FR 2509577 A1 19830121 FR 8212634 A 19820720 1 - "Procédé, composition et produit pour agir contre les virus" La présente invention concerne des compositions virucides d'une grande efficacité contre les virus respiratoires habituels tels que les rhinovirus, les parain- fluenzavirus, les adénovirus ainsi que les procédés et produits utilisant de telles compositions L'invention concerne plus particulièrement un nouveau type d'une composition virucide pouvant être appliqué sur une diversité de substrats tels que des tissus cellulosiques, des structures non tissées et des matériaux à base de textile En outre, la classe de compositions virucides appartenant à la présente invention peut être égale- ment incorporée dans des pulvérisations nasales, des crèmes pour le visage, des lotions pour les mains, des crayons à lèvres et autres préparations cosmétiques similaires Les compo- sitions peuvent être également utilisées comme ingrédients dans des produits détergents pour cuisine et salle de bain, des produits encaustiques pour meubles et planchers et des produits d'entretien du ménage, similaires. Les virologistes spécialisés dans le domaine des virus respiratoires sont généralement d'accord pour reconnaître que les rhinovirus, les influenzavirus et les-adé- novirus sont parmi le plus important groupe d'agents pathogènes responsables des maladies respiratoires Les rhinovirus, en par- ticulier, passent pour être le principal agent responsable de ce qui est généralement connu sous le nom de "rhume de cerveau". Le terme "rhinovirus"qui touche le nez, se traduit par d'abondants écoulements du nez lorsque les infections sont dues à ce groupe de virus Le rhinovirus appar- tient à la famille des picornavirus, virus qui, du fait de l'absence d'une enveloppe extérieure, sont souvent caractérisés comme des "virus nus" Bien que l'on connaisse plus de cent types antigéniques différents de rhinovirus, ils ont en commun certains attributs importants Par exemple, tous sont dotés d'une capside résistant à l'éther et tous contiennent une "seule chaîne" ARN (environ 2,6 x 10 daltons) Tous sont difficiles à -2 inactiver par des germicides habituels tels que les composés d'ammonium quaternaire. Les adénovirus comportent plus de trente types antigéniques Lorsqu'ils envahissent les voies respira- toires, ils provoquent l'inflammation des tissus conduisant b des symptômes de pharyngite, de bronchite etc Bien que la plupart des affections adénovirus aient lieu pendant l'enfance, il n'est pas rare que les adultes soient également touchés par ce type d'infection Tout comme les rhinovirus, les adénovirus n'ont pas d'enveloppe, mais ceux-ci, à l'inverse des rhinovirus, contiennent une double chaîne ADN Les adénovirus sont habituellement résistants à l'inactivat ion. Les parainfluenzavirus appartiennent à la famille des paramyxovirus Ils jouent un rôle important dans l'apparition des maladies des voies respiratoires inférieures chez l'enfant et des maladies des voies respiratoires supérieu- res chez l'adulte Les parainfluenzavirus sont des virus contenant de l'ARN dotés d'une enveloppe lipoprotéinique sensi- ble à l'éther entourant la nucléocapside Ces virus sont résistants à l'inactivation par les acides carboxyliques aux basses concentrations. Une récente étude effectuée par Dick et autres collaborateurs (Dick, E C et Chesney P J "Textbook of Pediatric Diseases", Feigin, R D et Cherry, J D ed Vol ïI, p 1 167 ( 1981) W B Saunders Pub Co Phila, PA) a jeté une lumière nouvelle sur le mode de transmission des maladies respiratoires provoquées par les rhinovirus Bien que le mode exact de transmission des maladies respiratoires ne soit pas pleinement compris, des études effectuées sur le terrain par les chercheurs précités ont pu mettre en évidence que la transmission effective des maladies telles que les rhumes de cerveau nécessitent habituellement que le sujet contaminé et la victime potentielle soient très proches l'une de l'autre ou soient en contact directement ou indirectement (un contact indirect peut être regardé comme un contact s'effectuant par -3- l'intermédiaire d'une surface intervenante, par exemple le dessus d'une table, la clenche d'une porte, etc) Ainsi, il est possible d'interrompre la chaîne d'infection et de réduire sa tendance à se propager si les virus peuvent être rendus inefficaces lorsqu'ils sortent du nez d'une personne infectée en les exposant immédiatement à un agent virucide En outre, une fois les virus sortis, ceux qui cherchent refuge sur la figure ou sur les mains de la personne infectée, peuvent être également "tués" si un agent virucide convenable est rapidement amené au contact de la surface anatomique appropriée, c'est-à- dire la figure, les mains, etc Un tissu facial contenant une composition agissant rapidement et ayant une action virucide efficace représente un moyen simple pour parvenir à ce but. On a longtemps éprouvé le besoin de. disposer d'un agent virucide s r et bon marché efficace contre les virus respiratoires habituels Les germicides simples d'usage courant sont inefficaces contre les rhino et les adenovirus. DESCRIPTION DE L'ART ANTERIEUR- Le brevet U S no 4 045 364 de Richter décrit un papier imprégné d'un iodophore (c'est-à-dire iode et un support) ayant des propriétés germicides et utile comme moyen de prélavage dans les opérations chirurgicales de routine. Le breveté a découvert que la stabilité de l'iodophore est -25 accrue à p H bas et que de petites quantités d'acides organiques faibles tels que l'acide citrique ou l'acide acétique peuvent être ajoutées pour permettre le contr 8 le du p H Le brevet U S. n O 3 881 210 et al décrit un tampon pré-humecté pour des utilisations sanitaires pouvant contenir un bactéricide Le brevet U S N O 3 654 165 de Bryant et al décrit un-moyen de nettoyage,servant à essuyer, contenant de l'iode conférant une action bactéricide Le brevet U S N O 3 567 118 de Shepherd et al décrit un matériau fibreux pour le nettoyage ayant un revêtement d'acrylate ou de méthacrylate hydrophilique contenant entre autres, un bactéricide. 