FR 2510999 A1 19830211 FR 8216348 A 19820927 e 51 0999 La présente invention a pour objet de nou- veaux dérivés de l'acide céphalosporanique, leur prépa- ration et leur application en thérapeutique, à titre de principes actifs de médicaments. L'invention concerne plus particulièrement les composés répondant à la formule I S H S Pl C CO N () 'N '"CH 2-S-R 4 OOR 3 dans laquelle R 1 représente un groupe 2-aminothiazole-4-yle ou 1 H- pyrazole-3-yle, R 2 représente l'hydrogène ou un groupe alkyle, carboxy- alkyle, alcoxycarbonylalkyle, hydroxyalkyle, cyano- alkyle ou carbamoylalkyle, R 3 représente l'hydrogène, un groupe pivaloyloxyméthyle, un reste facilement éliminable du groupe ester ou un cation, et R 4 représente un groupe aminotétrazolyle éventuellement substitué, et leurs sels. Conformément au procédé de l'invention,-pour préparer les composés de formule I a) lorsque R 2 a une signification autre qu'un groupe alcoxycarbonylalkyle et que R 3 représente un atome d'hydrogène ou un cation, on fait réagir un composé de formule II U P il (I Hl' Pl _ cu NBH HS(I CH 20 CO CH 3 OOR 3 dans laquelle R 1, R 2 et R 3 ont les significations données précédemment, avec un composé de formule III HS-R 4 (III) dans laquelle R 4 a la signification donnée précé- demment et o un groupe amino libre, éventuellement présent peut être protégé, et, s'il est présent, on élimine le groupe protecteur dans le produit ainsi obtenu, ou b) lorsque R 2 représente un groupe carboxyalkyle, on hydrolyse le composé correspondant de formule I dans laquelle R 2 représente un groupe alcoxycarbonylalkyle ou carbamoylalkyle, ou c) lorsque R 2 a une signification autre qu'un groupe carboxyalkyle, on fait réagir un composé de formule IV R NH H S (IV) R 5 ' _ CH 2-S-R 4 R 3 dans laquelle R 3 et R 4 ont les significations données précédemment et R 5 représente un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur du groupe amino, avec un composé de formule V /OR'2 (V) N- Rj-C-COOH dans laquelle R 1 a la signification données précé- demment et R 2 a la même signification que R 2 à l'exception du groupe carboxyalkyle, ou l'un de ses dérivés réactifs, et, si on le désire, on convertit les composés obtenus de formule I dans laquelle R 3 signifie l'hydrogène et/ou R 2 représente un groupe carboxyalkyle, en leurs esters ou en leurs sels, ou, si on le désire, on scinde un groupe ester si celuici est présent comme substituant -COOR 3 ou dans le substituant R 2, et on récupère les composés de formule I ainsi obtenus sous forme libre ou sous forme d'un sel. Le procédé a) peut être effectué de manière connue, comme décrit par exemple dans "Cephalosporins and Penicillins", Edwin H Flynn, Acad Press 1972, page 676 On peut utiliser des groupes protecteurs connus du groupe amino; ces groupes peuvent être ensuite éliminés de manière connue, par exemple par hydrolyse. Les produits de départ peuvent contenir des groupes carboxy estérifiés, par exemple un groupe COOR 3 o R 3 est différent de l'hydrogène ou un groupe ester présent dans R 2 La réaction est telle cependant que ces groupes sont scindés durant la réaction. Le procédé b) peut être effectué de manière connue, par exemple en dissolvant un produit de départ de formule I o R 2 représente un groupe carbamoylalkyle, dans un mélange d'acide acétique et d'acide sulfurique dilué et en ajoutant, à -basse température, par exemple à environ 0 , une solution aqueuse d'un nitrite de métal alcalin Lorsque dans le produit de départ le substituant R 2 signifie un groupe alcoxycarbonyl- alkyle, l'hydrolyse peut être effectuée par exemple en utilisant de l'hydroxyde de sodium aqueux. Dans le procédé c), les dérivés réactifs appropriés de l'acide de formule V comprennent les halogénures d'acides ou les anhydrides d'acides, par exemple avec l'acide pivalique ou les semi-esters de l'acide carbonique, les complexes activés avec le diméthylformamide et l'oxychlorure de phosphore, les azides d'acides ou les esters activés, par exemple dérivés de phénols, de N-hydroximides cycliques ou de thiols hétérocycliques, par exemple le 2-pyridinethiol, la 2,2 '-dithiopyridine ou, en particulier le 2-benzo- thiazolethiol On opère avantageusement en dissolvant ou en mettant en suspension le composé de formule V, ou l'un de ses dérivés réactifs, dans un solvant inerte, comme par exemple un hydrocarbure chloré tel que le dichloromé- thane, ou un ester tel que l'acétate d'éthyle. On