FR 2492827 A1 19820430 FR 8119340 A 19811014 1. La présente invention se rapporte à une nouvelle -désoxyapramycine. Des modifications chimiques d'antibiotiques cons- titués d'aminoglucosides ont été étudiées de manière impor- tante pour renforcer l'action antimicrobienne et réduire les effets secondaires. La demanderesse a trouvé que l'ac- tion antimicrobienne de l'apramycine (par exemple,décrite sous le nom de facteur II de nébramycine dans la demande de brevet japonais publiée n0 51-32719) est renforcée par rem- placement du groupe 5-hydroxy par un hydrogène, et est arri- vée à la présente invention. La présente invention se rapporte à une nouvelle -désoxyapramycine représentée par la formule suivante (1): 2. H2N, OH NH2 (1) lUi -.. Dans la présente invention, la-5-désoxyapramycine représentée par la formule (I) comprend des bases libres et leurs sels, et, en particulier, leurs sels d'addition avec les acides, non toxiques, pharmaceutiquement acceptables. Les acides qui peuvent former les sels d'addition avec des acides sont des acides minéraux, tels que l'acide chlorhy- drique, l'acide bromhydrique, l'acide iodhydrique, l'acide sulfurique, l'acide phosphorique et l'acide carbonique, et des acides organiques tels que l'acide acétique, l'acide fumarique, l'acide malique, l]acide tartrique, l'acide ma- léique, l'acide citrique, l'acide mandélique, l'acide ascor- bique et l'acide gallique. Le composé (I) de la présente invention est pro- duit selon la séquence de réactions suivantes. (Séquence de réactions) Première étape Protection des groupes.amino HO Deuxième étape Protection des groupes 5- et 6- hydroxy Troisième étape Protection des groupes 6'-, 2"-i 3"-,et 6"hydroxy 3. OH OHII (il) OH x (III) Ho' OH -OH HO (Iv) EC - NM O y_ qm 4. z1o NEC (VI) XHN oz1 NEK 24928T 7 Quatrième étape Enlèvement des groupes de protec- tion en positions et 6 Cinquième étape Protection du grou- pe 6-hydroxy Sixième étape Remplacement de groupes 5-hydroxy par un halogène NEC (V) O- -y (VIl) NHD NEC (VIII) Septième étape Enlèvement par réduc- tion d'halogène en position 5 Huitième étape Enlèvement des grou- pes de protection OH H2N. OH OH (I) 5. XHN. z1o x oz1 R XZN zioo oz' NEC NEC ix) NEC 6. 2492827 Dans ces différentes formules, X représente un groupe de protection du groupe amine, Y représente un grou- pe cyclique de protection du groupe hydroxy, Z1 et Z2 re- présentent chacun un groupe de protection du groupe hydroxy et R représente un halogène. (Première étape) Dans cette étape, les groupes 1-, 3-, 2'-, 7'- et 4"-amino de lapramycine sont protégés. Comme groupes de protection à introduire, les groupes qui peuvent être faci- lement retirés après terminaison de la réaction sont de préférence employés. Par exemple, des groupes tels que le groupe benzyloxycarbonyle o le noyau de benzène peut être substitué convenablement, les groupes formyle, t-butyloxy- carbonyle, p-amyloxycarbonyle, méthoxycarbonyle, éthoxycar- bonyle, p-toluènesulfonyle, phtaloyle, m-nitrophénylthio et triphénylméthylthio sont indiqués à titre d'exemples, et, en particulier, le groupe benzyloxycarbonyle est de préférence employé. Le procédé d'introduction de ces groupes de pro- tection est connu, et, dans le cas o l'on introduit le grou- pe benzyloxycarbonyle en tant que groupe de protection, plus de 5 équivalents de chlorure de carbobenzoxy peuvent être utilisés dans la réaction. (Deuxième étape) Dans cette étape, les groupes 5- et 6-hydroxy sont protégés. Comme groupes de protection les groupes qui sont condensés avec les groupes 5- et 6-hydroxy pour