablement substituée, on obtient les di-O-formyl- spectinomycines des tableaux I et II. 4 " 523583 1 4 TABLEAU il 0 il O = -Ri CBZ N H 3 C H Ri CH 3- c 2 HS- C 3 H 7- CAFH 9- CSHII- Ca Hi 1- CH 2-Cli- CH=C- CH 3- C 21 îs- C 3 H 7- CJ 4 g- 4 H Il- Caliii- CH 2-CH- Cli-=C- 1 5 TABLEAU II H 011 % O CBZ /N *% H 3 c HIL,0 -,NI% H Yc csz is Rl =R CH 3- C 2 H 5- C 3 H 7- C 4 H 9- Cs Hl 1- Ce Hl 1- CH 2 =CH- Cfi=-C- CH 3- C 2 H 5- c 3 H 7- C 4 H,9- C 5 H,1- C 8 Hll- CH?-CH- CHEC- Préparation 2 Enol-acétate de N,N'-dibenzyloxycarbonvl-2,6-di-O-formyl- 2 '-O-acétylspectinomycine On ajoute 7,0 g de N,N'-dibenzyloxycarbonyl-2,6- di-O-formylspectinomycine, 15,0 ml d'anhydride acétique, ,0 ml de pyridineet 0,5 g de diméthylaminopyridine à ml d'acétate d'éthyle contenu dans un ballon de 250 ml et on chauffe à 55 pendant environ 16 heures On dilue le mélange réactionnel à l'acétate d'éthyle ( 500 ml) et à l'hexane ( 500 ml) et on l'extrait avec trois fois 1 litre et 1 fois 0, 5 litre d'acide chlorhydrique 0,6 N, puis 2 fois 500 ml de bicarbonate de sodium saturé et 2 fois 500 ml de solution saturée de sel On déshydrate la phase organique sur du sulfate de sodium et on la concentre, ce qui donne 7,0 g d'énol-acétate de N,N'-dibenzyloxy- carbonyl-2,6-di-O-formyl-2 '-O-acétylspectinomycine. RMC (d 6-acétone): 168,9, 167,7, 161,4, 161,0, 157,1, 139,9, 137,8, 129,1, 128,4, 128,2, 128,1, 122,8, 94,7, 92,2, 74,1, 71,3, 69,1, 67,6, 67,2, 56,3, 55,5, 31,4, 30,7, 21,1, 21,0, 20,7 ppm. En utilisant un mode opératoire analogue à la Préparation 2, mais en remplaçant la N,N'-dicarbobenzyloxy- carbonyl-2,6-di-O-formylspectinomycine par la 2,6-di-O- formyl-2 '-O-acétylspectinomycine convenablement substituée, on obtient les énamines des tableaux III et IV. 1 7 TABLEAU III CBZ Ri N O O- H 3 C H O Rs O Rio O Rio N H 3 c CBZ RI Rs Ai O CH 3 CH 3 CH 31- O. C 2 H 5 C 2 H,5 CH 3 c- n-C 3 H 7 n-C 3 H 7 CH 3 c- as n-C 4 HS n-C 4 H 9 CH 31- n-C 8 H 17 n-Ce H 17 CH 3 c- CH 2-Oi CHZ-CH CH 3 c- O CH=-C CH=-C CH 3 c- H H CH 3 c- il H H CH 3 c- m H H ÈH 3 CH 2 C- el'ra Ainq Des a L, uoldoidosl 0 01 -H -H -De HD'HJ il -DEH 3 0 Il -DEHJ m -J'HJ 0 Il -j'Hi m -D'HJ 0 Il -DúHD m -DúHD -D'HD m -3 % 0 Il 0 r - -H -H -H -D=H:) -HD=ZHJ -LINOD-U -6 Hlj-U -LHED-La -SHZJ Ha -H -H -H -De Hi HDMZFID -ZliiD-tà -6 Hb-u -LHEJ-U -séi -úHi li Sú si ZRD 31 H 1. e N 0 L il 8 N\ Z 93 AI nlrdrlúIVI 6 L ú 8 súzsz il H H CH 3 (CH 2)2 C- H H CH 3 (CH 2)211 c- H H CH 3 (CH 2)2 c- O H H CH 3 (CH 2)2 c-0 O H H CH 3 (CH 2)3 c- H H Isopropionyle H H sec -butyryle H H tertio-butyryle Préparation 3: N,N'-dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-formyl-2 '-O-acétyl-4 ',5 '- didéhydrospectinomycine On dissout 5,26 g d'énol-acétate de N,N'-dibenzyl- oxycarbonyl-2,6-di-O-formyl-2 '-O-acétylspectinomycine dans du tétrachlorure de carbone ( 75 ml) et on ajoute 1,05 g de dibromodiméthylhydantolne On chauffe la solution au reflux en utilisant la lumière visible comme initiateur. Au bout de 20 minutes, on refroidit la solution, on la dilue avec 200 ml de chloroforme et 100 ml d'eau On sépare les phases et on lave la phase organique-avec ml de chlorure de sodium aqueux On déshydrate la phase organique sur du sulfate de sodium et on la concentre pour obtenir 5,65 g de N,N'-dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O- formyl-2 '-O-acétyl-4 ',5 '-didéhydrospectinomycine. RMC (d 6-acétone): 182,4, 173,4, 170,0, 161,6, - 161,0, 157,0, 137,6, 129,2, 128,6, 128,2, 103,4, 95,7, 93,1, 73,7, 72,1, 67,8, 66,9, 56,1, 55,7, 31,8, 30,6, 21,0 ppm. En utilisant un mode opératoire analogue à la Préparation 3, mais en remplaçant la N,N'-dicarbobenzyloxy- carbonyl-2,6-di-O-formylacétylspectinomycine par l'énol- acétate convenablement substitué, on obtient les 4 ',5 '- didéhydrospectinomycines des tableaux V et VI. TABLEAU V CBZ \ H:e/ N Il 1 %. H IC CBZ li O CH 3 c- CH 3 c- Il CH 3 c- CH 3 c-Il CH 3 c-w CH 3 c- CH 3 C- CH 3 c-0 CH 3 c-Il CH 3 CH 2 c-Il CH 3-. c 2 HS- n-C 3 H 7- n-C 4 H'3- rr-COH 17- CH 2-CH- CH=-C- H- H- CH 3- C 2 HS- n-C 3 H 7- n-C 4 HS- n-c 8 H 17- CH 2-CH- ai=-C- H- H- H- Il H H CH 3 (CH 2)2 c- O H H CH 3 (CH 2)2 é- H H- CH 3 (CH 2)2 c- H H il CH 3 (CH 2)2 C- O H H CH 3 (CH 2)3 "c- H H 1 so pro pi onyle H H sec -butyryle H H tertio-butyryle TABLEAU VI 0 O Csz R H N H 3 C H O Rs O Rjo N H 3 C CBZ R, Rç Ri O cue c Hr CH 3 Co- CZH 5 c 2 H 5 c Haco- n-Câ 47 n C 3 H 7 CH 3 =- n-CHq n-c 4 HS c Haco- n-C 8 H 17 n-c 8 H 17 CH 3 CO- CH 2 m CH* CH 2-CH cco- cji=-C CH=-C C Haco- H H CH 3 CO- H H CH,3 w- H H CH 3 CH 2 CO- H H CH 3 (CH 2)2 CO- H H CH 3 (CH 2)2 ÉO- H H CH 3 (CH 2)2 CO- H H CH 3 (CH 2)2 O- H H C Ha(CH 2)3 CO- H H 1 so pro pi onyle H H sec butyryle H H tertio-butyryle Préparation 4: N,N'-dicarbobenzyloxy-2 '-O-acétyl-6-/-(diméthylamino)- méthylène 7-4 ',5 '-didéhydrospectinomycine Une solution de 22,00 g ( 34,4 mmoles) de N,N'- dicarbobenzyloxy-2 '-O-acétyl-4 ',5 '-didéhydrospectinomycine et de 100 ml de diméthylacétal de diméthylformamide dans ml de diméthylformamide est agitée pendant 7 heures à -55 C sous protection de "Drierite" La solution brune est concentrée sous vide et le résidu est chromatographié sur 250 g de gel de silice qui a été