ajoute ensuite cette solution ou cette suspension à une solution ou à une suspension du composé de formule IV dans un solvant inerte, par exemple un ester, tel que l'acétate d'éthyle, ou un hydrocarbure aromatique, tel que le toluène On opère avantageusement à une température comprise par exemple entre -20 et la température ambiante Lorsqu'on utilise le composé de formule V sous forme d'acide libre, on ajoute avantageu- sement un agetit-de condensation tel que le dicyclohexyl- ca'rbodiimide ou le carbonyl-diimidazole. Lorsqu'on désire obtenir un composé de formule I dans laquelle R 3 signifie l'hydrogène, il est préférable de protéger le groupe carboxy dans le produit de départ de formule IV avant d'effectuer la réaction avec le composé de formule V ou son dérivé On peut utiliser les méthodes de protection connues Comme exemples de groupes pro- tecteurs, on peut citer les groupes tert -butyle, benzhydryle, éthyle, acétoxyméthyle, pivaloyloxyméthy- le ou triméthylsilyle Ces groupes peuvent être intro- duits par estérification, par exemple dans le cas du groupe triméthylsilyle par réaction avec le N,O-bis- triméthylsilylacétamide. L'élimination des groupes protecteurs peut être effectuée selon les méthodes connues, par exemple par hydrolyse. Dans les procédés a) et c), on opère de préfé- rence sous des conditions pratiquement neutres. Les composés de formule I ainsi obtenus peuvent être isolés et purifiés selon les techniques habituelles Le cas échéant, on peut de manière connue transformer les acides libres (par exemple dans le cas o R 3 =H ou dans le cas o R 2 = un groupe carboxyalkyle) en leurs sels Comme exemples de tels sels, on peut citer les sels de métaux alcalins, de métaux alcalino-terreux ou les sels d'ammonium A partir des sels, on peut libérer les acides selon les méthodes connues Les composés de formule I et leurs sels peuvent se présenter également sous forme de solvats obtenus par exemple après recristallisation dans par exemple l'eau ou l'éthanol. Il convient de noter que les différents composés de formule I peuvent être convertis entre eux C'est ainsi par exemple que les acides libres (lorsque R,=H ou lors- que R 2 = un groupe carboxyalkyle) peuvent être estérifiés de manière connue pour donner des com- posés dans lesquels R 3 représente un groupe pivaloyloxy- méthyle ou le reste facilement éliminable d'un ester ou bien R 2 signifie un groupe alcoxycarbonylalkyle ou carbamoylalkyle Ces esters peuvent, à leur tour, être scindés de manière connue en acides libres. Lorsque R 1 représente un groupe l H-pyrazole-3- yle, le noyau pyrazolique peut exister sous les formes tautomères suivantes: H ( 1 H-pyrazole-5-yle) ( 1 H-pyrazole-3-yle) L'équilibre entre les formes tautomères dépend, O 10 bien entendu, de facteurs connus tels que la température, les conditions d'agrégation, le solvant et le p H Il va de soi que l'invention n'est pas limitée à une forme tautomère particulière mais comprend les différentes formes tautomères possibles. Le groupe OR 2 dans les composés de l'invention peut avoir la configuration syn ou anti par rapport au groupe carboxamide L'invention comprend les deux formes isomères ainsi que leurs mélanges Les isomères syn ou les mélanges d'isomères dans lequels l'isomère syn est prédominant, c'est-à-dire dans une proportion d'au moins %, particulièrement d'au moins 90 %, sont toutefois pré- férés. Lorsque le produit de départ est utilisé sous forme d'isomère syn, le produit final peut être un isomè- re syn ou un mélange d'isomères syn et anti, selon le type de substitution et les conditions de la réaction. Les isomères individuels peuvent être isolés du mélange selon les méthodes habituelles, par exemple par chromato- graphie. Les produits de départ de formule II sont connus ou, lorsqu'ils sont nouveaux, peuvent être préparés de manière analogue à des procédés connus tels que a)i) lorsque dans la formule II R 2 a une signification autre qu'un groupe carboxyalkyle, par réaction 10 999 d'uncomposé de formule I Va H H S R 5 NH & '- t CH 20 CO CH 3 (Iva) OOR' dans laquelle R signifie un atome d'hydrogène, un groupe pivaloyloxyméthyle ou un groupe protecteur du groupe carboxy, et R 5 a la signification déjà donnée, avec un composé de formule V tel que défini pré- cédemment ou un de ses dérivés réactifs, ou b)i) lorsque dans la formule II R 2 signifie l'hydrogène, par hydrogénation d'un composé de formule I Ia -0-CH 2-C 6 H 5 (H