4 - Bien que l'art antérieur divulgue, que des compositions contenant de l'iode ont un effet virucide à large spectre, il n'avait pas été, jusqu'ici, développé commercialement un produit bon marché qui puisse, avec succès, interrompre la propagation des virus tels que le rhinovirus ou l'influenzavirus L'iode pose des problèmes, par exemple, à cause de sa toxicité et du fait qu'il est un irritant pour le tissu animal L'action de l'iode est non sélective entre les protéines bactérienne et mammifère, et son utilisation incon- tr 1 lée sur la peau peut provoquer unie grave irritation De plus, son activité peut se trouver réduite ou neutralisée par l'action de fluides biologiques tels que le sérum du sang. Les efforts tentés afin de modifier l'iode de façon à éviter ces difficultés n'ont pas, jusqu'ici, totalement abouti. On trouve dans la littérature des références qui traitent de l'action bactéricide des acides tels que l'acide citrique par exemple, Reid; James D; "The Desinfectant Action of certain organic Acids", American Journal of Hygiene, 16, 5406556 ( 1932)l Toutefois, l'action virucide est fondamentalement différente de l'action bactéricide, ce qui s'explique par le fait que les virus et les bactéries sont des microorganismes différents qui n'ont pas les mêmes caractéristiques C'est ainsi que les virus ne se reproduisent pas en dehors des cellules hôtes alors que les bactéries le font Des composés d'ammonium quaternaire tels que le chlorure de benzalkonium sont souvent efficaces contre des bactéries mais non contre les virus tels que les divers rhinovirus. Bien qu'il soit connu que les rhinovirus sont labiles dans des solutions aqueuses d'acides dans des conditions de bas p H lpar exemple Davis B D et al; "Microbiology" p 1303 Harper E; Row (Publishers) New-York 1973 et Rueckert, R R "Picornaviral Architecture" Comparative Virology Academic Press, New-York ( 1971), p 194-306 l, les références connues ne mentionnent pas l'utilisation de Ce concept dans des contextes épidémiologiques tels que l'interrup- tion de la chaîne d'infection provoquée par des rhinovirus. A notre connaissance, la seule étude systématique de l'action virucide des acides organiques (citrique, malique, etc) que l'on peut trouver dans la littérature généralement disponible, a été effectuée par Poli, Biondi, Uberti, Ponti, Balsari et CantonilPoli, G et al: "Virucidal Activity of Organic Acids" Food Chem (Angleterre) 4 ( 4) 251 8 ( 1979)l Ces chercheurs ont constaté que les acides citrique, malique, pyruvique et succinique parmi d'autres, étaient efficaces contre les virus de l'herpès, les orthomyxovirus et les rhabdovirus (virus des lapins) Leurs essais ont été effectués à température ambiante avec des solutions aqueuses d'acides purs Aucun substrat ousup- port n' était utilisé Les trois virus choisis pour être étudiés par ces chercheurs étaient tous des virus "enveloppés" ressem- blant à cet égard au parainfluenza 3 Poli et al ont observé que ces acides n'étaient pas efficaces contre les adenovirus qui, comme on le rappelle, est un virus "nu" Sur la base de cette constatation, ils concluent que ces acides étaient effi- caces contre les virus "enveloppés" mais non contre les virus "nus". Il est connu de l'homme de l'art que les adénovirus sont résistants aux acides. La présente invention propose un produit virucide, une composition et un procédé qui sont hautement efficaces sur un large spectre de virus et qui peuvent être produits et utilisés avec sûreté Elle résulte de la constatatior que les acides carboxyliques tels que les acides citrique, malique et succinique lorsqu'ils sont étendus dans un support approprié physiologiquement acceptable, en complément a leur action sur certains virus respiratoires "enveloppés", sont également efficaces contre les rhinovirus, des virus "nus" En outre, ces acides en présence d'un agent tensio-actif tel que le dodécylsulfate de sodium sont également efficaces contre les adénovirus En addition, les produits conformes à la présente invention peuvent comporter un substrat tel qu'un tissu 6 2509577 facial ou un matériau non tissé incorporant de telles composi- tions Selon le procédé conforme à l'invention, une quantité efficace d'une telle composition est amenée en contact avec la zone contaminée en utilisant ces produits En général, ces compositions peuvent être manipulées sans difficulté et n'ont pas d'effets nuisibles lorsqu'elles sont utilisées conformément à l'invention Par ailleurs, lorsque lesdites compositions sont appliquées sur un substrat tel qu'un tissu facial, elles n'ont pas ou très peu d'effets nuisibles sur la couleur, l'odeur, la résistance ou d'autres propriétés importantes Les produits conformes à l'invention peuvent être utilisés sous la forme d'un tissu sec ou maintenu humide par exemple. Bien que l'invention sera décrite en se référant à des modes de réalisation préférés, il est naturel- lement-entendu qu'elle n'est pas limitée à ces modes de réalisation préférés Bien au contraire, elle vise à couvrir toutes les alternatives, modifications et équivalents qui entrent dans le cadre de l'invention telle que définie dans les revendications annexées - La présente invention résulte de a découverte inattendue que certains acides tels que les acides citrique, malique, succinique et benzolque, utilisés dans des proportions convenables et comme il sera décrit, ciaprès, ont une grande efficacité contre les rhinovirus 16, l A et 86. Lorsqu'ils sont utilisés en présence d'un agent tensio-actif tel que le dodecylsulfate de sodium (SDS), ces acides sont également efficaces contre le parainfluenza 3 et l'adenovirus (les virus choisis pour l'étude, c'est-à-dire RV-16, RV -IA, RV-86, Para-3 et adeno-5, sont représentatifs de leur classe). En général, les acides carboxyliques solubles dans l'eau convenant à la réalisation de invention ont la structure suivante R COOH dans laquelle R peut représenter des alkyles inférieurs (un à six atomes de carbone), des alkyles -7- inférieurs substitués lpar exemple hydroxy alkyles inférieurs (par exemple HOCH 2)l, carboxy alkyles inférieurs (par exempl E HOOC-CH 2-CH 2), carboxy, hydroxy alkyles inférieurs (par exemple HOOCCH 2 CHOH); carboxy halo alkyles inférieurs (par exemple HOOCCH 2 CH