mis en place à l'état humide dans un entonnoir de 2 litres à verre fritté Le mélange est élué avec 5 % d'acétonitrile dans du chloro- forme ( 2 litres), 7 % ( 3 litres), 33 % ( 3 litres), 50 % ( 6 litres) en une période d'une heure et demie On recueille des fractions d'un demilitre Les fractions sont évaluées par chromatographie sur couche mince (acétonitrile dans - le chloroforme à 1/1) et rassemblées de manière à donner 19,78 g de N,N-dicarbobenzyloxy-2 '-O-acétyl-6-/-(diméthyl- amino)méthylène_ 7-4 ',5 '-didéhydrospectinomycine pure et 3,30 g de N,N-dicarbobenzyloxy-2 '-O-acétyl-6-/-(diméthyl- amino)méthylène_ 7-4 ',5 ' -didéhydrospectinomycine contenant un peu de DMF (diméthylformamide) La dernière fraction a été rechromatographiée comme ci-dessus (mais en utili- sant 60 g de gel de silice) en donnant 2,75 g de N,N- dicarbobenzyloxy-2 '-O-acétyl-6-/ (diméthylamino)méthylène 7- 4 ',5 '-didéhydrospectinomycine pure Le rendement total est de 22,53 g (rendement 94 %). CD(CH 30 H)_/ 7311 nm 10 400 + 1200, / 7285 - 2500 + 1200, re_ 7246 1200 + 1200. Spectre infrarouge (suspension épaisse): 3380, 1750, 1695, 1675 ép, 1600, 1555, 1500, 1385, 1350, 1280, 1240, 1195, 1185, 1145, 1110, 1085, 1065, 1025, 1000, 960, 770, 740, 645 cm 1. RMP (CDC 13): 2,13 ( 3 H, s), 2,82 ( 3 H, s), 2,89 ( 6 H, large s), 2,91 ( 3 H, s), 5,10 ( 4 H, large s), 5,16 ( 1 H, s), ,97 ( 1 H, s), 7,306 ( 10 H, s). RMC (CD 3 COCD 3): 20,9, 31,2, 31,5, 30-44 large, 36,3, 59,6, 66,2, 67,3, 74,6, 75,4, 88,7, 94,9, 95,0, ,1, 95,5, 128,3, 129,1, 137,9, 138,0, 150,3, 157,2, 157,7, 163,3, 169,8, 171,2, 180,3 ppm. Spectre de masse, m/c (di TMS): 839 (M+), 824, 797, 779, 730, 668 Comparaison des pics: calculé = 839,3480; trouvé = 839,3466. En utilisant des modes opératoires analogues à la Préparation 4, mais en remplaçant la N,N'-dicarbo- benzyloxy-2 '-O-acétyl-4 ',5 '-didéhydrospectinomycine par l'énoneacétate convenablement substitué, on a obtenu les énamines des tableaux VII et VIII. TABLEAU VII CBZ H CH 3 N O O N le l Ol CH 3 H 3 c -10 O ORI O N HIC CBZ B RIO HO CH 3 c- CH 30 HO CH 3 c- C 2 H 50 Ho CH 3 c N- us HO CH 3 c- CH 3 S Ho CH 3 c- C 2 H 5 S Ho CH 3 c- il m O H Ho CH 3 C- Il H CH 3 c- Ho CH 30 CH 3 C- C 2 H 50- Hs- CH 35- C 2 H 55- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- 0- CH 3 c-il CH 3 c-tg CH 3 c-it à O CH 3 CH 2 c- CH 3 (CH 2)2 c- CH 3 (CH 2)2 c- a CH 3 (CH 2)2 C- *CH 3 (CH 2)2 C- C Ha(CH 2)a-c_ Isopropionyle sec -butyryle tertio-butyryle Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- TABLEAU VIII CBZ B H CH 3 w-,m O H 3 c CH, BI O Rio lu N HIC CB 2 Rio is O HO HO CH 3 c- a CH 30 HO CH 3 c- c 2 HSO HO CH 3 c- Hs HO CH'Ic- cs HO CH 3 c- O CHSS HO CH 3 c- H HO CH 3 c- Ho H CH 3 co- HO CH 30 CH 3 c-Il HO c 2 H 50 CH 3 c-Il O HO H CH 3 c-M -0 HO CH 3 S CH 3 c- A 523583 Il HO C 2 H 5 S CH 2 CH 2 C- II HO HO CH 2 CH 2 C- O I HO HO CH 3 (C Hz)2 C- t' HO CH 3 (CH 2)2 C- o I HO HO CH 3 (CH 2)3 C- HO HO CH 3 (CH 2)3-C- HO HO lsopropionyle HO HO secrbutyryle HO HO tertio-butyryle Préparation 5: N,N'-dicarbobenzyloxy-2 '-O-acétyl-6-/-(diméthylamino)- méthylène 7-4 ',5 '-didéhydrospectinomycine On dissout 5,50 g de N,N'-dibenzyloxycarbonyl- 2,6-di-O-formyl-2 '-O-acétyl-4 ',5 '-didéhydrospectinomycine dans du diméthylformamide ( 39,0 ml) et on ajoute du diméthyl- acétal de diméthylformamide ( 36,0 ml) Après chauffage à -60 pendant 4 heures, on ajoute 36 ml de méthanol et on continue de chauffer à 55-60 pendant 3 heures On reprend le résidu dans du chloroforme ( 15 ml) et on charge la solution sur du gel de silice ( 200 ml) dans un filtre. Le produit est séparé par lavage, après le DMF restant, par élution avec du chloroforme ( 0,5 litre), de l'acéto- nitrile à 5 % dans le chloroforme ( 0,8 litre), de l'acéto- nitrile à 30 % dans le chloroforme ( 150 ml) et de l'acéto- nitrile ( 1 litre) Les fractions sont rassemblées en don- nant 2,71 g de N,N'-dicarbobenzyloxy-2 '-O-acétyl-6 (di- méthylamino)méthylène_ 7-4 ',5 '-didéhydrospectinomycine. RMC (d 6-acétone): 180,3, 171,2, 169,8, 157,0, ,3, 137,9, 129,0, 128,2, 95,5, ,2, 95,1, 94,8, 88,7, 75,3, 67,3, 66,2, 59,9, 56,7, 41,0, 31,4, 30,7, 21,2 ppm. En utilisant un mode opératoire analogue à la Préparation 5, mais en remplaçant la N,N'-dibenzyloxy- carbonyl-2,6-di-O-formyl-2 '-O-acétyl-4 ',5 '-didéhydro- spectinomycine par la 4 ',5 '-didéhydrospectinomycine con- venablement substituée, on obtient les énamines des tableaux IX et X. TABLEAU IX CBZ E Ri H CH 3 CH 3 R O H O ORIQII N H IC CBZ Ri R Ri O CH 3 CH 3 c Hac- % 20 O c 2 HS c 2 HS %c- n-c 3 H 7 n-C 3117 c Hac- -2 n-C 4 H 9 n-C 4 H 9 c Hac- n-C 8 HI 7 n-C 8 HI-7 CH 3 c- CH 2-CH CHZ-CH CR 3 C- O CH=-C CH-=C CH 3 c-0 H CH 3 c-8 H H CH 3 cn- H H CH 3 CH 2 c- H H CH 3 (CH 2)2 c- H H CH 3 (CH 2)2 c- H H CH 3 (CH 2)2 c- H H CH 3 (CH 2)2 c- O H H CH 3 (CH 2)3 c_M H H lsopropionyle H H sec -butyryle H H tertiobutyryle , c: à, -r 23583 TABLEAU X /CH 1 \CH 3 N , N% H 3 C Caz R._, O CH 3 c-Il CH,3 c-Il CH 3 c-8 CH 3 c-Il CH 3 c-0 CH 3 c-0 CH 3 c-Il CH 3 c- M CH 3 c- il C.H 3 CH 2 C- CH 3 - c 2 H 5- n-C 3 H 7- n-C 4 H 9- n-CH 17- CH 2-CH= .H=-C- H - N - H - C Ha - CZH 5- n-C 3 H 7 - n-C 4 H 9- n-CSH 17- CHZ-CH- CHEC- H - H- H - H H- CH 3 (Cli 2)2 c- H H CH 3 (CH 2)2 co- H H c- CH 3 (CHI)I" H H CH 3 (CH 2)2 c"- H CH 3 (CH 2)3 cm- H 1 so pro pl onyl e H H Se C -butyryle H H tertio-butyryle Préparation 6: N,N'-dicarbobenzyloxy-2-O'-acétyl-6 '-(diméthylaminométhyl)- 4 ',5 '-didéhydrospectinomycine On dissout de la N,N'-dicarbobenzyloxy-2 '-O- acétyl-6 '-/ -(diméthylamino)méthylène 7-4 ',5 '-didéhydro- spectinomycine ( 20,00 g, 28,78 mmoles) et de l'orangé de méthyle ( 5 mg) dans 200 ml de méthanol On ajuste le p H à 4 avec du chlorure d'hydrogène méthanolique 2 N et on ajoute du cyanoborohydrure de sodium par portions en 20 minutes en réajustant fréquemment le p H au moyen de solution méthanolique de chlorure d'hydrogène 2 N Apres l'addition d'un total de 2,00 g ( 31,83 mmoles) de cyano- borohydrure de sodium, on agite la solution pendant encore 1 heure à la température ambiante; la chromato- graphie sur couche mince (méthanol/chloroforme 1:9) montre que la matière de départ a été consommée La solu- tion a été concentrée, puis elle est diluée avec 500 ml d'acétate d'éthyle, 250 ml d'hydroxyde de sodium 0,1 N, ml de Na OH 1,0 N et 250 ml de solution saturée de chlorure de sodium La phase organique est lavée avec une solution saturée de sel ( 200 ml + 100 ml) Les trois phases aqueuses sont lavées successivement à 2 fois 200 ml d'acétate d'éthyle Les extraits organiques sont déshydra- tés sur du sulfate de sodium et concentrés en donnant la N,N'-dicarbobenzyloxy-2-O'-acétyl-6 '-(diméthylaminométhyl)- 4 ',5 '-didéhydrospectinomycine sous la forme d'une mousse ( 17,93 g, rendement 89 %). CD (CH 3 OH) Fe-7321 12 000 + 1100, /F 0-7270 + 1100. UV (C 2 H 5 OH): 273 nm ( 8800), 377 nm (ép) ( 63). RMP (CDCl 3): 2,13 ( 3 H, s), 2,17 ( 6 H, s), 2,46 ( 3 H, s), 3,05 ( 3 H, s), 3,06 ( 3 H, s), 5,05 ( 4 H, d), 5,34 ( 1 H, s), 5,89 ( 1 H, s), 7,26 ( 10 H, d). RMC (CD 3 COCD 3): 20,9, 31,3, 45,, 56,1, 57,1, 61,3, 66,1, 67,3, 74,0, 75,4, 93,7, 96,0, 103,1, 128,3, 129,1, 137,9, 157,2, 170,0, 174,9, 183,1 ppm. Préparation 6 a: N,N'-dicarbobenzyloxy-2,0 '-acétyl-6 '-(diméthylaminométhyl)- 4 ',5 '-didéhydrospectinomycine On mélange 57,0 g ( 78,7 mmoles) de N,N'-dicarbo- benzyloxy-2 '-O-acétyl-6 ' (diméthylamino)méthylène_ 7- 4 ',5 'didéhydrospectinomycine, 450 ml d'acétate d'éthyle et 105 ml de méthanol On ajuste le p H à 4 avec de l'acide chlorhydrique 2 N et on ajoute du cyanoborohydrure de sodium ( 7,3 g) en cinq portions en 5 minutes en effectuant de fréquents réajustements de p H à 4 au moyen d'acide chlor- hydrique 2 N Lorsque l'addition de cyanoborohydrure de sodium est terminée, on maintient le p H à 4 pendant encore minutes La chromatographie sur couche mince (méthanol/ chloroforme 1:9) montre que la matière de départ a été consommée La solution est ensuite mélangée avec de l'eau ( 350 ml) dans de l'hydroxyde de sodium ( 175 ml) et les - phases sont séparées La phase supérieure est épuisée avec 250 ml de solution saturée de sel, et 150 ml de w Skellysolve BU sont ajoutés pour casser l'émulsion Les deux phases aqueuses sont rincées successivement avec 300 ml d'acétate d'éthyle plus 75 ml de "Skellysolve B" et la phase organique totale est déshydratée sur du sul- fate de sodium Le sulfate de sodium est filtré en donnant un filtrat contenant la N,N'-dicarbobenzyloxy-2,O'-acétyl- 6 ' (diméthylaminométhyl)-4 ',5 '-diddhydrospectinomycine. En utilisant des modes opératoires semblables à ceux des Préparations 6 et 6 a, mais en remplaçant la N,N '-dicarbobenzyloxy-2 '-O-acétyl-6 '-/ (diméthylamino)- méthylène 7-4 ',5 '-didéhydrospectinomycine par les précur- seurs formés d'énamines convenablement substituées des tableaux I et II, on obtient les analogues de spectino- mycine protégés des tableaux XI et XII. 2 3 5 8 TABLEAU XI CBZ B H CH 3 N O CP 3 H 3 c ORIO HIIC C Bz B Sa Ri O HO HO C Hac- il CH 30 HO CH 3 c- C 2 H 50 HO CH 3 c- O HS HO CH 3 c- CH 3 S HO CH,3 c_ C 2 H 5 S HO CH 3 c- H HO CH 3 c- HO H CH,3 C- O HO CH 30 CH 3 c- HO C 2 H,50 CH 3 c- HO HS CH 3 c- HO CH 3 S CH 3 c. 9 Tr;nq;Des -OH -OH S a -OH aj Auo d od OS I-OH -OH 0 H O -OH -OHO -DZHD"HD -OH-O O l O 3 ?HDEH 3 -SSHZD -OH I -3 úHj il -DEH 3 Il -DúHD il -DúH:) 0 Il -De Ha 0 Il -DIH 3 0 Il -DúHa a -:)úHa a -:)úHa -:),Hi a -38 HJ -DúHj Il -s'Ha -SH -OSHZD -OIHD -H -OH -on -OH -OH -OH -OH -OH -OH -on -OH -OH -OH -H -55 HZ:) -SúHJ -SR -0,102 -OúHJ -OH si 0 qu zui m ta YH O, LI Z 93 RD 1 % RD/ S a - 8 9 TIX nvaqúlvjl ot, CH 3 CH 2 c- il CH 3 CHZC- CH 3 (CHZ)2 c- CH 3 (CH 2)2 c- CH 2 (CH 2)3 c- CH 3 (CH 2)3-c- Isopropionyle sec -butyryle tertio-butyryle HO- HO- HO- HO- Ho- HO- HO- HO- is HO- CAS - HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- Préparation 7: N,N'-dicarbobenzyloxy-2-O'-acètvl-6 '-méthyllne-4 ',5 '- didéhydrospectinomycine On dissout 17,43 g ( 25,00 mmoles) de N,N'-dicarbo- benzyloxy-2-O'-acétyl-6 '-(diméthylaminoinmthyl)-4 '1,5 '-didéhydrospectinomycine dans 200 ml de chlorure de méthylène et 18,0 ml ( 41,04 g, 289 mmoles) d'icdure de méthyle et on agite à la température ambiante pendant 6 heures. Apres repos à 10 C pendant encore 16 heures, on concentre la solution, puis on la dissout dans un mélange d'acéto- nitrile et de chloroforme à 1/9 On