FR 2493311 A1 19820507 FR 8120587 A 19811103 En 1975, un nouveau pentapeptide, la méthionine-encéphaline, a été mentionné par Hughes et coll. Nature, 258, page 577 (1975). On trouve ce peptide dans de nombreuses régions du cerveau o il semble agir comme neurotransmetteur de neuromodulateur dans un système central suppresseur de la douleur. Le peptide naturel se fixe de manière steréospécifique sur les sites opiacée-récepteurs partiel- lement purifiés du cerveau, voir, par exemple, Bradbury et coll. Nature, 260, page 793 (1976). Le peptide naturel est également fortement actif dans les essais biologiques de détermination de l'activité opiacée, mais ne présente qu'une activité analgésique faible,fugace, lorsqu'on l'injecte directement dans le cerveau du rat, voir,par exemple, Belluzi et coll., Nature, 260, page 625 (1976). Pour pallier l'absence d'activité in vivo, un certain nombre de chercheurs ont effectué de nombreuses modifications dans la structure de la méthionine-encéphaline, telles que le remplacement de la glycine en position 2 par un D-amino-acide, la N-méthylation de la 1-tyrosine, la substitution de la 4-phénylalanine, par exemple par un méthyle ou un halogène, la modification du C-terminal, etc. pour produire des dérivés d'encéphaline de propriétés et de pouvoirs variables. La présente invention concerne de nouveaux dérivés d'encéphaline et leurs sels acceptables en pharmacie qui approchent le pouvoir de la morphine comme agents analgésiques à la fois par voie orale et par voie parentérale. La présente invention concerne de nouveaux dérivés de la méthionine-encéphaline, l'acide 2,6-C-diméthyltyrosyl-D- méthionyl-glycyl-phénylalanyl-7-aminobutyrique et ses dérivés et l'acide 2,6-C-diméthyltyrosyl-D-méthionyl-glycyl-phénylalanyl- e- aminocaprolque et ses dérivés et leurs sels acceptables en pharmacie. Les composés sont intéressants comme agents analgésiques. Les dérivés d'encéphaline de la présente invention sont représentés par la formule (-) H-2,6-C-diMéTyr-(D)X-Gly-Phé-N(CH2)mCOOR dans laquelle: X représente la méthionine, l'alanine ou la nor-leucine; m est égal à 3 ou 5; et R est l'hydrogène, un groupe alkyle inférieur ou -NR2R3; o R2 et R3 sont identiques ou différents et représentent chacun l'hydrogène ou un alkyle inférieur; le signe (-) désignant le composé représenté, son image spéculaire ou un mélange de racémates; ou leurs sels acceptables en pharmacie. Dans la formule ci-dessus, "C-diM" représente la substitution diméthyl sur le noyau aromatique de la tyrosine. Les substitutions sur la tyrosine de la technique antérieure étaient des N-substitutions et l'on a trouvé que la C-substitution augmente de manière inattendue l'activité des composés. Tous les résidus d'amino-acides identifies ici sont dans la configuration naturelle ou L, sauf autre indication, à l'exception de la glycine qui n'a pas de centre de symétrie, et l'on a utilise les abréviations standards pour les résidus d'amino-acideso Le résidu diméthyltyrosine peut être dans la configuration L, D ou DL. Le terme "alkyle inférieur" désigne des radicaux alkyle à chaîne droite ou ramifiée en C1-C6, c'est-à-dire méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, n-butyle, tert-butyle, n-hexyle, etc. Le terme "sels acceptables en pharmacie" s'entend ici pour désigner les sels d'addition d'acides non toxiques qui sont généralement préparés in situ ou par réaction d'un compose de l'invention avec l'acide organique ou inorganique souhaité selon des procédés bien connus dans la technique. Des sels caractéristiques comprennent le chlorhydrate, le bromhydrate, le