FR 2499072 A1 19820806 FR 8102172 A 19810204 -acétyloxv-L-tryptophane et ses sels d'addition, procédé de prépara- tion et utilisation en thérapeutique. La présente invention concerne en tant que produits industriels nouveaux le 5-acétyloxy-L-tryptophane et ses sels d'ad- dition. Elle concerne également le procédé de préparation de ces produits et leur utilisation en thérapeutique et notamment en neuro- psychiatrie. La préparation du 5-acétyloxy-L-tryptophane et de ses sels d'addition n'a jamais été décrite jusqu'à ce jour. On sait que W. SAKAMI et G.TOENNIES,J. Biol. Chem., 144, 203 (1942) ont proposé une méthode d'acétylation des fonctions alcools d'hydroxyamnnoacides, que cette méthode a été appliquée avec succès pour l'O-acétylation de la L-hydroxyproline, de la DL-sérine, de la DLthréonine et de la L-tyrosine, mais qu'elle n'a pas pu être appliquée à l'O-acétylation d'un hydroxyaminoacide indolique tel que l'hydroxytryptophane. Ceci s'explique par le fait que l'un des co-auteurs de l'article susvisé [voir à cet effet G. TOEMNIES et J. J. KOLB,J. Biol. Chem., 144, 219 (1942)] dit avoir observé que l'acétylation a lieu sur l'atome d'azote indolique. La O-acétylation selon l'invention se distingue égale- ment de la N-acétylation du groupe NH2 du 5-hydroxy-L-tryptophane qui est notamment illustrée par le brevet francais n" 71-37901pu- blication n0 2 113 077). Selon l'invention on préconise une méthode de O-acé- tylation permettant d'obtenir le 5-acétyloxy-L-tryptophane et ses sels d'addition. De plus le 5-acétyloxy-L-tryptophane et ses sels d'addition s'étant révélés utiles en thérapeutique et notamment en neuropsychiatrie, on préconise selon l'invention une composition thérapeutique qui renferme,en association avec un excipient phy- siologiquement acceptable, au moins un composé choisi parmi l'en- semble constitué par le 5-acétyloxy-L-tryptophane et ses sels d'ad- dition. L'invention vise donc,E6n tant que produit industriel nouveau, un dérivé du 5-hydroxytryptophane caractérisé en ce qu'il est choisi parmi l'ensemble constitué par a) le 5-acétyloxy-L-tryptophane, et b) ses sels d'addition. L'invention vise également un procédé de préparation du 5-acétyloxy-Ltryptophane à partir du 5-hydroxy-L-tryptophane qui est caractérisé en ce qu'on fait réagir un équivalent de 5-hydroxy-L- tryptophane avec un équivalent d'acide perchlorique dissous dans de l'acide acétique anhydre, on traite un équivalent du produit salifié ainsi obtenu par 1 à 2 équivalents (de préférence 2 équivalents) d'anhydride acétique pour obtenir l'acétate de 5-acétyloxy-L-trypto- phane, la neutralisation de ce sel d'addition d'acide, notamment au moyen de NH4OH, donnant le 5-acétyloxy-L-tryptophane. Les autres sels d'addition peuvent être obtenus selon une méthode connue en soi à partir de l'acétate de 5-acétyloxy-L-tryptophane, et de préférence à partir du 5acétyloxy-L-tryptophane en faisant réagir ce produit avec un acide minéral (notamment HCl, HBr, H2S04, HN03) ou organique (notamment HCOOH, CH3CH2COOH, C6H5COOH, ou encore les acides oxalique, fumarique, maléique, malique, ascorbique, p-toluènesulfonique, méthanesulfonique et tartrique). Sans'sortir du cadre de l'invention on peut également préparer des sels d'addition du type ammonium quaternaire par réaction du 5-acétyloxy-Ltryptophane avec notamment TCH3 ou C1CH3. Le procédé selon l'invention peut être également mis en oeuvre à partir du 5-hydroxy-DL-tryptophane. On obtient ainsi l'acétate de 5-acétyloxy-DL-tryptophane et le 5-acétyioxy-DL-trypto- phane, les isomères L de ces produits étant ensuite, si nécessaire, isolés selon une méthode connue en soi. D'autres.avantages et caractéristiques de l'invention seront mieux compris à la lecture qui va suivre d'exemplesde pré- paration nullement limitatifs, mais donnés à titre d'illustration. Exemple 1 Acétate de 5-acétyloxy-L-tryptophane monohydrate 3 CCH H-C02 H À 2 I\,,kA N, CH3COOH, H20 