FR 2500838 A1 19820903 FR 8123093 A 19811210 -1- La présente invention concerne de nouveaux dérivés de néplanocine A. Plus particulièrement, elle concerne un dérivé de néplanocine A de la formule: R2 -N-R1 N6N ' 1 R6 OH2 C ORs R3 dans laquelle R1 et R2 sont chacun un atome d'hydrogène ou un groupe benzoyle, R5 est un atome d'hydrogène ou un groupe acétyle, R6 est un atome d'hydrogène ou un groupe O acétyle, benzoyle ou -P-O-R7, o R7 est un atome d'hydro- OH gène ou un groupe alcoyle inférieur; quand R3 est un atome d'hydrogène, R4 est un atome d'hydrogène ou d'un halogène ou un groupe hydroxy, acétoxy, acétylthio, amido ou azide; et quand R3 est un groupe OR8, R4 est un atome d'hydrogène, R8 est un atome d'hydrogène ou un groupe acétyle ou R8 et R5 sont ensemble un groupe benzylidène; et l'un au moins des substituants R8, R5 et R6 n'est pas un atome d'hydro- gène. La néplanocine A, appelée initialement antibiotique A 11079-Blb, est un antibiotique produit par Ampullariella sp. A 11079 FERM-P N 4494 ayant une activité anti-tumeurs et une action inhibitrice sur des champignons pathogènes des plantes (Brevet japonais N 54-154792). D'après des résultats d'analyse instrumentale et la nature chimiquement déductible de cet antibiotique par rapport à l'aristéro- mycine (J. Chem. Soc. Chem. Comm., 852-853 (1967), Chem. Pharm. Bull., 20(5), 940-946 (1972)), la néplanocine est -2- une substance apparentée aux antibiotiques nucléosides, ayant un noyau de cyclopentène, de la formule: NH2 N6 I HOH2 C C OH OH (voir Current Chemotherapy and Infectious Disease, 1558- 1559 (1980)) et a une configuration absolue de l'(R), 2'(R) et 3'(R). (Nucleic Acids Research, Symposium Series, No 8, S65 - S67 (1980)). Le composé (I) de la présente invention a une action inhibitrice sur le développement des cellules L 5178 Y et a des activités égales ou supérieures à celle de la néplanocine A, et est donc utile comme agent anti-tumeurs. Dans la présente invention, dans le cas o le groupe amine à la position 6 du noyau d'adénine n'est pas substitué, un sel d'addition d'acide peut être formé. En conséquence, le sel d'addition d'acide peut être inclus dans le cadre général de la présente invention. Ce sel est un sel nontoxique pharmacologiquement acceptable d'un acide inorganique tel que le sulfate, le chlorhydrate ou le phosphate, ou d'un acide organique, comme l'acétate, le propionate, le malate, le tartrate, le citrate ou un sel d'amino-acide. La dénomination du composé selon la présente invention et de ses intermédiaires est basée sur les numéros de positions de la formule (II) pour indiquer la position des substituants. -3- Des procédés de préparation du composé (I) selon la présente invention sont les suivants. (1) Un composé (1) dans lequel R1 et R2 sont chacun un atome d'hydrogène, R3 est un groupe OR8, R4 est un atome d'hydrogène et R8, R5 et R6 sont un groupe acétyle, c'est-à-dire la 2',3',5'-triacétyl néplanocine A, peut être préparé par acétylation de néplanocine A. L'acéty- lation peut être effectuée par réaction avec l'anhydride acétique en présence d'une amine organique tertiaire comme la pyridine, la N-méthylmorpholine ou la diméthylaniline. (2) Un composé (I) dans lequel R1, R2 et R6 sont chacun un atome d'hydrogène, R3 est OR8, R4 est un atome d'hydrogène et R8 et R5 sont ensemble un groupe benzyli- dène, c'est-à-dire la 2',3'-O-benzylidène néplanocine A, peut être préparé par benzylidénation de la néplanocine A. On peut effectuer la benzylidénation par réaction avec du benzaldéhyde en présence de chlorure de zinc. (3) Un composé (I) dans lequel R1, R2 et R6 sont chacun un groupe benzoyle, R3 est un groupe OR8 et R8 et R5 sont chacun un atome d'hydrogène, c'est-à-dire une N6,N6,5'-O-tribenzoyl néplanocine A, peut être préparé en protégeant un groupe hydroxy aux positions 2' et 3' de la néplanocine A par un groupe protecteur préférable, en benzoylant la 2',3'O-protégé-néplanocine A ainsi obtenue pour préparer le composé 6N6,N6-5'-O-tribenzoyl-2',3'-O- groupes protecteurs. Les groupes protecteurs ci-dessus pour le groupe 2'- ou 3'-hydroxy sont des groupes protecteurs classiques couramment utilisés dans le chimie des acides nucléiques, et sont, par exemple, un résidu d'aldéhyde qui forme un acétal avec les deux atomes d'oxygène voisins, nu un résidu de cétone qui forme un cétal. Des exemples des groupes protecteurs sont les groupes isopropylidène, méthoxyméthylène, éthoxyméthylène, éthoxyéthylidène ou benzylidène. On peut introduire ces groupes protecteurspar -4- réaction avec l'aldéhyde ou la cétone correspondants en présence d'un catalyseur acide. On peut introduire le groupe isopropylidène par réaction avec l'acétone ou le 2,2-diméthoxypropane en présence d'un acide de Lewis comme l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide per- chlorique, le chlorure de zinc, l'acide p-toluène sulfo- nique ou l'acide di-p-nitrophényl phosphorique. On peut introduire un groupe méthoxyméthylène, éthoxy- méthylène ou éthoxyéthylidène par réaction avec un excès d'ester d'acide orthoformique ou ortho-acétique en pré- sence d'acide chlorhydrique ou d'acide p-toluènesulfonique dans du diméthylformamide. On peut introduire le groupe benzylidène par réaction avec le benzaldéhyde en présence d'un catalyseur acide comme le chlorure de zinc, l'acide chlorhydrique ou l'éthérat de BF3. On peut effectuer la benzoylation en faisant réagir unexcès molaire au moins triple d'un halogénure de benzoyle comme le chlorure de benzoyle en présence d'une amine organique tertiaire comme la pyridine, la N-méthyl- morpholine ou la diméthylaniline. Le groupe protecteur 2',3'-O de la N6,N6,5'-O- tribenzoyl-2',3'-O-protégé-néplanocine A ainsi obtenue peut être éliminé par une méthode déjà connue pour l'élimi- nation d'un groupe protecteur 2',3'-O, par exemple en traitant par un solvant acide comme l'acide acétique ou l'acide formique aqueux. (4) Un composé (I) dans lequel R1 et R6 sont chacun un groupe benzoyle, R3 est un groupe OR8 et R8 et R5 sont chacun un atome d'hydrogène, c'est-à-dire une N6,5'-0- dibenzyl néplanocine A, peut être préparé en éliminant le groupe protecteur 2',3'-O dans la N6,N6,5'-O-tribenzoyl- 2',3'-O-substitué-néplanocine A ci-dessus et en éliminant le groupe monobenzoyle ou en éliminant le groupe protecteur 2', 3'-O après élimination du groupe monobenzoyle. On peut éliminer le groupe monobenzoyle par traitement -5- au moyen de Nbromosuccinimide dans le solvant organique ou d'ammoniac aqueux dans un alcool inférieur. L'élimi- nation du groupe protecteur 2',3'-O peut être effectuée comme expliqué ci-dessus. (5) Un composé (I) dans lequel R3 est un groupe OR8, R6 est un groupe -PO-R7 et R1, R2, R4, R5, R7 et R8 sont OH chacun un atome d'hydrogène, c'est-à-dire le 5'-phosphate de néplanocine A, peut être préparé en faisant réagir la 2',3'-O-protégé-néplanocine A avec le phosphate de cyano- éthyle en présence d'un agent de condensation dans un solvant organique pour obtenir du 5'-cyanoéthyl phosphate de 2',3'-O-protégé-néplanocine A et en éliminant le groupe cyanoéthyle par l'action d'un alcali après élimination du groupe protecteur 2',3'-O. Un exemple de la 2',3'-O-protégé-néplanocine A ci- dessus est le dérivé mentionné en (3) ci-dessus. Des exemples d'agents de condensation sont des carbodiimides connus comme le dicyclohexylcarbodiimide ou le N-éthyl-N'- 3-diméthylaminopropyl-carbodiimide. La pyridine peut être utilisée comme solvant organique courant. La réaction ci- dessus de transformation en phosphate peut être conduite à la température ambiante ou au-dessous. L'élimination du groupe protecteur 2',3'-O est effectuée par la méthode expliquée en (3) ci-dessus. Le groupe cyanoéthyle est généralement éliminé dans un alcool inférieur. Un exemple d'alcali est un hydroxyde aqueux de métal alcalin, et la réaction est conduite à la température ambiante. Après la réaction, on neutralise le mélange de réaction et le 5'-phosphate de néplanocine A ainsi obtenu est purifié par chromatographie sur colonne en utilisant du charbon actif, de la cellulose ou du Sephadex. Selon un autre procédé, on peut obtenir le produit en faisant réagir la néplanocine A avec l'oxychlorure de -6- phosphore dans un solvant organique. Un exemple de solvant organique est un mélange d'acide acétique et de pyridine. La réaction a lieu généralement à la tempéra- ture ambiante ou au-dessous. Le 5'-phosphate de néplano- cine A peut être purifié par les mêmes techniques qu'expliqué ci-dessus. Une autre méthode consiste à faire réagir la néplanocine A avec l'adénosine kinase. (6) Un composé (I) dans lequel R3 est un groupe OR8, R6 est un groupe -PO-R7, Rj, R2, R4, R5 et R8 sont chacun OH un atome d'hydrogène et R7 est un groupe alcoyle inférieur, c'est-à-dire un 5'-(alcoyl inférieur)phosphate de népla- nocine A, peut être préparé en faisant réagir la 2',3'-O- protégé-néplanocine A avec un phosphate d'alcoyle inférieur en présence d'un agent de condensation dans un solvant organique pour obtenir un 5'(alcoyl inférieur)phosphate de 2',3'-O-protégé-néplanocine A et en éliminant le groupe protecteur 2',3'-O. On effectue la phosphorylation par le procédé (5) expliqué ci-dessus et également l'élimination du groupe protecteur 2',3'-O peut être effectuée par la méthode expliquée ci-dessus. Dans un composé dans lequel R3 est un atome d'hydro- gène, le substituant R4 à la position 2' a la configu- ration absolue (R) et, contrairement à la configuration du groupe hydroxy à la position 2' de la néplanocine A représentée par la formule (II), il a la configuration