FR 2487850 A1 19820205 FR 8100007 A 19810102 COMPOSITIONS AQUEUSES RENFERMANT DES ENZYMES STABILISEES. La présente invention se rapporte à un procédé de stabilisation à long terme d'une enzyme, au sein d'une solution aqueuse, au moyen d'un sel d'acide organique de faible poids moléculaire. On sait bien qu'il peut être avantageux d'incorporer des enzymes protéo- lytiques ou a-amylolytiques dans des compositions de nettoyage. Ces enzymes sont intéressantes par leur aptitude à transformer des macromolécules, telles que les protéines et les amidons, en molécules plus petites, de manière qu'il soit possible de les éliminer facilement par lavage à l'aide de détergents et/ou d'eau. Plus particulièrement, les enzymes protéolytiques servent à briser les protéines et les enzymes aamylolytiques permettent de rompre les hydrates de carbone. Les compositions détergentes, renfermant ces enzymes possèdent un large domaine d'application car elles permettent d'éliminer les salissures protéiniques et amylacées telles que taches d'oeuf, de sang, de sauce, et similaires. On trouve sur le marché des compositions détergentes sous forme de poudre sèche renfermant des enzymes. Toutefois, il existe des problèmes inhérents à ces compositions. D'abord, il convient de les stocker à l'abri de l'humidité et de la chaleur de façon à conserver son activité enzymiatique.Ensuite, ces compositions en poudre sèche ne conviennent pas très bien à certaines appli- cations intéressantes comme le nettoyage des taches, trempage de la lessive et détachage préalables qui demandent une application directe sur la surface souillée. Pour ces applications et d'autres encore, il est souhaitable de disposer d'une composition liquide renfermant des enzymes. En outre, il est avantageux d'incorporer des quantités notables d'eau à ces compositions pour des raisons d'économie et de commodité de préparation. Toutefois, l'addition de quantité importante d'eau à une composition renfermant une enzyme soulève des problèmes particuliers dus au fait de l'instabilité inhérente aux enzymes en présence d'eau, qui entraîne une diminution rapide de leur activité enzy- matique, c'est-à-dire, leur aptitude à casser les macromolécules en fragments plus petits. On pense que cette perte d'activité enzymatique pourrait provenir de l'action hydrolysante de l'eau sur les enzymes. 2 2487850 On observe aussi une perte d'activité enzymatique lors de l'exposition des compositions aqueuses renfermant des enzymes à une température supérieure à 700C. En effet, si on soumet ces compositions à des températures de cet ordre pendant plus de quelques heures, on observe leur désactivation complète. Par conséquent, pour avoir une composition renfermant des enzymes, susceptible d'être utilisée comme indiqué ci-dessus, il est évident qu'il ne suffit pas que l'enzyme reste stable dans l'eau, c'est-à-dire qu'elle conserve son activité enzymatique, mais il faut encore qu'elle puisse conserver son activité même après un stockage prolongé à température élevée. En effet, il n'est pas rare que l'on conserve des produits courants dans des réserves pendant un certain temps à des températures très supérieures à la température ambiante, avant de les livrer au consommateur. On a déjà fait maintes tentatives en vue de stabiliser les enzymes au sein de compositions aqueuses, ainsi, par exemple: - Dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique No. 3 296 094 de Cayle, on em- ploie un collagène partiellement hydrolysé et solubilisé, et du glycérol pour stabiliser une composition aqueuse d'enzyme protéolytique. La quantité de glycérol nécessaire pour stabiliser la composition est comprise entre 35 et % du poids total de la composition. - Dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique No. 3 557 002 de McCarthy, on utilise un monoalcool et un alcool alcoxylé pour stabiliser une enzyme protéo- lytique. Bien que la quantité d'alcool utilisée dans cette composition est moindre que celle préconisée par Cayle, l'activité résiduelle de l'enzyme de cette