FR 2488256 A1 19820212 FR 8115327 A 19810807 - 2468856 La présente invention concerne de nouveaux dérivés qui ont une action dans le cas de maladies provoquées par les protozoaires et dans celles provoquées par des infections bactériennes. Elle vise plus particulièrement des dérivés actifs dans le traitement des trichomoniases dans les différents sites possibles d'infection, dans le traitement des amoebiases, des giardises et des infections bactériennes anaérobies, également dans leurs différents sites possibles d'infection. Il est bien connu que les trichomoniases sont des maladies sociales affectant à la fois l'homme et la femme, et cela avec des fréquences assez élevées; chez la femme, l'atteinte prend, dans la plupart des cas, la forme de vaginite à trichomonas; chez l'homme, par contre, l'atteinte est, le plus souvent, asymptomatique mais elle peut provoquer la stérilité. Des efforts très importants et soutenus ont été effectués afin de trouver un traitement efficace de ces maladies qui viennent au premier rang parmi les infections vénériennes et plusieurs tentatives ont été faites pour découvrir et mettre au point des agents chimio-thérapiques suffisament efficaces et sûrs. Théoriquement, le médicament idéal doit avoir une action sélective, c'està-dire agir contre le Trichomonias vaginalis mais, pas contre le bacille de Dbderlein, ni contre le Meisseria gonorrheae, cela afin de ne pas modifier l'équilibre de la flore vaginale et afin,également, de ne pas masquer, par un traitement inaproprié, l'infection gonorrhéale associée. En outre, le médicament idéal ne devra pas présenter de phénomène d'interférence d'action avec l'absorption éventuelle d'alcool, c'est-àdire ne pas avoir d'incidence sur le métabolisme de l'alcool. Pour le traitement des trichomoniases, on connaît déjà, depuis de nombreuses années, un médicament qui est largement prescrit, le métronidazole, c'est-à-dire le - 2 - 2488256. composé 1-(hydroxyethyl-2)-methyl-2-nitro-5-imidazole, (brevet américain 2.944.061, au nom de Jacobs et al). Néanmoins, ce médicament n'est pas tout à fait satisfaisant puisque maintenant certaines souches de Trichomonas vaginalis lui sont devenues résistantes. On a également proposé d'utiliser certains dérivés du nitroimidazole des dérivés portant les substitutions alcoyl inférieur, en position 1, et vinyl substitué en position 2, comme intermédiaires d'agent antiprotozo- aire contenant du soufre (brevet américain 3.549.626) Miller et al), ainsi également que des dérivés de la (nitro-5-furyl-2)-2 vinyl pyrimidine (brevet américain 3.464.982, Minami et al). De plus, on peut également citer, à titre de référence, le brevet américain 3.882.105, qui décrit et revendique pour le traitement des maladies provoquées par les proto- zoaires et par des infections bactériennes, ainsi que comme agent trichomonacide, l'emploi de l'amino-2 (alcoyl inférieur -1 nitro-5-imidazolyl-2)-2 vinyl -4 pyrimidine. Ces composés (qui sont d'ailleurs connus sous la dénomination commune de composés P) répondent à la formule suivante: NH2 N 02N vi C = CH_ e IV R dans laquelle R représente un alcoyl inférieur contenant 1 à 6 atomes de carbone et, de préférence, seulement 2 1 à 3 atomes de carbone. On a également proposé d'autres composés (connus sous le nom commun de composés O) qui sont des dérivés 3-N-oxydes de composés P, et répondent à la formule: - 3 - - 3- 2488256 R 02N HC = C H R dans laquelle R représente un alcoyl inférieur - éventuelle- ment substitué par un groupement tel que hydroxy ou un radical alcoyl sulfonyl inférieur - et Ri représente - NH2 ou - NHOH. Toutefois, aucun de ces composés ne s'est révélé sensiblement plus avantageux que le métronidazole qui reste