FR 2492815 A1 19820430 FR 8022693 A 19801023 Nouveau dérivé d'acide cinnamoyl-cinnamique, son procédé de prépara- tion et son application en thérapeutique. La présente invention concerne en tant que produit indus- triel nouveau une chalcone qui est un dérivé d'acide cinnamoyl-cinna- mique. Elle concerne également son procédé de préparation et son appli- cation en thérapeutique notamment en tant qu'agent régulateur de crois- sance. On vient de trouver de façon surprenante que les composés de formule I ci-après qui sont des chalcones appartenant à la famille des dérivés d'acide cinnamoyl-cinnamique sont utiles en thérapeutique, en particulier en tant qu'agents régulateurs de croissance. Ils per- mettent la restauration d'un phénotype cellulaire de cellule normale chez une cellule transformée (par exemple une cellule à croissance anarchique) et sont utiles notamment dans le traitement topique et systémique des cancers et des affections dermatologiques telles que psoriasis, kératose cutanée, acné, eczéma. Le nouveau dérivé d'acide cinnamoyl-cinnamique selon l'invention est caractérisé en ce qu'il est choisi parmi l'ensemble constitué par (i) les dérivés d'acide m-cinnamoyl-cinnamique de formule X2 X4 x3 C(R1)=C(R2)-COY (I) dans laquelle: - Xl, X2, X3, X4, identiques ou différents, représentent chacun l'atome d'hydrogène, un halogène, un groupe alkyle inférieur, un groupe al- koxy inférieur, le groupe NRR' (o R et R', identiques ou différents, représentent chacun l'atome d'hydrogène ou un groupe alkyle infé- rieur), le groupe NO2, CF3 ou OH; - R1 représente l'atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur - R2 représente l'atome d'hydrogène ou le groupe méthyle; - Y représente un groupe OH, OR3 (o R3 est un groupe alkyle inférieur), NRR' (o R et R' sont définis comme ci-dessus) ou le groupe O(CH 2)a NR R5 (o n est un nombre entier ayant pour valeur 1 à 5 et de préférence 2 ou 3-;et R4 et RS, identiques ou différents, représentent chacun l'atome d'hydrogène, un groupe alkyle inférieur et peuvent former avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un groupe hétérocyclique de 5 à 7 sommets susceptible d'être substitué et de comporter un ou plusieurs autreshétéroatomes tels que N et O); (ii) leurs isomères géométriques; et (iii) les sels des composés de formule I et de leurs isomètes géo- métriques. Par groupe alkyle inférieur on entend ici un reste hydro- carboné ramifié ou linéaire contenant 1 a 4 atomes de carbone comme par exemple les groupes méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, n-butyle, isobutyle ou tertiobutyle. De même par groupe alkoxy inférieur on entend ici un groupe dont le radical hydrocarboné contient 1 à 4 atomes de carbone. Par halogène on entend ici un atome de fluor, un atome de chlore, un atome de brome ou un atome d'iode, les atomes d'halogène préférés étant l'atome de fluor et de chlore. Par cycle de 5 a 7 sommets pouvant être substitué et pou- vant contenir éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomeson Zut men- tionner notamment les groupes pyrrolyle, imidazolyle, pyrazolyle, - :i-midazolidinyl.e,.pyrzolidinyle, pyrazoliditnyle, pipéridyle, pipera- zinyle, morpholinyle, homopipéridinyle, 4-méthylpipéridyle, 4-méthylpipérazinyle, 4-phénylpipérazinyle, 4-p-chlorophénylpipéra- zinyle et 4-0-hydroxyéthylpipérazinyle. Les isomères géométriques des composés selon l'invention peuvent être de configuration "cis-cis", "trans-trans", "cis-trans" et "trans-cis". Par sels on entend ici (i) les sels minéraux obtenus a partir d'un acide de formule I (Y=OH) avec une base minérale (notam- ment NaOH, KOH, NH3, Ca(OH)2), (ii) les sels d'addition d'acide obtenus à partir d'un acide de formule I (Y=OH) avec une base organique et (iii) les sels d'addition d'acide obtenus à partir d'un composé de formule I présentant au moins un reste basique avec un acide minéral ou organique. Les composés préférés sont les dérivés d'acide m-cinna- moyl-cinnamique tels que Y=0H, alkoxy en C1-C4, -(4-méthylpipérazi- nyl)-éthyloxy; X =H, Cl, 0CR3; X2=H, 0CR3, X3=H, OCH3; X4=H, OCH3, Ri=H ou CH3 et R2=H. 249 2 8 1 5 3. Le procédé de préparation que l'on préconise selon l'in- vention pour la préparation d'un composé de formule I est caractérise en ce qu'on condense un dérivé d'acide acétyl-cinnamique de formule CH3CX4 C(R1)=C(R2)-COY (IV) (o X4, Y, R1 et R2 sont définis comme ci-dessus) avec un benzaldéhyde de formule X CHO (V) X X3 (o X1, X2 et X3 sont définis comme ci-dessus), et en ce que, si nécessaire, on sépare les isomères géométriques. De façon avantageuse, cette réaction est réalisée en fai- sant réagir IV et V dans une solution aqueuse d'un alcali (de préfé- rence une solution aqueuse de NaOH à 400 g/1), ou dans un alcool infé- rieur en C 1-C4 saturé par HC1 gazeux. Cette technique convient parfai- tement à la synthèse des acides I o Y est OH quand on opère en solution aqueuse en présence d'un alcali tel que la soude, à partir d'un acide ou d'un ester de formule IV. Quand on opère dans un alcool inférieur saturé en HC1 gazeux, l'acide de formule IV donne l'acide de formule I et respectivement l'ester de formule IV donne l'ester de formule I; pour l'obtention d'un acide, l'alcool inférieur préféré est l'éthanol, et pour l'obtention d'un ester, l'alcool infé- rieur préféré est celui qui correspond au groupe ester du composé IV. L'acide de formule I (Y = OH) peut être, le cas échéant, soumis à une réaction d'estérification ou d'amidification pour donner un ester ou une amide. De mgme l'ester de formule I (Y = alkoxy en CC-C4) peut être, le cas échéant, soumis à une réaction de saponification, de transestérification ou de transamidification pour donner un acide, un ester ou un amide. La séparation des isomères géométriques peut être effectuée soit après la réaction de condensation, soit après les éventuelles saponifications, estérifications et amidifications envisa- 24928 5 gées ci-dessus. De préférence si cette séparation est jugée nécessaire elle sera mise en oeuvre après la réaction de conden- sation, les isomères géométriques ainsi obtenus étant alors, le cas échéant, saponifiés, estérifiés ou amidifiés. Les dérivés d'acide acétyl-cinnamique de formule IV L qui sont des produits intermédiaires nouveaux à l'exception des acides (Y = OH, R1 = R2 = X4 = H) et (Y = X4 = OH, R1 = R2 = H) décrits dans CA 84, 164 457q et respectivement CA 89, 108 943m_7 peuvent etre préparés à partir d'un dérivé de 2-mnéthyl-2-phényl- I n 1,3-dioxolanne de formule H C-C I (II) 3 i, 00 - CO-R1 (o X4 et R1 sont définis comme ci-dessus). Dans une première étape, on condense un composé de for- mule II au moyen (a) soit d'un phosphonoalkanoate de triéthyle (et en particulier le phosphonoacdtate de triéthyle ou le phosphono-2 propionate de trie éthyle) dans les conditions de la réaction de HORNER-M-ONS, en pré- sence d'hydrure