Ia) Irv C 2 C 6 5 Ia Il H H S Ia i-C CO NH H 20 CO CH 3 OOR dans laquelle R 1 et R 3 ont les significations données précédemment, ou c)i) lorsque dans la formule II R 2 représente un groupe carboxyalkyle, par hydrolyse d'un composé corres- pondant de formule II dans laquelle R 2 signifie un groupe carbamoylalkyle ou alcoxycarbonylalkyle, et, si on le désire, on convertit les composés ob- tenus de formule II o R 3 signifie l'hydrogène et/ou R 2 signifie un groupe carboxyalkyle,en leurs esters ou en leurs sels, ou bien, si on le désire, on scinde un groupe ester si celui est présent comme substituant COOR 3 ou dans le substituant R 2, et on récupère les composés de formule II ainsi obtenus sous forme libre ou sous forme d'un sel. Le procédé a)i) peut être effectué de manière analogue au procédé c) décrit précédemment. L'hydrogénation selon le procédé b)i) peut être effectuéede manière connue Par exemple le produit de départ peut être dissous ou mis en suspension dans un solvant inerte sous les conditions de la réaction, par exemple l'eau, et hydrogéné en présence d'un catalyseur comme par exemple le palladium sur charbon. Le procédé c)i) peut être effectué selon les méthodes connues Par exemple on peut dissoudre le produit de départ dans un mélange d'acide acétique et d'acide sulfurique et ajouter à basse température, par exemple à O , une solution aqueuse d'un nitrite de métal alcalin - Les composés de formule III sont nouveaux et font également partie de l'invention Ils peuvent être préparés par exemple comme illustré dans les schémas réactionnels suivants (R 7 et R 8 représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un groupe acyle inférieur, alkyle inférieur ou un subs- tituant quelconque du groupe amino figurant dans la liste ci-après). " -NN-+ Na SN a) ci 9 + Na HS '> HS lN i I Ia a) C 1 J 4 N 3 dans CH OH ' 51 Ia i 3 t N=CH-C H N=CH-C H HC 1/H 20 A NTH 2 b) R 6-Y-CS-NH-N M N 3 N S R 8 1 ou un sel R 7 R 8 c) +diméthyl N N + B Li 58 I' formamideacétal " NH 2 N=CH-N (CH 3)2 N N H Sss>l NN II Ic i N=CH-N (CH 3)2 Le procédé b), qui fait également partie de l'invention, peut être effectué dans un solvant inerte, comme par exemple un alcool,tel que le méthanol ou l'éthanol, une cétone aliphatique, un éther ou hydrocarbure aliphatique ou aromatique, un solvant bipolaire aproti- que,tel que le diméthylformamide ou le diméthylacétamide, ou des mélanges à une ou deux phases de ces solvants avec de l'eau, à une température comprise entre -20 et , de préférence entre 20 et 1000. Comme exemples d'azotures MN 3, on peut citer les azotures de métaux alcalins, par exemple l'azoture de sodium, de potassium ou de lithium, ou l'azoture d'ammonium On peut également utiliser des azotures d'ammonium quaternaire. Comme exemples de groupes R 6-Y susceptibles d'être éliminés, on peut citer ceux dans lesquels Y signifie l'oxygène ou le soufre et R 6 représente un groupe alkyle en C 1-C 6 tel que mé thyle, aralkyle tel que benzyle ou aryle tel que phényle ou tolyle Comme exemples de tels groupes, on peut ci- ter le groupe méthylthio et, de préférence, tolyloxy ou phénoxy. On peut également effectuer le procédé sous de transfert de phases. les conditions connues Les produits de départ peuvent être préparés de manière connue (voir par exemple K A Jensen et coll dans Acta Chem Scand 23, 1916-1934 l 1969 l). Les composés de formule IV sont également nouveaux et font partie de l'invention Ils peuvent être préparés de manière analogue au procédé a), en faisant réagir un composé de formule I Vb H N R 5 NB CN CH 2 OCOCH 3 (I Vb) O OOR 3 avec un composé de formule III, ou,lorsqu'on désire obtenir des composés contenant des groupes carboxy estérifiés, en estérifiant de manière connue les composés correspondants contenant des grou- pes carboxy libres. Les composés de formule I et leurs sels se signalent par d'intéressantes propriétés chimiothéra- peutiques En particulier, ils exercent une action anti- microbienne, comme il en résulte de l'effet inhibiteur qu'ils exercent sur différentes bactéries, comme par exemple Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Streptococcus faecalis, Escherichia coli, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Proteus morganii, Klebsiella aerogenes, Klebsiella pneumoniae, Serratia marcescens, Salmonella Heidelberg, Salmonella typhimurium, Salmonella enteritidis et Neisseria gonorrhoeae Cette action a été mise en évidence in