FR 2498606 A1 19820730 FR 8119341 A 19811014 1. La présente invention se rapporte à de nouveaux dérivés d'apramycine. Des modifications chimiques d'antibiotiques consti- tués d'aminoglucosides ont été étudiées de manière impor- tante pour renforcer l'action antimicrobienne et réduire les effets secondaires. La demanderesse a trouvé que l'action antimicrobienne de l'apramycine (par exemple décrite sous le nom de facteur II de nébramycine dans la demande de bre- vet japonais publiée n 51-36358) est remarquablement ren- forcée par enlèvement des groupes 5- et 6- hydroxy, et est arrivée à la présente invention. La présente invention se rapporte à de nouveaux dérivés de 5,6-didésoxyapramycine représentés par la formu- le générale suivante (I): 2. 2498606 X oY I CH--N OY XHN NHX (1) o X représente l'hydrogène ou un groupe de protection du groupe amino, Y représente l'hydrogène ou un groupe de pro- tection du groupe hydroxy et la ligne en pointillé représen- te la présence ou l'absence d'une double liaison. Dans la présente invention, les dérivés de 5,6-di- désoxyapramycine représentés par la formule générale (I) comprennent des bases libres et leurs sels, et, en parti- culier, les sels d'addition avec les acides, non toxiques, pharmaceutiquement acceptables. Les acides qui peuvent For- mer les sels d'addition avec des acides sont des acides mi- néraux, par exemple l'acide chlorhydrique, l'acide bromhy- drique, l'acide iodhydrique, l'acide sulfurique,l'acide carbonique, etc., et des acides organiques, par exemple l'acide acétique, l'acide fumarique, l'acide malique, l'acide tartrique, l'acide maléique, l'acide citrique, l'aci- de mandélique, l'acide ascorbique, l'acide gallique, etc. Les composés (I) de la présente invention peuvent être produits à partir d'apramycine selon la séquence de réactions suivante. L'apramycine peut être représentée par la formule développée suivante: OH OH OH 11' OW OH qui représente également sa conformation plus exactement que la formule simplifiée (II) qui est employée pour plus de commodité dans la présente description. Tous les composés dérivant de la formule (II) sont également représentés selon la formule (II). 4. (Séquence de réactions) 6: Première étape Protection de groupes amino Deuxième étape Protection de groupes 5- et 6-hydroxy xl ! NEX1 Troisième étape z o o0 Protection de groupes 6'-,2"-, 3"- et 6"-hydroxy Quatrième étape Enlèvement de groupes de pro- tection de groupes 5- et 6-hydroxy (III) X EN il X HN (Y) NHX1 NEC1 OXH OH NiC1 ANEC1 OSO RX 0 l2 0S02R NEl.1 Cinquième étape Sulfonylation de groupes 5- et 6-hydroxy Sixième étape NaI/Zn ou KI/Zn Septième étape Réduction et/ou enlèvement de groupes de protection NHIC A (V:I) 51 K X EN xu XO x1 (VIII) (I) 5. -Ub Dans ces différentes formules, X représente un groupe de protection du groupe amino, Yi représente un groupe de protection du groupe hydroxy, Z représente un groupe cyclique de protection du groupe hydroxy, RSO2 re- présente le groupe sulfonyle, et X, Y et la ligne en poin- tillé ont les mêmes désignations que celles indiquées ci- dessus. (Première étape) Dans cette étape, les groupes 1-, 3-, 2't-, 7t-, et 4"-amino de l'apramycine sont protégés.Comme groupes de protection à introduire,les groupes qui peuvent être faci- lement retirés après terminaison de la réaction sont de préférence employés. Par exemple, on indique à titre d'exemples un groupe alcanoyle en C2-C5 (formyle, acétyle, propanoyle, butanoyle, pentanoyle, etc.), un groupe alcoxy- carbonyle en C2-C6 (méthoxycarbonyle, éthoxycarbonyle, pro- poxycarbonyle, t-butoxycarbonyle, t-amylosycarbonyle), un