chromatographie le mélange sur du gel de silice ( 300 g) en utilisant le même solvant ( 4 litres), puis un mélange acétonitrile/chloro- forme à 1/3 ( 4 litres) La première substance pure élude est obtenue par rassemblement de fractions et concentra- tion, ce qui donne 10,03 g de N,N'-dicarbobenzyloxy-2-O'- acétyl-6 '-méthylène-4 ',5 '-didéhydrospectinomycine (rende- ment 61 %). CD (CH 3 OH): /Fe 7334 26 000 + 2300, _ 7240 - 44 800 + 2300, /'-7244 nm 10 800 + 2300. UV (C 2 H 5 OH): 204 ép ( 22 500), 241 ( 6750) 250 ép. ( 5900), 256 ép ( 4900), 293 nm ( 14 650). RMP (CDC 13): 2,13 ( 3 H, s), 3,03 ( 3 H, s), 3,06 ( 3 H, s), 5,05 ( 4 H, d), 5,44 ( 1 H, s), 5,61 ( 1 H, q), 5,95 ( 1 H, s), 6,11 ( 1 H, s), 6,19 ( 1 H, s), 7,29 ppm ( 10 H, s). RMC (CD 3 COCD 3): 20,9, 31,4, 57,2, 60,1, 66,2, 67,4, 74,1, 74,7, 75,6, 94,0, 96,1, 104,3, 125,3, 128,4, 129,2, 131,1, 138,0, 138,1, 157,6, 166,6, 170,2, 184,0 ppm. Préparation 7 a: N,N'-dicarbobenzyloxy-2-O'-acétyl-6 '-méthylène-4 ',5 '- didéhydrospectinomycine On ajoute 15 g d'acide m-chloroperbenzolque à la N,N'-dicarbobenzyloxy-2,O'-acétyl-6 '-(diméthylamino- méthyl)-4 ',5 '-didéhydrospectinomycine dans un mélange d'acétate d'éthyle et de "Skellysolve B" préparée dans la Préparation 6 a Apres agitation de la solution pendant minutes, on ajoute 300 ml de bicarbonate de sodium saturé, en agitant, et on sépare les phases On lave la phase organique avec 250 ml de solution saturée de sel, puis on ajoute du méthanol pour casser l'émulsion Les deux fractions aqueuses sont lavées successivement avec 250 ml d'acétate d'éthyle et 75 ml de "Skellysolve B". Les phases organiques sont rassemblées, déshydratées sur du sulfate de sodium, puis concentrées en donnant une matière solide Cette dernière est dissoute dans du chloro- * forme et la solution est chromatographiée sur de la silice ( 1 litre, disposée à l'état humide dans un entonnoir de 1 litre à verre fritté) en utilisant le chloroforme ( 4 litres), un mélange de 2 % d'acétonitrile/chloroforme ( 2 litres), un mélange de 5 % d'acétonitrile/chloroforme ( 2 litres), de l'acétonitrile à 10 % ( 4 litres) et de l'acétonitrile à 15 % ( 4 litres) Les fractions 10-14 sont rassemblées et concentrées en donnant 15,7 g d'un mélange contenant la N, N'-dicarbobenzyloxy-2-O'-acétyl _ 6 '-méthylène-4 ',5 '-didéhydrospectinomycine. En utilisant des modes opératoiressemblables à ceux des Préparations 7 et 7 a, mais en remplaçant la N,N'-dicarbo- benzyloxy-2-O'-acétyl-6 '-(diméthylaminométhyl)-4 ',5 '- didéhydrospectinomycine par la didéhydrospectinomycine convenablement substituée, on obtient les analogues de spectinomycine protégés des tableaux XIII et XIV. j'Hi 0 Il -DúHj a -j'Hi -DúHa m -39 H:) a -j'Hi -De HD m -Aj -De Ra 0 Il -D'Hi 0 Il -DúHD a 01-8 -H -O HZ:) -OúHj -H -OH -OH -OH -OH -on -OH -OH ri -OH -OH -ON -OH -H -55 HZ:) -Se Ha -su -OV 3 -olui -OH si a zea J&H m la DE H 1-1 N a N iiix nvausvi fr p Il CH 3 c- CH 2 CH 2 c 1 Il CH 2 CH 2 c- CH 2 (CH 2)2 c- CH 3 (CH 2)2 c- 0 - CH 3 (CH 2)3 c_ CH 3 (CH 2)3-c- Isopropionyle sec -butyryle tertio-butyryle HO- HO- Ho- Ho- HO- HO- is Ho- HO- Ho- HO- CH 25- C 2 HSS- HO- HO- HO- HO- HO- H(- HO- HO- TABLEAU XIV CBZ H O CH 2 H 3 C ORIO H 3 C CBZ B Bi Ri O O HO HO CH 3 c- CH 30 HO CH 3 c- C 2 H 50 HO CH 3 c- HS HO CH 3 c- CH 3 S HO C Hac- O c 2 H 55 HO CH 3 c- H_ HO CH 3 c- HO H CH 3 c- HO CH 30 CH 3 c- HO C 2 H 50 CH 3 c- O HO HS CH 3 c- O' HO CH 3 S CH 3 c- CH 3 c H 2 c- CH 3 CH 2 c- CH 3 (CH 2)2 c- C" 3 (CH 2)2 cn- CH 3 (CH 2)3 c- CH 3 (CH 2)3-c- Isopropionyk sec -butyryle tertio-butyryle Ho- Ho- Ho- Ho- C 2 H 55- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- lio- Ho- is Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Préparation 8: N,N'-dibenzyloxycarbonyl-2 '-O-acétyl-4 ',5 '-didéhydro-6 '- n-octylspectinomycine On équipe un ballon à trois cols de 15 ml séché d'un barreau d'agitateur magnétique et d'une capsule à sérum On dissout 332 mg ( 0,5 mmole) de N,N'-dicarbobenzyl- oxy-2-O'-acétyl-6 '-méthylène-4,5 '-didéhydrospectinomycine dans 10 ml de tétrahydrofuranne et on ajoute 25 mg de bromure cuivrique Apres refroidissement de la suspension à -78 sous une atmosphère d'azote, on ajoute du bromure d'heptylmagnésium ( 1,2 ml, 2,1 M) par injection à travers la capsule à sérum Un échantillon analysé par chromato- graphie sur couche mince (CH 30 H:CH C 13 à -1:4) montre que la matière de départ a été convertie en un produit dominant un peu moins polaire Le mélange réactionnel est versé sur une solution d'acétate d'éthyle ( 20 ml) et d'acide acétique ( 0,3 ml) Apres dilution avec de l'eau ( 10 ml) et agitation, la phase organique est séparée et lavée avec ml de bicarbonate de sodium saturé et 10 ml de solution saturée de sel Les extraits aqueux sont lavés, successi- vement, avec 20 ml d'acétate d'éthyle Les extraits orga- niques sont déshydratés sur du sulfate de sodium et con- centrés en donnant une mousse Par chromatographie sur 6,0 g de silice dans un mélange acétonitrile-chloroforme à 1:9, on obtient 0,32 g de N,N'-dibenzyloxycarbonyl-2 '-O- acétyl-4 ',5 '-didéhydro-6 '-n-octylspectinomycine purifiée. RMC (CD 3 COCD 3):183,1, 178,4, 170,0, 157,7, 138,0, 124,1, 128,3, 