du type arabino. Dans la dénomination des composés (I) ci-dessus et de leurs intermédiaires, les positions des substituants sont indiquées d'après les numéros de positions représentés sur la formule (II). -7- (7) Un composé (I) dans lequel R1 est un atome d'hydrogène ou un groupe benzoyle, R2, R3, R5 et R6 sont chacun un atome d'hydrogène et R4 est un groupe acétoxy, c'est-à-dire le composé de la formule: NH-R. N (Al) HOH2 C OH dans laquelle R1 a la même signification que ci-dessus et Ac est un groupe acétyle, peut être préparé en pro- tégeant le groupe hydroxyle aux positions 3' et 5' du composé de la formule: NH-Ri o PEN N HOH2 C[ OH OH dans laquelle R1 a la même signification que ci-dessus, par un groupe 1,1l,3,3-tétraisopropyl-disiloxane-l,3-diyle pour obtenir le composé de la formule: -8- NH-R1 NR 1 C3] dans laquelle R9 est un groupe -Si(i-Pro)2-O-Si(i-Pro)2, i-Pro est un groupe isopropyle et R1 a la même signifi- cation que ci-dessus, on effectue une trifluorométhane- sulfonylation du groupe hydroxy à la position 2' de ce composé pour obtenir le produit intermédiaire de la formule: NH-R1 N N6> C4) CH -0 0 SOiCF3 dans laquelle R1 et R5 ont les mêmes significations que ci-dessus, on fait réagir ce produit intermédiaire avec un acétate de métal alcalin pour obtenir le produit intermé- diaire de la formule: -9- NH-RI N (5) dans laquelle R1, Ac et Rg ont les mêmes significations que ci-dessus et on élimine le groupe protecteur 3', 5'-0 par traitement au moyen de fluorure de tétrabutylammonium. La matière de départ (2) dans laquelle R1 est un groupe benzoyle, c'est-àdire la N6-benzoyl néplanocine A, est préparée en faisant réagir la néplanocine A avec un agent de benzoylation en présence d'une amine organique tertiaire pour obtenir un composé benzoylé de la formule I I - R -N-R1 CN 1 0 5' 0 R11R OC)22 > 2' OR' OR, dans laquelle R' est un groupe benzoyle, et en traitant le composé ainsi obtenu par un hydroxyde de métal alcalin. Un exemple d'un agent de benzoylation est de manière classique le chlorure de benzoyle. La benzoylation peut être effectuée en présence d'une amine organique tertiaire comme la pyridine, la N-méthylmorpholine ou la diméthylaniline. Les groupes benzvle à l'exception d'un groupe benzoyle à la -10- position N6 sont éliminés en traitant le composé (I) par un hydroxyde de métal alcalin. - La protection du groupe hydroxy aux positions 3' et ' du composé (2) peut être effectuée de préférence par protection au moyen d'un groupe 1,1,3,3tétraisopropyl disiloxa-l,3-diyle. L'introduction de ce groupe protecteur est décrite dans J. Chem. Res.,(1979), 24 - 25 et (1979) 181 - 197. D'autres groupes protecteurs utilisés dans le domaine de la chimie des saccharides et des acides nucléiques peuvent être utilisés. Le composé (3) ainsi obtenu peut être isolé grâce à la stabilité à l'eau de son groupe disiloxazinyle. La trifluorométhane sulfonylation du groupe hydroxy à la position 2' du composé (3) peut être effectuée par par réaction avec un halogénure de trifluorométhane- sulfonyle comme le chlorure de trifluorométhane-sulfonyle en présence d'une amine organique tertiaire comme la triéthylamine ou la pyridine dans un solvant organique. On ajoute de préférence de la 4diméthylaminopyridine pour favoriser la réaction. On obtient le composé (5) en faisant réagir le composé (4) ainsi obtenu avec un acétate de métal alcalin dans un solvant organique comme l'hexaméthylphosphoramide. Des exemples de l'acétate de métal alcalin sont l'acétate de sodium, l'acétate de potassium ou l'acétate de lithium. La réaction a lieu à la température ambiante et il n'est pas nécessaire de chauffer, sauf si elle se produit lentement. L'élimination du groupe protecteur 3',5'-O- dans le composé (5) peut être effectuée facilement par traitement au moyen de fluorure de tétrabutylammonium dans un solvant organique. Des exemples de solvants organiques sont le tétrahydrofuranne et le dioxane. La réaction a lieu à la température ambiante en un court laps de temps. -11- L'isolement et la purification du composé (Al) peuvent être effectués comme expliqué ci-après. (8) Un composé dans lequel R1 est de l'hydrogène ou un groupe benzoyle, R4 est un groupe acétylthio et R2, R3, R5 et R6 sont chacun un atome d'hydrogène, c'est-à-dire le composé de la formule: NH-R, N$ (A2) HOH2 C OH dans laquelle Ac est un groupe acétyle, est préparé en faisant réagir le composé (4) avec un thio-acétate de métal alcalin de manière à former le composé de la formule N6N (6) 4 _ 2' dans laquelle R9 est un groupe -Si(i-Pro)2-O-Si(i-Pro)2-, iPro est un groupe isopropyle et R1 et Ac ont les mêmes significations que ci-dessus, et en éliminant le groupe protecteur 3',5'-O- au moyen de fluorure de tétrabutyl- ammonium. Des exemples de thio-acétate de métal alcalin sont le -12- thioacétate de sodium, le thio-acétate de potassium et le thio-acétate de lithium. La réaction du composé (4) et du thio-acétate de métal alcalin et l'élimination du groupe protecteur 3',5'-O- dans le composé (6) sont effectuées selon le même mode opératoire qu'en (7) ci-dessus. Le composé (A2) ainsi obtenu peut être isolé et purifié comme expliqué ci-après. (9) Un composé dans lequel R1 est de l'hydrogène ou un groupe benzoyle, R4 est un atome d'halogène, R2, R3, R5 et R6 sont chacun un atome d'hydrogène, c'est-à-dire le composé de la formule: NH-R1 (HOH CJ {A3) 3 IJ H-OH A dans laquelle R1 est un atome d'hydrogène ou un groupe benzoyle et X est un atome d'halogène, est préparé en faisant réagir le composé (4) avec un halogénure de métal alcalin de la formule MX dans laquelle X est un atome d'halogène et M est un atome de métal alcalin réactif, dans un solvant organique, pour obtenir le composé de la formule: i-. -__ -13- NE-RI ' A (7) CF.'2 9_O 2 dans laquelle R9 est un groupe -Si(i-Pro)2-O-Si(i-Pro)2-, i-Pro est un groupe isopropyle et R1 et X ont les mêmes significations que ci-dessus, et en éliminant le groupe protecteur 3-,5'-O- au moyen de fluorure de tétrabutyl- ammonium. Des exemples d'halogénure de métal alcalin sont des agents d'halogénation ayant une réactivité pour halogé- nation à la position 2' du composé (4), et sont LiF, LiCl, LiBr, LiI ou NaI. Un exemple de solvant organique pour l'halogénation ci-dessus est l'hexaméthylphosphoramide. L'halogénation peut être effectuée à la température ambiante et il n'est donc pas nécessaire de chauffer, sauf si la réaction est lente. L'élimination du groupe protecteur 3',5'-O- dans le composé (7) peut être effectuée par le même procédé qu'expliqué en (1) ci-dessus. Le composé (A3) peut être purifié comme expliqué ci- après. (10) Un composé dans lequel R1 est un atome d'hydro- gène ou un groupe benzoyle, R4 est un groupe azide et R2, R3, R5 et R6 sont chacun un atome d'hydrogène, c'est-à-dire un composé de la formule: 14- HOCH: (A4) dans laquelle R1 est de l'hydrogène ou un groupe benzoyle, est préparé en faisant réagir le composé (4) avec un azide de métal alcalin pour obtenir le composé de la formule NH- s8) dans laquelle R9 est un groupe -Si(i-Pro)2-O-Si(i-Pro)2-, i-Pro est un groupe isopropyle et R1 a la même signifi- cation que ci-dessus, et en éliminant le groupe protecteur 3',5'-0- au moyen de fluorure de tétrabutylammonium. Des exemples de l'azide de métal alcalin sont l'azide de lithium, l'azide de potassium et l'azide de sodium. Un solvant organique préférable dans la réaction d'azidation est l'hexaméthylphosphoramide. La réaction d'azidation se produit à la température ambiante et il n'est donc pas nécessaire que l'on chauffe, sauf si la réaction est lente. L'élimination du groupe protecteur 3',5'-0- dans le composé (8) peut être effectuée par le même procédé qu'expliqué en (7) ci-dessus. NIH-R, -15- Le composé ainsi obtenu peut être purifié comme expliqué ci-après. (11) Un composé (I) dans lequel R1 est un atome d'hy- drogène ou un groupe benzoyle, R4 est un groupe amino et R2, R3, R5 et R6 sont chacun un atome d'hydrogène, c'est- à-dire un composé de la formule: NH-RI NWRs (A5) HOCH, 2 2 H 2 dans laoelle R1 est un atome d'hydrogène ou un groupe benzoyle, est préparé en réduisant le composé (A4). On effectue la réduction du groupe amino en faisant barboter de l'hydrogène sulfuré dans de la pyridine. La réaction a lieu à la température ambiante. Le composé (A5) ainsi obtenu peut être purifié comme expliqué ci-après. (12) Un composé (I) dans lequel R1 est un atome d'hy- drogène ou un groupe benzoyle, R2 est un atome d'hydrogène et R2, R3, R5 et R6 sont chacun un atome d'hydrogène, c'est-à-dire le composé de la formule: NH-R-1 N6iN | - (A6) OH2 -16- dans laquelle R1 est un atome d'hydrogène ou un groupe benzoyle, peut être obtenu par désacétylation du composé (Al). La désacétylation peut être effectuée par traitement par l'ammoniac ou un alcoolate de métal alcalin dans du méthanol. Le groupe 2'-acétoxy et le groupe N -benzoyle sont éliminés par traitement par un alcoolate de métal alcalin comme le méthylate de sodium. Le produit (A6) peut être purifié par la méthode expliquée ci-après. (13) Un composé (I) dans lequel R1 est un atome d'hy- drogène ou un groupe benzoyle et R2, R3, R4, R5 et R6 sont chacun un atome d'hydrogène, c'est-à-dire un composé de la formule: N- N Nôs (A7) HOH2C 4 OH dans laquelle R1 est un atome d'hydrogène ou un groupe benzoyle, est préparé en traitant un composé (7) ci-dessus ou un composé de la formule: -17- MI-RI (C9) dans laquelle R1 est un atome d'hydrogène ou un groupe benzoyle, R9 est un groupe OSi(i-Pro)2-O-Si(i-Pro)2- et i-Pro est un groupe isopropyle au moyen de tributylate d'étain