former des groupes cycliques sont de préférence employés. Par exemple, un dialkylctal de cyclohexanone, un dialcoxypropane, etc. peuvent être utilisés comme agents de protection et, de pré- ference, on emploie le diméthylcétal de cyclohexanone. Les agents de protection sont employés dans la réaction en excès pour protéger les groupes 2"-, 3"- et 6"-hydroxy en même temps que les groupes 5- et 6hydroxy et puis les groupes de protection introduits aux positions 2"1, 3" et 6" sont reti- rés sélectivement par hydrolyse avec un acide faible, tel que l'acide acétique, pour donner le composé protégé en 5,6. 7 2492827 Cette étape est effectuée de manière classique dans le domaine de la chimie des sucres et peut être obte- nue dans des solvants inertes convenables (par exemple le benzène, le toluène, le xylène, etc.) en présence d'une quan- tité catalytique d'acides (par exemple l'acide formique, l'acide acétique, l'acide p-toluènesulfonique, etc,) (Troisième étape) Dans cette étape, les groupes 6'-, 2"-, 3"- et 6"- hydroxy sont protégés. Les groupes de protection à introdui- re sont les groupes qui peuvent être facilement retirés après terminaison de la réaction, par exemple les groupes formyle, acétyle, etc., et la réaction peut être réalisée d'une manière classique, Par exemple, dans le cas o l'on introduit le groupe acétyle, plus de 4 équivalents d'anhy- dride acétique peuvent être utilisés dans la réaction. (Quatrième étape) Dans cette étape, les groupes de protection en po- sitions 5 et 6 introduits dans la seconde étape sont reti- rés et la réaction peut être obtenue par hydrolyse avec un acide. Des acides disponibles sont des acides minéraux, tels que l'acide chlorhydrique, l'acide sulfurique,l'acide phos- phorique, et des acides organiques tels que V'acide formi- que, l'acide acétique, etc. à partir desquels des acides con- venables peuvent être choisis de préférence selon le genre de groupes de protection. (Cinquième étape) Dans cette étape, le groupe 6-hydroxy est proté- gé et la réaction peut être réalisée selon la troisième étape; dans la réaction, 1 équivalent de l'agent de protec- tion est utilisé. Le composé dans lequel le groupe 5-hydro- xy est protégé est fourni comme sous-produit, et, ainsi,le composé protégé en position 6 peut être séparé de préféren- ce suivant des manières classiques telles que la chromato- graphie. (Sixième étape) Dans cette étape, le groupe 5-hydroxy est rempla- cé par un halogène et la réaction peut être obtenue de ma- 8. nière classique. Comme agents d'halogénation, on indique à titre d'exemples un acide halogénhydrique gazeux, un halogé- nure de phosphore, du brome ou de l'iode et du phosphore, du chlorure de thionyle et du chlorure de sulfuryle et, en par- ticulier, le chlorure de sulfuryle est de préférence employé pour remplacer le groupe hydroxy en position 5 par un chlore. (Septième étape) Dans cette étape,l'halogène en position 5 intro- duit dans la sixième étape est retiré par réduction, et la réaction peut facilement être réalisée en présence d'un hy- drure de tri-n-butylétain. Cette réaction est de préférence réalisée dans des solvants hydrocarbonés (par exemple le benzène, le toluène, etc.) et, si cela est nécessaire, en présence d'un initiateur pour la réaction radicalaire tel que l'azobisisobutyronitrile. (Huitième étape) Dans cette étape, les groupes de protection du groupe amino et les groupes de protection du groupe hydroxy sont retirés et la réaction peut être réalisée suivant des manières elassiques telles que l'hydrolyse et l'hydrogénation catalytique. Par