Br) ; carboxy dihydroxy alkyles inférieurs (par exemple HOOC- CHOH-CHOH-); dicarboxy, hydroxy alkyles inférieurs OH 1 (par ex HOOC -CH 2 C CH) COOH alkényles inférieurs, carboxy alkényles inférieurs (par exemple HOOC CH=CH -), dicarboxy alkényles inférieurs (par exemple r OOH LHOOC-CH 2-C = CH -) phényles (par exemple C 6 H 5-), phényles substitués (par exemple hydroxy phényl HO-C 6 H 4-) D'autres exemples d'acides sont hydroxy, alkyle inférieur lactique; carboxy, hydroxy alkyle inférieur, 2-méthyle malique; carboxy, halo, alkyle inférieur 2 chloro-3-méthyle succinique; carboxy dihydroxy alkyle inférieuz, 2-méthyl tartrique; dicarboxy, hydroxy alkyle inférieur, 2-méthyle citrique; et carboxy alkényle inférieur fumarique Les définitions ci-dessus ont été données è titre indicatif, mais non limitatif Le terme "substitud" indique que un ou plusieurs atomes d'hydrogène sont substitués par des atomes d'halogènes (F, CI, Br, I), des groupes hydroxy, des groupes amino, des groupes thiol, des groupes nitro, des groupes cyano, etc L'agent tensio-actif peut être non ionique (par exemple les alkylphénols polyoxyéthylénés tels que le TRITON X 100 (marque déposée), fabriqué par Rohm et Haas; les esters du sorbitol polyoxyéthylénés tels que le TWEEN 40 (marque déposée), fabriqué par ICI, Etats-Unis, Inc) cationique (par ex le chlorure de cétylpyridinium -8- 2509577 8 - ( 6 H 5 N (C H 2) 15 CH 3 Cl-), le chlorure de méthylbenzethonium Me 1 + (Me 3 CCH 2 C(Me)2-CH(Me)Me)-0 CH CH 20 CH 2-CH 2 N-CH 2 C 6 H 5 Cl-) 1 Me ou anionique (par ex le dodécylsulfate de sodium (CH 3 (CH 2)10-CH 20 SO 3-Na), l'ester 1,4 bis ( 2-éthylhêxyle) du sel de sodium de l'acide sulfosuccinique, tel que fabriqué par American Cyanamid Company sous la marque AEROSOL OT Les agents tensio-actifs anioniques préférés peuvent être représentés par les formules: 1 (RO 503)x ou (R 503)x dans laquelle M+ est un cation métallique mono, di ou trivalent ou un ion ammonium ou un ion ammonium substitué; x est un nombre entier et R est un groupe alkyle C H CO R ( 12 2 1 2 M -03 S CH C 02 R 2 22 x dans laquelle M et x sont définis comme indiqués ci-dessus et R 1 et R 2 peuvent être les mêmes ou différents et peuvent être représentés par des groupes aliphatiques à chaînes droites ou ramifiées Les agents tensioactifs anioniques précités sont donnés à titre illustratif et non limitatif En général, les agents tensio-actifs seuls n'ont pas d'effet virucide vis-à-vis des virus nus tels que les rhinovirus. Bien que l'invention n'est pas limitée à l'utilisation d'un tissu cellulosique (tel que tissu facial, serviette de bain, essuie-mains et produits analogues) comme substrat ou support d'agents virucides, un tissu facial imprégné avec ces nouveaux agents virucides illustre suffisamment le principe de base de l'invention et représente un mode de réalisa- tion de l'invention simple et utile C'est pourquoi, les -9- les expériences décrites dans les paragraphes qui suivent, ont été effectuées en utilisant des tissus faciaux comme substrat. Des exemples de substrats non tissés qui conviennent pour la réalisation de l'invention sont des matériaux d'essuyage humide tels qu'essuie-mains crêpé humide et des tissus à base de polymères non tissés et fondus soufflés couramment utilisés dans la fabrication d'articles pour hôpitaux tels que linges chirurgicaux, draps, blouses, taies d'oreiller et articles analogues Des matériaux textiles de tout type dont des stratifiés de différents matériaux peuvent être utilisés comme substrat Par exemple, les masques de protection hygiénique utilisés par des personnes souffrant de maladies respiratoires constituent un excellent moyen de mise en oeuvre de l'invention. D'autres supports physiologiquement acceptables, essentiellement inertes, c'est-à-dire ceux qui sont essentiellement non toxiques et non-irritants pour le tissu humain ou animal dans des conditions normales d'utilisation viendront facilement à l'esprit de ceux spécialisés dans le domaine des applications telles que lotions, pulvérisations, crèmes, produits encaustiques et similaires. D'une façon générale, leprocédé de prépa- ration expérimental des échantillons dans les exemples ci-dessous était simple et rapide Des tissus faciaux KLEENEX (marque déposée) à trois plis ( 28 cm x 31 cm, - poids de base environ 43 grammes au mètre carré pour les trois plis ensemble) ont été imprégnés par des solutions aqueuses d'acide citrique, malique, succinique et benzoique par simple trempage. Les acides étaient utilisés soit seuls, soit en mélanges homogènes Généralement, la solution d'imprégnation contenait-un faible pourcentage d'un agent tensio-actif tel que l'Aérosol-OT sel de sodium de l'ester 1,4-bis ( 2-éthylhexyle) de l'acide sulfosuc- cinique fabriqué par AMERICAN CYANAMID ou du dodécylsulfate de sodium Dans certains exemples, une faible quantité de glycérol était également ajoutée pour augmenter la souplesse du tissu. Les tissus imprégnés étaient pressés entre des cylindres pour - exprimer l'excès d'imprégnant et assurer une uniformité de l'imprégnation Les tissus étaient pesés, séchés et le degré d'imprégnation (c'est-à-dire le pourcentage d'imprégnant absorbé) était calculé Les tissus étaient alors prêts pour tester l'efficacité virucide. Le procédé retenu pour tester l'efficaci- té virucide était en conformité avec les techniques d'essai virologique standard (TCID 50) avec de légères variations nécessités pour la présence du substrat cellulosique Une description de ce procéduit suit: PROCEDE D'ESSAI VIRUCIDE: 1 Produits mis en oeuvre A Solutions 1 Solution neutralisante: 6,4 ml 2 M Na HPO 4 dt 4 1,2 ml 1,0 M Acide citrique 92,4 ml 1 x Milieu 199 (milieu nutritif pour culture de tissu) 2 Solution de sel de Hank Mc Ilvaine (HMSS): 2,0 ml 1,0 Acide citrique Diluée à 2 litres avec 18,0 ml 2,0 M Na 2 HPO 4 stérile une solution de Sel de Le p H de cette solution est 7,0 Hank équilibrée. 3 Solution de sel de Hank équilibrée: g/litre dans l'eau deux lois distillée Na CI 8,0 KCI 0,4 Mg 504 7 H 20 0,2 Ca CI 2 (anhydre) 0,14 Na HPO 4 2 H 2 O 0,06 KH 2 PO 4 (anhydre) 0,06 Glucose 1,0 Rouge phénol 0,005 Na HCO 3 0,35 A noter: les solutions précitées ne sont pas virucides. 