hydrogéné dans un solvant organique pour obtenir un composé de la formule: NH-RI N6 KN N ( 10) dans laquelle R1 et R6 ont les mêmes significations que ci-dessus, et en éliminant le groupe protecteur 3',5'-0- par traitement au moyen de fluorure de tétrabutylammonium. On peut préparer la matière de départ (9) en faisant réagir le composé (3) avec du N,N'-thiocarbonyldiimidazole dans un solvant organique comme le chloroforme, le chlorure de méthylène et le chlorure d'éthylène. La réaction a lieu à la température ambiante. La réaction du composé (7) ou (91 ci-dessus et du tributylate d'étain hydrogéné est conduite dans un solvant organique comme du benzène ou du toluène, -18- en chauffant. Dans la réaction ci-dessus, de l'azo bis- isobutyronitrile est de préférence ajouté comme catalyseur et la réaction a lieu sous une atmosphère d'argon. Le groupe protecteur 3',5'-O dans le produit inter- médiaire (10) obtenu par la réaction ci-dessus est éliminé par la même méthode qu'expliqué en (1) ci-dessus. Le composé (A7) ainsi obtenu peut être purifié par la méthode expliquée ci-dessus. (14) Un composé (T), dans lequel R1 est un atome d'hydrogène ou un groupe benzoyle, R2 et R3 sont chacun un atome d'hydrogène, R4 est un groupe acétoxy ou un atome d'halogène et R5 et R6 sont chacun un groupe acétyle, c'est-à-dire un composé de la formule: 1Ml-f1 ' N6 I cA8) - '\R4/ 3 1 2 OAc dans laquelle R1 est un atome d'hydrogène ou un groupe benzoyle et R4 est un groupe acétoxy ou un atome d'halo- gène, est préparé en acétylant le composé (A1) ou (A3). On conduit la réaction d'acétylation par réaction avec l'anhydride acétique dans la pyridine à la tempéra- ture ambiante. Le composé (A8) est purifié par la méthode expliquée ci-dessus. Le composé (I) ci-dessus et ses intermédiaires peuvent être isolés et purifies par concentration sous vide, extraction, cristallisation et chromatographie en utilisant du gel de silice, du charbon actif, de la cellulose ou du Sephadex. -19- Dans le cas o le composé (I) est une substance basique, par exemple, le composé (A5) peut être isolé sous la forme d'un sel d'addition d'acide. Dans ce cas, la base est neutralisée par un acide, et son sel d'ad- dition d'acide est cristallisé ou soumis à une chromato- graphie sur colonne pour purification du produit. On indique ci-après les activités d'inhibition de croissance du composé (I) selon la présente invention sur les cellules L 5178 Y. (1) Méthode d'essai: Un échantillon d'essai (0,3 ml) dissous dans un milieu (sérum bovin ajouté (10 %) dans du milieu de Fischer) est ajouté à une suspension de cellules L 5178 Y de lymphome de souris (2,7 ml, 5 x 104 cellules/ml}, et le mélange est mis à incuber à 37 C pendant 22 heures. On observe le développement des cellules en contrôlant un changement de couleur du rouge de phénol dans un milieu. La concentration inhibitrice minimale (MIC) de la substance en ce qui concerne le développement des cellules est définie en observant l'inhibition de développement apparent par rapport à celui d'un témoin. (2) Résultats des essais: MIC (Y/ml) 2',3',5'-O-triacétyl néplanocine A 0, 8 2',3'-O-benzylidène néplanocine A 4 N6,N6,5'-O-tribenzoyl néplanocine A 0,16 N6,5'-O-dibenzoyl néplanocine A 0,16 '-phosphate de néplanocine A 0, 16 '-butylphosphate de néplanocine A 0,16 -20- NEl -Ri R6 OH2 C R1 H H H H H H R4 ce Br I NH-2 R5 H H H H H H R6 H H H H H r/ne H ce Ao Ac 100 COPh I H H 100 Les exemples suivants illustrent le procédé de pré- paration du composé (I) selon la présente invention. Dans les exemples, les supports et les développants dans la chromatographie sur couche mince (TLC) sont, s'ils ne sont pas spécifiés, les suivants: Support: gel de silice (Merck, Art. 5729) Développant: 1. Chloroforme- méthanol (1l 1) 2. " - " (5: 1) 3. " - " (10: 1) 4. " - " (20: 1) -21- 5. Chloroforme - méthanol (40: 1) 6. Benzène - acétate d'éthyle (1: 1) 7. Chloroforme - éthanol (10: 1) Support: gel de silice (Merck, Art. 5715) Développant: 8. Alcool propylique - eau - solution aqueuse concentrée d'ammoniac (6: 3: 1) 9. Acétone - eau (10: 3) Exemple 1 2',3',5'-O-triacétyl néplanocine A On ajoute goutte à goutte de l'anhydride acétique (0,28 ml) dans de la néplanocine A (263 mg) en suspension dans de la pyridine (5 ml) en agitant à la température ambiante. Après réaction pendant 2,5 heures à la tempé- rature ambiante, on concentre le mélange de réaction sous vide au-dessous de 40 C. On traite le résidu par extraction trois fois au chloroforme, puis on le lave à l'eau. On fait passer la couche chloroformique à travers du papier-filtre Whatman IPS et on la concentre sous vide. On charge le résidu sur une colonne de gel de silice (6 g) et on l'élue au moyen de chloroforme - éthanol (30: 1). Les fractions présentant un Rf7 = 0,45 par TLC sont recueillies et concentrées sous vide pour donner une poudre hygroscopique de 2',3',5'-O-triacétyl néplanocine (174 mg). * Analyse élémentaire (C17H19 06N5. H O) 17 96 52 2 C % H % N Trouvé 51,63 4,95 17,54 Calculé 51,64 5,01 17,71 UV: Imax (méthanol) = 262 nm Masse: 389 (M+), 346, 330, 329, 288, 287, 244, 228, 227, 136, 137. RMN: ppm (CDCl3) 2,01 (3H, S.OCOCH3), 2,10 (6H, S.OCOCH3 x 2), 4,75 (2H, J = 0, H-5'), 5,57 (1H, d.d., H-2'), ,82 (3H, large, NH2 et H-3'), 5,99 (1H, d., H-l'), 6.11 (1H, J = 0, H-6'), 7,80 (1H, S., H-2), 8,33 (1H, S., H-8). -22- Exemple 2 2', 3'-O-benzylidène néplanocine-A Un mélange de néplanocine A (263 mg, 1 mM), de chlorure de zinc (340 mg) et de benzaldéhyde (2 ml) est agité à la température ambiante pendant 1,5 jour. On ajoute de l'oxyde d'éthyle au mélange de réaction, on sépare le précipité par filtration et on le lave à l'oxyde d'éthyle. Le précipité dissous dans de l'acétate d'éthyle est lavé trois fois à l'eau. On fait passer la couche d'acétate d'éthyle à travers du papier-filtre Whatman lPS et on la concentre sous vide. On recristal- lise le résidu à partir d'acétate d'éthyle pour obtenir de la 2',3'-O-benzylidène néplanocine A (301 mg). Point de fusion: 226 - 229 C TLC: Rf2 = 0,62 Masse: 351 (M +), 245, 216, 136, 135. RMN:8 ppm (DMSO-d6) 4,19 (2H, légèrement large, H-5'), 4,85 (1H, d., H-2') , 5,10 (1H, t., OH-5', remplacé par D2 O, 5,41 (1H, d., H-3'), 5,58 (1H, large, H-l'), 5,75 (1H, S., H-6'), 5,90 (1H, S., >CH-Ph), 7,24 (2H, large, NH2, remplacé par D20), 7,41 (5H, S., proton de phényle), 8,00 (1H, S., H-2), 8,12 ilH, S., H-8). Exemple 3 2',3'-O-isopropylidène néplanocine A De l'acide perchlorique à 70 % (0,9 ml) est ajouté à de la néplanocine A (1,0 g) en suspension dans de l'acé- tone anhydre (100 ml) et le mélange est agité à la tempé- rature ambiante pendant 2 heures, le mélange étant alors homogénéisé. On règle le mélange de réaction à un pH de 8-9 par addition d'une solution aqueuse d'ammoniac. Les cristaux précipités sont refroidis, filtrés, lavés à l'acé- tone et séchés pour donner de la 2',3'-O-isopropylidène néplanocine A (682 mg). Point de fusion: 256 --259 C -23- Analyse élémentaire (C14H1703N5):C % H % N% Trouvé: 55,39 5,77 22,89 Calculé: 55,43 5,65 23,09 RMN: ppm (DMSO - d6) 1, 28, 1,39 (chacun 3H, chacun S., CH3 x 2), 4,15 (2H, légèrement large, H5'), 4,68 (1H, d., H-2'), 5,07 (1H, t., OH-5'), 5,33 (1H, d., H-3'), 5,45 (1H, J -O, H-l'), 5,71 (1H, J O, H-6'), 7,25 (2H, légèrement large, NH2), 7,96 (1H, S., H-2), 8,15 (1H, S., H-8). Exemple 4 N,N6,5'-O-tribenzoyl-2',3'-O-isopropylidène néplanocine A On dissout de la 2',3'-O-isopropylidène néplanocine A (303 mg) dans de la pyridine (10 ml). On ajoute goutte à goutte du chlorure de benzoyle (0,47 ml) en agitant à la température ambiante, puis on agite pendant 20 heures à la température ambiante. On ajoute de l'eau au mélange de réaction, on le concentre sous vide et le résidu est traité par extraction au chloroforme. La couche chloroformique est lavée avec une solution saturée de bicarbonate de sodium et à l'eau, passée à travers du papier-filtre Whatman IPS et concentrée sous vide. On charge le résidu sur une colonne de gel de silice (10 g) et on l'élue avec du chloroforme. Les fractions présentant Rf5 = 0,55 par TLC sont recueillies et concentrées sous vide pour donner de la N6,N6,5'-O-tri- benzoyl-2',3'-O-isopropylidène néplanocine A (510 mg, rendement: 83 %). TLC: Rf5 = 0,55 Masse: 615 (M), 600, 587, 510, 482, 344, 343, 342, 240, 239, 238, 215, 105 RMN: Sppm (CDCl3) 1,49, 1,52 (chacun 3H, chacun S, isopropylidène), 4,81 (1H, d., H-2'), 5,12 (2H, légèrement large, H-5'), 5,50 (1H, d., H-3'), 5, 68 (1H, légèrement large, H-l'), 5,89 (1H, légèrement largej H-6'), 7,2 8,2 -24- (16H, proton de phényle et H-2 ou H-8). Exemple 5 N6,5'-O-dibenzoyl néplanocine A 6 6 On met en suspension de la N6,N,5'-O-tribenzoyl- 2',3'-O-isopropylidène néplanocine A (62 mg) dans de l'acide formique aqueux à 60 % (2 ml) et on ajoute du méthanol (0,5 ml) pour homogénéiser, puis on agite à la température ambiante pendant un jour et à 60 C pendant heures. Le mélange de réaction est concentré sous vide. On ajoute du méthanol au résidu et le mélange est de nouveau concentré sous vide. On répète cette opération jusqu'à ce qu'on ne puisse plus détecter d'acide formique. Les cristaux ainsi obtenus sont recristallisés deux fois à partir de méthanol pour donner de la N6,5'-O-dibenzoyl néplanocine A. Point de fusion: 202 - 205 C Analyse élémentaire (C25H2105N5): C % H % N% Trouvé: 63,70 4,55 14,76 Calculé: 63,68 4,49 14,86 Masse: 471 (M), 366, 239 RMN: 'ppm (DMSO-d6) 4,48 (1H, m., H-2'), d. par D20, d.), 4,64 (1H, m. , H-3', d. par D20), 5,02 (2H, légèrement large, H-5'), 5,25 (1H, d., OH, remplacé par D2 O), 5,34 (1H, d., OH, remplacé par D20), 5,58 (1H, m., H1'), 6,05 (1H, J O, H-l'), 7,4 - 8,1 (10H, proton de phényle), 8,45 (1H, S., H-8 ou H-2), 11,13 (1H, large, NH, remplacé par D20). Exemple 6 N5,N6,5'-O-tribenzoyl néplanocine A Dans l'exemple 5, la liqueur-mère de l'opération de recristallisation est traitée par chromatographie en couche mince sur gel de silice (Merck, Art. 7747) pour séparer et purifier la N6,N6, 5'-O-tribenzoyl néplanocine A. -25- RMN: &pm (CDC13) 4, 44 (1H, dd, H-2'), 4,84 (1H, d., H-3'), 5,11 (2H, légèrement large, H-5'), 5,56 (1H, légè- rement large, H-i'), 6,13 (1H, J =0, H-6'), 7,2 - 8,2 (16H, proton de phényle et H-2 ou H-8), 8,61 (1H, S., H-8 ou H-2), le groupe OH est distribué dans un large inter- valle et est remplacé par D20. Masse: 575, 470. Exemple 7 N6,5'-O-dibenzoyl-2',3'-O-isopropylidène néplanocine A On ajoute du N-bromosuccinimide (20 mg) et du carbo- N6 6 --rbnol2,1 nate de baryum (10 mg) à de la N6,N6,5'-O-tribenzoyl-2',3'- O-isopropylidène néplanocine A (61,5 mg) dissoute dans un mélange de dichloroéthane (2 ml) et de tétrachlorure de carbone (5 ml) et on agite le mélange à 90 C pendant 15 heures. On ajoute de l'eau au mélange de réaction, on l'agite et une couche organique est concentrée sous vide. On charge le résidu sur une colonne de gel de silice (3 g) et on l'élue au moyen de chloroforme - méthanol (40: 1). Les fractions présentant Rf5 = 0,30 sont recueillies 5 0 et concentrées sous vide pour donner une poudre de N,5'-O- dibenzoyl-2',3'-O-isopropylidène néplanocine A (41 mg). RMN: Sppm (CDCl3) 1,40, 1,52 (chacun 3H, chacun S., CH3 x 2), 4,80 (1H, d. , H-2'), 5,12 (2H, légèrement large, N-5'), 5,52 (1H, d., H-3'), 5,71 (1H, légèrement large, H-1'), 5,90 (1H, légèrement large, H-6'), 7,3 - 8,2 (11H, proton de phényle, H-2 ou H-8). Exemple 8 N6,5'-O-dibenzoyl néplanocine A Un mélange de N6,5'-O-dibenzoyl-2',3'isopropylidène néplanocine A (51 mg), d'acide formique à 60 % (2 ml) et de méthanol (0,5 ml) est agité à 60 C pendant 5 heures. Le mélange de réaction est concentré sous vide et le résidu est recristallisé à partir de méthanol pour donner de la N6,5'-O-dibenzoyl néplanocine A (41 mg). Le résultat d'analyse est identique à celui obtenu -26- avec la N6,5'-O-dibenzoyl néplanocinedans l'exemple 5. Exemple 9 2',3'-O-éthoxyméthylène néplanocine A On ajoute du diméthylformamide (5 ml) et de l'ortho- formiate d'éthyle (0,33 ml) à de la néplanocine A (263 mg). On y ajoute une solution d'acide chlorhydrique dans du diméthylformamide (13,5 % en poids/volume, 0,3 ml) et le mélange homogène est agité à la température ambiante pendant 12 heures. On ajoute de la triéthylamine (0,25 ml) au mélange de réaction en refroidissant avec de la glace. Le chlorhydrate de triéthylamine précipité est séparé par filtration et le filtrat est concentré sous vide. On ajoute une petite quantité d'eau et de triéthylamine au résidu et on le neutralise complètement. Les cristaux précipités sont séparés par filtration pour donner de la 2',3'-O-éthoxy- méthylène néplanocine A (275 mg, rendement: 86,2 %). On effectue la purification par chromatographie sur une colonne de gel de silice en utilisant un mélange de chlo- roforme et de méthanol (1: 1) comme développant. Les fractions présentant Rf2 = 0,45 sont recueillies et con- centrées sous vide pour donner l'échantillon purifié. Point de fusion: 196 - 201 C TLC: Rf2 = 0,45 Analyse élémentaire (C14H17N504. H20) C % H % N % Trouvé: 51,71 5,38 21,52 Calculé: 51,21 5,52 21,33 Masse: 319 (M +), 274, 245, 135, 134. RMN: ppm (CDC13) 1,10, 1,12 (total 3H, chacun t., -CH2CH3), 352 (2H, q., OCH2CH3), 4,16 (2H, J=0, H-5'), 4,80 (1H, d, H-2'), 5,08 (1H, large, S., OH-5'), 5,48 (iH, S., =CH-OC2H5), 5,36, 5,66 (total 1H, chacun d., H-3'), 5,76 (1H, J 0, H-i'), 5,94, 5,98 (total 1H, chacun S., H-6'), 7,27 (2H, large, S., NH2), 7,98 (1H, S., H-2 ou H-8), 8,14 (1H, S., H-2 ou H-8). -27- Exemple 10 N6,N6 5'-O-tribenzoyl-2',3'-O-éthoxyméthylène néplanocineA Une solution de chlorure de benzoyle (0,47 ml) dans du chlorure de méthylène (5 ml) est ajoutée goutte à goutte à de la 2',3'-O-éthoxyméthylène néplanocine A (319 mg) dissoute dans de la pyridine (5 ml) tandis qu'on agite. On agite le mélange réactionnel en le refroidissant à la glace toute une nuit et à la température ambiante pendant 10 heures, puis on le verse dans de l'eau glacée et on l'agite avec du chloroforme. On fait passer la couche chloroformique à travers du papier-filtre Whatman lPS, on la concentre sous vide et on charge le résidu sur une colonne de gel de silice (6 g), et on élue avec un mélange de benzène et d'acétate d'éthyle (8: 1). Les fractions présentant Rf4 = 0,85 sont recueillies et con- centrées sous vide pour donner de la N6,N6 5'-O-tri- benzoyl-2',3',O-éthoxyméthylène néplanocine A (431 mg). TLC: Rf4= 0,85 UV: MeOH= 255 nm (épaulement), 275 nm max Masse: 631 (M+), 603, 586, 498. RMN: Sppm (CDCI3) 1,21 (3H, t., -CH2CH3), 3,62 (2H, q., -O-CH2-CH3), 4,92 (1H, d., H-2'), 5,12 (2H, large S., H-5'), 5,66 (total 1H, chacun d., H3'), 5,90 (1H, large S., H-1'), 5,97, 6,00 (total 1H, chacun S., H-6'), 7, 2 - 8,1 (16H, m., proton de phényle et H-2 ou H-8), 8,58, 8,59 (total 1H, chacun S., H-8 ou H-2). Exemple 11 N6,5'-O-dibenzoyl néplanocine A On ajoute de l'acide formique à 60 % (1 ml) et du méthanol (0,5 ml) dans de la N6,N6,5'-O-tribenzoyl-2',3'-O- éthoxyméthylène néplanocine A (78 ml) et on agite le mélange à la température ambiante pendant 30 minutes. De la N6,5'-O- dibenzoyl néplanocine A et de la N6,N6,5'-O-tribenzoyl néplanocine A sont détectées par TLC (développant N 4). Le mélange de réaction est concentré sous vide. On dissout Ii -28- le résidu dans de l'éthanol, on règle le pH à 8 au moyen d'une solution aqueuse d'ammoniac et on abandonne le mélange à la température ambiante. Les cristaux précipités sont séparés par filtration, lavés à l'éthanol et séchés sous vide pour donner de la N6,5'-O-dibenzoyl néplanocine A (43 mg) . Les résultats d'analyse sont identiques à ceux obtenus avec la N6,5'-Odibenzoyl néplanocine A obtenue dans l'exemple 5. Exemple 12 N6-benzoyl néplanocine A 1) Une solution (5 ml) de chlorure de benzoyle (0,78 ml) dans du chlorure de méthylène est ajoutée goutte à goutte, tandis qu'on agite et qu'on refroidit'à la glace, dans de la néplanocine A (263 mg) dissoute dans de la pyridine anhydre (5 ml). La température est portée progressivement à la température ambiante et on agite pendant 8 heures. On verse le mélange de réaction dans de l'eau glacée et on le traite par extraction trois fois au chloroforme. Les extraits combinés sont lavés à l'eau, passes à travers du papier-filtre Whatman 1PS et concentrés sous vide. On purifie le résidu par chromatographie sur une colonne de gel de silice ey utilisant du chloroforme pour obtenir une poudre de N6,N6,2'-0,3'-0,5'-O-penta- benzoyl néplanocine A (587 mg). RMN: Sppm (CDC13) 5,16 (2H, J = 0, H-5'), 5,98 (1H, q., H-2'), 6,06 (1H, J 0, H-1'), 6,31 (1H, J = 0, H-6'), 6,50 (1H, d., H-3'), 7,2 - 8,1 (25H, m., proton de phényle), 8,15 (1H, S., H-2), 8,56 (1H, S., H-8). 2) Le produit (500 mg) obtenu en 1) ci-dessus est dissous dans de l'éthanol (3 ml) et de la pyridine (1,5 ml). Un mélange d'hydroxyde de sodium 2N (3 ml) et d'éthanol (3 ml) est ajouté en une seule fois et agité pendant 5 minutes. Le mélange de réaction est neutralisé par ad- dition de Dowex 50 (type pyridinium), filtré et on lave la résine à l'éthanol et ensuite à la pyridine. On recueille -29- le filtrat et les liquides de lavage, on les concentre sous vide et on y ajoute du méthanol pour obtenir des cristaux de N6-benzoyl néplanocine A (187 mg). Point de fusion: 180 - 183 C. RMN: ppm (DMSO-d6) 4,16 (2H, m., H-5'), 4,36 (1H, q.,H-2'), 4,44 (1H, t., H-3'), 4,94 (1H, t., 5'-OH, rem- placé par D20), 5,02 (lHd, OH, remplacé par D20), 5,21 (lHd, OH, remplacé par D20), 5,50 (1H, m., H-l'), 5,76 (1H, J L 0, H-6'), 7,4 - 8,1 (5H, m., proton de phényle), 8,40 (1H, S., H-2), 8,70 (1H, S., H-8), 10,38 (1H, S., NH, remplacé par D20). Exemple 13 3',5'-O-(1,1,3,3-tétraisopropyl disiloxane-l,3-di-yl) néplanocine A On dissout de la néplanocine A (236 mg) et de l'imi- dazole (300 mg) dans du diméthylformamide (3 ml). On y ajoute du l,3dichloro-l,l,3,3-t6traisopropyl disiloxane (350 mg) et on agite à la température ambiante pendant 40 minutes. On ajoute de l'eau (20 ml) au mélange de réaction et on le refroidit à la glace pour précipiter la matière huileuse qui est séparée par décantation et dissoute dans du chloroforme, puis lavée à l'eau. On fait passer la couche organique à travers du papier-filtre Whatman lPS et on la concentre sous vide. On purifie le résidu par chro- matographie sur une colonne de gel de silice en utilisant un mélange chloroforme-éthanol (30:1). Les fractions pré- sentant Rf3 = 0,50 sont recueillies et séchées sous vide pour donner de la 3',5'-O-(1,1,3,3-tétraisopropyl disiloxane-l,3-di-yl) néplanocine A (212 mg). Point de fusion: 185 - 186 C. Analyse élémentaire (C23H3904N5Si2): C % H % N % Trouvé: 54,47 7,79 13,81 Calculé: 54,62 7,77 13,85 -30- RMN: 6 ppm (CDC13) 1,1 (28H, isopropyle), 3,59 (1H, d., OH-2', remplacé par D20), 4,32 (1H, Sextet, H-2', d.d par D20), 4,52 (2H, légèrement large, H-5'), 5,32 (1H, d., H-3'), 5,50 (1H, légèrement large, H-I'), 5,60 (2H, légé- rement large, NH2-6, remplacé par D.O), 5,83 (1H, H-6'), 7,76 (1H, S., H-2), 8,36 (1H, S, H-8). Masse: 505 (M), 462 (M - 43), 136, 135. Exemple 14 N -benzoyl-3',5'-O-(1,1,3,3-tétraisopropyl disiloxane- 1,3-di-yl) néplanocine A On dissout de la N6-benzoyl néplanocine A (926 mg) et