groupe aroyle en C7-C10 (benzoyle, phtaloyle, etc.), un groupe aryloxycarbonyle en C 6- C10 (phénoxycarbonyle, etc.), un groupe aralcoxycarbonyle en C7-C12 (benzyloxycarbonyle, etc.) et le groupe m-nitrophénylthio, triphénylthio etc.et, en particulier on préfère le groupe benzyloxycarbonyle. Le procédé d'introduction de groupes de protec- tion est connu et, dans le cas ob l'on introduit le groupe benzyloxycarbonyle comme groupe de protection, on peut utiliser plus de 5 équivalents de chlorure de carbobenzo- xy dans la réaction. (Deuxième étape) Dans cette étape, les groupes 5- et 6-hydroxy sont protégés. Comme groupes de protection les groupes qui sont condensés avec les groupes 5- et 6-hydroxy pour for- mer des acétals ou des cétals sont de préférence employés; par exemple, des cétones telles que l'acétone,la méthyl- éthylcétone, la cyclopentanone et la cyclohexanone, ou des aldéhydes tels que l'acétaldéhyde et le propionaldéhyde sont condensés de préférence; dans la réalisation de la réaction, leurs dialkylcétals ou leurs acétals correspon- 6. 7. 2498606 dants sont soumis à la réaction pour réaliser le produit fi- nal au moyen de la réaction connue d'échange d'acétals ou de cétals. On fait réagir les agents de protection en excès pour protéger les groupes 2"-, 3"- et 6"-hydroxy en même temps et puis les groupes de protection introduits à la position 2", 3" et 6" sont retirés sélectivement par hydrolyse avec des acides faibles, tels que l'acide acétique, pour donner les composés protégés en 5,6, Cette réaction est effectuée de manière classi- que dans le domaine de la chimie des sucres et peut être obtenue dans des solvants inertes convenables (par exemple le benzène, le toluène, le xylène, la diméthylformamide, etc.) en présence d'une quantité catalytique d'acides (par exemple l'acide sulfurique, l'acide formique, l'acide p-to- luènesulfonique, etc.) dans des conditions anhydres, (Troisième étape) Dans cette étape, les groupes 6t_, 2"-, 3"- et 6"-hydroxy sont protégés, Comme groupes de protection à introduire,les groupes qui peuvent être facilement retirés après termination de la réaction, par exemple des groupes acyles tels que les groupes formyle, acétyle et benzoyle, benzyle, tétrahydropyranyle, etc,, sont préférés, et la réaction peut être réalisée de manière classique. Par exem- ple, dans le cas de l'introduction de groupe acétyle, on peut utiliser dans la réaction plus de 4 équivalents d'anhy- dride acétique ou de chlorure d'acétyle. (Quatrième étape) Dans cette étape, les groupes de protection en positions 5 et 6 introduits dans la seconde étape sont re- tirés et la réaction peut être obtenue par hydrolyse dans de l'eau contenant des acides, ou une solution aqueuse de méthanol, ou de l'acétone dans des conditions modérées. Comme acides, on peut indiquer à titre d'exemples des aci- des minéraux, tels que l'acide chlorhydrique, l'acide sul- furique, l'acide phosphorique, etc., et des acides organi- ques tels que l'acide formique, l'acide acétique, etc. par- mi lesquels un acide convenable est choisi de préférence 8. 