l'étalon reconnu. Selon la présente invention, il a été possible de mettre au point de nouveaux dérivés présentant une efficacité accrue, notamment par rapport au métronidazole. Ces nouveaux dérivés répondent à la formule générale suivante: NH- COCH2 - CH2- COOE R1 CH3-c - C:313 02N CH = C H R dans laquelle R représente un radical alcoyl inférieur contenant de 1 à 6 atomes de carbone, de préférence de 1 à 3 atomes de carbone et R1 représente un atome d'hydrogène ou un radical méthoxy. L'invention concerne plus particulièrement l'ester du p-méthoxy-o-tert-butyl-phénol et de l'acide nitro-5- imidazolyl-éthènyl-2-(amino-2-pyrimidyl)-N-succinique, qui s'est révélé être un excellent agent pour le traitement de maladies provoquées par les protozoaires et les bactéries. Ce composé répond à la formule générale ci-dessus, dans laquelle R est un radical méthyl, et R1 est un radical méthoxy; c'est un composé cristallisé, de couleur jaune, se décomposant au chauffage à 170 C, soluble dans le méthanol (: 100), et dans le dimethylformamide ( 1: 30), mais insoluble dans l'eau. - 4 - 24B8256 L'invention concerne également un procédé de préparation des composés cidessus, consistant à: a) préparer le dérivé N-succinyl de l'amino-2[(alcoyl inférieur-1 nitro-5-imidazolyl-2-)-2 vinyli-4 pyrimidine en chauffant à reflux ce dernier composé avec de l'anhydride succinique et b) traiter le dérivé N-succinyl ainsi obtenu par le o-tert-butyl-phénol, éventuellement substitué en position para par un alcoyl inférieur, en présence d'un acide minéral concentré. Enfin, l'invention concerne également des compositions thérapeutiques dans lesquelles les composés ci-dessus sont utilisés comme principes actifs. L'invention sera d'ailleurs mieux comprise, grâce à la description donnée dans l'exemple qui suit. EXEMPLE Première étape Dans un réacteur approprié, on place 24,6 g (0,100 mole) d'azanidazole, c'est-à-dire d'amino-2 1(mâthyl-1 nitro-5 imidazolyl-2) -2 vinyl-4 pyrimidine, 0,5 litres de dime- thylformamide et 10,2 g (0,102 mole) d'anydride succinique. L'ensemble est porté au reflux pendant 3 heures, ce qui conduit à une solution limpide qui est refroidie puis versée sur 500 g de glace pilée; il y a, alors, précipitation d'une masse cristalline jaune qui est le dérivé N-succinyl de l'azanidazole. Ce composé est purifié en le reprenant par une solution à 10 % de NaH CO3, puis en le reprécipitant à l'aide d'une solution d'acide chlorhydrique dilué de moitié. Le rendement de cette réaction est toujours supérieur à 80 % de la théorie et le composé obtenu - qui ne présente pas de point de fusion défini - se décompose à 150 C; toutefois, son analyse par infra-rouge et par résonnance magnétique nucléaire confirme qu'il s'agit bien du dérivé N-succinyl de l'azanidazole. 248B256 Deuxième étape Le dérivé N-succinyl ainsi obtenu est placé dans un réacteur avec 50 fois son poids de dimethylformamide, une quantité stoechiométrique de p-methoxy-o-tert-butyl-phénol, et 2 ml d'acide sulfurique concentré. Le mélange réactionnel est porté au reflux pendant 6 heures, après quoi, on le distille sous pression réduite (20 mm Hg) pour évacuer environ la moitié du solvant, ce qui amène la cristallisation du composé préparé, c'est-à-dire l'ester du p-méthoxy-o-tert-butyl-phénol et de l'acide nitro-5- imidazolyl-éthènyl-2-(amino-2-pyrimidyl)-N-succinique. Le rendement de cette étape est supérieur à 70 % de la théorie et le produit obtenu se décompose à environ 1700 C sans avoir fondu. L'intérêt des composés selon la présente invention a été vérifié en les soumettant à différentes expérimen- tations notamment microbiologique, pharmacologique, toxi- cologique et clinique. Ces composés se sont