de l'imidazole (755 mg) dans du diméthylformamide anhydre (15 ml).. On y ajoute du 1,1-dichloro-l,l,3,3-tétraisopropyl disiloxane (870 mg) et on agite à la température ambiante pendant 10 minutes. On ajoute de l'eau en refroidissant avec de la glace, on concentre sous vide et on traite le résidu par extraction au chloroforme. La couche organique est lavée à l'eau, passée à travers du papier-filtre Whatman lPS et concentrée sous vide. On purifie le résidu par chromatographie sur une colonne de Florisil en uti- lisant un mélange chloroforme-méthanol (30 - 20: 1) (1,25 g, rendement: 82 %). RMN: S ppm (CDC13), 1,1 (28H, isopropyle), 3,48 (1H, d., OH-2', remplacé par D20), 4,34 (1H, Sextet, H-2', d.d par D20), 4,50 (2H, légèrement large, H-5'), 5,34 (1H, d., H-3'), 5,55 (1H, légèrement large, H-1'), 5, 82 (1H, H-6'), 7,4 - 8,1 (6H, proton de phényle et H-2 ou H-8), 8,78 (1H, S., H-8 ou H-2), 8,96 (1H, large, NH, remplacé par D20). UV: MeOH = 282 nm max Masse: 609 (M), 566 (M - 43). Exemple 15 2'-O-trifluorométhanesulfonyl-3',5'-O-(1,1,3,3-tétraiso- propyl disiloxane-l,3-di-yl) néplanocine A On ajoute de la 4diméthylaminopyridine (570 mg) et de -31- la triéthylamine (0,65 ml) à de la 3',5'-O-(1,1,3,3- tétraisopropyl dililoxane-l,3-di-yl) néplanocine A (2,36 g) dissoute dans de la pyridine anhydre (15 ml). On y ajoute du chlorure de trifluorométhanesulfonyle (0,5 ml) en agitant et en refroidissant avec de la glace. On porte progressivement la température à la température ambiante. On agite le mélange réactionnel pendant 30 minutes, on le verse dans de l'eau glacée, puis on le traite par extraction plusieurs fois au chloroforme. L'extrait est lavé à l'eau, passé à travers du papier-filtre Whatman lPS et concentré sous vide. On purifie le résidu par chromatographie sur une colonne de gel de silice en uti- lisant un mélange chloroforme - éthanol (30: 1). Les fractions présentant Rf3 = 0,16 sont recueillies et con- centrées sous vide pour donner de la 2'-O-trifluorométhane- sulfonyl-3',5'-0-(1,1,3,3-tétraisopropyl disiloxane-l,3- di-yl) néplanocine A poreuse (2,1 g, rendement: 70,5 %). RMN: 8 ppm (CDCl3) 1,1 (28H, isopropyle), 4,51 (2H, légèrement large, H5'), 5,38 (1H, d.d, H-2'), 5,58 (3H, 6-NH2 et H-3', d. par D2O, H-3'), 5, 69(1H, m., H-l'), 5,94 (1H, J = O, H-6'), 7,73 (1H, S., H-2), 8,32 (1H, S., H-8). UV: îieOH =262 nm Umax Masse: 594 (M+ - 43), 495, 477, 367, 253, 235, 135. Exemple 16 N -benzoyl-2'-O-trifluorométhanesulfonyl-3',5'-O-(1,1,3,3- tétraisopropyl disiloxane-l,3-di-yl) néplanocine A On ajoute de la triéthylamine (0,04 ml) et de la 4- diméthylaminopyridine (10 mg) à de la N6-benzoyl-3',5'-O- (tétraisopropyldisiloxane-l,3-di-yl) néplanocine A (52 mg) dissoute dans de la pyridine (1 ml). On ajoute goutte à goutte du chlorure de trlfluorométhanesulfonyle (0,01 ml) en refroidissant par de la glace. On porte progressi- vement la température à la température ambiante. On agite le mélange réactionnel pendant 3 heures, on le verse dans -32- de l'eau glacée, puis on le traite par extraction au chloroforme. La couche organique est passée à travers du papier-filtre Whatman lPS et concentrée sous vide. On purifie le résidu par chromatographie sur une celonne de gel de silice en utilisant un mélange chloroforme-méthanol (30: 1) pour obtenir de la N6-benzoyl-2'-O-trifluoro- méthanesulfonyl-3',5'-O-(1,1,3,3-tétraisopropyl disiloxane- 1,3-di-yl) néplanocine A (48 mg). RMN:& ppm (CDCl3) 1,1 (28H, isepropyle), 4,52 (1H, d.d., H-2'), 5,58 (1H, d., H-3'), 5,76 (1H, légèrement large, H-l'), 5,86 (1H, H-6'), 7,4 - 8,1 (6H, proton de phényle et H-2 ou H-8), 8,75 (lH, S, H-8 ou H-2), 9,00 (1H, large, NH). Exemple 17 2'-(R)-acétoxy-2'-déoxy néplanocine A (1) On ajoute de l'acétate de sodium (163 mg) à de la 2'-O-trifluorométhanesulfonyl-3',5'-O-(1,1,3,3-tétraiso- propyl disiloxane-l,3-di-yl) néplanocine A (1,06 g) dis- soute dans de l'hexaméthylphosphoramide (10 ml) et on agite le mélange à la température ambiante pendant 1,5 jour. On verse le mélange de réaction dans de l'eau glacée, on le traite par extraction au chloroforme, on lave la couche organique avec de l'eau, on la fait passer à travers du papier-filtre Whatman lPS et on la concentre sous vide. On purifie le résidu par chromatographie sur une colonne de gel de silice en utilisant un mélange chloroforme-éthanol (30: 1). Les fractions présentant Rf3 = 0,36 sont re- cueillies et séchées sous vide pour donner de la 2'-(R)- acétoxy-2'-déoxy-3',5'-O-(1,1,3,3-tétraisopropyl disiloxane- 1,3-di-yl) néplanocine A (270 mg). RMN: Sppm (CDCl3) 1,1 (28H, isopropyle), 1,61 (3H, S., OCOCH3), 4,45 (2H, légèrement large, H-5'), 5,32 (1H, t., H-3'), 5,44 (lH, d.d., H-2'), 5,6 6,0 (4H, NH2 et H-6', H-1', 2H par D2O), 7,69 (1H, S., H-2), 8,34 (1H, S. , 11F-8).. _ - _ - 359_ _H-8). --- -33- UV MeOH = 261 nm max Masse: 547 (M), 504 (M - 43), 352, 228, 136, 135. 2) Le produit obtenu en 1) ci-dessus (270 mg) est dissous dans du tétrahydrofuranne anhydre (4 ml). On y ajoute du fluorure de tétrabutylammonium (140 mg) en agitant à la température ambiante. Une matière huileuse précipite immédiatement-eton continue l'agitation pendant encore 10 minutes. On concentre le mélange de réaction sous vide et on recristallise le résidu à partir d'éthanol pour obtenir de la 2'-(R) -acétoxy-2'-déoxy néplanocine A (120 mg, rendement: 80 %). Point de fusion: 195 - 197 C Analyse élémentaire (C13H1504N5): C % H % N % Trouvé: 51,12 4,98 22,74 Calculé: 51,14 4,95 22,94 RMN: Sppm (DMSO-d6) 1, 52 (3H, S., OCOCH3), 4,17 (2H, légèrement large, H-5'), 4,82 (1H, légèrement large, H-3', d par D20), 4,97 (1H, t., OH-5', remplacé par D20) , 5,18 (1H, d.d., H-2'), 5,55 (1H, d., OH-3', remplacé par D20), ,64 (1H, d.d., H-1'), 5,80 (1H, d., H-6'), 7,18 (2H, large, S., NH2, remplacé par D20), 7,82 (1H, S., H-2), 8,11 (1H, S., H-8). UV maxeOH= 262 nm >max Masse: 306 (M+ - 1), 305 (M+), 304, 287, 262, 245, 136, 135. CD: (0) - 11 900 (252 nm, H20). Exemple 18 2'-(R)-hydroxy-2'-déoxy néplanocine A De l'ammoniac méthanolique (méthanol (50 ml) saturé d'ammoniac gazeux à 0 C) est ajouté à de la 2'-(R)-acétoxy- 2'-déoxy néplanocine A (74 mg) et le mélange est agité à. la température ambiante pendant 3,5 heures. Le mélange de réaction est desséché sous vide. On recristallise le résidu -34- à partir d'éthanol aqueux pour obtenir de la 2'-(R)- hydroxy-2'-déoxy néplanocine A (185 mg, rendement: 92 %). Point de fusion: 239 - 240,5 C. Analyse élémentaire (C11H1303N5. H20) C % H% N % Trouvé: 49,01 5,01 25,97 Calculé: 49,13 5,00 26,04 RMN: ppm (DMSO-d6) 4, 14 (3H, m., H-5' et H-2'), 4,56 (1H, t., H-3', d par D20), 4,86 (1H, t., OH-5', remplacé par D20), 5,18, 5,22 (chacun 1H, chacun d., OH-2' et OH3', remplacé par D20), 5,52 (1H, d.d., H-l'), 5,72 (1H, J 0, H-6'), 7,10 (2H, légèrement large, S., NH2), 7,78 (1H, S., H-2), 8,12 (1H, S., Hi-8). UV:H20 = 262 nm max Masse: 264 (M+ + 1), 263 (M+), 245, 216, 186, 136, 135. TLC: Rf2 = 0,10, Rf = 0,46 (éthanol + acide borique dans acétate d'ammonium aqueux (0,5 M) (5: 2), plaque de gel de silice). Exemple 19 N6-benzoyl-2{-(R)-acétoxy-2'-déoxy néplanocine A (1) On dissout de la N6-benzoyl-2'-trifluorométhane- sulfonyl-3',5'-O- (1,1,3,3-tétraisopropyl disiloxane-1,3- di-yl) néplanocine A (30 mg) dans de l'hexaméthylphos- phoramide (0,5 ml). On y ajoute de l'acétate de sodium (3,7 mg) et on agite à la température ambiante pendant 6,5 heures. On ajoute encore de l'acétate de sodium (3 mg) et on agite pendant 12 heures. On traite le mélange de réaction par extraction au chloroforme et on le lave à l'eau. La couche organique est concentrée sous vide et purifiée par TLC sur gel de silice en utilisant un mélange benzène - acétate d'éthyle (1: 1). La bande présentant Rf6 = 0,21 est recueillie, traitée par extraction au chloroforme - méthanol (1: 1) et desséchée sous vide -35- pour donner de la N6-benzoyl-2'-(R)-acétoxy-2'-déoxy-3',5'- O-(1,1,3,3-tétraisopropyl disiloxane-l,3-di-yl) néplano- cine A (10 mg). RMN: 6 ppm (DMSO-d5) 1,1 (28H, isopropyle), 1,60 (3H, S., OC0CH3), 4,46 (2H, légèrement large, H-5'), 5,3 - ,5 (2H, m., H-2' et H-3'), 5,87 (2H, H-6' et H-i'-, 7,4 - 8,1 (6H, proton de phényle et H-2 ou H-8), 8,76 (1H, S., H-8 ou H-2), 9,04 (1H, large, NH). Masse: 651 (M +), 608, 622, 591, 504, 369, 352, 105. (2) Le produit obtenu en (1) ci-dessus (45 mg) est dissous dans du tétrahydrofuranne anhydre (1 ml). On y avue du fluorure de tétrabutylamnnium (21 mg) et on agite à la tem- pérature ambiante pendant 10 minutes. On concentre le mé- lange de réaction sous vide et on recristallise le résidu à partir d'éthanol pour obtenir de la N6-benzoyl-2'-(R)- acétoxy-2'-déoxy néplanocine A (15 mg). Point de fusion: 205 - 207 C. RMN: & ppm (DMSO-d6) 1,52 (3H, S., OCOCH3), 4,20 (2H, m., H-5'), 4,88 (1H, d.d., H-3', d. par D20), 5,03 (1H, t., OH-5', remplacé par D20), 5,26 (1H, d.d., H-2'), 5,62 (1H, d., OH-3', remplacé par D20), 5,87 (2H, H-6' et H-i'), 7,4 - 8,1 (5H,/proton de phényle), 8,22 (1H, S., H-2 ou H-8), 8, 71 (1H, S., H-8 ou H-2), 11,13 (1H, large, NH, remplacé par DO20). * Masse: 409 (M+), 408, 349, 304, 228, 105. UV: MeOH 281 nmn Umax = Analyse élémentaire (C20H19N505. H20): C % H % N % Trouvé: 57,55 4,78 16,70 Calculé: 57,41 4,82 16,74 Exemple 20 2'-(R)-hydroxy-2'-déoxy néplanocine A On met en suspension de la N6-benzoyl-2'-(R)-acétoxy- 2'-déoxy néplanocine A (5 mg) dans du méthanol (2 ml). On règle la suspension au pH 10 par addition d'une solution -36- méthanolique de méthylate de sodium. On obtient une solution homogène. Après contrôle de la disparition de la matière de