composition diminue après un stockage prolongé à une température rela- tivement élevée. - Dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique No. 4 169 817 de Weber, on utilise soit des sels hydrosolubles tels queNa2SO4, K2SO4, NaCl ou KCl et/ou du glycérol, soit des alkylène-glycols, pour stabiliser une enzyme protéoly- tique au sein de compositions renfermant des composés ioniques (ou ionisables) et des agents tensioactifs. Ici, également, il faut des quantités notables de glycérol et/ou autres solides pour obtenir une stabilité de longue durée de l'enzyme dans ces compositions. - Dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique No. 3 682 842 de Innerfield, on utilise un agent de liaison enzyme-ion tel que l'acide trichloracétique ou l'acide tungstique; un sel tel que le chlorure de sodium ou le sulfate d'am- monium, un solvant organique tel que l'éthanol et un agent tensioactif afin de stabiliser le mélange d'enzymes protéolytiques et amylolytiques. - Dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique No. 3 676 374 de Zaki et al., on utilise unmélange dedérivés d'alcane-sulfonatesou d'aoléfinessulfonates avec des dérivés d'alkyl alkylèneoxy hydroxyle ou sulfate pour stabiliser une enzyme protéolytique incorporée dans une composition détergente liquide renfermant de l'eau. Avec ces compositions, on peut employer en outre divers agents stabilisants tels que CaCl2, MgCl, lactates et acétates de calcium et de magnésium, solubles dans l'eau. La demande de brevetaux U.S.A. N0 023363 du 23/03/1979 au nom de la Demanderesse, indique qu'on peut stabiliser des solutions aqueuses d'enzymes pendantde longues périodes par addition d'unealcanolamine etd'un acide organiqueà lasolution. On a constaté maintenant que la stabilité de l'enzyme en milieu aqueux renfermant de petites quantités d'alcool peut être conservée par addition d'un sel d'alcanolammonium, d'ammoniumoude métal alcalind'un acide organique de faible poids moléculaire. La présente invention se rapporte à des compositions aqueuses renfermant des enzymes stabilisées susceptibles d'être employées comme agents de net- toyage, lesdites enzymes ayant une stabilité de longue durée. La présente invention a également pour objet de conférer cette stabilité grâce à l'addition de faibles quantités d'agent stabilisateur ou stabilisant relativement bon marché. Selon la présente invention, il suffit de quantités minimes d'un agent stabilisateur des enzymes et d'un alcool pour obtenir une excellente stabi- lisation de longue durée des compositions et qui se conserventmême àtempéra- ture élevée. Ces compositions sont particulièrement efficaces en tant que préparations de nettoyage utilisables dans un large domaine d'applications. Les compositions de la présente invention renferment les ingrédients cidessous (toutes les quantités ci-après s'entendent en poids): a) de 0,01 à 15% d'un agent stabilisateur des enzymes, consistant en un sel de métal alcalin, d'ammonium ou d'alcanol ammonium d'un acide organique de faible poids moléculaire tel que les acides formique, acétique, propionique, butyrique et valérique, b) de 0,006 à 5% environ d'une enzyme telle que les protéases, les cX-amylases et leurs mélanges, c) de 1 à 25% environ d'un alcool de formule ROH, o R est un radical alkyle comportant 1 à 6 atomes de carbone, et de 10 à 90% environ d'eau. Selon la présente invention, on a constaté qu'un sel de métal alcalin, d'ammonium ou d'alcanol ammonium de certains acides organiques de faible masse moléculaire est capable, en présence d'un monoalcool de faible poids moléculaire, de stabiliser les enzymes protéolytiques ou a- amylolytiques et leurs mélanges, en milieu aqueux. En outre, on a constaté que l'enzyme, ainsi stabilisée, garde son activité pendant de longues périodes, de l'ordre de 12 à 18 mois. Les constituants principaux des compositions de la présente invention sont l'eau, les enzymes, les agents stabilisants et un alcool. L'eau peut constituer de 10 à 90% du poids total de la composition de la