révélés être particulièrement actifs contre le Tricnomonas vaginalis et l'Entamoeba histolitica, ainsi que contre la plupart des bactéries anaérobies. Par ailleurs, ces composés sont absorbés rapidement par l'organisme après administration orale et ne provoquent pas de phénomènes d'intolérance. Le résultat des différentes expérimentations entre- prises a montré qu'ils pouvaient être utilisés avec profit dans les cas de trichomoniases symptomatiques ou non symptomatiques, chez l'homme ou la femme, dans les cas d'amoebiases intestinales aigUes et d'abcès amoebiques du foie, dans le cas d'infections provoquées par des bactéries anaérobies localisées notamment dans l'abdomen, le pelvis et les seins, ainsi que pour le traitement des bactériémies, endocardites et méningites. En outre, ils sont intéressants à titre prophylactique lors d'opérations chi- rurgicales dans lesquelles le risque d'une infection post- opératoire par des agents anaérobies est élevé. -6- 2-488256 Microbiologie Des expérimentations ont été entreprises in vitro et in vivo, pour mettre en évidence l'intérêt des composés selon l'invention. - Ces composés sont actifs in vitro contre le Trichomonas vaginalis et ce, à des concentrations inférieures à celles nécessaires pour le métronidazole lorsqu'il est employé contre les souches sensibles à ce médicament; de plus, ils sont actifs sur plusieurs autres souches sur lesquelles -le métronidazole n'a pas d'action. - Le taux de destruction des microorganismes par les composés selon l'invention sont toujours plus élevés qu'avec le métronidazole. - Les composés selon l'invention sont actifs in vitro contre l'Entamoeba histolitica à des concentrations similaires à celles du métronidazole. - Les composés selon l'invention sont actifs in vitro contre les microorganismes anaérobies à des concentrations-infé- rieures à celles du métronidazole lorsqu'il est employé contre les souches sensibles à ce médicament; de plus, ils sont actifs sur plusieurs autres souches sur lesquelles le métronidazole n'a pas d'action. - Les composés selon l'invention sont inactifs in vitro, à la fois contre le bacille de Doderlein, et contre le Neisseria gonorrheae. - En administration chez l'animal,par voie orale, les composés selon l'invention ont montré une efficacité in vivo supérieure à celle du métronidazole dans tous les cas d'infections expérimentales. Pharmacocinétique - Chez l'animal, les composés selon l'invention, lorsqu'ils sont administrés par voie orale, sont rapidement absorbés. Une dose unique de 500 mg/kg conduit à des doses de produit actif dans le sang de 3 mcg/ml, 1 heure après l'absorption chez le rat; chez le chien, dans les mêmes conditions, la concentration de produit trouvé dans le sang, après 3 heures, est de 20 mcg/ml. - 7 - 2488256 - Le temps de demi-vie des composés selon l'invention administrés chez le chien et chez l'homme, est plus court que le temps correspondant pour le métronidazole (1 heure contre 7,3 heures) ce qui montre qu'il n'y a pas de tendance à l'accumulation de ces composés dans l'organisme, et cons- titue par suite un avantage sur le plan de la toxicité. Toxicité aigUe (DL50) La toxicité orale aigUe des composés selon l'invention est d'au moins 1250 mg/kg chez la souris. Biochimie - A la différence de ce qui se produit avec le métroni- dazole, les composés selon l'invention n'interfèrent pas avec le métabolisme de l'alcool. Il n'est donc pas né- cessaire d'interdire l'absorption de boissons alcoolisées lors de l'administration de ces composés. - On a pu montrer que les composés selon l'invention augmentent l'activité de la glutatione-S-transferase hépatique (un groupe de protéines à action détoxifiante multifonctionnelles), alors