départ, on neutralise la solution au moyen de Dowex 50 (H +). On lave la résine avec de l'eau, on élue au moyen d'une solution méthanolique aqueuse d'ammoniac et on concentre sous vide. On charge le résidu sur une plaque de TLC et on développe au moyen de benzène - acétate d'éthyle (1:1). La bande présentant Rf2 = 0,10 est recueillie, traitée par extraction au chloroforme - méthanol (1:1) et desséchée sous vide pour donner de la 2'-(R)-hydroxy-2'déoxy néplanocine A. úê produit ainsi obtenu est identique au composé obtenu dans l'exemple 18 par analyse instrumentale. Exemple 21 2 '-(R-azide-2' -déoxynéplanocine A 1) La 2'-O-trifluorométhanesulfonyl-3',5'-O-(1,1,3,3- tétraisopropyl disiloxane-1,3-di-yl) néplanocine A (63,7 mg) obtenue dans l'exemple 15 est dissoute dans de l'hexa- méthylphosphoramide (0,5 ml). On y ajoute de l'azide de lithium (8,5 mg) et on agite le mélange à la température ambiante pendant 10 heures. Le mélange de réaction est traité par extraction au chlorcforme, lavé à l'eau et concentré sous vide. On charge le résidu sur une plaque de gel de silice pour TLC et on développe au moyen de benzène- acétate d'éthyle (l:1). La bande présentant Rf6 = 0,10 est recueillie, traitée par extraction au chloroforme-méthanol (1: 1) et desséchée sous vide. On recristallise le produit à partir de méthanol pour obtenir de la 2'-(R)-azide-2'- déoxy-3',5'-O-(1,1,3,3-tétraisopropyl disiloxane-l,3-di-yl) néplanocine A (43 mg, rendement: 81 %). Point de fusion: 189 - 191;C (cristaux aciculaires blancs). Analyse élémentaire (C23H3803N8Si2) C % H % N % Trouvé: 51,81 7,19 20,95 Calculé: 52,04 7,22 21,11 -37- RMN: rppm (CDC13) 1,1 (28H, isopropyle), 4,27 (lH, d.d., H-2'), 4,44 (2H, S., H-5), 5,06 (1H, d., H-l'), 5,84 (1H, J O, H-6'), 7,64 (1H, S., H-2), 8,38 (1H, S. H-8). UV: MeOH = 262 nm max Masse: 530 (M+), 488 (M+ 42), 487 (M+ - 43", 432, 324 IR:eN3 (KBr) 2110 cml 2) La 2é-(R)-azide-2'-déoxy-3',5'-O-(1,1,3,3-tétra- isopropyl disiloxane-1,3-di-yl)néplanocine A (250 mg) obtenue en 1) cidessus (250 mg) est dissoute dans du tétrahydrofuranne anhydre (5 ml). On y ajoute goutte à goutte du fluorure de tétrabutylammonium (135 mg) en agitant à la température ambiante pendant 5 minutes. Le mél]ange de réaction est concentré sous vide. On recristal- lise le résidu à partir d'éthanol pour obtenir de la 2'- (R)-azide-2'-déoxy néplanocine A (119 mg, rendement: 82%). Point de fusion: 231 - 233 C (décomp.) Analyse élémentaire (C11H1202N8): C % H % N% Trouvé: 45,86 4,25 38,66 Calculé: 45,83 4,20 38,77 RMN: ppm (DMSO-d6) 4, 15 (2H, légèrement large, H-5'), 4,27 (1H, d.d., I-2'), 4,81 (1H, t., H3'), 4,95 (1H, t., OH-5', remplacé par D20), 5,64 (1H, d.d., H-i'), ,75 (1H, d., OH-3', remplacé par D20), 5,77 (1H, J =: 0, H-6'), 7,21 (2H, large, S., NH2, remplacé par D20), 7,88 (1H, S., H-2), 8,15 (1H, S., H-8). UV H20 = 262 nm max = Masse: 289 (M + 1), 288 (M), 246 (M - 42), 186, $36, 135. -1 IR: N3 (KBr) 2115 cm CD: (G) -19 900 (253 nm, H20). -38- Exemple 22 2 '-(R)-chloro-2' -déoxy néplanocine A La 2' -O-trifluorométhan-sulfonyl-3',5'-O-(1,1,3,3- tétraisopropyl disiloxane-l,3-di-yl) néplanocine A (500 mg) obtenue dans l'exemple 15 est dissoute dans de l'hexa- méthylphosphoramide (5 ml). On y ajoute du chlorure de lithium (43 mg) et on agite le mélange à la température ambiante pendant 20 heures. On verse le mélange de réaction dans de l'eau glacée et on le traite par extraction au chloroforme. La couche organique est lavée à l'eau, passée à travers du papier-filtre Whatman IPS, puis concentrée sous vide. On charge le résidu sur une plaque de gel de silice pour TLC et on développe au moyen de chloroforme-éthanol (15: 1). La bande présentant Rf3 =- 0,51 est recueillies traitée par extraction au chloroforme- méthanol (1: 1) et desséchée sous vide pour donner de la 2' - (R)-chloro2'-déoxy-3',5'-0-(1,1,3,3-tétraisopropyl disiloxane-l,3-di-yl) néplanocine A. On dissout le produit dans du tétrahydrofuranne anhydre et on y ajoute du fluorure de tétrabutylammonium en agitant à la température ambiante pour éliminer le groupe protecteur silyle. Le mélange de réaction est concentré sous vide. On charge le résidu sur une plaque de gel de silice pour TLC et on développe au moyen de chloroforme -méthanol (5 - 1). La bande pré- sentant Rf2 = 0,14 est recueillie, traitée par extraction au chloroforme - méthanol (1: 1) et concentrée sous vide. On recristallise le résidu pour obtenir de la 2'-(R)-chloro- 2'-déoxy néplanocine A (120 mg, rendement: 55 %). Point de fusion: 233 - 235 C (décomp.). Analyse élémentaire (C11H1202N5C1): C % H % N% Cl % Trouvé: 46,88 4,32 24, 79 12,51 Calculé: 46,90 4,29 24,86 12,59 RMN: ppm (DMSO-d6) 4,16 (2H, légèrement large, H-5'), 4,54 (1H, d.d., H-2', 4,91 (1H, t., H-3'), 5,00 (1H, t., -39- OH-5', remplacé par D20), 5,74 (1H, d.d., H-i'), 5,85 (lH, d., OH-3', remplacé par D2P), 5,86 (1H, J = 0, H-6'), 7,21 (2H, large, S., NH2, remplacé par D20), 7,96 (1H, S., H-2), 8,14 (lH, S, H-8). UV: 20 = 262 nm max + Masse: 284, 282 (M + 1), 283, 281 (M), 136, 135. CD: (0) -10 800 (252 ran, H20). Exemple 23 2'-(R)-chloro-2'-déoxy-3'-0,5'-O-diacétyl néplanocine A On ajoute de l'anhydride acétique (0,02 ml) à de la 2'-(R)-chloro-2'-déoxy néplanocine A (30 mg) dissoute dans de la pyridine anhydre (l ml) et on agite le mélange à la température ambiante pendant 8 heures. Le mélange de réaction est concentré sous vide. On recristallise le résidu à partir d'éthanol pour obtenir de la 2'-(R--chloro- 2'-déoxy-3'-0,5'-O-diacétyl néplanocine A (32 mg, ren- dement: 82 %). Point de fusion: 179 - 181 C. TLC: Rf2 = 0,64 RMN: ppm (CDCl3) 2,14, 2,18 (chacun 3H, chacun S.), OCOCH3X3), 4,72 (1H, d.d., H-2'), 4,78 (2H, S., H-5), 5,68 (2H, large, S., NH2, remplacé par D20), 6,0 - 6,1 (2H, H-1' et H-3'), 6,13 (1H, J -0, H6'), 7,78 (1H, S., H-2), 8,37 (1H, S., H-8). UV: MeOH = 262 nm max Masse: 368, 366 (M + 1), 367, 365 (M), 330, 288, 136, 135. Exemple 24 2'-(R)-bromo-2'-déoxy néplanocine A 1) On dissout de la 2'-trifluorométhanesulfonyl- 3',5'-O-(1,l,3,3-tétraisopropyl disiloxane-l,3-di-yl)népla- nocine A (500 mg) dans de l'hexaméthylphosphoramide (5 ml). On y ajoute du bromure de lithium (70 mg) (anhydride par chauffage du produit hydrate disponible dans le commerce) -40- et on agite le mélange à la température ambiante pendant 2,5 heures. On verse le mélange de réaction dans de l'eau glacée. Les cristaux précipités sont séparés par fil- tration, lavés à l'eau et séchés sous vide. On effectue une recristallisation à partir de cyclohexane pour obtenir de la 2'-(R)-bromo-2'-déoxy-3',5'-O-(l,l,3,3-tétraiso- propyl disilôxane-l,3-di-yl)néplanocine A (440 mg). Point de fusion: 175 - 178 C. Analyse élémentaire (C23H3803N5Si2Br) C % H % N % Br % Trouvé: 48,56 6,77 12,27 14,13 Calculé: 48,58 6,74 12,32 14,05 RMN: &ppm (CDCl3) 1,1(28H, isopropyle), 4,46 (2H, S., H-5'), 4,59 (1H, d.d., H-2x), 5,34 (1H, d., H3'), 5,56 (2H, large-; S., NH2, remplacé par D20), 5,78 (1H, d;d., H-l'), 5,90 (1H, J =0, H-6'), 7,69 (1H, S., H-2), 8,38 (1H, S., H-8). UV: maxeOH =262 nm Masse: 569, 567 (M), 526, 524, 488, 444, 353, 311. CD: (0) -15 300 (252 nm, MeOH). 2) Le produit 1) ci-dessus (200 mg) est dissous dans du tétrahydrofuranne anhydre (5 ml) On y ajoute du fluorure de tétra-n-butylammonium (100 mg) en agitant à la tempéra- ture ambiante pendant 5 minutes. On concentre le mélange de réaction sous vide. On charge le résidu sur une plaque pour TLC et on développe au moyen de chloroforme-méthanol (5: 1). La bande présentant Rf2 = 0,30 est recueillie, traitée par extraction au chloroforme - méthanol (1: 1), séchée sous vide, puis recristallisée à partir d'éthanol. (95 mg, rendement: 83 %). Point de fusion: 224 - 226 C (décomp.). Analyse élémentaire (C11H1202N5Br): C% H% N% Br% Trouvé: 40,57 3,63 21,26 24,24 Calculé: 40,50 3,71 21,47 24,50 -41- RMN: gppm (DMSO-d6) 4,17 (2H, légèrement large, H-5'), 4,60 (1H, d.d., H-2'), 4,93 - 5,06 (2H, H-3' et OH-5', 1H par D20), 5,70 (1H, d.d., H-i'), 5,84 (1H, d., OH-3', remplacé par D20), 5,86 (1H, J - 0, H-6'), 7,20 (2H, large, NH2, remplacé par D20), 7,96 (1H, S., H-2), 8,14 (1H, S., H-8). UV H2max = 262 nm max Masse: 327, 325 (M+), 246, 228, 136, 135. CD: ( Exemple 26 N -benzoyl-2'-(R)-iodo-2'-déoxy néoplacine A 1) Un composé (50 mg) obtenu dans l'exemple 16 et de l'iodure de lithium (15 mg) sont dissous dans de l'hexa- méthylphosphoramide (1 ml) et agités à la température am- biante pendant 24 heures. Le mélange de réaction est dissous dans du chloroforme, lavé à l'eau, passé à travers du papier-filtre Whatman lPS et concentré sous vide. On traite le résidu par TLC de la même manière que dans l'exemple 25 pour obtenir de la N6-benzoyl-2'-(R)- iodo-2'-déoxy-3',5'-O-(tétraisopropyl disiloxane-l,3-di- yl) néplanocine A (35 mg). RMN: ppm (CDCl3) 1,1 (28H, isopropyle), 4,51 (2H, légèrement large, H-5'), 4,70 (1H, d.d., H-2'), 5,46 (1H, d., H-3'), 5,78 (1H, d.d., H-l'), 5,92 (1H, J - 0, H-6'), 7,4 - 8,1 (5H, m., proton de phényle), 7,88 (1H, S., H2 ou H-8), 8,83 (1H, S., H-8 ou H-2), 8,98 (1H, large, NH, remplacé par D20). Masse: 676 (M+ - 43), 477, 253, 240, 239, 238. 