2498606 selon le genre de groupes de protection., (Cinquième étape) Dans cette étape, les groupes 5- et 6-hydroxy sont sulfonylés et, comme groupes sulfonyles à introduire, on peut indiquer à titres d'exemples un groupe alkylsulfony- le en C1-C4 [méthanesulfonyle (mésyle), éthanesulfonyle, propanesulfonyle, butanesulfonyle, etc.], arylsulfonyle [benzènesulfonyle, p-toluènesulfonyle (tosyle), etc.] ou aralkylsulfonyle (benzylsulfonyle, etc.), et le groupe mé- thanesulfonyle (mésyle) est préféré. Cette réaction peut être réalisée par réaction avec des halogénures de sulfo- nyle à introduire dans de la pyridine ou de la picoline. (Sixième étape) Dans des solvants convenables (diméthylsulfoxyde, diméthylformamide, hexamétapol, glyme, etc.), les composés ,6disulfonylés (VII) sont mis à réagir avec de l'iodure de sodium ou de l'iodure de potassium et de la poudre de zinc pour former une double liaison entre liatome de carbo- ne en position 5 et l'atome de carbone en position 6 avec enlèvement, par réduction, du groupe sulfonyle [Carbohy- drate Research vol 1, 338-340 (1965)]. Les conditions réac- tionnelles peuvent être selon le procédé connu. (Septième étape) Cette étape comprend deux étapes, l'une est la réduction de la double liaison en 5,6 et l'autre est l'en- lèvement des groupes de protection des groupes 1-, 3-, 2'-, 7'- et 4"amino et des groupes de protection des groupes 6'-, 2"-, 3"- et 6"-hydroxy. La réduction peut être réalisée au moyen de l'hy- drogénation dite catalytique avec du platine ou du palla- dium-carbone comme catalyseur dans de l'hydrogène. Dans l'enlèvement des groupes de protection, on peut choisir un procédé convenable à partir des procédés connus selon le genre de groupes de protection. Si le grou- pe de protection du groupe amino est le groupe benzyloxy- carbonyle et que le groupe de protection du groupe hydroxy est le groupe acétyle, ils peuvent être retirés en même 9. 2498606 temps par hydrolyse en présence dtun alcali (soude, potasse, etc.). La réduction dans cette étape fournit des composés ayant la formule générale (I) o X représente un groupe de protection du groupe amino, Y représente un groupe de protec- tion du groupe hydroxy et la ligne en pointillé représente l'absence d'une double liaison; la réaction d'enlèvement des groupes de protection fournit des composés ayant la for- mule générale (I) o X et Y représentent l'hydrogène et la ligne en pointillé représente la présence d'une double liai- son; et la réduction et l'enlèvement en même temps des grou- pes de protection fournit des composés o X et Y représentent l'hydrogène et la ligne en pointillé représente l"absence d'une double liaison. De manière plus définie, les composés suivants sont présentés spécifiquement: la 5,6-didésoxyapramycine, la 6',2",3",6"-tétra-0-acétyl-l,3,2t,7?,4"-penta- N-benzyloxycarbonyl-5,6-didésoxyapramycine, la 5,6-didésoxy-5,6didéhydroapramycine, et la 6t,2",3",6"-tétra-0-acétyl-1,3,2t,7?t,4"-penta- N-benzyloxycarbonyl-5,6-didésoxy-5,6-didéhydroapramycine. Les dérivés de 5,6-didésoxyapramycine et leurs sels non toxiques dans la présente invention ont des activités antimicrobiennes supérieures et sont très efficaces non seu- lement vis-à-vis des bactéries sensibles, qui sont sensibles à l'apramycine et à une amikacine antibiotique puissante ré- cemment connue [Bristol Banyu: l-N-(4-amino-2-hydroxybutyryl) kamamycine A] mais également à des bactéries résistantes. Dans ce qui suit, les concentrations d'inhibition minima (CIM, pg/ml de la 5,6-didésoxyapramycine (I: X=Y=H; la li- gne en pointillé représente l'absence d'une double liaison), de l'apramycine et de l'amikacine sont présentées. lo. 2498606 Composé DDA APR AMK Nom des bactérie! Escherichia coli W-677/R5 HL 1 ACC(6')-4 3,13 6,25 >100 " ACC(3)-I 3,13 12,5 6,25 W-677/JR762 6,25 12,5 12,5 AAD(2") " EC-14 1,56 3,13 3,13 " (No.12)EC-159 6,25 6,25 12,5 " (No.2)EC-151 3,13 6,25 100 Proteus inconstans 164 AAC(2') 6,25 25 12,5 " In-15 0,39 0,78 0,78 Proteus rettgeri Ret-ll 0,78 1,56 3,13 (No.28)Ret-59 0,78 1,56 1,56 Proteus morganii Morg-74 0,78 6,25 1,56 " Morg-96 25 >100 50 