vitro dans les essais de dilution en série à des concentrations comprises par exemple entre 0,01 et 50 pg/ml, et in vivo chez la souris à des doses comprises par exemple entre environ 0,1 et 100 mg/kg. Grâce à cette propriété, les composés de 10999 il formule I et leurs sels peuvent être utilisés en thérapeu- tiques comme agents chimiothérapeutiques, par exemple comme antibiotiques à activité antibactérienne. Une dose quotidienne appropriée sera comprise entre environ 60 et 3000 mg, l O 00 et 3000 mg ou 60 et 2000 mg. Les composés de formule I peuvent être utilisés sous forme d'acideslibresou sous forme de sels acceptables du point de vue chimiothérapeutique qu'ils forment avec une base,ou sous forme de solvats acceptables du point de vue chimiothérapeu- tique; ces formes ont le méme ordre d'activité que les acides libres Les sels appropriés comprennent les sels de métaux alcalins et alcalinoterreux et les sels d'ammonium ou d'amines,qui peuvent également se trouver sous forme de solvats,par exemple sous forme d'hydrates et d'éthanolates. Les composés de l'invention peuvent être asso- ciés à des diluants et excipients connus, acceptables du point de vue chimiothérapeutique Ils peuvent être ad- ministrés sous forme de comprimés ou de capsules; ils peuvent également être administrés par voie parentérale. De telles compositions font également partie de l'invention. Lorsqu'un substituant signifie un groupe al- kyle, il contient de préférence de 1 à 4 atomes de car- bone et signifie en particulier un groupe méthyle ou éthyle. Les groupes alkyle formant pont peuvent être à chaîne droite ou ramifiée et comprennent le groupe méthylène et diméthylméthylène. R 2 représente de préférence un groupe alkyle, alcoxycarbonylalkyle ou carbamoyle Lorsque R 3 représen- te un reste facilement éliminable du groupe ester, il peut s'agir par exemple du groupe l-éthoxycarbonyloxy- éthyle ou 5-indanyle ou, en particulier, d'un groupe hexanoyloxyméthyle, phtalidyle, éthoxycarbonylméthoxy- méthyle ou 3-éthoxycarbonyl-l-acétonyle Le groupe amino sur le reste tétrazole R 4 peut être non substitué ou substitué par un ou deux groupes alkyle, par un groupe alkylidène, par un ou deux groupes aryle, ou par un groupe arylidène,qui peuvent être à leur tour éventuellement substitués par des groupes amino, hydroxy, alcoxy en C 1-C 4, carboxy, sulfo, carbamoyl ou alkylthio en C 1-C 4. Le groupe aryle peut inclure des hétérocycles tels que le groupe furyle. Un groupe particulier d'aminotétrazoles, comme substituant R 4, comprend ceux o le groupe amino est éventuellement substitué par un ou deux groupes alkyle en C 1-C 4, un ou deux groupes acyle inférieursou par un groupe benzylidène ou diméthylaminométhylidène Les grou- pes amino-tétrazoles particulièrement préférés sont les groupes amino-, monoalkylamino et benzylidèneamino- tétrazoles Les composés dans lesquels le groupe OR 2 possède la configuration syn sont également préférés. Un composé particulièrement préféré est l'acide 7-l(méthoximino)-( 2-aminothiazole-4-yl)-acétyllamino-3- désacétoxy-3-( 1-amino-l H-tétrazole-5-yl-thio)céphalo- sporanique et ses sels,-par exemple-le sel de sodium. Les exemples suivants illustrent la présente invention sans aucunement en limiter la portée Toutes les températures sont indiquées en degrés Celsius. Exemple 1 Sel sodique de l'acide 7-l(méthoximino>( 2-aminothiazole- 4-yl-acétyllamino-3-désacétoxy-3-(l-benzylidène-amino- IH-tétrazole-5-yl-thio)céphalosporanique (Isomère syn, composé n 1) A une température de 60 , on maintient à une valeur constante de 7,0 le p H d'un mélange de 477 mg 251 ô 99 d'acide syn-7-l(méthoximino)-( 2-aminothiazole-4-yl)- acetyllamino-cephalosporanique et de 205 mg de l-benzy- lidêneamino-5-mercapto-l H-tetrazole dans 30 ml d'eau, par addition d'hydroxyde de sodium 1 N Au bout de 6 heures et demie, on ajuste le p H du mélange réactionnel à 4,0 avec de l'acide chlorhydrique IN et on extrait le composé du titre au moyen d'acétate d'éthyle Si nécessaire, le produit peut être purifié par chromato- graphie sur gel de silice RP-18. Exemple 2 Sel sodique de l'acide 7-l(méthoximino)-{-2-aminothiazole- 4-yl)-acetyl lamino-3-désacétoxy-3-( 1-amino-l H-tétrazole-5- yl-thio)cephalosporanique (Isomère syn, composé no 2) On met en suspension 780 mg de sel sodique de l'acide 7-amino-3-désacetoxy-3-( 1-amino-l H-tétrazole-5- yl-thio)cephalosporanique dans un mélange de 5 ml d'eau, de 2,5 ml