11 2509577 B Virus et lignées de cultures de tissu cellulaire: 1 Rhinovirus type 16, type 1 A et type 86 Les rhinovirus types 16, 1 A et 86 (RV 16, 1 A et 86 respec- tivement) sont cultivés sur des cultures de tissu cellulaire Hela (O-Hela) et conservés à 51 C jusqu'au moment d'être utilisés Le test de l'effet virucide intéressant les rhinovirus est effectué dans des tubes à essai de culture de tissu cellulaire O-Hela incubés sur une table à agiter à 33 C. 2 Parainfluenza type 3: le parainfluenza type 3 (Para 3) est cultivé sur des cultures de tissu cellulaire de reins de singe rhésus et conserves à 51 C jusqu'au moment d'être utilisés Le test de l'effet virucide intéressant le para 3 virus est effectué en utilisant des tubes à essais de culture de tissu cellulaire 0-Hela incubés dans une position stationnaire à 33 C. 3 Adénovirus type 5: L'adénovirus type 5 (Adeno 5) est cultivé sur des cultures de tissu cellulaire H Ep-2 et conservé à -51 Cjusqu'au moment d'être utilisé, le test de l'effet virucide intéressant l'adéno 5 virus est effectué en utilisant des tubes à essai de culture de tissu cellulaire humain Epithéléal Carcinome -2 (HEP-2) incubés dans une position stationnaire à 37 C. II Méthodes A Test de l'effet virucide On prépare un mélange 1:1 (volume:volume) de virus et de salive Un échantillon de 6,5 cm 2 est découpé dans un tissu KEENEX Kimberly-Clark traité et placé sur un disque de Pétri en plastique (un tissu traité est un tissu imprégné avec l'agent virucide à tester) Le mélange virus- salive ( 0,1 ml) est prélevé par pipette et mis directement sur l'échantillon et en laisseréagirpendant une minute Il fat noter que la dilution de virus est de 1/2 Apres une durée de réaction d'une minute, 5 ml de la solution neutralisant sont mis à l'aide d'une pipette sur l'échantillon placé sui 12 - la plaque de Pétri et agités pendant 3 secondes La dilution du virus est alors de 102 Le mélange solution neutralisante virus salive est alors prélevé de la plaque de Pétri par pipette et placé dans un tube contenant 5 ml de la solution de sel de Hank-Mc Ilvaine L'échantillon est placé dans le même tube en inclinant la plaque et en utilisant l'extrémité d'une pipette pour le pousser à l'intérieur du tube Le tube contenant les 10 ml de solution et l'échantillon est soumis à une agitation tourbillonnaire pendant 30 s Ce tube contient une dilution de virus de 10-2,3 ou 1:200 Des séries de dilutions de 1:10 (une pipette propre est utilisée pour chaque dilution) sont faites à partir de la solution de 10-2,3 en prenant 0,3 ml de cette dilution et en lui ajoutant 2,7 ml. de la solution de sel de Hank-Mc Ilvaine 0,1 ml est inoculé dans chaque tube à essai de culture de tissu En général, deux tubes sont inoculés par dilution - Pour chaque expérience, deux séries de contrôle sont exécutées La première peut être "le contrôle de virus" comme elle est destinée à contrôler l'infectiosité de la suspension de virus elle-même sans la salive ou le substrat de tissu La suspension de virus est diluée en série au 1/10 dans le HMSS 0,1 ml des dilutions spécifiques est inoculé par tube à essai contenant les cultures de tissu cellulaire L'information obtenue par ce contrôle donne le nombre d'unités de virus infectieux qui sont contenus dans la solution de virus qui a été conservée à -510 C et permet d'être assuré que la partie aliquote de la solution de virus utilisée dans l'expérience n'a pas perdu de son infectidsité pendant les opérations de congélation, de stockage ou de décongélation. Le second contrôle, "le contrôle de tissu" consiste à exécuter le test de l'effet virucide en utilisant 6,5 cm 2 d'un tissu KEENEX (marque déposée) non traité L'information obtenue par ce contrôle donne le nombre d'unités de virus infectieux qui peuvent être récupérées de 6,5 cm 2 du tissu non traité après le test de l'effet 13 - virucide Les tubes de culture de tissu inoculé sont examinés pendant sept jours afin de mettre en évidence l'infection virale. La fin d'un test de l'effet virucide pour un échantillon donné est la dilution du virus qui produit réellement une infection ou est calculée pour infecter seulement un des deux tubes inoculés Ce nombre est défini comme la dose infectieuse de culture de tissu ou TCID 50 Les résultats de l'activité virucide pour un échantillon déterminé sont habituel- lement donnés par la"'ifférence des log'" entre le log usuel du résultat TCID 50 de l'échantillon traité soustrait du log usuel du TCID 50 de l'échantillon non traité. L'efficacité virucide d'un échantillon peut être calculée à partir de la "différence des log" de la manière suivante X -Y Efficacité virucide = x 100 % X dans laquelle: X = la concentration initiale du virus (unités infectieuses/ 0,1 ml) dans l'échantillon non traité utilisé comme contrôle. Y = la concentration finale du virus (unités infectieuses /0,1 ml dans l'échantillon traité. Les exemples suivants expliquent le mode de calcul (dans les essais, la concentration finale du virus était toujours inférieure ou égale a 102 '3 unités infectieuses/ 0,1 ml) Pour la majorité des résultats, la concentration finale du virus était inférieure à 102,3 Avec une concentration initiale en virus de i 06,3, cela signifie une différence de log plus grande que 4 et un pourcentage de virus "tués" plus grand que 99,99 %). 