exemple, si le groupe de protection du grou- pe amino est le groupe benzyloxycarbonyle et que le groupé de protection du groupehydroxy est le groupe acétyle,le groupe de protection du groupe amine peut être retiré par hy- drogénation catalytique, en utilisant du palladium-carbone comme catalyseur, et puis le groupe de protection du groupe hydroxy est retiré par hydrolyse avec un alcali. La 5-désoxyapramycine et ses sels non toxiques dans la présente invention ont des activités antimicrobiennes su- périeures et présentent des effets plus puissants, contre certains genres de bactéries-gram-positives et gram-négati- ves, que l'apramycine. Les concentrations d'inhibition minima (CIM, pg/ml) de la 5-désoxyapramycine et de ltapramycine sont présentées comme suit. 9. 24928t7 Composé 5-dé- Apramy- i soxy- cine Nom des bactéries apranmy- __cine j _ Staphylococcus aureus AP01, AAD(4') " " ATCC 25923 " " No. 74 " epidermidis ATCC 14990 I"" TB-172 Escherichia coli W677/R5HL.AAC(6')-4 " " W677/JR88.AAC(3)-I " " W677/JR76.2APH(3')-II+ AAD(2") " " W677/JR214AAD(2") Pseudomonas aeruginosa 3796 AAC(6')-3 I" " PP-6 Proteus rettgeri Ret-29 " inconstans IN-23 " vulgaris ATCC 6390 f"" TB708 " mirabilis Pm-71 Serratia marcescens ATCC-13880 I" " MA-48 Enterobacter cloacae C1-126 Citrobacter freundii Ct-27 Klebsiella pneumoniae ATCC-27736 9" " K1-159 Moraxella villon AAC(6')-2 Notes: 3,13 1,56 1,56 0,39 0,39 6,25 6,25 6,25 3,13 6,25 3,13 0,78 0,78 1,56 1,56 1,56 6,25 12,5 1,56 1,56 1,56 3,13 6, 25 1,56 3,13 0,39 0,39 6,25 12,5 12,5 6,25 12,5 3,13 1,56 1,56 3,13 3,13 3,13 3,13 3,13 3,13 3,13 6,25 observé selon le procédé standard pour la détermi- nation de la CIM1)2) réglé par Japan Society of Chemotherapy, o le disque pour l'expérimentation de sensibilité à l'antibiotique [milieu modifié de Mueller-Hinton] est utilisé comme milieu de cul- ture. o cultivé à 37 C pendant 17 heures. o le volume des bactéries pour l'inoculation est 106CFU/mI. , _ a i i 10. 2492827 1) Chemotherapy 16(1), 98-99-1968 2) Chemotherapy 22(6), 1126-1128, 1974 Comme présenté dans le tableau ci-dessus, le composé (1) de la présente invention a des activités anti- microbiennes puissantes contre les bactéries gram-positives et gramnégatives et est utile comme produit chimique pour l'utilisation médicale chez les êtres humains et pour l'uti- lisation chez les animaux. Par exemple, le composé est uti- lisé pour le traitement et l'empêchement de diverses infec- tions provoquées par le Serratia marcescens, le Proteus rettgeri, etc. En outre, le composé (1) de la présente in- vention peut être ajouté à des produits alimentaires péris- sables, sous forme de bactéricide, et en outre, appliqué à des emplacements et à-des ustensiles o il est possible que des bactéries existent, en tant que produit désinfec- tant. Le composé (1) de la présente invention peut être administré aux êtres humains et à d'autres animaux par voie orale ou parentérale. En particulier, les sels pharma- cologiquement acceptables (par exemple, le sulfate) peuvent être administrés au moyen d'injection intraveineuse, d'in- jection intramusculaire ou d'injection sous-cutanée sous forme de solutions aqueuses. Le composé (I) peut être placé dans des ampoules fermées de manière étanche sous forme de solutions, de préférence conservé dans des ampoules ou des fioles sous forme de cristaux, de poudres, de cristaux fins, de lyophilisats, etc., et dissous avant l'utilisation. Un stabilisant peut être également ajouté. Sous ce rapport, le compose (I) avec des compo- sants pharmaceutiques tels que des diluants (par exemple de l'amidon, du saccharose, du lactose, du carbonate de cal- cium, du kaolin, etc.), des charges (agents d'extension) (par exemple du lactose, de l'amidon, du carbonate de calcium, du phosphate de calcium, du kaolin, de la bentonite, du talc, etc.), des lubrifiants (par exemple de l'acide stéari- que, de la paraffine,de l'acide borique, de la silice, du benzoate de sodium, du polyéthylèneglyool, etc.) etc. peu- vent être formulés sous forme de poudres, de tablettes, de 11. 