Proteus vulgaris CN329 6,25 6,25 12,5 Proteus mirabilis Pr-4 12,5 50 25 Staphylococcus aureus FDA 209 0,39 1,56 0,78 PJC-l 0,391,56 0,78 -PJC-1 " ATCC-25923 0,78 1,56 1,56 "fl S-25 0,39 1,56 3,13 Staphylococcus aureus No.74 0,78 3,13 6,25 Staphylococcus epidermidis ATCC- 14990 0,2 0,39 0,39 " EP-18 0,39 0,78 1,56 " 7TB-172 0,2 0,39 1,56 Moraxella villon AAC(6')-2 1,56 6,25 25 Klebsiella pneumoniae K1-184 1,56 3,13 6,25 (No.13)Kl-188 1,56 3,13 25 Pseudomonas aeruginosa TB-151 1,56 6, 25 3,13 " TB-166 1,56 3,13 6,25 Serratia marcescens ATCC-13880 1,56 3,13 3,13 "x HMA-23 1,56 6,25 25 " MA-48 6,25 25 25 "l MA-81 3,13 6,25 6,25 11. 2498606 TABLEAU (SUITE) Enterobacter cloacae C1-126 0,78 3,13 1,56 " No. 20 1,56 3,13 50 Enterobacter aerogenes AE-16 1,56 6,25 3,13 B" AE-27 1,56 6,25 3,1 DDA = 5,6-didésoxyapramycine, APR = Apramycine, AMK = Ami- kacine o Observé selon le procédé standard pour la détermination de la CIM1)2) réglé par Japan Society of Chemotherapy. O le disque pour l'expérimentation de sensibilité à l'antibiotique [milieu modifié de Mueller-Yinton (Nissui)] est employé comme milieu expérimental. 1) Chemotherapy 16(1), 98-99, (1968) 2) Chemotherapy 22(6), 1126-1128, (1974) Comme présenté dans le tableau ci-dessus, les com- posés (I) de la présente invention ont une activité antimi- crobienne plusieurs fois plus forte que l'apramycine, et il est particulièrement remarquable que les composés (I) ont des activités antimicrobiennes contre certains genres de bacté- ries résistant à l'amikacine plusieurs fois à plusieurs di- zaines de fois plus fortes que l'amikacine. En conséquence, les composés (I) de la présente in- vention sont utilisés pour le traitement et l'empêchement de diverses infections provoquées par un grand nombre de bacté- ries gram-positives et gram-négatives, contenant des bacté- ries résistantes. En outre, les composés (I) de la présente invention peuvent être ajoutés à des produits alimentaires périssables, en tant que bactéricide, et, en outre, en tant que désinfectant, appliqués à des emplacements et à des us- tensilbs, o il est possible que les bactéries existe.nt. Les composés (I) de la présente invention peuvent être administrés aux êtres humains et à d'autres animaux par voie orale ou parentérale. En particulier, des sels pharmacologiquement acceptables (par exemple le sulfate, etc.) peuvent être administrés au moyen d'injection intraveineuse, d'injection intramusculaire ou d'injection sous-cutanée sous forme de solutions aqueuses, Les composés (I) peuvent être placés dans des ampoules fermées de manière étanche sous forme de solutions, conservés de préférence dans des ampoules ou dans des fioles sous forme de cristaux, de poudres, de cristaux fins, de lyophilisats, etc. et dissous avant l'utilisation. Un stabilisant peut être également ajouté. Sous ce rapport, les composés (I) avec des compo- sants pharmaceutiques tels que des diluants (par exemple l'amidon, le saccharose, le lactose, le carbonate de calcium, le kaolin, etc.), des charges (agents d'extension) (par exemple le lactose, l'amidon, le carbonate de calcium, le phosphate de calcium, le kaolin, la bentonite, le talc, etc.), des lubrifiants (par exemple lacide stéarique, la paraffine, l'acide borique, la silice, le benzoate de so- dium, le polyéthylèneglycol, etc.), etc. peuvent être for- mulés sous forme de poudres, de tablettes, de granulés, de capsules, de truchisques, de sirops secs, de suppositoires, de suspensions, d'émulsions, de produits d'inhalation, de produits pour des gouttes pour les yeux, des poudres pour l'administration locale,d 