102,5, 96,0, 93,8, 75,6, 73,4, 67,3, 66,1, 59,7, 57,2, 35,0, 32,4, 31,4, 30,0, 29,8, 29,6, 26,7, 23,2, 20,4, 14,3 ppm. Spectre de masse (silylé): M/e 856 (M), 841, 769, 671, 600, 484, 356, 313, 284, 243, 217, 199, 171, 145, 73. En utilisant un mode opératoire analogue à celui qui a été utilisé dans la Préparation 8, mais en rempla- çant le bromure d'heptylmagnésium par le bromure d'alkyl- magnésium convenablement substitué, on a obtenu la N,N'-dibenzyloxycarbonyl-2 '-O-acétyl-4 ',5 '- didéhydro-6 '-éthylspectinomycine. RMC 183,1, 176,2, 170,0, 151,3, 137,81, 129,0, 128,1, 102,6, 95,9, 93,6, 75,3, 74,2, 67,3, 66,1, 60,0, 57,1, 36,8, 31,3, 20,8, 20,0, 13,6 ppm. La N,N' -dibenzyloxycarbonyl-2 '-0-acétyl-4, 5 ' - didéhydro-6 ' -r-propylspectinomycine. RMC 183,3, 176,5, 170,1, 157,2, 138,2, 129,2, 128,4, 102,6, 96,1, 93,8, 75,6, 74,6, 67,4, 66,2, 60,1, 57,3, 34,8, 32,2, 28,8, 22,7, 20,9, 13,9 ppm. La N,N' -dibenzyloxycarbonyl-2 ' -0-ac 4 tyl-4, 5 - didéhydro-6 ' -n-butylspectinomycine. RMC 183,1, 176,4, 170,0, 157,9, 138,2, 129,1, 128,7, 102,5, 96,0, 93,8, 75,6, 74,6, 67,3, 66,1, 60,0, 57,2, 35,0, 31,7, 31,4, 26,3, 22,8, 20,9, 14,1 ppm. La N,N '-dibenzyloxycarbonyl-2 '-0-acétyl-41,5 ' - 1.5 didéhydro-6 '-n-pentylspectinomycine. R 14 C 183,1, 176,5, 170,0, 157,8, 138,4, 129,1, - 128,3, 102,6, 96,0, 93,7, 75,6, 74,8, 67,3, 66,0, 60,2, 57,1, 35,0, 32,0, 31,4, 29,2, 26,6, 23,0, 20,9, 14,2 ppmn. et les analogues de N,N-dibenzyloxycarbonyl-2 '-0-acétyl- 4, 5 ' -didéhydro-6 ' -r-octylspectinomycine des tableaux XV et XVI. -OR -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -Ss Hza -SEHJ -SH -ouzo -Oe HD -H -OH -OH -OH -OH -OH -ON -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH OH -H -5503 -s'Ra -SH -0 éi -0 eho -OH si 1-ff a YH is fol H N s ú F 13 AX fl'V 3 'l SVJ cn 523583 TABLEAU XVI Cil 3 B CBZ /N H 3 C H ) 2 N 1 % H Sc CBZ Bl HO- HO- HO- HO- HO- Hû- HOH- CH 30- C 2 H 5- H 2- CH 35- C 2 H 55- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- Ho- CH 30- C 2 HSO- Hs- CHSS c 2 H 55- H- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- lîo- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- Préparation 9: N,N'-dibenzyloxycarbonyl-6 '-octylspectinomycine On dissout 0,32 g de N,N'-dicarbobenzyloxy-2 '-O- acétyl-4 ',5 '-didéhydro-6 '-n-octylspectinomycine dans 12,0 ml de 2propanol et on ajoute 0,12 ml de triéthyl- amine On divise la solution en quatre parties égales qu'on place dans des tubes à essai contenant chacun 30 mg d'oxyde de platine Les tubes à essai sont disposés soigneu- sement dans une bouteille de Parr et on les agite par secousses sous pression d'hydrogène de 0,14 M Pa pendant 2 heures On filtre le catalyseur et on ajoute 0,7 ml d'eau aux filtrats rassemblés Après repos pendant 16 heures, on chauffe le filtrat pendant encore 3/4 d'heure à 65 , on le concentre et on le chromatographie sur 6 g de silice. On élue la N,N'-dibenzyloxycarbonyl-6 '-n-octylspectinomy- cine avec du méthanol à 0,5 % dans le chloroforme ( 200 ml), 1 % ( 100 ml), 1,5 % ( 150 ml), 2 % ( 200 ml) et 3 % ( 100 ml). Les fractions intéressantes sont détectées par l'analyse par chromatographie sur couche mince; le produit donne une tache pourpre par pulvérisation de DNP, puis pulvéri- ation d'acide sulfurique et chauffage Le poids de produit est de 0,09 g. RMC (CD 3 COCD 3): 201,5, 157, 138,1, 129,1,128,3,-97,5, 92,3, 75,1, 74,7, 74,6, 71,8, 67,2, 66,4, 65,6, 61,1, 60,1, 57,5, 44,1, 36,1, 32,4, 31,7, 31,4, 30,7,30,1, 29,8, ,7, 23,1, 14,3 ppm. Spectre de masse (silylé): M/e = 928 (M+), 913, 901, 837, 823, 793, 745, 624, 611, 539, 493, 449, 359, 91. Préparation 9 a: N,N'-dibenzyloxycarbonyl-6 '-propylspectinomycine On dissout 0,70 g de 4 ',5 '-didéhydro-2-O-acétyl- N,N'-dibenzyloxycarbonyl-6 '-propylspectinomycine dans ml de tétrahydrofuranne et on refroidit la solution à -78 On ajoute une solution 1 M de tri-sec -butylboro- hydrure de lithium dans du tétrahydrofuranne ( 3,0 ml). Après agitation sous atmosphère d'azote pendant 25 minutes à -78 , on verse la solution dans 10-ml d'acétate d'éthyle additionné de 0,2 ml d'acide acétique On ajoute encore ml d'acétate d'éthyle, 1,0 ml d'eau et 1,0 ml de tri- éthylamine Deux heures plus tard, on ajoute encore 1,0 ml de triéthylamine et on agite la solution à la température ambiante pendant 16 heures On ajoute 20 ml de "Skellysolve B" et du bicarbonate de sodium ( 15 ml de solution aqueuse saturée) et on sépare les phases On lave la phase supé- rieure avec 15 ml de Na Cl aqueux saturé On déshydrate la phase organique sur du sulfate de sodium et on la concentre pour obtenir une huile On chromatographie cette huile sur 40 ml de gel de silice chargé dans du chlorure de méthylène On élue le produit avec 50 ml de chlorure de méthylène, 60 ml de chlorure de méthylène/chloroforme à 1:1, 50 ml de chloroforme, 100 ml de méthanol à 0,5 % dans le chloroforme, 100 ml de méthanol à 1 % dans le chloroforme, 100 ml de méthanol à 2,5 % dans le chloro- forme, 200 ml de méthanol à 5 % dans le chloroforme Par- concentration de fractions appropriées, on obtient 0,45 g ( 68,3 %) de N,N'-dibenzyloxycarbonyl-6 '-propylspectinomy- cine. En utilisant des modes opératoires semblables