sulfate, le bisulfate, l'acétate, l'oxalate, le valOrate, l'olêate, le laurate, le borate, le benzoate, le lactate, le phosphate, le tosylate, le citrate, le maléate, le fumarate, le succinate, le tartrate, le tosylate, le napsylate, etc. On a établi pour la première fois l'activité analgésique des composés de la présente invention dans l'essai à la plaque chaude et l'essai des contorsions des souris PBQ. Essai à la plaque chaude. Mode opératoire La méthode utilisée est une modification de celle décrite par Eddy et Leimback. On place dans la chambre d'expérience deux groupes de 14 souris environ 30 min avant l'essai. Les souris sont placées indi- viduellement sous une éprouvette de 600 ml en verre "Pyrex" sur une plaque chaude (Pyro-magnistir, Lab-Line Instruments, Inc., Melrose Park, IL) dont la température est réglée par un appareil de régulation de température proportionnelle YSI modèle 72 (Yellow Springs Instruments Co., Yellow Springs, Ohio) à 55 - 0,50C. On mesure le temps de réaction de chaque souris pour lécher une patte ou pour sauter (chronographe Lab- chron, Lab-Line Instruments, Inc. Melrose Park, IL) trois fois à intervalles de 20 min. Les souris qui ne répondent pas en 15 s sont rejetées. On donne à dix souris une dose du médicament essayé et a dix souris une solution de sérum physiologique à 0,9% par voie intra- veineuse,20 min après la dernière mesure de temps de réaction. On soumet les animaux aux essais comme précédemment 10 min, 30 min et min après cette injection. Les souris qui ne répondent pas en 30 s sont retirées de la plaque chaude et on leur attribue un temps de réponse de 30 s. On considère que l'analgésie est démontrée chez une souris si son temps de réaction après administration du médicament est plus grand que le temps de réaction moyen du groupe témoin + 2 fois l'écart-type. Le nombre d'animaux présentant l'analgésie dans le groupe traité avec le médicament est comparé avec la même valeur pour le groupe témoin au moyen de l'essai de probabilité exact de Fisher. On calcule les DE50 par l'analyse Log- probit en utilisant le pourcentage de souris présentant l'analgésie dans chaque groupediminué de la même valeur recueillie pour l'échantillon témoin. Essai des contorsions de la souris induites par le PBQ. Mode opératoire On fait jeûner pendant une nuit des groupes d'au moins dix souris males CD-1 (Charles River) de 18-25 g et on leur administre un prétraitement intragastrique (i.g.) par le véhicule (1-2 gouttes d'un mélange de propylèneglycol: Tween 80 1:1 par 10 ml de NaCl à 0,9%) à une dose de 10 ml par kg ou bien avec le médicament soit en solution, soit en suspension homogénéisée. On administre le PBQ par voie i.p. 30 min après en solution à 0,025% dans l'éthanol à 5%. En démarrant min après le traitement par le PBQ, on place chaque souris indi- viduellement dans un bêcher en verre et on compte le nombre de contor- sions pendant la période suivante de 10 min. On considère comme contor- sion une combinaison ou série de mouvements de torsion du dos, rotation pelvienne et extension de la patte arrière (1). Pour obtenir la sen- sibilité'maximale, on établit l'analgésie significative lorsque la fréquence de contorsions d'un animal individuel est de 50% ou moins de la fréquence moyenne du groupe témoin (2). Les estimations de la DE50 et la pente de la courbe de réponse à la dose sont déterminées à partir des données quantitatives en utilisant la méthode logistique de Berkson (3). La DE50 est définie comme la dose qui diminue les contor- sions de 50% ou plus de la moyenne du groupe témoin chez 50% des ani- maux d'essai. La comparaison de l'activité analgésique des composés représentatifs avec celle de la morphine donne les résultats suivants: Les composés de la présente invention peuvent Etre admi- nistrés soit par voie orale, soit par voie parentérale pour soulager la douleur chez les mammifères, à des doses orales de 0,5 à 5 mg/kg de poids corporel et de 0,05 à 3 mg/kg de poids corporel par jour, de pré- férence en doses fractionnées, c'est-à-dire toutes les 4 à 6 heures, selon le besoin. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toute- fois en limiter la portée. EXEMPLE 1 Préparation du tert-butoxycarbonyl-phénylalanyl-ú-aminocaproate de méthyle. A une solution froide de 2,65 g (10,0 mmol) de tert- butoxycarbonyl (Boc)-phénylalanine et 2,00 g (11,0 mmol) de'chlorhydrate d'E-aminocaproate de méthyle dans 25 ml de chlorure de méthylène, on ajoute 1,25 ml (11,2 mmol) de dicyclohexylcarbodiimide et 1,25 mi (1,10 mmol) de N-méthylmorpholine. On agite le mélange de réaction pendant 30 min & la température ambiante et, ensuite, on le place pendant plusieurs jours au réfrigérateur. On filtre la dicyclohexylurée formée dans la réaction et on extrait le filtrat plusieurs fois par l'eau, on sèche sur sulfate de magnésium anhydre et enfin on filtre et on évapore. L'huile résultante se solidifie rapidement pour donner un rendement quantitatif du produit Chromatographie sur couche mince TLC (chloroforme-méthanol-acide acétique-eau 83:15:1:1 en volume), Rf = 0,85. La structure est confirmée par le spectre de RMN. EXEMPLE 2 Préparation du tert-butoxycarbonyl-phénylalanyl-y-aminobutyrate de méthyle. On prépare le composé recherché de manière identique à l'exemple 1 à partir de 2,65 g (10,0 mmol) de Boc-Phé, 1,69 g (11,0 mmol) de chlorhydrate de y-aminobutyrate de méthyle, 1,25 ml de N-méthylmorpholine et 2,27 g (11,0 mmool) de dicyclohexylcarbo- diimide dans 25 ml de chlorure de méthylène, que l'on fait réagir pendant 24 h pour obtenir un rendement quantitatif du produit, TLC (système solvant ci-dessus), Rf = 0,84. EXEMPLE 3 Préparation du chlorhydrate de phénylalanyl- E-aminocaproate de méthyle. On dissout 10,0 mmol de tert-butoxycarbonyl-phénylalanyl- -aminocaproate de méthyle dans 37 ml d'acide acétique cristallisable et on traite par 18 ml d'acide chlorhydrique 5,6 N dans le dioxanne pendant 20 min à la température ambiante. On évapore les solvants et on ajoute de l'éther anhydre pour former un précipité. On filtre le précipité froid et on le lave à l'éther, puis on le sèche sous vide à 65QC pendant 3 h pour obtenir 2,79 g de produit (rendement 84,8%). EXEMPLE 4 Préparation du chlorhydrate de phénylalanyl-y-aminobutyrate de méthyle. On suit le mode opératoire de l'exemple 3 en utilisant des quantités identiques de produits pour obtenir 2,85 g de produit (rendement 98,4%). EXEMPLE 5 Préparation du Boc-Glycyl-phénylalanyl- --aminocaproate de méthyle. A 2,45 g (7,45 mmol) du dipeptide de l'exemple 2 et 2,04 g (8,57 mmol, excès 15%) d'ester de 2,4,5-trichlorophényle de Boc-Gly (OCP) dans 15 ml de diméthylformamide, on ajoute 0,85 ml (7,65 mmol) de N-méthylmorpholine et on laisse reposer le mélange de réaction à la température ambiante pendant 48 h. L'addition de 175 ml de solution froide de bisulfate de potassium a 5% donne un précipité gommeux que l'on extrait par 3 x 50 ml d'acétate d'éthyle. On réunit les extraits organiques et on lave par l'eau, puis par la saumure et on sèche sur sulfate de magnésium anhydre et, après filtration, on évapore pour obtenir une huile. On purifie le produit par chromatographie liquide basse