de sodium dans la diméthylformamide; (b) soit d'acétate d'éthyle dans l'éthanol selon CLAISEN en pré- sence de sodium dans le xylène; pour obtenir le composé III de formule -- X4 (III) CH-C c(lR)=C(R)-C-o-CH CH 1 2 ii 2 3 Puis, dans une seconde étape, on procède A la déprotec- tion du groupe dioxolannyle au moyen d'un acide concentzé (HC1 5N de préférence) puis, pour obtenir le produit IV utilise comme matière première dans le procédé de l'invention, on procède par exemple à une saponification pour avoir l'acide IV, et à une estérification (ou transestérification) pour avoir l'ester IV. 24928 15 L'invention concerne également en tant que produits intermédiaires nouveaux les composés de formule IV o Y, X4, R1 et R2 sont définis comme ci-dessus avec la condition sup- plémentaire: que l'un au moins des R1 et R2 est différent de H quand X4 est Hou OH. On a donné ci-après des exemples nullement limitatifs de préparation de dérivés d'acide cinnamoyl-cinnamique de formule I. Préparation I. 1 Obtention de l'acide 3-[5-(p-chlorocinnamoyl)-2-méthoxyphényl-but- 2-ène-oigue. (exemple 9; n de code 955) ClC H CH CH- CO - _ CH3 C(CH3)- CH - C0O2C2H5 a) 3-[5-(l,1-F.thylènedioxy-éthyl)-2-méthoxy-phényl]-but-2-ène- oate d'éthyle. A 0 C, on ajoute goutte à goutte 0,24 mol.(54 g) de phos- phonoacétate de triéthyle à 0,3 mole(7,2 g) d'hydrure de sodium en sus- pension dans 500 ml de N,N-diméthylformamide. On laisse revenir lemilieu iactionnel à tampérature ambiante (15-25 C) sous agitation. Apres 5 h. le dégagement d'hydrogène est terminé. On porte alors le milieu réac- tionnel à -40 C et on additionne lentement 0,2 mole(47 g) de 5- (1,1- éthylènedioxy;'-éthyl)-2-méthoxy-acétophénone. On laisse revenir à température ambiante et on agite pendant 12 h puis on hydrolyse sur de l'eau glacée. Après extraction à l'éther, lavage des phases êthérêesjusqu' à neutralité, séchage et évaporation du solvant, on recueille 45 g (rendement = 73%) du produit attendu qui se présente sous forme d'huile. b) Acide 3-(5-acétyl-2-méthoxy-phényl)-but-2-ène-orque. 45 g (0,147 mol) de l'ester précédent sont dissous dans 500 ml d'éthanol et 200 ml de soude à 10%. Après chauffage du mélange réactionnel 2 h à reflux, on laisse refroidir puis on acidifie à l'acide chlorhydrique 5N. On laisse précipiter le produit attendu et après filtration on le lave à l'eau dlis à l'alcool. Par recristallisation dans 150 ml de méthanol, on obtient 15 g du produit désiré À F 194 C. c) Acide 3-[5-(p-chlorocinnamoyl)-2-méthoxyphényl]-but-2-ène- o:syLe. 4,7 g (0,02 mole de l'acide précédemment obtenu sont dissous dans 30 ml de soude à 200 g/l.On ajoute au milieu reactionnel 2,8 g (0,02 mole)de parachlorobenzalddhyde et on agite pendant 2 h. Après acidification du mélange réactionnel le produit désiré préci- pite. On filtre puis on lave le précipité à l'eau. Après recristalli- sation dans 300 ml d'éthanol on obtient 3 g de produit pur. F =215 C. Préparation II. Obtention de l'acide 3-(5-cinnamoyl-2-mdthoxyphMyl)-but-2-ène-oqgue. (exemple 5; n de code 863) x CH = CH - CO -__ - OCH3 C(CH3)= CH - C02H En procédant comme indiqué au stade c) de la prépa- ration I, à partir de I g (4,25 millimoles) d'acide (3-(5-acetyl-2- méthoxy-phrnyl)-but-2-ène-oique, 10 ml de soude à 200 g/1 et 0,45 g (4,25 millimoles) de benzaldéhyde, on obtient 1,l g du produit pur désiré. F = 1900C. Préparation III. Obtention de l'acide 5-cinnamoyl-2-mdthoxy-cinnamigue. (exemple 