présente invention et, de préférence, de 40 à 90%. Bien que cela ne soit pas indispensable, il est préférable d'employer l'eau permutée. Les enzymes stabilisées selon le procédé de l'invention sont les pro- téases, les a-amylases et leurs mélanges. Les protéases, d'origine bactérienne ou fongique, peuvent se classer en trois catégories différentes: protéases acides, neutres et alcalines. Toutes entrent dans le cadre de l'invention. Bien que n'entrant pas faci- lement dans les catégories ci-dessus, on peut utiliser des protéases d'origine animale ou végétale sans sortir du cadre de la présente invention. Ces enzymes sont actives dans le domaine de pH qui s'étend de 3 à 11 environ. Elles présentent en général une activité optimum entre pH 6 et 10 environ. Les protéases catalysent l'hydrolyse des liaisons peptidiques des protéines, des polypeptides et autres composés du même genre. Par rupture des liaisons peptidiques, il se forme des groupes amines et acides libres sur des molé- cules à chalne courte qu'on peut facilement éliminer par un lavage à l'eau et/ou un détergent. On peut employer toutes les catégories de protéases ci-dessous dans le cadre de la présente invention mais, de préférence, on utilise celle dont l'activité est optimum à pH compris entre 6 et 9. Comme exemple de protéase utilisée de préférence, on peut citer la protéase de la sérine. Les a-amylases présentent une activité optimum aux pH acides. Ces enzymes catalysent les réactions de rupture des molécules d'amidon en molécules à chaîne courte qu'on peut ensuite éliminer facilement par lavage à l'eau et/ou undétergent. On peut obtenir les a-amylases à partir de sources ani- males, de graines de céréales ou de source bactérienne ou fongique. On peut ajouter le constituant enzymatique de la présente invention sous la forme d'une préparation d'enzyme du commerce. En général, on les trouve sur le marché sous la forme de poudre sèche, de solution ou de suspension et elles renferment d'ordinaire, de 2 à 80% d'enzyme active en association avec un support inerte tel du sulfate de sodium ou de calcium, chlorure de sodium, glycérol, agents tensioactifs non-ioniques, ou leurs mélanges, et qui cons- titue les autres 20 à 98% du mélange. En tant qu'exemples de préparations de protéase du commerce susceptibles d'entrer dans les compositions de la pré- sente invention, on peut citer les préparations suivantes: SavinaseO, Savinase 8,d& en suspension; EsperaseO, Esperase 8,Oen suspension et Alcalas0vendues par la Société NovoIndustri A/S, Copenhagen, Denmark; et "High Alkaline Protease", Maxatase Pe et Alkaline Protease 201P , vendues par G.B. Fermentation Inc, Des Plaines Ill. En tant qu'exemples de préparations d'a-amylases utilisables ici, on peut citer l'Amalase THC vendu par la Société G.B. Fermentation Inc., Des Plaines, Ill., et le Termamyl 60L, le Termamyl 60(vendu par Novo Industri A/S, Denmark. Comme exemple de préparation enzymatique du commerce renfermant un mélange d'a-amylase et de protéase, on peut citerleMaxatase de la G.B. Fermentation Inc. On utilise de préférence le "Savinase 8,d("en suspension de Novo Industries une préparation d'enzyme protéolytique- alcaline obtenue à partir du Baciîlus Subtilis et renfermant environ 6% en poids d'enzyme et possédant une activité de 8 kilo-unités novo. Les compositions de la présente invention permettent de stabiliser de 0, 006 à 5% environ d'enzyme active. De préférence, la proportion d'enzyme est comprise entre 0,006 et 2,5% en poids. Les agents stabilisants sont des sels de métal alcalin, d'ammonium ou d'alcanol ammonium d'acides organiques de faible masse moléculaire tels que les acides formique, acétique, propionique, butyrique et valérique. On peut utiliser ces stabilisants à raison de 0,01 à 15% environ du poids total de la composition et, de préférence, de 2 à 10% environ et, plus spé- cialement, de 2 à 6% du poids de la composition. Comme on l'a signalé ci-dessus, on peut utiliser comme agents stabilisants des alcanol ammoniums tels que monoéthanol