2492827 granulés, de capsules, de trochisques, de sirops secs, de suppositoires, de suspensions, d'émulsions, de produits d'inha- lation, de produits sous forme de gouttes pour les yeux, de poudres pour l'administration locale, dlonguents, etc. et ad- ministrés. Dans l'application pour le traitement d'infections sensibles des êtres humains ou des animaux, le composé (I) peut être administré à une dose quotidienne de 0,01-5 g/kg dans l'injection de 0,01-10 g/kg dans l'administration orale, et de 0,01-10 g/kg dans l'administration locale, respective- ment, toutes les 3-12 heures. Cependant, la dose peut être augmentée ou diminuée selon la sensibilité des bactéries pa- thogènes, la fréquence d'administration et l'état d'un malade. L'exemple suivant montre bien la présente invention avec plus de détail. EXEMPLE (a) 1,3,2',7',4"-penta-N-benzyloxycarbonylapramyci- ne (III: X=PhCH2OCO). Le semi-hydrate d'apramycine (10,000 g, 18,23 mmo- les) est dissous dans de l'eau (150 ml), à laquelle on ajoute du carbonate de sodium (10,047 g, 94,79 mmoles) et de- l'acé- tone (100 ml) pour donner un mélange homogène. Dans le mélan- ge on ajoute goutte à goutte du chlorure de carbobenzoxy (14,63 ml, 102,1 mmoles) en 15 minutes avec agitation vigou- reuse en refroidissant entre -5 et -10C, et, après agitation pendant 2 heures et demie à la température ambiante, le mélan- ge réactionnel est déversé dans de l'-eau et de la glace (800 ml). Le précipité résultant est filtré,lavé avee de l'eau et dissous dans du méthanol (100 ml), qui est séparé par dis- tillation sous pression réduite après décoloration avec du charbon actif (3 g).De l'éther est ajouté au résidu obtenu et la paroi du tube est frottée avec une tige métallique. La poudre qui a précipité est filtrée, lavée avec de l'éther et séchée sur du pentoxyde de phosphore sous pression réduite pour donner le composé indiqué en titre (22,134 g, rendement: %). Une partie de ce composé est chromatographiée sur une colonne [adsorbant:gel dit Kiesel gel 60 (fabriqué par 12. la société dite Merck & Co.); éluant: chloroforme-méthanol (97: 3)], les fractions pures sont rassemblées, les sol- vants sont évaporés sous pression réduite et le résidu est traité avec du méthanol.éther pour donner une poudre. []3,0 + 68,1 1,0 (c=1,037,CH20H) IR:VKmaBr 3406, 1700, 1520 cm1 Max Analyse élémentaire - Calculée (pour C61H71N5021. H20) (%) C, 59,65; H, 5,99; N, 5,70 Trouvé (): C, 59,64; H, 5,87; N, 5,70 (b) 1,3,2',7',4"-penta-N-benzyloxycarbonyl-5,6-0- cyclohexylidèneapramycine (IV: X=PhCH20C0, Y=) Le produit provenant de (a) (22,134 g, 18,23 mmo- les) est dissous dans de la diméthylformamide (630 ml), on ajoute du diméthylcétal de cyclohexanone (37 ml, 248,9 mmo- les) et de l'acide p-toluènesulfonique (2,128 g), et le mélange est agité sous pression réduite de 25 mm Hg en chauf- fant à 50 C pendant 3 heures et puis neutralisé avec de la triéthylamine (1,61 ml). Après évaporation du solvant, le résidu (33,1 g) est dissous dans de l'acétate d'éthyle (300 ml), lavé avec de l 'eau, séché sur du sulfate de sodium et puis