2) Les groupes protecteurs du produit obtenu en 1) ci-dessus sont éliminés de la même manière que dans l'exemple 19-2) pour donner de la N6-benzoyl-2'-(R)-iodo- 2'-déoxy néoplacine A. RMN: 'ppm (DMSO-d6) 4,21 (2H, légèrement large, H5'), 4,66 (1H, d.d., H-2'), 5,02 (1H, t., OH-5', remplacé -42- par D20), 5,13 (1H, t., H-3'), 5,78 (1H, d.d., H-1'), ,84 (1H, d., OH-3', remplacé par D20), 5,90 (1H, J - 0; H-6'), 7,5 - 8,1 (5H, m., proton de phényle), 8,32 (1H, S., H-2), 8,75 (1H, S., H-8), 1114 (1H, large, NH, remplacé par D20). Exemple 27 2'-déoxy néplanocine A (1) De la 2'-(R)-bromo-2'-déoxy-3',5'-O-(1,1,3,3- tétraisopropyl disiloxane-l,3-di-yl) néplanocine A (500 mg), de l'hydrure de tri-n-butylétain (0,35 ml) et une quantité catalytique d'azobisisobutyronitrile sont dissous dans du benzène (5 ml) et chauffés au reflux sous un courant d'argon pendant 3 heures. Le mélange de réaction est concentré sous vide. On purifie le résidu par chroma- tographie sur une colornne de gel de silice en utilisant un mélange chloroforme - éthanol (40: 1). Les fractions présentant Rf3 = 0,24 sont recueillies et concentrées sous vide. On recristallise le résidu à partir d'éthanol pour obtenir de la 2 '-déoxy-3',5'-0- (1,1,3,3-tétraisopropyl disiloxane-l,3-di-yl) néplanocine A (385 mg, rendement: %). Point de fusion: 149 - 151 C. RMN: 4ppm (CDCl3) 1,1 (28H, isopropyle), 2,3 - 2,6 (2H, 16 tet, H-2'), 4, 49 (2H, S., H-5'), 5,39 (1H, d.d., H-3'), 5,72 (2H, S., NH2, remplacé par D20), 5,81 (2H, H-i' et H-6'), 7,75 (1H, S., H-2), 8,36 (1H, S., H-8). V XMeOH = 262 nm UV: max 262 nm Masse: 489 (M), 446, 354, 311, 212, 136, 135. Analyse élémentaire (C23H3903N5Si2 1 H20) 23 39 3 5 22 20 C % H% N% Trouvé: 55,75 7,87 14,09 Calculé: 55,38 8,08 14,04 (2) Un composé (278 mg) obtenu en (1) ci-dessus et du -43- fluorure de tétrabutylammonium (200 mg) sont dissous dans du tétrahydrofuranne anhydre (3 ml) et agités à la tempé- rature ambiante pendant 10 minutes. Le mélange de réaction est concentré sous vide. On recristallise le résidu à partir d'éthanol pour obtenir de la 2'-déoxy néplanocine A (115 mg, rendement: 82 %). Point de fusion: 231 - 234 C. Analyse élémentaire (C11H1302N5): C % H % N % Trouvé: 53,43 5,25 28,04 Calculé: 53,43 5,30 28,33 TLC: Rf2 = 0,17 RMN: ppm (DMSO-d6) 2,2 - 2,4 (2H, m., H-2'), 4,15 (2H, légèrement large, H-S'), 4,8 - 5,0 (2H, t., +d.d., OH-5' et H-3'), 5,06 (1H, d., OH-3'), 5,64 (1H, m., H-i'), 5,75 (1H, J - 0, H-6'), 7,17 (2H, légèrement large, NH2), 7,97 (1H, S., H-2), 8,13 (1H, S., H-8). UV: mH2x = 262 nm max Masse: 247 (M), 229, 200, 186, 136, 135. CD: (0) -6 900 (252 nm, H20). Exemple 28 Acétate de 2'(R)-amino-2'-déoxy néplanocine A On dissout de la 2'-(R)azide-2'-déoxy néplanocine A (80 mg) dans de la pyridine aqueuse (50 %, 5 ml). On fait barboter de l'hydrogène sulfuré dans la solution à la tem- pérature ambiante. La matière de départ disparaît dans les 6 heures et on neutralise le mélange de réaction avec de l'acide acétique 2N, puis on le concentre sous vide. On répète deux fois la concentration sous vide en ajoutant de l'éthanol. On ajoute de l'eau au résidu et la matière insoluble est éliminée par filtration. La solution surna- geante est desséchée sous vide. On recristallise le résidu à partir d'éthanol pour obtenir de l'acétate de 2'-(R)- amino-2'-déoxy néplanocine A (56 mg, rendement: 72 %). -44- TLC: Rf1 = 0,15, Rf2 = 0. RMN: eppm (DMSO-d6) 2,50 (3H, S., CHCOO), 3,29 (3H, large, NH+), 3,47 (1H, d.d., H-2'), 4,14 (2H, S., H-5'), 4,49 (1H, d., H-3'), 4,85 (1H, large, OH-3' ou OH-5'), 5,22 (1H, large, OH-5' ou OH-3'), 5,46 (IN, d., H-1'), 5, 71 (1H, J = 0, H-6'), 7,17 (2H, légèrement large, NH2), 7,84 (1H, S., H-2), 8,12 (1H, S., H-8). UV: maxH20 = 262 n UV max Masse: 262 5M), 244, 216, 186, 136, 135. CD: (9) -10 000 (252 nm, H20) Exemple 29 N -benzoyl-2'-déoxy néplanocine A 1) De la 2'-iodo-3',5'-0-(1,1,3,3tétraisopropyl disiloxane-l,3-di-yl)-N6-benzoyl néplanocine A (230 mg), une quantité catalytique d'azobisisobutyronitrile et de l'hydrure de tributylétain (0,089 ml) dissous dans du benzène anhydre sont chauffés au reflux pendant 1 heure. Le mélange de réaction est concentré sous vide et purifié par chromatographie sur une colonne de gel de silice en utilisant un mélange chloroforme - éthanol (40: 1) et on obtient de la N6-benzoyl-2'-déoxy-3',5'-O-(1,1,3,3-tétra- isopropyl disiloxane-l,3-di-yl) néplanocine A. TLC: Rf1 = 0,30, Rf4 = 0, 40 Masse: 393 (M), 550, 354, 316, 311, 240, 105. 2) Le produit obtenu ci-dessus et du fluorure de tétrabutylammonium (100 mg) sont dissous dans du tétra- hydrofuranne (1 ml) et agités à la température ambiante pendant 10 minutes. Le mélange de réaction est concentre, chargé sur une plaque pour TLC et développé au moyen de chloroforme - méthanol (7: 1). La bande présentant Rf2 = 0,41 est recueillie, traitée par extraction au chloroforme - méthanol (5: 1), concentrée sous vide, puis traitée par l'oxyde d'éthyle pour donner une poudre de N6-benzoyl-2'-déoxy néoplacine A (52 mg). -45- RMN: ppm (DMSO-d6) 2,4 (2H, m., H-2'), 4,18 (2H, légèrement large, H5'), 4,9 - 5,0 (2H, t.t., d.d., H-3' et OH-5'), 5,14 (lH, d., OH-3'), 5, 82 (2H, H-6' et H-I'), 7,5 - 7,7 (3H, m., proton de phényle), 8,0 - 8,1 (2H, m., proton de phényle), 8,33 (1H, S., H-2), 8,72 (1H, S, H-8), 11,12 (1H, large, NH). Masse: 351 (M), 350, 240, 136, 135. Exemple 30 2'-(R)-acétylthio-2'-déoxy néplanocine A 1) De la 2'-O-trifluorométhanesulfonyl-3',5'-O- (1,1,3,3-tétraisopropyl disiloxane-l,3-di-yl) néplanocine A (1,9 g) et du thioacétate de potassium (0,62 g) sont dissous dans de l'hexaméthylphosphoramide (20 ml) et agités à la température ambiante pendant 3 heures. On verse le mélange de réaction dans de l'eau glacée. Le pré- cipité est séparé par filtration, lavé à l'eau et redissous dans du chloroforme. La solution est chargée sur une co- lonne de gel de silice et éluée au moyen de benzène - acétate d'éthyle (1: 2) pour donner une poudre de 2'-(R)- acétylthio-2'-déoxy-3',5'-O-(1,1,3,3-tétraisopropyl disiloxane-l,3-di-yl)néplanocine A (1,55 g). TLC: Rf6 = 0,19 RMN: ppm (CDCl3) 1,1 (28H, isopropyle, 2,11 (3H, S., -SCOCH3), 4,38 (1H, t., H-3'), 4,46 (2H, légèrement large, H-5'), 5,38 (1H, d.d., H-2'), 5,64 (2H, légèrement large, NH2, remplacé par D20), 5,75 (1H, d.d.! H-i'), 5,85 (1H, J = 0, H-6'), 7,59 (1H, S., H-2), 8,28 (1H, S., H-8). Masse: 563 (M+), 520 (M+ - 43), 488, 353, 136, 135. 2) On ajoute du fluorure de tétrabutylammonium (en- viron 100 mg) au produit ci-dessus (110 mg) dissous dans du tétrahydrofuranne anhydre (2 ml) et on agite le mélange à la température ambiante pendant 5 minutes. Le mêlange de réaction est concentré sous vide et le résidu est dissous dans du méthanol qui est immédiatement neutralisé par de l'acide acétique aqueux et ensuite chargé sur une plaque -46- de gel de silice pour TLC. La bande présentant Rf2 = 0,23 est recueillie après développement au moyen de chloro- forme - méthanol (5: 1). On dessèche l'extrait sous vide pour obtenir de la 2'-(R)-acétylthio-2'-déoxy néplanocine A en poudre (55 mg, rendement: 88 %). TLC: Rf2 =0,23 a H2 = 262 nm max CD: () -42000 (262 nm, H20) RMN (FX-200-FT, DMSO-d6): 6ppm (TMS) 2,10 (3H, S., acétylthio), 4,12 (1H, d.d. , H-2'), 4,16 (2H, légèrement large, H-5'), 4,91 (2H, m., OH-3' ou OH-5' et H-3', changé en 1H, d., par addition de D2O), 5,61 (2H, m., OH-3' ou OH-5' et H-i', changé en 1H, d., par addition de D20, 5,80 (1H, J - 0, H6'), 7,17 (2H, légèrement large, NH2-6, disparaît par addition de D20), 7, 86 (1H, S., H-2), 8,08 (1H, S., H-S). Exemple 31 - N6-benzoyl-2',3'-0-éthoxyméthylène néplanocine A 1) On met en suspension de la néplanocine A (263 mg) dans du diméthylformamide (DMF) (5 ml). On y ajoute de l'orthoformiate de triéthyle (0,33 ml) et on ajoute aussi une solution à 13,5 % en poids volume de HCl gazeux dans DMF (0,3 ml), puis on agite le mélange à la température ambiante pendant 12 heures. On ajoute de la triéthylamine (0,25 ml) au mélange de réaction en refroidissant par de la glace. On élimine le chlorhydrate de triéthylamine pré- cipité et on concentre le filtrat sous vide. On ajoute de l'eau au résidu pour précipiter des cristaux de 2',3'-O- éthoxyméthylène néplanocine A (275 mg, rendement: 86,2 %). Point de fusion: 196 - 201 C. RMN: gppm (DMSO-d6, étalon TMS); 1,10, 1,12 (chacun t., total 3H, OCH2CH3), 3,52 (q:, 2H, -OCH2CH3), 4,16 (légèrement large, S., 2H, H-5'), 4,80 (d., 1H, H-2'), 5,08 (large, S., 1H, OH-5'), 5,48 (S., 1H, CH-OEt), 5,36, 5,66 (chacun d., 1H, H-3'), 5,76 (d., 1H, H-1'), 5,94, 5,98 -47(chacun S., total 1H,H-6'), 7,27 (large, S., 2H, NH2-6), 7,98 (S., 1H, N-2), 8,14 (S., 1H, H-8). Masse: 319 (M), 274 (M -OEt), 245, 135 (B + 1) Analyse élémentaire (C14H17N504.2 H20) 14 17 5 4'2 H20 C % H % N % Trouvé: 51,21 5,52 21,33 Calculé: 51,71 5,38 21,52 2) De la 2',3'-Oéthoxyméthylène néplanocine A (160 mg) est dissoute dans de la pyridine anhydre (2 ml). On y ajoute du chlorure de benzoyle (0,3 ml) en refroidissant à la glace et on agite à la température ambiante pendant heures. On verse le mélange de réaction dans de l'eau glacée et on le traite par extraction trois fois au chloroforme. La couche chloroformique est lavée à l'eau, passée à travers du papier-filtre Whatman lPS et con- centrée sous vide. On purifie le résidu sirupeux par chromatographie sur une colonne de gel de silice en uti- lisant un mélange chloroforme-méthanol (50: 1) pour obtenir de la N6,N6, 6'-O-tribenzoyl-2',3'-O-éthoxyméthylène néplanocine A (290 mg). RMN: ppm (CDCl3, étalon TMS): 1,21 (t., 3H, -OCH2CH3), 3,62 (q., 2H, OCH2CH3), 4,92 (d., 1H, H-2'), ,12 (large, S., 2H, H-6'), 5,66 (S., 1H, CHOEt), 5,52, ,72 (chacun d., total 1H, H-3'), 5,90 (d., 1H, H-1'), 5,97, 6,00 (chacun S., total 1H, H-5'), 7,2 - 8,1 (16 H, PhCO-X3,H-2), 8,58, 8,59 (chacun S., total 1H, H-8). Masse: 631 (M +), 586 (M+ -OEt). 