à ceux qui sont utilisés dans les Préparations 9 ou 9 a, mais en remplaçant la N,N-dicarbobenzyloxy-6 '-octylspectinomy- cine par la N,N'-dicarbobenzyloxy-6 '-alkylspectinomycine convenablement substituée, on obtient: la N,N'-dibenzyloxycarbonyl-6 '-éthylspectinomy- cine RMC 201,0, 158,2, 138,2, 129,1, 128,4, 97,6, 92,3, 75,2, 74,7, 74,6, 71,5, 67,2, 66,2, 65,6, 61,1, ,2, 57,6, 57,3, 44,1, 38,2, 31,7, 31,4, 18,2, 14,1 ppm. la N,N'-dibenzyloxycarbonyl-6 '-n-propyl- spectinomycine RMC 201,8, 156,7, 138,1, 129,1, 128,3, 97,5, 92,3, ,1, 74,7, 74,6, 71,8, 67,2, 66,4, 65,6, 60,9, 59,9, 57,5, 44,1, 35,7, 31,4, 30,8, 27,7, 23,0, 14,2 ppm. la N,N'-dibenzyloxycarbonyl-6 '-n-butylspectino- mycine RMC 201,5, 156,2, 138,2, 129,4, 128,6, 97,7, 92,6, ,3, 75,1, 74,8, 72,1, 67,6, 66,7, 66,0, 61,0, 60,0, 57,8, 44,3, 35,3, 31,6, 32,5, 32,1, 31,8, 31,2, 30,2, 29,2, 25,6, 2, 23,3, 14,6 ppm. la N,N' -dibenzyloxycarbonyl-6 ' -isobutylspectino- mycine la NN'-dibenzyloxycarbonyl -6 '-n-pentylspectino- mycine RMC 202,0, 158,1, 138,2, 129,1, 128,4, 97,6, 92,4, 75,2, 74,6, 74,0, 71,8, 67,2, 66,4, 65,7, 61,1, ,1, 57,5, 57,3, 44,1, 36,1, 32,3, 31,7, 31,4, 29,7, ,6, 23,2, 14,3 ppm. la N,N'-dibenzyloxycarbonyl-6 '-( 3,3-diméthyl) -n- butyl spectinomycine la N,N'-dibenzyloxycarbonyl-6 '-cyclopentényl- spectinomycine la N,N '-dibenzyloxycarbonyl-6 ' -cyclohexylméthyl- spectinomycine RMC 202,0, 157,5, 138,0, 129,1, 178,3, 97,5, 92,3, 75,1, 74,7, 72,1, 67,2, 66,4, 65,6, 60,9, 60,7, 57,5, 57,3, 44,1, 38,2, 33,8, 33,5, 31,7, 31,4, 27,2, 26,9 pprm et les analogues de 6 '-n-butylspectinomycine des tableaux XVII et XVIII. La N,N' -dibenzyloxycarbonyl-6 ' -und 4 cylspectino- mycine. TABLEAU XVII CH 3 CBZ /N H 3 C Bli Il ', H -C CBZ B Ho- CH 30- C 2 H 50 - Hs- C-435 - C 2 HSS- H - HO- Ho- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- Hû- HO- HO- HO- Ho- HoHo- Ho- Ho- Ho- H- CH 30- C 2 H 50- Hs- CH 35- C 2 H 55- Ho- Ho- Ho- Ho- Ho- HO- HO- HO- TABLEAU XVIII c'.i 3 CBZ H 1 (CH,) IN O H 3 C 81 la H 3 C CBZ B Bi HO HO CH 3 c CH 3- CH 30 HO CH 3 c CH 3- C 2 HSO HO CH 3 c CH 3- HS HO CH 3 c CHS- CH 3 S HO CH 3 c CH 3- C 2 H 5 S HO CH 3 c CH 3- O H_ HO CH 3 C_ CH 3- HO H_ CH 3 c CH 3- HO CH 30 CH 3 C_ CH 3- HO C 2 HSC CH 3 c CH 3- HO H_ CH 3 c CH 3- O HO CH 3 S CH 3 C_ CH 3- 0 O Il il HO C 2 HSS CH 3 C_ CH 3- HO HO C 2 H 5 cn c 7 H 5- HO HO C 3 H 7 c C 3 H 7- HO HO C 4 H 9 c C 4 H 9- HO HO C 5 Hlc_ C 5 H,1- HO HO c 6 H 13 c C 6 HI 3 HO HO C 7 Hl Sc c 7 H 15- is HO HO C 8 H 17 C C 8 H 17- Exemple 1 6 '-n-octylspectinomycine * On dissout 0,09 g de N,N'-dibenzyloxvcarbonyl-6 '- n-octylspectinomycine dans 7,0 ml de méthanol et on agite la solution sous atmosphère d'azote On ajoute 60 mg de noir de palladium, puis 0,45 ml d'acide formique à 97 %. Après avoir correctement agité pendant 40 minutes, on filtre le catalyseur et on concentre le filtrat sous vide poussé On reprend le résidu dans 8 ml d'eau et on acidi- fie la solution à p H 1,5 avec du chlorure d'hydrogène 0,1 N ( 0,35 ml) On lyophilise l'échantillon pour préparer un échantillon destiné à l'analyse RMC Après l'analyse RMC, on dilue l'échantillon avec de l'eau et on le lyophilise pour obtenir 0,05 g de 6 '-n-octylspectinomycine sous la forme de son dichlorhydrate. RMC (D 20, par rapport à CH 3 CN comme étalon in- terne): 92,9, 92,6, 91,1, 70,9, 68,8, 65,1, 64,7, 60,6, 58,7, 57,5, 38,2, 33,4, 30,8, 30,1, 29,5, 28,5, 28,2, 24,2, 21,5, 12,8 ppm. En suivant un mode opératoire analogue à celui qui est utilisé dans l'exemple 1, mais en remplaçant la N,N'-dicarbobenzyloxy-6 '-n-octylspectinomycine par la 6 '- alkylspectinomycine protégée convenablement substituée, on obtient sous la forme de leur dichlorhydrate la 6 '-éthylspectinomycine RMC 29,8, 29,4, 60,6, 58,6, 57,6, 64,6, 70,7, ,0, 92,7, 92,7, 91,0, 58,5, 68,8, 35,0, 16,6, 12,4 ppm la 6 '-npropylspectinomycine RMC 29,8, 29,4, 60,6, 58,6, 57,6, 64,6, 70,9, 64,9, 92,6, 92,6, 91,0, 38,5, 68,7, 32,5, 25,4, 21,0, 12,3 ppm la 6 '-n-butylspectinomycine RMC 29,9, 24,4,-60,4, 58,5, 57,4, 64,5, 70,7, 64,9, 92,5, 92,5, 90,9, 38,7, 68,7, 32,9, 30,1, 23,1, 20,4, 12,5 ppm la 6 '-isobutylspectinomycine la 6 '-npentylspectinomycine 2 C 523583 RMC 29,8, 29,3, 60,6, 58,6, 57,7, 64,7, 71,0, 65,0, 92,7, 92,7, 91,1, 38,6, 68,8, 32,9, 30,1, 23,2, 21,0, 20,8, 12,5 ppm la 6 '- RMC 30,1, 29,5, 60,6, 58,6, 57,5, 64,7, 70,9, ,1, 92,6, 92,6, 91,1, 38,2, 68,8, 33,4, 30,7, 28,5, 28,5, 28,2, 28,2, 24,2, 21,5, 12,8 ppm la 6 '-n-undécylspectinomycine RMC 60,5, 58,6, 57,5, 64,9, 70,9, 65,2, 97,7, 92,8, 91,2, 38,8, 68,8, 33,4, 30,9, 28,4, 28,8, 28,8, 28,8, 28,8, 28,8, 28,8, 24,4, 21,5, 12,8, 30,2, 24,6 ppm et les analogues de 6 '-n-octylspectinomycine des tableaux XIX et XX. TABLEAU XIX H CH 3 (H,) CH, B H N H 3 c 1 H e H B HO- c Hao- c 2 HSO- Hs- CH 35- C 2 H 55- H- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO-' Ho.: HO- HO- HO- HO- H- CH 30- C 2 H 50- H 2- CH 35- C 2 H 55- 6 1 TABLEAU XX CH 3 ( CH,) 2 ICH 2 H N N li Sc 1 B H 3 c H B HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- H- CH 30- C 2 H 50- Hs- CH 35- CAS - HO- cli 3 o- CZH 50- Hs- CH 35- c 2 H 55- H- HO- HO- HO- Ho- HO- HO- Exemple 2 Sulfate de 6 '-n-propylspectinomycine On dissout 