7?, n, àc code 926) -CH = CH = CO / OCH3 CH = CH - CO2H 7 2 4 9 2 8 1 5 a) 3-t5-(1,-Ethylènedioxy-éthyl)-2-méthoxyphényj.4prop-2-ène- oa te A 'éthZle. A O'C, on ajoute goutte à goutte un mélange de 40 ml d'acétate d'éthyle et 1 cm d'éthanol à une suspension de 3,5 g (0,15 mol) de sodium en billes dans 200 ml de xylène. On ajoute ensuite 22 g (0,1 molW de 5-(1,1-éthylènedioxy -éthyl)-2-méthoxy- benzaldéhyde dissous dans 50 ml de xylène. On laisse revenir le milieu réactionnel à température ambiante et on agite pendant 3 h. On additionne alors 50 ml d'acide acétique. Après disparition totale du sodium on ajoute 40 ml d'eau. Après extraction à l'éther, lavages à la soude puis à l'eau jusqu'à neutralité on évapore les phases éthérées pour obtenir 24 g (huile) du produit attendu. b) -(5-Dcétyl-2- 2 On dissout 9,6 g de l'ester obtenu au stade a) dans 150 ml d'éther et on additionne 20 ml d'acide chlorhydrique 5N. On agite pen- dant 12 h. Après extraction par le mélange éther-CH2C12 (1:1) v/v puis lavages à l'eau, on obtient après évaporation des phases organiques 7,5 g du produit attendu. F.=90 C. c) Acide 3-(5-acétyl-2-méthoxvphényl_-proe-2- éne-;; 24 g (0,08 mo1E de l'ester obtenu au stade b) sont dissous dans 250 ml de méthanol et 50 ml de soude à 400 g/l.Après chauffage du mélange réactionnel 2 h à reflux, on laisse refroidir puison acidifie à l'acide chlorhydrique 5N. On laisse précipiter le produit attendu et, après filtration, on lave à l'eau puis à l'éthanol et enfin à l'éther isopropylique. On obtient 13,6 g du produit désiré. F= 203C. d) Acide 3-(5-cinnamoyl-2-méthoxyphényl)-prop-2-ène-oique. Au départ de 10 g (0,045 mole de l'acide obtenu au stade c), 80 ml de soude à 20% et 5 g (0,045 moi) de benzaldéhyde et selon un mode opératoire analogue à celui décrit au stade c) de la prépara- tion I, on obtient 11,5 g du produit pur désiré. Fe 204 C. Préparation IV. Obtention du 3-[m-(p-chlorocinnamoyl]-prop-2-ène-oate d'éthyle. (exemple 3; n de code 631) C y CH=C-C X C CH=CH-COOEt - autre nomenclature: m-(p-chlorocinnamoyl)-cinnamate d'éthyle - On dissout 12 g (0,055 mole)de l'ester éthylique de l'acide 3-acétyl-cinnamique dans 120 ml d'éthanol. On additionne 8 g (0,057 mole)de para-chlorobenzaldéhyde puis 35 ml d'éthanol anhydre saturé d'acide chlorhydrique gazeux, On agite le milieu réactionnel pendant 10 h. Par refroidissement V 0 C du milieu réactionnel, le pro- duit recherché précipite. On filtre puin on lave a l'hexane. On obtient ainsi 13,5 g (rendement = 72%7) du produit pur attendu. F= 1380C. De façon non limitative on a consigné dans le tableau I ci-après un certain nombre de composés selon l'invention. Les produits selon l'invention sont utiles en thérapeu- tique en tant qu'agents favorisant la restauration d'un phénotype cel- lulaire de cellule normale chez une souche transformée. Ils peuvent être utilisés en particulier pour la prévention et le traitement des cancers, pour le traitement topique ou systémique des affections dermatologiques comme par exemple les kératoses cutanées, l'acné, le psoriasis, les eczémas, les verrues ou tout autre désordre dermatolo- gique impliquant une altération du tissu corné et pour le traitement des altérations inflammatoires ou dégénératives des muqueuses, car- tilages, muscles ou tendons, comme par exemple l'arthrose, les rhuma- tismes infectieux. On rappelle que, quand on cultive des cellules normales (cellules