que le métronidazole n'a aucune action dans ce domaine. Expérimentation clinique L'expérimentation clinique a porté sur 42 patientes âgées de 22 à 55 ans et souffrant de vaginitesprovoquées par Trichomonas vaginalis. Le diagnostic a été effectué par bactérioscopie, examen de cultures et test de May-Grunwald-Giemsa avant traitement puis répétés trois jours après la fin du traitement. Les 42 patientes ont été réparties en 6 groupes de 7 malades chacun. Les informations sommaires concernant le dosage et l'administration sont données ci-après pour chacun des groupes: Groupei1: 7 patientes âgées de 22 à 54 ans posologie: 2 gélules de 200 mg par jour pendant 3 jours - 8 - 24B8256 Grou2e2: 7 patientes âgées de 35 à 48 ans posologie: 2 gélules de 200 mg par jour pendant 5 jours Groupe3:7 patientes âgées de 40 à 55 ans posologie: 9 gélules de 200 mg, en 3 prises, pendant 1 jour, c'est-à-dire 3 à midi, 3 le soir et 3 le lendemain à midi. Groue4-:7 patientes âgées de 25 à 40 ans posologie: une seule dose de 9 gélules de 200 mg, un seul jour Groue5: 7 patientes âgées de 30 à 45 ans posologie: 3 comprimés vaginaux de 200 mg par jour pendant 5 jours Groue6_:7 patientes âgées de 40 à 55 ans - posologie combinée: 2 gélules de 200 mg et deux fois 1 comprimé vaginal de 200 mg par jour pendant 5 jours Cette expérimentation a montré que ce médicament était parfaitement toléré et possédait une activité élevée contre les trichomoniases. La guérison complète a été obtenue pour -25 patientes sur 28 traitées par voie orale, celles des groupes 1, 2, 3 et 4, ce qui représente un succès de 98 %,sans qu'il y ait de diffé- rence significative entre les groupes. Pour les patientes du cinquième groupe traitées seulement par voie locale, le Trichomonas vaginalis a disparu totalement chez 6 sur 7 des patientes, c'est-à-dire un taux d'efficacité de 85 %. Quant au sixième groupe, soumis à un traitement par voie orale et locale, les 7 patientes ont été complètement guéries. On peut résumer ainsi succintement les avantages que présentent les composés selon l'invention par rapport au métronidazole: 24B8256 - sur les souches de Trichomonas vaginalis sensibles au métronidazole, meilleure activité in vitro. - sur les souches de Trichomonas vaginalis résistant au métronidazole, activité des composés selon l'invention. - meilleure activité sur les infections expérimentales. - demi-vie du produit plus brève, ce qui limite le risque de toxicité. - absence d'interférence avec le métabolisme de l'alcool, ce qui fait qu'il n'y a pas de contre-indication à la prise de boissons alcooliques pendant le traitement, contrairement à ce qui se passe avec le métronidazole. - augmentation de l'activité de certaines protéines détoxifiantes à action multifonctionnelle. - posologie plus favorable: dosage quotidien plus faible, durée du traitement plus brève, quantité totale de médicament administrée inférieure. Présentation Les médicaments selon l'invention peuvent être présentés selon toutes formes usuelles appropriées. Pour l'administration orale, on peut présenter le principe actif sous forme de pilules, comprimés ou gélules, associéà un excipient approprié. Les unités de dosage peuvent contenir de 50 à 500 mg de principe actif, complété le cas échéant par les diluants, excipients et lubrifiants usuels; on peut par exemple utiliser des substances solides comre le lactose, le stéréate de magnésium, l'amidon, la gélatine et l'agar-agar. Sous forme liquide, ce médicament peut être présenté en suspension ou dissous dans un liquide approprié ou se présenter sous forme d'émulsion ou de sirop. Les excipients liquides qui peuvent être utilisés comprennent par exemple l'huile de sésame, l'huile