pression en utilisant le gel de silice et en éluant par un gradient linéaire de 100% de chloroforme à 100% d'acétate d'éthyle. On obtient 3,17 g (rendement 94,6%/) de produit huileux. TLC (chloroforme- acetate d'éthyle 1:1 en volume): Rf = 0,09. EXEMPLE 6 Préparation du Boc-Glycyl-phénylalany -y-aỉnobutyrate de méthyle. On prépare le composé ci-dessus mentionné à partir de 2,55 g (8,49 mmol) du dipeptide de l'exemple 4, 3,47 g (9,77 mmol, excès 15%) de Boc-Gly-OCP et 1,1 ml (9,9 mmol) de N-méthylmorpholine dans 17 ml de diméthylformamide en suivant le procédé de l'exemple 5. Après le traitement comme a l'exemple 5, on purifie le produit par chromatographie liquide basse pression en utilisant un gradient linéaire de 95% de chloroforme/5% de Skellysolve B à 100%0 d'acétate d'éthyle sur une colonne de gel de silice de 25 x 100 mm pour obtenir 2,52 g (rendement 70,4%) du produit. TLC (chloroforme-méthanol-acide acétique-eau 83:15:1:1 en volume), Rf = 0>74; TLC (chloroforme- acétate d'éthyle 1:1 en volume), Rf = 0,06. EXEMPLE 7 Préparation du chlorhydrate de glycyl-phênylalanyl-t -aminocaproate de méthyle. On dissout 3,17 g (7,05 mmol) du composé de l'exemple 5 dans 26 ml d'acide acétique et on traite à la température ambiante par 13 ml d'acide acétique et on traite à la température ambiante par 13 ml d'acide chlorhydrique 5,7 M dans le dioxanne pendant 25 min. On évapore les solvants et on lave le solide cristallisé résultant par l'éther et on le sèche sous vide à 60'C pendant 2 hi 30 min pour obtenir 2,68 g (rendement 98,6%). TLC (chloroforme-méthanol-acide acétique-eau 83:15:1:1 en volume): une seule tache, Rf = 0,09. EXEMPLE 8 Préparation du chlorhydrate de glycyl-phênylalanyl-?-aminobutyrate de méthyle. On dissout 2,52 g (5,99 mmol) du Boc-peptide de l'exemple 6 dans 22 ml d'acide acétique et on traite selon le procédé de l'exemple 7 avec 10,7 ml d'acide chlorhydrique 5,6 N dans le 249331 1 dioxanne. Apres traitement et séchage sous vide à 55 C pendant 3 h, on obtient 2,14 g (rendement 98,6%) du produit. L'analyse élémentaire montre que le produit est un tétartohydrate (1/4 H20). TLC (méthanol- acide acEtique-eau-chloroforme 15:1:1:83 en volume), Rf = 0,07 (homogène). EXEMPLE 9 Préparation du Boc-(DL)-2,6-C-diméthyltyrosyl-(D)-méthionylglycyl- phénylalanyl-y-aminobutyrate de méthyle. On refroidit à -60 C une solution de 1,37 g (3,05 mmol) de (DL)-Boc-2,6-Cdiméthyltyrosyl-(D)-méthionine dans 18,5 ml de diméthylformamide et 0,72 ml (6,48 mmol) de N-méthylmorpholine et on ajoute en une fois 0,42 ml (3, 20 mmol, excès 5%) de chloroformiate d'isobutyle. On agite la solution pendant 10 min, tandis que la température remonte à -50 0C, après quoi on ajoute,en 20 min, 1,21 g (3,35 mmol) du chlorhydrate de tripeptide de l'exemple 8 dans 9 ml de diméthylformamide, en maintenant la température au-dessous de -20"C. On agite le mélange de réaction à environ -100C pendant 30 min puis on laisse réchauffer à la température ambiante et on le maintient à la température ambiante pendant 20 h. On ajoute ensuite le mélange de réaction à 300 ml de solution froide de bisulfate de potassium à 5% pour donner un précipité blanc que l'on filtre, on lave a l'eau et on sèche pour obtenir 1,97 g (rendement 86,8%) du produit. TLC (chloroforme-méthanol-acide acétique-eau 83:15:1:1 en volume): deux taches d'égale intensité (diastéréoisomères) à Rf = 0,70 et 0,76. EXEMPLE 10 Préparation du Boc-(DL)-2,6-C-diméthyltyrosyl-(D)-méthionyl-glycyl- phénylalanyl- C -aminocaproate de méthyle. On prépare le composé recherché à partir de 1,29 g (3,35 mmol) du chlorhydrate de