ammonium, diéthanol ammonium et triéthanol ammonium. Le quatrième constituant principal descompositions de l'invention estun alcool qui contribue à augmenter la stabilité enzymatique et qui a pour fonction d'abaisser la viscosité etd'empécher la formation depellicules à la surface des compositions dela présente invention. Ces alcools ont pour formule ROH, o R est un radical alkylecomportant 1à 6 atomes de carbone, bornes comprises, linéaire ou ramifié. Laquantité d'alcool estcomprise entre 1 et25 % environ dupoids total de la composition et, de préférence, entre 4 et 8 %. U Outre les constituants principaux énumérés ci-dessus, les compositions de la présente invention peuvent renfermer d'autres ingrédients tels qu'agents tensioactifs anioniques ou non-ioniques, solvants organiques, agents solu- bilisants et parfums. L'incorporation d'agents tensioactifs anioniques ou non-ioniques a pour avantage d'améliorer la stabilité des enzymes des compositions et, plus encore, d'augmenter notablement leurs propriétés détergentes. On peut incorporer ces agents tensioactifs anioniques ou non-ioniques à raison de 1 à 55% environ et, de préférence, 10 à 30% du poids total de la composition. En tant qu'exemples d'agents tensioactifs non-ioniques, on peut citer: 6 2487850 (1) Les alcools gras éthoxylés, de fOrmule: RO-(CH2-CH20)nH, o: R est un radical comportant 8 à-18 atomes de carbone, et n est un nombre entier compris entre 1 et 500; tels que, par exemple: (a) le produit de la condensation d'une mole d'alcool aliphatique com- portant 12 ou 13 atomes de carbone, linéaire ou ramifié, avec 6,5 moles, en moyenne, d'oxyde d'éthylène; (b) le produit de condensation d'une mole d'alcool aliphatique comportant 12 à 15 atomes de carbone,linéaire ou ramifié, avec 9 moles d'oxyde d'éthylène, et (c) le produit de condensation d'une mole d'alcool aliphatique, compor- tant 12 à 15 atomes de carbone, linéaire ou ramifié, avec 3 moles d'oxyde d'éthylène. On peut trouver dans le commerce les produits (a), (b) et (c) sous les dénominations commerciales de Neodol, Neodol 23-6,5, Neodol 25-9 et Neodol 25-3, respectivement, vendus par la Société- Shell Oil Company. (2) Les acides gras éthoxylés, répondant à la formule: o0 Il R-C-O(CH2CH20)nH o R et n ont la même signification que ci-dessus en (1). (3) Les alkyl phénols éthoxylés, de formule: R - O(CH2CH20)nH, o: R est un radical alkyle comortant 6 à 16 atomes de carbone, et n est un nombre entier compris entre 1 et 500. En tant qu'exemples d'agents tensioactifs anioniques, on peut citer: (1) Les savons - répondant à la formule: Il R - C-OX, o: X est le sodium, le potassium ou l'ammonium, et R est un radical d'acide gras, saturé ou insaturé, Linéaire ou ramifié, comportant 10 à 18 atomes de carbone. (2) Les alkyl benzène sulfonates - répondant à la formule: R - --- S03X, O : X est l'ammonium, le triéthanol ammonium, le sodium ou le potassium, et R est un radical alkyle comportant 8 à 18 atomes de carbone. (3) Les hydroxy alkane suLfonates - répondant à la formule: OH I R - CH-CH2-CH2 S03X, O : X est tel que ci-avant en (2), et R est un radical alkyle comportant 10 à 15 atomes de carbone. (4) Les acides gras sulfonés - répondant à la formule: CH3(CH2)n-COOH, o: S03x X est tel que ci-avant en (2), et n est un nombre entier compris entre 12 et 18. (5) Les agents tensioactifs non-ioniques sulfonés - répondant à la formule: R - O - (CH2CN2O)nH, o: I S03X SO3X X est tel que ci-avant en (2), n est un nombre entier compris entre 8 et 16, et R a la même signification que ci-avant en (1). (6) Les sulfates d'alcool gras - répondant à la formule: CH3(CH2)nCH20 S03X, o: X a la même signification que ci-avant en (2), et n est un nombre entier compris entre 8 et 16. (7) Les agents tensioactifs non-ioniques sulfatés- répondant à la formule: RO - (CH2CH20)n-SO3X, o: X a la même signification que ci-avant en (2), R est un radical alkyle comportant 12 à 18 atomes de carbone, et n est un nombre entier compris entre 1 et 50. (8) Les mono- et di-esters des sulfosuccinates de sodium - de formule: O O Il I R1-O-C-CH- CH2 - CO-R2 o: SO3Na R1 est le sodium, L'hydrogène ou un radical alkyle comportant 1 à 12 atomes de carbone; R2 est un radical alkyle comportant 1 à 12 atomes de carbone. On utilise de préférence les agents tensioactifs non-ioniques du type alcool gras éthoxylé. 