2,20 g de N,N'-dibenzyloxycarbonyl-6 '- n-octylspectinomycine dans 100 ml de méthanol et on agite la solution sous une atmosphère d'azote On ajoute 1,39 g de noir de palladium, puis 4, 3 ml d'acide formique à 97 % Apres avoir correctement agité le catalyseur, on le filtre et on concentre le filtrat sous vide poussé. On reprend le résidu dans 10 ml d'eau et on acidifie la solution avec de l'acide sulfurique aqueux 1 M ( 3,5 ml) On lyophilise l'échantillon, puis on le recris- tallise dans un mélange d'acétone et d'eau pour obtenir 0,87 g de sulfate de 6 '-n-propylspectinomycine penta- hydraté. RMC (D 20, par rapport à CH 3 CN comme étalon interne):118,07, 92,67, 91,24, 91,06, 70,73, 68,94, ,01, 64,74, 60,78, 59,15, 57,69, 38,77, 32,83, 30,35, 29,77, 25,78, 21,18 et 12,45 ppm. SCHEMA A R O CH 2 R 2 \ N R 3 R I R' CH, R R I 1 R O R J. W. R 3 Ia R 1 R-2 R CP % B Ri el N O R Bl R Ili A IN, Ra O Rue, R, Ri R 1 R#2 CH 2 B Ri IN O O RI 3 R 4 BI O R 4 r, R'7 OH Rs R'12 B Ri R CH 2 N 1.1 ' O R 3 L O I' -% - R's R 87 III P.Iii 9 tu sil m SE oc 9 lu m/ il ZH 3 A 1 III S L t'III L 8 9 u e oi 7 HD la 1 l il N S A 0 eau (C Ha B u a B t'Ai sz 4 m $ il 0 c'Ho OP oz 0 plu tu H SL Ai au 9 a Su OL ZH au N 22 súMZ, IIA SL IA ot 1 ND / NI 1 H 3 c tu N ', 1 % e 'd S L 9 úas ú 2 S C 7 SCHEMA I à à m O Roo Vil 3 1 v DMF N Me 2 H c OCH &H 3 ETAPE 1 vi p H 4 Na CNBH% ETAPE 2 Ri i R CH 3 de O R 83 CH 3 Rs N Re Ri OR 100 R'6 R'7 CH si i ETAPE 3 Ria B Ri R Bl ""A Rs R NM Re ORR * O R' R'7 IV' R'Mg X ETAPE 4 R' R'2 B Ri R CH R 3 R,6 RA III 2-1523583 M Ir Réduction N Et 3 ETAPE 5 R' - 1 CH 2 011-1 1-j R'2, Rl I'N Elimination de la protection Ir II ETAPE 6 R' CH 2 -A S j Rz, R a"m I SCHEMA II R s, 1 R 13 CH 3 x R'6 R'7 ETAPE 1 is (CH 3 co)20 HC 02 H Et O Ac Pyridine R 81 ix Rle R 87 (Rio)20 Pyridine OMAP ETAPE 2 H "-LO R#2 Rs 3 - 1 m R CH 3 viii H-40 ,\ Ri R 6 R'7 Dibromodiméthy 'Jl hydantolne légère E-TAPE 3 Vil H 1) DMF Acétal de DMF 2) c H 30 H ou eau ETAPE 4 Rs R# 1 R I-01 0 N 11- VI là#% nu R 5 OR, o O R'6 Rl 2 123583 REVEND ICATIONS 1 Procédé de préparation d'un composé de for- mule: \ RR' R 2 N B RCH 2 R 3 R 70 C dans laquelle R est l'hydrogène ou un groupe alkyle infé- rieur, R' est un groupe alkyle ayant 1 à 18 atomes de carbone ou un groupe cycloalkyle dans lequel la plus lon- gue extension du système cyclique contient 1 à 4 atomes de carbone, R 1 à R 9 sont choisis entre l'hydrogène, un groupe alkyle inférieur, un groupe alcényle inférieur et un groupe alcynyle inférieur; à condition que l'un de Rz R 3 soit toujours l'hydrogène et que l'un de R 6 et R 7 soit toujours l'hydrogène; A est choisi entre l'oxygène et le soufre et B et B 1 sont égaux ou différents et sont choisis entre l'hydrogène et un groupe hydroxy, alkoxy, O O-alcényle inférieur, thio, thio-alkyle inférieur et thio- alcënyle inférieur, caractérisé en ce qu'il consiste (a) à faire réagir un composé de formule: R RS I R'0 R'$ t 1 'H 2 IV Blé RI,t Re \ a Re OR Io O R 1 R' q, J avec un halogénure d'alkylmagnésium pour former un composé de formule: R'a N R'3 III (b) à faire réagir le composé formé dans l'étape (a) avec un agent réducteur pour former un composé de formule: 2 B RI R Cr 2 R H " 34 ill et (c) à soumettre le composé préparé dans l'étape (b) à l'élimination de la protection et à préparer, le cas échéant, un sel et un hydrate pharmaceutiquement accep- tables de ce composé, formules dans lesquelles R, R', R 1, R 4, R 5, R 8, R 9, A, B, B 1 ont les définitions données ci-dessus, R'2, R'3, R'6 et R'7 sont choisis dans le groupe comprenant un substituant alkyle inférieur, alcényle inférieur, alcynyle inférieur et un groupe protecteur choisi entre des groupes aralkoxycarbonyle, alkoxycarbonyle halogénés et alkoxycarbonyle, sous réserve que l'un de R'2 et R'3 représente toujours un groupe protecteur et que l'un de R'6 et R' représente toujours un groupe protecteur, et R 10 est un groupe acyle. 2 Procédé suivant la revendication 1, carac- térisé en ce que le composé préparé est choisi dans le groupe des composés suivants 6 ' -éthylspectinomycine dichlorhydrate de 6 'éthylspectinomycine; 6 '-n-propylspectinomycine dichlorhydrate de 68-npropylspectinomycine sulfate de 6 '-n-propylspectinomycine; 6 ' -nbutylspectinomycine dichlorhydrate de 6 '-n-butylspectinomycine 6 'isobutylspectinomycine dichlorhydrate de 6 '-isobu-Lylspectincmycine 6 ' n-pentylspectinomycine dichlorhydrate de 6 '-n-pentylspectinomycine; 6 ' 3, 3-diméthyl) -n-butylspectinomycine dichlorhydrate de 6 ' -( 3,3-diméthyl) -n-butyl- spectinomycine 6 '-n-octylspectinomycine dichlorhydrate de 6 '-noctylspectinomycine 6 '-n-undécylspectiniomycine 6 'cyclopentylméthylspectinomycine dichlorhydrate de 6 '-cyclopentylméthylspectino- mycine 6 ' -cyclohexylméthylspectinomycine et dîchlorhydrate de 6 '-cyclohexylméthylspectino- mycine. 