d'olive et l'eau. Pour l'administration locale, on peut utiliser cén5ra- lement des gélules, crèmes, onguents, ovules. Les ovules peuvent contenir à titre ('excipient du lactose, de l'alcool polyvinylique ou autres polyrères solubles dans l'eau et non 1' - 24B8256 toxiques, tui sont cénrralerient utilisés dans cette présentation. Il est géneralement avantageux d'associer le traitement local un traitement par voie orale. Enfin, pour l'administration parent6rale le principe actif est dissous ou ris en suspension dans une solution stérile aepropriee. - il - 2488256 REVENDICATIONS 1) Nouveaux composés répondant à la formule général_ H - COCH2 - CH2 - COO R1 CH C - C- CH 3 CH3 dans laquelle RR représente un radical alcoyl inférieur contenant de 1 à 6 atomes de carbone, de préférence de 1 à 3 atomes de carbone, et R1 représente un atome d'hydrogène ou un radical méthoxy. 2) Ester du p-méthoxy-o-tert-butyl-phénol et de l'acide nitro-5imidazolyl-éthènyl-2-(amino-2-pyrimidil)-N-succinique. 3) Procédé de préparation des composés selon la revendication 1, comportant la succession d'étapes: a) préparation du dérivé N-succinyl de l'amino-2(alcoyl inférieur-i nitro-5-imidazolyl-2) -2 vinyl] -4 pyrimidine en chauffant à reflux ce dernier composé avec de l'anhydride succinique et b) traitement du dérivé N succinyl ainsi obtenu par le o-tert-butyl-phénol, éventuellement substitué en position para par un alcoyl inférieur, en présence d'un acide minéral concentré. 4) Procédé selon la revendication 3), caractérisé en ce que la réaction de l'étape a) est effectuée en présence de dimethylformamide, en mettant en oeuvre un léger excès d'anhydride succinique et en maintenant le reflux pendant 3 heures. ) Procédé selon la revendication 4), caractérisé en ce que l'excès d'anhydride succinique est de 2 à 3 %. 6) Procédé selon la revendication 3) caractérisé en ce que, dans l'étape b), l'acide minéral utilisé est l'acide sulfu- rique, la durée de réaction étant de 6 heures. - 12 - 2488256 7) Procédé selon la revendication 3), caractérisé en ce que l'on porte au reflux, dans le diméthylformamide, l'amino-2-[(méthyl-1-nitro-5-imidazolyl-2)-2 vinyll-4- pyrimidine avec l'anhydride succinique et que le dérivé N-succinyl ainsi obtenu est, à son tour, porté au reflux avec la p-méthoxy-o-tert-butylphénol en présence d'acide sulfurique concentré, le mélange réactionnel étant ensuite distillé sous pression réduite et le produit de la réaction, séparé par cristallisation. 8) Composition pharmaceutique pour le traitement de maladies provoquées par les protozoaires ainsi que pour celles résultant d'infections bactériennes, caractérisée en ce qu'elle contient, comme agent actif, un composé selon la revendication 1), associé à un excipient approprié. 9) Composition pharmaceutique selon la revendication 8), et destinée aux traitements locaux, caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme d'une crème, d'un onguent, d'un émulsion ou d'un gel. ) Composition pharmaceutique selon la revendication 8), et destinée à l'administration parentérale, caractérisée en ce que le principe actif est associé à un excipient liquide. 11) Composition pharmaceutique selon la revendication 8), et destinée à l'administration par voie orale, caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme de pilules, comprimés, ou capsules dans lesquels le principe actif est associé à un excipient solide. 12) Composition pharmaceutique selon la revendication 8), et destinée à l'administration orale, caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme d'un sirop contenant le principe actif. 13) Composition pharmaceutique selon l'une des revendications 8 à 12), présentée comme agent trichomonacide.