1 Concentration initiale: X = 106,3 Concentration finale: y = 1 o 2,3 Différence des log = (log 106,3 log 102 ') = 4 -14- Efficacité virucide = ( 103 1023)X 100 % 106,3 2,3 ( 104 x 100 % îo 6 3 106 '3 = 99,99 % 2 Concentration initiale: X = 104 '8 Concentration finale: y = 10 o 2,3 Différence des log = 2,5 Efficacité virucide = ( 104 '8 102 '3) x 100 % 104,8 = 99,7 % Le mode de calcul indiqué ci-dessus est en conformité avec les techniques d'essai microbiologique standard. Il fournit des résultats fiables et reproductibles dans les limites de variabilité liéesaux expériences biologiques. RESULTATS Les résultats sont consignés dans les ta- bleaux I, II et III Les résultats donnés dans le Tableau I mon- trent que des acides carboxyliques organiques simples tels que les acides citrique, malique, tartrique, succinique et les déri- vés substitués de ces acides (par exemple l'acide 2-bromo-succi- nique) et l'acide benzoïque et ses dérivés substitués (acide salicylique), utilisés sur des tissus faciaux dans des concentra- tions convenables sont hautement virucides contre le rhinovirus 16 et le parainfluenza 3. De plus, les résultats du Tableau I mont- trentque,lorsqu'on utilise les acides en combinaison avec un agent tensioactif tel que l'Aérosol OT ou le dodécylsulfate de sodium, les concentrations des acides dans le tissu facial peu- vent être abaissées sans que l'effet virucide s'en trouve altéré. -15- Le Tableau II rassemble les résultats des essais avec des mélanges d'acides choisis dans le groupe consti- tué par les acides citrique, benzolque, succinique et malique. Les résultats montrent que les tissus faciaux traités avec des mélanges d'acides sont virucides contre les rhinovirus 16 et le parainfluenza 3 Ils mettent en évidence le fait que le tissu facial imprégné par un mélange d'acides tels que l'acide citrique et l'acide malique et un agent tensio-actif tel que le dodécyl- sulfate de sodium (SSD) est efficace contre les rhinovirus 16, l A et 86 et l'adénovirus 5 Comme ces exemples le montrent, des acides organiques simples tels que les acides citrique/ malique/ succinique,lorsqu'on les utilise en association avec un agent tensio-actif convenable tel que le dodécylsulfate de sodium, sont hautement virucides contre les virus respiratoires habituels par- mi lesquels les rhinovirus 16, 1 A et 86, le parainfluenza 3 et l'adénovirus 5 sont des exemples typiques En plus, des produits utilisant des tissus faciaux comme moyen de support des composi- tions virucides mentionnées sont hautement efficaces. L'intérêt de l'invention réside dans le fait qu'elle fournit la base pour interrompre la chaîne d'infec- tion provoquée par les virus respiratoires Comme les virus ne se reproduisent pas en dehors de la cellule hte, le degré d'inactivation démontré dans les essais offre un moyen simple et pratique pour réduire la concentration des virus dans le voisi- nage d'une personne infectée par un virus respiratoire Ceci, son tour, réduit notablement la tendance de l'infection à se propager. TABLEAU I EFFICACITE VIRUCIDE D'ACIDES SIMPLES CONTRE LE PARAINFLUENZA 3 VIRUS (TEMPS D'EXPOSITION Composition virucidea Agent tensio-actifa RHINOVIRUS 16 ET LE DE UNE MINUTE) i Efficacité virucide Rhinovirus 16 Parainfluenza 3 citrique ( 23,2 %) citrique ( 18,7 %) citrique ( 9,7 %) citrique ( 9,4 %) succinique ( 20 %) succinique ( 9,1 %) 2-bromosuccinique malique ( 9,4 %)( 10,4 %) tartrique ( 15 %) benzolque ( 30 %) salycilique ( 18 %) salycilique ( 9 %) Aucun Aucun AO Tb ( 1 %),SDC ( 1 %) SDS ( 1 %) Aucun SDS ( 2 %) SDS ( 1 %) AOT ( 0,5 %) Aucun Aucun Aucun Aucun a Les chiffres entre parenthèses représentent le pourcentage de produits chimiques utilisé rapporté au poids du tissu facial. b AEROSOL OT, le se de sodium de l'ester 1, 4-bis ( 2-éthylhexyl) de l'acide sulfosuccinique. C Dodécylsulfate de sodium. O Ln Or \ O -4 N 4 Exemple N Acide Acide Acide Acide Acide Acide Acide Acide Acide Acide Acide Acide > 99,7 % > 99,99 % > 99,99 % > 99,99 % > 99,99 % > 99,99 % 99,99 % > 99,99 % > 99,99 % > 99,99 % > 99,99 % 99,99 % > 99,99 % > 99,99 % > 99,99 % l O% TABLEAU II EFFICACITE VIRUCIDE Dg MLANGES D'ACIDES CONTRE LE RHINOVIRUS 16 ET LE PARAINFLUENZA 3 VIRUTS (TEM Po S D'EXPOSITION DE UNE MINUTE) Compositions Acide Acide Citri Qu Benzoique ,7 ,3 ,1 7,1 8,8 ,3 ,0 ,0 ,4 , 5 ,3 O,2 11, 1 ,6 11,1 ,6 4,8 13,8 , 7 0,2 0,2 0,2 0 $,2 0,2 0,2 vîiruc ides Acide Malique ,2 ,3 ,2 ,1 ,6 ,3 ,6 ,3 4,8 ,7 9,7 Efficacité virucide Acidea Succinique Agent tensio-actifa ,2 ,0 5.,0 ,0 A Ob) AOT ( 1) AOT ( 1) AOT ( 1) AOT ( 1) AOT ( 1) AOT ( 1) AOT ( 1) AOT ( 1) AOT AOT ( 1) AOT ( 1) AOT ( 0,5) AOT ( 1) AOT ( 0, 5) AOT ( 1) AOT ( 1 TX d 100 ( 2) SDS ( 2) SDS ( 2) Rhinovirus 16 > 99,99 *> 99,99 > 99,99 > 99 > 99 > 99,99 > 99,99 > 99,99 > 99,99 > 99,99 > 99,99 > 99,99 > 99,99 > 99,99 > 99,99 > 99,99 > 99,99 > 99,99 > 99,99 > 99,97 99,97 Parainfluenza 3 > 99,97 > 99,97 > 99,97 > 99,99 > 99,99 > 99,97 > 99,97 > 99,97 > 99,99 > 99,97 > 99,97 > 99,97 > 99,7 > 99,7 > 99,7 > 99,70 > 99,99 > 99,99 > 99,90 > 99,90 "Leas chiffres entre parenthèses représentent le pourcentage de produits chimiques utilisé tissu facial b AEROSOL OT TRITON X-100 d Dode#cylsulfate de sodium rapporté au poids de J, -.4 Exemple N O -J l A,L41 - -3 'l 'e - f -13 2 M à 1 TABLEAU III EFFICACITE VIRUCIDE DE MELANGES D'ACIDES ET DE SDS CONTRE LE RHINOVIRUS 16, LE RHINOVIRUS 1 A, LE RHINOVIRUS 86 ET L'ADENOVIRUS 5 ( TEMPS D'EXPOSITION DE UNE MINUTE) Composition virucidea Acide Acide Agent Tensio- Citrique Malique actif SD Sb Rhinovirus 16 Citrique Maligue actif SD Sb Rhinovirus 16 ,8 11,2 11,4 ,8 11,2 ,0 ,5 ,7 ,8 ,5 ,7 ,0 2,2 2,3 2,3 2,2 2, 3 2,0 > 99,99 > 99,99 > 99,99 > 99,99 > 99,99 > 99,99 Efficacité Virucide Rhinovirus 1 A Rhinovirus 86 > 99,9 > 99,9 Adénovirus 5 99,90 99,90 99,70 99,99 99,99 99,90 a Les chiffres reprdsentent le pourcentage de produits utilisé rapporté au poids du tissu facial Dodecylsufate de sodium un Or N o n C -,4 Exemple N A o, -19- Afin d'illustrer de façon plus spécifique les effets améliorés obtenus grace à la présente invention, des exemples complémentaires ont été donnés dans lesquels on a fait varier les concentrations des compositions acides choisies et mesuré l'activité virucide après 1 et 5 minutes Ces résultats sont consignés dans le Tableau IV En général, les compositions acides qui entrent dans le cadre de l'invention ont une grande efficacité virucide, par exemple dans le cas des rhinovirus ou des parainfluenza, ils produisent une chute du log de 2 ou une plus grande inactivation en une minute au moins Pour les adeno- virus, le temps sera de 5 minutes au moins En général, le degré d'inactivation est plus grand au bout de cinq minutes qu'au bout d'une minute, comme on pouvait s'y attendre Certaines discor- dances mineures apparaissent dans les résultats rapportes, dues à la marge d'erreur et à la nature du test utilise L'homme de l'art sait que l'efficacité est également influencée par la quan- tité de