évaporé sous pression réduite. La poudre blanche ainsi obtenue (25,13 g) est dissoute dans de lFacide acétique à % (210 ml), maintenue à la température ambiante pendant minutes et puis déversée dans de la glace et de l'eau (1 1). Le précipité résultant est filtré, lavé avec de l'eau et dissous dans de l'acétate d'éthyle. Le mélange est lavé avec de l'eau, séché sur du sulfate de sodium et évapo- ré sous pression réduite. Le résidu (23,60 g) est chromato- graphié sur une colonne [adsorbant: gel dit Kiesel gel 60 (fabriqué par la société dite Merck & Co.) 800 g; éluant: chloroformevchloroforme- acétone (99: 1X66: 40)]. Chaque fraction est vérifiée par chromatographie sur couche mince, les fractions présentant des taches multiples sont en outre chromatographiées sur une colonne à maintes reprises de la 13. 2492827 même manière, et les fractions présentant une seule tache sont rassemblées et cristallisées dans du méthanol pour don- ner le composé indiqué en titre sous forme de produit pur (13,893 g, rendement: 59,1 %) p.f. 140-1430C. la]25 + 63,7 - 1,00 (c=1,034, CH2COOC2H5) KBr -i IR:vmax 3400, 1703, 1518 cm. Analyse élémentaire Calculée (pour C67H79N5021.2H20) ( C, 60,67; H, 6,31; N, 5,28 Trouvé (%): C, 60,44; H, 6,09; N,5,30 (c) 6',2",3",6"-tétra-0O-acétyl-l,3,2',7',4"-penta- N-benzyloxycarbonyl-5,6-0-cyclohexylidèneapramycine (V: X= PhCH20CO, Y =, z = CH3CO). Le produit provenant de (b) (7,000 g, 5,425 mmoles) est dissous dansde la pyridine (91 ml) à laquelle on ajoute de l'anhydride acétique (20,4 ml), maintenu à la tempéra- ture ambiante pendant 24 heures et déversé dans de l'eau et de la glace. Le précipité est filtré, lavé avec de l'eau et dissous dans du chloroforme, et le mélange est lavé avec de l'eau, séché sur du sulfate de sodium et évaporé sous pres- sion réduite. Le résidu (7,80 g) est dissous dans du chlo- roforme et de l'hexane y est ajouté.. Le précipité résultant est filtré pour donner le composé indiqué en titre (7,345 g, rendement: 94,8 %). [a]25 + 77,2 - 1,10 (c=1,079, CHC13) IR:vKBr 3440, 1745, 1724, 1515 cm max Analyse élémentaire Calculée (pour C75H87N5025.'0,5H20) (%) C, 61,38; H, 6,04; N, 4,77 Trouvé (%): C, 61,17; H, 5,86; N, 4,71 (d) 6t,2",3",6"-tétra-0-acétyl-1,3,2',7',4"-penta- N-benzyloxycarbonylapramycine (VI: X=PhCH20CO, Z1=CH3CO). Le produit provenant de (c) (6,000, 4,114 mmoles) Le produit provenant de (c) (6,000 g, 4,114 mmoles) 14. 2492827 est dissous dans de l'acide acétique à 80 %O (60 ml) et dans de l'acétone (30 ml), chauffé à 70 C pendant 6 heures et demie et déversé dans de l'eau et de la glace. Le précipité résultant est filtré, lavé avec de l'eau et dissous dans de l'acétate d'éthyle, et le mélange est lavé avec de l'eau, séché sur du sulfate de sodium et évaporé sous pression ré- duite. Le résidu (5,92 g) est dissous dans de l'acétate d'éthyle et de l'hexane y est ajouté. Le précipité (5,60 g) est soumis à une chromatographie en phase liquide [colonne: colonne pré-tassée dite Prepack Column, dimension C (fabri- quée par la société dite Merck & Co.)] et élué avec du ben- zène-acétate d'éthyle (I: 2) à un taux de 20 ml/fraction, Les fractions n 33-104 sont rassemblées, lesolvant est éva- poré sous pression réduite, le résidu obtenu est dissous dans du chloroforme, et de l'hexane y est ajouté pour donner le composé indiqué en titre (4,975 g, rendement: 87 %). [l]25 + 84,2 + 1,3 (c=1,053, CHC13) IR: VKBra 3400, 1747, 1724, 1518 cm 1 max Analyse élémentaire Calculée (pour C69H79N 5025 H20) (%) *C, 59,35; H, 5,85; N, 5,02 Trouvé (%): C, 59,38; H, 5,61; N,4,97 (e) 