248785 0 Les compositions de la présente invention peuvent aussi renfermer des solvants organiques tels que les mélanges isoparaffiniques de la distillation du pétrole. Ils peuvent constituer jusqu'à 75% du poids de la composition et, de préférence, de 10 à 40% environ. Les compositions renfermant lesdits solvants organiques peuvent ainsi renfermer des agents solubilisants tels que, par exemple, les sels de sodium des acides benzène sulfonique, toluène sulfonique ou xylène-sulfonique. Ces agents solubilisants peuvent constituer jusqu'à 10% du poids de la compo- sition et, de préférence, de 3 à 6% environ. Outre les constituants énumérés ci-dessus, on peut incorporer des azurants optiques, des assouplisseurs, des agents anti-statiques, des agents anti- redéposition et de petites quantités de parfums et de colorants. En général, le pH de ces compositions est voisin de 7, toutefois, selon la nature de l'enzyme utilisée, on peut relever le pH par l'addition de NaOH ou bien l'abaisser à l'aide d'acide acétique. On peut effectuer le mélange des constituants des compositions de la présente invention dans un ordre quelconque. Cependant, il est préférable de préparer d'abord un mélange de sel, d'alcool et d'eau et d'ajouter ensuite les enzymes afin d'éviter leur dégradation ou leur désactivation. On peut ajouter les constituants optionnels,tels que les agents tensioactifs, à n'importe quel moment. Les compositions de la présente invention ont de multiples usages. On peut, par exemple, s'en servir comme détachant; on peut les employer dans des opérations du blanchissage domestique comme le trempage et en guise d'additif au cours du cycle de lavage d'un lave-linge automatique. D'autres avantages et caractéristiques de la présente invention apparal- tront à la lecture de la description suivante et des exemples donnés à titre illustratif mais non-limitatif. EXEMPLE 1 On prépare les compositions suivantes et on les stocke à 370 dans des récipients de verre bouchés, pendant les durées indiquées dans le Tableau I, ci-après. On considère qu'une semaine de stockage à 370 correspond à environ 2 à 3 mois de stockage à température ambiante. Chacune de ces compositions à un pH de l'ordre de 7. TABLEAU T Echantillon No. 1 2 3 4 5 6 7 85 95 10 Ingrédients % poids ZO poids % poids % poids % poids % poids % poids % poids % poids % poids * Néodol 2591 15 15 12,5 12,5 10 7,5 5 15 18,25 15 * Néodol 23-6,52 15 15 12,5 12,5 10 7,5 5 15 18,25 15 * Savinase 8,03 suspension 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 * Acétate de sodium 4 0 4 6 4 4 4 0 0 2 * Propionate de sodium 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 * Ethanol 7 7 7 5 5 5 5 8,8 8,8 8,0 * Eau 58 58 63 63 70 75 80 61, 6 59,1 59,1 * % Activité initiale 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 * % Activité après 2 sem.4 97 96 97 97 95 93 92 95 * % Activité après 4 sem.4 99 95 97 95 94 94 93 60 63 95 * % Activité après 6 sem.4 91 88 91 91 88 87 84 51 51 90 * % Activité après 8 sem.4 93 92 97 91 95 95 89 88 Voir page 10. M c'o 0o Co 1-2-3-4-5) - NOTES DU TABLEAU I, ci-avant: 1) Agent tensioactif non-ionique constitué d'un alcool aliphatique compor- tant 12 à 15 atomes de carbone éthoxylé par 9 moles, en moyenne d'oxyde d'éthylène. 2) Agent tensioactif non-ionique constitué d'un alcool aliphatique compor- tant 12 ou 13 atomes de carbone, éthoxylé par 6,5 moles d'oxyde d'éthy- lène en moyenne. 