compositions qui est en contact avec le virus et qui, à so tour, dépend de la nature du support Par exemples commne le montre le Tableau IV ci-après, un support relativelment épais avec de larges vides tel que la laine paut être inefficace à moins d'être traité avec des quantités importantes de composition A l'inverse, une structure légàre relativement fermée telle u'un tissu ou un matériau non tissé demandera moins de composition. Sur la base des tests décrits, cependant, il est possible de déterminer l'efficacité d'une combinaison donnée d'une composi- tion et de son support Par exemple, comme on le voit sur le Tableau IV, l'acide citrique est efficace à des concentrations comprises entre 5 et 10 % La méthode utilisée est décrite ci- dessous. Dans ces exemples, les TCID 50 ont été ob- tenus en utilisant des cellules WI-30 de passage bas provenant de Flow Laboratories Inc qui ont été initialement passées au moins une fois pour augmenter leur potentiel de croissance Les flacons ont été fractionnés dans un rapport 1:2 et ensemencés sur des plaques de culture de tissu aggloméré à 96 puits avec un -20- fond plat assurant une aire de croissance de 0,32 cm 2 fourni par MA Bioproducts Les cellules ont été incubées à 370 C dans du CO 2 à 5 %, et après 24 heures ont été récoltées à 80-90 % de façon habituelle et avaient'une apparence normale avant d'être utili- sées dans l'essai Le milieu ( 2 % MM) utilisé aussi bien pour les dilutions que pour l'entretien des cellules était du MEM Eagles avec du BSS Earles(avec de la glutamine, de la gentamycine et 2 % de sérum de veau foetal) Le rhinovirus l A provenait du National Institute of Allergy and Infectious Diseases, Bethesda, Maryland. On a laissé croître des cellules WI-38 dans une fiole, on les a ré- coltées après qu'elles aient montré un effet cytopathogénique (CPE) 4 + deux jours après l'inoculation Le virus a été récolté, divisé en parties aliquotes et conservé à -70 'C, et plus tard titré en cellules WI-38 sur des plaques à 96 puits. Pour l'essai, le milieu a été enlevé des plaques en plaçant une gaze stérile entre la plaque et le couver- cle et en retournant ladite plaque Les six puits utilisés ont reçu 0,1 ml de 2 % M 4 Dans les puits qui étaient destinés à être utilisés comme cellules de contrôle, on a ajouté une quantité supplémentaire de 0,1 ml de 2 % MM Dans les puits destinés à recevoir les composés, on a ajouté 0,1 ml de la dilution appro- priée dans chacun des six puits Le-stock de virus était mélangé en proportions égales avec 2 % MM pour la dilution initiale Un centième de microml de cette dilution de virus a été alors mis sur un disque traité sur un disque de Pétri Le virus a été appli- qué uniformément sur un disque de tissu en utilisant une serin- gue microlitre Le virus a été laissé sur le disque pendant 1 minute ou 5 minutes puis 5 ml de 2 % MM ont été mis sur le disque de tissu placé sur le disque de Pétri et a été légèrement agité. Le disque et la solution ont été enlevés, placés dans un tube stérile et soumis à une agitation tourbillonnaire pendant 30 se- condes, représentant la première dilution Trois dilutions de 1/10 ont été faites à partir du tube original et 0,1 ml des quatre dilutions a été ajouté sur les cellules WI-38 en couches mono- cellulaires Six puits étaient utilisés pour chaque dilution. -21- Des contrôles de tissus non traités ont été effectués à 1 et 5 minutes, avec et sans virus et un titrage de virus a été également réalisé pour chaque essai Les plaques ont été réin- cubées à 370 C dans du CO 2 à 5 % pour la durée du test. Des acides tels que les acides sulfamique et phosphorique se sont révélés également être virucides Cepen- dant, il a été constaté que ces acides endommageaient les sup- ports tels que les tissus. TABLEAU IV Acide Glyconique i t Salicilique VI t, Succinique t i' t, M 4 alique i fi i 2-Bromo- Succïnique if Tartr iqu e il il t' Concen- tration % Add. Tenajo- actif SDS -% Add. 2,4 7,2 ,4 3,6 1,4 9,2 6,9 4,6 1,8 ,5 7,9 ,2 2,1 2 e O ,2 11,7 8,8 ,9 2,3 Une minute TCID 50 (Log,0) Chute Log Tissu Contr Sle Traité,Virus 3,9 NA 2,38 2,0 3,33 2,5 > 3,25 > 3,25 > 3,25 > 2 e 33 > 2,33 o o > 3,25 > 3,325 > 3, O 0,8 > 3,25 NA > 3 25 2,.87 1,92 2,5 > 3,25 > 3,25 > 3,25 > 3,25 Cinq minutes Log 10 (TCID 50) Z Chute Log Tissu Contr 6 le Traité Virus 2,5 > 2,75 > 2,075 > 2,75 > 2,75 > 2,75 0,5 O > 2,75 > 2,75 > 3,17 0,4 > 2,75 > 2,75 > 2,75 > 2,75 > 2,75 2,67 > 2,75 > 2,75 > 2,75 > 2,75 Ef ficacité vïrucide (Z tués) Une Cinq Minute Minutes > 99,94 > 99,94 > 99,94 > 99,5 > 99,5 o O > 99,94 > 99,94 > 99, 9 > 99,94 NA > 99,94 99,9 98,8 99,7 > 99,94 > 99,94 > 99,94 > 99,94 > 99,82 > 99,82 > 99,82 > 99,8 > 99,8 o > 99,82 > 99,82 > 99,93 > 99,82 > 99,82 > 99,82 > 99,82 > 99,8 99,8 > 99,82 > 99,82 > 99,82 > 99,82 r N>) c' t, Exemple N O '5 NI TABLEAU IV (Suite) Conc en- tration Acide % Adcd. Tens io- act if SDS -Z Add. Une minute TCID 50 (Log 10) 15 Chute Log Tissu Contr 8 le Traité Virus Cinq minutes Log 10 (TCID 50) '1,1 Chute Log Tissu Contr Ble; Tralté Virus Ef ficacité virucide (% Inactivation de rhinovirua l A) Une Cinq Minute Minutes Maléique et i Acotinique i I Citrique I I Phosphorique fi i, I, Citrique/ Malique i Substrat Laine Poids base= 27 nrcj/cin 2 Masque de Protection Polypropylène, Soufflé fondu 6,8 4,5 1,8 9,0 6,8 i,8 ,0 7,5 ,0 2,0 ,0 3,8 2,5 1,0 ,0/5,0 i 4,25 > 3,25 > 3,25 > 3, 00 > 3,25 3,25 i,85 > 3,25 > 3,25 > 3,25 1,0 > 3, O > 3, O *> 3, O 0,75 > 1,75 > 3, O 0,4 4,6 a a a 4,40 >.2,75 > 2,75 > 2,40 > 2,75 1,25 > 2,75 > 2,40 > 2,75 > 2,4 > 3,17 > 3,17 > 3,17 0,77 > 1,40 > 3,17 NA NA > 99,94 > 99,94 > 99,9 > 99,94 98,6 > 99,94 > 99,94 > 99,94 > 99,9 > 99,9 > 99,9 a > 99,8 > 99,8 > 99,6 > 99,8 > 99,8 ( 2) > 99,6 > 99,8 ( 2) > 99,6 > 99,93 > 99,93 > 99,93 > 83 > 98,2 > 96 > 99,9 > 99,93 f" O NA NA > 97,5 NA Signifie non applicable a A noer dan qulque ca,particulièrement avec l'addition d'un agent tensio-actif, des effets cytopathiquesempîchento de bons rcésultats De tels effets sont décrits par Lennette et al, Diagonistie Procedure for Viral, Rickettsial$,%O and Chl amydial Infections, 1979, 5 th Ed, p 67 1- -à Exemple N O 1, bw TABLEAU V Acide Sulfamiqoe le i Tensio-actif Mole/cn 2 Acide Addit Z Addît % 2,4 5 7,2 15 2,4 2,4 SDS 2 % Activité Virucide (Y Inactivation de Rhinovirus 16) Une minute Cinq minutes 99 > 99,997 99,997 > 99,997. 