H - Dans un ballon de 2 litres, dissoudre 25 g de 5-hydroxy-L-trypto- phane (0,114 mole) dans 1140 ml d'une solution 0,1 N d'acide perchlorique dans l'acide acétique glacial (totalement exempt d'eau). - Additionner, goutte à goutte, 114 ml d'une solution à 20 % (p/v) d'anhydride acétique (0,22 mole) dans l'acide acétique. - Porter à 50 C et maintenir à cette température durant 15 minutes. - Additionner 23 ml d'eau et laisser réagir à 50 C durant 5 minutes. - Refroidir à température ambiante (15-20 C). - Ajouter 45 ml d'une solution aqueuse à 40 % (p/v) de cyclohexyl- amine. - Couler goutte à goutte 1,14 ld'étherdiisopropylique dans la solu- tion acétique (dans laquelle le produit à déjà commencé à cristal- liser). - Agiter pendant 1 h 30 après la fin de l'addition. - Filtrer, rincer avec 180 ml d'un mélange acide acétique-éther diisopropylique (50:50) v/v, puis avec 50 ml d'éther diisopropylique. - Sécher sous vide phosphorique. On obtient 32,3 g (rendement: 83,7 %) d'acétate de 5-acétyloxy-L-tryptophane monohydrate brut. La purification est effectuée comme indiqué ci-après: - Dans un erlenmeyer de 200 ml, mettre en suspension 32,3 g du pro- duit brut dans 120 ml du mélange éthanol-eau (50:50) v/v. - Porter 5 minutes au reflux. - Refroidir à température ambiante (15-20 C). - Agiter durant 2 heures à 20 C. - Abandonner une nuit à 5 C. - Filtrer, rincer avec 2 x 30 ml de mélange eau-éthanol (50:50) v/v. - Sécher sous vide phosphorique. On obtient 28,2 g (rendement: 87,3 %) d'acétate de -acétyloxy-Ltryptophane monohydrate purifié. Le point de fusion (déterminé selon la méthode dite au tube capillaire) se situe au voisinage de 225 C. La présence d'une molécule d'eau dans le produit final purifié est vérifiéepar la ménthode titrimétrique de K. FISCHER. Le sel monohydraté se présente sous la forme d'une poudre blanche ou peu colorée, inodore ou d'odeur faible, non hygros- copique vis-a-vis d'une atmosphère de 50 hygrométriques. I1 est soluble dans l'eau: une solution a 1 % p/v s'obtient à température ambiante, mais une solution à 2 % n'est réalisable qu'à chaud (au bain-marie à 60 C), cette dernière solu- tion restant toutefois totale après retour à température ordinaire. Dans l'éthanol absolu, ce sel est pratiquement inso- luble, même après ébullition du solvant. Dans le mélange eau-éthanol (50:50) v/v, une solution à 1 % p/v n'est pas réalisable de façon complète en opérant à tempéra- ture ambiante, mais le devient par un chauffage au bain-marie à hC et reste complète après retour à température ordinaire. Le spectre d'absorption IR (cf figure 1 ci-après) présente les bandes caractéristiques suivantes: 1750 cm 1 (car- -1 -1 bonyle ester), 1680 cm (acide carboxylique) et 1635 cm (car- boxylate). Le pouvoir rotatoire du produit de l'exemple 1 en solution à 2 % dans l'acide HC1 2N est 20 = +80. cD Exemple 2 -acétyloxy-L-tryptophane CH3-CO-0Q CH2-CH.COOH N H - Dans un bêcher de 1 litre, mettre 28,19 g d'acétate de 5-acétyl- oxy-L-tryptophane monohydrate (purifié comme indiqué à l'exemple 1) en suspension dans 750 ml d'eau. - Ajouter 6,7 ml d'une solution aqueuse d'ammoniaque à 20,9 % (densité: 0, 92). On observe une dissolution suivie de la formation d'un épais précipité. - Agiter pendant 3 heures à 20 C. - Filtrer puis rincer avec 2 x 30 ml d'eau. On obtient ainsi 15,2 g (rendement: 70 %7.) de 5-acé- tyloxy-L-tryptophane. Le point de fusion (déterminé selon la méthode dite au tube capillaire) se situe au voisinage de 220 C. Ce produit se présente sous la forme d'une poudre blanche ou peu colorée, inodore ou d'odeur faible, non hygroscopique vis-à-vis d'une atmosphère de 70 hygrométriques. Il est soluble dans l'eau, toutefois à condition d'opérer à chaud pour des concentrations aussi bien de 1 % que de 2 % p/v (au bain-marie à 60 C) , mais ces deux solutions restent totales après retour à température ordinaire. Dans l'éthanol anhydre, cet ester est pratiquement