d'acetone et de 6,2 ml d'éthanol et on ajuste le p H à 7,0 au moyen d'hydroxyde de sodium IN Apres addition de 996 mg de l'ester mercaptobenzothiazolique de l'acide syn-(méthoximinoy( 2-aminothiazole-4-yl)-ac&ti- que, on agite la suspension pendant 3 heures à 40 et pendant 3 heures et demie à 50 , tout en maintenant le p H à 7,0 Apres refroidissement à 20 , on élimine les produits solides par filtration et on concentre le fil- trat On filtre le précipité qui s'est formé et on ex- trait le filtrat (p H 7) à trois reprises avec de l'acé- tate d'éthyle On acidifie la phase aqueuse à p H 2,5 et on filtre le précipité qui s'est formé On extrait ensui- te le filtrat à cinq reprises avec un mélange d'acétate d'éthyle et de nbutanol dans le rapport 2:1, on sèche les extraits sur sulfate de magnésium, on évapore dans un évaporateur rotatif et on triture le résidu dans de l'éther diisopropylique, ce qui donne le composé du titre On dissout le produit brut dans un mélange d'eau et de Na HCO 3 et on le chromatographie en phase inversée (RP-18 avec de l'eau comme éluant), ce qui donne le produit à l'état pur. Pour préparer l'acide libre, on dissout 100 mg du sel sodique dans 4 ml d'eau et on acidifie à p H 2,5 avec de l'acide chlorhydrique 1 N On filtre l'acide libre ainsi obtenu, on le lave avec de l'eau et on le sèche à 20 pendant 5 heures sous vide poussé On obtient une poudre blanche. On peut également préparer le composé de cet exemple en procédant comme décrit à l'exemple 1. Exemple 3 Sel sodique de l'acide 7-l(méthoxycarbonylméthoximino)- ( 2-aminothiazole-4-yl)-acétyllamino-3-désacétoxy-3-( 1- amino-l H-tétrazole-5-yl-thio)céphalosporanique (Isomère syn, composé n 3). On met en suspension dans 40 ml de dichloro- méthane 1,92 g d'acide syn (méthoxycarbonylméthoximino)- ( 2-aminothiazole-4-yl)-acétique et 2,37 g de triphénylphos- phine et, à une température de 4 , on y ajoute 3 g de disulfure 2benzothiazolique On agite la suspension pendant 1 heure et demie à 4 , pendant 5 heures à 20 et pendant encore 16 heures à 4 , puis on l'évapore jusqu'à obtention d'un résidu huileux On ajoute à ce résidu une solution préparée à partir de 2,43 g du sel sodique de l'acide 7-amino-3-désacétoxy-3-( 1-amino-l H- tétrazole-5-yl-thio)céphalosporanique, de 10 ml d'eau, de 5 ml d'acétone et de 12 ml d'éthanol On agite le mélange réactionnel pendant 3 heures à 40 et pendant 1 heure à 45 , tout en maintenant le p H à 7,0 Apres évaporation dans un évaporateur rotatif, on dilue le résidu aqueux avec un peu d'eau et on l'extrait à p H 7 avec de l'acétate d'éthyle L'acidification de la phase aqueuse à p H 3 donne un produit brut que l'on chromato- graphie en phase inversée (RP-18, en utilisant, comme éluant, un mélange d'eau et d'acétonitrile dans le rapport 95:5), ce qui donne le composé du titre. En procédant comme décrit aux exemples i à 3 ou comme décrit précédemment, on peut également préparer les composés suivants de formule 1 Dans ces composés, R 4 signifie un reste N N R 4 k " X o X a la signification donnée dans le tableau. Composé R R R X Configura- Rn 2 tion 4 2-aminothiazole CH 3 Na -N=CH-N(CH 3)2 syn 4-yl " CH 3 Na N(CH 3)2 syn 6 " CH 2 COO Na Na -NH 2 syn 7 l H-pyrazole-3-ylCH 3 Na N=CH-C 6 H 5 syn 8 " CH 3 Na -NH 2 syn 2 9 " CH 2 COO Na Na -NH syn 2-aminothiazole CH 3 Na -NH-CO-CH 3 syn 4-yl CH 3 il -CCOOCH 3 Na -NH syn CH 3 CH 3 12 -CCOOC 2 H 5 Na -NH 2 syn CH 3 Exemple 4 Sel disodique de l'acide 7-l(carboxyméthoximinrio)--amino- thiazole-4-yl)acétyllamino-3-désacétoxy-3-( 1-amino-l H- tétrazole-5-yl-thio)céphalosporanique (Isomère syn, 2515 È 9 composé n 6). Dans 25 ml d'eau, on dissout 500 mg du sel sodique de l'acide syn-7-l(méthoxycarbonylméthoximino)- ( 2-aminothiazole-4-yl)-acétyllamino-3-désacétoxy-3-( 1- amino-l H-tétrazole-5-yl-thio)céphalosporanique et à une température de 4 on ajuste le p H à 12 au moyen d'hydroxyde de sodium 1 N Après 1 heure et quart à 4 , la mélange ne contient plus de produit de départ et la chromatographie en phase inversée de la solution ob- tenue (RP-18, élution avec de l'eau) donne le composé du titre à l'état pur. * En procédant de manière analogue, on peut obtenir le sel disodique de l'acide 7-l( 1-carboxy-1- méthyl-ét*hoximino)-( 2-aminothiazole-4-yl-acétyllamino- 3-désacétoxy-3-( 1-amino-l H-tétrazole-5-yl-thio)céphalo- sporanique (isomère syn, composé n 13). Exemple 5 Ester pivaloyloxyméthylique de l'acide 7-l(méthoximino)- ( 