99 99 99 > 99,99 Exemple N O "I N'o -J -25- C'est parce que de tels acides sont solu- bles dans l'eau qu'ils peuvent être appliqués sur de nombreux substrats à partir d'une solution aqueuse avec une grande faci- lité, soit par imprégnation, revêtement ou par d'autres moyens classiques tels que pulvérisation ou impression par photogra- vure Lorsqu'elle est incorporée à des substrats, la composi- tion est appliquée en une quantité suffisante pour produire une activité virucide telle qu'elle a été définie Si la limite in- férieure de la concentration en acide pour que le produit soit efficace n'a pas été déterminée avec précision, en général pour un substrat tel qu'un tissu facial ayant un poids de base com- pris entre 38 et 52 g par mètre carré ( 3 plis), le poids d'acides tels que l'acide citrique, absorbé rapporté au poids de substrat sec est d'au moins environ 2 % et de façon préféren- tielle d'environ 5 % D'autres substrats tels que des non-tissés peuvent être utilisés de la même façon. En ce qui concerne ces autres substrats, on préfère, en général, ceux qui ont un pouvoir mouillant élevé. Comme on l'a montré, l'effet virucide peu élevé que l'on obtient avec des substrats tels que la laine semble être dû à 1 'incapa- cité de pouvoir pénétrer de tels substrats avec une composition virucide. Lorsque des mélanges d'acides sont utilisés, ceux-ci peuvent être mélangés dans des proportions variable-, mais d'une façon préférentielle les mélanges contiennent au moinw environ 0,2 à 10 % de chaque acide rapporté au poids du substrat après séchage. Dans le cas o des agents tensio-actifs sont incorporés, ils sont choisis de façon préférentielle dans le groupe des agents tensio-actifs anioniques et incorporés dans une proportion d'environ 0,05 à 5 % rapportéeau poids du sub strat après séchage. Dans le cas o les acides organiques ayant une activité virucide conformes à la présente invention sont appliqués sur d'autres substrats ou supports tels que lotions, bains de bouche, crèmes, dispersions, produits encaustiques et -26- produits similaires, la quantité d'acides pour laquelle les pro- priétés virucides se manifestent, peut être déterminée en appli- quant la méthode décrite précédemment Par exemple, une chute du log de 2 ou plus signifierait que 99 % ou plus des virus hôte sont inactivés lorsqu'ils viennent en contact avec les compositions acides antivirales conformes à la présente invention. Ainsi, il ressort clairement que conformé- ment à la présente invention est fourni un produit virucide qui, dans des conditions d'utilisation normales, satisfait pleinement les objectifs et présente les avantages tels qu'exposés dans les paragraphes précédents. Bien que l'invention ait été décrite en se référant à des modes de réalisation spécifiques, il est évident que de nombreuses alternatives, variantes et modifications appa- raîtront à l'homme de l'art à la lumière de la description qui précède Aussi, l'invention vise-t-elle à couvrir toutes les al- ternatives, variantes et modifications qui entrent dans le cadre des revendications annexées. 27 - REVENDICATIONS 1 ) Procédé pour interrompre ou prévenir la propagation des virus respiratoires comprenant la mise en contact d'une zone contenant le virus avec une quantité suffi- sante pour obtenir une activité virucide efficace d'une composi- tion ayant une activité virucide contenant un ou plusieurs aci- des virucides essentiellement non-toxiques et non-irritants pour le tissu humain ou animal, caractérisé en ce que chacun desdits acides a la structure suivante: R COOH dans laquelle R est choisi dans le groupe constitué parles alkyles inférieurs; alkyles inférieurs substitués; carboxy alkyles inférieurs; carboxy hydroxyalkyles inférieurs; carboxy halo alkyl E inférieurs; carboxy dihydroxy alkylesinférieurs; dicarboxy, hy- droxyalkyles inférieurs alkenyles inférieurs; carboxy alkenyles in- férieurs; phnyles et groupes phényl substitués. 2 ) Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que lesdites compositions contiennent égale- ment un agent tensio-actif choisi dans le groupe constitué par les agents tensio-actifs non-ioniques, cationiques et anioniques. 3 ) Procédé selon l'une des revendications loi 2, caractérisé en ce que ledit acide est choisi dans le groupe constitué par les acides citrique, malique, succinique, benzol- qae et leurs dérivés substitués et les mélanges de deux ou plu- sieurs de ces acides. 4 ) Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que ledit agent tensio-actif est choisi dans le groupe constitué par les alkyl phenols polyoxyéthylénés, les esters du sorbitol polyoxyéthylènés, les sels d'amonium quater- naire ou les sels d'ester de l'acide sulfurique et les sels d'ester de l'acide sulfosuccinique ayant la formule: CHCO 2 R 1 (RO),o (O) M ou O H 2 ( I. M+ (' ramifiées de groupes aliphatiques identiques ou différents. 5 ) Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que ledit agent tensio-actif est choisi dans le groupe constitué par le sel de sodium de l'ester 1, 4-bis ( 2-éthylhexyl) de l'acide sulfosuccinique et le dodécylsulfate de sodium. caractérisé en ce que et malique. caractérisé en ce que et benzoique. 6 ) - que ledit ) - que ledit caractérisé en ce que que et succinique. caractérisé en ce que que et benzoique. 8 ) - ledit ) - ledit ) - caractérisé en ce que ledit que et succinique. Procédé selon la revendication 3, acide est un mélange d'acidescitri- Procédé selon la revendication 3, acide est un mélange d'acides citri- Procédé selon la revendication 3, acide est un mélange d'acides citri- Procédé selon la revendication 3, acide est un mélange d'acides mali- Procédé selon la revendication 3, acide est un mélange d'acides mali- 11 ) Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce queledit acide est un mélange d'acides succi- nique et benzolque. 