tripeptide de l'exemple 7 et on ajoute les mêmes excès molaires de Boc-(DL)-2,6-C-diméthyltyrosyl-(D)- méthionine, de N-méthylmorpholine et de chloroformiate d'isobutyle et le solvant de la même manière qu'à l'exemple 9. Le traitement 2'493311 comme à l'exemple 9 donne 2,19 g (rendement 93,2%) du produit. La TLC dans le système solvant de l'exemple 9 donne deux taches d'égale intensité à Rf = 0,64 et 0,72. EXEMPLE 11 Préparation du chlorhydrate de (DL)-2,6-C-dimthyltyrosyl-(D)-méthionyl- glycyl-phênylalanyl-y-aminobutyrate de méthyle. On traite 1,97 g (2,65 mmol) du peptide protégé de l'exemple 9 pendant 20 min à la température ambiante dans 10 ml d'acide acétique et 5 ml d'acide chlorhydrique 5 M dans le dioxanne et on évapore les solvants. L'addition d'éther suivie de trituration donne une poudre que l'on filtre, on lave à l'éther et on sèche sous vide à 60 C pendant 3 h 30 min pour obtenir 1,81 g (rendement 96,8%) du produit sous forme d'un chlorhydrate à 1,5 H 0, PM 707,28, [a]25 = +5,00 (c = 0,1, méthanol). L'analyse élémentaire et l'analyse de RMN confirment la structure. EXEMPLE 12 Préparation du chlorhydrate de (DL)-2,6-C-diméthyltyrosyl-(D)-mbthionyl- glycyl-phénylalanyl- --aminocaproate de méthyle. On traite comme ci-dessus 2,19 g (2,84 mmol) du penta- peptide protégé de l'exemple 10 par l'acide chlorhydrique dans le dioxanne pour obtenir, près séchage à 60 C pendant 2 h 30 min souS vide, 1,89 g (rendement 91,9%) du produit sous forme d'un chlorhydrate a 1-1,2 H 0. [a]25 =+3 O' (c = 0,1, méthanol). L'analyse élémentaire 2 D. et l'analyse de RM/ confirment la structure. Il est évident pour l'homme de l'art que l'on peut facilement obtenir par un choix des intermédiaires appropriés les acides, des amides et d'autres esters d'alkyle inférieur de l'invention. Des composés représentatifs de l'invention comprennent, mais sans limitation: l'acide (DL)-2,6-C-diméthyltyrosyl-(D)-méthionyl-glycyl-phénylalanyl- L-aminocaproYque; l'acide (DL)-2,6-C-diméthyltyrosyl-(D)-méthionyl-glycyl-phénylalanyl- y-aminobutyrique; 24933 11 le bromhydrate de (DL)-2,6-C-diméthyltyrosyl-(D)-méthionyl-glycyl- phénylalanyl- S-aminocaproate d'isopropyle; le (DL)-2,6-C-diméthyltyrosyl-(D)-méthionyl-glycyl-phénylalanyl-N- méthyl-.-aminocaproamide, etc. La présente invention concerne également des médicaments comprenant comme ingrédient actif au moins un des composés de formule I,en association avec un support ou diluant pharmaceutique. Les composés-de l'invention peuvent être administrés par voie orale, parentérale, nasale, vaginale, rectale ou sublinguale et peuvent être présentés en formesde dosage appropriées pour chaque voie d'adminis- tration. Les formes de dosage solides pour l'administration orale comprennent les capsules, comprimés, pilules, poudres et granulés. Dans ces formes de dosage solides, le composé actif est mélange avec au moins un diluant inerte, tel que saccharose, lactose ou amidon. Ces formes de dosage peuvent également contenir, comme c'est la pratique normale, des substances supplémentaires autres que les diluants inertes, par exemple des agents lubrifiants, tels que le stéarate de magnésium. Dans le cas de capsules, comprimés et pilules, les formes de dosage peuvent également contenir des agents tampons. Les comprimés et pilules peuvent en outre être préparés avec des revêtements entériques. Les formes de dosage liquides pour l'administration orale comprennent les émulsions, solutions, suspensions, sirops et élixirs acceptables en pharmacie contenant des diluants inertes couramment utilisés dans la technique, tels que l'eau. Outre les