'onguents, etc. et administrés. Dans l'application pour le traitement d'infections sensibles des êtres humains ou des animaux, les composés (I) peuvent être administrés à une dose quotidienne de 0,01-5 g/kg pour l'injection, de 0,01-10 g/kg pour l'admi- nistration orale et de 0,01-10 g/kg pour l'administration locale respectivement toutes les 3-12 heures. Cependant, la dose peut être augmentée ou diminuée selon la sensibili- té des bactéries pathogènes, la fréquence d"administration et l'état d'un malade. L'exemple suivant montrera bien la présente inven- tion avec plus de détail. EXEMPLE 5,6-didésoxyapramycine (a) 1,3,2',7t,4"-penta-N-benzyloxycarbonylapramy- cine (III: X1 = PhCH20CO) 12. 13. 2498606 Du semi-hydrate d1apramycine (10,000 g, 18,23 mmo- les) est dissous dans de l'eau (150 ml) à laquelle on ajou- te du carbonate de sodium (10,047 g, 94,79 mmoles) et de l'acétone (100 ml) pour donner un mélange homogène, le mélan- ge est refroidi jusqu'à -5 à -lac, on ajoute goutte à gout- te du chlorure de carbobenzoxy (14,63 ml, 102,1 mmoles) goutte à goutte en 15 minutes en agitant vigoureusement,et, après agitation pendant 2 heures et demie à la température ambiante, le mélange réactionnel est déversé dans de l'eau et de la glace (800 ml). Le précipité résultant est filtré, lavé avec de l'eau et dissous dans du méthanol (100 ml), qui est évaporé sous pression réduite après décoloration avec du carbone actif (3 g).De l'éther est ajouté au rési- du obtenu et La paroi des tubes est frottée avec une tige métallique. La poudre qui précipite est filtrée, lavée avec de l'éther et séchée sur du pentoxyde de phosphore sous pression réduite pour donner le composé indiqué en titre (22,134 g, rendement: 100 %), Une partie de ce composé est chromatographiée sur une colonne [adsorbant: gel dit Kiesel gel 60 (fabriqué par la société dite Merck & Co.); éluant: chloroforme-méthanol (97: 3)],les fractions pu- res sont rassemblées, les solvants sont évaporés sous pres- sion réduite, et le résidu est traité avec du méthanol. éther pour donner une poudre. [a]23',0 +68,11,0 (c=1,037, méthanol) IR:VmaxKBr 3406, 1700, 1520 cm 1. max Analyse élémentaire Calculée (pour C61H71N5021'H20) (%) C, 59,65; H, 5,99; N, 5,70 Trouvé (%) C, 59,64; H, 5,87; N, 5,70, (b) 1,3,2',7',4"-penta-N-benzyloxycarbonyl-5,6-0- cyclohexylidèneapramycine (IV: X 1-PhCH 20CO, Z = Le produit provenant de (a) (22,134 g, 18,23 mmoles) est dissous dans de la diméthylformamide (630 ml), on ajou- te du diméthylacétal de cyclohexanone (37 ml, 248,9 mmoles) et de l'acide p-toluènesulfonique (2,128 g), et le mélange est agité sous pression réduite de 25 mm Hg en chauffant à C pendant 3 heures et puis neutralisé avec de la trié- thylamine (1,61 ml). Le solvant est retiré par distilla- tion sous pression réduite, et le résidu (33,1 g) est dis- sous dans de l'acétate d'éthyle (300 ml), lavé avec de l'eau, séché sur du sulfate de sodium et puis évaporé sous pres- sion réduite. La poudre blanche ainsi obtenue (25,13 g) est dissoute dans de l'acide acétique à 80 % (210 ml), main- tenue à la température ambiante pendant 45 minutes et puis déversée dans de l'eau et de la glace (1 1). Le précipité résultant est filtré, lavé avec de l'eau et dissous dans de l'acétate d'éthyle. Le mélange est lavé avec de l'eau, sé- ché sur du sulfate de sodium et évaporé sous pression rédui- te. Le résidu (23,60 g) est chromatographié sur une colon- ne [adsorbant: gel dit Kiesel gel 60 (fabriqué par la so- ciété dite Merck & Co.) 800 g; éluant: chloroforme%chloro- forme-acétone (99: 1%60: 40)].Chaque fraction est véri- fiée par