3) Enzyme protéolytique du commerce vendue par la Société "Novo Industries" renfermant 6% d'enzymes actives présentant une activité de 8, 0 kilounités prot6ase Novo. 4) On évalue le taux d'activité résiduel par la méthode au trinitrobenzène sulfonate, en utilisant la caséine comme substrat. L'erreur expérimentale sur les activités est de 5%. ) Les échantillons Nos. 8 et 9 ne sont pas conformes à la présente inven- tion et ils ne figurent ici qu'à titre comparatif. L'examen de ces résultats indique que 1 'enzyme se désactive fort rapidement comme le montrent les échantillons Nos. 8 et 9, si on n'emploie pas d'agent stabilisant selon la présente invention. En outre, comme le montrent les résultats relatifs à l'échantillon No. 10, il suffit de 2% de l'un des agents stabilisants de la présente invention pour obtenir une excellente stabilisation de longue durée. EXEMPLE 2 On prépare une composition conforme à la présente invention, renfermant: 4% en poids d'acétate de sodium en guise de stabilisateur d'enzyme, 1% en poids de Savinase 8,0 en suspension, préparation enzymatique du commerce, vendu par la Société Novo Industries, 7% en poids d'éthanol, 15% en poids d'agent tensioactif non-ionique, obtenu par la réaction d'une mole d'alcool aliphatique renfermant 12 à 15 atomes de carbone avec 9 moles d'oxyde d'éthylène, vendu par la Société Shell Oil Company, sous la dénomination commerciale de "Neodol 25-9", , ' en poids d'agent tensioactif non-ionique, obtenu par la réaction d'une mole d'alcool aliphatique renfermant 12 ou 13 atomes de carbone avec 6,5 moles d'oxyde d'éthylène, 0,25% en poids de parfum, 0,01% en poids de colorant, et 57,74% en poids d'eau déminéralisée. 2487-850 On évalue ensuite le pouvoir nettoyant de cette solution comme prédétachant: on applique cette composition sur deux tissus, l'un taché de sang, de lait et d'encre, l'autre taché d'huile moteur usée. Après avoir traité les tissus à l'aide de la composition de l'invention, on les lave à l'aide d'une compo- sition détergente du commerce, vendue par la Société Procter & Gamble, sous la marque "Extra Action Tide". Après le lavage, on laisse sécher les tissus et on les analyse au moyen d'un colorimètre différentiel Gardener à triple stimulation afin d'évaluer le pourcentage de souillure éliminé. Ce pourcentage est donné colonne 1 du Tableau II, ci-dessous. A titre comparatif, on a lavé à l'aide d'Extra Action Tide", puis analysé des tissus tachés comme précédemment. Les résultats de ces tests comparatifs fi- gurent colonne 2 dudit Tableau II suivant: TABLEAU II * Résultats exprimés en % d'élimination des souillures. Ces résultats montrent clairement que les compositions de l'invention sont des prédétachants efficaces. EXEMPLE 3 On évalue la même composition que celle de l'Exempte 2 en tant qu'additif pour le blanchissage. On lave séparément un tissu souillé de sang, de lait et d'encre et un autre taché d'huile moteur usée à l'aide d'environ 1,2g de composition détergente "Extra Action Tide" et environ 0,75g de composition de l'Exemple 2. On effectue ces deux lavages dans un tergotomètre renfermant environ 1 litre d'eau. Après avoir lessivé des tissus, on les sèche et on évalue le taux d'élimination des souillures à l'aide du même instrument que dans l'Exempte 2. Les résultats de ces essais sont consignés dans la colonne 1 du Tableau III, ci-après. - A titre comparatif, on a lavé séparément dans un tergotomètre des tissus tachés comme ci-dessus à l'aide d"'Extra Action Tide" seul et additionné d'un COLONNE 1 2 Prédétachant selon l'invention aucun Tache: Sang,lait et encre..... 65,0* 43,2 Huile moteur usée 28,4 17,1 additif de lavage du commerce renfermant des enzymes de marque BIZ et on a évalué le taux d'élimination des souillures par la même méthode que cidessus. Les résultats de ces essais figurent dans les colonnes 2 et 3, respectivement, du Tableau III suivant. TABLEAU III * Taux d'élimination des souiZZures. D'après les résultats qui précèdent, il est manifeste qu'on peut employer les compositions de la présente invention comme additif de blanchissage. Bien entendu, la présente invention n'est nullement limitée aux exemples et modes de mise en oeuvre mentionnés ci-dessus; elle est susceptible de nom- breuses variantes accessibles à l'homme de l'art, suivant les applications envisagées et sans que l'on ne s'écarte de l'esprit de l'invention. COLONNE |1 2 Additif Composition selon néant BIZ l'invention Tache: Sang, lait et encre..... 