insoluble même après ébullition du solvant. Dans le mélange eau-éthanol (50:50) v/v, une solution à 2 % p/v n'est pas réalisable de façon complète en opérant à tempéra- ture ambiante, mais le devient par un chauffage au bain-marie à C et reste complète après retour à température ordinaire. Le spectre d'absorption IRB (cf. figure 2 ci-après) présente les bandes caractéristiques suivantes: 1735 cm'1 (car- bonyle ester) et 1605 cm'1 (carboxylate). Le pouvoir rotatoire du produit de l'exemple 2 en solution dans de l'acide HCl 2N est a2O = + 9 . D On a résumé ci-après les résultats des essais pharma- cologiques qui ont été entrepris. TOXICITE 1) Etude par voie intrapéritonéale chez 10 souris mâles: - 5-acétyloxy-Ltryptophane à la dose de 800 mg/kg, 1 h après administration: 2 morts/10 24 h après administration: 2 morts/8 Au total, sur 10 jours: 4 morts/10 - Produit de l'exemple 1 à la dose de 800 mg/kg chez 10 souris mAles. 1 h après administration: O mort 24 h après administration: 1 mort jours suivants: O mort. Au total, 1 mort sur 10. 2) Etude par voie orale chez 1C souris males: - 5-acétyloxy-L-tryptophane à la dose de 1 g/kg. 1 h après administration: 2 morts 24 h après administration: O mort jours après administration: O mort. Au total, 2 morts/10 dans l'hdure qui suit l'administration. - Produit de l'exemple 1 à la dose de lg/kg. Au total, aucun mort dans les heures et les 10 jours suivants. PHARMACOLOGIE La mise en évidence chez l'animal de manifestations motrices caractéristiques après administration de L-5-hydroxytrypto- phane à dose suffisante, a déjà fait l'objet de nombreux travaux. Ces manifestations sont attribuées à une activation des récepteurs sérotoninergiques cérébraux chez des animaux prétraités aux IMAO. Dans les conditions expérimentales adoptées, le 5-acétyloxy-L-tryptophane entralne, ainsi que le produit de l'exem- ple 1, des modifications du comportement moteur, chez la souris, plus importantes que celles que provoque une dose équimoléculaire de 5-hydroxy-L-tryptophane. Les études pharmacologiques, réalisées, conduisent à penser que la concentration cérébrale en sérotonine est plus rapide et plus importante après administration de 5-acétyloxy-L-tryptophane et de ses sels, qu'après administration de 5-hydroxy-L-tryptophane. Les applications cliniques, qui découlent des consta- tations pharmacologiques, concernent les déficits en sérotonine res- ponsables de désordres neuropsychiatriques tels que: - dysthymies, en particulier de syndromes dépressifs (avec associa- tion possible d'antidépressaurs), - troubles du sommeil (effet inducteur), - certains mouvements anormaux. La posologie moyenne préconisée chez l'homme est de l'ordre de 1,5 à 2 gparvoie orale etde O,5g par voieparentérale,parjour, de 5-acétyloxy-L-tryptophane ou d'un de ses sels d'addition. RE V E N D I C A T I 0 N S 1. Nouveau dérivé de 5-hydroxy-L-tryptophane caractérisé en ce qu'il est choisi parmi l'ensemble constitué par: a) le 5-acétyloxy-L-tryptophane, et b) ses sels d'addition. 2. 5-acétyloxy-L-tryptophane. 3. Acétate de 5-acétyloxy-L-tryptophane monohydrate. 4. Procédé de préparation du 5-acétyloxy-L-tryptophane à partir du 5hydroxy-L-tryptophane, caractérisé en ce qu'on fait réagir un équivalent de 5-hydroxy-L-tryptophane avec un équivalent d'acide perchlorique dissous dans de l'acide acétique anhydre, on traite un équivalent du produit salifié ainsi obtenu par 1 à 2 équi- valents (de préférence 2 équivalents) d'anhydride acétique pour obtenir l'acétate de 5-acétyloxy-L-tryptophane, la neutralisation de ce sel d'addition d'acide, notamment au moyen de NH4OH, donnant le 5-acétyloxy-L-tryptophane. 5. Composition thérapeutique caractérisée en ce qu'elle renferme en association avec un excipient physiologiquement accepta- ble, au moins un composé choisi parmi l'ensemble constitué par le acétyloxy-L-tryptophane et ses sels d'addition, en tant qu'ingré- dient actif.