diluants inertes, ces compositions peuvent également contenir des adjuvants, tels que des agents mouillants, émulsionnants et de mise en suspension, et des édulcorants, arômes et parfums. Les préparations selon l'invention pour l'administration parentérale comprennent les solutions, suspensions ou émulsions aqueuses ou non aqueuses stériles. Des exemples de solvants ou véhicules non aqueux sont le propylèneglycol, les huiles végétales, telles que l'huile d'olive, et les esters organiques injectables, tels que l'oléate d'éthyle. Ces formes de dosage peuvent également contenir des adjuvants, tels que conservateurs, agents mouillants, émulsionnants et agents dispersants. Elles peuvent être stérilisées, par exemple, par filtration sur un filtre à bactéries, par incorpo- ration d'agents stérilisants dans les compositions. Elles peuvent également être fabriquées sous forme de compositions solides stériles que l'on peut dissoudre dans l'eau stérile ou dans un autre milieu injectable stérile immédiatement avant l'emploi. La dose de l'ingrédient actif dans les compositions de l'invention peut varier; cependant, il est nécessaire que la quantité de l'ingrédient actif permette d'obtenir une forme de dosage conve- nable. La dose choisie dépend de l'effet thérapeutique recherché, de la voie d'administration et la durée du traitement. En général, on administre aux mammifères pour obtenir un soulagement efficace de la douleur des doses journalières de 0>5 A 5 mg/kg de poids corporel. RE V E N D I C A T I ONS 1. Dérivé d'encéphaline, caractérisé en ce qu'il est représenté par la formule: (+) H-2,6-C-diMéTyr-(D)X-Gly-Phé-N(CH2) COOR dans laquelle: X représente la méthionine, l'alanine ou la nor-leucine; m est égal à 3 ou 5; et R est choisi parmi l'hydrogène, les groupes alkyle inférieur et les groupes -NR2R3; o' R2 et R3 sont identiques ou différents et représentent chacun l'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur; le signe (+) désigne le composé représenté, son image spéculaire ou un mélange de racémates. 2. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que m est égal & 3. 3. Composé selon la revendication 2, caractérisé en ce que R est l'hydrogène. 4. Composé selon la revendication 2, caractérisé en ce que R est un groupe alkyle inférieur. 5. Compose selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'il consiste en (DL)-2,6-C-diméthyl-tyrosyl-(D)-mdthionyl-glycyl- phénylalanyl-T-aminobutyrate 6. Composé selon la R est un reste -NR2R3. 7. Composé selon la que m est égal à 5. 8. Composé selon la que R est l'hydrogène. 9. Composé selon la que R est un groupe -NR2R3. 10. Composé selon la de méthyle. revendication 2, caractérisé en ce que revendication 1, caractérisé en ce revendication 7, caractérisé en ce revendication 7, caractérisé en ce revendication 7, caractérisé en ce que R est un groupe il. Composé alkyle inférieur. selon la revendication , caractérisé en ce qu'il consiste en (DL)-2,6-C-diméthyl-tyrosyl-(D)-méthionyl-glycyl- phénylalanyl- 6-aminocaproate de méthyle. 12. Nouveaux médicaments, utiles notamment comme analgésiques, caractérisés en ce qu'ils contiennent comme produit actif au moins un composé selon la revendication 1 ou un de ses sels acceptables en pharmacie. 13. Médicament selon la revendication 11, caractérise en ce qu'il contient une quantité thérapeutiquement efficace du produit actif et un support ou diluant acceptable en pharmacie. 14. Médicament selon la revendication 12, caractérisé en ce que le produit actif est le composé selon la revendication 5 ou un de sels sels acceptables en pharmacie.