saines) sur un milieu nutritif donné dans un espace donné, on observe qu'après un certain laps de temps que le nombre de cellules présentes est constant (confluence), et que quand on cultive dans les mêmes conditions des cellules transformées (cellules anor- males ayant un développement anarchique) on n'obtient pas un nombre de 2 4 928 1 5 cellules constant, la prolifération cellulaire ne cessant pas (absence de confluence). On a résumé ci-après les résultats pharmacologiques obte- nus sur un test de restauration de l'inhibition de croissance à con- fluence d'une culture de cellules transformées. Le protocole opératoire utilisé a été décrit ci-après. 000 cellules murines sont ensemencées sur une surface de 0>2 cm sur un milieu de culture "Minimum Essential Medium" avec des sels de EARLES et 107. de sérum de veau foetal. Au bout de 4 h les cellules ont adhéré au support. Le milieu de culture est alors remplacé par le même milieu contenant le produit à tester dissous dans le DMSO. A intervalles réguliers sur une période de 2 semaines, les cellules sont numérées après trypsination. La courbe de croissance obtenue est comparée à celle obtenue en l'absence de substance à tes- ter. L'effet de la drogue est évalué par la concentration minimale nécessaire pour inhiber toute croissance à partir du moment o la confluence est atteinte. Les résultats obtenus ont été regroupés dans le tableau II ci-après, qui contient également les résultats relatifs à la toxicité (DL-O ou DL-50) chez la souris par voie intrapéritbnéale. Selon l'invention, on préconise une composition théra- peutique, caractérisée en ce qu'elle renferme,en association avec un excipient physiologiquement acceptable, au moins un composé de for- mule 1, un de ses isomères géométriques ou l'un de leurs sels ph.armaceutiquement acceptables. TABLEAU I (R 1"C(R2)-Coy o co 1%> O M M X2 dixIx Point de Exemple N de codeX1 X2 X3 X4 R1 fus n (C 2 R1 R fusion (oC) 1 595 4-C1 H H H H H OH 250 3 3 3 250 2 596 3-OCHi 4-OCH3 5-OCR3 H H H oc2H5 133 3 631 4-C1 H H H H R oc H5 138 O2H5 4 819 H H H H H H OH 188 863 R H H 2-O0C3 3 H OHR 190 6 919 H H U 2-OCH3 H O(CH2)2-N N-CH3 180 difumarate 7 926 H H H 2-OCH H H OR 209 8 927 4-OCH3 H H 2-OCH3 H H OH 230 9 955 4-Cl H H 2-OCHR3 CH H OH 215 _. 3.._ _1 24928 1 5 i ô T A B L E A U I I *.Référence: acide rétino$que: 5 Pg/ml xctI Concentration d'inhibition ExempleN de code sToxicts de croissance à confluence Exemp_ e de codesouris (mg/kg) en >g/mî * en)g/ml - 1 595 DL-O 1600 2 596, DL-O > 1600 3 ' 631 f DL-0 ? 1600 4 819 DL-50 = 450 > 10 j 863 DL-50 = 550 5 à 10 6 919 DL-50 = 300 7 926 DL-50 =1000 8 927 DL-0 > 800 > 10 9 955 DL-0 >/ 1600 5 l1 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 24928 5 R E V E N D I C A T I ON S ___________________________ 1. Nouveau dérivé d'acide cinnamoyl-cinnamique, caractérisé en ce qu'il est choisi parmi l'ensemble constitué par (i) les dérivés d'acide mcinnamoyl-cinnamique de formule x.X X _CH-C X 4 C(R1)=C(R2)-COY (I) dans laquelle: - X1, X2, X3, X4, identiques ou différents, représentent chacun l'atome - d'hydrogène, un halogène, un groupe alkyle inférieur, un groupe alkoxy inférieur, le groupe NRR' (o R et R', identiques ou diffé- rents, représentent chacun l'atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur), le groupe NO2, CF3ou OR; - R représente l'atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur; - R2 représente l'atome