3) On dissout de la N6,N6,6'-O-tribenzoyl-2',3'-O- éthoxyméthylène néplanocine A (160 mg) dans de l'éthanol (1 ml) et de la pyridine (0,5 ml). On ajoute immédiatement un mélange d'hydroxyde de sodium 2 N (1 ml) et d'éthanol (1 ml). Après 10 minutes, on ajoute du Dowex 50 (type pyri- dinium) pour neutraliser le mélange de réaction. On sépare la résine par filtration, on la lave à l'éthanol et à la pyridine et on effectue une concentration sous vide. On -48- purifie le résidu par chromatographie sur une colonne de gel de silice en utilisant du chloroforme - méthanol (5: 1) pour obtenir de la N -benzoyl-2',3'-O-éthoxy- méthylène néplanocine A en poudre (80 mg, rendement: 74%). UV XEtOH = 281 nm max RMN: ppm (CDCl3, étalon TMS) 1,20 (t., 3H, -OCH2CH3) , 3,62 (q., 2H, -OCH2CH3), 4,48 (large, S., 2H, H-6'), 4,87 (d., 1H, H-2') , 5,60 (d., 1H, H-3'), 5,64 (S, 1H, -CHOEt), 5,85 (d., 1H, H-1'), 5,95, 5, 98 (chacunS, total 1H, H-5'), 7,4 - 8,1 (6H, PhCO-, H-2), 8,76 (S., 1H, H-8), 9,26 (large, S., 1H, NH-6). Masse: 423 (M), 379 (M -OEt). Exemple 32 '-phosphate de néplanocine A On ajoute de l'Amberlite IR-120 (H+) à du cyanoéthyl phosphate de baryum (1,1 g) en suspension dans de l'eau (10 ml) en agitant jusqu'à ce qu'on observe une acidité. La résine est séparée par filtration et le filtrat est con- centré sous vide. On ajoute de la N6-benzoyl-2',3'-O-éthoxy- méthylène néplanocine A (150 mg) au résidu. On dissout le mélange dans de la pyridine anhydre et la solution est des- séchée sous vide. On ajoute du N,N-dicyclohexylcarbodiimide (1,5 g), dissous dans de la pyridine anhydre (10 ml) et on agite le mélange en refroidissant à la glace pendant 2 heures et à la température ambiante pendant 16 heures. On ajoute de l'eau (1 ml) au mélange de réaction, on agite le mélange à la température ambiante pendant 1 heure et on le concentre sous vide. On ajoute de nouveau de l'eau (l1ml) au résidu et le mélange est concentré sous vide. Le résidu dissous dans du méthanol est réglé au pH 12 par addition d'hydroxyde de sodium 2N et agité perndant 4 heures. On règle le mélange de réaction au pH 6,6 en ajoutant de l'acide chlorhydrique dilué. On ajoute du charbon actif, de qualité chromatoaraphique, pour adsorption, jusqu'à ce que l'absorption UV de la solution disparaisse. On lave -49- complètement le charbon pour enlèvement du sel, puis on élue avec de l'éthanol aqueux à 50 % et on concentre l'éluat sous vide à basse température. On charge le résidu sur une colonne de DEAE-cellulose et on le chromatoqraphie par chromatographie à qradient linéaire en utilisant de l'eau (500 ml) et du bicarbonate de triéthylammonium 0,2 M (500 ml) pour obtenir la fraction active contenant du 5'-phosphate de néplanocine A. On concentre la fraction sous vide à basse température pour isoler le 5'-phosphate de néplanocine A. UV: H20 = 262 nm max Electrophorèse sur papier (Papier: Toyo N 51A, 700 V, 40 minutes, bicarbonate de triéthylammonium aqueux (50 mM, pH 7,7)): migration 107 cm (référ.: 5'-AMP: 10,7 cm). Exemple 33 5'-phosphate de néplanocine A On ajoute de la néplanocine A (500 mg) à un mélange d'acide acétique (2,5 ml) et de pyridine (0,5 ml) à 5 C en agitant. On ajoute de l'oxychlorure de phosphore (1,0 ml) et on agite en refroidissant à la glace jusqu'à ce que la solution devienne claire. Cela demande 90 minutes environ. Ensuite, on abandonne le mélange réactionnel pendant 4 heures en refroidissant à la glace, on ajoute de l'eau glacée (20 ml) dans le mélange, puis on agite pendant 15 minutes. On règle le mélange de réaction au pH 1,6 par addition d'une solution à 50 % d'hydroxyde de sodium en agitant pendant 20 minutes. Le mélange de réaction est adsorbé au moyen de charbon (5 g), de qualité chromatographique, on lave à l'eau, on élimine le sel et on élue avec un mélange méthanol - eau - solution aqueuse concentrée d'ammoniac (50: 50: 3). L'éluat est lyophilisé et on charge le lyophilisat sur une colonne de Sephadex G-15 (170 ml) et on élue avec de l'eau. Une fraction con- tenant du 5'-phosphate de néplanocine A est recueillie et lyophilisée pour donner du 5'-phosphate de néplanocine A (113 mg). -50- UV: H20 = 262 nm max TLC: Rf8 = 0,39, Rf9 = 0,25 Exemple 34 '-butylphosphate de néplanocine A On dissout du butylphosphate cyclohexylaminate (1,0 g) dans de l'eau (10 ml) et on règle le pH à 1,5 par addition d'Amberlite IR-120 (H +). On sépare la résine par fil- tration et on la lave à l'eau. On combine le filtrat et les liquides de lavage et on les concentre sous vide. On ajoute de la pyridine anhydre au résidu et le mélange est concentré sous vide. On répète trois fois cette opération. Or. ajoute de la N-benzoyl-2',3'-O-éthoxyméthylène népla- nocine A (423 mg) au résidu, on dissout le mélange dans de la pyridine et la solution est concentrée sous vide. On ajoute DCC (3 g) au résidu et on dissout le mélange dans de la pyridine anhydre (10 ml), puis on agite la solution en refroidissant à la glace pendant deux heures et toute une nuit à la température ambiante. On ajoute de l'eau (1 ml) au mélange de réaction, on agite le mélange pendant une heure, on le neutralise en ajoutant de l'hydroxyde de sodium 2N et on le concentre sous vide. On ajoute de l'eau de nouveau et le mélange est concentré sous vide. On répète deux fois cette opération. Le résidu est traité par ex- traction au méthanol aqueux et la N,N-dicyclohexylurée est séparée par filtration. On concentre le filtrat, on ajoute du HCl 0,01 N (50 ml) et on agite à la température ambiante pendant 20 minutes. On neutralise la solution par addition d'hydroxyde de sodium 1 N, on la concentre sous vide, on ajoute de l'hydroxyde de sodium 0,2 N (20 ml) et on agite à la température ambiante. On continue la réaction jusqu'à ce que l'absorption à 262 nm soit accrue et que l'absorption à 282 m disparaisse, en contrôlant la réaction par absorption dans l'ultraviolet. Il faut environ 20 heures pour la réaction. On neutralise le mélange de réaction au pH 6, 7 en ajoutant de l'acide -51- chlorhydrique dilué. On ajoute du charbon actif, de qualité chromatographique, au mélange de réaction jusqu'à disparition de l'absorption UV pour adsorber la matière. On lave le charbon complètement pour enlèvement du sel, et on élue avec de l'éthanol aqueux à 5 %, 20 %, 30 % et % (500 ml chaque fois), puis on élue avec de l'éthanol aqueux à 50 % jusqu'à disparition de l'absorption UV. Les fractions éluées avec l'éthanol à 50 % sont recueillies et concentrées jusqu'à ce qu'on obtienne un volume de 12 ml. L'éluat fourni par la solution à 50 % est recueilli et concentré sous vide à environ 12 ml. On ajoute de l'oxyde d'éthyle au concentré pour obtenir du 5'- butylphosphate de néplanocine A en poudre. Rendement: absorption totale 3060. H20max = 262 nm U: max Electrophorèse sur papier: papier-filtre Toyo N 51A, 700 V, 40 minutes, solution de bicarbonate de triéthyl- ammonium (50 mM, pH 7,7): migration 6,8 cm. *référence: '-AMP = 10,1 cm). -52- REVENDICATIONS 1. Dérivé de néplanocine A de la formule suivante: R2 -N-R IN R6OH2 C R3 ORs dans laquelle R1 et R2 sont chacun un atome d'hydrogène ou un groupe benzoyle, R5 est un atome d'hydrogène ou un groupe acétyle, R6 est un atome d'hydrogène, un groupe acétyle, benzoyle ou -P-O-R7, dans laquelle R7 est un OH atome d'hydrogène ou un groupe alcoyle inférieur; quand R, est un atome d'hydrogène, R4 est un atome d'hydrogène ou d'un halogène, un groupe hydroxy, acêtoxy, acétylthio, amino ou azido, et quand R3 est un groupe OR8, R4 est un atome d'hydrogène, R8 est un atome d'hydrogène ou un groupe acétyle ou R8 et R5 sont ensemble un groupe benzylidène, et au moins un des substituants R8, R5 et R6 n'est pas un atome d'hydrogène. 2. Dérivé de néplanocine A selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est représenté par la formule: -53- R2-N-Ri N ANN R6 OH2 C OR8 OR5 dans laquelle R1 et R2 sont chacun un atome d'hydrogène ou un groupe benzoyle, R8 et R5 sont chacun un atome d'hydro- gène ou un groupe acétyle, ou R8 et R5 sont ensemble un groupe benzylidène, et R6 est un atome d'hydrogène ou un groupe acétyle ou benzoyle, et au moins un des substituants R8, R5 et R6 n'est pas un atome d'hydrogène. 3. Dérivé de néplanocine A selon la revendication 2, caractérisé en ce que le dérivé est la 2',3',5'-0-tri- acétyl-néplanocine A, la 2',3'-O-benzylidène néplanocine 66 6-O A, la N6,N6,5'-O-tribenzoyl néplanocine A ou la N6,5'-0- dibenzoyl néplanocine A. 4. Dérivé de néplanocine A selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est représenté par la formule: NH-Rl N N N R R6 OH2 C )Rs.5 -54- 2500838 dans laquelle R1 est un atome d'hydrogène ou un groupe benzoyle, R4 est un atome d'hydrogène ou d'halogène ou un groupe hydroxy, acétoxy, acetylthio, amino ou azide, R5 est un atome d'hydrogène ou un groupe acétyle et R6 est un atome d'hydrogène ou un groupe acétyle. 5. Dérivé de néplanocine A selon la revendication 4, caractérisé en ce que ce composé est la 2'-déoxynépla- nocine A, la 2'-(R)-hydroxy-2'-déoxy néplanocine A, la 2'-(R)-acétoxy-2'-déoxy néplanocine A, la 2'-(R)-acétyl- thio-2'-déoxy néplanocine A, la 2'-(R)-chloro-2'-déoxy néplanocine A, la 2'-(R)-bromo-2'-déoxy néplanocine A, la 2'-(R)-iodo-2'-déoxy néplanocine A, la 2'-(R)-amino-2'- déoxy néplanocine A, la.2'-(R)-azide-2'-déoxy néplanocine A ou la 2'-(R)chloro-3',5'-O-déacétyl-2'-déoxy néplanocine A. 6. Dérivé de néplanocine A selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est représenté par la formule: NH2 N OH R7-0-P-OH2C OH I OH OH dans laquelle R7 est un atome d'hydrogène ou un groupe alcoyle inférieur. 7. Dérivé de néplanocine A selon la revendication 6, caractérisé en ce que ce composé est le 5'-phosphate de néplanocine A ou le 5'- butylphosphate de néplanocine A.