2-aminothiazole-4-yl Yacétyllamino-3-désacétoxy-3-( 1- amino-l H-tétrazole-5-yl-thio)-céphalosporanique (Isomère syn, composé n 14). On dissout 5,7 g du sel sodique de l'acide syn-7-l(méthoximino)-( 2-aminothiazole-4-yl)-acétyll-amino- 3-désacétoxy-3-( 1-amino-IH-tétrazole-5-yl-thio)céphalo- sporanique dans 130 ml de diméthylformamide et on ajoute goutte à goutte à -l O une solution de pi- valate d'iodométhyle dans 40 ml de diméthylformamide. Après 30 minutes à -10 , on verse le mélange réactionnel dans un mélange de glace et d'eau, on filtre le précipité qui s'est formé et on le lave avec de l'eau Après sé- chage à 45 sous 15,6 mbar, on obtient le composé du titre à l'état brut On peut obtenir un supplément de produit brut par extraction du filtrat avec de l'acétate d'éthyle On réunit les portions de produit brut et on chromatographie l'ensemble sur gel de silice en utilisant, comme éluant, un mélange de dichlorométhane et de méthanol dans le rapport 95:5, ce qui donne le compo- sé du titre à l'état pur (à 91 % par chromatographie liquide sous haute pression). Exemple 6 Sel disodique de l'acide 7-l(l-carboxy-l-méthyl-éthox- imino Q 7 (l H-pyrazole-3-yl)-a-cetyllamino-3-désacétoxy-3- ( 1-amino-l H-tétrazole-5-yl-thio)cephalosporanique (Isomère syn, composé n 14). On dissout 5 g du sel sodique de l'acide syn- 7 l ( 1-tert -butoxycarbonyl-1-méthyl-éthoximino)-(l H-pyrazole-3-yl)- acétyllaminocéphalosporanique et 1,02 g de 1-amino-5- mercapto-l H-tétrazole dans 50 ml d'eau et on y ajoute du bicarbonate de sodium solide jusqu'à p H 7,0 On agite la solution pendant 16 heures à 60 , tout en maintenant le p H à 7,0 La chromatographie du mélange réactionnel en phase inversée (RP-18; élution avec de l'eau et un mélange 9:1 d'eau et de méthanol), donne le composé du titre ensemble avec le sel sodique de l'acide 7-l( 1-tert -butoxycarbonyl-1- méthyl-éthoximino)-OH-pyrazole-3-yl)-acétyllamino-3- désacétoxy-3-( 1-amino-l H-têtrazole-5-yl-thio)-céphalo- sporanique (isomère syn, composé n 18). 2 -51 1 O 9 9 9 Spectre RMN ( D 2 QP Pm) Spectre 3,55 (q, 2 Fi); 4,44 (q, 2 H); 5,05 (d, 1 H); 5,68 (dd, 1 H); 6,74 (s, 1 H); 7,08 (sb, 2 H); 7,62 (m, 4 H); 8,00 (m, 2 H); 9,37 (s, I Fi). Composé (DMSO) 3,65 (q, 2 H); 4,00 (s, 3 H); 4,23 (q, 2 H); 5,20 (d, 1 H); 5,78 (d, 2 H), 7,( 13 (s, 1 H) _ 3,83 (s); 4,33 (AB-quartet, 0,-13); 5,13 (d, 1 -5); 5, 79 (dxd, ir 8, Je 5); 6,75 (s); 6,94 (larges); 7,24 (large, s); 9,62 (d J,8). 3,65 (AB-quartet, J-18 superposé, avec 3,82 (s), au total 5 H 4,26 (ABquartet, J^,14, 2 H); 4,89 (s, 2 H); 5 24 (do J,5, 1 H); 5,85 (d, 1,5,1 H); 7,14 (s, 1 H). 3,13 (d, 6 H); 3,67 (q, 2 H); 4,00 (s, 3 H); 4,22 (q, 2 H'J; 5,20 (d, JH); 5,80 Cd, 1 H); 7,06 (s, 1 H); 8,32 (s, 1 FO- 2,98 (s, 6 H); 3,63 (q, 2 H); 4,00 (s, 3 H); 4,25 (q, 2 H); 5,22 (d, IH), 5,80 (d,-l H), 7,04 (s, 1 H). 3,65 (q, 2 H); 4,25 (q, 2 H); 4,60 (s, 2 H); 5,22 (d, 1 H); 5,85 (d, 1 H>, 7,10 (s, 1 H). 3,65 (q, 2 H); 3,95 (s, 3 H); 4,20 (q, 2 H); 5,08 (d, IH); 5,72 (q, 1 H); 6,68 (d, 1 H); 7,40-7,70 (m, 6 H); 9,00 Cd, 1 H). (sel S-6-dique) (acide libre) (DMSO) 3 - 7 ' 8 3,62 (q, 2 H); 4,02 (s, 3 Hi); 4,22 (q, 2 H); 5,20 (d, 1 H); 5, 8 '2 (d, 1 H); 6,73 (d, 1 H); 7,81 (d, 1 H). 9 3,65 (q, 2 H-); 4,25 (q, 2 H); 4,61 (s, 2 H); 5,22 (d, 1 H); 5,87 (d, IH); 6,75 (d, 1 H); 7,80 (d, 1 H). 2,18 (s, 3 H); 3,64 (AB-quartet, J-u 18, 2 H); 4,21 (AB- quartet, J- -14), superposé avec 4,00 (s), au to tal 5 H; il 1,60 (s" 3, 65 (AB-quartet, J, 18), superposé avec 3,80 (s), au total 5 H-; 4,25 (ABquartet, J -13, 2 H); 5,21 (d, J'-5 1 H); 5,82 (d,J,-5, 1 H); 7,05 (s, 1 H). 12 1,27 (t, Je-7, 3 H); 1,60 (s, 6 H); 3,65 (AB-quartet, J-18, 2 H); 4,004,50 (q, J, superposé avec AB-quartet, J 3-13, au total 4 H); 5,23 (d, J'-5, 1 H'); 5,84 (d, J 3-5, 1 H); 7,07 (s, 1 H) 13 1,53 (s, 6 H); 3,68 (AB-quartet, J' 18, 2 H); 4,28 (AB- quartet, J-'14, 2 H); 5,23 (d, Jl-5, 1 H); 5,84 Cd, J-5, 1 H); 7,03 (s, 1 H). 14 1,17 (s); 3,72 (AB-quartet, J-17) superposé avec3,83 (s), (DMSO) a u t ot al 5 H; 4,32 (AB-quartet, J 4 i, 2 H); 5,17 Cd, J'- 5, 1 Hi); 5 > 70-6, 00 (AB-qartet, J-6, superposé avec* dxd, J , J 1 8 au total 3 H); 6,74 (s) ; 6,91 (large, s); 7,13 (large, s); 9,54 (d, J,8) 1,51 (s, 6 H); 3,65 (AB 3-quartet, J"-18, 2 H); 4,23 (AB- quartet, J- -14, 2 H); 5,22 (d,J -5, 1 H); 5,84 (d, J -5, 1 H); 6,75 (d, J 3-3, 1 H); 7,78 (d, J-'3, 1 H). 