6,6',2",3",6"-penta-0-acétyl-1,3,2',7',4"-pen- ta-N-benzyloxycarbonylapramycine (VII: X=PhCH20CO, ZC z2, CH3CO). Le produit provenant de (d), (1,000 g, 0,725 mmo- le) est dissous dans de la pyridine (10 ml) et refroidi avec de la glace, de l'anhydride acétique (0,346 ml, 3,67 mmoles) y est ajouté, et le mélange est agité à la température am- biante pendant 16 heures 40 minutes. Le mélange réactionnel est déversé dans de la glace et de l'eau, et le précipité résultant est filtré, lavé avec de l'eau, dissous dans du chloroforme, séché sur du sulfate de sodium et évaporé sous pression réduite. Le résidu (1,075 g) est soumis à une chro- matographie en phase liquide [colonne: colonne pré-tassée dite Prepack Column, dimension B; éluant: benzène-acétate 15. d'éthyle (1: 1); débit: 6 ml/mn; une fraction: 12 ml].Les fractions n 22-50 sont rassemblées, le solvant est évaporé sous pression réduite, le résidu obtenu est dissous dans du chloroforme et de l'hexane y est ajouté pour précipiter le composé indiqué en titre (911 mg; rendement: 88,5 %). [a]26 + 75,4 + 1,3 (c=1,033, CHC13) Analyse élémentaire Calculée (pour C71H81N5026.H20) ( C, 59,28; H, 5,81; N, 4,87 Trouvé (%): C, 59,17; H, 5,81; N, 4,86 (f) 6,6',2",3",6"-penta-0-acétyl-1,3,2',7',4"-pen- ta-N-benzyloxycarbonyl-5-chloro-5-désoxy-5-épiapramycine (VIII: X = PhCH20CO, Z=Z2=CH3CO, R=C1) Le produit provenant de (e) (1,004 g, 0,698 mmo- le) est dissous dans de la pyridine (13 ml) à laquelle on ajou- te du chlorure de sulfuryle (0,231 ml, 2,85 mmoles, 4,1 équi- valents) en refroidissant à -20 C. Neuf minutes après, le mé- lange réactionnel est agité à 0DC pendant 3 heures et demie, on y ajoute du chloroforme et on le lave avec du bicarbonate de potassium à 5 %, de l'eau, du bicarbonate de sodium à 5 % et de l'eau, respectivement. La couche organique est séchée sur du sulfate de sodium et évaporée sous pression réduite. Le ré- sidu (1,202 g) est dissous dans du chloroforme et de l'hexane y est ajouté. Le précipité obtenu (1,027 g) est soumis à une chromatographie en phase liquide [colonne: colonne pré-tassée dite Prepack Column, dimension B; éluant: benzène-acétate d'éthyle (2: 1); débit: 6 ml/mn, une fraction: 12 ml]. Les fractions n 56-69 sont rassemblées et le solvant est évaporé sous pression réduite pour donner le composé indiqué en titre (388 mg; rendement: 34,7 %). Les fractions n0 70-96 sont rassemblées, le solvant est retiré par distillation et le ré- sidu obtenu (414 mg) est chromatographié sur une colonne de la même manière que ci-dessus pour donner le composé indiqué en titre (395 mg, rendement: 35,3 %. Poids total: 783 mg (rendement: 70,0 %, 16. 2492827 Une partie de ce composé est dissoute dans du chloroforme, et on y ajoute de l'hexane, pour former un précipité pour la purification. [a]24'0 + 87,7 + 1,2 (c=1,075, CHCi3) KBr -1 IR: vmax 3407, 1746, 1726, 1516, 1500 cm. Analyse élémentaire Calculée (pour C71H80ClN5025;H20) (%) C, 58,53; H, 5, 67; Cl, 2,43; N, 4,81 Trouvé (%) C, 58,63; H, 5,51; C1, 2,64; N, 4,90. (g) 6,6t,2",3",6"-penta-0-acétyl-1,3,2',7',4"-pen- ta-N-benzyloxycarbonyl-5-désoxyapramycine (IX: X=PhCH20CO, Z1=Z2=CH3CO) Le composé obtenu en (f) (615 mg, 0,427 mmole) est dissous dans du toluène (61,5 ml), on y ajoute de l'hy- drure de tri-n-butylétain (1,81 ml) et du 2,2-azobisisobuty- ronitrile (31 mg), et le mélange réactionnel est agité à C pendant 1 heure 40 minutes et évaporé sous pression réduite. Le résidu obtenu (2,568 g) est lavé avec de l'éther- hexane (1: 1), et une poudre blanche est rassemblée par filtration, lavée avec les mêmes