44,2* 20,4 8,6 Huile moteur usée..... 17,8 13,4 13,9 REVENDICATIONS 1.- Composition aqueuse renfermant une ou plusieurs enzymes stabilisées caractérisée en ce qu'elle renferme: a) de 0,01 à 15% environ d'un sel d'acide gras de faible masse moléculaire tel que les sels de sodium, d'ammonium ou d'alcanol ammonium des acides formique, acétique, propionique, butyrique ou valérique; b) de 0,006 à 5% environ d'une ou plusieurs protéases, a-amylases ou leurs mélanges; c) de i à 25% environ d'un alcool de formule ROH, o R est un radical alkyle comportant 1 à 6 atomes de carbone; d) de 10 à 90% environ d'eau. 2.- Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle ren- ferme en outre de i à 55% environ d'un agent tensioactif anionique, nonionique, ou leurs mélanges. 3.- Composition selon la revendication 1, caractériséen ceque laalcanolammoniu est le monoéthanolammonium, le diéthanolammonium ou le triéthanolammonium. 4.- Composition selon la revendication i ou 2, caractérisée en ce que le pH de la composition est compris entre 6 et 10 environ. 5.- Composition selon la revendication 4, caractérisée en ce centage d'eau est compris entre 40 et 90% environ. 6.- Composition selon la revendication 5, caractérisée en ce centage d'enzymes est compris entre 0,006et 2,5% environ. 7.- Composition selon la revendication 6, caractérisée en ce centage d'alcool est compris entre 4 et 8% environ. 8.- Composition selon la revendication 7, caractérisée en ce centage d'agent tensioactif est compris entre 10et 30% environ. 9.- Composition selon la revendication 8, caractérisée en ce centage de sel est compris entre 2 et 6% environ. que le pour- que le pour- que le pour- que le pour- que le pour- 10.- Composition selon la revendication 9, caractérisée en ce que le pH est compris entre 6 et 9 environ. 11.- Composition selon la revendication 10, caractérisée en ce que l'en- zyme est une enzyme protéolytique obtenue à partir de BaciZIus Subtilis. 12.- Composition selon la revendication 11, caractérisée en ce que le sel est l'acétate ou le propionate de sodium. 2 48 785 0 13.- Composition selon la revendication 12, caractérisée en ce que l'al- cool est l'éthanol. 14.- Composition selon la revendication 13, caractérisée en ce que le pourcentage d'agent tensioactif est de 30% environ et en ce que l'agent tensioactif est un mélange renfermant environ 33,3% en poids d'agent tensio- actif anionique et 66,6% en poids d'agent tensioactif non-ionique. 15.- Composition selon la revendication 13, caractérisée en ce que l'agent tensioactif est un alcool gras éthoxylé de formule: RO-(CH2-CH20) nH, o: R est un radical alkyle comportant 8 à 18 atomes de carbone, et n est un nombre entier compris entre 1 et 500. 16.- Composition selon la revendication 15, caractérisée en ce que l'agent tensioactif est un mélange de: a) le produit de condensation d'une mole d'alcool aliphatique comportant 12 ou 13 atomes de carbone, linéaire ou ramifié, avec 6,5 moles, en moyenne, d'oxyde d'éthylène, et b) le produit de condensation d'une mole d'alcool aliphatique, comportant 12 à 15 atomes de carbone, linéaire ou ramifié, avec 9 moles d'oxyde d'éthylène. 17.Composition selon la revendication 16, caractérisée en ce que le mélange d'agents tensioactifs renferme environ 50% de constituant a) et % de constituant b). 18.- Composition selon la revendication 17, caractérisée en ce qu'elle renferme en outre, exprimés en poids: a) de 1 à 10% environ d'agent solubilisant, et b) de 1 à 75% environ d'un mélange isoparaffinique de distillats de pétrole ayant un poids moléculaire moyen de 154. 19.- Composition selon la revendication 18, caractérisée en ce que l'agent solubilisant constitue 3 à 6% environ de la composition, en ce que le mélange isoparaffinique de distillats du pétrole constitue environ 10 à 40% de la composition et en ce que l'agent solubilisant est le xylène sul- fonate de sodium.