2510 P 99 Pour préparer les produits de départ de formule III, on peut procéder comme décrit ci-après: A) l-benzylidène-amino-5-mercapto-l H-tétrazole (pour les composés 1 et 7) A une température intérieure de 60 on ajoute goutte à goutte, sous agitation, 21 ml d'une solution aqueuse d'hydrogénosulfure de sodium à une solution de g de l-benzylidène-amino-5-chloro-1 H-tétrazole. Après 25 minutes à cette température, on ajuste le p H du mélange réactionnel à 3,0 avec de l'acide chlorhy- drique 2 N et on évapore le mélange sous pression réduite. On dissout le résidu d'évaporation dans environ 300 ml d'eau, on ajuste le p H à 7,3 avec de l'hydrogénocarbonate de sodium, on ajoute du charbon actif et on filtre On ajuste le p H du filtrat à 2,0 avec de l'acide chlorhydri- que 6 N,tout en maintenant la température à 10 l-12 par refroidissement avec de la glace On filtre sur verre fritté les cristaux qui ont précipité et on les lave avec de l'eau pour éliminer l'acide chlorhydrique; F = 131-135 . Spectre RMN (CD C 13 + DMSO): 7,45 (m,3 H); 7,90 (m,2 H); 9,31 (s,l H). B) l-amino-l H-tétrazole-5-thiol (pour les composés 2, 6, 8, 9, ll, 12 et 15) a) Sel d'ammonium de l'acide hydrazinedithiocarbazigue A une température de O , on ajoute sous agita- tion 1 kg d'hydrate d'hydrazine à une solution de 800 g d'ammoniac dans 7 litres d'éthanol En l'espace d'une heure, on ajoute ensuite entre -5 et l O , 1,5 kg de sulfure de carbone On filtre le précipité qui s'est formé et on le sèche sous pression réduite à la tempéra- ture ambiante. b) Ester méthylique de l'acide hydrazinedithiocarbazigue A une température de 50 , on dissout 2,3 kg de sel d'ammonium de l'acide hydrazinedithiocarbazique dans 4 litres d'eau et on mélange le tout avec 2 litres d'éthanol Tout en agitant, on ajoute ensuite goutte à goutte, à 10 et en l'espace de 3 heures, 1 litre d'io- dure de méthyle et on continue d'agiter le mélange pendant 2 heures à -50 Après filtration du précipité, on obtient l'ester désiré fondant à 80-82 . c) 1-amino-l H-tétrazole-5-thiol A une suspension de 1 kg d'azoture de sodium dans 13 litres de méthanol, on ajoute par portions, à et sous agitation, 650 g de chlorure de lithium et on chauffe le mélange au reflux pendant 8 heures On filtre le mélange réactionnel et on ajoute au filtrat 780 g d'ester méthylique de l'acide hydrazinedithio- carbazique On chauffe ensuite le mélange au reflux pen- dant 30 heures et on chasse le solvant, ce qui donne une huile visqueuse On dilue cette huile dans 0,5 litre d'hydroxyde de sodium 1 N et on extrait la solution con- tinuellement avec de l'éther pendant 6 heures Pendant une heure et demie, tout en maintenant un passage d'air constant, on acidifie à p H O avec 1, 4 litre d'acide chlorhydrique concentré On traite cette solution pendant 8 heures avec de l'éther puis on évapore la phase éthé- rée, ce qui donne le l-amino-l H-tétrazole-5-thiol; après recristallisation dans l'isopropanol, le produit fond à 170 . C) l-diméthylamino-l H-tétrazole-5-thiol (pour le composé n 5) a) Sel d'ammonium de l'acide N,N-diméthyldithiocarbazigue A une température de O , on condense 120 g d'ammoniac dans une solution de 270 g de N,N-diméthyl- hydrazine dans 2 litres d'éthanol A la même température, 10999 on ajoute goutte à goutte sous agitation, 48 g de sulfure de carbone Après 4 heures de réaction, on sépare les cristaux qui ont précipité et, sous agita- tion, on mélange le filtrat avec environ 10 litres d'éther diéthylique On sépare le sel d'ammonium désiré par filtration sur verre fritté; il fond à 112-120 . b) Ester méthylique de l'acide 1,1-diméthyldithiocar- bazigue, F = 86-90 , et c) 1-diméthylamino-l H-tétrazole-5-thiol, F = 137-138 ; Spectre RMN(CD C 13): 3,04 (s). On procède comme décrit aux exemples B)b) et B)c). D) 1diméthylaminométhylidène-amino-l H-tétrazole-5-thiol (pour le composé n 4) a) 1:diméthylaminométhylidène-amino-l H-tétrazole On laisse reposer pendant 3 heures à la tempé- rature ambiante, un mélange de 32 g de l-amino-l H-tétra- zole et de 300 ml de diméthylformamide-diméthylacétal. Les cristaux qui ont précipité sont lavés à plusieurs re- prises avec de l'éther diisopropylique sur verre fritté et séchés sous pression réduite; F = 88-900. Spectre RMN(CDC 13):3,0 et 3,12 ( 2 s,6 H); 8,32 (s,l IH); 8,40 (s,l H). b} 1-diméthylaminométhylidène-amino-l H-tétrazol e-5-thiol A -60 , o-n ajoute goutte à goutte 26 ml d'une solution de n-butyllithium dans de l'hexane à une solu- tion de 5 g de l-diméthylaminométhylidène-amino-l