3 Composé, caractérisé en ce qu'il répond à la formule R' R 2 M B R R' ài i R 6 R 7 dans lequel R est l'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur; R' est un groupe alkyle, à chaîne droite, cyclique ou à chaîne ramifiée, o la plus longue extension de la ramifi- cation ou du système cyclique contient 1 à 4 atomes de carbone; R 1 à R 9 sont choisis entre l'hydrogène, un groupe alkyle inférieur, un groupe alcényle inférieur et un groupe alcynyle inférieur; A est choisi entre l'oxygène et le soufre et B et B 1 sont égaux ou différents et sont choisis entre l'hydrogène, un groupe hydroxy, alkoxy, O-alcényle inférieur, thio, thio-alkyle inférieur et thio-alcényle inférieur, leurs formes hydratées et les sels pharmaceuti- quement acceptables du composé de formule I et leurs formes hydratées. 4 Composé suivant larevendication 3, caractérisé en ce qu'il répond à la formule: Rs. R t B H CH 2 N V XN la ansl R 6 R 7 dans laquelle R" est choisi entre les groupes éthyle, n- propyle et n-butyle, R 1 à R 9 sont choisis entre l'hydro- gène, un groupe alkyle inférieur, un groupe alcényle infé- rieur et un groupe alcynyle inférieur; sous réserve que l'un de R 2 et R 3 soit toujours l'hydrogne et que l'un de R 6 et R 7 soit toujours l'hydrogène; A est choisi entre l'oxygène et le soufre et B et Bl sont égaux ou différents et sont choisis entre l'hydrogène et un groupe hydroxy, alkoxy, O-alcényle inférieur, thio, thio-alkyle inférieur et thio-alcényle inférieur; leurs formes hydratées, et des sels pharmaceutiquement acceptables du composé de formule I et ses formes hydratées. 2 1523583 La 6 '-n-propylspectinomycine le dichlorhydrate de 6 '-npropylspectinomtycine le sulfate de 6 '-n-propylspectinomycine; la 6 '-nbutylspectinomycirne le dichlorhydrate de 6 '-n butylspectinomycine la 6 '-isobutylspectinomycine; le dichlorhydrate de 6 'isobutylspectinomycirne la 6 '-n-pentylspectinomycine la 6 ' ( 3, 3diméthyl) -n-butylspectinomycîne; le dichlorhydrate de 6 ' ( 3, 3-diméthyl) -n-butyl- spectinomyc ine; la 6 '-cyclopentylméthylspectinomycine le dichlorhydrate de 6 '-cyclopentylrnéthyl- spectinomycine; la 6 '-cyclohexylméthylspectinomycine le dichlorhydrate de 6 '-cyclohexylméthyl- spectinomycine; la 6 '-n-undécylspectinomycine ou le dichlorhydrate de 6 '-n-undécylspectino- mycine suivant la revendication 4. 6 Procédé de préparation d'-un composé de for- mule R' R'2 B Ri -tir II dans laquelle R, R', R 1, R 4, R 5, R 8, R 9 o, A, B et B 1 ont les définitions données dans la revendication 1, caractérisé en ce qu'il consiste (a) à faire réagir un composé de formule R -IV avec un halogénure d'alkylmagnésium pour former un composé de formule: R' I Ns R', R', R'7 III (b) à faire réagir le composé formé dans l'étape (a) avec un agent réducteur pour obtenir un composé de formule: R ' CV 2 B. II formules dans lesquelles R, R'1, R'2, R'3, R 4, R 5, R'6, R'7, R 8, R 9, R 10, B et Bl ont les définitions données dans la revendication 1. 7 Procédé suivant la revendication 6, caractérisé en ce que le composé répond à la formule: R' R'2 R CH 2 Ci H 2 BR R R' R'7 OH 8 Procédé suivant la revendication 7, caractérisé en ce que le composé préparé est un composé choisi dans le groupe comprenant la N,N'dicarbobenzyloxy-6 '-méthylspectinomycine; la N,N'-dicarbobenzyloxy-6 'éthylspectinomycine; la N,N' -dicarbobenzyloxy-6 ' -n-propylspectinomy- cine; la N,N' -dicarbobenzyloxy-6 ' -n-pentylspectinomy- cine; la N,N '-dicarbobenzyloxy-6 ' -n-octylspectinomy- cine; la N,N' -dicarbobenzyloxy-6 ' -n-undécylspectinomy- cine; et la N,N'-dicarbobenzyloxy-6 '-cyclohexylspectino- mycine. 9 Composé, caractérisé en ce qu'il répond à la formule: RF R R' CH 2 III' dans laquelle R est l'hydrogène ou un groupe alkyle infé- rieur, R 1 à R 9 sont choisis entre l'hydrogène et un groupe alkyle inférieur, alcényle inférieur et alcynyle inférieur; R'2, R'3, R'6 et R'7 sont choisis entre un groupe alkyle inférieur, un groupe alcényle inférieur, un groupe alcynyle inférieur et un groupe protecteur choisi entre un groupe aralkoxycarbonyle, un groupe alkoxycarbonyle halogéné et un groupe alkoxycarbonyle; sous réserve que l'un de R 2 et R 3 soit toujours l'hydrogène et que l'un de R 6 et R 7 soit toujours l'hydrogène, et à condition en outre que l'un de R'2 et R'3 soit toujours un groupe protecteur et que l'un de R'6 et R'7 soit toujours un groupe protecteur; R 10 est un groupe acyle; A est choisi entre l'oxygène et le soufre et B et B 1 sont égaux ou différents et sont choisis entre l'hydrogène et un groupe hydroxy, alkoxy, 0-alcényle inférieur, thio, thio-alkyle inférieur et thio- alcényle inférieur; et R' est un groupe alkyle ayant 1 à 18 atomes de carbone ou un groupe cycloalkyle dont la plus longue extension du système cyclique contient 1 à - 4 atomes de carbone. La N,N'-dicarbobenzyloxycarbonyl-2 '-O-acétyl- 4 ',5 '-diddhydro-6 '-éthylspectinomycine; la N,N'-dicarbobenzyloxycarbonyl-2 '-0-acétyl- 4 ',5 '-didéhydro-6 '-n-propylspectinomycine; la N,N'-dicarbobenzyloxycarbonyl-2 '-0-acétyl- 4,5 '-didéhydro-6 '-n-butylspectinomycine; la N,N'-dicarbobenzyloxycarbonyl-2 '-O-acétyl- 4 ',5 '-didéhydro-6 '-n-pentylspectinomycine; la N,N'-dicarbobenzyloxycarbonyl-2 '-0-acétyl- 4 ',5 '-didéhydro-6 '-n-octylspectinomycine; ou la N,N'-dicarbobenzyloxycarbonyl-2 '-O-acétyl- 4 ',5 '-didéhydro-6 '-n-undécylspectinomycine suivant la revendication 9. 11 Composition à usage antibactérien, caracté- risé en ce qu'elle contient comme substance active un composé suivant l'une quelconque des revendications 3, 4, , 9 et 10.