chromatographie sur couche mince, les fractions présentant des taches multiples sont encore chromatogra- phiées sur une colonne à maintes reprises de la même maniè- re, et les fractions présentant une seule tache sont ras- semblées et cristallisées dans du méthanol pour donner le composé indiqué en titre sous forme de produit pur (13,893 g, rendement: 59,1 ' p.f.: 140-1430 C. [(]25+ 63,7 1,00 (c=l,034, acétate dléthyle) IR À KBr 3400, 1703, 1518 cm-1 max Analyse élémentaire: Calculée (pour C67H 79N50212H20) (%) C, 60,67; H, 6,31; N, 5,28 Trouvé (%): C, 60,44; H, 6,09, N, 5,30. (c) 6',2",3",6"-tétra-0-acétyl-l,3,2',7',4"-penta- N-benzyloxycarbonyl-5,6-0-cyclohexylidèneapramycine (V:X = PhCH2OCO, Z: G , YI=CH3CO). 14. 15. 2498606 Le produit provenant de (b) (7,000 g, 5,425 mmo- les) dissous dans de la pyridine (91 ml) à laquelle on ajou- * te de l'anhydride acétique (20,4 ml), maintenu à la tempé- rature ambiante pendant 24 heures et déversé dans de l'eau et de la glace. Le précipité est rassemblé par filtration, lavé avec de l'eau et dissous dans du chloroforme, et le mé- lange est lavé avec de l'eau, séché sur du sulfate de so- dium et évaporé sous pression réduite. Le résidu (7,80 g) est dissous dans du chloroforme et de lhexane y est ajou- té. Le précipité résultant est filtré pour donner le compo- sé indiqué en titre (7,345 g, rendement: 94,8 %), [l]25 + 77,2 + 1,10 (c=1,079, chloroforme) [aD KBrl IR:v maBr 3440, 1745, 1724, 1515 cm- IR:max Analyse élémentaire Calculée (pour C75H87N5025 0,5H20) (%): C, 61,38; H, 6,04; N, 4,77. Trouvé (%O): C, 61,17; H, 5,86; N, 4,71. (d) 6',2",3",6"-tétra-0-acétyl-1,3,2',7',4"-penta- N-benzyloxycarbonylapramycine (VI: Xl=PhCH20CO, Y1 = CH3CO). Le produit provenant de (c) (6,000 g, 4,114 mmoles) est dissous dans de l'acide acétique (80 %, 60 ml) et de l'acétone (30 ml), chauffé à 70 C pendant 6 heures et demie et déversé dans de l'eau et de la glace.Le précipité résultant est fil- tr6,lavé avec de l'eau et dissous dan2 de l'acétate d'éthyle,et le mé- lange est lavé avee de l'eau,séché sur du-gulfate de sodium et évaporé sous pression réduite.Le-résidu (5,92 g) est dissous dans de l'acétate d'éthyle et de l'hexane y est ajouté.Le précipité (5,60 g) est soumis à une chromatographie en phase liquide [colonne: colonne pré- tassée dite Prepack Column, dimension C (fabriquée par la société dite Merck & Co.)] et élué avec du benzène-acétate d'éthyle (1: 2) à un taux de 20 ml/fraction. Les fractions n0 33-104 sont rassemblées, le solvant est évaporé, le ré- sidu obtenu est dissous dans du chloroforme et de l'hexane y est ajouté pour donner le composé indiqué en titre (4,975 g; rendement: 87 %). 16. [J 2+ 84,2 a 1,30 (c=1,053, chloroforme) IR: KBmax 3400, 1747, 1724, 1518 cm1 Max Analyse élémentaire Calculée (pour C69779N5025.H20) (%) C, 59,35; H, 5,85; N, 5,02 Trouvé (%): C, 59,38; H, 5,61; N, 4,97. (e) 6',2",3",6"-tétra-0-acétyl-1,3,2',7',4"-penta- N-benzyloxycarbonyl-5,6-di-0-mésylapramycine (VII: X = PhCH20CO, Y = CH3CO0, R=CHN3). Le composé provenant de (d) (200 mg, 0,143 mmole) est dissous dans de la pyridine anhydre (2 ml) et évaporé à sec avec une pompe à vide sous pression réduite.le résidu est dissous dans de la pyridine anhydre (2 ml), et du chlo- rure de méthanesulfonyle (0,166 ml, 2,15 mmoles) y est ajou- té. Après avoir maintenu à la température ambiante pendant heures,de l'eau et de la glace sont ajoutées et le mélan- ge est extrait avec du chloroforme, lavé avec de l'eau, de l'acide chlorhydrique à 10 %, de l'eau, du sulfate acide de potassium à 5 '%, de l'eau, du bicarbonate de sodium à 5 % et de l'eau, respectivement, et séché sur du sulfate de so- dium et puis évaporé sous pression réduite. Le résidu obte- nu (225 mg) est soumis à la chromatographie en phase liqui- de avec le dispositif formé d'une colonne pré-tassée dite Prepack Column, dimension B (fabriqué par la société dite Merck & Co.) et élué avec du benzène-acétone (4: 1) (10 ml par fraction, débit: 5 ml/mn). Les fractions n 17-33 sont rassemblées et évaporées sous pression réduite, le résidu ob- tenu est dissous dans du chloroforme, et dans le mélange, on ajoute de l'hexane pour donner le composé indiqué en titre (217 mg, 97,7 %) sous forme de précipité. [l]3J,5 + 58,6 - 1,0 (c=1,027, chloroforme). IR:Vmax CHC3 3390, 1743, 1719, 1518, 1349, 1175 cm-1 Analyse élémentaire (pour C71H83N5029S2 H20) Calculée (%): C, 54,92; H, 5,52; N, 4,51; S, 4,13. Trouvé (%): C, 54,86; H, 5,24; N, 4,42; S, 4,11. 17. 2498606 (f) 6',2",3",6"-tétra-0-acétyl-1,3,2',7,4"-penta- N-benzyloxycarbonyl-5,6-didésoxy-5,6-didéhydroapramycine (VIII: Xl=PhCH20CO, Yl=CH3CO), Le produit provenant de (e) (217 mg, 0,14 mmole) est dissous dans de la diméthylformamide (8,5 ml), de l'io- dure de sodium (2,17 g) et de la poudre de zinc (1,09 g) sont ajoutés, et le mélange est agité en chauffant à C. Deux heures après, le mélange est refroidi jusqu'à la température ambiante, du chloroforme est ajouté,la ma- tière insoluble est filtrée et lavée avec du chloroforme, le filtrat et le lavage sont combinés, lavés respectivement avec du carbonate de sodium à 5 %, de l'eau, une solution de thiosulfate de sodium et de l'eau, séchés sur du sulfa- te de sodium et puis évaporés sous pression réduite. Le ré- sidu obtenu (194 mg) est soumis à une chromatographie sur colonne avec le dispositif de colonne pré-tassée dit Pre- pack Column, dimension B (fabriqué par la société dite Merck & Co.) et élué avec du benzène - acétone (5: 1) (10 ml par fraction, débit: 5 ml/mn) . Les fractions n 27-47 sont rassemblées et évaporées sous pression réduite, et le résidu obtenu (164 mg) est recristallisé dans du chlorure de méthylène-méthanol pour donner le composé indiqué en ti- tre (137 mg; rendement: 72,1 %) sous forme de prismes. p.f. 180,5 - 182 C. ["]D3'5 + 135,5 + 1,7 (c=l,009, chloroforme). IR:vNujol 3370, 1751, 1723, 1703, 1525 cm 1 max Analyse élémentaire (pour C69H77N5023.H20) Calculée (%): C, 60,83; H, 5,84; N, 5,14 Trouvé (%): C, 60,65; H, 5,54; N, 5,14 RMN: CDCt3:CD30D(l:5) 7,30 (s, Ph), 5,55 (large s, H ppm, ( H6), 5,08 (s, PhCH2), 2,93(s, NCH3), 2,08, 2,00, 1,84 (s,Ac). (g) 5,6-didésoxyapramycine (I: X=Y=H, la ligne en pointillé représente l'absence d'une double liaison). Le produit provenant de (f) (250 mg, 0,184 mmole) est dissous dans du méthanol (8 ml) on ajoute du palladium à %-carbone (50 mg) et de l'acide chlorhydrique 2N (0,46 18. ml), et l'hydrogénation catalytique est conduite dans H2 ga- zeux sous 4 atmosphères. 7 heures plus tard, on ajoute enco- re du palladium à 10 % -carbune (50 mg) et de l'acide chlo- rhydrique 2N (0,23 ml), et l'hydrogénation catalytique est conduite de nouveau dans H2 gazeux sous 4 atmosphères. 