H- tétrazole dans 60 ml de tétrahydrofuranne anhydre Après minutes, on ajoute 1,14 g de soufre On laisse ensuite remonter la température à -40 * en l'espace de 45 minutes, puis on verse le mélange dans 600 ml V'éther diéthylique. Apres avoir agité pendant 30 minutes, on filtre le préci- pité sur verre fritté, on le lave à deux reprises avec de l'acétate d'éthyle et on le dissout dans 100 ml d'eau On extrait cette solution à plusieurs reprises avec de l'acétate d'éthyle et on acidifie la phase aqueuse à p H 2 avec de l'acide chlorhydrique IN On extrait ce mélange à plusieurs reprises avec de l'acétate d'éthyle et on le sèche sur sulfate de sodium, ce qui donne le composé du titre; il fond à 109-110 . Spectre RMN(CDC 13):3,12 (s,6 H); 8,20 (s,l H); 13,0 (s,1 H). E) Sel sodique de l'acide 7-amino-3-désacétoxy-3-( 1- amino-l H-tétrazole-5-yl-thio)céphalosporanique (pour les composés 2, 3, 6, 8, 9, 11 et 12). On dissout 23,24 g de 7-ACA et 10 g de 1- amino-5-mercapto-l H-tétrazole dans 700 ml d'eau en ajus- tant le p H à 7 On agite la solution pendant 6 heures à 60 , le p H étant maintenu continuellement à 7,0 au moyen d'hydroxyde de sodium 2 N Après refroidissement, on extrait le mélange à trois reprises à p H 7 avec de l'acétate d'éthyle, puis on acidifie la phase aqueuse à p H 2,7 avec de l'acide chlorhydrique 6 N Par extrac- tion à quatre reprises avec de l'acétate d'éthyle et à quatre reprises avec un mélange d'acétate d'éthyle et de n-butanol dans le rapport 3:1, on fait passer dans la phase organique le l-amino-5-mercapto-l H- tétrazole qui n'a pas réagi Après avoir éliminé le tétrazole, on évapore la phase aqueuse acide dans un évaporateur rotatif sous 16 mbar et on fait digérer l'acide brut dans du méthanol Le filtrat et le résidu, qui contiennent tous les deux le produit final, sont dissous ensemble dans un mélange d'eau et de Na HCO 3 et chromatographiés deux fois en phase inversée sur RP 18, en utilisant de l'eau comme éluant Après lyophilisation, on obtient le composé du tigre. Spectre de 1 H-RMN(D 20):3,63 (AB quartet, JN 18,2 H); 4,25 (AB-quartet, J 13,2 H); 4,75 (d,Jr 4,1 H); 5,05 (d,Ju 4,1 H). F) Sel sodique de l'acide 7-amino-3-désacétoxy-3-( 1- acétamido-l H-tétrazole-5-yl-thio)céphalosporanique (pour le composé n 10). A une suspension de 2,7 g de 7-ACA et de 1,4 g de 1-amino-l H-têtrazole-5thiol dans 30 ml d'acide acétique glacial, on ajoute goutte à goutte en l'espace de 30 minutes, 20 ml d'éthérate de trifluo- rure de bore On agite le mélange pendant 5 heures à , on le verse dans 60 ml d'eau glacée et, en refroi- dissant, on ajuste le p H à 3,5 par addition d'ammoniac mêthanolique On filtre le précipité, on le lave avec de l'eau et du méthanol, et on le dissout dans une solution à 5 % de bicarbonate de sodium Après chromatographie sur gel de silice RP 18 avec de l'eau comme éluant et lyophili- sation des fractions appropriées, on obtient le composé du titre Spectre IR(K Br): 3421, 3375, 1753 1643, 1596, -1 1407, 1355, 1289, 1238, 1200, 1101 cm 1 Spectre RMN(D 20): 5,05 (d,5 Hz,l H); 4,78 (d,5 Hz,l H); 4,38 (d,14 Hz,l H); 4,08 (d,14 Hz,l H); 3,78 (d,18 Hz,l H); 3,42 (d,18 Hz,l H); 2,2 (s,3 H). G) l-amino-l H-tétrazole-5-thiol Tout en agitant, on chauffe pendant 2 heures au reflux 5,47 g d'ester 0-4-tolylique de l'acide thiocarbazique, 75 ml de méthanol et 2,15 g d'azoture de sodium On concentre le mélange réactionnel, on le lave avec 50 ml d'eau et on l'extrait à trois reprises avec de l'éther On concentre la phase aqueuse et on re- prend le résidu solide mais non entièrement sec dans de l'éthanol à 80 , tout en agitant On refroidit la suspension obtenue, on l'agite et on la filtre Après lavage avec de l'éthanol et séchage, on obtient le composé du titre sous forme de son sel sodique; F = 220-225 . 10999 REVENDICATIONS 1. Les dérivés tétrazoliques de formule HS R 4 dans laquelle R 4 représente un groupe amino-tétrazole éventuellement substitué. 2. Un procédé de préparation des dérivés tétrazoliques selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on fait réagir un composé de formule R 7 R 6-Y-CS-NH-N\ R 8 dans laquelle Y représente l'oxygène ou le soufre, R 6 représente un groupe alkyle en C 1-C 6, aralkyle ou aryle, et R 7 et R 8 signifient chacun,indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur, un groupe acyle inférieur ou un groupe benzylidène ou diméthylamino-méthylidène, avec un azoture métallique.