d'hydrogène ou le groupe méthyle; - Y représente un groupe OH, OR3 (o R3 est un groupe alkyle inférieurs NRR' (o R et R' sont définis comme ci-dessus) ou le groupe O(CH2) NR4R5 (o n est un nombre entier ayant pour valeur 1 a 5 et de préférence 2ou 3-; et R4 et R5 identiques ou différents, représentent chacun l'atome d'hydrogène, un groupe alkyle inférieur, et peuvent former avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un groupe hétérocyclique de 5 à 7 sommets susceptible d'être substitué et de comporter un ou plusieurs autres hétéroatomes tels que N et O); (ii) leurs isomères géométriques; et (iii) leurs sels. 2. Nouveau dérivé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le groupe hétérocyclique NR4R5 est choisi parmi l'ensemble cons- titué par les groupes pyrrolyle, imidazolyle,pyrazolyle, imidazoli- dinyle, pyrrolidinyle, pyrazolidinyle, pipéridyle, pipérazinyle, mor- pholinyle, homopipéridinyle, 4-méthylpipéridyle, 4-méthylpipérazinyle, 4-phénylpipérazinyle, 4-p-chlorophénylpipérazinyle et 4-P-hydroxyéthyl- pipérazinyle. 24928 1 5 3. Nouveau dérivé selon la revendication 1, caractérisé en ce que Y est OH, alkoxy en C1-C4 ou P-(4-méthylpipérazinyl)-éthoxy, X1 est H, Cl ou OCH3, X2 est H ou OCH3, X3 est H ou OCH3, X4 est H ou OCR3, R1 est H ou CH3 et R2 est H. 4. Acide m-(p-chlorocinnamoyl)-cinnamique. 5. m-(3,4,5-Triméthoxycinnamoyl)-cinnamate d'éthyle. 6. m-(p-Chlorocinnamoyl)-cinnamate d'éthyle. 7. Acide m-cinnamoyl-cinnamique. 8. Acide 3-(5-cinnamoyl-2-mâthoxyphényl)-but-2-ène-o;que. 9. 5-Cinnamoyl-2-méthoxy-cinnamate de f -(4-méthyl- pipérazinyl)-éthyle. 10. Acide 5-cinnamoyl-2-méthoxy-cinnamique. 11. Acide 5-(p-méthoxycinnamoyl)-2-méthoxycinnamique. 12. Acide 3-/-5-(p-chlorocinnamoyl)-2-méthoxyphényl/-but- 2-ène-oique. 13. Procédé de préparation d'un composé de formule I selon la revendication 1, ledit procédé étant caractérisé en ce qu'on condense un dérivé d'acide acétyl-cinnamique de formule C(R1)=C(R2)-COY, (IV) (ou X4, Y, R1 et R2 sont définis comme ci-dessus) avec un benzaldéhyde de formule X et en ce que, si nécessaire, on sépare les isomères géométriques. 14. Procédé selon la revendication 13 pour préparer un acide de formule I o Y est OH, caractérisé en ce que l'on fait réagir un dérivé d'acide acétyl-cinnamique IV (o Y est OH ou alkoxy en C1-C4) avec un benzaldéhyde V dans une solution aqueuse d'un alcali, de préférence une solution aqueuse de NaOH à 400 g/l. 15. Procédé selon la revendication 13 pour préparer un composé de formule I o Y est OH ou alkoxy en C]-C4, caractérisé en ce que l'on fait réagir un dérivé d'acide acétylcinnamique IV (o Y est OH ou alkoxy en Cl-C4) avec un benzaldéhyde V dans un alcool inférieur en C1-C4, l'alcool en C1-C4 préféré pour l'obten- tion de l'ester Y = alkoxy en C1-C4 étant celui qui correspond au groupe ester du composé IV. 16. Composition thérapeutique, caractérisée en ce qu'elle renferme, en association avec un excipient physiologiquement accep- table, au moins un dérivé d'acide cinnamoyl!cinnamique selon l'une quelconque des revendications 1 à 12 en tant qu'ingrédient actif. 17. Produit intermédiaire nouveau intervenant dans la syn- thèse des composés de formule I, caractérisé en ce qu'il répond à la formule générale CH3CO (Iv) (R-)=C(R2)-coo) dans laquelle X4, R1 et R2 sont définis comme ci-dessus, avec la con- dition supplémentaire qu'au moins un des R1 et R2 est différent de H quand X4 est H ou OH.