12 ) Composition virucide comprenant un support physiologiquement acceptable contenant une quantité suf- fisante pour obtenir une activité virucide efficace d'un ou plu- sieurs acides non-toxiques et non-irritants pour le tissu humain ou animal dans la proportion utilisée,caractérisée en ce que chacun desdits acides a la structure suivante: R-COOH dans laquelle R est choisi dans le groupe constitué par les alkylesinférieurs; alkyles inférieurs substitués; carbc Ky 29 alkylesinférieurs; carboxy hydroxy alkyles inférieurs; carboxy halo alkylesinférieurs; carboxy dihydroxy alkylesinférieurs; di carboxy hydroxy alkyles inférieurs; alkenyles inférieurs; carboxy alkenylesinférieurs; dicarboxy alkenyles inférieurs; phényleet groupes phényl substitués. 13 ) Composition selon la revendication 12, caractérisée en ce que ladite composition contient également un agent tensio-actif choisi dans le groupe constitué par les agents tensio-actifs non-ioniques, cationiques et anioniques. 14 ) Composition selon la revendication 12, caractérisée en ce que ledit acide est choisi dans le grou- pe constitué par les acides citrique, malique, succinique, ben- zoique et leurs dérivés substitués et les mélanges de ces acides. ) Composition selon les revendications 12 et 13, caractérisée en ce que ledit agent tensio-actif est choisi dans le groupe constitué par les alkyles phénols polyoxyé- thylénés, les esters du sorbito:l polyoxy 6thylénés, les sels d'amonium quaternaire, les sels d'ester de l'acide sulfurique, les sels de l'acide sulfonique, et les sels de l'ester de l'acide sulfosuccinique ayant les formules: CH 2 CO 2 R 1) ( i) (R 503 >)M, ou (ROSO 3)x M+ ou M ( o -O O S-CHCO 2 R 2) dans laquelle M est un cation mono, di ou trivalent ou un ion amxiumr, ou un ion amnonijum substitué, x est un nombre entier et R est un groupe alkyle, R 1 et R 2 sont des chaînes droites ou ra- mifiées de groupes aliphatiques identiques ou différents. 16 ) Composition selon la revendication , caractérisée en ce que l'agent tensio-actif est choisi dans le groupe constitué par le sel de sodium de l'ester 1,4-bis ( 2- éthylhexyl) de l'acide sulfosuccinique et le dodécylsulfate de sodium. 17 ) Composition selon la revendication 14, caractérisée en ce que ledit acide est un mélange d'acides citrique et malique. -30- 18 ) Composition selon la revendication 14 caractérisée en ce que ledit acide est un mélange d'acide citri- que et benzolque. 19 ) 14 caractérisée en ce que citrique et succinique. ) 14 caraçtérisée en ce que malique et benzolque. 21 ) 14 caractérisée en ce que malique et succinique. 22 ) 14 caractérisée en ce que succinique et benzolque. 23 ) strat en tissu contenant Composition selon la revendication ledit acide est un mélange d'acides Composition selon la revendication ledit acide est un mélange d'acides Composition selon la revendication ledit acide est un mélange d'acides Composition selon la revendication ledit acide est un mélange d'acides Produit virucide comprenant un sub- une quantité suffisante pour obtenir une action virucide d'une composition contenant un ou plusieurs acides non-toxiques et non- irritants pour le tissu humain ou animal dans la proportion utilisée, caractérisé en ce que chacun desdits acides a la structure suivante: R-COOH dans laquelle R est choisi dans le groupe constitué par les alkylesinférieurs;, alkyles inférieurs substitués; carboxy alkylesinférieurs; carboxy hydroxy alkyles inférieurs; carboxy halo alk Yles inférieurs; carboxy dihydroxy alkylesinférieurs; dicarboxy hydroxy alkyléesinférieurs;alkenyles inférieurs; carboxy alkenyles inférieurs; dicarboxy alkenyles inférieurs; phényles et groupes phényl substitués. 24 ) Produit virucide selon la revendica- tion 23,caractérisé en ce que ladite composition contient égale- ment un agent tensio-actif choisi dans le groupe constitué par des agents tensio-actifs non-ioniques, cationiques et anioniques. ) Produit virucide selon les revendica- tions 23 et 24,caractérisé en ce que le substrat est choisi dans -31- le groupe constitué par un tissu cellulosique, des structures non tissées et des matériaux textiles. 26 ) Produit virucide selon la revendica- tion 25 caractérisé en ce que ledit acide est choisi dans le groupe constitué par les acides citrique, succinique, benzoique et leurs dérivés substitués et les mélanges de l'un quelconque de ces acides, ledit acide étant présent dans une proportion d'environ 2 % ou plus rapportéeau poids du substrat. 27 ) Produit virucide selon la revendica- tion 25 caractérisé en ce que le substrat est un tissu facial cellulosique. 28 ) Produit virucide selon la revendica- tion 25 caractérisé en ce que ledit agent tensio-actif est choisi dans le groupe constitué par les a 2 kylësphénols polyoxyéthylénés, les esters du sorbitol polyoxyéthylénés, les sels d'ammonium quaternaire, les sels d'ester de l'acide sulfurique, les sels de l'acide alkyl sulfonique et les sels de l'ester sulfosucci- nique ayant les formules: 1 90502 R 2 (RSO 3)M, ou (ROSO 3) M, ou M -03 S-CHCO 2 R 2 + dans laquelle M+ est un cation mono, di ou trivalent ou un ion ammonium ou un ion ammonium substitué, x est un nombre entier et R est un groupe alkyl, R 1 et R 2 sont des chatnes droites ou rami- fiées de groupes aliphatiques identiques ou différents. 29 ) Produit virucide selon la revendica- tion 25 caractérisé en ce que l'agent tensio-actif est choisi dans le groupe constitué par le sel de sodium de l'ester 1,4 -bis ( 2-éthylhexyl) de l'acide sulfosuccinique et le dodecylsulfate de sodium. ) Produit virucide selon la revendica- tion 25 caractérise en ce que ledit acide est un mélange 3 d'acides citrique et malique. -32 - 31 ) Produit virucide selon la revendica- tion,25 caractérisé en ce que ledit acide est un mélange d'acides citrique et benzoïque. 32 ) Produit virucide selon la revendica- tion 25 caractérisé en ce que ledit acide est un mélange d'acides citrique et succinique. 33 ) Produit virucide selon la revendication caractérisé en ce que ledit acide est un mélange d'acides malique et benzolque. 34 ) Produit virucide selon la revendication caractérisé en ce que ledit acide est un mélange d'acides ma- lique et succinique. ) Produit virucide selon la revendication caractérisé en ce que ledit acide est un mélange d'acides suc- cinique et benzo Ique.