solvants et soumise à la chromatographie en phase liquide [colonne: colonne pré-tas- sée dite Prepack Column, dimension B (fabriquée par la société dite Merck & Co; éluant: benzène-acétate d'éthyle (2: 1); débit: 6 ml/mn; une fraction: 12 ml)]. Les frac- tions n 56-105 sont rassemblées, le solvant est retiré par distillation et le résidu (597 mg) est recristallisé dans de l'acétone-éther pour donner le composé indiqué en titre (430 mg, rendement: 72,0 %) sous forme d'aiguilles. p.f. 182-1840C. [a]D3,5 + 89,7 ± 1,30 (c=1,'003, CHC13) IR vKBr 3340, 1735, 1704, 1514, 1502 cm- 1 max Analyse élémentaire Calculée (pour C71H81N5025,0,5H20) (%) C: 60,33; H, 5,85; N, 4,95 Trouvé ( ') C: 60,12; H, 5,75; N, 4,95. 17. La liqueur mère donnant le premier cristal est soumise à la recristallisation de la même manière pour don- ner la seconde récolte de cristaux (65 mg; rendement ,9 %). p.f. l80-l8l,5GC, Poids total: 495 mg (rendement: 82,9 %). (h) Sulfate de 5-désoxyapramycine (sulfate de I). Dans le produit provenant de (g) (465 mg, 0,331 mmole) et à du palladium à 10 '%-carbone (120 mg), on ajou- te du méthanol (25 ml), de l'eau (3 ml) et de l'acide chlo- rhydrique concentré (0,142 ml, 1,66 mmole) et le mélange est soumis à l'hydrogénation catalytique dans H2. Deux heu- res après, le catalyseur est filtré et lavé avec une solu- tion aqueuse de méthanol, et le filtrat et le lavage sont combinés et évaporés sous pression réduite. Le résidu ob- tenu (321 mg) est dissous dans du méthanol (4,5 ml) et la solution mélangée constituée de soude 2 N (5 ml) et d'eau (4,2 ml) est ajoutée goutte à goutte en 7 minutes et chauf- fée au reflux pendant 20 heures. Le mélange réactionnel est refroidi, neutralisé par addition d'acide chlorhydrique con- centré (0,7 ml), adsorbé sur une résine échangeuse d'ions dite Amberlite CG 50 (NH4, 120 ml), dont la colonne est la- vée avec de l'eau (600 ml) et éluée avec de l'eau (1 1) et de l'ammoniaque 0,2 N (1 1) au moyen du procédé par gra- dient (une fraction: 13 mi). Les fractions no 107-116 sont rassemblées et évaporées sous pression réduite. Le résidu est dissous dans de l'eau (8 ml), décoloré avec du carbone actif et filtré avec un filtre en verre (fabriqué par la société dite Millipore & Co). Le filtrat et les lavages sont combinés et lyophilisés, et le résidu ainsi obtenu est maintenu dans un dessicateur contenant du bromure de sodium (200 g) et de l'eau (100 g) jusqu'à ce que le résidu absor- be de l'humidité et soit à poids constant pour donner le composé recherché indiqué en titre (228 mg, rendement 73,7,). [a(D3,5 + 108,3 - 1,50 (c-1,012, H20) Analyse élémentaire 18. 2492827 Calculée (pour C21H41N 5010 2,H2 49,H 2) C, 26,84; H, 6,97; N, 7,45; S, 8,53 Trouvé (%): C, 26,75; H, 6,68; N, 7,45; S, 8,63 RMN:6 D20 6,10 (d, H1i ou Hl" i=4Hz), 6,03 (d, H1" ou H1' ppm J=4Hz), 3,47 (s, N-CH3). La présente invention n'est pas limitée aux exem- ples de réalisation qui viennent d"être décrits, elle est au contraire susceptible de modifications et de variantes qui apparaîtront à l'homme de l'art, 19. REVENDICATIONS 1 - A titre de produit industriel nouveau, 5-déso- xyapramycine représentée par la formule suivante: et ses sels d'addition avec les acides, pharmaceutiquement acceptables. 2 - Composition pharmaceutique à activité anti- microbienne contre les bactéries gram-positives et gram-né- gatives, caractérisée en ce qu'elle renferme, en tant qu'ingrédient actif. au moins un des composés indiqués dans la revendication 1, en association avec un ou plusieurs adju- vants pharmaceutiquement acceptables.