4 heures plus tard, le catalyseur est séparé par filtration et lavé avec une solution aqueuse de méthanol, le filtrat et le lavage sont combinés et neutralisés avec une résine échangeu- se d'ions dite AmberJite IR-45 (type OH), la résine est sépa- rée par filtration et lavée avec une solution aqueuse de mé- thanol, le filtrat et le lavage sont combinés, et le sol- vant est évaporé à sec sous pression réduite pour donner le résidu (137 mg). Le composé ci-dessus (137 mg) est dissous dans de l'eau (3 ml), ajouté à de la soude 2N (1,96 ml) à 1000C en agitant et chauffé au reflux pendant 4 heures, Le mélange est neutralisé avec de l'acide chlorhydrique 2N, adsorbé sur une résine échangeuse d'ions dite Amberlite CG-50 (type NH, 50 ml), lavé avec de l'eau (250 ml) et élué avec de l'eau (1 1) et de l'ammoniaque 0,4 N (1 1) au moyen du procédé par gra- dient (11 ml par fraction). Les fractions n0 91-121 sont ras- semblées et évaporées à sec sous pression réduite, le résidu obtenu (94 mg) est dissous dans l'eau (3 ml), de l'acide sul- furique 0,lN (7,25 ml) est ajouté, le mélange est réglé à un pH de 4,5 et condensé jusqu'à i ml sous pression réduite, de l'éthanol (16 ml) y est ajouté, et le précipité résultant est filtré et lavé avec de lVéthanol.Ce précipitéest dissous dans de l'eau, du carbone actif (15 mg) est ajouté, filtré avec un filtre enverre (fabriqué par la société dite Milli- pore & Co) 30 minutes plus tard, lavé avec de l'eau, et le filtrat et le lavage sont combinés et lyophilisés. Le rési- du obtenu est maintenu dans un dessicateur contenant du bro- mure de sodium(200 g) et de l'eau (100 g) jusqu'-à ce que le résidu absorbe de l'humidité et soit à poids constant pour donner du sulfate de 5,6-didésoxyapramycine (129 mg, rende- ment: 75,4 %). 19. 2498606 ]4 + 106,4 + 1,4 (c=1,041, eau). Analyse élémentaire (pour C21H41N509.2,5H2SO4. 10H20) Calculée (%): C, 27, 03; H, 7,13; N, 7,51; S, 8,59 Trouvé (%): C, 27,00; H, 7,11; N, 7,63; S, 8,76 RMN (ppm à partir de la norme extérieure de l'eau lourde) D20 6ppm 6, 06 (d, H' ou H" J=4Hz), 5,99 (d, H" ou H' PPM 1 1 - I J=4Hz), 5,79 (d, H'8, J=8Hz), 3,45 (s, N-CH3). La présente invention n'est pas limitée aux exemples de réalisation qui viennent d'être décrits, elle est au con- traire susceptible de modifications et de variantes qui ap- paraltront à l'homme de l'art. 20. REVENDICATIONS 1 - Dérivé d'apramycine, caractérisé en ce qu'il est représenté par la formule générale suivante: x OY C OY NHX NE N o X représente l'hydrogène ou un groupe de protection du groupe amino, Y représente l'hydrogène ou un groupe de pro- tection du groupe hydroxy, et la ligne en pointillé repré- sente la présence ou l'absence d"une double liaison, et ses sels d'addition avec les acides, pharmaceutiquement accepta- bles. 2 - Dérivé d'apramycine selon la revendication 1, caractérisé en ce que le groupe de protection du groupe ami- no est choisi dans le groupe se composant de groupes alca- noyles en C 2-C5 alcoxycarbonyles en C2-C6, aroyles en C7-C1l, aryloxycarbonyles en C6-C1,, aralcoxycarbonyles en C7-C12, m-nitrophénylthio et triphénylthio. 3 - Dérivé d'apramycine selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisé en ce que le groupe de protection du groupe amine est le groupe benzyloxycarbonyle. 4 - Dérivé d'apramycine selon la revendication 1, caractérisé en ce que le groupe de protection du groupe hydroxy est choisi dans le groupe se composant de groupes acyles, benzyle et tétrahydropyranyle. - Dérivé d'apramycine selon la revendication 1 ou la revendication 4,caractérisé en ce que le groupe de pro- tection du groupe hydroxy est le groupe acétyle. 6 - Dérivé d'apramycine selon la revendication 1, 21. 2498606 caractérisé en ce qu'il est formé par la 5,6-didésoxyapra- mycine. 7 - Composition pharmaceutique à activité anti- microbienne contre les bactéries gram-positives et gram-né- gatives, caractérisée en ce qutelle renferme, en tant qu'in- grédient actif, au moins un des dérivés dapramycine de la revendication 1, en association avec un ou plusieurs ad- juvants pharmaceutiquement acceptables.